KR20090010662A - Pharmaceutical composition for angiogenesis stimulation comprising visfatin as an active ingredient - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 비스파틴을 유효성분으로 함유하는 혈관신생 촉진제에 관한 것으로, 보다 구체적으로는, 비스파틴이 혈관신생을 유도하고, 혈관신생과 관련된 혈관내피세포의 이동, 침윤 및 세포의 관 형성을 활성화시켜 혈관신생을 촉진한다는 신규 용도에 관한 것이다.The present invention relates to an angiogenesis-promoting agent containing bispatin as an active ingredient. More specifically, bispatin induces angiogenesis, migration, invasion and vascular formation of vascular endothelial cells associated with angiogenesis. It relates to a new use to promote angiogenesis by activating it.
혈관신생(angiogenesis)은 기존 혈관의 내피세포가 세포 외 기질을 분해하고, 이동, 분열 및 분화하여 새로운 모세혈관을 형성하는 현상으로, 상처 수복, 배아 발생, 종양 형성, 만성염증, 비만 등 여러 가지 생리적, 병리적 현상에 관여한다. Angiogenesis is a phenomenon in which endothelial cells of existing blood vessels decompose, move, divide, and differentiate extracellular matrix to form new capillaries. Wound repair, embryonic development, tumor formation, chronic inflammation, obesity, etc. Involved in physiological and pathological phenomena.
혈관신생 과정은 혈관내피세포의 증식 및 혈관벽으로부터 자극이 있는 방향의 주변조직으로 이동하는 과정을 거친다. 이어서 다양한 단백질 분해효소가 활성 화되어 혈관내피세포가 기저막을 침윤시키고 루프를 형성하며, 형성된 루프들이 분화되어 관 형성을 하게 된다. 이러한 혈관신생 과정은 여러 종류의 촉진인자 및 억제인자에 의해 엄격히 조절되는 것으로 알려져 있다. Angiogenesis is a process of vascular endothelial cell proliferation and migration from the vessel wall to the surrounding tissue in the direction of stimulation. Subsequently, various proteolytic enzymes are activated so that vascular endothelial cells infiltrate the basement membrane and form loops, and the formed loops are differentiated to form tubes. These angiogenic processes are known to be tightly regulated by several types of promoters and inhibitors.
최근 혈관신생을 유도 또는 억제하는 인자를 이용하여 암, 류마티스 관절염, 건선, 궤양, 허혈, 동맥경화증, 심근경색, 협십증, 뇌혈관성 질환 등 혈관신생에 의존하는 질병을 치료하고자 하는 시도가 활발히 이루어지고 있다 (Folkman J., J. Nat . Med., 1:27, 1995; Jackson J.R., et al ., FASEB J., 11:457, 1997; Risau W., Nature, 386:671, 1997; Bussolino, F., et al ., Trends Biochem . Sci., 22:251, 1997; Hanahan D., et al ., Cell, 86:353, 1996).Recently, there have been active attempts to treat angiogenesis-dependent diseases such as cancer, rheumatoid arthritis, psoriasis, ulcers, ischemia, arteriosclerosis, myocardial infarction, angina, and cerebrovascular diseases using factors that induce or inhibit angiogenesis. (Folkman J., J. Nat . Med ., 1:27, 1995; Jackson JR, et al ., FASEB J. , 11: 457, 1997; Risau W., Nature , 386: 671, 1997; Bussolino, F., et al ., Trends Biochem . Sci ., 22: 251, 1997; Hanahan D., et al ., Cell , 86: 353, 1996).
정상 성인의 경우, 혈관을 이루고 있는 내피세포의 교체 시간은 일반적으로 47일에서 20,000일로 다양하며, 매우 엄격한 조절을 받고 있다. 일반적으로 트롬보스폰딘-1(thrombospondin-1), 혈소판 인자-4(platelet factor-4), 엔지오스타틴(angiostatin) 등의 혈관신생 억제인자와, 혈관내피 성장인자(vascular endothelial growth factor), 섬유아세포 성장인자(basic fibroblast growth factor) 등과 같은 혈관신생 촉진인자가 평상시에는 양적 평형 상태를 유지하여 혈관신생이 일어나지 않지만, 상처나 암이 발생한 경우 상처난 조직의 재생 및 암의 성장을 위하여 혈관신생 억제인자와 촉진인자의 양적 평형상태가 깨어지고 새로운 혈관이 형성되는데, 이때 혈관신생 촉진인자의 과다 발현이 관여하게 된다.In normal adults, the replacement time of endothelial cells that make up blood vessels generally varies from 47 days to 20,000 days and is under very strict control. In general, angiogenesis inhibitors such as thrombospondin-1, platelet factor-4, angiostatin, vascular endothelial growth factor, fibroblasts Angiogenesis-promoting factors such as basic fibroblast growth factor usually maintain quantitative equilibrium so that angiogenesis does not occur.However, in the case of wounds or cancers, angiogenesis inhibitors are necessary for regeneration of wounded tissues and cancer growth. The quantitative equilibrium of and promoters is broken and new blood vessels are formed, at which time the overexpression of angiogenic promoters is involved.
과다한 혈관 형성은 질병 악화의 주원인이 되기도 하지만, 혈관의 미형성 또한 심각한 질병의 원인이 되고 있다. 혈관신생은 상처 치유나 조직 재생에 필수적 인 현상이라 할 수 있는데, 예를 들어 혈관 형성이 미발달된 태반은 유산의 중요한 원인이 되며, 혈관의 미형성으로 인한 괴사, 궤양 및 허혈의 경우 조직이나 기관의 기능 이상을 유발하거나, 사망의 원인이 될 수 있다. 또한, 동맥경화증, 심근경색 및 협심증과 같은 질병도 원활하지 못한 혈액 공급이 원인이 되고 있다. 따라서, 혈관의 미형성으로 인한 저산소 상태 또는 저영양 상태의 유발로 인한 조직 손상을 감소시키고, 원활한 조직 재생을 위해 새로운 혈관 형성을 유도하거나 촉진시키고자 하는 치료법 개발이 필요하다.Excessive blood vessel formation may be a major cause of disease deterioration, but the formation of blood vessels is also a cause of serious disease. Angiogenesis is an essential phenomenon for wound healing or tissue regeneration.For example, the placenta that has not developed blood vessels is an important cause of miscarriage, and in the case of necrosis, ulceration and ischemia due to the formation of blood vessels, tissues or organs It may cause dysfunction or cause death. In addition, diseases such as arteriosclerosis, myocardial infarction and angina are caused by poor blood supply. Therefore, there is a need to develop a treatment to reduce tissue damage caused by hypoxic or hypotrophic conditions caused by the formation of blood vessels and to induce or promote new blood vessel formation for smooth tissue regeneration.
특히, 혈관신생은 상처받은 피부 조직이 재생되기 위한 필수적인 상처 회복 과정에 반드시 수반되어야 한다. 상처의 초기 단계에는 세포의 괴사와 혈관의 파괴로 인한 염증 반응이 일어나게 되고, 이 염증 반응 이후에 혈액 성분의 탈혈관 현상, 혈소판의 활성화 및 혈액 응고와 함께, 칼리크레인, 트롬빈 및 플라스민 등과 같은 생물학적 매개 물질이 형성되는 일련의 과정을 거치게 된다. In particular, angiogenesis must be involved in the necessary wound healing process for the rejuvenation of wounded tissue. In the early stages of the wound, inflammatory reactions occur due to necrosis of the cells and destruction of blood vessels, which are accompanied by devascularization of blood components, activation of platelets and coagulation, and kallikrein, thrombin and plasmin. It goes through a series of processes in which biological mediators are formed.
혈관신생을 이용한 생체 질환의 치료를 혈관신생 치료라 하고, 이미 혈관내피 성장인자와 같은 혈관신생 촉진인자는 중증의 국소 빈혈을 위한 치료제로 사용되고 있다. 또한 섬유아세포 성장인자, 표피 성장인자(epidermal growth factor) 및 혈소판 유도 내피 성장인자(platelet-derived epidermal growth factor) 등의 혈관신생 촉진인자들도 임상 치료를 위하여 연구되고 있다. 그러나, 상기 인자들은 단백질로서 분리·정제하기 어렵고, 고가이므로 임상 적용에 어려움이 있다.Treatment of biological diseases using angiogenesis is called angiogenesis treatment, and angiogenesis promoters such as vascular endothelial growth factor have already been used as therapeutic agents for severe ischemia. In addition, angiogenic factors such as fibroblast growth factor, epidermal growth factor and platelet-derived epidermal growth factor have been studied for clinical treatment. However, these factors are difficult to isolate and purify as proteins and are expensive and have difficulty in clinical application.
지방조직은 혈관이 잘 발달된 조직이며, 지방덩어리의 성장에도 혈관신생과정이 요구된다. 비스파틴은 지방조직에서 분비되는 분비성 단백질로써, 인슐린과 유사한 기능을 갖는 것으로 보고되고 있고, 최근에는 비스파틴이 혈관 평활근 세포의 기능적 성숙에 관여하는 것으로 알려져 있다. 그러나, 비스파틴이 혈관내피세포의 혈관신생에 미치는 영향에 대해서는 알려져 있지 않았다. Adipose tissue is a well-developed blood vessel, and angiogenesis is required for the growth of fat mass. Bispartin is a secretory protein secreted from adipose tissue, and has been reported to have a function similar to that of insulin. Recently, bispartin is known to be involved in the functional maturation of vascular smooth muscle cells. However, the effect of bispartin on angiogenesis of vascular endothelial cells is unknown.
이에 본 발명자들은 혈관신생 촉진제를 개발하고자 예의 노력한 결과, 비스파틴이 혈관신생을 유도하고, 혈관신생과 관련된 혈관내피세포의 이동, 침윤 및 관 형성을 활성화시켜 혈관신생을 촉진한다는 것을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.Accordingly, the present inventors have made efforts to develop angiogenesis promoters, and have confirmed that bispartin induces angiogenesis and promotes angiogenesis by activating angiogenesis, invasion and vascular formation associated with angiogenesis. The invention was completed.
본 발명의 주된 목적은 비스파틴(visfatin)을 유효성분으로 함유하는 혈관신생 촉진제를 제공하는데 있다.It is a main object of the present invention to provide an angiogenesis-promoting agent containing bispatin as an active ingredient.
본 발명의 다른 목적은 비스파틴(visfatin)을 유효성분으로 함유하는 혈관신생 의존성 질환의 치료용 약학 조성물을 제공하는데 있다.Another object of the present invention to provide a pharmaceutical composition for the treatment of angiogenic dependent diseases containing bispatin (visfatin) as an active ingredient.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 비스파틴(visfatin)을 유효성분으로 함유하는 혈관신생 촉진제를 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides an angiogenesis promoter containing bispatin (visfatin) as an active ingredient.
본 발명은 또한, 비스파틴(visfatin)을 유효성분으로 함유하는 혈관신생 의존성 질환의 치료용 약학 조성물을 제공한다.The present invention also provides a pharmaceutical composition for the treatment of angiogenic dependent diseases containing bispartin (visfatin) as an active ingredient.
본 발명에 있어서, 상기 혈관신생 질환은 만성궤양, 지연성 상처치유, 허혈성 뇌졸중, 심근경색, 협심증 및 뇌혈관성 치매로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 할 수 있다.In the present invention, the angiogenic disease may be selected from the group consisting of chronic ulcers, delayed wound healing, ischemic stroke, myocardial infarction, angina pectoris and cerebrovascular dementia.
본 발명은 비스파틴을 유효성분으로 함유하는 혈관신생 촉진제를 제공하는 효과가 있다. The present invention has the effect of providing angiogenesis promoter containing bispatin as an active ingredient.
본 발명에 따르면, 비스파틴을 처리하여 혈관신생을 유도할 수 있으므로 만 성궤양, 지연성 상처 치유, 허혈성 뇌졸중, 심근경색, 협심증 및 뇌혈관성 치매 등과 같은 혈관신생 질환의 치료에 이용할 수 있다. According to the present invention, bispartin may be used to induce angiogenesis, and thus it may be used for the treatment of angiogenic diseases such as chronic ulcer, delayed wound healing, ischemic stroke, myocardial infarction, angina pectoris and cerebrovascular dementia.
본 발명의 일 양태는 비스파틴을 유효성분으로 함유하는 혈관신생 촉진제 및 비스파틴을 유효성분으로 함유하는 혈관신생 의존성 질환의 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.One aspect of the present invention relates to an angiogenic promoter containing bispartin as an active ingredient and a pharmaceutical composition for treating angiogenic dependent diseases containing bispartin as an active ingredient.
본 발명의 일 실시예에서는 비스파틴이 성인조직에서 유일하게 혈관신생이 끊임없이 활발히 일어나는, 지방조직에서 분비되는 단백질이라는 점에 착안하여, 비스파틴이 혈관신생을 유도할 수 있는지 확인하였다. 비스파틴의 혈관신생 활성을 조사하기 위하여, 인간 탯줄 정맥 내피세포(human umbilical vein endothelial cell, HUVEC)의 이동 및 침윤(invasion), 세포의 관 형성(tube formation)에 비스파틴이 미치는 영향을 측정하였다. 그 결과, 비스파틴이 HUVEC 세포의 이동 및 침윤을 증가시키고, HUVEC 세포의 관 형성을 촉진시킨다는 것을 알 수 있었다. In an embodiment of the present invention, the bispartin is the only protein that is secreted from adipose tissue, which is constantly active in angiogenesis in adult tissues, it was confirmed whether bispatin can induce angiogenesis. To investigate the angiogenic activity of bispartin, we investigated the effects of bispartin on the migration and invasion of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) and tube formation of cells. Measured. As a result, it was found that bispartin increases the migration and invasion of HUVEC cells and promotes tube formation of HUVEC cells.
비스파틴의 혈관신생능을 알아보기 위하여 쥐의 대동맥 고리(rat aortic ring)를 이용한 스프라우팅 어세이(sprouting assay)를 실시한 결과, 비스파틴이 쥐의 대동맥 고리에서 스프라우팅 형성을 촉진시킨다는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 융모 요막(chorioallantoic membrane, CAM) 및 마트리젤 플러그(matrigel plug)를 이용하여 생체 내(in vivo)에서의 혈관신생 여부를 확인한 결과, 비스파틴이 혈관신생을 촉진함을 알 수 있었다. Sprouting assays using rat aortic rings to determine the angiogenesis of bispartin showed that bispartin promotes sprouting formation in rat aortic rings. I could confirm it. In addition, as a result of confirming angiogenesis in vivo using chorioallantoic membrane (CAM) and matrigel plug, it was found that bispartin promotes angiogenesis.
본 발명의 약학 조성물은 이미 사용되고 있는 항히스타민제, 소염진통제, 항암제 및 항생제 등의 약제와 함께 제제화하거나 병용하여 사용될 수 있다. The pharmaceutical composition of the present invention can be formulated or used in combination with drugs such as antihistamines, anti-inflammatory drugs, anticancer agents and antibiotics that are already in use.
본 발명의 조성물의 약학적 투여 형태는 이들의 약학적 허용 가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 또한 단독으로 또는 타 약학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다.Pharmaceutical dosage forms of the compositions of the present invention may be used in the form of their pharmaceutically acceptable salts, and may be used alone or in combination with other pharmaceutically active compounds, as well as in any suitable collection.
본 발명에 따른 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. The pharmaceutical compositions according to the invention can be used in the form of oral dosage forms, external preparations, suppositories, and sterile injectable solutions, such as powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols, etc., respectively, according to conventional methods. Can be. Carriers, excipients and diluents that may be included in the composition include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl Cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil.
제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되 는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.When formulated, diluents or excipients such as fillers, extenders, binders, wetting agents, disintegrating agents, and surfactants are usually used. Solid preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules, and the like, and the solid preparations may include at least one excipient such as starch, calcium carbonate, sucrose in the extract. ) Or lactose, gelatin and the like are mixed. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate and talc are also used. Oral liquid preparations include suspensions, liquid solutions, emulsions, and syrups, and may include various excipients, such as wetting agents, sweeteners, fragrances, and preservatives, in addition to commonly used simple diluents such as water and liquid paraffin. . Formulations for parenteral administration include sterile aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, lyophilized preparations, suppositories. As the non-aqueous solvent and suspending agent, propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oils such as olive oil, injectable esters such as ethyl oleate and the like can be used. As the base of the suppository, witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin butter, glycerogelatin and the like can be used.
본 발명의 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁 내 경막 또는 뇌혈관 내 주사에 의해 투여될 수 있다. The composition of the present invention can be administered to mammals such as rats, mice, livestock, humans, etc. by various routes. All modes of administration can be expected, for example, by oral, rectal or intravenous, intramuscular, subcutaneous, intrauterine dural or cerebrovascular injections.
본 발명에 따른 조성물은 주사용 조성물과 혼합하여 포유동물의 혈관신생을 유도하고자 하는 부위에 주사 형태로 투여할 수 있고, 주사용 조성물은 등장성 수용액 또는 현탁액이 바람직하며, 상기 약학 조성물은 멸균되거나 방부제, 안정화제, 습윤제, 유화제 용액 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제와 같은 보조제 또는 기타 치료적으로 유용한 물질을 함유할 수 있다. The composition according to the present invention may be administered in the form of an injection to a site to be mixed with an injectable composition to induce angiogenesis in a mammal, and the injectable composition is preferably an isotonic aqueous solution or suspension, and the pharmaceutical composition may be Adjuvants such as preservatives, stabilizers, wetting agents, emulsifier solution accelerators, salts for regulating osmotic pressure and / or buffers or other therapeutically useful substances.
본 발명의 약학 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 조성물은 1일 0.5mg/kg 내지 10mg/kg으로 투여할 수 있으며, 반감기에 따라 일일 수회 내지 일주일에 1회 투여할 수 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.Preferred dosages of the pharmaceutical compositions of the present invention vary depending on the condition and weight of the patient, the extent of the disease, the form of the drug, the route of administration and the duration, and may be appropriately selected by those skilled in the art. However, for the desired effect, the composition of the present invention may be administered at 0.5 mg / kg to 10 mg / kg per day, and may be administered several times to once a week depending on the half-life. The dosage does not limit the scope of the invention in any aspect.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. These examples are only for illustrating the present invention, it will be apparent to those skilled in the art that the scope of the present invention is not to be construed as limited by these examples.
실시예Example 1: 재조합 1: recombination 비스파틴의Bispatin 제조 Produce
인간 비스파틴(visfatin) 유전자의 전체 cDNA(서열번호 1)를 서열번호 2 및 서열번호 3의 프라이머를 사용하여 PCR을 수행한 후, 상기 PCR 산물을 발현벡터인 pET 플라스미드에 클로닝한 다음, 상기 재조합 벡터를 대장균(E. coli)에 도입하여 형질전환체를 제조하였다. 상기 형질전환체를 배양하여 비스파틴 단백질을 수득하여 정제하였다.After performing the PCR using the primers of SEQ ID NO: 2 and SEQ ID NO: 3 of the entire cDNA of the human visfatin gene, the PCR product was cloned into the expression vector pET plasmid, and The recombinant vector was introduced into E. coli to prepare a transformant. The transformant was cultured to obtain and purify bispatin protein.
서열번호 2: 5'-atgaatcctg cggcagaagc-3'SEQ ID NO: 5'-atgaatcctg cggcagaagc-3 '
서열번호 3: 5'-atgatgtgctgcttccagttc-3'SEQ ID NO: 5'-atgatgtgctgcttccagttc-3 '
실시예Example 2: 2: 비스파틴의Bispatin 세포 이동에 미치는 영향 Effect on cell migration
인간 탯줄 정맥 내피세포(human umbilical vein endothelial cell, HUVEC, Clonetics사)를 성장배지(M199; 20% FBS, 100unit/㎖ 페니실린, 10㎍/㎖ 스트립토 마이신, 3ng/㎖ 섬유아세포 성장인자(basic fibroblast growth factor, bFGF), 5units/㎖ 헤파린)에서 37℃, 95%(v/v) CO2, 5%(v/v) 공기의 조건으로 배양하였다. 상기에서 배양된 세포를 젤라틴으로 코팅한 60㎜ 플레이트에서 세포가 약 90% 채워질 때까지 배양한 후, 면도날을 수직으로 세워 중심선이 표시되게끔 해 준 뒤, 면도날을 가볍게 눕혀 아래로 약 5㎜ 정도 그어 내려 상처(wounding)를 주었다. 상기 세포를 혈청이 제거된 배지로 세척한 후, 배지에 1mM 티미딘(thymidine) 및 상기 실시예 1에서 수득한 비스파틴(visfatin, 10ng/㎖, 100ng/㎖)을 첨가하여 24시간 배양한 다음, 고정하고 Giemsa 염색하여 광학현미경 상으로 관찰·계수하였다 (도 1). 양성 대조군으로는 기존에 혈관신생 인자로 알려진 혈관내피 성장인자(vascular endothelial growth factor, VEGF)를 처리하였다. 그 결과, 비스파틴의 농도가 증가할수록 이동하는 세포 수가 증가한다는 것을 알 수 있었다. Human umbilical vein endothelial cells (HUVEC, Clonetics) were grown on growth media (M199; 20% FBS, 100unit / ml penicillin, 10µg / ml striptomycin, 3ng / ml fibroblast growth factor (basic fibroblast) growth factor, bFGF), and 5 units / ml heparin) at 37 ° C., 95% (v / v) CO 2 , and 5% (v / v) air. After culturing the cultured cells in gelatin-coated 60mm plate until the cell is about 90% filled, the razor blades are vertically placed so that the centerline is displayed, and then the blades are laid down lightly about 5mm. I drew it and wounded it. After washing the cells with medium without serum, the cells were incubated for 24 hours by adding 1 mM thymidine and bispatin (10 ng / ml, 100 ng / ml) obtained in Example 1 to the medium. Next, fixation and Giemsa staining were observed and counted on an optical microscope (FIG. 1). As a positive control, vascular endothelial growth factor (VEGF) was previously known as angiogenesis factor. As a result, it was found that as the concentration of bispatin increases, the number of moving cells increases.
실시예Example 3: 3: 비스파틴의Bispatin 세포 침윤에 미치는 영향 Effect on Cell Infiltration
공극 크기(pore size)가 8㎛인 폴리카보네이트 필터가 있는 트랜스웰(transwell)의 삽입 챔버를 사용하여 비스파틴이 세포 침윤에 미치는 영향을 측정하였다.The effect of bispartin on cell infiltration was measured using a transwell insertion chamber with a polycarbonate filter with a pore size of 8 μm.
챔버 필터의 아랫부분은 타입 IV 콜라겐(type IV collagen) 5㎍으로 코팅하고, 필터의 윗부분은 25㎍의 마트리젤로 코팅하였다. 메인 챔버에 배지 600㎕를 첨가하고, 삽입 챔버에는 HUVEC(2×105 cells/well) 세포를 포함하는 배지 400㎕과 비 스타틴(100ng/㎖)을 넣은 후, 삽입 챔버를 메인 챔버에 집어넣어, 37℃ 배양기에서 16시간 동안 배양하였다. 상기 배양한 삽입 챔버의 폴리카보네이트 필터를 떼어내어 고정한 후, 헤마토실린-에오신(hematoxylin-eosin)으로 염색하여 마트리젤을 분해하고, 필터를 통과한 세포의 수를 광학현미경 상에서 계수하였다 (도 2). 그 결과, 비스파틴에 의해 필터를 통과한 HUVEC 세포 수가 증가한다는 것을 알 수 있었다.The bottom of the chamber filter was coated with 5 μg of type IV collagen, and the top of the filter was coated with 25 μg of Matrigel. 600 μl of medium was added to the main chamber, 400 μl of medium containing HUVEC (2 × 10 5 cells / well) cells and bistatin (100 ng / ml) were added to the insertion chamber, and the insertion chamber was placed in the main chamber. Incubated for 16 hours at 37 ℃ incubator. After removing and fixing the polycarbonate filter of the incubation chamber, the matrigel was decomposed by staining with hematoxylin-eosin, and the number of cells passing through the filter was counted on an optical microscope (FIG. 2). ). As a result, it was found that the number of HUVEC cells passing through the filter by bispartin increases.
실시예Example 3: 3: 비스파틴의Bispatin 관 형성에 미치는 영향 Impact on tube formation
10㎎/㎖ 농도의 마트리젤 300㎕를 24 웰 플레이트에 떨어뜨려 젤화 되도록 37℃에서 30분간 방치하였다. 젤이 형성된 후 바닥이 보이지 않을 정도로 배양된 HUVEC 세포를 트립신 처리하여 수득한 후, 성장배지(M199)에 4×105 cells/well이 되도록 분주하고, 비스파틴(100ng/㎖ 및 1000ng/㎖)이 첨가된 1㎖의 배지에서 배양한 다음, 세포가 젤 속을 파고 들어가 혈관과 유사한 모양을 형성하는지 광학현미경으로 관찰하였다 (도 3). 그 결과, 비스파틴을 넣어준 경우 HUVEC 세포의 관 형성이 촉진된다는 것을 알 수 있었다.300 μl of Matrigel at a concentration of 10 mg / ml was dropped into a 24 well plate and left at 37 ° C. for 30 minutes to gel. After the gel was formed, obtained by trypsinizing the HUVEC cells cultured to the bottom, and then cultured into growth medium (M199) to 4 × 10 5 cells / well, bispatin (100ng / ㎖ and 1000ng / ㎖ ) Was cultured in 1 ml of medium, and then observed by light microscopy to see if cells penetrated into the gel to form blood vessel-like shapes (FIG. 3). As a result, it was found that the addition of bispartin promotes tube formation of HUVEC cells.
실시예Example 4: 쥐의 대동맥 고리 조직에서 4: in rat aortic ring tissue 비스파틴의Bispatin 스프라우팅에In sprouting 미치는 영향 Impact
6주된 Sprague Dawley 쥐로부터 획득한 대동맥 고리 조직을 마트리젤 110㎕로 코팅된 48 웰 플레이트에 분주하고, 다시 마트리젤 50㎕로 코팅한 다음, 각각 100ng/㎖ 비스파틴이 최종 부피가 200㎕가 되도록 첨가된 혈청 제거 배지를 각 웰에 넣어 주고, 5일 후에 각 고리로부터 뻗어 나온 스프라우팅(sprout) 정도를 광학이미지 기술로 촬영하였다 (도 4). 그 결과, 비스파틴에 의해 쥐의 대동맥 고리 조직에서 스프라우팅이 증가된다는 것을 확인할 수 있었다.Aortic ring tissues obtained from 6-week-old Sprague Dawley rats were aliquoted into 48 well plates coated with 110 μl of Matrigel, and then coated with 50 μl of Matrigel, and then 100 μg / ml bispartin, each with a final volume of 200 μl. The serum removal medium added as much as possible was put in each well, and after 5 days, the degree of spouting from each ring was photographed by optical imaging technique (FIG. 4). As a result, it was confirmed that the sprouting increased by bispatin in the aortic ring tissue of the rat.
실시예Example 5: 5: CAMCAM 을 이용한 Using 비스파틴의Bispatin 혈관신생 촉진에 미치는 영향 측정 Measurement of the effects on the promotion of angiogenesis
융모 요막(chorioallantoic membrane, CAM)을 이용하여 비스파틴이 생체(in vivo) 내에서 혈관신생을 유도하는지 확인하였다. Chorioallantoic membrane (CAM) was used to determine whether bispartin induces angiogenesis in vivo.
혈관 형성이 종료된 3일령 닭의 수정란의 계란 알부민 2㎖를 제거하여 난황을 껍질막과 분리하고, CAM이 관찰되도록 투명테이프로 밀봉하였다. 1일이 경과한 후, 음성 대조군, 0.1㎍/㎖의 PMA(양성 대조군) 및 여러 농도의 비스파틴을 놓고 건조시킨 커버 슬라이드를 CAM에 처리하였다. 8일 경과 후, 10% 지방 에멀젼(fat emulsion)을 CAM 막 안쪽에 주입하여 해부현미경(8배율)으로 혈관신생이 촉진되었는지 관찰하였다. 그 결과, 음성 대조군에 비하여 PMA 또는 비스파틴을 처리한 경우, 혈관신생이 현저히 촉진됨을 알 수 있었다 (도 5).Egg yolk was removed from the egg albumin of the fertilized egg of the 3 day old chicken whose blood vessel formation was terminated, and egg yolk was separated from the shell film and sealed with a transparent tape so that CAM was observed. After 1 day, the cover slides were dried with negative control, 0.1 μg / ml PMA (positive control) and various concentrations of bispartin and treated with CAM. After 8 days, a 10% fat emulsion was injected into the CAM membrane to observe whether angiogenesis was promoted by anatomical microscopy (8x magnification). As a result, it was found that angiogenesis was significantly promoted when PMA or bispartin was treated as compared to the negative control (FIG. 5).
실시예Example 6: 6: 마트리젤을Matrigel 이용한 Used 비스파틴의Bispatin 혈관신생 촉진에 미치는 영향 측정 Measurement of the effects on the promotion of angiogenesis
헤파린(40units/㎖)을 포함하는 마트리젤 500㎕와 비스파틴(10㎍/㎖)을 4℃에서 섞은 후, 6~7주된 생쥐(C57BL/6) 복부의 피부와 복강막 사이로 주사하였다. 양성 대조군으로는 혈관내피 성장인자(vascular endothelial growth factor, VEGF) 를 처리하였다. 5~7일 경과 후, 쥐의 피부를 벗겨내고 형성된 마트리젤 플러그(matrigel plug)를 생쥐에서 꺼내어, 헤모글로빈 분석법을 수행하여 전체적인 혈관 형성 정도를 측정하였다 (도 6). 그 결과, 음성 대조군에서는 새로운 혈관이 거의 형성되지 않았으나, VEGF 처리군 및 비스파틴 처리군에서는 새로이 혈관이 형성되었고, 농도 의존적으로 현저히 증가한다는 것을 확인할 수 있었다. 따라서, 비스파틴을 이용할 경우, 혈관신생을 효과적으로 유도할 수 있다는 것을 알 수 있었다.500 μl of Matrigel containing heparin (40 units / ml) and bispartin (10 μg / ml) were mixed at 4 ° C., and then injected between the abdominal membrane and the skin of 6-7 week old mice (C57BL / 6). As a positive control, vascular endothelial growth factor (VEGF) was treated. After 5-7 days, the skin of the mouse was peeled off and the formed matrigel plugs were removed from the mice, and hemoglobin analysis was performed to measure the overall degree of blood vessel formation (FIG. 6). As a result, new blood vessels were hardly formed in the negative control group, but new blood vessels were formed in the VEGF-treated group and the bispartin-treated group, and it was confirmed that the concentration increased significantly in a concentration-dependent manner. Therefore, it was found that the use of bispartin can effectively induce angiogenesis.
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.The specific parts of the present invention have been described in detail above, and it is apparent to those skilled in the art that such specific descriptions are merely preferred embodiments, and thus the scope of the present invention is not limited thereto. something to do. Thus, the substantial scope of the present invention will be defined by the appended claims and their equivalents.
도 1은 비스파틴(visfatin)의 처리 농도에 따라 이동한 혈관내피세포를 나타낸 것이다. Figure 1 shows the vascular endothelial cells migrated according to the treatment concentration of bispatin (visfatin).
도 2는 트랜스웰을 사용하여 혈관내피세포성장인자(VEGF) 및 비스파틴의 혈관내피세포의 전이촉진 효과를 나타낸 것이다. Figure 2 shows the effect of promoting the transfer of vascular endothelial growth factor (VEGF) and bispartin vascular endothelial cells using a transwell.
도 3은 혈관내피세포를 마트리젤 위에서 배양하여 비스파틴을 처리한 경우 혈관 형성 여부를 확인한 것이다. Figure 3 is a culture of vascular endothelial cells on Matrigel to determine whether the formation of blood vessels when treated with bispartin.
도 4a은 비스파틴에 의한 스프라우팅 정도의 변화를 관찰한 것이다 (A: 쥐의 대동맥 고리에서 비스파틴에 의한 스프라우팅 정도의 변화를 관찰한 사진; B: 쥐의 대동맥 고리에서 비스파틴의 혈관 스프라우팅 촉진 작용을 정량화한 그래프).Figure 4a shows the change in the degree of spouting by bispatin (A: photograph of the change in the degree of spouting by bispatin in the aortic ring of the rat; B: bispartin in the aortic ring of the rat Graph quantifying the effect of promoting blood vessels spouting.
도 5는 비스파틴의 혈관신생 작용을 나타낸 것이다. (A: 계배 융모막에서 비스파틴의 혈관신생 작용을 나타내는 현미경사진; B: 계배 융모막에서 전체 CAM의 수에 대한 혈관신생을 나타내는 CAM의 수를 정량화한 그래프). Figure 5 shows the angiogenic action of bispartin. (A: micrograph showing the angiogenic action of bispartin in the chorionic villus; B: graph quantifying the number of CAMs representing angiogenesis versus the total number of CAMs in the chorionic villus).
도 6은 마트리젤을 이용한 비스파틴의 혈관신생 촉진에 미치는 영향 측정한 것이다 (A: 생쥐를 이용한 마트리젤 플러그(matrigel plug) 실험방법에 따른 음성대조군, 양성대조군(VEGF) 및 비스파틴의 혈관형성작용을 나타낸 사진; B: 생쥐를 이용한 마트리젤 플러그 실험방법에 따라 음성대조군, 양성대조군(VEGF) 및 비스파틴에서 생성된 혈관을 헤모글로빈 분석법을 이용하여 정량분석한 그래프).Figure 6 is a measurement of the effect on the promotion of angiogenesis of bispartin using Matrigel (A: negative control group, positive control group (VEGF) and bispatin according to the Matrigel plug test method using a mouse B: quantitative analysis of blood vessels generated from negative control group, positive control group (VEGF), and bispartin according to the Matrigel plug test method using mice.
<110> Technology LicensingCenter Pusan University <120> PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR ANGIOGENESIS STIMULATION COMPRISING VISFATIN AS AN ACTIVE INGREDIENT <160> 3 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 1476 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 1 atgaatcctg cggcagaagc cgagttcaac atcctcctgg ccaccgactc ctacaaggtt 60 actcactata aacaatatcc acccaacaca agcaaagttt attcctactt tgaatgccgt 120 gaaaagaaga cagaaaactc caaattaagg aaggtgaaat atgaggaaac agtattttat 180 gggttgcagt acattcttaa taagtactta aaaggtaaag tagtaaccaa agagaaaatc 240 caggaagcca aagatgtcta caaagaacat ttccaagatg atgtctttaa tgaaaaggga 300 tggaactaca ttcttgagaa gtatgatggg catcttccaa tagaaataaa agctgttcct 360 gagggctttg tcattcccag aggaaatgtt ctcttcacgg tggaaaacac agatccagag 420 tgttactggc ttacaaattg gattgagact attcttgttc agtcctggta tccaatcaca 480 gtggccacaa attctagaga gcagaagaaa atattggcca aatatttgtt agaaacttct 540 ggtaacttag atggtctgga atacaagtta catgattttg gctacagagg agtctcttcc 600 caagagactg ctggcatagg agcatctgct cacttggtta acttcaaagg aacagataca 660 gtagcaggac ttgctctaat taaaaaatat tatggaacga aagatcctgt tccaggctat 720 tctgttccag cagcagaaca cagtaccata acagcttggg ggaaagacca tgaaaaagat 780 gcttttgaac atattgtaac acagttttca tcagtgcctg tatctgtggt cagcgatagc 840 tatgacattt ataatgcgtg tgagaaaata tggggtgaag atctaagaca tttaatagta 900 tcgagaagta cacaggcacc actaataatc agacctgatt ctggaaaccc tcttgacact 960 gtgttaaagg ttttggagat tttaggtaag aagtttcctg ttactgagaa ctcaaagggt 1020 tacaagttgc tgccacctta tcttagagtt attcaagggg atggagtaga tattaatacc 1080 ttacaagaga ttgtagaagg catgaaacaa aaaatgtgga gtattgaaaa tattgccttc 1140 ggttctggtg gaggtttgct acagaagttg acaagagatc tcttgaattg ttccttcaag 1200 tgtagctatg ttgtaactaa tggccttggg attaacgtct tcaaggaccc agttgctgat 1260 cccaacaaaa ggtccaaaaa gggccgatta tctttacata ggacgccagc agggaatttt 1320 gttacactgg aggaaggaaa aggagacctt gaggaatatg gtcaggatct tctccatact 1380 gtcttcaaga atggcaaggt gacaaaaagc tattcatttg atgaaataag aaaaaatgca 1440 cagctgaata ttgaactgga agcagcacat cattag 1476 <210> 2 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 2 atgaatcctg cggcagaagc 20 <210> 3 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 3 atgatgtgct gcttccagtt c 21 <110> Technology LicensingCenter Pusan University <120> PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR ANGIOGENESIS STIMULATION COMPRISING VISFATIN AS AN ACTIVE INGREDIENT <160> 3 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 1476 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 1 atgaatcctg cggcagaagc cgagttcaac atcctcctgg ccaccgactc ctacaaggtt 60 actcactata aacaatatcc acccaacaca agcaaagttt attcctactt tgaatgccgt 120 gaaaagaaga cagaaaactc caaattaagg aaggtgaaat atgaggaaac agtattttat 180 gggttgcagt acattcttaa taagtactta aaaggtaaag tagtaaccaa agagaaaatc 240 caggaagcca aagatgtcta caaagaacat ttccaagatg atgtctttaa tgaaaaggga 300 tggaactaca ttcttgagaa gtatgatggg catcttccaa tagaaataaa agctgttcct 360 gagggctttg tcattcccag aggaaatgtt ctcttcacgg tggaaaacac agatccagag 420 tgttactggc ttacaaattg gattgagact attcttgttc agtcctggta tccaatcaca 480 gtggccacaa attctagaga gcagaagaaa atattggcca aatatttgtt agaaacttct 540 ggtaacttag atggtctgga atacaagtta catgattttg gctacagagg agtctcttcc 600 caagagactg ctggcatagg agcatctgct cacttggtta acttcaaagg aacagataca 660 gtagcaggac ttgctctaat taaaaaatat tatggaacga aagatcctgt tccaggctat 720 tctgttccag cagcagaaca cagtaccata acagcttggg ggaaagacca tgaaaaagat 780 gcttttgaac atattgtaac acagttttca tcagtgcctg tatctgtggt cagcgatagc 840 tatgacattt ataatgcgtg tgagaaaata tggggtgaag atctaagaca tttaatagta 900 tcgagaagta cacaggcacc actaataatc agacctgatt ctggaaaccc tcttgacact 960 gtgttaaagg ttttggagat tttaggtaag aagtttcctg ttactgagaa ctcaaagggt 1020 tacaagttgc tgccacctta tcttagagtt attcaagggg atggagtaga tattaatacc 1080 ttacaagaga ttgtagaagg catgaaacaa aaaatgtgga gtattgaaaa tattgccttc 1140 ggttctggtg gaggtttgct acagaagttg acaagagatc tcttgaattg ttccttcaag 1200 tgtagctatg ttgtaactaa tggccttggg attaacgtct tcaaggaccc agttgctgat 1260 cccaacaaaa ggtccaaaaa gggccgatta tctttacata ggacgccagc agggaatttt 1320 gttacactgg aggaaggaaa aggagacctt gaggaatatg gtcaggatct tctccatact 1380 gtcttcaaga atggcaaggt gacaaaaagc tattcatttg atgaaataag aaaaaatgca 1440 cagctgaata ttgaactgga agcagcacat cattag 1476 <210> 2 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 2 atgaatcctg cggcagaagc 20 <210> 3 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 3 atgatgtgct gcttccagtt c 21
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Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8815243B2 (en) | 2010-08-18 | 2014-08-26 | Korea Institute Of Radiological & Medical Sciences | Pharmaceutical composition with antibody that binds to heat shock protein 27(HSP270) and method for promoting wound healing |
| KR20200070890A (en) * | 2018-12-10 | 2020-06-18 | 고려대학교 산학협력단 | Composition for the screening of wound healing agent and screening method for the same |
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