KR20080090950A

KR20080090950A - Process for preparing gemcitabine and associated intermediates

Info

Publication number: KR20080090950A
Application number: KR1020070072386A
Authority: KR
Inventors: 블라디미르 나다카; 에얄 클로프퍼; 샤디 사에드; 디온 몬트빌리스키; 오데드 아라드; 조셉 카스피
Original assignee: 케마지스 리미티드
Priority date: 2007-04-06
Filing date: 2007-07-19
Publication date: 2008-10-09

Abstract

A method for preparing gemcitabine and a method for preparing intermediates thereof are provided to facilitate the production of the gemcitabine, particularly on a commercial scale. A method for preparing gemcitabine comprises the steps of: (a) reducing a compound represented by a formula(16A) to produce a compound represented by a formula(19); (b) activating the hydroxyl group, for example, by conversion into a sulfonate(mesylate); (c) reacting the activated hydroxyl(mesylate) with a protected cytosine to produce a protected nucleoside; (d) optionally separating a beta anomer; (e) deprotecting the protected nucleoside; and (f) optionally separating the beta anomer, wherein R1 is unsubstituted or substituted C1-5 saturated or unsaturated alkyl, substituted phenyl, or C1-5 saturated or unsaturated aralkyl; R5 is unsubstituted or substituted phenyl, unsubstituted or substituted phenyl sulfonyl, or C1-5 alkylsulfonyl; and X is O or S. A method for preparing a compound represented by a formula(16) comprises the steps of: (a) hydrolyzing a mixture of erythro and threo isomers of a 3-substituted, alkyl 2,2-difluoro-3-hydroxy-3-(2,2-dialkyldioxolan-4-yl)-propionate in the presence of an acid to produce a 3-substituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose; and (b) reacting the 3-substituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose with a compound of R5NCX, optionally in presence of a base, wherein X is O or S, and R5 is unsubstituted or substituted phenyl, unsubstituted or substituted phenylsulfonyl, or C1-C5 alkylsulfonyl. A method for preparing the compound of the formula(16A) comprises the steps of: (a) dissolving a diastereomeric mixture of the formula(16) in a non-polar solvent: (b) cooling the mixture sufficiently to produce crystals of the compound of the formula(16A); (c) collecting a least a portion of the crystals; (d) optionally washing the crystals; and (e) optionally drying the crystals.

Description

젬시타빈의 제조 방법 및 관련 중간체{Process for preparing gemcitabine and associated intermediates}Process for preparing gemcitabine and associated intermediates

본원 발명은 젬시타빈의 제조에 유용한 중간체 화합물, 그와 같은 중간체의 제조 방법, 및 그와 같은 중간체로부터의 젬시타빈의 제조 방법을 제공한다.The present invention provides intermediate compounds useful in the preparation of gemcitabine, methods of preparing such intermediates, and methods of preparing gemcitabine from such intermediates.

엘리 릴리(Eli Lilly)에 의해 상표명 젬자(Gemzar^®)로 판매되고 있는 젬시타빈(Gemcitabine) HCl은 항종양 활성을 갖는 뉴클레오시드 유사체이고, 이것은 대사길항물질로 알려진 화학치료용 약물의 일반적인 그룹에 속한다. 젬시타빈은 세포 단계 특이성을 나타내어, 주로 DNA 합성을 하는 세포들을 죽이고, G1/S-단계 근처에서 세포의 발달을 차단한다.Gemcitabine HCl, sold by Eli Lilly under the trade name Gemzar ^® , is a nucleoside analogue with anti-tumor activity, which is a common group of chemotherapeutic drugs known as metabolic agents. Belong. Gemcitabine exhibits cell phase specificity, killing cells that primarily synthesize DNA, and block the development of cells near the G1 / S-phase.

젬시타빈은 시토신의 합성 글루코시드 유사체로서, 화학적으로는 4-아미노-1-(2-데옥시-2,2-디플루오로-β-D-리보푸라노실)-피리미딘-2(1H)-온 또는 2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘(β 아이소머)로 기재된다. 젬시타빈 HCl은 하기 구조를 갖는다. Gemcitabine is a synthetic glucoside analog of cytosine, chemically 4-amino-1- (2-deoxy-2,2-difluoro-β-D-ribofuranosyl) -pyrimidine-2 (1H) -One or 2'-deoxy-2 ', 2'-difluorocytidine (β isomer). Gemcitabine HCl has the following structure.

젬자(Gemzar^®)는 멸균된 동결건조 분말인 만니톨(200 mg 또는 1g, 각각) 및 소듐 아세테이트(12.5 mg 또는 62.5 mg, 각각)와 함께 제제화된 젬시타빈 HCl 200 mg 또는 1 g(유리 염기로 계산됨)을 포함하는 멸균된 형태의 히드로클로라이드 염으로 바이알에 및 정맥 내 용도로만 공급된다. 염산 및/또는 소듐 히드록시드가 pH 조절을 위해 첨가될 수 있다.Gemzar ^® is 200 mg or 1 g of gemcitabine HCl formulated with sterile lyophilized powder mannitol (200 mg or 1g, respectively) and sodium acetate (12.5 mg or 62.5 mg, respectively), calculated as free base Hydrochloride salt in sterile form, which is supplied only to the vial and for intravenous use. Hydrochloric acid and / or sodium hydroxide may be added for pH adjustment.

미국특허 제4,808,614호("'614 특허")는 하기 반응식 1에서 개괄적으로 설명되는, 합성에 의해 젬시타빈을 제조하는 방법을 기술하고 있다.U.S. Patent 4,808,614 ("'614 Patent") describes a method for preparing gemcitabine by synthesis, outlined in Scheme 1 below.

<반응식 1><Scheme 1>

D-글리세르알데히드 케탈 2는 활성화된 아연의 존재 하에서 브로모디플루오로아세트산 에틸 에스테르(BrCF₂COOEt)와 반응하여, 3-R 아이소머(isomer)와 3-S 아이소머의 혼합물인 에틸 2,2-디플루오로-3-히드록시-3-(2,2-디메틸디옥솔란-4-일)-프로피오네이트 3을 제공한다. 3-R 아이소머 대 3-S 아이소머의 비율은 약 3:1이다. 3-R 아이소머는 목표로 하는 에리트로(erythro)(3-R) 리보스 구조를 제조하는데 필요한 입체화학을 갖고 있고, 및 크로마토그래피에 의해 3-S 아이소머로부터 분리될 수 있다. D-glyceraldehyde ketal 2 is reacted with bromodifluoroacetic acid ethyl ester (BrCF ₂ COOEt) in the presence of activated zinc, ethyl 2, which is a mixture of 3-R isomer and 3-S isomer, 2-Difluoro-3-hydroxy-3- (2,2-dimethyldioxolan-4-yl) -propionate 3 is provided. The ratio of 3-R isomer to 3-S isomer is about 3: 1. By the 3-R iso dimmer for preparing the erythro (erythro) (3-R) ribose structure aiming and has the required stereochemistry, and chromatography may be separated from the 3-S iso bots

그 결과 생성되는 생성물은 Dowex 50W-X12와 같은 산성 이온 교환 수지에 의한 처리에 의해 고리화되어, 2-데옥시-2,2-디플루오로-D-에리트로-펜탄산-γ-락톤 4를 생성한다. 락톤의 히드록시기는 터트-부틸디메틸실릴(TBDMS) 보호기로 보호되어, 보호된 락톤인 3,5-비스-(터트-부틸디메틸실릴옥시)-2-데속시-2,2-디플루오로-1-옥소리보스 5를 생성하고, 이 생성물은 환원되어 3,5-비스-(터트-부틸디메틸실릴)-2-데속시-2,2-디플루오로리보스 6을 생성한다.The resulting product is cyclized by treatment with an acidic ion exchange resin such as Dowex 50W-X12 to give 2-deoxy-2,2-difluoro-D-erythro-pentanoic acid-γ-lactone 4 Create The hydroxyl group of the lactone is protected with a tert-butyldimethylsilyl (TBDMS) protecting group to protect the protected lactone 3,5-bis- (tert-butyldimethylsilyloxy) -2-decoxy-2,2-difluoro-1 -Oxoribose 5 is produced and the product is reduced to yield 3,5-bis- (tert-butyldimethylsilyl) -2-decoxy-2,2-difluororibose 6 .

탄수화물의 1번 위치는 이탈기 도입에 의해 활성화되는데, 예를 들면 화합물 6과 메탄술포닐 클로라이드를 반응시켜 3,5-비스-(터트-부틸디메틸실릴옥시)-1-메탄술포닐옥시-2-데속시-2,2-디플루오로리보스 7을 수득함으로써 형성되는 메탄술포닐옥시(메실레이트)로 활성화된다. 트리플루오로메탄술포닐옥시 트리메틸실란(트리메틸실릴 트리플레이트)과 같은 반응 개시제의 존재 하에서, 화합물 7과 N,O-비스-(트리메틸실릴)-시토신 8을 반응시킴으로써, 기본 고리와 탄수화물이 커플링된다. 보호기의 제거와 크로마토그래피 정제로 유리 염기 상태의 젬시타빈을 얻는다.Position 1 of the carbohydrate is activated by the introduction of a leaving group, for example by reacting compound 6 with methanesulfonyl chloride, 3,5-bis- (tert-butyldimethylsilyloxy) -1-methanesulfonyloxy-2 Activated with methanesulfonyloxy (mesylate), which is formed by obtaining desoxy-2,2-difluororibose 7 . By reacting compound 7 with N, O-bis- (trimethylsilyl) -cytosine 8 in the presence of a reaction initiator such as trifluoromethanesulfonyloxy trimethylsilane (trimethylsilyl triflate), the basic ring and carbohydrate are coupled do. Removal of the protecting group and chromatographic purification give gemcitabine in the free base state.

미국특허 제4,526,988호는 알킬 3-디옥솔라닐-2,2-디플루오로-3-히드록시-프로피오네이트를 약한 산성 이온 교환 수지로 가수분해시킴으로써 고리화 반응이 수행되는 유사한 제조 방법을 기술하고 있다. 또한, Hert et al ., J. Org . Chem . 53, 2406(1998)을 참고한다.U.S. Patent No. 4,526,988 describes a similar process by which the cyclization reaction is carried out by hydrolyzing alkyl 3-dioxolanyl-2,2-difluoro-3-hydroxy-propionate with a weak acidic ion exchange resin. Doing. Also, Hert et al . , J. Org . Chem . 53, 2406 (1998).

미국특허 제4,965,374호("'374 특허")는 하기 식의 3,5-디벤조일 리보 보호된 락톤 중간체로부터 젬시타빈을 제조하는 방법을 기술하고 있는데:U.S. Patent 4,965,374 ("'374 Patent") describes a process for preparing gemcitabine from 3,5-dibenzoyl ribo protected lactone intermediates of the formula:

목표로 하는 에리트로 아이소머는 에리트로 아이소머와 트레오(threo) 아이소머 혼합물로부터 결정 형태로 분리될 수 있다. '374 특허에서 기술된 제조 방법이 반응식 2에서 개괄적으로 약술되어 있다.The target erythro isomer can be separated in crystalline form from the mixture of erythro isomers and threo isomers . The preparation method described in the '374 patent is outlined in Scheme 2.

<반응식 2><Scheme 2>

화합물 3의 3-히드록시기는 3차 아민 또는 4-디메틸아미노피리딘 또는 4-피롤리디노피리딘과 같은 촉매의 존재 하에서, 벤조일 클로라이드, 벤조일 브로마이트, 벤조일 시아니드, 벤조일 아지드 등(예를 들면, X = Cl, Br, CN, 또는 N₃인PhCOX)과의 반응에 의해 벤조일 보호기로 에스테르화되어, 에틸 2,2-디플루오로-3-벤조일옥시-3-(2,2-디메틸디옥솔란-4-일)-프로피오네이트 9를 제공한다.The 3 -hydroxy group of compound 3 is selected from benzoyl chloride, benzoyl bromite, benzoyl cyanide, benzoyl azide and the like in the presence of a tertiary amine or a catalyst such as 4-dimethylaminopyridine or 4-pyrrolidinopyridine. X = Cl, Br, CN, or N ₃ Esterified by benzoyl protecting group by reaction with PhCOX) to give ethyl 2,2-difluoro-3-benzoyloxy-3- (2,2-dimethyldioxolan-4-yl) -propionate 9 do.

9의 이소알킬리덴 보호기는 예를 들면 에탄올에서 진한 황산과 같은 강산을 사용함으로써 선택적으로 제거되어, 에틸-2,2-디플루오로-3-벤조일옥시-4,5-디히드록시펜타노에이트 9A를 생성한다. 생성물은 락톤 10으로 고리화되고, 락톤은 디벤조에이트 에스테르로 변환되어 에리트로 아이소머와 트레오 아이소머의 혼합물인 락톤 2-데옥시-2,2-디플루오로펜토푸라노스-1-울로스-3,5-디벤조이트 11을 생성한다. '374 특허는 혼합물로부터 에리트로 아이소머의 적어도 일 부분을 선택적인 침전에 의해 분리하는 단계를 기술하고 있다. 또한, Chou et al ., Synthesis, 565-570 (1992)를 참조한다. 9 isoalkylidene protecting group is selectively removed by using strong acid such as concentrated sulfuric acid in ethanol, for example ethyl-2,2-difluoro-3-benzoyloxy-4,5-dihydroxypentanoate Create 9A . The product is cyclized to lactone 10 , and the lactone is converted to a dibenzoate ester to form lactone 2-deoxy-2,2-difluoropentofuranos-1-ulose- which is a mixture of erythro isomers and treo isomers. To yield 3,5-dibenzoate 11 . The '374 patent describes the step of separating at least a portion of the erythro isomer from the mixture by selective precipitation. Also, Chou et al . , Synthesis , 565-570 (1992).

그런 다음, 화합물 11은 환원되어 2-데속시-2,2-디플루오로펜토푸라노스-디벤조에이트 12의 α 아노머(anomer)와 β 아노머의 혼합물을 제공하고, 이 혼합물은 메탄술포닐 클로라이드로 활성화되어 메실레이트의 아노머 혼합물인 2-데옥시-2,2-디플루오로-D-리보푸라노실-3,5-디-O-벤조일-1-O-메탄술포네이트 13을 제공하고, 이것은 N,O-비스(트리메틸실릴)-시토신 8과 커플링하여 α-아노머와 β-아노머의 혼합물(α/β 아노머 비율이 약 1:1)인 디벤조에이트 에스테르로서 실릴-보호된 뉴클레오시드 14를 제공한다. 에스테르기와 실릴 보호기의 제거는 β-아노머(젬시타빈)와 α-아노머의 혼합물(α/β 아노머 비율이 약 1:1)을 제공한다. '374 특허는 아노머 혼합물의 염, 예를 들면 히드로클로라이드 염 또는 히드로브로마이드 염을 형성하고, 선택적으로 침전시켜 α/β 비율이 1:4인 염으로써 2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘을 수득함으로써, β-아노머(젬시타빈)를 선택적으로 분리하는 단계를 기술하고 있다. 또한, '374 특허는 약간 염기성인 수성 용액에서 β-아노머를 유리 염기 형태로 선택적으로 침전시키는 단계를 기술하고 있다. 그와 같은 한 방법은 뜨거운 산성 물(pH가 2.5-5.0으로 조절됨)에 상기 α/β가 1/1인 아노머 혼합물을 녹이고, 일단 혼합물이 실질적으로 녹으면, pH를 7.0-9.0으로 높이고 용액을 냉각시켜 결정을 석출하고, 여과에 의해 분리하는 단계를 포함하고 있다. Compound 11 is then reduced to provide a mixture of α and β anomers of 2-desoxy-2,2-difluoropentofuranos-dibenzoate 12 , which mixture is methanesulphur. Activated with polyvinyl chloride to give 2-deoxy-2,2-difluoro-D-ribofuranosyl-3,5-di-O-benzoyl-1-O-methanesulfonate 13 , an anomer mixture of mesylate Which is a dibenzoate ester which is a mixture of α-anomer and β-anomer (α / β anomer ratio of about 1: 1) coupled with N, O-bis (trimethylsilyl) -cytosine 8 Silyl-protected nucleoside 14 is provided. Removal of the ester group and silyl protecting group provides a mixture of β-anomer (gemcitabine) and α-anomer (α / β anomer ratio of about 1: 1). The '374 patent forms 2'-deoxy-2', 2 'as salts of anomer mixtures, for example, hydrochloride salts or hydrobromide salts, and optionally precipitated to salts with an α / β ratio of 1: 4. The step of selectively separating β-anomer (gemcitabine) by obtaining difluorocytidine is described. The '374 patent also describes the step of selectively precipitating β-anomer in free base form in a slightly basic aqueous solution. One such method dissolves the anomer mixture with α / β 1/1 in hot acidic water (pH is adjusted to 2.5-5.0) and once the mixture is substantially dissolved, the pH is raised to 7.0-9.0 and the solution The crystals were cooled to precipitate crystals and separated by filtration.

알킬술포네이트 중간체의 아노머 혼합물 13을 분리하는 방법이 또한 기술되어 있다. 미국특허 제5,256,797호와 미국특허 제4,526,988호는 2-데옥시-2,2-디플루오로-D-리보푸라노실-1-알킬술포네이트의 아노머를 분리하는 방법을 기술하고 있고, 미국특허 제5,256,798호는 α-아노머가 많은 리보푸라노실 술포네이트를 수득하는 방법을 기술하고 있다. Also described is a method for separating anomer mixture 13 of an alkylsulfonate intermediate. U.S. Patent Nos. 5,256,797 and 4,526,988 describe a method for separating anomers of 2-deoxy-2,2-difluoro-D-ribofuranosyl-1-alkylsulfonate, and U.S. Patent 5,256,798 describes a process for obtaining ribofuranosyl sulfonates rich in α-anomers.

젬시타빈 제조에 유용할 수 있는 다른 중간체들이 개시되어 있다. 예를 들면, 미국특허 제5,480,992호는 2,2-디플루오로리보실 아지드의 아노머 혼합물과, 예를 들면 2-데옥시-2,2-디플루오로-D-리보푸라노실-3,5-디-O-벤조일-1-O-β-메탄술포네이트를 리튬 아지드와 같은 아지드 친핵자(nucleophile)와 반응시켜 아지드를 수득함으로써 제조될 수 있는 상응하는 아민 중간체를 개시하고 있다. 아지드 의 환원은 상응하는 아민을 생성하고, 이 아민은 합성에 의해 뉴클레오시드로 전환될 수 있다. 또한, 미국특허 제5,541,345호와 미국특허 제5,594,155호를 참조한다.Other intermediates are disclosed that may be useful for preparing gemcitabine. For example, US Pat. No. 5,480,992 discloses an anomer mixture of 2,2-difluororibosyl azide, for example 2-deoxy-2,2-difluoro-D-ribofuranosyl-3, Corresponding amine intermediates can be prepared by reacting 5-di-O-benzoyl-1-O-β-methanesulfonate with an azide nucleophile such as lithium azide to yield azide. . Reduction of azide results in the corresponding amine, which can be converted to nucleosides by synthesis. See also US Pat. No. 5,541,345 and US Pat. No. 5,594,155.

다른 공지된 중간체는 예를 들면, 1-알킬술포닐-2,2-디플루오로-3-카바모일 리보스 및 관련된 뉴클레오시드 중간체(미국특허 제5,521,294호), 트리틸기가 붙은 중간체(미국특허 제5,559,222호), 2-데옥시-2,2-디플루오로-β-D-리보-펜토피라노스(미국특허 제5,602,262호), 2-치환된-3,3-디플루오로푸란 중간체(미국특허 제5,633,367호), 및 α,α-디플루오로-β-히드록시 티올 에스테르(미국특허 제5,756,775호와 미국특허 제5,912,366호)를 포함한다.Other known intermediates include, for example, 1-alkylsulfonyl-2,2-difluoro-3-carbamoyl ribose and related nucleoside intermediates (US Pat. No. 5,521,294), intermediates with trityl groups (US patents). 5,559,222), 2-deoxy-2,2-difluoro-β-D-ribo-pentopyranose (US Pat. No. 5,602,262), 2-substituted-3,3-difluorofuran intermediates ( US Pat. No. 5,633,367), and α, α-difluoro-β-hydroxy thiol esters (US Pat. No. 5,756,775 and US Pat. No. 5,912,366).

젬시타빈 제조, 특히 상업적인 규모에서 좋지 못한 수득률을 초래하는 경향이 있는 아이소머의 제조와 분리를 필요로 하는 제조 방법에 있어서 본질적인 문제점이 있다. 따라서, 젬시타빈의 제조, 특히 상업적인 규모에서 젬시타빈의 제조를 용이하게 하는, 젬시타빈 및 그의 중간체의 개선된 제조 방법에 대한 필요성이 있게 된다. 본원 발명은 본원 명세서에서 제공되는 발명의 상세한 설명에서 명백한 바와 같이, 그와 같은 제조 방법 및 중간체를 제공한다.There is an inherent problem in the preparation of gemcitabine, especially in the production process which requires the preparation and separation of isomers which tend to lead to poor yields on a commercial scale. Thus, there is a need for an improved method for preparing gemcitabine and its intermediates that facilitates the preparation of gemcitabine, particularly on the commercial scale. The present invention provides such methods of preparation and intermediates as is evident in the detailed description provided herein.

본원 발명의 간단한 요약Brief Summary of the Invention

본원 발명은 젬시타빈 제조에 유용한 중간체 화합물, 그와 같은 중간체의 제 조 방법, 및 그와 같은 중간체로부터 젬시타빈을 제조하는 방법을 제공한다. 본원 발명의 대표적인 중간체는 하기 식 15의, 3-치환된, 알킬 2,2-디플루오로-3-히드록시-3-(2,2-디알킬디옥솔란-4-일)-프로피오네이트 유도체를 포함하는데:The present invention provides intermediate compounds useful for the preparation of gemcitabine, methods of making such intermediates, and methods of preparing gemcitabine from such intermediates. Below it is typical intermediate of the invention (15), 3-substituted, 3-hydroxy-3-alkyl 2,2-difluoro (2,2-dialkyl-dioxolan-4-yl) propionate Derivatives include:

상기에서 R₁은 비치환된 또는 치환된 C₁-C₅ 포화된 또는 불포화된 알킬, 치환된 페닐, 또는 C₁-C₅ 포화된 또는 불포화된 아랄킬이고; R₂와 R₃은 독립적으로 C₁-C₃ 알킬이고; 및 R₄는 C₁-C₄ 알킬이다. 본원 발명의 대표적인 중간체는 또한 하기 식 16과 16A의 3,5-이치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스 유도체를 포함하는데:Wherein R ₁ is unsubstituted or substituted C ₁ -C ₅ saturated or unsaturated alkyl, substituted phenyl, or C ₁ -C ₅ saturated or unsaturated aralkyl; R ₂ and R ₃ are independently C ₁ -C ₃ alkyl; And R ₄ is C ₁ -C ₄ alkyl. Representative intermediates of the invention also include 3,5-disubstituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose derivatives of the following formulas 16 and 16A :

상기에서 R₁은 비치환된 또는 치환된 C₁-C₅ 포화된 또는 불포화된 알킬, 페닐 또는 치환된 페닐, 또는 C₁-C₅ 포화된 또는 불포화된 아랄킬이고; X는 O 또는 S 이고; 및 R₅는 비치환된 또는 치환된 페닐, 비치환된 또는 치환된 페닐술포닐, 또는 C₁-C₅ 알킬술포닐이다.Wherein R ₁ is unsubstituted or substituted C ₁ -C ₅ saturated or unsaturated alkyl, phenyl or substituted phenyl, or C ₁ -C ₅ saturated or unsaturated aralkyl; X is O or S; And R ₅ is unsubstituted or substituted phenyl, unsubstituted or substituted phenylsulfonyl, or C ₁ -C ₅ alkylsulfonyl.

본원 발명에 따르면, 젬시타빈은, 식 16의 화합물로부터 쉽게 얻을 수 있는 식 16A의 화합물로부터 제조될 수 있다. 또한, 본원 발명은 식 15의 화합물로부터 식 16의 화합물을 제조하는 방법을 제공한다.According to the present invention, gemcitabine can be prepared from a compound of formula 16A which is readily available from a compound of formula 16 . The present invention also provides a process for preparing the compound of formula 16 from the compound of formula 15 .

젬시타빈 합성의 전구체로 유용한, 식 16의 D-에리트로-3,5-이치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스 유도체의 다이아스테레오머(diastereomer) 혼합물은 바람직하게는, 가수분해 시약으로 산을 사용하여 식 15의 알킬 2,2-디플루오로-3-히드록시-3-(2,2-디알킬디옥솔란-4-일)-프로피오네이트의 에리트로 아이소머와 트레오 아이소머의 혼합물을 가수분해하고, 뒤이어 물을 제거하고(바람직하게는 공비 증류(azeotropic distillation)에 의함), 그 결과 생성되는 반응 혼합물을 X와 R₅가 본원 명세서에서 정의된 일반식 R₅NCX(17)의 화합물과 반응시킴으로써 제조된다. 바람직하게는, 화합물 17은 이소시아네이트 또는 이소티오시아네이트이다.Diastereomer of D-erythro-3,5-disubstituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose derivative of formula 16 , useful as a precursor for gemcitabine synthesis The mixture is preferably alkyl 2,2-difluoro-3-hydroxy-3- (2,2-dialkyldioxolan-4-yl) -propio of formula 15 using an acid as a hydrolysis reagent. Hydrolyzing the mixture of erythro isomers and threo isomers of the nate, followed by removal of water (preferably by azeotropic distillation), and the resulting reaction mixture is described herein by X and R ₅ . Prepared by reaction with a compound of the general formula R ₅ NCX ( 17 ) as defined. Preferably, compound 17 is isocyanate or isothiocyanate.

또한, 본원 발명은 식 16의 (D-에리트로 및 D-트레오)-3,5-이치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스 다이아스테레오머 혼합물로부터 95％ 이상의 순도를 갖는, 하기 식 16A의 D-에리트로-3,5-이치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스를 선택적으로 분리하는 방법을 제공한다.In addition, the present invention provides a mixture of (D-erythro and D-threo) -3,5-disubstituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose diastereomer mixture of formula 16 Provided is a method for selectively separating D-erythro-3,5-disubstituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose of formula 16A having a purity of at least 95% do.

대표적인 방법은 (D-에리트로 및 D-트레오)-3,5-이치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스의 다이아스테레오머 혼합물을 비-극성 용매와 혼합하는 단계(예를 들면, 다이아스테레오머 혼합물을 녹이기 위함); 상기 혼합물을 냉각시켜 결정화를 촉진하는 단계; 및 예를 들면, 여과에 의해 결정을 포집하는 단계, 및 선택적으로는 상기 결정을 수세하고 및/또는 건조시키는 단계를 포함한다.Representative methods include diastereomer mixtures of (D-erythro and D-threo) -3,5-disubstituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose with non-polar solvents. Mixing with (eg, to dissolve the diastereomer mixture); Cooling the mixture to promote crystallization; And, for example, collecting the crystals by filtration, and optionally washing and / or drying the crystals.

바람직한 실시 형태를 위한 상세한 설명Detailed description of the preferred embodiment

본원 발명은 젬시타빈 제조에 유용한 중간체 화합물, 그와 같은 중간체의 제조 방법, 및 상기 중간체로 젬시타빈을 제조하는 방법을 제공한다. 본원 발명의 대표적인 화합물은 하기 식 15의 3-치환된, 알킬 2,2-디플루오로-3-히드록시-3-(2,2-디알킬디옥솔란-4-일)-프로피오네이트 유도체를 포함하는데:The present invention provides intermediate compounds useful for the preparation of gemcitabine, methods of preparing such intermediates, and methods of preparing gemcitabine from such intermediates. Representative compounds of the present invention are substituted 3 of the formula 15, an alkyl 2,2-difluoro-3-hydroxy-3- (2,2-dialkyl-dioxolan-4-yl) propionate derivative Includes:

상기에서 R₁은 비치환된 또는 치환된 C₁-C₅ 포화된 또는 불포화된 알킬, 치환된 페닐, 또는 C₁-C₅ 포화된 또는 불포화된 아랄킬이고; R₂와 R₃은 독립적으로 C₁-C₃ 알킬이고; 및 R₄는 C₁-C₄ 알킬이다. 또한, 본원 발명의 대표적인 화합물은 하기 식 16과 16A의 3,5-이치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스 유도체를 포함하는데:Wherein R ₁ is unsubstituted or substituted C ₁ -C ₅ saturated or unsaturated alkyl, substituted phenyl, or C ₁ -C ₅ saturated or unsaturated aralkyl; R ₂ and R ₃ are independently C ₁ -C ₃ alkyl; And R ₄ is C ₁ -C ₄ alkyl. Representative compounds of the invention also include 3,5-disubstituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose derivatives of the following formulas 16 and 16A :

상기에서 R₁은 비치환된 또는 치환된 C₁-C₅ 포화된 또는 불포화된 알킬, 치환된 페닐, 또는 C₁-C₅ 포화된 또는 불포화된 아랄킬이고; X는 O 또는 S이고; 및 R₅는 비치환된 또는 치환된 페닐, 비치환된 또는 치환된 페닐술포닐, 또는 C₁-C₅ 알킬술포닐이다.Wherein R ₁ is unsubstituted or substituted C ₁ -C ₅ saturated or unsaturated alkyl, substituted phenyl, or C ₁ -C ₅ saturated or unsaturated aralkyl; X is O or S; And R ₅ is unsubstituted or substituted phenyl, unsubstituted or substituted phenylsulfonyl, or C ₁ -C ₅ alkylsulfonyl.

본원 발명에 따르면, R₁은 비치환된 또는 치환된 페닐(예를 들면, 카르보닐과 연결되었을 때 4-클로로벤조일을 형성하는 4-클로로페닐)이 될 수 있는 C₁-C₅ 포화된 알킬 및 C₁-C₅ 불포화된 알킬 치환체, 또는 C₁-C₅ 포화된 또는 불포화된 아랄킬(예를 들면, 카르보닐과 연결되었을 때 시나모일을 형성하는 트란스-2-페닐에테 닐)을 포함하고; R₂와 R₃은 같거나 또는 다르고, 각각 예를 들면 C₁-C₃ 알킬(예를 들면 메틸)을 포함할 수 있고; 및 R₄는 C₁-C₄ 알킬(예를 들면, 에틸)을 포함하고; R₅는 비치환된 또는 치환된 페닐(예를 들면, 페닐, 4-메틸페닐, 4-클로로페닐), 비치환된 또는 치환된 페닐술포닐, 또는 C₁-C₅ 알킬술포닐을 포함하고; 및 X는 O 또는 S를 포함한다.According to the present invention, R ₁ is C ₁ -C ₅ saturated alkyl which can be unsubstituted or substituted phenyl (eg 4-chlorophenyl which forms 4-chlorobenzoyl when linked with carbonyl) And C ₁ -C ₅ unsaturated alkyl substituents, or C ₁ -C ₅ saturated or unsaturated aralkyl (eg, trans-2-phenylethenyl to form cinnamoyl when linked with carbonyl) Including; R ₂ and R ₃ are the same or different and may each comprise, for example, C ₁ -C ₃ alkyl (eg methyl); And R ₄ comprises C ₁ -C ₄ alkyl (eg ethyl); R ₅ comprises unsubstituted or substituted phenyl (eg, phenyl, 4-methylphenyl, 4-chlorophenyl), unsubstituted or substituted phenylsulfonyl, or C ₁ -C ₅ alkylsulfonyl; And X includes O or S.

본원 발명에 따르면, 젬시타빈은 식 16의 화합물로부터 쉽게 얻을 수 있는 식 16A의 화합물로부터 제조될 수 있다. 또한, 본원 발명은 식 15의 화합물로부터 식 16의 화합물의 제조 방법을 제공한다.According to the present invention, gemcitabine can be prepared from a compound of formula 16A which is readily available from a compound of formula 16 . The present invention also provides a process for preparing the compound of formula 16 from the compound of formula 15 .

바람직한 실시 형태에서, 본원 발명은 하기 반응식 3에서 기술되는 바와 같이, 식 16A의 화합물을 젬시타빈으로 전환하는 방법을 제공한다. 본원 발명의 대표적인 방법은:In a preferred embodiment, the present invention provides a method for converting a compound of formula 16A to gemcitabine, as described in Scheme 3 below. Representative methods of the present invention are:

하기 식 16A의 화합물을 환원시켜To reduce the compound of formula 16A

하기 식 19의 락톨을 제조하는 단계;Preparing lactol of Formula 19 ;

상기 히드록시기를 예를 들면 메실레이트와 같은 술포네이트로 전환에 의해 활성화하는 단계;Activating said hydroxy group by conversion to a sulfonate such as, for example, mesylate;

상기 활성화된 히드록시기(예를 들면, 메실레이트)를 적절하게 보호된 시토신과 반응시켜 보호된 뉴클레오시드를 제조하는 단계;Reacting the activated hydroxy group (eg mesylate) with an appropriately protected cytosine to produce a protected nucleoside;

선택적으로 β-아노머를 분리하는 단계;Optionally separating the β-anomers;

보호된 뉴클레오시드를 탈보호하는 단계; 및 Deprotecting the protected nucleosides; And

선택적으로 β-아노머를 분리하는 단계를 포함하는데, 상기 R₁은 비치환된 또는 치환된 C₁-C₅ 포화된 또는 불포화된 알킬, 비치환된 또는 치환된 페닐(예를 들면, 4-클로로페닐), 또는 C₁-C₅ 포화된 또는 불포화된 아랄킬(예를 들면, 카르보닐과 함께 시나모일을 형성하는 트란스-2-페닐에테닐)이고; R₅는 비치환된 또는 치환된 페닐, 비치환된 또는 치환된 페닐술포닐, 또는 C₁-C₅ 알킬술포닐이고; 및 X는 0 또는 S이다.Optionally separating the β-anomer, wherein R ₁ is unsubstituted or substituted C ₁ -C ₅ saturated or unsaturated alkyl, unsubstituted or substituted phenyl (eg, 4- Chlorophenyl), or C ₁ -C ₅ saturated or unsaturated aralkyl (eg, trans-2-phenylethenyl to form cinnamoyl with carbonyl); R ₅ is unsubstituted or substituted phenyl, unsubstituted or substituted phenylsulfonyl, or C ₁ -C ₅ alkylsulfonyl; And X is 0 or S.

또 다른 실시 형태에서, 본원 발명은 젬시타빈 합성의 전구체로 유용한, 식 16의 (D-에리트로 및 D-트레오)-3,5-이치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D- 리보스 유도체의 신규 다이아스테레오머 혼합물의 제조 방법을 제공한다. 본원 발명에 따르면, 식 16의 화합물은 바람직하게는 산의 존재 하에서 3-치환된, 알킬 2,2-디플루오로-3-히드록시-3-(2,2-디알킬디옥솔란-4-일)-프로피오네이트의 에리트로 아이소머와 트레오 아이소머의 혼합물을 가수분해하여 3-치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스를 제조하는 단계, 및 상기 생성물을 X와 R₅가 본원 명세서에서 정의된 식 R₅NCX(17)의 화합물과 반응시키는 단계를 포함하는 제조 방법에 의해 제조된다. 선택적으로, 물은 가수분해 단계에서 생성된 반응 혼합물로부터 제거되고, 바람직하게는 공비 증류에 의해 제거된다.In another embodiment, the present invention provides (D-erythro and D-threo) -3,5-disubstituted-2-deoxy-2,2-difluoro- of formula 16 , useful as precursor of gemcitabine synthesis. Provided is a process for preparing a novel diastereomer mixture of 1-oxo-D-ribose derivatives. According to the invention, the compound of formula 16 is preferably alkyl 2,2-difluoro-3-hydroxy-3- (2,2-dialkyldioxolan-4-, 3-substituted in the presence of an acid Hydrolyzing a mixture of erythro isomers and threo isomers of i) -propionate to prepare 3-substituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose, And reacting the product with a compound of formula R ₅ NCX ( 17 ) in which X and R ₅ are defined herein. Optionally, water is removed from the reaction mixture produced in the hydrolysis step, preferably by azeotropic distillation.

바람직하게는, 화합물 17은 이소시아네이트 또는 이소티오시아네이트이다. Preferably, compound 17 is isocyanate or isothiocyanate.

본원 발명의 바람직한 제조 방법은 Preferred production method of the present invention

3-치환된, 알킬 2,2-디플루오로-3-히드록시-3-(2,2-디알킬디옥솔란-4-일)-프로피오네이트의 에리트로 아이소머와 트레오 아이소머의 혼합물을 수-혼화성(water-miscible) 용매, 물 및 산의 존재 하에서 가수분해하는 단계;A mixture of an erythro isomer and a treo isomer of 3-substituted, alkyl 2,2-difluoro-3-hydroxy-3- (2,2-dialkyldioxolan-4-yl) -propionate Hydrolyzing in the presence of a water-miscible solvent, water and acid;

가수분해 반응이 충분히 완료될 때까지 상기 혼합물을 가열하는 단계;Heating the mixture until the hydrolysis reaction is completed sufficiently;

선택적으로 용액의 부피를 증류에 의해 줄이는 단계;Optionally reducing the volume of the solution by distillation;

수-불혼화성(water-immiscible) 용매를 첨가하고, 예를 들면 공비 증류에 의해 적어도 물의 일정 부분을 제거(바람직하게는, 적어도 물의 충분한 부분을 제거)하는 단계;Adding a water-immiscible solvent and removing at least a portion of the water (preferably, removing at least a sufficient portion of the water), for example by azeotropic distillation;

용매 혼합물을 증류로 제거하여, 3-치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소- D-리보스를 고체로 얻는 단계; Removing the solvent mixture by distillation to obtain 3-substituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose as a solid;

선택적으로 상기 3-치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스를 유기 용매에서 활성탄(activated carbon)으로 처리하고 상기 활성탄을 제거하는 단계;Optionally treating the 3-substituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose with activated carbon in an organic solvent and removing the activated carbon;

선택적으로 염기의 존재 하에서, 상기 3-치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스를 이소시아네이트 또는 이소티오시아네이트와 반응시키고, 반응이 충분히 완료될 때까지 혼합하는 단계;및 Optionally reacting the 3-substituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose with an isocyanate or isothiocyanate, optionally in the presence of a base, and when the reaction is sufficiently complete Mixing step; and

그 결과 생성되는 3,5-이치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스 생성물을 침전에 의해 수득하는 단계를 포함한다.Obtaining the resulting 3,5-disubstituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose product by precipitation.

대표적인 수-혼화성 용매는 아세토니트릴, 테트라히드로푸란(THF), 2-메틸테트라히드로푸란, 아세톤, N,N-디메틸포름아미드(DMF), N,N-디메틸아세트아미드(DMA), 및 이들의 혼합물을 포함한다. 바람직한 수-혼화성 용매는 아세토니트릴이다.Representative water-miscible solvents include acetonitrile, tetrahydrofuran (THF), 2-methyltetrahydrofuran, acetone, N, N-dimethylformamide (DMF), N, N-dimethylacetamide (DMA), and these It contains a mixture of. Preferred water-miscible solvents are acetonitrile.

대표적인 산은 메탄술폰산, 황산, 트리플루오로아세트산 및 그 등가물, 및 이들의 배합을 포함한다. 바람직한 산은 트리플루오로아세트산이다.Representative acids include methanesulfonic acid, sulfuric acid, trifluoroacetic acid and equivalents thereof, and combinations thereof. Preferred acids are trifluoroacetic acid.

수-혼화성 용매, 물 및 산의 대표적인 혼합물은 바람직하게는 아세토니트릴, 물 및 트리플루오로아세트산을 포함한다. 대표적인 아세토니트릴:물:트리플루오로아세트산 비율은 54/1.25/0.3(v/v/v) 또는 160/3.75/0.9(v/v/v)(아세토니트릴:물:트리플루오로아세트산)를 포함한다.Representative mixtures of water-miscible solvents, water and acids preferably include acetonitrile, water and trifluoroacetic acid. Representative acetonitrile: water: trifluoroacetic acid ratios include 54 / 1.25 / 0.3 (v / v / v) or 160 / 3.75 / 0.9 (v / v / v) (acetonitrile: water: trifluoroacetic acid) do.

대표적인 수-불혼화성 용매는 톨루엔, o-자일렌, m-자일렌, p-자일렌, 에틸벤젠, 디에틸벤젠, 및 그 등가물, 및 이들의 혼합물을 포함한다. 바람직한 수-불 혼화성 용매는 톨루엔이다.Representative water-immiscible solvents include toluene, o-xylene, m-xylene, p-xylene, ethylbenzene, diethylbenzene, and equivalents thereof, and mixtures thereof. Preferred water-immiscible solvents are toluene.

본원 발명에 따르면, 반응에서 바람직하게 사용되는 이소시아네이트 또는 이소티오시아네이트는 예를 들면, 2-클로로에틸 이소티오시아네이트, 5-클로로-2-메틸페닐 이소티오시아네이트, 2-클로로-4-니트로페닐 이소티오시아네이트, 2-클로로페닐 이소티오시아네이트, 3-클로로페닐 이소티오시아네이트, 4-클로로페닐 이소티오시아네이트, 3-아세틸페닐 이소티오시아네이트, 4-아세틸페닐 이소티오시아네이트, 2-(클로로메틸)페닐 이소시아네이트, 2-클로로-5-메틸-페닐 이소시아네이트, 2-클로로-6-메틸페닐 이소시아네이트, 3-클로로-2-메틸페닐 이소시아네이트, 3-클로로-4-메틸페닐 이소시아네이트, 4-(클로로메틸)-페닐 이소시아네이트, 4-클로로-2-메틸페닐 이소시아네이트, 5-클로로-2-메틸페닐 이소시아네이트, 2-클로로-4-니트로페닐 이소시아네이트, 2-클로로-5-니트로페닐 이소시아네이트, 4-클로로-2-니트로페닐 이소시아네이트, 4-클로로-3-니트로페닐 이소시아네이트, 2-클로로-2-니트로페닐 이소시아네이트, 2-클로로페닐 이소시아네이트, 3-클로로페닐 이소시아네이트, 4-클로로페닐 이소시아네이트, 3-아세틸페닐 이소시아네이트, 페닐 이소시아네이트, N-벤젠술포닐 이소시아네이트, p-톨루엔술포닐 이소시아네이트, 및 o-톨루엔술포닐 이소시아네이트로부터 선택된다. According to the invention, the isocyanates or isothiocyanates which are preferably used in the reaction are, for example, 2-chloroethyl isothiocyanate, 5-chloro-2-methylphenyl isothiocyanate, 2-chloro-4-nitro Phenyl isothiocyanate, 2-chlorophenyl isothiocyanate, 3-chlorophenyl isothiocyanate, 4-chlorophenyl isothiocyanate, 3-acetylphenyl isothiocyanate, 4-acetylphenyl isothiocyanate , 2- (chloromethyl) phenyl isocyanate, 2-chloro-5-methyl-phenyl isocyanate, 2-chloro-6-methylphenyl isocyanate, 3-chloro-2-methylphenyl isocyanate, 3-chloro-4-methylphenyl isocyanate, 4- (Chloromethyl) -phenyl isocyanate, 4-chloro-2-methylphenyl isocyanate, 5-chloro-2-methylphenyl isocyanate, 2-chloro-4-nitrophenyl isocyanate, 2-cle Roro-5-nitrophenyl isocyanate, 4-chloro-2-nitrophenyl isocyanate, 4-chloro-3-nitrophenyl isocyanate, 2-chloro-2-nitrophenyl isocyanate, 2-chlorophenyl isocyanate, 3-chlorophenyl isocyanate, 4-chlorophenyl isocyanate, 3-acetylphenyl isocyanate, phenyl isocyanate, N-benzenesulfonyl isocyanate, p-toluenesulfonyl isocyanate, and o-toluenesulfonyl isocyanate.

바람직하게는, 이소시아네이트 또는 이소티오시아네이트는 p-톨루엔술포닐 이소시아네이트, 페닐술포닐 이소시아네이트, 또는 4-클로로페닐 이소티오시아네이트를 포함한다. Preferably, the isocyanate or isothiocyanate includes p-toluenesulfonyl isocyanate, phenylsulfonyl isocyanate, or 4-chlorophenyl isothiocyanate.

반응에서 사용될 수 있는 염기는 바람직하게는 트리에틸 아민, 하나 이상의 루티딘, 모르폴린, 디이소프로필에틸아민, 피리딘, 2-(디메틸아미노)-피리딘, 4-(디메틸아미노)-피리딘, 및 그 등가물, 및 이들의 배합을 포함한다. 바람직한 실시 형태에서, 염기는 4-(디메틸아미노)-피리딘이다. Bases that can be used in the reaction are preferably triethyl amine, one or more lutidine, morpholine, diisopropylethylamine, pyridine, 2- (dimethylamino) -pyridine, 4- (dimethylamino) -pyridine, and their Equivalents, and combinations thereof. In a preferred embodiment, the base is 4- (dimethylamino) -pyridine.

또한, 본원 발명은 식 16의 (D-에리트로 및 D-트레오)-3,5-이치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스의 다이아스테레오머 혼합물로부터 95％ 이상의 순도로 하기 식 16A의 The present invention also provides a diastereomer mixture of (D-erythro and D-threo) -3,5-disubstituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose of formula 16 95% or more from the following formula 16A

D-에리트로-3,5-이치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-펜토푸라노스-1-옥소-D-리보스를 선택적으로 분리하는 방법을 제공하는데, 상기 방법은:Provided is a method for selectively separating D-erythro-3,5-disubstituted-2-deoxy-2,2-difluoro-pentofuranos-1-oxo-D-ribose, wherein the method comprises:

상기 다이아스테레오머 혼합물을 비-극성 용매와 혼합하여 상기 다이아스테레오머 혼합물의 적어도 일 부분을 녹이는 단계;Mixing the diastereomer mixture with a non-polar solvent to dissolve at least a portion of the diastereomer mixture;

상기 혼합물을 충분히 냉각시켜 결정화하고, 예를 들면 여과에 의해 결정의 적어도 일 부분을 분리하는 단계, 및 선택적으로 상기 결정을 수세하고 및/또는 건조시키는 단계를 포함한다.Cooling the mixture sufficiently to crystallize, for example, separating at least a portion of the crystals by filtration, and optionally washing and / or drying the crystals.

침전을 위해, 및/또는 수세를 위해 사용될 수 있는 대표적인 비-극성 용매는 톨루엔, o-자일렌, m-자일렌, p-자일렌, 에틸벤젠, 디에틸벤젠, n-펜탄, n-헥산, n-헵탄, n-옥탄, 이소옥탄, 시클로헥산, 페트롤 에테르(petrol ether), 및 그 등가 물, 및 이들의 혼합물을 포함한다. 침전을 위해 사용되는 바람직한 용매는 톨루엔이고, 수세를 위해 사용되는 바람직한 용매는 톨루엔 및 헥산 또는 이들의 혼합물을 포함한다. 본원 발명의 대표적인 제조 방법이 반응식 3에서 도시된다.Representative non-polar solvents that can be used for precipitation and / or for washing with water are toluene, o-xylene, m-xylene, p-xylene, ethylbenzene, diethylbenzene, n-pentane, n-hexane , n-heptane, n-octane, isooctane, cyclohexane, petrol ether, and equivalent water thereof, and mixtures thereof. Preferred solvents used for precipitation are toluene and preferred solvents used for washing with water include toluene and hexane or mixtures thereof. An exemplary preparation method of the present invention is shown in Scheme 3.

<반응식 3><Scheme 3>

반응식 3에 따르면, 젬시타빈은 하기의 단계를 수행함으로써, 식 16A의 D-에리트로-3,5-이치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스로부터 수득될 수 있는데:According to Scheme 3, gemcitabine was prepared from D-erythro-3,5-disubstituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose of Formula 16A by performing the following steps: Can be obtained:

화합물 16A를 적절한 환원제로 유기 용매에서 환원시켜 식 19의 락톨 중간체를 얻는 단계;Reducing Compound 16A in an organic solvent with an appropriate reducing agent to obtain the lactol intermediate of Formula 19;

식 19의 락톨 중간체를 염기의 존재 하에서 메탄술포닐 클로라이드(MsCl)와 반응시켜 식 20의 술포네이트 중간체를 얻는 단계;Reacting the lactol intermediate of Formula 19 with methanesulfonyl chloride (MsCl) in the presence of a base to obtain a sulfonate intermediate of Formula 20;

바람직하게는 실온에서 촉매를 사용하고 유기 용매에서, 화합물 20을 비스(트리메틸실릴)-N-아세틸시토신 8과 커플링시켜 3,5-이보호된(diprotected)-N-1-트리메틸실릴아세틸-2'-데옥시-2',2'-디플루오로시티딘 21의 α-아노머와 β-아노머의 혼합물을 얻는 단계;Preferably, compound 20 is coupled to bis (trimethylsilyl) -N-acetylcytosine 8 using a catalyst at room temperature and in an organic solvent to give 3,5-diprotected-N-1-trimethylsilylacetyl-2 Obtaining a mixture of α-anomer and β-anomer of '-deoxy-2', 2'-difluorocytidine 21;

선택적으로 식 21의 β-아노머를 침전시켜 두 개의 아이소머가 분리되도록 하여 β-아이소머가 분리되도록 하는(예를 들면, 침전에 의함) 단계; 및Optionally precipitating the β-anomer of formula 21 so that the two isomers are separated such that the β-isomer is separated (eg, by precipitation); And

보호기(예를 들면, 가수분해에 의함)를 제거하여, 젬시타빈을 얻는 단계; 및 선택적으로 젬시타빈의 β-아노머를 분리하는 단계에 의해 얻을 수 있다.Removing protecting groups (eg by hydrolysis) to obtain gemcitabine; And optionally isolating the β-anomer of gemcitabine.

본원 발명에 따르면, 예를 들면 반응식 3에서 도시된 바와 같이, 일반식 16A를 갖는 출발 물질 D-에리트로-3,5-이치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스들(예를 들면, 3-시나모일옥시-5-(N-p-톨루엔술포닐)카바모일옥시-2-데옥소-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스, 3-시나모일옥시-5-(N-벤젠술포닐)-카바모일옥시-2-데옥소-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스, 3-시나모일옥시-5-(N-4-클로로벤젠술포닐)-카바모일옥시-2-데옥소-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스, 3-시나모일옥시-5-(N-4-클로로페닐)-카바모일옥시-2-데옥소-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스, 및 3-(4-클로로벤조일옥시)-5-(N-4-클로로페닐)-카바모일옥시-2-데옥소-2,2-디플루오로- 1-옥소-D-리보스)중 어느 하나를 사용하는 제조 방법은 젬시타빈을 수득하는 통상적인 제조 방법에 비해 더 유익한데, 왜냐하면 본원 발명은 더 적은 합성 단게를 필요로 하는 제조 방법을 제공하고, 또한 에리트로 아이소머 16A는 고순도와 높은 수득률로 얻어지기 때문이다. According to the invention, for example, starting material D-erythro-3,5-disubstituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo having the general formula 16A, as shown in Scheme 3 -D-riboses (eg 3-cinnamoyloxy-5- (Np-toluenesulfonyl) carbamoyloxy-2-deoxo-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose, 3-cinamoyloxy-5- (N-benzenesulfonyl) -carbamoyloxy-2-deoxo-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose, 3-cinamoyloxy-5- ( N-4-chlorobenzenesulfonyl) -carbamoyloxy-2-deoxo-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose, 3-cinamoyloxy-5- (N-4-chlorophenyl ) -Carbamoyloxy-2-deoxo-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose, and 3- (4-chlorobenzoyloxy) -5- (N-4-chlorophenyl) -carba Production method using any of the following methods: moyloxy-2-deoxo-2,2-difluoro-l-oxo-D-ribose) is more advantageous than the conventional production method for obtaining gemcitabine, because invent Provide a manufacturing method that requires fewer synthetic Tange, and further iso-erythro Murray 16A is due to be obtained in high purity and high yield.

반응식 3에서 도시된 바와 같이, 락톤 16A의 환원은 예를 들면 리튬 알루미늄 하이드라이드, 디이소부틸 알루미늄 하이드라이드, 및 소듐 비스-(2-메톡시에톡시)-알루미늄 하이드라이드, 또는 그 등가물, 또는 이들의 배합과 같은 소정의 적절한 환원제를 사용하여 수행될 수 있다. 반응식 3에서 설명된 바와 같이, 환원 반응은 바람직하게는 특히 상업적인 규모의 생산을 위해, 저 분자량 및 상대적으로 높은 환원 용량(reduction capacity)(분자 1 개당 4 개의 이용가능한 수소 원자) 때문에, 리튬 알루미늄 하이드라이드를 사용하여 수행된다. 또한, 환원 반응은 디이소부틸 알루미늄 하이드라이드가 분자량 및 환원을 위해 이용가능한 1 개의 수소 원자만 포함하고 있음에도 불구하고, 디이소부틸 알루미늄 하이드라이드를 사용하여 수행될 수 있다(예를 들면, 미국특허 제4,808,614호와 Chou et al., Synthesis, 565-570(1992)에서 개시된 바에 따름). As shown in Scheme 3, the reduction of lactone 16A is, for example, lithium aluminum hydride, diisobutyl aluminum hydride, and sodium bis- (2-methoxyethoxy) -aluminum hydride, or an equivalent thereof, or It may be carried out using any suitable reducing agent such as a combination thereof. As described in Scheme 3, the reduction reaction is preferably lithium aluminum hydride, due to the low molecular weight and relatively high reduction capacity (four available hydrogen atoms per molecule), especially for commercial scale production. This is done using a ride. In addition, the reduction reaction can be carried out using diisobutyl aluminum hydride, even though diisobutyl aluminum hydride contains only one hydrogen atom available for molecular weight and reduction (e.g., US patent 4,808,614 and in Chou et al., Synthesis , 565-570 (1992).

반응식 3에서 도시된 바와 같이, 커플링 반응은 예를 들면 아세토니트릴, 디클로로메탄, 클로로포름, 1,2-디클로로에탄, 톨루엔, 하나 이상의 자일렌, 및 그 등가물, 및 그 혼합물을 포함할 수 있는 소정의 적절한 용매에서 수행될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 커플링 반응은 1,2-디클로로에탄에서 수행된다. 선택적으 로, 커플링 반응은 예를 들면 트리메틸실릴 트리플레이트(Me₃SiOTf)와 같은 적절한 촉매제를 사용하여 용이하게 할 수 있다. As shown in Scheme 3, the coupling reaction may include, for example, acetonitrile, dichloromethane, chloroform, 1,2-dichloroethane, toluene, one or more xylenes, and equivalents thereof, and mixtures thereof. Can be carried out in a suitable solvent. In one embodiment, the coupling reaction is carried out in 1,2-dichloroethane. Optionally, the coupling reaction can be facilitated using a suitable catalyst such as, for example, trimethylsilyl triflate (Me ₃ SiOTf).

반응식 3에서 도시된 바와 같이, 보호기의 제거는 예를 들면, 메탄올에서 암모니아와 같은 염기성 가수분해를 포함할 수 있는 소정의 적절한 조건을 사용함으로써 수행될 수 있다. As shown in Scheme 3, removal of the protecting group can be carried out by using any suitable condition, which may include, for example, basic hydrolysis such as ammonia in methanol.

<실시예 1> < Example 1>

이 실시예는 3-시나모일옥시-5-(N-p-톨루엔술포닐)-카바모일옥시-2-데옥소-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스의 제조를 설명한다.This example illustrates the preparation of 3-cinamoyloxy-5- (N-p-toluenesulfonyl) -carbamoyloxy-2-deoxo-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose.

에틸 (D-에리트로 및 D-트레오)-3-(시나모일옥시)-2,2-디플루오로-3-(2,2-디메틸디옥솔란-4-일)-프로피오네이트[96％의 순도를 가짐(HPLC에 의함), D-에리트로-아이소머 대 D-트레오-아이소머의 비율이 4.3 대 1, 15.6 g, 0.039 mol], 아세토니트릴(160 ml), CF₃COOH(0.9 ml) 및 물(3.75 ml)의 혼합물을 5.5 시간 동안 환류 상태에서 가열하였다. 그런 다음, 물/CF₃COOH/아세토니트릴의 혼합물(36 ml)을 증류시켜 제거하였고, 톨루엔(36 ml)을 첨가하였다. 남아있는 부분(약 40 ml)을 증류시켜 제거하였고 톨루엔(40 ml)을 첨가하였다. 반응 혼합물의 내부 온도가 약 99℃가 되도록 하면서, 이러한 방법을 4회 반복하였다. 에틸 아세테이트(50 ml)와 활성탄(Darco G-60, 1.5g)을 용액에 첨가하였고, 혼합물을 0.5 시간 동안 환류 상태에서 가열하였다. 활성탄을 여과로 포집하여 약간 노란색의 여과액을 얻었다. 감압 하에서 에틸 아세테이트를 제거하였고, 이렇게 얻은 잔류 용액을 질소 하에서 실온까지 냉각시켰다. 그 다음, p-톨루엔술포닐 이소시아네이트(96％ 순도, 8.5 g, 0.0429 mol, 1.1 당량)를 용액에 첨가하였고, 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였고, 그 이후에 침전물을 얻었고, 혼합물을 5℃에서 밤새 방치하였다. 여과에 의해 무색의 침전물을 포집하였고, 톨루엔과 n-헥산으로 수세하였고, 60℃에서 밤새 건조시켜, 3-시나모일옥시-5-(N-p-톨루엔술포닐)-카바모일옥시-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스 8.5 g을 44.0％의 수득률로 얻었다. mp. 129-131℃. ¹H NMR (CDCl₃): δ = 2.33 (s, 3H, C₆H₄ CH ₃ ), 4.46 (2 AB-q, 2H, CH₂), 4.72 (m, 1H, 4-CH), 5.50 (m, 1H, 3-CH), 6.45 (d, 1H, =CH), 7.34 (d, 2H_arom, C₆H₄CH₃), 7.47 (m, 5H_arom, C₆H₅), 7.79 (d, 1H, =CH), 7.91 (d, 2H_arom, C₆H₄CH₃), 8.31 (s, 1H, SO₂NHCO). ¹³C NMR(CDCl₃) δ = 21.7 (C₆H₄ CH₃), 63.1 (CH₂), 68.2 (C-3, J _C-F = 30.0, 30.0 Hz), 77.3 (C-4), 111.2 (C-2, J _C-F = 256, 256 Hz), 114.6 (=CH), 128.3, 128.5, 129.0, 129.8, 131.3, 133.5, 145.5(C_arom), 148.7(CH), 149.7 (OCONHSO₂), 162.1 (C-1, J _C-F = 30, 30 Hz), 164.8 (OCOCH=CH), ¹⁹F NMR[δ = -118.6 (2 AB-q)], 이것은 한 개의 불소만 포함하는 생성물이 주로 존재하고 있음을 나타낸다. AOCI(음)/MS: m/z = 494.24 [M-H⁺].Ethyl (D-erythro and D-threo) -3- (cinamoyloxy) -2,2-difluoro-3- (2,2-dimethyldioxolan-4-yl) -propionate [96% Purity (by HPLC), ratio of D-erythro-isomer to D-threo-isomer is 4.3 to 1, 15.6 g, 0.039 mol], acetonitrile (160 ml), CF ₃ COOH (0.9 ml) And a mixture of water (3.75 ml) was heated at reflux for 5.5 hours. The mixture of water / CF ₃ COOH / acetonitrile (36 ml) was then distilled off and toluene (36 ml) was added. The remaining portion (about 40 ml) was distilled off and toluene (40 ml) was added. This method was repeated four times, allowing the internal temperature of the reaction mixture to be about 99 ° C. Ethyl acetate (50 ml) and activated carbon (Darco G-60, 1.5 g) were added to the solution and the mixture was heated at reflux for 0.5 h. Activated carbon was collected by filtration to give a slightly yellow filtrate. Ethyl acetate was removed under reduced pressure and the resulting solution was cooled to room temperature under nitrogen. Then p-toluenesulfonyl isocyanate (96% purity, 8.5 g, 0.0429 mol, 1.1 equiv) was added to the solution, the reaction mixture was stirred at rt for 3 h, after which a precipitate was obtained and the mixture was 5 It was left overnight at ℃. The colorless precipitate was collected by filtration, washed with toluene and n-hexane, dried at 60 ° C. overnight, 3-cinnamoyloxy-5- (Np-toluenesulfonyl) -carbamoyloxy-2-deoxy 8.5 g of -2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose were obtained at a yield of 44.0%. mp. 129-131 ° C. ¹ H NMR (CDCl ₃ ): δ = 2.33 (s, 3H, C ₆ H ₄ CH ₃ ), 4.46 (2 AB-q, 2H, CH ₂ ), 4.72 (m, 1H, 4-CH), 5.50 ( m, 1H, 3-CH), 6.45 (d, 1H, = CH), 7.34 (d, 2H _arom , C ₆ H ₄ CH ₃ ), 7.47 (m, 5H _arom , C ₆ H ₅ ), 7.79 (d , 1H, = CH), 7.91 (d, 2H _arom , C ₆ H ₄ CH ₃ ), 8.31 (s, 1H, SO ₂ NHCO). ¹³ C NMR (CDCl ₃ ) δ = 21.7 (C ₆ H ₄ C H ₃ ), 63.1 ( C H ₂ ), 68.2 (C-3, J _CF = 30.0, 30.0 Hz), 77.3 (C-4), 111.2 (C-2, J _CF = 256, 256 Hz), 114.6 (= C H), 128.3, 128.5, 129.0, 129.8, 131.3, 133.5, 145.5 (C _arom ), 148.7 ( C H), 149.7 (O C ONHSO ₂ ), 162.1 (C-1, J _CF = 30, 30 Hz), 164.8 (O C OCH = CH), ¹⁹ F NMR [δ = -118.6 (2 AB-q)], which contains only one fluorine Indicates that the product is mainly present. AOCI (negative) / MS: m / z = 494.24 [MH ⁺ ].

<실시예 2> < Example 2>

이 실시예는 3-시나모일옥시-5-(N-벤젠술포닐)-카바모일옥시-2-데옥소-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스의 제조를 설명한다.This example illustrates the preparation of 3-cinamoyloxy-5- (N-benzenesulfonyl) -carbamoyloxy-2-deoxo-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose.

에틸 (D-에리트로 및 D-트레오)-3-(시나모일옥시)-2,2-디플루오로-3-(2,2-디메틸디옥솔란-4-일)-프로피오네이트[96％의 순도를 가짐(HPLC에 의함), D-에리트로-아이소머 대 D-트레오-아이소머의 비율이 4.3 대 1, 5.2 g, 0.013 mol], 아세토니트릴(54 ml), CF₃COOH(0.3 ml) 및 물(1.25 ml)의 혼합물을 5.5 시간 동안 환류 상태에서 가열하였다. 그런 다음, 물/CF₃COOH/아세토니트릴의 혼합물(13 ml)을 증류시켜 제거하였고, 톨루엔(13 ml)을 첨가하였다. 남아있는 부분(약 14 ml)을 증류시켜 제거하였고 톨루엔(14 ml)을 첨가하였다. 반응 혼합물의 내부 온도가 약 99℃가 되도록 하면서, 이러한 방법을 4회 반복하였다. 에틸 아세테이트(20 ml)와 활성탄(Darco G-60, 0.3 g)을 용액에 첨가하였고, 혼합물을 0.5 시간 동안 환류 상태에서 가열하였다. 활성탄을 여과로 포집하여 약간 노란색의 여과액을 얻었다. 감압 하에서 에틸 아세테이트를 제거하였고, 이렇게 얻은 잔류 용액을 질소 하에서 실온까지 냉각시켰다. 그 다음, 벤젠술포닐 이소시아네이트(95％ 순도, 2.6 g, 0.0135 mol, 1.04 당량)를 용액에 첨가하였고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 여과에 의해 무색의 침전물을 포집하였고, 톨루엔과 n-헥산으로 수세하였고, 60℃에서 밤새 건조시켜, 순수한 3-시나모일옥시-5-(N-벤젠술포닐)-카바모일옥시-2-데옥소-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스 2.2 g을 35.2％의 수득률로 얻었다. [α]_D ²⁵ +51.1°(아세토니트릴에서 _C 1); mp. 145-146.5℃. ¹H NMR (CDCl₃): δ = 4.51 (2 AB-q, 2H, CH₂), 4.76 (q, 1H, 4-CH), 5.55 (m, 1H, 3-CH), 6.49 (d, 1H, =CH), 7.47 (m, 3H_arom), 7.60 (m, 4H_arom), 7.71 (t, 1H_arom), 7.83 (d, 1H, =CH), 8.08 (d, 2H_arom), 8.30 (s, 1H, SO₂NHCO). ¹³C NMR(CDCl₃): δ = 63.4 (CH₂), 68.3 (C-3, J _C-F = 30.0, 30.0 Hz), 77.5 (C-4), 111.4 (C-2, J _C-F = 256, 256 Hz), 114.8 (=CH), 128.4, 128.7, 129.2, 129.4, 131.5, 133.6, 134.4, 138.1(C_arom), 148.9 (=CH), 149.7 (OCONHSO₂), 162.1 (C-1, J _C-F = 30, 30 Hz), 165.0 (OCOCH=CH), ESI(음)/MS: m/z=480.1 [M-H]⁺. Ethyl (D-erythro and D-threo) -3- (cinamoyloxy) -2,2-difluoro-3- (2,2-dimethyldioxolan-4-yl) -propionate [96% Purity (by HPLC), ratio of D-erythro-isomer to D-threo-isomer is 4.3 to 1, 5.2 g, 0.013 mol], acetonitrile (54 ml), CF ₃ COOH (0.3 ml) And a mixture of water (1.25 ml) was heated at reflux for 5.5 hours. The mixture of water / CF ₃ COOH / acetonitrile (13 ml) was then distilled off and toluene (13 ml) was added. The remaining portion (about 14 ml) was distilled off and toluene (14 ml) was added. This method was repeated four times, allowing the internal temperature of the reaction mixture to be about 99 ° C. Ethyl acetate (20 ml) and activated carbon (Darco G-60, 0.3 g) were added to the solution and the mixture was heated at reflux for 0.5 h. Activated carbon was collected by filtration to give a slightly yellow filtrate. Ethyl acetate was removed under reduced pressure and the resulting solution was cooled to room temperature under nitrogen. Benzenesulfonyl isocyanate (95% purity, 2.6 g, 0.0135 mol, 1.04 equiv) was then added to the solution and the reaction mixture was stirred at rt overnight. The colorless precipitate was collected by filtration, washed with toluene and n-hexane, dried at 60 ° C. overnight, and pure 3-cinamoyloxy-5- (N-benzenesulfonyl) -carbamoyloxy-2-de 2.2 g of oxo-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose were obtained at a yield of 35.2%. [α] _D ²⁵ + 51.1 ° ( _C 1 in acetonitrile); mp. 145-146.5 ° C. ¹ H NMR (CDCl ₃ ): δ = 4.51 (2 AB-q, 2H, CH ₂ ), 4.76 (q, 1H, 4-CH), 5.55 (m, 1H, 3-CH), 6.49 (d, 1H , = CH), 7.47 (m, 3H _arom ), 7.60 (m, 4H _arom ), 7.71 (t, 1H _arom ), 7.83 (d, 1H, = CH), 8.08 (d, 2H _arom ), 8.30 (s , 1H, SO ₂ NHCO). ¹³ C NMR (CDCl ₃ ): δ = 63.4 ( C H ₂ ), 68.3 (C-3, J _CF = 30.0, 30.0 Hz), 77.5 (C-4), 111.4 (C-2, J _CF = 256, 256 Hz), 114.8 (= C H), 128.4, 128.7, 129.2, 129.4, 131.5, 133.6, 134.4, 138.1 (C _arom ), 148.9 (= C H), 149.7 (O C ONHSO ₂ ), 162.1 (C- 1, J _CF = 30, 30 Hz), 165.0 (O C OCH = CH), ESI (negative) / MS: m / z = 480.1 [MH] ⁺ .

<실시예 3> < Example 3>

이 실시예는 3-시나모일옥시-5-(N-4-클로로벤젠술포닐)-카바모일옥시-2-데옥소-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스의 제조를 설명한다.This example describes the preparation of 3-cinamoyloxy-5- (N-4-chlorobenzenesulfonyl) -carbamoyloxy-2-deoxo-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose. Explain.

에틸 (D-에리트로 및 D-트레오)-3-(시나모일옥시)-2,2-디플루오로-3-(2,2-디메틸디옥솔란-4-일)-프로피오네이트[96％의 순도를 가짐(HPLC에 의함), D-에리트로-아이소머 대 D-트레오-아이소머의 비율이 4.3 대 1, 5.2 g, 0.013 mol], 아세토니트릴(54 ml), CF₃COOH(0.3 ml) 및 물(1.25 ml)의 혼합물을 5.5 시간 동안 환류 상태에서 가열하였다. 그런 다음, 물/CF₃COOH/아세토니트릴의 혼합물(13 ml)을 증류시켜 제거하였고, 톨루엔(13 ml)을 첨가하였다. 남아있는 부분(약 14 ml)을 증류시켜 제거하였고 톨루엔(14 ml)을 첨가하였다. 반응 혼합물의 내부 온도를 약 99℃ 가 되도록 하면서, 이러한 방법을 4회 반복하였다. 얻은 용액에 에틸 아세테이트(20 ml)와 활성탄(Darco G-60, 0.3 g)을 첨가하였고, 혼합물을 0.5 시간 동안 환류 상태에서 가열하였다. 활성탄을 여과로 포집하여 약간 노란색의 여과액을 얻었다. 감압 하에서 에틸 아세테이트를 제거하였고, 이렇게 얻은 잔류 용액을 질소 하에서 실온까지 냉각시켰다. 그 다음, 4-클로로벤젠술포닐 이소시아네이트(97％ 순도, 3.2 g, 0.0143 mol, 1.1 당량)를 용액에 첨가하였고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 78 시간 동안 -20℃에서 유지하였다. 여과에 의해 무색의 침전물을 포집하였고, 차가운 톨루엔과 n-헥산으로 수세하였고, 60℃에서 밤새 건조시켜, 순수한 3-시나모일옥시-5-(N-4-클로로벤젠술포닐)-카바모일옥시-2-데옥소-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스 3.1 g을 43.6％ 수득률로 얻었다. 정제되지 않은 생성물을 톨루엔에 녹였고, 용액을 5℃에서 밤새 방치하였다. 여과에 의해 무색의 결정을 포집하여 순수한 3-시나모일옥시-5-(N-4-클로로벤젠술포닐)-카바모일옥시-2-데옥소-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스를 얻었다; 전체 수득률: 2.0 g(29.9％); [α]_D ²⁵ +29.3°(아세토니트릴에서 _C 1); mp. 145-147℃. ¹H NMR (CDCl₃): δ = 4.49 (2 AB-q, 2H, CH₂), 4.76 (q, 1H, 4-CH), 5.57 (m, 1H, 3-CH), 6.43 (d, 1H, =CH), 7.41 (m, 3H_arom), 7.50 (m, 4H_arom), 7.76 (d, 1H, =CH), 7.95 (d, 2H_arom), 8.89 (s, 1H, SO₂NHCO). ¹³C NMR(CDCl₃): δ = 63.3 (CH₂), 68.2 (C-3, J _C-F = 30.0, 30.0 Hz), 77.4 (C-4, J_C _-F=7Hz), 111.3 (C-2, J _C-F = 256, 256 Hz), 114.6 (=CH), 128.6, 129.1, 129.5, 129.8, 131.4, 133.4, 136.3, 141.0(C_arom), 148.7 (=CH), 149.9 (OCONHSO₂), 162.4 (C-1, J _C-F = 30, 30 Hz), 165.0 (OCOCH=CH). ¹⁹F NMR 스펙트럼은 한 개의 불소를 포함하는 생성물이 주로 존재함을 나타낸다. APCI(양)/MS: m/z = 516.14[M+H]⁺.Ethyl (D-erythro and D-threo) -3- (cinamoyloxy) -2,2-difluoro-3- (2,2-dimethyldioxolan-4-yl) -propionate [96% Purity (by HPLC), ratio of D-erythro-isomer to D-threo-isomer is 4.3 to 1, 5.2 g, 0.013 mol], acetonitrile (54 ml), CF ₃ COOH (0.3 ml) And a mixture of water (1.25 ml) was heated at reflux for 5.5 hours. The mixture of water / CF ₃ COOH / acetonitrile (13 ml) was then distilled off and toluene (13 ml) was added. The remaining portion (about 14 ml) was distilled off and toluene (14 ml) was added. This method was repeated four times, bringing the internal temperature of the reaction mixture to about 99 ° C. To the resulting solution was added ethyl acetate (20 ml) and activated carbon (Darco G-60, 0.3 g) and the mixture was heated at reflux for 0.5 h. Activated carbon was collected by filtration to give a slightly yellow filtrate. Ethyl acetate was removed under reduced pressure and the resulting solution was cooled to room temperature under nitrogen. 4-chlorobenzenesulfonyl isocyanate (97% purity, 3.2 g, 0.0143 mol, 1.1 equiv) was then added to the solution and the reaction mixture was stirred at rt overnight. The reaction mixture was kept at -20 ° C for 78 hours. The colorless precipitate was collected by filtration, washed with cold toluene and n-hexane, dried at 60 ° C. overnight, and pure 3-cinamoyloxy-5- (N-4-chlorobenzenesulfonyl) -carbamoyloxy 3.1 g of 2-deoxo-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose were obtained in 43.6% yield. The crude product was taken up in toluene and the solution was left at 5 ° C. overnight. Colorless crystals were collected by filtration to obtain pure 3-cinamoyloxy-5- (N-4-chlorobenzenesulfonyl) -carbamoyloxy-2-deoxo-2,2-difluoro-1-oxo- D-ribose was obtained; Total yield: 2.0 g (29.9%); [α] _D ²⁵ + 29.3 ° ( _C 1 in acetonitrile); mp. 145-147 ° C. ¹ H NMR (CDCl ₃ ): δ = 4.49 (2 AB-q, 2H, CH ₂ ), 4.76 (q, 1H, 4-CH), 5.57 (m, 1H, 3-CH), 6.43 (d, 1H , = CH), 7.41 (m, 3H _arom ), 7.50 (m, 4H _arom ), 7.76 (d, 1H, = CH), 7.95 (d, 2H _arom ), 8.89 (s, 1H, SO ₂ NHCO). ¹³ C NMR (CDCl ₃ ): δ = 63.3 ( C H ₂ ), 68.2 (C-3, J _CF = 30.0, 30.0 Hz), 77.4 (C-4, J _C _-F = 7Hz), 111.3 (C- 2, J _CF = 256, 256 Hz), 114.6 (= C H), 128.6, 129.1, 129.5, 129.8, 131.4, 133.4, 136.3, 141.0 (C _arom ), 148.7 (= C H), 149.9 (O C ONHSO ₂ ), 162.4 (C-1, J _CF = 30, 30 Hz), 165.0 (O C OCH = CH). ¹⁹ F NMR spectra indicate that a product mainly containing one fluorine is present. APCI (vol) / MS: m / z = 516.14 [M + H] ⁺ .

<실시예 4> < Example 4>

이 실시예는 3-시나모일옥시-5-(N-4-클로로페닐)-카바모일옥시-2-데옥소-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스의 제조를 설명한다.This example illustrates the preparation of 3-cinnamoyloxy-5- (N-4-chlorophenyl) -carbamoyloxy-2-deoxo-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose .

에틸 (D-에리트로 및 D-트레오)-3-(시나모일옥시)-2,2-디플루오로-3-(2,2-디메틸디옥솔란-4-일)-프로피오네이트[96％의 순도를 가짐(HPLC에 의함), D-에리트로-아이소머 대 D-트레오-아이소머의 비율이 4.3 대 1, 5.2 g, 0.013 mol], 아세토니트릴(54 ml), CF₃COOH(0.3 ml) 및 물(1.25 ml)의 혼합물을 5.5 시간 동안 환류 상태에서 가열하였다. 그런 다음, 물/CF₃COOH/아세토니트릴의 혼합물(13 ml)을 증류시켜 제거하였고, 톨루엔(13 ml)을 첨가하였다. 남아있는 부분(약 14 ml)을 증류시켜 제거하였고 톨루엔(14 ml)을 첨가하였다. 반응 혼합물의 내부 온도가 약 99℃가 되도록 하면서, 이러한 방법을 4회 반복하였다. 얻은 용액에 에틸 아세테이트(20 ml)와 활성탄(Darco G-60, 0.3 g)을 첨가하였고, 혼합물을 0.5 시간 동안 환류 상태에서 가열하였다. 활성탄을 여과로 포집하여 약간 노란색의 여과액을 얻었다. 감압 하에서 에틸 아세테이트를 제거하였고, 이렇게 얻은 잔류 용액을 질소 하에서 실온까지 냉각시켰다. 4-클로로페닐 이소시아네이트(98％ 순도, 2.48 g, 0.0143 mol, 1.1 당량)와 4-(디메틸아미노)-피리딘(99％ 순도, 0.033 g, 0.0003 mol)을 용액에 첨가하였고, 반응 혼합물을 80-90℃에서 6시간 동안 교반하였고, 실온까지 냉각시켰고, 1,3-디(4-클로로페닐)우레아의 무색 결정을 여과에 의해 포집하였다. 에틸 아세테이트(20 ml)와 활성탄(Darco G-60, 0.3 g)을 여과액에 첨가하였고, 혼합물을 0.5 시간 동안 환류 상태에서 가열하였다. 활성탄을 여과로 포집하여 약간 노란색의 여과액을 얻었다. 감압 하에서 여과액으로부터 용매를 제거하여 정제되지 않은 (D-에리트로 및 D-트레오)-3-시나모일옥시-5-(N-4-클로로페닐카바모일옥시)-2-데옥소-2,2-디플루오로펜토푸라노스-1-울로스 고체 5.64 g을 96％ 수득률로 얻었다. 얻은 고체에 톨루엔(12 ml)을 첨가하였고, 혼합물을 가열하여 용액을 얻었다. 용액을 5℃에서 밤새 방치하였다. 여과에 의해 무색의 침전물을 포집하였고, 톨루엔과 n-헥산으로 수세하였고, 60℃에서 밤새 건조시켜 순수한 3-시나모일옥시-5-(N-4-클로로페닐)-카바모일옥시-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스 2.7 g을 46％ 수득률로 얻었다; [α]_D ²⁵ +95.0°(아세토니트릴에서 _C 1); mp. 119-121℃. ¹H NMR (CDCl₃): δ = 4.59 (2 AB-q, 2H, CH₂), 4.88 (q, 1H, 4-CH), 5.67 (m, 1H, 3-CH), 6.51 (d, 1H, =CH), 7.14(s, 1H, ArNHCO), 7.32 (m, 4H_arom), 7.51 (m, 5H_arom), 7.84 (d, 1H, =CH). ¹³C NMR(CDCl₃) δ = 62.3 (CH₂), 68.7 (C-3, J _C-F = 30.0, 30.0 Hz), 78.4 (C-4, J_C-F=6Hz), 111.6 (C-2, J _C-F = 256, 256 Hz), 114.8 (=CH), 120.3, 128.6, 129.1, 129.2, 131.5, 133.5, 135.8 (C_arom), 148.7 (=CH), 152.3 (OCONHAr), 162.8 (C-1, J _C-F = 30, 30 Hz), 165.0 (OCOCH=CH). ¹⁹F NMR 스펙트럼은 한 개의 불소를 포함하는 생성물이 주로 존재함을 나타낸다. ESI(음)/MS: m/z=451.44[M-H]⁺. Ethyl (D-erythro and D-threo) -3- (cinamoyloxy) -2,2-difluoro-3- (2,2-dimethyldioxolan-4-yl) -propionate [96% Purity (by HPLC), ratio of D-erythro-isomer to D-threo-isomer is 4.3 to 1, 5.2 g, 0.013 mol], acetonitrile (54 ml), CF ₃ COOH (0.3 ml) And a mixture of water (1.25 ml) was heated at reflux for 5.5 hours. The mixture of water / CF ₃ COOH / acetonitrile (13 ml) was then distilled off and toluene (13 ml) was added. The remaining portion (about 14 ml) was distilled off and toluene (14 ml) was added. This method was repeated four times, allowing the internal temperature of the reaction mixture to be about 99 ° C. To the resulting solution was added ethyl acetate (20 ml) and activated carbon (Darco G-60, 0.3 g) and the mixture was heated at reflux for 0.5 h. Activated carbon was collected by filtration to give a slightly yellow filtrate. Ethyl acetate was removed under reduced pressure and the resulting solution was cooled to room temperature under nitrogen. 4-chlorophenyl isocyanate (98% purity, 2.48 g, 0.0143 mol, 1.1 equiv) and 4- (dimethylamino) -pyridine (99% purity, 0.033 g, 0.0003 mol) were added to the solution and the reaction mixture was 80- Stirred at 90 ° C. for 6 hours, cooled to room temperature, and colorless crystals of 1,3-di (4-chlorophenyl) urea were collected by filtration. Ethyl acetate (20 ml) and activated carbon (Darco G-60, 0.3 g) were added to the filtrate and the mixture was heated at reflux for 0.5 h. Activated carbon was collected by filtration to give a slightly yellow filtrate. Purification of the solvent from the filtrate under reduced pressure (D-erythro and D-threo) -3-cinnamoyloxy-5- (N-4-chlorophenylcarbamoyloxy) -2-deoxo-2,2 5.64 g of -difluoropentofuranos-1-ulose solid were obtained in 96% yield. Toluene (12 ml) was added to the obtained solid, and the mixture was heated to give a solution. The solution was left at 5 ° C. overnight. The colorless precipitate was collected by filtration, washed with toluene and n-hexane, dried at 60 ° C. overnight to give pure 3-cinamoyloxy-5- (N-4-chlorophenyl) -carbamoyloxy-2-de 2.7 g of oxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose were obtained at 46% yield; [α] _D ²⁵ + 95.0 ° ( _C 1 in acetonitrile); mp. 119-121 ° C. ¹ H NMR (CDCl ₃ ): δ = 4.59 (2 AB-q, 2H, CH ₂ ), 4.88 (q, 1H, 4-CH), 5.67 (m, 1H, 3-CH), 6.51 (d, 1H , = CH), 7.14 (s, 1H, ArNHCO), 7.32 (m, 4H _arom ), 7.51 (m, 5H _arom ), 7.84 (d, 1H, = CH). ¹³ C NMR (CDCl ₃ ) δ = 62.3 ( C H ₂ ), 68.7 (C-3, J _CF = 30.0, 30.0 Hz), 78.4 (C-4, J _CF = 6Hz), 111.6 (C-2, J _CF = 256, 256 Hz), 114.8 (= C H), 120.3, 128.6, 129.1, 129.2, 131.5, 133.5, 135.8 (C _arom ), 148.7 (= C H), 152.3 (O C ONHAr), 162.8 (C -1, J _CF = 30, 30 Hz), 165.0 (O C OCH = CH). ¹⁹ F NMR spectra indicate that a product mainly containing one fluorine is present. ESI (negative) / MS: m / z = 451.44 [MH] ⁺ .

<실시예 5> < Example 5>

이 실시예는 3-(4-클로로벤조일옥시)-5-(N-4-클로로페닐)-카바모일옥시-2-데옥소-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스의 제조를 설명한다. This example is made up of 3- (4-chlorobenzoyloxy) -5- (N-4-chlorophenyl) -carbamoyloxy-2-deoxo-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose. Explain the manufacture.

에틸 아세테이트(30 ml)에 넣은 에틸 (D-에리트로 및 D-트레오)-3-히드록시-2,2-디플루오로-3-(2,2-디메틸디옥솔란-4-일)-프로피오네이트[83％의 순도를 가짐(HPLC에 의함), D-에리트로-아이소머 대 D-트레오-아이소머의 비율이 3.4 대 1, 6.25 g, 0.02 mol], 2,6-루티딘(4.65 ml, 0.04 mol) 및 4-(디메틸아미노)-피리딘(1.2 g, 0.01 mol)의 혼합물을 65-70℃까지 가온하였다. 그런 다음, 에틸 아세테이트(25 ml)에 넣은 4-클로로벤조일 클로라이드(3.05 ml, 0.024 mol)의 용액을 이 온도에서 4 시간 동안 적가하였다. 혼합물을 5℃까지 냉각하였고, 2,6-루티딘 히드로클로라이드를 여과하여 제거하였다. 감압하에서 여과액으로부터 에틸 아세테이트를 제거하여 오일로 에틸 (D-에리트로 및 D-트레오)-3-(4-클로로벤조일옥시)-2,2-디플루오로-3-(2,2-디메틸디옥솔란-4-일)-프로피오네이트 7.6 g을 97％ 수득률로 얻었다. 아세토니트릴(82 ml), CF₃COOH(0.5 ml) 및 물(1.9 ml)을 오일에 첨가하였고, 혼합물을 5.5 시간 동안 환류 상태에서 가열하였다. 그런 다음 물/CF₃COOH/아세토니트릴의 혼합물(20 ml)을 증류시켜 제거하였고, 톨루엔(20 ml)을 첨가하였다. 남아있는 부분(약 20 ml)을 증류시켜 제거하였고 톨루엔(20 ml)을 첨가하였다. 반응 혼합물의 온도가 약 99℃가 되도록 하면서, 이러한 방법을 4회 반복하였다. 얻은 용액에 에틸 아세테이트(20 ml)와 활성탄(Darco G-60, 0.3 g)을 첨가하였고, 혼합물을 0.5시간 동안 환류 상태에서 가열하였다. 활성탄을 여과로 포집하여 약간 노란색의 여과액을 얻었다. 감압 하에서 여과액으로부터 에틸 아세테이트를 제거하였고, 남은 용액을 질소 하에서 실온까지 냉각시켰다. 그런 다음, 4-클로로페닐 이소시아네이트(98％ 순도, 3.45 g, 0.022 mol, 1.1 당량) 및 4-(디메틸아미노)-피리딘(99％ 순도, 0.050 g, 0.0004 mol)을 용액에 첨가하였고, 반응 혼합물을 80-90℃에서 6시간 동안 교반하였고, 실온까지 냉각시켰고, 1,3-디(4-클로로페닐)우레아의 무색 결정을 여과에 의해 포집하였다. 에틸 아세테이트(20 ml)와 활성탄(Darco G-60, 0.4 g)을 여과액에 첨가하였고, 혼합물을 0.5시간 동안 환류 상태에서 가열하였다. 활성탄을 여과에 의해 포집하여 약간 노란색의 여과액을 얻었다. 감압하에서 용매를 제거하였고, 톨루엔(22 ml)을 잔류 오일(11g)에 첨가하였다. 혼합물을 가열하여 용액을 얻었다. 얻은 용액을 5℃에서 밤새 방치하였다. 여과에 의해 무색 침전물을 포집하였고, 톨루엔과 n-헥산으로 수세하였고, 60℃에서 밤새 건조시켜 3-(4-클로로벤조일옥시)-5-(N-4-클로로페닐)-카바모일옥시-2-데옥소-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스 2.75 g을 30.4％ 수득률로 얻었다. [α]_D ²⁵ +91.7°(아세토니트릴에서 _C 1); mp. 136.5-138.0℃. ¹H NMR (CDCl₃): δ = 4.58 (2 AB-q, 2H, CH₂), 4.90 (q, 1H, 4-CH), 5.70 (m, 1H, 3-CH),7.00 (s, 1H, ArNHCO), 7.28 (m, 4H_arom), 7.45 (d, 2H_arom), 7.98 (d, 2H_arom). ¹³C NMR(CDCl₃) δ = 62.2 (CH₂), 69.2 (C-3, J _C-F = 30.0, 30.0 Hz), 78.3 (C-4, J_C _-F=6Hz), 111.4 (C-2, J _C-F = 256, 256 Hz), 120.2, 125.7, 129.1, 129.2, 131.5, 135.6, 141.3 (C_arom), 152.1 (OCONHAr), 162.5 (C-1, J _C-F = 30, 30 Hz), 163.9 (OCOAr). ¹⁹F NMR 스펙트럼은 한 개의 불소를 포함하는 생성물이 주로 존재함을 나타낸다. APCI(양)/MS: m/z = 459.6[M+H]⁺.Ethyl (D-erythro and D-threo) -3-hydroxy-2,2-difluoro-3- (2,2-dimethyldioxolan-4-yl) -propio in ethyl acetate (30 ml) Nate [with 83% purity (by HPLC), ratio of D-erythro-isomer to D-threo-isomer 3.4 to 1, 6.25 g, 0.02 mol], 2,6-lutidine (4.65 ml , 0.04 mol) and 4- (dimethylamino) -pyridine (1.2 g, 0.01 mol) were warmed to 65-70 ° C. Then, a solution of 4-chlorobenzoyl chloride (3.05 ml, 0.024 mol) in ethyl acetate (25 ml) was added dropwise at this temperature for 4 hours. The mixture was cooled to 5 ° C. and 2,6-lutidine hydrochloride was removed by filtration. Ethyl acetate was removed from the filtrate under reduced pressure to give ethyl (D-erythro and D-threo) -3- (4-chlorobenzoyloxy) -2,2-difluoro-3- (2,2-dimethyldioct as oil. 7.6 g of solan-4-yl) -propionate was obtained in 97% yield. Acetonitrile (82 ml), CF ₃ COOH (0.5 ml) and water (1.9 ml) were added to the oil and the mixture was heated at reflux for 5.5 hours. The mixture of water / CF ₃ COOH / acetonitrile (20 ml) was then distilled off and toluene (20 ml) was added. The remaining portion (about 20 ml) was distilled off and toluene (20 ml) was added. This method was repeated four times, allowing the temperature of the reaction mixture to be about 99 ° C. To the resulting solution was added ethyl acetate (20 ml) and activated carbon (Darco G-60, 0.3 g), and the mixture was heated at reflux for 0.5 h. Activated carbon was collected by filtration to give a slightly yellow filtrate. Ethyl acetate was removed from the filtrate under reduced pressure and the remaining solution was cooled to room temperature under nitrogen. Then 4-chlorophenyl isocyanate (98% purity, 3.45 g, 0.022 mol, 1.1 equiv) and 4- (dimethylamino) -pyridine (99% purity, 0.050 g, 0.0004 mol) were added to the solution and the reaction mixture Was stirred at 80-90 ° C. for 6 hours, cooled to room temperature, and colorless crystals of 1,3-di (4-chlorophenyl) urea were collected by filtration. Ethyl acetate (20 ml) and activated carbon (Darco G-60, 0.4 g) were added to the filtrate and the mixture was heated at reflux for 0.5 h. Activated carbon was collected by filtration to give a slightly yellow filtrate. The solvent was removed under reduced pressure and toluene (22 ml) was added to the residual oil (11 g). The mixture was heated to give a solution. The resulting solution was left at 5 ° C. overnight. The colorless precipitate was collected by filtration, washed with toluene and n-hexane, dried overnight at 60 ° C. to 3- (4-chlorobenzoyloxy) -5- (N-4-chlorophenyl) -carbamoyloxy-2 2.75 g of -deoxo-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose were obtained in 30.4% yield. [α] _D ²⁵ + 91.7 ° ( _C 1 in acetonitrile); mp. 136.5-138.0 ° C. ¹ H NMR (CDCl ₃ ): δ = 4.58 (2 AB-q, 2H, CH ₂ ), 4.90 (q, 1H, 4-CH), 5.70 (m, 1H, 3-CH), 7.00 (s, 1H , ArNHCO), 7.28 (m, 4H _arom ), 7.45 (d, 2H _arom ), 7.98 (d, 2H _arom ). ¹³ C NMR (CDCl ₃ ) δ = 62.2 ( C H ₂ ), 69.2 (C-3, J _CF = 30.0, 30.0 Hz), 78.3 (C-4, J _C _-F = 6Hz), 111.4 (C-2 , J _CF = 256, 256 Hz), 120.2, 125.7, 129.1, 129.2, 131.5, 135.6, 141.3 (C _arom ), 152.1 (O C ONHAr), 162.5 (C-1, J _CF = 30, 30 Hz), 163.9 (OCOAr). ¹⁹ F NMR spectra indicate that a product mainly containing one fluorine is present. APCI (vol) / MS: m / z = 459.6 [M + H] ⁺ .

본원 명세서에서 인용된 간행물, 특허 출원서, 및 등록 특허를 포함하는 모든 참조문헌은 각각의 참조문헌이 개별적으로 및 구체적으로 참조문헌으로 통합되어 있는 것처럼 동일한 정도로 참조로 통합되어 있고, 전문으로 설명되어 있다. All references, including publications, patent applications, and registered patents cited herein, are incorporated by reference and are described in their entirety to the same extent as if each reference was individually and specifically incorporated by reference. .

본원 발명을 설명하는 문맥에서 용어 "하나(a)", "하나(an)" 및 "그(the)" 및 유사한 관계어의 사용은 본원 명세서에서 달리 지적되거나 또는 문맥에 명백하게 상반되지 않는다면, 단수 및 복수를 모두 포함하는 것으로 해석되어야 한다. 용어 "포함하는(comprising)", "갖는(having)", "포함하는(including)", 및 포함하는(containing)"은 달리 지적되지 않는다면 개방식 용어(즉, "포함하지만, 제한되는 것은 아님"을 의미)로 해석되어야 한다. 본원 명세서에서 수치 범위의 인용은 본원 명세서에서 달리 지적되지 않는다면, 단순히 그 범위 내에 있는 각각의 독립된 수치를 개별적으로 나타내기 위한 간단한 방법을 위한 것으로 해석되어야 하고, 각각의 독립적인 수치는 개별적으로 본원 명세서에서 인용된 것처럼 명세서에 통합되어 있다. 본원 명세서에서 기술된 모든 방법들은 본원 명세서에서 달리 지적되거나 또는 문맥에 명백하게 상반되지 않는다면, 소정의 적절한 순서로 수행될 수 있다. 본원 명세서에서 제공된 실시예 또는 대표적인 용어(예를 들면,"~와 같은")은 달리 청구되지 않는다면, 단순히 본원 발명을 더 잘 설명하기 위한 것이고, 본원 발명의 범위를 제한하지 않는다. 본원 명세서의 용어는 본원 발명의 실시에 필수적인 청구되지 않은 요소를 나타내는 것으로 해석되어져서는 안된다.The use of the terms “a”, “an” and “the” and similar relations in the context of the present invention is singular unless otherwise indicated herein or otherwise clearly contradicted by context. And plural inclusive. The terms "comprising", "having", "including" and containing "are open terms (ie," including, but not limited to "unless otherwise indicated). Reference to a numerical range in this specification should be construed as merely a simple way to individually represent each independent numerical value within that range unless otherwise indicated herein. Independent numerical values are incorporated in the specification as individually cited in the specification All methods described herein may be performed in any suitable order unless otherwise indicated herein or clearly contradicted by context. The examples or representative terms provided herein (eg, “such as”) are, unless otherwise claimed, Hi is for better describe the invention, not to limit the scope of the present invention. The term should never be in the present specification is to be interpreted as indicating a non-claimed element essential to the practice of the present invention.

본원 발명의 실시를 위해 발명자들에게 알려진 최적 형태를 포함하여, 본원 발명의 바람직한 실시 형태가 본원 명세서에서 기술되어 있다. 그러한 바람직한 실시 형태의 변형은 상기 명세서를 읽는 당업자들에게 명백할 것이다. 본원 발명자들은 당업자가 그러한 변형을 적절하게 사용할 것을 기대하고 있으며, 본원 발명자들은 본원 명세서에서 구체적으로 기재된 것보다 발명이 실시되기를 의도하고 있다. 따라서, 본원 발명은 적용되는 법에 의해 허용되는, 첨부된 청구항에서 인용된 발명의 구성 요소의 모든 변형 및 등가물을 포함한다. 또한, 모든 가능한 변형에서 상기-기술된 구성 요소의 조합은 본원 명세서에서 달리 지적되거나 또는 문맥에 명백하게 상반되지 않는다면, 본원 발명에 포함된다.Preferred embodiments of the invention are described herein, including the best mode known to the inventors for carrying out the invention. Modifications of such preferred embodiments will be apparent to those skilled in the art upon reading the above specification. The inventors expect skilled artisans to employ such variations as appropriate, and the inventors intend for the invention to be practiced rather than as specifically described herein. Accordingly, the invention includes all modifications and equivalents of the components of the invention recited in the appended claims, as permitted by applicable law. In addition, in all possible variations the combination of the above-described components is included in the present invention unless otherwise indicated herein or otherwise clearly contradicted by context.

Claims

젬시타빈의 제조 방법으로서, 상기 제조 방법은:As a method for preparing gemcitabine, the preparation method is:

하기 식 19의 화합물을 제조하는 단계; Preparing a compound of Formula 19 ;

상기 히드록시기를 예를 들면, 술포네이트(메실레이트)로 전환에 의해 활성화하는 단계;Activating said hydroxy group, for example by conversion to a sulfonate (mesylate);

상기 활성화된 히드록시(메실레이트)를 보호된 시토신과 반응시켜 보호된 뉴클레오시드를 제조하는 단계;Reacting the activated hydroxy (mesylate) with a protected cytosine to produce a protected nucleoside;

상기 보호된 뉴클레오시드를 탈보호하는 단계; 및Deprotecting said protected nucleoside; And

선택적으로 β-아노머를 분리하는 단계를 포함하고, 상기 식에서 R₁은 비치 환된 또는 치환된 C₁-C₅ 포화된 또는 불포화된 알킬, 치환된 페닐, 또는 C₁-C₅ 포화된 또는 불포화된 아랄킬이고; R₅는 비치환된 또는 치환된 페닐, 비치환된 또는 치환된 페닐술포닐, 또는 C₁-C₅ 알킬술포닐이고; 및 X는 O 또는 S인 것인 제조 방법.Optionally separating the β-anomer, wherein R ₁ is unsubstituted or substituted C ₁ -C ₅ saturated or unsaturated alkyl, substituted phenyl, or C ₁ -C ₅ saturated or unsaturated Aralkyl; R ₅ is unsubstituted or substituted phenyl, unsubstituted or substituted phenylsulfonyl, or C ₁ -C ₅ alkylsulfonyl; And X is O or S.

R₁이 비치환된 또는 치환된 C₁-C₅ 포화된 또는 불포화된 알킬, 치환된 페닐, 또는 C₁-C₅ 포화된 또는 불포화된 아랄킬이고; R₂와 R₃이 독립적으로 C₁-C₃ 알킬이고; 및 R₄가 C₁-C₄ 알킬인, 하기 식 15의R ₁ is unsubstituted or substituted C ₁ -C ₅ saturated or unsaturated alkyl, substituted phenyl, or C ₁ -C ₅ saturated or unsaturated aralkyl; R ₂ and R ₃ are independently C ₁ -C ₃ alkyl; And R ₄ is a C ₁ -C ₄ alkyl, the formula 15

3-치환된, 알킬 2,2-디플루오로-3-히드록시-3-(2,2-디알킬디옥솔란-4-일)-프로피오네이트.3-substituted, alkyl 2,2-difluoro-3-hydroxy-3- (2,2-dialkyldioxolan-4-yl) -propionate.

R₁이 비치환된 또는 치환된 C₁-C₅ 포화된 또는 불포화된 알킬, 치환된 페닐, 또는 C₁-C₅ 포화된 또는 불포화된 아랄킬이고; X가 O 또는 S이고; 및 R₅가 비치환된 또는 치환된 페닐, 비치환된 또는 치환된 페닐술포닐, 또는 C₁-C₅ 알킬술포닐인, 하 기 식 16의R ₁ is unsubstituted or substituted C ₁ -C ₅ saturated or unsaturated alkyl, substituted phenyl, or C ₁ -C ₅ saturated or unsaturated aralkyl; X is O or S; And R ₅ is a unsubstituted or substituted phenyl ring, unsubstituted or ring-substituted phenylsulfonyl, or C ₁ -C ₅ alkylsulfonyl of, and group type 16

3,5-이치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스.3,5-disubstituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose.

상기 식 16 화합물의 제조 방법으로서, 상기 제조 방법은:As a method for preparing the compound of Formula 16 , the preparation method is:

3-치환된, 알킬 2,2-디플루오로-3-히드록시-3-(2,2-디알킬디옥솔란-4-일)-프로피오네이트의 에리트로 아이소머와 트레오 아이소머의 혼합물을 산 존재 하에서 가수분해하여, 3-치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스를 제조하는 단계; 및 A mixture of an erythro isomer and a treo isomer of 3-substituted, alkyl 2,2-difluoro-3-hydroxy-3- (2,2-dialkyldioxolan-4-yl) -propionate Hydrolysis in the presence of an acid to prepare 3-substituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose; And

X가 O 또는 S이고, 및 R₅가 비치환된 또는 치환된 페닐, 비치환된 또는 치환된 페닐술포닐, 또는 C₁-C₅ 알킬술포닐인 식 R₅NCX(17)의 화합물과 상기 3-치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스를, 선택적으로 염기 존재 하에서, 반응시키는 단계를 포함하는 것인 제조 방법.A compound of Formula R ₅ NCX ( 17 ) wherein X is O or S and R ₅ is unsubstituted or substituted phenyl, unsubstituted or substituted phenylsulfonyl, or C ₁ -C ₅ alkylsulfonyl Reacting 3-substituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose, optionally in the presence of a base.

제4항에 있어서, 상기 3-치환된, 알킬 2,2-디플루오로-3-히드록시-3-(2,2-디알킬디옥솔란-4-일)-프로피오네이트가 R₁이 비치환된 또는 치환된 C₁-C₅ 포화된 또 는 불포화된 알킬, 페닐, 치환된 페닐, 또는 C₁-C₅ 포화된 또는 불포화된 아랄킬이고; R₂와 R₃이 독립적으로 C₁-C₃ 알킬이고; 및 R₄가 C₁-C₄ 알킬인 하기 식 15의 5. The compound of claim 4, wherein said 3-substituted, alkyl 2,2-difluoro-3-hydroxy-3- (2,2-dialkyldioxolan-4-yl) -propionate is R ₁ Unsubstituted or substituted C ₁ -C ₅ saturated or unsaturated alkyl, phenyl, substituted phenyl, or C ₁ -C ₅ saturated or unsaturated aralkyl; R ₂ and R ₃ are independently C ₁ -C ₃ alkyl; And R ₄ is a C ₁ -C ₄ alkyl to the formula 15

화합물인 것인 제조 방법.It is a compound.

제5항에 있어서, 상기 식 15의 3-치환된, 알킬 2,2-디플루오로-3-히드록시-3-(2,2-디알킬디옥솔란-4-일)-프로피오네이트가 에틸 (D-에리트로 및 D-트레오)-3-(시나모일옥시)-2,2-디플루오로-3-(2,2-디메틸디옥솔란-4-일)-프로피오네이트 또는 에틸 (D-에리트로 및 D-트레오)-3-(4-클로로벤조일옥시)-2,2-디플루오로-3-(2,2-디메틸디옥솔란-4-일)-프로피오네이트인 것인 제조 방법. The compound of claim 5 wherein the 3-substituted, alkyl 2,2-difluoro-3-hydroxy-3- (2,2-dialkyldioxolan-4-yl) -propionate of Formula 15 is Ethyl (D-erythro and D-threo) -3- (cinamoyloxy) -2,2-difluoro-3- (2,2-dimethyldioxolan-4-yl) -propionate or ethyl (D Erythro and D-threo) -3- (4-chlorobenzoyloxy) -2,2-difluoro-3- (2,2-dimethyldioxolan-4-yl) -propionate .

제4항에 있어서, 상기 3-치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스를 포함하는 반응 혼합물로부터 물을 제거하는 단계를 더 포함하는 것인 제조 방법.The preparation of claim 4 further comprising the step of removing water from the reaction mixture comprising the 3-substituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose. Way.

제4항에 있어서,The method of claim 4, wherein

상기 3-치환된, 알킬 2,2-디플루오로-3-히드록시-3-(2,2-디알킬디옥솔란-4- 일)프로피오네이트의 에리트로 아이소머와 트레오 아이소머의 혼합물을 수-혼화성(water-miscible) 용매, 물 및 산 존재 하에서 가수분해하는 단계;A mixture of the erythro isomer and the treo isomer of the 3-substituted, alkyl 2,2-difluoro-3-hydroxy-3- (2,2-dialkyldioxolan-4-yl) propionate Hydrolysis in the presence of a water-miscible solvent, water and acid;

상기 가수분해 반응이 충분히 완료될 때까지 상기 혼합물을 가열하는 단계;Heating the mixture until the hydrolysis reaction is sufficiently completed;

수-불혼화성(water-immiscible) 용매를 첨가하고 상기 물을 제거하는 단계;Adding a water-immiscible solvent and removing the water;

상기 용매 혼합물을 증류로 더 제거하여 상기 3-치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스를 고체로 얻는 단계;Further removing the solvent mixture by distillation to obtain the 3-substituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose as a solid;

선택적으로 상기 3-치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스를 활성탄으로 유기 용매에서 처리하고 상기 활성탄을 제거하는 단계;Optionally treating the 3-substituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose with activated carbon in an organic solvent and removing the activated carbon;

반응이 충분히 완료될 때까지 상기 3-치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스와 이소시아네이트 또는 이소티오시아네이트와 반응시키는 단계; 및Reacting the 3-substituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose with an isocyanate or isothiocyanate until the reaction is sufficiently completed; And

상기 3,5-이치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스를 침전시키는 단계를 포함하는 것인 제조 방법.And precipitating the 3,5-disubstituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose.

제8항에 있어서, 상기 수-혼화성 용매가 아세토니트릴, 테트라히드로푸란(THF), 2-메틸테트라히드로푸란, 아세톤, N,N-디메틸 포름아미드(DMF), N,N-디메틸 아세트아미드(DMA), 또는 이들의 혼합물인 것인 제조 방법.The method of claim 8, wherein the water-miscible solvent is acetonitrile, tetrahydrofuran (THF), 2-methyltetrahydrofuran, acetone, N, N-dimethyl formamide (DMF), N, N-dimethyl acetamide (DMA), or a mixture thereof.

제9항에 있어서, 상기 수-혼화성 용매가 아세토니트릴인 것인 제조 방법.10. The method of claim 9, wherein said water-miscible solvent is acetonitrile.

제8항에 있어서, 상기 산이 메탄술폰산, 황산, 트리플루오로아세트산, 또는 이들의 배합물인 것인 제조 방법.The method of claim 8, wherein the acid is methanesulfonic acid, sulfuric acid, trifluoroacetic acid, or a combination thereof.

제11항에 있어서, 상기 산이 트리플루오로아세트산인 것인 제조 방법.The method of claim 11, wherein said acid is trifluoroacetic acid.

제10항에 있어서, 상기 3-치환된, 알킬 2,2-디플루오로-3-히드록시-3-(2,2-디알킬디옥솔란-4-일)-프로피오네이트가 아세토니트릴, 물 및 트리플루오로아세트산의 혼합물에서 가수분해되는 것인 제조 방법.The compound of claim 10, wherein the 3-substituted, alkyl 2,2-difluoro-3-hydroxy-3- (2,2-dialkyldioxolan-4-yl) -propionate is acetonitrile, And hydrolyzed in a mixture of water and trifluoroacetic acid.

제7항에 있어서, 상기 물이 공비 증류에 의해 제거되는 것인 제조 방법.8. The process of claim 7, wherein the water is removed by azeotropic distillation.

제8항에 있어서, 상기 수-불혼화성 용매가 톨루엔, o-자일렌, m-자일렌, p-자일렌, 에틸벤젠, 디에틸벤젠, 또는 이들의 혼합물인 것인 제조 방법.The method of claim 8, wherein the water-immiscible solvent is toluene, o-xylene, m-xylene, p-xylene, ethylbenzene, diethylbenzene, or mixtures thereof.

제15항에 있어서, 상기 수-불혼화성 용매가 톨루엔인 것인 제조 방법.The method of claim 15, wherein said water-immiscible solvent is toluene.

제8항에 있어서, 상기 이소시아네이트 또는 이소티오시아네이트가 2-클로로에틸 이소티오시아네이트, 5-클로로-2-메틸페닐 이소티오시아네이트, 2-클로로-4-니트로페닐 이소티오시아네이트, 2-클로로페닐 이소티오시아네이트, 3-클로로페닐 이소티오시아네이트, 4-클로로페닐 이소티오시아네이트, 3-아세틸페닐 이소티오시 아네이트, 4-아세틸페닐 이소티오시아네이트, 2-(클로로메틸)페닐 이소시아네이트, 2-클로로-5-메틸페닐 이소시아네이트, 2-클로로-6-메틸페닐 이소시아네이트, 3-클로로-2-메틸페닐 이소시아네이트, 3-클로로-4-메틸페닐 이소시아네이트, 4-(클로로메틸)-페닐 이소시아네이트, 4-클로로-2-메틸페닐 이소시아네이트, 5-클로로-2-메틸페닐 이소시아네이트, 2-클로로-4-니트로페닐 이소시아네이트, 2-클로로-5-니트로페닐 이소시아네이트, 4-클로로-2-니트로페닐 이소시아네이트, 4-클로로-3-니트로페닐 이소시아네이트, 2-클로로-2-니트로페닐 이소시아네이트, 2-클로로페닐 이소시아네이트, 3-클로로페닐 이소시아네이트, 4-클로로페닐 이소시아네이트, 3-아세틸페닐 이소시아네이트, 페닐 이소시아네이트, N-벤젠술포닐 이소시아네이트, p-톨루엔술포닐 이소시아네이트, 및 o-톨루엔술포닐 이소시아네이트인 것인 제조 방법.The method of claim 8, wherein the isocyanate or isothiocyanate is 2-chloroethyl isothiocyanate, 5-chloro-2-methylphenyl isothiocyanate, 2-chloro-4-nitrophenyl isothiocyanate, 2- Chlorophenyl isothiocyanate, 3-chlorophenyl isothiocyanate, 4-chlorophenyl isothiocyanate, 3-acetylphenyl isothiocyanate, 4-acetylphenyl isothiocyanate, 2- (chloromethyl) Phenyl isocyanate, 2-chloro-5-methylphenyl isocyanate, 2-chloro-6-methylphenyl isocyanate, 3-chloro-2-methylphenyl isocyanate, 3-chloro-4-methylphenyl isocyanate, 4- (chloromethyl) -phenyl isocyanate, 4 -Chloro-2-methylphenyl isocyanate, 5-chloro-2-methylphenyl isocyanate, 2-chloro-4-nitrophenyl isocyanate, 2-chloro-5-nitrophenyl isocyanate, 4-chloro Rho-2-nitrophenyl isocyanate, 4-chloro-3-nitrophenyl isocyanate, 2-chloro-2-nitrophenyl isocyanate, 2-chlorophenyl isocyanate, 3-chlorophenyl isocyanate, 4-chlorophenyl isocyanate, 3-acetylphenyl Isocyanate, phenyl isocyanate, N-benzenesulfonyl isocyanate, p-toluenesulfonyl isocyanate, and o-toluenesulfonyl isocyanate.

제17항에 있어서, 상기 이소시아네이트 또는 이소티오시아네이트가 p-톨루엔술포닐 이소시아네이트, 페닐술포닐 이소시아네이트, 또는 4-클로로페닐 이소티오시아네이트인 것인 제조 방법.18. The process of claim 17, wherein said isocyanate or isothiocyanate is p-toluenesulfonyl isocyanate, phenylsulfonyl isocyanate, or 4-chlorophenyl isothiocyanate.

제4항에 있어서, 상기 염기가 트리에틸 아민, 루티딘, 모르폴린, 디이소프로필에틸아민, 피리딘, 2-(디메틸아미노)-피리딘, 4-(디메틸아미노)-피리딘, 또는 이들의 배합물인 것인 제조 방법.The compound of claim 4, wherein the base is triethyl amine, lutidine, morpholine, diisopropylethylamine, pyridine, 2- (dimethylamino) -pyridine, 4- (dimethylamino) -pyridine, or a combination thereof. Manufacturing method.

제19항에 있어서, 상기 염기가 4-(디메틸아미노)-피리딘인 것인 제조 방법.The method of claim 19, wherein said base is 4- (dimethylamino) -pyridine.

95％ 이상의 순도를 갖는 하기 식 16A의Of formula 16A having a purity of 95% or more

D-에리트로-3,5-이치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스의 제조 방법으로서, 상기 제조 방법은:A process for preparing D-erythro-3,5-disubstituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose, wherein the preparation method is:

하기 식 16의 (D-에리트로 및 D-트레오)-3,5-이치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스의 다이아스테레오머 혼합물을 비-극성 용매에 녹이는 단계Non-polar diastereomer mixtures of (D-erythro and D-threo) -3,5-disubstituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose of Formula 16 Dissolving in solvent

;

상기 혼합물을 충분히 냉각하여 상기 식 16A 화합물의 결정을 제조하는 단계;Cooling the mixture sufficiently to produce crystals of the above formula 16A compound;

상기 결정 중 적어도 일 부분을 포집하는 단계;Collecting at least a portion of the determination;

선택적으로 상기 결정을 수세하는 단계; 및Optionally washing the determination; And

선택적으로 상기 결정을 건조시키는 단계를 포함하는 것인 제조 방법.Optionally drying the crystals.

제21항에 있어서, 상기 비-극성 용매가 톨루엔, o-자일렌, m-자일렌, p-자일렌, 에틸벤젠, 디에틸벤젠, n-펜탄, n-헥산, n-헵탄, n-옥탄, 이소옥탄, 시클로헥산, 페트롤 에테르, 또는 이들의 혼합물인 것인 제조 방법.22. The process of claim 21 wherein the non-polar solvent is toluene, o-xylene, m-xylene, p-xylene, ethylbenzene, diethylbenzene, n-pentane, n-hexane, n-heptane, n- Octane, isooctane, cyclohexane, petroleum ether, or a mixture thereof.

제22항에 있어서, 상기 비-극성 용매가 톨루엔을 포함하는 것인 제조 방법.The method of claim 22, wherein the non-polar solvent comprises toluene.

제22항에 있어서, 상기 비-극성 용매가 톨루엔과 n-헥산의 혼합물을 포함하는 것인 제조 방법.The method of claim 22, wherein the non-polar solvent comprises a mixture of toluene and n-hexane.

3-시나모일옥시-5-(N-p-톨루엔술포닐) 카바모일옥시-2-데옥소-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스, 3-시나모일옥시-5-(N-벤젠-술포닐) 카바모일옥시-2-데옥소-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스, 3-시나모일옥시-5-(N-4-클로로벤젠술포닐) 카바모일옥시-2-데옥소-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스, 3-시나모일옥시-5-(N-4-클로로페닐) 카바모일옥시-2-데옥소-2,2-디플루오로-1-D-리보스, 또는 3-(4-클로로벤조일옥시)-5-(N-4-클로로페닐) 카바모일옥시-2-데옥소-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스인, D-에리트로-3,5-이치환된-2-데옥시-2,2-디플루오로-1-옥소-D-리보스.3-cinnamoyloxy-5- (Np-toluenesulfonyl) carbamoyloxy-2-deoxo-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose, 3-cinamoyloxy-5- (N -Benzene-sulfonyl) carbamoyloxy-2-deoxo-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose, 3-cinnamoyloxy-5- (N-4-chlorobenzenesulfonyl) carba Moyloxy-2-deoxo-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose, 3-cinamoyloxy-5- (N-4-chlorophenyl) carbamoyloxy-2-deoxo-2 , 2-difluoro-1-D-ribose, or 3- (4-chlorobenzoyloxy) -5- (N-4-chlorophenyl) carbamoyloxy-2-deoxo-2,2-difluoro D-erythro-3,5-disubstituted-2-deoxy-2,2-difluoro-1-oxo-D-ribose which is -1-oxo-D-ribose.