KR20080029020A - A storage stable erythorpoietin composition - Google Patents

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KR20080029020A
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mannitol
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이준원
오혜연
정순관
장신재
홍승서
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주식회사 셀트리온
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Abstract

An erythorpoietin composition is provided to maintain erythoropoietin stable, increase safety of the erythoropoietin and prevent the erythoropoietin from being absorbed into the container wall surface by comprising the erythoropoietin, Tween 20, propylene glcyol and mannitol. An erythorpoietin composition with storage stability comprises 100-100,000 IU of erythorpoietin, 0.0002-0.5% of Tween 20, 0.005-0.3% of propylene glycol, and 0.01-3% of mannitol.

Description

저장 안정성 에리스로포이에틴 조성물{A storage stable erythorpoietin composition}A storage stable erythorpoietin composition

도 1과 2는 각각 표 1과 2에 나타낸 각 조성물을 25 ℃에서 5 주 동안 보관한 후 크기배제 크로마토그래피 (SEC-HPLC)로 분석한 결과를 나타내는 도면이다.1 and 2 show the results of analysis of size exclusion chromatography (SEC-HPLC) after storing each composition shown in Tables 1 and 2 for 5 weeks at 25 ° C.

도 3은 표 3에 나타낸 조성물을 25℃ (A) 및 40℃ (B)에서 5 주 동안 배양기에 보관하면서 각 지정된 시간에 시료를 채취하여 역상 크로마토그래피 (RP-HPLC) 분석을 수행한 결과를 나타내는 도면이다. FIG. 3 shows the results of performing reverse phase chromatography (RP-HPLC) analysis by taking samples at each designated time while keeping the compositions shown in Table 3 at 25 ° C. (A) and 40 ° C. (B) for 5 weeks. It is a figure which shows.

본 발명은 혈장 유래 성분을 포함하지 않으면서도, 에리스로포이에틴을 안정하게 유지할 수 있는, 에리스로포이에틴 함유 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to an erythropoietin-containing composition capable of stably maintaining erythropoietin without including a plasma-derived component.

에리스로포이에틴은 콜로니 자극 인자 (colony stimulating factor; CSF) 중 하나인 당단백질로써 신장에서 주로 생성되며, 간에서도 소량 생성되는 것으로 알려져 있다. 에리스로포이에틴은 적혈구 계열의 전구세포의 성장 및 분화를 촉진시켜 성숙한 적혈구의 생성을 도와주는 역할을 하므로, 신장기능 장해로 인한 빈혈, 골수이식성 빈혈, 류마티스성 빈혈, 암 또는 항암제 관련 빈혈, AIDS성 빈혈 등에 이용될 수 있고, 재생 불량성 빈혈 환자 및 만성 신부전증 환자 치료에 광범위하게 이용되고 있다.Erythropoietin is a glycoprotein that is one of the colony stimulating factors (CSFs). It is mainly produced in the kidney and is known to be produced in small amounts in the liver. Erythropoietin promotes the growth and differentiation of erythrocyte-like progenitor cells to help produce mature erythrocytes. It has been widely used in the treatment of aplastic anemia patients and chronic renal failure patients.

상기 언급된 질환들의 치료를 위해서, 에리스로포이에틴과 같은 단백질 약물을 시장에 제품으로 공급하기 위해서는 제제화 과정에서 나타날 수 있는 가수분해, 디설파이드 교환 반응, 변성, 응집, 흡착 등의 물리화학적인 변화를 억제하면서 생체내 활성을 유지시키는 것이 필수적이다.For the treatment of the above-mentioned diseases, in order to supply protein drugs such as erythropoietin to the market, it is necessary to provide biopharmaceutical products while suppressing physicochemical changes such as hydrolysis, disulfide exchange reaction, denaturation, aggregation and adsorption that may occur during the formulation process. Maintaining my activity is essential.

따라서, 당해 분야에서는 이러한 에리스로포이에틴 제제의 물리화학적 변화를 억제하면서 장기간 저장을 통해서도 생체내 활성을 유지시키기 위한 노력이 계속되어져 왔다. 상기와 같이 에리스로포이에틴 단백질 약물을 장기간 저장하면서 생체내 활성을 유지시키는 방법으로는 안정화제를 사용한 제제화 방법이 있을 수 있다.Accordingly, efforts have been made in the art to maintain in vivo activity even during long-term storage while suppressing physicochemical changes of such erythropoietin preparations. As described above, there may be a formulation method using a stabilizer as a method of maintaining erythropoietin protein drug in vivo while prolonged storage.

기존의 단백질 약물의 제형에서 단백질 안정성을 개선하기 위하여 일반적으로 안정화제로 사람 또는 소 혈청 알부민, 정제된 젤라틴 등이 사용되었으나, 이러한 사람 혈청 알부민은 수혈에 의존한 혈액 유래 성분으로서 바이러스 감염의 우려가 있다.Human or bovine serum albumin, purified gelatin, etc. have been generally used as stabilizers to improve protein stability in the formulation of conventional protein drugs, but such human serum albumin is a blood-derived component that is dependent on blood transfusion. .

이러한 문제점을 해결하기 위하여, 혈장 유래 성분을 함유하지 않는 에리스로포이에틴 조성물이 개발된 바 있다. 예를 들면, 국제출원공개 제0061169호에는 pH 완충제, 소르비탄 모노-9-옥타데노에이트 폴리옥시-1,2-에탄디일 유도체, 및 아미노산 등으로 이루어진 에리스로포이에틴 안정화 제제가 개시되어 있고, 바람직한 것으로 인산 완충액과 폴리소르베이트 80, 글리신의 안정화제 조합으로 이루어진 에리스로포이에틴의 약제학적 조성물이 개시되어 있다.In order to solve this problem, erythropoietin compositions have been developed that do not contain plasma-derived components. For example, International Publication No. 006169 discloses an erythropoietin stabilizing agent consisting of a pH buffer, sorbitan mono-9-octadenoate polyoxy-1,2-ethanediyl derivatives, amino acids and the like, and preferred phosphoric acid. A pharmaceutical composition of erythropoietin consisting of a stabilizer combination of buffer and polysorbate 80, glycine is disclosed.

그러나, 상기한 폴리소프베이트 80은 인체에 투여되는 경우 마이셀을 형성하여 면역원성을 갖는 것으로 알려져 있다. 즉, 폴리소르베이트 80을 포함하는 에리스로포이에틴 조성물은 인체에 투여되는 경우, 인체에서 항체 생성을 유도하여 순수한 적혈구 무형성증 (PRCA: pure red cell aplasia)을 유발할 수 있다. However, the polysorbate 80 is known to have an immunogenicity by forming micelles when administered to the human body. That is, the erythropoietin composition comprising polysorbate 80 may induce antibody production in the human body when induced in the human body, resulting in pure red cell aplasia (PRCA).

따라서, 종래 기술에 의하더라도 에리스로포이에틴의 안정성을 높일 수 있고, 안전성을 높일 수 있는 에리스로포이에틴 조성물이 여전히 요구되고 있다.Therefore, even in the prior art, there is still a need for an erythropoietin composition capable of increasing the stability of erythropoietin and improving safety.

이에 본 발명자들은 종래 면역원성이 있는 폴리소르베이트인 Tween 80을 사용하지 않으면서도, 에리스로포이에틴의 안정성과 안전성을 높일 수 있는 에리스로포이에틴 조성물을 개발하고자 예의 연구하던 중 Tween 20, 프로필렌글리콜 및 만니톨을 포함하는 조성물이 에리스로포이에틴의 안정성 및 안전성을 높일 수 있다는 것을 발견하고 본 발명을 완성하기에 이르렀다.Accordingly, the present inventors have been intensively researching to develop an erythropoietin composition which can enhance the stability and safety of erythropoietin without using the conventional immunogenic polysorbate Tween 80. The present inventors have found that the stability and safety of erythropoietin can be improved, and the present invention has been completed.

본 발명의 목적은 에리스로포이에틴의 안정성과 안전성을 높일 수 있는 에리스로포이에틴 조성물을 제공하는 것이다. An object of the present invention is to provide an erythropoietin composition that can increase the stability and safety of erythropoietin.

본 발명은 에리스로포이에틴, Tween 20, 프로필렌글리콜 및 만니톨을 포함하는, 저장 안정성 에리스로포이에틴 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a storage stable erythropoietin composition comprising erythropoietin, Tween 20, propylene glycol and mannitol.

본 발명은 최종 투여 형태로서 투여하기에 유용한 농도의 에리스로포이에틴을 포함하는 조성물을 제공한다. 본 발명의 조성물은 바람직하게는, 100 IU 내지 100,000IU 에리스로포이에틴, 0.0002 내지 0.05%의 Tween 20, 0.005 내지 0.3%의 프로필렌글리콜 및 0.01 내지 3%의 만니톨을 포함하는 조성물이다.The present invention provides compositions comprising erythropoietin in concentrations useful for administration as the final dosage form. The composition of the present invention is preferably a composition comprising 100 IU to 100,000 IU erythropoietin, 0.0002 to 0.05% Tween 20, 0.005 to 0.3% propylene glycol and 0.01 to 3% mannitol.

본 발명의 조성물은 버퍼제 (buffering agent)를 더 포함할 수 있다. 상기 버퍼제는 본 발명의 조성물의 pH를 약 6 내지 약 8의 범위, 바람직하게는 약 7로 유지한다. 바람직한 버퍼제는 포스페이트, 히스티딘, 석시네이트, 트리스, 및 디에탄올아민으로 구성되는 군으로부터 선택된 것일 수 있다. 가장 바람직하게는, 소듐 및 포타슘 포스페이트를 포한한, 포스페이트일 수 있다. 버퍼제의 농도는 약 1 mM 내지 약 100 mM, 바람직하게는 약 5 mM 내지 약 40 mM, 가장 바람직하게는 10 mM 소듐 포스페이트이다. The composition of the present invention may further comprise a buffering agent (buffering agent). The buffer maintains the pH of the composition of the present invention in the range of about 6 to about 8, preferably about 7. Preferred buffers may be selected from the group consisting of phosphate, histidine, succinate, tris, and diethanolamine. Most preferably, it may be phosphate, including sodium and potassium phosphate. The concentration of buffer agent is about 1 mM to about 100 mM, preferably about 5 mM to about 40 mM, most preferably 10 mM sodium phosphate.

본 발명의 조성물은, 벌크제 (bulking agent)를 더 포함할 수 있다. 상기 벌크제는 바람직하게는, 글리신 및 NaCl 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 것일 수 있다. 가장 바람직하게는 글리신이다. 글리신이 사용되는 경우, 상기 글리신은 약 1mM 내지 약 1M, 바람직하게는 약 50 mM 내지 400 mM, 가장 바람직하게는 약 130 mM의 농도로 사용된다.The composition of the present invention may further comprise a bulking agent. The bulking agent may be preferably selected from the group consisting of glycine and NaCl and combinations thereof. Most preferably glycine. If glycine is used, the glycine is used at a concentration of about 1 mM to about 1M, preferably about 50 mM to 400 mM, most preferably about 130 mM.

이하 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. However, these examples are for illustrative purposes only and the scope of the present invention is not limited to these examples.

실시예Example

이하의 실시예에서는 에리스로포이에틴, Tween 20, 프로필렌글리콜 및 만니톨을 함유하는, 에리스로포이에틴 조성물을 가혹 조건에서 방치한 후 에리스로포이 에틴의 함량 변화 및 순도를 조사하였다. In the following examples, the erythropoietin content containing erythropoietin, Tween 20, propylene glycol and mannitol was left under severe conditions, and then the content change and purity of erythropoietin were investigated.

실시예Example 1: Tween 20,  1: Tween 20, 프로필렌글리콜Propylene glycol 및  And 만니톨이Mannitol 에리스로포이에틴의 함량에 미치는 영향 Effect on the content of erythropoietin

본 실시예에서는 Tween 20, 프로필렌글리콜 및 만니톨이 가혹 조건에서 에리스로포이에틴의 함량에 미치는 영향을 크기 배제 크로마토그래피 (SEC-HPLC)를 이용하여 조사하였다. In this example, the effects of Tween 20, propylene glycol and mannitol on the content of erythropoietin under severe conditions were investigated using size exclusion chromatography (SEC-HPLC).

본 실시예에 사용된 에리스로포이에틴 조성물은 시린지 당 2000 IU 및 4000 IU의 에리스로포이에틴을 포함하는 조성물을 사용하였으며, 각 조성물의 조성은 다음과 같다. The erythropoietin composition used in this example was used a composition comprising 2000 IU and 4000 IU of erythropoietin per syringe, the composition of each composition is as follows.

표 1. 2000 IU의 에리스로포이에틴을 포함하는 조성물Table 1. Composition comprising 2000 IU of erythropoietin

조성물Composition EPO (IU/시린지)EPO (IU / syringe) 소듐포스페이트 (mM)Sodium Phosphate (mM) NaCl(%)NaCl (%) 글리신(%)Glycine (%) Tween 20(%)Tween 20 (%) 프로필렌글리콜(%)Propylene Glycol (%) 만니톨(%)Mannitol (%) P1-2000P1-2000 20002000 1010 0.10.1 1.01.0 0.020.02 00 00 P2-2000P2-2000 20002000 1010 0.10.1 1.01.0 0.020.02 0.10.1 00 P3-2000P3-2000 20002000 1010 0.10.1 1.01.0 0.020.02 00 1.01.0 P4-2000P4-2000 20002000 1010 0.10.1 1.01.0 0.020.02 0.10.1 1.01.0 음성대조군Negative Control 20002000 1010 0.10.1 00 00 00 00

표 2. 4000 IU의 에리스로포이에틴을 포함하는 조성물Table 2. Composition comprising 4000 IU of erythropoietin

조성물Composition EPO (IU/시린지)EPO (IU / syringe) 소듐포스페이트 (mM)Sodium Phosphate (mM) NaCl (%)NaCl (%) 글리신(%)Glycine (%) Tween 20(%)Tween 20 (%) 프로필렌글리콜(%)Propylene Glycol (%) 만니톨(%)Mannitol (%) P1-4000P1-4000 40004000 1010 0.10.1 1.01.0 0.020.02 00 00 P2-4000P2-4000 40004000 1010 0.10.1 1.01.0 0.020.02 0.10.1 00 P3-4000P3-4000 40004000 1010 0.10.1 1.01.0 0.020.02 00 1.01.0 P4-4000P4-4000 40004000 1010 0.10.1 1.01.0 0.020.02 0.10.1 1.01.0 음성대조군Negative Control 40004000 1010 0.10.1 00 00 00 00

상기 표 1과 2의 에리스로포이에틴 조성물의 pH는 7.0이었다. 대조군으로는 Johnson &Johnson 사로부터 상업적으로 구입가능한 EPREXTM의 조성물에 해당하는, 각각 2000 IU 및 4000 IU의 에리스로포이에틴을 포함하고, 소듐 포스페이트 10 mM, NaCl 0.45%, Tween 80 0.03% 및 글리신 0.5%를 포함하고, 삼투압이 253 mOsm이고 pH가 6.9인 조성물 (이하 E-2000 및 E-4000 조성물이라 한다)을 사용하였다. 사용된 에리스로포이에틴은 자체적으로 생산된 것을 사용하였으며, 코팅되지 않은 고무 마개를 갖는 1ml 용량의 미리 충전된 시린지 (pre-filled syringe) (BD Hypak 1.0 ml long syringe)에 0.5ml 충진하여 사용하였다. PH of the erythropoietin composition of Table 1 and 2 was 7.0. Controls include 2000 IU and 4000 IU of erythropoietin, corresponding to a composition of EPREX ™ commercially available from Johnson & Johnson, respectively, 10 mM sodium phosphate, 0.45% NaCl, 0.03% Tween 80 and 0.5% glycine A composition having an osmotic pressure of 253 mOsm and a pH of 6.9 (hereinafter referred to as E-2000 and E-4000 composition) was used. The erythropoietin used was self-produced and 0.5 ml filled into a 1 ml pre-filled syringe (BD Hypak 1.0 ml long syringe) with an uncoated rubber stopper.

상기 표 1 및 2에 나타낸 조성물을 25℃에서 5 주 동안 배양기에 보관하면서 각 지정된 시간에 시료를 채취하여 크기 배제 크로마토그래피 (SEC-HPLC) 분석을 수행하였다. SEC-HPLC는 TOSOH TSK G3000 SW (7.5 mm ID x 600 mm L) 칼럼을 사용하고 1.5 mM 인산이수소칼륨, 8.1mM 디소듐 히드로겐 포스페이트, 0.4M NaCl를 포함하는 수용액 (pH 7.3)을 이동상으로 하여 0.6 ml/min의 유속으로 전개하였다. 시료는 100 ㎕ 씩 주입하였으며, 형광 검출기를 이용하여 280 nm의 여기 파장과 340nm의 방출 파장에서 검출하였다. Size exclusion chromatography (SEC-HPLC) analysis was performed by taking samples at each designated time while keeping the compositions shown in Tables 1 and 2 in the incubator at 25 ° C. for 5 weeks. SEC-HPLC uses a TOSOH TSK G3000 SW (7.5 mm ID x 600 mm L) column and an aqueous solution (pH 7.3) containing 1.5 mM potassium dihydrogen phosphate, 8.1 mM disodium hydrogen phosphate, 0.4 M NaCl as mobile phase. Developed at a flow rate of 0.6 ml / min. Samples were injected at 100 μl and detected using an fluorescence detector at an excitation wavelength of 280 nm and an emission wavelength of 340 nm.

도 1과 2는 각각 표 1과 2에 나타낸 각 조성물을 25 ℃에서 5 주 동안 보관한 후 SEC-HPLC로 분석한 결과를 나타내는 도면이다. 도 1에 나타낸 바와 같이, 본원 발명의 에리스로포이에틴, 프로필렌글리콜, 및 만니톨을 포함하는 조성물 (P4-2000)은 양성 대조군 (E-2000) 및 에리스로포이에틴과 프로필렌글리콜을 포함하는 조성물 (P2-2000)에 비하여, 에리스로포이에틴 함량이 약 8% 및 9% 높았다. 또한, 도 2에 나타낸 바와 같이, 본원 발명의 에리스로포이에틴, 프로필렌글리콜, 및 만니톨을 포함하는 조성물 (P2-4000)은 양성 대조군 (E-4000) 및 에리스로포이에틴과 프로필렌글리콜을 포함하는 조성물 (P2-2000)에 비하여, 에리스로포이에틴 함량이 각각 약 6.6% 및 약 5.7% 높았다. 이는 본원의 에리스로포이에틴 조성물이 에리스로포이에틴을 용기 벽 표면에 흡착 등에 의한 손실 없이 잘 보존할 수 있다는 것을 나타낸다. 1 and 2 are diagrams showing the results of analyzing by SEC-HPLC after storing each composition shown in Table 1 and 2 for 5 weeks at 25 ℃. As shown in FIG. 1, the composition comprising erythropoietin, propylene glycol, and mannitol of the present invention (P4-2000) is compared to the positive control (E-2000) and the composition comprising erythropoietin and propylene glycol (P2-2000). , Erythropoietin content was about 8% and 9% higher. In addition, as shown in Figure 2, the composition comprising erythropoietin, propylene glycol, and mannitol of the present invention (P2-4000) is a positive control (E-4000) and a composition comprising erythropoietin and propylene glycol (P2-2000) In comparison, the erythropoietin content was about 6.6% and about 5.7% higher, respectively. This indicates that the erythropoietin composition of the present application can well preserve erythropoietin without loss by adsorption or the like on the container wall surface.

실시예Example 2: Tween 20,  2: tween 20, 프로필렌글리콜Propylene glycol 및  And 만니톨이Mannitol 에리스로포이에틴의 순도에 미치는 영향 Effect of Purity on Erythropoietin

본 실시예에서는 Tween 20, 프로필렌글리콜 및 만니톨이 에리스로포이에틴의 순도에 미치는 영향을 조사하기 위하여 25 ℃ 및 40 ℃의 가혹 조건에서 5 주 동안 방치한 후 역상 크로마토그래피 (RP-HPLC)를 이용하여 에리스로포이에틴 순도를 조사하였다. In this example, to investigate the effects of Tween 20, propylene glycol and mannitol on the purity of erythropoietin, the erythropoietin purity was obtained by using reverse phase chromatography (RP-HPLC) after 5 weeks in harsh conditions of 25 ° C and 40 ° C. Was investigated.

본 실시예에 사용된 에리스로포이에틴 조성물은 시린지 당 4000 IU의 에리스로포이에틴을 포함하는 조성물을 사용하였으며, 각 조성물의 조성은 다음과 같다. The erythropoietin composition used in the present Example was used a composition containing 4000 IU of erythropoietin per syringe, the composition of each composition is as follows.

표 3. 4000 IU의 에리스로포이에틴을 포함하는 조성물Table 3. Composition comprising 4000 IU of erythropoietin

조성물Composition EPO (IU/시린지)EPO (IU / syringe) 소듐포스페이트 (mM)Sodium Phosphate (mM) NaCl (%)NaCl (%) 글리신 (%)Glycine (%) Tween 20 (%)Tween 20 (%) 프로필렌글리콜 (%)Propylene Glycol (%) 만니톨 (%)Mannitol (%) P1-4000P1-4000 40004000 1010 0.10.1 1.01.0 0.020.02 00 00 P2-4000P2-4000 40004000 1010 0.10.1 1.01.0 0.020.02 0.10.1 00 P3-4000P3-4000 40004000 1010 0.10.1 1.01.0 0.020.02 00 1.01.0 P4-4000P4-4000 40004000 1010 0.10.1 1.01.0 0.020.02 0.10.1 1.01.0

상기 표 3의 에리스로포이에틴 조성물의 pH는 7.0이었다. 대조군으로는 Johnson & Johnson 사로부터 상업적으로 구입가능한 EPREXTM의 조성물에 해당하는, 4000 IU의 에리스로포이에틴을 포함하고, 소듐 포스페이트 10 mM, NaCl 0.45%, Tween 80 0.03% 및 글리신 0.5%를 포함하고, 삼투압이 253 mOsm이고 pH가 6.9인 조성물을 사용하였다. 사용된 에리스로포이에틴은 자체적으로 생산된 것을 사용하였 으며, 코팅되지 않은 고무 마개를 갖는 1ml 용량의 미리 충전된 시린지 (pre-filled syringe) (BD Hypak 1ml long syringe)에 0.5ml 충진하여 사용하였다. PH of the erythropoietin composition of the said Table 3 was 7.0. Controls include 4000 IU of erythropoietin, corresponding to a composition of EPREX ™ commercially available from Johnson & Johnson, include sodium phosphate 10 mM, NaCl 0.45%, Tween 80 0.03% and glycine 0.5% This was 253 mOsm and had a pH of 6.9. The erythropoietin used was self-produced, and 0.5 ml filled in a 1 ml pre-filled syringe (BD Hypak 1ml long syringe) with an uncoated rubber stopper.

상기 표 3에 나타낸 조성물을 25℃ 및 40℃에서 5 주 동안 배양기에 보관하면 각 시간에 시료를 채취하여 역상 크로마토그래피 (RP-HPLC) 분석을 수행하였다. RP-HPLC는 Vydac C4 칼럼 (5 ㎛, 4.2mm ID x 250 mm L)을 사용하고 0.12% TFA의 완충용액 A와 0.1% TFA, 70% 아세토니트릴의 완충용액 B를 이동상으로 하여 0.5 ml/min의 유속으로 정해진 프로그램에 의하여 전개하였다. 시료는 100 ㎕ 씩 주입하였으며, UV 검출기를 이용하여 215 nm에서 검출하였다. When the composition shown in Table 3 was stored in the incubator for 5 weeks at 25 ℃ and 40 ℃ sample was taken at each time and subjected to reverse phase chromatography (RP-HPLC) analysis. RP-HPLC using a Vydac C4 column (5 μm, 4.2 mm ID × 250 mm L) and a mobile phase of buffer solution A of 0.12% TFA and buffer solution B of 0.1% TFA, 70% acetonitrile as 0.5 ml / min The program was developed according to the flow rate of. Samples were injected at 100 μl and detected at 215 nm using a UV detector.

도 3은 표 3에 나타낸 조성물을 25℃ (A) 및 40℃ (B)에서 5 주 동안 배양기에 보관하면 각 시간에 시료를 채취하여 역상 크로마토그래피 (RP-HPLC) 분석을 수행한 결과를 나타내는 도면이다. 도 3A에 나타낸 바와 같이, 25℃ 에서 본원 발명의 에리스로포이에틴, 프로필렌글리콜, 및 만니톨을 포함하는 조성물 (P4-4000)은 그 순도가 초기에 비하여 약 8.6% 감소하였으나, 대조군 (E-4000) 조성물은 그 순도가 초기에 비하여 15.0% 감소하였다. 도 3B에 나타낸 바와 같이, 40℃ 에서 본원 발명의 에리스로포이에틴, 프로필렌글리콜, 및 만니톨을 포함하는 조성물 (P4-4000)은 그 순도가 초기에 비하여 약 13.9% 감소하였으나, 대조군 (E-4000) 조성물은 그 순도가 초기에 비하여 19.4% 감소하였다. 이는 본원의 에리스로포이에틴 조성물이 종래의 에리스로포이에틴 조성물에 비하여, 에리스로포이에틴을 더 잘 안정화시켜 순도를 높게 유지할 수 있다는 것을 의미한다.FIG. 3 shows the results of reverse phase chromatography (RP-HPLC) analysis of samples taken at each time when the compositions shown in Table 3 were stored in the incubator for 5 weeks at 25 ° C. (A) and 40 ° C. (B). Drawing. As shown in FIG. 3A, the composition comprising erythropoietin, propylene glycol, and mannitol of the present invention at 25 ° C. (P4-4000) had a purity of about 8.6% lower than that of the initial stage, but the control (E-4000) composition was The purity was reduced by 15.0% compared to the initial stage. As shown in FIG. 3B, the composition comprising erythropoietin, propylene glycol, and mannitol of the present invention at 40 ° C. (P4-4000) had a purity of about 13.9% less than that of the initial stage, but the control (E-4000) composition was The purity was reduced by 19.4% compared to the initial stage. This means that the erythropoietin composition of the present disclosure can better stabilize erythropoietin and maintain high purity as compared to conventional erythropoietin compositions.

본 발명의 에리스로포이에틴 조성물에 따르면, 에리스로포이에틴을 안정하게 유지할 수 있고, 용기 벽 표면으로의 흡착 등을 통한 손실을 방지할 수 있다. According to the erythropoietin composition of the present invention, erythropoietin can be stably maintained, and loss through adsorption to the container wall surface and the like can be prevented.

Claims (2)

에리스로포이에틴, Tween 20, 프로필렌글리콜 및 만니톨을 포함하는, 저장 안정성 에리스로포이에틴 조성물.A storage stable erythropoietin composition comprising erythropoietin, Tween 20, propylene glycol and mannitol. 제1항에 있어서, 100 내지 100,000 IU의 에리스로포이에틴, 0.0002 내지 0.05%의 Tween 20, 0.005 내지 0.3%의 프로필렌글리콜 및 0.01 내지 3%의 만니톨을 포함하는 조성물.The composition of claim 1 comprising 100 to 100,000 IU of erythropoietin, 0.0002 to 0.05% Tween 20, 0.005 to 0.3% propylene glycol and 0.01 to 3% mannitol.
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