KR20070104293A - Mushrooms cultivation medium and preparation thereof - Google Patents
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Abstract
Description
도 1 내지 도 3은 본 발명에 따르는 배지를 이용하여 재배된 큰느타리버섯(새송이)에 함유된 징코플라본글리코사이드의 함유량을 측정한 HPLC그래프.1 to 3 are HPLC graphs for measuring the content of ginkgo flavone glycosides contained in the oyster mushroom (Culture) cultivated using the medium according to the present invention.
도 4는 본 발명에 따르는 배지를 이용하여 재배된 팽이버섯에 함유된 징코플라본글리코사이드의 함유량을 측정한 HPLC그래프.Figure 4 is an HPLC graph measuring the content of ginkgo flavone glycosides contained in the mushrooms cultivated using the medium according to the present invention.
도 5는 본 발명에 사용되는 은행잎박에 함유된 징코플라본글리코사이드의 함유량을 측정한 HPLC그래프.Figure 5 is an HPLC graph measuring the content of ginkgo flavone glycosides contained in ginkgo biloba used in the present invention.
도 6은 본 발명에 사용되는 추출가공된 은행잎박에 함유된 징코플라본글리코사이드의 함유량을 측정한 HPLC그래프.Figure 6 is an HPLC graph measuring the content of ginkgo flavone glycosides contained in the extract processed ginkgo leaf foil used in the present invention.
본 발명은 버섯 재배용 배지에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 인체의 혈액을 활성화시키는 효과를 가지는 것으로 잘 알려진 징코플라본글리코사이드를 함유하는 은행잎을 이용한 배지 및 그 제조방법에 관한 것이다. The present invention relates to a culture medium for mushroom cultivation, and more particularly, to a medium using a ginkgo leaf containing the ginkgo flavone glycoside known to have an effect of activating the blood of the human body and a method for producing the same.
담자균류에 속하는 버섯(mushroom)은 각종 유기물을 분해하여 성장 발육하는 자실체를 가지고 있으며 중요한 식품자원이면서 동시에 약용식물로 알려져 왔다. 최근에는 생활수준이 향상되어 국민보건에 관심이 고조되면서 청정농산물의 재배와 기능성 식품에 점점 관심이 집중되고 있다.Mushrooms (mushroom) belonging to basidiomycete have fruiting bodies that grow and decompose and decompose various organic materials, and have been known as important food resources and medicinal plants at the same time. Recently, as the standard of living has improved and the interest in public health has been increasing, attention has been focused on the cultivation of clean agricultural products and functional foods.
버섯은 그 종류에 따라 맛과 향이 독특하며 단백질, 비타민 기타 무기영양소를 많이 함유하고 있으며 특히 섬유소가 다량 함유되어 있어 미용, 건강용 식품이 됨은 물론 변비와 항암효과가 보고되고 있다.Mushrooms are unique in taste and aroma, and contain a lot of protein, vitamins and other inorganic nutrients. Especially, mushrooms contain a large amount of fiber, making them a beauty and health food, as well as constipation and anti-cancer effects.
종래의 버섯재배용 배지를 보면 원목을 이용하는 방법, 볏집을 주재료로 한 제품, 볏집과 왕겨를 주재료로 한 제품, 볏집이나 톱밥을 주재료로한 제품 등이 개발된 바 있다.In the conventional mushroom cultivation medium, a method of using wood, a product mainly made of crests, a product mainly made of crests and chaff, and a product made of crests or sawdust as a main material have been developed.
원목의 경우에 있어서 참나무 등의 원목은 그 습득이 용이하지 않고 원가상승의 요인이 되어 왔다. 그뿐만 아니라 많은 재배면적이 필요하고 많은 인력이 소요될 뿐만 아니라 인력을 적기에 구하기가 곤란하였다. 또한 재배기간도 봄, 가을에 제한되고 5~6년 장기간 소요된다. 이러한 단점을 개선하기 위하여 각종 식물성 섬유물질을 분쇄하거나 절단하여서 되는 톱밥배지, 볏집배지 및 왕겨배지 등 인공배지가 개발된 바 있다.In the case of solid wood, solid wood such as oak is not easy to learn and has been a factor in the cost increase. Not only that, it requires a lot of cultivation area, a lot of manpower, and it is difficult to find manpower in a timely manner. The growing season is also limited in spring and autumn and takes a long period of 5-6 years. In order to improve these disadvantages, artificial media such as sawdust badges, crest badges and chaff badges, which have been pulverized or cut, have been developed.
그러나, 이러한 배지들은 버섯균사의 활성화에 적잖은 문제점이 있으며, 이를 인공배지의 혼합, 살균, 접종단계에 있어 상당한 노동력이 소요되고 있는 단점이 있다.However, these mediums have a considerable problem in the activation of mushroom hyphae, there is a disadvantage that takes a considerable labor in the mixing, sterilization, inoculation step of artificial medium.
또한, 대한민국 특허출원 제90-6943호에는 낙면을 주재료로 하고 볏집이나 왕겨, 활엽수 톱밥 또는 활엽수의 원목가지 등을 부재료로 하며, 미강, 석고, 소석회 등을 첨가물로 하는 느타리버섯을 재배하는 방법이 개시되어 있다.In addition, Korean Patent Application No. 90-6943 discloses how to grow oyster mushrooms with assorted raw materials such as crests, rice hulls, hardwood sawdust or hardwood branches as additives, and rice bran, gypsum, and lime. Is disclosed.
대한민국 특허출원 제96-931호에는 산업폐자원인 목재소의 톱밥, 양계장의 닭똥, 두부공장에서 나오는 비지를 적절히 가공 배합하여 제조하는 버섯재배 배지의 제조방법이 개시되어 있다.Republic of Korea Patent Application No. 96-931 discloses a method for producing a mushroom cultivation medium prepared by properly processing and blending the waste from wood sawdust, poultry chicken poultry, tofu factory of industrial waste resources.
대한민국 특허출원 제96-43851호에는 통상의 버섯재배용 인공배지에 왕겨 등의 탄화숯 또는 활성탄을 5~10 첨가하여 느타리버섯, 표고버섯 등 버섯류를 재배하여 인공배지에 균사활착을 촉진하며, 영양분해 능력을 높이고 보수성을 좋게 할 뿐만 아니라 배지내 통기성을 향상시켜 버섯의 증수효과를 현저히 향상시키는 인공배지 조성물이 개시되어 있다.Korean Patent Application No. 96-43851 cultivates mushrooms such as oyster mushroom and shiitake mushroom by adding 5 ~ 10 charcoal or activated charcoal such as chaff to artificial mushroom culture medium to promote mycelial adhesion to artificial medium. There is disclosed an artificial medium composition that not only improves the capacity and improves water retention, but also improves the water vaporizing effect of the mushroom by improving the air permeability in the medium.
또한, 대한민국 특허출원 제04-61230호에는 버섯재배용 배지조성물에 버섯에 이행시킬 목적으로 소정함량의 크롬공급원을 함유한 버섯재배용 배지조성물 및 버섯재배용 배지에 소정함량의 크롬공급원을 첨가하고, 버섯을 상기 배지에서 배양함으로써 크롬이 다량으로 함유된 버섯을 제조하는 방법이 개시되어 있다. In addition, Korean Patent Application No. 04-61230 adds a predetermined amount of chromium source to the mushroom cultivation medium composition and mushroom cultivation medium containing a predetermined amount of chromium source for mushroom cultivation medium composition to mushroom. A method for producing a mushroom containing a large amount of chromium by culturing in the medium is disclosed.
한편, 은행잎에 관해서 살펴보면, 대한민국특허공개 특1998-0008012(공개일 1998. 4. 30)에서는 콜레스테롤의 침착에 의한 동맥경화 등의 심장질환을 예방 또는 방지하기 위해서 임상에서 노인성 치매를 포함한 지적 능력의 저하, 평행장애, 말초 동맥의 폐쇄, 혈액 응고, 동맥경화증의 치료에 사용되고, 노화방지, 항암작용, 망막에 의한 작용, 발모 촉진작용 등이 있어 의약품으로 뿐만 아니라, 건강식 품, 화장품 등 다양한 형태로 개발되고 있는 은행잎의 특성을 이용하여, 은행잎 분말 사료로 조제하여 산란계에 급여하면 은행잎 속의 플라보노이드 등의 유효성분들이 계란에 이행되어 은행잎이 가지고 있는 상기한 효과를 얻을 수 있음을 보고한 바 있다. 국내에서는 몇몇 제약회사에서 은행잎 엑기스 개발에 대한 연구를 진행하고 있어 훌륭한 결과를 얻고 있는 실정이며, 독성, 약리 및 임상실험 등의 체계적인 연구가 활발하게 진행되고 있는 실정이다. 외국에서는 특히, 유럽지역에서는 현재 은행잎 엑기스제제(정제, 액제, 좌제, 주사제 등)의 단미제 및 복합제로 연간 5억불 이상의 매출고를 기록하고 있으며, 이에 대한 화학적, 약리학적, 임상학적인 연구가 전세계적으로 활발히 진행되고 있다. 우선 화학적인 연구 결과를 살펴보면 다음과 같다. On the other hand, ginkgo leaves, Korean Patent Laid-Open Publication No. 1998-0008012 (published Apr. 30, 1998) discloses the ability of cognitive ability including senile dementia in clinical practice to prevent or prevent heart disease such as atherosclerosis caused by the deposition of cholesterol. It is used for the treatment of hypoplasia, parallel disorders, obstruction of peripheral arteries, blood coagulation and atherosclerosis, and it is not only a medicine, but also a health food, cosmetics, etc. Using the characteristics of the ginkgo biloba being developed, it has been reported that the active ingredients such as flavonoids in the ginkgo biloba can be transferred to the egg to obtain the above-described effect that the ginkgo biloba has in the egg when prepared by ginkgo biloba powder feed. In Korea, some pharmaceutical companies are conducting research on the development of ginkgo biloba extract, which has obtained excellent results, and systematic researches on toxicity, pharmacology, and clinical trials are being actively conducted. In foreign countries, especially in Europe, ginseng extract extracts (tablets, liquids, suppositories, injections, etc.) are single and combination products, with annual sales of more than $ 500 million. Chemical, pharmacological, and clinical studies of this It is actively underway. First, the results of chemical research are as follows.
은행잎 엑기스의 주 유효성분인 GFG의 각 성분에 대한 분리 및 함량 분석연구와 은행잎 엑기스에도 소량함유되고 있으며 최근 들어 크게 각광을 받고 있는 징코라이드(ginkgolides) 및 빌로바라이드(bilobalide)에 대한 분리 및 특성에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다. 그리고 최근 항암효과가 있음이 밝혀진 세븐롱체인페놀(Seven Long Chain Phenols) 화합물인 아나카딕엑시드(Anacardic Acid), 빌로볼(Bilobol) 및 카다놀(Cardanol)을 1986년 일본의 Tokyo 약대 Itokawa 등에 의해 분리확인되었으며 그 밖의 특이 화합물인 빌로베틴(Bilobetin), 징크게틴(Ginkgetin), 이소징크게틴(Isoginkgetin), 시아도피티(Sciadopity) 등의 비플라본(Biflavones)이 검출되는 등 은행잎에 들어 있는 유효 생리활성 물질들에 대한 화학적 연구가 폭넓게 이루어지고 있다. 약리학적인 연구결과를 종합해보면 다음과 같다. Isolation and content analysis of each component of GFG, the main active ingredient of ginkgo biloba extract, and small amounts in ginkgo biloba extract, and separation and characteristics of ginkgolides and bilobalide, which have recently gained much attention. There is an active research on. In addition, Anacardic Acid, Bilobol, and Cardanol, Seven Long Chain Phenols compounds, which have recently been found to have an anticancer effect, were isolated by Tokyo Pharmaceutical University Itokawa et al. In 1986. Other specific compounds, such as Bilobetin, Ginkgetin, Isoginkgetin, and Siadopity, are detected. There is extensive chemical research on effective bioactive substances. The results of the pharmacological research are as follows.
은행잎을 의약품으로 처음 연구 개발한 곳은 독일 Dr .Schwabe社로 Peter 등 연구원들이 1966년 최초의 주성분인 징코플라보노이드(Ginkgoflavonoids)를 분리 발표하면서 그들이 말초 및 뇌혈관 순환장애에 치료효과가 있음을 발견하였다. 그 후 계속적인 약리작용 및 기전을 연구한 결과 말초혈관 확장 및 혈액순환 촉진, 혈관의 저항감소 및 콜레스테롤 감소, 혈관 항경련 작용 등 혈액 및 혈관에 대한 약리작용을 알아냈으며 최근 프랑스 연구소에서 뇌혈류량 증가, 뇌대사 촉진 등의 뇌기능 순환개선 작용을 나타내고 있음을 보고하였다. 그리고 최근 새로운 혈소판 응집촉진물질(Platelet-Activating Factor)이 발견되면서 은행잎과 은행나무 뿌리에 소량함유되어있는 징코라이드(Ginkgolides)의 혈소판 응집저해작용에 대한 연구가 전세계적으로 유명한 생화학자, 약리학자들에 의해 깊이 연구되고 있고 그 결과 현재 혈소판 응집저해, 수술 및 저혈압 등에 의한 쇼크 방지, 항알레르기(천식치료효과 등), 면역기는 증가, 프로스타글란딘(Prostaglandin) 생성저해 등 PAF-Antagonist는 향후 알레르기, 암, 류마치스 등의 인간이 정복하지 못한 불치질환이나 그 영역에 획기적인 예방약물로 기대되고 있어 은행나무에 함유하고 있는 징코라이드(Ginkgolides)는 앞으로 인류에게는 없어서는 안 될 약물이 될 것이다. The first research and development of ginkgo biloba as a medicine was Dr. Schwabe, Germany, and researchers, in 1966, released Ginkgoflavonoids, the first active ingredient, and found that they had therapeutic effects on peripheral and cerebrovascular disorders. . Subsequent studies of pharmacological action and mechanisms revealed pharmacological effects on blood and blood vessels, including peripheral blood vessel expansion and blood circulation, blood vessel resistance and cholesterol reduction, and vascular antispasmodic effects. It has been reported that the brain function is improved, such as the promotion of brain metabolism. And recently, with the discovery of a new platelet-activating factor, biochemists and pharmacologists around the world have studied the platelet aggregation inhibitory effects of Ginkgolides in small amounts in the ginkgo leaves and ginkgo roots. PAF-Antagonist is currently studying allergies, cancers, etc., including deep platelet aggregation, prevention of shock from surgery and hypotension, anti-allergic effects (asthma, etc.), increased immunity, and inhibition of prostaglandin production. Ginkgolides contained in Ginkgo biloba will be an indispensable drug for humanity as it is expected to be an incurable disease that has not been conquered by humans such as rheumatism or a groundbreaking preventive drug in the area.
또한 은행잎에서만 존재하는 빌로바라이드(Bilobalide) 화합물은 현재 독일에서 새로운 신경계 약물로서 깊이 연구하고 있는데 주로 뇌신경계, 척수신경계, 근신경계 및 신경전달물질(Neurotransmitter)에 대한 약효를 입증하여 향후 노인성치매, 노인성 천식, 심장질환 등과 같은 노인성 질환의 치료약물로써, 그리고 퇴행 성 뇌 및 척수신경계 질환의 치료제로써 개발하기 위한 노력이 집중적으로 진행되고 있다. 그밖에 은행나무에 특이하게 존재하는 유효생리활성물질에 대해서도 항암, 항바이러스(Anti-Viral), 저해제(Anti-Feedant) 등의 많은 약리학적 연구가 계속 진행되고 있어 머지않아 또 새로운 분야의 물질이 발견될 것을 의심치 않는다. 특히 징코플라본글리코사이드(Ginkgoflavonglycosides)를 주성분으로 함유하고 있는 은행잎 추출물에 대한 생체내 이용과정 및 약리학적 연구가 각국에서 많은 약리학자 ,생리학자들에 의해 1960년 말부터 깊이 진행되어 왔다. In addition, bilobalide compounds, which are present only in ginkgo biloba, are currently being studied in Germany as a new neurological drug. They mainly proved their effects on the brain, spinal nerve, musculature, and neurotransmitters. Efforts are being made to develop medicinal drugs for senile diseases such as senile asthma and heart disease, and to treat degenerative brain and spinal cord nervous system diseases. In addition, many pharmacological studies, such as anti-cancer, anti-viral, and anti-Feedant, continue to be conducted on effective physiologically active substances specific to ginkgo biloba. Do not doubt to be. In particular, the bioavailability and pharmacological studies of ginkgo biloba extract, which contains Ginkgoflavonglycosides as a main ingredient, have been conducted by many pharmacologists and physiologists in various countries since the late 1960s.
본 발명의 목적은 성인병, 특히 노인성 치매, 뇌혈관 및 말초혈관장애 예방에 좋은 징코플라본글리코사이드(Ginkgoflavonglycosides, 이하, 'GFG'라 함)성분, 보다 구체적으로 컴페롤(Kaempferol), 이소르함네틴(Isorhamnetin) 및 퀘르세틴(Quercetin) 성분을 함유하는 버섯을 효과적으로 재배할 수 있는 배지와 이러한 배지를 제조하는 방법을 제공하는 데에 있다. An object of the present invention is a ginkgoflavonglycosides (GFG) components, which are good for preventing adult diseases, especially senile dementia, cerebrovascular and peripheral vascular disorders, more specifically kaempferol, isolehaminetin ( The present invention provides a medium capable of effectively cultivating mushrooms containing Isorhamnetin) and quercetin components and a method for producing such a medium.
상기와 같은 목적을 달성한 본 발명은 배지 건조중량기준으로 통상의 버섯배지성분 40~90중량%와 입자크기 0.1~0.5mm의 건조 은행잎박 10~40중량%를 함유하며, 고압 살균기에서 121℃(1.2㎏/㎠)에서 60~90분 멸균 후 pH가 6.4~6.7이고, 수분함량이 63~67중량% 인 것을 특징으로 하는 버섯 재배용 배지를 제공한다. The present invention, which achieves the above object, contains 40 to 90% by weight of a conventional mushroom medium component and 10 to 40% by weight of dried ginkgo leaf foil having a particle size of 0.1 to 0.5 mm, based on the dry weight of the medium, and 121 ° C. in an autoclave. (1.2㎏ / ㎠) in 60 to 90 minutes after sterilization provides a culture medium for mushroom cultivation, characterized in that the pH is 6.4 ~ 6.7, the moisture content is 63 ~ 67% by weight.
또한, 본 발명은 건조중량기준으로 통상의 버섯배지성분 40~90중량%와 입자크기 0.1~0.5mm의 건조 은행잎박 10~40중량%를 혼합하고 물을 첨가하는 단계, 얻어진 혼합물을 내열용기에 충전하여 고압 살균기에 넣고 온도 121℃(1.2㎏/㎠)에서 60~90분 동안 멸균하여 pH 6.4~6.7, 수분함량 63~67중량%의 배지를 제조하는 단계로 이루어지는 것을 특징으로 하는 버섯 재배용 배지의 제조방법을 제공한다. In addition, the present invention is a dry weight of 40 to 90% by weight of the mushroom medium component and 10 to 40% by weight dry ginkgo leaf foil of 0.1 ~ 0.5mm particle size and adding water, the mixture obtained in the heat-resistant container Filled into a high-pressure sterilizer sterilized for 60 to 90 minutes at a temperature of 121 ℃ (1.2㎏ / ㎠) to produce a medium of pH 6.4 ~ 6.7, moisture content 63 ~ 67% by weight of the medium for mushroom cultivation, characterized in that It provides a method of manufacturing.
이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명하기로 한다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail.
본 발명에 따르는 버섯 재배용 배지는 건조중량기준으로 통상의 버섯배지성분 40~90중량%와 입자크기 0.1~0.5mm의 건조 은행잎박 10~40중량%를 함유한다. The mushroom cultivation medium according to the present invention contains 40 to 90% by weight of conventional mushroom medium components and 10 to 40% by weight of dried ginkgo leaf foil having a particle size of 0.1 to 0.5mm.
본 발명에 있어서, 은행잎박은 은행잎을 수분함량 10%이하가 되도록 건조한 후 입자크기가 0.1~0.5mm가 되도록 분쇄한 것이다. In the present invention, the ginkgo biloba foil is ground to dry the ginkgo leaf to less than 10% moisture content and then pulverized to a particle size of 0.1 ~ 0.5mm.
은행잎박은 통상 6월에서 10월초 사이에 채취되는 은행잎을 의약용 은행잎추출물을 얻기 위하여 분쇄하여 에탄올 등과 같은 추출용매에서 일부 GFG성분을 추출하고 남은 은행잎박에서 추출용매를 제거하고 건조한 것을 사용할 수도 있고, 추출가공되지 않은 은행잎을 분쇄, 건조한 것을 사용할 수도 있다. 은행잎에는 통상 3.45%의 GFG를 함유하고 있는 것으로 알려져 있으며, 상기 추출용매로 추출가공된 은행잎박에는 GFG함량이 1.70% 정도 잔류되어 있다. Ginkgo leaf gourd is usually pulverized to obtain a medicinal ginkgo leaf extract obtained from June to early October to extract some GFG components from an extraction solvent such as ethanol, remove the extraction solvent from the remaining ginkgo leaf gourd may be used dry, It is also possible to grind and dry ginkgo leaves that have not been extracted. Ginkgo biloba leaves are generally known to contain 3.45% of GFG. Ginkgo biloba leaves extracted and processed with the extracting solvent have a GFG content of about 1.70%.
본 발명의 배지중에 은행잎박의 함량은 배지 건조중량기준으로 10~40중량%, 보다 바람직하게 15~35중량%이다. 은행잎박의 함량이 10중량% 보다 적은 경우에는 버섯의 GFG성분의 흡수량이 적어 약리학적 기능을 갖는 고품질의 버섯을 재배하는 것이 어렵고, 또한 40중량% 보다 많은 경우에는 버섯이 흡수할 수 있는 GFG성분은 무한대로 흡수되지 않는 단점이 있어 경제성이 떨어지며, 또한 버섯 생육이 지연되고, 일부 사멸되는 현상이 발생할 수도 있다. 또한 은행잎박의 크기는 0.1~0.5mm가 적당한데, 그 이유는 은행잎박의 크기가 상기한 범위에서 벗어나면 배지제조시 혼합이 어렵고, 수분공급이 불균일하여 균사배양이 불균일하고, 양호한 수량으로 버섯을 재배하는 것이 어렵게 된다. The content of ginkgo leaf foil in the medium of the present invention is 10 to 40% by weight, more preferably 15 to 35% by weight based on the dry weight of the medium. If the content of ginkgo biloba is less than 10% by weight, it is difficult to cultivate high-quality mushrooms with pharmacological function due to the low absorption of GFG components of the mushrooms. Has the disadvantage that it is not absorbed indefinitely, it is less economical, and may also delay the growth of mushrooms, and may cause some death. In addition, the size of the ginkgo leaf gourd is 0.1 ~ 0.5mm is suitable, because if the size of the ginkgo leaf gourd out of the above range, it is difficult to mix during the production of the medium, the water supply is uneven, the mycelial culture is uneven, the mushrooms in good quantity It is difficult to grow them.
본 발명의 배지는 고압 살균기에서 121℃(1.2㎏/㎠)에서 60~90분 멸균 후 pH가 6.4~6.7이고, 수분함량이 63~67중량%이다. 만일 배지조성물의 멸균후 pH가 6.4 미만이거나 6.7을 초과할 경우에는 균사의 생장불량이나 수량 감소의 문제가 발생할 수 있다. pH는 패화석의 함량으로 조절하는 것이 바람직하다. The medium of the present invention has a pH of 6.4 to 6.7 after sterilization at 121 ° C. (1.2 kg / cm 2) for 60 to 90 minutes in an autoclave, and has a moisture content of 63 to 67 wt%. If the pH is less than 6.4 or more than 6.7 after sterilization of the media composition, problems of poor growth or yield of mycelia may occur. The pH is preferably adjusted by the content of calcite.
은행잎박 이외에 본 발명의 배지에 사용될 수 있는 버섯배지성분은 당분야에 잘 알려져 있으며, 그 바람직한 예로는 미송톱밥, 밀기울, 패화석, 미강, 소맥피, 콘코프 등이 있으며, 이러한 통상의 성분들은 재배하고자 하는 버섯의 종류에 따라 적의 선택될 수 있다. 예를 들어 큰느타리버섯 재배용 배지에는 미송톱밥, 밀기울, 패화석을 사용하는 것이 바람직하고, 팽이버섯의 경우에는 미강, 소맥피, 콘코프, 밀기울, 패화석을 사용하는 것이 바람직하다. Mushroom medium that can be used in the medium of the present invention in addition to the ginkgo leaf gourd is well known in the art, the preferred examples thereof are rice pine sawdust, bran, calcite, rice bran, wheat bran, corn corp, etc., these conventional ingredients are grown The enemy can be chosen according to the type of mushroom to be desired. For example, it is preferable to use rice pine sawdust, wheat bran, and chalcedony in the medium for growing oyster mushrooms, and rice bran, wheat bran, corn cob, bran, and calcite in the case of the top mushroom.
본 발명의 배지는 건조중량기준으로 통상의 버섯배지성분 40~90중량%와 입자크기 0.1~0.5mm의 건조 은행잎박 10~40중량%를 혼합하고, 물을 첨가하여 내열용기에 충전하고 나서, 고압 살균기에 넣고 온도 121℃(1.2㎏/㎠)에서 60~90분 동안 멸균하여 pH 6.4~6.7, 수분함량 63~67중량%이 되도록 하는 것에 의해 제조될 수 있다. The medium of the present invention is a dry weight of 40 to 90% by weight of the mushroom medium component and 10 to 40% by weight dry ginkgo biloba leaf particle size of 0.1 ~ 0.5mm mixed with water, and then filled with a heat-resistant container, It can be prepared by sterilizing at a temperature of 121 ° C. (1.2 kg / cm 2) for 60 to 90 minutes in a autoclave to pH 6.4 to 6.7 and a water content of 63 to 67 wt%.
이와 같이 제조되는 배지를 이용하여 버섯을 재배하는 방법을 예를 들어 설명하면, 도 7에 나타낸 바와 같이 에 대해서 설명하면, 우선 입병된 배지에 버섯종균을 접종하여 온도 15~16℃, 습도 85~95%에서 29 내지 31일간 배양하고, 상기 배양이 완료된 후 잡균을 선별하고 접종원을 제거하여 온도 16~18℃, 습도 90~95%에서 7 내지 8일간 발아시킨 다음, 발아된 자실체를 온도 14~15℃, 습도 85~90%에서 11일 내지 12일간 자실체를 생육하면 얻고자 하는 버섯을 수확하게 된다.Referring to the method of cultivating mushrooms using the medium prepared as described above, for example, as shown in Figure 7, first, inoculate the mushroom spawn in the inoculated medium,
상기와 같은 방법으로 재배된 버섯은 징코플라본글리코사이드의 함유량이 생육버섯의 종류에 따라 0.170 ~ 0.296의 범위내로 함유되게 된다. Mushrooms cultivated in the same manner as described above will contain the content of ginkgo flavone glycosides in the range of 0.170 ~ 0.296 depending on the growth mushroom.
이하, 본 발명을 바람직한 실시예를 들어 설명하면 다음과 같으며, 하기의 실시예로 본 발명을 한정하는 것은 아니다. Hereinafter, the present invention will be described with reference to preferred embodiments as follows, but the present invention is not limited to the following examples.
하기의 실시예에서는 큰느타리버섯(새송이)과 팽이버섯 재배용으로 배지를 제조하여 실시하였다. 또한, 사용된 은행잎박은 은행잎을 건조후 분쇄하고 추출용매로 GFG성분을 추출한 후 폐기되는 은행잎박으로부터 추출용매를 전부 제거하고 건조한 것을 사용하였다. 추출전과 추출후의 은행잎에 잔류하는 GFG함량은 다음과 같은 방법으로 측정하였다. In the following examples, a medium was prepared for cultivation of the Great Pleurotus eryngii (Pulture) and Enoki mushroom. In addition, the ginkgo leaf foil used was dried after crushing the ginkgo biloba leaves, extracting the GFG component with an extraction solvent, and removing all the extraction solvent from the discarded ginkgo leaf foil was used. The GFG content remaining in the ginkgo leaves before and after extraction was measured by the following method.
1) 추출전 은행잎박 1) Ginkgo leaf gourd before extraction
- 은행잎박: 80g-Ginkgo leaf gourd: 80g
- 70% 메탄올: 720㎖70% methanol: 720 ml
- 추출액: 612㎖(85%)Extract: 612 ml (85%)
- 수율: 20%Yield: 20%
- GFG 함량: 3.45%(Q=1.174, K=1.736, I=0.539) (도 5 참조)GFG content: 3.45% (Q = 1.174, K = 1.736, I = 0.539) (see FIG. 5)
2) 추출후 은행잎박2) Ginkgo leaf gourd after extraction
- 은행잎박: 80g-Ginkgo leaf gourd: 80g
- 70%메탄올: 720㎖70% methanol: 720 ml
- 추출액: 634㎖(88.2%)Extract: 634 ml (88.2%)
- 수율: 6.19%Yield: 6.19%
- GFG함량: 1.70%(Q=0.59, K=0.84, I=0.27) (도 6 참조)GFG content: 1.70% (Q = 0.59, K = 0.84, I = 0.27) (see Fig. 6)
* 본 발명에 따라 생산된 버섯에서 은행잎 성분을 추출하기 위한 방법* Method for extracting ginkgo biloba components from mushrooms produced according to the present invention
건조 버섯 50g과 70% 메탄올 450ml을 둥근 플라스크(1000ml)에 넣어 물 온도 36도에서 회전시키며 12시간 정도 중탕시켜 추출한 후, 여과하여 여과액을 얻고, 얻어진 여과액을 둥근 플라스크에 넣어 50ml이 되도록 감압 농축한다. 이때 배스(Bath)의 물 온도를 68℃로 세팅한다. 분액 깔떼기에 농축액과 농축액의 80% 양으로 N-butanol을 첨가하여 (이때 사용한 N-butanl은 P.W와 혼합시 상층액을 사용) 흔들어 혼합 후 스탠드에 고정하여 20-30분 후 층분리가 되면 상층a은 보관하고, 하층a은 다시 위와 같은 방법을 1회 더 반복하여 상층b와 하층을 분리한다.(상층a:37-38ml, 하층a: 51-54ml, 상층b: 40-41ml, 하층b:50-54ml)50 g of dried mushrooms and 450 ml of 70% methanol were put in a round flask (1000 ml), rotated at a water temperature of 36 ° C, extracted by stirring for 12 hours, filtered and the filtrate was obtained. The filtrate was put in a round flask and reduced to 50 ml. Concentrate. At this time, the water temperature of the bath (Bath) is set to 68 ℃. Add N-butanol to the separatory funnel with 80% of the concentrate and concentrate (the N-butanl used at this time uses the supernatant when mixed with PW). The upper layer a is stored, and the lower layer a is repeated once more to separate the upper layer b and the lower layer (upper layer a: 37-38 ml, lower layer a: 51-54 ml, upper layer b: 40-41 ml, lower layer). b: 50-54 ml)
상층A(상층a와 상층b을 혼합(77-79ml))를 P.W로 세척한다. 이때 사용되는 P.W는 상층 A의 33%의 양으로 한다. 상층 A와 P.W를 분액깔떼기에 넣어 혼합 후 20-30분 후 층이 분리되면 상층B(75-78ml)를 둥근 플라스크에 넣어 감압 농축하여 건조 시킨다. 이때 2-3번 메탄올을 첨가하면서 농축 건조한다.Wash the upper layer A (mixing the upper layer a and the upper layer b (77-79 ml) with P.W. The P.W used at this time is 33% of the upper layer A. After mixing the upper layer A and P.W into the separatory bed, after 20-30 minutes, when the layers are separated, the upper layer B (75-78ml) is put into a round flask and concentrated under reduced pressure to dry. At this time, 2-3 times methanol and concentrated to dryness.
* 생산된 버섯의 GFG 함량을 측정하기 위한 HPLC 의 측정조건 * Measurement conditions of HPLC for measuring the GFG content of the produced mushroom
1. 조건- 온도 25도1. Condition-
용매-메탄올: 물: 빙초산 = 30: 40 :2Solvent-Methanol: Water: Glacial Acetic Acid = 30: 40: 2
유속(Flow): 1 ml/minFlow rate: 1 ml / min
UV: 365nmUV: 365nm
2. 1.5N 2. 1.5N HclHcl 제조 Produce
35wt%Hcl:water=1:635wt% Hcl: water = 1: 6
3. 샘플 제조3. Sample manufacture
상기 농축건조물에 methanol 30ml과 1.5N Hcl 20ml을 첨가 혼합하여 바이알(10ml)에 2/3정도 채운 후 완전 밀봉하여 25분 동안 가수분해시킨 다음, 얼음물에 급냉각시켜 여과한다. (0.45㎛ 필터를 사용)30 ml of methanol and 20 ml of 1.5N Hcl were added to the concentrated dried mixture, and the vial (10 ml) was filled in about 2/3, completely sealed, hydrolyzed for 25 minutes, and then rapidly cooled in iced water and filtered. (0.45㎛ filter used)
4. 4. ColumnColumn
C18 4㎛ 사용C 18 4㎛ use
5. 표준시료 제조5. Standard Sample Manufacturing
50ml 플라스크(Volumetric Flask)에 Quercetin Dihydrat, Kampferol, Isorhamnetin을 5mg, 5mg, 3mg을 넣은 후 methanol을 첨가하여 눈금에 맞춘 후 마개로 막고 3-5분 정도 초음파로 디게스드(Degased)하여 냉장 보관한다.Add 5 mg, 5 mg, 3 mg of Quercetin Dihydrat, Kampferol, or Isorhamnetin in a 50 ml flask (Volumetric Flask), add methanol to adjust the scale, stop with a stopper, and degassed for 3 to 5 minutes in ultrasonic storage.
6. 실험6. Experiment
용매를 2-3시간 정도 흘려 안정화를 찾은 후 표준 시료를 3번 정도 인젝션(injection) 후 그래프 면적중 가운데 값을 정한다.After stabilization by flowing the solvent for 2-3 hours, the standard sample is injected 3 times, and the center value of the graph area is determined.
샘플을 인젝션하여 각각의 성분 Quercetin Dihydrat, Kampferol, Isorhamnetin의 양을 알고 표준시료와 대비하여 성분들의 양을 알 수 있다.Samples can be injected to know the amounts of each component Quercetin Dihydrat, Kampferol, and Isorhamnetin, and the amount of the components compared to the standard sample.
* GFG 함량 계산방법 * GFG content calculation method
샘플 면적의 값/표준시료 면적의 값× 분자량× 표준품량Value of sample area / value of standard sample area x Molecular weight x Standard quantity
1)분자량1) Molecular weight
Quercetin Dihydrat: 2.504Quercetin Dihydrat: 2.504
Kampferol: 2.588Kampferol: 2.588
Isorhamnetin: 2.437Isorhamnetin: 2.437
2)표준품량2) Standard quantity
-표준시료 제조시 첨가된 Quercetin Dihydrat, Kampferol, Isorhamnetin 각각의 양-The amount of Quercetin Dihydrat, Kampferol, and Isorhamnetin added in the preparation of the standard sample.
3)GFG값3) GGF value
GFG = Quercetin Dihydrat값 + Kampferol값 + Isorhamnetin값GFG = Quercetin Dihydrat + Kampferol + Isorhamnetin
[실시예 1 내지 실시예 3][Examples 1 to 3]
표 1에 나타낸 바와 같은 양으로 입자크기 0.1~0.5mm의 건조 은행잎박, 미송 톱밥 및 밀기울 및 패화석을 혼합하고, 물을 첨가하여 850cc의 폴리프로필렌 병에 담아 121℃(1.2㎏/㎠)에서 60분 내지 90분동안 살균하고 20℃ 이하로 냉각시켜 배지를 제조하였다. Dry ginkgo leaf gourd, unripe sawdust, wheat bran and crushed stone with a particle size of 0.1 ~ 0.5mm in the amount as shown in Table 1, add water and put it in a polypropylene bottle of 850cc in 60 ℃ at 121 ℃ (1.2㎏ / ㎠). The medium was prepared by sterilization for minutes to 90 minutes and cooling to 20 ° C. or less.
크린벤치(class 1000)에서 제조된 배지가 건조중량기준 181g 충전된 850cc PP병에 큰느타리버섯종균을 5~8g의 양으로 접종하고, 온도 15~16℃, 습도 85~95%의 환경에서 29 내지 31일간 배양한 후, 잡균을 선별하고 접종원을 제거하여 온도 16~18℃, 습도 90~95%의 환경에서 7 내지 8일간 발아시켜 발아된 자실체를 온도 14~15℃, 습도 85~90%환경에서 11일 내지 12일간 생육하였다. 생육된 버섯의 GFG성분함량을 측정하였고, 배지의 특성 및 버섯의 생육과정별 특성(버섯 재배시 버섯 균사 생장, 산도, 생육특성, 자실체특성)을 관찰하였다. 그 결과는 표2 내지 6에 제시된다. A 850cc PP bottle filled with 181g of dry media based on dry weight was inoculated with 5 to 8g of large sized mushroom spawn, in a temperature of 15 ~ 16 ℃ and a humidity of 85 ~ 95%. After culturing for 31 to 31 days, various bacteria were screened and the inoculum was removed, and germinated fruiting bodies were germinated for 7 to 8 days in an environment at a temperature of 16 to 18 ° C. and a humidity of 90 to 95%, for a temperature of 14 to 15 ° C. and a humidity of 85 to 90%. It grew in the environment for 11 to 12 days. The GFG content of the grown mushrooms was measured, and the characteristics of the culture medium and the mushroom growth process (mushroom mycelial growth, acidity, growth characteristics, and fruiting body characteristics) were observed. The results are shown in Tables 2-6.
균사 생장: 직경 30㎜ 시험관에서 측정Mycelial growth: measured in a test tube with a diameter of 30 mm
자실체 특성의 경도조건: 거리 10㎜, 속도 1.0㎜/sec, Φ 5㎜Hardness condition of fruiting body characteristics: distance 10㎜, speed 1.0㎜ / sec,
[비교예 1]Comparative Example 1
은행잎박을 첨가하지 않고 표 1에 제시되는 양으로 조성된 배지를 이용하여 상기 실시예과 같은 방법으로 버섯을 생육하였고, 생육된 버섯을 본 발명의 실험방법에 따라 GFG성분함량을 측정하였고, 배지의 특성 및 버섯의 생육과정별 특성을 관찰하였다, 그 결과는 표 2 내지 6에 제시된다. Mushrooms were grown in the same manner as in Example using the medium prepared in the amount shown in Table 1 without adding ginkgo leaf gourd, and the grown mushrooms were measured for GFG content according to the experimental method of the present invention. The characteristics and characteristics of the mushrooms during the growth process were observed, and the results are shown in Tables 2 to 6.
은행잎박이 첨가된 실시예의 경우 은행잎박이 첨가되지 않은 비교예 1에 비해 균사생장이 느린 경향이 있었다.In the case where the ginkgo leaf foil was added, mycelial growth tended to be slower than in Comparative Example 1 in which the ginkgo leaf foil was not added.
실시예 1 내지 실시예 2의 경우 균배양일수는 29~31일로 비교예와 비슷하였지만 실시예 3의 경우 2일정도 지연되었으며, 초발이일수는 7~8일, 생육일수는 11~12일로 비교예 1과 비슷한 경향이었지만, 병당 수량은 비교예에 비해 실시예의 경우 3~12% 증수되었다. In Example 1 to Example 2, the bacterial culture days were 29-31 days, which was similar to the comparative example, but in Example 3, it was delayed by 2 days, the first day was 7-8 days, and the growth days was 11-12 days. Although the tendency was similar to that of Example 1, the amount per bottle was increased by 3 to 12% in the case of the example compared to the comparative example.
* 실시예 1 내지 실시예 3은 비교예 1에 비해 갓의 크기는 작은 경향이 있었지만, 실시예 1의 경우 대의 길이가 98㎜로 무처리 91㎜에 비해 길었다. 대의 두께는 비교예 1에 비해 실시예 1 내지 실시예 3은 45~48㎜두꺼운 경향이었다. 대의 경도도 비교예 1의 32,156(g/㎠)에 비해 실시예 1~3의 경우 35,062(g/㎠)~41,065(g/㎠)로 높아 저장 및 유통에 유리한 것으로 조사되었다. * In Examples 1 to 3, the size of the shade tended to be smaller than that of Comparative Example 1, but in Example 1, the length of the stand was 98 mm, which was longer than the untreated 91 mm. Compared with Comparative Example 1, the thickness of the bands was in the range of 45 to 48 mm thick in Examples 1 to 3. Compared with 32,156 (g / cm 2) of Comparative Example 1, the hardness of the Examples 1 to 3 was 35,062 (g / cm 2) to 41,065 (g / cm 2), which was found to be advantageous for storage and distribution.
* GFG함량(%)=컴페롤+궤르세틴+이소르함네틴(건조버섯 100g 기준)* GFG content (%) = Comperol + Gurcetin + Isolehamnetine (based on 100g of dry mushroom)
* 미송 톱밥 단용으로 재배시 버섯에서 GFG은 전혀 검출되지 않았지만, 은행잎박을 첨가한 실시예의 경우 GFG 0.170~0.296%를 함유한 것으로 조사되었다. 건조된 은행잎 100g 추출시 GFG의 함량이 3.45 %임을 감안 할 때 실시예의 배지를 이용하여 재배한 버섯에서 검출된 GFG의 함량은 대단히 높은 것으로, 고 기능성 버섯을 생산할 수 있음을 알 수 있다. * No GFG was detected in the mushrooms when grown for single-song sawdust alone, but it was found to contain 0.170 to 0.296% of GFG in the case of adding ginkgo leaf gourd. Considering that the content of GFG is 3.45% when extracting 100 g of dried ginkgo biloba leaves, the content of GFG detected in the mushrooms cultivated using the medium of Example is very high, and it can be seen that high-functional mushrooms can be produced.
[실시예 4]Example 4
입자크기 0.1~0.5mm의 건조 은행잎박, 콘코프, 미강, 소맥피, 밀기울, 패화석을 표 7에 나타난 바와 같은 비율로 혼합하고, 수분함량이 65%가 되도록 물을 첨가하여 배지를 제조하고, 이 배지를 1,100cc병에 담아 121℃에서 60분 내지 90분에서 살균하여 20℃로 냉각시켜 팽이버섯 재배용 배지 조성물을 제조하였다. 상기 배지 조성물에 팽이버섯종균을 접종하고, 온도 15~16℃, 습도 85~95%의 환경에서 29 내지 31일간 배양한 후, 잡균을 선별하고 접종원을 제거하여 온도 16~18℃, 습도 90~95%의 환경에서 7 내지 8일간 발아시켜 발아된 자실체를 온도 14~15℃, 습도 85~90%환경에서 11일 내지 12일간 생육하였다. 생육된 버섯을 본 발명의 실험방법에 따라 GFG성분함량을 측정하였고, 배지의 특성 및 버섯의 생육과정별 특성을 관찰하였다. 그 결과는 표 8 내지 표 10에 제시된다. Dry ginkgo biloba leaf, corn cob, rice bran, wheat bran, wheat bran, and crushed stone in a particle size of 0.1 ~ 0.5 mm in a proportion as shown in Table 7, and the medium was prepared by adding water so that the moisture content is 65%, The medium was placed in a 1,100 cc bottle and sterilized at 121 ° C. for 60 to 90 minutes, and cooled to 20 ° C. to prepare a mushroom composition for enoki mushroom culture. After inoculating the mushroom composition, the inoculation medium is incubated for 29 to 31 days at a temperature of 15 to 16 ° C. and a humidity of 85 to 95%, and various bacteria are selected and the inoculum is removed to obtain a temperature of 16 to 18 ° C. and humidity of 90 to The germinated fruiting bodies were germinated for 7 to 8 days in a 95% environment and grown for 11 to 12 days in a temperature of 14 to 15 ° C. and a humidity of 85 to 90%. The GFG content of the grown mushrooms was measured according to the experimental method of the present invention, and the characteristics of the medium and the growth process of the mushrooms were observed. The results are shown in Tables 8-10.
[비교예 2]Comparative Example 2
은행잎박을 첨가하지 않고 표 7에 나타낸 바와 같은 비율로 배지를 제조하여 상기 실시예 4와 같은 방법으로 버섯을 생육하였고, 생육된 버섯을 본 발명의 실험방법에 따라 GFG성분함량을 측정하였고, 배지의 특성 및 버섯의 생육과정별 특성을 관찰하였다, 그 결과는 표 8 내지 표 10에 제시된다. To prepare a medium in the ratio as shown in Table 7 without adding ginkgo leaf gourd to grow mushrooms in the same manner as in Example 4, the grown mushroom was measured for the GFG component content according to the experimental method of the present invention, medium The characteristics of and the growth characteristics of the mushrooms were observed, the results are shown in Tables 8 to 10.
* 은행잎박 30% 첨가시 무첨가에 비해 초발이 소요일수가 1~2일 더 소요되고, 억제 기간도 2일정도 더 소요되며, 생육일수도 2~3일 더 소요되었다. * When 30% of ginkgo leaf gourd was added, it took 1 ~ 2 days more to start up, 2 days to restrained, and 2 ~ 3 days to grow.
* 은행잎박 30% 첨가시 무첨가에 비해 대의 길이가 0.5㎝ 더 길어졌고, 갓의 개산은 0.2㎝가 적어지고, 수분함량도 2.3%가 적어 저장에 유리하였고, 수량도 병당 32.1g 증가되었다. 은행잎박 무첨가시 버섯의 색택은 백색에 가까우나, 은행잎박 30%을 첨가할때 미백색을 띠며 윤택이 났다. 또한 수확 후 외부에 3시간 노출시킨 결과 은행잎박 무첨가 배지에서 생산된 팽이버섯의 갓은 주름이 지고, 변형이 왔으나 은행잎박 30% 첨가시 버섯의 갓이 원형을 유지하였다. 성장 과정에서 은행잎박을 30% 첨가한 배지는 은행잎박 무첨가 배지에 비해 기중 균사가 전혀 발생하지 않아 작업 능률을 향상시킬 수 있었다. 생버섯 시식에서도 은행잎박 무첨가 배지에서 생산된 팽이버섯은 곰팡이 냄새가 나고, 씹는 맛이 푸석거렸지만, 은행잎박을 30% 첨가 배지에서 생산된 팽이버섯은 냄새가 없으며, 쫄깃하고 당도가 높고 고소한 맛이 있었다. * When 30% of ginkgo biloba was added, the length of the stand was 0.5cm longer than that of no addition, and the freshness of the pod was 0.2cm less and the moisture content was 2.3% less, which was favorable for storage, and the yield was increased by 32.1g per bottle. The mushroom's color is near white when no ginkgo leaves are added, but when the 30% of ginkgo leaves are added, it becomes white and glossy. In addition, after harvesting for 3 hours after exposure to the outside of the ginkgo biloba produced in the ginkgo leaf-free medium, the top of the mushroom was wrinkled, strained, but when the addition of 30% ginkgo biloba leaves the mushroom was kept round. In the growth process, the medium added with 30% of ginkgo leaf gourd did not generate any aerial mycelium at all compared to the ginkgo leaf free medium, thereby improving work efficiency. In the fungi tasting, the top mushrooms produced on the ginkgo leaf free medium had a mildew smell and chewy taste, but the top mushrooms produced on a medium containing 30% ginkgo leaf foil had no smell, and had a chewy, sugary, savory taste. there was.
* GFG함량(%)=컴페롤+퀘르세틴+이소르함네틴(건조버섯 100g 기준)* GFG content (%) = Comperol + Quercetin + Isolehamnetine (based on 100g of dry mushroom)
* 실시예 4의 배지에서 제조한 버섯에서는 높은 GFG 함량( 0.108 %)이 검출되었다. * A high GFG content (0.108%) was detected in the mushroom prepared in the medium of Example 4.
본 발명에 따르는 배지에 버섯종균을 배양하여 버섯을 생산할 경우 종래의 은행잎박이 첨가되지 않은 배지에서 재배된 일반 버섯보다 GFG함유 버섯의 수량이 3~12% 증수되는 효과를 가지며, 자실체의 경도도 높아 저장 및 유통에 유리한 조건을 가지게 되는 효과를 가진다. 또한, 은행잎박에 함유되어 있는 컴페롤, 이소르함메틴 및 퀘르세틴 성분을 포함하는 GFG를 함유하는 버섯이 생산됨으로서 향후 간접적인 약리학적 효과를 기대할 수 있는 기능성 버섯을 제공하는 효과를 가지는 것이다. 또한 추출후 폐자원으로 버려지는 은행잎박을 이용할 수 있는 장점도 있다. When mushrooms are produced by culturing mushroom spawn on the medium according to the present invention, the number of GFG-containing mushrooms is increased by 3 to 12% more than ordinary mushrooms grown on a medium without conventional ginkgo leaf gourds, and the hardness of fruiting bodies is also high. It has the effect of having favorable conditions for storage and distribution. In addition, by producing a mushroom containing GFG containing the comperol, isolhammethin and quercetin components contained in the ginkgo biloba foil will have the effect of providing a functional mushroom that can be expected indirect pharmacological effects in the future. It also has the advantage of using ginkgo leaf gourd, which is discarded as waste after extraction.
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