KR20070102686A - Process for producing coated fine particle - Google Patents

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KR20070102686A
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polar organic
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KR1020077017256A
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노부히로 야기
다쿠야 도쿠다
마사시 나카쿠라
야스키 가토
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교와 핫꼬 고교 가부시끼가이샤
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Abstract

A process for producing by a simpler method coated fine particles comprising fine core particles and a coating-layer ingredient with which the core particles are coated. The process is characterized by comprising: a step in which a polar organic solvent in which a coating-layer ingredient is soluble is incorporated into a liquid in such a concentration that fine core particles do not dissolve therein and the coating-layer ingredient can be present therein in a dispersed state, and the fine core particles and the coating-layer ingredient are dispersed in the liquid; and a step in which the fine core particles are coated with the coating-layer ingredient.

Description

피복 미립자의 제조 방법{PROCESS FOR PRODUCING COATED FINE PARTICLE}Production method of coated fine particles {PROCESS FOR PRODUCING COATED FINE PARTICLE}

본 발명은 피복 미립자의 제조 방법 등에 관한 것이다.The present invention relates to a method for producing coated fine particles and the like.

종래부터 의약품, 식품, 농약, 동물용 약 등의 분야에 있어서, 피복 미립자의 제조 방법에 관해 많은 기술이 개시되어 있다. 미립자 (피복될 미립자) 의 피복층 성분에 의한 피복은, 예를 들어 외적 인자로부터 받는 영향을 억제하기 위해, 외적 인자의 영향을 선택적으로 받아들여 그것을 트리거로서 미립자에 변화를 일으키기 위해서 등, 미립자에 기능을 부여하는 목적으로 실시되고 있다. 그 중 하나로서 액체 중에서 미립자를 지질막으로 피복하는 방법이 보고되어 있다 (특허 문헌 1 참조). 그 방법에 있어서는, 미립자가 분산되고 또한 지질이 용해된 극성 유기 용매 함유 수용액 중의 극성 유기 용매의 비율을 감소시킴으로써 미립자가 지질막으로 피복되어 있고 액체 중에서 피복이 실시되어, 예를 들어 정맥 주사용 미립자 등에 바람직한 크기의 피복 미립자가 우수한 효율로 제조되고 있다. Background Art Conventionally, in the fields of medicines, foods, pesticides, veterinary medicines and the like, many techniques have been disclosed regarding the production of coated fine particles. The coating by the coating layer component of the fine particles (fine particles to be coated) functions on the fine particles, for example, to suppress the influence from the external factors, to selectively receive the influence of the external factors, and to change the fine particles by triggering it. It is carried out for the purpose of granting. As one of them, a method of coating fine particles in a liquid with a lipid film has been reported (see Patent Document 1). In this method, by reducing the proportion of the polar organic solvent in the polar organic solvent-containing aqueous solution in which the fine particles are dispersed and in which the lipid is dissolved, the fine particles are coated with the lipid membrane and coated in a liquid, for example, for intravenous fine particles or the like. Coated fine particles of the desired size are produced with good efficiency.

또, 액체 중에서 미셀 입자를 지질막으로 피복하는 방법이 보고되어 있다 (특허 문헌 2 및 3 참조). 특허 문헌 2 에 있어서의 그 방법은 예를 들어, 양이온성 지질을 클로로포름에 미리 용해하고, 이어서 올리고디옥시뉴클레오티드 (ODN) 의 수용액과 메탄올을 첨가하여 혼합한 후, 원심 분리함으로써 클로로포름층 에 양이온성 지질/ODN 의 복합체를 이행시키고, 다시 그 클로로포름층을 취출하여 이것에 폴리에틸렌글리콜화 인지질과 중성 지질과 물을 첨가하여 유중수형 (W/O) 에멀션을 형성하고 역상 증발법으로 처리하여 ODN 내포 리포솜을 제조하는 방법이며, 한편, 특허 문헌 3 에 있어서의 그 방법은 예를 들어, 10 ∼ 90% 에탄올 중에서 히스티딘/후소제닉펩티드 결합체를 갖는 플라스미드 또는 올리고뉴클레오티드 DNA 와 지질 성분 사이의 복합체 (미셀) 를 형성시키고, 물을 이용한 희석과 미리 제조된 리포솜 또는 지질과의 혼합을 실시하여 미셀을 리포솜으로 변환시키고 투석 및 막을 개재하고 그 리포솜을 압출하여 플라스미드 또는 올리고뉴클레오티드를 엔트랩한 리포솜을 제조하는 방법이다. In addition, a method of coating micelle particles with a lipid membrane in a liquid has been reported (see Patent Documents 2 and 3). In the method of Patent Document 2, for example, cationic lipids are dissolved in chloroform in advance, and then an aqueous solution of oligodioxynucleotide (ODN) and methanol are added and mixed, followed by centrifugation to cationic to the chloroform layer. The complex of lipid / ODN was transferred, and the chloroform layer was again taken out, and polyethylene glycolylated phospholipid, neutral lipid, and water were added thereto to form a water-in-oil (W / O) emulsion, and treated by reversed phase evaporation to cover ODN-containing liposomes. In the meantime, the method in Patent Document 3 discloses a complex (micelle) between a plasmid or oligonucleotide DNA having a histidine / fusogenic peptide conjugate in 10 to 90% ethanol and a lipid component. The micelles were formed by diluting with water and mixing with a previously prepared liposome or lipid. Via conversion to the cotton it was dialyzed and membrane and extruding the liposome plasmid or oligonucleotide is a method for preparing a liposome ent wrap nucleotides.

특허 문헌 1 : 국제공개공보 제02/28367호 팜플렛Patent Document 1: International Publication No. 02/28367 Pamphlet

특허 문헌 2 : 일본 공표특허공보 2002-508765호Patent Document 2: Japanese Patent Application Publication No. 2002-508765

특허 문헌 3 : 일본 공표특허공보 2003-535832호Patent Document 3: Japanese Patent Publication No. 2003-535832

발명의 개시Disclosure of the Invention

발명이 해결하고자 하는 과제Problems to be Solved by the Invention

본 발명의 목적은 보다 간편한 방법에 따른 코어 미립자가 피복층 성분으로 피복된 피복 미립자의 제조 방법을 제공하는 것에 있다. An object of the present invention is to provide a method for producing coated fine particles in which core fine particles are coated with a coating layer component according to a simpler method.

과제를 해결하기 위한 수단Means to solve the problem

본 발명은 이하의 (1) ∼ (27) 에 관한 것이다.The present invention relates to the following (1) to (27).

(1) 피복층 성분이 가용인 극성 유기 용매를 함유한 액 중에 코어 미립자가 용해되지 않고 피복층 성분이 분산 상태로 존재하는 것이 가능한 농도로 그 극성 유기 용매를 함유시키고, 그 액 중에 그 코어 미립자 및 그 피복층 성분을 분산시키는 공정 (공정 A) 및 그 코어 미립자를 그 피복층 성분으로 피복하는 공정 (공정 B) 을 포함하는 것을 특징으로 하는 그 코어 미립자가 그 피복층 성분으로 피복된 피복 미립자의 제조 방법.(1) The core fine particles and the core are contained in the liquid at a concentration such that the core fine particles are not dissolved in the liquid containing the polar organic solvent in which the coating layer component is soluble and the coating layer component is present in a dispersed state. A process for producing coated fine particles coated with the coating layer component, comprising the step of dispersing the coating layer component (step A) and the step of coating the core fine particles with the coating layer component (step B).

(2) 공정 B 는 공정 A 에서 얻어지는 액을 그 코어 미립자가 그 피복층 성분으로 피복되기에 충분한 시간동안 정치(靜置) 또는 혼합하는 공정인 것을 특징으로 하는 상기 (1) 의 제조 방법.(2) Step B is the step of mixing or mixing the liquid obtained in Step A for a time sufficient for the core fine particles to be coated with the coating layer component.

(3) 공정 A 는, 그 피복층 성분이 용해된 극성 유기 용매를 함유한 액 (액 A) 을 조제하는 공정, (3) Step A is a step of preparing a liquid (liquid A) containing a polar organic solvent in which the coating layer component is dissolved,

액 A 와 혼합 가능하고, 또한 그 코어 미립자가 분산되고 그 극성 유기 용매를 함유하지 않거나 또는 액 A 보다 낮은 비율로 그 극성 유기 용매를 함유하는 액 (액 B) 을 조제하는 공정, 및 액 A 와 액 B 를 혼합하여 액 C 를 조제하는 공정을 포함하는 것을 특징으로 하는 상기 (1) 또는 (2) 의 제조 방법.A process of preparing a liquid (liquid B) which can be mixed with the liquid A and whose core fine particles are dispersed and which do not contain the polar organic solvent or which contain the polar organic solvent at a lower ratio than the liquid A, and the liquid A and The process of manufacturing said (1) or (2) containing the process of mixing liquid B and preparing liquid C.

(4) 공정 A 는 그 피복층 성분이 분산된 액 (액 D) 을 조제하는 공정,(4) Step A is a step of preparing a liquid (liquid D) in which the coating layer component is dispersed,

액 D 와 혼합 가능하고, 또한 그 코어 미립자가 분산된 액 (액 E) 을 조제하는 공정 및A process of preparing a liquid (liquid E) capable of mixing with the liquid D and dispersing the core fine particles thereof; and

액 D 와 액 E 를 혼합하여 액 F 를 조제하는 공정을 포함하고,Mixing liquid D and liquid E to prepare liquid F;

액 D 및 액 E 의 적어도 한쪽을 극성 유기 용매를 함유하는 액으로 하는 것을 특징으로 하는 상기 (1) 또는 (2) 의 제조 방법.At least one of the liquid D and the liquid E is a liquid containing a polar organic solvent, The method for producing (1) or (2) above.

(5) 공정 A 는 그 피복층 성분이 분산된 극성 유기 용매를 함유한 액 (액 G) 을 조제하는 공정 및(5) Step A is a step of preparing a liquid (liquid G) containing a polar organic solvent in which the coating layer component is dispersed, and

액 G 에 그 코어 미립자를 분산시키는 공정을 포함하는 것을 특징으로 하는 상기 (1) 또는 (2) 의 제조 방법.A process for dispersing the core fine particles in the liquid G, characterized by the above-mentioned (1) or (2).

(6) 공정 A 는 그 피복층 성분 및 그 코어 미립자가 분산된 액 (액 H) 을 조제하는 공정, 및(6) Step A is a step of preparing a liquid (liquid H) in which the coating layer component and the core fine particles are dispersed, and

액 H 와 혼합 가능하고, 또한 극성 유기 용매를 함유하는 액을 액 H 와 혼합하여 액 I 을 조제하는 공정을 포함하는 것을 특징으로 하는 상기 (1) 또는 (2) 의 제조 방법.A method for producing the above (1) or (2), which comprises mixing the liquid H and mixing a liquid containing a polar organic solvent with the liquid H to prepare a liquid I.

(7) 극성 유기 용매가 알코올, 글리콜 및 폴리알킬렌글리콜에서 선택되는 1 개 이상인 것을 특징으로 하는 상기 (1) ∼ (6) 중 어느 하나의 제조 방법.(7) The method for producing any one of (1) to (6) above, wherein the polar organic solvent is one or more selected from alcohols, glycols, and polyalkylene glycols.

(8) 공정 B 에 있어서 극성 유기 용매를 함유하는 액 중의 극성 유기 용매의 농도를 1 ∼ 80vol% 로 하는 것을 특징으로 하는 상기 (1) ∼ (7) 중 어느 하나의 제조 방법.(8) The manufacturing method in any one of said (1)-(7) characterized by setting the density | concentration of the polar organic solvent in the liquid containing a polar organic solvent in step B to 1-80 vol%.

(9) 피복층 성분은 피복층이 지질막이 되는 지질 및 계면 활성제에서 선택되는 1 개 이상의 물질인 상기 (1) ∼ (8) 중 어느 하나의 제조 방법.(9) The manufacturing method of any one of said (1)-(8) whose coating layer component is one or more substance chosen from the lipid and surfactant from which a coating layer becomes a lipid film.

(10) 피복층 성분은 피복층이 지질막이 되는 지질 및 계면 활성제에서 선택되는 1 개 이상의 물질, 그리고 당, 펩티드, 핵산 및 수용성 고분자에서 선택되는 1 개 이상 물질의 지질 유도체 또는 지방산 유도체 또는 계면 활성제인 상기 (1) ∼ (8) 중 어느 하나의 제조 방법.(10) The coating layer component may be a lipid derivative or a fatty acid derivative or a surfactant of at least one substance selected from lipids and surfactants and the sugar, peptides, nucleic acids, and water-soluble polymers. The manufacturing method in any one of (1)-(8).

(11) 코어 미립자가 당, 펩티드, 핵산 및 수용성 고분자에서 선택되는 1 개 이상의 물질의 지질 유도체 또는 지방산 유도체 또는 계면 활성제를 포함한 상기 (1) ∼ (10) 중 어느 하나의 제조 방법.(11) The method according to any of (1) to (10), wherein the core fine particles contain a lipid derivative or fatty acid derivative or surfactant of at least one substance selected from sugars, peptides, nucleic acids and water-soluble polymers.

(12) 당, 펩티드, 핵산 및 수용성 고분자에서 선택되는 1 개 이상 물질의 지질 유도체 또는 지방산 유도체 또는 계면 활성제가, 폴리에틸렌글리콜화 지질, 폴리글리세린화 지질, 폴리에틸렌글리콜알킬에테르, 폴리에틸렌글리콜소르비탄 지방산 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 지방산 에스테르, 폴리글리세린 지방산 에스테르, 폴리옥시에틸렌폴리옥시프로필렌글리콜 및 글리세린 지방산 에스테르에서 선택되는 1 개 이상인 상기 (10) 또는 (11) 의 제조 방법.(12) Lipid derivatives or fatty acid derivatives or surfactants of one or more substances selected from sugars, peptides, nucleic acids and water-soluble polymers include polyethylene glycolylated lipids, polyglycerolated lipids, polyethylene glycol alkyl ethers, polyethylene glycol sorbitan fatty acid esters. The manufacturing method of said (10) or (11) which is 1 or more selected from polyethyleneglycol fatty acid ester, polyglycerol fatty acid ester, polyoxyethylene polyoxypropylene glycol, and glycerin fatty acid ester.

(13) 공정 B 다음, 극성 유기 용매를 함유한 액으로부터 극성 유기 용매를 제거 또는 극성 유기 용매의 농도를 감소시키는 공정을 포함한 상기 (1) ∼ (12) 중 어느 하나의 제조 방법.(13) Process B Next, the manufacturing method in any one of said (1)-(12) containing the process of removing a polar organic solvent or reducing the density | concentration of a polar organic solvent from the liquid containing a polar organic solvent.

(14) 코어 미립자가 약물, 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드 및 미립자 제제에서 선택되는 1 개 이상을 구성 성분으로 하는 미립자인 상기 (1) ∼ (13) 중 어느 하나의 제조 방법.(14) The manufacturing method in any one of said (1)-(13) whose core microparticles | fine-particles are microparticles which make one or more components chosen from a drug, a lipid aggregate, a liposome, an emulsion particle, a polymer, a metal colloid, and a particulate formulation. .

(15) 코어 미립자가 약물을 구성 성분으로 하는 미립자인 상기 (1) ∼ (13) 중 어느 하나의 제조 방법.The manufacturing method in any one of said (1)-(13) whose core microparticles | fine-particles are microparticles | fine-particles which make a drug a structural component.

(16) 코어 미립자는 약물과 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드 및 미립자 제제에서 선택되는 1 개 이상의 복합체를 구성 성분으로 하는 미립자인 상기 (1) ∼ (13) 중 어느 하나의 제조 방법.(16) Preparation of any of the above (1) to (13), wherein the core fine particles are fine particles composed of at least one complex selected from drugs and lipid aggregates, liposomes, emulsion particles, polymers, metal colloids, and particulate preparations. Way.

(17) 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드 또는 미립자 제제가 약물과 정전적으로 반대의 전하를 갖는 것인 상기 (16) 의 제조 방법.(17) The method according to the above (16), wherein the lipid aggregate, liposome, emulsion particles, polymer, metal colloid or particulate preparation have an electrostatic opposite charge with the drug.

(18) 코어 미립자가 음이온성 약물과 양이온성 지질을 함유하는 리포솜의 복합체를 구성 성분으로 하는 미립자인 상기 (1) ∼ (13) 중 어느 하나의 제조 방법.(18) The manufacturing method in any one of said (1)-(13) whose core microparticles | fine-particles are microparticles | fine-particles which make a composite component of the liposome containing anionic drug and cationic lipid as a component.

(19) 코어 미립자가 양이온성 약물과 음이온성 지질을 함유하는 리포솜의 복합체를 구성 성분으로 하는 미립자인 상기 (1) ∼ (13) 중 어느 하나의 제조 방법.(19) The manufacturing method in any one of said (1)-(13) whose core microparticles | fine-particles are microparticles | fine-particles which make a composite component of the liposome containing a cationic drug and an anionic lipid as a component.

(20) 코어 미립자가 추가로 부착 경합제를 함유한 미립자인 상기 (17) ∼ (19) 중 어느 하나의 제조 방법.The manufacturing method in any one of said (17)-(19) whose core microparticles | fine-particles are microparticles | fine-particles which further contain an adhesion | attachment competitive agent.

(21) 약물이 펩티드, 단백질, 핵산, 저분자 화합물, 당류 및 고분자 화합물에서 선택되는 1 개 이상인 상기 (14) ∼ (20) 중 어느 하나의 제조 방법.(21) The method according to any of (14) to (20), wherein the drug is at least one selected from peptides, proteins, nucleic acids, low molecular weight compounds, sugars, and high molecular compounds.

(22) 약물이 유전자, DNA, RNA, 올리고뉴클레오티드, 플라스미드 및 siRNA에서 선택되는 1 개 이상인 상기 (14) ∼ (20) 중 어느 하나의 제조 방법.(22) The method according to any of (14) to (20), wherein the drug is at least one selected from genes, DNA, RNA, oligonucleotides, plasmids, and siRNAs.

(23) 상기 (1) ∼ (22) 중 어느 하나의 제조 방법에 따라 피복 미립자를 조제하기 위한, 적어도 코어 미립자, 피복층 성분 및 극성 유기 용매를 함유하는 액으로 구성되는 키트.(23) The kit which consists of a liquid containing at least a core fine particle, a coating layer component, and a polar organic solvent for preparing coated fine particles in any one of said (1)-(22) manufacturing method.

(24) 상기 (1) ∼ (22) 중 어느 하나의 제조 방법을 이용하여 제조할 수 있는 피복 미립자.(24) Coated fine particles which can be manufactured using the manufacturing method in any one of said (1)-(22).

(25) 상기 (15) ∼ (22) 중 어느 하나의 제조 방법을 이용하여 제조할 수 있는 피복 미립자 중, 약물이 항종양약인 그 피복 미립자를 함유하는 종양의 치료제.(25) The therapeutic agent for tumors containing the coated fine particles whose drug is an anti-tumor drug among the coated fine particles which can be manufactured using the manufacturing method in any one of said (15)-(22).

(26) 상기 (15) ∼ (22) 중 어느 하나의 제조 방법을 이용하여 제조할 수 있는 피복 미립자 중, 약물이 항염증약인 그 피복 미립자를 함유하는 염증의 치료제.(26) The therapeutic agent for inflammation containing the coated fine particles, wherein the drug is an anti-inflammatory drug, among the coated fine particles that can be produced using the production method according to any one of (15) to (22).

(27) 상기 (15) ∼ (22) 중 어느 하나의 제조 방법을 이용하여 제조할 수 있는 피복 미립자로 이루어지는 종양 또는 염증 부위에 대한 약물 함유 캐리어.(27) A drug-containing carrier for a tumor or inflamed site consisting of the coated fine particles that can be produced using the production method of any one of (15) to (22).

발명의 효과Effects of the Invention

본 발명에 의해 코어 미립자가 피복층 성분으로 피복된 피복 미립자의 간편한 제조 방법 등이 제공된다. 또, 본 발명에 의해 효율적으로 및/또는 견고하게 약물을 함유시킨 피복 미립자의 제조 방법 등이 제공된다. According to the present invention, there is provided a simple method for producing coated fine particles in which core fine particles are coated with a coating layer component. In addition, the present invention provides a method for producing coated fine particles containing a drug efficiently and / or firmly.

[도면의 간단한 설명][Brief Description of Drawings]

도 1 은, 실시예 4 및 비교예 2 에서 얻어진 각 제제에 대해, 래트에게 투여 후의 혈중 동태 추이를 나타내고 있다. ● 는 실시예 4, ○ 는 비교예 2 에서 얻어진 제제의 투여군을 각각 나타내고 있다. 1 shows the blood dynamics after administration to rats for each of the formulations obtained in Example 4 and Comparative Example 2. FIG. Indicates the administration group of the preparation obtained in Example 4 and ○ in Comparative Example 2, respectively.

발명을 실시하기To practice the invention 위한 최선의 형태 Best form for

본 발명에 있어서의 피복 미립자란, 적어도 코어 미립자와 피복층으로 이루어지는 미립자를 말하며, 피복층을 구성하는 피복층 성분이 코어 미립자의 외측을 피복하여 형성되는 미립자를 말한다. The coated fine particles in the present invention refer to fine particles composed of at least the core fine particles and the coating layer, and refers to the fine particles formed by the coating layer component constituting the coating layer covering the outside of the core fine particles.

본 발명에 있어서의 코어 미립자란, 예를 들어, 약물, 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드, 미립자 제제 등을 구성 성분으로 하는 미립자를 말하며, 바람직하게는 적어도 약물을 구성 성분으로 하는 미립자를 들 수 있다. 또, 본 발명에 있어서의 코어 미립자는, 약물, 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드, 미립자 제제 등을 2 개 이상 조합시킨 복합체를 구성 성분으로 하고 있어도 되고, 약물, 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드, 미립자 제제 등과 다른 화합물 (예를 들어 당, 지질, 무기 화합물 등) 을 조합시킨 복합체를 구성 성분으로 하고 있어도 되고, 바람직하게는 약물과 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드 및 미립자 제제에서 선택되는 1 개 이상의 복합체를 구성 성분으로 하는 미립자를 들 수 있고, 보다 바람직하게는 약물과 리포솜의 복합체를 구성 성분으로 하는 미립자를 들 수 있다. The core microparticles | fine-particles in this invention mean microparticles which make a component a drug, a lipid aggregate, a liposome, an emulsion particle, a polymer, a metal colloid, a particulate formulation, etc., for example, Preferably at least a drug is a component Particulates are mentioned. In addition, the core fine particles in the present invention may be composed of a complex of a combination of two or more drugs, lipid aggregates, liposomes, emulsion particles, polymers, metal colloids, particulate preparations, and the like, and the drug, lipid aggregates, and liposomes. The composition may be composed of a combination of emulsion particles, polymers, metal colloids, particulate preparations, and the like and other compounds (e.g., sugars, lipids, inorganic compounds, etc.), preferably drug and lipid aggregates, liposomes, emulsion particles. And microparticles composed of one or more complexes selected from polymers, metal colloids, and particulate preparations as constituents, and more preferably, microparticles comprising a complex of drug and liposome as constituents.

약물은 극성 유기 용매를 함유하는 액에 있어서의 용매 중에서 미립자의 형태를 취하는 약물, 코어 미립자를 구성하는 다른 구성 성분과 복합체를 형성하고 그 용매 중에서 미립자의 형태를 취하는 약물 등을 포함하고, 예를 들어 단백질, 펩티드, 핵산, 저분자 화합물, 당류, 고분자 화합물, 지질성 화합물, 금속 화합물등 중 약리학적 활성을 갖는 물질을 들 수 있고, 바람직하게는 핵산을 들 수 있고, 보다 바람직하게는 유전자, DNA, RNA, 올리고뉴클레오티드 (ODN), 플라스미드 및 siRNA 에서 선택되는 1 개 이상의 물질을 들 수 있다. The drug includes a drug taking the form of fine particles in a solvent in a liquid containing a polar organic solvent, a drug forming a complex with other components constituting the core fine particles and taking the form of fine particles in the solvent, and the like. For example, a substance having pharmacological activity among proteins, peptides, nucleic acids, low molecular weight compounds, sugars, high molecular weight compounds, lipidic compounds, metal compounds, and the like, and preferably nucleic acids, and more preferably genes, DNA And one or more substances selected from RNA, oligonucleotide (ODN), plasmid and siRNA.

단백질 또는 펩티드로서는, 예를 들어 브래디키닌, 안지오텐신, 옥시토신, 바소프레신, 아드레노코르티코트로핀, 칼시토닌, 인슐린, 글루카곤, 콜레키스토키닌, β-엔돌핀, 멜라노사이트 저해 인자, 멜라노사이트 자극 호르몬, 가스트린안타고니스트, 뉴로텐신, 소마토스타틴, 브루신, 시클로스포린, 엔케팔린, 트랜스페린, 아르기닌-글리신-아스파르트산 (RGD) 펩티드, 갑상선 호르몬, 성장 호르몬, 성선 자극 호르몬, 황체 형성 호르몬, 아스파라기나아제, 아르기나아제, 우리카아제, 카르복시펩티다아제, 글루타미나아제, 수퍼옥시드디스무타아제, 조직 플라스미노겐액티베이터, 스트렙토키나아제, 인터루킨, 인터페론, 무라밀디펩티드, 타이모포이에틴, 과립구 콜로니 자극 인자, 과립구 매크로파지 콜로니 자극 인자, 에리스로포이에틴, 트롬보포이에틴, 트립신인히비터, 리소자임, 표피 성장 인자 (EGF), 인슐린형 성장 인자, 신경 성장 인자, 혈소판 유래 성장 인자, 형질 전환 성장 인자, 내피 세포 성장 인자, 피브로브라스트 (섬유아세포) 성장 인자, 글리아 세포 성장 인자, 타이모신, 특이 항체 (예를 들어, 항 EGF 수용체 항체 등을 들 수 있다) 등을 들 수 있다. As the protein or peptide, for example, bradykinin, angiotensin, oxytocin, vasopressin, adrenocorticotropin, calcitonin, insulin, glucagon, cholekistokinin, β-endorphin, melanocyte inhibitory factor, melanosite stimulating hormone, gastrinantagonist , Neurotensin, somatostatin, brucin, cyclosporin, enkephalin, transferrin, arginine-glycine-aspartic acid (RGD) peptide, thyroid hormone, growth hormone, gonadotropin, luteinizing hormone, asparaginase, arginase, Uricasease, carboxypeptidase, glutaminase, superoxide dismutase, tissue plasminogen activator, streptokinase, interleukin, interferon, muramildipeptide, thymopoietin, granulocyte colony stimulating factor, granulocyte macrophage colony stimulation Factor, erythropoietin, thrombopoietin, Trypsin inhibitor, lysozyme, epidermal growth factor (EGF), insulin type growth factor, nerve growth factor, platelet derived growth factor, transforming growth factor, endothelial cell growth factor, fibroblast growth factor, article Lia cell growth factor, thymosin, specific antibodies (e.g., anti-EGF receptor antibodies, etc.) may be mentioned.

핵산으로서는, 예를 들어 안티센스올리고뉴클레오티드, 센스올리고뉴클레오티드 등의 ODN, 유전자, DNA, RNA, 플라스미드, siRNA 등을 들 수 있고, 그 핵산은 핵산의 구조 중의 인산부, 에스테르부 등에 함유되는 산소 원자 등이, 예를 들어 황 원자 등의 다른 원자로 치환된 유도체를 포함한다. 또한, siRNA 란 짧은 2 개사슬 RNA 를 말한다. Examples of the nucleic acid include ODN such as antisense oligonucleotides and sense oligonucleotides, genes, DNA, RNA, plasmids, siRNAs, and the like, and the nucleic acid is an oxygen atom contained in a phosphoric acid portion, an ester portion, or the like in the nucleic acid structure. This includes, for example, derivatives substituted with other atoms such as sulfur atoms. In addition, siRNA refers to short two-chain RNA.

저분자 화합물로서는, 예를 들어 엡실론-아미노카프론산, 염산 아르기닌, L-아스파르트산 칼륨, 트라넥사민산, 황산 블레오마이신, 황산 빈크리스틴, 세파조린나트륨, 세파로틴나트륨, 시티콜린, 시타라빈, 황산 겐타마이신, 염산 반코마이신, 황산 카나마이신, 황산 아미카신 등을 들 수 있다. As the low molecular weight compound, for example, epsilon-aminocaproic acid, arginine hydrochloride, L-aspartic acid potassium, tranexamic acid, bleomycin sulfate, vincristine sulfate, sodium cefazorine, sodium cepharotin, citcholine, cytarabine, sulfate Gentamicin, vancomycin hydrochloride, kanamycin sulfate, amikacin sulfate and the like.

당류로서는, 예를 들어 콘드로이틴 황산 나트륨, 헤파린나트륨, 덱스트란플루오레세인 등을 들 수 있다. As a saccharide, sodium chondroitin sulfate, heparin sodium, dextran fluorescein, etc. are mentioned, for example.

고분자 화합물로서는, 예를 들어 폴리에틸렌술폰산 나트륨, 디비닐에테르-무수 말레산 공중합체 (DIVEMA), 스티렌 무수 말레산 공중합체-네오카르지노스타틴 결합체 (SMANCS) 등을 들 수 있다. As a high molecular compound, sodium polyethylene sulfonate, a divinyl ether-maleic anhydride copolymer (DIVEMA), a styrene maleic anhydride copolymer-neocardinostatin binder (SMANCS), etc. are mentioned, for example.

지질성 화합물로서는, 예를 들어 비타민 D, 비타민 E 등을 들 수 있다. As a lipid compound, vitamin D, vitamin E, etc. are mentioned, for example.

금속 화합물로서는, 예를 들어 시스프라틴 등을 들 수 있다. As a metal compound, cisplatin etc. are mentioned, for example.

지질 집합체 또는 리포솜은, 예를 들어 지질 및/또는 계면 활성제 등에 의해 구성되고, 지질로서는 단순 지질, 복합 지질 또는 유도 지질의 어떠한 것이어도 되고, 예를 들어 인지질, 글리세로 당지질, 스핑고 당지질, 스핑고이드, 스테롤, 양이온성 지질 등을 들 수 있고, 바람직하게는 인 지질, 양이온성 지질 등을 들 수 있다. 또, 지질로서는, 예를 들어 계면 활성제 (후기의 계면 활성제와 동일한 의미), 고분자 (후기의 고분자와 동일한 의미, 구체적으로는 덱스트란 등), 폴리옥시에틸렌 유도체 (구체적으로는 폴리에틸렌글리콜 등) 등의 지질 유도체도 들 수 있고, 바람직하게는 폴리에틸렌글리콜화 인 지질을 들 수 있다. 계면 활성제로서는, 예를 들어 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제, 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다. Lipid aggregates or liposomes are composed of, for example, lipids and / or surfactants, and the lipids may be any of simple lipids, complex lipids or derived lipids, for example, phospholipids, glycerol glycolipids, sphingolipid glycolipids, Pingoids, sterols, cationic lipids, and the like, preferably phosphorus lipids, cationic lipids, and the like. As the lipid, for example, a surfactant (same meaning as the late surfactant), a polymer (same meaning as the late polymer, specifically dextran and the like), a polyoxyethylene derivative (specifically, polyethylene glycol, etc.) and the like Lipid derivatives of these are also mentioned, Preferably, a polyethyleneglycol phosphorus lipid is mentioned. As surfactant, a nonionic surfactant, anionic surfactant, cationic surfactant, an amphoteric surfactant, etc. are mentioned, for example.

인 지질로서는, 예를 들어 포스파티딜콜린 (구체적으로는 대두 포스파티딜 콜린, 난황 포스파티딜콜린 (EPC), 디스테아로일포스파티딜콜린, 디팔미토일포스파티딜콜린, 디미리스토일포스파티딜콜린, 디올레오일포스파티딜콜린 등), 포스파티딜에탄올아민 (구체적으로는 디스테아로일포스파티딜에탄올아민 (DSPE), 디팔미토일포스파티딜에탄올아민, 디올레오일포스파티딜에탄올아민 등), 글리세로 인지질 (구체적으로는 포스파티딜세린, 포스파티딘산, 포스파티딜글리세롤, 포스파티딜이노시톨, 리조포스파티딜콜린 등), 스핑고 인지질 (구체적으로는 스핑고미엘린, 세라미드포스포에탄올아민, 세라미드포스포글리세롤, 세라미드포스포글리세로 인산 등), 글리세로포스포노 지질, 스핑고포스포노 지질, 천연 레시틴 (구체적으로는 난황 레시틴, 대두 레시틴 등), 수소 첨가 인지질 (구체적으로는 수소 첨가 대두 포스파티딜콜린 등) 등의 천연 또는 합성의 인지질을 들 수 있다. Examples of phosphorus lipids include, for example, phosphatidylcholine (specifically soybean phosphatidylcholine, egg yolk phosphatidylcholine (EPC), distearoylphosphatidylcholine, dipalmitoylphosphatidylcholine, dimyristoylphosphatidylcholine, dioleoylphosphatidylcholine, etc.), and phosphatidylethanolamine ( Specifically, distearoylphosphatidylethanolamine (DSPE), dipalmitoylphosphatidylethanolamine, dioleoylphosphatidylethanolamine, etc.), glycerol phospholipid (specifically, phosphatidylserine, phosphatidyl acid, phosphatidylglycerol, phosphatidylinositol, Risphophosphatidylcholine, etc.), sphingophospholipids (specifically sphingomyelin, ceramide phosphoethanolamine, ceramide phosphoglycerol, ceramide phosphoglycerophosphate, etc.), glycerophosphono lipids, sphingophosphono lipids, natural lecithin (Specifically yolk lecithin, soybean les Natural or synthetic phospholipids such as cytin) and hydrogenated phospholipids (specifically hydrogenated soybean phosphatidylcholine).

글리세로 당지질로서는, 예를 들어 술폭시리보실글리세라이드, 디글리코실디글리세라이드, 디갈락토실디글리세라이드, 갈락토실디글리세라이드, 글리코실디글리세라이드 등을 들 수 있다. Examples of glycerol glycolipids include sulfoxyribosylglycerides, diglycosyl diglycerides, digalactosyl diglycerides, galactosyl diglycerides, glycosyl diglycerides, and the like.

스핑고 당지질로서는, 예를 들어 갈락토실세레브로사이드, 락토실세레브로사이드, 갱글리오사이드 등을 들 수 있다. Examples of sphingoglycolipids include galactosyl cerebromide, lactosyl cerebromide, ganglioside and the like.

스핑고이드로서는, 예를 들어 스핑강, 이코사스핑강, 스핑고신, 그들의 유도체 등을 들 수 있다. 유도체로서는, 예를 들어 스핑강, 이코사스핑강, 스핑고신 등의 -NH2 를 -NHCO(CH2)xCH3 (식 중, x 는 0 ∼ 18 의 정수를 나타내고, 그 중에서도 6, 12 또는 18 이 바람직하다) 으로 변환한 것 등을 들 수 있다. Examples of sphingoids include sping steel, icosapung steel, sphingosine, derivatives thereof and the like. Examples of the derivative include -NH 2 , such as sping steel, icosapung steel, sphingosine, and the like -NHCO (CH 2 ) x CH 3 (wherein x represents an integer of 0 to 18, among which 6, 12 or 18 is preferable).

스테롤로서는, 예를 들어 콜레스테롤, 디히드로콜레스테롤, 라노스테롤, β-시토스테롤, 캄페스테롤, 스티그마스테롤, 브라시카스테롤, 에르고카스테롤, 푸코스테롤, 3β-[N-(N',N'-디메틸아미노에틸)카르바모일]콜레스테롤(DC-Chol) 등을 들 수 있다. As sterols, for example, cholesterol, dihydrocholesterol, lanosterol, β-sitosterol, camphorsterol, stigmasterol, brassicasterol, ergocasterol, fucosterol, 3β- [N- (N '(N', N'-dimethylamino) Ethyl) carbamoyl] cholesterol (DC-Chol) and the like.

양이온성 지질 등으로서는, 예를 들어, N-[1-(2,3-디올레오일프로필)]-N,N,N-트리메틸염화 암모늄 (DOTAP), N-[1-(2,3-디올레오일프로필)]-N,N-디메틸아민 (DODAP), N-[1-(2,3-디올레일옥시프로필)]-N,N,N-트리메틸염화 암모늄 (DOTMA), 2,3-디올레일옥시-N-[2-(스페르민카르복시아미드)에틸]-N,N-디메틸-1-프로파나미늄트리플루오로아세트산 (DOSPA), N-[1-(2,3-디테트라데실옥시프로필)]-N,N-디메틸-N-히드록시에틸브롬화 암모늄 (DMRIE), N-[1-(2,3-디올레일옥시프로필)]-N,N-디메틸-N-히드록시에틸브롬화 암모늄 (DORIE) 등을 들 수 있다. Examples of cationic lipids include N- [1- (2,3-dioleoylpropyl)]-N, N, N-trimethyl ammonium chloride (DOTAP), N- [1- (2,3- Dioleoylpropyl)]-N, N-dimethylamine (DODAP), N- [1- (2,3-dioleyloxypropyl)]-N, N, N-trimethyl ammonium chloride (DOTMA), 2,3 -Dioleyloxy-N- [2- (sperminecarboxyamide) ethyl] -N, N-dimethyl-1-propananiumtrifluoroacetic acid (DOSPA), N- [1- (2,3- Ditetradecyloxypropyl)]-N, N-dimethyl-N-hydroxyethylammonium bromide (DMRIE), N- [1- (2,3-dioleyloxypropyl)]-N, N-dimethyl-N- Hydroxyethyl ammonium bromide (DORIE) and the like.

비이온성 계면 활성제로서는, 예를 들어 모노올레인산 폴리옥시에틸렌소르비탄 (구체적으로는 폴리소르베이트 80 등), 폴리옥시에틸렌폴리옥시프로필렌글리콜 (구체적으로는 플루로닉 F68 등), 소르비탄 지방산 (구체적으로는 소르비탄모노라우레이트, 소르비탄모노올레에이트 등), 폴리옥시에틸렌 유도체 (구체적으로는 폴리옥시에틸렌 경화 피마자유 60, 폴리옥시에틸렌라우릴알코올 등), 글리세린 지방산 에스테르 등을 들 수 있다. As the nonionic surfactant, for example, monooleic acid polyoxyethylene sorbitan (specifically, polysorbate 80, etc.), polyoxyethylene polyoxypropylene glycol (specifically, Pluronic F68, etc.), sorbitan fatty acid (specifically Examples thereof include sorbitan monolaurate, sorbitan monooleate, and the like, polyoxyethylene derivatives (specifically, polyoxyethylene cured castor oil 60, polyoxyethylene lauryl alcohol, and the like), glycerin fatty acid ester, and the like.

음이온성 계면 활성제로서는, 예를 들어 아실살코신, 알킬 황산 나트륨, 알킬벤젠술폰산염, 탄소수 7 ∼ 22 의 지방산 나트륨 등을 들 수 있다. 구체적으로는 도데실 황산 나트륨, 라우릴 황산 나트륨, 콜산 나트륨, 디옥시콜산 나트륨, 타우로데옥시콜산 나트륨 등을 들 수 있다. As anionic surfactant, acyl salcosine, alkyl sodium sulfate, alkylbenzene sulfonate, C7-C22 fatty acid sodium, etc. are mentioned, for example. Specifically, sodium dodecyl sulfate, sodium lauryl sulfate, sodium cholate, sodium dioxycholate, sodium taurodeoxycholate, etc. are mentioned.

양이온성 계면 활성제로서는, 예를 들어 알킬아민염, 아실아민염, 제 4 급 암모늄염, 아민 유도체 등을 들 수 있다. 구체적으로는 염화 벤잘코늄, 아실아미노에틸디에틸아민염, N-알킬폴리알킬폴리아민염, 지방산 폴리에틸렌폴리아미드, 세틸트리메틸암모늄브로마이드, 도데실트리메틸암모늄브로마이드, 알킬폴리옥시에틸렌아민, N-알킬아미노프로필아민, 지방산 트리에탄올아민에스테르 등을 들 수 있다. As a cationic surfactant, an alkylamine salt, an acylamine salt, a quaternary ammonium salt, an amine derivative, etc. are mentioned, for example. Specifically, benzalkonium chloride, acylaminoethyldiethylamine salt, N-alkyl polyalkyl polyamine salt, fatty acid polyethylene polyamide, cetyltrimethylammonium bromide, dodecyltrimethylammonium bromide, alkylpolyoxyethyleneamine, N-alkylaminopropyl Amine, fatty acid triethanolamine ester, etc. are mentioned.

양성 계면 활성제로서는, 예를 들어 3-[(3-콜아미드프로필)디메틸암모니오]As the amphoteric surfactant, for example, 3-[(3-colamidepropyl) dimethylammonio]

-1-프로판술폰산, N-테트라데실-N,N-디메틸-3-암모니오-1-프로판술폰산 등을 들 수 있다. -1-propanesulfonic acid, N-tetradecyl-N, N-dimethyl-3-ammonio-1-propanesulfonic acid, etc. are mentioned.

리포솜에 있어서는, 이들 지질 및 계면 활성제는 단독으로 또는 조합시켜 이용되고, 바람직하게는 조합시켜 이용된다. 조합시켜 이용하는 경우의 조합으로서는, 예를 들어 수소 첨가 대두 포스파티딜콜린, 폴리에틸렌글리콜화 인지질 및 콜레스테롤에서 선택되는 2 성분 이상의 조합, 디스테아로일포스파티딜콜린, 폴리에틸렌글리콜화 인지질 및 콜레스테롤에서 선택되는 2 성분 이상의 조합, EPC 와 DOTAP 의 조합, EPC, DOTAP 및 폴리에틸렌글리콜화 인지질의 조합, EPC, DOTAP, 콜레스테롤 및 폴리에틸렌글리콜화 인지질의 조합 등을 들 수 있다. In liposomes, these lipids and surfactants are used alone or in combination, preferably in combination. As a combination in the case of using in combination, for example, a combination of two or more components selected from hydrogenated soybean phosphatidylcholine, polyethyleneglycolated phospholipids and cholesterol, distearoylphosphatidylcholine, polyethyleneglycolated phospholipids and cholesterol, Combinations of EPC and DOTAP, combinations of EPC, DOTAP and polyethyleneglycolated phospholipids, combinations of EPC, DOTAP, cholesterol and polyethyleneglycolated phospholipids, and the like.

또, 리포솜은 필요에 따라, 예를 들어 콜레스테롤 등의 스테롤 등의 막안정화제, 예를 들어 토코페롤 등의 항산화제 등을 함유하고 있어도 된다. Moreover, the liposome may contain membrane stabilizers, such as sterols, such as cholesterol, antioxidant, such as tocopherol, etc. as needed.

지질 집합체로서는, 예를 들어 구형상 미셀, 구형상 역(逆)미셀, 소세지형상 미셀, 소세지형상 역미셀, 판형상 미셀, 판형상 역미셀, 헥사고날 I, 헥사고날 Ⅱ 및 지질 2 분자 이상으로 이루어지는 회합체 등을 들 수 있다. Examples of the lipid aggregate include spherical micelles, spherical inverted micelles, sausage-shaped micelles, sausage-shaped inverted micelles, plate-shaped micelles, plate-shaped inverted micelles, hexagonal I, hexagonal II and lipids. The association made etc. are mentioned.

에멀션 입자로서는, 예를 들어 지방 유제, 비이온성 계면 활성제와 대두유로 이루어지는 에멀션, 리피드에멀션, 리피드나노스페어 등의 수중유형 (O/W) 에멀션이나 수중유중수형 (W/O/W) 에멀션 입자 등을 들 수 있다. As emulsion particles, oil-in-water (O / W) emulsions and oil-in-water emulsion (W / O / W) emulsion particles, such as an emulsion consisting of a fat emulsion, a nonionic surfactant and soybean oil, a lipid emulsion, and a lipid nano spare, for example. Etc. can be mentioned.

고분자로서는, 예를 들어 알부민, 덱스트란, 키토산, 덱스트란 황산, DNA 등의 천연 고분자, 예를 들어 폴리-L-라이신, 폴리에틸렌이민, 폴리아스파르트산, 스티렌말레산 공중합체, 이소프로필아크릴아미드-아크릴피롤리돈 공중합체, 폴리에틸렌글리콜 수식 덴드리머, 폴리락트산, 폴리락트산폴리글리콜산, 폴리에틸렌글리콜화 폴리락트산 등의 합성 고분자, 또는 그들의 염 등을 들 수 있다. As the polymer, for example, natural polymers such as albumin, dextran, chitosan, dextran sulfuric acid, DNA, for example, poly-L-lysine, polyethyleneimine, polyaspartic acid, styrenemaleic acid copolymer, isopropylacrylamide- Synthetic polymers such as acrylpyrrolidone copolymer, polyethylene glycol modified dendrimer, polylactic acid, polylactic acid polyglycolic acid, polyethyleneglycolated polylactic acid, and salts thereof.

여기에서 고분자에 있어서의 염은, 예를 들어 금속염, 암모늄염, 산부가염, 유기 아민 부가염, 아미노산 부가염 등을 포함한다. 금속염으로서는, 예를 들어 리튬염, 나트륨염, 칼륨염 등의 알칼리 금속염, 마그네슘염, 칼슘염 등의 알칼리토금속염, 알루미늄염, 아연염 등을 들 수 있고, 암모늄염으로서는, 예를 들어 암모늄, 테트라메틸암모늄 등의 염을 들 수 있고, 산부가염으로서는, 예를 들어 염 산염, 황산염, 질산염, 인산염 등의 무기산염 및 아세트산염, 말레산염, 푸마르산염, 시트르산염 등의 유기산염을 들 수 있으며, 유기 아민 부가염으로서는, 예를 들어 모르폴린, 피페리딘 등의 부가염을 들 수 있고, 아미노산 부가염으로서는, 예를 들어 글리신, 페닐알라닌, 아스파르트산, 글루탐산, 리신 등의 부가염을 들 수 있다. Salts in the polymer include, for example, metal salts, ammonium salts, acid addition salts, organic amine addition salts, amino acid addition salts, and the like. Examples of the metal salts include alkali metal salts such as lithium salts, sodium salts and potassium salts, alkaline earth metal salts such as magnesium salts and calcium salts, aluminum salts and zinc salts. Examples of the ammonium salts include ammonium and tetra Salts, such as methylammonium, are mentioned, As acid addition salt, For example, inorganic acid salts, such as hydrochloride, sulfate, nitrate, and phosphate, and organic acid salts, such as acetate, maleate, fumarate, and citrate, Examples of the organic amine addition salts include addition salts such as morpholine and piperidine, and examples of the amino acid addition salts include addition salts such as glycine, phenylalanine, aspartic acid, glutamic acid, and lysine. .

금속 콜로이드로서는, 예를 들어 금, 은, 백금, 구리, 로듐, 실리카, 칼슘, 알루미늄, 철, 인듐, 카드뮴, 바륨, 납 등을 함유한 금속 콜로이드를 들 수 있다. As a metal colloid, the metal colloid containing gold, silver, platinum, copper, rhodium, silica, calcium, aluminum, iron, indium, cadmium, barium, lead etc. is mentioned, for example.

미립자 제제로서는, 예를 들어 마이크로스페어, 마이크로캡슐, 나노크리스탈, 리피드나노파티클, 고분자 미셀 등을 들 수 있다. Examples of the particulate preparation include micro spares, microcapsules, nanocrystals, lipid nanoparticles, polymer micelles, and the like.

또, 본 발명에 있어서의 코어 미립자는, 예를 들어 당, 펩티드, 핵산 및 수용성 고분자에서 선택되는 1 개 이상 물질의 지질 유도체 또는 지방산 유도체 또는 계면 활성제 등을 함유하는 것이 바람직하다. 당, 펩티드, 핵산 및 수용성 고분자에서 선택되는 1 개 이상 물질의 지질 유도체 또는 지방산 유도체 또는 계면 활성제는 코어 미립자의 구성 성분으로서 함유시켜도 되고, 코어 미립자의 구성 성분에 첨가하여 이용해도 상관없다. Moreover, it is preferable that the core fine particles in this invention contain a lipid derivative, fatty acid derivative, surfactant, etc. of the 1 or more substance chosen from sugar, a peptide, a nucleic acid, and a water-soluble polymer, for example. Lipid derivatives or fatty acid derivatives or surfactants of one or more substances selected from sugars, peptides, nucleic acids and water-soluble polymers may be contained as constituents of the core fine particles, or may be added to the constituents of the core fine particles and used.

당, 펩티드, 핵산 및 수용성 고분자에서 선택되는 1 개 이상 물질의 지질 유도체 또는 지방산 유도체 또는 계면 활성제로서는, 바람직하게는 당지질, 또는 수용성 고분자의 지질 유도체 또는 지방산 유도체를 들 수 있고, 보다 바람직하게는 수용성 고분자의 지질 유도체 또는 지방산 유도체를 들 수 있다. 당, 펩티드, 핵산 및 수용성 고분자에서 선택되는 1 개 이상 물질의 지질 유도체 또는 지방산 유도체 또는 계면 활성제는, 분자의 일부가 코어 미립자의 다른 구성 성분과 예를 들어 소수성 친화력, 정전적 상호 작용 등으로 결합하는 성질을 갖고, 다른 부분이 코어 미립자의 제조시의 용매와 예를 들어 친수성 친화력, 정전적 상호 작용 등으로 결합하는 성질을 갖는, 2 면성을 갖는 물질인 것이 바람직하다. As lipid derivatives or fatty acid derivatives or surfactants of at least one substance selected from sugars, peptides, nucleic acids and water-soluble polymers, preferably glycolipids or lipid derivatives or fatty acid derivatives of water-soluble polymers are mentioned, and more preferably water-soluble. Lipid derivatives or fatty acid derivatives of the polymers. Lipid derivatives or fatty acid derivatives or surfactants of one or more substances selected from sugars, peptides, nucleic acids and water soluble polymers, wherein a portion of the molecule binds to other constituents of the core particulates, for example, by hydrophobic affinity, electrostatic interaction, etc. It is preferable that it is a substance which has a two-sided property which has the property to bind, and the other part has the property which couple | bonds with the solvent at the time of manufacture of a core fine particle by hydrophilic affinity, an electrostatic interaction, etc., for example.

당, 펩티드 또는 핵산의 지질 유도체 또는 지방산 유도체로서는, 예를 들어 자당, 소르비톨, 유당 등의 당, 예를 들어 카세인 유래 펩티드, 난백 유래 펩티드, 대두 유래 펩티드, 글루타티온 등의 펩티드, 또는 예를 들어 DNA, RNA, 플라스미드, siRNA, ODN 등의 핵산과, 예를 들어 상기의 코어 미립자의 정의 중에서 예시한 지질, 예를 들어 스테아르산, 팔미트산, 미리스트산, 라우르산 등의 지방산이 결합 하여 이루어지는 것 등을 들 수 있고, 보다 구체적으로 당의 지질 유도체 또는 지방산 유도체로서는, 예를 들어 상기의 코어 미립자의 정의 중에서 예시한 글리세로 당지질, 스핑고 당지질 등의 당지질 등을 들 수 있다. As lipid derivatives or fatty acid derivatives of sugars, peptides or nucleic acids, for example, sugars such as sucrose, sorbitol and lactose, for example casein derived peptides, egg white derived peptides, soybean derived peptides, glutathione and the like, or for example DNA Nucleic acids such as RNA, plasmid, siRNA, ODN, and fatty acids such as, for example, stearic acid, palmitic acid, myristic acid, lauric acid, etc. Examples of the lipid derivatives or fatty acid derivatives of sugars include glycolipids such as glycerol glycolipids, sphingolipid glycolipids, and the like, as exemplified in the definition of the core fine particles.

수용성 고분자의 지질 유도체 또는 지방산 유도체로서는, 예를 들어 폴리에틸렌글리콜, 폴리글리세린, 폴리에틸렌이민, 폴리비닐알코올, 폴리아크릴산, 폴리아크릴아미드, 올리고당, 덱스트린, 수용성 셀룰로오스, 덱스트란, 콘드로이틴 황산, 폴리글리세린, 키토산, 폴리비닐피롤리돈, 폴리아스파르트산 아미드, 폴리-L-라이신, 만난, 풀루란, 올리고글리세롤 등 또는 그들의 유도체와, 예를 들어 상기의 코어 미립자의 정의 중에서 예시한 지질, 또는 예를 들어 스테아르산, 팔미트산, 미리스트산, 라우르산 등의 지방산이 결합하여 이루어지는 것 등을 들 수 있고, 보다 바람직하게는 폴리에틸렌글리콜 유도체, 폴리글리세린 유도체 등의 지질 유도체 또는 지방산 유도체를 들 수 있고, 더욱 바람직하게는 폴리에틸렌글리콜 유도체의 지질 유도체 또는 지방산 유도체를 들 수 있다. As lipid derivatives or fatty acid derivatives of water-soluble polymers, for example, polyethylene glycol, polyglycerol, polyethyleneimine, polyvinyl alcohol, polyacrylic acid, polyacrylamide, oligosaccharide, dextrin, water soluble cellulose, dextran, chondroitin sulfate, polyglycerine, chitosan , Polyvinylpyrrolidone, polyaspartic acid amide, poly-L-lysine, mannan, pullulan, oligoglycerol and the like or derivatives thereof, and the lipids exemplified in the definition of the core fine particles, for example stearic And a fatty acid such as acid, palmitic acid, myristic acid, lauric acid, etc. may be combined. More preferably, lipid derivatives or fatty acid derivatives such as polyethylene glycol derivatives and polyglycerol derivatives may be mentioned. More preferably, lipid derivatives or supports of polyethylene glycol derivatives And dispersing derivatives.

폴리에틸렌글리콜 유도체의 지질 유도체 또는 지방산 유도체로서는, 예를 들어 폴리에틸렌글리콜화 지질 (구체적으로는 폴리에틸렌글리콜-포스파티딜에탄올아민 (보다 구체적으로는 1,2-디스테아로일-sn-글리세로-3-포스포에탄올아민-N-[메톡시(폴리에틸렌글리콜)-2000](PEG-DSPE) 등), 폴리옥시에틸렌 경화 피마자유 60, 크레모포 EL (CEMOPHOR EL) 등), 폴리에틸렌글리콜소르비탄 지방산 에스테르 (구체적으로는 모노올레산 폴리옥시에틸렌소르비탄 등), 폴리에틸렌글리콜 지방산 에스테르 등을 들 수 있고, 보다 바람직하게는 폴리에틸렌글리콜화 지질을 들 수 있다.As lipid derivatives or fatty acid derivatives of polyethylene glycol derivatives, for example, polyethylene glycolated lipids (specifically, polyethylene glycol-phosphatidylethanolamine (more specifically 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-force) Poethanolamine-N- [methoxy (polyethyleneglycol) -2000] (PEG-DSPE), etc.), polyoxyethylene cured castor oil 60, cremophor EL (CEMOPHOR EL, etc.), polyethylene glycol sorbitan fatty acid ester (specific As monooleic acid polyoxyethylene sorbitan etc.), polyethyleneglycol fatty acid ester, etc. are mentioned, More preferably, polyethyleneglycolation lipid is mentioned.

폴리글리세린 유도체의 지질 유도체 또는 지방산 유도체로서는, 예를 들어 폴리글리세린화 지질 (구체적으로는 폴리글리세린-포스파티딜에탄올아민 등), 폴리글리세린 지방산 에스테르 등을 들 수 있고, 보다 바람직하게는 폴리글리세린화 지질을 들 수 있다. Examples of the lipid derivatives or fatty acid derivatives of the polyglycerol derivatives include polyglycerinated lipids (specifically, polyglycerol-phosphatidylethanolamine and the like), polyglycerin fatty acid esters, and the like, and more preferably polyglycerolated lipids. Can be mentioned.

계면 활성제로서는, 예를 들어 상기의 코어 미립자의 정의 중에서 예시한 계면 활성제, 폴리에틸렌글리콜알킬에테르 등을 들 수 있고, 바람직하게는 폴리옥시에틸렌폴리옥시프로필렌글리콜, 글리세린 지방산 에스테르, 폴리에틸렌글리콜알킬에테르 등을 들 수 있다. As surfactant, surfactant, polyethyleneglycol alkylether, etc. which were illustrated in the definition of the said core microparticles | fine-particles, etc. are mentioned, for example, Preferably polyoxyethylene polyoxypropylene glycol, glycerin fatty acid ester, polyethyleneglycol alkyl ether, etc. are mentioned. Can be mentioned.

코어 미립자가 약물과 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드 및 미립자 제제에서 선택되는 1 개 이상의 복합체를 구성 성분으로 하는 미립자인 경우, 그 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드 또는 미립자 제제는 약물과 정전적으로 반대의 전하를 갖는 것인 것이 보다 바람직하다. 여기에서 약물과 정전적으로 반대의 전하란, 약물 분자 내의 전하, 분자내 분극 등에 대해 정전적 인력을 발생시키는 전하, 표면 분극 등을 포함한다. 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드 또는 미립자 제제가 약물과 정전적으로 반대의 전하를 갖는 데에는, 바람직하게는 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드 또는 미립자 제제는 약물과 정전적으로 반대의 전하를 갖는 하전 물질을 함유하고, 보다 바람직하게는 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드 또는 미립자 제제는 약물과 정전적으로 반대의 전하를 갖는 지질 (상기의 양이온성 지질 또는 후기의 음이온성 지질) 을 함유한다.When the core particulates are particulates composed of one or more complexes selected from drugs and lipid aggregates, liposomes, emulsion particles, polymers, metal colloids and particulate preparations, the lipid aggregates, liposomes, emulsion particles, polymers, metal colloids or It is more preferred that the particulate formulation has an electrostatic opposite charge to the drug. Here, the charges electrostatically opposite to the drug include charges, surface polarization, and the like, which generate an electrostatic attraction to charges in the drug molecule, intramolecular polarization, and the like. Lipid aggregates, liposomes, emulsion particles, polymers, metal colloids or particulate preparations have an electrostatic opposite charge to the drug, preferably lipid aggregates, liposomes, emulsion particles, polymers, metal colloids or particulate preparations are electrostatically Lipid aggregates, liposomes, emulsion particles, polymers, metal colloids or particulate preparations containing charged materials with opposite charges, more preferably lipids having an electrostatically opposite charge with the drug (the above cationic lipids or later Anionic lipids).

약물과 정전적으로 반대의 전하를 갖는 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드 또는 미립자 제제에 함유되는 하전 물질은 양이온성을 나타내는 양이온성 물질과 음이온성을 나타내는 음이온성 물질로 분류되는데, 양이온성 기와 음이온성 기의 양방을 갖는 양성의 물질이어도, pH 나 다른 물질과의 결합 등에 의해 상대적인 음성도가 변화하므로, 그때그때에 따라 양이온성 물질 또는 음이온성 물질로 분류될 수 있다. 이들 하전 물질은 코어 미립자의 구성 성분으로서 함유시켜도 되고, 코어 미립자의 구성 성분에 첨가하여 이용해도 상관없다. Charged substances contained in lipid aggregates, liposomes, emulsion particles, polymers, metal colloids, or particulate preparations with an electrostatic opposite charge to the drug are classified into cationic and anionic materials, which are cationic. Even a positive material having both a sexual group and an anionic group may be classified as a cationic material or an anionic material at that time since the relative negative degree changes due to pH or binding to other materials. These charged substances may be contained as a constituent of the core fine particles or may be added to and used in the constituent of the core fine particles.

양이온성 물질로서는, 예를 들어 상기의 코어 미립자의 정의에서 예시한 것 중의 양이온성 물질 [구체적으로는, 양이온성 지질 (상기와 동일한 의미), 양이온성 스테롤, 양이온성 계면 활성제 (상기와 동일한 의미), 양이온성 고분자 등], 등전점 이하의 값의 pH 에서 복합체를 형성할 수 있는 단백질 또는 펩티드 등을 들 수 있다. As the cationic substance, for example, a cationic substance [specifically, a cationic lipid (same meaning as above), a cationic sterol, a cationic surfactant (same meaning as above) in the definition of the said core fine particle ), Cationic polymers, and the like], proteins or peptides capable of forming a complex at a pH below the isoelectric point.

양이온성 스테롤로서는, 예를 들어 DC-Chol 등을 들 수 있다. As cationic sterol, DC-Chol etc. are mentioned, for example.

양이온성 고분자로서는, 예를 들어 폴리-L-라이신, 폴리에틸렌이민, 폴리펙트 (polyfect), 키토산 등을 들 수 있다. Examples of the cationic polymer include poly-L-lysine, polyethyleneimine, polyfect, chitosan, and the like.

등전점 이하의 값의 pH 에서 복합체를 형성할 수 있는 단백질 또는 펩티드로서는, 그 물질의 등전점 이하의 값의 pH 에서 복합체를 형성할 수 있는 단백질 또는 펩티드이면 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 알부민, 오로소무코이드, 글로불린, 피브리노겐, 펩신, 리보뉴클레아제 T1 등을 들 수 있다. The protein or peptide capable of forming a complex at a pH below the isoelectric point is not particularly limited as long as it is a protein or peptide capable of forming a complex at a pH below the isoelectric point of the substance. For example, albumin, orosomucoid, globulin, fibrinogen, pepsin, ribonuclease T1, etc. are mentioned.

음이온성 물질로서는, 예를 들어 상기의 코어 미립자의 정의에서 예시한 것 중의 음이온성 물질 [구체적으로는, 음이온성 지질, 음이온성 계면 활성제 (상기와 동일한 의미), 음이온성 고분자 등], 등전점 이상의 값의 pH 에서 복합체를 형성할 수 있는 단백질 또는 펩티드, 핵산 등을 들 수 있다. As the anionic substance, for example, anionic substances [specifically, anionic lipids, anionic surfactants (same meanings as above), anionic polymers, etc.) in the examples exemplified in the definition of the core fine particles, and the isoelectric point or more Proteins or peptides that can form complexes at pH of values, nucleic acids, and the like.

음이온성 지질로서는, 예를 들어 포스파티딜세린, 포스파티딜글리세롤, 포스파티딜이노시톨, 포스파티딘산 등을 들 수 있다. Examples of the anionic lipids include phosphatidylserine, phosphatidylglycerol, phosphatidylinositol, phosphatidic acid and the like.

음이온성 고분자로서는, 예를 들어 폴리아스파르트산, 스티렌말레산 공중합체, 이소프로필아크릴아미드-아크릴피롤리돈 공중합체, 폴리에틸렌글리콜 수식 덴드리머, 폴리락트산, 폴리락트산폴리글리콜산, 폴리에틸렌글리콜화 폴리락트산, 덱스트란 황산, 덱스트란 황산 나트륨, 콘드로이틴 황산, 콘드로이틴 황산 나트륨, 히알루론산, 콘드로이틴, 데르타만 황산, 헤파란 황산, 헤파린, 케타란 황산, 덱스트란플루오레세인 음이온계 (dextranfluorescein anionic) 등을 들 수 있다. Examples of the anionic polymer include polyaspartic acid, styrenemaleic acid copolymer, isopropylacrylamide-acrylpyrrolidone copolymer, polyethylene glycol modified dendrimer, polylactic acid, polylactic acid polyglycolic acid, polyethylene glycolated polylactic acid, Dextran sulfate, sodium dextran sulfate, chondroitin sulfate, chondroitin sulfate, hyaluronic acid, chondroitin, derthaman sulfuric acid, heparan sulfate, heparin, ketaran sulfate, dextranfluorescein anionic Can be.

등전점 이상의 값인 pH 에서 복합체를 형성할 수 있는 단백질 또는 펩티드로서는, 그 물질의 등전점 이상의 값인 pH 에서 복합체를 형성할 수 있는 단백질 또는 펩티드이면 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 알부민, 오로소무코이드 (orosomucoid), 글로불린, 피브리노겐, 히스톤, 프로타민, 리보뉴크레아제, 리소자임 등을 들 수 있다. The protein or peptide capable of forming a complex at a pH equal to or higher than the isoelectric point is not particularly limited as long as it is a protein or peptide capable of forming a complex at a pH equal to or higher than the isoelectric point of the substance. For example, albumin, orosomcooid, globulin, fibrinogen, histone, protamine, ribonuclease, lysozyme, etc. are mentioned.

음이온성 물질로서의 핵산으로서는, 예를 들어 DNA, RNA, 플라스미드, siRNA, ODN 등을 들 수 있고, 생리 활성을 나타내지 않은 것이면, 어떠한 길이, 배열의 것이어도 된다. As a nucleic acid as an anionic substance, DNA, RNA, a plasmid, siRNA, ODN etc. are mentioned, for example, As long as it does not show a physiological activity, it may be of any length and arrangement.

코어 미립자는 약물과 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드 및 미립자 제제에서 선택되는 1 개 이상의 복합체를 구성 성분으로 하는 미립자로서, 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드 또는 미립자 제제가 약물과 정전적으로 반대의 전하를 갖는 것인 경우, 코어 미립자는 부착 경합제를 함유하는 것이 더욱 바람직하다. Core particulates are microparticles composed of a drug and one or more complexes selected from lipid aggregates, liposomes, emulsion particles, polymers, metal colloids and particulate preparations, and are lipid aggregates, liposomes, emulsion particles, polymers, metal colloids or particulate preparations. In the case where is an electrostatically opposite charge from the drug, it is more preferable that the core fine particles contain an attachment competitive agent.

부착 경합제로서는, 예를 들어 약물과 정전적으로 동일한 전하를 갖는 물질 등을 들 수 있고, 분자 내의 전하, 분자내 분극 등에 의한 양이온 또는 음이온에 대한 정전적 인력에 의해 코어 미립자의 구성 성분의 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드 또는 미립자 제제에 정전적으로 부착되는 물질을 포함하고, 예를 들어 지질, 계면 활성제, 핵산, 단백질, 펩티드, 고분자 등을 들 수 있다. 지질, 계면 활성제, 핵산, 단백질, 펩티드 및 고분자로서는, 예를 들어 상기의 하전 물질의 정의 중에서 예시한 양이온성 지질, 음이온성 지질, 양이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 핵산, 단백질, 펩티드, 양이온성 고분자, 음이온성 고분자 등을 들 수 있고, 바람직하게는 상기의 하전 물질의 정의 중에서 예시한 양이온성 고분자, 음이온성 고분자 등을 들 수 있고, 보다 바람직하게는 덱스트란 황산, 덱스트란 황산 나트륨, 콘드로이틴 황산, 콘드로이틴 황산 나트륨, 히알루론산, 콘드로이틴, 데르타만 황산, 헤파란 황산, 헤파린, 케타란 황산, 덱스트란플루오레세인아니오닉, 폴리-L-라이신, 폴리에틸렌이민, 폴리펙트 (polyfect), 키토산 등에서 선택되는 1 개 이상의 물질을 들 수 있다. 부착 경합제는 코어 미립자의 구성 성분의 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드 또는 미립자 제제에 정전적으로 부착되는 것이 바람직하고, 코어 미립자의 구성 성분의 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드 또는 미립자 제제에 부착되어도 코어 미립자의 구성 성분의 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드 또는 미립자 제제를 응집시키는 가교를 형성하지 않은 크기의 물질이거나, 분자 내에 그 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드 또는 미립자 제제와 부착되는 부분과, 부착에 반발하여 그 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드 또는 미립자 제제의 응집을 억제하는 부분을 갖는 물질인 것이 바람직하다. Examples of the adhesion competitive agent include substances having an electrostatic same charge as drugs, and include lipid aggregates of the components of the core fine particles by electrostatic attraction to positive or negative ions due to intramolecular charges, intramolecular polarization, and the like. And substances that electrostatically attach to liposomes, emulsion particles, polymers, metal colloids or particulate preparations, and examples thereof include lipids, surfactants, nucleic acids, proteins, peptides, polymers and the like. As lipids, surfactants, nucleic acids, proteins, peptides and polymers, for example, cationic lipids, anionic lipids, cationic surfactants, anionic surfactants, nucleic acids, proteins, peptides, exemplified in the definition of the above charged materials, Cationic polymers, anionic polymers, and the like, and examples thereof include cationic polymers and anionic polymers exemplified in the definition of the above charged materials. More preferably, dextran sulfate and dextran sulfate. , Chondroitin sulfate, sodium chondroitin sulfate, hyaluronic acid, chondroitin, derthaman sulfate, heparan sulfate, heparin, ketaraan sulfate, dextran fluorescein anionic, poly-L-lysine, polyethyleneimine, polyfect And one or more substances selected from chitosan and the like. The adhesion competing agent is preferably electrostatically attached to the lipid aggregates, liposomes, emulsion particles, polymers, metal colloids or particulate preparations of the constituents of the core fine particles, and the lipid aggregates, liposomes, emulsion particles, polymers, A lipid aggregate, liposomes, emulsion particles, polymers, colloids of metal or colloidal particles of a constituent of the core microparticles, which are attached to the metal colloid or particulate preparation, but which do not form a crosslink which aggregates the lipid aggregate, liposomes, It is preferable that it is a substance which has a part which adheres to an emulsion particle, a polymer, a metal colloid, or a particulate preparation, and a part which repels adhesion and suppresses aggregation of the lipid aggregate, liposome, emulsion particle, polymer, metal colloid, or particulate preparation.

본 발명에 있어서의 코어 미립자는 공지된 제조 방법 또는 그것에 준하여 제조할 수 있고, 어떠한 제조 방법으로 제조된 것이어도 된다. 예를 들어, 코어 미립자의 하나인 리포솜을 구성 성분으로 하는 코어 미립자의 제조에는 공지된 리포솜의 조제 방법을 적용할 수 있다. 공지된 리포솜의 조제 방법으로서는, 예를 들어 Bangham 등의 리포솜 조제법［J. Mol. Biol., 1965년, 제13권, p.238-252 참조］, 에탄올 주입법［Cell Biol., 1975년, 제66권, p.621-634 참조］, 프렌치프레스법［FEBS Lett., 1979년, 제99권, p.210-214 참조］, 동결 융해법［Arch. Biochem. Biophys, 1981년, 제212권, p.186-194 참조］, 역상 증발법［Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1978년, 제75권, p.4194-4198 참조］, pH 구배법 (예를 들어 일본특허공보 제2572554호, 일본특허공보 제2659136호 등 참조) 등을 들 수 있다. 리포솜의 제조시에 리포솜을 분산시키는 용액으로서는, 예를 들어 물, 산, 알칼리, 여러 가지의 완충액, 생리적 식염액, 아미노산 수액 등을 이용할 수 있다. 또, 리포솜의 제조시에는, 예를 들어 시트르산, 아스코르브산, 시스테인, 에틸렌디아민 4 아세트산 (EDTA) 등의 항산화제, 예를 들어 글리세린, 포도당, 염화 나트륨 등의 등장화제 등의 첨가도 가능하다. 또, 지질 등을 예를 들어 에탄올 등의 유기 용매에 용해시키고 용매 증류 제거한 후, 생리 식염수 등을 첨가, 진탕 교반하여 리포솜을 형성시킴으로써 리포솜을 제조할 수도 있다. The core microparticles | fine-particles in this invention can be manufactured according to a well-known manufacturing method or it, and what was manufactured by what kind of manufacturing method may be sufficient. For example, a well-known method of preparing a liposome can be applied to manufacture of the core fine particle which uses the liposome which is one of the core fine particles as a component. As a known method of preparing a liposome, for example, a liposome preparation method of Bangham et al. [J. Mol. Biol., 1965, vol. 13, p.238-252], ethanol injection method [Cell Biol., 1975, vol. 66, p. 621-634], French press method [FEBS Lett., 1979] , Vol. 99, pp. 210-214], Freeze-thawing method [Arch. Biochem. Biophys, 1981, Vol. 212, p. 186-194], reversed phase evaporation [Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1978, Vol. 75, p. 4194-4198], and pH gradient method (for example, refer to Japanese Patent Publication No. 2252554, Japanese Patent Publication No. 2659136, etc.). As a solution for dispersing liposomes in the preparation of liposomes, for example, water, acids, alkalis, various buffers, physiological saline solutions, amino acid sap and the like can be used. In the production of liposomes, antioxidants such as citric acid, ascorbic acid, cysteine and ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA), for example, isotonic agents such as glycerin, glucose, sodium chloride and the like can also be added. In addition, liposomes can be prepared by dissolving lipids and the like in organic solvents such as ethanol, distilling off the solvent, and then adding physiological saline and the like to form liposomes by shaking and stirring.

또, 예를 들어 비이온성 계면 활성제 (상기와 동일한 의미), 양이온성 계면 활성제 (상기와 동일한 의미), 음이온성 계면 활성제 (상기와 동일한 의미), 고분자, 폴리옥시에틸렌 유도체 등에 의한 리포솜 표면 개질도 임의로 실시할 수 있고, 이들의 표면 개질 리포솜도 본 발명에 있어서의 코어 미립자의 구성 성분으로서 사용된다［D. D. Lasic, F. Martin 편, Stealth Liposomes, CRC Press Inc, 1995년, p.93-102 참조］. 고분자로서는, 예를 들어 덱스트란, 풀루란, 만난, 아밀로펙틴, 히드록시에틸전분 등을 들 수 있다. 폴리옥시에틸렌 유도체로서는, 예를 들어 폴리소르베이트 80, 플루로닉 F68, 폴리옥시에틸렌 경화 피마자유 60, 폴리옥시에틸렌라우릴알코올, PEG-DSPE 등을 들 수 있다. 리포솜 표면 개질은 코어 미립자에 당, 펩티드, 핵산 및 수용성 고분자에서 선택되는 1 개 이상 물질의 지질 유도체 또는 지방산 유도체 또는 계면 활성제를 함유시키는 방법의 하나로서도 이용할 수 있다. Moreover, liposome surface modification degree, for example by nonionic surfactant (same meaning as above), cationic surfactant (same meaning as above), anionic surfactant (same meaning as above), a polymer, a polyoxyethylene derivative, etc. Optionally, these surface modified liposomes are also used as constituents of the core fine particles in the present invention [D. D. Lasic, F. Martin, Stealth Liposomes, CRC Press Inc, 1995, pp. 93-102]. Examples of the polymer include dextran, pullulan, mannan, amylopectin, hydroxyethyl starch and the like. As a polyoxyethylene derivative, polysorbate 80, Pluronic F68, polyoxyethylene hardened castor oil 60, polyoxyethylene lauryl alcohol, PEG-DSPE, etc. are mentioned, for example. Liposomal surface modification can also be used as one of the methods in which the core fine particles contain lipid derivatives or fatty acid derivatives or surfactants of one or more substances selected from sugars, peptides, nucleic acids and water-soluble polymers.

리포솜의 평균 입자 직경은 소망에 의해 자유롭게 선택할 수 있다. 평균 입자 직경을 조절하는 방법으로서는, 예를 들어 익스트루젼법, 큰 다중막 리포솜 (MLV) 을 기계적으로 분쇄 (구체적으로는 멘톤고린, 마이크로플루이다이저 등을 사용) 하는 방법［R. H. Muller, S. Benita, B. Bohm 편저, Emulsion and Nanosuspensions for the Formulation of Poorly Soluble Drugs, 독일, Scientific Publishers Stuttgart, 1998년, p.267-294 참조］등을 들 수 있다. The average particle diameter of liposomes can be freely selected as desired. As a method of adjusting an average particle diameter, for example, an extrusion method and a method of mechanically crushing a large multi-film liposome (MLV) (specifically, using mentongorin, a microfluidizer, etc.) [R. H. Muller, S. Benita, B. Bohm, Emulsion and Nanosuspensions for the Formulation of Poorly Soluble Drugs, Germany, Scientific Publishers Stuttgart, 1998, p. 267-294.

또, 코어 미립자를 구성하는, 예를 들어 약물, 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드, 미립자 제제 등에서 선택되는 2 개 이상을 조합시킨 복합체 (구체적으로는, 예를 들어 양이온성 지질을 함유하는 리포솜 또는 지질 집합체와 핵산의 복합체, 폴리-L-라이신 등의 양이온성 고분자를 함유하는 고분자와 핵산의 복합체, 포스파티딘산 등의 음이온성 지질을 함유하는 리포솜 또는 지질 집합체와 단백질의 복합체, 스티렌말레산 등의 음이온성 고분자를 함유하는 고분자와 단백질의 복합체, 양이온성 지질을 함유하는 리포솜 또는 지질 집합체와 단백질의 복합체, 폴리-L-라이신 등의 양이온성 고분자를 함유하는 고분자와 단백질의 복합체 등을 들 수 있다) 의 제조 방법은 예를 들어 수중에서 약물과 지질 집합체, 리포솜, 고분자 등을 혼합하는 것만의 제조 방법이어도 되고, 이 때, 필요하면 추가로 정립 공정이나 무균화 공정도 등을 부가할 수도 있다. 또, 복합체 형성을 예를 들어 아세톤, 에테르 등 여러 가지 용매 중에서 실시하는 것도 가능하다. 예를 들어, 핵산과 지질을 에탄올 등의 유기 용매에 용해시키고 용매 증류 제거한 후, 생리 식염수 등을 첨가, 진탕 교반하여 핵산 복합체를 형성시킬 수도 있다.In addition, a complex (specifically, for example, a cationic lipid), which combines two or more selected from drugs, lipid aggregates, liposomes, emulsion particles, polymers, metal colloids, particulate preparations, etc. Complexes of liposomes or lipid aggregates and nucleic acids containing, complexes of polymers containing cationic polymers such as poly-L-lysine and nucleic acids, complexes of liposomes or lipid aggregates and proteins containing anionic lipids such as phosphatidic acid, Complex of protein and protein containing anionic polymer such as styrene maleic acid, complex of liposome or lipid aggregate and protein containing cationic lipid, complex of protein and protein containing cationic polymer such as poly-L-lysine And the like, for example, drugs and lipid aggregates, liposomes, and polymers are mixed in water. The manufacturing method only by combining may be sufficient, and a sizing process, a sterilization process, etc. can also be added at this time as needed. Moreover, complex formation can also be performed in various solvents, such as acetone and an ether, for example. For example, the nucleic acid and lipids may be dissolved in an organic solvent such as ethanol, and the solvent is distilled off, followed by addition of physiological saline or the like to form a nucleic acid complex.

본 발명에 있어서의 코어 미립자의 크기는 평균 입자 직경이 수 ㎚ ∼ 수백 ㎛ 인 것이 바람직하고, 10㎚ ∼ 5㎛ 인 것이 보다 바람직하며, 30㎚ ∼ 300㎚ 인 것이 더욱 바람직하고, 50㎚ ∼ 200㎚ 인 것이 가장 바람직하다. It is preferable that the average particle diameter of the core fine particle in this invention is several nm-several hundred micrometers, It is more preferable that it is 10 nm-5 micrometers, It is still more preferable that it is 30 nm-300 nm, 50 nm-200 Most preferably.

본 발명에 있어서의 피복층 성분은, 본 발명에서 사용되는 극성 유기 용매의 농도를 조정함으로써 그 유기 용매를 함유하는 액 중에 분산 가능한 피복층 성분으로서, 그 피복층 성분으로서는, 예를 들어 상기의 코어 미립자의 정의 중에서 예시한 지질, 계면 활성제, 고분자 등을 들 수 있고, 바람직하게는 상기의 코어 미립자의 정의 중에서 예시한 지질 및 계면 활성제에서 선택되는 1 개 이상의 물질을 들 수 있고, 보다 바람직하게는 피복층이 지질막이 되는 지질 및 계면 활성제에서 선택되는 1 개 이상의 물질을 들 수 있고, 더욱 바람직하게는 지질, 계면 활성제 중의 중성 지질을 들 수 있다. 여기에서 중성 지질이란, 상기의 코어 미립자의 정의 중에서 예시한 지질 및 계면 활성제 중 상기의 양이온성 지질, 양이온성 계면 활성제, 음이온성 지질 및 음이온성 계면 활성제를 제외한 것을 말하며, 중성 지질로서 보다 바람직하게는 인지질, 글리세로 당지질, 스핑고 당지질 등을 들 수 있고, 더욱 바람직하게는 인지질을 들 수 있고, 가장 바람직하게는 EPC 를 들 수 있다. The coating layer component in this invention is a coating layer component which can be disperse | distributed in the liquid containing this organic solvent by adjusting the density | concentration of the polar organic solvent used by this invention, As the coating layer component, for example, the definition of said core fine particle Examples thereof include lipids, surfactants, polymers, and the like, and preferably one or more substances selected from lipids and surfactants exemplified in the definition of the core fine particles, and more preferably the coating layer is a lipid membrane. One or more substances chosen from the lipid and surfactant used are mentioned, More preferably, the lipid and the neutral lipid in surfactant are mentioned. Neutral lipids herein refer to those excluding the cationic lipids, cationic surfactants, anionic lipids and anionic surfactants among the lipids and surfactants exemplified in the definition of the core fine particles, more preferably as neutral lipids. The phospholipid, glycerol glycolipid, sphingo glycolipid, etc. are mentioned, More preferably, a phospholipid is mentioned, Most preferably, EPC is mentioned.

본 발명에 있어서의 코어 미립자와 피복층 성분의 조합은, 특별히 한정되지 않는데, 코어 미립자가 약물과 리포솜의 복합체를 구성 성분으로 하는 미립자로서, 피복층 성분이 지질 및/또는 계면 활성제인 조합이 바람직하다. 코어 미립자가 리포솜을 구성 성분으로 하는 미립자로서, 피복층 성분이 지질 및/또는 계면 활성제로서 피복층이 지질막인 피복 미립자는 그 구성으로부터 좁은 의미의 리포솜과 분류되고, 미립자가 리포솜을 구성 성분으로 하는 미립자 이외에 피복층 성분이 지질 및/또는 계면 활성제로서 피복층이 지질막인 피복 미립자는 넓은 의미의 리포솜과 분류된다. 본 발명에 있어서 코어 미립자의 구성 성분도 피복 미립자도 리포솜인 것이 보다 바람직하다. Although the combination of a core fine particle and a coating layer component in this invention is not specifically limited, The combination whose core particle is a microparticle which makes a composite of a drug and a liposome as a component is preferable, and a combination whose coating layer component is a lipid and / or surfactant. The core fine particles are liposomes as constituents, the coating layer component is lipid and / or surfactant, and the coated fine particles are lipid membranes and are classified into liposomes in a narrow sense from the constitution, and the fine particles are fine particles other than liposomes as constituents. The coated fine particles in which the coating layer component is a lipid and / or a surfactant and the coating layer is a lipid membrane are classified into liposomes in a broad sense. In the present invention, the constituents of the core fine particles and the coated fine particles are more preferably liposomes.

또, 그 피복층 성분은, 분자 내에 본 발명에서 사용되는 극성 유기 용매와 친화성이 있는 소수성 부분을 갖고, 그 소수성 부분에 의해 그 극성 유기 용매에 대해 가용인 것이 바람직하고, 분자 내에 친수성 부분도 갖는 것이 더욱 바람직하다. 또, 공정 A 에 있어서 바람직하게는 0.1 ∼ 1000㎚, 보다 바람직하게는 0.3 ∼ 500㎚ 의 크기를 갖는 응집체 또는 미셀의 형태가 되는 피복층 성분이 바람직하다. 그 응집체 또는 미셀 형태의 크기는, 원하는 크기의 구멍을 갖는 멤브레인 필터에 통과 가능한지의 여부에 따라 측정을 할 수 있다. Moreover, it is preferable that the coating layer component has a hydrophobic part which has affinity with the polar organic solvent used by this invention in a molecule | numerator, and is soluble with respect to the polar organic solvent by the hydrophobic part, and also has a hydrophilic part in a molecule | numerator. More preferred. Moreover, in the process A, the coating layer component which becomes the form of the aggregate or micelle which preferably has a magnitude | size of 0.1-1000 nm, More preferably, 0.3-500 nm is preferable. The size of the aggregate or micelle shape can be measured depending on whether or not it can pass through a membrane filter having a hole of a desired size.

본 발명에 있어서 피복층 성분이 극성 유기 용매에 대해 가용이란, 피복층 성분이 극성 유기 용매에 용해되는 성질을 갖는 경우, 가용화제 등을 이용함으로써 피복층 성분이 극성 유기 용매에 용해되는 성질을 갖는 경우, 피복층 성분이 극성 유기 용매 중에서 응집체 또는 미셀 등을 형성하여 유탁 또는 에멀션화할 수 있는 성질을 갖는 경우 등을 포함하고, 피복층 성분이 극성 유기 용매에 용해되는 성질을 갖는 경우인 것이 바람직하다. In the present invention, when the coating layer component is soluble to the polar organic solvent, when the coating layer component has the property of dissolving in the polar organic solvent, when the coating layer component has the property of dissolving in the polar organic solvent by using a solubilizer or the like, the coating layer It is preferable to include the case where a component has the property to form an aggregate, micelle, etc. in a polar organic solvent, and has the property which can be emulsified or emulsified, and it is preferable when a coating layer component has a property which melt | dissolves in a polar organic solvent.

또, 피복층이 지질막인 경우에 이용되는 지질로서, 예를 들어 합성 지질 등도 들 수 있다. 합성 지질로서는, 예를 들어 불소 첨가 포스파티딜콜린, 불소 첨가 계면 활성제, 브롬화 디알킬암모늄 등을 들 수 있고, 이들은 단독으로 또는 다른 지질 등과 조합시켜 이용되어도 된다. 또, 피복층이 지질막인 경우에는 피복층 성분은, 바람직하게는 수용성 물질의 지질 유도체, 지방산 유도체 또는 지방족 탄화수소 유도체, 또는 상기의 당, 펩티드, 핵산 및 수용성 고분자에서 선택되는 1 개 이상의 물질의 지질 유도체 또는 지방산 유도체 또는 계면 활성제를 함유하고, 상기의 수용성 고분자의 지질 유도체 또는 지방산 유도체를 함유하는 것이 보다 바람직하고, 상기의 폴리에틸렌글리콜화 인지질을 함유하는 것이 더욱 바람직하며, 폴리에틸렌글리콜-포스파티딜에탄올아민을 함유하는 것이 가장 바람직하다.Moreover, synthetic lipid etc. are mentioned as a lipid used when a coating layer is a lipid film, for example. Examples of the synthetic lipid include fluorinated phosphatidylcholine, fluorinated surfactant, dialkylammonium bromide, and the like, and these may be used alone or in combination with other lipids. In the case where the coating layer is a lipid membrane, the coating layer component is preferably a lipid derivative, a fatty acid derivative or an aliphatic hydrocarbon derivative of a water-soluble substance, or a lipid derivative of one or more substances selected from the above sugars, peptides, nucleic acids and water-soluble polymers, or It is more preferable to contain a fatty acid derivative or a surfactant, to contain a lipid derivative or a fatty acid derivative of the above water-soluble polymer, more preferably to contain the polyethyleneglycolated phospholipid, and to contain polyethylene glycol-phosphatidylethanolamine. Most preferred.

본 발명에 있어서의 수용성 물질의 지질 유도체, 지방산 유도체 또는 지방족탄화수소 유도체로서는, 예를 들어 상기의 당, 단백질 및 펩티드, 핵산 및 수용성 고분자에서 선택되는 1 개 이상 물질의 지질 유도체 또는 지방산 유도체, 또는 당, 단백질 및 펩티드, 핵산 및 수용성 고분자에서 선택되는 1 개 이상 물질의 지방족 탄화수소 유도체를 들 수 있고, 바람직하게는 당지질, 또는 수용성 고분자의 지질 유도체 또는 지방산 유도체를 들 수 있고, 보다 바람직하게는 수용성 고분자의 지질 유도체 또는 지방산 유도체를 들 수 있다. As the lipid derivative, fatty acid derivative or aliphatic hydrocarbon derivative of the water-soluble substance in the present invention, for example, the lipid derivative or fatty acid derivative of one or more substances selected from the above-mentioned sugars, proteins and peptides, nucleic acids and water-soluble polymers, or sugars And aliphatic hydrocarbon derivatives of at least one substance selected from proteins and peptides, nucleic acids and water-soluble polymers, preferably glycolipids, lipid derivatives or fatty acid derivatives of water-soluble polymers, and more preferably water-soluble polymers. Lipid derivatives or fatty acid derivatives.

수용성 물질의 지방족 탄화수소 유도체로서는 수용성 물질과, 예를 들어 긴사슬 지방족 알코올, 폴리옥시프로필렌알킬, 글리세린 지방산 에스테르의 알코올성 잔기 등이 결합하여 이루어지는 것을 들 수 있다. Examples of the aliphatic hydrocarbon derivative of the water-soluble substance include those in which a water-soluble substance is bonded to an alcoholic moiety of a long chain aliphatic alcohol, polyoxypropylene alkyl, a glycerin fatty acid ester, or the like.

당, 펩티드 또는 핵산의 지방족 탄화수소 유도체로서는, 예를 들어 자당, 소르비톨, 유당 등의 당, 예를 들어 카세인 유래 펩티드, 난백 유래 펩티드, 대두 유래 펩티드, 글루타티온 등의 펩티드, 또는 예를 들어 DNA, RNA, 플라스미드, siRNA, ODN 등의 핵산의 지방족 탄화수소 유도체를 들 수 있다. As aliphatic hydrocarbon derivatives of sugars, peptides or nucleic acids, for example, sugars such as sucrose, sorbitol, lactose and the like, for example, casein-derived peptides, egg white-derived peptides, soybean-derived peptides, glutathione and the like, or for example DNA, RNA And aliphatic hydrocarbon derivatives of nucleic acids such as plasmids, siRNAs, and ODNs.

수용성 고분자의 지방족 탄화수소 유도체로서는, 예를 들어 폴리에틸렌글리콜, 폴리글리세린, 폴리에틸렌이민, 폴리비닐알코올, 폴리아크릴산, 폴리아크릴아미드, 올리고당, 덱스트린, 수용성 셀룰로오스, 덱스트란, 콘드로이틴 황산, 폴리글리세린, 키토산, 폴리비닐피롤리돈, 폴리아스파르트산 아미드, 폴리-L-라이신, 만난, 풀루란, 올리고글리세롤 등 또는 그들의 유도체의 지방족 탄화수소 유도체를 들 수 있고, 보다 바람직하게는 폴리에틸렌글리콜 유도체, 폴리글리세린 유도체 등의 지방족 탄화수소 유도체를 들 수 있고, 더욱 바람직하게는 폴리에틸렌글리콜 유도체의 지방족 탄화수소 유도체를 들 수 있다. As aliphatic hydrocarbon derivatives of water-soluble polymers, for example, polyethylene glycol, polyglycerol, polyethyleneimine, polyvinyl alcohol, polyacrylic acid, polyacrylamide, oligosaccharide, dextrin, water soluble cellulose, dextran, chondroitin sulfate, polyglycerine, chitosan, poly Aliphatic hydrocarbon derivatives of vinylpyrrolidone, polyaspartic acid amide, poly-L-lysine, mannan, pullulan, oligoglycerol and the like or derivatives thereof, and more preferably aliphatic such as polyethylene glycol derivatives and polyglycerol derivatives. Hydrocarbon derivatives are mentioned, More preferably, the aliphatic hydrocarbon derivative of a polyethyleneglycol derivative is mentioned.

본 발명에 있어서의 피복 미립자는 피복층 성분이 가용인 극성 유기 용매를 함유한 액 중에 코어 미립자가 용해되지 않고 피복층 성분이 분산 상태로 존재하는 것이 가능한 농도로 그 극성 유기 용매를 함유시켜, 그 액 중에 그 코어 미립자 및 그 피복층 성분을 분산시키는 공정 (공정 A) 및 그 코어 미립자를 그 피복층 성분으로 피복하는 공정 (공정 B) 을 포함하는 것을 특징으로 하는 제조 방법, 예를 들어 코어 미립자가 분산되고 피복층 성분이 용해된 극성 유기 용매를 함유하는 액을 피복층 성분이 석출되어 분산될 때까지 극성 유기 용매 농도를 감소시키고, 코어 미립자와 피복층 성분을 극성 유기 용매를 함유하는 액 중에 분산시키는 공정, 얻어진 코어 미립자 및 피복층 성분의 분산액을 코어 미립자가 피복층 성분으로 피복 되는데 충분한 시간, 정치 또는 혼합하는 공정을 포함한 제조 방법 등으로 제조되고, 피복 미립자는 분산액 상태로 얻어진다. 본 발명의 제조 방법은 공정 A 에서 얻어지는 코어 미립자 및 피복층 성분의 분산액에 피복층 성분이 가용인 극성 유기 용매가 함유되고, 그 공정에서 얻어지는 액 중의 극성 유기 용매의 농도가 코어 미립자가 용해되지 않고 피복층 성분의 적어도 일부가 용해되지 않으며 분산 상태로 존재하는 것이 가능한 농도인 것으로 코어 미립자를 그 피복층 성분으로 피복 하는 것을 특징으로 하고, 공정 B 는 공정 A 에 이어서 실시되거나 또는 공정 B 는 공정 A 에 포함된다. 코어 미립자가 분산된다는 것은, 코어 미립자가 현탁, 유탁 또는 에멀션화, 바람직하게는 현탁되어 있는 상태를 말하며, 코어 미립자의 대부분이 분산되고 나머지 부분이 용해되어 있는 상태 또는 일부가 침전되어 있는 상태도 포함하는데, 코어 미립자의 가능한 한 전부가 분산되어 있는 것이 바람직하다. 또, 피복층 성분이 분산된다는 것은, 피복층 성분이 응집체 또는 미셀 등을 형성하고 현탁, 유탁 또는 에멀션화, 바람직하게는 유탁 또는 에멀션화되어 있는 상태를 말하며, 피복층 성분의 대부분이 응집체 또는 미셀 등을 형성하고 유탁 또는 에멀션화되고 나머지 부분이 용해되어 있는 상태, 피복층 성분의 대부분이 응집체 또는 미셀 등을 형성하고 현탁, 유탁 또는 에멀션화, 바람직하게는 유탁 또는 에멀션화되고 나머지 부분이 침전되어 있는 상태 등을 포함한다. 극성 유기 용매를, 사용하는 피복층 성분이 가용인 극성 유기 용매로 하고, 공정 A 에 의해 얻어지는 분산액 중의 그 극성 유기 용매의 농도가, 코어 미립자가 용해되지 않고 피복층 성분이 분산 상태로 존재하는 것이 가능한 농도가 된다면 분산액의 조제 방법은 어떠한 형태도 취할 수 있다. 예를 들어, 코어 미립자가 분산되고 피복층 성분이 용해된 극성 유기 용매를 함유하는 액을 피복층 성분이 석출되어 분산될 때까지 극성 유기 용매 농도를 감소시키고, 코어 미립자와 피복층 성분을 극성 유기 용매를 함유하는 액 중에 분산시키는 경우에는 피복층 성분을 극성 유기 용매를 함유한 액에 용해시키고, 한편, 코어 미립자를 극성 유기 용매를 함유하지 않거나 또는 코어 미립자가 용해되지 않은 농도로 극성 유기 용매를 함유하는 액에 분산시키고, 양 액을 혼합하여 코어 미립자가 분산되고 피복층 성분이 용해된 극성 유기 용매를 함유하는 액을 조제하여, 그 액을 피복층 성분이 석출되어 분산될 때까지 극성 유기 용매 농도를 감소시키고, 코어 미립자와 피복층 성분을 극성 유기 용매를 함유하는 액 중에 분산시키는 조제 방법 등을 들 수 있다. The coated fine particles in the present invention contain the polar organic solvent in a concentration such that the core fine particles are not dissolved in the liquid containing the polar organic solvent in which the coating layer component is soluble, and the coating layer component can be dispersed in the liquid. A manufacturing method comprising the step of dispersing the core fine particles and the coating layer component (step A) and the step of coating the core fine particles with the coating layer component (step B), for example, the core fine particles are dispersed and the coating layer The step of reducing the concentration of the polar organic solvent until the coating layer component is deposited and dispersed in the liquid containing the polar organic solvent in which the component is dissolved, and dispersing the core fine particles and the coating layer component in the liquid containing the polar organic solvent. And sufficient time for the core fine particles to be coated with the coating layer component in the dispersion of the coating layer component, It is manufactured by the manufacturing method including the process of standing still or mixing, and a coating fine particle is obtained in a dispersion state. In the production method of the present invention, a polar organic solvent in which the coating layer component is soluble is contained in the dispersion of the core fine particles and the coating layer component obtained in step A, and the concentration of the polar organic solvent in the liquid obtained in the step does not dissolve the core fine particles and the coating layer component At least a part of is a concentration at which it is possible to dissolve and exist in a dispersed state, characterized in that the core fine particles are coated with the coating layer component, and step B is carried out after step A or step B is included in step A. Dispersion of the core fine particles refers to a state in which the core fine particles are suspended, suspended or emulsified, and preferably suspended, and also includes a state in which most of the core fine particles are dispersed and the remainder is dissolved or a portion is precipitated. It is preferable that all of the core fine particles are dispersed as much as possible. In addition, the coating layer component dispersed means a state in which the coating layer component forms agglomerates or micelles and is suspended, suspended or emulsified, preferably emulsion or emulsified, and most of the coating layer components form agglomerates or micelles. And emulsion or emulsion, and the remaining part is dissolved, the majority of the coating layer components to form aggregates or micelles, and suspended, emulsion or emulsified, preferably emulsion or emulsified, and the remaining part is precipitated, etc. Include. A concentration in which the polar organic solvent is used as a polar organic solvent in which the coating layer component to be used is soluble, and the concentration of the polar organic solvent in the dispersion liquid obtained by step A can exist in a dispersed state without the core fine particles being dissolved. If so, the method for preparing the dispersion may take any form. For example, the liquid containing the polar organic solvent in which the core fine particles are dispersed and the coating layer component dissolved therein is reduced in the concentration of the polar organic solvent until the coating layer component is precipitated and dispersed, and the core fine particles and the coating layer component contain the polar organic solvent. When disperse | distributing in the liquid to make, a coating layer component is melt | dissolved in the liquid containing a polar organic solvent, On the other hand, the core microparticles | fine-particles do not contain a polar organic solvent or the liquid containing a polar organic solvent in the density | concentration which a core microparticle does not melt | dissolve Disperse and mix both liquids to prepare a liquid containing a polar organic solvent in which the core fine particles are dispersed and the coating layer component is dissolved, thereby reducing the polar organic solvent concentration until the coating layer component is precipitated and dispersed, and the core And preparation methods for dispersing the fine particles and the coating layer component in a liquid containing a polar organic solvent. have.

또, 공정 B 는 공정 A 에서 얻어지는 액을 그 코어 미립자가 그 피복층 성분으로 피복되는 데에 충분한 시간, 정치 또는 혼합하는 공정인 것이 바람직하고, 정치 또는 혼합하는 시간은 코어 미립자 및 피복층 성분을 극성 유기 용매를 함유하는 액 중에 분산시킨 후에 순간적으로 종료시키는 것이 아니면 제한은 없는데, 피복층 성분이나 극성 유기 용매를 함유하는 액의 종류에 따라 임의로 설정할 수 있고, 얻어진 피복 미립자의 수율이 정상량이 되는 시간을 설정하는 것이 바람직하고, 예를 들어 3 초 ∼ 30 분이다. Moreover, it is preferable that process B is a process of time sufficient to allow the core microparticles | fine-particles to coat | cover the liquid obtained by process A with the coating layer component, and to stand or mix, and the time to stand or mix the core microparticles and coating layer component is polar organic There is no restriction as long as it is not terminated instantaneously after dispersing in a liquid containing a solvent, but it can be arbitrarily set according to the kind of the coating layer component or the liquid containing a polar organic solvent, and the time for which the yield of the obtained coating fine particles becomes a normal amount is set. It is preferable to, for example, 3 seconds to 30 minutes.

또, 공정 A 는 피복층 성분이 용해된 극성 유기 용매를 함유한 액 (액 A) 을 조제하는 공정, 액 A 와 혼합 가능하고, 또한 코어 미립자가 분산되고 극성 유기 용매를 함유하지 않거나 또는 액 A 보다 낮은 비율로 극성 유기 용매를 함유하는 액 (액 B) 을 조제하는 공정, 및 액 A 와 액 B 를 혼합하여 액 C 를 조정하는 공정이어도 된다. 액 A 및 액 B 는 혼합 후의 액 C 중의 극성 유기 용매의 농도가, 코어 미립자가 용해되지 않고 피복층 성분이 분산 상태로 존재하는 것이 가능한 농도이면, 그 공급 방법은 어떠한 형태도 취할 수 있고, 코어 미립자가 피복층 성분으로 피복되는 데에 충분한 시간, 정치 또는 혼합하는 공정을 포함하는 것이 바람직하고, 정치 또는 혼합하는 시간은 상기와 동일하다. Moreover, process A is a process of preparing the liquid (liquid A) containing the polar organic solvent in which the coating layer component melt | dissolved, and can be mixed with liquid A, and core fine particles disperse | distribute and contain no polar organic solvent, or The process of preparing the liquid (liquid B) containing a polar organic solvent at low ratio, and the process of adjusting liquid C by mixing liquid A and liquid B may be sufficient. If the concentration of the polar organic solvent in the liquid C after the mixing of the liquid A and the liquid B is a concentration at which the core fine particles are not dissolved and the coating layer component is present in a dispersed state, the supply method may take any form, and the core fine particles It is preferable to include the time sufficient to coat | cover with a coating-layer component, the process of standing still or mixing, and the time of standing or mixing is the same as the above.

또, 공정 A 는 피복층 성분이 분산된 액 (액 D) 을 조제하는 공정, 액 D 와 혼합 가능하고, 또한 코어 미립자가 분산된 액 (액 E) 을 조제하는 공정 및 액 D 와 액 E 를 혼합하여 액 F 를 조정하는 공정을 포함한 공정이어도 된다. 액 D 및 액 E 는, 액 D 및 액 E 의 적어도 일방이 극성 유기 용매를 함유하는 액이며, 극성 유기 용매가 피복층 성분이 가용인 극성 유기 용매이며, 액 F 중의 극성 유기 용매의 농도가 코어 미립자가 용해되지 않고 피복층 성분이 분산 상태로 존재하는 것이 가능한 농도이면, 그 공급 방법은 어떠한 형태도 취할 수 있고, 코어 미립자가 피복층으로 피복되는 데에 충분한 시간, 정치 또는 혼합하는 공정을 포함하는 것이 바람직하고, 정치 또는 혼합하는 시간은 상기와 동일하다. Moreover, process A is a process of preparing the liquid (liquid D) in which the coating layer component was disperse | distributed, and the process of preparing the liquid (liquid E) in which the core fine particle was disperse | distributed, and mixing liquid D and liquid E The process including the process of adjusting liquid F may be sufficient. Liquid D and liquid E are liquids in which at least one of liquid D and liquid E contains a polar organic solvent, the polar organic solvent is a polar organic solvent in which the coating layer component is soluble, and the concentration of the polar organic solvent in the liquid F is the core fine particles. If the concentration is such that the coating layer component can be present in a dispersed state without dissolving, the supplying method can take any form, and preferably includes a step of allowing sufficient time, standing, or mixing to coat the core fine particles with the coating layer. The time to let stand or mix is the same as the above.

또, 공정 A 는 피복층 성분이 분산된 극성 유기 용매를 함유한 액 (액 G) 을 조제하는 공정 및 액 G 에 코어 미립자를 분산시키는 공정을 포함하는 공정이어도 된다. 액 G 가 극성 유기 용매를 함유하는 액이고, 극성 유기 용매가 피복층 성분이 가용인 극성 유기 용매이며, 액 G 중의 극성 유기 용매의 농도가 코어 미립자가 용해되지 않고 피복층 성분이 분산 상태로 존재하는 것이 가능한 농도이면, 그 공급 방법은 어떠한 형태도 취할 수 있고, 코어 미립자가 피복층으로 피복되는 데에 충분한 시간, 정치 또는 혼합하는 공정을 포함하는 것이 바람직하고, 정치 또는 혼합하는 시간은 상기와 동일하다. Moreover, the process A may be a process including the process of preparing the liquid (liquid G) containing the polar organic solvent in which the coating layer component was disperse | distributed, and the process of disperse | distributing a core fine particle in liquid G. Liquid G is a liquid containing a polar organic solvent, the polar organic solvent is a polar organic solvent in which the coating layer component is soluble, and the concentration of the polar organic solvent in the liquid G is such that the core fine particles are not dissolved and the coating layer component is present in a dispersed state. If possible concentration, the supply method may take any form, and it is preferable to include the time sufficient to allow core microparticles | fine-particles to be coat | covered with a coating layer, the process of standing still or mixing, and the time of standing or mixing is the same as the above.

또, 공정 A 는 피복층 성분 및 코어 미립자가 분산된 액 (액 H) 을 조제하는 공정, 액 H 와 혼합 가능하고, 또한 극성 유기 용매를 함유하는 액을 액 H 와 혼합하여 액 I 를 조제하는 공정을 포함한 공정이어도 된다. 액 H 는 코어 미립자 및 피복층 성분의 각각을 극성 유기 용매 이외의 용매 중에 분산시켜 양 분산액을 혼합한 것이어도 되고, 코어 미립자 또는 피복층 성분의 어느 일방을 극성 유기 용매 이외의 용매 중에 분산시켜, 그 분산액에 고체 상태의 코어 미립자 또는 피복층 성분의 남은 일방을 첨가하여 분산시킨 것이어도 된다. 또, 극성 유기 용매는 피복층 성분이 가용인 극성 유기 용매이며, 액 I 중의 극성 유기 용매의 농도가, 코어 미립자가 용해되지 않고 피복층 성분이 분산 상태로 존재하는 것이 가능한 농도이면, 그 공급 방법은 어떠한 형태도 취할 수 있고, 코어 미립자가 피복층으로 피복되는 데에 충분한 시간, 정치 또는 혼합하는 공정을 포함하는 것이 바람직하고, 정치 또는 혼합하는 시간은 상기와 동일하다. Moreover, process A is a process of preparing the liquid (liquid H) in which the coating layer component and the core microparticles | fine-particles were disperse | distributed, and the process of mixing liquid H containing liquid organic solvent with liquid H, and preparing liquid I The process including may be sufficient. The liquid H may disperse each of the core fine particles and the coating layer components in a solvent other than the polar organic solvent, and may mix both dispersion liquids. The dispersion liquid may disperse one of the core fine particles or the coating layer components in a solvent other than the polar organic solvent. The remaining one of the core fine particles in the solid state or the coating layer component may be added and dispersed. The polar organic solvent is a polar organic solvent in which the coating layer component is soluble. If the concentration of the polar organic solvent in the liquid I is such that the core fine particles are not dissolved and the coating layer component can be present in a dispersed state, the supply method is It is also possible to take the form, and it is preferable to include the time sufficient to allow a core fine particle to coat | cover with a coating layer, the process of standing still or mixing, and the time of standing or mixing is the same as the above.

본 발명에서 사용되는 극성 유기 용매로서는, 예를 들어 메탄올, 에탄올, n-프로판올, 2-프로판올, n-부탄올, 2-부탄올, tert-부탄올 등의 알코올, 글리세린, 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 등의 글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 폴리옥시에틸렌 경화 피마자유, 폴리옥시에틸렌소르비탄 지방산 에스테르 또는 에테르 등의 폴리알킬렌글리콜 등을 들 수 있고, 바람직하게는 에탄올을 들 수 있다. 극성 유기 용매 이외의 용매로서는, 예를 들어, 물, 액체 이산화탄소, 액체 탄화수소, 할로겐화 탄소, 할로겐화 탄화수소 등을 들 수 있고, 바람직하게는 물을 들 수 있다. 또, 공정 A 에서 얻어지는 액은 완충 성분 등을 함유하고 있어도 된다. Examples of the polar organic solvent used in the present invention include alcohols such as methanol, ethanol, n-propanol, 2-propanol, n-butanol, 2-butanol and tert-butanol, glycols such as glycerin, ethylene glycol and propylene glycol. Polyalkylene glycol, such as polyethyleneglycol, polyoxyethylene hardened castor oil, polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester, or ether, etc. are mentioned, Preferably, ethanol is mentioned. As a solvent other than a polar organic solvent, water, a liquid carbon dioxide, a liquid hydrocarbon, a halogenated carbon, a halogenated hydrocarbon etc. are mentioned, for example, Preferably water is mentioned. Moreover, the liquid obtained at process A may contain the buffer component etc.

극성 유기 용매와 극성 유기 용매 이외의 용매의 조합은 서로 혼합 가능한 조합인 것이 바람직하고, 각 공정에 있어서의 극성 유기 용매를 함유하는 액 중의 용매에 대한 상기의 코어 미립자의 용해도, 상기의 피복층 성분의 용해도 등을 고려하여 선택할 수 있다. 한편, 코어 미립자에 대해서는 각 공정에 있어서의 극성 유기 용매를 함유하는 액 중의 용매의 어느 것에 대한 용해도도 낮은 것이 바람직하고, 또 이용되는 극성 유기 용매 및 이용되는 극성 유기 용매 이외의 용매의 어느 것에 대한 용해도도 낮은 것이 바람직하며, 피복층 성분에 대해서는 이용되는 극성 유기 용매에 대한 용해도가 높은 것이 바람직하고, 사용되는 극성 유기 용매 이외의 용매에 대한 용해도가 낮은 것이 바람직하다. It is preferable that the combination of a polar organic solvent and a solvent other than a polar organic solvent is a combination which can be mixed with each other, and the solubility of the said core fine particle with respect to the solvent in the liquid containing a polar organic solvent in each process, of the said coating layer component The solubility and the like can be selected in consideration. On the other hand, as for the core fine particles, the solubility in any of the solvents in the liquid containing the polar organic solvent in each step is also preferably low, and in addition to the polar organic solvent used and any solvent other than the polar organic solvent used. It is preferable that solubility is also low, It is preferable that the solubility with respect to the polar organic solvent used for a coating layer component is high, and that solubility with respect to solvents other than the polar organic solvent used is preferable.

또, 코어 미립자가 이용되는 극성 유기 용매에 용해되는 경우, 그 용해도는 피복층 성분의 용해도보다 낮은 것이 바람직하다. 여기에서, 코어 미립자의 용해도가 낮다는 것은, 코어 미립자의 각 구성 성분의 용매 중에 있어서의 용출성이 작은 것이며, 각 구성 성분의 개개의 용해도가 높아도 각 구성 성분간의 결합 등에 의해 각 구성 성분의 용출성이 작아지면 된다. Moreover, when core microparticles | fine-particles are melt | dissolved in the polar organic solvent used, it is preferable that the solubility is lower than the solubility of a coating layer component. Here, the low solubility of the core fine particles means that the elutability in the solvent of each component of the core fine particles is small, and even if the individual solubility of each component is high, elution of each component by the coupling between the components, etc. The castle should be small.

공정 A 에서 얻어지는 액의 극성 유기 용매의 비율은, 본 발명에 있어서의 코어 미립자와 피복층 성분이 모두 분산되어 있는 조건만 만족하면 특별히 한정되는 것은 아니고, 이용하는 용매나 코어 미립자, 피복층 성분의 종류 등에 따라 상이한데, 공정 A 에서 얻어지는 액 중의 극성 유기 용매의 농도는, 바람직하게는 1 ∼ 80vol%, 보다 바람직하게는 10 ∼ 60vol%, 더욱 바람직하게는 20 ∼ 50vol%, 가장 바람직하게는 30 ∼ 40vol% 이다. The proportion of the polar organic solvent of the liquid obtained in the step A is not particularly limited as long as the conditions in which both the core fine particles and the coating layer components are dispersed in the present invention are not particularly limited, and depending on the type of solvent, core fine particles, coating layer components, etc. to be used. Although the concentration of the polar organic solvent in the liquid obtained in the step A is preferably 1 to 80 vol%, more preferably 10 to 60 vol%, still more preferably 20 to 50 vol%, most preferably 30 to 40 vol% to be.

또, 공정 A 에서 얻어지는 액에 있어서 분산액의 용매 중에서 피복층 성분과 코어 미립자 표면 사이에서 친수성 상호 작용의 인력이 작용하는 것이 바람직하고, 따라서 코어 미립자 표면과 피복층 성분은 친수성 부분을 갖는 것이 바람직하다. Moreover, in the liquid obtained at the process A, it is preferable that the attraction force of a hydrophilic interaction acts between a coating layer component and a core fine particle surface in the solvent of a dispersion liquid, Therefore, it is preferable that a core particle surface and a coating layer component have a hydrophilic part.

각 공정에 있어서의 혼합 또는 분산 방법으로서는, 특별히 한정되는 것이 아니고, 예를 들어 인라인 믹서, 스태틱식 믹서, 프로펠러형 믹서, 로터/스테이터식 믹서, 터빈식 믹서, 톱니 블레이드, 콜로이드 밀, 고압 호모지나이저 등에 의한 혼합 또는 분산을 들 수 있고, 바람직하게는 인라인 믹서, 스태틱식 믹서, 프로펠러형 믹서, 로터/스테이터식 믹서 또는 터빈식 믹서에 의한 혼합 또는 분산을 들 수 있다. The mixing or dispersing method in each step is not particularly limited, and for example, an inline mixer, a static mixer, a propeller mixer, a rotor / stator mixer, a turbine mixer, a saw blade, a colloid mill, and a high pressure homo paper. Mixing or dispersion by a niger etc. is mentioned, Preferably, mixing or dispersion by an inline mixer, a static mixer, a propeller type mixer, a rotor / stator type mixer, or a turbine type mixer is mentioned.

예를 들어 피복층이 지질막인 본 발명에 있어서의 피복 미립자의 바람직한 제조 방법으로서는, 이하의 방법을 들 수 있다. For example, the following method is mentioned as a preferable manufacturing method of the coating fine particle in this invention whose coating layer is a lipid membrane.

(공정 1) 극성 유기 용매 함유 수용액 또는 극성 유기 용매에 지질막이 되는 지질 및/또는 계면 활성제 (지질막을 구성하는 성분) 를 용해 또는 분산시킨다. 이 때, 추가로 당, 펩티드, 핵산 및 수용성 고분자에서 선택되는 1 개 이상의 물질의 지질 유도체 또는 지방산 유도체 또는 계면 활성제 (예를 들어, 폴리에틸렌글리콜 수식 지질 유도체 등) 를 첨가해도 되고, 여기에서 첨가하는 당, 펩티드, 핵산 및 수용성 고분자에서 선택되는 1 개 이상 물질의 지질 유도체 또는 지방산 유도체 또는 계면 활성제의 양은 특별히 한정되는 것은 아니다. (Step 1) The lipid and / or the surfactant (component constituting the lipid membrane) to be a lipid membrane are dissolved or dispersed in an aqueous solution containing a polar organic solvent or a polar organic solvent. At this time, a lipid derivative or fatty acid derivative or surfactant (for example, polyethylene glycol modified lipid derivative, etc.) of one or more substances selected from sugars, peptides, nucleic acids and water-soluble polymers may be added, and here added The amount of lipid derivatives or fatty acid derivatives or surfactants of at least one substance selected from sugars, peptides, nucleic acids and water soluble polymers is not particularly limited.

(공정 2) 코어 미립자를 수용액에 분산 (현탁) 시킨다. (Step 2) The core fine particles are dispersed (suspended) in an aqueous solution.

(공정 3) 공정 1 에서 얻어진 액과 공정 2 에서 얻어진 액을 혼합한다. (Process 3) The liquid obtained at the process 1 and the liquid obtained at the process 2 are mixed.

이용하는 코어 미립자의 종류나 이용하는 피복층 성분의 종류에 따르지 않고 기본적으로는 상기와 동일한 방법으로 본 발명에 있어서의 피복 미립자를 제조할 수 있다. The coated fine particles in the present invention can be produced in basically the same manner as described above regardless of the type of the core fine particles to be used or the type of the coating layer component to be used.

본 발명의 피복 미립자의 제조 방법에 있어서, 공정 A 에서 얻어지는 액 중의 코어 미립자의 농도는, 코어 미립자를 피복층 성분으로 피복할 수 있으면 특별히 한정되는 것은 아니지만, 1㎍/mL ∼ 1g/mL 인 것이 바람직하고, 0.1 ∼ 500mg/mL 인 것이 보다 바람직하다. 또, 공정 A 에서 얻어지는 액 중의 피복층 성분 (예를 들어 지질 등) 의 농도는, 코어 미립자를 피복할 수 있으면 특별히 한정되는 것은 아닌데, 1㎍/mL ∼ 1g/mL 인 것이 바람직하고, 0.1 ∼ 400mg/mL 인 것이 보다 바람직하다. 본 발명의 피복 미립자의 제조 방법에 의해 얻어지는 피복 미립자에 있어서, 코어 미립자에 대한 피복층 성분의 비율은 중량비로 1 : 0.1 ∼ 1 : 1000 인 것이 바람직하고, 1 : 1 ∼ 1 : 10 인 것이 보다 바람직하다. In the method for producing coated fine particles of the present invention, the concentration of the core fine particles in the liquid obtained in Step A is not particularly limited as long as the core fine particles can be coated with the coating layer component, but is preferably 1 µg / mL to 1 g / mL. And it is more preferable that it is 0.1-500 mg / mL. Moreover, the density | concentration of the coating layer component (for example, lipid etc.) in the liquid obtained at process A will not be specifically limited if it can coat | cover a core fine particle, It is preferable that it is 1 microgram / mL-1 g / mL, and 0.1-400 mg It is more preferable that it is / mL. In the coated fine particle obtained by the manufacturing method of the coated fine particle of this invention, it is preferable that the ratio of the coating layer component with respect to a core fine particle is 1: 0.1-1: 1000 by weight ratio, and it is more preferable that it is 1: 1-1: 10. Do.

또, 본 발명의 피복 미립자의 제조 방법에 의해 얻어지는 피복 미립자의 크기는 평균 입자 직경이 300㎚ 이하인 것이 바람직하고, 200㎚ 이하인 것이 보다 바람직하며, 130㎚ 이하인 것이 더욱 바람직하고, 115㎚ 이하인 것이 가장 바람직하며, 예를 들어 주사 가능한 크기인 것이 바람직하다. 얻어지는 피복 미립자의 크기를 크게 하는 데에는, 피복되는 코어 미립자의 크기를 크게 하면 되고, 반대로 얻어지는 피복 미립자의 크기를 작게 하는 데에는, 피복되는 코어 미립자의 크기를 작게 하면 된다. Moreover, it is preferable that average particle diameter is 300 nm or less, It is more preferable that it is 200 nm or less, It is still more preferable that it is 130 nm or less, As for the magnitude | size of the coated fine particle obtained by the manufacturing method of the coated fine particle of this invention, it is most preferable that it is 115 nm or less. It is preferred, for example, to be injectable size. What is necessary is just to enlarge the size of the core microparticles | fine-particles coat | covered, and to increase the size of the coated microparticles | fine-particles obtained, and to reduce the size of the coated microparticles | fine-particles obtained on the contrary, what is necessary is just to reduce the size of the core microparticles | fine-particles to coat | cover.

또한, 상기에서 얻어지는 피복 미립자에 항체 등의 단백질, 당류, 당지질, 아미노산, 핵산, 여러 가지 저분자 화합물, 고분자 화합물 등의 물질에 의한 수식을 실시할 수도 있고, 이들에서 얻어지는 피복 미립자도 본 발명의 피복 미립자에 포함된다. 또, 예를 들어 타겟팅에 응용하기 위해, 상기에서 얻어지는 피복 미립자에 대해 항체 등의 단백질, 펩티드, 지방산류 등에 의한 지질막 표면 수식을 실시할 수도 있고［D. D. Lasic, F. Martin 편, Stealth Liposomes (미국), CRC Press Inc, 1995년, p.93-102 참조］, 또, 미립자의 구성 성분인 리포솜일 때와 동일하게 예를 들어 비이온성 계면 활성제 (상기와 동일한 의미), 양이온성 계면 활성제 (상기와 동일한 의미), 음이온성 계면 활성제 (상기와 동일한 의미), 고분자 (상기와 동일한 의미), 폴리옥시에틸렌 유도체 (상기와 동일한 의미) 등에 의한 표면 개질도 임의로 실시할 수 있고, 이들 지질막 표면 수식 또는 표면 개질된 것도 본 발명의 피복 미립자에 포함된다. 또, 동일하게 예를 들어 수용성 물질의 지질 유도체, 지방산 유도체 또는 지방족 탄화수소 유도체, 또는 당, 펩티드, 핵산 및 수용성 고분자에서 선택되는 1 개 이상 물질의 지질 유도체 또는 지방산 유도체 또는 계면 활성제 등에 의한 표면 개질도 임의로 실시할 수 있고, 이들 표면 개질에 이용되는 수용성 물질의 지질 유도체, 지방산 유도체 또는 지방족 탄화수소 유도체, 또는 당, 펩티드, 핵산 및 수용성 고분자에서 선택되는 1 개 이상 물질의 지질 유도체 또는 지방산 유도체 또는 계면 활성제는, 상기의 지질막의 구성 성분으로서의 수용성 물질의 지질 유도체, 지방산 유도체 또는 지방족 탄화수소 유도체, 또는 상기의 코어 미립자의 정의 중 코어 미립자 표면의 일부 또는 전부에 친수성 부분을 갖게 하기 위한 당, 펩티드, 핵산 및 수용성 고분자에서 선택되는 1 개 이상 물질의 지질 유도체 또는 지방산 유도체 또는 계면 활성제와 동일한 의미이며, 지질막의 구성 성분에 포함된다. In addition, the coated fine particles obtained above may be modified with a protein such as an antibody, a saccharide, a glycolipid, an amino acid, a nucleic acid, various low molecular weight compounds, a high molecular compound, or the like, and the coated fine particles obtained from these may also be coated with the present invention. It is included in microparticles. In addition, for example, in order to apply to targeting, the coated fine particles obtained above may be subjected to lipid membrane surface modification by proteins, peptides, fatty acids, etc., such as antibodies, or the like. D. Lasic, F. Martin, Stealth Liposomes (USA), CRC Press Inc, 1995, p. 93-102], and nonionic surfactants, for example, as in the case of liposomes, which are constituents of the microparticles. (Same meaning as above), cationic surfactant (same meaning as above), anionic surfactant (same meaning as above), polymer (same meaning as above), polyoxyethylene derivative (same meaning as above), etc. Modification can also be performed arbitrarily, and these lipid membrane surface modifications or surface modifications are included in the coated fine particles of the present invention. Similarly, the surface modification degree may be, for example, lipid derivatives, fatty acid derivatives or aliphatic hydrocarbon derivatives of water-soluble substances, or lipid derivatives or fatty acid derivatives or surfactants of one or more substances selected from sugars, peptides, nucleic acids, and water-soluble polymers. Lipid derivatives, fatty acid derivatives or aliphatic hydrocarbon derivatives of water-soluble substances used for these surface modifications, or lipid derivatives or fatty acid derivatives or surfactants of one or more substances selected from sugars, peptides, nucleic acids and water-soluble polymers. Is a lipid, fatty acid or aliphatic hydrocarbon derivative of a water-soluble substance as a constituent of the lipid membrane, or a sugar, a peptide, a nucleic acid or the like to have a hydrophilic portion on part or all of the surface of the core particle in the definition of the core particle. Water soluble polymer It is as defined lipid derivative or fatty acid derivative or a surfactant of one or more materials selected, are included in the constituent components of the lipid membrane.

본 발명의 제조 방법을 이용하여 제조할 수 있는 피복 미립자는, 예를 들어 혈액 성분 등의 생체 성분 (예를 들어 혈액, 소화액 등) 중에서 약제의 안정화, 부작용의 저감, 종양 등의 표적 장기에 대한 약제 집적성의 증대, 경구나 경점막에서의 약제 흡수의 개선 등을 목적으로 하는 제제로서 사용할 수 있다. The coated fine particles that can be produced using the production method of the present invention are, for example, in stabilizing drugs, reducing side effects, and targeting target organs such as tumors in biological components such as blood components (for example, blood and digestive fluids). It can be used as an agent for the purpose of increasing drug integration, improving oral or drug absorption in the transmucosal membrane, and the like.

본 발명의 제조 방법을 이용하여 제조할 수 있는 피복 미립자는, 코어 미립자의 구성 성분의 적어도 1 개가 예를 들어 항종양약, 항염증약 등의 약물인 경우, 그 약물의 종양 또는 염증 부위에 대한 약물 함유 캐리어로서, 그 피복 미립자를 투여함으로써 그 약물을 종양 또는 염증 부위에 송달할 수 있고, 그 약물이 항종양약인 경우, 예를 들어, 종양의 치료제로서 그 피복 미립자를 투여함으로써 종양의 치료를 실시할 수 있고, 또 그 약물이 항염증약인 경우, 예를 들어, 염증의 치료제로서 그 피복 미립자를 투여함으로써 염증 치료를 할 수 있다. 또, 혈관 신생이 항진하는 조직 또는 장기는, 본 발명의 제조 방법을 이용하여 제조할 수 있는 피복 미립자가 양호하게 송달할 수 있는 부위의 하나로서 들 수 있고, 피수식 미립자의 구성 성분의 적어도 1 개가 그 조직 또는 장기에 있어서의 질환의 치료약인 경우, 그 미립자를 그 질환의 치료약으로서 투여함으로써 그 질환의 치료를 실시할 수 있다. The coated fine particles that can be produced using the production method of the present invention contain a drug to a tumor or inflammatory site of the drug when at least one of the components of the core fine particles is a drug such as an anti-tumor drug or an anti-inflammatory drug. By administering the coated fine particles as a carrier, the drug can be delivered to the tumor or site of inflammation, and when the drug is an anti-tumor drug, for example, the tumor can be treated by administering the coated fine particles as a therapeutic agent for the tumor. In addition, when the drug is an anti-inflammatory drug, the inflammation can be treated, for example, by administering the coated fine particles as a therapeutic agent for inflammation. Moreover, the tissue or organ to which angiogenesis is advanced is mentioned as one of the site | parts which the coated microparticles | fine-particles which can be manufactured using the manufacturing method of this invention can be delivered well, and at least 1 of the constituent component of a to-be-derived microparticle When a dog is a therapeutic drug for a disease in the tissue or organ, the microparticles can be treated as a therapeutic drug for the disease, thereby treating the disease.

본 발명의 피복 미립자를 제제로서 사용하는 경우, 상기 서술한 방법에 의해 조제한 피복 미립자의 분산액을 그대로 예를 들어 주사제 등의 형태로서 이용할 수도 있는데, 그 분산액 중에 함유되는 극성 유기 용매와 혼합 가능한 극성 유기 용매 이외의 용매를 함유한 용매를 첨가하는 것, 및/또는 증발 증류 제거, 반투막 분리, 분류(分留) 등에 의해 선택적으로 그 극성 유기 용매를 제거함으로써, 극성 유기 용매의 비율을 감소시켜 이용할 수도 있다. 또, 분산액 또는 극성 유기 용매의 비율을 감소시킨 분산액에서 예를 들어 여과, 원심 분리 등에 의해 용매를 제거하여 사용하는 것도 그 분산액, 또는 예를 들어 만니톨, 락토오스, 트레할로오스, 말토오스, 글리신 등의 부형제를 첨가한 그 분산액을 동결 건조시켜 사용할 수도 있다. In the case of using the coated fine particles of the present invention as a preparation, the dispersion of the coated fine particles prepared by the above-described method may be used as it is, for example, in the form of an injection or the like, but may be mixed with the polar organic solvent contained in the dispersion. It is also possible to reduce the proportion of the polar organic solvent by adding a solvent containing a solvent other than the solvent, and / or selectively removing the polar organic solvent by evaporation distillation, semipermeable membrane separation, fractionation, or the like. have. In addition, the solvent may be used by removing the solvent from the dispersion or the dispersion having a reduced ratio of the polar organic solvent, for example, by filtration, centrifugation, or the like, or for example, mannitol, lactose, trehalose, maltose, glycine, or the like. The dispersion to which the excipient of is added may be lyophilized and used.

주사제의 경우, 상기의 피복 미립자의 분산액 또는 극성 유기 용매의 비율을 감소시킨 분산액 또는 상기의 용매를 제거 또는 동결 건조시킨 피복 미립자에, 예를 들어 물, 산, 알칼리, 여러 가지 완충액, 생리적 식염액, 아미노산 수액 등을 혼합하여 주사제를 조제하는 것이 바람직하다. 또, 예를 들어 시트르산, 아스코르브산, 시스테인, EDTA 등의 항산화제, 글리세린, 포도당, 염화 나트륨 등의 등장화제 등을 첨가하여 주사제를 조제하는 것도 가능하다. 또, 예를 들어 글리세린 등의 동결 보존제를 첨가하여 동결 보존할 수도 있다. In the case of injectables, the dispersion of the coated fine particles or the dispersion of which the proportion of the polar organic solvent is reduced or the coated fine particles from which the solvent is removed or lyophilized, for example, water, acid, alkali, various buffers, physiological saline solution It is preferable to prepare an injection by mixing amino acid sap and the like. Injectables can also be prepared by adding antioxidants such as citric acid, ascorbic acid, cysteine, EDTA, isotonic agents such as glycerin, glucose, sodium chloride, and the like. Moreover, cryopreservation can also be carried out by adding cryopreservatives, such as glycerin, for example.

또, 본 발명의 피복 미립자는 적당한 부형제 등과 함께 조립, 건조시키는 등 하여 예를 들어 캡슐제, 정제, 과립제 등의 경구용 제제로 가공해도 된다. The coated fine particles of the present invention may be processed into oral formulations such as capsules, tablets and granules, for example, by granulation and drying together with a suitable excipient.

본 발명의 제조 방법으로는 키트를 이용하는 것도 가능하다. 키트의 구성으로서는, 예를 들어, 본 발명의 제조 방법에 따라 피복 미립자를 조제하기 위한 적어도 코어 미립자, 피복층 성분 및 극성 유기 용매를 함유하는 액으로 이루어지는 구성 등을 들 수 있다. 예를 들어, 소용량 용기에 본 발명의 제조 방법에 따라 피복 미립자를 조제하기 위한 코어 미립자, 피복층 성분, 극성 유기 용매를 함유하는 액 등을 각각 충전하고, 본 발명의 제조 방법에 따라 혼합함으로써 피복 미립자를 조제할 수 있고, 그 혼합에 있어서 예를 들어 서서히 혼합해야 하는 등의 제약이 없기 때문에, 키트로서의 간편성이 높다는 이점도 있다. It is also possible to use a kit as a manufacturing method of this invention. As a structure of a kit, the structure etc. which consist of the liquid containing at least a core fine particle, a coating layer component, and a polar organic solvent for preparing coated fine particle by the manufacturing method of this invention are mentioned, for example. For example, the coated fine particles are filled into a small-capacity container by respectively filling the core fine particles for preparing the coated fine particles, the coating layer component, the liquid containing the polar organic solvent, and the like according to the production method of the present invention. Since there is no restriction | limiting, such as mixing slowly, for example, in the mixing, there exists also the advantage that the simplicity as a kit is high.

이어서, 실시예에 의해 본 발명을 구체적으로 설명한다. 단, 본 발명은 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다. Next, an Example demonstrates this invention concretely. However, this invention is not limited to these Examples.

실시예Example 1 One

피복층 성분의 용해액 (액 A); EPC (니혼 유지 제조, 이하 동일) 60㎎ 및 PEG-DSPE (니혼 유지 제조, 이하 동일) 12.5㎎ 을, 에탄올/물 혼합액 (8 : 5) 2mL에 용해시켰다 (A1 액).Dissolution liquid of the coating layer component (liquid A); 60 mg of EPC (manufactured by Nihon Fats and Oils, below) and 12.5 mg of PEG-DSPE (manufactured by Nihon Fats and Fats, below) were dissolved in 2 mL of an ethanol / water mixture (8: 5) (A1 liquid).

코어 미립자의 분산액 (액 B); 덱스트란플루오레세인아니오닉 (FD, 모레큘러프로브스사 제조, 이하 동일) 10㎎, DOTAP (아반티포랄리피즈사 제조, 이하 동일) 60㎎ 및 PEG-DSPE 24mg 을 물 2mL 에 분산시켰다. 얻어진 분산액을 구멍 직경 0.1㎛ 의 폴리카보네이트 멤브레인 (왓트만 제조, 이하 동일) 에 31 회 통과시켰다 (B1 액).Dispersion of core fine particles (liquid B); 10 mg of dextran fluorescein anonic (FD, manufactured by Molecular Probes, Inc., below), 60 mg of DOTAP (manufactured by Avantiforal Lipiz, Inc., below), and 24 mg of PEG-DSPE were dispersed in 2 mL of water. The obtained dispersion was passed through a polycarbonate membrane (manufactured by Wattman, hereinafter identical) having a pore diameter of 0.1 μm 31 times (B1 liquid).

A1 액에 B1 액 0.5mL 를 적하하여 (에탄올 농도는 대략 50vol% 이고, 이 농도로 피복층 성분 및 코어 미립자는 분산되었다), 피복 미립자의 분산액을 얻었다.0.5 mL of B1 liquid was added dropwise to the A1 liquid (ethanol concentration was approximately 50 vol%, and the coating layer component and the core fine particles were dispersed at this concentration) to obtain a dispersion of the coated fine particles.

얻어진 분산액과 물 22.5mL 를 혼합하고, 초원심 (1 시간, 110,000 × g, 25℃) 에 의해 상청액을 제거하여 제제를 얻었다. The obtained dispersion liquid and 22.5 mL of water were mixed, the supernatant liquid was removed by ultracentrifuge (1 hour, 110,000xg, 25 degreeC), and the preparation was obtained.

실시예Example 2 2

피복층 성분의 분산액 (액 D); EPC 60㎎ 및 PEG-DSPE 12.5㎎ 를 에탄올/물 혼합액 (1 : 1) 1.6mL 에 분산시켰다 (D2 액). Dispersion of coating layer component (liquid D); 60 mg of EPC and 12.5 mg of PEG-DSPE were dispersed in 1.6 mL of an ethanol / water mixture (1: 1) (D2 solution).

코어 미립자의 분산액 (액 E); FD 10㎎, DOTAP 60㎎ 및 PEG-DSPE 24㎎ 을 물 1mL 에 분산시켰다. 얻어진 분산액을 구멍 직경 0.1㎛ 의 폴리카보네이트 멤브레인에 31 회 통과시켜 코어 분산액을 얻었다. 이 액 0.25mL 에 에탄올 0.25mL 를 첨가하여 에탄올 농도를 대략 50vol% 로 하였다 (E2 액).Dispersion of core fine particles (liquid E); 10 mg of FD, 60 mg of DOTAP and 24 mg of PEG-DSPE were dispersed in 1 mL of water. The obtained dispersion liquid was passed through the polycarbonate membrane of 0.1 micrometer of pore diameters 31 times, and the core dispersion liquid was obtained. 0.25 mL of ethanol was added to 0.25 mL of this solution to make the ethanol concentration approximately 50 vol% (E2 solution).

D2 액과 E2 액을 혼합하여 (에탄올 농도는 대략 50vol% 이고, 이 농도로 피복층 성분 및 코어 미립자는 분산되었다), 피복 미립자의 분산액을 얻었다. The D2 liquid and the E2 liquid were mixed (ethanol concentration was approximately 50 vol%, and the coating layer component and the core fine particles were dispersed at this concentration) to obtain a dispersion of the coated fine particles.

얻어진 피복 미립자의 분산액과 물 23mL 를 혼합하고, 실시예 1 과 동일하게 초원심 조작을 실시하여 제제를 얻었다. The dispersion of the coated fine particles thus obtained was mixed with 23 mL of water, and ultracentrifugal operation was performed in the same manner as in Example 1 to obtain a formulation.

실시예Example 3 3

피복층 성분 및 코어 미립자의 분산액 (액 H); FD 10㎎, DOTAP 60㎎ 및 PEG-DSPE 24㎎ 을 물 1mL 에 분산시켰다. 얻어진 분산액을 구멍 직경 0.1㎛ 의 폴리카보네이트 멤브레인에 31 회 통과시켰다. 별도로, EPC 120㎎ 및 PEG-DSPE 25㎎ 을 물 2mL 에 분산시켰다. 얻어진 분산액을 구멍 직경 0.4㎛ 의 폴리카보네이트 멤브레인 (왓트만 제조, 이하 동일) 에 11 회, 구멍 직경 0.1㎛ 의 폴리카보네이트 멤브레인에 21 회 통과시켰다. 얻어진 FD, DOTAP 및 PEG-DSPE 의 분산액과 얻어진 EPC 및 PEG-DSPE 의 분산액을 혼합하였다 (H3 액).Dispersion of coating layer component and core fine particles (liquid H); 10 mg of FD, 60 mg of DOTAP and 24 mg of PEG-DSPE were dispersed in 1 mL of water. The obtained dispersion liquid was passed through the polycarbonate membrane of 0.1 micrometer of pore diameters 31 times. Separately, 120 mg of EPC and 25 mg of PEG-DSPE were dispersed in 2 mL of water. The obtained dispersion was passed through a polycarbonate membrane having a pore diameter of 0.4 μm (manufactured by Wattman, the same below) 11 times and a polycarbonate membrane having a pore diameter of 0.1 μm 21 times. The dispersion liquid of the obtained FD, DOTAP, and PEG-DSPE, and the dispersion liquid of the obtained EPC and PEG-DSPE were mixed (H3 liquid).

H3 액에 에탄올 1.25mL 를 첨가하여 (에탄올 농도는 대략 50vol% 이고, 이 농도로 피복층 성분 및 코어 미립자는 분산되었다), 피복 미립자의 분산액을 얻었다.1.25 mL of ethanol was added to the H3 solution (ethanol concentration was approximately 50 vol%, and the coating layer component and the core fine particles were dispersed at this concentration) to obtain a dispersion of the coated fine particles.

얻어진 피복 미립자의 분산액과 물 22.5mL 를 혼합하고, 실시예 1 과 동일하 게 초원심 조작을 실시하여 제제를 얻었다. The dispersion of the obtained coated fine particles and 22.5 mL of water were mixed, and ultracentrifugal operation was performed in the same manner as in Example 1 to obtain a formulation.

비교예Comparative example 1 One

피복층 성분의 용해액 (액 A); EPC 60㎎ 및 PEG-DSPE 12.5㎎ 을 에탄올 1mL에 용해시켰다 (a1 액).Dissolution liquid of the coating layer component (liquid A); 60 mg of EPC and 12.5 mg of PEG-DSPE were dissolved in 1 mL of ethanol (a1 liquid).

코어 미립자의 분산액 (액 B); FD 30㎎, DOTAP 180㎎ 및 PEG-DSPE 72㎎ 을 물 9mL 에 분산시켰다. 얻어진 분산액을 구멍 직경 0.1㎛ 의 폴리카보네이트 멤브레인에 31 회 통과시켰다 (b1 액).Dispersion of core fine particles (liquid B); 30 mg of FD, 180 mg of DOTAP and 72 mg of PEG-DSPE were dispersed in 9 mL of water. The obtained dispersion liquid was passed through the polycarbonate membrane of 0.1 micrometer of pore diameters 31 times (b1 liquid).

a1 액 0.25mL 와 b1 액 0.75mL 를 혼합 (에탄올 농도는 대략 62.5vol% 이고, 이 농도로 피복층 성분은 용해되고 코어 미립자는 분산되었다) 으로 하고, 다시 교반하면서 1mL/분의 속도로 증류수 23mL 를 첨가하여 피복 미립자의 분산액을 얻었다. 0.25 mL of a1 liquid and 0.75 mL of b1 liquid were mixed (ethanol concentration was about 62.5 vol%, and the coating layer component was dissolved and the core fine particles were dispersed at this concentration), and 23 mL of distilled water was added at a rate of 1 mL / min while stirring again. Was added to obtain a dispersion of the coated fine particles.

얻어진 분산액에 대해 실시예 1 과 동일하게 초원심 조작을 하여 제제를 얻었다. About the obtained dispersion liquid, the ultracentrifugal operation was performed like Example 1, and the formulation was obtained.

시험예Test Example 1 One

실시예 1 ∼ 3 및 비교예 1 에서 얻어진 각 제제에 대해, 이하의 방법에 따라 평균 입자 직경, FD 및 EPC 의 회수율, 그리고 소태아 혈청 (FBS) 중의 안정성에 대해 검토를 하였다. 결과를 표 1 에 나타낸다. About each formulation obtained in Examples 1-3 and Comparative Example 1, the average particle diameter, the recovery of FD and EPC, and the stability in fetal bovine serum (FBS) were examined according to the following method. The results are shown in Table 1.

평균 입자 직경Average particle diameter

동적 광산란법 (DLS)(사용 기기 : A model ELS-800, 오오츠카 전자, 이하 동일) 으로 피복 미립자의 인산 완충 생리 식염수 (PBS) 중에서의 평균 입자 직경을 측정하였다. The average particle diameter in the phosphate buffered saline solution (PBS) of the coated fine particles was measured by the dynamic light scattering method (DLS) (applied equipment: A model ELS-800, Otsuka Electronics Co., Ltd., below).

FD 및 EPC 의 회수율Recovery of FD and EPC

각 제제를 PBS 로 총 지질 농도가 30㎎/mL 가 되도록 희석하였다. 다시 PBS 로 1000 배 희석하고, 희석 후의 각 50μL 에 10w/v% 트라이톤엑스-100 (TritonX-100, 와코우 준야쿠 제조, 이하 동일) 50μL 및 PBS 400μL 를 각각 첨가하여 볼텍스 믹서로 교반하였다. 또, 각 실시예 및 비교예에서의 초원심 상청액을 PBS 로 10 배 희석하고, 희석 후의 각 50μL 에 10w/v% TritonX-100 50μL 및 PBS 400μL 를 각각 첨가하여 볼텍스 믹서로 교반하였다. 각각 100μL 를 96 웰 마이크로플레이트에 넣고, 형광 플레이트 리더 (ARVOsx-4, Wallac사 제조, 이하 동일) 를 사용하여 여기 파장 485㎚ 및 형광 파장 530㎚ 에서의 형광 강도를 측정하였다. 한편, 1, 0.5 및 0.25㎍/mL 의 각 FD-PBS 의 형광 강도를 측정하여 검량선을 얻었다. 검량선에서 각 제제 중의 FD 농도를 구하였다. 한편, 각 제제 중의 EPC 농도는 인지질 C-테스트 와코 (와코우 준야쿠 제조, 이하 동일) 를 이용하여 측정함으로써 구하였다. Each formulation was diluted with PBS to a total lipid concentration of 30 mg / mL. After diluting 1000 times with PBS, 50 μL of 10w / v% Triton X-100 (TritonX-100, manufactured by Wako Junyaku Co., Ltd., below) and 400 μL of PBS were added to each 50 μL after dilution, followed by stirring with a vortex mixer. In addition, the ultracentrifuge supernatant in each Example and the comparative example was diluted 10-fold with PBS, 50 microliters of 10w / v% TritonX-100 and 400 microliters of PBS were added to each 50 microliters after dilution, and it stirred with the vortex mixer. 100 μL each was put in a 96 well microplate, and the fluorescence intensity at the excitation wavelength 485 nm and the fluorescence wavelength 530 nm was measured using a fluorescent plate reader (ARVOsx-4, manufactured by Wallac, hereinafter identical). On the other hand, the fluorescence intensity of each FD-PBS of 1, 0.5 and 0.25 µg / mL was measured to obtain a calibration curve. From the calibration curve, the FD concentration in each formulation was determined. In addition, the EPC density | concentration in each formulation was calculated | required using the phospholipid C-test Wako (made by Wako Junyaku, the same hereafter).

각 제제에 있어서의 FD 회수율 및 EPC 회수율은 하기 식 (1) 및 (2) 로 산출하였다. FD recovery rate and EPC recovery rate in each formulation were calculated by the following formulas (1) and (2).

FD 의 회수율 (%) = A1 / (A1 ＋ B1) × 100 (1)Recovery of FD (%) = A 1 / (A 1 + B 1 ) × 100 (1)

A1 : 피복 미립자 중의 FD 함량 (㎍)A 1 : FD content in the coated fine particles (μg)

= 피복 미립자 획분 중의 FD 농도 (㎍/mL) × 피복 미립자의 체적 (mL)     = FD concentration (μg / mL) in the coated particulate fraction x volume of the coated particulate (mL)

B1 : 상청액 중의 FD 함량 (㎍)B 1 : FD content in the supernatant (μg)

= 상청액 중의 FD 농도 (㎍/mL) × 상청액의 체적 (mL)     = FD concentration in supernatant (μg / mL) x volume of supernatant (mL)

EPC 의 회수율 (%) = A2 / (A2 ＋ B2) × 100 (2)Recovery% of EPC (%) = A 2 / (A 2 + B 2 ) × 100 (2)

A2 : 피복 미립자 중의 EPC 함량 (㎍)A 2 : EPC content (μg) in the coated fine particles

= 피복 미립자 획분 중의 EPC 농도 (㎍/mL) × 피복 미립자의 체적 (mL)     = EPC concentration (µg / mL) in the coated particulate fraction × volume of coated particulate (mL)

B2 : 상청액 중의 EPC 함량 (㎍)B 2 : EPC content in the supernatant (μg)

= 상청액 중의 EPC 농도 (㎍/mL) × 상청액의 체적 (mL)     = EPC concentration in the supernatant (μg / mL) x volume of the supernatant (mL)

FBS 중의 안정성Stability in FBS

각 제제를 PBS 로 총 지질 농도가 30㎎/mL 가 되도록 희석하였다. 희석 후의 30μL 에 FBS 2970μL 를 첨가하여 혼합하였다. Each formulation was diluted with PBS to a total lipid concentration of 30 mg / mL. 2970 µL of FBS was added to 30 µL after dilution and mixed.

혼합 직후 및 37℃ 에서 3 시간 정치 후에 각 500μL 를 취하여 겔 여과 크로마토그래피 (Gel Permeation Chromatography (GPC)) 를 실시하고, 그 프랙션 (100 방울, 10 개) 을 회수하였다. 각 프랙션을 볼텍스 믹서로 진탕 교반하여 샘플로 하고, FD 를 정량하기 위해 각 50μL 에 10w/v% TritonX-100 50μL 및 PBS 400μL 를 각각 첨가하여 볼텍스 믹서로 교반하였다. 그 100μL 를 96 웰 마이크로플레이트에 넣고 ARVOsx-4 를 사용하여 여기 파장 485㎚ 및 형광 파장 530㎚ 에서의 형광 강도를 측정하여 0 시간 후 및 3 시간 후의 미립자 중의 약물 잔존율을 하기 식 (3) 으로 산출하였다. 500 μL of each was taken immediately after mixing and after 3 hours of standing at 37 ° C. to conduct gel filtration chromatography (GPC), and the fractions (100 drops, 10) were collected. Each fraction was shaken and agitated with a vortex mixer to prepare a sample. To quantify FD, 50 μL of 10w / v% TritonX-100 and 400 μL of PBS were added to each sample, followed by stirring with a vortex mixer. 100 μL of the solution was put into a 96 well microplate, and the fluorescence intensity at the excitation wavelength 485 nm and the fluorescence wavelength 530 nm was measured using ARVOsx-4, and the drug residual ratio in the fine particles after 0 hours and 3 hours was expressed by the following formula (3). Calculated.

0 시간 후의 FD 의 잔존율 (%) = A3 / B3 × 100 (3)Remaining percentage of FD after 0 h (A) = A 3 / B 3 × 100 (3)

3 시간 후의 FD 의 잔존율 (%) = C3 / D3 × 100% Of FD remaining after 3 hours = C 3 / D 3 × 100

A3 = Σ{(각 프랙션 형광 강도)피복 미립자 획분 (0 시간 후) × (각 프랙션 체적)피복 미립자 획분 (0 시간 후))}A 3 = Σ {(each fraction fluorescence intensity) coated particulate fraction (after 0 hours) × (each fraction volume) coated particulate fraction (after 0 hours) )}

B3 = Σ{(각 프랙션 형광 강도)전체 획분 (0 시간 후) × (각 프랙션 체적)전체 획분 (0 시간 후))}B 3 = Σ {(each fraction fluorescence intensity) total fraction (after 0 hours) × (each fraction volume) total fraction (after 0 hours) )}

C3 = Σ{(각 프랙션 형광 강도)피복 미립자 획분 (3 시간 후) × (각 프랙션 체적)피복 미립자 획분 (3 시간 후))}C 3 = Σ {(each fraction fluorescence intensity) coated particulate fraction (after 3 hours) × (each fraction volume) coated particulate fraction (after 3 hours) )}

D3 = Σ{(각 프랙션 형광 강도)전체 획분 (3 시간 후) × (각 프랙션 체적)전체 획분 (3 시간 후))}D 3 = Σ {(each fraction fluorescence intensity) total fraction (after 3 hours) × (each fraction volume) total fraction (after 3 hours) )}

평균 입자 직경 (㎚)Average particle diameter (nm) 회수율 (%)Recovery rate (%) FBS 중의 잔존율 (%)% Remaining in FBS FDFD EPCEPC 0 시간0 hours 3 시간3 hours 실시예 1Example 1 128128 9292 9393 측정하지 않음Do not measure 측정하지 않음Do not measure 실시예 2Example 2 150150 8585 8484 6161 5858 실시예 3Example 3 114114 8686 8282 6363 5959 비교예 1Comparative Example 1 145145 9696 8888 6868 6767

표 1 에 의하면, 실시예 1 ∼ 3 에서 얻어진 제제는 비교예 1 에서 얻어진 제제와 비교하여 동일한 정도로 작은 입자 직경 (단, 실시예 1 및 3 에서 얻어진 제제는 각각 130㎚ 이하 및 115㎚ 이하의 것보다 작은 입자 직경이었다) 으로, 동일한 정도로 효율적이고 또한 견고하게 약물이 내봉(內封)된 피복 미립자였다. 본 발명의 피복 미립자의 제조 방법은 종래법과 비교하여, 예를 들어 서서히 혼합해야 하는 등의 제약이 없는 간편한 제조 방법임에도 불구하고, 그 방법에 의해 종래법과 동일한 정도로 우수한 피복 미립자가 얻어지는 것이 명백해졌다. According to Table 1, the formulations obtained in Examples 1 to 3 have a particle diameter which is as small as compared with the formulations obtained in Comparative Example 1, except that the formulations obtained in Examples 1 and 3 are 130 nm or less and 115 nm or less, respectively. Smaller particle diameters), coated microparticles with drug-embedded efficiency and solidity to the same extent. Although the manufacturing method of the coated fine particle of this invention is a simple manufacturing method which does not have restrictions, such as mixing slowly, compared with the conventional method, it became clear that the coated fine particle excellent in the same grade as the conventional method is obtained by this method.

실시예Example 4 4

실시예 1 에서 얻어진 제제에 PBS 를 첨가하여 EPC 농도를 24㎎/mL 로 조정하고, 그 0.5mL 와 PEG-DSPE 2.5㎎ 을 에탄올 0.02mL 에 용해시킨 것을 혼합한 후, 70℃ 에서 2 분간 가열하여 PEG 로 표면 수식된 제제를 얻었다. PBS was added to the formulation obtained in Example 1 to adjust the EPC concentration to 24 mg / mL, and 0.5 mL and PEG-DSPE dissolved in 0.02 mL of ethanol were mixed, followed by heating at 70 ° C. for 2 minutes. A surface modified formulation was obtained with PEG.

비교예Comparative example 2 2

비교예 1 에서 얻어진 제제에 PBS 를 첨가하여 EPC 농도를 24㎎/mL 로 조정하고, 그 0.5mL 와 PEG-DSPE 2.5㎎ 을 에탄올 0.02mL 에 용해시킨 것을 혼합한 후, 70℃ 에서 2 분간 가열하여 PEG 로 표면 수식된 제제를 얻었다. PBS was added to the preparation obtained in Comparative Example 1 to adjust the EPC concentration to 24 mg / mL, and 0.5 mL and PEG-DSPE dissolved in 0.02 mL of ethanol were mixed, followed by heating at 70 ° C. for 2 minutes. A surface modified formulation was obtained with PEG.

시험예Test Example 2 2

실시예 4 및 비교예 2 에서 얻어진 각 제제에 대해, 이하의 방법에 따라 혈중 동태에 대해 검토를 하였다. 각각의 결과를 표 2 및 도 1 에 나타낸다. Each formulation obtained in Example 4 and Comparative Example 2 was examined for blood dynamics according to the following method. Each result is shown in Table 2 and FIG.

혈중 동태Blood dynamics

각 제제를 PBS 로 총 지질 농도가 5㎎/mL 가 되도록 희석하고, 래트에 대해서 투여량을 지질량/래트 체중비로 10㎎/kg 로 하여 투여하였다. 투여 후 1 분 , 10 분, 30 분, 1 시간, 3 시간, 6 시간 및 24 시간에 채혈하고 원심 조작을 실시하여 혈장을 취득하였다. 혈장 중의 FD 를 정량하기 위해, 혈장 각 50μL 에 10w/v% TritonX-100 50μL 및 PBS 400μL 를 각각 첨가하여 볼텍스 믹서로 교반하였다. 그 100μL 를 96 웰 마이크로 플레이트에 넣고 ARVOsx-4 를 사용하여 여기 파장 485㎚ 및 형광 파장 530㎚ 에서의 형광 강도를 측정하였다. 한편, 1, 0.5, 0.25㎍/mL 의 각 FD-PBS 의 형광 강도를 측정하여 검량선을 얻었다. 검량선으로부터 각 혈장 중의 FD 농도를 구하였다. 래트 체중 100g 당의 혈장량을 7.8mL 로 계산하고, 투여량에 대한 혈중 잔존율 (%) 을 산출함과 함께, 사다리꼴법으로 AUC0 .24h(㎍·min/dose) 를 산출하였다. Each formulation was diluted with PBS so that the total lipid concentration was 5 mg / mL, and the dose was administered to the rat at a dose of 10 mg / kg in a lipid / rat body weight ratio. Blood was collected at 1 minute, 10 minutes, 30 minutes, 1 hour, 3 hours, 6 hours and 24 hours after administration and centrifuged to obtain plasma. In order to quantify FD in plasma, 50 μL of 10w / v% TritonX-100 and 400 μL of PBS were added to each 50 μL of plasma, and stirred by a vortex mixer. The 100 µL was put in a 96 well microplate and the fluorescence intensity at the excitation wavelength 485 nm and the fluorescence wavelength 530 nm was measured using ARVOsx-4. On the other hand, the fluorescence intensity of each FD-PBS of 1, 0.5 and 0.25 µg / mL was measured to obtain a calibration curve. FD concentration in each plasma was calculated | required from the analytical curve. Calculating a 100g rat weight per hyeoljangryang in 7.8mL, followed by calculating the AUC 0 .24h (㎍ · min / dose) along with the blood Calculated remaining ratio (%), trapezoidal method for the dose.

평균 입자 직경 (nm)Average particle diameter (nm) AUC (㎍·min/dose)AUC (μgmin / dose) 실시예 4Example 4 128128 423423 비교예 2Comparative Example 2 145145 342342

표 2 에 의하면, 실시예 4 에서 얻어진 제제는 비교예 2 에서 얻어진 제제와 비교하여 생체 내에 있어서 동일한 정도로 우수한 혈중 체류성을 나타냈다. 본 발명의 피복 미립자의 제조 방법은 간편한 제조 방법임에도 불구하고, 그 방법에 의해 종래법과 동일한 정도로 우수한 피복 미립자가 얻어지는 것이 명백해졌다. According to Table 2, the formulation obtained in Example 4 exhibited excellent blood retention in the body as compared with the formulation obtained in Comparative Example 2. Although the manufacturing method of the coated fine particle of this invention is a simple manufacturing method, it became clear that the coated fine particle which is excellent in the same grade as the conventional method is obtained by this method.

실시예Example 5 5

피복층 성분의 용해액 (액 A); EPC 15㎎ 및 PEG-DSPE 3.125㎎ 를, 에탄올/물 혼합액 (8 : 5) 1mL 에 용해시켰다 (A5 액).Dissolution liquid of the coating layer component (liquid A); 15 mg of EPC and 3.125 mg of PEG-DSPE were dissolved in 1 mL of an ethanol / water mixture (8: 5) (A5 solution).

코어 미립자의 분산액 (액 B); DOTAP 90㎎ 및 PEG-DSPE 36㎎ 을 물 2mL 에 분산시켰다. 얻어진 분산액을 구멍 직경 0.4㎛ 의 폴리카보네이트 멤브레인에 11회, 구멍 직경 0.1㎛ 의 폴리카보네이트 멤브레인에 11 회, 구멍 직경 0.05㎛ 의 폴리카보네이트 멤브레인 (왓트만 제조, 이하 동일) 에 25 회 통과시켰다. 얻어진 분산액 0.167mL 에 ODN (플루오레세인이소티오시아네이트 라벨화 포스포로티오에이트형 올리고디옥시리보뉴클레오티드 (배열 : (5') CCT CTT ACC TCA G (3'), 염기수 13, 분자량 4573.57, 사이미디어사 제조, 이하 동일) 1.87㎎ 을 물 0.083mL 에 용해시킨 것을 첨가하였다 (B5 액).Dispersion of core fine particles (liquid B); 90 mg of DOTAP and 36 mg of PEG-DSPE were dispersed in 2 mL of water. The obtained dispersion was passed through a polycarbonate membrane having a pore diameter of 0.4 μm 11 times, a polycarbonate membrane having a pore diameter of 0.1 μm 11 times and a polycarbonate membrane having a pore diameter of 0.05 μm (manufactured by Wattman, hereinafter identical) 25 times. ODN (fluorescein isothiocyanate-labeled phosphorothioate type oligodioxyribonucleotide (array: (5 ') CCT CTT ACC TCA G (3'), the base number 13, molecular weight 4573.57, Saimedia Co., Ltd. in 0.167 mL of the obtained dispersion liquid) The same thing as what dissolved 1.87 mg in 0.083 mL of water was added (B5 liquid).

A5 액과 B5 액을 혼합하여 (에탄올 농도는 대략 50vol% 이고, 이 농도로 피복층 성분 및 코어 미립자는 분산되었다), 피복 미립자의 분산액을 얻었다. A5 liquid and B5 liquid were mixed (ethanol concentration was approximately 50 vol%, and the coating layer component and the core fine particles were dispersed at this concentration) to obtain a dispersion of the coated fine particles.

얻어진 피복 미립자의 분산액과 물 11.25mL 를 혼합하고, 초원심 (1 시간, 110,000 × g, 25℃) 에 의해 상청액을 제거하여 제제를 얻었다. The dispersion liquid of the obtained coating fine particles and 11.25 mL of water were mixed, the supernatant liquid was removed by ultracentrifugation (1 hour, 110,000xg, 25 degreeC), and the preparation was obtained.

실시예Example 6 6

피복층 성분의 용해액 (액 A); 실시예 5 의 A1 액과 동량의 EPC 및 PEG-DSPE 를 에탄올/물 혼합액 (8 : 5) 0.9mL 에 용해시켰다 (A6 액).Dissolution liquid of the coating layer component (liquid A); EPC and PEG-DSPE in the same amount as A1 liquid of Example 5 were dissolved in 0.9 mL of an ethanol / water mixture (8: 5) (A6 liquid).

코어 미립자의 분산액 (액 B); 실시예 5 의 B5 액에 0.1mL 의 증류수를 첨가했다 (B6 액).Dispersion of core fine particles (liquid B); 0.1 mL of distilled water was added to the B5 liquid of Example 5 (B6 liquid).

A6 액과 B6 액을 혼합하여 (에탄올 농도는 대략 45vol% 이고, 이 농도로 피복층 성분 및 코어 미립자는 분산되었다), 피복 미립자의 분산액을 얻었다. A6 liquid and B6 liquid were mixed (ethanol concentration was about 45 vol%, and the coating layer component and core fine particles were disperse | distributed at this concentration), and the dispersion liquid of coating fine particles was obtained.

얻어진 피복 미립자의 분산액과 물 10mL 를 혼합하고, 실시예 5 와 동일하게 초원심 조작을 실시하여 제제를 얻었다. The dispersion of the coated fine particles thus obtained was mixed with 10 mL of water, and ultracentrifugal operation was performed in the same manner as in Example 5 to obtain a formulation.

실시예Example 7 7

피복층 성분의 용해액 (액 A); 실시예 5 의 A5 액과 동량의 EPC 및 PEG-DSPE 를 에탄올/물 혼합액 (8 : 5) 0.8mL 에 용해시켰다 (A7 액).Dissolution liquid of the coating layer component (liquid A); The same amount of EPC and PEG-DSPE as in A5 liquid of Example 5 were dissolved in 0.8 mL of an ethanol / water mixture (8: 5) (A7 liquid).

코어 미립자의 분산액 (액 B); 실시예 5 의 B5 액에 0.2mL 의 물을 첨가하였다 (B7 액).Dispersion of core fine particles (liquid B); 0.2 mL of water was added to the B5 liquid of Example 5 (B7 liquid).

A7 액과 B7 액을 혼합하여 (에탄올 농도는 대략 40vol% 이고, 이 농도로 피복층 성분 및 코어 미립자는 분산되었다), 피복 미립자의 분산액을 얻었다. A7 liquid and B7 liquid were mixed (ethanol concentration was about 40 vol%, and the coating layer component and core fine particles were disperse | distributed at this concentration), and the dispersion liquid of coating fine particles was obtained.

얻어진 피복 미립자의 분산액과 물 8.75mL 를 혼합하고, 실시예 5 와 동일하게 초원심 조작을 실시하여 제제를 얻었다. The dispersion liquid of the obtained coating fine particles and 8.75 mL of water were mixed, and ultracentrifugal operation was performed like Example 5 to obtain a formulation.

실시예Example 8 8

피복층 성분의 용해액 (액 A); 실시예 5 의 A5 액과 동량의 EPC 및 PEG-DSPE 를 에탄올/물 혼합액 (8 : 5) 0.7mL 에 용해시켰다 (A8 액).Dissolution liquid of the coating layer component (liquid A); The same amount of EPC and PEG-DSPE as in A5 liquid of Example 5 were dissolved in 0.7 mL of an ethanol / water mixture (8: 5) (A8 liquid).

코어 미립자의 분산액 (액 B); 실시예 5 의 B5 액에 0.3mL 의 증류수를 첨가했다 (B8 액).Dispersion of core fine particles (liquid B); 0.3 mL of distilled water was added to the B5 liquid of Example 5 (B8 liquid).

A8 액과 B8 액을 혼합하여 (에탄올 농도는 대략 35vol% 이고, 이 농도로 피복층 성분 및 코어 미립자는 분산되었다), 피복 미립자의 분산액을 얻었다. The A8 liquid and the B8 liquid were mixed (ethanol concentration was approximately 35 vol%, and the coating layer component and the core fine particles were dispersed at this concentration) to obtain a dispersion of the coated fine particles.

얻어진 피복 미립자의 분산액과 물 7.5mL 를 혼합하고, 실시예 5 와 동일하게 초원심 조작을 실시하여 제제를 얻었다. The dispersion of the coated fine particles thus obtained was mixed with 7.5 mL of water, and ultracentrifugal operation was performed in the same manner as in Example 5 to obtain a formulation.

실시예Example 9 9

피복층 성분의 용해액 (액 A); 실시예 5 의 A5 액과 동량의 EPC 및 PEG-DSPE 를 에탄올/물 혼합액 (8 : 5) 0.5mL 에 용해시켰다 (A9 액).Dissolution liquid of the coating layer component (liquid A); The same amount of EPC and PEG-DSPE as in A5 liquid of Example 5 were dissolved in 0.5 mL of an ethanol / water mixture (8: 5) (A9 liquid).

코어 미립자의 분산액 (액 B); 실시예 5 의 B5 액에 0.5mL 의 증류수를 첨가하였다 (B9 액). Dispersion of core fine particles (liquid B); 0.5 mL of distilled water was added to the B5 liquid of Example 5 (B9 liquid).

A9 액과 B9 액을 혼합하여 (에탄올 농도는 대략 25vol% 이고, 이 농도로 피복층 성분 및 코어 미립자는 분산되었다), 피복 미립자의 분산액을 얻었다. The A9 liquid and the B9 liquid were mixed (ethanol concentration was approximately 25 vol%, and the coating layer component and the core fine particles were dispersed at this concentration) to obtain a dispersion of the coated fine particles.

얻어진 피복 미립자의 분산액과 물 5mL 를 혼합하고, 실시예 5 와 동일하게 초원심 조작을 실시하여 제제를 얻었다. The dispersion of the coated fine particles thus obtained was mixed with 5 mL of water, and ultracentrifugal operation was performed in the same manner as in Example 5 to obtain a formulation.

비교예Comparative example 3 3

피복층 성분의 용해액 (액 A); EPC 30㎎ 및 PEG-DSPE 6.25㎎ 을 에탄올 1mL 에 용해시켰다 (a3 액).Dissolution liquid of the coating layer component (liquid A); 30 mg of EPC and 6.25 mg of PEG-DSPE were dissolved in 1 mL of ethanol (a3 liquid).

코어 미립자의 분산액 (액 B); DOTAP 60㎎ 및 PEG-DSPE 24㎎ 을 물 2mL 에 분산시켰다. 얻어진 분산액을 구멍 직경 0.4㎛ 의 폴리카보네이트 멤브레인에 11 회, 구멍 직경 0.1㎛ 의 폴리카보네이트 멤브레인에 11 회, 구멍 직경 0.05㎛ 의 폴리카보네이트 멤브레인에 21 회 통과시켰다. 얻어진 분산액 0.5mL 에 ODN 3.75㎎ 을 물 0.25mL 에 용해시킨 것을 첨가하였다 (b3 액).Dispersion of core fine particles (liquid B); 60 mg of DOTAP and 24 mg of PEG-DSPE were dispersed in 2 mL of water. The obtained dispersion was passed through a polycarbonate membrane having a pore diameter of 0.4 µm 11 times, a polycarbonate membrane having a pore diameter of 0.1 µm 11 times and a polycarbonate membrane having a pore diameter of 0.05 µm 21 times. The thing which melt | dissolved 3.75 mg of ODN in 0.25 mL of water was added to 0.5 mL of obtained dispersion liquid (b3 liquid).

a3 액 0.25mL 와 b3 액을 혼합하고 (에탄올 농도는 대략 62.5vol% 이고, 이 농도로 피복층 성분은 용해되고 코어 미립자는 분산되었다), 추가로 교반하면서 1mL/min 의 속도로 물 23mL 를 첨가하여 피복 미립자의 분산액을 얻었다. 0.25 ml of a3 liquid and b3 liquid were mixed (ethanol concentration was approximately 62.5 vol%, at which concentration the coating layer component was dissolved and the core fine particles were dispersed), and 23 mL of water was added at a rate of 1 mL / min while further stirring. A dispersion of coated fine particles was obtained.

얻어진 피복 미립자의 분산액에 대해 실시예 5 와 동일하게 초원심 조작을 실시하여 제제를 얻었다. The ultracentrifuge operation was performed similarly to Example 5 with respect to the obtained dispersion of coated fine particles, and the preparation was obtained.

시험예Test Example 3 3

실시예 5 ∼ 9 및 비교예 3 에서 얻어진 각 제제에 대해, 이하의 방법에 따라 평균 입자 직경, ODN 및 EPC 의 회수율, 그리고 FBS 중의 안정성에 대해 검토를 하였다. 결과를 표 3 에 나타낸다. Each formulation obtained in Examples 5 to 9 and Comparative Example 3 was examined for average particle diameter, recovery of ODN and EPC, and stability in FBS according to the following method. The results are shown in Table 3.

평균 입자 직경Average particle diameter

DLS 로 피복 미립자의 PBS 중에서의 평균 입자 직경을 측정하였다. The average particle diameter in PBS of coating fine particles was measured by DLS.

ODN 및 EPC 의 회수율Recovery of ODN and EPC

각 제제를 PBS 로 총 지질 농도가 30㎎/mL 가 되도록 희석하였다. 다시 PBS 로 1000 배 희석하고, 희석 후의 각 50μL 에 10w/v% TritonX-100 50μL 및 PBS 400μL 를 각각 첨가하여 볼텍스 믹서로 교반하였다. 또, 각 실시예 및 비교예에서의 초원심 상청액을 PBS 로 10 배 희석하고, 희석 후의 각 50μL 에 10w/v% TritonX-100 50μL 및 PBS 400μL 를 각각 첨가하여 볼텍스 믹서로 교반하였다. 각각 100μL 를 96 웰 마이크로 플레이트에 넣고 ARVOsx-4 를 사용하여 여기 파장 485㎚ 및 형광 파장 530㎚ 에서의 형광 강도를 측정하였다. 한편, 1.5, 1.5/4, 1.5/42, 1.5/43, 1.5/44 및 1.5/45㎍/mL 의 각 ODN-PBS 의 형광 강도를 측정하여 검량선을 얻었다. 검량선으로부터 각 제제 중의 ODN 농도를 구하였다. 한편, 각 제제 중의 EPC 농도는 인지질 C-테스트 와코를 이용하여 측정함으로써 구하였다. Each formulation was diluted with PBS to a total lipid concentration of 30 mg / mL. After diluting 1000 times with PBS, 50 µL of 10w / v% TritonX-100 and 400 µL of PBS were added to each 50 µL after dilution, followed by stirring with a vortex mixer. In addition, the ultracentrifuge supernatant in each Example and the comparative example was diluted 10-fold with PBS, 50 microliters of 10w / v% TritonX-100 and 400 microliters of PBS were added to each 50 microliters after dilution, and it stirred with the vortex mixer. 100 μL each was placed in a 96 well microplate and the fluorescence intensity at the excitation wavelength 485 nm and the fluorescence wavelength 530 nm was measured using ARVOsx-4. On the other hand, the fluorescence intensity of each ODN-PBS of 1.5, 1.5 / 4, 1.5 / 4 2 , 1.5 / 4 3 , 1.5 / 4 4 and 1.5 / 4 5 μg / mL was measured to obtain a calibration curve. ODN concentration in each formulation was determined from the calibration curve. In addition, EPC concentration in each formulation was calculated | required by using the phospholipid C-test Waco.

각 제제에 있어서의 ODN 회수율 및 EPC 회수율은 하기 식 (4) 및 (5) 에서 산출하였다. ODN recovery and EPC recovery in each formulation were calculated by the following formulas (4) and (5).

ODN 의 회수율 (%) = A4 / (A4 ＋ B4) × 100 (4)Recovery of ODN (%) = A 4 / (A 4 + B 4 ) × 100 (4)

A4 : 피복 미립자 중의 ODN 함량 (㎍)A 4 : ODN content (μg) in coated fine particles

= 피복 미립자 획분 중의 ODN 농도 (㎍/mL) × 피복 미립자의 체적 (mL)     = ODN concentration (µg / mL) in the coated particulate fraction × volume of coated particulate (mL)

B4 : 상청액 중의 ODN 함량 (㎍)B 4 : ODN content in the supernatant (μg)

= 상청액 중의 ODN 농도 (㎍/mL) × 상청액의 체적 (mL)     = ODN concentration in supernatant (μg / mL) x volume of supernatant (mL)

EPC 의 회수율 (%) = A5 / (A5 ＋ B5) × 100 (5)Recovery of EPC (%) = A 5 / (A 5 + B 5 ) × 100 (5)

A5 : 피복 미립자 중의 EPC 함량 (㎍)A 5 : EPC content (μg) in the coated fine particles

= 피복 미립자 획분 중의 EPC 농도 (㎍/mL) × 피복 미립자의 체적 (mL)     = EPC concentration (µg / mL) in the coated particulate fraction × volume of coated particulate (mL)

B5 : 상청액 중의 EPC 함량 (㎍)B 5 : EPC content in the supernatant (μg)

= 상청액 중의 EPC 농도 (㎍/mL) × 상청액의 체적 (mL)             = EPC concentration in the supernatant (μg / mL) x volume of the supernatant (mL)

FBS 중의 안정성Stability in FBS

각 제제를 PBS 로 총 지질 농도가 30㎎/mL 가 되도록 희석하였다. 희석 후의 30μL 에 50㎎/mL 의 덱스트란 황산 나트륨 60μL 및 FBS 2910μL 를 첨가하여 혼합하였다. Each formulation was diluted with PBS to a total lipid concentration of 30 mg / mL. To 30 µL after dilution, 60 µL of 50 mg / mL sodium dextran sulfate and 2910 µL of FBS were added and mixed.

혼합 직후 및 37℃ 에서 3 시간 정치 후에 각 500μL 를 취하여 GPC 를 실시하여 그 프랙션 (100 방울, 10 개) 을 회수하였다. 각 프랙션을 볼텍스 믹서로 진탕 교반하여 샘플로 하고, ODN 을 정량하기 위해, 각 50μL 에 10w/v%TritonX-100 50μL 및 PBS 400μL 를 각각 첨가하여 볼텍스 믹서로 교반하였다. 그 100μL 를 96 웰 마이크로 플레이트에 넣고 ARVOsx-4 를 사용하여 여기 파장 485㎚ 및 형광 파장 530㎚ 에서의 형광 강도를 측정하여 0 시간 후 및 3 시간 후의 약물의 회수율을 하기 식 (6) 에서 산출하였다. Immediately after mixing and after 3 hours of standing at 37 ° C., 500 μL of each was taken and GPC was performed to recover the fraction (100 drops, 10 pieces). Each fraction was shaken and agitated with a vortex mixer to prepare a sample, and in order to quantify ODN, 50 μL of 10w / v% TritonX-100 and 400 μL of PBS were respectively added, followed by stirring with a vortex mixer. The 100 μL was put in a 96 well microplate, and the fluorescence intensity at the excitation wavelength 485 nm and the fluorescence wavelength 530 nm was measured using ARVOsx-4, and the recovery rate of the drug after 0 hours and after 3 hours was calculated by the following equation (6). .

0 시간 후의 ODN 의 잔존율 (%) = A6 / B6 × 100 (6)Remaining percentage of ODN after 0 hours (%) = A 6 / B 6 × 100 (6)

3 시간 후의 ODN 의 잔존율 (%) = C6 / D6 × 100Remaining percentage of ODN after 3 hours = C 6 / D 6 × 100

A6 = Σ{(각 프랙션 형광 강도)피복 미립자 획분 (0 시간 후) × (각 프랙션 체적)피복 미립자 획분 (0 시간 후))}A 6 = Σ {(each fractional fluorescence intensity) coated particulate fraction (after 0 hours) × (each fraction volume) coated particulate fraction (after 0 hours) )}

B6 = Σ{(각 프랙션 형광 강도)전체 획분 (0 시간 후) × (각 프랙션 체적)전체 획분 (0 시간 후))}B 6 = Σ {(each fraction fluorescence intensity) total fraction (after 0 hours) × (each fraction volume) total fraction (after 0 hours) )}

C6 = Σ{(각 프랙션 형광 강도)피복 미립자 획분 (3 시간 후) × (각 프랙션 체적)피복 미립자 획분 (3 시간 후))}C 6 = Σ {(each fraction fluorescence intensity) coated particulate fraction (after 3 hours) × (each fraction volume) coated particulate fraction (after 3 hours) )}

D6 = Σ{(각 프랙션 형광 강도)전체 획분 (3 시간 후) × (각 프랙션 체적)전체 획분 (3 시간 후))}D 6 = Σ {(each fraction fluorescence intensity) total fraction (after 3 hours) × (each fraction volume) total fraction (after 3 hours) )}

평균 입자 직경 (㎚)Average particle diameter (nm) 회수율 (%)Recovery rate (%) FBS 중의 잔존율 (%)% Remaining in FBS ODNODN 지질Geology 0 h0 h 3 h3 h 실시예 5Example 5 124124 8484 4545 6868 4343 실시예 6Example 6 125125 8585 5757 8484 6262 실시예 7Example 7 119119 8888 7070 8787 7373 실시예 8Example 8 129129 8888 7070 7979 6161 실시예 9Example 9 110110 8585 2929 5555 3232 비교예 3Comparative Example 3 145145 9797 5959 측정하지 않음Do not measure 측정하지 않음Do not measure

표 3 에 의하면, 실시예 5 ∼ 9 에서 얻어진 제제는 비교예 3 에서 얻어진 제제와 비교하여, 동일한 정도로 작은 입자 직경 (단, 실시예 5 ∼ 8 및 9 에서 얻어진 제제는 각각 130㎚ 이하 및 115㎚ 이하) 으로, 동일한 정도로 효율적으로 약물이 내봉된 피복 미립자이고, 또 견고하게 약물이 내봉된 피복 미립자였다. 실시예 5 ∼ 9 는 피복층 성분이 용해된 극성 유기 용매를 함유하는 액 (액 A) 을 조제하는 공정, 액 A 와 혼합 가능하고, 또한 코어 미립자가 분산되고 극성 유기 용매를 함유하지 않거나 또는 액 A 보다 낮은 비율로 극성 유기 용매를 함유하는 액 (액 B) 을 조제하는 공정 및 액 A 와 액 B 를 혼합하여 액 C 를 조제하는 공정을 포함하는 코어 미립자가 피복층 성분으로 피복된 피복 미립자의 제조 방법에 관한 것이다. 그 방법은 종래법과 비교하여, 예를 들어 서서히 혼합해야 하는 등의 제약이 없는 간편한 제조 방법임에도 불구하고, 그 방법에 의해 비교적 큰 약물인 ODN 을 함유하는 코어 미립자를 이용한 경우에도, 기존의 제조 방법과 동일한 정도로 우수한 피복 미립자를 얻을 수 있는 것이 명백해졌다. According to Table 3, the particle | grains obtained in Examples 5-9 are particle | grains small in the same grade compared with the formulation obtained in Comparative Example 3 (However, the formulations obtained in Examples 5-8 and 9 are 130 nm or less and 115 nm, respectively. The microparticles of the present invention were coated fine particles in which the drug was efficiently enclosed to the same extent, and coated microparticles in which the drug was firmly enclosed. Examples 5-9 are a process of preparing the liquid (liquid A) containing the polar organic solvent in which the coating layer component was melt | dissolved, and can be mixed with liquid A, and core fine particle is disperse | distributed and it does not contain a polar organic solvent, or liquid A Method for producing coated fine particles coated with core layer fine particles, including a step of preparing a liquid (liquid B) containing a polar organic solvent at a lower ratio and a step of mixing liquid A and liquid B to prepare liquid C It is about. Although the method is a simple manufacturing method without restrictions such as, for example, mixing slowly, compared with the conventional method, even if the core fine particles containing a relatively large drug ODN is used by the method, the existing manufacturing method It was evident that excellent coated fine particles could be obtained at the same level as.

실시예Example 10 10

피복층 성분 및 코어 미립자의 분산액 (액 H); EPC 30㎎ 및 PEG-DSPE 6.25㎎ 을 물 0.75mL 에 분산시켰다. 얻어진 분산액을 구멍 직경 0.4㎛ 의 폴리카보네이트 멤브레인에 11 회, 구멍 직경 0.1㎛ 의 폴리카보네이트 멤브레인에 25 회 통과시켜 지질 분산액을 얻었다. 얻어진 지질 분산액 0.375mL 와 실시예 5 의 B5 액을 혼합하였다 (H10 액).Dispersion of coating layer component and core fine particles (liquid H); 30 mg of EPC and 6.25 mg of PEG-DSPE were dispersed in 0.75 mL of water. The obtained dispersion was passed through a polycarbonate membrane having a pore diameter of 0.4 μm 11 times and a polycarbonate membrane having a pore diameter of 0.1 μm 25 times to obtain a lipid dispersion. 0.375 mL of the obtained lipid dispersion and the B5 liquid of Example 5 were mixed (H10 liquid).

H10 액에 에탄올 0.625mL 를 첨가하고 (에탄올 농도는 대략 50vol% 이고, 이 농도로 피복층 성분 및 코어 미립자는 분산되었다), 30 분간 교반하여 피복 미립자의 분산액을 얻었다. 0.625 mL of ethanol was added to the H10 liquid (ethanol concentration was approximately 50 vol%, and the coating layer component and the core fine particles were dispersed at this concentration), followed by stirring for 30 minutes to obtain a dispersion of the coated fine particles.

얻어진 피복 미립자의 분산액과 물 11.25mL 를 혼합하고, 실시예 5 와 동일하게 초원심 조작을 실시하여 제제를 얻었다. The dispersion liquid of the obtained coating fine particles and 11.25 mL of water were mixed, and ultracentrifugal operation was performed like Example 5 to obtain a formulation.

실시예Example 11 11

피복층 성분 및 코어 미립자의 분산액 (액 H); 실시예 10 의 H10 액의 조제 에 있어서, 물의 양을 1mL 로 하여 얻어진 지질 분산액 0.5mL 에 실시예 5 의 B5 액을 혼합하였다 (H11 액).Dispersion of coating layer component and core fine particles (liquid H); In the preparation of the H10 liquid of Example 10, the B5 liquid of Example 5 was mixed with 0.5 mL of the lipid dispersion obtained by setting the amount of water to 1 mL (H11 liquid).

H11 액에 에탄올 0.5mL 를 첨가하고 (에탄올 농도는 대략 40vol% 이고, 이 농도로 피복층 성분 및 코어 미립자는 분산되었다), 30 분간 교반하여 피복 미립자의 분산액을 얻었다. 0.5 mL of ethanol was added to the H11 liquid (ethanol concentration was approximately 40 vol%, and the coating layer component and the core fine particles were dispersed at this concentration), followed by stirring for 30 minutes to obtain a dispersion of the coated fine particles.

얻어진 피복 미립자의 분산액과 물 8.75mL 를 혼합하고, 실시예 5 와 동일하게 초원심 조작을 실시하여 제제를 얻었다. The dispersion liquid of the obtained coating fine particles and 8.75 mL of water were mixed, and ultracentrifugal operation was performed like Example 5 to obtain a formulation.

실시예Example 12 12

피복층 성분 및 코어 미립자의 분산액 (액 H); 실시예 10 의 H10 액의 조제 에 있어서, 물의 양을 1.125mL 로 하여 얻어진 지질 분산액 0.563mL 에 실시예 5 의 B5 액을 혼합하였다 (H12 액).Dispersion of coating layer component and core fine particles (liquid H); In the preparation of the H10 liquid of Example 10, the B5 liquid of Example 5 was mixed with 0.563 mL of the lipid dispersion obtained by setting the amount of water to 1.125 mL (H12 liquid).

H12 액에 에탄올 0.438mL 를 첨가하고 (에탄올 농도는 대략 35vol% 이고, 이 농도로 피복층 성분 및 코어 미립자는 분산되었다), 30 분간 교반하여 피복 미립자의 분산액을 얻었다. 0.438 mL of ethanol was added to the H12 liquid (ethanol concentration was approximately 35 vol%, and the coating layer component and the core fine particles were dispersed at this concentration), followed by stirring for 30 minutes to obtain a dispersion of the coated fine particles.

얻어진 피복 미립자의 분산액과 물 7.5mL 를 혼합하고 실시예 5 와 동일하게 초원심 조작을 실시하여 제제를 얻었다. The dispersion of obtained coating fine particles and 7.5 mL of water were mixed, and ultracentrifugal operation was performed in the same manner as in Example 5 to obtain a formulation.

실시예Example 13 13

피복층 성분 및 코어 미립자의 분산액 (액 H); 실시예 10 의 H10 액의 조제 에 있어서, 물의 양을 1.375mL 로 하여 얻어진 지질 분산액 0.688mL 에 실시예 5 의 B5 액을 혼합하였다 (H13 액).Dispersion of coating layer component and core fine particles (liquid H); In the preparation of the H10 solution of Example 10, the B5 solution of Example 5 was mixed with 0.688 mL of the lipid dispersion obtained by setting the amount of water to 1.375 mL (H13 solution).

H13 액에 에탄올 0.313mL 를 첨가하고 (에탄올 농도는 대략 25vol% 이고, 이 농도로 피복층 성분 및 코어 미립자는 분산되었다), 30 분간 교반하여 피복 미립자의 분산액을 얻었다. 0.313 mL of ethanol was added to the H13 solution (ethanol concentration was approximately 25 vol%, and the coating layer component and the core fine particles were dispersed at this concentration), followed by stirring for 30 minutes to obtain a dispersion of the coated fine particles.

얻어진 피복 미립자의 분산액과 물 5mL 를 혼합하고, 실시예 5 와 동일하게 초원심 조작을 실시하여 제제를 얻었다. The dispersion of the coated fine particles thus obtained was mixed with 5 mL of water, and ultracentrifugal operation was performed in the same manner as in Example 5 to obtain a formulation.

시험예Test Example 4 4

실시예 10 ∼ 13 에서 얻어진 각 제제에 대해 시험예 3 과 동일한 방법에 따라 평균 입자 직경, ODN 및 EPC 의 회수율, 그리고 FBS 중의 안정성에 대해 검토를 하였다. 결과를 표 4 에 나타낸다. About each formulation obtained in Examples 10-13, the average particle diameter, the recovery rate of ODN and EPC, and the stability in FBS were examined according to the method similar to Test Example 3. The results are shown in Table 4.

평균 입자 직경 (㎚)Average particle diameter (nm) 회수율 (%)Recovery rate (%) 혈장 잔존율 (%)Plasma survival rate (%) ODNODN EPCEPC 0 시간0 hours 3 시간3 hours 실시예 10Example 10 108108 7979 4343 5656 2929 실시예 11Example 11 9898 9090 7676 8282 6161 실시예 12Example 12 9999 9393 7474 8888 7070 실시예 13Example 13 9595 9090 7979 7373 6060 비교예 3Comparative Example 3 145145 9797 5959 측정하지 않음Do not measure 측정하지 않음Do not measure

표 4 에 의하면, 실시예 10 ∼ 13 에서 얻어진 제제는 비교예 3 에서 얻어진 제제와 비교하여, 동일한 정도로 작은 입자 직경 (단, 실시예 10 및 11 ∼ 13 은 각각 115㎚ 이하 및 100㎚ 이하) 으로, 동일한 정도로 효율적으로 약물이 내봉된 피복 미립자이고, 또한 견고하게 약물이 내봉된 피복 미립자였다. 실시예 10 ∼ 13 은 피복층 성분 및 코어 미립자가 분산된 액 (액 H) 을 조제하는 공정, 액 H 와 혼합 가능하고, 또한 극성 유기 용매를 함유하는 액을 액 H 와 혼합하여 액 I 를 조제하는 공정을 포함하는 코어 미립자가 피복층 성분으로 피복된 피복 미립자의 제조 방법에 관한 것이다. 그 방법은 종래법과 비교하여, 예를 들어 서서히 혼합해야 하는 등의 제약이 없는 간편한 제조 방법임에도 불구하고, 그 방법에 의해 비교적 큰 약물인 ODN 를 함유하는 코어 미립자여도, 종래법과 동일한 정도로 우수한 피복 미립자를 얻을 수 있는 것이 명백해졌다. According to Table 4, the formulations obtained in Examples 10 to 13 are smaller in particle size (except that Examples 10 and 11 to 13 are 115 nm or less and 100 nm or less, respectively) as compared with the formulations obtained in Comparative Example 3. The coated microparticles were drug-coated microparticles with the same degree of efficiency as the drug, and the coated microparticles were solidly enclosed with drug. Examples 10-13 are processes for preparing a liquid (liquid H) in which a coating layer component and core fine particles are dispersed, and can be mixed with liquid H, and a liquid containing a polar organic solvent is mixed with liquid H to prepare liquid I. It relates to a method for producing coated fine particles in which core fine particles including a step are coated with a coating layer component. Compared with the conventional method, the method is a simple production method that does not have to be mixed slowly, for example, and even though the core fine particles containing ODN, which is a relatively large drug, are excellent in the same degree as the conventional method, It became clear that we could get

또한, 표 3 및 표 4 에서 알 수 있는 바와 같이, 실시예 9 및 13 에서 얻어지는 제제는 극성 유기 용매의 농도가 불과 25% 정도임에도 불구하고 종래법과 동일한 정도로 작은 입자 직경으로, 종래법과 동일한 정도로 효율적으로 제조할 수 있고, 또한 견고하게 약물이 내봉된 피복 미립자였다. 이런 점에서, 본 발명의 피복 미립자의 제조 방법은 종래법과 비교하여 이용하는 극성 유기 용매를 감량할 수 있는 이점도 있는 것이 명백해졌다. In addition, as can be seen from Tables 3 and 4, the formulations obtained in Examples 9 and 13 are effective to the same extent as the conventional method with a particle diameter as small as the conventional method, despite the concentration of the polar organic solvent being only about 25%. It was also coated fine particles in which the drug was firmly enclosed. In this respect, it has become clear that the method for producing coated fine particles of the present invention also has the advantage of reducing the polar organic solvent used compared with the conventional method.

본 발명에 의해, 코어 미립자가 피복층 성분으로 피복된 피복 미립자의 간편한 제조 방법 등이 제공된다. 또, 본 발명에 의해 효율적으로 및/또는 견고하게 약물을 함유시킨 피복 미립자의 제조 방법 등이 제공된다. According to the present invention, there is provided a simple method for producing coated fine particles in which core fine particles are coated with a coating layer component. In addition, the present invention provides a method for producing coated fine particles containing a drug efficiently and / or firmly.

Claims (27)

피복층 성분이 가용인 극성 유기 용매를 함유한 액 중에, 코어 미립자가 용해되지 않고 피복층 성분이 분산 상태로 존재하는 것이 가능한 농도로 그 극성 유기 용매를 함유시키고, 그 액 중에 그 코어 미립자 및 그 피복층 성분을 분산시키는 공정 (공정 A) 및 그 코어 미립자를 그 피복층 성분으로 피복하는 공정 (공정 B) 을 포함하는 것을 특징으로 하는 그 코어 미립자가 그 피복층 성분으로 피복된 피복 미립자의 제조 방법.In the liquid containing the polar organic solvent in which the coating layer component is soluble, the polar organic solvent is contained at a concentration in which the core fine particles are not dissolved and the coating layer component can exist in a dispersed state, and the core fine particle and the coating layer component in the liquid. And a step (step A) of coating the core fine particles with the coating layer component (step A), wherein the core fine particles are coated with the coating layer component. 제 1 항에 있어서,The method of claim 1, 공정 B 는 공정 A 에서 얻어지는 액을 그 코어 미립자가 그 피복층 성분으로 피복되기에 충분한 시간동안 정치 또는 혼합하는 공정인 것을 특징으로 하는 제조 방법.Step B is a step in which the liquid obtained in Step A is left to stand or mixed for a time sufficient for the core fine particles to be coated with the coating layer component. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,The method according to claim 1 or 2, 공정 A 는 그 피복층 성분이 용해된 극성 유기 용매를 함유한 액 (액 A) 을 조제하는 공정, Step A is a step of preparing a liquid (liquid A) containing a polar organic solvent in which the coating layer component is dissolved, 액 A 와 혼합 가능하고, 또한 그 코어 미립자가 분산되고 그 극성 유기 용매를 함유하지 않거나 또는 액 A 보다 낮은 비율로 그 극성 유기 용매를 함유하는 액 (액 B) 을 조제하는 공정, 및 Preparing a liquid (liquid B) which can be mixed with the liquid A and whose core fine particles are dispersed and which do not contain the polar organic solvent or which contain the polar organic solvent at a lower ratio than the liquid A, and 액 A 와 액 B 를 혼합하여 액 C 를 조제하는 공정을 포함하는 것을 특징으로 하는 제조 방법.A process for producing a liquid C by mixing the liquid A and the liquid B. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,The method according to claim 1 or 2, 공정 A 는 그 피복층 성분이 분산된 액 (액 D) 을 조제하는 공정,Step A is a step of preparing a liquid (liquid D) in which the coating layer component is dispersed, 액 D 와 혼합 가능하고, 또한 그 코어 미립자가 분산된 액 (액 E) 을 조제하는 공정, 및A step of preparing a liquid (liquid E) capable of mixing with the liquid D and dispersing the core fine particles thereof, and 액 D 와 액 E 를 혼합하여 액 F 를 조제하는 공정을 포함하고,Mixing liquid D and liquid E to prepare liquid F; 액 D 및 액 E 의 적어도 한쪽을 극성 유기 용매를 함유하는 액으로 하는 것을 특징으로 하는 제조 방법.At least one of the liquid D and the liquid E is a liquid containing a polar organic solvent. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,The method according to claim 1 or 2, 공정 A 는 그 피복층 성분이 분산된 극성 유기 용매를 함유한 액 (액 G) 을 조제하는 공정, 및Step A is a step of preparing a liquid (liquid G) containing a polar organic solvent in which the coating layer component is dispersed, and 액 G 에 그 코어 미립자를 분산시키는 공정을 포함하는 것을 특징으로 하는 제조 방법.A process for dispersing the core fine particles in the liquid G. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,The method according to claim 1 or 2, 공정 A 는 그 피복층 성분 및 그 코어 미립자가 분산된 액 (액 H) 을 조제하는 공정, 및Step A is a step of preparing a liquid (liquid H) in which the coating layer component and the core fine particles are dispersed, and 액 H 와 혼합 가능하고, 또한 극성 유기 용매를 함유하는 액을 액 H 와 혼합하여 액 I 을 조제하는 공정을 포함하는 것을 특징으로 하는 제조 방법.A process for producing a liquid I by mixing the liquid H and mixing a liquid containing a polar organic solvent with the liquid H. 제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 1 to 6, 극성 유기 용매가 알코올, 글리콜 및 폴리알킬렌글리콜에서 선택되는 1 개 이상인 것을 특징으로 하는 제조 방법.Wherein the polar organic solvent is at least one selected from alcohols, glycols and polyalkylene glycols. 제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 1 to 7, 공정 B 에 있어서 극성 유기 용매를 함유하는 액 중의 극성 유기 용매의 농도를 1 ∼ 80 vol% 로 하는 것을 특징으로 하는 제조 방법.In the process B, the density | concentration of the polar organic solvent in the liquid containing a polar organic solvent is 1-80 vol%, The manufacturing method characterized by the above-mentioned. 제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 1 to 8, 피복층 성분은 피복층이 지질막이 되는 지질 및 계면 활성제에서 선택되는 1 개 이상의 물질인 제조 방법.The coating layer component is a production method in which the coating layer is at least one material selected from lipids and surfactants which become lipid membranes. 제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 1 to 8, 피복층 성분은 피복층이 지질막이 되는 지질 및 계면 활성제에서 선택되는 1 개 이상의 물질, 그리고 당, 펩티드, 핵산 및 수용성 고분자에서 선택되는 1 개 이상 물질의 지질 유도체 또는 지방산 유도체 또는 계면 활성제인 제조 방법.The coating layer component is a production method wherein the coating layer is a lipid derivative or a fatty acid derivative or a surfactant of at least one substance selected from lipids and surfactants which are lipid membranes and at least one substance selected from sugars, peptides, nucleic acids and water-soluble polymers. 제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 1 to 10, 코어 미립자가 당, 펩티드, 핵산 및 수용성 고분자에서 선택되는 1 개 이상 물질의 지질 유도체 또는 지방산 유도체 또는 계면 활성제를 포함한 제조 방법.A method for producing a core particle comprising a lipid derivative or fatty acid derivative or surfactant of at least one substance selected from sugars, peptides, nucleic acids and water soluble polymers. 제 10 항 또는 제 11 항에 있어서,The method of claim 10 or 11, 당, 펩티드, 핵산 및 수용성 고분자에서 선택되는 1 개 이상 물질의 지질 유도체 또는 지방산 유도체 또는 계면 활성제가, 폴리에틸렌글리콜화 지질, 폴리글리세린화 지질, 폴리에틸렌글리콜알킬에테르, 폴리에틸렌글리콜소르비탄 지방산 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 지방산 에스테르, 폴리글리세린 지방산 에스테르, 폴리옥시에틸렌폴리옥시프로필렌글리콜 및 글리세린 지방산 에스테르에서 선택되는 1 개 이상인 제조 방법.Lipid derivatives or fatty acid derivatives or surfactants of one or more substances selected from sugars, peptides, nucleic acids and water-soluble polymers include polyethylene glycolylated lipids, polyglycerolated lipids, polyethylene glycol alkyl ethers, polyethylene glycol sorbitan fatty acid esters, polyethylene glycol At least one selected from fatty acid esters, polyglycerin fatty acid esters, polyoxyethylenepolyoxypropylene glycol and glycerin fatty acid esters. 제 1 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 1 to 12, 공정 B 다음, 극성 유기 용매를 함유한 액으로부터 극성 유기 용매를 제거 또는 극성 유기 용매의 농도를 감소시키는 공정을 포함한 제조 방법.Process B Next, the manufacturing method including the process of removing a polar organic solvent or reducing the density | concentration of a polar organic solvent from the liquid containing a polar organic solvent. 제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 1 to 13, 코어 미립자가 약물, 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드 및 미립자 제제에서 선택되는 하나 이상을 구성 성분으로 하는 미립자인 제조 방법.The core microparticle is a microparticle comprising at least one member selected from drugs, lipid aggregates, liposomes, emulsion particles, polymers, metal colloids, and particulate preparations. 제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 1 to 13, 코어 미립자가 약물을 구성 성분으로 하는 미립자인 제조 방법.The manufacturing method whose core microparticles | fine-particles are microparticles | fine-particles which make drug a component. 제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 1 to 13, 코어 미립자는 약물과 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드 및 미립자 제제에서 선택되는 1 개 이상의 복합체를 구성 성분으로 하는 미립자인 제조 방법.The core microparticles are microparticles composed of a drug and lipid aggregates, liposomes, emulsion particles, polymers, metal colloids, and one or more complexes selected from particulate preparations. 제 16 항에 있어서,The method of claim 16, 지질 집합체, 리포솜, 에멀션 입자, 고분자, 금속 콜로이드 또는 미립자 제제가 약물과 정전적으로 반대의 전하를 갖는 것인 제조 방법.Wherein the lipid aggregate, liposomes, emulsion particles, polymers, metal colloids or particulate preparations have an electrostatic opposite charge with the drug. 제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 1 to 13, 코어 미립자가 음이온성 약물과 양이온성 지질을 함유하는 리포솜의 복합체를 구성 성분으로 하는 미립자인 제조 방법.The core microparticle is a microparticle which comprises as a component a complex of the liposome containing anionic drug and cationic lipid. 제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 1 to 13, 코어 미립자가 양이온성 약물과 음이온성 지질을 함유하는 리포솜의 복합체를 구성 성분으로 하는 미립자인 제조 방법.The core fine particle is a fine particle which comprises as a component a complex of liposome containing a cationic drug and an anionic lipid. 제 17 항 내지 제 19 항 중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 17 to 19, 코어 미립자가 추가로 부착 경합제를 함유한 미립자인 제조 방법.The manufacturing method whose core microparticles | fine-particles are microparticles | fine-particles which further contain an adhesion | attachment competitive agent. 제 14 항 내지 제 20 항 중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 14 to 20, 약물이 펩티드, 단백질, 핵산, 저분자 화합물, 당류 및 고분자 화합물에서 선택되는 하나 이상인 제조 방법.The method of manufacture wherein the drug is at least one selected from peptides, proteins, nucleic acids, low molecular weight compounds, sugars and high molecular compounds. 제 14 항 내지 제 20 항 중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 14 to 20, 약물이 유전자, DNA, RNA, 올리고뉴클레오티드, 플라스미드 및 siRNA 에서 선택되는 1 개 이상인 제조 방법.The production method wherein the drug is at least one selected from genes, DNA, RNA, oligonucleotides, plasmids and siRNAs. 제 1 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법에 따라 피복 미립자를 조제하기 위한, 적어도 코어 미립자, 피복층 성분 및 극성 유기 용매를 함유하는 액으로 구성되는 키트.The kit consisting of the liquid containing at least a core fine particle, a coating layer component, and a polar organic solvent for preparing coated fine particles according to the manufacturing method according to any one of claims 1 to 22. 제 1 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법을 이용하여 제조할 수 있는 피복 미립자.The coated fine particle which can be manufactured using the manufacturing method in any one of Claims 1-22. 제 15 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법을 이용하여 제조 할 수 있는 피복 미립자 중, 약물이 항종양약인 그 피복 미립자를 함유하는 종양의 치료제.The therapeutic agent for tumors containing the coated fine particle whose drug is an anti-tumor drug among the coated fine particles which can be manufactured using the manufacturing method in any one of Claims 15-22. 제 15 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법을 이용하여 제조할 수 있는 피복 미립자 중, 약물이 항염증약인 그 피복 미립자를 함유하는 염증의 치료제.The therapeutic agent for inflammation containing the coated microparticles | fine-particles whose drug is an anti-inflammatory drug among the coating microparticles which can be manufactured using the manufacturing method in any one of Claims 15-22. 제 15 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법을 이용하여 제조할 수 있는 피복 미립자로 이루어지는 종양 또는 염증 부위에 대한 약물 함유 캐리어.A drug-containing carrier for a tumor or inflammation site consisting of coated fine particles that can be produced using the production method according to any one of claims 15 to 22.
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