KR20060118318A - Methods and compositions for administering therapeutic and diagnostic agents - Google Patents

Abstract

Methods and compositions are described for targeting therapeutic and diagnostic molecules to particular types of cells using targeting antibodies or other targeting moeities.

Description

치료 및 진단용 제제의 투여방법 및 투여용 조성물 {Methods and compositions for administering therapeutic and diagnostic agents}Methods and compositions for administering therapeutic and diagnostic agents

관련 특허출원의 상호-참조Cross-Reference to the Related Patent Application

본 출원은 미국 가출원 제60/444,357호(2003.1.31.출원)의 일부계속(Continuaion-in-Part) 출원으로서, 이는 본 발명에 온전히 참고문헌으로 포함된다. This application is a Continuation-in-Part application of US Provisional Application No. 60 / 444,357, filed Jan. 1, 2003, which is incorporated herein by reference in its entirety.

발명의 배경Background of the Invention

본 발명은 생체 내 치료 및 진단용 제제의 생체 내 투여 분야에 관한 것으로서, 이들 제제를 특정 형태의 세포에 표적화하는 방법 및 표적용 조성물을 포함한다. FIELD OF THE INVENTION The present invention relates to the field of in vivo administration of agents for therapeutic and diagnostic in vivo, and includes methods and targeting compositions for targeting these agents to specific types of cells.

여기에 제공된 정보 및 인용문헌들은 오직 독자들의 이해를 위한 것으로서, 이들 정보 및 인용문헌 중 어느 것도 본 발명의 종래 기술을 구성하는 것은 아니다. The information and citations provided herein are for the understanding of the reader only, and none of these information and citations constitute the prior art of the present invention.

표적 부위의 탐지는 탐지용 제제의 신호/배경비(signal-to-background ratio)가 높을수록 효과적이다. 치료는 치료용 제제가 표적부위에서 오랫동안 흡수 및 결합하고, 또한 절대적으로 누적될수록 효과적이다. 선택적 편재화를 위해 표적 부분에 컨쥬게이트 되는 진단 또는 치료용 제제를 포함하는 표적 벡터를 사용하여, 표적부위로 전달되는 제제의 표적 비율과 양을 향상시킬 수 있다. Detection of the target site is more effective with a higher signal-to-background ratio of the detection agent. Treatment is as effective as the therapeutic agent absorbs and binds at the target site for a long time, and also accumulates absolutely. Target vectors containing diagnostic or therapeutic agents conjugated to the target moiety for selective localization can be used to improve the target ratio and amount of agent delivered to the target site.

표적 벡터의 예로는 항체 또는 항체 단편, 세포- 또는 조직-특이적 펩티드, 및 호르몬 및 다른 수용체-결합 분자와 같은 표적화 부분의 진단 또는 치료용 제제 컨쥬게이트를 들 수 있다. 예를 들어, 병리 미생물과 결합하는 결정인자 및 병리세포 또는 정상세포와 결합하는 상이한 결정인자에 대한 항체들이 다양한 질병 또는 병변의 탐지 및 치료에 사용되어 왔다. 예를 들어 한센 등(Hansen et al.)의 미국 특허 제3,927,193호 및 골든베르그(Goldenberg)의 미국특허 제4,331,647호, 4,348,376호, 제4,361,544호, 제4,468,457호, 제4,444,744호, 제4,460,459호, 제4,460,561호, 제4,624,846호 및 제4,818,709호(이들 개시 내용은 참고문헌으로 한다)에 기재되어 있는 바와 같이, 이들 방법 중 표적항체는 적절한 탐지 또는 치료용 제제에 직접 컨쥬게이트 된다. Examples of target vectors include agent conjugates for the diagnosis or treatment of antibodies or antibody fragments, cell- or tissue-specific peptides, and targeting moieties such as hormones and other receptor-binding molecules. For example, determinants that bind to pathological microorganisms and antibodies to different determinants that bind to pathological cells or normal cells have been used for the detection and treatment of various diseases or lesions. See, for example, US Pat. Nos. 3,927,193 to Hansen et al. And US Pat. Nos. 4,331,647, 4,348,376, 4,361,544, 4,468,457, 4,444,744, 4,460,459, and 4 to Goldenenberg. As described in US Pat. Nos. 4,460,561, 4,624,846 and 4,818,709, the disclosures of which are incorporated by reference, of these methods, the target antibody is conjugated directly to a suitable detection or therapeutic agent.

직접 표적화 방법, 즉 진단 또는 치료용 제제("활성 성분")가 표적화 부위에 직접적으로 컨쥬게이트되는 방법의 문제점 중 하나는 대부분의 컨쥬게이트가 순환하면서 표적화된 컨쥬게이트의 기능을 어떤 식으로든 보완하는 반면에, 상대적으로 작은 컨쥬게이트 단편이 실제로 표적 부위에 결합한다는 것이다. 예를 들어, RIS (Radioimmunoscintigraphic) 영상 또는 핵자기 영상 컨쥬게이트와 같은 진단 컨쥬게이트의 경우, 순환중인 비표적화 컨쥬게이트는 배경을 증가시켜 해상도를 저하시킬 수 있다. 항체와 같은 장거리 순환하는 표적 부분에 부착되어 있고 예를 들어 방사성동위원소, 약물 또는 독소와 같은 독성 치료제를 갖는 치료 컨쥬게이트의 경 우, 순환 컨쥬게이트는 숙주에 허용될 수 없는 독성, 예를 들어 골수 독성 또는 시스템 부작용 등을 야기할 수 있다. One of the problems with direct targeting methods, i.e., in which a diagnostic or therapeutic agent ("active ingredient") is conjugated directly to the targeting site, is complied with in some way to complement the function of the targeted conjugate as most of the conjugates circulate. On the other hand, relatively small conjugate fragments actually bind to the target site. For example, for diagnostic conjugates such as Radioimmunoscintigraphic (RIS) or nuclear magnetic imaging conjugates, circulating non-targeting conjugates can increase the background to reduce resolution. In the case of therapeutic conjugates that are attached to long-range circulating target moieties such as antibodies and that have toxic therapeutic agents such as, for example, radioisotopes, drugs, or toxins, the circulating conjugate may be unacceptable to the host, for example Bone marrow toxicity or system side effects.

탐지 또는 치료용 제제의 표적/배경 비를 증가시키기 위해 예비표적화 방법이 개발되었다. 예비-표적화 및 바이오틴/아비딘 접근법의 예로는 예를 들어 굿윈 등(Goodwin et al.)의 미국특허 제4,863,713호;; 골든베르그의 미국특허 제5,525,338호; 굿윈 등의 J.Nucl.Med.29:226,1988; 나호위치 등(Hnatowich et al.,) J.Nucl. Med.28:1294,1987; 에르 등(Oehr et al.,)의 J.Nucl.Med.29:728,1988; 클리바노프 등(Klibanov et al.,)의 J.Nucl.Med.29:1951,1988; 시닛신 등(Sinitsyn et al.,)의 J.Nucl.Med.30:66,1989; 칼로포노스 등(Kalofonoset al.,)의 J.Nucl.Med.31:1791,1990; 쉐터 등(Schechter et al.,)의 Int.J.Cancer 48:167,1991; 파가넬리 등(Paganelli et al.,)의 Cancer Res.51:4960, 1991; 파가넬리 등(Paganelli et al.,)의 Nucl. Med. Commun.12:211,1991; 샤키 등(Sharkey et al.,)의 Bioconjugate Chem 8:595-604,1997; 스틱니 등(Stickney et al.,)의 Cancer Res. 51:6650,1991; 및 유단 등(Yuan et al.,)의 Cancer Res. 51:3119,1991(이들 모두는 온전히 참고문헌으로 포함된다)에 개시되어 있다.Pretargeting methods have been developed to increase the target / background ratio of a detection or therapeutic agent. Examples of pre-targeting and biotin / avidin approaches are described, for example, in US Patent Nos. 4,863,713 to Goodwin et al .; Goldenberg, U.S. Patent No. 5,525,338; Goodwin et al. J. Nucl. Med. 29: 226,1988; Nahowich et al., J. Nucl. Med. 28: 1294, 1987; J. Nucl. Med. 29: 728,1988 by Oehr et al. J. Nucl. Med. 29: 1951,1988 by Klibanov et al.,; J. Nucl. Med. 30: 66,1989 by Sinitsyn et al., Et al .; J. Nucl. Med. 31: 1791,1990 by Kaloponos et al.,; Int. J. Cancer 48: 167,1991 to Schechter et al.,; Cancer Res. 51: 4960, 1991 by Paganelli et al.,; Nucl., Paganelli et al. Med. Commun. 12: 211, 1991; Bioconjugate Chem 8: 595-604,1997 by Sharkey et al.,; Cancer Res. Of Stickney et al. 51: 6650,1991; And Cancer Res. 51: 3119,1991, all of which are incorporated by reference in their entirety.

예비표적화 방법에서, (진단 또는 치료용 제제에 결합되지 않은) 일차 표적 종을 투여한다. 일차 표적 종은 표적 부위에 결합하는 표적 부분 및, 표적가능한 구조체상의 결합 부위에 결합할 수 있는 결합 부분을 포함한다. 일차 표적 종이 충분히 누적된 후, 표적가능한 구조체가 투여된다. 표적가능한 구조체는 일차 표적 종의 가능한 결합부위를 인식하는 결합 부위 및 진단 또는 치료용 제제를 포함 한다. In the pretargeting method, the primary target species (not bound to a diagnostic or therapeutic agent) is administered. Primary target species include a target moiety that binds to a target site and a binding moiety capable of binding to a binding site on a targetable construct. After sufficient accumulation of the primary target species, the targetable construct is administered. Targetable constructs include binding sites that recognize possible binding sites of the primary target species and agents for diagnosis or treatment.

예비표적화는 직접 표적화방법에 비해 소정의 장점이 있다. 예를 들어 방사성면역요법과 같이 치료용 표적 부위에 방사성핵종을 생체내 전달하는 예비표적화 접근법은 방사성면역컨쥬게이트의 장기 순환으로 인한 골수 독성을 감소시킨다. 이는 종종 장기 순환 종인 일차 표적 분자에 방사성동위원소가 직접 컨쥬게이트되기 보다는 신속히 제거하는 저분자량 킬레이트로서 전달되기 때문이다. Pretargeting has certain advantages over direct targeting methods. For example, pretargeting approaches that deliver radionuclides in vivo to therapeutic target sites, such as radioimmunotherapy, reduce bone marrow toxicity due to long-term circulation of radioimmunoconjugates. This is because the radioisotope is often delivered as a low molecular weight chelate that quickly removes rather than directly conjugated to the primary target molecule, which is a long-term circulating species.

일부 예비표적화 방법의 특징은 순환 일차 표적 종(표적부위에 결합하지 않은 일차 표적 종)이 표적 부위에 결합하는 표적 종에 표적가능한 컨쥬게이트가 결합하는 것을 (일차 표적 종의 결합 부위를 통해) 방해한다는 것이다. 일부 방법에서는 일차 표적 종에 결합하여 순환 종을 용이하게 제거하는 제거제를 사용하여 순환 일차 표적 종의 양을 감소시킨다. 예시는 굿윈 등의 미국특허 제4,863,713호에 기술되어 있다. 그러나, 순환 일차 표적 종의 양을 감소시키면 결합 평형이 이동되고, (표적가능한 구조체게 결합될 수 있는) 결합된 일차 표적 종이 표적으로부터 분리되어, 탐지 또는 치료용 종이 표적 부위에 존재하는 시간이 감소하게 된다. Some pretargeting methods are characterized by preventing the target conjugates (via the binding site of the primary target species) from binding to the target species to which the circulating primary target species (primary target species not bound to the target site) binds to the target site. Is that. Some methods reduce the amount of circulating primary target species with a scavenger that binds to the primary target species and readily removes the circulating species. Examples are described in U.S. Patent 4,863,713 to Goodwin et al. However, reducing the amount of circulating primary target species shifts the binding equilibrium and separates from the bound primary target species (which can be bound to the targetable construct), reducing the time that the detection or therapeutic species is present at the target site. Done.

발명의 요약Summary of the Invention

본 발명은 생물학적 표적에 생물학적 활성 종 및 구조체를 전달하는 유리한 방법을 제공한다. 따라서, 일 구현예에서는, 본 발명은 표적 부위의 활성 종의 보유를 증가시키는 제제에 의해 표적 부위에 치료 또는 진단용 제제(또는 다른 활성 종)가 결합하는 것을 향상시키는 개선된 표적화 방법을 제공한다. The present invention provides an advantageous method of delivering biologically active species and structures to biological targets. Thus, in one embodiment, the present invention provides an improved targeting method that enhances binding of a therapeutic or diagnostic agent (or other active species) to a target site by an agent that increases retention of the active species at the target site.

다른 구현예에서, 본 발명은 내재화제가 없을때 보다도 더 크고/크거나 빠르게 표적세포에서 내재화되는 부분의 결합 또는 복합체의 생성에 의해 활성 종 및 복합체의 내재화를 향상시키는 개선된 표적화 방법을 제공한다. In another embodiment, the present invention provides an improved targeting method that enhances internalization of active species and complexes by the generation of binding or complexes of parts that are larger and / or faster than in the absence of an internalizing agent in the target cell.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 하나 이상의 표적 결합 부분 및 하나 이상의 표적가능한 구조체 결합 부분을 포함하는 일차 표적 제제; 하나 이상의 일차 표적 제제 결합 부분, 제거제 결합 부분 및 통상 치료 또는 진단 부분을 포함하는 표적가능한 구조체; 및 하나 이상의 표적가능한 구조체 결합 부분을 포함하고 표적 부위의 표적가능한 구조체의 보유를 증가시키는 제거제를 포유류에 투여하는, 치료 또는 진단용 제제의 표적화된 전달 방법을 제공한다. In another embodiment, the present invention provides a kit comprising: a primary target agent comprising at least one target binding moiety and at least one targetable construct binding moiety; A targetable construct comprising one or more primary target agent binding moieties, a scavenger binding moiety and a conventional therapeutic or diagnostic moiety; And a method for delivering a therapeutic or diagnostic agent to a mammal, wherein the agent comprises at least one targetable construct binding moiety and which increases the retention of the targetable construct at the target site.

또 다른 구현예에서, 표적 결합 부분을 포함하는 일차 표적 제제 및 내재화 부분을 포함하는 개별 내재화제를 포유류에 투여하되, 일차 표적 제제는 내재화제와 복합체을 형성하여 내재화를 향상시키고 복합체은 또한 치료 또는 진단부분을 포함하는, 치료 또는 진단용 제제의 세포 내재화 향상 방법을 제공한다. In another embodiment, a primary target agent comprising a target binding moiety and an individual internalizer comprising an internalization moiety are administered to a mammal, wherein the primary target agent forms a complex with the internalizing agent to enhance internalization and the complex also provides a therapeutic or diagnostic moiety. It provides a method for improving cell internalization of a therapeutic or diagnostic agent.

유사하게 다른 면에서, 본 발명은 표적 결합 부분 및 하나 이상의 표적가능한 구조체 결합 부분을 포함하는 일차 표적 제제; 일차 표적 제제 결합 부분, 제거제 결합 부분 및 영상화 부분을 포함하는 표적가능한 구조체; 및 하나 이상의 표적가능한 구조체 결합 부분을 포함하는 제거제를 포유류에 투여하여, 표적 결합된 표적가능한 구조체에 대한 순환중인 표적가능한 구조체의 비율을 감소시키고/시키거나 순환중인 표적의 제거율을 높일 수 있는 생체내 영상화 시스템의 콘트라스트 향상 방법을 제공한다. Similarly, in another aspect, the invention provides a primary target agent comprising a target binding moiety and at least one targetable construct binding moiety; A targetable construct comprising a primary target agent binding moiety, a remover binding moiety, and an imaging moiety; And in vivo a scavenger comprising at least one targetable construct binding moiety, thereby reducing the ratio of circulating targetable construct to the target bound targetable construct and / or increasing the clearance rate of the circulating target. Provided are a method for improving contrast in an imaging system.

여기에 기술된 제거제는 또한 순환중인 치료 또는 진단용 제제를 갖는 포유류에 제거제를 투여하여, 치료 또는 진단용 제제를 포함하는 순환인 분자 또는 복합체 상의 하나 이상의 부분에 제거제가 특이적으로 결합하여 분자 또는 복합체의 제거를 향상시키는, 순환중인 치료 또는 진단용 제제의 제거방법을 제공한다. The scavenger described herein may also be administered to a mammal having a therapeutic or diagnostic agent in circulation, such that the scavenger specifically binds to one or more portions of the molecule or complex that is a circulatory comprising the therapeutic or diagnostic agent so that A method of removing a circulating therapeutic or diagnostic agent is provided that enhances elimination.

관련된 면에서, 본 발명은 본 발명의 방법에 유용한 구조체를 제공한다. 따라서, 본 발명은 치료 또는 진단 부분의 수송에 적합한 삼중특이적 표적가능한 구조체를 제공한다. 구조체는 개별 일차 표적 제제와 결합하기에 적합한 제1 결합 부분; 제거제와 결합하기 적합한 제2 결합 부분; 및 내재화제와 결합하기 적합한 제3 결합부분을 포함한다. In a related aspect, the present invention provides constructs useful in the methods of the present invention. Accordingly, the present invention provides trispecific targetable constructs suitable for the transport of therapeutic or diagnostic moieties. The construct comprises a first binding moiety suitable for binding to an individual primary target agent; A second binding moiety suitable for binding with the remover; And a third bonding moiety suitable for bonding with the internalizing agent.

또한, 본 발명은 포유류 내 순환 중인 표적가능한 구조체를 제거하기에 적합한 제거제를 제공한다. 제거제는 표적가능한 구조체와 결합하기 적합한 결합 부분 및 내재화 부분을 포함한다. The present invention also provides a scavenger suitable for removing the targetable construct in circulation in a mammal. The scavenger includes a binding moiety and an internalization moiety suitable for binding with the targetable construct.

다른 관련된 면에서, 본 발명은 하나 이상의 일차 표적 제제 결합 부분 및 내재화제 결합 부분을 포함하고, 내재화제와 결합된 표적가능한 구조체를 포함하는 분자 복합체을 제공한다. In another related aspect, the present invention provides a molecular complex comprising at least one primary target agent binding moiety and an internalizing agent binding moiety and comprising a targetable structure associated with the internalizing agent.

또 다른 관련된 면에서, 하나 이상의, 바람직하게는 2개의 일차 표적 제제 결합 부분, 제거제 결합 부분 및 치료 또는 진단 부분을 포함하고, 제거제와 결합된 표적가능한 구조체를 포함하는 분자 복합체을 제공한다. In another related aspect, there is provided a molecular complex comprising a targetable construct comprising one or more, preferably two primary target agent binding moieties, a scavenger binding moiety and a therapeutic or diagnostic moiety, and associated with the scavenger.

또 다른 구현예에서, 표적 결합 부분 및 다수의 표적가능한 구조체 결합 부분을 포함하고 다수의 일차 표적 제제 결합 부분을 포함하는 다가 표적가능한 구서에에 결합된 다가 일차 표적 제제; 제거제 결합 부분 및 치료 또는 진단 부분을 포함하는 분자 복합체을 제공한다.  In another embodiment, a multivalent primary target agent comprising a target binding moiety and a plurality of targetable construct binding moieties and linked to a multivalent targetable phrase comprising a plurality of primary target agent binding moieties; A molecular complex is provided that includes an agent binding moiety and a therapeutic or diagnostic moiety.

또 다른 분자 복합체은 표적 결합 부분 및 하나 이상의 표적가능한 구조체 결합 부분을 포함하는 일차 표적 제제를 포함하며; 하나 이상의 일차 표적 제제 결합 부분, 제거제 결합 부분 및 치료 또는 진단 결합 부분을 포함하는 표적가능한 구조체와 결합하고; 표적가능한 구조체 결합 부분 또는 제거제 결합 및 내재화 부분응ㄹ 포함하는 내재화제에 결합한다. Another molecular complex comprises a primary target agent comprising a target binding moiety and one or more targetable construct binding moieties; Bind to a targetable construct comprising one or more primary target agent binding moieties, a scavenger binding moiety and a therapeutic or diagnostic binding moiety; Bind to an internalizing agent comprising a targetable construct binding moiety or an eliminator binding and internalization moiety.

또 다른 복합체은 표적 결합 부분 및 치료 또는 진단 부분을 포함하고, 일차 표적 제제 결합 부분 및 내재화 부분을 포함하는 내재화제에 결합된 일차 표적 제제를 포함한다. Another complex includes a target binding moiety and a therapeutic or diagnostic moiety and includes a primary target agent bound to an internalizing agent comprising a primary target agent binding moiety and an internalization moiety.

소정의 구현예에서는, 본 발명의 구성 성분을 포함하는 키트가 표적 세포에 치료 또는 진단용 제제를 표적시키는 개시된 방법에 사용되기 위해 제공된다. In certain embodiments, kits comprising the components of the invention are provided for use in the disclosed methods of targeting a therapeutic or diagnostic agent to a target cell.

다른 구현예에서는, 피험자(통상 환자), 바람직하게는 인간 피험자의 질병 또는 상태를 치료 및/또는 진단하는 방법이 제공된다. 방법은 여기 개시된 표적 수송 방법에 하나 이상의 치료 또는 진단 부분을 피험자에게 투여하는 것을 포함한다. In another embodiment, a method is provided for treating and / or diagnosing a disease or condition of a subject (usually a patient), preferably a human subject. The method comprises administering to the subject one or more therapeutic or diagnostic portions in the targeted transport method disclosed herein.

또 다른 면에서, 본 발명은 고상 매체, 예를 들어 레진 상에서의 합성에 의해 DTPA 컨쥬게이트 펩티드를 제조하는 유리한 방법을 제공한다. 합성은 여기의 실시예에서 IMP 272 제조 기술에 의해 예시된다. In another aspect, the present invention provides an advantageous method for preparing DTPA conjugate peptides by synthesis on a solid phase medium, such as a resin. Synthesis is illustrated by the IMP 272 manufacturing technique in the Examples herein.

다른 면 및 구현예들은 이하의 도면의 설명 및 상세한 설명으로부터 명백하게 될 것이다. Other aspects and embodiments will be apparent from the description and the description below.

바람직한 desirable 구현예의Implementation 상세한 설명 details

다른 특정이 없으면 "하나"는 "하나 이상"을 의미한다. Unless otherwise specified, "one" means "one or more".

I. 정의I. Definition

이하의 기술에서는, 본 발명의 이해를 돕기 위해 수많은 용어들이 사용되고 이하의 정의들이 제공된다. 다른 정의가 없는 한, 사용되는 모든 기술적 과학적 용어는 당업자가 통상적으로 이해하는 바와 동일한 의미를 갖는다. 또한, 여기 인용된 모든 문헌들은 온전히 참고문헌으로서 포함된다. In the following description, numerous terms are used to aid the understanding of the present invention and the following definitions are provided. Unless defined otherwise, all technical and scientific terms used have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art. In addition, all documents cited herein are incorporated by reference in their entirety.

여기에서 사용한 용어 "일차 표적 제제"란 선택된 표적에 결합하는 하나 이상의 결합 부분 및 표적가능한 구조체에 결합하는 하나 이상(바람직하게는 2)의 결합 부분을 포함하는 적어도 이중특이성 구조체를 의미한다. 여기에서 사용되는 용어 "이중특이성 항체"란 두개의 상이한 부분, 예를 들어 표적 조직 및 표적가능한 구조체, 에 결합할 수 있는 항체이다. 이중특이성 항체는 구조가 상이한 두개의 표적에 동시에 결합할 수 있다. 이중특이성 항체(bsAb) 및 이중특이성 항체 단편(bsFab)은 에를 들어 종양, 조직, B-세포, T-세포, 골수-, 플라스마-, 및 비만-세포 항원 또는 에피토프에 특이적으로 결합하는 하나 이상의 팔과, 표적가능한 구조체에 특이적으로 결합하는 하나 이상의 다른 팔을 갖는다. 분자 공학을 이용하여 다양한 이중특이성 항체 융합 단백질을 제조할 수 있다. 이중특이성 항체 융합 단백질은 동일 또는 상이한 특이성을 갖는 두개 이상의 동일 또는 상이한 단쇄 항체 또는 항체 단편들이 연결된 재조합 항원-결합 분자이다. 일 형태에서, 이중특이성 융합 단백질은 1가이고, 예를 들어 한 항원에 대한 단일 결합 부위를 갖는 scFv와 제2 항원에 대한 단일 결합부위를 갖는 Fab 단편으로 구성된다. 다른 형태에서, 이중특이성 융합 단백질은 2가로서, 예를 들어 한 하원에 대한 결합 부위를 갖는 IgG 및 제2 항원에 대한 단일 결합 부위를 갖는 두개의 scFv로 구성된다. 다른 형태에서, 이량체 항체 단편인 디아바디(diabody)가 본 발명에서 유용하다. 디아바디는 중쇄 가변 영역(VH)으로 구성되고, 펩티드 링커에 의해 경쇄 가변 영역(VL)에 연결된다. 단쇄(sc) Fv 단편과 달리, 각 항원 결합 부위는 두개의 상이한 폴리펩티드로부터의 하나의 VH 와 하나의 VL 영역의 짝짓기에 의해 형성된다. 디아바디는 두개의 항원 결합부위를 갖고, 이중특이성이 될 수 있으며, 본 발명에서 일차 표적 제제로 유용하다. As used herein, the term "primary target agent" means at least a bispecific construct comprising at least one binding moiety that binds to the selected target and at least one (preferably 2) binding moiety that binds to the targetable construct. As used herein, the term “bispecific antibody” is an antibody capable of binding to two different parts, eg, target tissue and targetable construct. Bispecific antibodies can simultaneously bind to two targets of different structures. Bispecific antibodies (bsAb) and bispecific antibody fragments (bsFab) are for example one or more that specifically binds to tumors, tissues, B-cells, T-cells, bone marrow-, plasma-, and mast-cell antigens or epitopes. And one or more other arms that specifically bind to the targetable structure. Molecular engineering can be used to prepare a variety of bispecific antibody fusion proteins. Bispecific antibody fusion proteins are recombinant antigen-binding molecules to which two or more identical or different single chain antibodies or antibody fragments having the same or different specificities are linked. In one form, the bispecific fusion protein is monovalent and consists of, for example, an scFv having a single binding site for one antigen and a Fab fragment having a single binding site for a second antigen. In another form, the bispecific fusion protein is bivalent and consists of, for example, IgG with a binding site for one house and two scFvs with a single binding site for a second antigen. In another form, diabodies, which are dimeric antibody fragments, are useful in the present invention. Diabodies consist of a heavy chain variable region (VH) and are linked to the light chain variable region (VL) by a peptide linker. Unlike single chain (sc) Fv fragments, each antigen binding site is formed by pairing one VH and one VL region from two different polypeptides. Diabodies have two antigen binding sites, can be bispecific, and are useful as primary targeting agents in the present invention.

일차 표적 제제는 또한 다중특이성 항체, 즉 구조가 상이한 2개 이상의 표적(예를 들어 두개의 상이한 항원, 동일 항원 상에 두개의 상이한 에피토프, 또는 부착소 및/또는 항원 또는 에피토프)에 동시에 결합할 수 있는 항체가 될 수 있다. 예를 들어, 일 특이성은 B-세포, T-세포, 골수-, 플라스마- 및 비만-세포 항원 또는 에피토프에 대한 것일 수 있다. 다른 특이성은 동일 세포 형태에 상이한 항원, 예를 들어 B-세포 상의 CD20, CD19, CD21, CD23, CD46, CD80, HLADR, CD74 및 CD22에 대한 것일 수 있다. 다가 항체는 구조가 동일 또는 상이한 2개 이상의 표적에 동시에 결합할 수 있는 항체이다. 다중특이성, 다가 항체는 특이성이 상이한 결합 부위를 1개 이상 가지고 있는 구조체이다. 예를 들어, 디아바디는 한 항원의 일 결합부위 및 다른 항원의 다른 결합부위와 반응할 수 있다. The primary targeting agent may also simultaneously bind to a multispecific antibody, ie two or more targets of different structures (eg, two different antigens, two different epitopes on the same antigen, or an attachment and / or an antigen or epitope). Can be an antibody. For example, one specificity can be for B-cell, T-cell, bone marrow-, plasma- and mast-cell antigens or epitopes. Other specificities may be for different antigens in the same cell type, for example CD20, CD19, CD21, CD23, CD46, CD80, HLADR, CD74 and CD22 on B-cells. Multivalent antibodies are antibodies that can bind to two or more targets of the same or different structures simultaneously. Multispecific, multivalent antibodies are constructs that have one or more binding sites that differ in specificity. For example, a diabody may react with one binding site of one antigen and another binding site of another antigen.

또한, 일차 표적 제제는 동일 또는 상이한 특이성을 갖는 동일 또는 상이한 단쇄 항체 또는 항체 단편 2개 이상이 연결된 재조합 항원 결합 분자인 항체 또는 항체 융합 단백질이 될 수 있다. 융합 단백질의 결합가는 융합 단백질이 단일 항원 또는 에피토프에 얼마나 많은 결합 팔 또는 부위를 갖는지를 의미한다; 즉 1가, 2가, 3가 또는 다가. 항체 융합 단백질이 다가성은 항원에 결합시 다중 연결을 할 수 있어 항원 결합의 친화성을 높일 수 있음을 의미한다. 특이성은 항체 융합 단백질이 얼마나 많은 항원 또는 에피토프에 결합할 수 있는지를 나타낸다: 즉 단일특이성, 이중특이성, 삼중특이성, 다중특이성. 이러한 정의를 사용하여, IgG와 같은 천연 항체는 두개의 결합 팔은 가지므로 2가이나 하나의 에피토프에 결합하므로 단일특이성이다. 단일특이성, 다가 융합 단백질은 에피토프에 대해 하나 이상의 결합부위를 가지나 하나의 에피토프에만 결합하며, 예를 들어 디아바디는 동일 항원에 대해 두개의 결합 반응 부위를 갖는다. 융합 단백질은 단일 항체 부분, 상이한 항체 구성 부분의 다가 또는 다중특이성 결합, 또는 동일 항체 구성부분의 다중 카피를 포함할 수 있다. 융합 단백질은 부가적으로 항체 또는 항ㅊ 단편 및 치료용 제제를 포함할 수 있다. 이러한 융합 단백질에 적합한 치료용 제제의 예로는 면역조절제("항체-면역조절제 융합 단백질") 및 독소("항체-독소 융합 단백질")를 들 수 있다. The primary target agent can also be an antibody or antibody fusion protein that is a recombinant antigen binding molecule to which two or more identical or different single chain antibodies or antibody fragments having the same or different specificities are linked. The binding value of a fusion protein means how many binding arms or sites the fusion protein has on a single antigen or epitope; That is, monovalent, bivalent, trivalent, or multivalent. The antibody fusion protein is multivalent when binding to the antigen means that the affinity of the antigen binding can be increased. Specificity indicates how many antigens or epitopes an antibody fusion protein can bind to: monospecific, bispecific, trispecific, multispecific. Using this definition, natural antibodies, such as IgG, are monospecific because they bind two or one epitope because they have two binding arms. Monospecific, multivalent fusion proteins have one or more binding sites for epitopes but only one epitope, for example diabodies having two binding reaction sites for the same antigen. Fusion proteins may comprise a single antibody moiety, multivalent or multispecific binding of different antibody moieties, or multiple copies of the same antibody moiety. Fusion proteins may additionally include antibodies or anti-fragment fragments and therapeutic agents. Examples of therapeutic agents suitable for such fusion proteins include immunomodulators (“antibody-immunogen fusion proteins”) and toxins (“antibody-toxin fusion proteins”).

일차 표적 제제는 표적 결합 부분을 통해 다양한 항원 또는 표적에 특이적으로 결합할 수 있다. 그러나, 특히 적합한 항원에는 CEA(carcinoembryonic antigen), 테나신(tenascin), EGF(epidermal growth factor), 혈소판 유래 성장 인자 수용체, 섬유아세포 성장인자 수용체, 혈관내피 성장인자 수용체, 갱글리오사이드, HER/2neu 수용체 및 이들의 혼합물을 들 수 있다. 보다 구체적으로, 항원은 콜론-특이적 항체-p(CSAp), CEA, CD66e, CD4, CD5, CD8, CD14, CD15, CD19, CD20, CD21, CD22, CD23, CD25, CD30, CD33, CD37, CD38, CD40, VD40L, CD45, CD46, CD52, CD66a-d, CD74, CD75, CD80, CD126, B7, HLA-DR, Ia, Ii, HM1.24, MUC 1, MUC 2, MUC 3, MUC 4, NCA, EGFR, HER 2/neu, PAM-4, TAG-72, C에1, C에2, AFP, HCG, HCG-beta,PLAP, PAP, 히스톤, A3, KS-1, Le(y), S100, PSMA, PSA, 테나신, 폴레이트 수용체, VEGF, PIGF, ILGF-1 (인슐린 유사 성장 인자-1), 종양 괴사 항원, IL-2, IL-6, I101, MAGE, 오르가노트로픽 호르몬, 종양유전자 산물, 사이토케라틴 및 이들의 조합을 들 수 있다. Primary target agents may specifically bind various antigens or targets via target binding moieties. However, particularly suitable antigens include carcinoembryonic antigen (CEA), tenascin, epidermal growth factor (EGF), platelet derived growth factor receptor, fibroblast growth factor receptor, vascular endothelial growth factor receptor, gangliosides, HER / 2neu Receptor and mixtures thereof. More specifically, antigens are colon-specific antibody-p (CSAp), CEA, CD66e, CD4, CD5, CD8, CD14, CD15, CD19, CD20, CD21, CD22, CD23, CD25, CD30, CD33, CD37, CD38 , CD40, VD40L, CD45, CD46, CD52, CD66a-d, CD74, CD75, CD80, CD126, B7, HLA-DR, Ia, Ii, HM1.24, MUC 1, MUC 2, MUC 3, MUC 4, NCA , EGFR, HER 2 / neu, PAM-4, TAG-72, C1, C2, AFP, HCG, HCG-beta, PLAP, PAP, Histone, A3, KS-1, Le (y), S100 , PSMA, PSA, Tenacin, Folate Receptor, VEGF, PIGF, ILGF-1 (Insulin-like Growth Factor-1), Tumor Necrosis Antigen, IL-2, IL-6, I101, MAGE, Organotropic Hormone, Tumor Gene products, cytokeratins and combinations thereof.

"표적가능한 구조체"는 일차 표적 제제의 결합 부분 및 제거제의 결합 부분에 의해 개별적으로 인식되는 두개 이상의 직교하는 결합 부분을 포함하거나 함유하는 분자성 골격을 포함한다. 여기 사용된, "분자성 골격" (혹은 단순히 "골격")은 골격 및/또는 다른 부분에 비해 다양한 위치 및/또는 다양한 방향에서 에피토프 및 다른 결합 부분이 결합되는 임의의 화학구조이다. 분자성 골격의 비제한적인 예로서는 올리고펩티드 및 올리고뉴클레오티드와 같은 폴리머가 있다. Skerra, Engineered protein scaffolds for molecular recogniton. J Mol Recogniti 13(4):167-187, 2000; Erratum in: J Mol Recognit 13(2):141,2001. 참조.A "targetable construct" includes a molecular backbone comprising or containing two or more orthogonal binding moieties that are individually recognized by the binding moiety of the primary target agent and the binding moiety of the eliminator. As used herein, “molecular framework” (or simply “skeleton”) is any chemical structure to which epitopes and other binding moieties are bound in various positions and / or in various directions relative to the skeleton and / or other moieties. Non-limiting examples of molecular backbones include polymers such as oligopeptides and oligonucleotides. Skerra, Engineered protein scaffolds for molecular recogniton. J Mol Recogniti 13 (4): 167-187, 2000; Erratum in: J Mol Recognit 13 (2): 141,2001. Reference.

여기 사용된 "제거제"는 순환 중인 비결합 표적가능한 구조체의 제거를 향상시키고/시키거나 일차 표적 제제에 표적가능한 구조체를 록킹시키는 구조체이다. 바람직하게는, 제거제는 제거제와 동일한 치료 프로토콜에 사용되는 표적가능한 구조체에 의해 인식되는 표적 세포의 빈도에 제거제 접근을 제한하는 크기, 전하, 배열 또는 이들의 조합과 같은 물리적 특성을 갖는다. 이러한 향상은 표적 부위에 결합하는, 일차 표적 제제의 결정인자에 특이적인 항-개체특이적 모노클로날 항체와 같은 항-개체특이적 제거제의 투여에 의해 더 향상될 수 있다. 제거 효과는 갈락토실화된 제거제를 사용하면 더 향상되는데, 이는 갈락토실화 제거제가 간을 통해서 신속히 제거되기 때문이다. 유사하게, 제거제는 제거를 향상시키는 돌연변이를 갖는 항체와 같은, 신속히 제거되는 항체를 포함할 수 있다. 제거제는 IgG일 수 있고, 보다 바람직하게는 IgG1은 환자로부터 신속히 제거된다. 본 발명에서, 제거제는 또한 가교 개별 표적-결합된 표적가능한 구조체로 배열된다. As used herein, a "removing agent" is a construct that enhances the removal of non-binding targetable constructs in circulation and / or locks the targetable constructs to the primary target agent. Preferably, the scavenger has physical properties such as size, charge, arrangement, or a combination thereof that limits the scavenger access to the frequency of target cells recognized by the targetable construct used in the same treatment protocol as the scavenger. This improvement can be further enhanced by the administration of an anti-object specific scavenger, such as an anti-object specific monoclonal antibody specific for the determinant of the primary target agent, that binds to the target site. The elimination effect is further enhanced by the use of galactosylated removers because galactosylated removers are quickly removed through the liver. Similarly, scavengers may include antibodies that are rapidly removed, such as antibodies with mutations that enhance clearance. The scavenger can be IgG, more preferably IgGl is quickly removed from the patient. In the present invention, the scavenger is also arranged in crosslinked individual target-bound targetable structures.

여기 사용된 용어, "병원체"란 곰팡이, 바이러스(예, 인체 면역결핍 바이러스(HIV)), 헤르페스 바이러스(herpes virus), 사이토메갈로 바이러스(cytomegalovirus), 광견병 바이러스(rabies virus), 인플루엔자 바이러스(influenza virus), 헤파티티스 B 바이러스(hepatitis B virus), 센다이바이러스(Sendai virus), 고양이 백혈병 바이러스(feline leukemia virus), 레오 바이러스(Reo virus), 폴리오 바이러스(polio virus), 인간 세럼파르보 바이러스(human serumparvo-like virus), 시미언 바이러스(simian virus) 40, 호흡기 세포융합 바이러스(respiratory syncytial virus), 쥐유방종양바이러스(mouse mammary tumor virus), 수두-대상포진 바이러스(Varicella-Zoster virus), 뎅기 바이러스(Dengue virus), 풍진 바이러스(rubella virus), 홍역바이러스(measles virus), 아데노바이러스(adenovirus), 인체 T세포 백혈병 바이러스(human T-cell leukemia viruses), 엡슈타인-바르 바이러스(Epstein-Barr virus), 뮤린 류케미아 바이러스(murine leukemia virus), 멈프스 바이러스(mumps virus), 수포성 구내염 바이러스(vesicular stomatitis virus), 신드비스 바이러스(Sindbis virus), 림프구 맥락수막염 바이러스(lymphocytic choriomeningitis virus), 사마귀 바이러스(wart virus) 및 블루텅 바이러스(blue tongue virus)), 기생충 및 세균(예를 들면, 화농성연쇄상구균(Streptococcus agalactiae), 폐염(Legionella pneumophilia), 스트렙토코코스포겐(Streptococcuspyogenes), 대장균(Escherichia coli), 임균(Neisseria gonorrhoeae), 수막염균(Neisseria meningitidis), 폐렴구균(Pneumococcus), 헤모필리신플루엔제(Hemophilisinfluenzae) B, 트레포네마 팔리듐(Treponema pallidum), 라임병 스피로헤테스(Lyme disease spirochetes), 녹농균(Pseudomonas aeruginosa), 나균(Mycobacterium leprae), 브루셀라 어보르트(Brucella aborts), 미코박테리룸 터버쿨로시스(Mycobaeterium tuberculosis) 및 파상풍 독소(Tetanus toxin)), 미국특허 제 5,332,567호 참조. 다른 병원체는 상세한 설명에 기술된다. As used herein, the term “pathogen” refers to fungi, viruses (eg, human immunodeficiency virus (HIV)), herpes virus, cytomegalovirus, rabies virus, influenza virus ), Hepatitis B virus, Sendai virus, feline leukemia virus, Reo virus, polio virus, human serum parvovirus serumparvo-like virus, simian virus 40, respiratory syncytial virus, mouse mammary tumor virus, varicella-Zoster virus, dengue virus Dengue virus, rubella virus, measles virus, adenovirus, human T-cell leukemia viruses, Ep Step-Barr virus, murine leukemia virus, mumps virus, vesicular stomatitis virus, Sindbis virus, lymphocytic meningitis Virus (lymphocytic choriomeningitis virus, wart virus and blue tongue virus), parasites and bacteria (e.g. Streptococcus agalactiae), pneumonia (Legionella pneumophilia), streptococosogen (Streptococcuspyogenes), Escherichia coli, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis, Pneumococcus, Hemophilisinfluenzae B, Treponema, Palidium palidium Lyme disease spirochetes, Pseudomonas aeruginosa, Mycobacterium leprae, Brucella aborts, Mycobacterium tuber Tuberculosis (Mycobaeterium tuberculosis) and tetanus toxin, see (Tetanus toxin)), U.S. Patent No. 5,332,567 calls. Other pathogens are described in the detailed description.

여기서 사용한 용어 "항체"는 온길이(즉, 정상 면역글로불린 유전자 단편 재조합 과정에 의해 자연적으로 일어나거나 형성되는) 면역글로불린 분자 또는 항체단편과 같이 면역글로불린 분자의 면역 활성(특정 결합) 부분을 의미한다. As used herein, the term "antibody" refers to the immunologically active (specific binding) portion of an immunoglobulin molecule, such as an immunoglobulin molecule or an antibody fragment that is warm (ie, naturally occurring or formed by a normal immunoglobulin gene fragment recombination process). .

"항체 단편"이란 F(ab')₂, F(ab)₂, Fab', Fab, Fv, sFv 등과 같은 항체 부분이다. 구조와 관계없이 항체 단편은 완전한 항체에 의해 인식되는 동일한 항체에와 결합한다. 예를 들어, 항-CEA 모노클로날 항체 단편은 CEA의 에피토프와 결합한다. An "antibody fragment" is an antibody portion, such as F (ab ') ₂ , F (ab) ₂ , Fab', Fab, Fv, sFv and the like. Regardless of the structure, the antibody fragment binds to the same antibody recognized by the complete antibody. For example, anti-CEA monoclonal antibody fragments bind to epitopes of CEA.

용어 "항체 단편"은 또한 특정 항원에 결합하여 복합체을 형성함으로써 항체와 유사하게 작용하는 임의의 합성 또는 유전자 공학 단백질을 포함한다. 예를 들어, 항체 단편은 경쇄 가변영역으로 구성된 독립된 단편, 중쇄 및 경쇄 가변 영역으로 구성된 "Fv" 단편, 경쇄 및 중쇄 가변 영역이 펩티드 링커에 의해 연결된 재조합 단쇄 폴리펩티드 분자 ("sFv 단백질") 및 초변이영역을 모방하는 아미노산 잔기로 구성된 최소 인식단위를 포함한다. The term “antibody fragment” also includes any synthetic or genetic engineering protein that acts like an antibody by binding to a specific antigen to form a complex. For example, antibody fragments include independent fragments composed of light chain variable regions, “Fv” fragments composed of heavy and light chain variable regions, recombinant single chain polypeptide molecules (“sFv proteins”) and ultra light and heavy chain variable regions joined by peptide linkers It contains a minimal recognition unit consisting of amino acid residues that mimic the variant region.

용어 "scFv"는 항체의 경쇄 및 중쇄 변이영역이 펩티드 링커로 연결된 재조합 단쇄 폴리펩티드 분자를 의미하는데 사용된다. 단쇄 항체(scFv)는 비록 필요한 경우 공지의 scFv 분자에 이들 영역을 첨가하는 방법이 공지되어 있기는 하나, ㅊ일반적으로 효과기 기능에 관여하는 항체의 Fc 영역 부분을 포함하지 않으므로 항체 자체이다. 헬프리 등(Helfrich et al.,)의 "A rapid and versatile method for harnessing scFv antibody fragments with various biological functions. J Immunol Methods" 237:131-145 (2000) 및 드 하드 등(de Haard et al.,)의 "Creating and engineering human antibodies for immunotherapy" Advanced Drug Delivery Reviews 31:5-31 (1998) 참조. The term “scFv” is used to mean a recombinant single chain polypeptide molecule in which the light and heavy chain variant regions of the antibody are linked by a peptide linker. Single-chain antibodies (scFv) are antibodies themselves, although they are known to add these regions to known scFv molecules when needed, but do not generally include the Fc region portion of the antibody involved in effector function. "A rapid and versatile method for harnessing scFv antibody fragments with various biological functions. J Immunol Methods" by Helprich et al., 237: 131-145 (2000) and de Haard et al., See “Creating and engineering human antibodies for immunotherapy” Advanced Drug Delivery Reviews 31: 5-31 (1998).

용어 "IgG"는 항원에 대항하여 생성되고 항원에 특이적으로 결합할 수 있는 항체 단백질을 의미하는데 사용된다. The term "IgG" is used to mean an antibody protein produced against an antigen and capable of specific binding to the antigen.

신속 제거 뮤턴트 항체와 관련하여 여기 사용된 용어 "부모 항체(parent antibody)"는 부모 항체의 IgG 성분의 Fc-경첩 단편이 C_H2-C_H3 도메인 간섭 영역 내에 하나 이상의 아미노산 변형을 포함하지 않는 것을 제외하고는 뮤턴트 항체와 모든 면에서 유사한 항체를 의미한다. 여기서 사용된 용어 "Fc-경첩"은 IgG의 C1, CH1, 경첩, CH2 및 CH3 영역을 포함한다. The term "parent antibody" as used herein in connection with a rapid removal mutant antibody means that the Fc-hinge fragment of the IgG component of the parent antibody does not contain one or more amino acid modifications within the C _H 2 -C _H 3 domain interference region. Except for mutant antibody, it means an antibody similar in all respects. The term “Fc-hinge” as used herein includes the C1, CH1, hinge, CH2 and CH3 regions of IgG.

"키메라 항체"는 설치류 항체로부터 유래한 가변 도메인 및 상보성 결정 영역을 포함하고 항체 분자의 나머지는 인간 항체로부터 유래한 재조합 단백질이다. A "chimeric antibody" comprises a variable domain and complementarity determining regions derived from rodent antibodies and the remainder of the antibody molecule is a recombinant protein derived from a human antibody.

용어 "인간화된 항체"는 항체를 투여할 동물, 주로 인간 내의 항체 또는 항체 단편의 항원성을 감소시키기 위해, 아미노산, 글리코실화 패턴 등의 면에서 보다 인간-유사가 되도록 유전자 조작 및/또는 시험관내 처리를 하여 개질된 항체를 의미한다. Gussow & Seemann, Humanization of monoclonal antibodies. Methods Enz. 203:99-121 (1991) 및 Vaswani & Hamilton, Humanized antibodies as potential therapeutic drugs. Ann Allergy Asthma Innunol 81:105-119 (1998) 참조. 많은 경우, 인간화된 항체는 모노클로날 항체의 뮤린 상보성 결정 영역의 뮤린의면역글로불린 가변 중쇄 및 경쇄로부터 인간 가변 도메인으로 변이된 재조합 단백질이다. mendez et al., Nature Genetics,15:146-156(1997); 미국특허 제5,633,425호 참조(이들 전체를 참고문헌으로 포함한다). 일차 표적 제제 및 제거제는 상기 기술한 뮤린, 키메라, 인간화, 인간 항체들 및 이들의 조합으로 로 구성될 수 있다. The term “humanized antibody” is genetically engineered and / or in vitro to be more human-like in terms of amino acids, glycosylation patterns, etc., in order to reduce the antigenicity of the antibody or antibody fragment in the animal, predominantly human, to which the antibody will be administered. Means an antibody that has been modified by treatment. Gussow & Seemann, Humanization of monoclonal antibodies. Methods Enz. 203: 99-121 (1991) and Vaswani & Hamilton, Humanized antibodies as potential therapeutic drugs. See Ann Allergy Asthma Innunol 81: 105-119 (1998). In many cases, the humanized antibody is a recombinant protein that has been mutated from the immunoglobulin variable heavy and light chains of murine of the murine complementarity determining regions of monoclonal antibodies to human variable domains. mendez et al., Nature Genetics, 15: 146-156 (1997); See US Pat. No. 5,633,425, which is incorporated by reference in its entirety. Primary target agents and scavengers may consist of the murine, chimeric, humanized, human antibodies and combinations thereof described above.

결합 부분과 관련하여 여기서 사용한 용어 "직교하는"은 서로 직교하는 것으로 지적된 두개 이상의 결합 부분이 동일한 상보성 결합 쌍 부재에 유의미한 양으로 결합하지 않는 것을 의미한다. 즉 이들은 상이한 분자상에 상이한 에피토프를 인식한다. The term "orthogonal" as used herein with respect to the binding moiety means that two or more binding moieties that are indicated to be orthogonal to each other do not bind in significant amounts to the same complementary binding pair member. That is, they recognize different epitopes on different molecules.

"부착소"은 면역 담체 분자에 일차 결합되지 않으면 면역반응을 일으킬 수 없는 작은 분자이다. 비록 부착소이 그 자체로는 면역반응을 일으키지 않으나 부착소-담체 컨쥬게이트에 대한 면역 반응 동안 생성된 항체에 특이적으로 결합한다. An "adhesin" is a small molecule that cannot elicit an immune response unless it is primarily bound to an immune carrier molecule. Although the attachment itself does not elicit an immune response, it specifically binds to the antibody produced during the immune response to the attachment-carrier conjugate.

여기 사용된 "치료용 제제"는 예를 들어 RNAase 또는 독소를 이용해 항체 부분과 같은 일차 표적 부분에 컨쥬게이트 되거나, 표적가능한 구조체에 컨쥬게이트 되거나, 일차 표적 제제에 융합되어 치료에 유용한 컨쥬게이트를 형성하는 분자이다. 치료용 제제의 비제한적 예로서는, 약물, 프로드럭, 독소, 효소, 프로드럭을 약물로 활성화하는 효소, 효소-저해제, 뉴클리아제, 호르몬, 호르몬 길항제, 사이토카인과 같은 면역 조절제(인터루킨 2와 같은 인터루킨, 림포카인, 인터페론 및 종양괴사 인자), 올리고뉴클레오티드(안티센스 올리고뉴클레오티드 또는 간섭 RNAs, 즉 작은 간섭 RNA (siRNA)), 킬레이터, 붕소 화합물, 광활성제 또는 염료, 방사성동위원소 또는 방사성핵종을 들 수 있다. LL1 scv734 IgG는 본 출원의 도 9에 도시된 바와 같이 결합 분자이기도 한 록킹 항체의 예다. As used herein, a “therapeutic agent” may be conjugated to a primary target moiety, such as an antibody moiety, for example with an RNAase or toxin, conjugated to a targetable construct, or fused to a primary target agent to form a useful conjugate for treatment. It is a molecule. Non-limiting examples of therapeutic agents include drugs, prodrugs, toxins, enzymes, enzymes that activate the prodrug as drugs, enzyme-inhibitors, nucleases, hormones, hormonal antagonists, immunomodulators such as cytokines (such as interleukin 2). Interleukin, lymphokine, interferon and tumor necrosis factor), oligonucleotides (antisense oligonucleotides or interfering RNAs, ie small interfering RNAs (siRNA)), chelators, boron compounds, photoactive agents or dyes, radioisotopes or radionuclides Can be mentioned. LL1 scv734 IgG is an example of a locking antibody that is also a binding molecule as shown in FIG. 9 of the present application.

적합한 부가 투여되는 약물, 프로드럭 및/또는 독소로는 애플리딘(aplidin), 아자리빈(azaribine), 아나스트로졸(anastrozole), 아자시티딘(azacytidine), 블레오마이신(bleomycin), 보르테조미브(bortezomin), 브리오스타틴-1(bryostatin-1)c, 부술판(busulfan), 캄토테신, 10-히드록시캄토테신, 카무스틴(carmustine), 세레브렉스(celebrex), 클로람부실(chlorambucil), 시스플라틴, 이리노테칸(CPT-11), SN-39, 카르보플라틴(carboplatin), 클라드리빈(cladribine), 시클로포스파미드(cyclophosphamide) 시타라빈(cytarabine), 다카르바진(dacarbazine), 도세탁셀(docetaxel), 닥티노마이신(dactinomycin), 다우노마이신 글루크로나이드(daunomycinn lucuronide), 다우노루비신(daunorubicin), 덱사메타손, 디에틸스틸베스트롤(diethylstilbestrol), 독소루비신 및 그 유사체, 독소루비신 글루쿠로나이드(doxorubicin glucuronide), 에피루비신 글루쿠로나이드(epirubicine glucuronidee) 에티닐 에스트라디올(ethinyl dstradiol), 에스트라무스틴(estramustine), 에토포사이드(etoposide), 에토포사이드 글루쿠로나이드(etoposide glucuronide), 에토포사이드 포스페이트(etoposide phosphate)c, 플록수리딘(FUdR), 3',5'-O-디올레일-FudR(FUdR-dO), 플루다라빈(fludarabine), 플루타미드(glutamide), 플루로우라실(flurouracil), 플루옥시메스테론(fluoxymesterone), 겜시타빈(gemicitabine), 히드록시프로게스테론 카프로에이트(hydroxyprogesterone caproate), 히드록시우레아(hydroxyurea), 이다루비신(idarubicinee), 이포스파미드(ifosfamide), L-아스파라기나아제(L-asparaginase), 류코보린(leucovorin), 로무스틴(lomustine), 메클로에타민(mechlorethamine), 메드로프로게스테론 아세테이트(medroprogesteone acetate), 메게스트롤 아세테이트(megestreol acetate), 멜팔란(melphalan), 메르캅토퓨린(mercaptopurine), 6-메르캅토퓨린(6-mercaptopurine), 메토트렉세이트(methotrexate), 미톡산트론(mitoxantrone), 미트라마이신(mithramycin), 미토마이신(mitomycin), 미토탄(mitotanee) 페틸 부티레이트(phenyl butyrate), 프레드니손(prednisone), 프로카바진(procarbazine), 파클리탁셀(paclitaxel), 펜토스타틴(pentostatin), 세무스틴 스트렙토조신(semustine streptozocin), 타목시펜(tamoxifen), 탁산(taxanes), 탁솔(taxol), 테스토스테론 프로피오네이트(testosterone propionate), 탈리도마이드(thalidomide), 티오구아닌(thioguanine), 티오테파(thiotepa), 테니포시드(teniposidee), 토포테칸(topothecan), 우라실 머스타드(uracil mustard), 빈블라스틴(vinblastine), 비노렐빈(vinorelbine), 빈크리스틴(vincrisine), 리신(ricin), 아브린(abrin), 리보뉴클레아제(ribonuclease), 리보뉴클레아제(ribonucleasee), 종양, rapLR1, DNase I, 스타필로코커스 장독소-A, 미국자리공 항바이러스 단백질(Pokeweed antiviral protein), 젤로닌, 디프테리아 독소, 슈도모나스 외독소, 슈도모나스 내독소, 질소 머스타드, 에틸렌이민 유도체, 알킬 술포네이트, 니트로소우레아, 트리아젠, 엽산 유사체, 안트라사이클린, COX-2 억제제, 피리미딘 유사체, 퓨린 유사체, 항생물질, 에피포도필로톡신(epipodophyllotoxins), 백금 배위 복합체, 유사분열억제제(vinca alkaloid), 치환된 우레아, 메틸 히드라진 유도체, 부신피질억제제, 길항제, 엔도스타틴 또는 그 조합이 있다. Suitable additional administered drugs, prodrugs and / or toxins include aplidin, azaribine, anastrozole, azacytidine, bleomycin, bortezomib ( bortezomin, bryostatin-1 c, busulfan, camptothecin, 10-hydroxycamptothecin, carmustine, celebrex, chlorambucil, cisplatin, Irinotecan (CPT-11), SN-39, carboplatin, cladribine, cyclophosphamide cytarabine, dacarbazine, docetaxel, doc Tinomycin (dactinomycin), daunomycin n lucuronide, daunorubicin, dexamethasone, diethylstilbestrol, doxorubicin and its analogues, doxorubicin glucuronide, glucuronido Epirubicin glucurona Epirubicine glucuronidee ethinyl dstradiol, estramustine, etoposide, etoposide glucuronide, etoposide phosphate c, phloxuridine (FUdR), 3 ', 5'-O-dioleyl-FudR (FUdR-dO), fludarabine, flutamide, flurouracil, fluoxymesterone Gemcitabine, hydroxyprogesterone caproate, hydroxyurea, idarubicinee, ifosfamide, L-asparaginase, Leucovorin, lomustine, mechlorethamine, meroprogesterone acetate, megestreol acetate, melphalan, mercaptopurine, 6-mercap Purine (6-mercaptopurine), methotrexate, mitoxantrone, mithramycin, mitomycin, mitomycin, mitotanee phenyl butyrate, prednisone, procarba Procarbazine, paclitaxel, pentostatin, semustine streptozocin, tamoxifen, taxanes, taxol, testosterone propionate, thalidomide (thalidomide), thioguanine, thiotepa, teniposidee, topotecan, uracil mustard, vinblastine, vinorelbine, vinorelbine Vincrisine, lysine, abrin, ribonuclease, ribonuclease, ribonucleasee, tumor, rapLR1, DNase I, Staphylococcus enterotoxin-A, US Virus protein (Pok eweed antiviral protein), gelonin, diphtheria toxin, pseudomonas exotoxin, pseudomonas endotoxin, nitrogen mustard, ethyleneimine derivative, alkyl sulfonate, nitrosourea, triazene, folic acid analog, anthracycline, COX-2 inhibitor, pyrimidine analog , Purine analogues, antibiotics, epipipodophyllotoxins, platinum coordination complexes, vinca alkaloids, substituted ureas, methyl hydrazine derivatives, corticosteroids, antagonists, endostatins or combinations thereof.

적절한 방사성핵종으로는 ¹⁸F, ³²P, ³³P. ⁴⁵Ti, ⁴⁷Sc, ⁵²Fe,⁵⁹Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ⁷⁵Se, ⁷⁷As, ⁸⁶Y, ⁸⁹Sr, ⁸⁹Zr, ⁹⁰Y, ⁹⁴Tc, ^{94 m}Tc, ⁹⁹Mo, ^{99 m}Tc, ¹⁰⁵Pd, ¹⁰⁵Rh, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²³I, ¹²⁴I, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁴³Pr, ¹⁴⁹Pm, ¹⁵³Sm, ^154-158Gd, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁶⁹Er, ¹⁷⁵Lu, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ¹⁹⁴Ir, ¹⁹⁸Au, ¹⁹⁹Au, ²¹¹At, ²¹¹Pb, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁸Ac 또는 그 혼합물이 있을 수 있다. Suitable radionuclides include ¹⁸ F, ³² P, ³³ P. ⁴⁵ Ti, ⁴⁷ Sc, ⁵² Fe, ⁵⁹ Fe, ⁶² Cu, ⁶⁴ Cu, ⁶⁷ Cu, ⁶⁷ Ga, ⁶⁸ Ga, ⁷⁵ Se, ⁷⁷ As, ⁸⁶ Y, ⁸⁹ Sr, ⁸⁹ Zr, ⁹⁰ Y, ⁹⁴ Tc, ^{94 m} Tc, ⁹⁹ Mo, ^{99 m} Tc, ¹⁰⁵ Pd, ¹⁰⁵ Rh, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In, ¹²³ I, ¹²⁴ I, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁴³ Pr, ¹⁴⁹ Pm, ¹⁵³ Sm, ^154-158 Gd, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁶⁹ Er, ¹⁷⁵ Lu, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re, ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ¹⁹⁴ Ir, ¹⁹⁸ Au, ¹⁹⁹ Au, ²¹¹ At, ²¹¹ Pb, ²¹² Bi, ²¹² Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁸ Ac or mixtures thereof.

일차 치료용 제제와 함께 투여될 수 있는 적절한 효소로는 카르복실에스테라제, 글루쿠로니다제, 카르복시펩티다제, 베타-락타마제, 포스파타제, 뉴클레아제, 프로테아제, 리파아제 및 그 혼합물이 있을 수 있다. Suitable enzymes that may be administered with the primary therapeutic agent include carboxyesterase, glucuronidase, carboxypeptidase, beta-lactamase, phosphatase, nuclease, protease, lipase and mixtures thereof. Can be.

적절한 광활성제 및 염료로는 벤조피린 모노액시드 링 A (BPD-MA), 틴 에티로푸푸린(tin etiopurpuin (SnET2)), 황화 알루미늄 프탈로시아닌(AISPc) 및루테늄 텍사피린(Lutex)와 같은 광감작제와 같은 광동역학 치료용 제제가 있다. Suitable photoactive agents and dyes include light sensitizers such as benzopyrin monoacid ring A (BPD-MA), tin etiopurpuin (SnET2), aluminum phthalocyanine sulfide (AISPc) and ruthenium texaphyrin (Lutex). There is an agent for treating photodynamics such as agent.

여기 사용된 "진단용 제제"는 항체 부분과 같은 일차 표적 부분에 컨쥬게이트 되거나 표적가능한 구조체에 컨쥬게이트 되어 진단에 유용한 컨쥬게이트를 생성하는 분자 또는 원자이다. 진단용 제제의 비제한적 예로서는, 광활성제 또는 염료, 방사성핵종, 방사성비투과성 물질, 조영제, 형광 화합물, MRI용 향상제(예, 상자성 이온) 및 이들의 조합이 있다. 적절한 향상제는 Mn, Fe, Gd이다. 미국특허 제6,331,175호는 MRI 기술 및 MRI 향상제에 컨쥬게이트 되는 항체의 제법을 기술하고 이으며, 이를 온전히 참고문헌으로 한다. 초음파 영상에는 하나 이상의 향상제가 유용할 수 있다. As used herein, a “diagnostic agent” is a molecule or atom that is conjugated to a target target moiety, such as an antibody moiety, or conjugated to a targetable construct to produce a conjugate useful for diagnosis. Non-limiting examples of diagnostic agents include photoactive agents or dyes, radionuclides, radiopaque materials, contrast agents, fluorescent compounds, enhancers for MRI (eg paramagnetic ions) and combinations thereof. Suitable enhancers are Mn, Fe, Gd. U. S. Patent No. 6,331, 175 describes the preparation of antibodies conjugated to MRI techniques and MRI enhancers, which are incorporated by reference in their entirety. One or more enhancers may be useful for ultrasound imaging.

진단용제제가 25-4000 keV 감마 입자 및/또는 양전자를 방사하는 진단에 사용하기 적절한 방사성 핵종으로는, ¹⁸F, ³²P, ⁴⁵Ti, ⁵²Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ⁸⁶Y, ⁸⁹Zr, ⁹⁰Y, ^{94 m}Tc, ⁹⁴Tc, ^{99 m}Tc, ¹¹¹In, ¹²³I, ¹²4I, ¹²⁵I, ¹³¹I, ^154-158Gd, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁸Re 또는 그 혼합물이다. 또한, 진단용 제제가 60-700 keV 감마 입자 및/또는 양전자를 방사하는 진단에 사용하기 적절한 방사성 핵종은 ¹⁸F, ⁵²Fe,⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga,⁹⁰Y,¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ^{1 125}I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁵³Sm, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ²¹¹At, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁵Ac 또는 그 혼합물이다. 방사성 동이원소는 PET(positron-emission tomography)에 사용된다. Radionuclides suitable for use in diagnostics where the diagnostic agent emits 25-4000 keV gamma particles and / or positrons include ¹⁸ F, ³² P, ⁴⁵ Ti, ⁵² Fe, ⁶² Cu, ⁶⁴ Cu, ⁶⁷ Cu, ⁶⁷ Ga, ⁶⁸ Ga, ⁸⁶ Y, ⁸⁹ Zr, ⁹⁰ Y, ^{94 m} Tc, ⁹⁴ Tc, ^{99 m} Tc, ¹¹¹ In, ¹²³ I, ¹² 4I, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ^154-158 Gd, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁸ Re or mixtures thereof. In addition, suitable radionuclides for use in diagnostics where diagnostic agents emit 60-700 keV gamma particles and / or positrons are ¹⁸ F, ⁵² Fe, ⁶² Cu, ⁶⁴ Cu, ⁶⁷ Cu, ⁶⁷ Ga, ⁹⁰ Y, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In, ^{1 125} I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁵³ Sm, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re, ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ²¹¹ At, ²¹² Bi, ²¹² Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁵ Ac or a mixture thereof. Radioactive isotopes are used in positron-emission tomography (PET).

치료용 및/또는 진단용 제제는 일차 치료용 제제와 직접 결합(예, 공유 또는 비공유 결합)될 수 있다. 바람직하게는, 진단용 제제는 방사성동위원소, MRI용 향상제 및 형광화합물로 이루어진 군으로부터 선택된다. 항체 성분에 방사성활성 금속 또는 상자성 이온을 적재하기 위해선, 이를 이들 이온과 결합하는 다수의 킬레이팅기가 부착된 긴 꼬리를 갖는 제제와 반응시킬 필요가 있다. 이러한 꼬리는 폴리신; 폴리사카라이드; 또는 EDTA, DTPA, 포르피린, 폴리아민, 크라운에테르, 비스-티오세미카르바존, 폴리옥심 및 이 목적에 유용하다고 알려진 유사 그룹과 같은 킬레이팅기가 부착될 수 있는, 펜던트기를 갖는 다른 유도체화된 또는 유도체화될 수 있는 쇄와 같은 고분자일 수 있다. Therapeutic and / or diagnostic agents may be directly coupled (eg, covalently or noncovalently) with the primary therapeutic agent. Preferably, the diagnostic agent is selected from the group consisting of radioisotopes, MRI enhancers and fluorescent compounds. In order to load radioactive metals or paramagnetic ions into antibody components, it is necessary to react them with a formulation having a long tail with a large number of chelating groups attached to these ions. Such tails include polysine; Polysaccharides; Or other derivatized or derivatized groups having pendant groups to which chelating groups such as EDTA, DTPA, porphyrin, polyamines, crownethers, bis-thiosemiccarbazones, polyoximes and similar groups known to be useful for this purpose can be attached. It may be a polymer such as a chain which may be used.

여기 사용된 용어 "조직"은 당업자가 이해하는 의미의 조직을 의미한다. 본 발명에서 기술된 대로, 조직은 또한 신체 조직 또는 유액(예: 혈액 세포)의 개별 세포, 세포 그룹 또는 세포 배양물을 의미하기도 한다. 또한, 조직은 피험자, 또는 피험자로부터 생검 또는 제거된 것일 수 있다. 조직은 또한 신체 조직 전체 또는 일부일 수 있다. 또한 조직은 절제 및 본 발명의 방법 사이에서 어떠한 저장단계도 없이 피험자로부터 바로 제거된 것이라는 점에서 "신선"하다. 조직은 또한 본 발명의 방법 시행 전에, 냉동, 급속 냉동, 파라핀 침적 및 조직 고정을 포함한 (단 이에 제한되지는 않음) Y표준 조직 제조 기법에 의해 저장될 수 있다. 조직의 비제한적 예로는 난소, 흉선, 부갑상선 및 비장을 들 수 있다. As used herein, the term "tissue" refers to an organization in the sense understood by those skilled in the art. As described herein, tissue also refers to individual cells, cell groups, or cell cultures of body tissue or fluid (eg, blood cells). In addition, the tissue may be biopsied or removed from the subject or from the subject. The tissue may also be all or part of body tissue. The tissue is also "fresh" in that it is removed directly from the subject without any storage steps between ablation and the method of the present invention. Tissue can also be stored by Ystandard tissue preparation techniques, including but not limited to freezing, deep freezing, paraffin deposition, and tissue fixation, prior to implementing the methods of the present invention. Non-limiting examples of tissues include the ovary, thymus, parathyroid gland and spleen.

여기 사용된 용어 "표적 조직" 또는 "표적"은 예를 들어 시스템, 기관, 조직, 세포, 세포소기관, 수용체, 표면 항원, 클롯(clot), 경색, 죽상경화성 플라크, 막단백질 또는 분비 폴리펩티드와 같은 표적가능한 구조체가 우선적으로 수송되는 임의의 생물학적 존재를 말한다. 용어 "수송"은 표적 조직에 접촉하거나, 결합하거나, 내재화되는 것을 의미한다. 예를 들어, 본 발명의 치료학적 측면에서, 표적 조직은 주로 감염, 부어오름, 종양, 기능장애 또는 치환 또는 정규장소를 벗어난 것이다(예:감염 세포, 암세포, 자궁내막증). As used herein, the term “target tissue” or “target” refers to a system, organ, tissue, cell, organelle, receptor, surface antigen, clot, infarction, atherosclerotic plaque, membrane protein or secreted polypeptide, for example. Refers to any biological entity to which a targetable construct is preferentially transported. The term "transport" means contacted, bound or internalized to the target tissue. For example, in the therapeutic aspects of the present invention, the target tissue is primarily infection, swelling, tumors, dysfunction or substitutions or out of normal places (e.g. infected cells, cancer cells, endometriosis).

여기 사용된 용어 "에피토프"(즉, 면역 인식 부분)는 인식 부분 또는 분자에 의해 특이적으로 결합된 임의의 분자 또는 부분을 의미한다. 인식 부분 또는 분자의 비제한적 예로서는 항체, 항체 유도체, 항원-결합 영역 및 최소 항체 인식 단위 및 수용체-특이적 리간드가 있다. As used herein, the term “epitope” (ie, an immune recognition moiety) refers to any molecule or moiety specifically bound by a recognition moiety or molecule. Non-limiting examples of recognition moieties or molecules include antibodies, antibody derivatives, antigen-binding regions and minimal antibody recognition units and receptor-specific ligands.

여기 사용된 용어 "피험자"는 인간 및 다른 영장류, 설치류(예: 마우스, 래트 및 기니아피그), 중치류(예: 토끼), 소류(예: 축우), 양류(예; 양), 염소류(예; 염소), 돼지류(예: 돼지), 말류(예;말), 개류(예;개), 고양이류(예; 고양이), 가금류(예: 닭, 칠면조, 오리, 거위 및 다른 가금류 등) 및 유제류(예: 사슴), 곰, 물고기, 중치류, 설치류, 새 등(이에 제한되지 않음)과 같은 야생 동물을 포함한 임의의 동물(즉, 척추 및 비척추동물)을 의미한다. 이 용어는 특정 연령 또는 성별에 제한되지 않는다. 따라서, 이 용어는 수컷이거나 암컷이거나 간에 태아, 성숙동물 및 갓 태어난 피험자를 다 포함한다. As used herein, the term "subject" refers to human and other primates, rodents (such as mice, rats and guinea pigs), intermediates (such as rabbits), cattle (such as cattle), lambs (such as sheep), goats ( Eg goats, pigs (eg pigs), horses (eg horses), dogs (eg dogs), cats (eg cats), poultry (eg chickens, turkeys, ducks, geese and other poultry) ) And any animal (ie, vertebrate and non-vertebrate), including wild animals such as, but not limited to, ungulates (e.g. deer), bears, fish, intermediates, rodents, birds and the like. This term is not limited to any particular age or gender. Thus, the term includes all fetuses, mature animals and newborn subjects, whether male or female.

II. 본 발명의 일반적 방법, 제제, 구조체, 복합체 및 II. General Methods, Formulations, Structures, Complexes of the Invention 키트Kit

본 발명은 표적 부위에 진단 또는 치료용 제제와 같은 활성 종을 수송하는 방법을 제공한다. 일반적으로, 이 방법은 원하는 표적에 일차 표적 제제를 예비표적화를 제공한다. 일차 표적 제제와 결합하여 활성종을 운반한는 표적가능한 구조체가 투여된다. 결합된 표적가능한 구조체를 "록킹"시켜 결합되지 않은 표적가능한 구조체를 신속히 제거하는 제거제가 투여된다. 표적결합부위에서 결합된 표적가능한 구조체의 "록킹"은 표적가능한 구조체의 일차 표적제제에 대한 결합 평형이 보통 결합된 표적가능한 구조체 두개 이상의 가교로 인하여 결합 상태 쪽으로 옮겨가기 때문에 일어난다. 이렇게, 순환 중이 표적가능한 구조체상의 활성 종을 제거함으로써 표적가능한 구조체의 표적 부위로부터의 이탈을 막는다. The present invention provides a method of transporting an active species, such as a diagnostic or therapeutic agent, to a target site. In general, this method provides for pretargeting the primary target agent to the desired target. A targetable construct is administered which carries the active species in combination with the primary target agent. A scavenger is administered that "locks" the bound targetable construct to quickly remove the unbound targetable construct. “Locking” of the targetable construct bound at the target binding site occurs because the binding equilibrium of the targetable construct to the primary targeting agent is usually shifted towards the binding state due to the crosslinking of two or more bound targetable constructs. Thus, elimination of active species on the targetable construct in circulation prevents the departure of the targetable construct from the target site.

따라서, 통상 제거제는 두가지 기능을 갖는다. "록킹" 기능으로는, 제거제는 보통 인접 구조체 두개 이상을 가교함으로써 표적가능한 구조체를 "록킹"한다. 동시에, 표적가능한 구조체와 일차 표적 제제간의 결합은 가능한 한 안정성이 높도록 선택되며, 통상적으로 각 표적가능한 구성게체 두개 이상의 결합 부분을 사용한다. 제거 기능으로는, 활성종에 대한 일반적 조직 노출(비 표적화)을 줄일 수 있도록 하는 제거 시간을 갖도록 선택된다. 종종 신속히 제거되는 제거제, 예를 들어 제거율을 높이도록 변형된 IgG 분자 또는 갈락토실화된 항체를 제공하도록 개질된 항체가 선택된다. 이렇게, 제거제는 활성종에 대한 일반 조직 조출을 감소시키고 동시에 표적 부위에서 활성종을 함유하는 표적가능한 구조체가 분리되는 것을 감소시킨다. 그 결과, 본 방법은 표적 부위에 표적가능한 구조체의 결합의 안정활 인해 표적 부위에 활성종의 농도를 높이고 노출 시간을 늘린다. Thus, the remover usually has two functions. In the "locking" function, the remover usually "locks" the targetable structure by crosslinking two or more adjacent structures. At the same time, the binding between the targetable construct and the primary target agent is chosen to be as stable as possible, typically using two or more binding moieties of each targetable construct. As a clearance function, it is selected to have a clearance time that allows to reduce general tissue exposure (non-targeting) to the active species. Often, antibodies are selected that are modified to provide a rapidly removing scavenger, eg, an IgG molecule or galactosylated antibody that is modified to increase clearance. As such, the scavenger reduces general tissue outgrowth for the active species and at the same time reduces the separation of the targetable construct containing the active species at the target site. As a result, the method increases the concentration of active species at the target site and increases the exposure time due to the stabilization of the binding of the targetable construct to the target site.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 예비표적화를 사용하여 포유류에 생체내 특정 부위에 치료 또는 진단용 제제의 표적화 및 비국소화 활성종의 신속한 제거를 제공한다. 이렇게 하여, 일차 활성종 또는 국소화 제제는 국소화제제가 순환중에서 제거되지 않기 때문에 평형 상태로 남는다. 대신, 활성종을 함유하는 비결합 표적가능한 컨쥬게이트가 제거되어, 비-표적 부위의 활성종에 대한 노출을 감소시킨다. 표적가능한 구조체에 결합되어 있는 제거제를 사용하여 표적가능한 컨쥬게이트를 제거한다. 제거제는 또한 "록킹" 종으로도 기능하여 표적가능한 컨쥬게이트를 국소화제제에 고정시킬 수 있도록 구성되는 것이 매우 바람직하다. 이렇게 하여, 표적가능한 구조체를 제거해도 표적 부위의 국소 제제로부터 상당량의 표적가능한 구조체의 분리는 일어나지 않는다. In another embodiment, the present invention provides for the rapid removal of targeted and non-localized active species of therapeutic or diagnostic agents at specific sites in vivo in mammals using pretargeting. In this way, the primary active species or localized agent remains in equilibrium because no localizing agent is removed from the circulation. Instead, unbound targetable conjugates containing the active species are removed, reducing the exposure of the non-target site to the active species. A remover bound to the targetable construct is used to remove the targetable conjugate. It is highly desirable that the scavenger is also configured to function as a “locking” species to immobilize the targetable conjugate to the topical agent. In this way, removal of the targetable construct does not result in significant separation of the targetable construct from the topical formulation of the target site.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 하나 이상의 표적 결합 부분 및 하나 이상의 표적가능한 구조체 결합 부분; 하나 이상의 일차 표적 제제 결합 부분, 제거제 결합 부분 및 통상 치료 또는 진단부분을 포함하는 표적가능한 구조체; 및 하나 이상의 표적가능한 구조체 결합 부분을 포함하여 표적 부위에 표적가능한 구조체의 보유를 향상시키는 제거제를 포함하는 일차 표적 제제를 포유류에 투여함을 포함하는 치료 또는 진단용 제제의 표적 수송 방법을 제공한다. 제거제는 표적가능한 구조체에 결합하고 (또한 일차 표적 제제에 결합하여), 그 결과 표적가능한 구조체가 일차 표적 제제에만 결합하거나 표적 결합 부위에서 표적가능한 구조체를 안정화시키지 않는 제거제를 사용할 때 비해서 결합 부위에 표적가능한 구조체의 안정화된 결합을 야기한다. 대부분의 경우 이러한 안정화는 결합 부위에서 표적가능한 구조체 2개 이상을 가교시킴으로써 이루어진다. In another embodiment, the present invention provides one or more target binding moieties and one or more targetable construct binding moieties; A targetable construct comprising one or more primary target agent binding moieties, a scavenger binding moiety and a conventional therapeutic or diagnostic moiety; And administering to the mammal a primary target agent comprising an at least one targetable construct binding moiety to enhance retention of the targetable construct at the target site. The scavenger binds to the targetable construct (and also to the primary target agent), and as a result, the targetable construct targets the binding site as compared to using an scavenger that only binds to the primary target agent or that does not stabilize the targetable construct at the target binding site. It leads to stabilized bonding of possible structures. In most cases this stabilization is achieved by crosslinking two or more targetable structures at the binding site.

일차 표적 제제의 소정의 구현예에서는, 표적 결합 부분이 항체이고; 일차 표적 제제가 다수(예: 2, 3 또는 4개)의 표적 결합 부위를 포함하고; 표적가능한 구조체 결합 부분이 항체 또는 그 항원 결합 단편이고; 표적가능한 구조체 결합 부분이 부착소이고; 표적가능한 구조체 결합 부분이 특정 결합 쌍의 일원이고; 일차 표적 제제가 다수(예; 2개)의 표적가능한 결합 부분을 포함하고; 일차 표적 제제가 암세포를 표적화하고; 일차 표적 제제가 조직을 표적화하고; 일차 표적 제제가 병원균을 표적화하고; 표적 결합 항체 및/또는 표적가능한 구조체 결합 항체가 IgG 항체(항체 단편일 수 있음)를 포함한다. In certain embodiments of the primary target agent, the target binding moiety is an antibody; The primary target agent comprises multiple (eg 2, 3 or 4) target binding sites; The targetable construct binding moiety is an antibody or antigen binding fragment thereof; The targetable construct binding moiety is an attachment; The targetable construct binding moiety is a member of a particular binding pair; The primary targeting agent comprises a plurality (eg two) targetable binding moieties; Primary targeting agents target cancer cells; Primary target agents target tissue; Primary target agents target pathogens; Target binding antibodies and / or targetable construct binding antibodies include IgG antibodies (which may be antibody fragments).

표적가능한 구조체의 구현예에서, 일차 표적 제제 결합 부분이 직교 부착소과 같이 제거제 결합 부분과 직교하고; 표적가능한 구조체가 2개의 일차 표적제제 결합 부분을 포함하고; 표적가능한 구조체가 2개의 일차 표적 제제 결합 부분 및 제거제 결합 부분을 포함하고; 표적가능한 구조체가 치료용 제제를 포함하고; 표적가능한 구조체가 진단제를 포함하고; 일차 표적 제제 결합 부분이 항체 또는 부착소이고; 제거제 결합 부분이 항체 또는 부착소이고; 일차 표적 제제 결합 부분 및 제거제 결합 부분 다 항체 또는 부착소이고; 일차 표적 제제 결합 부분 및 제거제 결합 부분이 개별 특정 결합 쌍의 일원이다. In an embodiment of the targetable construct, the primary target agent binding moiety is orthogonal to the remover binding moiety, such as an orthogonal attachment; The targetable construct comprises two primary targeting agent binding moieties; The targetable construct comprises two primary target agent binding moieties and a scavenger binding moiety; The targetable construct comprises a therapeutic agent; The targetable construct comprises a diagnostic agent; The primary target agent binding moiety is an antibody or an attachment; The remover binding moiety is an antibody or an attachment; The primary target agent binding moiety and the removal agent binding moiety are both antibodies or attachments; The primary target agent binding moiety and the eliminator binding moiety are members of separate specific binding pairs.

제거제의 특정 구현예에서, 제거제는 제거제는 2개 시앙의 표적가능한 구조체 결합 부분을 포함하고; 표적가능한 구조체 결합 부분은 항체 또는 그의 항체 결합 단편이고, 표적가능한 구조체 부분은 부착소이고; 표적가능한 구성세 쳐ㄹ갑부분은 특정 결합 쌍의 일원이고; 제거제의 표적가능한 구조체 결합 항체는 IgG, 항체(단편일 수 있음)이고; IgG 항체는 항체 및 결합 제거제가 개질되지 않은 부모 항체에 비해 순환 중에서 더 신속히 제거될 수 있도록 개질되고; IgG 개질은 하나 이상의 아미노산 변화 및/또는 결실을 포함하고; IgG 결실은 C_H2 영역 결실을 포함하고; 제거제 항체는 부착된 갈락토오즈를 포함하고; 제거제는 다수(예: 2 또는 3)의 표적가능한 구조체와 결합하고; 표적 결합된 일차 표적 제제에 결합된 표적가능한 구조체에 제거제의 결합은 표적 부위의 표적가능한 구조체의 결합을 안정화시킴(표적가능한 구조체가 결합되어 있는 시간을 증가시킴); 표적 부위에 결합되지 않은 표적가능한 구조체에 대한 제거제의 결합은 순환 중으로부터 표적가능한 구조체의 제거율을 높인다. In certain embodiments of the scavenger, the scavenger comprises a target structure of the two binding elements; The targetable construct binding moiety is an antibody or antibody binding fragment thereof, and the targetable construct moiety is an attachment; Targetable constituents are members of specific binding pairs; Targetable construct binding antibodies of the scavenger are IgG, antibodies (which may be fragments); IgG antibodies are modified such that antibodies and binding eliminators can be removed more rapidly in circulation than unmodified parent antibodies; IgG modifications include one or more amino acid changes and / or deletions; IgG deletions include C _H 2 region deletions; Scavenger antibodies include attached galactose; The scavenger binds to multiple (eg 2 or 3) targetable constructs; Binding of the remover to the targetable construct bound to the target bound primary target agent stabilizes binding of the targetable construct at the target site (increases the time that the targetable construct is bound); Binding of the scavenger to the targetable construct that is not bound to the target site increases the removal rate of the targetable construct from the circulation.

본 방법의 소정의 구현예에서, 일차 표적 제제는 표적가능한 구조체 결합 항체 구조체 및 표적 결합 항체 구조체를 포함하고; 표적가능한 구조체는 표적가능한 구조체 결합 항체 구조체와 결합하는 부착소의 2 이상의 복제물 및 제거제 항체 구조체와 결합하는 항체를 포함하고; 제거제는 2개 이상의 표적가능한 구조체와 결합하는 표적가능한 구조체 결합 항체를 포함한다. In certain embodiments of the methods, the primary target agent comprises a targetable construct binding antibody construct and a target binding antibody construct; The targetable construct includes an antibody that binds two or more copies of an attachment to the targetable construct binding antibody construct and a scavenger antibody construct; The scavenger includes a targetable construct binding antibody that binds two or more targetable constructs.

일부 경우, 제거제가 표적가능한 구조체를 신속하게 제거하는 것은 불필요하며, 따라서 실질적으로 록킹 기능만으로도 충분하다. 이는 특히 표적가능한 구조체 자체가 신속히 제거되는 경우 가능하다. 그러한 시스템에서는, 비결합 표적가능한 구조체가 순환으로부터 제거될 때 표적가능한 구조체는 일차 표적 제제에 결합하여 표적 부위에 "록킹"된다. 따라서, 본 발명은 또한 신속히 제거되지 않은 가교 제거제의 사용도 포함한다. In some cases, it is not necessary for the remover to remove the targetable structure quickly, so that only the locking function is sufficient. This is especially possible when the targetable structure itself is quickly removed. In such systems, the targetable construct binds to the primary target agent and is "locked" at the target site when the unbound targetable construct is removed from the circulation. Thus, the present invention also encompasses the use of crosslinkers which have not been removed quickly.

본 발명의 많은 용도가 세포 표면 국소화 또는 타게팅과 관련된다. 그러나, 본 발명의 일반적 방법은 또한 세포 내 활성 종의 내재화를 포함하는데 까지 확대될 수 있다. 이들 구현예에서, 본 방법은 세포가 결합된 복합체을 내재화하도록 하는 내재화 부분을 갖는 구조체를 사용한다. 그러한 내재화 부분은 각종 구조체와 결합, 예를 들어 제거제의 일부 또는 표적가능한 구조체 또는 제거제와 결합하는 개별 내재화제의 일부를 형성할 수 있다. 이때, 본 발명은 복합체, 예를 들어 치료 또는 진단용 제제를 함유하는 복합체을 표적 세포에 내재화시키는 방법을 제공한다. 이 방법은 구소화 제제를 표적에 표적화 또는 예비표적화하고, 결합 복합체의 세포 내재화를 향상시키는 내재화제를 첨가하는 것을 포함한다. 이렇게 하여, 국소화제 없이 내재화제를 사용함으로써 일어날 수 있는 비-특이적 내재화 대신에 표적 내재화가 일어난다. 이 방법은 여기 기술한 예비표적화 방법 또는 다른 표적화 방법과 같이 사용될 수 있다. 국소화 제제는 예를 들어 기본 표적화 방법의 구성성분 중 하나이거나 또는 이들 성분 중 하나 이상과 결합하는 개별 제제일 수 있다. Many uses of the invention relate to cell surface localization or targeting. However, the general method of the present invention can also be extended to include internalization of active species in cells. In these embodiments, the method uses a construct having an internalization moiety that allows the cells to internalize the bound complex. Such internalization moieties may form a portion of an individual internalizing agent that binds to a variety of structures, eg, a portion of a remover or a targetable structure or a remover. In this case, the present invention provides a method for internalizing a complex, for example, a complex containing a therapeutic or diagnostic agent in a target cell. The method involves targeting or pretargeting the spheroidizing agent to the target and adding an internalizing agent that enhances cellular internalization of the binding complex. In this way, target internalization occurs instead of non-specific internalization that can occur by using an internalizing agent without a localizing agent. This method can be used in conjunction with the pretargeting method or other targeting methods described herein. The localization formulation can be, for example, one of the components of the basic targeting method or an individual formulation in combination with one or more of these components.

특히, 본 발명은 표적 결합부분을 포함하는 일차 표적 제제; 및 내재화 부분을 포함하는 개별 내재화제(단 일차 표적 제제는 내재화제와 복합체을 형성하여 내재화를 향상시키고; 복합체은 또한 치료 또는 진단 부분을 포함함)를 포유류에게 투여함으로써, 치료 또는 진단용 제제의 세포 내재화를 향상시키는 방법을 제공한다. 치료 또는 진단 부분은 일차 표적 제제의 일부일 수 있다. In particular, the present invention relates to a primary target agent comprising a target binding moiety; And internalizing the cell internalization of the therapeutic or diagnostic agent by administering to the mammal an individual internalizing agent comprising the internalizing portion, wherein the primary target agent forms a complex with the internalizing agent to enhance internalization; the complex also includes a therapeutic or diagnostic portion. Provide a way to improve. The therapeutic or diagnostic portion may be part of the primary target agent.

바람직한 구현예에서, 내재화 부분은 표적가능한 구조체 또는 제거제에 결합하거나 그 부분이다. 따라서, 소정의 구현예에서, 본 방법은 또한 일차 표적 제제 결합 부분 및 제거제 결합 부분을 포함하는 표적가능한 구조체, 및 표적가능한 구조체 결합 부분 및 내재화 부분을 포함하는 제거제를 포유류에게 투여하는 것을 포함한다. 또는 제거제는 내재화제 결합부분을 포함할 수 있고 제거제 결합 부분을 갖는 내재화제가 또한 투여된다. 유사하게, 소정 구현예에서 본 방법은 일차 표적제제 결합 부분, 내재화제 결합 부분 및 제거제 결합 부분을 갖는 표적가능한 구조체; 표적가능한 구조체 결합부분을 갖는 제거제; 및 표적가능한 구조체 결합 부분 및 내재화 부분을 갖는 내재화제를 포유류에게 투여하는 것을 포함한다. 개별 내재화제의 사용은 결합 부위만 혹은 결합 부위에 우선적으로, 내재화 부분과 표적가능한 구조체 부분의 결합을 허용한다. In a preferred embodiment, the internalizing moiety binds to or is a moiety of the targetable construct or eliminator. Thus, in certain embodiments, the method also includes administering to the mammal a targetable construct comprising a primary target agent binding moiety and a scavenger binding moiety, and a scavenger comprising a targetable construct binding moiety and an internalization moiety. Or the removing agent may comprise an internalizing agent binding moiety and an internalizing agent having an removing agent binding moiety is also administered. Similarly, in certain embodiments the method comprises a targetable construct having a primary targeting agent binding moiety, an internalizing agent binding moiety, and a removal agent binding moiety; A remover having a targetable construct binding moiety; And administering to the mammal an internalizing agent having a targetable construct binding moiety and an internalization moiety. The use of individual internalizing agents allows binding of internalization moieties to targetable structural moieties only or preferentially to the binding moiety.

내재화 부분과 관련된 본 발명의 면에서, 내재화는 다양한 방법으로 수행될 수 있다. 특정 구현예에서, 내재화 부분은 재활용 수용체(폴레이트 수용체와 같은)에 결합한다. 폴레이트 수용체게 결합하기 위해서, 내재화 부분은 예를 들어 폴레이트 또는 메토트렉세이트, 혹은 폴레이트 수용체에 결합하는 폴레이트 유사체를 포함할 수 있다. 다른 구현예에서, 내재화 부분은 HIV-1 tat 단백질, 트랜스포란, MAP(model amphipatic peptide), 안테나페디아 펩티드(페네트라틴으로 알려짐) 및 부착하는 부분을 내재화시킨다고 알려진 단백질 또는 펩티드와 같은 비수용체 매개 내재화를 향상시키는 펩티드를 포함한다. 나가하라 등(Nagahara et al.)의 Nature Medicine, 4(12):1449-1998은 융합 단백질 내 tat의 사용을 개시한다. 다른 세포 투과 펩티드는 종래기술에 알려져 있고, 토렌 등(Thoren et al.,)의 FEBS Letters 482:265-268 (2000); 마젤 등(Mazel et al.), Anti-Cancer Drugs 12:107-116(2001); 홀브링크 등(Hallbrink et al.), Biochim,. et Biophys. Acta 1515:101-109(2001); 토렌 등(Thoren et al.)의 Biochem. Biophys. Rs. Commun. 307:100-107(2003)에 개시되어 있다. 본 방법은 상기 기술된 구조체를 사용하고/하거나 여기 기술된 내재화제 또는 내재화부분과 관계있다. In the context of the present invention with regard to internalization portions, internalization can be performed in a variety of ways. In certain embodiments, the internalization moiety binds to a recycling receptor (such as a folate receptor). To bind to the folate receptor, the internalization moiety may comprise folate or methotrexate, or a folate analog that binds to the folate receptor, for example. In other embodiments, the internalization moiety is a non-receptor mediated agent, such as a HIV-1 tat protein, transporane, model amphipatic peptide (MAP), an antennapedia peptide (known as feneratin), and a protein or peptide known to internalize the attachment moiety. Peptides that enhance internalization. Nagahara et al., Nature Medicine, 4 (12): 1449-1998, discloses the use of tat in fusion proteins. Other cell penetrating peptides are known in the art and include FEBS Letters 482: 265-268 (2000) by Thoren et al.,; Mazel et al., Anti-Cancer Drugs 12: 107-116 (2001); Holbrink et al., Biochim ,. et Biophys. Acta 1515: 101-109 (2001); Biochem. Of Thoren et al. Biophys. Rs. Commun. 307: 100-107 (2003). The method uses the structure described above and / or relates to the internalization agent or internalization portion described herein.

진단 또는 치료 부분을 포함하는 본 발명의 면에서, 진단 또는 치료 부분은 많은 상이한 형태일 수 있다. 예를 들어, 치료 부분은 광활성제, 방사성활성 동위원소, 비-방사성활성 금속 킬레이트, 약물, 프로드럭을 활성화시키는 효소, 프로드럭 및/또는 독소이거나 이를 포함할 수 있다. 유사하게, 진단 부분은 예를 들어 조영제, 빛 산란 금속 콜로이드 입자; 방사성활성 동위원소 및/또는 바사성 영상 금속 클레이트이거나 이를 포함할 수 있다. In the context of the present invention, including the diagnostic or therapeutic moiety, the diagnostic or therapeutic moiety may be in many different forms. For example, the therapeutic moiety can be or include a photoactive agent, radioactive isotopes, non-radioactive metal chelates, drugs, enzymes that activate prodrugs, prodrugs, and / or toxins. Similarly, the diagnostic portion may include, for example, contrast agents, light scattering metal colloidal particles; Or may comprise a radioactive isotope and / or vasa imaging metal crate.

이 세포 내재화 향상 방법에서 제거제의 표적가능한 구조체 결합 부분이란 항체 또는 그 항원 결합 항체 단편을 포함하고, 보다 구체적으로는 항체 또는 그 단편이 IgG 항체 또는 그 단편이다. 보다 구체적으로는 항체 또는 그 단편이 순환으로부터의 제거를 향상시키는 C_H2 결실된 항체이다. 항체 또는 그 단편은 또한 갈락토오즈로 개질되어 제거가 향상될 수도 있다. In this method of enhancing cell internalization, the targetable construct binding portion of the scavenger includes an antibody or antigen-binding antibody fragment thereof, and more specifically, the antibody or fragment thereof is an IgG antibody or fragment thereof. More specifically the antibody or fragment thereof is a C _H 2 deleted antibody that enhances clearance from circulation. The antibody or fragment thereof may also be modified with galactose to enhance removal.

또한 내재화 향상 방법은 다수의 표적가능한 구조체와 결합하는 제거제를 사용한다. 또한 표적가능한 구조체에 대한 제거제는 표적 부위에서 일차 표적 제제에 대한 표적가능한 구조체의 결합을 안정화시키고 표적 부위에서 일차 표적 제제에 결합되지 않은 표적가능한 구조체의 제거를 향상시킨다. 제거제의 표적가능한 구조체 결합 부분은 항체 또는 항체 단편, 특히 IgG 항체 또는 그 단편을 포함한다. 항체 또는 그 단편은 순환으로부터 제거를 향상시키는 C_H2 결실된 IgG 항체 또는 갈락토오즈로 개질된 항체 또는 항체 단편이다. The method of enhancing internalization also uses a remover that binds to a plurality of targetable constructs. The scavenger for the targetable construct also stabilizes the binding of the targetable construct to the primary target agent at the target site and enhances the removal of the targetable construct that is not bound to the primary target agent at the target site. Targetable construct binding portions of the scavenger include antibodies or antibody fragments, in particular IgG antibodies or fragments thereof. The antibody or fragment thereof is a C _H 2 deleted IgG antibody or galactose modified antibody or antibody fragment that enhances clearance from circulation.

또한, 본 발명은 표적 결합 부분 및 하나 이상의 표적가능한 구조체 결합 부분을 갖는 일차 표적 제제; 일차 표적 제제 결합 부분, 제거제 결합 부분 및 영상화 부분을 갖는 표적가능한 구조체; 및 하나 이상의 표적가능한 구조체 결합 부분을 포함하는 제거제를 포유류에게 투여하여, 표적 결합된 표적가능한 구조체에 대한 순환중인 표적가능한 구조체 비율을 감소시키고/시키거나 순환 표적의 제거율을 향상시킴으로써 생체내 영상화 시스템에서 콘트라스트를 향상시키는 방법을 개시한다. 제거제는 또한 내재화 부분을 포함한다. 표적가능한 구조체는 내재화제 결합 부분을 더 포함하고, 방법은 표적가능한 구조체 결합 부분 및 내재화 부분을 포함하는 내재화제를 포유류에게 투여하는 것을 더 포함한다. 일 구현예에서, 제거제의 표적가능한 구조체 결합 부분은 바람직하게는 IgG 항체 또는 항체 단편인 항체 또는 항체 단편을 포함한다. 순환으로부터 제거를 향상시키거나 갈락토오즈로 개질된 C_H2 결실된 IgG 항체. 제거제는 다수의 표적가능한 구조체와 결합할 수 있다. 또한, 표적가능한 구조체에 대한 제거제의 결합은 표적 부위에서 일차 표적제제에 대한 표적가능한 구조체의 결합을 안정시키고 결합 부위에서 일차 표적 제제에 결합되지 않은 표적가능한 구조체의 제거를 향상시킨다. In addition, the present invention provides a primary target formulation having a target binding moiety and at least one targetable construct binding moiety; A targetable construct having a primary target agent binding moiety, a remover binding moiety, and an imaging moiety; And administering an scavenger comprising at least one targetable construct binding moiety to the mammal to reduce the proportion of circulating targetable constructs to the target bound targetable construct and / or improve the clearance rate of the circulating target in an in vivo imaging system. Disclosed is a method for improving contrast. The remover also includes an internalization portion. The targetable construct further comprises an internalizing agent binding moiety, and the method further comprises administering to the mammal an internalizing agent comprising the targetable construct binding moiety and the internalizing moiety. In one embodiment, the targetable construct binding portion of the remover comprises an antibody or antibody fragment, which is preferably an IgG antibody or antibody fragment. C _H 2 deleted IgG antibodies with improved clearance from circulation or modified with galactose. The scavenger may bind to a number of targetable structures. In addition, binding of the scavenger to the targetable construct stabilizes binding of the targetable construct to the primary target agent at the target site and enhances removal of the targetable construct that is not bound to the primary target agent at the binding site.

본 발명은 또한 순환중인 치료 또는 진단용 제제를 갖는 포유류에게, 치료 또는 진단용 제제를 포함하는 순환 분자 또는 복합체 상의 하나 이상의 부분에 특이적으로 결합하여 상기 분자 또는 복합체의 제거를 향상시키는 제거제를 투여함으로써 순환중인 치료 또는 진단용 제제를 제거하는 방법을 포함한다. 상기 방법은 여기 기술한 표적가능한 구조체 및/또는 제거제를 포함한다. The invention also relates to a mammal having a therapeutic or diagnostic agent in circulation, by administering a scavenger that specifically binds one or more moieties on a circulating molecule or complex comprising the therapeutic or diagnostic agent to enhance removal of the molecule or complex. Methods of removing an active therapeutic or diagnostic agent. The method includes the targetable constructs and / or removers described herein.

특정 구현예에서, 치료 또는 진단용 제제는 2개 이상의 직교 부착소, 바람직하게는 직교 부착소의 2개 이상의 복제물를 포함하는 표적가능한 구조체의 일부이고; 표적가능한 구조체는 펩티드, 바람직하게는 스캐폴드 또는 링커로서의 펩티드를 포함하고; 치료용 제제는 방사성동위원소, 약물, 독소, 프로드럭을 활성화하는 효소, 비-방사성 금속 킬레이트, 또는 면역자극제이다. 이 방법에서 제거제는 순환 분자 또는 복합체에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을 포함한다. 제거제는 두개 이상의 순환 분자 또는 복합체에 결합하여 분자 또는 복합체의 가교를 야기한다. 제거제는 상기 기술된 바와 같이, IgG 또는 단편, 또는 순환으로부터 제거를 향상시키는 C_H2 결실된 IgG 항체 또는 갈락토오즈로 개질된 IgG 항체이다. 제거제는 또한 다수의 표적가능한 구조체에 결합될 수 있다. 또한 표적가능한 구조체에 대한 제거제의 결합은 결합 부위에서 일차 표적 제제에 대한 표적가능한 구조체의 결합을 안정시키고 결합 부위에서 일차 표적제제에 결합하지 않은 표적가능한 구조체의 제거를 향상시킨다. In certain embodiments, the therapeutic or diagnostic agent is part of a targetable construct comprising two or more orthogonal attachments, preferably two or more copies of orthogonal attachments; Targetable constructs include peptides, preferably peptides as scaffolds or linkers; Therapeutic agents are radioisotopes, drugs, toxins, enzymes that activate prodrugs, non-radioactive metal chelates, or immunostimulants. In this method, the scavenger includes an antibody or antibody fragment that specifically binds to a circulating molecule or complex. The scavenger binds to two or more circulating molecules or complexes resulting in crosslinking of the molecules or complexes. The scavenger is an IgG or fragment, or a IgG antibody modified with galactose or a C _H 2 deleted IgG antibody that enhances clearance from circulation, as described above. The scavenger can also be bound to a number of targetable constructs. Binding of the scavenger to the targetable construct also stabilizes the binding of the targetable construct to the primary target agent at the binding site and enhances the removal of the targetable construct that is not bound to the primary target agent at the binding site.

이하에서 상세히 설명하는 바와 같이, 본 발명에서 사용하는 구조체는 많은 상이한 방법으로 배열될 수 있다. 예를 들어, 특정 결합 쌍(예; 항체/부착소 쌍)에 대해, 통상적으로 결합 쌍의 개별 멤버는 관련 구조체상에 위치할 수 있다. 따라서, 항체/부착소 결합쌍이 사용되는 경우, 항체는 하나의 구조체 상에 있고 인접 부착소은 제1 구조체가 결합하는 구조체 상에 있거나, 또는 항체 및 부착소은 두개의 구조체 상에서 서로 바뀌어 있을 수 있다. 이러한 대체적 구조체는 이하의 기술로부터 명백할 것이다. 몇몇 예시적 배열이 도 1~5 및 7~9에 도식적으로 나타나 있다. As will be described in detail below, the structures used in the present invention can be arranged in many different ways. For example, for a particular binding pair (eg, antibody / adhesive pair), typically individual members of the binding pair may be located on related constructs. Thus, when antibody / adhesin binding pairs are used, the antibody may be on one structure and the adjacent attachment may be on the structure to which the first structure binds, or the antibody and the attachment may be interchanged on the two structures. Such alternative structures will be apparent from the description below. Some exemplary arrangements are shown schematically in FIGS. 1-5 and 7-9.

본 발명에 이용가능한 정보를 제공하는 수많은 참고 문헌이 여기에 인용된다. 예를 들어 인용문헌은 본 발명에 유용하거나 유용하게 개작될 수 있는 일차 표적 제제, 표적가능한 구조체 및 제거제를 포함한다. 특히 유용한 예로서, 골든베르그 등의 미국 출원 10/150.654호(명칭 "Use of Bi-Spcific Antibodies for Pre-Trageting Diagnosis and Therapy")는 이특이성 항체 구조체, 표적가능한 구조체, 제거제, 표적, 치료 및 진단 부분, 컨쥬게이트 방법, 시험 방법 및 사용방법(이에 한정되지는 않음)에 대한 적용가능한 기술을 포함하고 있으며, 이를 온전히 참고문헌으로 한다. Numerous references that provide information available for the present invention are cited herein. For example, citations include primary targeting agents, targetable constructs, and eliminators that may be useful or usefully adapted to the present invention. As a particularly useful example, U.S. Application No. 10 / 150.654 to Goldenberg et al. Entitled "Use of Bi-Spcific Antibodies for Pre-Trageting Diagnosis and Therapy" discloses bispecific antibody constructs, targetable constructs, eliminators, targets, treatments and diagnostics. Applicable techniques for, but not limited to, parts, conjugate methods, test methods, and methods of use are incorporated herein by reference in their entirety.

특히, 본 발명은 본 방법에 유용한 구조체를 제공한다. 따라서 본 발명은 치료 또는 진단 부분의 수송을 위해 개작된 삼중특이성 표적가능한 구조체를 제공한다. 구조체는 개별 일차 표적 제제와 결합하기 적합한 하나 이상의 제1 결합 부분; 제거제와 결합하기 적합한 제2 결합 부분 및 내재화제와 결합하기 적합한 제3 결합부분을 포함한다. 구조체는 또한 진단 또는 치료 부분을 포함하는 것이 바람직하다. 치료 부분은 방사성활성 동위원소, 비-방사성활성 금속 킬레이트, 약물, 프로드럭, 독소 또는 프로드럭 또는 여기 기술된 다른 치료 부분을 활성화시키는 효소이다. 진단 부분은 광활성제, 조영제, 빛 산란 금속 콜로이드 입자, 방사성활성 동위원소 또는 방사어영상 금속 킬레이트 또는 여기 기술된 다른 진단 부분이다. 구조체는 바람직하게는 포유류 세포와 결합하고 보다 바람직하게는 이 구조체는 포유류에 투여되어 포유류 내에 위치한다. In particular, the present invention provides constructs useful for the method. Accordingly, the present invention provides trispecific targetable constructs adapted for the transport of therapeutic or diagnostic moieties. The construct may comprise one or more first binding moieties suitable for binding individual discrete target agents; A second binding moiety suitable for binding with the remover and a third binding moiety suitable for binding with the internalizing agent. The construct also preferably includes a diagnostic or therapeutic portion. The therapeutic moiety is an enzyme that activates radioactive isotopes, non-radioactive metal chelates, drugs, prodrugs, toxins or prodrugs or other therapeutic moieties described herein. The diagnostic portion is a photoactive agent, contrast agent, light scattering metal colloidal particle, radioactive isotope or radiofish metal chelate or other diagnostic portion described herein. The construct preferably binds to a mammalian cell and more preferably the construct is administered to the mammal and located in the mammal.

바람직한 구현예들에서, 제1, 제2 및 제3 결합 부분 중 하나 이상이 부착소이거나: 결합 부분 중 2개 이상이 부착소이거나: 결합 부분 3개 모두가 부착소이거나; 결합 부분은 바람직하게는 직교한다. 구조체의 부가 특징은 표적가능한 구조체에 대한 기술과 동일하다. In preferred embodiments, at least one of the first, second and third binding portions is an attachment: at least two of the binding portions are attachments: all three binding portions are attachments; The joining portion is preferably orthogonal. Additional features of the construct are the same as for the targetable construct.

소정의 구현예에서, 구조체는 포유류 세포에 결합하고; 이들 세포는 포유류, 예를 들어 인간일 수 있다. In certain embodiments, the construct binds to a mammalian cell; These cells can be mammals, for example humans.

여기 기술된 바와 같이, 본 발명은 포유류 내 순환중인 표적가능한 구조체의 제거에 적합한 제거제를 제공한다. 제거제는 결합 부분을 포함하고, 소정의 구현예에서 표적가능한 구조체를 결합하기 적절한 2개 이상의 결합 부분 및 내재화 부분을 포함한다. 제거제 및/또는 내재화 부분의 각종 구현예가 여기 기술된다. 내재화 부분은 여기 기술된 재활용 세포 표면 수용체 또는 비-수용체 매개된 내재화 펩티드에 의해 결합될 수 있다. 또한, 제거제는 여기 기술된 항체, 그 단편, C_H2 결실된 항체 또는 갈락토실화된 항체일 수 있다. As described herein, the present invention provides a scavenger suitable for the removal of circulating targetable constructs in a mammal. The scavenger comprises a binding moiety, and in certain embodiments includes two or more binding moieties and internalization moieties suitable for binding a targetable construct. Various embodiments of the remover and / or internalization portion are described herein. The internalization moiety can be bound by the recycled cell surface receptors or non-receptor mediated internalization peptides described herein. In addition, the scavenger may be an antibody described herein, fragments thereof, C _H 2 deleted antibody or galactosylated antibody.

다른 관련된 면에서, 본 발명은 하나 이상의 일차 표면 제제 결합 부분 및 내재화제 결합 부분을 포함하는 표적가능한 구조체를 포함하는, 내재화제와 결합된, 분자 복합체을 제공한다. 표적가능한 구조체는 또한 제거제 결합 부분을 포함한다. 복합체의 내재화제는 표적가능한 구조체 결합 부분 및 내재화 부분을 더 포함할 수 있다. 표적가능한 구조체는 여기 기술된 치료 또는 진단 부분을 포함할 수 있다. 제거제 의 각종 구현예 및/또는 내재화 부분은 여기 기술된 다른 면에서 기술된 대로이다. In another related aspect, the present invention provides a molecular complex associated with an internalizing agent, comprising a targetable structure comprising at least one primary surface agent binding moiety and an internalizing agent binding moiety. Targetable constructs also include a remover binding moiety. The internalization agent of the complex may further comprise a targetable structure binding moiety and an internalization moiety. Targetable constructs can include the therapeutic or diagnostic moieties described herein. Various embodiments and / or internalization portions of the remover are as described elsewhere described herein.

또 다른 관련된 면에서 하나 이상, 바람직하게는 2개의 일차 표적 제제 결합 부분, 제거제 결합 부분 및 치료 또는 진단 부분을 포함하는 표적가능한 구조체를 포함하는, 제거제와 결합된 분자복합체을 제공한다. 바람직한 구현예에서, 일차 표적 제제 결합 부분 및 제거제 결합 부분은 직교 부착소; 제거제로 가교된 두개 이상의 표적가능한 구조체를 포함하고; 복합체은 또한 일차 표적 제제를 포함한다. In another related aspect there is provided a molecular complex associated with an scavenger comprising a targetable construct comprising one or more, preferably two primary target agent binding moieties, a scavenger binding moiety and a therapeutic or diagnostic moiety. In a preferred embodiment, the primary target agent binding moiety and the removal agent binding moiety are orthogonal attachments; At least two targetable structures crosslinked with a scavenger; The complex also includes a primary target agent.

또 다른 분자 복합체은 다수의 일차 표적 제제 결합 부분을 포함하는 다가의 표적가능한 구조체에 결합된, 표적 결합 부분 및 다수(바람직하게는 2개)의 표적가능한 구조체 결합부분; 제거제 결합 부분 및 여기 기술된 치료 또는 진단 부분을 포함하는,다가의 일차 표적 제제를 포함한다. 표적가능한 구조체 결합 부분은 항체 결합 영역일 수 있다. 일차 표적 제제 결합 부분은 제거제 결합 부분과 직교한다. Still other molecular complexes include a target binding moiety and a plurality (preferably two) targetable construct binding moieties bound to a multivalent targetable construct comprising a plurality of primary target agent binding moieties; And multiple primary target agents, including a scavenger binding moiety and a therapeutic or diagnostic moiety described herein. The targetable construct binding moiety can be an antibody binding region. The primary target agent binding moiety is orthogonal to the remover binding moiety.

또 다른 분자 복합체은 표적 결합 부분 및 하나 이상의 표적가능한 구조체 결합 부분을 포함하고, 하나 이상의 일차 표적 제제 결합 부분, 제거제 결합 부분 및 치료 또는 진단결합 부분을 포함하는 표적가능한 구조체에 결합되고, 또한 표적가능한 구조체 결합 부분 또는 제거제 결합 부분 및 내재화 부분을 포함하는 내재화제에 결합된 일차 표적 제제를 포함한다. Another molecular complex comprises a target binding moiety and at least one targetable construct binding moiety, and is coupled to a targetable construct comprising at least one primary target agent binding moiety, a remover binding moiety, and a therapeutic or diagnostic binding moiety, and is also a targetable construct. Binding moiety or scavenger A primary target agent bound to an internalizing agent comprising a binding moiety and an internalization moiety.

또 다른 복합체은 여기 기술된 대로, 표적 결합 부분 및 치료 또는 진단 부분을 포함하고, 일차 표적 제제 결합 부분 및 내재화 부분을 포함하는 내재화제에 결합된 일차 표적 제제를 포함한다. Another complex, as described herein, includes a target binding moiety and a therapeutic or diagnostic moiety, and includes a primary target agent bound to an internalization agent that includes a primary target agent binding moiety and an internalization moiety.

소정의 복합체 구현예에서, 복합체은 포유류 세포에 결합되거나: 복합체은 포유류의 세포에 결합될 수 있거나; 복합체은 결합 부위에 결합된다. In certain complex embodiments, the complex is bound to a mammalian cell: or the complex may be bound to a mammalian cell; The complex is bound to the binding site.

표적 세포에 치료 또는 진단용 제제를 표적화하는 구조체, 키트 및 방법의 면에서, 본 발명은 또한 피험자 (통상 환자), 바람직하게는 인간 피험자의 질병 또는 상태를 치료 및/또는 진단하는 방법을 제공한다. 본 방법은 또한 표적화된 수송 방법으로 하나 이상의 치료 또는 진단 부분을 피험자에게 투여하는 것을 포함한다. 이 방법에 의해 치료가능한 질병 또는 상태는 이하에서 기술한다. In terms of constructs, kits, and methods for targeting therapeutic or diagnostic agents to target cells, the invention also provides methods for treating and / or diagnosing the disease or condition of a subject (usually a patient), preferably a human subject. The method also includes administering to the subject one or more therapeutic or diagnostic portions by a targeted transport method. Diseases or conditions treatable by this method are described below.

소정의 구현예에서, 치료 또는 진단 부분은 내재화를 촉진하는 방식, 예를 들어 신속히 내재화하는 수용체 또는 내재화 펩티드와 가교하는 식으로 표적화된다. 통상 치료 또는 진단 부분은 표적 결합된 복합체의 일부로 내재화된다. 특정 구현예에서, 치료 또는 진단 부분은 여기 기술된 활성종을 포함한다. 또한 소정의 구현예에서, 치료 또는 진단 부분이 조합 치료의 일부로 투여된다. In certain embodiments, the therapeutic or diagnostic moiety is targeted in a manner that promotes internalization, such as by crosslinking with rapidly internalizing receptors or internalizing peptides. Typically the therapeutic or diagnostic moiety is internalized as part of the target bound complex. In certain embodiments, the therapeutic or diagnostic portion includes the active species described herein. Also in certain embodiments, the therapeutic or diagnostic portion is administered as part of the combination treatment.

특정 구현예에서, 표적화는 마커, 기관 또는 조직에 대해 일어난다. 유사하게, 특정 구현예에서 방법은 여기 기술된 질병 또는 상태의 치료 또는 진단 (영상을 포함)에 사용된다. In certain embodiments, targeting occurs for a marker, organ or tissue. Similarly, in certain embodiments the methods are used for the treatment or diagnosis (including imaging) of a disease or condition described herein.

또 다른 면에서, 본 발명은 고상 매체(예; 수지) 상에서의 합성에 의한 DTPA 컨쥬게이트된 펩티드 제조하는 유리한 방법을 제공한다. 합성은 본 실시예에서 IMP 272의 제조의 기재 부분에 의해 예시화된다. In another aspect, the present invention provides an advantageous method for preparing DTPA conjugated peptides by synthesis on solid phase media (e.g. resins). Synthesis is exemplified by the description part of the preparation of IMP 272 in this example.

부가적 면에서 상기 기술한 구조체를 포함하는 키트가 제공된다. 이러한 키트 중 하나는 치료 또는 진단용 제제의 투여용 키트이다. 키트는 표적 결합 부분 및 하나 이상의 표적가능한 구조체 결합 부분을 포함하는 일차 표적 제제; 여기 기술한 대로, 하나 이상의 일차 표적 제제 결합 부분, 치료 또는 진단 부분 및 제거제 결합 부분을 포함하는 표적가능한 구조체; 및 표적가능한 구조체 결합 부분을 포함하는 제거제를 포함한다. 일차 표적 제제, 표적가능한 구조체 및 제거제는 상기 기술한 대로 배열된다. In a further aspect there is provided a kit comprising the structure described above. One such kit is a kit for administration of a therapeutic or diagnostic agent. The kit comprises a primary target agent comprising a target binding moiety and one or more targetable construct binding moieties; As described herein, a targetable construct comprising one or more primary target agent binding moieties, a therapeutic or diagnostic moiety, and an eliminator binding moiety; And a remover comprising a targetable construct binding moiety. Primary target agents, targetable constructs and scavengers are arranged as described above.

키트의 다른 예로는 표적 결합 부분 및 하나 이상의 내재화제 결합 부분을 갖는 일차 표적 제제; 및 내재화 부분을 포함하는 복합체의 내재화를 향상시키는 내재화 부분및일차 표적 제제 결합 부분을 포함하는 내재화제를 포함한다. Other examples of kits include primary target agents having a target binding moiety and one or more internalizing agent binding moieties; And an internalization agent comprising an internalization moiety and a primary target agent binding moiety that enhances internalization of the complex comprising an internalization moiety.

바람직하게는 키트는 포유류, 예를 들어 인간의 생체 내 사용에 대한 규제 기능에 의해 승인된다. Preferably the kit is approved by regulatory functions for in vivo use in mammals, for example humans.

당업자가 알고 있듯이, 항체/헵탄 또는 다른 항체/에피토프 결합 쌍 이외에 수많은 상이한 특정 결합 쌍이 사용될 수 있다. 여기에는 예를 들어, 금속 킬레이트화 쌍, 리간드/수용체 결합 쌍(천연, 유사, 또는 합성 리간드), 바이오틴/아비딘 또는 스트렙타비딘 및 탄수화물/렉틴이 있다. As will be appreciated by those skilled in the art, a number of different specific binding pairs can be used in addition to antibody / heptane or other antibody / epitope binding pairs. These include, for example, metal chelation pairs, ligand / receptor binding pairs (natural, analogous, or synthetic ligands), biotin / avidin or streptavidin, and carbohydrates / lectins.

유사하게, 폴레이트 수용체와 폴레이트 또는 메토트렉세이트 대신에 수많은 내재화 메커니즘이 사용될 수 있다. 예를 들어, 스테로이드 호르몬과 같은 호르몬 또는 호르몬 유사체/호르몬 수용체 쌍; 특정 펩티드/펩티드 수용체 및 비-수용체 매개 펩티드 내재화. Similarly, numerous internalization mechanisms can be used in place of the folate receptor and folate or methotrexate. Hormone or hormone analog / hormone receptor pairs such as, for example, steroid hormones; Specific peptide / peptide receptor and non-receptor mediated peptide internalization.

III. III. 이특이성Uniqueness 일차  Primary 표적화Targeting 종 Bell

본 발명의 표적화 방법에서, 선택된 표적, 통상 세포 표적에 결합하는데 일차 표적 제제가 사용된다. 많은 경우 표적은 조직의 세포 또는 특정 특징을 갖는 세포들이다. 대부분의 경우, 일차 표적 제제가 이특이성 제제인 것이 바람직하다. 따라서, 일차 표적 제제는 표적 결합 부분 및 하나 이상의 표적가능한 구조체 결합 부분을 모두 포함하며, 표적가능한 구조체가 통상 표적에 향하도록 하는 부분(예를 들어 치료 또는 진단 부분)을 포함하는, 통상 이특이성 제제이다. In the targeting method of the present invention, a primary target agent is used to bind to the selected target, usually a cellular target. In many cases, targets are cells of tissue or cells with specific characteristics. In most cases, it is preferred that the primary target agent is a bispecific agent. Thus, a primary targeting agent usually comprises both a target binding moiety and one or more targetable construct binding moieties, and typically comprises a part that directs the targetable construct toward the target (eg, a therapeutic or diagnostic moiety). to be.

이특이성 일차 표적 제제, 특히 항체-기초한 제제는 수많은 출원에서 기술되어 있다. 이러한 기술로는 예를 들어 출원 제09/337,756호(명칭:Use of bi-specific antibodies for pre-targeting diagnosis and therapy" 1999. 6.22 출원); 출원 제09/382,186호(명칭: "Use of bi-specific antibodies for pre-targeting diagnosis and therapy", 1999.8.23.출원); 출원 제09/823,746호(명칭: "Production and use of novel peptide-based agents for use with bi-specific antibodies", 2001.4.3.출원); 미국 가출원 제60/361,037호 (명칭: "Bispecific antibody point mutations for enhancing rate of clearance" 2003.3.1. 출원); 및 한센 등(Hansen et al.)의 PCT 출원공개 WO99/66951 (명칭: "Use of bi-specific antibodis for pre-targeting diagnosis and therapy")가 있으며, 이들 모두를 온전히 참고문헌으로 포함한다. 이들 문헌은 보 sqkf명의 일차 표적 제제에 사용될 수 있거나 사용되도록 개량된 이특이성 항체 구성물 및 이들 일차 표적 제제 구성물의 제조방법을 기술하고 있다. 또한, 배경기술에서 인용한 다른 문헌들에 기재된 표적 제제는 예를 들어 표적 제제가 이특이성이 되도록 결합 부분이 있는 것을 확인함으로써, 본 발명에 사용되거나 사용되도록 개량될 수 있다. 바람직하게는 표적 제제는 또한 표적 및 표적가능한 구조체 어느 한쪽 또는 양쪽 모두에 결합될 수 있게 다가이다. 표적 결합 부분에 대한 항체 결합 및 표적가능한 구조체 결합 부분에 대한 비오틴 또는 아비딘/스트렙타비딘을 사용하는 일차 표적 제제의 예가 골든베르그의 미국특허 제5,525,338호(명칭: "Detection and Therapy of Lesions with Biotin/Avidin Congjugates")에 기술되어 있다. 항체 및 다른 종에 대한 비오틴 및 아비딘/스트렙타비딘 컨쥬게이트에 대한 기술은 업계에 공지되어 있다. 예를 들어, 배경기술에서 인용된 문헌 참조: 그리피스 등의 미국특허 제5,846,741호; 그리피스 등의 미국특허 제5,965,115호 및 그리피스 등의 미국특허 제6,120,768호 (이들 문헌은 온전히 참고문헌으로 포함된다). Bispecific primary target agents, in particular antibody-based agents, have been described in numerous applications. Such techniques include, for example, application 09 / 337,756 (named: Use of bi-specific antibodies for pre-targeting diagnosis and therapy, June 22, 1999); application 09 / 382,186, titled "Use of bi- specific antibodies for pre-targeting diagnosis and therapy, filed Aug. 23, 1999; Application No. 09 / 823,746, entitled "Production and use of novel peptide-based agents for use with bi-specific antibodies," 2001.4.3. US Provisional Application No. 60 / 361,037 (named "Bispecific antibody point mutations for enhancing rate of clearance" filed on March 31, 2003); and PCT application published by Hansen et al. WO99 / 66951 (named: "Use of bi-specific antibodies for pre-targeting diagnosis and therapy", all of which are incorporated by reference in their entirety, which are bispecific antibody constructs that may or may be used in complementary sqkf primary target preparations. And methods for preparing these primary target formulation constructs. Targeting agents described in other documents cited in the art can be used or improved for use in the present invention, for example by identifying that the binding agent has a binding moiety such that the target agent is bispecific. And a target that is capable of binding to either or both of the targetable constructs Examples of primary target agents using antibody binding to the target binding moiety and biotin or avidin / streptavidin to the targetable construct binding moiety US Patent No. 5,525,338 (named "Detection and Therapy of Lesions with Biotin / Avidin Congjugates"). Techniques for biotin and avidin / streptavidin conjugates for antibodies and other species are known in the art. See, eg, literature cited in the background: US Pat. No. 5,846,741 to Griffith et al .; U.S. Patent No. 5,965,115 to Griffith et al. And U.S. Patent No. 6,120,768 to Griffith et al., Which are incorporated by reference in their entirety.

본 발명의 일차 표적 제제에서, 원하는 표적에 결합되는 표적 제제 부분이 선택되며 따라서 필요한 특정 결합이 가능한 임의의 부분일 수 있다. 이러한 부분은 예를 들어 수용체 리간드 및 이들 리간드 유사체 또는 표적을 인식하고 결합하는 항체 또는 항체 단편을 포함한다. 특히 바람직하게는 표적 결합 부분 또는 부분들의 친화도가 높아서, 표적가능한 구조체 및 제거제와 복합체을 형성할 때에도 표적에 안정되게 결합되는 것을 유지한다. 바람직하게는 표적 에피토프에 동시에 부착되는다수의 표적 결합 부분이 있다. 많은 경우, 일차 표적 제제는 동일한 표적 에피토프를 인식하는 2개 이상의 표적 결합 부분을 포함할 것이다. 다수의 표적 결합 부분의 존재로 인해 보다 안정적인 결합 및/또는 대체 표적의 결합이 가능하다. In the primary target formulations of the invention, the portion of the target agent that is bound to the desired target is selected and thus can be any portion capable of the specific binding required. Such moieties include, for example, antibodies or antibody fragments that recognize and bind to receptor ligands and these ligand analogs or targets. Particularly preferably, the affinity of the target binding moiety or moieties is high, maintaining stable binding to the target even when forming a complex with the targetable construct and the scavenger. Preferably there are multiple target binding moieties that are attached simultaneously to the target epitope. In many cases, the primary target agent will comprise two or more target binding moieties that recognize the same target epitope. The presence of multiple target binding moieties allows for more stable binding and / or binding of alternative targets.

유사하게, 표적가능한 구조체의 부분(일차 표적 제제 결합 부분)에 특이적으로 결합하기 위해 표적가능한 구조체 결합 부분이 선택된다. 일반적으로, 표적가능한 구조체 결합 부분은 항체/부착소 결합쌍과 같은 결합쌍의 일 멤버이다. 사용될 수 있는 다른 결합쌍은 당업자에게 공지되어 있다. Similarly, a targetable construct binding moiety is selected to specifically bind to a portion of the targetable construct (primary target agent binding moiety). Generally, the targetable construct binding moiety is one member of a binding pair, such as an antibody / adhesive binding pair. Other binding pairs that can be used are known to those skilled in the art.

일 배열에서, 일차 표적 제제의 표적 결합 부분은 표적 부위(예: v적 조직 또는 세포형)에 특이적으로 결합하는 IgG와 같은 항체이다. 표적가능한 구조체 결합 부부은 항체 또는 부착소 부분 또는 부분들(예를 들어 하나 이상, 바람직하게는 두 개의 부분들, 예를 들어 항체 결합 팔 또는 scFv 부분들)이다. 결합부분, 예를 들어 scFv는 결합 부위, 예를 들어 표적가능한 구조체상의 부착소에 대해 특이적이다. 이 경우 표적가능한 구조체는 하나 이상, 및 바람직하게는 두 개(이상)의 인식가능한 부착소을 포함한다. 사용될 수 있는 인식가능한 부착소의 예로는 히스타민 숙시닐 글리신(HSG), DTPA 및 플루오레세인 이소티오시아네이트가 있으나 이에 제한되는 것은 아니다. 두개 이상의 표적가능한 구조체 결합 부분이 일차 표적 제제 상에 존재하는 경우, 제제는 이특이성 또는 이가(또는 다가, 예를 들어 삼가, 사가 등)이다. In one arrangement, the target binding moiety of the primary target agent is an antibody such as an IgG that specifically binds to a target site (eg, v tissue or cell type). The targetable construct binding moiety is an antibody or attachment site or parts (eg one or more, preferably two parts, for example antibody binding arm or scFv parts). The binding moiety, eg scFv, is specific for the binding site, eg, attachment point on the targetable construct. In this case the targetable construct comprises one or more and preferably two (or more) recognizable attachments. Examples of recognizable attachments that may be used include, but are not limited to, histamine succinyl glycine (HSG), DTPA and fluorescein isothiocyanate. When two or more targetable construct binding moieties are present on the primary target agent, the agent is bispecific or divalent (or multivalent, eg trivalent, saga, etc.).

상기에서 지적한 바와 같이, 표적에 대한 일차 표적 제제의 결합은 또한 다중 결합 부위를 포함함으로써 향상될 수 있다. 일부 경우, 완전 IgG 항체가 사용되어 2개의 결합 팔을 제고하거나 2개 이상의 결합부위가 연결된다. 부가 결합 부분, 예를들어 부가 항체 또는 단편은 동일 또는 상이한 에피토프를 인식할 수 있다. 이러한 다중 결합 부분은 적절한 거리 및 유연성을 갖고 연결되어, 다중 결합 부위가 결합될 수 있다. As noted above, the binding of the primary target agent to the target can also be enhanced by including multiple binding sites. In some cases, complete IgG antibodies are used to enhance two binding arms or to link two or more binding sites. Additional binding moieties, such as additional antibodies or fragments, may recognize the same or different epitopes. These multiple binding moieties can be linked with appropriate distance and flexibility so that multiple binding sites can be joined.

따라서, 표적가능한 구조체에 반응하고, 부분, 예를 들어 완전 항체 또는 scFv 부분을 포함하는 이특이성 항체 구조체를 사용함으로써, 다양한 치료 및 진단 용도가 각 용도에 신규 bsAb이 생성 없이도 수행될 수 있다. Thus, by using bispecific antibody constructs that respond to targetable constructs and include portions, eg, complete antibodies or scFv moieties, various therapeutic and diagnostic uses can be performed without producing new bsAbs for each use.

이특이성 일차 표적 제제의 예가 hMN14-m679에 나타나 있다. HMN14은 인간화된 항-CEA이다. m679 부분은 뮤린의 항-HSG이다. 이 구조체는 미국출원 제09/823,746호 (2001.4.3 출원) 및 샤키, 맥브라이드, 카라케이, 장, 그리피스, 한센 및 골든베르그(Sharkey, McBride, Karacay, Chang, Griffiths, Hansen and Goldenberg)의 "Universal Pre-targetting System for Cancer Detection and Therapy Using Bispecific Antibody", Cancer Research 63:354-363(2003)에 상세히 기술되어 있다. 이 제제는 제제의 m679부분과 HSG 부분이 결합하는 식으로, HSG 부분을 함유하는 표적가능한 구조체와 함께 사용될 수 있다. 다음으로 표적가능한 구조체 상의 제거제 결합 부분은 In-DTPA와 같은 직교 부착소일 수 있으며, 제거제는 항-In-DTPA 결합 부분을 포함할 수 있다. hMN14-h679 삼가, 삼특이성 융합 단백질의 예가 미국 가출원 제60/464,532호(2003.4.22출원)에 기술되어 있으며, 그 내용이 참조문헌으로 포함된다. 이 형태의 일차 표적 제제의 예가 도 1-5에 도식적으로 도시되어 있다. 유사한 일차 표적 제제가 도 7-9에 도식적으로 도시되어 있다. Examples of bispecific primary target agents are shown in hMN14-m679. HMN14 is a humanized anti-CEA. The m679 portion is the anti-HSG of murine. This structure is described in U.S. Application No. 09 / 823,746 (filed April 4, 2001) and in "Universal" by Sharkey, McBride, Karakay, Jean, Griffith, Hansen and Goldenberg (Sharkey, McBride, Karacay, Chang, Griffiths, Hansen and Goldenberg). Pre-targetting System for Cancer Detection and Therapy Using Bispecific Antibody, "Cancer Research 63: 354-363 (2003). This formulation can be used with a targetable construct containing an HSG moiety such that the m679 moiety and the HSG moiety of the formulation bind. The remover binding moiety on the targetable construct may then be an orthogonal attachment such as In-DTPA, and the remover may comprise an anti-In-DTPA binding moiety. Examples of hMN14-h679 trivalent, trispecific fusion proteins are described in US Provisional Application No. 60 / 464,532 (filed Feb. 22, 2000), the contents of which are incorporated by reference. Examples of primary targeting agents of this type are shown schematically in FIGS. 1-5. Similar primary target agents are shown schematically in FIGS. 7-9.

사용될 수 있는 구조체의 다른 예는 hNM14-734scFv(hMN14-m734 및734 항체로부터 유래하는 항체 단편에 연결된 hMN14를 갖는 다른 제제 또한 사용될 수 있음)로서 표시되며, 그 제법 및 구조가 PCT 출원 공개 WO99/66951호에 기술되어 있다. 상기와 같이, hMN14는 인간화된 항-CEA 항체이고, 734scFv는 항-In-DTPA (DTPA와 복합체화된 인듐)이다. 이 제제는 In-DTPA 부분을 함유하는 표적가능한 구조체와 함께 사용될 수 있다. 이어서 표적가능한 구조체 상의 제거제 결합 부분은 HSC와 같은 직교 헵탄일 수 있으며, 따라서 제거제는 항-HSG 결합 부분을 포함할 수 있다. Other examples of constructs that can be used are represented as hNM14-734scFv (other agents with hMN14 linked to antibody fragments derived from hMN14-m734 and 734 antibodies can also be used), the preparation and structure of which are disclosed in PCT Application WO99 / 66951. Described in the heading. As above, hMN14 is a humanized anti-CEA antibody and 734scFv is anti-In-DTPA (indium complexed with DTPA). This agent may be used with a targetable construct containing an In-DTPA moiety. The remover binding moiety on the targetable construct may then be orthogonal heptane, such as HSC, and thus the remover may comprise an anti-HSG binding moiety.

IV. IV. 표적가능한Targetable 구조체 Structure

상기에서 기술한 바와 같이, 표적가능한 구조체는 활성종을 운반하거나 또는 "적재"한다. 여기서 기술하는 일반적 표적 수송 방법에서는, 표적가능한 구조체는 일차 표적 제제에 결합하여 활성종을 국소화시키고, 제거제와 결합하여 별개 표적-결합된 표적가능한 구조체를 가교시켜, 결합되지 않은 구조체를 제거한다. As described above, the targetable construct carries or "loads" the active species. In the general target transport methods described herein, the targetable construct binds to the primary target agent to localize the active species and binds to the scavenger to crosslink the separate target-bound targetable construct to remove the unbound construct.

표적가능한 구조체는 일차 표적 제제 및 제거제 양쪽 모두를 결합할 수 있는 어떠한 배열로도 구성될 수 있다. 통상, 표적가능한 구조체는 펩티드 스캐폴드를 기본으로 할 수 있으나, 탄수화물과 같은 다른 화학식도 사용될 수 있다. 또한 구조체는 일차 표적 제제 및 제거제에 결합되며, 표적가능한 구조체 또한 2개 이상의 직교 결합 부분을 포함한다. 일반적으로, 이들 결합 부분들은 항체 또는 부착소과 같이 특정 결합쌍의 멤버이다. 바람직하게는, 구조체가 두개 이상의 직교 부착소을 포함하며, 그중 하나는 일차 표적 제제와 결합하고 나머지는 제거제와 결합한다. 이러한 부착소으로는 킬레이터 또는 금속-킬레이트 복합체이 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 비제한적 예로서, 킬레이터는 굳은산 양이온에 대한 굳은염기 킬레이터 이며 킬레이터중 하나 이상이 무른산 양이온에 대한 무른염기 킬레이터이거나; 또는 카르복실레이트 및 아민기를 포함하는 굳은염기 킬레이터일 수 있다. 굳은 염기 킬레이터의 비제한적 예에는 DTPA(diethylenetriaminepentaacetic acid), NOTA(1,4,7-triaza-cyclononane-N,N',N"-triacetic acid), DOTA(1,4,7.10-tetraazacyclotetradecane-N,N',N",N"'-tetraacetic acid) 및 TETA(tetraazacyclotetradecane-N,N',N",N"'-tetraacetic acid)가 있다. The targetable construct can be constructed in any arrangement capable of binding both the primary target agent and the scavenger. Typically, the targetable construct may be based on a peptide scaffold, but other formulas such as carbohydrates may also be used. The construct is also bound to the primary target agent and the scavenger, and the targetable construct also includes two or more orthogonal binding moieties. In general, these binding moieties are members of a specific binding pair, such as an antibody or an attachment. Preferably, the construct comprises two or more orthogonal attachments, one of which binds to the primary target agent and the other to the remover. Such attachments include, but are not limited to, chelators or metal-chelate complexes. By way of non-limiting example, the chelator is a solid base chelator for a cation acid cation and at least one of the chelators is a soft base chelator for a cation acid cation; Or a solid base chelator comprising a carboxylate and an amine group. Non-limiting examples of solid base chelators include diethylenetriaminepentaacetic acid (DTPA), NOTA (1,4,7-triaza-cyclononane-N, N ', N "-triacetic acid), DOTA (1,4,7.10-tetraazacyclotetradecane-N , N ', N ", N"'-tetraacetic acid) and TETA (tetraazacyclotetradecane-N, N ', N ", N"'-tetraacetic acid).

바람직하게는 표적가능한 구조체는 일차 표적제제와 결합하도록 선택된 2개 이상의 결합 부분, 예를 들어 2개 이상의 합켄을 포함한다. 이러한 다중 결합 부분은 동일하거나 상이할 수 있다. 구성의 단순화를 위해 동일한 것이 바람직하다. Preferably the targetable construct comprises two or more binding moieties selected to bind the primary targeting agent, for example two or more hapken. These multiple binding moieties may be the same or different. The same is preferred for simplicity of configuration.

표적가능한 구조체는 또한 제거제와 결합하도록 선택된 하나 이상의 결합 부분을 포함한다. 바람직한 구현예에서, 하나의 이러한 제거제 결합 부분이 있다. 본 방법에서는 표적가능한 구조체를 표적 부위에 "록킹"시키기 위해 별개의 표적가능한 구조체 분자를 가교시키는 것이 바람직하다. 따라서, 표적가능한 구조체는 대응되는 제거제가 표적가능한 구조체 결합 부분을 갖는 갯수보다는 적은 수의 제거제 결합 부분을 가져야 한다. 예르 f들어, 만일 제거제가 표적가능한 구조체와 결합하는 2개의 부분을 가지면, 표적가능한 구조체는 제거제게 결합되는 부분이 하나여서, 제거제 상의 두번째 결합 부분이 별개 표적가능한 구조체에 결합될 수 있도록 하여야 한다. The targetable construct also includes one or more binding moieties selected to bind with the scavenger. In a preferred embodiment, there is one such remover binding moiety. In the present method, it is desirable to crosslink separate targetable construct molecules to "lock" the targetable construct to the target site. Thus, the targetable construct should have fewer than the number of remover binding moieties than the number of corresponding remover having the targetable construct binding moiety. For example, if the remover has two moieties that bind to the targetable construct, the targetable construct must be one moiety that binds to the remover so that the second binding moiety on the remover can bind to a separate targetable construct.

표적가능한 구조체는 질병 조직의 치료 및 동정에 유용한 다양한 제제에 컨쥬게이트될 수 있다. 컨쥬게이트 제제의 예에는 킬레이터, 금속 킬레이트 복합체, 방사성핵종, 약물, 독소(예; 리신, 아브린, 스타필로코칼 외독소-A, 포크위드 항바이러스 단백질, 젤로닌, 디프테리아 독소, 슈도모나스 외독소, 슈도모나스 내독소) 및 사이토카인, 림포카인, 올리고뉴클레오티드, 키모카인, 면역조절제, 효소, 방사성감작제, 아스파라기나제, RNAase, DNAase, 수용체 표적 제제와 같은 다른 효과기 분자들이 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 또한, 프로드럭을 활성화시키거나 약물의 표적-특이적 독성을 증가시키는데 유용한 효소는 표적가능한 구조체에 컨쥬게이트 될 수 있다. 부착될 수 있는 특이적 부분의 많은 예들이 여기 기술된다. Targetable constructs may be conjugated to various agents useful for the treatment and identification of diseased tissue. Examples of conjugate preparations include chelators, metal chelate complexes, radionuclides, drugs, toxins (e.g. lysine, avrine, staphylococcal exotoxin-A, forkweed antiviral protein, gelonin, diphtheria toxin, pseudomonas exotoxin, pseudomonas Endotoxins) and other effector molecules such as, but not limited to, cytokines, lymphokines, oligonucleotides, chemokines, immunomodulators, enzymes, radiosensitizers, asparaginases, RNAase, DNAase, receptor targeting agents . In addition, enzymes useful for activating prodrugs or increasing the target-specific toxicity of a drug can be conjugated to a targetable construct. Many examples of specific moieties that can be attached are described herein.

1. 펩티드/부착소 구조체1. Peptide / Adhesive Constructs

상기에서 지적한 바와 같이, 표적가능한 구조체는 각종 구조로 구성될 수 있다. 그러나, 항체 결합에 참여하도록 설계된 구조체에서, 구조는 충분히 단단한 결합 뿐만 아니라 신속한 생체내 제거가 될 수 있도록 선택되는 것이 바람직하다. 많은 구현예에서, 펩티드 기본 구조가 사용되며, 보통 항체 결합을 위해 제공되는 부착소과 함께 사용된다. 제거제를 결합시키는 직교 결합 부분을 개재시킴으로써 본 발명에 적합한 표적가능한 구조체의 예들이 미국출원 제09/337,756호(1999.6.22 출원) 및 미국출원 제09/823,746호(2001.4.3 출원)에 기술되어 있으며, 이들 내용을 참고문헌으로 포함한다. 본 발명에 사용될 수 있게 개량될 수 있는 다른 표적가능한 구조체들이 예비표적화 방법과 관련하여 배경기술에서 인용한 다른 문헌들에 기술되어 있다. 일반적으로, 본 발명에서 표적가능한 구조체는 하나 이상 및 바람직하게는 다수의 일차 표적 제제 결합 부분 및 하나 이상의 제거제 결합 부분을 포함하고, 일차 표적 제제 결합 부분 및 제거제 결합 부분이 직교하는 표적가능한 구조체를 함유하여야 한다. 물론, 개별 결합 기능을 제공하는 부분은 특정 시스템에 사용되도록 선택된 특정 일차 표적 제제 및 제거제에 따라 달라진다. As pointed out above, the targetable construct may consist of a variety of constructs. However, in constructs designed to participate in antibody binding, the structure is preferably selected to allow for fast in vivo removal as well as sufficiently tight binding. In many embodiments, peptide base structures are used, usually in conjunction with attachments provided for antibody binding. Examples of targetable structures suitable for the present invention by intersecting orthogonal binding moieties that bind the scavenger are described in US Application Ser. No. 09 / 337,756 (filed on June 2, 1999) and US Application Ser. No. 09 / 823,746 (applied on March 4, 2001). The contents of which are incorporated by reference. Other targetable constructs that can be improved for use in the present invention are described in other documents cited in the background with respect to pretargeting methods. In general, a targetable construct in the present invention comprises at least one and preferably a plurality of primary target agent binding moieties and at least one scavenger binding moiety, wherein the primary target agent binding moiety and the scavenger binding moiety are orthogonal to each other. shall. Of course, the portion that provides the individual binding function depends on the particular primary target agent and eliminator selected for use in the particular system.

표적가능한 구조체가 보통 항체와 결합하기 위한 직교부착소을 두개 이상 포함하는 반면, 일부 경우에서는 표적가능한 구조체의 일부에 직접적으로 대항하는 면역 반응을 이끌어내는 것이 바람직하다. 일반적으로, 신속한 생체내 제거를 위해서는 친수성 제제가 바람직한 반면, 강한 면역 반응을 이끌어내기 위해서는 소수성 제제가 최상이며, 따라서 친수성 및 소수성간의 균형이 이루어져야 한다. 이는, 많은 유기 부분의 고유 소수성을 상쇄시키는 친수성 킬레이트제를 사용함으로써 부분적으로 달성될 수 있다. 또한, 상반되는 용해 특성을 갖는 표적가능한 구조체의 서브-유니트들, 예를 들어 일부는 소수성이고 일부는 친수성인 아미노산을 함유하는 펩티드들을 선택할 수도 있다. 펩티드 대신에, 탄수화물, 바람직하게는 2 내지 6개의 당 유니트의 탄수화물쇄가 사용될 수 있다. 덱스트란과 같은 고분자 탄수화물 역시 사용될 수 있다. While the targetable construct usually contains two or more orthogonal attachments for binding to the antibody, it is desirable in some cases to elicit an immune response that is directed against a portion of the targetable construct. Generally, hydrophilic agents are preferred for rapid in vivo removal, while hydrophobic agents are best for eliciting a strong immune response, and therefore a balance between hydrophilicity and hydrophobicity must be achieved. This can be achieved in part by using hydrophilic chelating agents that counteract the inherent hydrophobicity of many organic moieties. It is also possible to select sub-units of targetable constructs with opposite dissolution properties, eg, peptides containing amino acids, some of which are hydrophobic and some of which are hydrophilic. Instead of peptides, carbohydrates, preferably carbohydrate chains of 2 to 6 sugar units can be used. Polymeric carbohydrates such as dextran may also be used.

만일 킬레이팅제와 같은 다른 부분에 결합되면, 2개 정도의 아미노산 잔기, 바람직하게는 2개 내지 10개의 잔기를 갖는 펩티드가 사용될 수 있다. 링커는 바람직하게는 저분자량 컨쥬게이트로서, 바람직하게는 킬레이트 내의 금속 이온을 포함하여, 분자량이 50,000 달톤 미만이며, 더 바람직하기로는 20,000 달톤, 10,000 달톤 또는 5,000 달톤이다. 예를 들어, 공지의 펩티드 DTPA-Tyr-Lys(DTPA)-OH (여기서 DTPA는 디에틸렌트리아민펜타아세트산임)는 분자의 인듐-DTPA 부분에 대한 항체를 생성하는데 사용되어 왔다. 그러나, 비-인듐-함유 분자를 사용하고 적절한 스크리닝단계를 거쳐 티로실-리신 디펩티드에 대한 새로운 항체가 제조될 수 있다. If bound to other moieties such as chelating agents, peptides with about two amino acid residues, preferably two to ten residues, may be used. The linker is preferably a low molecular weight conjugate, preferably comprising a metal ion in the chelate, having a molecular weight of less than 50,000 Daltons, more preferably 20,000 Daltons, 10,000 Daltons or 5,000 Daltons. For example, the known peptide DTPA-Tyr-Lys (DTPA) -OH (where DTPA is diethylenetriaminepentaacetic acid) has been used to generate antibodies against the indium-DTPA portion of the molecule. However, new antibodies to tyrosyl-lysine dipeptides can be prepared using non-indium-containing molecules and undergoing appropriate screening steps.

보통, 펩티드는 In-DTPA 및 HSG (여기서 HSG는 하기 식중 히스타민 숙시닐 글리실기임)와 같이 결합 부착소 부분을 포함한다. Usually, peptides comprise a binding attachment moiety such as In-DTPA and HSG, where HSG is a histamine succinyl glycyl group in the formula below.

5. 1차 표적 제제: bsAb(표적 결합 항체 부분 2개 & 표적가능한 구성체 부착소 결합 항체 부분 2개);5. Primary Targeting Agents: bsAb (2 target binding antibody moieties & 2 targetable construct attachment binding antibody moieties);

표적가능한 구성체: 2개의 직교 부착소(1차 표적 제제상의 부착소-결합 항체에 의해 인식되는 항체 복제물 2개 & 제거제 상의 부착소-결합 항체에 의해 인식되는 다른 부분) & 치료 또는 진단용 부분을 기본 골격으로 하는 펩티드;Targetable constructs: based on two orthogonal attachments (two antibody replicas recognized by an attachment-binding antibody on the primary target formulation & another portion recognized by an attachment-binding antibody on the remover) & a therapeutic or diagnostic portion Peptides as skeletons;

제거제: 표적가능한 구성체 상의 단일 복제물 부착소 & 내재화제 부분을 인식하는 이가의 항체. Remover: A bivalent antibody that recognizes a single copy attachment & internalization moiety on a targetable construct.

5. 1차 표적 제제: bsAb(표적 결합 항체 부분 2개 & 표적가능한 구성체 부착소 결합 항체 부분 2개);5. Primary Targeting Agents: bsAb (2 target binding antibody moieties & 2 targetable construct attachment binding antibody moieties);

표적가능한 구성체: 2개의 직교 부착소(1차 표적 제제상의 부착소-결합 항체에 의해 인식되는 항체 복제물 2개 & 제거제 상의 부착소-결합 항체에 의해 인식되는 다른 부분) & 치료 또는 진단용 부분을 기본 골격으로 하는 펩티드;Targetable constructs: based on two orthogonal attachments (two antibody replicas recognized by an attachment-binding antibody on the primary target formulation & another portion recognized by an attachment-binding antibody on the remover) & a therapeutic or diagnostic portion Peptides as skeletons;

제거제: 표적가능한 구성체 상의 단일 복제물 부착소 & 내재화제 부분을 인식하는 이가의 항체. Remover: A bivalent antibody that recognizes a single copy attachment & internalization moiety on a targetable construct.

면원원으로 사용되는 펩티드는 고상 지지체 및 반복 직교 탈보호화 및 커플링에 대한 표준 기법을 사용하여 자동 펩티드 합성제 상에서 편리하게 합성될 수 있다. 이후 킬레이트 컨쥬게이션에 사용될 수 있는 펩티드내 유리 아미노기들은 아세틸기와 같은 표준 보호기에 의해 차폐되는 것이 유리하다. 이러한 보호기는 당업자에게 공지되어 있다 그린 및 웃츠(Greene and Wuts)의 Protective Groups in Organic Synethesis, 1999 (John Wiley and Sons, N.Y.) 참조. 본 발명에 사용하기 위해 상기 펩티드가 제조될 때, 이들이 수지로부터 분리되어 대응 C-말단 아미드를 생성하여, 생체네 카르복시펩티다아제 활성을 억제하는 것이 바람직하다. Peptides used as surface sources can be conveniently synthesized on an automated peptide synthesizer using standard techniques for solid phase support and repeated orthogonal deprotection and coupling. Free amino groups in the peptide that can then be used for chelate conjugation are advantageously masked by standard protecting groups such as acetyl groups. Such protecting groups are known to those skilled in the art. See Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synethesis, 1999 (John Wiley and Sons, N.Y.). When the peptides are prepared for use in the present invention, it is preferred that they are separated from the resin to produce the corresponding C-terminal amides, thereby inhibiting biocine carboxypeptidase activity.

2. 킬레이트 부분들2. Chelate Parts

링커 부분에 킬레이트 부분의 존재로 인해 여러가지 다른 기능들이 제공된다. 친수성 킬레이트 부분들은 신속한 생체내 제거를 보증한다. 친수성 이외에, 금속-결합 특성에 따라, 킬레이터를 선택한다. 이러한 금속 킬레이트 조합으로 인해 치료 또는 진단 금속 동위원소를 개재시키고, 또한 적어도 일부 경우에는 단단한 결합 항체가 개발될 수 있는 부착소 부분을 제공한다. The presence of the chelate portion in the linker portion provides several other functions. Hydrophilic chelate moieties ensure rapid in vivo removal. In addition to hydrophilicity, depending on the metal-binding properties, chelators are selected. Such metal chelate combinations result in intercalation of therapeutic or diagnostic metal isotopes, and at least in some cases provide attachment sites where solid binding antibodies can be developed.

유용한 금속-킬레이트 조합의 예로는 방사성-영상 및 RAIT의 ⁴⁷Sc, ⁵²Fe, ⁵⁵Co, ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ¹¹¹In, ⁸⁹Zr, ⁹⁰Y, ¹⁶¹Tb, ¹⁷⁷Lu, ²¹²Bi 및 ²²⁵Ac와 함께 사용되는 2-벤질-DTPA 및 그 모노메틸 및 사이클로헥실 유사체가 있다. Mn, Fe 및 Gd와 같은 비-방사성활성 금속과 복합체을 형성할 때 동일한 킬레이터가 본 발명의 변형 bsAb와 함께 사용될 때, MRI에 사용될 수 있다. NOTA(1,4,-triaza-cyclononane-N,N',N"-triacetic acid), DOTA 및 TETA(p-bromoacetamido-benzyl-tetraethylaminetetraacetic acid)와 같은 거대고리 킬레이터가 다양한 금속 및 방사성금속, 특히 Ga, Y 및 Cu의 방사성핵종과 함께 사용된다. Examples of useful metal-chelate combinations include ⁴⁷ Sc, ⁵² Fe, ⁵⁵ Co, ⁶⁷ Ga, ⁶⁸ Ga, ¹¹¹ In, ⁸⁹ Zr, ⁹⁰ Y, ¹⁶¹ Tb, ¹⁷⁷ Lu, ²¹² Bi and ²²⁵ Ac of radio-imaging and RAIT. 2-benzyl-DTPA and its monomethyl and cyclohexyl analogs used together. The same chelator can be used in MRI when used with the modified bsAb of the present invention when forming complexes with non-radioactive metals such as Mn, Fe and Gd. Macrocyclic chelators such as NOTA (1,4, -triaza-cyclononane-N, N ', N "-triacetic acid), DOTA, and TETA (p-bromoacetamido-benzyl-tetraethylaminetetraacetic acid) are widely used in various metals and radiometals, especially Used with radionuclides of Ga, Y and Cu.

DTPA 및 DOTA-형 킬레이터는 리간드가 카르복실레이트 또는 아민기와 같은 굳은 염기 킬레이팅 기능을 포함하며, 굳은산 양이온, 특히 IIa족 및 IIIa족 금속 양이온을 킬레이팅 시키는데 가장 유효하다. 이러한 금속-킬레이트 복합체은 고리 크기를 관심 금속에 맞게 함으로써 안정화시킬 수 있다. 거대고리 폴리에테르와 같은 다른 고리형 킬레이터는 RAIT용 ²²³RA와 같은 핵종을 안정하게 결합하는데 유용하다. 포르피린 킬레이터는 각종 방사성금속과 함께 사용될 수 있으며, bsAb 관련 면역 광치료에 사용될 수 있는 소정의 차가운 금속 복합체로서 유용하다. 하나 이상의 킬레이터 형태가 담체와 컨쥬게이트되어 다중 금속이온, 예를 들어 냉이온, 진단 방사성핵종 및/또는 치료 방사성핵종을 결합한다. 특히 유용한 치료 방사성핵종에는 ³²P, ³³P, ⁴⁷Sc, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁹⁰Y, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁵³Sm, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ²¹²Pb, ²¹²Bi, ²¹³Bi, ²¹¹At, ²²³Ra 및 ²²⁵Ac가 있으나 이에 제한되지는 않는다. 특히 유용한 진단 방사성핵종에는 ¹⁸F, ⁴⁵Ti, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁸⁶Y, ⁸⁹Zr, ^{94 m}Tc, ⁹⁴Tc, ^{99 m}Tc, ¹¹¹In, ¹²³I, ¹²⁴I, ¹²⁵I, ¹³¹I, ^154-158Gd 및 ¹⁷⁵Lu가 있으나, 이에 제한되지는 않는다. DTPA and DOTA-type chelators have a solid base chelating function such that the ligand is a carboxylate or amine group, and is most effective for chelating hard acid cations, especially Group IIa and Group IIIa metal cations. Such metal-chelate complexes can be stabilized by tailoring the ring size to the metal of interest. Other cyclic chelators such as macrocyclic polyethers are useful for stably binding nuclides such as ²²³ RA for RAIT. Porphyrin chelators can be used with various radiometals and are useful as certain cold metal complexes that can be used for bsAb related immunophototherapy. One or more chelator forms are conjugated with a carrier to bind multiple metal ions such as cold ions, diagnostic radionuclides and / or therapeutic radionuclides. Particularly useful therapeutic radionuclides include ³² P, ³³ P, ⁴⁷ Sc, ⁶⁴ Cu, ⁶⁷ Cu, ⁶⁷ Ga, ⁹⁰ Y, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁵³ Sm, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy , ¹⁶⁶ Ho, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re, ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ²¹² Pb, ²¹² Bi, ²¹³ Bi, ²¹¹ At, ²²³ Ra, and ²²⁵ Ac. Particularly useful diagnostic radionuclides include ¹⁸ F, ⁴⁵ Ti, ⁶⁴ Cu, ⁶⁷ Cu, ⁶⁷ Ga, ⁸⁶ Y, ⁸⁹ Zr, ^{94 m} Tc, ⁹⁴ Tc, ^{99 m} Tc, ¹¹¹ In, ¹²³ I, ¹²⁴ I, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ^154-158 Gd and ¹⁷⁵ Lu, but are not limited to these.

미국특허 제5,753,206호에 개시된 것과 같은 킬레이터, 특히 Tscg-Cys(thiosemicarbazonylglyoxylcysteine) 및 Tsca-Cys(thiosemicarbazinyl-acetylcysteine) 킬레이터는 무른염기 리간드, 특히 황- 또는 인산-함유 리간드에 단단하게 결합되는 Tc, Re, Bi 및 다른 전이금속, 란탄계금속 및 악틴계금속의 무른산 양이온을 결합하는데 유리하게 사용된다. 한 종류 이상의 킬레이터를 펩티드에 연결하는 것, 예를 들어 In(III)양이온 용 DTPA 또는 유사한 킬레이터 및 Tc 양이온용 티올-함유 킬레이터, 예를 들어 Tscg-Cys이 유용할 수 있다. di-DTPA 부착소에 대한 항체는 공지되어 있고(바르벳(Barbet), 미국특허 제5,256,395호) 표적 항체에 쉽게 연결되어 bsAb를 형성하기 때문에, 방사성동위원소를 표적화하기 위해 예비표적화 프로토콜에서, 방사성 동위원소를 결합시키는데, 냉 diDTPA 킬레이터 및 다른 킬레이터와 함께 펩티드 부착소을 사용하는 것이 가능하다. 이러한 펩티드의 일예가 Ac-Lys(DTPA)-Tyr-Lys(DTPA)-Lys(Tscg-Cys-)-NH₂이다. 이 펩티드는 In(III)에 예비적재된 후 99-m-Tc 양이온으로 표지화되고, In(III) 이온은 티올-함유 Tscg-Cys에 우선적으로 결합되어 있는 DTPA 및 Tc 양이온에 의해 우선적으로 킬레이트된다. NOTA, DOTA, TETA 등과 같은 다른 굳은산 킬레이터가 DTPA기를 대체할 수 있으며, 이들에 특이적인 단클론항체들이 항-di-DTPA 단클론항체를 생성하는데 사용되는 유사 기법을 사용하여 제조될 수 있다. Chelating agents, such as those disclosed in U.S. Pat. It is advantageously used to bind the Murnic acid cations of Re, Bi and other transition metals, lanthanide metals and actin metals. Linking one or more chelators to a peptide may be useful, for example DTPA for In (III) cations or similar chelators and thiol-containing chelators for Tc cations such as Tscg-Cys. Antibodies to di-DTPA attachments are known (Barbet, U.S. Pat. No. 5,256,395) and are readily linked to target antibodies to form bsAbs, thus, in a pretargeting protocol to target radioisotopes, radioactive To bind isotopes, it is possible to use peptide attachments with cold diDTPA chelators and other chelators. One example of such a peptide is Ac-Lys (DTPA) -Tyr-Lys (DTPA) -Lys (Tscg-Cys-)-NH ₂ . This peptide is preloaded with In (III) and labeled with 99-m-Tc cations, and the In (III) ions are preferentially chelated by DTPA and Tc cations preferentially bound to thiol-containing Tscg-Cys . Other callous chelators such as NOTA, DOTA, TETA, etc. can replace DTPA groups, and monoclonal antibodies specific to them can be prepared using similar techniques used to generate anti-di-DTPA monoclonal antibodies.

예를 들어 상이한 킬레이트 고리 크기를 갖는, 두개의 상이한 굳은산 또는 무른산 킬레이터들이 링커에 개재되어, 양이온의 크기, 킬레이트 고리의 구조 및 양이온의 바람직한 복합체 이온 구조이 상이함으로 인해 두개의 상이한 굳은산 또는 무른산 양이온에 우선적으로 결합할 수 있다. 이로써, 예비표적화된 일차 표적 제제에 의해 궁극적 포획을 위해 두개의 상이한 금속(이들 중 하나는 방사성활성이거나 MRI 향상에 유용함)이 링커에 개재될 수 있다. For example, two different hard acid or murnic acid chelators, having different chelate ring sizes, are interposed in a linker such that two different hard acids or cations may differ due to the different sizes of cations, the structure of the chelate ring, and the preferred complex ion structure of the cations. It may preferentially bind to the Murion acid cation. As such, two different metals, one of which is radioactive or useful for MRI enhancement, may be intercalated in the linker for ultimate capture by the pretargeted primary target agent.

킬레이터 NOTA, DOTA 및 Tscg는 이하의 구조에서 예시하는 것과 같은 킬레이터-펩티드 컨쥬게이트 모티프 내에 개재되어 왔다. The chelators NOTA, DOTA and Tscg have been intervened in chelator-peptide conjugate motifs as illustrated in the structures below.

(a) DOTA-Phe-Lys(HSG)-D-Tyr-Lys(HSG)-NH₂;(a) DOTA-Phe-Lys (HSG) -D-Tyr-Lys (HSG) -NH ₂ ;

(b) DOTA-Phe-Lys(HSG)-Tyr-Lys(HSG)-NH₂;(b) DOTA-Phe-Lys (HSG) -Tyr-Lys (HSG) -NH ₂ ;

(c) Ac-Lys(HSG)D-Tyr-Lys(HSG)-Lys(Tscg-Cys)-NH₂;(c) Ac-Lys (HSG) D-Tyr-Lys (HSG) -Lys (Tscg-Cys) -NH ₂ ;

(d) (d)

및

And

(e)(e)

상기 킬레이터-펩티드 접합체 (d) 및 (e)는 ⁶⁸Ga와 결합하는 것을 보여줘왔고 따라서 양전자 방출 단층촬영(PET)에서 유용하다.The chelator-peptide conjugates (d) and (e) have been shown to bind with ⁶⁸ Ga and are therefore useful in positron emission tomography (PET).

킬레이터들은 하기 실시되는 예에서 더 완전하게 논의되는 표준 화학을 사용하여 연결자 일부분에 짝지어진다. 간단하게, Ac-Lys(HSG)D-Tyr-Lys(HSG)-Lys(Tscg-Cys)-NH₂의 합성은 펩티드 합성기에서 링크 아미드 레진에 Aloc-Lys(Fmoc)-OH를 처음 붙이는 것에 의해 달성되었다. 보호 그룹의 약어 "Aloc" 및 "Fmoc"는 여기에서 그룹 알릴옥시카르보닐 및 플루오레닐메틸옥시 카르보닐을 언급하는 것으로 사용되었다. 그 후 Fmoc-Cys(Trt)-OH 및 TscG는 다음의 펩티드를 형성하기 위하여 표준 Fmoc 자동 합성 프로토콜을 사용하여 라이신의 곁 사슬에 더해졌다; Aloc-Lys(Tscg-Cys(Tet)-rink resin. Aloc 그룹이 그 뒤 제거되었다. 펩티드 합성은 그 후 다음 펩티드를 만들기 위하여 합성기에서 계속적되었다; (Lys(Aloc)-D-Tyr-Lys(Aloc)-Lys(Tscg-Cys(Trt)-)-rink resin. N-말단 아실레이션을 따라 곁 사슬 Aloc 보호 그룹의 제거. 결과 펩티드는 그 뒤 카이저(Kaiser) 테스트를 사용하여 레진이 아민에 대하여 음성 테스트를 줄 때까지 활성화된 N-Trityl-HSG-OH로 처리된다. Karacay et al. Bioconjugate Chem, 11:842-854 (2000)을 보라. DOTA-Phe-Lys(HSG)-D-Tyr-Lys(HSG)-NH₂의 합성 뿐만 아니라 Ac-Lys(HSG)D-Tyr-Lys(HSG)-Lys(Tscg-Cys)-NH₂ 및 DOTA-Phe-Lys(HSG)-Tyr-Lys(HSG)-NH₂의 합성 또한 하기에서 더 자세하게 설명된다.Chelaters are paired to the linker portion using standard chemistry, which is discussed more fully in the examples given below. In brief, the synthesis of Ac-Lys (HSG) D-Tyr-Lys (HSG) -Lys (Tscg-Cys) -NH ₂ is achieved by first attaching Aloc-Lys (Fmoc) -OH to the link amide resin in a peptide synthesizer. Was achieved. The abbreviations "Aloc" and "Fmoc" of the protecting group have been used herein to refer to the group allyloxycarbonyl and fluorenylmethyloxy carbonyl. Fmoc-Cys (Trt) -OH and TscG were then added to the side chains of lysine using standard Fmoc automated synthesis protocols to form the following peptides; Aloc-Lys (Tscg-Cys (Tet) -rink resin.Aloc group was then removed. Peptide synthesis was then continued in the synthesizer to make the next peptide; (Lys (Aloc) -D-Tyr-Lys (Aloc) ) -Lys (Tscg-Cys (Trt)-)-rink resin.Removal of the side chain Aloc protecting group along the N-terminal acylation.The resulting peptide was then negatively reacted with the resin to the amine using a Kaiser test. Treated with activated N-Trityl-HSG-OH until testing, see Karacay et al. Bioconjugate Chem, 11: 842-854 (2000) DOTA-Phe-Lys (HSG) -D-Tyr-Lys Synthesis of (HSG) -NH ₂ as well as Ac-Lys (HSG) D-Tyr-Lys (HSG) -Lys (Tscg-Cys) -NH ₂ and DOTA-Phe-Lys (HSG) -Tyr-Lys (HSG) The synthesis of -NH ₂ is also described in more detail below.

3. 금속 킬레이트의 일반적 제조방법3. General method of metal chelate

킬레이터-펩티드 접합체는 고체로 오랜 기간 동안 저장될 수 있다. 그들은 금속-결합 반응에 대한 단위량으로 측정되기도 하며 고체, 수용액 또는 반수용성 용액, 냉동된 용액 또는 냉동건조 제제로서 단위량으로 저장될 수 있다. 그들은 공지의 과정으로 표지화될 수 있다. 통상, 굳은산 양이온은 편리한 염의 용액으로서 주입되며 굳은산 킬레이터에 의해, 가능하게는 무른산 킬레이터에 의해 흡유된다. 그러나, 무른산 양이온의 후 첨가는 그 안에서 킬레이트될 수 있는 어떤 굳은산 양이온의 교체로 인해 무른산 양이온에 의한 그것들의 결합을 유발할 수 있다. 예를 들어, 심지어 차가운 ¹¹¹InCl3의 과도한 존재하에서, 주석 염소 및 Na99m-TcO₄와 원위치에서 유발된 99ㅡTc(V) 글루코헵토네이트 또는 Na99m-TcO₄ 로 라벨링하는 것은 양적으로 무른산 킬레이터에서 진행된다. ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ²¹³Bi과 같은 다른 무른산 양이온 및 Mn, Co, Ni, Pb, Cu, Cd, Au, Fe, Ag(일가), Zn 및 Hg의 이가 또는 삼가 양이온, 특히 ⁶⁴Cu 및 ⁶⁷Cu 및 그와 같은 종류의 것들, 방사성면역진단 또는 방사성면역치료에 유용한 것들은 아날로그적인 방법에 의해 연결자 펩티드에 장착될 수 있다. Re 양이온은 또한 페르헤네이드(perrhenate)로부터 원위치에서 유발될 수 있고 주속 이온 또는 예비환원된 레늄 글루코헵토네이트 또는 다른 전이킬레이터가 사용될 수 있다. 페르네이트의 환원이 Tc의 환원에서 필요한 것보다도 더 많은 주석 이온(전형적으로 200μg/mL 최종 농도 이상)을 필요도 하기 때문에 디설파이드-사이클라이즈드 펩티드의 존재와 같은 불안정한 디설파이드 결합을 환원시키지 않는 더 높은 단계의 주석이온을 확보하기 위한 부가적인 처리가 행해지는 거싱 필요하다. 레늄의 방사성라벨링 동안에 비슷한 과정이 Tc-99m과 사용된 것과 같이 사용된다. Tscg-Cys-리간드의 ReO 금속 복합체의 제조하는 바람직한 방법은 ReOCl₃₍P(Ph₃)₂와 펩티드를 반응으로 인하지만 또한 ReO(atheylenediamine)₂와 같은 다른 환원된 종을 사용하는 것도 가능하다. The chelator-peptide conjugate can be stored as a solid for a long time. They can also be measured in unit quantities for metal-bonding reactions and can be stored in unit quantities as a solid, aqueous or semi-aqueous solution, frozen solution or lyophilized formulation. They can be labeled by known procedures. Typically, the callous cation is injected as a solution of a convenient salt and is absorbed by the callous chelator, possibly by the murnic acid chelator. However, the subsequent addition of the Muranic cation can lead to their binding by the Muranic cation due to the replacement of any hard acid cations that can chelate therein. For example, labeling with 99-Tc (V) glucoheptonate or Na99m-TcO ₄ induced in situ with tin chlorine and Na99m-TcO ₄ , even in the excessive presence of cold ¹¹¹ InCl ₃ , in a quantitatively lean acid chelator Proceed. Other murnic acid cations such as ¹⁸⁶ Re, ¹⁸⁸ Re, ²¹³ Bi and divalent or trivalent cations of Mn, Co, Ni, Pb, Cu, Cd, Au, Fe, Ag (monovalent), Zn and Hg, especially ⁶⁴ Cu and ⁶⁷ Cu and the like, useful for radioimmunodiagnosis or radioimmunotherapy, can be attached to the connector peptide by analog methods. Re cations can also be derived in situ from a perhenhenate, and either primary ions or pre-reduced rhenium glucoheptonates or other transition chelators can be used. Higher levels that do not reduce unstable disulfide bonds, such as the presence of disulfide-cyclized peptides, because the reduction of phenate also requires more tin ions (typically above 200 μg / mL final concentration) than is required for the reduction of Tc. There is a need for gussing where additional processing is done to secure the tin ions of the step. During the radiolabeling of rhenium, a similar procedure is used as used with Tc-99m. A preferred method of preparing the ReO metal complex of Tscg-Cys-ligand is by reaction of ReOCl _{3 (} P (Ph ₃ ) ₂ with the peptide but it is also possible to use other reduced species such as ReO (atheylenediamine) ₂ .

두개 이상의 HSG 부분 및 하나의 DTPA 부분 및 펩티드 스캐폴드 또는 링커을 함유하는 본 발명에 대한 표적가능한 구조체의 예가 구성되었다(도 1~4에 도식적으로 나타나 있음). 이 구조체는 IMP272로 표시되어 있고, 이의 제법 및 구조는 이하의 실시예에 기술되어 있다. 이 구성에서, 제거제 결합에 사용되는 하나의 DTPA 부분 및 두개의 HSG 부분이 일차 표적제제의 결합에 사용된다. 이 목적을 위해, DTPA 부분은 인듐과 킬레이트 되어 항-In-DTPA 항체를 결합시킨다. 표적가능한 구조체의 다른 예가 도 7~9에 나타나 있다. 이경우, 표적가능한 구조체는 오직 하나의 HSG 부분을 포함하여, 오직 하나의 일차 표적 제제 및 HSG 부분에 결합한다. An example of a targetable construct for the invention containing two or more HSG moieties and one DTPA moiety and a peptide scaffold or linker was constructed (shown schematically in FIGS. 1-4). This structure is indicated by IMP272, the preparation and structure of which are described in the examples below. In this configuration, one DTPA moiety and two HSG moieties used for binding the eliminator are used for binding the primary targeting agent. For this purpose, the DTPA moiety is chelated with indium to bind anti-In-DTPA antibodies. Other examples of targetable constructs are shown in FIGS. 7-9. In this case, the targetable construct includes only one HSG moiety and binds to only one primary target agent and the HSG moiety.

V. 제거제V. Remover

본 발명에서, 제거제는 개별 표적가능한 구조체를 가교시킴으로써 표적 부위에 표적-결합된 표적가능한 구조체를 "록킹"시키고, 또한 비결합된 표적가능한 구조체를 순환으로부터 제거하는 것을 보조하는 두가지 기능을 수행한다. 이때, 용어 "비결합된"이란 비록 구조체가 순환중인 일차 표적 제제 또는 다른 순환 성분들에 부착될 수는 있으나, 구조체가 표적 부위에 부착되지 않음을 가리킨다. 록킹 기능을 제공하기 위해선, 제거제는 동일하거나 상이한 형태의 개별 표적가능한 구조체 2개 이상을 결합시키는 것이 특히 바람직하다. 대부분의 경우, 제거제는 비록 다양한 형태의 표적가능한 구조체 결합 부분이 대체적으로 사용될 수는 있으나, 오직 한 형태의 표적가능한 구조체 결합 부분에 맞추어 설계된다. In the present invention, the scavenger performs two functions of "locking" the target-linked targetable construct to the target site by crosslinking the individual targetable constructs and also assisting in removing the unbound targetable construct from the circulation. Herein, the term "unbound" refers to that the construct is not attached to the target site, although the construct may be attached to the primary target agent or other circulating components in circulation. In order to provide a locking function, it is particularly preferred that the remover combines two or more individual targetable structures of the same or different form. In most cases, the remover is designed for only one type of targetable construct binding moiety, although various forms of targetable construct binding moiety may be used.

비결합된 복합체의 신속한 제거를 위해, 제거제는 신속히 제거되는 부분들을 하나 이상 포함하는 것이 바람직하다. 천연 IgG 항체는 상대적으로 신속히 제거되기는 하나, 소정의 개질된 항체를 사용하거나 또는 상보물을 고정할 수 있는 IgG1을 사용함으로써 제거율을 향상시켜 신속히 제거할 수 있다. For rapid removal of the unbound complex, the remover preferably includes one or more portions to be removed quickly. Although native IgG antibodies are removed relatively quickly, they can be removed quickly by improving the removal rate by using certain modified antibodies or by using IgG1 to fix complements.

제거율을 향상시키는 개질로 알려진 것 중 한 형태는 갈락토오스를 부착하는 것(갈락토실화)이다. 갈락토실화율은 원하는 제거 특성에 맞춰서 선택될 수 있다. 카라카이 등의 1997, Biogconjug Chme 8(4): 585-594 참조. 갈락토오스는 간의 아사이알로당단백질 수용체에 결합하여, 부착된 제제 또는 복합체이 간세포에 의해 신속히 인식된다. 갈락토실화된 제제의 사용은, 실질적으로 간 전체에 1회 주사 후 수분내 거의 전체 간세포 인식 및 부골형성이 일어난다. 기술한 대로, 제제의 당잔기 개질도는 혈류 제거율을 결정한다. 원하는 제거율을 얻는데 필요한 제제 분자당 당 잔기 개수는 업계에 공지된 일반적 방법에 의해 각 특정 제제에 대해 경험적으로 결정된다. 갈락토실화도를 당의 첨가에 의해 개질되는 리신 잔기의 비율로 설명하는 것이 편리하다. 항-요오드형 항체 제거제에 있어서, 리신 잔기의 약 22%를 개질하는 것은 비국소화된 일차 표적 컨쥬게이트의 제거율을 유의미하게 향상시키지 않는 반면, 리신 잔기의 약 48%를 개질하는 것은 제거율을 아주 많이 향상시키고, 리신 잔기의 약 76% 이상을 개질하면 간 전체에 1회 주사만으로 순환으로부터 거의 전체를 제거할 수 있다. 이는 비록 비율은 어느 정도 변화가 있겠으나, 일반적으로 항체 단편에 대해서도 적용된다. 1회 주사로 거의 완벽한 제거를 달성할 수 있는 글리코실화도는 쉽게 결정된다. One type of modification known to improve the removal rate is to attach galactose (galactosylation). The galactosylation rate can be selected according to the desired removal characteristics. See Karakai et al., 1997, Biogconjug Chme 8 (4): 585-594. Galactose binds to the liver acyalo glycoprotein receptor, so that the attached agent or complex is rapidly recognized by hepatocytes. The use of galactosylated agents results in almost total hepatocyte recognition and osteoclastism in minutes after substantially once injection throughout the liver. As described, the degree of sugar residue modification of the formulation determines the rate of blood flow clearance. The number of residues per molecule of the agent required to achieve the desired removal rate is determined empirically for each particular agent by general methods known in the art. It is convenient to explain the degree of galactosylation in terms of the proportion of lysine residues that are modified by the addition of sugars. For anti-iodide antibody scavengers, modifying about 22% of the lysine residues does not significantly improve the removal rate of the non-localized primary target conjugate, whereas modifying about 48% of the lysine residues significantly increases the removal rate. Enhancement and modification of at least about 76% of the lysine residues can remove almost all of the circulation from a single injection throughout the liver. This applies generally to antibody fragments, although the ratio will vary somewhat. The degree of glycosylation that can achieve near perfect clearance in a single injection is readily determined.

제거를 향상시키는 다른 형태의 개질은 IgG 성분의 Fc-경첩 부분의 변형(일반적으로 치환 또는 결심임)으로서, 예를 들어 C_H2-C_H3 도메인 계면 영역에서의 하나 이상의 아미노산 변형을 포함한다. 즉, 변형 항체의 IgG 성분의 Fc-경첨 부분을 부모 항체의 IgG 성분의 Fc-경첩 부분과 비교할 때, 이들 부분은 하나 이상의 아미노산이 상이하다. 변형에는 예를 들어 치환된 아미노산이 유사한 구조적, 화학적 특성을 갖는 "보수적" 변화(예: 류신을 이소류신으로 치환)도 포함될 수 있다. 변형에는 또한, 예를 들어 "비보수석"변화(예: 글리신을 트립토판으로 치환)도 포함된다. C_H2-C_H3 도메인 계면 영역의 어떠한 아미노산도 변형될 수 있다. 바람직한 아미노산 변형은 이소류신 253을 알라닌(I253A)으로 변형하는 것이다. C_H2 영역 내 결실 또한 제거율의 향상을 가져온다. Another form of modification that enhances removal is a modification (generally a substitution or determination) of the Fc-hinge portion of the IgG component, including, for example, one or more amino acid modifications at the C _H 2 -C _H 3 domain interface region. . That is, when comparing the Fc-conjugated portion of the IgG component of the modified antibody with the Fc- hinge portion of the IgG component of the parent antibody, these portions differ by at least one amino acid. Modifications may also include, for example, "conservative" changes (eg, replacing leucine with isoleucine) in which the substituted amino acids have similar structural and chemical properties. Modifications also include, for example, "non-conservative" changes (eg, replacing glycine with tryptophan). Any amino acid in the C _H 2 -C _H 3 domain interface region may be modified. A preferred amino acid modification is to modify isoleucine 253 with alanine (I253A). Deletion in the C _H 2 region also leads to an improvement in removal rate.

제거제의 일 예가 도 2-5에 도식적으로 나타나 있다. 도 3에 도시된 제제는 갈락토오스로 개질되어 제거율을 향상시키고, 도 4에 도시된 제제는 폴레이트로 개질되어 폴레이트 수용체를 통한 내재화를 향상시킨다. 제거제의 다른 예가 도 9에 도식적으로 나타나 있다. 제거제는 신속히 내재화하는 B 세포 종양 항원 (CD74)에 결합하는 항체hLL1)를 포함한다. 착화된 제거제를 CD74에 결합하면 복합체의 내재화를 향상시키고, 따라서 표적가능한 구조체 상의 활성 종의 내재화가 향상된다. One example of a remover is shown schematically in FIGS. 2-5. The formulation shown in FIG. 3 is modified with galactose to improve the removal rate, while the formulation shown in FIG. 4 is modified with folate to enhance internalization through the folate receptor. Another example of a remover is shown schematically in FIG. 9. The scavenger includes antibody hLL1) that binds rapidly internalizing B cell tumor antigen (CD74). Binding of the complexed scavenger to CD74 enhances the internalization of the complex and thus the internalization of the active species on the targetable construct.

VI. 동시 투여 및 VI. Simultaneous administration and 투여전에Before administration 형성된 복합체 Formed complex

많은 경우, 표적가능한 구조체 투여 전에 일차 표적 제제가 투여되어 표적에 결합되는 예비표적화 방법을 사용하는 것이 바람직하다. 그러나, 대신에 이들 시스템 구성 성분 두개 이상을 실질적으로 동시에 투여하거나 또는 투여 전에 혼합하여 투여할 수 있다. 예를 들어, 일차 표적 제제 및 표적가능한 구조체를 실질적으로 동시에 투여하여, 표적에 결합되게 하고, 이어 제거제를 투여할 수 있다. 유사하게, 일차 표적 제제, 표적가능한 구조체 및 제거제를 동시에 투여하여 표적에 부착되게 할 수 있다. In many cases, it is desirable to use a pretargeting method in which the primary target agent is administered and bound to the target prior to administering the targetable construct. However, instead two or more of these system components may be administered substantially simultaneously or in combination prior to administration. For example, the primary target agent and the targetable construct may be administered substantially simultaneously to allow binding to the target followed by administration of a scavenger. Similarly, the primary target agent, targetable construct, and scavenger may be administered simultaneously to allow attachment to the target.

또한, 일차 표적 제제 및 표적가능한 구조체는 또한 투여전에 혼합하여 복합체을 형성할 수도 있다. 이러한 복합체을 일차 표적제제의 투여와 유사하게 투여하여, 표적에 결합시킨다. 이어 제거제를 통상의 방식으로 투여하여, 표적 부위에 결합된 복합체을 "록킹"시키고, 순환으로부터 비결합 복합체을 제거한다. 유사하게, 제거제 또한 혼합물에 첨가되어, 세 성분 모두 복합체로서 투여될 수도 있다. 세가지 성분 모두를 혼합하는 것은 제거제가 신속히 제거하는 것은 아니고 오직 "록킹" 기능으로만 사용될 때 특히 유용하다. In addition, the primary target agent and the targetable construct may also be mixed prior to administration to form a complex. This complex is administered similar to the administration of the primary targeting agent to bind to the target. The scavenger is then administered in a conventional manner to "lock" the complex bound to the target site and remove the unbound complex from the circulation. Similarly, a remover may also be added to the mixture so that all three components may be administered as a complex. Mixing all three components is particularly useful when the remover does not remove quickly and is only used as a "locking" function.

VII. VII. 록킹Locking 및  And 체이스Chase 표적화Targeting 방법(Lock and Chase Targeting Methods) Lock and Chase Targeting Methods

상기에서 간략히 논의한 것과 같이, 본 발명에서 기술하는 구조체는 유리한 표적화방법을 제공한다. 각종 구조체는 수많은 상이한 모드로 사용될 수 있다. 표적화 방법에서, 일차 표적 제제는 제제 및 표적 부위에 결합된 복합체의 다른 성분을 국소화시키는 초기 또는 일차 표적 종을 제공한다. 따라서, 일차 표적 제제가 피험자에게 투여되고 분산되어 표적에 결합하도록 하는 예비 표적화방법이 사용된다. 일단 표적에 일차 표적 종이 충분히 축적되면, 표적가능한 구조체가 투여된다. 표적가능한 구조체는 일차 표적 제제의 가능한 결합 부위 및 진단 또는 치료용 제제를 인식하는 하나 이상의 결합 부위를 포함한다. 표적가능한 구조체의 예들이 여기 기술된다. 시약의 복용량 및 복용시간의 결정은 당업자에게는 용이할 것이며, 채용되는 시약의 특정 성질에 따라 다르다. 제거제를 사용하거나 사용하지 않거나 일반적으로 예비표적화방법이 수행될 수 있으나, 본 발명의 대부분의 경우, 심지어 순화 표적가능한 구조체의 농도가 감소하더라도, 표적 부위에서 표적가능한 구조체가 복합체 내에서 일차 표적제제와 안정하게 결합하도록 제제를 "록킹"시키는 기능을 하는 제거제가 사용된다. As briefly discussed above, the constructs described herein provide an advantageous targeting method. Various structures can be used in a number of different modes. In the targeting method, the primary target agent provides an initial or primary target species that localizes the agent and other components of the complex bound to the target site. Thus, a preliminary targeting method is used in which the primary target agent is administered to the subject and dispersed to bind the target. Once the primary target species has accumulated sufficiently in the target, the targetable construct is administered. Targetable constructs include one or more binding sites that recognize possible binding sites of the primary target agent and agents for diagnosis or treatment. Examples of targetable structures are described herein. Determination of the dose and time of administration of the reagents will be readily apparent to those skilled in the art and will depend on the specific nature of the reagents employed. Although pretreatment methods may or may not be used with or without a scavenger in general, in most cases of the present invention, even if the concentration of the purified targetable construct is reduced, the targetable construct at the target site may be combined with the primary targeting agent in the complex. Removers are used that function to "lock" the formulation to ensure stable binding.

표적화 이외에, 본 구조체는 표적화된 세포에 의한 복합체의 내재화를 향상시키도록 배열될 수 있다. 내재화는 내재화될 복합체에 하나 이상의 내재화부분을 부착함으로써 일어난다. 이러한 내재화제의 사용은 하기에 기술한다. In addition to targeting, the constructs can be arranged to enhance internalization of the complex by targeted cells. Internalization occurs by attaching one or more internalization moieties to the composite to be internalized. The use of such internalizing agents is described below.

이하에서는 항체 및 부착소의 조합을 사용하여, 본 방법에 사용될 각종 설계를 보여준다. 상기에서 지적한 바와 같이, 항체 및/또는 부착소에 덧붙여 다른 결합쌍들도 대체물로 사용될 수 있다. The following shows the various designs to be used in the method, using a combination of antibodies and attachment sites. As noted above, in addition to antibodies and / or attachments, other binding pairs may also be used as substitutes.

1. 일차 표적 제제: bsAb (2개의 표적 결합 항체 부분 & 2개의 표적가능한 구조체 부착소 결합 항체 부분);1. Primary Targeting Agents: bsAb (2 target binding antibody moieties & 2 targetable construct attachment binding antibody moieties);

표적가능한 구조체: 2개의 직교 부착소(일차 표적 제제상의 부착소-결합 항체에 의해 인식되는 부착소 & 제거제상의 부착소-결합 항체에 의해 인식되는 다른 것의 2 복제물)+ 치료 또는 진단용 부분을 기본 골격으로 하는 펩티드;Targetable construct: two orthogonal attachments (two copies of the attachment recognized by the attachment-binding antibody on the primary target agent & the other copy recognized by the attachment-binding antibody on the remover) + the therapeutic or diagnostic portion of the base skeleton Peptides;

제거제: 표적가능한 구조체 상의 단일 복제물 부착소을 인식하는 이가 항체. Remover: A bivalent antibody that recognizes a single copy attachment point on a targetable construct.

2. 일차 표적 제제: bsAb (1개의 표적 결합 항체 부분 & 1개의 표적가능한 구조체 부착소 결합 항체 부분);2. Primary Targeting Agents: bsAb (1 target binding antibody moiety & 1 targetable construct attachment binding antibody moiety);

표적가능한 구조체: 2개의 직교 부착소(일차 표적 제제상의 부착소-결합 항체에 의해 인식되는 부착소 & 제거제상의 부착소-결합 항체에 의해 인식되는 다른 것의 2 복제물) + 치료 또는 진단용 부분을 기본 골격으로 하는 펩티드;Targetable construct: two orthogonal attachments (two copies of the attachment recognized by the attachment-binding antibody on the primary target agent & the other copy recognized by the attachment-binding antibody on the remover) + the therapeutic or diagnostic portion of the base skeleton Peptides;

제거제: 표적가능한 구조체 상의 단일 복제물 부착소을 인식하는 이가 항체. Remover: A bivalent antibody that recognizes a single copy attachment point on a targetable construct.

3. 일차 표적 제제: 항체 및 부착소(표적 결합 항체 부분 2개 & 표적가능한 구조체상의 항체에 의해 인식되는 부착소 복제물 2개)을 함유하는 이특이성 제제;3. Primary Targeting Agents: Bispecific agents containing antibodies and attachments (two target binding antibody moieties & two attachment clones recognized by an antibody on a targetable construct);

표적가능한 구조체: 일차 표적 제제상의 부착소을 인식하는 이가 항체 & 제거제상의 항체에 의해 인식되는 부착소(1 복제물) & 치료 또는 진단용 부분을 기본 골격으로 하는 펩티드;Targetable constructs: Peptides based on a bivalent antibody that recognizes an attachment point on a primary target agent & an attachment point (one copy) < RTI ID = 0.0 > a < / RTI >

제거제: 표적가능한 구조체 상의 단일 복제물 부착소을 인식하는 이가 항체. Remover: A bivalent antibody that recognizes a single copy attachment point on a targetable construct.

4. 일차 표적 제제: (표적 결합 항체 부분 2개를 갖는) 항체 및 표적가능한 구조체상의 항체에 의해 인식되는 부착소 복제물 2개를 함유하는 이특이성 제제;4. Primary Targeting Agents: Bispecific agents containing two attachment binding copies recognized by an antibody (with two target binding antibody moieties) and an antibody on the targetable construct;

표적가능한 구조체: 일차 표적 제제상의 부착소을 인식하는 이가 항체 & 제거제상의 항체에 의해 인식되는 부착소(2 복제물) & 치료 또는 진단용 부분을 기본 골격으로 하는 펩티드;Targetable constructs: Peptides based on a bivalent antibody that recognizes an attachment on the primary target agent & an attachment (2 copies) < RTI ID = 0.0 > a < / RTI >

제거제: 표적가능한 구조체 상의 부착소을 인식하는 4개의 항체 부분. Remover: Four antibody moieties that recognize an attachment point on a targetable construct.

5. 일차 표적 제제: bsAb(표적 결합 항체 부분 2개 & 표적가능한 구조체 부착소 결합 항체 부분 2개);5. Primary Targeting Agents: bsAb (2 target binding antibody moieties & 2 targetable construct attachment binding antibody moieties);

표적가능한 구조체: 2개의 직교 부착소(일차 표적 제제상의 부착소-결합 항체에 의해 인식되는 항체 복제물 2개 & 제거제 상의 부착소-결합 항체에 의해 인식되는 다른 부분) & 치료 또는 진단용 부분을 기본 골격으로 하는 펩티드;Targetable constructs: two orthogonal attachments (two antibody replicas recognized by an attachment-binding antibody on the primary target formulation & another portion recognized by an attachment-binding antibody on the remover) & a therapeutic or diagnostic portion based on the backbone Peptides;

제거제: 표적가능한 구조체 상의 단일 복제물 부착소 & 내재화제 부분을 인식하는 이가의 항체. Remover: A bivalent antibody that recognizes a single copy attachment & internalization moiety on a targetable construct.

6. 일차 표적 제제: bsAb(표적 결합 항체 부분 2개 & 표적가능한 구조체 부착소 결합 항체 부분 2개);6. Primary Targeting Agents: bsAb (2 target binding antibody moieties & 2 targetable construct attachment binding antibody moieties);

표적가능한 구조체: 2개의 직교 부착소(일차 표적 제제상의 부착소-결합 항체에 의해 인식되는 항체 복제물 2개 & 제거제 상의 부착소-결합 항체에 의해 인식되는 다른 부분) & 치료 또는 진단용 부분을 기본 골격으로 하는 펩티드;Targetable constructs: two orthogonal attachments (two antibody replicas recognized by an attachment-binding antibody on the primary target formulation & another portion recognized by an attachment-binding antibody on the remover) & a therapeutic or diagnostic portion based on the backbone Peptides;

제거제: 표적가능한 구조체 상의 단일 복제물 부착소 & 내재화제 부분을 인식하는 이가의 항체; Remover: Bivalent antibody recognizing a single copy attachment & internalization moiety on a targetable construct;

내재화제: 제거제 상의 부착소 결합 항체 부분에 의해 인식되는 부착소(표적가능한 구조체 상의 부착소에 직교함). Internalizing agent: an attachment recognized by an attachment site binding antibody portion on the removal agent (orthogonal to the attachment site on the targetable construct).

7. 일차 표적 제제: bsAb(표적 결합 항체 부분 1개 & 표적가능한 구조체 부착소 결합 항체 부분 2개);7. Primary Targeting Agents: bsAb (1 target binding antibody portion & 2 targetable construct attachment binding antibody portions);

표적가능한 구조체: 2개의 직교 부착소(일차 표적 제제상의 부착소-결합 항체에 의해 인식되는 항체 복제물 2개 & 제거제 상의 부착소-결합 항체에 의해 인식되는 다른 부분) & 치료 또는 진단용 부분을 기본 골격으로 하는 펩티드;Targetable constructs: two orthogonal attachments (two antibody replicas recognized by an attachment-binding antibody on the primary target formulation & another portion recognized by an attachment-binding antibody on the remover) & a therapeutic or diagnostic portion based on the backbone Peptides;

제거제: 표적가능한 구조체 상의 단일 복제물 부착소을 인식하는 이가의 항체. Remover: A bivalent antibody that recognizes a single copy attachment point on a targetable construct.

항체 및 부착소을 사용하는 배열의 일부 예들이 도면에 도식적으로 나타나 있다. 일차 표적제제, 표적가능한 구조체 및 제거제의 결합은 도 1~5에 개시되어 있다. Some examples of arrangements using antibodies and attachments are shown schematically in the figures. Binding of primary targeting agents, targetable constructs and eliminators is disclosed in FIGS. 1-5.

또한, 예시적 배열의 결합 시리즈를 나타내는 순차적 도식예이 도 6-9에 나타나 있다. 도 6은 표면상에 나타나는 다수의 CD20 항원을 갖는 B 세포를 예시한다. CD20은 도 7에 도시된 바와 같이 일차 표적 제제에 대한 표적 항원으로 작용한다. 도 7은 일차 표적 제제가 주사되는 것을 나타내고 도 6에 도시한 바와 같이 CD20 항원에 대한 일차 표적 제제의 결합을 예시한다. 도시한 바와 같이, 일차 표적 제제는 표적가능한 구조체에 결합하기 위한 항-HSG 항체 부분에 연결된 항-CD20 항체 부분(hA20Fab')을 갖는다. 일차 표적 제제가 표적 부위에 결합한 후, 도 8에 나타난 바와 같이 표적가능한 구조체가 주사된다. 도시된 바와 같이, 표적가능한 구조체가 HSG 부착소을 통해 국소화된 일차 표적제제에 결합한다. 각 표적가능한 구조체는 두개의 HSG 부분을 포함하고 두개의 국소화된 일차 표적 제제, 할성종(¹³¹I) 및 제거제에 결합하기 위한 하나의 DTPA 부분을 가교시킬 수 있다. 도 9에 도시된 바와 같이, 표적가능한 구조체의 결합 이후 제거제가 주사된다. 제거제는 두개의 항-In-DTPA 항체 부분을 갖는 2가의 제거제로서, 두개의 표적가능한 구조체를 결합하여 가교시킬 수 있다. 표적가능한 구조체 자신이 두개의 일차 표적제제에 결합되므로, 그 결과 4개의 표적 항원에 결합된 가교 복합체이 형성되어 표적에서 표적가능한 구조체를 "록킹"시킨다. 또한, 도 9의 제거제는 신속히 내재화되는 표면 항원인 상이한 세포 표면 항원, CD74에 결합하는 항체 부분(hLL1)을 포함한다. CD74에 결합하는 것은 따라서 결합된 복합체의 내재화를 향상시키고, 활성 종(이경우, ¹³¹I)를포함한다. Also shown in FIGS. 6-9 are sequential schematics illustrating a combined series of exemplary arrangements. 6 illustrates B cells with multiple CD20 antigens appearing on the surface. CD20 acts as a target antigen for the primary target agent as shown in FIG. 7. FIG. 7 shows that the primary target agent is injected and illustrates binding of the primary target agent to the CD20 antigen as shown in FIG. 6. As shown, the primary target agent has an anti-CD20 antibody portion (hA20Fab ') linked to an anti-HSG antibody portion for binding to the targetable construct. After the primary target agent binds to the target site, the targetable construct is injected as shown in FIG. 8. As shown, the targetable construct binds to the localized primary targeting agent through the HSG attachment. Each targetable construct includes two HSG moieties and can crosslink two DTPA moieties for binding to two localized primary target agents, a split species ( ¹³¹ I) and a scavenger. As shown in FIG. 9, the remover is injected after binding of the targetable construct. The scavenger is a bivalent scavenger with two anti-In-DTPA antibody moieties, capable of binding and crosslinking two targetable constructs. Since the targetable construct itself is bound to two primary target agents, a crosslinked complex bound to the four target antigens is formed to "lock" the targetable construct at the target. The remover of FIG. 9 also includes an antibody portion (hLL1) that binds to a different cell surface antigen, CD74, which is a surface antigen that is rapidly internalized. Binding to CD74 thus enhances the internalization of the bound complex and includes the active species (in this case ¹³¹ I).

상기 조합은 오직 예시일 뿐이며, 예를 들어 상기 예시적 조합에서 항체/부착소 쌍의 일부 또는 전부를 대체할 다른 결합쌍을 사용한 다른 배열 또한 가능하다. The combination is merely exemplary, and other arrangements are also possible, for example, using other binding pairs to replace some or all of the antibody / adhesive pairs in the exemplary combination.

Ⅵ. Ⅵ. 표적화Targeting 방법의 적용 Application of the method

본 발명에 의한 고 분석 표적화는 치료 및 진단(시각화(visualization)포함)용 적용의 많은 상이한 형태에 사용될 수 있다. 상기 적용에서, 본 구성 및 방법은 표적부위에 물질을 전달하는데 사용될 수 있으며, 이에 따라 정상 조직 또는 세포분포 등의 치료 및/또는 진단 또는 영상화를 제공한다. 적용의 여러 상이한 형태는 하기 및 참조예가 되는 특허 및 특허출원에 기재한다. High analytical targeting according to the present invention can be used in many different forms of application for treatment and diagnosis (including visualization). In such applications, the present configurations and methods can be used to deliver substances to target sites, thereby providing for the treatment and / or diagnosis or imaging of normal tissues or cell distribution and the like. Several different forms of application are described in the following patents and patent applications.

본 조성물 및 방법은 제한없이 심장혈관(cardiovascular) 병변(경색, 응고, 색전, 동맥경화반(atherosclerotic plaque)), 기타 병리상 병변(예를들어, 아밀로이드증(Amyloidosis) 및 알츠하이머 질병에서 아밀로이드), 암(예를들어, 백혈병, 림프종, 육종(sarcomas), 흑색종(melanomas), 암종(carcinomas), 신경교종(gliomas), 피부암), 전염성 병변(예를들어, 세균성, 리켓티아성(rickettsial), 곰팡이성, 기생충성, 및 바이러스성 병원균), 염증(예를들어, 류마티스성 관절염, 전신성 홍반, 다발성 경화증과 같은 자가면역 질병), 치환 또는 전위 정상 조직 및 세포(예를들어, 자궁내막, 흉선, 비장, 부갑상선), 정상 조직 절제(예를들어, 골수, 비장)에 치료 및/또는 진단 및 영상화용으로 사용될 수 있다. The compositions and methods include, but are not limited to, cardiovascular lesions (infarction, coagulation, embolism, atherosclerotic plaque), other pathological lesions (e.g. amyloid in Amyloidosis and Alzheimer's disease), cancer (E.g., leukemia, lymphoma, sarcomas, melanoma, carcinomas, gliomas, skin cancer), infectious lesions (e.g., bacterial, rickettsial, Fungal, parasitic, and viral pathogens, inflammation (e.g., autoimmune diseases such as rheumatoid arthritis, systemic erythema, multiple sclerosis), substitutional or dislocation normal tissues and cells (e.g., endometrium, thymus gland) , Spleen, parathyroid), and normal tissue resection (eg, bone marrow, spleen) for treatment and / or diagnosis and imaging.

1. 검출 및 영상화1. Detection and imaging

그러므로, 예를 들어 종양은 적절한 파장의 빛이 전달된 다음 수집하여 다양한 구조들을 직접적으로 또는 간접적으로 관찰하는 방법으로 체강(body cavity)에서 검출될 수 있다. 체내 부위에서 병변들은 비이온성 방사가 전달되고 상기 구조로부터 재포획될 수 있다면 관측될 수 있다. 예를 들어, 고 분석, 비-침해성인 PET 영상화 기술은 인간 질병의 시각화에 본 제제와 사용할 수 있다. PET에서 양전자소멸(positron annihilation) 붕괴동안 생성된 511 keV 감마 광자가 관측된다. Thus, for example, tumors can be detected in the body cavity by direct or indirect observation of various structures by the transmission of light of the appropriate wavelengths. Lesions at the site of the body can be observed if nonionic radiation is delivered and can be recaptured from the structure. For example, high analytical, non-invasive PET imaging techniques can be used with the present formulations for visualization of human disease. 511 keV gamma photons generated during positron annihilation decay in PET are observed.

일반적으로 본 발명은 25~600 keV 감마 입자 및/또는 양전자를 방출하는 진단성 제제를 사용할 수 있다. 상기 제제의 예로는 특별히 한정되지 않지만, ¹⁸F, ⁴⁵Ti, ⁵²Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ⁸⁶Y, ⁸⁹Zr, ^{94 m}Tc, ⁹⁴Tc, ^{99 m}Tc, ¹¹¹In, ¹²³I, ¹²⁴I, ¹²⁵I, ¹³¹I, ^154-158Gd 및 ¹⁷⁵Lu가 있다. 상기 신호발생 제제는 본 발명의 성분, 전형적으로 표적화할 수 있는 구조 중의 하나에 부착되어 표적한 다음 영상 또는 검출하도록 한다. In general, the present invention may employ diagnostic agents that emit 25-600 keV gamma particles and / or positrons. Examples of the formulation are not particularly limited, but ¹⁸ F, ⁴⁵ Ti, ⁵² Fe, ⁶² Cu, ⁶⁴ Cu, ⁶⁷ Cu, ⁶⁷ Ga, ⁶⁸ Ga, ⁸⁶ Y, ⁸⁹ Zr, ^{94 m} Tc, ⁹⁴ Tc, ^{99 m} Tc , ¹¹¹ In, ¹²³ I, ¹²⁴ I, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ^154-158 Gd and ¹⁷⁵ Lu. The signaling agent is attached to one of the components of the invention, typically a targetable structure, for targeting and subsequent imaging or detection.

또한, 수술/내시경 프로브로의 검출은 예를들어 방사성라벨화된 표적화할 수 있는 구조(예를들어, I-125로 라벨화된 펩티드계 구조)를 사용하여 수행될 수 있다. 상기 방법들은 예를들어, 전 내용이 참조예가 되는 미국특허 5,716,595 및 6,096,289, 및 미국특허출원 공보 2002-146369에 기재되어 있다. In addition, detection with surgical / endoscopic probes can be performed using, for example, radiolabelled targetable structures (eg, peptide-based structures labeled with I-125). Such methods are described, for example, in US Pat. Nos. 5,716,595 and 6,096,289, and US Patent Application Publication 2002-146369, the entire contents of which are incorporated by reference.

치료적 및 진단적으로 유용한 이뮤노컨쥬게이트(immunoconjugate)는 표적화할 수 있는 구조에 광활성 제제 또는 염료를 컨쥬게이트함으로써 얻어질 수 있다. 형광성 및 기타 색원체 또는 가시광선에 민감한 포르피린과 같은 염료들은 병변에 적절한 빛을 도입함으로써 병변을 검출하고 치료하는데 사용되어 왔다. 치료에서, 이는 광방사, 광치료, 또는 광활성치료법(photodynamic therapy, PDT)로 지칭되어 왔다(Jori etal. (eds. ), PHOTODYNAMIC THERAPY OF TUMORS AND OTHER DISEASES (Libreria Progetto 1985); van den Bergh, Chem. Britain 22: 430 (1986) ). 게다가, 단클론 항체들은 광치료를 수행하는데 광활성 염색과 결합되어 왔다. Mewet al., J. Immunol. 130 : 1473 (1983);idem., CancerRes. 45 :4380 (1985);Oseroff et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83 : 8744 (1986);idem., Photochem.Photobiol. 46 : 83 (1987); Hasan et al., Prog. Clin.BioL Res. 288 : 471 (1989); Tatsuta etal., LasersSurg. Med. 9 : 422 (1989); Pelegrin et al., Cancer 67 : 2529 (1991).Therapeutic and diagnostically useful immunoconjugates can be obtained by conjugating a photoactive agent or dye to a targetable structure. Dyes, such as porphyrins, which are sensitive to fluorescent and other color sources or visible light, have been used to detect and treat lesions by introducing appropriate light into the lesion. In treatment, this has been referred to as photoradiation, phototherapy, or photodynamic therapy (PDT) (Jori et al. (Eds.), PHOTODYNAMIC THERAPY OF TUMORS AND OTHER DISEASES (Libreria Progetto 1985); van den Bergh, Chem. Britain 22: 430 (1986)). In addition, monoclonal antibodies have been combined with photoactive staining to perform phototherapy. Mewe et al., J. Immunol. 130: 1473 (1983); idem., Cancer Res. 45: 4380 (1985); Oseroff et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83: 8744 (1986); idem., Photochem. Photobiol. 46: 83 (1987); Hasan et al., Prog. Clin. BioL Res. 288: 471 (1989); Tatsuta et al., Lasers Surg. Med. 9: 422 (1989); Pelegrin et al., Cancer 67: 2529 (1991).

또한, 광활성 치료법(photodynamic therapy, PDT)는 전체가 참조예가 되는 미국특허 제 6,096,289; 4,331,647; 4,818,709; 4,348,376; 4,361,544; 4,444,744; 5,851,527;에 공개되어 있다. 상기 방법에서 예를들어, 디헤마토포르피린 에테르(dihematoporphyrin ether, DHE) 등의 헤마토포르피린 유도체와 같은 광감작제(photosensitizer)가 대상에 투여된다. 항-종양 활성은 예를들어 630㎚의 빛을 사용하여 개시된다. 교대적 광감작제는 더 긴 파장에서 유용한 것을 포함하여 사용될 수 있으며, 피부는 태양에 의해 덜 광감작적이어야 한다. 상기 광감작제의 예로는 특별히 한정적이지 않지만, 벤조포르피린 1산 고리 A(BPD-MA), 주석 에티오퓨르퓨린(tin Etiopurpurin; SnET2), 술폰산화 알루미늄 프탈로시아닌(sulfonated aluminum phthalocyanine;AlSPc) 및 루테티움 텍사피린(lutetium texaphyrin)이 있다. In addition, photodynamic therapy (PDT) is described in US Pat. No. 6,096,289, which is incorporated by reference in its entirety; 4,331,647; 4,818,709; 4,348,376; 4,361,544; 4,444,744; 5,851,527; In the method, for example, a photosensitizer such as a hematoporphyrin derivative such as dihematoporphyrin ether (DHE) is administered to the subject. Anti-tumor activity is initiated using, for example, light at 630 nm. Alternate photosensitizers can be used including those useful at longer wavelengths, and the skin should be less photosensitized by the sun. Examples of such photosensitizers include, but are not particularly limited to, benzoporphyrin monocyclic ring A (BPD-MA), tin Etiopurpurin (SNET2), sulfonated aluminum phthalocyanine (AlSPc) and lutetium Lutetium texaphyrin.

게다가, 예를들어 PDT에서 진단성 제제(예를들어, 여기에서 기재된 표적화할 수 있는 구조)를 전신적으로 주입하고, 레이저 유도 형광법(laser-induced fluorescence)은 광활성 제제가 부착된 암의 부위를 검출하는데 내시경과 함께 사용할 수 있다. 예를들어, 상기는 초기 폐 종양의 형광성 기관지내시경 공개에 적용되어왔다. Doiron et al. Chest 76:32(1979). 다른 예에서, 본 구조는 단일광자방출법(single photon emission)에 사용될 수 있다. 예를들어, Tc-99m 라벨화된 진단성 제제는 제거제(clearing agent)의 투여 다음으로 1차 표적화제제의 투여에 이어서, 대상에 투여될 수 있다. 다음, 대상은 단일광자방출 전산화단층촬영(single photon emission computed tomography)으로 생성하는 감마 카메라로 스캔하고, 병변 또는 종양부위를 정의한다. In addition, systemic infusions of diagnostic agents (eg, the targetable structures described herein), for example, in PDT, and laser-induced fluorescence detects sites of cancer to which photoactive agents are attached. It can be used with an endoscope. For example, it has been applied to fluorescent bronchoscope disclosure of early lung tumors. Doiron et al. Chest 76: 32 (1979). In another example, the structure can be used for single photon emission. For example, a Tc-99m labeled diagnostic agent may be administered to a subject following administration of a clearing agent followed by administration of a primary targeting agent. Next, the subject is scanned with a gamma camera generated by single photon emission computed tomography and defines the lesion or tumor site.

상기에서 기재된 바와 같이, 본 조성물 및 방법은 종양세포의 검출에 더하여 진단 또는 영상용의 다양한 상황에 적용될 수 있다. 예를들어, 동맥경화성(atherosclerotic) 영상의 검출용 항체 표적의 사용은 Goldenberg, 미국특허 5,525,338호의 실시예 8에 기재되어 있다. 영상화는 감마 카메라로 스캔함으로써 수행되었다. 또한, 항체 표적을 사용한 암 영상화 및 암 치료는 본 발명에서 기재되었다. As described above, the compositions and methods may be applied to a variety of situations for diagnosis or imaging in addition to the detection of tumor cells. For example, the use of antibody targets for detection of atherosclerotic images is described in Example 8 of Goldenberg, US Pat. No. 5,525,338. Imaging was performed by scanning with a gamma camera. In addition, cancer imaging and cancer treatment using antibody targets have been described herein.

영상화(및 치료)에 사용될 수 있는 항체 표적의 예로는 알츠하이머 질병 특이성 타우 단백질(Tau protein) 에피토프이다(Vechterova et al., 2003, Neuroreport 14(1):87-91, "DC11:a novel monoclonal antibody revealing Alzheimer's disease-specific tau epitope"). 면역조직화학법에서 동정 단클론 항체(mAb DC11)는 AD 환자에서 유래된 뇌에서 신경섬유(neurofibrillary) 병변에 결합되고, 건강한 뇌 조직과 반응성이 부족하다. 웨스턴 블롯(Western blot)에서 mAb DC11은 천부적으로(native) 건강한 타우도 이의 전체 길이 재조합 대응체를 인지하지 않았다. 따라서, mAb DC11(또는 유사한 특이성을 갖는 다른 항체)는 AD 뇌에서 존재하는 병리적 타우의 구조에 특이성을 갖는 유용한 표적 결합 부분을 제공한다. An example of an antibody target that can be used for imaging (and treatment) is an Alzheimer's disease specific Tau protein epitope (Vechterova et al., 2003, Neuroreport 14 (1): 87-91, “DC11: a novel monoclonal antibody revealing Alzheimer's disease-specific tau epitope "). In immunohistochemistry, the identified monoclonal antibody (mAb DC11) binds to neurofibrillary lesions in the brain derived from AD patients and lacks reactivity with healthy brain tissue. MAb DC11 in Western blot did not recognize its native healthy tau even its full length recombinant counterpart. Thus, mAb DC11 (or other antibody with similar specificity) provides a useful target binding moiety that has specificity for the structure of pathological tau present in the AD brain.

2. 치료적 적용2. Therapeutic Application

본 구조, 제제 및 방법은 치료적 적용에 높은 장점이 있다. 일반적으로, 본 구조가 치료에 사용될 때의 표적 및 질병 또는 조건은 치료성 부분을 더하거나 대신하는 진단성 부분의 적절한 선택으로 진단(예를들어 영상화)에 사용될 수 있다. The present structures, formulations and methods have high advantages for therapeutic applications. In general, targets and diseases or conditions when the present structures are used for treatment can be used for diagnosis (eg imaging) with appropriate selection of diagnostic portions that add or replace therapeutic portions.

a. 효소 및 전구체(prodrug)a. Enzymes and Prodrugs

적용의 일예에서 표적화할 수 있는 구조는 표적 부위에서 전구체를 활성화하고, 체내의 해독경로를 조절함으로써 정상적 치료의 효율성을 향상시키거나 치료성 반응에 영향을 미치는 효소반응을 수행하는 효소에 컨쥬게이트될 수 있다. 예를들어, 적절한 표소를 표적부위에 예비표적화를 한 후, 표적부위에서 활동하는 것으로 알려진 세포독성 약물(cytotoxic drug)를 주입한다. 약물은 포유동물의 통상의 해독작용으로 해독되는 것일 수 있다. 예를들어, 약물은 간에서 잠재적으로 덜 독성의 글루쿠로니드(glucuronide)로 전환될 수 있다. 다음, 해독된 중간체는 표적부위에서 예비표적화된 효소에 의해 더 독성의 형태로 재 전환될 수 있다. 선택적으로, 투여된 전구체는 예비표적화된 효소에 의해 활성화 약물로 전환될 수 있다. 예비표적화된 효소는 해독된 약물을 재순환함으로써 치료의 효율성을 향상시킨다. 상기의 접근법은 어떤 효소-약물 쌍과 사용하는데 채택될 수 있다. In one example of application, the targetable structure may be conjugated to an enzyme that activates the precursor at the target site and modulates the detoxification pathway in the body to enhance the efficiency of normal treatment or to perform an enzyme reaction that affects the therapeutic response. Can be. For example, appropriate targets are pretargeted to the target site followed by injection of a cytotoxic drug known to act on the target site. The drug may be detoxified by the normal detoxification of the mammal. For example, the drug can be converted to glucuronide, which is potentially less toxic in the liver. The decoded intermediate can then be converted back into a more toxic form by a pretargeted enzyme at the target site. Optionally, the administered precursor can be converted to the activating drug by a pretargeted enzyme. Pretargeted enzymes improve treatment efficiency by recycling the detoxified drug. The above approach can be adapted for use with any enzyme-drug pair.

항암 치료에 유용한 적당한 세포독성 약물은 혈청에서 상대적으로 불용성이다. 또한, 몇몇은 비컨쥬게이트된 형태에서 약간 독성이며, 이의 독성은 전구체로 전환함으로써 상당히 감소된다. 약간 가용성 약물이 글루쿠로니드, 친수성 산의 에스테르 또는 친수성 아민의 아미드와 같은 더 가용성 컨쥬게이트로의 전환은 혈청의 수용상에서 용해도, 및 정맥, 동맥 또는 모세관 세포벽을 통과하는 능력 및 세포조직사이의 유체 용액 종양에 도달하는 능력이 향상될 것이다. 전구체의 절단은 표적부위에서 덜 가용성 약물을 퇴적시킨다. 상기 약물-대-약물 전환의 많은 예는 전체가 참조예가 되는 Hansen 미국특허 제5,851,527호에 기재되어 있다. Suitable cytotoxic drugs useful for anticancer therapy are relatively insoluble in serum. In addition, some are slightly toxic in unconjugated form and their toxicity is significantly reduced by converting to precursors. The conversion of slightly soluble drugs to more soluble conjugates such as glucuronide, esters of hydrophilic acids or amides of hydrophilic amines is characterized by solubility in the aqueous phase of serum and the ability to cross vein, arterial or capillary cell walls and between tissues. The ability to reach fluid solution tumors will be improved. Cleavage of the precursor deposits less soluble drug at the target site. Many examples of such drug-to-drug conversions are described in Hansen US Pat. No. 5,851,527, which is incorporated by reference in its entirety.

간에서 방향족 또는 지방족 알콜, 티올, 페놀 및 아민과 같은 독성물질이 글루쿠로니드로의 전환은 이들을 해독하고 소변에서 용이하게 배설하도록 하는 체내방법이다. 상기 기질로 전환될 수 있는 항종양 약물의 한 형태는 에피루비신(epirubicin), 독소루비신의 4-에피머(epimer)(Adriamycin)이며, 이는 안트라사이클린(anthracycline) 글리코시드이고 인간 베타-D-글루쿠로니다아제용 기질로 나타내왔다. 예로, Arcamone Cancer Res. 45:5995(1985)를 보아라. 소수의 극성 그룹을 갖는 다른 유사체는 더 친유성일 것으로 예상되며, 상기 접근에 더 큰 가망을 나타낼 것으로 예상된다. 방향족 또는 지방족 알콜, 티올 또는 아민그룹을 갖는 기타 약물 또는 독소는 상기 컨쥬게이트 형성에 후보자이다. 상기 약물 또는 이의 다른 전구체 형태는 본 발명의 부위-특이성 증대방법에 적절한 후보자이다. The conversion of toxic substances such as aromatic or aliphatic alcohols, thiols, phenols and amines to glucuronide in the liver is a method in the body that detoxifies them and facilitates their excretion in urine. One form of antitumor drug that can be converted to the substrate is epirubicin, a 4-epimer of doxorubicin (Adriamycin), which is an anthracycline glycoside and human beta-D-glu It has been shown as a substrate for kuronidase. For example, Arcamone Cancer Res. See 45: 5995 (1985). Other analogs with fewer polar groups are expected to be more lipophilic and show greater promise for this approach. Other drugs or toxins having aromatic or aliphatic alcohols, thiols or amine groups are candidates for forming the conjugates. The drug or other precursor form thereof is a suitable candidate for the site-specific enhancement method of the present invention.

다른 예로서 전구체 CPT-11 (이리노테칸(irinotecan))은 카르복실에스터라아제(carboxylesterase)에 의해 활성 대사산물 SN-38로 생체안에서 전환된다. 그러므로, 발명의 한 적용은 디-DTPA-카르복실에스터라아제 컨쥬게이트의 주입에 이어 종양 및 합텐(예를들어, 디-DTPA)에 대하여 표적할 수 있는 bsAb를 사용하는 것이다. 적절한 종양-대-배후 부위의 비율이 이루어졌을 때, CPT-11이 주어지고 종양-국부화된 카르복실에스터라아제는 종양에서 CPT-11을 SN-38로 전환시킨다. 이의 낮은 가용성때문에, 활성 SN-38은 종양주변에 남겨질 것이고, 결과적으로 표적화된 항원에 음적인 근처 종양 세포에 영향을 미칠것이다. 이는 방법의 장점이다. 카르복실에스터라아제의 변형된 형태를 기재하고, 발명의 범위내에 있다. 예로, Potter et al., Cancer Res. 58:2646-2651(1998) 및 Potter et al., Cancer Res. 58:3627-3632(1998)를 보아라. As another example the precursor CPT-11 (irinotecan) is converted in vivo to the active metabolite SN-38 by a carboxylesterase. Therefore, one application of the invention is to use bsAbs which can be targeted to tumors and hapten (eg, di-DTPA) following injection of the di-DTPA-carboxyesterase conjugate. When the appropriate tumor-to-backing site ratio is achieved, CPT-11 is given and tumor-localized carboxyesterases convert CPT-11 to SN-38 in the tumor. Because of its low solubility, active SN-38 will be left around the tumor and consequently affect nearby tumor cells that are negative for the targeted antigen. This is an advantage of the method. Modified forms of carboxyesterases are described and are within the scope of the invention. See, eg, Potter et al., Cancer Res. 58: 2646-2651 (1998) and Potter et al., Cancer Res. See 58: 3627-3632 (1998).

다른 예로서, 에토포사이드(Etoposide)는 이의 글루쿠로니드의 형성에 의해 다량으로 해독되는 암 약물로 널리 사용되며, 발명의 범위내에 있다. 예로, Hande et al., Cancer Res. 48:1829-1834(1998)을 보아라. 글루쿠로니드 컨쥬게이트는 세포독성 약물로부터 제조될 수 있고, 이는 mAb-글루쿠로니다아제 컨쥬게이트와 예비 표적화된 종양에 치료제로서 주입될 수 있다. 예로, Wang et al., Cancer Res. 52:4484-4491(1992)을 보아라. 따라서, 상기 컨쥬게이트는 여기에서 기재된 표적방법으로 사용될 수 있다. 유사하게, 도노마이신(daunomycin) 및 독소루비신의 유도체계 설계된 전구체는 카르복실에스터라아제 및 글루쿠로니다아제와 사용하는 것으로 기재되어 왔다. 예로, Bakina et al., J. Med Che. 40:4013-4018(1997)을 보아라. 본 발명 내에서 사용될 수 있는 전구체/효소 쌍의 다른 예는 특별히 한정되지 않지만, 페놀 머스타드 및 베타-글루쿠로니다아제의 수산기 유도체의 글루쿠로니드 전구체; 페놀 머스타드 또는 CPT-11 및 카르복실펩티다아제; 메토트레세이트(methotrexate)-치환 알파-아미노산 및 카르복시펩티다아제 A; 페니실린 또는 6-머캅토퓨린과 같은 약물의 세팔로스포린(cephalosporin) 컨쥬게이트, 및 독소루비신 및 베타-락타마아제; 에토포시드 포스페이트 및 알카린 포스페이트;를 포함한다. As another example, etoposide is widely used as a cancer drug that is detoxified largely by the formation of glucuronide and is within the scope of the invention. See, eg, Hande et al., Cancer Res. See 48: 1829-1834 (1998). Glucuronide conjugates can be prepared from cytotoxic drugs, which can be injected as therapeutics in mAb-glucuronidase conjugates and pretargeted tumors. See, eg, Wang et al., Cancer Res. See 52: 4484-4491 (1992). Thus, the conjugates can be used in the targeting methods described herein. Similarly, derivative based designed precursors of daunomycin and doxorubicin have been described for use with carboxyesterases and glucuronidase. See, eg, Bakina et al., J. Med Che. See 40: 4013-4018 (1997). Other examples of precursor / enzyme pairs that can be used within the present invention are not particularly limited, but include glucuronide precursors of hydroxyl derivatives of phenol mustard and beta-glucuronidase; Phenol mustard or CPT-11 and carboxypeptidase; Methotrexate-substituted alpha-amino acids and carboxypeptidase A; Cephalosporin conjugates of drugs such as penicillin or 6-mercaptopurine, and doxorubicin and beta-lactamase; Etoposide phosphate and alkaline phosphate.

b. 붕소-중성자 포획치료법(Boron Neutron Capture Therapy, BNCT)b. Boron Neutron Capture Therapy (BNCT)

또한, 본 발명은 붕소-중성자 포획치료법(BNCT) 프로토콜의 내용에 적용될 수 있다. BNCT는 종양-국부화된 ¹⁰B 원소의 중성자 조사에 의해 종양세포에 이온화 방사를 전달하는데 설계된 이성분계(binary system)이다. BNCT는 동위원소적으로 풍성한 ¹⁰B(자연존재비 19.8%로 존재)인 안정한 동위원소를 열적 중성자로 조사하여 알파입자 및 ⁷Li 핵을 생성할 경우 발생하는 핵 반응을 바탕으로 한다. 상기 입자들은 약 하나 세포지름의 경로길이를 갖고 있어 고선형 에너지 전달(High Linear Energy Transfer)을 초래한다. 상기 핵 반응에서 생성된 소수의 단-범위 1.7MeV 알파입자들은 세포핵을 표적하고 이를 붕괴하는데 충분하다. 암의 BNCT로의 성공은 종양부위에서 ¹⁰B의 고농도 국부화 방법이 요구되며, 본질적으로 비-표적 기관은 붕소-프리가 된다. BNCT에서 예비표적화 bsAb를 사용하여 대상에 종양을 치료하는 조성물 및 방법은 특허출원 09/205,243호(전체가 참조예가 됨)에 기재되어 있으며, 본 발명의 목적으로 용이하게 변형될 수 있다. In addition, the present invention can be applied to the contents of the boron-neutron capture therapy (BNCT) protocol. BNCT is a binary system designed to deliver ionizing radiation to tumor cells by neutron irradiation of tumor-localized ^10B elements. The BNCT is based on the nuclear reaction that occurs when alpha particles and ⁷ Li nuclei are generated by irradiating a thermal neutron with a stable isotope of ¹⁰ B (which is 19.8% natural). The particles have a path length of about one cell diameter, resulting in high linear energy transfer. The few short-range 1.7MeV alphaparticles produced in the nuclear reaction are sufficient to target and disrupt the cell nucleus. The success of cancer with BNCT requires a high concentration localization method of ¹⁰ B at the tumor site and essentially the non-target organ is boron-free. Compositions and methods for treating tumors in a subject using pretargeting bsAb in BNCT are described in patent application 09 / 205,243, which is incorporated by reference in its entirety, and can be readily modified for the purposes of the present invention.

c. 수술, 혈액내, 및 내시경적 종양 및 병변 검출, 생체검사법 및 치료c. Surgery, Blood, and Endoscopic Tumors and Lesions Detection, Biopsy and Treatment

본 발명의 추가적 적용에서 검출 및 영상화용으로 상기에서 기재한 바와 같이, 전체가 참조예가 되는 미국특허 5,716,595 및 6,096,289, 및 미국특허출원 공보 2002/0146369에 기재된대로 수술, 혈액내 및 내시경적 종양 및 병변 검출에 사용될 수 있다. As described above for detection and imaging in further applications of the present invention, surgery, blood and endoscopic tumors and lesions as described in US Pat. Nos. 5,716,595 and 6,096,289, and US Patent Application Publication 2002/0146369, which are incorporated by reference in their entirety. Can be used for detection.

d. 질병의 치료에 적용 및 기타 조건d. Applicable to the treatment of diseases and other conditions

상기에서 기재한 바와 같이, 본 구성 및 방법은 관련 조직을 표적화할 수 있는 다양한 질병 및 조건에 적용할 수 있다. 본 발명을 사용하여 치료할 수 있는 질병 및 조건의 몇몇을 하기에서 간략하게 기재한다. As described above, the present configurations and methods can be applied to a variety of diseases and conditions that can target related tissues. Some of the diseases and conditions that can be treated using the present invention are briefly described below.

1. 암 치료1. Cancer Treatment

암 치료에 유용한 기술 및 제제의 예들의 기재로 상기에서 기재한 바와 같이, 본 발명은 암을 치료하는데 매우 유용하다. 일반적으로, 본 발명은 암세포에 항암치료의 성분 및 항암제제를 표적할 수 있다. 표적화는 세포표면 암 표식자(cell-surface cancer marker)를 사용하여 수행하는 것이 바람직하다. 많은 경우에서 표식자는 정상세포위 암세포에 높게(예를들어, 여러배 또는 그 이상으로) 존재하는 단백질 또는 펩티드이다. 상기 표식자는 암의 특유한 형태 또는 관련된 암의 세트에 특이적이다. 전형적인 표식자의 수는 여기에서 제공되며, 당업계의 당업자들은 다른 표식자가 알려져 있고 다른 것들이 확인될 것이라는 것을 인지할 것이다. 상기 추가적 표시자는 본 발명에서 표적으로서 사용될 수 있다. As described above with examples of techniques and agents useful for treating cancer, the present invention is very useful for treating cancer. In general, the present invention can target components of anticancer therapy and anticancer agents to cancer cells. Targeting is preferably performed using a cell-surface cancer marker. In many cases, the marker is a protein or peptide that is present high (eg, several times or more) in cancer cells on normal cells. The marker is specific for a particular form of cancer or a set of related cancers. Typical numbers of markers are provided herein, and those skilled in the art will recognize that other markers are known and others will be identified. Such additional indicators may be used as targets in the present invention.

2. 자기면역장애(autoimmune disorder)2. autoimmune disorder

다른 전형적인 적용으로서, 본 조성물은 자기면역 장애에 관련하여 사용될 수 있다. 예를들어, 표적화 제제는 CD22, CD20, CD19, CD74, 또는 HLA-DR 항원과 같은 B-세포 항원을 표적하는데 사용될 수 있다. 자가면역 장애의 치료용 표적에 사용되는 예는 Goldenberg 및 Hansen, 국제출원 PCT/US00/15780, 국제출원 공보 WO 00/74718 A1, "Immunotherapy of Autoimmune Disorders Using Antibodies Which Target B-Cell"에 기재되어 있다. 상기에서 기재된 바와 같이, 상기 치료는 다면적 치료방법(multimodal treatment)에서 다른 치료와 같이 하나 이상의 B-세포 항원과 결합하는 항체의 사용 및 B-세포의 표적의 조합을 포함할 수 있다. 치료될 수 있는 자기면역 질병의 예들로는 제한없이, 면역매개저혈소판증(Immune-mediated thrombocytopenia)(급성 특발성 혈소판 감소성 자반병(acute Idiopathic thrombocytopenic purpura) 및 만성 특박성 혈소판 감소성 자방병 등), 피부근염 (dermatomyositis), 소무도병(Sydenham's chorea), 중증근무력증(myasthenia gravis), 전신성 홍반성 루푸스(Systemic lupus erythematosus), 루푸스 신염 (Lupus Nephritis), 류마티스열(Rheumatic fever), 다선증후군(Polyglandular Syndrome), 유천포창(Bullous Pemphigoid), 당뇨병(diabetes mellitus), 헤노흐-쉔라인 자반증(Henoch-Schonlein purpura), 연쇄상구균 감염후(Post-streptococcal) 신장염, 결절성 홍반(Erythema Nodosum), 다까야수 동맥염(Takayasu's arteritis), 애디슨병(Addison's disease), 류머티스성 관절염(rheumatoid arthritis), 다발성 경화증(Multiple Sclerosis), 유육종증(Sarcoidosis), 궤양성 직장염(ulcerative colitis), 다형 홍반(erythema multiforme), IgA 신병증(IgA nephropathy), 결절다발동맥염(Polyarteritis Nodosa), 강직성 척추염(ankylosing spondylitis), 구드패스츄어 증후군(Goodpasture's syndrome), 혈전맥관염(thromboangitis ubiterans) 쇼그렌증후군(sjogren's syndrome), 원발성 담즙성 간경변증(Primary biliary cirrhosis), 하시모토 갑상선염(Hashimoto's thyroiditis), 갑상선중독증(Thyrotoxicosis), 공피증(Scleroderma), 만성 활동성 간염(Chronic active hepatitis), 다발성 근염(polymyositis)/피부근염 (dermatomyositis), 다발연골염(polychondritis), 심상성 천포창(Pemphigus Vulgaris), 웨게너육아종증(Wegener's granulomatosis), 막성 신증(Membranous nephropathy), 근위축성 측삭 경화증(amyotrophic lateral sclerosis), 척수로(tabes dorsalis), 거대세포 동맥염(Giant Cell Arteritis)/다발성근육통(polymyalgia), 악성 빈혈(pernicious anemia), 급성 진행성 사구체신염(rapidly progressive glomerulonephritis), 및 섬유성 폐렴(fibrosing alveolitis)과 같은 클래스 Ⅲ 자기면역 질병들을 포함한다. As another typical application, the compositions can be used in connection with autoimmune disorders. For example, targeting agents can be used to target B-cell antigens such as CD22, CD20, CD19, CD74, or HLA-DR antigens. Examples used for therapeutic targets of autoimmune disorders are described in Goldenberg and Hansen, International Application PCT / US00 / 15780, International Application Publication WO 00/74718 A1, "Immunotherapy of Autoimmune Disorders Using Antibodies Which Target B-Cell". . As described above, the treatment may comprise the use of an antibody that binds one or more B-cell antigens and a target of B-cells, like other treatments in a multimodal treatment. Examples of autoimmune diseases that can be treated include, but are not limited to, immuno-mediated thrombocytopenia (such as acute Idiopathic thrombocytopenic purpura and chronic thrombocytopenic purpura), and skin Dermatomyositis, Sydenham's chorea, myasthenia gravis, Systemic lupus erythematosus, Lupus Nephritis, Rheumatic fever, Polyglandular Syndrome Bullous Pemphigoid, Diabetes mellitus, Henoch-Schonlein purpura, Post-streptococcal nephritis, Erythema Nodosum, Takayasu's arteritis ), Addison's disease, rheumatoid arthritis, Multiple Sclerosis, Sarcoidosis, Ulcerative colitis itis, erythema multiforme, IgA nephropathy, Polyarteritis Nodosa, ankylosing spondylitis, Goodpasture's syndrome, thromboangitis ubiterans Sjogren's syndrome, primary biliary cirrhosis, Hashimoto's thyroiditis, thyrotoxicosis, scleroderma, chronic active hepatitis (polymyitis), polymyositis Dermatomyositis, polychondritis, Pemphigus Vulgaris, Wegener's granulomatosis, Membranous nephropathy, amyotrophic lateral sclerosis, spinal cord dorsalis, Giant Cell Arteritis / polymyalgia, pernicious anemia, acute progressive progres class III autoimmune diseases such as sive glomerulonephritis, and fibrosing alveolitis.

3. 감염성 질병(Infectious Disease)3. Infectious Disease

병원성 또는 기회성 세균, 균류, 리케차, 원생동물, 및 바이러스 등과 같은 감염성 것들은 사용될 수 있는 표적을 제공한다. 상기 표적은 감염성 것의 세포 위에 있을 수 있거나, 감염된 숙주세포의 표면(예를들어, 세포의 감염이 세포표면위 특징 표식자를 남겨둘 경우)에 있을 수 있다. 특이한 감염성 것들의 종류는 여기에서 표적을 제공하는 것으로 기재하며; 여기에서 반복하지는 않을 것이다. Infectious ones such as pathogenic or opportunistic bacteria, fungi, rickettsia, protozoa, viruses, and the like provide targets that can be used. The target may be on a cell of an infectious one or may be on the surface of an infected host cell (eg, if the infection of the cell leaves a characteristic marker on the cell surface). The kinds of specific infectious ones are described herein as providing a target; I won't repeat here.

4. 정상 세포 표적화4. Normal Cell Targeting

많은 경우에 본 방법은 병리학 표적, 예를들어 암세포, 감염된 세포, 전염성 것들, 생화학 작용에서 생화학 불균형 또는 결함을 갖는 세포를 표적하는데 적용된다. 그러나, 정상 세포를 표적하는데 도움이 된다. In many cases the method is applied to targeting pathological targets, for example cancer cells, infected cells, infectious ones, cells with biochemical imbalances or defects in biochemical action. However, it helps to target normal cells.

5. 조합치료5. Combination Therapy

단일 치료성 부분은 본 발명을 사용하여 전달되는 방법에 더하여, 성분 및 방법은 부가적 치료성 부분의 적어도 하나에서 및/또는 개별적 치료성 방법으로 동시에 수행되도록 배열될 수 있다. 예를들어, 암의 표적화된 면역요법을 사용한 다중 제제 치료법의 적용은 전체가 참조예가 되는 Griffiths et al., 미국특허 6,077,499 "Targeted Combination Immunotherapy of Cancer"에 기재되어 있다. 상기 2-제제(또는 다중제제, 예를들어, 2,3,4-제제) 방법은 본 발명에서 수행될 수 있으며, 예를들어 동일한 결합부위이나 상이한 치료성 부위를 갖는 부위에 설계된 표적화할 수 있는 구조를 사용하거나, 상이한 치료성 부위를 포함하는 표적화할 수 있는 구성을 사용하여 수행될 수 있다. 예를들어, 상기 상이한 치료성 부위는 2개의 상이한 약물, 2개의 상이한 독소, 2개의 상이한 방사성핵종, 방상성핵종 및 약물, 방사성핵종 및 독소, 약물 및 독소를 함유할 수 있다. 선택적으로, 개별적 표적화할 수 있는 구성은 개별적 결합 부위, 전형적으로 일차 표적화 제제 또는 제제들 위에 결합하여 사용될 수 있다. 또한, 상기 조합 치료는 전체가 참조예가 되는 Griffiths et al., 국제출원 PCT/US01/41048, 국제공보 WO 01/97855 A2, "Targeted Combinationn Immunotherapy of Cancer and Infectious Diseases"에 기재되어 있다. In addition to the methods delivered using the present invention, a single therapeutic moiety, the components and methods may be arranged to be performed simultaneously on at least one of the additional therapeutic moieties and / or in separate therapeutic methods. For example, application of multiple agent therapy using targeted immunotherapy of cancer is described in Griffiths et al., US Pat. No. 6,077,499, "Targeted Combination Immunotherapy of Cancer", which is incorporated by reference in its entirety. The two-agent (or multi-agent, e.g., 2,3,4-agent) method can be carried out in the present invention, for example, targeted to sites having the same binding site or different therapeutic sites. Using structures that are present, or targeting constructs that include different therapeutic sites. For example, the different therapeutic moieties may contain two different drugs, two different toxins, two different radionuclides, acicular radionuclides and drugs, radionuclides and toxins, drugs and toxins. Alternatively, individually targetable constructs may be used in combination on individual binding sites, typically on a primary targeting agent or agents. The combination therapy is also described in Griffiths et al., International Application PCT / US01 / 41048, International Publication WO 01/97855 A2, "Targeted Combinationn Immunotherapy of Cancer and Infectious Diseases," which are incorporated by reference in their entirety.

e. 생체 내 적용e. In vivo application

본 구성 및 방법은 치료 또는 영상화 목적 뿐만 아니라, 생체내 연구를 수행하는데 도움을 주기 위해 적용될 수 있다. 예를들면, 이특이성 일차 표적화제제는 표적화할 수 있는 구성이 하나이상의 bsAbs 또는 다른 이특이성 일차 표적화제제와 안정한 복합체를 형성할 수 있다면, 생체내에서 확인하는데 사용될 수 있다. 상기 분석은 상기 안정한 복합체를 형성하는 표적화할 수 있는 구성을 확인하는데 당업자에게 도움을 준다. 이는 당업자가 치료성 및/또는 영상화제제로서 우수할 것 같은 표적화할 수 있는 구성을 확인하게 한다. The present configurations and methods can be applied to assist in conducting in vivo studies, as well as for therapeutic or imaging purposes. For example, bispecific primary targeting agents can be used to identify in vivo if the targetable construct can form a stable complex with one or more bsAbs or other bispecific primary targeting agents. The assay helps those skilled in the art to identify targetable constructs that form the stable complex. This allows those skilled in the art to identify targeting constructs that are likely to be excellent as therapeutic and / or imaging agents.

상기 분석은 돌연변이 bsAb의 적어도 2 몰 당량을 갖는 표적화할 수 있는 구성을 조합함으로써 유리하게 수행된다. 배양에 이어, 혼합물은 구성이 bsAb 결합하였는지를 결정하기 위해 크기-배제 HPLC로 분석한다. 선택적으로, 분석은 다양한 bsAb의 용액이 96웰 판에 침적되어 있는 표준 조합방법을 사용하여 수행된다. 각 웰에 표적화할 수 있는 구성의 용액을 첨가한다. 배양 및 분석에 이어, 구성이 bsAb에 결합되어 있는지를 용이하게 결정할 수 있다. The assay is advantageously performed by combining a targetable construct having at least 2 molar equivalents of mutant bsAb. Following incubation, the mixture is analyzed by size-exclusion HPLC to determine if the composition is bsAb bound. Optionally, the analysis is performed using standard combination methods in which solutions of various bsAbs are deposited in 96-well plates. To each well is added a solution of targetable composition. Following incubation and analysis, it may be readily determined whether the composition is bound to bsAb.

상기 분석에서 표적화할 수 있는 구성에 이특이성 제제의 부가순서는 결정적인 것이 아니며; 즉 이특이성 제제가 구성에 첨가되거나 반대일 수 일수도 있다. 게다가, 돌연변이 bsAb 뿐만 아니라 구성도 용액에서 필요하지 않으며; 즉 가장 적절한 것이라면 용액 또는 니트(neat)에 첨가될 수 있다. 마직막으로, 결합 분석의 방법은 결합이 형성되는 동안에는 결정적이지 않다. 따라서, 제한적이지 않지만, FABMS, 고 자장(high field) NMR을 포함하는 표준 분석방법, 또는 크기 배제 HPLC와 결합하거나 대신하는 기타 적절한 방법을 사용하여 결합을 분석할 수도 있다. 당업계의 당업자들은 많은 적적한 결정방법에 익숙하다. The order of addition of the bispecific agent to the constructs that can be targeted in the assay is not critical; That is, the bispecific agent may be added to the composition or vice versa. Moreover, not only the mutant bsAb but also the composition are not needed in solution; That is, it may be added to the solution or neat if it is most appropriate. Finally, the method of binding analysis is not critical while bonds are being formed. Thus, but not limited to, binding can also be assayed using FABMS, standard assays including high field NMR, or other suitable methods in combination with or in place of size exclusion HPLC. Those skilled in the art are familiar with many suitable methods of determination.

Ⅶ. 표적 항원 및 Iii. Target antigen and 에피토프Epitope

표적 에피토프는 대상의 표적화된 조직에 의해 노출되거나 방출된 시료 또는 이의 세포 배양내에서 이루어진다. 시료는 신체상의 조직이거나 유동체 조직일 수 있으며, 대상내에 있거나 대상으로부터 생체검사되거나 제거된 것 일 수 있으며, 신체상 장기의 전체 또는 어느 부분일 수 있다. 게다가, 조직이 적출(excision) 및 본 발명의 방법 사이에서 보존 단계없이 대상으로부터 제거된다면, 조직은 "시료"가 될 수 있다. 또한, 조직은 본 발명의 방법의 적용에 앞서서 제한적이지 않지만, 냉동, 금속냉동, 파라핀 포매(Embedding) 및 조직 고정을 포함하는 표준 조직 제조기술로 보존될 수 있다. Target epitopes are made in a sample or cell culture thereof exposed or released by a subject's targeted tissue. The sample may be tissue on the body or fluid tissue, may be in the subject or may be biopsied or removed from the subject, and may be all or any part of an organ on the body. In addition, the tissue may be a "sample" if the tissue is removed from the subject without a preservation step between extraction and the method of the present invention. In addition, tissue may be preserved with standard tissue preparation techniques including, but not limited to, prior to the application of the methods of the invention, including freezing, freezing, paraffin embedding, and tissue fixation.

"노출(displayed)"은 막단백질(membrane protein)의 부분이 세포, 조직 및/또는 기관의 표면에 존재하는 것을 의미하며, 세포, 조직 또는 기관의 외부환경과 접촉하는 것이다. 표적 에피토프는 제한적이지 않지만, 암, 증식성 장애(proliferative disorder), 및 병원성 감염을 포함하는 질병, 및 기타 질병, 및 조건들과 관련될 수 있다. "Displayed" means that a portion of the membrane protein is present on the surface of a cell, tissue and / or organ, and is in contact with the external environment of the cell, tissue or organ. Target epitopes may be associated with, but not limited to, diseases including cancer, proliferative disorders, and pathogenic infections, and other diseases and conditions.

A. 과증식성(hyperproliferative) 질병과 관련된 항원 및 에피토프A. Antigens and Epitopes Associated with Hyperproliferative Diseases

본 발명에서 사용된 이특이성 일차 표적화제제(예를들어, 항체)는 과증식성 질병과 관련된 세포표면 또는 세포내 항원의 종류에 특이하게 설계될 수 있다. 정상조직 생체항상성(homeostasis)은 세포 증식 및 세포사멸의 속도사이에서의 복잡한 균형으로 이루어진다. 세포증식의 속도가 증가하거나 세포사멸의 속도가 감소함에 의한 상기 균형의 붕괴는 세포의 비정상적 성장을 초래하고, 암 및 기타 과증식성 질병의 발전에서 주요 사건으로 간주된다. 따라서, "과증식성 질병"은 세포들이 세포분열이 비정상적으로 높은 속도를 갖고/거나 괴사 및/또는 세포사(apoptosis)가 비정상적으로 낮은 속도를 갖는 것이다. 비-제한적인 예로는 종양의 발생과정(tumorigenesis); 종양 진행; 백혈병, 고형암(solid tumor) 및 전이와 같은 암류; 건선; 양성 전립선 비대증(Benign Prostatic Hypertrophy), 피부의 양성증식(hyperplasia) 및 혈관종(hemangiomas)과 같은 양성 과증식성 질병; 건선 및 류마티스성 관절염과 같은 만성염증(chronic inflammatory) 과증식성 질병; 당뇨병성 망막증(diabetic retinopathy) 및 황반변성(macular degeneration)과 같은 증식성 눈 장애; 및 재협착(restenosis) 및 죽상동맥경화(Atherosclerosis)와 같은 증식성 심장혈관 장애;를 포함한다. 혈관성형술(angioplasty) 또는 기타 동맥손상에 이어 혈관의 내강(lumen)으로 부드러운 근육세포의 재성장에 의해 특징되어진 재협착은 혈관성형술의 성공관점에서 종종 및 재발생하는 문제이며, 동맥성 복원, 죽종절제술(atherectomy), 스텐트(stent) 체내이식(implantation), 및 레이저 혈관성형술 후에 발생한다. The bispecific primary targeting agents (eg, antibodies) used in the present invention may be specifically designed for the type of cell surface or intracellular antigens associated with hyperproliferative diseases. Normal tissue homeostasis consists of a complex balance between the rate of cell proliferation and apoptosis. Disruption of this balance by increasing the rate of cell proliferation or decreasing the rate of apoptosis leads to abnormal growth of cells and is considered a major event in the development of cancer and other hyperproliferative diseases. Thus, "hyperproliferative disease" is that cells have an abnormally high rate of cell division and / or an abnormally low rate of necrosis and / or apoptosis. Non-limiting examples include tumorigenesis; Tumor progression; Cancers such as leukemia, solid tumors and metastases; psoriasis; Benign hyperproliferative diseases such as Benign Prostatic Hypertrophy, hyperplasia of the skin and hemangiomas; Chronic inflammatory hyperproliferative diseases such as psoriasis and rheumatoid arthritis; Proliferative eye disorders such as diabetic retinopathy and macular degeneration; And proliferative cardiovascular disorders such as restenosis and atherosclerosis. Restenosis, characterized by regrowth of smooth muscle cells into the lumen of blood vessels after angioplasty or other arterial injuries, is a frequent and reoccurring problem in the success of angioplasty. ), Stent implantation, and laser angioplasty.

상기 항원은 예를들어 종양에 의해 생성된 물질일 수 있거나, 세포질, 핵세포 또는 세포표면 또는 세포내 수용체를 포함하는 다양한 세포기관 또는 세포이하의 구조에서 종양세포 표면 위 또는 종양세포내의 종양부위에 축적된 물질일 수 있다. 상기 종양관련 표식자들은 제한적이지 않지만, Herberman, Immunodiagnosis of Cancer, in Fleisher ed., The Clinical Biochemistry of Cancer, page 347 (American Association of Clinical Chemists, 1979) 및 미국특허 제 4,150,149; 4,361,544; 및 4,444,744에 기재되어 있다. The antigen may be, for example, a substance produced by a tumor, or on a tumor cell surface or within a tumor cell in various organelles or subcellular structures, including cytoplasm, nuclear cells or cell surfaces or intracellular receptors. It may be an accumulated material. Such tumor-associated markers include, but are not limited to, Herberman, Immunodiagnosis of Cancer, in Fleisher ed., The Clinical Biochemistry of Cancer, page 347 (American Association of Clinical Chemists, 1979) and US Pat. No. 4,150,149; 4,361,544; And 4,444,744.

종양관련 표식자는 종양태아성 항원(Oncofetal antigen), 태반항원(placental antigen), 항원관련 종양원성(oncogenic) 또는 종양 바이러스, 항원관련 조직, 항원관련 기관, 전위의 호르몬 및 정상 항원 또는 이의 변형을 포함하는 분류로 상기 위의 Herberman에 의해 분류되어졌다. 가끔, 종양관련 표식자의 서브-유닛은 미국특허 제 4,361,644 및 4,444,744(전체가 참고예가 됨)에 기재된 바와 같이 비-종양 물질에 감소된 가교반응성을 갖는 항체의 생성을 자극하는 인체 융모 성성 호르몬(Human chorionic gonadotropin, hCG)의 베타-서브유닛 또는 CEA(Carcinoembryonic antigen)의 감마부위의 높은 종양특이성을 갖는 항체를 야기하는데 유리하게 사용된다. Tumor-associated markers include oncofetal antigens, placental antigens, antigen-associated oncogenic or tumor viruses, antigen-associated tissues, antigen-related organs, translocation hormones and normal antigens or modifications thereof. Was classified by Herberman above. Occasionally, the sub-units of tumor-associated markers are human chorionic hormones (Human) that stimulate the production of antibodies with reduced cross-reactivity to non-tumor substances, as described in US Pat. It is advantageously used to induce antibodies having high tumor specificity on the beta-subunit of chorionic gonadotropin (hCG) or gamma of carcinoembryonic antigen (CEA).

비-제한적으로 적절한 종양관련 표식자 또는 수용체의 예로는 종양의 혈관구조(vasculature)(혈관내피조직(vascular endothelium)에 의해 생성되는 종양 혈관신생(angiogenesis) 표식자)에 의해 발현되는 VEGF 및 테나신(tenascin)과 같은 표적 분자들 및 p53과 같은 발암유전자(oncogene)-관련 표식자 뿐만 아니라, B-세포 복합체 구조(예를들어, CD19, CD20, CD21, CD22, CD23, CD74, CD80), 조혈성(hematopoietic) 및 일정 고형 종양(CD74, HLA-DR)에 발현된 기타 수용체, 및 다양한 암에 발현된 종양관련 표식자(예를들어, 태아성암항원(Carcinoembryonic Antigen), CSAp, MUC-1, MUC-2, MUC-3, MUC-4, Tag-72, EGP-1, EGP-2, A33 항체에 특이적 항원, PSA, PSMA, EGFR, HER2/neu, PAM-4, AFP, HCG, 및 이들의 서브유닛, 흑색종 연관 항원(melanoma-associated antigen)(예를들어, S100), 신경교종 (Glioma) 관련 항원, 난소암 관련 항원 등)를 포함한다. 여기에서 기재된 상기 항원에 예시적인 항체에 부가적으로, 상기 항원에 항체들은 당업계에서 알려진 것이다(예로, Kim S., Song S., Kim Y., Park S. Expression and Chracterization of a Recombinant Fab Fragment Derived from an Anti-Human alpha-Fetoprotein Monoclonal Antibody. Mol. Cells 11:158-163, 2001; 및 Haisma HJ, Sernee MF, Hooijberg E, Brakenhoff RH, Meulen-Muilenman I, Pinedo HM; Boven E. Construction and chracterization of a fusion protein of single-chain anti-CD40 antibody and human glucuronidase for andtibody-directed enzyme prodrug therapy. Blood 92: 184-190, 1998을 보아라). Examples of non-limiting suitable tumor-associated markers or receptors include VEGF and tenascin expressed by the tumor's vasculature (tumor angiogenesis markers produced by vascular endothelium). Target molecules such as) and oncogene-related markers such as p53, as well as B-cell complex structures (e.g., CD19, CD20, CD21, CD22, CD23, CD74, CD80), hematopoietic ) And other receptors expressed in certain solid tumors (CD74, HLA-DR), and tumor-related markers expressed in various cancers (e.g., Carcinoembryonic Antigen, CSAp, MUC-1, MUC-2, Antigens specific for MUC-3, MUC-4, Tag-72, EGP-1, EGP-2, A33 antibodies, PSA, PSMA, EGFR, HER2 / neu, PAM-4, AFP, HCG, and subunits thereof , Melanoma-associated antigens (eg, S100), glioma-associated antigens, ovarian cancer-associated antigens, and the like. In addition to exemplary antibodies to the antigens described herein, antibodies to the antigens are known in the art (eg, Kim S., Song S., Kim Y., Park S. Expression and Chracterization of a Recombinant Fab Fragment) Derived from an Anti-Human alpha-Fetoprotein Monoclonal Antibody.Mol. Cells 11: 158-163, 2001; and Haisma HJ, Sernee MF, Hooijberg E, Brakenhoff RH, Meulen-Muilenman I, Pinedo HM; Boven E. Construction and chracterization of a fusion protein of single-chain anti-CD40 antibody and human glucuronidase for andtibody-directed enzyme prodrug therapy.See Blood 92: 184-190, 1998).

대상의 다른 표식자는 막관통 활성제(transmembrane activator) 및 CAML-상호작용자(TACI)가 있다. Yu et al., Nat. Immunol. 1:252-256(2000)을 보아라. 간략하게, TACI는 B-세포 악성종양(예를들어, 림프종(lymphoma))에의 표식자이다. 게다가, TACI 및 B 세포 성숙(maturation)항원(BCMA)은 종양괴사 인자 동종 세포증식 유도 리간드(a proliferation inducing ligand, APRIL)에 의해 결합된다. APRIL은 생체내에서 일차 B 및 T 세포의 세포증식을 자극하고, 생체내에서 B 세포의 축적으로 비장 중량이 증가한다. 또한, APRIL는 수용체 결합에 TALL-1(BLys 또는 BAFF라 지칭함)과 경쟁한다. 가용성 BCMA 및 TACI는 APRIL의 결합을 특이적으로 방해하고, 일차 B 세포의 APRIL-자극 세포증식을 방해한다. 또한, BCMA-Fc는 쥐에서 키홀림펫 헤모시아닌(keyhole limpet hemocyanin) 및 프네모박스(pneumovax)에 대하여 항체의 생성을 억제하며, 이는 BCMA 및/또는 TACI에 의하여 APRIL 및/또는 TALL-I 신호가 체액의 면역성의 생성에 요구되는 것을 가리킨다. 따라서, APRIL-TALL-I 및 BCMA-TACI는 B 및 T세포기능의 자극과 관련하여 2 리간드-2 수용체 경로를 형성한다. Other markers of the subject are transmembrane activators and CAML-interacters (TACI). Yu et al., Nat. Immunol. See 1: 252-256 (2000). Briefly, TACI is a marker for B-cell malignancies (eg, lymphoma). In addition, TACI and B cell maturation antigens (BCMA) are bound by a tumor necrosis factor allogenic proliferation inducing ligand (APRIL). APRIL stimulates the proliferation of primary B and T cells in vivo, and increases the spleen weight as accumulation of B cells in vivo. APRIL also competes with TALL-1 (called BLys or BAFF) for receptor binding. Soluble BCMA and TACI specifically interfere with the binding of APRIL and interfere with APRIL-stimulated cell proliferation of primary B cells. In addition, BCMA-Fc inhibits the production of antibodies against keyhole limpet hemocyanin and pneumovax in rats, which are either APRIL and / or TALL-I by BCMA and / or TACI. Indicates that a signal is required for the generation of immunity of body fluids. Thus, APRIL-TALL-I and BCMA-TACI form a two ligand-2 receptor pathway in connection with stimulation of B and T cell function.

종양-특이성 항원(TSAs), 종양관련 분화 항원(differentiation antigen, TADAs), 및 암 관련된 기타 항원, 및 기타 과증식성 질병은 한정적이지 않지만, C1 IAC, 인간 암관련 단백질(Osther, 미국특허4,132,769); CA125 항원, 난소의 낭선암(cystadenocarcinoma) 관련 항원(Hanisch et al., Carbohydr. Res. 178:29-47, 1998; O'Brien, 미국특허 4,921,790); CEA(태아성암항원(Carcinoembryonic Antigen)), 많은 선암(adenocarcinoma)에 존재하는 항원(Horig et al., Strategies for cancer therapy using carcinembryonic antigen vaccines, Expert Reviews in Molecular Medicine, http://www. ermm.cbcu.cam.ac.uk:12,000); Toth et al., (미국특허 제4,914,021)에 기재된 암 또는 오로소뮤코이트 관련 항원(carcinoma or orosomucoid-related antigen)) CORA; 인간 유방암으로부터 DF3 항원(Kufe, 미국특허 4,963,484 및 5,053,489); DU-PAN-2, 췌장암종(pancreatic carcinoma)(Lan et al., Cancer Res. 45:305-310, 1985); HCA, 인간 암종 항원(Codington et al., 미국특허 5,693,763); Her2, 유방암 항원(Fendly et al., The Extracellular Domain of HER2/neu Is a Potential Immunogen for Active Specific Immunotherapy of Breast Cancer, Journal of Biological Response Modifiers 9:449-455, 1990); MSA, 유방암 당단백질(glycoprotein)(Tjandra et al., Br. J. Surg. 75:811-817, 1988); MFGM, 유방암 항원(Ishida et al., Tumor Biol. 10:12-22, 1989); PSA(전립선특이항원(Prostate Specific Antigen))(Nadji et al. Prostatic-specific-antigen, Cancer 48:1229-1232,1981); STEAP(Six-Transmembrane Epithelial Antigen of prostate) 단백질(Afar et al., 미국특허 6,329,503호); TAG-72, 유방암종 당단백질(Kjeldsen et al., Cancer Res. 48:2214-2220, 1988); YH206, 폐암종 항원(Hinoda et al., Cancer .42:653-658,1988); 인간 흑색종의 항원, p97(Estin et al., Recombinant Vaccinia Virus Vaccine Against the Human Melanoma Antigen p97 for Use in Immunotherapy, Proc. Natl Acad. Sci, USA, 85:1052-1056,1988); 및 미국특허 6,025,191호에 Pfreundschuh에 의해 기재된 흑색종 특이성 항원;을 포함한다. Tumor-specific antigens (TSAs), tumor-related differentiation antigens (TADAs), and other antigens related to cancer, and other hyperproliferative diseases include, but are not limited to, C1 IAC, human cancer-related proteins (Osther, US Pat. No. 4,132,769); CA125 antigen, ovarian cystadenocarcinoma-associated antigen (Hanisch et al., Carbohydr. Res. 178: 29-47, 1998; O'Brien, US Pat. No. 4,921,790); Carcinoembryonic Antigen (CEA), an antigen present in many adenocarcinoma (Horig et al., Strategies for cancer therapy using carcinembryonic antigen vaccines, Expert Reviews in Molecular Medicine, http: //www.ermm.cbcu .cam.ac.uk: 12,000); Cancer or orosomucoid-related antigens described in Toth et al. (US Pat. No. 4,914,021) CORA; DF3 antigens from human breast cancer (Kufe, US Pat. Nos. 4,963,484 and 5,053,489); DU-PAN-2, pancreatic carcinoma (Lan et al., Cancer Res. 45: 305-310, 1985); HCA, human carcinoma antigen (Codington et al., US Pat. No. 5,693,763); Her2, Breast Cancer Antigen (Fendly et al., The Extracellular Domain of HER2 / neu Is a Potential Immunogen for Active Specific Immunotherapy of Breast Cancer, Journal of Biological Response Modifiers 9: 449-455, 1990); MSA, breast cancer glycoprotein (Tjandra et al., Br. J. Surg. 75: 811-817, 1988); MFGM, breast cancer antigen (Ishida et al., Tumor Biol. 10: 12-22, 1989); PSA (Prostate Specific Antigen) (Nadji et al. Prostatic-specific-antigen, Cancer 48: 1229-1232,1981); Six-Transmembrane Epithelial Antigen of prostate (STEAP) protein (Afar et al., US Pat. No. 6,329,503); TAG-72, breast carcinoma glycoprotein (Kjeldsen et al., Cancer Res. 48: 2214-2220, 1988); YH206, lung carcinoma antigen (Hinoda et al., Cancer. 42: 653-658,1988); Antigen of human melanoma, p97 (Estin et al., Recombinant Vaccinia Virus Vaccine Against the Human Melanoma Antigen p97 for Use in Immunotherapy, Proc. Natl Acad. Sci, USA, 85: 1052-1056,1988); And melanoma specific antigens described by Pfreundschuh in US Pat. No. 6,025,191.

B. 병원균-관련 항원B. Pathogen-Related Antigens

본 발명이 암 및 기타 세포증식성 질병에 관련된 에피토프에 표적화하는데 특이적으로 유용하며, 상기 에피토프에만 제한적이지 않다. 예를들어, 본 발명은 바이러스, 박테리아 및 균류와 같은 병원균의 존재에 관련된 에피토프를 표적하는데 사용될 수 있다. 단클론 항체의 광범위한 종류들은 예를들어 Polin, 1984, Eur. J. Clin. Microbiol.4(5):387-398에 요약된 바와 같이 전염성 제제에 대하여 개발되어왔다. 전염성 제제에 대한 특이적 항체는 미국특허 제 3927193; 4331647; 4348376; 4361544; 4818709 및 4624846호에 기재되어 있다. 상기 표적에 대하여 영향을 미치는 상기 항체 또는 기타 적절한 항체는 본 발명에서 사용될 수 있다. 게다가, 몇개의 예시적인 병원균들은 하기에서 지적한다. The present invention is particularly useful for targeting epitopes associated with cancer and other cell proliferative diseases, but is not limited to such epitopes. For example, the present invention can be used to target epitopes involved in the presence of pathogens such as viruses, bacteria and fungi. A wide variety of monoclonal antibodies are described, for example, in Polin, 1984, Eur. J. Clin. It has been developed for infectious agents as summarized in Microbiol. 4 (5): 387-398. Specific antibodies to infectious agents are described in US Pat. 4331647; 4348376; 4361544; 4818709 and 4624846. The antibody or other suitable antibody that affects the target can be used in the present invention. In addition, some exemplary pathogens are pointed out below.

1. 바이러스1. Virus

제한적이지 않지만, 표적화될 수 있는 바이러스의 예들은 간염 A형, 간염 B형, 간염 C형, 독감, 수두, 아데노바이러스, 단순포진(herpes simplex) I형(HSV-I), 단순포진 Ⅱ형(HSV-Ⅱ), 우역(rinderpest), 리노바이러스(rhinovirous), 에코바이러스(echovirus), 광견병 바이러스(rabies virus), 에볼라 바이러스(Ebola Virus), 로타바이러스(rotavirus), 합포체성 바이러스(Respiratory syncytial viruse), 파필로마 바이러스(papilloma virus), 파포바 바이러스(papova virus), 거대세포바이러스(Cytomegalovirus;CMV), 에키노바이러스(echinovirus), 아르보 바이러스(Arbovirus), 한타 바이러스(Hantavirus), 수족구병 바이러스(Coxsackie Virus), 멈프스바이러스(mumps virus), 홍역 바이러스(Measles Virus), 풍진 바이러스(rubella virus), 폴리오바이러스(polio virus), 인간의 면역결핍 바이러스(human immunodeficiency virus) 타입 Ⅰ(HIV-I) 및 인간의 면역결핍 바이러스 타입 Ⅱ(HIV-Ⅱ), 센다이 바이러스(Sendai virus), 고양이 백혈병 바이러스(Feline leukemia virus), 레오바이러스(reovirus), 폴리오바이러스, 인간혈청 간췌장 바이러스(parvo-like virus), 시미언바이러스 40(simian virus, SV40), 합포체성 바이러스, 쥐유방종양바이러스(mouse mammary tumor virus, MMTV), 수두대상포진 바이러스(varicella-Zoster virus), 뎅기 바이러스(Dengue virus), 풍진바이러스, 홍역바이러스, 아데노바이러스, 인간 T세포 백혈병 바이러스(human T-cell leukemia virus), 엡스타인-바르 바이러스(Epstein-Barr Virus), 뮤린 류케미아 바이러스(Murine Leukemia Virus), 수포성 구내염 (Vesicular stomatitis) 바이러스(VSV), 천연두바이러스(Smallpox;Variola virus), 신드비스 바이러스(sindbis virus), 림프구 맥락수막염 바이러스(lymphocytic choriomeningitis virus), 우역 바이러스(rinderpest virus), 사마귀 바이러스(wart virus) 및 청설 바이러스(blue tongue virus)를 포함한다. Examples of viruses that can be targeted include, but are not limited to, hepatitis A, hepatitis B, hepatitis C, flu, chickenpox, adenovirus, herpes simplex type I (HSV-I), and herpes simplex type II ( HSV-Ⅱ), rinderpest, rinonovirous, echovirus, rabies virus, ebola virus, rotavirus, respiratory syncytial viruse , Papilloma virus, papova virus, cytomegalovirus (CMV), echinovirus (echinovirus), arbovirus (Hantavirus), hand and foot disease virus (Coxsackie) Virus, mumps virus, measles virus, rubella virus, poliovirus, human immunodeficiency virus type I (HIV-I) and Human immunity Pip virus type II (HIV-II), Sendai virus, Feline leukemia virus, reovirus, poliovirus, human serum pancreatic virus (parvo-like virus), simian virus 40 (simian virus, SV40), synaptic virus, mouse mammary tumor virus (MMTV), varicella-Zoster virus, dengue virus, rubella virus, measles virus, adeno Virus, human T-cell leukemia virus, Epstein-Barr Virus, Murine Leukemia Virus, Vesicular stomatitis virus (VSV), smallpox Virus (Smallpox; Variola virus), Sindbis virus, Lymphocytic choriomeningitis virus, Rinderpest virus, Wart virus (wart virus) and blue tongue virus.

2. 세포내 병원균2. Intracellular Pathogens

유사하게, 세포내 절대 병원균의 비-제한적인 예로는 클라미디아(Chlamydia sp.), 리케차(Rickettsia sp.), 제한되지는 않지만 레이시마니아종(Leishmania), 코그지디오아종(kokzidioa) 및 라임관절염(Lyme disease)의 병원체(causative agent)인 보렐리아 부르그도페리(Borrelia burgdorferi)를 포함하는 트리파노소마속(trypanosoma)을 포함하는 세포내 원생동물(intracellular protozoa); 및 말라리아의 병원체인 열대열 원충(P. falciparum), 수면병을 야기하는 혈액편모충(hemoflagellate)인 트리파노소마 브루세이(Trypanosoma brucei), 및 샤가스병 (Chagas’disease)을 야기하는 트리파노소마 크루지(Trypanosoma cruzi)을 포함하는 간 및 적혈구(Red Blood Cell)의 스포로잔(sporozoan) 절대 세포내 기생충인 플라스모디아(plasmodia)종이 있다. 상기 병원균의 면역학의 재검토를 위해, Blackman MJ. Proteases involved in erythrocyte invasion by the malaria parasite:fuction and potential as chemotherapeutic targets, Curr Drug Targets.2000 Jul;1(1):59-83; Kosma P. Chlamydial lipopolysaccharide. Biochim Biophys Acta. 1999 Oct 8; 1455(2-3):387-402; Casadevall A. Antibody-mediated protection against intracellular pathogens. Trends Microbiol. 1998 Mar;6(3):102-7; Hoffman SL, Franke ED. Inducing protective immune responses against the sporozoite and liver stages of Plasmodium. Immunol Lett.1994 Jul;41(2-3):89-94; Keusch GT. Immune responses in parasitic diseases. Part A:general concepts. Rev Infect Dis.1982 Jul-Aug;4(4):751-5; and Colli W, Alves MJM. Relevant glycoproteins on the surface of Trypanosoma crusi을 보아라. Similarly, non-limiting examples of intracellular absolute pathogens include Chlamydia sp., Rickettsia sp., But are not limited to Leishmania, kokzidioa and Lyme arthritis. Intracellular protozoa, including trypanosoma, including Borrelia burgdorferi, a causative agent of Lyme disease; And P. falciparum, a pathogen for malaria, Trypanosoma brucei, a hemolagellate that causes sleep sickness, and Trypanosoma cruzi, which causes Chagas'disease. There is a sporozoan absolute intracellular parasite of the liver and red blood cells (plasmodia) species, including. For a review of the immunology of the pathogen, Blackman MJ. Proteases involved in erythrocyte invasion by the malaria parasite: fuction and potential as chemotherapeutic targets, Curr Drug Targets. 2000 Jul; 1 (1): 59-83; Kosma P. Chlamydial lipopolysaccharide. Biochim Biophys Acta. 1999 Oct 8; 1455 (2-3): 387-402; Casadevall A. Antibody-mediated protection against intracellular pathogens. Trends Microbiol. 1998 Mar; 6 (3): 102-7; Hoffman SL, Franke ED. Inducing protective immune responses against the sporozoite and liver stages of Plasmodium. Immunol Lett. 1994 Jul; 41 (2-3): 89-94; Keusch GT. Immune responses in parasitic diseases. Part A: general concepts. Rev Infect Dis. 1982 Jul-Aug; 4 (4): 751-5; and Colli W, Alves MJM. See Relevant glycoproteins on the surface of Trypanosoma crusi.

3. 박테리아3. Bacteria

또한, 박테라아 병원균은 특별히 한정되지 않지만, 포도상구균(Streptococcus aureus), 무유성 연쇄상구균(Streptococcus agalactiae), 레지오넬라균(Legionella pneumophila), 연쇄상구균(Streptococcus pyogenes), 대장균 (Escherichia coli), 살모넬라 티피뮤리움(Salmonella typhimurium), 임균( Neisseria gonorrhoeae), 수막구균(Neisseria meningitidis), 뉴모코커스(pneumococcus sp), 헤모필루스 인플루엔자(Haemophilus influenzae) B, 예르시나 페스티스(Yersina pestis), 비-제한적인 예로 한센균(Mycobacterium Leprae) 및 결핵균(Mycobacterium tuberculosis)을 포함하는 마이코박테리아균(Mycobacteria sp.), 트레포네마 팔리둠(Treponema pallidum), 녹농균(Pseudomonas aeruginosa), 야토병균(Francisella tularensis), 부루셀라 아보터스(Brucella abortus)를 포함하는 부루셀라균(Brucella sp), 탄저균 포자(anthrax spores)를 포함하는 탄저균 (Bacillus anthracis), 보툴리누스 독소(botulism toxin)를 포함하는 클로스트리디움 보툴리늄(Clostridium botulinum), 및 파상풍 독소(Tetanus Toxin)를 포함하는 파상풍균(Clostridium tetani)을 포함한다. 미국특허 제5,332,567호를 보아라. In addition, bacteria pathogens are not particularly limited, but Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Legionella pneumophila, Streptococcus pyogenes, Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis, pneumococcus sp, Haemophilus influenzae B, Yersina pestis, non-limiting examples Mycobacteria sp., Including Mycobacterium Leprae and Mycobacterium tuberculosis, Treponema pallidum, Pseudomonas aeruginosa, Francois fungus (Francisella tularensis) Brucella sp, including Brucella abortus, Bacillus anthracis, botulinum, including anthrax spores Clostridium botulinum containing toxins (botulism toxin) and Clostridium tetani including tetanus toxins. See US Pat. No. 5,332,567.

4. 병원성균류(pathogenic fungi)4. pathogenic fungi

표적화될 수 있는 진균 병원성균은 한정되지 않지만, 캔디다(Candida sp), 아스퍼길러스(Aspergillus sp.), 무코(Mucor sp.), 라이조푸스(Rhizopus sp.), 붉은 곰팡이속(Fusarium sp.), 푸른곰팡이속 마르네페이(penicillium marneffei), 소아포균(microsporum), 피부사상균(Trichophyton mentagrophytes), 칸디다 알비칸스(Candida albicans(Candida albicans), 히스토플라스마 캡슬라툼(Histoplasma capsulatum), 블라스토마이시즈 데르마티티디스(Blastomyces dermatitidis), 및 콕시다이오드증(Coccidioides immitis)을 포함한다. 또한, 기타 다른 진균 병원성균이 사용될 수 있다. Fungal pathogens that may be targeted include, but are not limited to, Candida sp, Aspergillus sp., Mucor sp., Rhizopus sp., And Fusarium sp. , Penicillium marneffei, microsporum, Trichophyton mentagrophytes, Candida albicans (Candida albicans), Histoplasma capsulatum, Blastomai Silas dermatitidis, and Coccidioides immitis, and other fungal pathogens may be used.

C. 기타 표적C. Other Targets

상기에 기재된 표적들은 한정되는 것은 아니다. 기타 질병, 조건, 감염성제제, 조직 등을 식별하는 항원 또는 에피토프는 알려져 있으며, 더 많은 것들이 확인된다. 예로는 상기에 기재된 알츠하이머 질병 특이성 타우 단백질(Tau protein) 에피토프이다(Vechterova et al., 2003, Neuroreport 14(1):87-91, "DC11:a novel monoclonal antibody revealing Alzheimer's disease-specific tau epitope"). The targets described above are not limited. Antigens or epitopes identifying other diseases, conditions, infectious agents, tissues, and the like are known and many more are identified. An example is the Alzheimer's disease specific Tau protein epitope described above (Vechterova et al., 2003, Neuroreport 14 (1): 87-91, "DC11: a novel monoclonal antibody revealing Alzheimer's disease-specific tau epitope"). .

Ⅷ. 활성화 종(active species)Iii. Active species

본 발명에서 상이한 종들의 종류들이 표적부위에서 표적하는데 영향을 미칠 수 있다. 대부분의 경우에서 표적에 전단되는 종들은 진단성 또는 치료성 종들이다. 예를들면, 상기들은 시각화제, 조영제, 방사활성 치료성 동위원소, 약물 및 독소를 함유하지만, 이들에만 한정되는 것은 아니다. 상기 예들의 수는 표적화할 수 있는 구성에 접합 또는 복합체화와 관련하여 기재되어 있다. 또한, 상기 활성화 종들은 부가적인 표적화 방법에 사용되도록 기타 전달성분과 접합될 수 있다. 예를들어, 활성화 종들은 일차 표적화제제와 결합하는 분리 내제화제(separate internalization agent)를 사용하는 방법에 사용하는데 일차 표적화제(표적에 직접적으로 결합한 종)과 접합될 수 있다. Different species of species in the present invention may affect targeting at the target site. In most cases the species shearing the target are diagnostic or therapeutic species. For example, these contain, but are not limited to, visualization agents, contrast agents, radioactive therapeutic isotopes, drugs, and toxins. The number of examples above is described in connection with conjugation or complexation in the targetable constructs. In addition, the activated species can be conjugated with other delivery components for use in additional targeting methods. For example, activating species may be conjugated with a primary targeting agent (a species that directly binds to the target) for use in a method using a separate internalization agent that binds to the primary targeting agent.

Ⅸ. Iii. 내제화Internalization 부분(internalization moiety) Internalization moiety

본 표적화 방법 및 구성은 표적화된 복합체 또는 이의 부분의 내제화를 향상시키는 기술과 결합하여 사용될 수 있다. 상기 방법에서 표적화할 수 있는 구성은 내제화 부분과 특이적으로 결합한다. 상기 내제화 부분은 일차 표적화 제제 또는 제거제의 부분으로서 배합될 수 있거나, 일차 표적화제, 표적화할 수 있는 구성, 또는 제거제와 특이적으로 결합하는 분리 내제화제로서 존재될 수 있다. 더 바람직하게, 내제화 부분은 활성화 종들의 비-표적화된 내제화를 감소시키기 위해 표적하기에 앞서 활성화 종들로부터 분리된다. The present targeting methods and constructs can be used in combination with techniques to enhance the internalization of the targeted complex or portion thereof. Targetable constructs in this method specifically bind to the internalizing moiety. The internalization moiety can be formulated as part of a primary targeting agent or removal agent, or can be present as a separate internalization agent that specifically binds to a primary targeting agent, a targeted construct, or a removal agent. More preferably, the internalization moiety is separated from the active species prior to targeting to reduce the non-targeted internalization of the active species.

내제화를 향상하는 상이한 종들의 종류들이 알려져 있으며, 사용될 수 있다. 예로는 폴산 수용체; 스테로이드 호르몬 및 이의 개별 수용체; 소마토스타틴(somatostatin), LHRH 봄베신(bombesin)/CCKB, 물질 P, VIP와 같은 수용체-인지 펩티드에 의하여 내제화를 갖는 엽산(폴산) 또는 메토트렉세이트(methotrexate)를 포함한다. 게다가, 쉽게 내제화하는 막 단백질에 표적화할 수 있는 구성이 가교결합하는 이특이성 항체는 내제화를 향상시키는데 사용될 수 있다. 예를들어, 표적화할 수 있는 구성은 림프종 세포(lymphoma cell)의 CD20에 영향을 미칠 수 있으며, 이특이성 항체를 사용하여 CD74에 가교결합된다. 가교결합하는 이특이성 항체를 구성하는데 사용하는 적절한 항-CD74 항체는 LL1이고, 이는 전체가 참조예가 되는 미국특허 6,458,933호에 기재되어 있다. 선택적으로, 이특이성 항체는 b-세포 림프종에 존재하는 b-세포 특이성 분자를 쉽게 내제화하는 것으로 알려진 CD22 또는 CD19에 표적화할 수 있는 구성을 가교결합하는데 사용될 수 있다. 상기 목적에서 적절한 항-CD22 항체는 LL2이고, 이는 전체가 참조예가 되는 미국특허 5,789,554에 기재되어 있다. 두번째 예로서, 표적화할 수 있는 구성은 암세포(carcinoma cell)의 CD66e(CEA)에 영향을 미칠 수 있으며, 이특이성 항체를 사용하여 EGP-1에 가교결합된다. 가교결합 이특이성 항체를 구성하는데 사용하는 적절한 항-EGP-1 항체는 RS7이고, 이는 전체가 참조예가 되는 Govindan et al., 미국출원 60/360229, 03/01/2002 출원, "RS7 Antibodies"에 기재되어 있다. EGP-2(Anticancer Res 1998 Sept-Oct;18(5B):3669-75)는 내제화에 영향을 주는 상기 기재된 EGP-1로서 사용될 수 있는 CD66e 양성 암세포에 존재하는 종양관련 항원을 용이하게 내재화하는 것으로 나타난다. Different species of species that enhance internalization are known and can be used. Examples include folic acid receptors; Steroid hormones and their individual receptors; Folate (folic acid) or methotrexate with internalization by receptor-cognitive peptides such as somatostatin, LHRH bombesin / CCKB, substance P, VIP. In addition, bispecific antibodies crosslinked in constructs that can target membrane proteins that are easily internalized can be used to enhance internalization. For example, targetable constructs can affect CD20 in lymphoma cells and crosslink to CD74 using bispecific antibodies. Suitable anti-CD74 antibodies for use in constructing cross-linking bispecific antibodies are LL1, which is described in US Pat. No. 6,458,933, which is incorporated by reference in its entirety. Alternatively, bispecific antibodies can be used to crosslink constructs that can target CD22 or CD19, which are known to readily internalize b-cell specific molecules present in b-cell lymphoma. Suitable anti-CD22 antibodies for this purpose are LL2, which is described in US Pat. No. 5,789,554, which is incorporated by reference in its entirety. As a second example, targetable constructs can affect CD66e (CEA) in carcinoma cells and crosslink to EGP-1 using bispecific antibodies. A suitable anti-EGP-1 antibody used to construct a crosslinked bispecific antibody is RS7, which is described in Govindan et al., US application 60/360229, 03/01/2002, "RS7 Antibodies", which is incorporated by reference in its entirety. It is described. EGP-2 (Anticancer Res 1998 Sept-Oct; 18 (5B): 3669-75) facilitates internalization of tumor-associated antigens present in CD66e-positive cancer cells that can be used as EGP-1 described above that affects internalization. Appears to be.

게다가, 비-수용체 매개 기작에 의해 내제화되는 바이러스 또는 바이러스성 펩티드가 사용될 수 있다. 세포-관통 펩티드의 예들은 제한되지 않지만, 펜트라틴(pentratin), 트랜스포르탄(transportan), Tat, 및 MAP를 포함한다. 예로, 전체가 참조예가 되는 Hallbrink et al.,2001, Cargo delivery kinetics of cell-penetrating peptides, BBiochimica et Biophysica Acta 1515:1001-1009; Gallouzi & Steitz, 2001, Delineation of mRNA export pathways by the use of cell-permeable peptides, Science 294:1895-1901를 보아라. In addition, viral or viral peptides internalized by non-receptor mediated mechanisms can be used. Examples of cell-penetrating peptides include, but are not limited to, pentratin, transportan, Tat, and MAP. See, eg, Hallbrink et al., 2001, Cargo delivery kinetics of cell-penetrating peptides, BBiochimica et Biophysica Acta 1515: 1001-1009; See Gallouzi & Steitz, 2001, Delineation of mRNA export pathways by the use of cell-permeable peptides, Science 294: 1895-1901.

Ⅹ. 분자 복합체의 Iii. Molecular complex 내제화Internalization 방법 Way

내제화 부분(예로, 상기에서 기재된 부분)은 표적화된 활성화 종들의 내제화를 도와주는데 사용될 수 있다. 특별히, 활성화 종이 독성 제제일 경우 내제화부분에 의해 매개된 비-표적화 내제화의 수준을 최소화하는 것이 더욱 바람직하다. 따라서, 내제화부분은 상기 비-표적화 내제화를 피하기 위해 활성화 종으로부터 분리되어야 한다. 즉, 내제화부분은 활성화종 보다 분리 종들의 부분이어야 한다. 예를들어, 일차 표적화제제, 표적화할 수 있는 구성 및 제거제가 사용되고 활성화 종의 표적화할 수 있는 구성의 부분일 경우, 내제화 부분은 제거제 또는 덜 바람직하게 일차 표적화제제에 부착될 수 있거나, 표적부위에 복합체의 결합에 이어 투여되는 분지 종으로서 존재할 수 있고 특이적으로 표적화제제, 표적할 수 있는 구성, 또는 제거제와 결합한다. 물리적으로 및/또는 일시적으로 내제 부분으로부터 활성화 종을 분리함으로써 활성화 종의 비-특이적 내제화는 최소화된다. The internalization moiety (eg, the moiety described above) can be used to aid in internalization of the targeted active species. In particular, it is more desirable to minimize the level of non-targeting internalization mediated by the internalization moiety when the activated species is a toxic agent. Thus, the internalization moiety must be separated from the active species to avoid the non-targeting internalization. That is, the internalization portion should be part of the separated species rather than the active species. For example, if a primary targeting agent, a targetable construct and an eliminator is used and is part of the targetable construct of the active species, the internalizing moiety may be attached to the remover or less preferably the primary targeting agent, or to the target site. Binding to the complex may be present as a branched species to be administered and specifically binds to a targeting agent, a target constituent, or a scavenger. Non-specific internalization of the active species is minimized by physically and / or temporarily separating the active species from the internal portion.

다른 예에서 상기 내제화 제제는 표적화, 잠금(locking) 및 제거방법 없이 사용될 수 있다. 예를들어, 독성 또는 치료성 방사성 핵종과 같은 활성화 종들은 일차 표적화제에 접합되거나 복합화된다. 제제는 표적부위에 투여되어 가속화된다. 다음, 내제화제제가 투여되고, 내제화제제는 일차 표적화제제에 특이적으로 결합하여 복합체를 형성하고 복합체의 내제화를 향상시키는 결합부위를 포함한다. 상기 방법에서 내제화제제와 관련된 활성화 종의 순환양이 최소화되어, 활성화 종의 비-특이적 내제화를 최소화한다. In another example, the internalizing agent can be used without targeting, locking and removal methods. For example, active species, such as toxic or therapeutic radionuclides, are conjugated or complexed with primary targeting agents. The agent is accelerated by administration to the target site. The agent is then administered, and the agent contains a binding site that specifically binds to the primary targeting agent to form a complex and enhances the internalization of the complex. In this method the amount of circulation of the activated species associated with the internalization agent is minimized to minimize non-specific internalization of the activated species.

다른 실시예에서 상기에서 지적한 바와 같이, 내제화는 특이적 내제화제 없이 세포표면 수용체를 쉽게 내제화하는 일차 표적화제제를 가교결합함으로써 수행될 수 있다. 상기 방법은 표적이 정상세포에 존재하는 것이지만, 암세포와 같은 특이적 표적화된 세포에서 더 높은 수준으로 존재하는 경우에 특별히 적용할 수 있다. 상기 경우에서 표적화된 세포에 결합된 것과 비유하여 정상세포에 결합된 표적화 제제가 상대적으로 낮을 것이다. 표면 분자를 용이하게 내제화하는 가교결합 및 결과 내제화는 정상세포 보다 표적화된 세포에 더 자주 발생될 것이다. 상기 방법에서 정상세포에서 활성화 종의 내제화는 표적화된 세포에서 보다 더 낮은 수준에서 발생될 것이다. As noted above in another embodiment, internalization can be performed by crosslinking a primary targeting agent that easily internalizes cell surface receptors without specific internalization agents. The method is particularly applicable when the target is present in normal cells but at higher levels in specific targeted cells, such as cancer cells. In this case the targeting agent bound to normal cells will be relatively low in comparison to that bound to the targeted cells. Crosslinking and resulting internalization that easily internalize surface molecules will occur more frequently in targeted cells than normal cells. In this method internalization of the activated species in normal cells will occur at lower levels than in targeted cells.

ⅩⅠ. ⅩⅠ. 키트Kit

발명의 방법을 수행하는 것을 촉진하기 위해, 환자에게 질병 조직을 치료 또는 진단하는데 적절한 성분을 함유하는 키트와 같은 키트를 제공하는 것이 유리하다. 상기 키트는 여기에서 기재된 일차 표적화제제, 표적할 수 있는 구성, 제거제, 내제화제 및 이들 성분의 각 조합과 같은 적어도 하나의 구성을 함유할 수 있다. 표적할 수 있는 구성이 포함된다면, 구성은 진단성 또는 치료성 부분을 함유하거나, 상기 부분에 결합하도록 배열되는 것이 더욱 바람직하다. In order to facilitate carrying out the method of the invention, it is advantageous to provide a patient with a kit, such as a kit containing components suitable for treating or diagnosing diseased tissue. The kit may contain at least one component, such as primary targeting agents, targetable components, eliminators, internalizing agents, and each combination of these components described herein. If a targetable construct is included, the construct preferably contains a diagnostic or therapeutic moiety, or is arranged to bind to the moiety.

게다가, 투여 성분을 함유하는 조성은 설하전달(sublingual delivery)에 한정되는 것은 아니지만, 소화관(alimentary canal)을 매개로 전달하도록 형성되지 않는다면, 다른 루트를 통하여 치료성 제제를 전달할 수 있는 고안이 함유될 수 있다. 비경구적 전달과 같은 적용에서 고안의 한 형태는 치료성 제제의 필요에 따라 동물의 체내에 조성을 주입하는데 사용되는 주사기가 있다. 또한, 흡입(inhalation) 고안이 사용될 수 있다. In addition, the composition containing the dosage ingredient is not limited to sublingual delivery, but if it is not formed to deliver via an alimentary canal, it may contain a design capable of delivering a therapeutic agent through another route. Can be. One form of design in applications such as parenteral delivery is a syringe used to inject a composition into the body of an animal as needed for a therapeutic agent. Inhalation schemes can also be used.

또한, 키트의 하나 이상의 시약 또는 구획의 다수를 갖는 용기(container)로 이루어진 분리 용기를 함유하는 것이 유리할 수 있다. 바람직한 실시형태에서 용기는 재구성에 적절한 조성의 무균, 동결건조(Lyophilized)된 형태를 함유하는 바이얼(vial)이다. 또한, 키트는 일차 표적화제, 표적할 수 있는 구성, 제거제 및/또는 내제화제와 같은 기타 제제의 재구성 및/또는 희석에 적절한 하나 이상의 완충용액을 함유할 수 있다. 사용될 수 있는 기타 용기는 특별히 한정되지 않지만, 주머니(pouch), 접시(tray), 상자, 튜브 등을 포함한다. 키트 성분들은 용기내에 쌓여지고 무균적으로 보존될 수 있다. It may also be advantageous to contain a separation vessel consisting of a container having a plurality of one or more reagents or compartments of the kit. In a preferred embodiment the container is a vial containing a sterile, lyophilized form of a composition suitable for reconstitution. In addition, the kit may contain one or more buffers suitable for the reconstitution and / or dilution of other agents such as primary targeting agents, targetable constructs, eliminators and / or toners. Other containers that can be used are not particularly limited, but include pouches, trays, boxes, tubes, and the like. Kit components may be stacked in a container and aseptically preserved.

함유될 수 있는 기타 성분을 용도로 키트를 사용하는 사람에게 지시된다. 지시는 하나 이상의 키트 성분, 키트 포장 및/또는 키트 포장 삽입물이 존재할 수 있다. 비-제한적인 예로 상기 지시는 키트 및 이의 시약의 용도, 동결건조된 시약을 재구성하거나 시약을 제조, 및/또는 투여에 이어 대상을 모니터링하는 것을 포함한다. The use of the kit for the other ingredients that may be contained is directed to the person using the kit. Instructions may be present in one or more kit components, kit packaging and / or kit packaging inserts. By way of non-limiting example, the instructions include the use of the kit and its reagents, reconstituting the lyophilized reagents or preparing the reagents, and / or monitoring the subject following administration.

바람직한 실시형태에서 키트는 미국 식품의약품 안정청(Food and Drug Administration)과 같은 진단성 및/또는 치료성 제제의 관리를 담당하는 국가 또는 지방 관리기관에 의해 인간에 사용되는 등과 같은 용도가 승인된다. In a preferred embodiment the kit is approved for use, such as for human use, by a national or local authority responsible for the management of diagnostic and / or therapeutic agents, such as the US Food and Drug Administration.

본 키트는 하기를 포함한다:The kit includes:

표적 결합 부위 및 적어도 하나의 표적할 수 있는 구성 결합 부위로 이루어진 일차 표적화 제제; 적어도 하나의 일차 표적화 제제 결합부위, 치료성 또는 진단성 부분 및 제거제 결합 부위로 이루어진 표적할 수 있는 구성; 및 표적할 수 있는 구성 결합 부위로 이루어진 제거제;를 포함하는 치료성 또는 진단성 제제의 투여용 키트. A primary targeting agent consisting of a target binding site and at least one targetable constitutive binding site; A targetable configuration consisting of at least one primary targeting agent binding site, a therapeutic or diagnostic moiety, and an eliminator binding site; And a scavenger consisting of a target constituent binding site; and a kit for administration of a therapeutic or diagnostic agent.

다른 예는 적어도 하나의 표적 결합부위 및 적어도 하나의 내제화 제제 결합부위를 갖는 일차 표적화 제제; 및 내제화 부분을 포함하는 복합체의 내제화를 향상시키는 내제화 부분을 갖는 내제화 제제; 및 일차 표적화제 결합 부위를 포함한다. 또한, 키트는 일차 표적화 제제가 적어도 하나의 표적할 수 있는 구성 결합부위를 포함한다면, 표적할 수 있는 구성 및/또는 제거제를 포함할 수 있다. Other examples include primary targeting agents having at least one target binding site and at least one internalizing agent binding site; And an internalization agent having an internalization moiety that enhances internalization of the complex including the internalization moiety; And primary targeting agent binding sites. In addition, the kits may include targetable components and / or scavengers provided the primary targeting agent includes at least one targetable component binding site.

본 발명의 다른 키트의 대부분은 여기에서 기재된 일차 표적화 제제, 표적할 수 있는 구성, 제거제 및/또는 내제화 제제의 선택을 포함한다. 예를들어, 특정 키트는 여기에 기재된 특정 표적에 영향을 미치는 일차 표적화 제제, 여기에 기재된 활성 종 및/또는 합텐을 포함하는 표적할 수 있는 구성, 여기에 기재된 이가(bi-valent)제거제, 및/또는 여기에 기재된 내제화 제제 또는 부분을 포함한다. Most of the other kits of the present invention include the selection of primary targeting agents, targetable constructs, removal agents and / or internalization agents described herein. For example, certain kits may comprise a primary targeting agent that affects a particular target described herein, a targetable construct comprising the active species and / or hapten described herein, a bi-valent remover described herein, and And / or the internalization formulations or portions described herein.

ⅩⅡ. 투여(Administration)XII. Administration

본 구성은 투여 방법의 종류를 사용하여 정상 조직 및 기관을 치료 및/또는 영상화하는데 사용될 수 있다. 제한없이, 투여는 국소 도관(Catheter)을 통한 관류(perfusion) 및 직접 병변내 주사요법(Intralesional injection)에 의한 정맥내, 동맥내, 복강내, 근육내, 피하, 늑막내, 수막강내 일 수 있다. 투여방법의 예는 미국특허 제 6,126,916; 6,077,499; 6,010,680; 5,776,095; 5,776,094; 5,776,093; 5,772,981; 5,753,206; 5,746,996; 5,697,902; 5,328,679; 5128119; 5101827; 및 4,735,210에 기재되어 있다. 부가적 방법은 1999년 6월 22일 출원, 미국출원 제09/337756호 및 2001년 4월 3일에 출원한 미국출원 제 09/823,746호에 기재되어 있다. 상기 예들은 모두 전체가 참조예가 된다. 상기 문헌들에서 제공된 기재에 더하여, 하기는 약학적 조성물을 제조하고 사용하는데 유용한 정보를 기재한다. This configuration can be used to treat and / or image normal tissues and organs using any type of administration method. Without limitation, administration can be intravenous, intraarterial, intraperitoneal, intramuscular, subcutaneous, intrapleural, intramedullary days by perfusion through local catheters and direct intralesional injection. have. Examples of methods of administration are described in US Pat. No. 6,126,916; 6,077,499; 6,010,680; 5,776,095; 5,776,094; 5,776,093; 5,772,981; 5,753,206; 5,746,996; 5,697,902; 5,328,679; 5128119; 5101827; And 4,735,210. Additional methods are described in US application Ser. No. 09/337756, filed June 22, 1999, and US application Ser. No. 09 / 823,746, filed April 3, 2001. The above examples are all incorporated by reference in their entirety. In addition to the descriptions provided in these documents, the following describes information useful for preparing and using pharmaceutical compositions.

일반적으로, 포유동물에의 투여에서 본 구성은 약학적 조성물로 나타낼 것이다. "약학적 조성물" 용어는 전달되는 전체로 이루어진 조성물을 의미하고, 여기서 운반체(carrier)는 약학적으로 수용가능한 운반체이며, "수의학적 조성물(veterinary composition)"은 운반체가 수의학적으로 수용가능한 운반체이다. "약학적으로 수용가능한 운반체" 또는 "수의학적으로 수용가능한 운반체"는 생물학적 또는 다른 부적당하지 않은, 즉 운반체가 복합체 또는 이의 성분 또는 유기체와 바람직하지 못한 생물학적 효과를 야기하거나 해로운 방식으로 상호작용하지 않고 발명의 조성물 또는 화합물로 유기체에 투여될 수 있는 매개 또는 물질을 포함한다. 약학적으로 수용가능한 시약의 예는 미국약전(The United States Pharmacopeia), 국내처방집(National Formulary), 미국약전협의, Rockville, MD 1990에 기재되어 있으며, Pharmaceutical Dosage Forms & Drug Delivery Systems, 7th Edition, Ansel et al., editors, Lippincott Williams & Wilkins, 1999.과 같이 본 발명에 참조예가 된다. In general, in administration to a mammal, the composition will be represented by a pharmaceutical composition. The term "pharmaceutical composition" means a composition consisting entirely of which is delivered, wherein a carrier is a pharmaceutically acceptable carrier and a "veterinary composition" is a carrier that is veterinarily acceptable. . A "pharmaceutically acceptable carrier" or "veterinically acceptable carrier" is a biological or other inadequate, that is, the carrier does not cause undesired biological effects or interact in a deleterious manner with the complex or its components or organisms. It comprises a medium or substance that can be administered to an organism in a composition or compound of the invention. Examples of pharmaceutically acceptable reagents are described in The United States Pharmacopeia, National Formulary, American Pharmacopoeia, Rockville, MD 1990, Pharmaceutical Dosage Forms & Drug Delivery Systems, 7th Edition, Ansel et al., editors, Lippincott Williams & Wilkins, 1999.

전달된 분자(예를들어, 일차 표적화제제, 표적할 수 있는 구성, 제거제 또는 복합체)는 환자에게 바람직한 효과를 생성하는 충분한 양으로 약학적 조성물로 포함된다. 발명의 약학적 조성물은 희석제 및 첨가제와 같은 기타 화학적 성분을 더 포함할 수 있다. "희석제"는 용매, 바람직하게는 수용성 용매에서 약물의 용해를 촉진하는 희석된 화학적 화합물이며, 약물 또는 하나이상의 이의 성분의 생물학적 활성 형태를 안정화할 수 있다. 완충용액에서 용해된 염이 당업계에서 희석제로서 사용될 수 있다. 예를들어, 바람직한 희석제는 하나이상의 염을 함유하는 완충 용액이다. 바람직한 용액은 인간혈액의 염 조건과 흡사한 인산염완충식염수(phosphate-buffered. saline)(특히 약학적 투여를 위해 조성물과 결합하는)이다. 완충용액 염은 저 농도에서 용액의 pH를 조절할 수 있기 때문에, 완충 희석제는 생물학적 활성 펩티드의 생물학적 활성을 거의 조절하지 않는다. The delivered molecule (eg, primary targeting agent, targetable construct, scavenger or complex) is included in the pharmaceutical composition in an amount sufficient to produce the desired effect for the patient. The pharmaceutical composition of the invention may further comprise other chemical components such as diluents and additives. A "diluent" is a diluted chemical compound that promotes dissolution of the drug in a solvent, preferably a water-soluble solvent, and may stabilize the biologically active form of the drug or one or more components thereof. Salts dissolved in buffers can be used as diluents in the art. For example, preferred diluents are buffer solutions containing one or more salts. Preferred solutions are phosphate-buffered saline, particularly in combination with the composition for pharmaceutical administration, similar to the salt conditions of human blood. Since buffer salts can adjust the pH of the solution at low concentrations, the buffer diluent hardly regulates the biological activity of the biologically active peptide.

"첨가제"는 적절한 굳기(consistency)와 같은 적절한 특성을 부여하거나 약물을 형성하도록 하기 위해 조성물에 부가될 수 있는 대략 하나의 안정한 물질이다. 특히, 적절한 첨가제 및 운반체는 락토스, 슈크로스, 만니톨, 또는 옥수수 전분(Maize starch), 밀전분, 쌀전분, 한천, 펙틴, 잔탄검(xanthan gum), 구아검, 로커스트빈검(locust bean gum), 하이알우로닉산(hyaluronic acid), 카제인 감자전분, 젤라틴, 트래거캔스고무(gum tragacanth), 폴리아크릴레이트, 메틸 셀룰로오스, 하이드록시프로필메틸-셀룰로오스, 소듐 카르복시메틸셀룰로오스, 및/또는 폴리비닐피롤리돈(PVP)와 같은 소르비톨 셀룰로오스 조제를 포함한다. 또한, 바람직하게 분해제(disintegrating agent)는 가교결합된 폴리비닐피롤리돈, 아가, 또는 알긴산 또는 소듐 알길산염과 같은 이의 염으로서 포함할 수 있다. 기타 적적한 첨가제 및 운반체는 하이드로젤(hydrogel), 겔성 하이드로콜로이드(Hydrocolloid), 및 키토산을 포함한다. 키토산 마이크로스피어(microsphere) 및 마이크로캡슐을 운반체로서 사용될 수 있다. 위에 화합물을 표적하는 마이크로스피어 제제, 하나 이상의 활성 성분을 함유하는 내부 코어(선택적으로 겔화된 하이드로콜로이드), 활성 성분의 방출속도를 조절하는 불용성 고분자(예를들어, 에틸셀룰루오스)로 이루어진 막, 및 예를들어 양이온성 다당류, 양이온성 단백질, 및/또는 합성 양이온성 고분자와 같은 바이오점착성 양이온성 고분자로 이루어진 외각층으로 이루어진 제제를 기재하고 있는 WO 98/52547, 미국특허 제4,895,724를 보아라. 전형적으로, 키토산은 예를들어 글루타알데하이드, 글리옥살(glyoxal), 에피클로로하이드린, 및 석신알데하이드(succinaldehyde)와 같은 적절한 제제를 사용하여 가교결합된다. 운반체로서 키토산을 도입되는 조성물은 활성 성분의 방출을 조절하도록 하는 것을 포함하는 알약, 정제, 미세입자, 및 미소구체(microsphere) 등을 포함하는 조제 형태의 종류로 조제될 수 있다. 기타 적절한 바이오점착성(bioadhesive) 양이온성 고분자는 산성 젤라틴, 폴리갤락토사민, 폴리리신, 폴리히스티딘, 폴리오르니틴, 폴리쿼터너리(polyquaternary) 화합물, 프롤라민(prolamine), 폴리이민, 디에틸아미노에틸덱스트란(DEAE), DEAE-이민, DEAE-메타크릴레이트, DEAE-아크릴아민, DEAE-덱스트란, DEAE-셀룰로오스, 폴리-p-아미노스틸렌, 폴리옥스에탄, 코폴리메타크릴레이트, 폴리아미도아민, 양이온성 전분, 폴리티오디에틸아미노메틸에틸렌 및 폴리비닐피리딘과 같은 폴리아미노산을 포함한다. An "additive" is approximately one stable substance that can be added to a composition to impart proper properties, such as proper consistency or to form a drug. In particular, suitable additives and carriers include lactose, sucrose, mannitol, or maize starch, wheat starch, rice starch, agar, pectin, xanthan gum, guar gum, locust bean gum, Hyaluronic acid, casein potato starch, gelatin, gum tragacanth, polyacrylate, methyl cellulose, hydroxypropylmethyl-cellulose, sodium carboxymethylcellulose, and / or polyvinylpyrroli Sorbitol cellulose preparations such as pig (PVP). Furthermore, the disintegrating agent may preferably comprise as crosslinked polyvinylpyrrolidone, agar, or salts thereof, such as alginic acid or sodium alginate. Other suitable additives and carriers include hydrogels, gelled hydrocolloids, and chitosans. Chitosan microspheres and microcapsules can be used as carriers. A membrane consisting of a microsphere formulation that targets a compound in the stomach, an inner core (optionally gelled hydrocolloid) containing one or more active ingredients, and an insoluble polymer (e.g. ethyl cellulose) that regulates the release rate of the active ingredient. And WO 98/52547, US Pat. No. 4,895,724, which describes a formulation consisting of an outer layer consisting of, for example, a cationic polysaccharide, a cationic protein, and / or a biotacky cationic polymer such as a synthetic cationic polymer. Typically, chitosan is crosslinked using suitable agents such as, for example, glutaaldehyde, glyoxal, epichlorohydrin, and succinaldehyde. The composition into which the chitosan is introduced as a carrier may be formulated in a form of preparation that includes pills, tablets, microparticles, microspheres, and the like, which comprise controlling the release of the active ingredient. Other suitable bioadhesive cationic polymers include acidic gelatin, polygalactosamine, polylysine, polyhistidine, polyornithine, polyquaternary compounds, prolamine, polyimine, diethylamino Ethyldextran (DEAE), DEAE-imine, DEAE-methacrylate, DEAE-acrylamine, DEAE-dextran, DEAE-cellulose, poly-p-aminostyrene, polyoxethane, copolymethacrylate, polyamido Polyamino acids such as amines, cationic starch, polythiodiethylaminomethylethylene and polyvinylpyridine.

본 발명의 표적할 수 있는 구성, 기타 제제, 및 복합체는 적절한 방식으로 조제될 수 있다. 표적할 수 있는 구성 및 복합체는 운반체에서 균일하게(균질적으로) 또는 비-균일하게(이질적으로) 분산될 수 있다. 적절한 조제는 건조 및 액상 조제를 포함한다. 건조 조제는 냉동건조 및 동결건조된 분말을 포함하고, 이는 특히 동(sinuses) 또는 폐에의 에어로졸 전달, 또는 투여에 앞서 적절한 희석액으로 재구성하는 것에 이어 장시간 저장에 적절하다. 다른 바람직한 건조 조제는 본 발명에 의한 약학적 조성물이 구강 투여에 적절한 정제 또는 알약으로 압축되거나, 지속적인 방출조제로 혼합하는 것을 포함한다. 약학적 조성물은 구강 투여로 의도되지만 표적할 수 있는 구성 또는 복합체는 장(intestine)에서 상피조직으로 전달될 때, 표적할 수 있는 구성 및 복합체의 조제를 보호하고 너무 이른 방출을 억제하기 위해 장 코팅으로 캡슐에 쌓여 조제하는 것을 포함하는 것이 바람직하다. 당업계의 당업자들이 이해할 수 있는 것으로, 발명의 약학적 조성물은 적절한 조제 형태로 제조될 수 있다. 정제 및 알약은 상기 조제형태 중의 하나를 나타낸다. 또한, 약학적 조성물은 예를들어, 압축, 디핑(dipping), 팬코팅, 스프레이 건조 등으로 적절한 캡슐 또는 코팅물질로 캡슐에 쌓일 수 있다. 적절한 캡슐은 젤라틴 및 전분으로 제조된 것을 포함한다. 다음, 바람직하다면 상기 캡슐은 하나이상의 부가적 물질 및 장코팅으로 코팅될 수 있다. 액상조제는 수용성 조제, 겔 및 에멀젼을 포함한다. Targetable compositions, other agents, and complexes of the invention can be formulated in a suitable manner. Targetable configurations and complexes may be dispersed homogeneously (homogeneously) or non-uniformly (heterogeneously) in the carrier. Suitable preparations include drying and liquid preparations. Dry preparations include lyophilized and lyophilized powders, which are particularly suitable for long-term storage following aerosol delivery to sinuses or lungs, or reconstitution with an appropriate dilution prior to administration. Other preferred drying aids include the pharmaceutical compositions according to the invention compressed into tablets or pills suitable for oral administration, or mixed into sustained release aids. Pharmaceutical compositions are intended for oral administration, but when a target composition or complex is delivered from the intestine to epithelial tissue, enteric coating is used to protect the preparation of the target composition and complex and to inhibit premature release. It is preferable to include to prepare by stacking in a capsule. As will be appreciated by those skilled in the art, the pharmaceutical compositions of the invention may be prepared in the form of suitable formulations. Tablets and pills represent one of the above dosage forms. In addition, the pharmaceutical compositions may be encapsulated in a suitable capsule or coating material, for example by compression, dipping, pan coating, spray drying, or the like. Suitable capsules include those made with gelatin and starch. The capsule can then be coated with one or more additional materials and enteric coating, if desired. Liquid preparations include water soluble preparations, gels and emulsions.

바람직한 실시형태는 바이오점착성, 바람직하게는 점막 점착성(mucoadhesive) 코팅으로 이루어진 조성물에 관한 것이다. "바이오 점착성 코팅"은 코팅이 없는 경우보다 생물학적 표면 또는 물질에 약물을 부착하게 하는 코팅이다. "점막점착성 코팅"은 예를들어, 발명에 의한 조성물과 같은 물질을 코팅이 없는 경우보다 점막에 더 부착하도록 하는 바이오점착성 코팅이다. 예를들어, 미분(micronized) 입자(예를들어, 약 5, 10, 25, 50 및 100㎛의 평균 직경을 갖는 입자)는 점막점착성으로 코팅되는 것일 수 있다. 다음, 코팅된 입자를 유기체에 전달되도록 적절한 조제 형태로 모을 수 있다. 바람직하게, 표적화된 세포표면 운송 부분이 발현되는 위치에 따라 조제 형태는 바람직한 위치에 도달할 때까지 조제를 보호하도록 다른 코팅으로 코팅될 수 있으며, 발명의 조성물 또는 화합물이 세포표면 운송 부분과 상호작용하는 동안 점막점착성은 조제를 유지할 수 있게 한다. Preferred embodiments relate to compositions consisting of bioadhesive, preferably mucoadhesive coatings. A "bioadhesive coating" is a coating that allows the drug to adhere to a biological surface or material than would be without the coating. A "mucoadhesive coating" is a bioadhesive coating that allows, for example, more adhesion of a substance such as a composition according to the invention to the mucosa than in the absence of a coating. For example, micronized particles (eg, particles having an average diameter of about 5, 10, 25, 50, and 100 μm) may be coated with mucoadhesiveness. The coated particles can then be collected in a suitable formulation to be delivered to the organism. Preferably, depending on where the targeted cell surface transport moiety is expressed, the dosage form may be coated with another coating to protect the preparation until the desired location is reached, and the composition or compound of the invention interacts with the cell surface transport moiety. Mucoadhesiveness allows the preparation to be maintained.

본 발명의 약학적 조성물은 유기체, 바람직하게 동물, 바람직하게 포유류, 조류, 어류, 곤충 또는 거미류에 단클론 항체의 투여를 촉진한다. 바람직한 포유류는 소, 개, 말, 고양이, 양 및 돼지 동물, 및 비-인간 영장류를 포함한다. 인간이 특이 바람직하다. 당업계에서 존재하는 화합물을 투여 또는 전달하는 많은 기술을포함하며, 구강, 직장(예를들어, 관장 또는 좌약) 에어로졸(예를들어, 비장 또는 폐 전달), 비경구적 및 국부 투여에 한정되지 않는다. 바람직하게, 발명의 조성 또는 화합물의 충분한 양은 의도된 효과를 이루도록 전달된다. 전달된 조성물 또는 화합물의 특정 양은 이루고자하는 효과, 조성물이 전달된 유기체의 형태, 전달 루트, 조제 요양법, 및 유기체의 나이, 건강 및 성별 등을 포함하는 많은 인자들에 의존할 것이다. 상기와 같이, 주어진 조제에서 포함된 발명의 조성물 또는 화합물의 특정 조제는 당업계의 당업자의 결정에 남겨둔다. The pharmaceutical compositions of the present invention facilitate the administration of monoclonal antibodies to organisms, preferably animals, preferably mammals, birds, fish, insects or arachnids. Preferred mammals include cattle, dogs, horses, cats, sheep and pig animals, and non-human primates. Humans are particularly preferred. Many techniques for administering or delivering compounds present in the art include, but are not limited to, oral, rectal (eg, enema or suppository) aerosols (eg, spleen or lung delivery), parenteral and topical administration. . Preferably, a sufficient amount of the composition or compound of the invention is delivered to achieve the intended effect. The specific amount of the composition or compound delivered will depend on many factors, including the effect to be achieved, the form of organism to which the composition is delivered, the route of delivery, the regimen of care, and the age, health and sex of the organism, and the like. As above, certain formulations of the compositions or compounds of the invention included in a given formulation are left to the decision of one skilled in the art.

당업계의 당업자들은 본 발명의 약학적 조성물이 치료성 또는 보호성 효과를 포함하는 원하는 생물학적 결과를 이루는 제제로서 투여될 경우, 적절한 약학적 운반체와 발명의 조성물 또는 화합물을 조합하는 것이 필요하다. 약학적 운반체 및 치료성 또는 보호성 제제로서 조성물 또는 화합물의 제조의 선택은 의도하는 용도 및 투여방법에 의존할 것이다. 치료성 제제의 적절한 조제 및 투여 방법은 특별히 한정되지 않지만, 경구, 폐, 비강, 구강, 눈, 피부, 직장 또는 질 전달을 포함한다. Those skilled in the art need to combine the appropriate pharmaceutical carrier with the composition or compound of the invention when the pharmaceutical composition of the invention is administered as an agent with a desired biological result comprising a therapeutic or protective effect. The choice of preparation of the composition or compound as a pharmaceutical carrier and therapeutic or protective agent will depend upon the intended use and method of administration. Appropriate preparation and methods of administration of therapeutic agents are not particularly limited and include oral, pulmonary, nasal, oral, eye, skin, rectal or vaginal delivery.

도입된 전달 방법에 따라, 본 발명에서 사용되는 구성은 약학적으로 수용가능한 형태의 종류로 전달될 것이다. 예를들어, 구성은 정제, 캡슐, 알약, 좌약, 에어로졸, 작은 방울, 주입형 또는 스프레이로 고체, 용액, 에멀젼, 분산액, 마이셀, 리포좀 등의 형태로 전달될 수 있다. 정제, 알약, 좌약, 에어로졸, 분말, 작은 방울, 및 스프레이는 복잡하고 다층 구조를 가질 수 있으며, 큰 크기를 갖는다. 에어로졸, 분말, 작은 방울 및 스프레이는 크기면에서 작게(1 마이크론)~큰(200 마이크론)의 범위일 수 있다. Depending on the method of delivery introduced, the compositions used in the present invention will be delivered in a kind of pharmaceutically acceptable form. For example, the composition may be delivered in the form of solids, solutions, emulsions, dispersions, micelles, liposomes and the like in tablets, capsules, pills, suppositories, aerosols, droplets, infusions or sprays. Tablets, pills, suppositories, aerosols, powders, droplets, and sprays can be complex, multi-layered, and large in size. Aerosols, powders, droplets, and sprays can range in size from small (1 micron) to large (200 micron).

본 발명의 약학적 조성물은 고형, 동결건조된 분말, 용액, 에멀젼, 분산액, 마이셀, 리포좀 등의 형태로 사용될 수 있으며, 결과 조성물은 경장(enteral) 또는 비경구적 적용에 적절한 유기성 또는 무기성 운반체 또는 첨가제와의 혼합물에서 활성 성분으로서 하나이상의 본 발명의 표적할 수 있는 구성 또는 복합체를 함유한다. 예를들어, 활성성분은 사용에 알약, 정제, 캡슐, 좌약, 용액, 에멀젼, 현탁액 및 사용에 적절한 기타 형태에 보통의 비-독성, 약학적으로 수용가능한 운반체와 혼합될 수 있다. 예를들어, 사용될 수 있는 운반체는 고형, 반고체 또는 액상 형태로 제조공정에서 포도당, 락토스, 만노스, 아카시아검, 젤라틴, 만니톨, 전분풀, 삼규산 마그네슘(magnesium trisilicate), 탈크, 옥수수전분, 케라틴, 콜로이드 실리카(colloidal silica), 감자전분, 우레아, 중쇄 트리글리세라이드, 덱스트란 및 용도에 적절한 기타 운반체를 포함한다. 게다가, 안정화제, 증점제(thickening agent) 및 색소제(coloring agent) 및 향료가 사용될 수 있다. 건조 안정화제의 예는 트리울로오스(triulose)를 포함하며, 바람직하게 0.1% 이상의 농도(예로, 미국특허 제5,314,695호를 보아라)이다.The pharmaceutical compositions of the present invention may be used in the form of solids, lyophilized powders, solutions, emulsions, dispersions, micelles, liposomes, and the like, and the resulting compositions may be organic or inorganic carriers suitable for enteral or parenteral application or It contains one or more targetable constructs or complexes of the present invention as active ingredient in admixture with additives. For example, the active ingredient may be mixed with the usual non-toxic, pharmaceutically acceptable carriers in pills, tablets, capsules, suppositories, solutions, emulsions, suspensions, and other forms suitable for use. For example, carriers that can be used are solid, semi-solid or liquid forms of glucose, lactose, mannose, acacia gum, gelatin, mannitol, starch grass, magnesium trisilicate, talc, corn starch, keratin, Colloidal silica, potato starch, urea, medium chain triglycerides, dextran and other carriers suitable for use. In addition, stabilizers, thickening agents and coloring agents and perfumes can be used. Examples of dry stabilizers include triulose, preferably at a concentration of at least 0.1% (see, eg, US Pat. No. 5,314,695).

개별적인 필요가 차이가 있을 수 있지만, 약학적 조성물의 유효량의 최적 범위 결정은 당업자 내에 있다. 인간 조제는 동물연구(Katocs et al., Chapter 27 In: Remington's Pharmaceutical Science. 18th Ed., Gennaro, ed. Mack Publising Co., Easton, Pa, 1990)로부터 추론될 수 있다. 일반적으로, 당업자에 의해 조절될 수 있는 약학적 조성물의 유효량을 제공하는데 요구되는 조제는 수령인의 나이, 건강, 신체조건, 몸무게, 질병 또는 장애의 형태 및 범위, 현 치료의 성질 및 원하는 효과의 성질 및 범위에 따라 변할 것이다. 예로, Nies et al. Chapter 3 In: Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 9th Ed. Harman et al., eds., McGraw-Hill, New York, N.Y., 1996을 보아라. While individual needs may vary, determination of the optimal range of effective amounts of pharmaceutical compositions is within the skill of the art. Human preparation can be deduced from animal studies (Katocs et al., Chapter 27 In: Remington's Pharmaceutical Science. 18th Ed., Gennaro, ed. Mack Publising Co., Easton, Pa, 1990). In general, the preparations required to provide an effective amount of a pharmaceutical composition that can be adjusted by one skilled in the art include the age, health, physical condition, weight, form and extent of the disease or disorder, the nature of the current treatment and the desired effect of the recipient. And range. For example, Nies et al. Chapter 3 In: Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 9th Ed. See Harman et al., Eds., McGraw-Hill, New York, N.Y., 1996.

치료성 조성물의 복용은 여러 날에서 여러 달로 지속되는 치료과정으로, 또는 치료가 효과적이거나 질병상태의 축소가 이루어질 때까지 치료된 질병상태의 심한정도 및 민감정도에 따라 의존한다. 최적의 복용 스케줄은 환자의 체내에서 약물 축적의 측정으로부터 산출될 수 있다. "환자" 용어는 인간 뿐만 아니라 동물(예로, 고양이, 개, 및 말)을 포함하는 것이다. 당업계의 당업자들은 최적 복용량, 복용방법 및 반복율을 용이하게 결정할 수 있다. 최적 복용량은 각각의 치료성 제제의 상대적 잠재력에 따라 변할 수 있으며, 일반적으로 생체내 및 생체밖 동물 모델에서 효율적인 것으로 발견된 EC₅₀에 기반하여 결정될 수 있다. The administration of a therapeutic composition depends on the course of treatment, which lasts from several days to several months, or depending on the severity and sensitivity of the treated disease state until the treatment is effective or until the disease state is reduced. The optimal dosing schedule can be calculated from the measurement of drug accumulation in the patient's body. The term "patient" includes humans as well as animals (eg cats, dogs, and horses). Those skilled in the art can readily determine the optimal dosage, method of administration and repetition rate. Optimal dosages can vary depending on the relative potential of each therapeutic agent and can generally be determined based on EC ₅₀ found to be effective in in vivo and ex vivo animal models.

복용량의 범위(표적할 수 있는 구성 또는 투여된 복합체의 양)는 상이한 동물의 치료성 효과의 효율성은 쥐보다 인간에서 전형적으로 20, 30 또는 40배 이하(체중 당)로 넓게 변할 수 있기 때문에 광범위하다. 일반적으로 복용량은 체중 ㎏당 0.01㎍~100g, 바람직하게는 체중 ㎏당 0.01㎍~10g, 체중 ㎏당 0.01㎍~1000㎎, 체중 ㎏당 0.01㎍~100㎎, 체중 ㎏당 0.01㎍~10㎎, 체중 ㎏당 0.01㎍~1㎎, 체중 ㎏당 0.01㎍~100㎍, 체중 ㎏당 0.01㎍~10㎍, 체중 ㎏당 0.01㎍~1㎍, 체중 ㎏당 0.01㎍~0.1㎍이며, 농도범위에 앞서 경계를 기반으로 한다. 예를들면, 복용량의 기재는 체중 ㎏당 100~10g, 체중 ㎏당 10g~1000㎎, 1000~100㎎ 등 범위내의 복용량을 포함한다. The range of dosage (targetable composition or amount of complex administered) is broad because the effectiveness of the therapeutic effect of different animals can vary widely from humans to 20, 30 or 40 times or less (per body weight), typically in humans. Do. In general, the dosage is 0.01 μg to 100 g per kg body weight, preferably 0.01 μg to 10 g per kg body weight, 0.01 μg to 1000 mg per kg body weight, 0.01 μg to 100 mg per kg body weight, 0.01 μg to 10 mg per kg body weight, 0.01 μg-1 mg per kg body weight, 0.01 μg-100 μg per kg body weight, 0.01 μg-10 μg per kilogram body weight, 0.01 μg-1 μg per kilogram body weight, 0.01 μg-0.1 μg per kilogram body weight, prior to concentration range. Based on boundaries. For example, the description of dosage includes dosages in the range of 100 to 10 g / kg body weight, 10 g to 1000 mg / kg body weight, 1000 to 100 mg, and the like.

복용량은 매일, 매주, 매달 또는 매년 1회 이상, 또는 2~20년마다 1회로 주어질 수 있다. 당업계에서 당업자들은 신체상 유체 또는 조직에서 표적할 수 있는 구성 또는 복합체의 농도 및 특정 잔류시간을 기반으로 복용 반복율을 용이하게 산출할 수 있다. 성공적인 치료에 이어, 환자는 질병상태의 재발을 억제하도록 치료를 유지하는 것이 바람직하며, 치료제제는 체중 ㎏당 0.01㎍~100g으로 매일 1회이상, 매 20년 1회의 범위로 투여된다. Dosages may be given daily, weekly, monthly or more than once a year, or once every 2-20 years. Those skilled in the art can readily calculate dose repetition rates based on the concentration and composition of complexes or complexes that can be targeted in the fluid or tissue on the body and the specific residence time. Following successful treatment, the patient preferably maintains the treatment to prevent recurrence of the disease state, wherein the therapeutic agent is administered at a range of 0.01 μg-100 g / kg body weight at least once daily, once every 20 years.

특이적 복용은 환자의 대략 체중 또는 표면적에 따라 산출된다. 적절한 복용량의 결정에서 기타 인자는 치료되거나 제거된 질병 또는 조건, 질병의 심한정도, 투여 루트, 환자의 나이, 성별 및 의학 조건을 포함할 수 있다. 치료에 적절한 복용량을 결정하는데 필요한 산출의 섬세함은 당업계의 당업자에 의해 통상적으로 이루어질 수 있으며, 특히 여기에서 기재된 복용 정보 및 분석을 고려하여 이루어진다. 또한, 복용은 적절한 복용-반응 결과와 결합하여 사용되는 복용량을 결정하는데 공지된 분석을 사용하여 결정할 수 있다. Specific doses are calculated based on the approximate weight or surface area of the patient. Other factors in determining the appropriate dosage may include the disease or condition treated or eliminated, the severity of the disease, the route of administration, the age, sex and medical condition of the patient. The fineness of the calculations needed to determine the appropriate dosage for treatment can be conventionally made by those skilled in the art, in particular in view of the dosing information and analysis described herein. In addition, dosage can be determined using known assays to determine the dosage used in combination with the appropriate dose-response results.

개별 환자의 복용량은 질병의 진행을 관찰하면서 조절될 수 있다. 환자에서 표적할 수 있는 구성 또는 복합체의 혈중농도는 복용이 효율농도에 도달하거나 유지하는데 조절하는 것이 필요하다면 관측될 수 있다. 약물유전체 (Pharmacogenomic)는 표적할 수 있는 구성 및/또는 복합체, 및 이의 복용량이 개체에서 효율적일 경우 결정하는데 사용될 수 있다(Schmitz et al., Clinica Chimica Acta 308:43-53, 2001; Steimer et al., Clinica Chimica Acta 308:33-41, 2001).The dose of an individual patient can be adjusted while observing the progress of the disease. Blood concentrations of constituents or complexes that may be targeted in a patient can be observed if dosing is necessary to adjust to reach or maintain efficiency levels. Pharmacogenomics can be used to determine if a target composition and / or complex, and its dosage, is effective in an individual (Schmitz et al., Clinica Chimica Acta 308: 43-53, 2001; Steimer et al. , Clinica Chimica Acta 308: 33-41, 2001).

ⅩⅢ. 항체 증식방법XIII. Antibody propagation method

원하는 에피토프에의 항체는 Ab 제조에 공지된 방법에 의해 생성될 수 있다. 예를들어, 비완전 프로인트 보강제에서 면역적격(immunocompetent) 동물로 현탁된 동일한 면역원의 두번의 이은 주입에 이어 (단백질)_n-KLH(여기서, 완전 프로인트 보강제(Freund's adjuvant)에서 KLH는 키홀림펫 헤모시아닌, 및 n=1~30)와 같은 면역원의 주입은 비장 세포채취에 의해 항원의 정맥내 주입 후 3일에 이어진다. 다음, 채취된 비장 세포를 Sp2/0-Ag14 골수종세포로 용해하고, 결과 클론의 배양 부유액을 직접-결합 ELISA를 사용하여 항-단백질 반응성을 분석하였다. 생성된 Abs의 미세 특이성은 본래 면역원의 단백질 단편을 사용함으로써 분석될 수 있다. 상기 단편들은 자동화 단백질 합성기를 사용하여 용이하게 제조될 수 있다. Ab 제조에서, 효소-결핍 하이브리도마(hybridomas)를 융합세포 라인을 선택할 수 있도록 분리한다. 또한, 상기 기술은 In(Ⅲ)-DTPA 킬레이트와 같은 연결기로 이루어진 하나이상의 킬레이트에 항체를 증식하는데 사용될 수 있다. In(Ⅲ)-DTPA 킬레이트에 단클론 쥐 항체가 알려져 있다(Barbet '395 supra). Antibodies to the desired epitopes can be produced by methods known for Ab preparation. For example, following two subsequent infusions of the same immunogen suspended from an incomplete Freund's adjuvant into an immunocompetent animal (protein), _n -KLH (wherein Freund's adjuvant, KLH is keyhole) Injection of immunogens such as pet hemocyanin, and n = 1-30), followed by 3 days after intravenous injection of antigen by spleen cell harvesting. Next, the collected splenocytes were lysed with Sp2 / 0-Ag14 myeloma cells, and the culture suspensions of the resulting clones were analyzed for anti-protein reactivity using direct-link ELISA. The microspecificity of the resulting Abs can be analyzed by using protein fragments of the original immunogen. Such fragments can be readily prepared using an automated protein synthesizer. In Ab preparation, enzyme-deficient hybridomas are isolated to select a fusion cell line. The technique can also be used to propagate antibodies to one or more chelates consisting of linking groups such as In (III) -DTPA chelate. Monoclonal murine antibodies are known for In (III) -DTPA chelates (Barbet '395 supra).

표적을 위해 본 발명에서 사용된 항체는 표식자 물질로서 세포의 표면 또는 세포내 종양-관련 항원의 종류 중 하나에 특이적이다. 상기 표식자는 세포질, 핵세포 또는 다양한 세포기관 또는 세포이하 구조에서 종양에 의해 생성된 물질일 수 있거나, 종양부위, 종양세포 표면 위 또는 종양세포 내에 축적된 물질일 수 있다. 상기 종양-관련 표식자는 Herberman, "Immunodiagnosis of Cancer" in Fleisher ed., "The Clinical Biochemistry of Cancer", page347(American Association of Clinical Chemists, 1979) 및 미국특허 제 4150149;4361544; 및 4444744호에 공개되어 있다. The antibodies used in the present invention for targeting are specific to one of a class of tumor-associated antigens on the surface of cells or intracellular as marker substances. The marker may be a substance produced by the tumor in the cytoplasm, nuclear cells or various organelles or subcellular structures, or may be a substance accumulated on the tumor site, the surface of the tumor cells or in the tumor cells. Such tumor-associated markers are described in Herberman, "Immunodiagnosis of Cancer" in Fleisher ed., "The Clinical Biochemistry of Cancer", page 347 (American Association of Clinical Chemists, 1979) and US Pat. Nos. 4150149; 4361544; And 4444744.

종양-관련 표식자는 암태아성 항원, 태반항원, 암태아성 또는 종양 바이러스 관련 항원, 조직 관련 항원, 장기 관련 항원, 전위의 호르몬 및 정상 항원 또는 이의 변종을 포함하는 분류에서 Herberman에 의해 분류되어졌다. 종종, 종양관련 표식자의 서브유닛은 인체 융모 성성 호르몬(Human chorionic gonadotropin, hCG) 또는 CEA(Carcinoembryonic antigen)의 감마부위와 같은 더 높은 종양 특이성을 갖는 항체를 증식하는데 유리하게 사용되며, 미국특허 제4361644 및 4444744호에 기재된 바와 같이 비-종양 물질에 더 높은 감소된 가교반응성을 갖는 항체의 생성을 자극한다. Tumor-associated markers have been classified by Herberman in a classification that includes cancerous antigens, placental antigens, cancerous or tumor virus-associated antigens, tissue-associated antigens, organ-associated antigens, translocation hormones and normal antigens or variants thereof. Often, subunits of tumor-associated markers are advantageously used to propagate antibodies with higher tumor specificity, such as gamma regions of human chorionic gonadotropin (hCG) or carcinoembryonic antigen (CEA), US Pat. And 4444744, which stimulates the production of antibodies with higher reduced crosslinkability to non-tumor materials.

대상의 다른 표식자는 막통과 활성제 및 CAML-상호작용자(TACI)이다. 예로, Yu et al., Nat. Immunol. 1:252-265(2000)을 보아라. 간략하게, TACI는 B 세포 악성종양(예로, 림프종)에의 표식자이다. 게다가, TACI 및 B 세포 성숙항원(BCMA)은 종양괴사 인자 동종 세포증식 유도 리간드(a proliferation inducing ligand, APRIL)에 의해 결합되는 것으로 인지된다. APRIL은 생체내에서 일차 B 및 T 세포의 세포증식을 자극하고, 생체내에서 B 세포의 축적으로 비장 중량이 증가한다. 또한, APRIL는 수용체 결합에 TALL-I(BLys 또는 BAFF라 지칭함)과 경쟁한다. 가용성 BCMA 및 TACI는 APRIL의 결합을 방해하고, 일차 B 세포의 APRIL-자극 세포증식의 결합을 특이적으로 방해한다. 또한, BCMA-Fc는 쥐에서 키홀림펫 헤모시아닌(keyhole limpet hemocyanin) 및 프네우모박스(pneumovax)에 대하여 항체의 생성을 억제하며, 이는 BCMA 및/또는 TACI에 의하여 APRIL 및/또는 TALL-I 신호가 체액의 면역성의 생성에 요구되는 것을 가리킨다. 따라서, APRIL-TALL-I 및 BCMA-TACI는 B 및 T세포기능의 자극과 관련하여 2 리간드-2 수용체 경로를 형성한다. Other markers of the subject are transmembrane actives and CAML-interacters (TACI). See, eg, Yu et al., Nat. Immunol. See 1: 252-265 (2000). Briefly, TACI is a marker for B cell malignancies (eg, lymphomas). In addition, TACI and B cell maturation antigens (BCMA) are recognized to be bound by a tumor necrosis factor allogenic proliferation inducing ligand (APRIL). APRIL stimulates the proliferation of primary B and T cells in vivo, and increases the spleen weight as accumulation of B cells in vivo. APRIL also competes with TALL-I (called BLys or BAFF) for receptor binding. Soluble BCMA and TACI interfere with the binding of APRIL and specifically interfere with the binding of APRIL-stimulated cell proliferation of primary B cells. In addition, BCMA-Fc inhibits the production of antibodies against keyhole limpet hemocyanin and pneumovax in mice, which may be APRIL and / or TALL-I by BCMA and / or TACI. Indicates that a signal is required for the generation of immunity of body fluids. Thus, APRIL-TALL-I and BCMA-TACI form a two ligand-2 receptor pathway in connection with stimulation of B and T cell function.

면역원에 항체의 초기증식 후, 항체는 서열화되고 이어 재조합 기술로 제조될 수 있다. 쥐과 항체 및 항체 단편의 인간화 및 키메라화는 당업계에서 공지되어 있다. 예를들어, 인간화된 단클론 항체는 쥐과 면역글로부린의 중쇄 및 경쇄 가변부위로부터 인간 가변부위로 쥐과 상보결정 부위를 이동하고, 쥐과 대응부분의 골격부위에서 인간 잔기를 대체함으로써 제조된다. 인간화된 단클론 항체로부터 유래된 항체 성분의 사용은 쥐과 일정 부위의 면역원성(immunogenicity)과 관련된 잠재적 문제들을 제거한다. 예를들어, 쥐과 면역글로부린 가변부위를 클론화하는 일반적인 기술은 전체가 참조예가 되는 Orlandi, et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA86:3833(1989)에 기재되어 있다. 예로, 인간화된 Mabs를 생성하는 기술은 Jones et al. Nature 321:522(1986), Richmann et al., Nature 332:323(1988), Verhoeyen et al., Science 239:1534(1988), Carter et al., Proc. Nat'l Acad. sCI. USA 89:4285(1992), Sandu, Crit. Rev. Biotech. 12:437(1992), 및 Singer et al., J. Immun 150:2844(1993)에 기재되어 있다. After initial proliferation of the antibody to the immunogen, the antibody can be sequenced and then produced by recombinant technology. Humanization and chimerization of murine antibodies and antibody fragments are known in the art. For example, humanized monoclonal antibodies are prepared by moving the murine complementarity sites from the heavy and light chain variable regions of murine immunoglobulin to human variable regions and replacing human residues in the skeletal regions of the murine counterparts. The use of antibody components derived from humanized monoclonal antibodies eliminates potential problems associated with immunogenicity of murine sites. For example, general techniques for cloning murine immunoglobulin variable regions are described in Orlandi, et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 86: 3833 (1989). For example, techniques for generating humanized Mabs are described by Jones et al. Nature 321: 522 (1986), Richmann et al., Nature 332: 323 (1988), Verhoeyen et al., Science 239: 1534 (1988), Carter et al., Proc. Nat'l Acad. sCI. USA 89: 4285 (1992), Sandu, Crit. Rev. Biotech. 12: 437 (1992), and Singer et al., J. Immun 150: 2844 (1993).

선택적으로, 전체 인간 항체는 형질전환 비-인간 동물로부터 얻어질 수 있다. 예로, Mendez et al., Nature Genetics, 15:146-156(1997); 미국특허 제5633425를 보아라. 예를들면, 인간항체는 인간 면역글로부린 좌(loci)를 갖는 형질전환 쥐로부터 회복될 수 있다. 쥐 체액 면역 시스템은 내생적 면역글로부린 유전자를 비활성화하고 인간 면역글로부린 좌를 도입함으로써 인간화된다. 인간 면역글로부린 좌는 크게 복잡하게 되고 인간 게놈의 거의 0.2%를 차지하는 다수의 별개 단편들로 이루어진다. 형질전환 쥐가 항체의 적절한 레퍼토리를 생성할 수 있도록 하기 위해, 인간 중쇄 및 경쇄 좌의 대부분은 쥐 게놈에 도입되어야 한다. 이는 배(germline) 배열에서 인간 중쇄 또는 경쇄 면역글로부린 좌를 포함하는 효모 인공염색체(yeast artificial chromosome, YAC)의 형성을 시작으로 단계적 방법으로 수행된다. 각 삽입이 크기면으로 대략 1 Mb이기 때문에, YAC 구조는 면역글로부린 좌의 겹침 단편의 동종 재조합이 요구된다. 2개 YAC, 중쇄 좌를 함유하는 하나 및 경쇄좌를 함유하는 하나는 마우스 배아 줄기세포(mouse embryonic stem cell; mES)와 효모 스페로플라스트(Spheroplast)를 함유하는 YAC의 융합으로 쥐속으로 개별적으로 도입된다. 배아줄기세포 클론은 쥐 배포(blastocyst)속으로 미세주입된다. 결과 키메라 수컷을 그들의 배를 통한 YAC를 전달하는 능력으로 스크린하고, 쥐과 항체 생성에서 부족한 쥐를 사육한다. 인간 중쇄 좌를 함유하는 하나와 인간 경쇄좌를 함유하는 다른 하나인 2개의 형질전환 품종들의 사육은 면역화와 대응하여 인간 항체를 생성하는 결과를 가져온다. Optionally, whole human antibodies can be obtained from transgenic non-human animals. See, eg, Mendez et al., Nature Genetics, 15: 146-156 (1997); See U. S. Patent No. 5633425. For example, human antibodies can be recovered from transgenic mice with human immunoglobulin loci. The rat humoral immune system is humanized by inactivating endogenous immunoglobulin genes and introducing human immunoglobulin loci. Human immunoglobulin loci are largely complex and consist of a number of distinct fragments, which make up nearly 0.2% of the human genome. In order to enable transgenic mice to generate appropriate repertoires of antibodies, most of the human heavy and light chain loci must be introduced into the mouse genome. This is done in a stepwise manner beginning with the formation of a yeast artificial chromosome (YAC) comprising human heavy or light chain immunoglobulin loci in a germline arrangement. Since each insert is approximately 1 Mb in size, the YAC structure requires homologous recombination of the overlapping fragment of the immunoglobulin locus. Two YACs, one containing the heavy chain locus and one containing the light chain locus, are individually introduced into the mouse by the fusion of YES containing mouse embryonic stem cells (mES) and yeast spheroplast (Spheroplast). do. Embryonic stem cell clones are microinjected into the rat blastocyst. Results The chimeric males are screened for their ability to deliver YAC through their embryos and breed mice lacking murine antibody production. Breeding of two transgenic varieties, one containing a human heavy chain locus and the other containing a human light chain locus, results in the production of human antibodies in response to immunization.

또한, 비재배열된 인간 면역글로부린 유전자는 마이크로셀을 이용한 염색체 전이기법 (microcell-mediated chromosome transfer, MMCT)으로 쥐 배아줄기세포로 도입될 수 있다. 예로, Tomizuka et al., Nature Genetics, 16:1333(1997)을 보아라. 상기 방법론에서 인간 염색체를 함유하는 마이크로셀은 쥐 배아줄기 세포로 용해된다. 변형 염색체는 안정적으로 유지되고, 성인 키메라는 적절한 조직-특이적 발현을 나타낸다. In addition, non-rearranged human immunoglobulin genes can be introduced into mouse embryonic stem cells by microcell-mediated chromosome transfer (MMCT). See, for example, Tomizuka et al., Nature Genetics, 16: 1333 (1997). In this methodology microcells containing human chromosomes are lysed into mouse embryonic stem cells. The modified chromosome remains stable and the adult chimera exhibits proper tissue-specific expression.

선택적으로, 본 발명의 항체 또는 항체 단편은 조합적 면역글로부린 라이브러리로부터 분리된 인간 항체 단편으로부터 유래될 수 있다. 예로, 전체가 참조예가 되는 Barbas et al., METHODS: A Companion to Methods in Enzymoligy 2:119(1991), 및 Winter et al., Ann. Rev. Immunol. 12:433(1994)를 보아라. B-세포 불멸화(immortalization)에 의한 단클론 항체의 생성과 관련된 많은 문제점들은 파아지 발현 (phage display)을 사용한 E coli 에서 항체 단편을 증진 및 발현함으로써 극복될 수 있다. 고 친화력의 회복을 확신하기 위해, 단클론 항체 조합 면역글로부린 라이브러리(combinatorial immunoglobulin library)는 큰 레퍼토리 크기를 함유해야만 한다. 전형적인 용법은 역전사효소를 사용한 cDNA를 합성하는 면역화된 쥐의 림프구 또는 비장 세포로부터 얻어진 mRNA를 사용한다. 중쇄 및 경쇄 유전자는 PCR에 의해 개별적으로 증대되고, 파아지 클로닝 벡터로 결찰된다. 2개의 상이한 라이브러리가 생성되며, 이는 중쇄 유전자를 함유하는 하나와 경쇄 유전자를 함유하는 하나이다. 파아지 DNA는 각 라이브러리로부터 분리되고, 중쇄 및 경쇄 서열은 함께 결찰되어 조합 라이브러리 형태를 갖도록 쌓여진다. 각 파아지는 중쇄 및 경쇄 cDNA의 자유 임의 쌍을 함유하며, E coli의 감염은 감염된 세포에서 항체 사슬의 발현에 영향을 준다. 대상의 항원을 인지하는 항체를 동정하기 위해, 파아지 라이브러리를 씌우고, 프라그(plaque)에서 존재하는 항체 분자들은 필터로 이동된다. 필터는 방사성으로 라벨화된 항원으로 배양하고, 과량의 비결합된 리간드를 제거하도록 세척하였다. 방사선사진에서 방사성 점은 항원에 결합하는 항체를 함유하는 프라그를 나타낸다. 예를들어, STRATAGENE Cloning System(La Jlla, CA)로부터 인간 면역글로부린 파아지 라이브러리를 생성하는데 유용한 클로닝 및 발현 벡터가 얻어질 수 있다. Alternatively, an antibody or antibody fragment of the invention can be derived from human antibody fragments isolated from combinatorial immunoglobulin libraries. See, eg, Barbas et al., METHODS: A Companion to Methods in Enzymoligy 2: 119 (1991), and Winter et al., Ann. Rev. Immunol. See 12: 433 (1994). Many problems associated with the production of monoclonal antibodies by B-cell immortalization can be overcome by enhancing and expressing antibody fragments in E coli using phage display. To assure high affinity recovery, the monoclonal antibody immunoglobulin library must contain a large repertoire size. Typical usage uses mRNA from immunized rat lymphocytes or spleen cells that synthesize cDNA using reverse transcriptase. Heavy and light chain genes are separately augmented by PCR and ligated into phage cloning vectors. Two different libraries are generated, one containing the heavy chain gene and one containing the light chain gene. Phage DNA is isolated from each library and the heavy and light chain sequences are ligated together and stacked to have a combinatorial library form. Each phage contains free arbitrary pairs of heavy and light chain cDNAs, and infection with E coli affects the expression of antibody chains in infected cells. To identify antibodies that recognize the antigen of interest, phage libraries are covered and antibody molecules present in the plaque are transferred to the filter. The filter was incubated with radiolabeled antigen and washed to remove excess unbound ligand. Radiographs in the radiographs represent plaques containing antibodies that bind to the antigen. For example, cloning and expression vectors useful for generating human immunoglobulin phage libraries can be obtained from the STRATAGENE Cloning System (La Jlla, Calif.).

유사한 용법은 고-친화성 scFv를 얻는데 적용될 수 있다. 예로 Vaughn et al., Nat. Biotechnol., 14:309-314(1996)을 보아라. 큰 레퍼토리를 갖는 scFv 라이브러리는 공지된 모든 V_H, V_k, 및 V_λ 유전자에 대응하는 PCR 프라이머를 사용한 비-면역화된 인간 도너로부터 V-유전자를 분리함으로써 설계될 수 있다. 증식에 이어, V_k, 및 V_λ 풀(pool)은 하나의 풀을 형성하도록 조합된다. 상기 단편들은 파아지미드(Phagemid) 벡터로 결찰된다. scFv 링커(linker), (Gly₄,Ser)₃는 V_L 단편의 파아지미드 상류로 결찰된다. V_H 및 링커-V_L 단편은 증식되고, J_H 0위에 집합된다. 결과 V_H -링커- V_L 단편은 파아지미드 벡터로 결찰된다. 파아지미드 라이브러리는 상기에 기재된 바와 같이 필터 또는 이뮤노튜브(Nunc;Maxisorp)를 사용하여 산출될 수 있다. 유사한 결과는 면역화된 토끼의 림프구 또는 비장세포로부터 조합 면역글로부린 라이브러리를 설계하고 P. pastoris에서 scFv 구조를 발현함으로써 이룰 수 있다. 예로, Ridder et al., Biotechnology,13:255-260(1995)를 보아라. 게다가, 적절한 scFv의 분리에 이어, 고 결합 친화력 및 낮은 분리율을 갖는 항체 단편은 CDR3 돌연변이 및 사슬섞음(chain shuffling)과 같은 친화력 성숙과정을 통해 얻어질 수 있다. 예로, Jackson et al., Br. J. Cancer, 78:181-188(1998); Osbourn et al., Immunotechnology,2:181-196(1996)을 보아라. Similar usage can be applied to obtain high-affinity scFv. See, eg, Vaughn et al., Nat. See Biotechnol., 14: 309-314 (1996). ScFv libraries with large repertoires can be designed by separating V-genes from non-immunized human donors using PCR primers corresponding to all known V _H , V _k , and V _λ genes. Following propagation, V _k , and V _λ pools are combined to form one pool. The fragments are ligated with Phagemid vectors. The scFv linker, (Gly ₄ , Ser) _3, is ligated up to phagemid upstream of the V _L fragment. V _H and linker-V _L fragments proliferate and aggregate on J _H 0. The resulting V _H -linker-V _L fragment is ligated into phagemid vector. Phageimide libraries can be calculated using filters or immunotubes (Nunc; Maxisorp) as described above. Similar results can be achieved by designing combinatorial immunoglobulin libraries from lymphocytes or splenocytes of immunized rabbits and expressing scFv structures in P. pastoris. See, eg, Ridder et al., Biotechnology, 13: 255-260 (1995). In addition, following fragmentation of appropriate scFvs, antibody fragments with high binding affinity and low isolation rate can be obtained through affinity maturation processes such as CDR3 mutations and chain shuffling. See, eg, Jackson et al., Br. J. Cancer, 78: 181-188 (1998); See Osbourn et al., Immunotechnology, 2: 181-196 (1996).

키메라 항체(chimeric antibody)는 설치류 항체로부터 유래된 가변 및 상보성 결정 부위를 함유하는 재조합 단백질이며, 항체분자의 잔여부분은 인간항체로부터 유래된다. 인간화된 항체는 단클론 항체의 쥐과 상보성 결정부위가 쥐과 면역글로부린의 중쇄 및 경쇄로부터 인간 가변 부위로 전이되는 재조합 단백질이다. Chimeric antibodies are recombinant proteins containing variable and complementarity determining sites derived from rodent antibodies, with the remainder of the antibody molecules derived from human antibodies. Humanized antibodies are recombinant proteins in which murine complementarity determining regions of monoclonal antibodies are transferred from the heavy and light chains of murine immunoglobulins to human variable regions.

재조합 방법의 종류는 이특이성 항체 및 항체단편을 제조하는데 사용될 수 있다. 예를들어, 이특이성 항체 및 항체단편은 형질전환 가축류의 우유에서 제조될 수 있다. 예로, Colman, A., Biochem. Soc. Symp.,63:141-147,1998; 미국특허 제5827690를 보아라. 각각 DNA 시편 인코딩 쌍 면역글로블린 중쇄 및 경쇄를 함유하는 2개의 DNA 구조가 생성된다. 단편들은 포유류 상피세포에서 바람직하게 발현되는 프로모터 서열을 함유하는 발현 벡터로 클론화된다. 예들은 특별히 한정되지 않지만, 토끼, 소 및 양 카세인 유전자, 소 α-락토글로불린 유전자, 양 β-락토글로부린 유전자 및 쥐 유장산 단백질 유전자로부터 프로모터를 포함한다. 바람직하게, 삽입된 단편은 포유류-특이적 유전자로부터 동족 게놈 서열에 의해 이의 3' 측에 위치한다. 이는 폴리아데닐레이션(polyaldenylation) 부위 및 전사-안정화 서열를 제공한다. 발현 카세트는 수정된 포유류 알의 전핵(pronuclei)으로 같이 주입되고, 수령 암컷의 자궁속으로 불어넣어져 임신하게 된다. 출산 후, 자손은 Southern 분석으로 형질전환 유전자(transgene)의 존재를 스크린한다. 존재하는 항체에서 중쇄 및 경쇄 유전자는 동일 세포에서 동시에 발현되어야만 한다. 형질전환 암컷의 우유를 당업계에서 공지된 표준 면역학 방법을 사용하여 항체 또는 항체 단편의 존재 및 기능성을 분석한다. 항체는 당업계에서 공지된 표준방법을 사용하여 우유로부터 정제될 수 있다. Kinds of recombinant methods can be used to prepare bispecific antibodies and antibody fragments. For example, bispecific antibodies and antibody fragments can be prepared in the milk of transgenic livestock. See, eg, Colman, A., Biochem. Soc. Symp., 63: 141-147,1998; See U. S. Patent No. 5827690. Two DNA structures are generated, each containing a DNA specimen encoding pair immunoglobulin heavy and light chain. Fragments are cloned into expression vectors containing promoter sequences that are preferably expressed in mammalian epithelial cells. Examples include, but are not particularly limited to, promoters from rabbit, bovine and sheep casein genes, bovine α-lactoglobulin gene, sheep β-lactoglobulin gene, and murine whey protein gene. Preferably, the inserted fragment is located on its 3 'side by cognate genomic sequence from a mammalian-specific gene. This provides a polyaldenylation site and a transcription-stabilization sequence. The expression cassette is injected together into the pronuclei of the fertilized mammalian egg, blown into the uterus of the receiving female, and becomes pregnant. After birth, the offspring screen for the presence of the transgene by Southern analysis. In the antibodies present, the heavy and light chain genes must be expressed simultaneously in the same cell. The milk of transgenic females is analyzed for the presence and functionality of the antibody or antibody fragment using standard immunological methods known in the art. Antibodies can be purified from milk using standard methods known in the art.

키메라 Ab는 인간 항체로부터 단편 인코딩 C 도메인에 cDNA 단편 인코딩 쥐 경쇄 및 중쇄 가변 도메인을 결찰함으로써 설계된다. C 도멘인은 항원결합에 도움을 주기 않지 때문에, 키메라 항체는 원 쥐 Ab로서 같은 항원 특이성을 유지할 것이지만, 서열에서 인간 항체에 더 가까울 것이다. 그러나, 여전히 키메라 Ab는 쥐 서열을 함유할 것이고, 면역원이 될 것이다. 인간화된 Ab는 항원을 인지하는데 필요한 쥐 아미노산을 함유한다. 상기 생성물은 쥐 상보성 결정 부위로부터 인간 항체 단편 아미노산으로 결합함으로써 설계된다. Chimeric Abs are designed by ligation of cDNA fragment encoding murine light and heavy chain variable domains from a human antibody to the fragment encoding C domain. Since C domainn does not aid in antigen binding, chimeric antibodies will retain the same antigen specificity as the original mouse Ab, but will be closer to human antibodies in the sequence. However, the chimeric Ab will still contain murine sequences and will become an immunogen. Humanized Ab contains murine amino acids necessary to recognize antigen. The product is designed by binding to human antibody fragment amino acids from murine complementarity determining sites.

도 1은 종양세포상의 CEA에 결합하는 hMN14 단클론 부분을 갖는 표적화제, 및 표적가능한 구조체 상의 부착소, HSG에 결합하는 679 단클론 부분을 갖는 일차 표적 제제를 이용하여 예비표적화를 설명하는 모식도이다. 표적가능한 구조체는 직교하는 부착소 HSG (2 copies) 및 DTPA (1 copy)를 가져, 표적가능한 구조체가 두개의 표적 결합된 일차 표적 제제에 결합되고, DTPA 부분은 제거제에 결합되지 않는다. 1 is a schematic diagram illustrating pretargeting using a targeting agent having an hMN14 monoclonal moiety that binds to CEA on tumor cells, and a primary targeting agent having an attachment point on the targetable construct, a 679 monoclonal moiety that binds to HSG. The targetable construct has orthogonal attachment HSG (2 copies) and DTPA (1 copy) such that the targetable construct is bound to two target bound primary target agents and the DTPA moiety is not bound to the remover.

도 2는 두개의 표적가능한 구조체 각각의 InDTPA 부착소에 결합하는 734 IgG 단클론을 갖는 제거제로 두개의 표적-결합 복합체을 가교시켜, 표적 부위에 표적가능한 구조체의 보유를 증가시키는, 도 1의 예비표적화를 도시하는 모식도이다. 도시된 바와 같이 표적가능한 구조체 및 제거제의 조합 결과 4개의 결합부위를 가교하는 복합체이다. FIG. 2 illustrates the pretargeting of FIG. 1, which crosslinks two target-binding complexes with an 734 IgG monoclonal binding agent that binds to the InDTPA attachment of each of the two targetable constructs, thereby increasing retention of the targetable construct at the target site. It is a schematic diagram to show. As shown, the combination of the targetable construct and the remover is a complex that crosslinks four binding sites.

도 3은 제거제가 갈락토즈 부분으로 개질되어, 순환중인 제거제 및 거기에 결합된 임의의 표적가능한 구조체의 제거율이 향상되는 것을 제외하고는, 도 2와 같은 예비표적화 및 록킹을 도시하는 모식도이다. FIG. 3 is a schematic diagram illustrating pretargeting and locking as in FIG. 2, except that the remover is modified to a galactose moiety, thereby improving the removal rate of the circulating remover and any targetable structure bound thereto.

도 4는 제거제가 엽산으로 개질되어 엽산 부분이 폴레이트 수용체에 결합하여 결합된 복합체의 내재화를 향상시키는 것을 제외하고는 도 2와 같은 예비표적화 및 록킹을 도시하는 모식도이다. FIG. 4 is a schematic showing pretargeting and locking as in FIG. 2 except that the remover is modified with folic acid so that the folate portion binds to the folate receptor to enhance internalization of the bound complex.

도 5는 표적가능한 구조체의 교호 배열을 도시하는 모식도이다. 도 2와 대비하여, 표적가능한 구조체는 하나의 HSG 부착소을 가져 하나의 일차 표적 제제에 결합한다. 도 2에서와 같이, 제거제는 두개의 표적 결합된 표적가능한 구조체에 가교하여, 표적 부위의 표적가능한 구조체의 보유가 향상된다. 이 배열에서, 복합 체은 2개의 결합 부위를 가교한다. 5 is a schematic diagram showing an alternating arrangement of targetable structures. In contrast to FIG. 2, the targetable construct has one HSG attachment and binds to one primary target agent. As in FIG. 2, the remover crosslinks the two target bound targetable constructs to improve retention of the targetable construct of the target site. In this arrangement, the complex bridges two binding sites.

도 6~9는 세포 표면 마커, 일차 표적 제제에 결합하고 두 개의 결합된 일차 표적 제제를 가교시키는 표적가능한 구조체 및 표적가능한 구조체에 결합하여 두 개의 결합된 표적가능한 구조체를 가교시켜 4개의 세포 표면 마커에 결합하는 표적 결합 복합체을 형성하는 제거제의 예비표적화에 일차 표적 제제를 사용하는 것을 설명하는 일련의 모식도이다. 도 6은 표면상에 CD20을 갖는 B 세포를 도시한다. 도 7은 도 6에 도시된 세포 표면 마커에 일차 표적 제제를 결합하는 것을 도시한다. 도 8은 도 7로부터 국소화된 일차 표적 제제에 결합된 표적가능한 구조체을 도시하는데, 각 표적가능한 구조체는 두개의 국소화된 일차 표적 제제와 가교한다. 도 9는 2가 제거제를 국소화된 표적가능한 구조체에 결합시켜, 두개의 표적가능한 구조체를 가교하여 4개의 표적에 결합하는 복합체을 형성하는 것을 도시한다. 6-9 show cell surface markers, a targetable construct that binds to a primary target agent and crosslinks two bound primary target agents, and four cell surface markers that bind to a targetable construct and crosslink two bound targetable constructs. A series of schematic diagrams illustrating the use of a primary target agent in the pretargeting of a scavenger that forms a target binding complex that binds to. 6 shows B cells with CD20 on their surface. FIG. 7 illustrates binding the primary target agent to the cell surface marker shown in FIG. 6. FIG. 8 shows a targetable structure bound to the localized primary target agent from FIG. 7, with each targetable structure crosslinking with two localized primary target agents. 9 illustrates binding a divalent remover to a localized targetable construct to crosslink the two targetable constructs to form a complex that binds to four targets.

실시예1Example 1 - IMP 272 합성, 항체 결합 및 혈청 안정성 IMP 272 synthesis, antibody binding and serum stability

하기에 기술된 바와 같이, 대표적인 펩티드 IMP 272를 합성하고 ¹¹¹In으로 표지화하였다. As described below, a representative peptide IMP 272 was synthesized and labeled with ¹¹¹ In.

DTPA-Gln-Ala-Lys(HSG)-D-Tyr-Lys(HSG)-NH₂ (IMP 272, MH⁺ : 1512)DTPA-Gln-Ala-Lys (HSG) -D-Tyr-Lys (HSG) -NH ₂ (IMP 272, MH ⁺ : 1512)

합성synthesis

고체상의 펩티드 합성은 Fmoc 과정을 이용하여, Sieber 산아미드 수지(0.424 g, 0.53 mmol/g)상태에서 펩티드를 합성했다. 다음의 아미노산(1 결합당 6 당량)을 다음의 순서와 같이 첨가했다. Fmoc-Lys(Aloc)-OH, Fmoc-D-Tyr(OBut)-OH, Fmoc-Lys(Aloc)-OH, Fmoc-Ala-OH 그리고 Fmoc-Gln(Trt)-OH. 각각의 아미노산은 처음에는 디이소프로필카르보이미드를 이용하여, 다음에는 O-벤조트리아졸-N,N,N',N'-테트라메틸-우로늄-헥사플루오로-포스페이트(HBTU)을 활성제제로 사용하는 결합에 의한, 두 시간의 결합 동안 두 겹으로 연결되었다. Peptide synthesis of the solid phase was synthesized in the Sieber acid amide resin (0.424 g, 0.53 mmol / g) using the Fmoc process. The next amino acid (6 equivalents per bond) was added in the following order. Fmoc-Lys (Aloc) -OH, Fmoc-D-Tyr (OBut) -OH, Fmoc-Lys (Aloc) -OH, Fmoc-Ala-OH and Fmoc-Gln (Trt) -OH. Each amino acid is first activated with diisopropylcarbodiimide, followed by O-benzotriazole-N, N, N ', N'-tetramethyl-uronium-hexafluoro-phosphate (HBTU). The connection was made in two layers during the binding of two hours, by the coupling using zero.

글루타민으로부터 말단 Fmoc 그룹을 제거하고 클로로아세트산 무수물 0.866g, DMAP 0.042 g, DIEA 1.76 mL 및 NMP 5mL로 N-말단 아미노기를 반응시켜 수수지상에 DTPA를 만들었다. 반응은 21시간 동안 혼합되었다. 수지를 NMP와 IPA로 세척하였다. 디에틸렌트리아민 1.0mL를 4.0mL NMP와 혼합하고, 용액을 클로로아세틸 수지에 첨가하였다. t-부틸 브로모아세테이트 1.5 mL를 DIEA 2.0 ml, NMP 3.0 mL와 혼합하였다. 이 용액을 수지에 첨가하고 21시간동안 혼합하였다. 이어 ALoc 측쇄를 Pd 촉매를 사용하여 통상의 방법으로 제거하고, 트리틸-HSG-OH를 리신 측쇄에 두겹으로 연결시켰다. 펩티드를 TFA로 격리시키고, 에테르에 침전시키고, HPLC로 정제하여 원하는 펩티드를 얻었다. The terminal Fmoc group was removed from glutamine and DTPA was made on the resin by reacting the N-terminal amino group with 0.866 g chloroacetic anhydride, 0.042 g DMAP, 1.76 mL DIEA and 5 mL NMP. The reaction was mixed for 21 hours. The resin was washed with NMP and IPA. 1.0 mL of diethylenetriamine was mixed with 4.0 mL NMP and the solution was added to chloroacetyl resin. 1.5 mL t-butyl bromoacetate was mixed with 2.0 mL DIEA, 3.0 mL NMP. This solution was added to the resin and mixed for 21 hours. The ALoc side chain was then removed in a conventional manner using a Pd catalyst, and trityl-HSG-OH was doubled to the lysine side chain. Peptides were sequestered with TFA, precipitated in ether and purified by HPLC to afford the desired peptide.

IMP 272 제형 키트IMP 272 Formulation Kit

IMP 272의 15μg을 포함한 제형키트를 이번 연구에 사용하였다. 이 키트는 다음 순서에 따라 만들어졌다. 히드록시프로필-β-시클로덱스트린, 10.053g, 구연산 0.426g, IMP 272 0.0015g 을 탈이온수 85mL 에 용해했다. 1M NaHO를 첨가하여 용액의 pH 지수를 pH 4.30에 맞추었다. 탈이온수로 용액을 100mL까지 희석시켰다. 그 용액을 밀렉스 GV(Millex GV(0.22μm)) 필터를 통해서 1mL 약수에서 3mL 동결건조 바이알(vial)들로 걸러냈다. 바이알들을 드라이아이스 위에 놓아 용액을 얼게 하고 동결시켰다. 동결건조 주기가 완성될 때 그 바이알들을 진공상태에서 밀봉하고 동결건조기로부터 치웠다. Formulation kits containing 15 μg of IMP 272 were used in this study. The kit was made in the following order. Hydroxypropyl-β-cyclodextrin, 10.053 g, citric acid 0.426 g, and IMP 272 0.0015 g were dissolved in 85 mL of deionized water. 1 M NaHO was added to adjust the pH index of the solution to pH 4.30. The solution was diluted to 100 mL with deionized water. The solution was filtered through a Millex GV (Millex GV (0.22 μm)) filter into 3 mL lyophilized vials in 1 mL aliquots. The vials were placed on dry ice to freeze and freeze the solution. When the lyophilization cycle was completed the vials were sealed in vacuo and removed from the lyophilizer.

표지화 Cover

¹¹¹InCl₃(30.4μL)을 DIH₂O 500μL에 첨가하였다. 이 용액을 준비한 IMP 272 바이알에 첨가하고 실온에서 약 20분 정도 방치하였다. 그리고 차가운 In 초산염 버퍼(1.0×10^-4M InCl₃, 0.5M NaOAc, pH6.5) 600μL를 바이알에 첨가하고, 45분 동안 더 방치하였다. 총 부피는 1130μL이고 IMP 272의 몰 양이 1.220×10^-8 몰로서 농도는 8.777×10^-6M이었다. 표지화가 완성된 후 펩티드의 안정성을 건강한 인간과 누드 마우스 혈청으로 24시간 동안 테스트하였다. 펩티드의 인간화된 항체들, m679xhMN14와 m734xhMN14에 대한 결합력을 테스트하였다. 크기 배제와 역상 크로마토그램은 펩티드가 표지화가 잘되고 hMN-14m734를 하나씩 또는 한번에 전부 결합할 수 있다는 것을 보여준다. ¹¹¹ InCl ₃ (30.4 μL) was added to 500 μL DIH ₂ O. This solution was added to a prepared IMP 272 vial and left at room temperature for about 20 minutes. And 600 μL of cold In acetate buffer (1.0 × 10 ⁻⁴ M InCl ₃ , 0.5M NaOAc, pH6.5) was added to the vial and left to stand for 45 minutes. The total volume was 1130 μL and the molar amount of IMP 272 was 1.220 × 10 ⁻⁸ moles with a concentration of 8.777 × 10 ⁻⁶ M. After labeling was completed, the stability of the peptide was tested for 24 hours with healthy human and nude mouse serum. The binding of the peptide to humanized antibodies, m679xhMN14 and m734xhMN14, was tested. Size exclusion and reversed phase chromatograms show that the peptides are well labeled and can bind hMN-14m734 one at a time or all at once.

60μL의 ¹¹¹In IMP 272를 540μL의 건강한 인간의 혈청에 첨가하였다. 이것을 섞어서 37℃를 유지하는 곳에 두었다. 이 혼합물의 펩티드 농도는 8.777×10-⁷M이었 다. 인간의 혈청에서 배양된 펩티드는 37℃의 인간혈청에서 한 시간 동안 배양된 후 손상되지 않았으나, 37℃에서 24시간 후 HSG와의 결합 중 몇 가지 결합을 잃어버렸다. 크기 배제(size exclusion) HPLC 는 두 HSG의 펩티드들 중 하나와 연결된 것들 중 약 50%는 24시간 시점에서 이루어진다는 것을 나타낸다.60 μL of ¹¹¹ In IMP 272 was added to 540 μL of healthy human serum. This was mixed and placed at 37 ° C. The peptide concentration of this mixture was 8.777 × 10 ⁻⁷ M. Peptides cultured in human serum were intact after incubation in human serum at 37 ° C. for one hour, but lost some of their binding to HSG after 24 hours at 37 ° C. Size exclusion HPLC indicates that about 50% of those linked with one of the peptides of the two HSGs occur at the 24 hour time point.

44μL의 ¹¹¹In IMP 272를 400μL의 건강한 누드 마우스의 혈청에 첨가하였다. 이것을 섞어서 37℃를 유지하는 곳에 두었다. 이 혼합물의 펩티드 농도는 8.698×10-⁷M이었다. 크기 배제 HPLC와 역상 HPLC 크로마토그램은 펩티드가 37℃의 쥐의 혈청에서 24시간 동안 안정적이라는 것을 보여주었다. 44 μL of ¹¹¹ In IMP 272 was added to the serum of 400 μL of healthy nude mice. This was mixed and placed at 37 ° C. The peptide concentration of this mixture was 8.698 × 10 ⁻⁷ M. Size exclusion HPLC and reversed phase HPLC chromatograms showed that the peptides were stable for 24 hours in serum of 37 ° C. mice.

결론 conclusion

IMP 272 펩티드는 ¹¹¹In로 잘 표지화되었다. 게다가, 표지화 후에는, 펩티드는 두 개의 m679xhMN14 항체와 하나의 m734xhMN14 항체와 개별적으로 잘 결합하였다. 두 항체와 결합하였을 때, 정체시간에서의 변화와 최고점의 확장을 볼 수 있다. 37℃의 배양에서 쥐의 혈청과 결합하였을 때, 펩티드는 안정적이었다. 37℃에서 인간의 혈청과 결합하였을 때, 펩티드는 부분적으로 신진대사가 이루어졌다. HSG의 펩티드 중 하나는 항체와 결합하는 능력을 잃어버린다. IMP 272 peptide was well labeled with ¹¹¹ In. In addition, after labeling, the peptides bound well with the two m679xhMN14 antibodies and one m734xhMN14 antibody separately. When combined with both antibodies, changes in retention time and expansion of peaks can be seen. Peptides were stable when bound to rat serum in culture at 37 ° C. When bound to human serum at 37 ° C., the peptide was partially metabolized. One of the peptides of HSG loses its ability to bind antibodies.

실시예Example 2: 제거제를 사용하여  2: using remover 표적가능한Targetable 구조체의 제거(chase) Chase

특정 구조체에 대해, 록킹 및 체이스 방법의 제거(chase) 성분을 IMP 272 펩 티드에 대해 여기에 설명한 바와 같이 테스트할 수 있다. IMP 272 DTPA-Gln-Ala-Lys(HSG)-D-Tyr-Lys(HSG)-NH₂ MN^＋ 1512 펩티드를 록킹 및 체이스 이특이성 항체 약물표적화를 위해서 제조하였다. 펩티드는 전형적인 예비표적화 방법으로 종양의 표면에서 항체에 연결되기 위하여 두 HSG 그룹을 포함한다. 펩티드는 또한 DTPA를 운반하고, (인듐으로 채워져 있을 때에는) m734 항체와 결합한다. IgG는 두개의 DTPA 연결 팔을 가지고 있으므로 종양의 표면에 결합된 두 개의 펩티드에 결합될 수 있다. 종양 표면에서의 부가적 가교는 펩티드가 종양의 자리에 머물러 있는 시간을 늘려준다. m734 IgG 항체에 의한 In-DTPA 가교연결은 록킹 및 체이스 항체 시스템에 락(lock)을 제공한다. 만약 항체가 갈락토오스에 의해 개질된다면 그것은 혈류로부터 비갈락토실화된(non-galactosylated) 항체보다 더 신속하게 제거할 것이다. 항체에 있는 갈락토오스의 양은 제거속도에 영향을 미친다. 높은 함량(30-40 gal/ab)는 항체가 더 신속하게 제거되도록 하고, 좀더 적당한 함량(10-20 gal/ab)은 좀더 적당한 속도에서 항체를 제거한다. 이 테스트에서 종양을 갖는 충분한 누드 마우스를 확보하기 위하여 65마리의 쥐에 종양을 이식하고, 가급적 60마리의 GW-39 종양을 지닌 누드 마우스를 사용하여 이 테스트를 수행하였다. For certain constructs, the chase component of the locking and chase method can be tested as described herein for the IMP 272 peptide. IMP 272 DTPA-Gln-Ala-Lys (HSG) -D-Tyr-Lys (HSG) -NH ₂ MN ⁺ 1512 peptide was prepared for locking and chase bispecific antibody drug targeting. Peptides contain two HSG groups in order to be linked to antibodies at the surface of the tumor by typical pretargeting methods. The peptide also carries DTPA and binds to the m734 antibody (when filled with indium). IgG has two DTPA-linked arms so that it can bind to two peptides bound to the surface of the tumor. Additional crosslinking at the tumor surface increases the time the peptide stays in place of the tumor. In-DTPA crosslinking with the m734 IgG antibody provides a lock to the locking and chase antibody system. If the antibody is modified by galactose it will remove more rapidly from the bloodstream than non-galactosylated antibodies. The amount of galactose in the antibody affects the rate of elimination. Higher amounts (30-40 gal / ab) allow antibodies to be removed more quickly, and more moderate amounts (10-20 gal / ab) remove antibodies at more moderate rates. Tumors were transplanted into 65 rats to ensure sufficient nude mice with tumors in this test, and this test was performed using nude mice with 60 GW-39 tumors as possible.

이 연구의 예비표적화 팔에서 각각의 쥐에 hMN-14x m679(5μCi/mouse)가 라벨이 된 I-125의 15μg 용액 100uL을 주입하였다. 펩티드를 주입하기 24시간 전에 그 항체를 주입하였다. In the pretargeting arm of this study, each rat was injected with 100 μL of a 15 μg solution of I-125 labeled hMN-14 × m679 (5 μCi / mouse). The antibody was injected 24 hours prior to peptide injection.

일반적으로, 펩티드를 15μg의 펩티드를 포함한 동결 건조된 키트에 조직화 한다. 그 펩티드는 In-111로 표지화되어 있고, 과량의 차가운 인듐을 첨가하여 페티드의 모든 DTPA의 인듐을 포화시켰다. Generally, peptides are organized in lyophilized kits containing 15 μg of peptide. The peptide was labeled with In-111 and excess cold indium was added to saturate the indium of all DTPA in the peptide.

펩티드 방사성표지Peptide Radiolabels

키트들을 3mL의 바이알에 동결 건조시키고, 1mL의 물(무균의 물이 적합하다.)을 타서 액상으로 만들었다. 0.5mL의 앨리컷(aliquot)을 제거해야했고, 3.0mCi In-111과 섞었다. 그 In-111 용액을 실온에 10분 동안 배양하였다. 117uL의 앨리컷을 제거하였고, (1 x 10^-4M In) 초산염 완충기(0.5M NaOAc, pH 6.54)를 포함한 차가운 인듐 117μL을 섞었고, 실온에서 다시 10분간 배양하였다. 이 용액에 6.80mL의 식염수를 넣고 무균바이알에서 희석시켰다. 식별된 펩티드를 포화시킨 NaCL에서 ITLC로 분석할 수 있다. 유리된 In-111은 ITLC 밴드의 상위 20%에 있게 된다. The kits were lyophilized in 3 mL vials and poured into 1 mL of water (sterile water is suitable) to make the liquid. 0.5 mL of aliquots had to be removed and mixed with 3.0 mCi In-111. The In-111 solution was incubated at room temperature for 10 minutes. 117 uL of alicut was removed, 117 μL of cold indium with (1 × 10 ⁻⁴ M In) acetate buffer (0.5M NaOAc, pH 6.54) was mixed and incubated for another 10 minutes at room temperature. 6.80 mL of saline was added to the solution and diluted in sterile vials. The identified peptides can be analyzed by ITLC in NaCL saturated. Free In-111 is in the top 20% of the ITLC band.

동물 연구Animal research

그룹Ⅰ(hMN-14 x m679 24시간 예비 표적화됨, IMP 272 와 25시간 m734 IgG Higal)Group I (hMN-14 x m679 pretargeted 24 h, IMP 272 and 25 h m734 IgG Higal)

15마리의 GW-39 종양을 지닌 누드 마우스에 hMN-14 x m679 15ug(5μCi, 1.5×10^-10몰)을 함유하는 용액 100μL를 주입하였다. 24시간 후에, IMP 272 1.5 x 10^-11몰(10μCi) 용액 100μL을 주입하였다. 이특이성 항체의 투여 후에 25시간 째, 100μL에 매우 높게 갈락토실화된 12μg(8 x 10^{- 11}몰)m734 IgG를 주입하였다. 동물들을 시간 포인트마다 5마리씩, 펩티드 주입 후 3시간째, 24시간째, 48시간째에 죽였다. 종양, 혈액, 근육, 간, 폐, 신장, 비장, 대장, 소장, 위, 소변, 그리고 꼬리 등의 기관들과 조직들을 모으고, 수를 세었다. Nude mice with 15 GW-39 tumors were injected with 100 μL of a solution containing 15 ug hMN-14 × m679 (5 μCi, 1.5 × 10 ⁻¹⁰ moles). After 24 hours, 100 μL of IMP 272 1.5 × 10 ⁻¹¹ mol (10 μCi) solution was injected. After administration of a bispecific antibody reason galacto second 25 hours, is very high in misfire 100μL 12μg (8 x 10 ^{- 11} mol) was injected m734 IgG. Animals were killed 5 at each time point, 3 hours, 24 hours and 48 hours after peptide injection. Organs and tissues such as tumors, blood, muscle, liver, lungs, kidneys, spleen, colon, small intestine, stomach, urine, and tail were collected and counted.

그룹 Ⅱ(hMN-14 x m679 24시간 예비표적화됨, 미리 섞인 IMP 272, m734 IgG Higal)Group II (hMN-14 x m679 pretargeted 24 h, premixed IMP 272, m734 IgG Higal)

15마리의 GW-39 종양을 지닌 누드 마우스에 hMN-14 x m679 15ug(5μCi, 1.5×10^-10몰)의 용액 100μL를 주입하였다. 24시간 후에, 100μL에서 12μg(8 x 10^{- 11}몰)m734IgG(고도로 galactosylated)와 섞인 1.5 x 10^{- 11}몰(10μCi)IMP 272의 용액을 주입하였다. 동물들을 시간 포인트마다 5마리씩, 펩티드 주입 후 3시간째, 24시간째, 48시간째에 죽였다. 종양, 혈액, 근육, 간, 폐, 신장, 비장, 대장, 소장, 위, 소변, 그리고 꼬리 등의 기관들과 조직들을 모으고, 수를 세었다. Nude mice with 15 GW-39 tumors were injected with 100 μL of a solution of hMN-14 × m679 15 ug (5 μCi, 1.5 × 10 ⁻¹⁰ moles). It was injected to ¹¹ mol (10μCi) solution of IMP 272 ^- 1.5 x 10 mixed with ^{- (11} mol of 8 x 10) m734IgG (Highly galactosylated) in 24 hours, 12μg in 100μL. Animals were killed 5 at each time point, 3 hours, 24 hours and 48 hours after peptide injection. Organs and tissues such as tumors, blood, muscle, liver, lungs, kidneys, spleen, colon, small intestine, stomach, urine, and tail were collected and counted.

그룹 Ⅲ(hMN-14 x m679 24시간 예비표적화됨, IMP 272와 25시간 m734 IgG Modgal)Group III (hMN-14 x m679 pretargeted 24 h, IMP 272 and 25 h m734 IgG Modgal)

15마리의 GW-39 종양을 지닌 누드 마우스에 15ug(5μCi, 1.5×10^{- 10}몰)hMN-14 x m679의 용액 100μL를 주입하였다. 24시간 후에, 100μL의 1.5 x 10^-11몰(10μCi)IMP 272의 용액을 주입하였다. 이특이성 항체의 투여 후에 25시간 째, 100μL에 있는 12μg(8 x 10^{- 11}몰)m734 IgG(적당하게 galactosylated 된)를 주입하였다.동물들을 시간 포인트마다 5마리씩, 펩티드 주입 후 3시간째, 24시간째, 48시간째에 죽였다. 종양, 혈액, 근육, 간, 폐, 신장, 비장, 대장, 소장, 위, 소변, 그리고 꼬리 등의 기관들과 조직들을 모으고, 수를 세었다. 15 15ug in nude mice with the GW-39 tumor ^in-a solution of 100μL (5μCi, 1.5 × ¹⁰ 10 mol) hMN-14 x m679 was injected. After 24 hours, 100 μL of a solution of 1.5 × 10 ⁻¹¹ mol (10 μCi) IMP 272 was injected. After administration of the bispecific reason antibody 25 hours after, 12μg in 100μL. ^- the original (suitably galactosylated) (8 x 10 ¹¹ mol) m734 IgG was injected into the animals in each time point th after 5 rats, the peptide infusion for 3 hours, 24 Killed at 48 hours. Organs and tissues such as tumors, blood, muscle, liver, lungs, kidneys, spleen, colon, small intestine, stomach, urine, and tail were collected and counted.

그룹 Ⅳ(hMN-14 x m679 24시간 예비표적화됨, 미리 섞인 IMP 272, m734 IgG Modgal)Group IV (hMN-14 x m679 pretargeted 24 h, premixed IMP 272, m734 IgG Modgal)

15마리의 GW-39 종양을 지닌 누드 마우스에 15ug(5μCi, 1.5×10^{- 10}몰)hMN-14 x m679의 용액 100μL를 주입하였다. 24시간 후에, 100μL에서 12μg(8 x 10^{- 11}몰)m734IgG(적당하게 갈락토실화됨)와 섞인 1.5 x 10^{- 11}몰(10μCi)IMP 272의 용액을 주입하였다. 동물들을 시간 포인트마다 5마리씩, 펩티드 주입 후 3시간째, 24시간째, 48시간째에 죽였다. 종양, 혈액, 근육, 간, 폐, 신장, 비장, 대장, 소장, 위, 소변, 그리고 꼬리 등의 기관들과 조직들을 모으고, 수를 세었다. 15 15ug in nude mice with the GW-39 tumor ^in-a solution of 100μL (5μCi, 1.5 × ¹⁰ 10 mol) hMN-14 x m679 was injected. Was injected to ¹¹ mol (10μCi) solution of IMP 272 ^- after 24 hours, in 100μL 12μg ^- 1.5 x 10 mixed with (8 x 10 ¹¹ moles) m734IgG (Lactobacillus misfire being properly go). Animals were killed 5 at each time point, 3 hours, 24 hours and 48 hours after peptide injection. Organs and tissues such as tumors, blood, muscle, liver, lungs, kidneys, spleen, colon, small intestine, stomach, urine, and tail were collected and counted.

실시예Example 3 :  3: 록킹Locking 및  And 체이스의Chase 락 성분 테스트 Rock Ingredient Test

앞의 예에서처럼, 체이스 성분의 테스트와 비슷하게, 록킹 및 체이스 방법의 락 양상도 테스트할 수 있다. 예를 들면, 펩티드 IMP 272 DTPA-Gln-Ala-Lys(HSG)-D-Tyr-Lys(HSG)-NH₂ MH⁺ 1512는 록킹 및 체이스 이특이성 항체 약물표적화를 위해 만 들어졌다. 위에서 설명한 바와 같이, 그 펩티드는 전형적인 예비표적화의 방식으로 종양 표면에서 이특이성 항체들과 연결하기 위해 두 HSG 그룹을 포함한다. 펩티드는 DTPA도 운반하는데, 인듐으로 차 있을 때에는, m734 항체와 연결되었다. IgG 는 DTPA를 위해 두 개의 연결 고리를 지니고 있고 종양의 표면에 묶여있는 두 개의 펩티드에 연결될 수 있다. 종양 표면의 특별한 가교결합은 펩티드가 종양의 표면에 있는 시간을 늘려준다. m734 IgG 항체에 의한 In-DTPA 가교결합은 록킹 및 체이스 항체 시스템에 락을 제공하였다. 이 테스트에서 50마리의 GW-39 종양을 지닌 누드 마우스를 사용하였고, 충분한 종양을 지닌 누드 마우스들을 확보하기 위해 55마리의 누드 마우스들에게 종양을 이식하였다. As in the previous example, similar to the test of the chase component, the lock aspect of the locking and chase method can also be tested. For example, peptide IMP 272 DTPA-Gln-Ala-Lys (HSG) -D-Tyr-Lys (HSG) -NH ₂ MH ⁺ 1512 was made for locking and chase bispecific antibody drug targeting. As described above, the peptide includes two HSG groups for linking with bispecific antibodies at the tumor surface in a typical pretargeting manner. The peptide also carries DTPA, which, when filled with indium, was linked to the m734 antibody. IgG has two linkages for DTPA and can be linked to two peptides that are bound to the surface of the tumor. Special crosslinking of the tumor surface increases the time that the peptide is on the surface of the tumor. In-DTPA crosslinking with the m734 IgG antibody provided a lock to the locking and chase antibody system. Nude mice with 50 GW-39 tumors were used in this test, and tumors were transplanted into 55 nude mice to obtain nude mice with sufficient tumors.

본 연구의 예비표적화 팔에서 각각의 쥐에게 hMN-14 x m679(5μCi/mouse)의 15μg를 포함한 100μL의 용액을 주입하였다. 펩티드를 주입하기 24시간 전에 항체를 주입하였다. In the pretargeting arm of this study, each rat was injected with 100 μL of solution containing 15 μg of hMN-14 × m679 (5 μCi / mouse). Antibodies were injected 24 hours prior to peptide injection.

그 펩티드를 동결 건조된 키트에 조직화시켰다. 펩티드를 In-111과 함께 구별하였고 과량의 차가운 인듐을 펩티드에 있는 모든 DTPA의 인듐을 포화시키기 위해 첨가하였다.The peptides were organized in lyophilized kits. Peptides were distinguished with In-111 and excess cold indium was added to saturate the indium of all DTPA in the peptide.

펩티드 방사성표지Peptide Radiolabels

키트들을 3mL의 바이알에 동결 건조시키고, 1mL의 물(무균의 물이 적합하다.)을 타서 액상으로 만들었다. 0.5mL의 앨리컷(aliquot)을 제거하고, 3.0mCi In-11과 섞었다. 그 In-111 용액을 실온에 10분 동안 배양하였다. 100uL의 앨리컷을 제 거하였고, 초산염 완충기(1.0x10^-4MInCl₃, 0.5M NaOAc, pH 6.5)를 포함한 차가운The kits were lyophilized in 3 mL vials and poured into 1 mL of water (sterile water is suitable) to make the liquid. 0.5 mL aliquots were removed and mixed with 3.0 mCi In-11. The In-111 solution was incubated at room temperature for 10 minutes. 100 uL of Alycut was removed and cold with acetate buffer (1.0x10 ^-4 MInCl ₃ , 0.5M NaOAc, pH 6.5)

인듐 100μL을 섞었고, 실온에서 다시 10분간 배양하였다. 이 용액에 5.80mL의 식염수를 넣고 무균바이알에서 희석시켰다. 식별된 펩티드를 포화시킨 NaCL에서 ITLC로 분석하였다. 유리된 In-111은 ITLC 밴드의 상위 20%에 있게 된다. 100 μL of indium was mixed and incubated for another 10 minutes at room temperature. 5.80 mL of saline was added to the solution and diluted in sterile vials. The identified peptides were analyzed by ITLC in saturated NaCL. Free In-111 is in the top 20% of the ITLC band.

동물 연구 Animal research

그룹 Ⅰ(hMN-14 x m679 24시간 예비표적화됨, IMP 272와 25시간 m734 IgG)Group I (hMN-14 x m679 pretargeted 24 h, IMP 272 and 25 h m734 IgG)

15마리의 GW-39 종양을 지닌 누드 마우스에 15ug(5μCi, 1.5×10^{- 10}몰)hMN-14 x m679의 용액 100μL를 주입하였다. 24시간 후에, 100μL의 1.5 x 10^-11몰(10μCi)IMP 272의 용액을 주입하였다. 이특이성 항체의 투여 후에 26시간 째, 100μL에 12μg(8 x 10^{- 11}몰)m734 IgG를 주입하였다. 동물들을 시간 포인트마다 5마리씩, 펩티드 주입 후 3시간째, 24시간째, 48시간째에 희생시켰다. 종양, 혈액, 근육, 간, 폐, 신장, 비장, 대장, 소장, 위, 소변, 그리고 꼬리 등의 기관들과 조직들을 모으고, 수를 세었다. 15 15ug in nude mice with the GW-39 tumor ^in-a solution of 100μL (5μCi, 1.5 × ¹⁰ 10 mol) hMN-14 x m679 was injected. After 24 hours, 100 μL of a solution of 1.5 × 10 ⁻¹¹ mol (10 μCi) IMP 272 was injected. After administration of the bispecific antibody reason second 26 hours, 12μg in 100μL (8 x 10 ^{- 11} mol) was injected m734 IgG. Animals were sacrificed at 5 time points, 3 hours, 24 hours and 48 hours after peptide injection. Organs and tissues such as tumors, blood, muscle, liver, lungs, kidneys, spleen, colon, small intestine, stomach, urine, and tail were collected and counted.

그룹 Ⅱ(hMN-14 x m679 예비표적화됨, 24시간 IMP 272)Group II (hMN-14 x m679 pretargeted, 24-hour IMP 272)

15마리의 GW-39 종양을 지닌 누드 마우스에 15ug(5μCi, 1.5×10^{- 10}몰)hMN-14 x m679의 용액 100μL를 주입하였다. 24시간 후에, 100μL의 1.5 x 10^-11몰(10μCi)IMP 272의 용액을 주입하였다. 동물들을 시간 포인트마다 5마리씩, 펩티드 주입 후 3시간째, 24시간째, 48시간째에 희생시켰다. 종양, 혈액, 근육, 간, 폐, 신장, 비장, 대장, 소장, 위, 소변, 그리고 꼬리 등의 기관들과 조직들을 모으고, 수를 세었다. 15 15ug in nude mice with the GW-39 tumor ^in-a solution of 100μL (5μCi, 1.5 × ¹⁰ 10 mol) hMN-14 x m679 was injected. After 24 hours, 100 μL of a solution of 1.5 × 10 ⁻¹¹ mol (10 μCi) IMP 272 was injected. Animals were sacrificed at 5 time points, 3 hours, 24 hours and 48 hours after peptide injection. Organs and tissues such as tumors, blood, muscle, liver, lungs, kidneys, spleen, colon, small intestine, stomach, urine, and tail were collected and counted.

그룹 Ⅲ(오직 IMP 272)Group III (only IMP 272)

20마리의 GW-39 종양을 지닌 누드 마우스에 1.5×10^{- 10}몰(10μCi)IMP 272의 용액 100μL를 주입하였다. 동물들을 시간 포인트마다 5마리씩, 펩티드 주입 후 30분, 1시간, 3시간째, 24시간째에 죽여야 했다. 종양, 혈액, 근육, 간, 폐, 신장, 비장, 대장, 소장, 위, 소변, 그리고 꼬리 등의 기관들과 조직들을 모으고, 수를 세었다. 1.5 × 10 in nude mice with the GW-39 tumors in 20 ^{- 10} mol (10μCi) 100μL solution of IMP 272 was injected. Animals were to be killed at 5 time points, 30 minutes, 1 hour, 3 hours and 24 hours after peptide injection. Organs and tissues such as tumors, blood, muscle, liver, lungs, kidneys, spleen, colon, small intestine, stomach, urine, and tail were collected and counted.

다음의 연구는 인간 결장의 종양에 있는 IMP-272로 알려진 예비표적화로 규정된 화학 물질(DCS)의 보유력을 향상시키기 위해 항-In-DTPA F(ab')₂을 연속적 주입하는 것의 효과를 실험하기 위해 수행했다. 이 개념은 “록킹 및 체이스”라고 알려져 있다. 이 자료들은 종양과 여러 가지 다른 조직 내 DCS의 반감기 약량 측정을 계산하고, 734F(ab')₂를 투여하지 않은 동물과 비교하기 위하여 사용될 것이다. The following study examines the effects of continuous infusion of anti-In-DTPA F (ab ') ₂ to improve the retention of chemicals (DCS) defined as pretargeting known as IMP-272 in tumors of human colon. Was done to. This concept is known as "locking and chase". These data will be used to calculate half-life dose measurements of DCS in tumors and various other tissues and to compare them with animals that did not receive 734F (ab ') ₂ .

실시예Example 4 :  4 : 록킹Locking 및  And 체이스Chase 적용의 락 성분의 추가 테스트 Further testing of the lock component of the application

종양에 IMP-272로 알려진, 예비표적화로 규정된 화학 물질(DCS)의 반감기를 연구하기 위해, 다음의 실험을 GW-39 인간 결장의 암 이종이식을 지닌 누드 마우스에 수행하였다. 동물들에게 다음과 같이 세 가지를 투여하였다. 첫 번째로, 항-CEA BS1.5HP 디아바디(hMN-14 x 679)를 주입하였고, 이어서 24시간 후에 IMP-272를주입하였다. 3시간 후에는 항-In-DTPA F(ab')₂ 항체, 734를 주입하였다.To study the half-life of a chemical substance (DCS) defined as pretargeting, known as IMP-272 in tumors, the following experiment was performed on nude mice with cancer xenografts of GW-39 human colon. Animals were given three doses: First, anti-CEA BS1.5HP diabody (hMN-14 × 679) was injected followed by IMP-272 after 24 hours. After 3 hours the anti-In-DTPA F (ab ') ₂ antibody, 734, was injected.

BS1.5HP를 ¹²⁵I로 표지화하였고, IMP-272는 ¹¹¹In으로 표지화하였다. 합성과 이 디아바디의 이용은 Cin . Cancer Res. 9:3886s-3896s(2003), 2002년 12월 24일에 출원된 미국 가출원 제60/436.359, 이어서 나온 2003년 12월 23일에 출원된 제: 10/746,245와 2003년 12월 24일에 출원된 PCT/US03/41131호에도 발표되어있고, 이를 온전히 참고문헌을 포함한다. BS1.5HP를 준비하기 알려진 표준 분자의 생물학 방법을 사용하였다. BS1.5HP was labeled with ¹²⁵ I and IMP-272 was labeled with ¹¹¹ In. Synthesis and the use of this diabody are described in Cin . Cancer Res . 9: 3886s-3896s (2003), US Provisional Application No. 60 / 436.359, filed December 24, 2002, followed by December 23, 2003: 10 / 746,245 and December 24, 2003 It is also published in PCT / US03 / 41131, which is incorporated by reference in its entirety. Biology methods of known standard molecules were used to prepare BS1.5HP.

종양 표면에서 펩티드의 가교결합 최대치를 테스트하기 위해, 주입된 734F(ab')₂의 총 단백질 투여량의 범위는 10μ~100μg이다. 쥐들의 네 그룹에게 10μCi¹²⁵I-BS1.5HP(27μg, 5.0 x 10^{- 10}몰)을 주입하고, 뒤이어 24시간 후에 이특이성 대 IMP-272의 비율인 10 : 1을 위하여 25μCi¹¹¹In-IMP-272(5.0 x 10^-11 몰)을 주입하였다. 734F(ab')₂의 주입 3시간 전에 혈액으로부터 종양을 공략하여 제거하기 위해 IMP-272를 주입하였다. 그룹 간의 차이는 오직 주입된 734F(ab')₂의 양의 차이이다. To test the crosslinking maximum of peptide at the tumor surface, the total protein dose of 734F (ab ') ₂ injected was in the range of 10 μg to 100 μg. To four groups of rats ^{10μCi 125 I-BS1.5HP (27μg,} 5.0 x 10 - 10 moles) implanting and subsequently after 24 hours bispecific reason for IMP-272 ratio of 10: 25μCi for 1 ¹¹¹ In-IMP- 272 (5.0 x 10 ^-11 moles) was injected. IMP-272 was injected to capture and remove tumors from the blood 3 hours before the injection of 734F (ab ') ₂ . The difference between the groups is only the difference in the amount of 734F (ab ') ₂ injected.

그룹 Ⅰ: 식염수만(대조군) [20마리의 쥐들; 식염수 주입 후에 3시간, 24시간, 48시간, 72시간 포인트마다 5마리씩 죽임] Group I : saline only (control) [20 rats; 5 kills every 3 hours, 24 hours, 48 hours, 72 hours after saline infusion]

그룹 Ⅱ: 10μg 총 734F(ab')2 단백질 투여량 [20마리의 쥐들, 734 주입 후에 3시간, 24시간, 48시간, 72시간 포인트마다 5마리씩 죽임] Group II : 10 μg total 734F (ab ') 2 protein dose [20 rats, 5 kills every 3 hours, 24 hours, 48 hours, 72 hours after 734 injections]

그룹 Ⅲ: 20μg 734F(ab')2 [20마리의 쥐들, 734 주입 후에 3시간, 24시간, 48시간, 72시간 포인트마다 5마리씩 죽임] Group III: 20 μg 734F (ab ') 2 [20 rats, 5 kills every 3 hours, 24 hours, 48 hours, 72 hours points after 734 injection]

그룹 Ⅳ: 100μg 734F(ab')2 [20마리의 쥐들, 734 주입 후에 3시간, 24시간, 48시간, 72시간 포인트마다 5마리씩 죽임] Group IV : 100 μg 734F (ab ') 2 [20 rats, 5 kills every 3 hours, 24 hours, 48 hours, 72 hours after 734 injections]

재료 및 방법:Material and method:

테스트와 대조 시약Test and Control Reagents

복용량 제조 및 분석 : 에드먼드 로시 박사(Edmund Rossi, Ph.D)가 제공한BS1.5HP.[Lot#011303, 150mM 수크로스 내 1mg/mL, 10mM 인산염, pH 6.0] 와 윌리암 맥브라이드 박사가 동결건조 키트로 준비한 DCS IMP-272 [Lot#BM11-154]는 화학 공식을 다음과 같이 가지고 있다. Dosage Preparation and Analysis : BS1.5HP. [Lot # 011303, 1 mg / mL in 150 mM sucrose, 10 mM phosphate, pH 6.0] and Dr. William McBride provided by Edmund Rossi, Ph.D. The DCS IMP-272 [Lot # BM11-154] prepared by the chemical formula has the chemical formula

IMP-272:[¹¹¹In]DTPA-Gln-Ala-Lys(HSG)-D-Tyr-Lys(HSG)-NH₂(MW=1512)IMP-272: [ ¹¹¹ In] DTPA-Gln-Ala-Lys (HSG) -D-Tyr-Lys (HSG) -NH ₂ (MW = 1512)

DTPA = 디에틸렌트리아민-펜타아세트산 및 [¹¹¹In]DTPA 는 734 항체로 인지한 다. HSG:=히스타민-숙시닐-글리신 그룹과 HSG는 BS1.5HP의 679부분에 의해서 인지된다. DTPA = diethylenetriamine-pentaacetic acid and [ ¹¹¹ In] DTPA are recognized as 734 antibodies. HSG: = histamine-succinyl-glycine group and HSG are recognized by 679 part of BS1.5HP.

단백질 A와 이온교환 색층분석 정제에 이어진 734 IgG의 펩신 침지는 항체 734F(ab')₂[Lot#052201]를 유도한다. Pepsin immersion of 734 IgG following protein A and ion exchange chromatographic purification leads to antibody 734F (ab ') ₂ [Lot # 052201].

방사성표지화 : NEN 라이프 사이언스 제품(보스톤, 메사추세츠)로부터 얻은 요오드화나트륨-125(Na¹²⁵I)과 IsoTex(프렌즈빌, 텍사스)로부터 얻은 인듐-111 염화물(¹¹¹InCl³)을 이 실험들에 사용하였다. 과량의 티록신 첨가로 인한 소멸(quenching)과 함께 BS1.5HP의 요오드 표지화을 위해 클로로마인-티(chloromine-T) 방법을 썼다. 정제는 PD 10 칼럼상 크기배제(size-exclusion)를 써서 완성하였다. Radioactive labeling: a NEN Life Science Products sodium iodide -125 (Na ¹²⁵ I) and indium -111 chloride ⁽¹¹¹ InCl ³⁾ obtained from IsoTex (Bill Friends, Texas) was obtained from (Boston, MA) were used in these experiments. The chloromine-T method was used for iodine labeling of BS1.5HP with quenching due to excess thyroxine addition. Purification was completed using size-exclusion on PD 10 columns.

IMP-272(1 x 10^-8 몰 펩티드/키트)는 비금속 조건하에서 ¹¹¹In 과 함께 구별되었다. 간략하게, 그 키트에 1mL의 무균의 물을 넣어서 원래대로 되게 하였다. IMP-272의 0.6mL 앨리컷(aliquot)을 ¹¹¹InCl₃(3mCi)와 섞었다. 그 뒤로 실온에서 15분 동안 배양을 하였다. 차가운 In(OA_C)₃(1.0 x 10^-4 M In, pH 4.5 완충제)의 2.4mL 앨리컷을 제거하고, In-111 표지화된 펩티드와 섞었고, 실온에서 추가로 15분 동안 배양했다. 그리고나서, 이 용액을 12mL의 무균의 바이알의 식염수에서 희석시켰다. 식별된 DCS는 포화 NaCL에서 ITLC로 분해하였다. 비결합 ¹¹¹In은 ITLC 밴드의 상위 20%로 옮겨갔다. IMP-272 (1 × 10 ⁻⁸ mole peptide / kit) was distinguished with ¹¹¹ In under nonmetallic conditions. Briefly, 1 mL of sterile water was added to the kit to undo the original. 0.6 mL aliquot of IMP-272 was mixed with ¹¹¹ InCl ₃ (3mCi). Thereafter, the cells were incubated for 15 minutes at room temperature. 2.4 mL aliquots of cold In (OA _C ) ₃ (1.0 × 10 ⁻⁴ M In, pH 4.5 buffer) were removed, mixed with In-111 labeled peptides and incubated for an additional 15 minutes at room temperature. This solution was then diluted in 12 mL of sterile vial. The identified DCSs were digested with ITLC in saturated NaCL. Unbound ¹¹¹ In moved to the top 20% of the ITLC band.

방사선 동위원소로 표지화한 BS1.5HP를 CEA와 섞기 전과 후에, 크기 배제 (size exclusion) HPLC 칼럼으로 분석하였다. IMP-272도 마찬가지로 식별되지 않은 BS1.5HP와 섞기 전과 후에 분석하였다. 다음은 사용한 쥐에 대한 정보이다. Radioisotope labeled BS1.5HP was analyzed by a size exclusion HPLC column before and after mixing with CEA. IMP-272 was also analyzed before and after mixing with unidentified BS1.5HP. The following is information about mice used.

품종, 성별, 나이, 무게, 출처: 이 연구에 쓰인 쥐들은 타코닉(저먼타운, 뉴욕)사의 약 20그램 정도의 비흉선(athymic) nu/nu 암컷이다. s.c. 종양처럼 쉽게 종양을 추적할 수 있게 GW-39가 누드 마우스 몸안에서 자라서 연구 개시의 시점이 더 잘 측정될 수 있도록 하기 때문에 이 쥐들을 사용하였다(종양의 양 ~0.2 cm³). 통계적인 권위를 위해 시간 포인트마다 5마리의 쥐가 필요하였다. 모든 동물들은 바이러스에 감염되지 않은 채로 구입하였다. 동물들을 일주일의 기간 동안 검역하였다. 동물들을 토렌(Thoren) 새장 단위에서 승인된 절차의 CMMI에 따라서 돌보며 길렀다. 처음의 종양의 양은 입체적으로, 가로×세로×높이를 계산하여 측정양각기에 의해서 측정되었다. 쥐들을 대략 시간 포인트마다 5마리의 그룹으로 나누어졌는데, 그룹 안에서 시간포인트마다 비슷한 종양의 크기를 지녔고, 그룹끼리에서도 비슷한 크기(mean±SD)의 종양을 지니고 있었다. 이 연구에 대략 0.2cm³(0.2-0.5cm³)의 종양을 지닌 쥐를 사용하였다. Breed, Gender, Age, Weight and Source: The mice used in this study are about 20 grams of athymic nu / nu females from Taconic (Germantown, New York). These mice were used because GW-39 grew in the nude mouse body so that the point of initiation of the study could be better measured so that tumors could be tracked as easily as sc tumors (tumor amount ~ 0.2 cm ³ ). Five rats were required per time point for statistical authority. All animals were purchased without virus infection. Animals were quarantined for a week. Animals were cared for in accordance with the CMMI of procedures approved at the Thoren cage. The amount of the first tumor was measured in three dimensions, by measuring the width × length × height and using a measuring embosser. The mice were divided into approximately five groups per time point, with similar tumor size per time point in the group, and similar size (mean ± SD) between groups. Mice with tumors of approximately 0.2cm ³ (0.2-0.5cm ³⁾ were used in this study.

세포 유형과 출처 : 인간의 직장 종양인 GW-39는 다만 쥐 몸속에서 종양의 연속 통로로서 유지될 수 있다. 대략 1cm³의 종양은 40그물의 철사망을 통하여 이어 지는 통로와 함께 0.9%의 식염수에서 잘게 썰은 종양으로 준비된 10%(w/v) 종양 현탁 물질의 0.3mL의 피하주사로 인하여 연속적으로 퍼졌다. 이 종양에 관한 과거의 경험으로 볼 때, 종양이 알맞은 크기에 도달할 때까지 ~17일이 필요함을 알 수 있다. 연구 초기의 종양 크기는 0.2cm³ 였다. Cell type and source: Human rectal tumor, GW-39, can only be maintained in the rat body as a continuous channel of tumor. Tumors of approximately 1 cm ³ were spread continuously due to subcutaneous injection of 0.3 mL of 10% (w / v) tumor suspension material prepared as tumors chopped in 0.9% saline with passages running through 40 net wires. Past experience with this tumor suggests that it takes ~ 17 days for the tumor to reach the right size. Tumor size at the beginning of the study was 0.2 cm ³ .

동물들에게 옆의 꼬리정맥을 통하여 ¹²⁵I-BS1.5HP 디아바디(diabody)(27μ;5.0 x 10^-10 몰)의 10μCi를 주입하였다. 이 연구는 종양 모형 체계에서 이 시약과 관련된 과거의 경험에 기초한 것인데, 그것은 주입 후 24시간이 될 때, 혈액 속에 1% ID/g보다 적은 양이 들어있어야 한다는 것이다. 이 시점에, ¹¹¹In-IMP-272(76ng;5.0 x 10^-11 moles)의 25μCi를 쥐에게 주입한다. 세 시간 후에 5마리의 쥐들을 검시하였다. 쥐들의 남은 그룹들에는 식염수(식염수 그룹) 또는 734F(ab')₂를 주입하였다. 734 그룹들에게 주어진 총 단백질 투여량은 10~100μg(734＋"cold"734로 구별된)이다. 주입량은 0.05mL에서 0.2mL 사이이고, 준비된 것은 임상 사용(즉, 다시 말하면, 6시간 안에)에서 제시하는 같은 시간 안에 주입되었다. Through the tail vein¹²⁵I-BS1.5HP diabody (27μ; 5.0 x 10^-10 Mole) of 10 μCi was injected. The study is based on past experience with this reagent in tumor modeling systems, which means that less than 1% ID / g should be present in the blood 24 hours after injection. At this point,¹¹¹In-IMP-272 (76 ng; 5.0 x 10^-11 Inject 25 μCi of moles) into rats. Three hours later, five rats were examined. The remaining groups of rats included saline (saline group) or 734F (ab ')₂Was injected. The total protein dose given to the 734 groups is 10-100 μg (separated by 734 + "cold" 734). The infusion amount was between 0.05 mL and 0.2 mL, and the prepared one was infused within the same time as presented for clinical use (ie, within 6 hours).

다음의 동물 그룹들도 연구하였다. 그룹 Ⅰ에 배정된 5마리의 쥐들을 IMP-272 주입 후 3시간 되는 때 검시하였고, 734의 투약 전에 IMP-272 종양 빨아올림의 시작 평가기준이 되었다. The following animal groups were also studied. Five rats assigned to group I were 3 hours after IMP-272 injection Necropsy was performed and was the starting criterion for IMP-272 tumor resuscitation prior to dosing of 734.

GW-39 인간 결장의 암종 세포를 접종한 비흉선 누드 마우스 85마리GW-39 85 non-thymus nude mice inoculated with carcinoma cells of human colon 집단group (N)(N) 투여한 시약 Dosed Reagent BS:DCS 비율BS: DCS Ratio 투여량 Dosage 계획 plan ⅠI 2525 BS1.5HP IMP-272 식염수(식염수) BS1.5HP IMP-272 Saline (Saline) (10:1)(10: 1) 27μg(5.0 X 10^-10 moles) 76ng(5.0 x 10^-11moles) 100μL 식염수 27 μg (5.0 x 10 ^-10 moles) 76 ng (5.0 x 10 ^-11 moles) 100 μL saline 0 hrs BS1.5HP 후 24시간 IMP-272 후 3시간 24 hours after 0 hrs BS1.5HP 3 hours after IMP-272 ⅡⅡ 20 20 BS1.5HP IMP-272 734F(ab')₂ BS1.5HP IMP-272 734F (ab ') ₂ (10:1)(10: 1) 27μg(5.0 X 10^-10 moles) 76ng(5.0 x 10^-11moles) 10μg(1.0 x 10^-10moles)27 μg (5.0 x 10 ^-10 moles) 76 ng (5.0 x 10 ^-11 moles) 10 μg (1.0 x 10 ^-10 moles) 0 hrs BS1.5HP 후 24시간 IMP-272 후 3시간 24 hours after 0 hrs BS1.5HP 3 hours after IMP-272 ⅢⅢ 2020 BS1.5HP IMP-272 734F(ab')₂ BS1.5HP IMP-272 734F (ab ') ₂ (10:1)(10: 1) 27μg(5.0 X 10^-10 moles) 76ng(5.0 x 10^-11moles) 20μg(2.0 x 10^-10moles)27 μg (5.0 x 10 ^-10 moles) 76 ng (5.0 x 10 ^-11 moles) 20 μg (2.0 x 10 ^-10 moles) 0 hrs BS1.5HP 후 24시간 IMP-272 후 3시간 24 hours after 0 hrs BS1.5HP 3 hours after IMP-272 ⅣⅣ 2020 BS1.5HP IMP-272 734F(ab')₂ BS1.5HP IMP-272 734F (ab ') ₂ (10:1)(10: 1) 27μg(5.0 X 10^-10 moles) 76ng(5.0 x 10^-11moles) 100μg(1.0 x 10^-9moles)27 μg (5.0 x 10 ^-10 moles) 76 ng (5.0 x 10 ^-11 moles) 100 μg (1.0 x 10 ^-9 moles) 0 hrs BS1.5HP 후 24시간 IMP-272 후 3시간 24 hours after 0 hrs BS1.5HP 3 hours after IMP-272

시간 포인트(3, 24, 48, 그리고 72시간) 마다 각 그룹의 5마리의 쥐들을 검시하였다. 그룹 Ⅰ은 쥐 5마리가 더해진 그룹으로 종양을 목표로 하는 IMP-272의 양과, 734F(ab')2가 투여될 때 IMP-272의 혈액 속의 양을 결정하는 데 유용한 -시각 포인트(IMP-272 투여 후 3시간)를 가지고 있는 유일한 그룹이다. 이것은 4그룹 모두에게 시작 평가기준이다. 이 쥐들은 734는 투여받지 않고 오직 식염수만 투여받았기 때문에 이 그룹은 734에 의해 표면으로 잠기지(locked) 않았을 때, 종양과 정상의 조직들에서 IMP-272의 손실을 추적하는 식염수그룹이 된다. Five rats of each group were examined at each time point (3, 24, 48, and 72 hours). Group I is a group of 5 rats that are useful for determining the amount of IMP-272 targeted to tumors and the amount of IMP-272 in the blood when 734F (ab ') 2 is administered (IMP-272). 3 hours after dosing). This is the starting criterion for all four groups. Because these mice received only saline and not 734, the group became a saline group that tracks the loss of IMP-272 in tumors and normal tissues when not locked to the surface by 734.

임상적용과 관련된 주입 경로를 모사하기 위해 쥐에게 시약 i.v.를 투여하였다. 방사선 동위원소로 식별된 제품의 활동도는 이 연구에 쓰인 시간 포인트(주입 후 3 시간~96 시간)와 ¹¹¹In의 반감기(68시간)와 ¹²⁵I의 반감기(60일)에 근거해서 뽑았다. 이특이성 단일세포에서 유래하는 세포인 항체 대 IMP-272 비율이 10:1(5.0 x 10^-10:5.0 x 10^-11 moles)인 것을 알았고, GW-39 종양(3시간 때 ~20% ID/g)에 대한 DCS의 높은 명확한 약물표적화로 귀착하기 위해서 Clin . Cancer Res. Vo. 9의 3886s-3896s에서 설명되었다. Reagent iv was administered to mice to simulate the infusion route associated with clinical application. The activity of the products identified as radioisotopes was derived based on the time points used in this study (3 to 96 hours after injection), half-life of ¹¹¹ In (68 hours) and half-life of ¹²⁵ I (60 days). We found that the ratio of antibody to IMP-272, a cell derived from a bispecific single cell, was 10: 1 (5.0 x 10 ^-10 : 5.0 x 10 ^-11 moles), and GW-39 tumors (~ 20% ID / glin to result in high clear drug targeting of DCS for Clin . Cancer Res. Vo. Illustrated in 9, 3886s-3896s.

종양에 연결되는 가교결합의 최대치를 달성하기 위한 734F(ab')2의 양의 선택은 중요하고, 그런 투여량은 734F(ab')₂의 단독 2가의 그램 분자가 두 펩티드에 확실하게 연결되도록 포화시키는 것보다 적어야 한다고 예견하였었다. 효과 단백질 투여량이 이 체계에서 충분한지 결정하려는 노력에서, 세 가지 복용량 10μg, 20μg, 그리고 100μg를 실험하였다. IMP-272 후 3시간 때, 종양 그램당 1 x 10^-11로 변하는 약 20% ID/g이 있을 거라는 가정에 근거해서 세 복용량을 선택했다. 734를 보면서, 주입 후 3시간 때 종양에는 약 F(ab')2의 5%ID/g가 있을 것이다. 734F(ab')₂ 분자의 무게는 100,000 돌턴이므로, 10μg 은 1 x 10^-10 몰과 같다. 5%ID/g에서, 이것은 종양 그램당 5 x 10^-12moles와 같고, 종양에 있을 IMP-272의 양의 반이다. 이 투여량은 최대가교결합을 하기 위하여 선택하였다. 부가적으로, 다른 두 그룹에는 IMP-272에 비교하여 종양에 초과량으로 귀착시키기 위해 734F(ab')₂의 증가량을 제공하였다. The choice of the amount of 734F (ab ') 2 to achieve the maximum amount of crosslinking that is linked to the tumor is important, and that dosage is such that the single divalent gram molecule of 734F (ab') ₂ is reliably linked to both peptides. It was expected to be less than saturation. In an effort to determine whether an effective protein dose is sufficient for this system, three doses of 10 μg, 20 μg, and 100 μg were tested. 3 hours after IMP-272, changing to 1 × 10 ⁻¹¹ per gram of tumor Three doses were chosen based on the assumption that there would be about 20% ID / g. Looking at 734, the tumor will have 5% ID / g of F (ab ') 2 at 3 hours post-infusion. Since the 734F (ab ') ₂ molecule weighs 100,000 Daltons, 10 μg is equivalent to 1 x 10 ^-10 moles. At 5% ID / g, this equals 5 x 10 ^-12 moles per gram of tumor and is half of the amount of IMP-272 that will be in the tumor. This dose was chosen for maximal crosslinking. In addition, the other two groups contained 734F (ab ') ₂ to result in excess tumors compared to IMP-272. The increase was provided.

투여 계획과 예상치Dosage Plans and Estimates

투여 5 x 10^-11 몰 IMP-272＠3시간~20%ID/g 종양 = 1 x 10^-11 몰Dosage 5 x 10 ^-11 mol IMP-272 ＠ 3 hours-20% ID / g tumor = 1 x 10 ^-11 mol

투여 1 x 10^-10 몰 734F(ab')₂(10μg)＠3시간~5%ID/g = 5 x 10^-12 몰Dosing 1 x 10 ^-10 moles 734F (ab ') ₂ (10 μg) ＠ 3 hours to 5% ID / g = 5 x 10 ^-12 moles

734F(ab')₂:IMP-272 = 0.5734F (ab ') ₂ : IMP-272 = 0.5

투여 2 x 10^-10 몰 734F(ab')₂(20μg)＠3시간~5%ID/g = 1 x 10^-11 몰Dosing 2 x 10 ^-10 moles 734F (ab ') ₂ (20 μg) ＠ 3 hours to 5% ID / g = 1 x 10 ^-11 moles

734F(ab')₂:IMP-272 = 1.0734F (ab ') ₂ : IMP-272 = 1.0

투여 1 x 10^-9 몰 734F(ab')₂(100μg)＠3시간~5%ID/g = 5 x 10^-11 몰Dosing 1 x 10 ^-9 mol 734F (ab ') ₂ (100 μg) ＠ 3 hours to 5% ID / g = 5 x 10 ^-11 mol

734F(ab')₂:IMP-272 = 10.0734F (ab ') ₂ : IMP-272 = 10.0

종양 크기의 평가, 정체와 병의 경과 상태의 평가와 독성, 예컨데 혈액 화학, WBC, 조직학과 테스트 기간 동안 부가적인 경로 테스트와 관찰 등을 포함하는 통례의 근거에 의하여 이 동물들을 관찰하였다. These animals were observed on a routine basis, including assessment of tumor size, assessment of stasis and disease progression and toxicity, such as blood chemistry, WBC, histology and additional pathway testing and observation during the test.

명기된 검시 시간에, 심장을 찌름으로 이어진 경부의 탈구로 출혈하며 5마리의 동물을 마취시켰다. 기관들을 제거하고, 무게를 재고 컨테이너에 놓았다. 종양, 간, 비장, 신장, 폐, 혈액, 위, 소장, 대장, 뼈(대퇴골), 세척한 뼈(대퇴골)와 근육 등은 분석을 위해 이용하였다. 이 조직들을 ¹¹¹In과 ¹²⁵I를 위해 눈금이 정해진 감마 계산기에서 수를 세었다. ¹²⁵I 경로를 건너는 어떤 계산을 위해 정정하기 위하여 교차곡선은 ¹¹¹In으로부터 발생했다. 투여로부터 남겨진 식별된 "cold" 제품과의 혼합으로부터 만들어진 계산 기준과 관련된 각각의 조직들의 세트를 세었다. 이 기준들은 방사성 동위원소로 구별된 두 시약 중 어느 것이든지 주어진 시간 포인트에서 어느 때든지 총 투여된 방사능을 계산하기 위해 사용되었다. 대체적으로, 이것은 0.1mL로 간주되는 투여된 물질의 1:100 희석도의 준비와 관계가 있다. 이 조직들에 있는 방사능의 정확한 측정을 보장하기 위해 활동이 충분히 쇠퇴했을 때 〉2 x 10⁶ cpm을 포함한 어떤 조직이든지 나중에 다시 계산하였다. At the specified necropsy time, five animals were anesthetized with bleeding from the cervical dislocation that led to the heart sting. The organs were removed and weighed and placed in a container. Tumor, liver, spleen, kidney, lung, blood, stomach, small intestine, large intestine, bone (femur), washed bone (femur) and muscle were used for analysis. These tissues were counted in a gamma calculator calibrated for ¹¹¹ In and ¹²⁵ I. ^The intersection curve originates from ¹¹¹ In to correct for any calculations crossing the ¹²⁵ I path. Each set of tissues associated with a calculation criterion made from mixing with the identified “cold” product left from the dosing was counted. These criteria were used to calculate the total administered radioactivity at any given time point in either of the two reagents identified as radioisotopes. In general, this relates to the preparation of a 1: 100 dilution of the administered substance, which is considered to be 0.1 mL. Any activity, including 2 x 10 ⁶ cpm, was later recalculated when activity was sufficiently depleted to ensure accurate measurement of radioactivity in these tissues.

예를 들면 종양이 어떤 크기에 도달하거나 정체했을 때, 팔다리가 마비됐을 때, 미리 결정된 시간 포인트 등의 기준을 근거로 이 연구를 끝마쳤다. 쥐들을 위에 열거한 시간에, 위에서 묘사한 바와 같이 (연구용으로) 죽였다. For example, the study was completed based on criteria such as predetermined time points when the tumor reached or stagnated at a certain size, when the limbs were paralyzed. Mice were killed at the times listed above (for study purposes) as described above.

통계적인 분석 : 734F(ab')₂나 식염수 식염수의 여러 가지 투여량을 주입받은 쥐들의 조직 간의 비교는 분리물을 확인하기 위해 f-테스트와 그럽의 크리티컬 Z 테스트(Grubb's Critical Z test)를 이용한 가변조건수의 같음을 결정한 후에 수행한 학생들의 t-테스트를 이용한다. 동물들을 혈액이나 종양의 %ID/g에 근거하여 분리물들로 제거하였다. (ⅰ)만약 혈액치수가 너무 낮아서 불충분한 주입을 나타낸다면, 종양을 포함한 모든 조직의 라벨의 낮은 빨아올림을 초래할 것이고 또한 (ⅱ)만약 종양을 적합하게 절제하지 않아서 너무 많은 정상조직이 종양에 있거나 만약 그것이 괴지성이어서, 이것 또한 %ID/g의 부정확한 측정을 초래할 것이기 때문에, 이 두 조직을 뽑았다. 비록 통계적인 중요성은 734F(ab')2를 투여받은 쥐의 그룹들 과 투여받지 않은(식염수) 그룹간의 이 "록킹 및 체이스(Lock and chase)" 개념과 함께 얻을지 모르지만, 실질적인 이유로는, 50%를 넘는 약량 측정에서의 증가는 이 개념을 좀더 추구하기 위해 필요할지도 모른다. Statistical analysis: Comparisons between tissues of rats given different doses of 734F (ab ') ₂ or saline saline were performed using the f-test and Grubb's Critical Z test to identify isolates. Use the students' t-tests after determining the equality of the variable conditions. Animals were removed with isolates based on% ID / g of blood or tumor. (Iii) if the blood dimension is too low to indicate an insufficient infusion, it will result in a low uptake of the label of all tissues, including the tumor, and (ii) if too many normal tissues are present in the tumor because If it was grotesque, this would also result in an incorrect measurement of% ID / g, so these two tissues were selected. Although statistical significance may be gained with this "Lock and chase" concept between groups of rats receiving 734F (ab ') 2 and untreated (saline) groups, for practical reasons, 50% Increasing dose measurements beyond this may be necessary to further pursue this concept.

실시예Example 5: 대표적인 초기의  5: representative early 약물표적화Drug Targeting 시약의 준비와 구조 Reagent Preparation and Structure

위에서 지적한 바와 같이, 현재의 발명에서는 초기의 약물표적화 시약의 다른 많은 배열은 구성될 수 있고 유용할 것이다. 많은 케이스에서, 시약은 이특이성 항체 디자인(bsAB), 즉 다시 말하면, 다른 두 에피토프를 위해 특정지어진 영역을 연결하고 있는 항체를 포함하고 있다. 다음의 예를 포함하여, 다수의 다른 이특이성 항체 초기 약물표적화 시약을 구성하여 왔고, 효과적인 약물표적화를 제공하는 것으로 설명하였다. As noted above, in the present invention many other arrangements of early drug targeting reagents may be constructed and useful. In many cases, the reagents comprise a bispecific antibody design (bsAB), that is, an antibody that connects regions specified for the other two epitopes. Numerous other bispecific antibody initial drug targeting reagents have been constructed and described as providing effective drug targeting, including the following examples.

hMN14hMN14 -m679의 준비-m679 preparation

대표적인 hMN14-m679 초기 약물표적화 시약(bsAB)의 구성은 2001년 4월 3일에 출원된 미국 특허출원번호 09/823,746 (샤키, 맥브라이드, 카라케이, 창, 그리피스, 한센, 그리고 골든베르그, 이특이성 항체를 이용한 암 검출과 치료를 위한 일반적인 예비표적화 체계)에 설명되어있다. 암 연구 63:354-363(2003). 또한 이 참고 문헌들에 설명된 것은 활성의 종을 지닌 목표를 정할 수 있는 구조체와, 임의로 제거하는 시약과 관련 있는 bsAB 초기 약물표적화 시약의 사용법이다. The composition of a representative hMN14-m679 early drug targeting reagent (bsAB) is described in US patent application Ser. No. 09 / 823,746, filed April 3, 2001 (Shaki, McBride, Caracay, Chang, Griffith, Hansen, and Goldenberg, Lee Sang-sung General pre-targeting system for cancer detection and treatment using antibodies). Cancer Research 63: 354-363 (2003). Also described in these references is the use of bsAB early drug targeting reagents in conjunction with constructs capable of targeting with active species and reagents that are optionally removed.

hMN14hMN14 -734의 준비Preparation of -734

이특이성 항체 hMN-14 x 734는 인간화된 anti-CEA 항체(hMN-14)의 Fab' 조각의 같은 양을 o-phenylene-bismaleimide에 의해 활성화된 쥐의 anti-인듐-DTPA 항체(734)를 연결함으로써 준비되었고 Ca-DTPA에 대한 정화(공액되지 않은 hMN-14 특성을 제거하기 위해)와 Supredex-200 기둥(100-kD 생산물을 얻기 위해)이 이어졌다. CEA를 위한 이특이성 공액의 면역반응성은 초과량 CEAD 존재에서, CEA에 연결된 결과로 짧아진 보유시간으로 바뀐 라디오이오디네이티드(radioionated) 샘플의 분류를 측정한 크기-배제 HPLC에서 평가받았다. 면역반응성은 일반적으로 85%이거나 더 나은 수치였다. 이특이성 공액을 첨가한 것에 대하여 동위원소로 구별된 펩티드가 더 짧은 보유시간으로 바뀐 것을 주목함으로써 크기-배제 HPLC에 대해서 이특이성 공액이 방사성 동위원소로 구별된 펩티드에 연결되는 능력을 비슷하게 설명하였다. The bispecific antibody hMN-14 x 734 links the same amount of Fab 'fragment of the humanized anti-CEA antibody (hMN-14) to the mouse anti-indium-DTPA antibody 734 activated by o-phenylene-bismaleimide The preparation was followed by a clarification of Ca-DTPA (to remove unconjugated hMN-14 properties) and a Supredex-200 column (to obtain a 100-kD product). The immunoreactivity of bispecific conjugates for CEA was assessed in size-exclusion HPLC, in the presence of excess CEAD, which measured the classification of radioionated samples with shortened retention times as a result of linkage to CEA. Immune reactivity was generally 85% or better. The addition of the bispecific conjugates described similarly the ability to link the heterologous conjugates to the radioisotope separated peptides for size-exclusion HPLC by noting that the peptides identified as isotopes changed to shorter retention times.

실시예Example 6 : 대표적인 제거 시약의 준비와 구조 6: Preparation and Structure of Representative Removal Reagents

대표적인 제거 시약은 anti-DTPA IgG 항체(m734IgG)를 포함한다. m734IgG는 카라케이 등의 Bioconjugate Chem.,(1997,8,585-594)의 방법으로 갈락토오스화(galactosylated)되었다. 무수물의 메탄올의 6.2mL에 CTTG(0.23g, 5.7 x 10^-5 mol)을 용해하였다. 메탄올(115L, 5.75 x 10-5 mol)0.5M의 나트륨 메톡사이드를 아르곤 하에 위의 용액에 첨가하였고 실온에서 18시간 동안 뒤섞었다. 이 이미데잇 (imidate)을 즉시 사용하고, 4℃에서 저장하였다. m734IgG의 세포 용해소 잔류물을 갈락토실화하기 위해서 여러 가지 이미데잇(imidate):m734IgG 몰의 비율에 대응하는 이미데잇을 아르곤의 흐름을 사용하여 증발시켰다. m734IgG 항체를 각각, pH 8.1에서 나트륨 인산염 0.1M의 첨가에 의하여 8.4mg/mL에 맞춘 마지막 단백질 농축과, 3염기의 나트륨 인산염의 포화시킨 용액과 함께 pH 8.5-8.6 지수에 맞춘 마지막 단백질 농축에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 두 시간 동안 뒤섞었고, 변경된 m734IgG의 혼합물은 pH 7.3에서 나트륨 인산염 0.1M에서 Sephadex G-50-80으로 채워진 원심분리된 스핀(spin) 기둥들의 두 일련의 세트 위에서 정화되었다. 갈락토실레이트된(galactosylated) m734IgG 샘플들을 남아있는 갈락토오스 잔류물의 정확한 수를 측정하기 위해 MALDI-MS를 이용하여 분석하였다. Representative removal reagents include anti-DTPA IgG antibodies (m734IgG). m734IgG was galactosylated by the method of Bioconjugate Chem., et al. (1997, 8,585-594). CTTG (0.23 g, 5.7 × 10 ⁻⁵ mol) was dissolved in 6.2 mL of anhydrous methanol. 0.5 M sodium methoxide (115 L, 5.75 x 10-5 mol) was added to the above solution under argon and stirred for 18 hours at room temperature. This imide was used immediately and stored at 4 ° C. In order to galactosylate the cell lysate residues of m734IgG, imideates corresponding to the various imidate: m734IgG molar ratios were evaporated using a flow of argon. The m734IgG antibody was added to the last protein concentration adjusted to pH 8.5-8.6 index with the final protein concentration adjusted to 8.4 mg / mL by addition of 0.1 M sodium phosphate at pH 8.1 and saturated solution of tribasic sodium phosphate, respectively. It was. The reaction mixture was stirred for 2 hours at room temperature, and the modified mixture of m734IgG was clarified on two series sets of centrifuged spin columns filled with Sephadex G-50-80 at 0.1 M sodium phosphate at pH 7.3. Galactosylated m734IgG samples were analyzed using MALDI-MS to determine the exact number of remaining galactose residues.

실시예Example 7 : 대표적인  7: representative 록킹Locking 및  And 체이스Chase 타겟티드Targeted 딜리버리delivery (lock and chase targeted delivery)(lock and chase targeted delivery)

이특이성 항체인 hMN-14 x m679(쥐 한마리당 PBS 100μL의 15μg)를 GW-39 종양을 지닌 누드 마우스에 투여하였다. 그 항체는 종양을 24시간 동안 제거하고 In-111은 IMP 272(전에 설명한 것처럼 식별된, 쥐 한마리당 10μCi 100μL에)를 식별한다. 15분(A 그룹)과 30분(B 그룹)에 갈락토실레이티드(galactosylated)된 m734 IgG(쥐 한마리당 PBS 100μL의 25-30μg)가 펩티드의 주입을 빠르게 하였다. 동물들(각각의 그룹에서 시간 포인트마다 5마리)를 3시간, 24시간, 48시간, 그리고 72시간 때에 죽였다. A와 B 그룹의 약물표적화를 펩티드 투여 후에 관련이 없는 갈락 토실레이티드 항체 AgS를 받은 식염수(C 그룹)그룹에 비교할 것이다. The bispecific antibody hMN-14 × m679 (15 μg of 100 μL of PBS per mouse) was administered to nude mice with GW-39 tumors. The antibody removes the tumor for 24 hours and In-111 identifies IMP 272 (at 100 μL per mouse, identified as described previously). At 15 minutes (Group A) and 30 minutes (Group B), galactosylated m734 IgG (25-30 μg of 100 μL PBS per mouse) speeded up peptide infusion. Animals (five per time point in each group) were killed at 3, 24, 48 and 72 hours. Drug targeting of groups A and B will be compared to the saline (group C) group receiving the unrelated galactosylated antibody AgS after peptide administration.

실시예Example 8 : 내재화와 함께 대표적인 목표물이 된 운반 8: Transportation that became a representative target with internalization

표면의 항원을 신속하게 내재화시키는 것에 가교결합을 함으로써 내재화와 함께 B-세포 임파종의 치료 Treatment of B-cell lymphoma with internalization by crosslinking to rapidly internalize surface antigens

광범한 림프절 관여와 B-세포 임파종을 지니고 있는 환자에게 미국 특허 09/337,756과 60/360,229에 설명된 것처럼 준비된 이특이성 hA20Fab-679scFv의 목표 분량을 함유하고 있는 무균의, 발열물질이 없는 용액을 정맥 내로 주입하였다. 24시간 후에, 환자에게 DTPA-Gln-Ala-Lys(HSG)-D-[I-131Tyr]-Lys(HSG)-NH₂의 치료상의 복용량을 함유하는 무균의, 발열물질이 없는 PBS 용액을 정맥 내로 주입하였다. 24시간 후에 환자에게 이특이성 hLL1IgG[734scFv]의 50mg의 무균의, 발열물질이 없는 PBS 용액을 정맥 내로 주입하였다.I-131이 혈액으로부터 빠르게 제거되는 것을 관찰하였고, 다음의 방사성 면역 검출은 집중적인 국재성과 림프절과 관련된 임파종에 있는 I-131의 장시간의 정체를 증명한다. 다음 몇 달에 걸친 CAT 정밀검사는 림프절과 관련된 임파종의 크기에 있어서 현저한 감소를 증명한다. 이 투여는 개략적으로 도면 6-9에서 설명된다. For patients with extensive lymph node involvement and B-cell lymphoma, a sterile, pyrogen-free solution containing a target portion of bispecific hA20Fab-679scFv prepared as described in US Pat. Injected into. After 24 hours, the patient was given a sterile, pyrogen-free PBS solution containing a therapeutic dose of DTPA-Gln-Ala-Lys (HSG) -D- [I-131Tyr] -Lys (HSG) -NH ₂ intravenously. Injected into. After 24 hours, the patient was injected intravenously with 50 mg of sterile, pyrogenic PBS solution of bispecific hLL1IgG [734scFv]. I-131 was observed to be rapidly removed from the blood and the following radioimmune detection was intensive. Prove locality and prolonged identity of I-131 in lymph nodes associated with lymph nodes. CAT overhaul over the next few months demonstrates a significant reduction in the size of lymph nodes associated lymphomas. This administration is schematically illustrated in Figures 6-9.

엽산 m734IgG의 엽산 수용체 합성을 이용한 내재화된 목표물이 된 운반Internalized Target Transport Using Folate Receptor Synthesis of Folate m734IgG

Reddy 등의 Blood, 1999, 93, 3940-3948의 방법을 사용하여 m734IgG와 같은 단백질을 엽산과 함께 유도할 수 있다. 엽산(10mg)을 무수물 DMSO와 실온에서 30분 동안 1-에틸-3-(디메틸아미노프로필)카보디이미드와 뒤섞는 상태에서 배양된 것에 용해했다. 용액의 앨리컷[aliquot](용액의 1/3) 을 pH 7.4의 PBS에서 m734IgG(~10 mg/mL)의 100mg에 첨가하였다. 실온에서 2시간 동안의 배양 후에, 초과 자유 엽산으로부터 공액의 단백질을 분리하기 위하여 이 반응 혼합물을 PBS에서 균형을 유지한 탈염한 기둥 PD-10을 통하여 빠져나가게 했다. Blood, 1999, 93, 3940-3948, by Reddy et al., May be used to induce proteins such as m734IgG with folic acid. Folic acid (10 mg) was dissolved in an incubated mixture with 1-ethyl-3- (dimethylaminopropyl) carbodiimide for 30 minutes at room temperature with anhydrous DMSO. Aliquots (1/3 of solution) of the solution were added to 100 mg of m734IgG (˜10 mg / mL) in PBS at pH 7.4. After 2 hours of incubation at room temperature, the reaction mixture was forced through a balanced desalted column PD-10 in PBS to separate the conjugated protein from excess free folic acid.

항체당 염산 잔류물의 정확한 수를 측정하기 위하여 항체 공액을 MALDI-MS로 분석하였다.  Antibody conjugates were analyzed by MALDI-MS to determine the exact number of hydrochloric acid residues per antibody.

엽산 수용체 내재화와 함께 In-In- with Folic Acid Receptor Internalization vivovivo 표적이 된 운반 테스트 Targeted port test

이특이성 항체인 hMN-14 x m679(쥐 한마리당 100μL PBS의 15μg)를 GW-39 종양을 지닌 누드 마우스에 주입하였다. 그 항체는 24시간 동안 종양을 제거하였고, IMP 272(이전에 설명한 바와 같이 식별된 100μL의 10μCi/mouse)로 식별된 In-111를 주입하였다. 펩티드 주입 후, 30분에(A 그룹) 엽산은 m734IgG(쥐 한마리당 100μL PBS의 25-30μg)를 바꾸었다. 동물들(각각의 그룹에서 시간 포인트마다 5마리)을 3시간, 24시간, 48시간 그리고 72시간 되는 때에 죽였다. A 그룹에서의 약물표적화를 변경되지 않은 m734IgG을 받은 식염수(B 그룹)그룹과 펩티드 투여 후에 관련이 없는 염산과 변경된 항체 Ag8을 받은 식염수(C 그룹)그룹에 비교하였다. The bispecific antibody hMN-14 × m679 (15 μg of 100 μL PBS per mouse) was injected into nude mice with GW-39 tumors. The antibody removed tumors for 24 hours and injected with In-111 identified as IMP 272 (100 μL of 10 μCi / mouse identified as described previously). 30 minutes after peptide injection (group A) folic acid changed m734IgG (25-30 μg of 100 μL PBS per mouse). Animals (5 per time point in each group) were killed at 3, 24, 48 and 72 hours. Drug targeting in group A was compared to saline (group B) receiving unaltered m734IgG and saline (group C) receiving unrelated hydrochloric acid and altered antibody Ag8 after peptide administration.

엽산 수용체 내재화와 함께 In-vitro 표적이 된 운반 테스트In-vitro Targeted Transport Test with Folic Acid Receptor Internalization

LoVo 나 TT 세포같은 세포들을 나타내는 CEA를 hMN-14 x m679와 ¹¹¹In/In DTPA-Gln-Ala-Lys(HSG)-D-Tyr-Lys(HSG)-NH₂(IMP 272)[두 항체 대 한 개의 펩티드 몰의 비율]와 함께 한 시간 동안 배양한다. 그리고나서 세포들을 신선한 혈청으로 세척하고 항체로 바뀐 엽산, m734 IgG로 바뀌지 않은 식염수 항체와 Ag8(나누어진 곳에서의 각각의 항체 배양)으로 바뀐 엽산과 함께 4시간 동안 배양한다. 그리고 세포들을 신선한 혈청으로 세척하고 배양 후에 30분, 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 24시간, 48시간 마다 펩티드의 내재화를 검사하였다. CEAs representing cells such as LoVo or TT cells were expressed by hMN-14 × m679 and ¹¹¹ In / In DTPA-Gln-Ala-Lys (HSG) -D-Tyr-Lys (HSG) -NH ₂ (IMP 272) [two antibodies versus Incubation for one hour with one peptide mole ratio]. The cells are then washed with fresh serum and incubated for 4 hours with folic acid changed to antibody, folic acid changed to m734 IgG and folic acid changed to Ag8 (each antibody culture in the split). The cells were washed with fresh serum and tested for internalization of peptides every 30 minutes, 1 hour, 2 hours, 4 hours, 8 hours, 24 hours, and 48 hours after incubation.

명세서에서 인용된 모든 특허들과 다른 참고문헌들은 발명이 속하는 기술 분야의 당업자의 수준을 뜻하고, 각각의 참고문헌들이 개별적으로 온전히 합병되었던 것처럼 같은 정도로, 표와 도면들을 포함하여 온전히 참고문에 의해서 합쳐졌다. All patents and other references cited in the specification are indicative of the level of skill of those skilled in the art to which the invention pertains, and are incorporated by reference in their entirety, including tables and figures, to the same extent as if each reference were individually incorporated completely. Combined.

당업자들은 고유의 목적 및 장점 뿐만 아니라 언급된 목적 및 장점을 얻기 위해 본 발명이 잘 적용됨을 잘 알 것이다. 대표적인 바람직한 구현예로서 여기에 설명된 방법들, 변형 및 구성들은 예시로서, 본 발명의 범위를 한정하고자 하는 것은 아니다. 본 발명의 범위 안에 속하는 한 변화 및 다른 용도가 당업자에게는 가능할 것이다. Those skilled in the art will appreciate that the present invention is well applied to obtain the stated objects and advantages as well as the inherent objects and advantages. The methods, variations, and configurations described herein as representative preferred embodiments are by way of example and not intended to limit the scope of the invention. Changes and other uses will be possible to those skilled in the art as long as they fall within the scope of the invention.

본 발명의 범위 및 정신에 벗어남이 없이 각종 대체 및 변경이 여기 개시된 본 발명에 대해 이루어질 수 있음은 당업자에게는 명백할 것이다. 예를 들면, 상이한 치료 및 진단용 제제와 마찬가지로, 다양한 상이한 결합쌍이 이용될 수 있다. 그러므로, 그와 같은 부가적인 구체화는 현재 발명의 범위 내이다. It will be apparent to those skilled in the art that various substitutions and changes can be made to the invention disclosed herein without departing from the scope and spirit of the invention. For example, as with different therapeutic and diagnostic agents, various different binding pairs can be used. Therefore, such additional embodiments are within the scope of the present invention.

여기에 구체적으로 개시되어 있지 않은 한계나 한계들, 어떤 요소나 요소들이 없이도 여기에 설명된 본 발명을 적절하게 실시할 수 있다. 그러므로 예를 들면, 여기 각각의 예에서 "포함하는", "본질적으로 구성하는" 과 "구성하는"의 어떤 용어도 다른 두 용어 중 어떤 것과도 바꿀 수 있을 것이다. 쓰인 용어와 표현들은 제한이 아닌 설명을 위해서 사용하고 있고, 나타나거나 설명된 특징들의 어떤 등가물 또는 그 일부를 배제하는 용어나 표현들의 사용시에도 그러한 의도는 없으며, 다양한 변화들은 발명의 범위 안에서 가능한 것으로 여겨진다. 그러므로, 비록 본 발명이 바람직한 구현예와 선택적 특징에 의하여 구체적으로 기술되었더라도, 당업자에 의해 여기에 나타난 개념의 개질 및 변형이 있을 수도 있으며, 이러한 변경과 다양성은 본 발명의 범위 안에 있는 것으로 간주해야 한다는 것을 이해해야 한다. The invention described herein may be suitably practiced without the limitations or limitations, and any elements or elements not specifically disclosed herein. Thus, for example, in each of the examples herein, any of the terms "comprising", "consisting essentially of" and "constituting" may be replaced with any of the other two terms. The terms and expressions used are for the purpose of description and not of limitation, and there is no intention in the use of terms or expressions that exclude any equivalent or part of the features shown or described, and various changes are considered to be possible within the scope of the invention. . Therefore, although the invention has been described in detail by its preferred embodiments and optional features, there may be modifications and variations of the concepts presented herein by those skilled in the art, and such changes and variations should be considered within the scope of the invention. You must understand that.

게다가, 마커쉬(Markush) 그룹 및 대안인 다른 그룹을 사용하여 발명의 특징이나 양상이 설명되는 경우, 마커쉬 그룹 및 다른 그룹의 하위그룹이나 개별 원소들에 의해 본 발명이 기술됨은 당업자가 알 것이다. In addition, where a feature or aspect of the invention is described using Markush groups and alternative groups, those skilled in the art will recognize that the invention is described by Markish groups and other groups of subgroups or individual elements. .

또한, 특별히 지적되지 않는다면, 다양한 수치들이 구현예로서 제공되며, 범위의 종점으로서 어떤 다른 두 가지 가치를 취함으로써 부가적인 구조체가 설명된다. 또한 이러한 범위는 본 발명의 범위 내에 속할 것이다. Also, unless specifically indicated, various numbers are provided as implementations, and additional structures are described by taking some other two values as endpoints of the range. Such ranges will also fall within the scope of the present invention.

그러므로, 부가적인 구현예는 본 발명의 범위 안에 있다. 예를 들면, 다음의 번호화된 구현예에 의하여 설명될 것이다. Therefore, additional embodiments are within the scope of the present invention. For example, it will be explained by the following numbered implementation.

Claims (151)

하나 이상의 표적 결합 부위 및 하나 이상의 표적가능한 구조체 결합 부위를 포함하는 일차 표적 제제;A primary target agent comprising at least one target binding site and at least one targetable construct binding site; 하나 이상의 일차 표적 제제 결합 부위, 제거제 결합 부위 및 치료 또는 진단 부위를 포함하는 표적가능한 구조체; 및A targetable construct comprising at least one primary target agent binding site, a remover binding site, and a therapeutic or diagnostic site; And 하나 이상의 표적가능한 구조체 결합 부위를 포함하는 제거제를 포유동물에 투여하는 단계를 포함하고,Administering to the mammal a scavenger comprising at least one targetable construct binding site, 여기에서 상기 제거제는 표적 부위에서 상기 표적가능한 구조체의 보존을 증강시킴을 특징으로 하는 치료제 또는 진단제를 표적하여 운반하는 방법.Wherein said scavenger enhances preservation of said targetable construct at a target site. 제 1항에 있어서, 상기 일차 표적 제제 결합 부위는 상기 제거제 결합 부위와 직교(orthogonal) 됨을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1, wherein the primary target agent binding site is orthogonal to the remover binding site. 제 2항에 있어서, 상기 제거제는 둘 이상의 표적가능한 구조체 결합 부위들을 포함함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 2, wherein the scavenger comprises two or more targetable construct binding sites. 제 3항에 있어서, The method of claim 3, wherein 상기 일차 표적 제제는 표적가능한 구조체 결합 항체 구조체 및 표적 결합 항체 구조체를 포함하고,The primary target agent comprises a targetable construct binding antibody construct and a target binding antibody construct, 상기 표적가능한 구조체는 상기 표적가능한 구조체 결합 항체 구조체와 결합하는 둘 이상의 부착소 복제물들 및 제거제 항체 구조체와 결합하는 부착소를 포함하며,The targetable construct comprises two or more attachment clones that bind to the targetable construct binding antibody construct and an adsorbent that binds to the scavenger antibody construct, 상기 제거제는 둘 이상의 표적가능한 구조체들과 결합하는 표적가능한 구조체 결합 항체 구조체를 포함함을 특징으로 하는 방법.Wherein said scavenger comprises a targetable construct binding antibody construct that binds two or more targetable constructs. 제 4항에 있어서, 상기 제거제의 표적가능한 구조체 결합 항체는 IgG 항체를 포함함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 4, wherein the targetable construct binding antibody of the scavenger comprises an IgG antibody. 제 5항에 있어서, 상기 IgG 항체는 IgG1 항체를 포함함을 특징으로 하는 방법.6. The method of claim 5, wherein said IgG antibody comprises an IgG1 antibody. 제 4항에 있어서, 상기 제거제의 표적가능한 구조체 결합 항체는 C_H2 도메인이 제거되지 않은 대응하는 IgG 항체 보다 빠르게 혈액순환으로부터 제거되는 C_H2 도메인이 제거된 IgG 항체를 포함함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 4, wherein the target as possible structure of the scavenger binding antibody, characterized in that it comprises a C _H 2 domain has been removed IgG antibodies to be removed from the quick circulation than an IgG antibody corresponding to the C _H 2 domain has been removed Way. 제 4항에 있어서, 상기 제거제의 표적가능한 구조체 결합 항체 구조체는 갈락토오스를 더 포함함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 4, wherein the targetable construct binding antibody construct of the scavenger further comprises galactose. 제 1항에 있어서, 상기 제거제는 다수의 표적가능한 구조체들과 결합함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1, wherein the scavenger associates with a plurality of targetable constructs. 제 1항에 있어서, 표적가능한 구조체와 제거제의 결합이 결합 부위에서 일차 표적 제제와 표적가능한 구조체의 결합을 안정화하고, 결합 부위에서 일차 표적 제제에 결합하지 않는 표적가능한 구조체의 제거를 증강시킴을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1, wherein the binding of the targetable construct and the scavenger stabilizes the binding of the target target agent and the target construct at the binding site and enhances the removal of the targetable construct that does not bind the primary target agent at the binding site. How to. 제 1항에 있어서, 상기 일차 표적 제제 및 상기 제거제는 하나 이상의 인간화된 항체, 키메라 항체, 인간 항체, 뮤린 항체 또는 이들의 항원 결합 단편을 포함함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1, wherein the primary target agent and the scavenger comprise one or more humanized antibodies, chimeric antibodies, human antibodies, murine antibodies, or antigen binding fragments thereof. 제 1항에 있어서, 상기 일차 표적 항체는 하나 이상의 치료 부위 또는 하나 이상의 진단 부위를 더 포함함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1, wherein the primary target antibody further comprises one or more therapeutic sites or one or more diagnostic sites. 제 1항 또는 제 12항에 있어서, 상기 치료 부위는 약물, 독소, 프로드럭, 효소, 약물에 대하여 프로드럭을 활성화시키는 효소, 효소 억제제, 뉴클레아제, 호르몬, 호르몬 길항제, 면역조절제, 올리고뉴클레오타이드, 붕소 화합물, 광활성제 또는 염료, 방사성핵종 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택된 것임을 특징으로 하는 방법.The method according to claim 1 or 12, wherein the treatment site is a drug, toxin, prodrug, enzyme, enzyme that activates the prodrug against the drug, enzyme inhibitor, nuclease, hormone, hormonal antagonist, immunomodulator, oligonucleotide , A boron compound, photoactive agent or dye, radionuclide and combinations thereof. 제 13항에 있어서, 상기 치료 부위는 애플리딘(aplidin), 아자리빈(azaribine), 아나스트로졸(anastrozole), 아자시티딘(azacytidine), 블레오마이신(bleomycin), 보르테조미브(bortezomib), 브리오스타틴-1(bryostatin-1), 부술판(busulfan), 캄포테신(camptothecin), 10-히드록시캄포테신(10-hydroxycamptothecin), 카무스틴(carmustine), 세레브렉스(celebrex), 클로람부실(chlorambucil), 시스플라틴(cisplatin), 이리노테칸(irinotecan; CPT-11), SN-38, 카보플라틴(carboplatin), 클라드리빈(cladribine), 사이클로포스파미드(cyclophosphamide), 시타라빈(cytarabine), 다카르바진(dacarbazine), 도세탁셀(docetaxel), 닥티노마이신(dactinomycin), 다우노마이신(daunomycin), 글루쿠로나이드(glucuronide), 다우노루비신(daunorubicin), 덱사메타손(dexamethasone), 디에틸스틸베스트롤(diethylstilbestrol), 독소루비신(doxorubicin) 및 그 유사체들, 독소루비신 글루쿠로나이드, 에피루비신 글루쿠로나이드(epirubicin glucuronide), 에티닐 에스트라디올(ethinyl estradiol), 에스트라무스틴(estramustine), 에토포사이드(etoposide), 에토포사이드 글루쿠로나이드, 에토포사이드 포스페이트, 플록수리딘(floxuridine; FUdR), 3',5'-O-디오레오일-FudR(3',5'-O-dioleoyl-FudR; FUdR-dO), 플루다라빈(fludarabine), 플루타미드(flutamide), 플루오로우라실(fluorouracil), 플루옥시메스테론(fluoxymesterone), 겜시타빈(gemcitabine), 히드록시프로게스테론 카프로에이트(hydroxyprogesterone caproate), 히드록시우레아(hydroxyurea), 이다루비신(idarubicin), 이포스파미드(ifosfamide), L-아스파라기나아제(L-asparaginase), 류코보린(leucovorin), 로무스틴(lomustine), 메클로레타 민(mechlorethamine), 메드로프로게스테론 아세테이트(medroprogesterone acetate), 메게스트롤 아세테이트(megestrol acetate), 멜파란(melphalan), 메르캅토퓨린(mercaptopurine), 6-메르캅토퓨린, 메토트렉세이트(methotrexate), 미톡산트론(mitoxantrone), 미트라마이신(mithramycin), 미토마이신(mitomycin), 미토탄(mitotane), 페닐 부티레이트(phenyl butyrate), 프레드니손(prednisone), 프로카르바진(procarbazine), 파클리탁셀(paclitaxel), 펜토스타틴(pentostatin), 세무스틴 스트렙토조신(semustine streptozocin), 타목시펜(tamoxifen), 탁산(taxanes), 탁솔(taxol), 테스토스테론 프로피오네이트(testosterone propionate), 탈리도마이드(thalidomide), 티오구아닌(thioguanine), 티오테파(thiotepa), 테니포사이드(teniposide), 토포테칸(topotecan), 우라실 머스타드(uracil mustard), 빈블라스틴(vinblastine), 비노렐빈(vinorelbine), 빈크리스틴(vincristine), 리신(ricin), 아브린(abrin), 리보뉴클레아제(ribonuclaease), 온코나아제(onconase), rapLR1, DNase I, 스타필로코커스 장독소-A(Staphylococcal enterotoxin-A), 미국자리공 항바이러스 단백질(pokeweed antiviral protein), 겔로닌(gelonin), 디프테리아 독소, 슈도모나스 외독소(Pseudomonas exotoxin), 슈도모나스 내독소(Pseudomonas endotoxin), 질소 머스타드, 에틸렌이민 유도체, 알킬 술포네이트(alkyl sulfonate), 니트로소우레아(nitrosourea), 트리아젠(triazene), 엽산 유사체, 안트라사이클린(anthracycline), COX-2 억제제, 피리미딘 유사체, 퓨린 유사체, 항생물질, 에피포도필로톡신(epipodophyllotoxin), 백금 동등 복합체(platinum coordination complex), 빈카 알카로이드(vinca alkaloid), 치환된 우레아, 메틸 히드라진 유도체, 부신 피질 억제제(adrenocortical suppressant), 길항제, 엔도스타틴(endostatin), 사이토카인(cytokine), 인터류킨(interleukin), 인터페론(interferon), 림포카인(lymphokine), 종양 괴사 인자(tumor necrosis factor), 안티센스 올리고뉴클레오타이드(antisense oligonucleotide), 간섭 RNA(interference RNA) 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되고, 상기 방사성핵종은 ¹⁸F, ³²P, ³³P, ⁴⁵Ti, ⁴⁷Sc, ⁵²Fe, ⁵⁹Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ⁷⁵Se, ⁷⁷As, ⁸⁶Y, ⁸⁹Sr, ⁸⁹Zr, ⁹⁰Y, ⁹⁴Tc, ^{99 m}Tc, ⁹⁹Mo, ^{99 m}Tc, ¹⁰⁵Pd, ¹⁰⁵Rh, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²³I, ¹²⁴I, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁴³Pr, ¹⁴⁹Pm, ¹⁵³Sm, ^154-158Gd, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁶⁹Er, ¹⁷⁵Lu, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ¹⁹⁴Ir, ¹⁹⁸Au, ¹⁹⁹Au, ²¹¹At, ²¹¹Pb, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁵Ac 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택됨을 특징으로 하는 방법.The method of claim 13, wherein the treatment site is aplidin, azaribine, anastrozole, azacytidine, bleomycin, bortezomib, brio Statin-1, busulfan, camptothecin, 10-hydroxycamptothecin, carmustine, celebrex, chlorambucil Cisplatin, irinotecan (CPT-11), SN-38, carboplatin, cladribine, cyclophosphamide, cytarabine, dacarbazine ( dacarbazine, docetaxel, docetaxel, dactinomycin, daunomycin, glucuronide, glucuronide, daunorubicin, dexamethasone, dexamethasone, diethylstilbestrol Doxorubicin and its analogues, doxorubicin glucuro Eid, epirubicin glucuronide, ethinyl estradiol, estramustine, etoposide, etoposide glucuronide, etoposide phosphate, phloxuridine (floxuridine; FUdR), 3 ', 5'-O-dioleoyl-FudR (3', 5'-O-dioleoyl-FudR; FUdR-dO), fludarabine, flutamide Fluorouracil, fluoxymesterone, gemcitabine, hydroxyprogesterone caproate, hydroxyurea, idarubicin, idarubicin, phosphamide ifosfamide, L-asparaginase, leucovorin, lomustine, mechlorethamine, medroprogesterone acetate, megestrol acetate acetate), melphalan, mercapto Purine (mercaptopurine), 6-mercaptopurine, methotrexate, mitoxantrone, mithramycin, mitomycin, mitomyne, mitotane, phenyl butyrate, phenyl butyrate prednisone, procarbazine, paclitaxel, pentostatin, semustine streptozocin, tamoxifen, taxanes, taxol, testosterone propionate ( testosterone propionate, thalidomide, thioguanine, thiotepa, teniposide, topotecan, uracil mustard, vinciline, vinblastine, vinblastine vinorelbine, vincristine, lysine, abrain, ribonuclaease, onconase, rapLR1, DNase I, Staphylococcal enterotoxin-A -A), USA Rigong antiviral protein (pokeweed antiviral protein), gel Ronin (gelonin), diphtheria toxin, Pseudomonas exotoxin (Pseudomonas exotoxin), Pseudomonas endotoxin (Pseudomonas endotoxin), nitrogen mustards, ethylenimine derivatives, alkyl sulfonates (alkyl sulfonate), Nitro Nitrosourea, triazene, folic acid analogs, anthracycline, COX-2 inhibitors, pyrimidine analogs, purine analogs, antibiotics, epipipodophyllotoxin, platinum coordination complex, vinca alkaloid, substituted urea, methyl hydrazine derivatives, adrenocortical suppressant, antagonist, endostatin, cytokine, interleukin, interferon, rim Lymphokine, tumor necrosis factor, antisense oligonucleotide, liver Is selected from the group consisting of RNA (interference RNA), and combinations thereof, wherein the radionuclide is ^{18 F, 32 P, 33 P} , 45 Ti, 47 Sc, 52 Fe, 59 Fe, 62 Cu, 64 Cu, 67 Cu, ⁶⁷ Ga, ⁶⁸ Ga, ⁷⁵ Se, ⁷⁷ As, ⁸⁶ Y, ⁸⁹ Sr, ⁸⁹ Zr, ⁹⁰ Y, ⁹⁴ Tc, ^{99 m} Tc, ⁹⁹ Mo, ^{99 m} Tc, ¹⁰⁵ Pd, ¹⁰⁵ Rh, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In, ¹²³ I, ¹²⁴ I, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁴³ Pr, ¹⁴⁹ Pm, ¹⁵³ Sm, ^154-158 Gd, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁶⁹ Er, ¹⁷⁵ Lu, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re, ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ¹⁹⁴ Ir, ¹⁹⁸ Au, ¹⁹⁹ Au, ²¹¹ At, ²¹¹ Pb, ²¹² Bi, ²¹² Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁵ Ac, and combinations thereof. 제 1항 또는 제 12항에 있어서, 상기 진단 부위는 광활성제 또는 염료, 방사선비투과성 물질(radioopaque material), 조영제, 형광 화합물, 증강제(enhancing agent), 방사성핵종 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되며, 여기에서 상기 방사성핵종은 ¹⁸F, ⁴⁵Ti, ⁵²Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁹⁰Y, ^{99 m}Tc, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁵³Sm, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ²¹¹At, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁵Ac 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 것임을 특징으로 하는 방법.The method according to claim 1 or 12, wherein the diagnostic site is selected from the group consisting of photoactive agents or dyes, radioopaque materials, contrast agents, fluorescent compounds, enhancing agents, radionuclides and combinations thereof. Wherein the radionuclide is ¹⁸ F, ⁴⁵ Ti, ⁵² Fe, ⁶² Cu, ⁶⁴ Cu, ⁶⁷ Cu, ⁶⁷ Ga, ⁹⁰ Y, ^{99 m} Tc, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr , ¹⁵³ Sm, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re, ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ²¹¹ At, ²¹² Bi, ²¹² Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁵ Ac and combinations thereof Characterized in that it is selected. 제 1항에 있어서, 상기 일차 표적 제제는 암태아성 항원(CEA), 결장 특이 항원-p(CSAp), CD4, CD5, CD8, CD14, CD15, CD19, CD20, CD21, CD22, CD23, CD25, CD30, CD33, CD37, CD38, CD40, CD40L, CD45, CD46, CD52, CD66a-d, CD74, CD75, CD80, CD126, B7, HLA-DR, Ia, Ii, HM1.24, MUC 1, MUC 2, MUC 3, MUC 4, NCA, EGFR, HER 2/neu, PAM-4, TAG-72, EGP-1, EGP-2, AFP, HCG, HCG-베타, PLAP, PAP, 히스톤, A3, KS-1, Le(y), S100, PSMA, PSA, 테나신(tenascin), 엽산 수용체, VEGF, P1GF, ILGF-1(인슐린류 성장 인자-1), 세포괴사 항원들, IL-2, IL-6, T101, MAGE, 장기친화성(organotropic) 호르몬, 암유전자 생산물, 사이토케라틴(cytokeratin), 갱글리오사이드(gangliosides) 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택된 항원들 중 하나 이상과 결합함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1, wherein the primary target agent is cancerous antigen (CEA), colon specific antigen-p (CSAp), CD4, CD5, CD8, CD14, CD15, CD19, CD20, CD21, CD22, CD23, CD25, CD30 , CD33, CD37, CD38, CD40, CD40L, CD45, CD46, CD52, CD66a-d, CD74, CD75, CD80, CD126, B7, HLA-DR, Ia, Ii, HM1.24, MUC 1, MUC 2, MUC 3, MUC 4, NCA, EGFR, HER 2 / neu, PAM-4, TAG-72, EGP-1, EGP-2, AFP, HCG, HCG-beta, PLAP, PAP, Histone, A3, KS-1, Le (y), S100, PSMA, PSA, tenascin, folate receptor, VEGF, P1GF, ILGF-1 (insulin growth factor-1), cell necrosis antigens, IL-2, IL-6, T101 , MAGE, organotropic hormones, oncogene products, cytokeratin, gangliosides, and combinations thereof. 제 1항에 있어서, 상기 포유동물은 암, 자가면역 질병, 감염성 질병, 아밀로이드 단백질 축적과 관련된 병리학적 질병 및 심장혈관 병변으로 이루어진 군에서 선택된 질병 또는 이상(condition)을 앓고 있는 것임을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1, wherein the mammal has a disease or condition selected from the group consisting of cancer, autoimmune diseases, infectious diseases, pathological diseases associated with amyloid protein accumulation and cardiovascular lesions. . 제 1항에 있어서, 상기 일차 표적 제제 및 상기 표적가능한 구조체는 동시에 투여되고, 상기 제거제는 상기 동시 투여 이후에 또는 동시에 투여됨을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1, wherein the primary target agent and the targetable construct are administered simultaneously, and the scavenger is administered after or concurrently with the concurrent administration. 하나 이상의 표적 결합 부위를 포함하는 일차 표적 제제; 및Primary target agents comprising one or more target binding sites; And 내재화 부위를 포함하는 분리 내재화 제제;를 포유동물에게 투여하는 단계를 포함하고, Administering to the mammal an isolated internalization agent comprising an internalization site; 여기에서, 상기 일차 표적 제제는 상기 내재화 제제와 복합체를 생성하여 내재화를 증강시키고; 상기 복합체는 치료 또는 진단 부위를 더 포함하는 Wherein the primary target agent creates a complex with the internalization agent to enhance internalization; The complex further comprises a therapeutic or diagnostic site 치료제 또는 진단제의 세포 내재화를 증강시키는 방법.A method of enhancing cellular internalization of a therapeutic or diagnostic agent. 제 19항에 있어서, 상기 일차 표적 제제는 치료 또는 진단 부위를 더 포함함을 특징으로 하는 방법.20. The method of claim 19, wherein said primary target agent further comprises a treatment or diagnostic site. 제 19항에 있어서, 일차 표적 제제 결합 부위 및 제거제 결합 부위를 포함하는 표적가능한 구조체; 및 표적가능한 구조체 결합 부위 및 내재화 부위를 포함하는 제거제를 상기 포유동물에게 투여하는 단계를 더 포함함을 특징으로 하는 방법.20. The method of claim 19, further comprising: a targetable construct comprising a primary target agent binding site and a remover binding site; And administering to said mammal a scavenger comprising a targetable construct binding site and an internalization site. 제 19항에 있어서, 일차 표적 제제 결합 부위, 내재화 제제 결합 부위 및 제거제 결합 부위를 포함하는 표적가능한 구조체; 표적가능한 구조체 결합 부위를 포함하는 제거제; 및 표적가능한 구조체 결합 부위 및 내재화 부위를 포함하는 내재화 제제를 포유동물에게 투여하는 단계를 더 포함함을 특징으로 하는 방법.20. The composition of claim 19, further comprising: a targetable construct comprising a primary target agent binding site, an internalization agent binding site, and a remover binding site; A remover comprising a targetable construct binding site; And administering to the mammal an internalization agent comprising a targetable construct binding site and an internalization site. 제 19항 또는 제 21항에 있어서, 상기 일차 표적 제제 및 상기 제거제는 하나 이상의 인간화된 항체, 키메라 항체, 인간 항체, 뮤린 항체 또는 이들의 항원 결합 단편을 포함함을 특징으로 하는 방법.22. The method of claim 19 or 21, wherein said primary targeting agent and said scavenger comprise one or more humanized antibodies, chimeric antibodies, human antibodies, murine antibodies or antigen binding fragments thereof. 제 19항에 있어서, 상기 내재화 부위는 엽산 수용체에 의해 결합되는 부위를 포함함을 특징으로 하는 방법.20. The method of claim 19, wherein said internalization site comprises a site that is bound by a folic acid receptor. 제 24항에 있어서, 엽산 수용체에 의해 결합되는 상기 부위는 엽산을 포함함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 24, wherein said site bound by the folic acid receptor comprises folic acid. 제 24항에 있어서, 엽산 수용체에 의해 결합되는 상기 부위는 메토트렉세이트(methotrexate)를 포함함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 24, wherein said site bound by the folate receptor comprises methotrexate. 제 19항에 있어서, 상기 내재화 부위는 재생 세포(recycling cell) 표면 수용체에 의해 결합되는 부위를 포함함을 특징으로 하는 방법.20. The method of claim 19, wherein said internalization site comprises a site that is bound by a recycling cell surface receptor. 제 19항에 있어서, 상기 내재화 부위는 비-수용체 조정 내재화를 증강시키는 펩타이드를 포함함을 특징으로 하는 방법.20. The method of claim 19, wherein said internalization site comprises a peptide that enhances non-receptor regulatory internalization. 제 20항에 있어서, 상기 치료 부위는 약물, 독소, 프로드럭, 효소, 약물에 대하여 프로드럭을 활성화시키는 효소, 효소 억제제, 뉴클레아제, 호르몬, 호르몬 길항제, 면역조절제, 올리고뉴클레오타이드, 붕소 화합물, 광활성제 또는 염료, 방사성핵종 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택된 것임을 특징으로 하는 방법.The method of claim 20, wherein the treatment site is a drug, toxin, prodrug, enzyme, enzyme, enzyme inhibitor, nuclease, hormone, hormone antagonist, immunomodulator, oligonucleotide, boron compound, Photoactive agent or dye, radionuclide and combinations thereof. 제 29항에 있어서, 상기 치료 부위는 애플리딘(aplidin), 아자리빈(azaribine), 아나스트로졸(anastrozole), 아자시티딘(azacytidine), 블레오마이신(bleomycin), 보르테조미브(bortezomib), 브리오스타틴-1(bryostatin-1), 부술판(busulfan), 캄포테신(camptothecin), 10-히드록시캄포테신(10-hydroxycamptothecin), 카무스틴(carmustine), 세레브렉스(celebrex), 클로람부실(chlorambucil), 시스플라틴(cisplatin), 이리노테칸(irinotecan; CPT-11), SN-38, 카보플라틴(carboplatin), 클라드리빈(cladribine), 사이클로포스파미드(cyclophosphamide), 시타라빈(cytarabine), 다카르바진(dacarbazine), 도세탁셀(docetaxel), 닥티노마이신(dactinomycin), 다우노마이신(daunomycin), 글루쿠로나이드(glucuronide), 다우노루비신(daunorubicin), 덱사메타손(dexamethasone), 디에틸스틸베스트롤(diethylstilbestrol), 독소루비신(doxorubicin) 및 그 유사체들, 독소루비신 글루쿠로나이드, 에피루비신 글루쿠로나이드(epirubicin glucuronide), 에티닐 에스트라디올(ethinyl estradiol), 에스트라무스틴(estramustine), 에토포사이드(etoposide), 에토포사이드 글루쿠로나이드, 에토포사이드 포스페이트, 플록수리딘(floxuridine; FUdR), 3',5'-O-디오레오일-FudR(3',5'-O-dioleoyl-FudR; FUdR-dO), 플루다라빈(fludarabine), 플루타미드(flutamide), 플루오로우라실 (fluorouracil), 플루옥시메스테론(fluoxymesterone), 겜시타빈(gemcitabine), 히드록시프로게스테론 카프로에이트(hydroxyprogesterone caproate), 히드록시우레아(hydroxyurea), 이다루비신(idarubicin), 이포스파미드(ifosfamide), L-아스파라기나아제(L-asparaginase), 류코보린(leucovorin), 로무스틴(lomustine), 메클로레타민(mechlorethamine), 메드로프로게스테론 아세테이트(medroprogesterone acetate), 메게스트롤 아세테이트(megestrol acetate), 멜파란(melphalan), 메르캅토퓨린(mercaptopurine), 6-메르캅토퓨린, 메토트렉세이트(methotrexate), 미톡산트론(mitoxantrone), 미트라마이신(mithramycin), 미토마이신(mitomycin), 미토탄(mitotane), 페닐 부티레이트(phenyl butyrate), 프레드니손(prednisone), 프로카르바진(procarbazine), 파클리탁셀(paclitaxel), 펜토스타틴(pentostatin), 세무스틴 스트렙토조신(semustine streptozocin), 타목시펜(tamoxifen), 탁산(taxanes), 탁솔(taxol), 테스토스테론 프로피오네이트(testosterone propionate), 탈리도마이드(thalidomide), 티오구아닌(thioguanine), 티오테파(thiotepa), 테니포사이드(teniposide), 토포테칸(topotecan), 우라실 머스타드(uracil mustard), 빈블라스틴(vinblastine), 비노렐빈(vinorelbine), 빈크리스틴(vincristine), 리신(ricin), 아브린(abrin), 리보뉴클레아제(ribonuclaease), 온코나아제(onconase), rapLR1, DNase I, 스타필로코커스 장독소-A(Staphylococcal enterotoxin-A), 미국자리공 항바이러스 단백질(pokeweed antiviral protein), 겔로닌(gelonin), 디프테리아 독소, 슈도모나스 외독소(Pseudomonas exotoxin), 슈도모나스 내독소(Pseudomonas endotoxin), 질소 머스타드, 에틸렌이민 유도체, 알킬 술포네이트(alkyl sulfonate), 니트로소우레아(nitrosourea), 트리아젠(triazene), 엽산 유사체, 안트라사이클린(anthracycline), COX-2 억제제, 피리미딘 유사체, 퓨린 유사체, 항생물질, 에피포도필로톡신(epipodophyllotoxin), 백금 동등 복합체(platinum coordination complex), 빈카 알카로이드(vinca alkaloid), 치환된 우레아, 메틸 히드라진 유도체, 부신 피질 억제제(adrenocortical suppressant), 길항제, 엔도스타틴(endostatin), 사이토카인(cytokine), 인터류킨(interleukin), 인터페론(interferon), 림포카인(lymphokine), 종양 괴사 인자(tumor necrosis factor), 안티센스 올리고뉴클레오타이드(antisense oligonucleotide), 간섭 RNA(interference RNA) 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되고, 상기 방사성핵종은 ¹⁸F, ³²P, ³³P, ⁴⁵Ti, ⁴⁷Sc, ⁵²Fe, ⁵⁹Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ⁷⁵Se, ⁷⁷As, ⁸⁶Y, ⁸⁹Sr, ⁸⁹Zr, ⁹⁰Y, ⁹⁴Tc, ^{99 m}Tc, ⁹⁹Mo, ^{99 m}Tc, ¹⁰⁵Pd, ¹⁰⁵Rh, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²³I, ¹²⁴I, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁴³Pr, ¹⁴⁹Pm, ¹⁵³Sm, ^154-158Gd, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁶⁹Er, ¹⁷⁵Lu, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ¹⁹⁴Ir, ¹⁹⁸Au, ¹⁹⁹Au, ²¹¹At, ²¹¹Pb, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁵Ac 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택됨을 특징으로 하는 방법.The method of claim 29, wherein the treatment site is aplidin, azaribine, anastrozole, azacytidine, bleomycin, bortezomib, brio Statin-1, busulfan, camptothecin, 10-hydroxycamptothecin, carmustine, celebrex, chlorambucil Cisplatin, irinotecan (CPT-11), SN-38, carboplatin, cladribine, cyclophosphamide, cytarabine, dacarbazine ( dacarbazine, docetaxel, docetaxel, dactinomycin, daunomycin, glucuronide, glucuronide, daunorubicin, dexamethasone, dexamethasone, diethylstilbestrol Doxorubicin and its analogues, doxorubicin glucuro Eid, epirubicin glucuronide, ethinyl estradiol, estramustine, etoposide, etoposide glucuronide, etoposide phosphate, phloxuridine (floxuridine; FUdR), 3 ', 5'-O-dioleoyl-FudR (3', 5'-O-dioleoyl-FudR; FUdR-dO), fludarabine, flutamide , Fluorouracil, fluoxymesterone, gemcitabine, hydroxyprogesterone caproate, hydroxyurea, idarubicin, idarubicin, and phosphamide ifosfamide, L-asparaginase, leucovorin, lomustine, mechlorethamine, medroprogesterone acetate, megestrol acetate acetate), melphalan, mercapto Purine (mercaptopurine), 6-mercaptopurine, methotrexate, mitoxantrone, mithramycin, mitomycin, mitomyne, mitotane, phenyl butyrate, phenyl butyrate prednisone, procarbazine, paclitaxel, pentostatin, semustine streptozocin, tamoxifen, taxanes, taxol, testosterone propionate ( testosterone propionate, thalidomide, thioguanine, thiotepa, teniposide, topotecan, uracil mustard, vinciline, vinblastine, vinblastine vinorelbine, vincristine, lysine, abrain, ribonuclaease, onconase, rapLR1, DNase I, Staphylococcal enterotoxin-A -A), USA Rigong antiviral protein (pokeweed antiviral protein), gel Ronin (gelonin), diphtheria toxin, Pseudomonas exotoxin (Pseudomonas exotoxin), Pseudomonas endotoxin (Pseudomonas endotoxin), nitrogen mustards, ethylenimine derivatives, alkyl sulfonates (alkyl sulfonate), Nitro Nitrosourea, triazene, folic acid analogs, anthracycline, COX-2 inhibitors, pyrimidine analogs, purine analogs, antibiotics, epipipodophyllotoxin, platinum coordination complex, vinca alkaloid, substituted urea, methyl hydrazine derivatives, adrenocortical suppressant, antagonist, endostatin, cytokine, interleukin, interferon, rim Lymphokine, tumor necrosis factor, antisense oligonucleotide, liver Is selected from the group consisting of RNA (interference RNA), and combinations thereof, wherein the radionuclide is ^{18 F, 32 P, 33 P} , 45 Ti, 47 Sc, 52 Fe, 59 Fe, 62 Cu, 64 Cu, 67 Cu, ⁶⁷ Ga, ⁶⁸ Ga, ⁷⁵ Se, ⁷⁷ As, ⁸⁶ Y, ⁸⁹ Sr, ⁸⁹ Zr, ⁹⁰ Y, ⁹⁴ Tc, ^{99 m} Tc, ⁹⁹ Mo, ^{99 m} Tc, ¹⁰⁵ Pd, ¹⁰⁵ Rh, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In, ¹²³ I, ¹²⁴ I, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁴³ Pr, ¹⁴⁹ Pm, ¹⁵³ Sm, ^154-158 Gd, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁶⁹ Er, ¹⁷⁵ Lu, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re, ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ¹⁹⁴ Ir, ¹⁹⁸ Au, ¹⁹⁹ Au, ²¹¹ At, ²¹¹ Pb, ²¹² Bi, ²¹² Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁵ Ac, and combinations thereof. 제 20항에 있어서, 상기 진단 부위는 광활성제 또는 염료, 방사성핵종, 방사선비투과성 물질(radioopaque material), 조영제, 형광 화합물, 증강제(enhancing agent) 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되며, 여기에서 상기 방사성핵종 은 ¹⁸F, ⁴⁵Ti, ⁵²Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁹⁰Y, ^{99 m}Tc, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁵³Sm, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ²¹¹At, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁵Ac 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 것임을 특징으로 하는 방법.21. The method of claim 20, wherein the diagnostic site is selected from the group consisting of photoactive agents or dyes, radionuclides, radioopaque materials, contrast agents, fluorescent compounds, enhancement agents, and combinations thereof. The radionuclide is ¹⁸ F, ⁴⁵ Ti, ⁵² Fe, ⁶² Cu, ⁶⁴ Cu, ⁶⁷ Cu, ⁶⁷ Ga, ⁹⁰ Y, ^{99 m} Tc, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁵³ Sm, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re, ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ²¹¹ At, ²¹² Bi, ²¹² Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁵ Ac and combinations thereof How to. 제 19항에 있어서, 상기 일차 표적 제제는 암태아성 항원(CEA), 결장 특이 항원-p(CSAp), CD4, CD5, CD8, CD14, CD15, CD19, CD20, CD21, CD22, CD23, CD25, CD30, CD33, CD37, CD38, CD40, CD40L, CD45, CD46, CD52, CD66a-d, CD74, CD75, CD80, CD126, B7, HLA-DR, Ia, Ii, HM1.24, MUC 1, MUC 2, MUC 3, MUC 4, NCA, EGFR, HER 2/neu, PAM-4, TAG-72, EGP-1, EGP-2, AFP, HCG, HCG-베타, PLAP, PAP, 히스톤, A3, KS-1, Le(y), S100, PSMA, PSA, 테나신(tenascin), 엽산 수용체, VEGF, P1GF, ILGF-1(인슐린류 성장 인자-1), 세포괴사 항원들, IL-2, IL-6, T101, MAGE, 장기친화성(organotropic) 호르몬, 암유전자 생산물, 사이토케라틴(cytokeratin), 갱글리오사이드(gangliosides) 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택된 항원들 중 하나 이상과 결합함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 19, wherein the primary target agent is a fetal antigen (CEA), colon specific antigen-p (CSAp), CD4, CD5, CD8, CD14, CD15, CD19, CD20, CD21, CD22, CD23, CD25, CD30 , CD33, CD37, CD38, CD40, CD40L, CD45, CD46, CD52, CD66a-d, CD74, CD75, CD80, CD126, B7, HLA-DR, Ia, Ii, HM1.24, MUC 1, MUC 2, MUC 3, MUC 4, NCA, EGFR, HER 2 / neu, PAM-4, TAG-72, EGP-1, EGP-2, AFP, HCG, HCG-beta, PLAP, PAP, Histone, A3, KS-1, Le (y), S100, PSMA, PSA, tenascin, folate receptor, VEGF, P1GF, ILGF-1 (insulin growth factor-1), cell necrosis antigens, IL-2, IL-6, T101 , MAGE, organotropic hormones, oncogene products, cytokeratin, gangliosides, and combinations thereof. 제 19항에 있어서, 상기 제거제의 표적가능한 구조체 결합 부위는 항체 또는 항체 단편을 포함함을 특징으로 하는 방법.20. The method of claim 19, wherein the targetable construct binding site of the remover comprises an antibody or antibody fragment. 제 33항에 있어서, 상기 항체 또는 항체 단편은 IgG 항체 또는 항체 단편임 을 특징으로 하는 방법.The method of claim 33, wherein the antibody or antibody fragment is an IgG antibody or antibody fragment. 제 34항에 있어서, 상기 IgG 항체는 IgG1 항체를 포함함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 34, wherein said IgG antibody comprises an IgG1 antibody. 제 34항에 있어서, 상기 항체 또는 항체 단편은 혈액순환에서의 제거를 증강시키는 C_H2가 제거된 IgG 항체임을 특징으로 하는 방법.35. The method of claim 34, wherein said antibody or antibody fragment is an IgG antibody depleted of C _H 2 that enhances clearance in blood circulation. 제 34항에 있어서, 상기 항체 또는 항체 단편은 갈락토오스로 변형된 것임을 특징으로 하는 방법.The method of claim 34, wherein the antibody or antibody fragment is modified with galactose. 제 21항에 있어서, 상기 제거제는 다수의 표적가능한 구조체들과 결합함을 특징으로 하는 방법.22. The method of claim 21, wherein said scavenger binds to a plurality of targetable constructs. 제 21항에 있어서, 표적가능한 구조체와 제거제의 결합이 결합 부위에서 일차 표적 제제와 표적가능한 구조체의 결합을 안정화하고, 결합 부위에서 일차 표적 제제에 결합하지 않는 표적가능한 구조체의 제거를 증강시킴을 특징으로 하는 방법.22. The method of claim 21, wherein the binding of the targetable construct and the scavenger stabilizes the binding of the primary target agent and the target construct at the binding site and enhances the removal of the targetable construct that does not bind the primary target agent at the binding site. How to. 제 21항에 있어서, 상기 제거제의 표적가능한 구조체 결합 부위는 항체 또는 항체 단편을 포함함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 21, wherein the targetable construct binding site of the remover comprises an antibody or antibody fragment. 제 40항에 있어서, 상기 항체 또는 항체 단편은 IgG 항체 또는 항체 단편임을 특징으로 하는 방법.The method of claim 40, wherein the antibody or antibody fragment is an IgG antibody or antibody fragment. 제 41항에 있어서, 상기 IgG 항체는 IgG1 항체를 포함함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 41, wherein the IgG antibody comprises an IgG1 antibody. 제 40항에 있어서, 상기 항체 또는 항체 단편은 혈액순환에서의 제거를 증강시키는 C_H2가 제거된 IgG 항체임을 특징으로 하는 방법.41. The method of claim 40, wherein the antibody or antibody fragment is an IgG antibody depleted of C _H 2 that enhances clearance in blood circulation. 제 40항에 있어서, 상기 항체 또는 항체 단편은 갈락토오스로 변형된 것임을 특징으로 하는 방법.The method of claim 40, wherein the antibody or antibody fragment is modified with galactose. 제 21항에 있어서, 상기 제거제는 다수의 표적가능한 구조체들과 결합함을 특징으로 하는 방법.22. The method of claim 21, wherein said scavenger binds to a plurality of targetable constructs. 제 21항에 있어서, 표적가능한 구조체와 제거제의 결합이 결합 부위에서 일 차 표적 제제와 표적가능한 구조체의 결합을 안정화하고, 결합 부위에서 일차 표적 제제에 결합하지 않는 표적가능한 구조체의 제거를 증강시킴을 특징으로 하는 방법.The method of claim 21, wherein the binding of the targetable construct and the scavenger stabilizes the binding of the primary target agent and the target construct at the binding site and enhances the removal of the targetable construct that does not bind the primary target agent at the binding site. How to feature. 제 19항에 있어서, 상기 포유동물은 암, 자가면역 질병, 감염성 질병, 아밀로이드 단백질 축적과 관련된 병리학적 질병 및 심장혈관 병변으로 이루어진 군에서 선택된 질병 또는 이상(condition)을 앓고 있는 것임을 특징으로 하는 방법.20. The method of claim 19, wherein the mammal has a disease or condition selected from the group consisting of cancer, autoimmune diseases, infectious diseases, pathological diseases associated with amyloid protein accumulation and cardiovascular lesions. . 제 21항에 있어서, 상기 일차 표적 제제 및 상기 내재화 제제는 상기 표적가능한 구조체와 동시에 투여되고, 상기 제거제는 상기 동시 투여 이후에 또는 동시에 투여됨을 특징으로 하는 방법.The method of claim 21, wherein the primary target agent and the internalization agent are administered simultaneously with the targetable construct and the scavenger is administered after or concurrently with the concurrent administration. 하나 이상의 표적 결합 부위 및 하나 이상의 표적가능한 구조체 결합 부위를 포함하는 일차 표적 제제; 일차 표적 제제 결합 부위, 제거제 결합 부위 및 가시화 부위(visualization moiety)를 포함하는 표적가능한 구조체; 및 이로 인해 결합된 표적가능한 구조체에 대한 순환하는 표적가능한 구조체의 비율이 감소되는 하나 이상의 표적가능한 구조체 결합 부위를 포함하는 제거제를 포유동물에 투여하는 단계를 포함하는 생체내 가시화 시스템에서의 대비(contrast)를 증가시키는 방법.A primary target agent comprising at least one target binding site and at least one targetable construct binding site; Targetable constructs comprising a primary target agent binding site, a remover binding site, and a visualization moiety; And administering to the mammal an eliminator comprising at least one targetable construct binding site whereby the ratio of circulating targetable constructs to bound targetable constructs is reduced. How to increase). 제 49항에 있어서, 상기 제거제는 내재화 부위를 더 포함함을 특징으로 하는 방법.50. The method of claim 49, wherein said remover further comprises an internalization site. 제 49항에 있어서, 상기 표적가능한 구조체는 내재화 제제 결합 부위를 더 포함하고, 상기 방법은 표적가능한 구조체 결합 부위 및 내재화 부위를 포함하는 내재화 제제를 상기 포유동물에게 투여하는 단계를 더 포함함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 49, wherein the targetable construct further comprises an internalization agent binding site, and the method further comprises administering to the mammal an internalization agent comprising a targetable structure binding site and an internalization site. How to. 제 49항에 있어서, 상기 제거제의 표적가능한 구조체 결합 부위는 항체 또는 항체 단편을 포함함을 특징으로 하는 방법.50. The method of claim 49, wherein the targetable construct binding site of the remover comprises an antibody or antibody fragment. 제 52항에 있어서, 상기 항체 또는 항체 단편은 IgG 항체 또는 항체 단편임을 특징으로 하는 방법.The method of claim 52, wherein the antibody or antibody fragment is an IgG antibody or antibody fragment. 제 53항에 있어서, 상기 IgG 항체는 IgG1 항체를 포함함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 53, wherein the IgG antibody comprises an IgG1 antibody. 제 52항에 있어서, 상기 항체 또는 항체 단편은 혈액순환에서의 제거를 증강시키는 C_H2가 제거된 IgG 항체임을 특징으로 하는 방법.53. The method of claim 52, wherein the antibody or antibody fragment is an IgG antibody depleted of C _H 2 that enhances clearance in blood circulation. 제 52항에 있어서, 상기 항체 또는 항체 단편은 갈락토오스로 변형된 것임을 특징으로 하는 방법.The method of claim 52, wherein the antibody or antibody fragment is modified with galactose. 제 49항에 있어서, 상기 제거제는 다수의 표적가능한 구조체들과 결합함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 49, wherein the scavenger associates with a plurality of targetable structures. 제 49항에 있어서, 표적가능한 구조체와 제거제의 결합이 결합 부위에서 일차 표적 제제와 표적가능한 구조체의 결합을 안정화하고, 결합 부위에서 일차 표적 제제에 결합하지 않는 표적가능한 구조체의 제거를 증강시킴을 특징으로 하는 방법.50. The method of claim 49, wherein the binding of the targetable construct and the scavenger stabilizes the binding of the primary target agent and the target construct at the binding site and enhances the removal of the targetable construct that does not bind the primary target agent at the binding site. How to. 제 49항에 있어서, 상기 가시화 부위는 광활성제 또는 염료, 방사성핵종, 방사선비투과성 물질(radioopaque material), 조영제, 형광 화합물, 증강제(enhancing agent) 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되며, 여기에서 상기 방사성핵종은 ¹⁸F, ⁴⁵Ti, ⁵²Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁹⁰Y, ^{99 m}Tc, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁵³Sm, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ²¹¹At, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁵Ac 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 것임을 특징으로 하는 방법.50. The method of claim 49, wherein the visualization site is selected from the group consisting of photoactive agents or dyes, radionuclides, radioopaque materials, contrast agents, fluorescent compounds, enhancement agents, and combinations thereof. The radionuclide is ¹⁸ F, ⁴⁵ Ti, ⁵² Fe, ⁶² Cu, ⁶⁴ Cu, ⁶⁷ Cu, ⁶⁷ Ga, ⁹⁰ Y, ^{99 m} Tc, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁵³ Sm, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re, ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ²¹¹ At, ²¹² Bi, ²¹² Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁵ Ac and combinations thereof How to. 제 49항에 있어서, 상기 일차 표적 제제 및 상기 제거제는 하나 이상의 인간화된 항체, 키메라 항체, 인간 항체, 뮤린 항체 또는 이들의 항원 결합 단편을 포함하는 것임을 특징으로 하는 방법.The method of claim 49, wherein said primary target agent and said scavenger comprise one or more humanized antibodies, chimeric antibodies, human antibodies, murine antibodies, or antigen binding fragments thereof. 제 49항에 있어서, 상기 일차 표적 제제는 암태아성 항원(CEA), 결장 특이 항원-p(CSAp), CD4, CD5, CD8, CD14, CD15, CD19, CD20, CD21, CD22, CD23, CD25, CD30, CD33, CD37, CD38, CD40, CD40L, CD45, CD46, CD52, CD66a-d, CD74, CD75, CD80, CD126, B7, HLA-DR, Ia, Ii, HM1.24, MUC 1, MUC 2, MUC 3, MUC 4, NCA, EGFR, HER 2/neu, PAM-4, TAG-72, EGP-1, EGP-2, AFP, HCG, HCG-베타, PLAP, PAP, 히스톤, A3, KS-1, Le(y), S100, PSMA, PSA, 테나신(tenascin), 엽산 수용체, VEGF, P1GF, ILGF-1(인슐린류 성장 인자-1), 세포괴사 항원들, IL-2, IL-6, T101, MAGE, 장기친화성(organotropic) 호르몬, 암유전자 생산물, 사이토케라틴(cytokeratin), 갱글리오사이드(gangliosides) 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택된 항원들 중 하나 이상과 결합함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 49, wherein the primary target agent is a fetal antigen (CEA), colon specific antigen-p (CSAp), CD4, CD5, CD8, CD14, CD15, CD19, CD20, CD21, CD22, CD23, CD25, CD30 , CD33, CD37, CD38, CD40, CD40L, CD45, CD46, CD52, CD66a-d, CD74, CD75, CD80, CD126, B7, HLA-DR, Ia, Ii, HM1.24, MUC 1, MUC 2, MUC 3, MUC 4, NCA, EGFR, HER 2 / neu, PAM-4, TAG-72, EGP-1, EGP-2, AFP, HCG, HCG-beta, PLAP, PAP, Histone, A3, KS-1, Le (y), S100, PSMA, PSA, tenascin, folate receptor, VEGF, P1GF, ILGF-1 (insulin growth factor-1), cell necrosis antigens, IL-2, IL-6, T101 , MAGE, organotropic hormones, oncogene products, cytokeratin, gangliosides, and combinations thereof. 제 49항에 있어서, 상기 포유동물은 암, 자가면역 질병, 감염성 질병, 아밀로이드 단백질 축적과 관련된 병리학적 질병 및 심장혈관 병변으로 이루어진 군에서 선택된 질병 또는 이상(condition)을 앓고 있는 것임을 특징으로 하는 방법.50. The method of claim 49, wherein the mammal has a disease or condition selected from the group consisting of cancer, autoimmune diseases, infectious diseases, pathological diseases associated with amyloid protein accumulation and cardiovascular lesions. . 순환하는 치료제 또는 진단제를 가지는 포유동물에 제거제를 투여하는 단계 를 포함하고, 상기 제거제는 순환하는 분자 또는 상기 치료제 또는 진단제를 포함하는 복합체에 있는 하나 이상의 부위에 특이적으로 결합하며 상기 분자 또는 복합체의 제거를 증강시키는 것임을 특징으로 하는 순환하는 치료제 또는 진단제를 제거하는 방법.Administering an scavenger to a mammal having a circulating therapeutic or diagnostic agent, said scavenger specifically binding to the circulating molecule or one or more sites in the complex comprising the therapeutic or diagnostic agent and A method for removing a circulating therapeutic or diagnostic agent, characterized in that it enhances the removal of the complex. 제 63항에 있어서, 상기 치료제 또는 진단제는 둘 이상의 직교(orthogonal) 부착소들을 포함하는 표적가능한 구조체의 일부임을 특징으로 하는 방법.64. The method of claim 63, wherein the therapeutic or diagnostic agent is part of a targetable construct comprising two or more orthogonal attachments. 제 64항에 있어서, 상기 표적가능한 구조체는 둘 이상의 직교(orthogonal) 부착소 복제물들(copies)을 포함함을 특징으로 하는 방법.65. The method of claim 64, wherein the targetable construct comprises two or more orthogonal attachment copies. 제 63항에 있어서, 상기 표적가능한 구조체는 펩타이드를 포함함을 특징으로 하는 방법.64. The method of claim 63, wherein said targetable construct comprises a peptide. 제 63항에 있어서, 상기 치료제는 약물, 독소, 프로드럭, 효소, 약물에 대하여 프로드럭을 활성화시키는 효소, 효소 억제제, 뉴클레아제, 호르몬, 호르몬 길항제, 면역조절제, 올리고뉴클레오타이드, 붕소 화합물, 광활성제 또는 염료, 방사성핵종 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택된 것임을 특징으로 하는 방법.64. The method of claim 63, wherein the therapeutic agent is a drug, toxin, prodrug, enzyme, enzyme that activates the prodrug against the drug, enzyme inhibitor, nuclease, hormone, hormonal antagonist, immunomodulator, oligonucleotide, boron compound, photo And activator or dye, radionuclide and combinations thereof. 제 67항에 있어서, 상기 치료제는 애플리딘(aplidin), 아자리빈(azaribine), 아나스트로졸(anastrozole), 아자시티딘(azacytidine), 블레오마이신(bleomycin), 보르테조미브(bortezomib), 브리오스타틴-1(bryostatin-1), 부술판(busulfan), 캄포테신(camptothecin), 10-히드록시캄포테신(10-hydroxycamptothecin), 카무스틴(carmustine), 세레브렉스(celebrex), 클로람부실(chlorambucil), 시스플라틴(cisplatin), 이리노테칸(irinotecan; CPT-11), SN-38, 카보플라틴(carboplatin), 클라드리빈(cladribine), 사이클로포스파미드(cyclophosphamide), 시타라빈(cytarabine), 다카르바진(dacarbazine), 도세탁셀(docetaxel), 닥티노마이신(dactinomycin), 다우노마이신(daunomycin), 글루쿠로나이드(glucuronide), 다우노루비신(daunorubicin), 덱사메타손(dexamethasone), 디에틸스틸베스트롤(diethylstilbestrol), 독소루비신(doxorubicin) 및 그 유사체들, 독소루비신 글루쿠로나이드, 에피루비신 글루쿠로나이드(epirubicin glucuronide), 에티닐 에스트라디올(ethinyl estradiol), 에스트라무스틴(estramustine), 에토포사이드(etoposide), 에토포사이드 글루쿠로나이드, 에토포사이드 포스페이트, 플록수리딘(floxuridine; FUdR), 3',5'-O-디오레오일-FudR(3',5'-O-dioleoyl-FudR; FUdR-dO), 플루다라빈(fludarabine), 플루타미드(flutamide), 플루오로우라실(fluorouracil), 플루옥시메스테론(fluoxymesterone), 겜시타빈(gemcitabine), 히드록시프로게스테론 카프로에이트(hydroxyprogesterone caproate), 히드록시우레아(hydroxyurea), 이다루비신(idarubicin), 이포스파미드(ifosfamide), L-아스파라기나아제(L-asparaginase), 류코보린(leucovorin), 로무스틴(lomustine), 메클로레타민(mechlorethamine), 메드로프로게스테론 아세테이트(medroprogesterone acetate), 메게스트롤 아세테이트(megestrol acetate), 멜파란(melphalan), 메르캅토퓨린(mercaptopurine), 6-메르캅토퓨린, 메토트렉세이트(methotrexate), 미톡산트론(mitoxantrone), 미트라마이신(mithramycin), 미토마이신(mitomycin), 미토탄(mitotane), 페닐 부티레이트(phenyl butyrate), 프레드니손(prednisone), 프로카르바진(procarbazine), 파클리탁셀(paclitaxel), 펜토스타틴(pentostatin), 세무스틴 스트렙토조신(semustine streptozocin), 타목시펜(tamoxifen), 탁산(taxanes), 탁솔(taxol), 테스토스테론 프로피오네이트(testosterone propionate), 탈리도마이드(thalidomide), 티오구아닌(thioguanine), 티오테파(thiotepa), 테니포사이드(teniposide), 토포테칸(topotecan), 우라실 머스타드(uracil mustard), 빈블라스틴(vinblastine), 비노렐빈(vinorelbine), 빈크리스틴(vincristine), 리신(ricin), 아브린(abrin), 리보뉴클레아제(ribonuclaease), 온코나아제(onconase), rapLR1, DNase I, 스타필로코커스 장독소-A(Staphylococcal enterotoxin-A), 미국자리공 항바이러스 단백질(pokeweed antiviral protein), 겔로닌(gelonin), 디프테리아 독소, 슈도모나스 외독소(Pseudomonas exotoxin), 슈도모나스 내독소(Pseudomonas endotoxin), 질소 머스타드, 에틸렌이민 유도체, 알킬 술포네이트(alkyl sulfonate), 니트로소우레아(nitrosourea), 트리아젠(triazene), 엽산 유사체, 안트라사이클린(anthracycline), COX-2 억제제, 피리미딘 유사체, 퓨린 유사체, 항생물질, 에피포도필로톡신(epipodophyllotoxin), 백금 동등 복합체(platinum coordination complex), 빈카 알카로이드(vinca alkaloid), 치환된 우레아, 메틸 히드라진 유도체, 부신 피질 억제제(adrenocortical suppressant), 길항제, 엔도스 타틴(endostatin), 사이토카인(cytokine), 인터류킨(interleukin), 인터페론(interferon), 림포카인(lymphokine), 종양 괴사 인자(tumor necrosis factor), 안티센스 올리고뉴클레오타이드(antisense oligonucleotide), 간섭 RNA(interference RNA) 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되고, 상기 방사성핵종은 ¹⁸F, ³²P, ³³P, ⁴⁵Ti, ⁴⁷Sc, ⁵²Fe, ⁵⁹Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ⁷⁵Se, ⁷⁷As, ⁸⁶Y, ⁸⁹Sr, ⁸⁹Zr, ⁹⁰Y, ⁹⁴Tc, ^{99 m}Tc, ⁹⁹Mo, ^{99 m}Tc, ¹⁰⁵Pd, ¹⁰⁵Rh, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²³I, ¹²⁴I, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁴³Pr, ¹⁴⁹Pm, ¹⁵³Sm, ^154-158Gd, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁶⁹Er, ¹⁷⁵Lu, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ¹⁹⁴Ir, ¹⁹⁸Au, ¹⁹⁹Au, ²¹¹At, ²¹¹Pb, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁵Ac 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택됨을 특징으로 하는 방법.68. The method of claim 67, wherein the therapeutic agent is aplidin, azaribine, anastrozole, azacytidine, bleomycin, bortezomib, bryostatin -1 (bryostatin-1), busulfan, camptothecin, 10-hydroxycamptothecin, carmustine, celebrex, chlorambucil, Cisplatin, irinotecan (CPT-11), SN-38, carboplatin, cladribine, cyclophosphamide, cytarabine, dacarbazine Docetaxel, dactinomycin, daunomycin, glucuronide, daunorubicin, dexamethasone, dexamethasone, diethylstilbestrol, diethylstilbestrol Doxorubicin and its analogues, doxorubicin glucurona De, epirubicin glucuronide, ethinyl estradiol, estramustine, etoposide, etoposide glucuronide, etoposide phosphate, phloxuridine (floxuridine; FUdR), 3 ', 5'-O-dioleoyl-FudR (3', 5'-O-dioleoyl-FudR; FUdR-dO), fludarabine, flutamide Fluorouracil, fluoxymesterone, gemcitabine, hydroxyprogesterone caproate, hydroxyurea, idarubicin, idarubicin, phosphamide ifosfamide, L-asparaginase, leucovorin, lomustine, mechlorethamine, medroprogesterone acetate, megestrol acetate acetate), melphalan, mercaptofu (mercaptopurine), 6-mercaptopurine, methotrexate, mitoxantrone, mithramycin, mitomycin, mitomycin, mitotane, phenyl butyrate, prednisone ), Procarbazine, paclitaxel, pentostatin, pentostatin, semustine streptozocin, tamoxifen, taxanes, taxol, testosterone propionate propionate, thalidomide, thioguanine, thiotepa, teniposide, topotecan, uracil mustard, vinciline, vinblastine, vinorelbine ), Vincristine, lysine, ricin, abrin, ribonuclaease, onconase, rapLR1, DNase I, Staphylococcus enterotoxin-A ( Staphylococcal enterotoxin-A) A), USA Antiviral protein (pokeweed antiviral protein), gel Ronin (gelonin), diphtheria toxin, Pseudomonas exotoxin (Pseudomonas exotoxin), Pseudomonas endotoxin (Pseudomonas endotoxin), nitrogen mustards, ethylenimine derivatives, alkyl sulfonates (alkyl sulfonate), nitroso Urea, triazene, folic acid analog, anthracycline, COX-2 inhibitor, pyrimidine analog, purine analog, antibiotic, epipidophyllotoxin, platinum coordination complex ), Vinca alkaloid, substituted urea, methyl hydrazine derivatives, adrenocortical suppressant, antagonist, endostatin, cytokine, interleukin, interferon, interferon, Lymphokine, tumor necrosis factor, antisense oligonucleotide, interference R Selected from the group consisting of NA (interference RNA) and combinations thereof, and the radionuclide is ¹⁸ F, ³² P, ³³ P, ⁴⁵ Ti, ⁴⁷ Sc, ⁵² Fe, ⁵⁹ Fe, ⁶² Cu, ⁶⁴ Cu, ⁶⁷ Cu, ⁶⁷ Ga, ⁶⁸ Ga, ⁷⁵ Se, ⁷⁷ As, ⁸⁶ Y, ⁸⁹ Sr, ⁸⁹ Zr, ⁹⁰ Y, ⁹⁴ Tc, ^{99 m} Tc, ⁹⁹ Mo, ^{99 m} Tc, ¹⁰⁵ Pd, ¹⁰⁵ Rh, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In, ¹²³ I, ¹²⁴ I, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁴³ Pr, ¹⁴⁹ Pm, ¹⁵³ Sm, ^154-158 Gd, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁶⁹ Er, ¹⁷⁵ Lu, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re, ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ¹⁹⁴ Ir, ¹⁹⁸ Au, ¹⁹⁹ Au, ²¹¹ At, ²¹¹ Pb, ²¹² Bi, ²¹² Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁵ Ac, and combinations thereof. 제 63항에 있어서, 상기 진단제는 광활성제 또는 염료, 방사성핵종, 방사선비투과성 물질(radioopaque material), 조영제, 형광 화합물, 증강제(enhancing agent) 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되며, 여기에서 상기 방사성핵종은 ¹⁸F, ⁴⁵Ti, ⁵²Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁹⁰Y, ^{99 m}Tc, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁵³Sm, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ²¹¹At, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁵Ac 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 것임을 특징으로 하는 방법.64. The method of claim 63, wherein the diagnostic agent is selected from the group consisting of photoactive agents or dyes, radionuclides, radioopaque materials, contrast agents, fluorescent compounds, enhancing agents, and combinations thereof. The radionuclide is ¹⁸ F, ⁴⁵ Ti, ⁵² Fe, ⁶² Cu, ⁶⁴ Cu, ⁶⁷ Cu, ⁶⁷ Ga, ⁹⁰ Y, ^{99 m} Tc, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁵³ Sm, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re, ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ²¹¹ At, ²¹² Bi, ²¹² Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁵ Ac and combinations thereof How to. 제 63항에 있어서, 상기 제거제는 하나 이상의 인간화된 항체, 키메라 항체, 인간 항체, 뮤린 항체 또는 이들의 항원 결합 단편을 포함함을 특징으로 하는 방법.64. The method of claim 63, wherein said scavenger comprises one or more humanized antibodies, chimeric antibodies, human antibodies, murine antibodies or antigen binding fragments thereof. 제 63항에 있어서, 상기 제거제는 상기 분자 또는 복합체에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을 포함함을 특징으로 하는 방법.64. The method of claim 63, wherein said scavenger comprises an antibody or antibody fragment that specifically binds said molecule or complex. 제 63항에 있어서, 상기 제거제는 둘 이상의 상기 순환하는 분자 또는 복합체에 결합하여 상기 분자 또는 복합체들과 교차결합하는 것임을 특징으로 하는 방법.64. The method of claim 63, wherein said scavenger binds to at least two of said circulating molecules or complexes and crosslinks said molecules or complexes. 제 71항에 있어서, 상기 제거제는 IgG 항체 또는 항체 단편을 포함하는 것임을 특징으로 하는 방법.The method of claim 71, wherein the scavenger comprises an IgG antibody or antibody fragment. 제 73항에 있어서, 상기 IgG 항체는 IgG1 항체를 포함함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 73, wherein said IgG antibody comprises an IgG1 antibody. 제 71항에 있어서, 상기 제거제는 C_H2가 제거된 IgG 항체를 포함하고, 제거되지 않은 대응하는 IgG 항체 보다 빠르게 혈액순환으로부터 제거되는 것임을 특징 으로 하는 방법.The method of claim 71, wherein the scavenger comprises an IgG antibody from which C _H 2 has been removed and is removed from the blood circulation faster than the corresponding IgG antibody that has not been removed. 제 71항에 있어서, 상기 항체는 갈락토오스로 변형된 것임을 특징으로 하는 방법.The method of claim 71, wherein the antibody is modified with galactose. 제 71항에 있어서, 상기 제거제는 다수의 표적가능한 구조체들과 결합함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 71, wherein the scavenger binds to a plurality of targetable structures. 제 63항에 있어서, 상기 포유동물은 또한 결합 부위에서 일차 표적 제제와 결합하는 표적가능한 구조체를 가지고, 표적가능한 구조체와 제거제의 결합이 상기 결합 부위에서 일차 표적 제제와 표적가능한 구조체의 결합을 안정화시킴을 특징으로 하는 방법.64. The method of claim 63, wherein the mammal also has a targetable construct that binds to the primary target agent at the binding site, and the binding of the targetable construct and the scavenger stabilizes the binding of the target target target to the target target construct at the binding site. Characterized by the above. 제 63항에 있어서, 상기 포유동물은 또한 암, 자가면역 질병, 감염성 질병, 아밀로이드 단백질 축적과 관련된 병리학적 질병 및 심장혈관 병변으로 이루어진 군에서 선택된 질병 또는 이상(condition)을 앓고 있는 것임을 특징으로 하는 방법.66. The method of claim 63, wherein said mammal is also suffering from a disease or condition selected from the group consisting of cancer, autoimmune diseases, infectious diseases, pathological diseases associated with amyloid protein accumulation and cardiovascular lesions. Way. 분리 일차 표적 제제와 결합하기에 적절한 하나 이상의 일차결합 부위;One or more primary binding sites suitable for binding with the isolated primary target agent; 제거제와 결합하기에 적절한 이차 결합 부위; 및Secondary binding sites suitable for binding with the scavenger; And 내재화 제제와 결합하기에 적절한 삼차 결합 부위;Tertiary binding sites suitable for binding with internalization agents; 를 포함하는 치료 또는 진단 부위의 운반에 적합한 삼특이성(tri-specific) 표적가능한 구조체.Tri-specific targetable construct suitable for delivery of a therapeutic or diagnostic site comprising a. 제 80항에 있어서, 상기 일차, 이차 및 삼차 결합 부위들의 하나 이상이 부착소임을 특징으로 하는 구조체.81. The construct of claim 80, wherein at least one of said primary, secondary and tertiary binding sites is an attachment. 제 80항에 있어서, 상기 일차, 이차 및 삼차 결합 부위들은 직교(orthogonal) 부착소임을 특징으로 하는 구조체.81. The construct of claim 80, wherein the primary, secondary and tertiary binding sites are orthogonal attachments. 제 80항에 있어서, 상기 구조체는 치료 또는 진단 부위를 더 포함함을 특징으로 하는 구조체.81. The construct of claim 80, wherein said construct further comprises a treatment or diagnostic site. 제 83항에 있어서, 상기 치료 부위는 약물, 독소, 프로드럭, 효소, 약물에 대하여 프로드럭을 활성화시키는 효소, 효소 억제제, 뉴클레아제, 호르몬, 호르몬 길항제, 면역조절제, 올리고뉴클레오타이드, 붕소 화합물, 광활성제 또는 염료, 방사성핵종 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택된 것임을 특징으로 하는 구조체.84. The method of claim 83, wherein the therapeutic site is a drug, toxin, prodrug, enzyme, enzyme, enzyme inhibitor, nuclease, hormone, hormone antagonist, immunomodulator, oligonucleotide, boron compound, A structure characterized in that it is selected from the group consisting of photoactive agents or dyes, radionuclides and combinations thereof. 제 85항에 있어서, 상기 치료 부위는 애플리딘(aplidin), 아자리빈 (azaribine), 아나스트로졸(anastrozole), 아자시티딘(azacytidine), 블레오마이신(bleomycin), 보르테조미브(bortezomib), 브리오스타틴-1(bryostatin-1), 부술판(busulfan), 캄포테신(camptothecin), 10-히드록시캄포테신(10-hydroxycamptothecin), 카무스틴(carmustine), 세레브렉스(celebrex), 클로람부실(chlorambucil), 시스플라틴(cisplatin), 이리노테칸(irinotecan; CPT-11), SN-38, 카보플라틴(carboplatin), 클라드리빈(cladribine), 사이클로포스파미드(cyclophosphamide), 시타라빈(cytarabine), 다카르바진(dacarbazine), 도세탁셀(docetaxel), 닥티노마이신(dactinomycin), 다우노마이신(daunomycin), 글루쿠로나이드(glucuronide), 다우노루비신(daunorubicin), 덱사메타손(dexamethasone), 디에틸스틸베스트롤(diethylstilbestrol), 독소루비신(doxorubicin) 및 그 유사체들, 독소루비신 글루쿠로나이드, 에피루비신 글루쿠로나이드(epirubicin glucuronide), 에티닐 에스트라디올(ethinyl estradiol), 에스트라무스틴(estramustine), 에토포사이드(etoposide), 에토포사이드 글루쿠로나이드, 에토포사이드 포스페이트, 플록수리딘(floxuridine; FUdR), 3',5'-O-디오레오일-FudR(3',5'-O-dioleoyl-FudR; FUdR-dO), 플루다라빈(fludarabine), 플루타미드(flutamide), 플루오로우라실(fluorouracil), 플루옥시메스테론(fluoxymesterone), 겜시타빈(gemcitabine), 히드록시프로게스테론 카프로에이트(hydroxyprogesterone caproate), 히드록시우레아(hydroxyurea), 이다루비신(idarubicin), 이포스파미드(ifosfamide), L-아스파라기나아제(L-asparaginase), 류코보린(leucovorin), 로무스틴(lomustine), 메클로레타민(mechlorethamine), 메드로프로게스테론 아세테이트(medroprogesterone acetate), 메게스트롤 아세테이트(megestrol acetate), 멜파란(melphalan), 메르캅토퓨린(mercaptopurine), 6-메르캅토퓨린, 메토트렉세이트(methotrexate), 미톡산트론(mitoxantrone), 미트라마이신(mithramycin), 미토마이신(mitomycin), 미토탄(mitotane), 페닐 부티레이트(phenyl butyrate), 프레드니손(prednisone), 프로카르바진(procarbazine), 파클리탁셀(paclitaxel), 펜토스타틴(pentostatin), 세무스틴 스트렙토조신(semustine streptozocin), 타목시펜(tamoxifen), 탁산(taxanes), 탁솔(taxol), 테스토스테론 프로피오네이트(testosterone propionate), 탈리도마이드(thalidomide), 티오구아닌(thioguanine), 티오테파(thiotepa), 테니포사이드(teniposide), 토포테칸(topotecan), 우라실 머스타드(uracil mustard), 빈블라스틴(vinblastine), 비노렐빈(vinorelbine), 빈크리스틴(vincristine), 리신(ricin), 아브린(abrin), 리보뉴클레아제(ribonuclaease), 온코나아제(onconase), rapLR1, DNase I, 스타필로코커스 장독소-A(Staphylococcal enterotoxin-A), 미국자리공 항바이러스 단백질(pokeweed antiviral protein), 겔로닌(gelonin), 디프테리아 독소, 슈도모나스 외독소(Pseudomonas exotoxin), 슈도모나스 내독소(Pseudomonas endotoxin), 질소 머스타드, 에틸렌이민 유도체, 알킬 술포네이트(alkyl sulfonate), 니트로소우레아(nitrosourea), 트리아젠(triazene), 엽산 유사체, 안트라사이클린(anthracycline), COX-2 억제제, 피리미딘 유사체, 퓨린 유사체, 항생물질, 에피포도필로톡신(epipodophyllotoxin), 백금 동등 복합체(platinum coordination complex), 빈카 알카로이드(vinca alkaloid), 치환된 우레아, 메틸 히드라진 유도체, 부신 피질 억제제(adrenocortical suppressant), 길항제, 엔도스 타틴(endostatin), 사이토카인(cytokine), 인터류킨(interleukin), 인터페론(interferon), 림포카인(lymphokine), 종양 괴사 인자(tumor necrosis factor), 안티센스 올리고뉴클레오타이드(antisense oligonucleotide), 간섭 RNA(interference RNA) 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되고, 상기 방사성핵종은 ¹⁸F, ³²P, ³³P, ⁴⁵Ti, ⁴⁷Sc, ⁵²Fe, ⁵⁹Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ⁷⁵Se, ⁷⁷As, ⁸⁶Y, ⁸⁹Sr, ⁸⁹Zr, ⁹⁰Y, ⁹⁴Tc, ^{99 m}Tc, ⁹⁹Mo, ^{99 m}Tc, ¹⁰⁵Pd, ¹⁰⁵Rh, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²³I, ¹²⁴I, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁴³Pr, ¹⁴⁹Pm, ¹⁵³Sm, ^154-158Gd, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁶⁹Er, ¹⁷⁵Lu, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ¹⁹⁴Ir, ¹⁹⁸Au, ¹⁹⁹Au, ²¹¹At, ²¹¹Pb, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁵Ac 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택됨을 특징으로 하는 구조체.86. The method of claim 85, wherein the treatment site is aplidin, azaribine, anastrozole, azacytidine, bleomycin, bortezomib, brio Statin-1, busulfan, camptothecin, 10-hydroxycamptothecin, carmustine, celebrex, chlorambucil Cisplatin, irinotecan (CPT-11), SN-38, carboplatin, cladribine, cyclophosphamide, cytarabine, dacarbazine ( dacarbazine, docetaxel, dactinomycin, daunomycin, daunomycin, glucuronide, daunorubicin, dexamethasone, dexamethasone, diethylstilbestrol, diethylstilbestrol Doxorubicin and its analogues, doxorubicin glucuro Naid, epirubicin glucuronide, ethinyl estradiol, estramustine, etoposide, etoposide glucuronide, etoposide phosphate, phloxuridine (floxuridine; FUdR), 3 ', 5'-O-dioleoyl-FudR (3', 5'-O-dioleoyl-FudR; FUdR-dO), fludarabine, flutamide Fluorouracil, fluoxymesterone, gemcitabine, hydroxyprogesterone caproate, hydroxyurea, idarubicin, idarubicin, phosphamide ifosfamide, L-asparaginase, leucovorin, lomustine, mechlorethamine, medroprogesterone acetate, megestrol acetate acetate), melphalan, mercapto Purine (mercaptopurine), 6-mercaptopurine, methotrexate, mitoxantrone, mithramycin, mitomycin, mitomyne, mitotane, phenyl butyrate, phenyl butyrate prednisone, procarbazine, paclitaxel, pentostatin, semustine streptozocin, tamoxifen, taxanes, taxol, testosterone propionate ( testosterone propionate, thalidomide, thioguanine, thiotepa, teniposide, topotecan, uracil mustard, vinciline, vinblastine, vinblastine vinorelbine, vincristine, lysine, abrain, ribonuclaease, onconase, rapLR1, DNase I, Staphylococcal enterotoxin-A -A), USA Rigong antiviral protein (pokeweed antiviral protein), gel Ronin (gelonin), diphtheria toxin, Pseudomonas exotoxin (Pseudomonas exotoxin), Pseudomonas endotoxin (Pseudomonas endotoxin), nitrogen mustards, ethylenimine derivatives, alkyl sulfonates (alkyl sulfonate), Nitro Nitrosourea, triazene, folic acid analogs, anthracycline, COX-2 inhibitors, pyrimidine analogs, purine analogs, antibiotics, epipipodophyllotoxin, platinum coordination complex, vinca alkaloid, substituted urea, methyl hydrazine derivative, adrenocortical suppressant, antagonist, endostatin, cytokine, interleukin, interferon , Lymphokine, tumor necrosis factor, antisense oligonucleotide, liver Is selected from the group consisting of interference RNA and combinations thereof, and the radionuclide is ¹⁸ F, ³² P, ³³ P, ⁴⁵ Ti, ⁴⁷ Sc, ⁵² Fe, ⁵⁹ Fe, ⁶² Cu, ⁶⁴ Cu, ⁶⁷ Cu , ⁶⁷ Ga, ⁶⁸ Ga, ⁷⁵ Se, ⁷⁷ As, ⁸⁶ Y, ⁸⁹ Sr, ⁸⁹ Zr, ⁹⁰ Y, ⁹⁴ Tc, ^{99 m} Tc, ⁹⁹ Mo, ^{99 m} Tc, ¹⁰⁵ Pd, ¹⁰⁵ Rh, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In , ¹²³ I, ¹²⁴ I, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁴³ Pr, ¹⁴⁹ Pm, ¹⁵³ Sm, ^154-158 Gd, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁶⁹ Er, ¹⁷⁵ Lu, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re , ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ¹⁹⁴ Ir, ¹⁹⁸ Au, ¹⁹⁹ Au, ²¹¹ At, ²¹¹ Pb, ²¹² Bi, ²¹² Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁵ Ac, and combinations thereof . 제 83항에 있어서, 상기 진단 부위는 광활성제 또는 염료, 방사선비투과성 물질(radioopaque material), 조영제, 형광 화합물, 증강제(enhancing agent), 광산란 금속 콜로이드 입자(light scattering metal colloid particle), 방사선영상 금속 킬레이트(radioimaging metal chelate), 방사성핵종 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되며, 여기에서 상기 방사성핵종은 ¹⁸F, ⁴⁵Ti, ⁵²Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁹⁰Y, ^{99 m}Tc, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁵³Sm, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ²¹¹At, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁵Ac 및 이들의 조합으로 이루어 진 군에서 선택되는 것임을 특징으로 하는 구조체.84. The method of claim 83, wherein the diagnostic site is a photoactive agent or dye, a radioopaque material, a contrast agent, a fluorescent compound, an enhancing agent, a light scattering metal colloid particle, a radiographic metal Selected from the group consisting of chelates (radioimaging metal chelates), radionuclides and combinations thereof, wherein the radionuclides are ¹⁸ F, ⁴⁵ Ti, ⁵² Fe, ⁶² Cu, ⁶⁴ Cu, ⁶⁷ Cu, ⁶⁷ Ga, ⁹⁰ Y, ^{99 m} Tc, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁵³ Sm, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re, ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ²¹¹ At, ²¹² Bi, ²¹² A structure characterized in that it is selected from the group consisting of Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁵ Ac and combinations thereof. 제 80항에 있어서, 상기 구조체는 포유동물 세포에 결합됨을 특징으로 하는 구조체.81. The construct of claim 80, wherein said construct is bound to a mammalian cell. 제 80항에 있어서, 상기 구조체는 포유동물 안에 존재하는 것임을 특징으로 하는 구조체.81. The construct of claim 80, wherein said construct is in a mammal. 표적가능한 구조체에 결합하기에 적절한 결합 부위; 및Binding sites suitable for binding to the targetable construct; And 내재화 부위;Internalization sites; 를 포함하는 포유동물의 혈액순환으로부터 표적가능한 구조체를 제거하기에 적절한 제거제.Appropriate remover for removing a targetable structure from the blood circulation of a mammal comprising a. 제 89항에 있어서, 상기 내재화 부위는 엽산 수용체에 의해 결합되는 부위를 포함함을 특징으로 하는 제거제.90. The remover of claim 89, wherein said internalization site comprises a site that is bound by a folic acid receptor. 제 90항에 있어서, 상기 부위는 엽산을 포함하는 엽산 수용체에 의해 결합되는 것임을 특징으로 하는 제거제.91. The remover of claim 90, wherein said site is bound by a folic acid receptor comprising folic acid. 제 90항에 있어서, 상기 부위는 메토트렉세이트(methotrexate)를 포함하는 엽산 수용체에 의해 결합되는 것임을 특징으로 하는 제거제.93. The remover of claim 90, wherein said site is bound by a folic acid receptor comprising methotrexate. 제 89항에 있어서, 상기 내재화 부위는 비수용체 조정 내재화 펩타이드를 포함함을 특징으로 하는 제거제.90. The remover of claim 89, wherein said internalization site comprises a non-receptor modulating internalization peptide. 제 89항에 있어서, 상기 내재화 부위는 재생 세포 표면 수용체에 의해 결합되는 것임을 특징으로 하는 제거제.90. The remover of claim 89, wherein said internalization site is bound by a regenerative cell surface receptor. 제 89항에 있어서, 상기 제거제는 표적가능한 구조체에 결합하기에 적절한 둘 이상의 결합 부위들을 더 포함함을 특징으로 하는 제거제.90. The remover of claim 89, wherein said remover further comprises two or more binding sites suitable for binding to the targetable construct. 제 89항에 있어서, 상기 제거제는 하나 이상의 항체 또는 항체 단편을 더 포함함을 특징으로 하는 제거제.90. The remover of claim 89, wherein said remover further comprises one or more antibodies or antibody fragments. 제 96항에 있어서, 상기 항체 또는 항체 단편은 IgG 항체 또는 항체 단편임을 특징으로 하는 제거제.97. The remover of claim 96, wherein said antibody or antibody fragment is an IgG antibody or antibody fragment. 제 97항에 있어서, 상기 IgG 항체는 IgG1 항체를 포함함을 특징으로 하는 제거제.98. The remover of claim 97, wherein said IgG antibody comprises an IgGl antibody. 제 97항에 있어서, 상기 IgG 항체 단편은 C_H2가 제거된 것이고, 이를 제거하지 않은 대응하는 IgG 항체 보다 빠르게 혈액순환으로부터 제거되는 것임을 특징으로 하는 제거제.98. The remover of claim 97, wherein said IgG antibody fragment is removed from C _H 2 and removed from the blood circulation faster than the corresponding IgG antibody which did not remove it. 제 97항에 있어서, 상기 항체 또는 항체 단편은 갈락토오스로 변형된 것임을 특징으로 하는 제거제.98. The remover of claim 97, wherein said antibody or antibody fragment is modified with galactose. 하나 이상의 일차 표적 제제 결합 부위 및 내재화 제제와 결합하는 내재화 제제 결합 부위를 포함하는 분자 복합체.A molecular complex comprising at least one primary target agent binding site and an internalization agent binding site that binds to the internalization agent. 제 101항에 있어서, 상기 표적가능한 구조체는 제거제 결합 부위를 더 포함함을 특징으로 하는 복합체.102. The complex of claim 101, wherein said targetable construct further comprises an remover binding site. 제 101항에 있어서, 상기 내재화 제제는 표적가능한 구조체 결합 부위 및 내재화 부위를 포함함을 특징으로 하는 복합체.102. The complex of claim 101, wherein said internalization agent comprises a targetable construct binding site and an internalization site. 제 103항에 있어서, 상기 내재화 부위는 엽산 수용체에 의하여 결합되는 부위를 포함함을 특징으로 하는 복합체.109. The complex of claim 103, wherein said internalization site comprises a site bound by a folic acid receptor. 제 104항에 있어서, 상기 부위는 엽산을 포함하는 엽산 수용체에 의해 결합됨을 특징으로 하는 복합체.107. The complex of claim 104, wherein said site is bound by a folic acid receptor comprising folic acid. 제 103항에 있어서, 상기 부위는 메토트렉세이트(methotrexate)를 포함하는 엽산 수용체에 의해 결합되는 것임을 특징으로 하는 복합체.107. The complex of claim 103, wherein said site is bound by a folic acid receptor comprising methotrexate. 제 103항에 있어서, 상기 내재화 부위는 비수용체 조정 내재화 펩타이드를 포함함을 특징으로 하는 복합체.107. The complex of claim 103, wherein said internalization site comprises a non-receptor modulating internalization peptide. 제 101항에 있어서, 상기 표적가능한 구조체는 치료 또는 진단 부위를 더 포함함을 특징으로 하는 복합체.102. The complex of claim 101, wherein said targetable construct further comprises a therapeutic or diagnostic site. 제 108항에 있어서, 상기 치료 부위는 약물, 독소, 프로드럭, 효소, 약물에 대하여 프로드럭을 활성화시키는 효소, 효소 억제제, 뉴클레아제, 호르몬, 호르몬 길항제, 면역조절제, 올리고뉴클레오타이드, 붕소 화합물, 광활성제 또는 염료, 방사성핵종 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택된 것임을 특징으로 하는 복합체.109. The method of claim 108, wherein the treatment site is a drug, toxin, prodrug, enzyme, enzyme, enzyme inhibitor, nuclease, hormone, hormone antagonist, immunomodulator, oligonucleotide, boron compound, And a photoactive agent or dye, radionuclide and combinations thereof. 제 109항에 있어서, 상기 치료 부위는 상기 치료 부위는 애플리딘(aplidin), 아자리빈(azaribine), 아나스트로졸(anastrozole), 아자시티딘(azacytidine), 블레 오마이신(bleomycin), 보르테조미브(bortezomib), 브리오스타틴-1(bryostatin-1), 부술판(busulfan), 캄포테신(camptothecin), 10-히드록시캄포테신(10-hydroxycamptothecin), 카무스틴(carmustine), 세레브렉스(celebrex), 클로람부실(chlorambucil), 시스플라틴(cisplatin), 이리노테칸(irinotecan; CPT-11), SN-38, 카보플라틴(carboplatin), 클라드리빈(cladribine), 사이클로포스파미드(cyclophosphamide), 시타라빈(cytarabine), 다카르바진(dacarbazine), 도세탁셀(docetaxel), 닥티노마이신(dactinomycin), 다우노마이신(daunomycin), 글루쿠로나이드(glucuronide), 다우노루비신(daunorubicin), 덱사메타손(dexamethasone), 디에틸스틸베스트롤(diethylstilbestrol), 독소루비신(doxorubicin) 및 그 유사체들, 독소루비신 글루쿠로나이드, 에피루비신 글루쿠로나이드(epirubicin glucuronide), 에티닐 에스트라디올(ethinyl estradiol), 에스트라무스틴(estramustine), 에토포사이드(etoposide), 에토포사이드 글루쿠로나이드, 에토포사이드 포스페이트, 플록수리딘(floxuridine; FUdR), 3',5'-O-디오레오일-FudR(3',5'-O-dioleoyl-FudR; FUdR-dO), 플루다라빈(fludarabine), 플루타미드(flutamide), 플루오로우라실(fluorouracil), 플루옥시메스테론(fluoxymesterone), 겜시타빈(gemcitabine), 히드록시프로게스테론 카프로에이트(hydroxyprogesterone caproate), 히드록시우레아(hydroxyurea), 이다루비신(idarubicin), 이포스파미드(ifosfamide), L-아스파라기나아제(L-asparaginase), 류코보린(leucovorin), 로무스틴(lomustine), 메클로레타민(mechlorethamine), 메드로프로게스테론 아세테이트(medroprogesterone acetate), 메게스트롤 아세테이트(megestrol acetate), 멜파란(melphalan), 메르캅 토퓨린(mercaptopurine), 6-메르캅토퓨린, 메토트렉세이트(methotrexate), 미톡산트론(mitoxantrone), 미트라마이신(mithramycin), 미토마이신(mitomycin), 미토탄(mitotane), 페닐 부티레이트(phenyl butyrate), 프레드니손(prednisone), 프로카르바진(procarbazine), 파클리탁셀(paclitaxel), 펜토스타틴(pentostatin), 세무스틴 스트렙토조신(semustine streptozocin), 타목시펜(tamoxifen), 탁산(taxanes), 탁솔(taxol), 테스토스테론 프로피오네이트(testosterone propionate), 탈리도마이드(thalidomide), 티오구아닌(thioguanine), 티오테파(thiotepa), 테니포사이드(teniposide), 토포테칸(topotecan), 우라실 머스타드(uracil mustard), 빈블라스틴(vinblastine), 비노렐빈(vinorelbine), 빈크리스틴(vincristine), 리신(ricin), 아브린(abrin), 리보뉴클레아제(ribonuclaease), 온코나아제(onconase), rapLR1, DNase I, 스타필로코커스 장독소-A(Staphylococcal enterotoxin-A), 미국자리공 항바이러스 단백질(pokeweed antiviral protein), 겔로닌(gelonin), 디프테리아 독소, 슈도모나스 외독소(Pseudomonas exotoxin), 슈도모나스 내독소(Pseudomonas endotoxin), 질소 머스타드, 에틸렌이민 유도체, 알킬 술포네이트(alkyl sulfonate), 니트로소우레아(nitrosourea), 트리아젠(triazene), 엽산 유사체, 안트라사이클린(anthracycline), COX-2 억제제, 피리미딘 유사체, 퓨린 유사체, 항생물질, 에피포도필로톡신(epipodophyllotoxin), 백금 동등 복합체(platinum coordination complex), 빈카 알카로이드(vinca alkaloid), 치환된 우레아, 메틸 히드라진 유도체, 부신 피질 억제제(adrenocortical suppressant), 길항제, 엔도스타틴(endostatin), 사이토카인(cytokine), 인터류킨(interleukin), 인터페론 (interferon), 림포카인(lymphokine), 종양 괴사 인자(tumor necrosis factor), 안티센스 올리고뉴클레오타이드(antisense oligonucleotide), 간섭 RNA(interference RNA) 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되고, 상기 방사성핵종은 ¹⁸F, ³²P, ³³P, ⁴⁵Ti, ⁴⁷Sc, ⁵²Fe, ⁵⁹Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ⁷⁵Se, ⁷⁷As, ⁸⁶Y, ⁸⁹Sr, ⁸⁹Zr, ⁹⁰Y, ⁹⁴Tc, ^{99 m}Tc, ⁹⁹Mo, ^{99 m}Tc, ¹⁰⁵Pd, ¹⁰⁵Rh, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²³I, ¹²⁴I, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁴³Pr, ¹⁴⁹Pm, ¹⁵³Sm, ^154-158Gd, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁶⁹Er, ¹⁷⁵Lu, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ¹⁹⁴Ir, ¹⁹⁸Au, ¹⁹⁹Au, ²¹¹At, ²¹¹Pb, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁵Ac 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택됨을 특징으로 하는 복합체.109. The therapeutic site of claim 109, wherein the therapeutic site is aplidin, azaribine, anastrozole, azacytidine, bleomycin, bortezomib (bortezomib), bryostatin-1, busulfan, camptothecin, 10-hydroxycamptothecin, carmustine, celebrex, claw Chlorambucil, cisplatin, irinotecan (CPT-11), SN-38, carboplatin, cladribine, cyclophosphamide, cytarabine ), Dacarbazine, docetaxel, dactinomycin, daunomycin, glucuronide, daunorubicin, dexamethasone, dexamethasone, diethylstil Diethylstilbestrol, doxorubicin and its analogs, venom Sorubicin glucuronide, epirubicin glucuronide, ethinyl estradiol, estramustine, etoposide, etoposide glucuronide, etoposide Phosphate, floxuridine (FUdR), 3 ', 5'-O-dioleoyl-FudR (3', 5'-O-dioleoyl-FudR; FUdR-dO), fludarabine, flu Tamide, fluorouracil, fluoxymesterone, gemcitabine, hydroxyprogesterone caproate, hydroxyurea, idarubicin , Ifosfamide, L-asparaginase, leucovorin, lomustine, mechlorethamine, meroprogesterone acetate, medroprogesterone acetate Megestrol Acetate, Melparan (melphalan), mercaptopurine, 6-mercaptopurine, methotrexate, mitoxantrone, mithramycin, mitomycin, mitomycin, mitotane, phenyl butyrate (phenyl butyrate), prednisone, procarbazine, procarbazine, paclitaxel, pentostatin, semustine streptozocin, tamoxifen, taxanes, taxol ), Testosterone propionate, thalidomide, thioguanine, thiotepa, teniposide, topotecan, uracil mustard, vinciltine (vinblastine), vinorelbine, vincristine, lysine, ricin, abrin, ribonuclaease, onconase, rapLR1, DNase I, staphylococcus Enterotoxin-A ( Staphylococca l enterotoxin-A), Phytolacca americana antiviral protein (pokeweed antiviral protein), gel Ronin (gelonin), diphtheria toxin, Pseudomonas exotoxin (Pseudomonas exotoxin), Pseudomonas endotoxin (Pseudomonas endotoxin), nitrogen mustards, ethylenimine derivatives, alkyl sulfonates Alkyl sulfonate, nitrosourea, triazene, folic acid analogs, anthracycline, COX-2 inhibitors, pyrimidine analogs, purine analogs, antibiotics, epipipodophyllotoxins , Platinum coordination complex, vinca alkaloid, substituted urea, methyl hydrazine derivative, adrenocortical suppressant, antagonist, endostatin, cytokine, interleukin , Interferon, lymphokine, tumor necrosis factor, antisense oligonucleotides ense oligonucleotides, interference RNAs, and combinations thereof, and the radionuclides are ¹⁸ F, ³² P, ³³ P, ⁴⁵ Ti, ⁴⁷ Sc, ⁵² Fe, ⁵⁹ Fe, ⁶² Cu, ⁶⁴ Cu, ⁶⁷ Cu, ⁶⁷ Ga, ⁶⁸ Ga, ⁷⁵ Se, ⁷⁷ As, ⁸⁶ Y, ⁸⁹ Sr, ⁸⁹ Zr, ⁹⁰ Y, ⁹⁴ Tc, ^{99 m} Tc, ⁹⁹ Mo, ^{99 m} Tc, ¹⁰⁵ Pd, ¹⁰⁵ Rh, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In, ¹²³ I, ¹²⁴ I, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁴³ Pr, ¹⁴⁹ Pm, ¹⁵³ Sm, ^154-158 Gd, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁶⁹ Er, ¹⁷⁵ Lu, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re, ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ¹⁹⁴ Ir, ¹⁹⁸ Au, ¹⁹⁹ Au, ²¹¹ At, ²¹¹ Pb, ²¹² Bi, ²¹² Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁵ Ac, and combinations thereof Characterized by a complex. 제 108항에 있어서, 상기 진단 부위는 광활성제 또는 염료, 방사선비투과성 물질(radioopaque material), 조영제, 형광 화합물, 증강제(enhancing agent), 광산란 금속 콜로이드 입자(light scattering metal colloid particle), 방사선영상 금속 킬레이트(radioimaging metal chelate), 방사성핵종 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되며, 여기에서 상기 방사성핵종은 ¹⁸F, ⁴⁵Ti, ⁵²Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Ga, ⁹⁰Y, ^{99 m}Tci, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁵³Sm, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ²¹¹At, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁵Ac 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 것임을 특징으로 하는 복합체.109. The method of claim 108, wherein the diagnostic site is a photoactive agent or dye, a radioopaque material, a contrast agent, a fluorescent compound, an enhancing agent, a light scattering metal colloid particle, a radiographic metal Selected from the group consisting of chelates (radioimaging metal chelates), radionuclides and combinations thereof, wherein the radionuclides are ¹⁸ F, ⁴⁵ Ti, ⁵² Fe, ⁶² Cu, ⁶⁴ Cu, ⁶⁷ Ga, ⁹⁰ Y, ^{99 m} Tci , ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁵³ Sm, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re, ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ²¹¹ At, ²¹² Bi, ²¹² Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁵ Ac and combinations thereof, characterized in that selected from the group consisting of. 제 101항에 있어서, 상기 복합체는 포유동물 세포에 결합됨을 특징으로 하는 복합체.102. The complex of claim 101, wherein said complex is bound to a mammalian cell. 제 101항에 있어서, 상기 복합체는 포유동물 안에 존재함을 특징으로 하는 복합체.102. The complex of claim 101, wherein said complex is in a mammal. 하나 이상의 일차 표적 제제 결합 부위, 제거제 결합 부위 및 제거제와 결합되는 치료 또는 진단 부위를 포함하는 표적가능한 구조체를 포함하는 분자 복합체.A molecular complex comprising at least one primary target agent binding site, a remover binding site, and a targetable construct comprising a therapeutic or diagnostic site associated with the remover. 제 114항에 있어서, 상기 일차 표적 제제 결합 부위 및 상기 제거제 결합 부위는 직교(orthogonal) 부착소를 포함함을 특징으로 하는 복합체.119. The complex of claim 114, wherein the primary target agent binding site and the remover binding site comprise orthogonal attachments. 제 115항에 있어서, 제거제에 의해 교차결합되는 둘 이상의 표적가능한 구조체들을 더 포함함을 특징으로 하는 복합체.116. The complex of claim 115, further comprising two or more targetable structures that are crosslinked by a remover. 제 114항에 있어서, 일차 표적 제제를 더 포함하고, 상기 복합체가 표적 부위에서 결합됨을 특징으로 하는 복합체.116. The complex of claim 114, further comprising a primary target agent, wherein the complex is bound at the target site. 제 117항에 있어서, 상기 복합체는 포유동물 세포에 결합됨을 특징으로 하는 복합체.118. The complex of claim 117, wherein said complex is bound to a mammalian cell. 제 117항에 있어서, 상기 복합체는 포유동물 안에 존재함을 특징으로 하는 복합체.118. The complex of claim 117, wherein said complex is in a mammal. 제 114항에 있어서, 상기 치료 부위는 약물, 독소, 프로드럭, 효소, 약물에 대하여 프로드럭을 활성화시키는 효소, 효소 억제제, 뉴클레아제, 호르몬, 호르몬 길항제, 면역조절제, 올리고뉴클레오타이드, 붕소 화합물, 광활성제 또는 염료, 방사성핵종 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택된 것임을 특징으로 하는 복합체.119. The method of claim 114, wherein the therapeutic site is a drug, toxin, prodrug, enzyme, enzyme, enzyme inhibitor, nuclease, hormone, hormonal antagonist, immunomodulator, oligonucleotide, boron compound, And a photoactive agent or dye, radionuclide and combinations thereof. 제 120항에 있어서, 상기 치료 부위는 애플리딘(aplidin), 아자리빈(azaribine), 아나스트로졸(anastrozole), 아자시티딘(azacytidine), 블레오마이신(bleomycin), 보르테조미브(bortezomib), 브리오스타틴-1(bryostatin-1), 부술판(busulfan), 캄포테신(camptothecin), 10-히드록시캄포테신(10-hydroxycamptothecin), 카무스틴(carmustine), 세레브렉스(celebrex), 클로람부실(chlorambucil), 시스플라틴(cisplatin), 이리노테칸(irinotecan; CPT-11), SN-38, 카보플라틴(carboplatin), 클라드리빈(cladribine), 사이클로포스파미드(cyclophosphamide), 시타라빈(cytarabine), 다카르바진(dacarbazine), 도세탁셀(docetaxel), 닥티노마이신(dactinomycin), 다우노마이신(daunomycin), 글루쿠로나 이드(glucuronide), 다우노루비신(daunorubicin), 덱사메타손(dexamethasone), 디에틸스틸베스트롤(diethylstilbestrol), 독소루비신(doxorubicin) 및 그 유사체들, 독소루비신 글루쿠로나이드, 에피루비신 글루쿠로나이드(epirubicin glucuronide), 에티닐 에스트라디올(ethinyl estradiol), 에스트라무스틴(estramustine), 에토포사이드(etoposide), 에토포사이드 글루쿠로나이드, 에토포사이드 포스페이트, 플록수리딘(floxuridine; FUdR), 3',5'-O-디오레오일-FudR(3',5'-O-dioleoyl-FudR; FUdR-dO), 플루다라빈(fludarabine), 플루타미드(flutamide), 플루오로우라실(fluorouracil), 플루옥시메스테론(fluoxymesterone), 겜시타빈(gemcitabine), 히드록시프로게스테론 카프로에이트(hydroxyprogesterone caproate), 히드록시우레아(hydroxyurea), 이다루비신(idarubicin), 이포스파미드(ifosfamide), L-아스파라기나아제(L-asparaginase), 류코보린(leucovorin), 로무스틴(lomustine), 메클로레타민(mechlorethamine), 메드로프로게스테론 아세테이트(medroprogesterone acetate), 메게스트롤 아세테이트(megestrol acetate), 멜파란(melphalan), 메르캅토퓨린(mercaptopurine), 6-메르캅토퓨린, 메토트렉세이트(methotrexate), 미톡산트론(mitoxantrone), 미트라마이신(mithramycin), 미토마이신(mitomycin), 미토탄(mitotane), 페닐 부티레이트(phenyl butyrate), 프레드니손(prednisone), 프로카르바진(procarbazine), 파클리탁셀(paclitaxel), 펜토스타틴(pentostatin), 세무스틴 스트렙토조신(semustine streptozocin), 타목시펜(tamoxifen), 탁산(taxanes), 탁솔(taxol), 테스토스테론 프로피오네이트(testosterone propionate), 탈리도마이드(thalidomide), 티오구아닌(thioguanine), 티오테파(thiotepa), 테니포사이드 (teniposide), 토포테칸(topotecan), 우라실 머스타드(uracil mustard), 빈블라스틴(vinblastine), 비노렐빈(vinorelbine), 빈크리스틴(vincristine), 리신(ricin), 아브린(abrin), 리보뉴클레아제(ribonuclaease), 온코나아제(onconase), rapLR1, DNase I, 스타필로코커스 장독소-A(Staphylococcal enterotoxin-A), 미국자리공 항바이러스 단백질(pokeweed antiviral protein), 겔로닌(gelonin), 디프테리아 독소, 슈도모나스 외독소(Pseudomonas exotoxin), 슈도모나스 내독소(Pseudomonas endotoxin), 질소 머스타드, 에틸렌이민 유도체, 알킬 술포네이트(alkyl sulfonate), 니트로소우레아(nitrosourea), 트리아젠(triazene), 엽산 유사체, 안트라사이클린(anthracycline), COX-2 억제제, 피리미딘 유사체, 퓨린 유사체, 항생물질, 에피포도필로톡신(epipodophyllotoxin), 백금 동등 복합체(platinum coordination complex), 빈카 알카로이드(vinca alkaloid), 치환된 우레아, 메틸 히드라진 유도체, 부신 피질 억제제(adrenocortical suppressant), 길항제, 엔도스타틴(endostatin), 사이토카인(cytokine), 인터류킨(interleukin), 인터페론(interferon), 림포카인(lymphokine), 종양 괴사 인자(tumor necrosis factor), 안티센스 올리고뉴클레오타이드(antisense oligonucleotide), 간섭 RNA(interference RNA) 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되고, 상기 방사성핵종은 ¹⁸F, ³²P, ³³P, ⁴⁵Ti, ⁴⁷Sc, ⁵²Fe, ⁵⁹Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ⁷⁵Se, ⁷⁷As, ⁸⁶Y, ⁸⁹Sr, ⁸⁹Zr, ⁹⁰Y, ⁹⁴Tc, ^{99 m}Tc, ⁹⁹Mo, ^{99 m}Tc, ¹⁰⁵Pd, ¹⁰⁵Rh, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²³I, ¹²⁴I, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁴³Pr, ¹⁴⁹Pm, ¹⁵³Sm, ^154-158Gd, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁶⁹Er, ¹⁷⁵Lu, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ¹⁹⁴Ir, ¹⁹⁸Au, ¹⁹⁹Au, ²¹¹At, ²¹¹Pb, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁵Ac 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택됨을 특징으로 하는 복합체.121. The method of claim 120, wherein the treatment site is aplidin, azaribine, anastrozole, azacytidine, bleomycin, bortezomib, brio Statin-1, busulfan, camptothecin, 10-hydroxycamptothecin, carmustine, celebrex, chlorambucil Cisplatin, irinotecan (CPT-11), SN-38, carboplatin, cladribine, cyclophosphamide, cytarabine, dacarbazine ( dacarbazine, docetaxel, docetaxel, dactinomycin, daunomycin, glucuronide, daunorubicin, dexamethasone, dexamethasone, diethylstilbestol Doxorubicin and its analogs, doxorubicin glucu Naid, epirubicin glucuronide, ethinyl estradiol, estramustine, etoposide, etoposide glucuronide, etoposide phosphate, phloxuridine (floxuridine; FUdR), 3 ', 5'-O-dioleoyl-FudR (3', 5'-O-dioleoyl-FudR; FUdR-dO), fludarabine, flutamide Fluorouracil, fluoxymesterone, gemcitabine, hydroxyprogesterone caproate, hydroxyurea, idarubicin, idarubicin, phosphamide ifosfamide, L-asparaginase, leucovorin, lomustine, mechlorethamine, medroprogesterone acetate, megestrol acetate acetate), melphalan, mercap Purine (mercaptopurine), 6-mercaptopurine, methotrexate, mitoxantrone, mithramycin, mitomycin, mitomyne, mitotane, phenyl butyrate, phenyl butyrate prednisone, procarbazine, paclitaxel, pentostatin, semustine streptozocin, tamoxifen, taxanes, taxol, testosterone propionate ( testosterone propionate, thalidomide, thioguanine, thiotepa, teniposide, topotecan, uracil mustard, vinciline, vinblastine, vinblastine vinorelbine, vincristine, lysine, abrain, ribonuclaease, onconase, rapLR1, DNase I, Staphylococcal enterotoxin-A -A), USA Jarigong antiviral protein (pokeweed antiviral protein), gel Ronin (gelonin), diphtheria toxin, Pseudomonas exotoxin (Pseudomonas exotoxin), Pseudomonas endotoxin (Pseudomonas endotoxin), nitrogen mustards, ethylenimine derivatives, alkyl sulfonates (alkyl sulfonate), Nitro Nitrosourea, triazene, folic acid analogs, anthracycline, COX-2 inhibitors, pyrimidine analogs, purine analogs, antibiotics, epipipodophyllotoxin, platinum coordination complex, vinca alkaloid, substituted urea, methyl hydrazine derivatives, adrenocortical suppressant, antagonist, endostatin, cytokine, interleukin, interferon, rim Lymphokine, tumor necrosis factor, antisense oligonucleotide, Is selected from the group consisting of interference RNA (interference RNA), and combinations thereof, wherein the radionuclide is ^{18 F, 32 P, 33 P} , 45 Ti, 47 Sc, 52 Fe, 59 Fe, 62 Cu, 64 Cu, 67 Cu , ⁶⁷ Ga, ⁶⁸ Ga, ⁷⁵ Se, ⁷⁷ As, ⁸⁶ Y, ⁸⁹ Sr, ⁸⁹ Zr, ⁹⁰ Y, ⁹⁴ Tc, ^{99 m} Tc, ⁹⁹ Mo, ^{99 m} Tc, ¹⁰⁵ Pd, ¹⁰⁵ Rh, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In , ¹²³ I, ¹²⁴ I, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁴³ Pr, ¹⁴⁹ Pm, ¹⁵³ Sm, ^154-158 Gd, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁶⁹ Er, ¹⁷⁵ Lu, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re , ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ¹⁹⁴ Ir, ¹⁹⁸ Au, ¹⁹⁹ Au, ²¹¹ At, ²¹¹ Pb, ²¹² Bi, ²¹² Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁵ Ac and combinations thereof . 제 114항에 있어서, 상기 진단 부위는 광활성제 또는 염료, 방사선비투과성 물질(radioopaque material), 조영제, 형광 화합물, 증강제(enhancing agent), 광산란 금속 콜로이드 입자(light scattering metal colloid particle), 방사선영상 금속 킬레이트(radioimaging metal chelate), 방사성핵종 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되며, 여기에서 상기 방사성핵종은 ¹⁸F, ⁴⁵Ti, ⁵²Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁹⁰Y, ^{99 m}Tc, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁵³Sm, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ²¹¹At, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁵Ac 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 것임을 특징으로 하는 복합체.116. The method of claim 114, wherein the diagnostic site is a photoactive agent or dye, a radioopaque material, a contrast agent, a fluorescent compound, an enhancing agent, a light scattering metal colloid particle, a radiographic metal Selected from the group consisting of chelates (radioimaging metal chelates), radionuclides and combinations thereof, wherein the radionuclides are ¹⁸ F, ⁴⁵ Ti, ⁵² Fe, ⁶² Cu, ⁶⁴ Cu, ⁶⁷ Cu, ⁶⁷ Ga, ⁹⁰ Y, ^{99 m} Tc, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁵³ Sm, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re, ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ²¹¹ At, ²¹² Bi, ²¹² Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁵ Ac, and combinations thereof. 표적 결합 부위 및 다수의 일차 표적 제제 결합 부위들을 포함하는 다가의 표적가능한 구조체와 결합하는 다수의 표적가능한 구조체 결합 부위들을 포함하는 다가 일차 표적 제제; 제거제 결합 부위 및 치료 또는 진단 부위를 포함하는 분자 복합체.A multivalent primary target agent comprising a plurality of targetable construct binding sites that bind to a multivalent targetable construct comprising a target binding site and a plurality of primary target agent binding sites; A molecular complex comprising a remover binding site and a therapeutic or diagnostic site. 제 123항에 있어서, 상기 다수의 표적가능한 구조체 결합 부위들은 다수의 항체 결합 도메인들을 포함함을 특징으로 하는 복합체.126. The complex of claim 123, wherein said plurality of targetable construct binding sites comprises a plurality of antibody binding domains. 제 123항에 있어서, 상기 다수의 일차 표적 제제 결합 부위들은 두 개의 결합 부위들임을 특징으로 하는 복합체.126. The complex of claim 123, wherein said plurality of primary target agent binding sites are two binding sites. 제 123항에 있어서, 상기 일차 표적 제제 결합 부위들은 상기 제거제 결합 부에 직교(orthogonal)됨을 특징으로 하는 복합체.126. The complex of claim 123, wherein said primary target agent binding sites are orthogonal to said remover binding site. 제 123항에 있어서, 상기 치료 부위는 약물, 독소, 프로드럭, 효소, 약물에 대하여 프로드럭을 활성화시키는 효소, 효소 억제제, 뉴클레아제, 호르몬, 호르몬 길항제, 면역조절제, 올리고뉴클레오타이드, 붕소 화합물, 광활성제 또는 염료, 방사성핵종 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택된 것임을 특징으로 하는 복합체.126. The method of claim 123, wherein the therapeutic site is a drug, toxin, prodrug, enzyme, enzyme, enzyme inhibitor, nuclease, hormone, hormone antagonist, immunomodulator, oligonucleotide, boron compound, And a photoactive agent or dye, radionuclide and combinations thereof. 제 127항에 있어서, 상기 치료 부위는 애플리딘(aplidin), 아자리빈(azaribine), 아나스트로졸(anastrozole), 아자시티딘(azacytidine), 블레오마이신(bleomycin), 보르테조미브(bortezomib), 브리오스타틴-1(bryostatin-1), 부술판(busulfan), 캄포테신(camptothecin), 10-히드록시캄포테신(10-hydroxycamptothecin), 카무스틴(carmustine), 세레브렉스(celebrex), 클로람부실 (chlorambucil), 시스플라틴(cisplatin), 이리노테칸(irinotecan; CPT-11), SN-38, 카보플라틴(carboplatin), 클라드리빈(cladribine), 사이클로포스파미드(cyclophosphamide), 시타라빈(cytarabine), 다카르바진(dacarbazine), 도세탁셀(docetaxel), 닥티노마이신(dactinomycin), 다우노마이신(daunomycin), 글루쿠로나이드(glucuronide), 다우노루비신(daunorubicin), 덱사메타손(dexamethasone), 디에틸스틸베스트롤(diethylstilbestrol), 독소루비신(doxorubicin) 및 그 유사체들, 독소루비신 글루쿠로나이드, 에피루비신 글루쿠로나이드(epirubicin glucuronide), 에티닐 에스트라디올(ethinyl estradiol), 에스트라무스틴(estramustine), 에토포사이드(etoposide), 에토포사이드 글루쿠로나이드, 에토포사이드 포스페이트, 플록수리딘(floxuridine; FUdR), 3',5'-O-디오레오일-FudR(3',5'-O-dioleoyl-FudR; FUdR-dO), 플루다라빈(fludarabine), 플루타미드(flutamide), 플루오로우라실(fluorouracil), 플루옥시메스테론(fluoxymesterone), 겜시타빈(gemcitabine), 히드록시프로게스테론 카프로에이트(hydroxyprogesterone caproate), 히드록시우레아(hydroxyurea), 이다루비신(idarubicin), 이포스파미드(ifosfamide), L-아스파라기나아제(L-asparaginase), 류코보린(leucovorin), 로무스틴(lomustine), 메클로레타민(mechlorethamine), 메드로프로게스테론 아세테이트(medroprogesterone acetate), 메게스트롤 아세테이트(megestrol acetate), 멜파란(melphalan), 메르캅토퓨린(mercaptopurine), 6-메르캅토퓨린, 메토트렉세이트(methotrexate), 미톡산트론(mitoxantrone), 미트라마이신(mithramycin), 미토마이신(mitomycin), 미토탄(mitotane), 페닐 부티레이트(phenyl butyrate), 프레드니손(prednisone), 프로카 르바진(procarbazine), 파클리탁셀(paclitaxel), 펜토스타틴(pentostatin), 세무스틴 스트렙토조신(semustine streptozocin), 타목시펜(tamoxifen), 탁산(taxanes), 탁솔(taxol), 테스토스테론 프로피오네이트(testosterone propionate), 탈리도마이드(thalidomide), 티오구아닌(thioguanine), 티오테파(thiotepa), 테니포사이드(teniposide), 토포테칸(topotecan), 우라실 머스타드(uracil mustard), 빈블라스틴(vinblastine), 비노렐빈(vinorelbine), 빈크리스틴(vincristine), 리신(ricin), 아브린(abrin), 리보뉴클레아제(ribonuclaease), 온코나아제(onconase), rapLR1, DNase I, 스타필로코커스 장독소-A(Staphylococcal enterotoxin-A), 미국자리공 항바이러스 단백질(pokeweed antiviral protein), 겔로닌(gelonin), 디프테리아 독소, 슈도모나스 외독소(Pseudomonas exotoxin), 슈도모나스 내독소(Pseudomonas endotoxin), 질소 머스타드, 에틸렌이민 유도체, 알킬 술포네이트(alkyl sulfonate), 니트로소우레아(nitrosourea), 트리아젠(triazene), 엽산 유사체, 안트라사이클린(anthracycline), COX-2 억제제, 피리미딘 유사체, 퓨린 유사체, 항생물질, 에피포도필로톡신(epipodophyllotoxin), 백금 동등 복합체(platinum coordination complex), 빈카 알카로이드(vinca alkaloid), 치환된 우레아, 메틸 히드라진 유도체, 부신 피질 억제제(adrenocortical suppressant), 길항제, 엔도스타틴(endostatin), 사이토카인(cytokine), 인터류킨(interleukin), 인터페론(interferon), 림포카인(lymphokine), 종양 괴사 인자(tumor necrosis factor), 안티센스 올리고뉴클레오타이드(antisense oligonucleotide), 간섭 RNA(interference RNA) 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되고, 상기 방사성핵종은 ¹⁸F, ³²P, ³³P, ⁴⁵Ti, ⁴⁷Sc, ⁵²Fe, ⁵⁹Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ⁷⁵Se, ⁷⁷As, ⁸⁶Y, ⁸⁹Sr, ⁸⁹Zr, ⁹⁰Y, ⁹⁴Tc, ^{99 m}Tc, ⁹⁹Mo, ^{99 m}Tc, ¹⁰⁵Pd, ¹⁰⁵Rh, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²³I, ¹²⁴I, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁴³Pr, ¹⁴⁹Pm, ¹⁵³Sm, ^154-158Gd, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁶⁹Er, ¹⁷⁵Lu, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ¹⁹⁴Ir, ¹⁹⁸Au, ¹⁹⁹Au, ²¹¹At, ²¹¹Pb, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁵Ac 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택됨을 특징으로 하는 복합체.127. The method of claim 127, wherein the treatment site is aplidin, azaribine, anastrozole, azacytidine, bleomycin, bortezomib, brio Statin-1, busulfan, camptothecin, 10-hydroxycamptothecin, carmustine, celebrex, chlorambucil Cisplatin, irinotecan (CPT-11), SN-38, carboplatin, cladribine, cyclophosphamide, cytarabine, dacarbazine ( dacarbazine, docetaxel, dactinomycin, daunomycin, daunomycin, glucuronide, daunorubicin, dexamethasone, dexamethasone, diethylstilbestrol, diethylstilbestrol Doxorubicin and its analogs, doxorubicin glucu Naid, epirubicin glucuronide, ethinyl estradiol, estramustine, etoposide, etoposide glucuronide, etoposide phosphate, phloxuridine (floxuridine; FUdR), 3 ', 5'-O-dioleoyl-FudR (3', 5'-O-dioleoyl-FudR; FUdR-dO), fludarabine, flutamide Fluorouracil, fluoxymesterone, gemcitabine, hydroxyprogesterone caproate, hydroxyurea, idarubicin, idarubicin, phosphamide ifosfamide, L-asparaginase, leucovorin, lomustine, mechlorethamine, medroprogesterone acetate, megestrol acetate acetate), melphalan, mercap Purine (mercaptopurine), 6-mercaptopurine, methotrexate, mitoxantrone, mithramycin, mitomycin, mitomyne, mitotane, phenyl butyrate, phenyl butyrate prednisone, procarbazine, paclitaxel, pentostatin, pentostatin, semustine streptozocin, tamoxifen, taxanes, taxol, testosterone propionate (testosterone propionate), thalidomide, thioguanine, thiotepa, teniposide, topotecan, uracil mustard, vinciline, vinblastine, vinblastine (vinorelbine), vincristine, lysine (ricin), abrin (abrin), ribonuclaease, onconase, rapLR1, DNase I, Staphylococcus enterotoxin-A enterotoxin-A), United States Jarigong antiviral protein (pokeweed antiviral protein), gel Ronin (gelonin), diphtheria toxin, Pseudomonas exotoxin (Pseudomonas exotoxin), Pseudomonas endotoxin (Pseudomonas endotoxin), nitrogen mustards, ethylenimine derivatives, alkyl sulfonates (alkyl sulfonate), Nitro Nitrosourea, triazene, folic acid analogs, anthracycline, COX-2 inhibitors, pyrimidine analogs, purine analogs, antibiotics, epipipodophyllotoxin, platinum coordination complex, vinca alkaloid, substituted urea, methyl hydrazine derivatives, adrenocortical suppressant, antagonist, endostatin, cytokine, interleukin, interferon, rim Lymphokine, tumor necrosis factor, antisense oligonucleotide, Is selected from the group consisting of interference RNA (interference RNA), and combinations thereof, wherein the radionuclide is ^{18 F, 32 P, 33 P} , 45 Ti, 47 Sc, 52 Fe, 59 Fe, 62 Cu, 64 Cu, 67 Cu , ⁶⁷ Ga, ⁶⁸ Ga, ⁷⁵ Se, ⁷⁷ As, ⁸⁶ Y, ⁸⁹ Sr, ⁸⁹ Zr, ⁹⁰ Y, ⁹⁴ Tc, ^{99 m} Tc, ⁹⁹ Mo, ^{99 m} Tc, ¹⁰⁵ Pd, ¹⁰⁵ Rh, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In , ¹²³ I, ¹²⁴ I, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁴³ Pr, ¹⁴⁹ Pm, ¹⁵³ Sm, ^154-158 Gd, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁶⁹ Er, ¹⁷⁵ Lu, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re , ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ¹⁹⁴ Ir, ¹⁹⁸ Au, ¹⁹⁹ Au, ²¹¹ At, ²¹¹ Pb, ²¹² Bi, ²¹² Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁵ Ac and combinations thereof . 제 123항에 있어서, 상기 진단 부위는 광활성제 또는 염료, 방사선비투과성 물질(radioopaque material), 조영제, 형광 화합물, 증강제(enhancing agent), 광산란 금속 콜로이드 입자(light scattering metal colloid particle), 방사선영상 금속 킬레이트(radioimaging metal chelate), 방사성핵종 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되며, 여기에서 상기 방사성핵종은 ¹⁸F, ⁴⁵Ti, ⁵²Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁹⁰Y, ^{99 m}Tc, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁵³Sm, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ²¹¹At, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁵Ac 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 것임을 특징으로 하는 복합체.124. The method of claim 123, wherein the diagnostic site is a photoactive agent or dye, a radioopaque material, a contrast agent, a fluorescent compound, an enhancing agent, a light scattering metal colloid particle, a radiographic metal Selected from the group consisting of chelates (radioimaging metal chelates), radionuclides and combinations thereof, wherein the radionuclides are ¹⁸ F, ⁴⁵ Ti, ⁵² Fe, ⁶² Cu, ⁶⁴ Cu, ⁶⁷ Cu, ⁶⁷ Ga, ⁹⁰ Y, ^{99 m} Tc, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁵³ Sm, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re, ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ²¹¹ At, ²¹² Bi, ²¹² Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁵ Ac, and combinations thereof. 하나 이상의 표적 결합 부위 및 하나 이상의 표적가능한 구조체 결합 부위를 포함하는 일차 표적 제제를 포함하고, A primary target agent comprising at least one target binding site and at least one targetable construct binding site, 하나 이상의 일차 표적 제제 결합 부위, 제거제 결합 부위 및 치료 또는 진단 결합 부위를 포함하는 표적가능한 구조체와 결합되며; Is associated with a targetable construct comprising at least one primary target agent binding site, a remover binding site, and a therapeutic or diagnostic binding site; 표적가능한 구조체 결합 부위 또는 제거제 결합 부위 및 내재화 부위를 포함하는 내재화 제제와 결합되는 분자 복합체.A molecular complex associated with an internalization agent comprising a targetable construct binding site or eliminator binding site and an internalization site. 제 130항에 있어서, 상기 치료 부위는 약물, 독소, 프로드럭, 효소, 약물에 대하여 프로드럭을 활성화시키는 효소, 효소 억제제, 뉴클레아제, 호르몬, 호르몬 길항제, 면역조절제, 올리고뉴클레오타이드, 붕소 화합물, 광활성제 또는 염료, 방사성핵종 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택된 것임을 특징으로 하는 복합체.131. The method of claim 130, wherein the therapeutic site is a drug, toxin, prodrug, enzyme, enzyme, enzyme inhibitor, nuclease, hormone, hormonal antagonist, immunomodulator, oligonucleotide, boron compound, And a photoactive agent or dye, radionuclide and combinations thereof. 제 131항에 있어서, 상기 치료 부위는 애플리딘(aplidin), 아자리빈(azaribine), 아나스트로졸(anastrozole), 아자시티딘(azacytidine), 블레오마이신(bleomycin), 보르테조미브(bortezomib), 브리오스타틴-1(bryostatin-1), 부술판(busulfan), 캄포테신(camptothecin), 10-히드록시캄포테신(10-hydroxycamptothecin), 카무스틴(carmustine), 세레브렉스(celebrex), 클로람부실(chlorambucil), 시스플라틴(cisplatin), 이리노테칸(irinotecan; CPT-11), SN-38, 카보플라틴(carboplatin), 클라드리빈(cladribine), 사이클로포스파미드(cyclophosphamide), 시타라빈(cytarabine), 다카르바진(dacarbazine), 도세탁셀 (docetaxel), 닥티노마이신(dactinomycin), 다우노마이신(daunomycin), 글루쿠로나이드(glucuronide), 다우노루비신(daunorubicin), 덱사메타손(dexamethasone), 디에틸스틸베스트롤(diethylstilbestrol), 독소루비신(doxorubicin) 및 그 유사체들, 독소루비신 글루쿠로나이드, 에피루비신 글루쿠로나이드(epirubicin glucuronide), 에티닐 에스트라디올(ethinyl estradiol), 에스트라무스틴(estramustine), 에토포사이드(etoposide), 에토포사이드 글루쿠로나이드, 에토포사이드 포스페이트, 플록수리딘(floxuridine; FUdR), 3',5'-O-디오레오일-FudR(3',5'-O-dioleoyl-FudR; FUdR-dO), 플루다라빈(fludarabine), 플루타미드(flutamide), 플루오로우라실(fluorouracil), 플루옥시메스테론(fluoxymesterone), 겜시타빈(gemcitabine), 히드록시프로게스테론 카프로에이트(hydroxyprogesterone caproate), 히드록시우레아(hydroxyurea), 이다루비신(idarubicin), 이포스파미드(ifosfamide), L-아스파라기나아제(L-asparaginase), 류코보린(leucovorin), 로무스틴(lomustine), 메클로레타민(mechlorethamine), 메드로프로게스테론 아세테이트(medroprogesterone acetate), 메게스트롤 아세테이트(megestrol acetate), 멜파란(melphalan), 메르캅토퓨린(mercaptopurine), 6-메르캅토퓨린, 메토트렉세이트(methotrexate), 미톡산트론(mitoxantrone), 미트라마이신(mithramycin), 미토마이신(mitomycin), 미토탄(mitotane), 페닐 부티레이트(phenyl butyrate), 프레드니손(prednisone), 프로카르바진(procarbazine), 파클리탁셀(paclitaxel), 펜토스타틴(pentostatin), 세무스틴 스트렙토조신(semustine streptozocin), 타목시펜(tamoxifen), 탁산(taxanes), 탁솔(taxol), 테스토스테론 프로피오네이트(testosterone propionate), 탈리도마이 드(thalidomide), 티오구아닌(thioguanine), 티오테파(thiotepa), 테니포사이드(teniposide), 토포테칸(topotecan), 우라실 머스타드(uracil mustard), 빈블라스틴(vinblastine), 비노렐빈(vinorelbine), 빈크리스틴(vincristine), 리신(ricin), 아브린(abrin), 리보뉴클레아제(ribonuclaease), 온코나아제(onconase), rapLR1, DNase I, 스타필로코커스 장독소-A(Staphylococcal enterotoxin-A), 미국자리공 항바이러스 단백질(pokeweed antiviral protein), 겔로닌(gelonin), 디프테리아 독소, 슈도모나스 외독소(Pseudomonas exotoxin), 슈도모나스 내독소(Pseudomonas endotoxin), 질소 머스타드, 에틸렌이민 유도체, 알킬 술포네이트(alkyl sulfonate), 니트로소우레아(nitrosourea), 트리아젠(triazene), 엽산 유사체, 안트라사이클린(anthracycline), COX-2 억제제, 피리미딘 유사체, 퓨린 유사체, 항생물질, 에피포도필로톡신(epipodophyllotoxin), 백금 동등 복합체(platinum coordination complex), 빈카 알카로이드(vinca alkaloid), 치환된 우레아, 메틸 히드라진 유도체, 부신 피질 억제제(adrenocortical suppressant), 길항제, 엔도스타틴(endostatin), 사이토카인(cytokine), 인터류킨(interleukin), 인터페론(interferon), 림포카인(lymphokine), 종양 괴사 인자(tumor necrosis factor), 안티센스 올리고뉴클레오타이드(antisense oligonucleotide), 간섭 RNA(interference RNA) 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되고, 상기 방사성핵종은 ¹⁸F, ³²P, ³³P, ⁴⁵Ti, ⁴⁷Sc, ⁵²Fe, ⁵⁹Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ⁷⁵Se, ⁷⁷As, ⁸⁶Y, ⁸⁹Sr, ⁸⁹Zr, ⁹⁰Y, ⁹⁴Tc, ^{99 m}Tc, ⁹⁹Mo, ^{99 m}Tc, ¹⁰⁵Pd, ¹⁰⁵Rh, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²³I, ¹²⁴I, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁴³Pr, ¹⁴⁹Pm, ¹⁵³Sm, ^154-158Gd, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁶⁹Er, ¹⁷⁵Lu, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ¹⁹⁴Ir, ¹⁹⁸Au, ¹⁹⁹Au, ²¹¹At, ²¹¹Pb, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁵Ac 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택됨을 특징으로 하는 복합체.134. The method of claim 131, wherein the treatment site is aplidin, azaribine, anastrozole, azacytidine, bleomycin, bortezomib, brio Statin-1, busulfan, camptothecin, 10-hydroxycamptothecin, carmustine, celebrex, chlorambucil Cisplatin, irinotecan (CPT-11), SN-38, carboplatin, cladribine, cyclophosphamide, cytarabine, dacarbazine ( dacarbazine, docetaxel, docetaxel, dactinomycin, daunomycin, glucuronide, daunorubicin, dexamethasone, dexamethasone, diethylstilbestrol Doxorubicin and its analogs, doxorubicin glucu Naid, epirubicin glucuronide, ethinyl estradiol, estramustine, etoposide, etoposide glucuronide, etoposide phosphate, phloxuridine (floxuridine; FUdR), 3 ', 5'-O-dioleoyl-FudR (3', 5'-O-dioleoyl-FudR; FUdR-dO), fludarabine, flutamide Fluorouracil, fluoxymesterone, gemcitabine, hydroxyprogesterone caproate, hydroxyurea, idarubicin, idarubicin, phosphamide ifosfamide, L-asparaginase, leucovorin, lomustine, mechlorethamine, medroprogesterone acetate, megestrol acetate acetate), melphalan, mercap Purine (mercaptopurine), 6-mercaptopurine, methotrexate, mitoxantrone, mithramycin, mitomycin, mitomyne, mitotane, phenyl butyrate, phenyl butyrate prednisone, procarbazine, paclitaxel, pentostatin, semustine streptozocin, tamoxifen, taxanes, taxol, testosterone propionate ( testosterone propionate, thalidomide, thioguanine, thiotepa, teniposide, topotecan, uracil mustard, vinblastine, Vinorelbine, vincristine, lysine, abrin, ribonuclaease, onconase, rapLR1, DNase I, Staphylococcus enterotoxin-A ( Staphylococcal enterotoxin-A), United States Jarigong antiviral protein (pokeweed antiviral protein), gel Ronin (gelonin), diphtheria toxin, Pseudomonas exotoxin (Pseudomonas exotoxin), Pseudomonas endotoxin (Pseudomonas endotoxin), nitrogen mustards, ethylenimine derivatives, alkyl sulfonates (alkyl sulfonate), Nitro Nitrosourea, triazene, folic acid analogs, anthracycline, COX-2 inhibitors, pyrimidine analogs, purine analogs, antibiotics, epipipodophyllotoxin, platinum coordination complex, vinca alkaloid, substituted urea, methyl hydrazine derivatives, adrenocortical suppressant, antagonist, endostatin, cytokine, interleukin, interferon, rim Lymphokine, tumor necrosis factor, antisense oligonucleotide, Is selected from the group consisting of interference RNA (interference RNA), and combinations thereof, wherein the radionuclide is ^{18 F, 32 P, 33 P} , 45 Ti, 47 Sc, 52 Fe, 59 Fe, 62 Cu, 64 Cu, 67 Cu , ⁶⁷ Ga, ⁶⁸ Ga, ⁷⁵ Se, ⁷⁷ As, ⁸⁶ Y, ⁸⁹ Sr, ⁸⁹ Zr, ⁹⁰ Y, ⁹⁴ Tc, ^{99 m} Tc, ⁹⁹ Mo, ^{99 m} Tc, ¹⁰⁵ Pd, ¹⁰⁵ Rh, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In , ¹²³ I, ¹²⁴ I, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁴³ Pr, ¹⁴⁹ Pm, ¹⁵³ Sm, ^154-158 Gd, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁶⁹ Er, ¹⁷⁵ Lu, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re , ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ¹⁹⁴ Ir, ¹⁹⁸ Au, ¹⁹⁹ Au, ²¹¹ At, ²¹¹ Pb, ²¹² Bi, ²¹² Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁵ Ac and combinations thereof . 제 130항에 있어서, 상기 진단 부위는 광활성제 또는 염료, 방사선비투과성 물질(radioopaque material), 조영제, 형광 화합물, 증강제(enhancing agent), 광산란 금속 콜로이드 입자(light scattering metal colloid particle), 방사선영상 금속 킬레이트(radioimaging metal chelate), 방사성핵종 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되며, 여기에서 상기 방사성핵종은 ¹⁸F, ⁴⁵Ti, ⁵²Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁹⁰Y, ^{99 m}Tc, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁵³Sm, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ²¹¹At, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁵Ac 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 것임을 특징으로 하는 복합체.131. The method of claim 130, wherein the diagnostic site is a photoactive agent or dye, a radioopaque material, a contrast agent, a fluorescent compound, an enhancing agent, a light scattering metal colloid particle, a radiographic metal Selected from the group consisting of chelates (radioimaging metal chelates), radionuclides and combinations thereof, wherein the radionuclides are ¹⁸ F, ⁴⁵ Ti, ⁵² Fe, ⁶² Cu, ⁶⁴ Cu, ⁶⁷ Cu, ⁶⁷ Ga, ⁹⁰ Y, ^{99 m} Tc, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁵³ Sm, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re, ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ²¹¹ At, ²¹² Bi, ²¹² Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁵ Ac, and combinations thereof. 하나 이상의 표적 결합 부위 및 치료 또는 진단 부위를 포함하는 일차 표적 제제를 포함하고,A primary target agent comprising at least one target binding site and a therapeutic or diagnostic site, 일차 표적 제제 결합 부위 및 내재화 부위를 포함하는 내재화 제제와 결합하는 분자 복합체.A molecular complex that binds to an internalization agent comprising a primary target agent binding site and an internalization site. 제 134항에 있어서, 상기 치료 부위는 약물, 독소, 프로드럭, 효소, 약물에 대하여 프로드럭을 활성화시키는 효소, 효소 억제제, 뉴클레아제, 호르몬, 호르몬 길항제, 면역조절제, 올리고뉴클레오타이드, 붕소 화합물, 광활성제 또는 염료, 방사성핵종 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택된 것임을 특징으로 하는 복합체.134. The method of claim 134, wherein the therapeutic site is a drug, toxin, prodrug, enzyme, enzyme, enzyme inhibitor, nuclease, hormone, hormone antagonist, immunomodulator, oligonucleotide, boron compound, And a photoactive agent or dye, radionuclide and combinations thereof. 제 135항에 있어서, 상기 치료 부위는 애플리딘(aplidin), 아자리빈(azaribine), 아나스트로졸(anastrozole), 아자시티딘(azacytidine), 블레오마이신(bleomycin), 보르테조미브(bortezomib), 브리오스타틴-1(bryostatin-1), 부술판(busulfan), 캄포테신(camptothecin), 10-히드록시캄포테신(10-hydroxycamptothecin), 카무스틴(carmustine), 세레브렉스(celebrex), 클로람부실(chlorambucil), 시스플라틴(cisplatin), 이리노테칸(irinotecan; CPT-11), SN-38, 카보플라틴(carboplatin), 클라드리빈(cladribine), 사이클로포스파미드(cyclophosphamide), 시타라빈(cytarabine), 다카르바진(dacarbazine), 도세탁셀(docetaxel), 닥티노마이신(dactinomycin), 다우노마이신(daunomycin), 글루쿠로나이드(glucuronide), 다우노루비신(daunorubicin), 덱사메타손(dexamethasone), 디에틸스틸베스트롤(diethylstilbestrol), 독소루비신(doxorubicin) 및 그 유사체들, 독소루비신 글루쿠로나이드, 에피루비신 글루쿠로나이드(epirubicin glucuronide), 에티닐 에스트라디올(ethinyl estradiol), 에스트라무스틴(estramustine), 에토포사이드(etoposide), 에토포사이드 글루쿠로나이드, 에토포사이드 포스페이트, 플록 수리딘(floxuridine; FUdR), 3',5'-O-디오레오일-FudR(3',5'-O-dioleoyl-FudR; FUdR-dO), 플루다라빈(fludarabine), 플루타미드(flutamide), 플루오로우라실(fluorouracil), 플루옥시메스테론(fluoxymesterone), 겜시타빈(gemcitabine), 히드록시프로게스테론 카프로에이트(hydroxyprogesterone caproate), 히드록시우레아(hydroxyurea), 이다루비신(idarubicin), 이포스파미드(ifosfamide), L-아스파라기나아제(L-asparaginase), 류코보린(leucovorin), 로무스틴(lomustine), 메클로레타민(mechlorethamine), 메드로프로게스테론 아세테이트(medroprogesterone acetate), 메게스트롤 아세테이트(megestrol acetate), 멜파란(melphalan), 메르캅토퓨린(mercaptopurine), 6-메르캅토퓨린, 메토트렉세이트(methotrexate), 미톡산트론(mitoxantrone), 미트라마이신(mithramycin), 미토마이신(mitomycin), 미토탄(mitotane), 페닐 부티레이트(phenyl butyrate), 프레드니손(prednisone), 프로카르바진(procarbazine), 파클리탁셀(paclitaxel), 펜토스타틴(pentostatin), 세무스틴 스트렙토조신(semustine streptozocin), 타목시펜(tamoxifen), 탁산(taxanes), 탁솔(taxol), 테스토스테론 프로피오네이트(testosterone propionate), 탈리도마이드(thalidomide), 티오구아닌(thioguanine), 티오테파(thiotepa), 테니포사이드(teniposide), 토포테칸(topotecan), 우라실 머스타드(uracil mustard), 빈블라스틴(vinblastine), 비노렐빈(vinorelbine), 빈크리스틴(vincristine), 리신(ricin), 아브린(abrin), 리보뉴클레아제(ribonuclaease), 온코나아제(onconase), rapLR1, DNase I, 스타필로코커스 장독소-A(Staphylococcal enterotoxin-A), 미국자리공 항바이러스 단백질(pokeweed antiviral protein), 겔로닌(gelonin), 디프테리아 독 소, 슈도모나스 외독소(Pseudomonas exotoxin), 슈도모나스 내독소(Pseudomonas endotoxin), 질소 머스타드, 에틸렌이민 유도체, 알킬 술포네이트(alkyl sulfonate), 니트로소우레아(nitrosourea), 트리아젠(triazene), 엽산 유사체, 안트라사이클린(anthracycline), COX-2 억제제, 피리미딘 유사체, 퓨린 유사체, 항생물질, 에피포도필로톡신(epipodophyllotoxin), 백금 동등 복합체(platinum coordination complex), 빈카 알카로이드(vinca alkaloid), 치환된 우레아, 메틸 히드라진 유도체, 부신 피질 억제제(adrenocortical suppressant), 길항제, 엔도스타틴(endostatin), 사이토카인(cytokine), 인터류킨(interleukin), 인터페론(interferon), 림포카인(lymphokine), 종양 괴사 인자(tumor necrosis factor), 안티센스 올리고뉴클레오타이드(antisense oligonucleotide), 간섭 RNA(interference RNA) 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되고, 상기 방사성핵종은 ¹⁸F, ³²P, ³³P, ⁴⁵Ti, ⁴⁷Sc, ⁵²Fe, ⁵⁹Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ⁷⁵Se, ⁷⁷As, ⁸⁶Y, ⁸⁹Sr, ⁸⁹Zr, ⁹⁰Y, ⁹⁴Tc, ^{99 m}Tc, ⁹⁹Mo, ^{99 m}Tc, ¹⁰⁵Pd, ¹⁰⁵Rh, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²³I, ¹²⁴I, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁴³Pr, ¹⁴⁹Pm, ¹⁵³Sm, ^154-158Gd, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁶⁹Er, ¹⁷⁵Lu, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ¹⁹⁴Ir, ¹⁹⁸Au, ¹⁹⁹Au, ²¹¹At, ²¹¹Pb, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁵Ac 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택됨을 특징으로 하는 복합체.136. The method of claim 135, wherein the treatment site is aplidin, azaribine, anastrozole, azacytidine, bleomycin, bortezomib, brio Statin-1, busulfan, camptothecin, 10-hydroxycamptothecin, carmustine, celebrex, chlorambucil Cisplatin, irinotecan (CPT-11), SN-38, carboplatin, cladribine, cyclophosphamide, cytarabine, dacarbazine ( dacarbazine, docetaxel, docetaxel, dactinomycin, daunomycin, glucuronide, glucuronide, daunorubicin, dexamethasone, dexamethasone, diethylstilbestrol Doxorubicin and its analogues, doxorubicin glucuro Naid, epirubicin glucuronide, ethinyl estradiol, estramustine, etoposide, etoposide glucuronide, etoposide phosphate, floc suridine (floxuridine; FUdR), 3 ', 5'-O-dioleoyl-FudR (3', 5'-O-dioleoyl-FudR; FUdR-dO), fludarabine, flutamide Fluorouracil, fluoxymesterone, gemcitabine, hydroxyprogesterone caproate, hydroxyurea, idarubicin, idarubicin, phosphamide ifosfamide, L-asparaginase, leucovorin, lomustine, mechlorethamine, medroprogesterone acetate, megestrol acetate acetate), melphalan, mercap Purine (mercaptopurine), 6-mercaptopurine, methotrexate, mitoxantrone, mithramycin, mitomycin, mitomyne, mitotane, phenyl butyrate, phenyl butyrate prednisone, procarbazine, paclitaxel, pentostatin, semustine streptozocin, tamoxifen, taxanes, taxol, testosterone propionate ( testosterone propionate, thalidomide, thioguanine, thiotepa, teniposide, topotecan, uracil mustard, vinciline, vinblastine, vinblastine vinorelbine, vincristine, lysine, abrain, ribonuclaease, onconase, rapLR1, DNase I, Staphylococcal enterotoxin-A -A), USA Rigong antiviral protein (pokeweed antiviral protein), gel Ronin (gelonin), diphtheria toxin, Pseudomonas exotoxin (Pseudomonas exotoxin), Pseudomonas endotoxin (Pseudomonas endotoxin), nitrogen mustards, ethylenimine derivatives, alkyl sulfonates (alkyl sulfonate), Nitrosourea, triazene, folic acid analog, anthracycline, COX-2 inhibitor, pyrimidine analog, purine analog, antibiotic, epipipodophyllotoxin, platinum equivalent coordination complex, vinca alkaloid, substituted urea, methyl hydrazine derivative, adrenocortical suppressant, antagonist, endostatin, cytokine, interleukin, interferon, interferon, Lymphokine, tumor necrosis factor, antisense oligonucleotide, Is selected from the group consisting of interference RNA (interference RNA), and combinations thereof, wherein the radionuclide is ^{18 F, 32 P, 33 P} , 45 Ti, 47 Sc, 52 Fe, 59 Fe, 62 Cu, 64 Cu, 67 Cu , ⁶⁷ Ga, ⁶⁸ Ga, ⁷⁵ Se, ⁷⁷ As, ⁸⁶ Y, ⁸⁹ Sr, ⁸⁹ Zr, ⁹⁰ Y, ⁹⁴ Tc, ^{99 m} Tc, ⁹⁹ Mo, ^{99 m} Tc, ¹⁰⁵ Pd, ¹⁰⁵ Rh, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In , ¹²³ I, ¹²⁴ I, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁴³ Pr, ¹⁴⁹ Pm, ¹⁵³ Sm, ^154-158 Gd, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁶⁹ Er, ¹⁷⁵ Lu, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re , ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ¹⁹⁴ Ir, ¹⁹⁸ Au, ¹⁹⁹ Au, ²¹¹ At, ²¹¹ Pb, ²¹² Bi, ²¹² Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁵ Ac and combinations thereof . 제 134항에 있어서, 상기 진단 부위는 광활성제 또는 염료, 방사선비투과성 물질(radioopaque material), 조영제, 형광 화합물, 증강제(enhancing agent), 광산란 금속 콜로이드 입자(light scattering metal colloid particle), 방사선영상 금속 킬레이트(radioimaging metal chelate), 방사성핵종 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되며, 여기에서 상기 방사성핵종은 ¹⁸F, ⁴⁵Ti, ⁵²Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁹⁰Y, ^{99 m}Tc, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁵³Sm, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ²¹¹At, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁵Ac 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 것임을 특징으로 하는 복합체.136. The method of claim 134, wherein the diagnostic site is a photoactive agent or dye, a radioopaque material, a contrast agent, a fluorescent compound, an enhancing agent, a light scattering metal colloid particle, a radiographic metal Selected from the group consisting of chelates (radioimaging metal chelates), radionuclides and combinations thereof, wherein the radionuclides are ¹⁸ F, ⁴⁵ Ti, ⁵² Fe, ⁶² Cu, ⁶⁴ Cu, ⁶⁷ Cu, ⁶⁷ Ga, ⁹⁰ Y, ^{99 m} Tc, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁵³ Sm, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re, ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ²¹¹ At, ²¹² Bi, ²¹² Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁵ Ac, and combinations thereof. 하나 이상의 표적 결합 부위 및 하나 이상의 표적가능한 구조체 결합 부위를 포함하는 일차 표적 제제;A primary target agent comprising at least one target binding site and at least one targetable construct binding site; 하나 이상의 일차 표적 제제 결합 부위, 치료 또는 진단 부위 및 제거제 결합 부위를 포함하는 표적가능한 구조체; 및A targetable construct comprising at least one primary target agent binding site, a therapeutic or diagnostic site, and an eliminator binding site; And 표적가능한 구조체 결합 부위를 포함하는 제거제;A remover comprising a targetable construct binding site; 를 포함하는 포유동물에 치료제 또는 진단제를 투여하기 위한 키트.Kit for administering a therapeutic or diagnostic agent to a mammal comprising a. 제 138항에 있어서, 상기 치료 부위는 약물, 독소, 프로드럭, 효소, 약물에 대하여 프로드럭을 활성화시키는 효소, 효소 억제제, 뉴클레아제, 호르몬, 호르몬 길항제, 면역조절제, 올리고뉴클레오타이드, 붕소 화합물, 광활성제 또는 염료, 방사성핵종 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택된 것임을 특징으로 하는 키트.138. The method of claim 138, wherein the therapeutic site is a drug, toxin, prodrug, enzyme, enzyme, enzyme inhibitor, nuclease, hormone, hormonal antagonist, immunomodulator, oligonucleotide, boron compound, Kit selected from the group consisting of photoactive agents or dyes, radionuclides and combinations thereof. 제 139항에 있어서, 상기 치료 부위는 애플리딘(aplidin), 아자리빈(azaribine), 아나스트로졸(anastrozole), 아자시티딘(azacytidine), 블레오마이신(bleomycin), 보르테조미브(bortezomib), 브리오스타틴-1(bryostatin-1), 부술판(busulfan), 캄포테신(camptothecin), 10-히드록시캄포테신(10-hydroxycamptothecin), 카무스틴(carmustine), 세레브렉스(celebrex), 클로람부실(chlorambucil), 시스플라틴(cisplatin), 이리노테칸(irinotecan; CPT-11), SN-38, 카보플라틴(carboplatin), 클라드리빈(cladribine), 사이클로포스파미드(cyclophosphamide), 시타라빈(cytarabine), 다카르바진(dacarbazine), 도세탁셀(docetaxel), 닥티노마이신(dactinomycin), 다우노마이신(daunomycin), 글루쿠로나이드(glucuronide), 다우노루비신(daunorubicin), 덱사메타손(dexamethasone), 디에틸스틸베스트롤(diethylstilbestrol), 독소루비신(doxorubicin) 및 그 유사체들, 독소루비신 글루쿠로나이드, 에피루비신 글루쿠로나이드(epirubicin glucuronide), 에티닐 에스트라디올(ethinyl estradiol), 에스트라무스틴(estramustine), 에토포사이드(etoposide), 에토포사이드 글루쿠로나이드, 에토포사이드 포스페이트, 플록수리딘(floxuridine; FUdR), 3',5'-O-디오레오일-FudR(3',5'-O-dioleoyl-FudR; FUdR-dO), 플루다라빈(fludarabine), 플루타미드(flutamide), 플루오로우라실(fluorouracil), 플루옥시메스테론(fluoxymesterone), 겜시타빈(gemcitabine), 히드록시프로게스테론 카프로에이트(hydroxyprogesterone caproate), 히드록시우레아(hydroxyurea), 이다루비신(idarubicin), 이포스파미드(ifosfamide), L-아스파라기 나아제(L-asparaginase), 류코보린(leucovorin), 로무스틴(lomustine), 메클로레타민(mechlorethamine), 메드로프로게스테론 아세테이트(medroprogesterone acetate), 메게스트롤 아세테이트(megestrol acetate), 멜파란(melphalan), 메르캅토퓨린(mercaptopurine), 6-메르캅토퓨린, 메토트렉세이트(methotrexate), 미톡산트론(mitoxantrone), 미트라마이신(mithramycin), 미토마이신(mitomycin), 미토탄(mitotane), 페닐 부티레이트(phenyl butyrate), 프레드니손(prednisone), 프로카르바진(procarbazine), 파클리탁셀(paclitaxel), 펜토스타틴(pentostatin), 세무스틴 스트렙토조신(semustine streptozocin), 타목시펜(tamoxifen), 탁산(taxanes), 탁솔(taxol), 테스토스테론 프로피오네이트(testosterone propionate), 탈리도마이드(thalidomide), 티오구아닌(thioguanine), 티오테파(thiotepa), 테니포사이드(teniposide), 토포테칸(topotecan), 우라실 머스타드(uracil mustard), 빈블라스틴(vinblastine), 비노렐빈(vinorelbine), 빈크리스틴(vincristine), 리신(ricin), 아브린(abrin), 리보뉴클레아제(ribonuclaease), 온코나아제(onconase), rapLR1, DNase I, 스타필로코커스 장독소-A(Staphylococcal enterotoxin-A), 미국자리공 항바이러스 단백질(pokeweed antiviral protein), 겔로닌(gelonin), 디프테리아 독소, 슈도모나스 외독소(Pseudomonas exotoxin), 슈도모나스 내독소(Pseudomonas endotoxin), 질소 머스타드, 에틸렌이민 유도체, 알킬 술포네이트(alkyl sulfonate), 니트로소우레아(nitrosourea), 트리아젠(triazene), 엽산 유사체, 안트라사이클린(anthracycline), COX-2 억제제, 피리미딘 유사체, 퓨린 유사체, 항생물질, 에피포도필로톡신(epipodophyllotoxin), 백금 동등 복합체(platinum coordination complex), 빈카 알카로이드(vinca alkaloid), 치환된 우레아, 메틸 히드라진 유도체, 부신 피질 억제제(adrenocortical suppressant), 길항제, 엔도스타틴(endostatin), 사이토카인(cytokine), 인터류킨(interleukin), 인터페론(interferon), 림포카인(lymphokine), 종양 괴사 인자(tumor necrosis factor), 안티센스 올리고뉴클레오타이드(antisense oligonucleotide), 간섭 RNA(interference RNA) 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되고, 상기 방사성핵종은 ¹⁸F, ³²P, ³³P, ⁴⁵Ti, ⁴⁷Sc, ⁵²Fe, ⁵⁹Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ⁷⁵Se, ⁷⁷As, ⁸⁶Y, ⁸⁹Sr, ⁸⁹Zr, ⁹⁰Y, ⁹⁴Tc, ^{99 m}Tc, ⁹⁹Mo, ^{99 m}Tc, ¹⁰⁵Pd, ¹⁰⁵Rh, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²³I, ¹²⁴I, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁴³Pr, ¹⁴⁹Pm, ¹⁵³Sm, ^154-158Gd, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁶⁹Er, ¹⁷⁵Lu, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ¹⁹⁴Ir, ¹⁹⁸Au, ¹⁹⁹Au, ²¹¹At, ²¹¹Pb, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁵Ac 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택됨을 특징으로 하는 키트.139. The method of claim 139, wherein the treatment site is aplidin, azaribine, anastrozole, azacytidine, bleomycin, bortezomib, brio Statin-1, busulfan, camptothecin, 10-hydroxycamptothecin, carmustine, celebrex, chlorambucil Cisplatin, irinotecan (CPT-11), SN-38, carboplatin, cladribine, cyclophosphamide, cytarabine, dacarbazine ( dacarbazine, docetaxel, dactinomycin, daunomycin, daunomycin, glucuronide, daunorubicin, dexamethasone, dexamethasone, diethylstilbestrol, diethylstilbestrol Doxorubicin and its analogues, doxorubicin glucuro Naid, epirubicin glucuronide, ethinyl estradiol, estramustine, etoposide, etoposide glucuronide, etoposide phosphate, phloxuridine (floxuridine; FUdR), 3 ', 5'-O-dioleoyl-FudR (3', 5'-O-dioleoyl-FudR; FUdR-dO), fludarabine, flutamide Fluorouracil, fluoxymesterone, gemcitabine, hydroxyprogesterone caproate, hydroxyurea, idarubicin, idarubicin, phosphamide ifosfamide, L-asparaginase, leucovorin, lomustine, mechlorethamine, medroprogesterone acetate, megestrol acetate acetate), melphalan, mercap Purine (mercaptopurine), 6-mercaptopurine, methotrexate, mitoxantrone, mithramycin, mitomycin, mitomyne, mitotane, phenyl butyrate, phenyl butyrate prednisone, procarbazine, paclitaxel, pentostatin, semustine streptozocin, tamoxifen, taxanes, taxol, testosterone propionate ( testosterone propionate, thalidomide, thioguanine, thiotepa, teniposide, topotecan, uracil mustard, vinciline, vinblastine, vinblastine vinorelbine, vincristine, lysine, abrain, ribonuclaease, onconase, rapLR1, DNase I, Staphylococcal enterotoxin-A -A), USA Rigong antiviral protein (pokeweed antiviral protein), gel Ronin (gelonin), diphtheria toxin, Pseudomonas exotoxin (Pseudomonas exotoxin), Pseudomonas endotoxin (Pseudomonas endotoxin), nitrogen mustards, ethylenimine derivatives, alkyl sulfonates (alkyl sulfonate), Nitro Nitrosourea, triazene, folic acid analogs, anthracycline, COX-2 inhibitors, pyrimidine analogs, purine analogs, antibiotics, epipipodophyllotoxin, platinum coordination complex, vinca alkaloid, substituted urea, methyl hydrazine derivatives, adrenocortical suppressant, antagonist, endostatin, cytokine, interleukin, interferon, rim Lymphokine, tumor necrosis factor, antisense oligonucleotide, liver Is selected from the group consisting of interference RNA and combinations thereof, and the radionuclide is ¹⁸ F, ³² P, ³³ P, ⁴⁵ Ti, ⁴⁷ Sc, ⁵² Fe, ⁵⁹ Fe, ⁶² Cu, ⁶⁴ Cu, ⁶⁷ Cu , ⁶⁷ Ga, ⁶⁸ Ga, ⁷⁵ Se, ⁷⁷ As, ⁸⁶ Y, ⁸⁹ Sr, ⁸⁹ Zr, ⁹⁰ Y, ⁹⁴ Tc, ^{99 m} Tc, ⁹⁹ Mo, ^{99 m} Tc, ¹⁰⁵ Pd, ¹⁰⁵ Rh, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In , ¹²³ I, ¹²⁴ I, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁴³ Pr, ¹⁴⁹ Pm, ¹⁵³ Sm, ^154-158 Gd, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁶⁹ Er, ¹⁷⁵ Lu, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re , ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ¹⁹⁴ Ir, ¹⁹⁸ Au, ¹⁹⁹ Au, ²¹¹ At, ²¹¹ Pb, ²¹² Bi, ²¹² Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁵ Ac, and combinations thereof . 제 138항에 있어서, 상기 진단 부위는 광활성제 또는 염료, 방사선비투과성 물질(radioopaque material), 조영제, 형광 화합물, 증강제(enhancing agent), 광산란 금속 콜로이드 입자(light scattering metal colloid particle), 방사선영상 금속 킬레이트(radioimaging metal chelate), 방사성핵종 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되며, 여기에서 상기 방사성핵종은 ¹⁸F, ⁴⁵Ti, ⁵²Fe, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁷Ga, ⁹⁰Y, ^{99 m}Tc, ¹¹¹Ag, ¹¹¹In, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁴²Pr, ¹⁵³Sm, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁷⁷Lu, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ¹⁸⁹Re, ²¹¹At, ²¹²Bi, ²¹²Pb, ²¹³Bi, ²²³Ra, ²²⁵Ac 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 것임을 특징으로 하는 키트.138. The method of claim 138, wherein the diagnostic site is a photoactive agent or dye, a radioopaque material, a contrast agent, a fluorescent compound, an enhancing agent, a light scattering metal colloid particle, a radiographic metal Selected from the group consisting of chelates (radioimaging metal chelates), radionuclides and combinations thereof, wherein the radionuclides are ¹⁸ F, ⁴⁵ Ti, ⁵² Fe, ⁶² Cu, ⁶⁴ Cu, ⁶⁷ Cu, ⁶⁷ Ga, ⁹⁰ Y, ^{99 m} Tc, ¹¹¹ Ag, ¹¹¹ In, ¹²⁵ I, ¹³¹ I, ¹⁴² Pr, ¹⁵³ Sm, ¹⁶¹ Tb, ¹⁶⁶ Dy, ¹⁶⁶ Ho, ¹⁷⁷ Lu, ¹⁸⁶ Re, ¹⁸⁸ Re, ¹⁸⁹ Re, ²¹¹ At, ²¹² Bi, ²¹² Kits selected from the group consisting of Pb, ²¹³ Bi, ²²³ Ra, ²²⁵ Ac and combinations thereof. 하나 이상의 표적 결합 부위 및 하나 이상의 재재화 제제 결합 부위를 포함하는 일차 표적 제제; 및A primary target agent comprising at least one target binding site and at least one reproductive agent binding site; And 상기 내재화 부위를 포함하는 복합체의 내재화를 증강시키는 내재화 부위 및 일차 표적 제제 결합 부위를 포함하는 내재화 제제;An internalization agent comprising an internalization site and a primary target agent binding site that enhance internalization of the complex comprising the internalization site; 를 포함하는 키트.Kit comprising a. 제 142항에 있어서, 상기 내재화 제제는 엽산 수용체에 결합함을 특징으로 하는 키트.145. The kit of claim 142, wherein the internalization agent binds to folate receptors. 제 142항에 있어서, 상기 내재화 부위는 엽산을 포함함을 특징으로 하는 키트.145. The kit of claim 142, wherein the internalization site comprises folic acid. 제 142항에 있어서, 상기 내재화 부위는 메토트렉세이트(methotrexate)를 포함함을 특징으로 하는 키트.145. The kit of claim 142, wherein the internalization site comprises methotrexate. 제 142항에 있어서, 상기 내재화 부위는 재생 수용체에 결합함을 특징으로 하는 키트.145. The kit of claim 142, wherein said internalization site binds to regenerative receptors. 고상 배지에서 펩타이드를 합성하는 단계;Synthesizing the peptides in solid medium; 상기 펩타이드의 아미노기와 클로로아세트산 무수물, DMAP, DIEA 및 NMP를 반응시켜 중간물질 1을 제조하고, NMP 및 IPA로 세척하는 단계;Reacting the amino group of the peptide with chloroacetic anhydride, DMAP, DIEA, and NMP to prepare Intermediate 1, and washing with NMP and IPA; 상기 중간 물질 1을 NMP와 혼합된 디메틸렌트리아민과 반응시켜 중간물질 2를 제조하고, NMP/IPA로 세척하는 단계;Reacting the intermediate 1 with dimethylenetriamine mixed with NMP to prepare an intermediate 2, and washing with NMP / IPA; 상기 중간물질 2를 DIEA 및 NMP와 혼합된 t-부틸 브로모아세트산염과 반응시켜 DTPA 부위를 가지는 펩타이드 생성물을 제조하는 단계;Reacting the intermediate 2 with t-butyl bromoacetate mixed with DIEA and NMP to prepare a peptide product having a DTPA site; 를 포함하는 고상 배지에서 DTPA-함유 펩타이드를 합성하는 방법.Method for synthesizing DTPA-containing peptide in a solid phase medium comprising a. 제 146항에 있어서, 새롭게 합성된 DTPA 부위는 펩타이드를 더욱 동화(elaboration)시키므로써 보호됨을 특징으로 하는 방법.148. The method of claim 146, wherein the newly synthesized DTPA site is protected by further elaborating the peptide. 제 148항에 있어서, 상기 동화는 리신 측쇄로부터 Aloc 보호기의 제거하고 트리틸(trityl)-HSG-OH를 리신 측쇄에 결합하는 과정을 포함하며, 상기 방법은 상기 고상 배지로부터 생성물을 분리하고 상기 생성물을 정제하는 과정을 더 포함함을 특징으로 하는 방법.148. The method of claim 148, wherein the assimilation comprises removing an Aloc protecting group from the lysine side chain and binding trityl-HSG-OH to the lysine side chain, said method separating the product from said solid medium and said product Method for characterized in that it further comprises the step of purifying. 제 147항에 있어서, 상기 펩타이드는 Fmoc 방법을 이용하여 합성되고, 여기에서 각각의 아미노산은 디이소프로필카르보디이미드(diisopropylcarbodiimide)를 사용하여 결합된 후 활성화제로서 O-벤조트리아졸-N,N,N',N'-테트라메틸-우로늄-헥사플루오로-포스페이트(O-Benzotriazole-N,N,N', N'-tetramethyl-uronium-hexafluoro-phosphate; HBTU)를 사용하여 결합됨을 특징으로 하는 방법.149. The peptide of claim 147, wherein the peptide is synthesized using the Fmoc method, wherein each amino acid is bound using diisopropylcarbodiimide and then O-benzotriazole-N, N as an activator. Characterized in that it is bound using O-Benzotriazole-N, N, N ', N'-tetramethyl-uronium-hexafluoro-phosphate (HBTU). How to. 표적 결합 부위 및 하나 이상의 표적가능한 구조체 결합 부위를 포함하는 일차 표적 제제;A primary target agent comprising a target binding site and one or more targetable construct binding sites; 하나 이상의 일차 표적 제제 결합 부위, 제거제 결합 부위 및 치료 또는 진단 부위를 포함하는 표적가능한 구조체; 및A targetable construct comprising at least one primary target agent binding site, a remover binding site, and a therapeutic or diagnostic site; And 하나 이상의 표적가능한 구조체 결합 부위를 포함하는 제거제;A remover comprising one or more targetable construct binding sites; 를 환자에게 투여하는 단계를 포함하고, Administering to the patient, 상기 제거제는 표적 부위에서 상기 표적가능한 구조체의 보존을 증강시킴을 특징으로 하는Said scavenger enhances retention of said targetable construct at a target site 환자에서 질병 또는 이상(condition)을 치료 또는 진단하는 방법.A method of treating or diagnosing a disease or condition in a patient.

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