KR20060002290A - New sphingolipid derivatives and the composition for anti-cancer containing the same - Google Patents

New sphingolipid derivatives and the composition for anti-cancer containing the same Download PDF

Info

Publication number
KR20060002290A
KR20060002290A KR1020040051250A KR20040051250A KR20060002290A KR 20060002290 A KR20060002290 A KR 20060002290A KR 1020040051250 A KR1020040051250 A KR 1020040051250A KR 20040051250 A KR20040051250 A KR 20040051250A KR 20060002290 A KR20060002290 A KR 20060002290A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
formula
compound
sphingolipid derivative
pharmaceutically acceptable
group
Prior art date
Application number
KR1020040051250A
Other languages
Korean (ko)
Inventor
김진욱
박성진
이호재
박장서
김용우
이원구
하현준
Original Assignee
주식회사 두산
주식회사 이매진
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 주식회사 두산, 주식회사 이매진 filed Critical 주식회사 두산
Priority to KR1020040051250A priority Critical patent/KR20060002290A/en
Priority to PCT/KR2005/002102 priority patent/WO2006004359A1/en
Publication of KR20060002290A publication Critical patent/KR20060002290A/en

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/16—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C07C233/17—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom
    • C07C233/18—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom having the carbon atom of the carboxamide group bound to a hydrogen atom or to a carbon atom of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/16—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C07C233/17—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom
    • C07C233/22—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom having the carbon atom of the carboxamide group bound to an acyclic carbon atom of a carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/165—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C215/00—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C215/02—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C215/22—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being unsaturated
    • C07C215/28—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being unsaturated and containing six-membered aromatic rings

Abstract

본 발명은 스핑고신키나아제 억제 활성이 있는 신규 스핑고리피드(sphingolipid) 유도체 및 그를 함유하는 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 의한 신규 합성된 스핑고리피드 유도체를 이용하면, 스핑고신키나제의 활성을 억제할 수 있으므로 스핑고신키나아제에 의해 세라마이드와 스핑고신이 인산화되는 것을 막음으로써 세라마이드와 스핑고신의 농도를 높게 유지할 수 있고, 그러한 세라마이드와 스핑고신에 의해 암세포에서 아폽토시스가 유발되므로 암 또는 암 관련 질환을 치료 또는 예방할 수 있고, 또한 스핑고신키나아제의 세포 증식 촉진 활성을 억제함으로써 암과 건선 등과 같은 과증식성 질환을 치료 또는 예방할 수 있다. 따라서, 이를 함유하는 조성물은 스핑고신키나아제 억제용 조성물, 암 또는 과증식성 질환의 치료 또는 예방을 위한 조성물로써 사용될 수 있다.
The present invention relates to a novel sphingolipid derivative having a sphingosine kinase inhibitory activity and a composition containing the same, wherein the use of the novel synthesized sphingolipid derivatives according to the invention can inhibit the activity of sphingosine kinase. It is possible to maintain high concentrations of ceramide and sphingosine by preventing phosphorylation of ceramides and sphingosines by sphingosine kinase and to treat cancer or cancer-related diseases because such ceramides and sphingosines cause apoptosis in cancer cells. It is possible to prevent and to treat or prevent hyperproliferative diseases such as cancer and psoriasis by inhibiting the cell proliferation promoting activity of sphingosine kinase. Therefore, the composition containing the same can be used as a composition for inhibiting sphingosine kinase, or a composition for the treatment or prevention of cancer or hyperproliferative disease.

스핑고리피드, 유도체, 세라마이드, 스핑고신, 암, 과증식성 질환. Sphingolipids, derivatives, ceramides, sphingosine, cancer, hyperproliferative diseases.

Description

신규 스핑고리피드 유도체 및 그를 함유하는 항암 조성물{New sphingolipid derivatives and the composition for anti-cancer containing the same} New sphingolipid derivatives and the composition for anti-cancer containing the same}             

도 1a 내지 1d는 신규 합성된 스핑고리피드 유도체의 스핑고신키나아제 1 억제 효과를 측정한 결과에 관한 것으로, 도 1a는 SG 1 내지 4의 스핑고신키나아제 억제 효과를 측정한 도이고, 도 1b는 SG 5 내지 7의 스핑고신키나아제 억제 효과를 측정한 도이며, 도 1c는 SG 9 내지 12의 스핑고신키나아제 억제 효과를 측정한 도이고, 도 1d는 SG 13 내지 16의 스핑고신키나아제 억제 효과를 측정한 도이며,Figure 1a to 1d is a result of measuring the sphingosinkinase 1 inhibitory effect of the newly synthesized sphingolipid derivative, Figure 1a is a diagram measuring the sphingosine kinase inhibitory effect of SG 1 to 4, Figure 1b is SG It is a figure measuring the sphingosine kinase inhibitory effect of 5-7, FIG. 1C is a figure which measured the sphingosine kinase inhibitory effect of SG 9-12, FIG. 1D is a measure of the sphingosine kinase inhibitory effect of SG13-16. Degrees,

도 2a 내지 2d는 신규 합성된 스핑고리피드 유도체의 스핑고신키나아제 2 억제 효과를 측정한 결과에 관한 것으로, 도 2a는 SG 1 내지 5의 스핑고신키나아제 억제 효과를 측정한 도이고, 도 2b는 SG 6 내지 8의 스핑고신키나아제 억제 효과를 측정한 도이며, 도 2c는 SG 9 내지 13의 스핑고신키나아제 억제 효과를 측정한 도이고, 도 2d는 SG 14 내지 16의 스핑고신키나아제 억제 효과를 측정한 도이다.
Figure 2a to 2d is a result of measuring the sphingosinkinase 2 inhibitory effect of the newly synthesized sphingolipid derivative, Figure 2a is a measure of the sphingosinkinase inhibitory effect of SG 1 to 5, Figure 2b is SG It is a figure measuring the sphingosine kinase inhibitory effect of 6-8, FIG. 2C is a figure which measured the sphingosine kinase inhibitory effect of SG 9-13, FIG. 2D is a measure of the sphingosine kinase inhibitory effect of SG14-16. It is also.

본 발명은 스핑고신키나아제 억제 활성이 있는 신규 스핑고리피드(sphingolipid) 유도체 및 그를 함유하는 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to novel sphingolipid derivatives having sphingosine kinase inhibitory activity and compositions containing them.

스핑고리피드는 1884년 튜디첨(Thudichum)에 의해 처음 밝혀진 것으로, 수수께끼같은(Sphinx like) 물질이라 명명되었고, 세포의 성장, 증식, 분화의 조절과 함께 생명 현상의 중심에서 핵심적인 역할을 하는 것으로 밝혀졌다.Sphingolipid was first discovered by Thudichum in 1884 and was named Sphinx-like substance, and plays a key role in the center of life phenomena with the regulation of cell growth, proliferation and differentiation. Turned out.

스핑고리피드는 스핑고신(Sphingosine), 파이토스핑고신(Phytospingosine), 스핑가닌(Sphinganine)이라고 하는 물질을 기본 골격으로 하고 있으며, 여기에 지방산이 연결된 형태인 세라마이드(Ceramide)를 비롯하여 약 300종류 이상의 유도체를 가지고 있다. Sphingolipid is composed of substances called sphingosine, phytospingosine, and sphinganine as the basic skeleton, and contains more than 300 derivatives, including ceramide, a fatty acid-linked form. Have.

스핑고리피드는 인지질과 함께 세포막을 구성하는 주요성분이며, 극성부위와 비극성 부위를 가지고 있다. Sphingolipids, together with phospholipids, are the major constituents of cell membranes and have polar and nonpolar regions.

스핑고리피드에 지방산이 연결된 형태인 세라마이드는 세포내에서 일어나는 여러 가지 작용 기전을 일으키는 데 중요한 역할을 많이 하는 것으로 알려져 있으며, 특히, 세포증식(cell proliferation), 세포 분화(cell differentiation), 세포 증식의 일시적인 정지상태(growth arrest), 아폽토시스(apoptosis)에 관여하고 있다. Ceramide, a fatty acid-linked form of sphingolipid, is known to play an important role in causing various mechanisms of action in the cell. In particular, ceramides may be used for cell proliferation, cell differentiation, and cell proliferation. It is involved in transient arrest, apoptosis.

스핑고리피드의 기능해석은 1990년대에 들어와 본격적으로 시작되었다. 하넌(Hannun), 벨(Bell) 등에 의하여 스핑고신의 프로테인 키나제(Protein Kinase)의 억제효과가 확인되면서 연구가 활발해지기 시작하였고, 세포분화, 성장, 노화, 사멸 등의 중요한 생명현상이 세라마이드에 의해 조절됨이 밝혀지면서 생물학연구 의 핵심으로 발전하였다.The functioning of sphingolipid began in earnest in the 1990s. As Hannun, Bell, etc. confirmed the inhibitory effect of protein kinase of sphingosine, studies began to become active. Important life phenomena such as cell differentiation, growth, aging, and death were caused by ceramide. As it turned out, it became the core of biological research.

또한, 세라마이드는 암 치료의 중요한 기작인 아폽토시스를 유발하는 물질로 항암제 개발의 중심 테마로 위치하고 있으며, 현재 사용중이거나 개발중인 많은 항암제가 세라마이드의 생합성 경로에 영향을 미침으로 해서 그 효과가 나타나는 것으로 해석되고 있다.In addition, ceramide is a substance that induces apoptosis, which is an important mechanism of cancer treatment, is located as a central theme of anticancer drug development, and it is interpreted that many anticancer drugs currently in use or under development affect the biosynthetic pathway of ceramide, and thus its effect is shown. have.

세라마이드의 C-3 위치의 알릴알콜기(allylic alcohol group)는 생물학적 효과(biological effect)를 가지고 있고, 미토콘드리아에서 C-3 하이드록시기(hydroxyl group)가 산화되어 ROS(reactive oxygen species)를 생성하는 것을 효능의 주요 단계로 보고 있다. 게다가 세라마이드는 단백질의 인산화 및 생체내 칼슘 양을 조절하는 것으로도 알려져 있다.The allylic alcohol group at the C-3 position of ceramide has a biological effect, and the C-3 hydroxyl group is oxidized in the mitochondria to produce reactive oxygen species (ROS). To be the main stage of efficacy. In addition, ceramides are known to regulate the phosphorylation of proteins and the amount of calcium in vivo.

암세포를 사멸시키기 위한 치료범위에는 세라마이드, 세라마이드 유도체(derivative) 및 유사체(analog)를 직접 암세포에 처리하거나 세라마이드의 신생(de novo)합성을 유도하는 물질 및 시작물질을 항암제로 사용하기도 한다. 세라마이드 및 스핑고리피드의 생합성에 관여하는 효소의 활성을 조절하는 물질은 항암제로 개발될 가능성이 매우 높기 때문에 최근 관심의 초점이 되는 분야이다. SPT(Serine Palmitoyl Transferase), 세라미다아제(Ceramidase), SMase(Sphingomyelinase), GlcCer 합성효소(Gluco-sylceramide synthase), 스핑고신 키나아제(Sphingosine kinase) 등은 세라마이드의 합성 및 가수분해에 관여하는 효소로, 이러한 효소의 활성화 및 저해물질은 암세포내 세라마이드 함량을 적절히 조절하여 암세포의 아폽토시스(apoptosis)를 유도할 수 있는 가능성을 제시하고 있 다. In the therapeutic range for killing cancer cells, ceramides, ceramide derivatives and analogues may be directly treated to cancer cells, or substances and starting materials that induce de novo synthesis of ceramides may be used as anticancer agents. Substances that modulate the activity of enzymes involved in the biosynthesis of ceramides and sphingolipids have been of great interest in recent years because they are highly likely to be developed as anticancer agents. SPT (Serine Palmitoyl Transferase), ceramidase (Ceramidase), SMase (Sphingomyelinase), GlcCer synthase (Gluco-sylceramide synthase), spingosine kinase (Sphingosine kinase), etc. are enzymes involved in the synthesis and hydrolysis of ceramides. The activation and inhibitors of these enzymes suggest the possibility of inducing apoptosis of cancer cells by appropriately controlling the ceramide content in cancer cells.

또한, 최근 스핑고리피드의 당화(Glycosylation)가 약제내성에 중요한 역할을 수행하는 것으로 밝혀져 스핑고리피드를 이용한 항암제는 약제내성을 극복할 수 있는 가능성도 제시하였다.In addition, glycosylation of sphingolipid has recently been found to play an important role in drug resistance, suggesting the possibility of anticancer drugs using sphingolipid to overcome drug resistance.

세포내 세라마이드의 함량을 조절하는 물질에 대한 연구는 크게 스핑고리피드 및 세라마이드의 유도체 개발과 유사체 개발로 국한할 수 있으며, 이와 더불어 스핑고리피드의 생합성에 영향을 미치는 기능성지방산, 비타민류, 안드로겐(androgens), ROS(reactive oxygen species: hydroxyperoxide, nitric oxide releasing compound), GSH 수치(glutathione level) 및 레시틴 수치(lecithin level)에 영향을 주는 물질 등 상당히 많은 분류의 물질을 포함한다.Studies on substances that regulate the content of intracellular ceramides can be largely limited to the development of sphingolipids and derivatives of ceramides and the development of analogues.Furthermore, functional fatty acids, vitamins and androgens affecting the biosynthesis of sphingolipids ( androgens), ROS (reactive oxygen species: hydroxyperoxide, nitric oxide releasing compounds), GSH (glutathione level), and substances that affect lecithin levels.

이중, 최근 항암제로 활발히 연구중인 P-약물(P-drug)은 아미노알콜(aminoalcohol)류의 세라마이드 유사체이다. PDMP(D-threo-1-phenyl-2-decanoylamino-3-morpholino-1-pro- panol)는 이중에서 가장 많이 연구되고 있는 초기 합성물질로 셀 사이클(cell cycle)에 중요한 영향을 미치는 GlcCer(glucosylceramide)의 합성에 대한 저해제(inhibitor)로서 탁월한 효과를 보인다. 이보다 효과가 우수한 PPMP(D-threo-1-phenyl-2-palmitoylami-no-3-morpholino-1-propanol)는 조금 더 긴 체인을 가진 상동체(homolog)이고 PPPP(P4D-threo-1-phenyl-2-palmi toylamino-3-pyrrolidino-1-propanol) 또한 PDMP에 비해 높은 억제 효과를 보이는 유사체이다. P-약물은 일반적인 암세포에 대한 항암효과 는 물론 항암제 내성과 연관이 있는 GlcCer의 합성을 억제하여 약제내성의 예방에도 기여할 것으로 기대된다. Among these, P-drug, which is being actively studied as an anticancer agent, is a ceramide analogue of aminoalcohols. PDMP (D-threo-1-phenyl-2-decanoylamino-3-morpholino-1-pro-panol) is one of the most studied early synthetic compounds, GlcCer (glucosylceramide), which has an important effect on cell cycle. Shows an excellent effect as an inhibitor to the synthesis of (). More effective PPMP (D-threo-1-phenyl-2-palmitoylami-no-3-morpholino-1-propanol) is a homolog with a longer chain and PPPP (P4D-threo-1-phenyl) -2-palmi toylamino-3-pyrrolidino-1-propanol) is also an analogue with higher inhibitory effect than PDMP. P-drugs are expected to contribute to the prevention of drug resistance by inhibiting the synthesis of GlcCer, which is associated with anticancer drug resistance as well as anticancer effects on general cancer cells.

또한, 세라미다아제 저해제(Ceramidase inhibitor)인 B13나 N-올레오일에탄올아민(N-oleoylethanolamine)도 세라마이드 유사체로 세라마이드의 분해를 억제함으로서 암세포 사멸을 유도한다. 이외에도 FTY-720, 푸모니신(fumonisin), 미리오신(myriocin) 등 스핑고리피드 및 세라마이드와 구조가 유사한 세라마이드 생합성 억제제가 있다.In addition, ceramidase inhibitors B13 and N-oleoylethanolamine also inhibit cancer cell death by inhibiting the breakdown of ceramides with ceramide analogues. In addition, there are sphingolipids such as FTY-720, fumonisin and myriocin, and ceramide biosynthesis inhibitors similar in structure to ceramides.

세라마이드 생합성에 관여하는 물질 중에는 이미 항암제로 쓰이고 있는 물질들이 많이 있다. 빈크리스틴(vincristine), 젬시타빈(gemcitabine), 캄토테신(camptothecin), 호모캄토테신(homocamptothecin), 이리노테칸(irinotecan) 등이 대표적인 예로, 대부분이 SMase의 활성을 촉진하는 것이다. 그러나, 세라마이드로부터 생성되는 GlcCer 및 S1P(sphingosine-1-phosphate)는 암세포의 생장을 촉진하므로 GlcCer 합성효소(synthase), 세라미다아제(ceramidase)나 SPHK(sphingosine kinase) 등에 대한 선택적 억제제의 개발이 암에 대한 효율적 치료전략이 될 것이다. 더욱이 SPHK 저해제는 새로운 항암제의 개발 Target으로 가능성이 높아, 최근 들어 연구가 시작되는 분야이다. Many substances involved in ceramide biosynthesis are already used as anticancer drugs. Vincristine, gemcitabine, camptothecin, homocamptothecin, irinotecan, etc. are typical examples. Most of them promote SMase activity. However, since GlcCer and S1P (sphingosine-1-phosphate) produced from ceramides promote the growth of cancer cells, the development of selective inhibitors for GlcCer synthase, ceramidase or SPHK (sphingosine kinase), etc. It will be an effective treatment strategy for. In addition, SPHK inhibitors are likely to be targeted for the development of new anticancer drugs, and research is being started recently.

특히 최근 들어 스핑고신에 메틸화 반응을 시킨 DMS(Dimethylsphingosine)와 스핑가닌의 이성질체인 사핀골(safingol)은 이미 SPHK 저해제(inhibiotr)로 알려져 새로운 항암제 타겟(Target)으로 많은 관심이 집중되고 있다. 실제 DMS의 경우 미국의 M.D. 앤더슨(Anderson) 암연구소의 연구결과에 의하면, 약제내성을 띈 급성 백혈병에 효과가 있는 것으로 확인되어 항암제로의 개발 가능성이 확인되었으며, 아울러 이러한 물질을 통해 세포내 스핑고지질 및 세라마이드의 함량을 조절할 수 있는 특정 구조에 대한 연구가 현재 활발히 진행되고 있다. In particular, DMS (Dimethylsphingosine), which has been methylated to sphingosine, and sapingol, which is an isomer of sphinginine, are already known as SPHK inhibitors and are attracting much attention as new anticancer targets. For real DMS, M.D. A study by the Anderson Cancer Institute confirmed that it was effective in acute leukemia with drug resistance, and thus could be developed as an anticancer drug. In addition, the substance regulates intracellular sphingolipids and ceramides. There is currently active research into specific structures that can be used.

이외에도 스핑고리피드 및 세라마이드의 활용도를 높이기 위해 다양한 물질이 제시되고 있으며, 이 중 폴리에틸렌 글리콜(Polyethylene glycol)을 연결한 세라마이드는 리포좀 형성을 용이하게 하고 생체 내 순환수명(circulation lifetime)을 늘일 수 있어 그러한 물질에 대한 연구와 리포좀 형성에 대한 조성 연구도 진행 중에 있다.In addition, various substances have been proposed to increase the utilization of sphingolipids and ceramides. Among them, ceramides linked with polyethylene glycol facilitate liposome formation and increase the circulation lifetime in vivo. Studies on substances and compositions on liposome formation are also in progress.

따라서, 본 발명자들은 스핑고지질의 기본구조에 다양한 기능기(functional group)의 변화를 줌으로써 의화학적 분자설계를 통하여 효능을 가지는 새로운 구조의 유도체들을 합성해서 항암 효능을 검색해본 결과, DMS나 사핀골(Safingol)에 비해 효과가 우수함을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
Therefore, the present inventors synthesized derivatives having a new structure having efficacy through chemical and chemical design by changing various functional groups in the sphingolipid base structure and searching for anticancer efficacy. Safingol) was confirmed that the effect is excellent to complete the present invention.

본 발명의 목적은 스핑고리피드의 유도체(sphingolipid)를 이용하여 스핑고신키나아제(Sphingosine kinase)의 활성을 억제함으로써 세라마이드와 스핑고신이 인산화되는 것을 막음으로써 세라마이드와 스핑고신의 농도를 높게 유지시키고, 그러한 세라마이드와 스핑고신에 의해 암세포에서 아폽토시스가 유발되어 암 또는 암 관련 질환을 치료 또는 예방하는 것을 목적으로 한다. 또한, 스핑고신키나아제의 세포 증식 촉진 활성을 억제함으로써 암과 건선 등과 같은 과증식성 질환을 치료 또는 예방하는 것을 목적으로 한다. 또한, 이러한 효과를 갖는 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
It is an object of the present invention to maintain high concentrations of ceramide and sphingosine by inhibiting the activity of sphingosine kinase using sphingolipid derivatives, thereby preventing phosphorylation of ceramide and sphingosine. Ceramide and sphingosine cause apoptosis in cancer cells to treat or prevent cancer or cancer-related diseases. In addition, it aims to treat or prevent hyperproliferative diseases such as cancer and psoriasis by inhibiting the cell proliferation promoting activity of sphingosine kinases. It is also an object to provide a composition having such an effect.

상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다.
In order to achieve the above object, the present invention provides a sphingolipid derivative represented by the following formula (1), an isomer thereof or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

Figure 112004029241444-PAT00001
Figure 112004029241444-PAT00001

(상기 식에서, (Wherein

R1은 수소(hydrogen), 또는 탄소수 1 내지 40개의 알킬기(alkyl group), 알케닐기(alkenyl group), 아실기(acyl group) 또는 아릴기(aryl group)이고; R 1 is hydrogen or an alkyl group having 1 to 40 carbon atoms, an alkenyl group, an acyl group, or an aryl group;

R2는 수소(hydrogen), 또는 탄소수 1 내지 40개의 알킬기(alkyl group), 알케닐기(alkenyl group), 아실기(acyl group) 또는 아릴기(aryl group)이고; R 2 is hydrogen or an alkyl group having 1 to 40 carbon atoms, an alkenyl group, an acyl group, or an aryl group;

R3는 수소(hydrogen), 또는 탄소수 1 내지 40개의 알킬기(alkyl group), 알 케닐기(alkenyl group), 아실기(acyl group) 또는 아릴기(aryl group)이거나, 피롤리딘기와 몰포린기를 포함하는 헤테로고리기이고;R 3 is hydrogen or an alkyl group having 1 to 40 carbon atoms, an alkenyl group, an acyl group, or an aryl group, or a pyrrolidine group and a morpholine group Heterocyclic group containing;

R4는 수산기를 포함한 수소(hydrogen), 또는 탄소수 1 내지 40개의 알킬기(alkyl group), 알케닐기(alkenyl group), 아실기(acyl group) 또는 아릴기(aryl group)이고;R 4 is hydrogen including a hydroxyl group, or an alkyl group having 1 to 40 carbon atoms, an alkenyl group, an acyl group or an aryl group;

R5는 수소(hydrogen), 또는 탄소수 1 내지 40개의 알킬기(alkyl group), 알케닐기(alkenyl group), 아실기(acyl group) 또는 아릴기(aryl group)이다.) R 5 is hydrogen, or an alkyl group having 1 to 40 carbon atoms, an alkenyl group, an acyl group, or an aryl group.

또한, 상기 화학식 1로 표시되는 스핑고리피드 유도체는 바람직하게는 하기 화학식 2 내지 7로 표시되는 화합물로 이루어진 군으로부터 선택된 것이다.
In addition, the sphingolipid derivative represented by Chemical Formula 1 is preferably selected from the group consisting of compounds represented by the following Chemical Formulas 2 to 7.

Figure 112004029241444-PAT00002
Figure 112004029241444-PAT00002

(상기 식에서, R은 수소(hydrogen), 또는 탄소수 1 내지 40개의 알킬기(alkyl group)이다.)(Wherein R is hydrogen or an alkyl group having 1 to 40 carbon atoms)

상기 화학식 2로 표시되는 스핑고리피드 유도체는 바람직하게는 하기 화학식 2a(이하, SG-1), 2b(이하, SG-2), 2c(이하, SG-3), 또는 2d(이하, SG-4)의 화합물이다.
The sphingolipid derivative represented by Formula 2 is preferably Formula 2a (hereinafter, SG-1), 2b (hereinafter, SG-2), 2c (hereinafter, SG-3), or 2d (hereinafter, SG-). 4) is a compound.

Figure 112004029241444-PAT00003
Figure 112004029241444-PAT00003

Figure 112004029241444-PAT00004
Figure 112004029241444-PAT00004

Figure 112004029241444-PAT00005
Figure 112004029241444-PAT00005

Figure 112004029241444-PAT00006
Figure 112004029241444-PAT00006

Figure 112004029241444-PAT00007
Figure 112004029241444-PAT00007

(상기 식에서, R은 수소(hydrogen), 또는 탄소수 1 내지 40개의 알킬기(alkyl group)이다.)(Wherein R is hydrogen or an alkyl group having 1 to 40 carbon atoms)

상기 화학식 3으로 표시되는 스핑고리피드 유도체는 바람직하게는 하기 화학식 3a(이하, SG-13), 3b(이하, SG-14), 3c(이하, SG-15), 3d(이하, SG-10) 또는 3e(이하, SG-16)의 화합물이다.

The sphingolipid derivative represented by Chemical Formula 3 is preferably the following Chemical Formulas 3a (hereinafter, SG-13), 3b (hereinafter, SG-14), 3c (hereinafter, SG-15), and 3d (hereinafter, SG-10). ) Or 3e (hereinafter SG-16).

Figure 112004029241444-PAT00008
Figure 112004029241444-PAT00008

Figure 112004029241444-PAT00009
Figure 112004029241444-PAT00009

Figure 112004029241444-PAT00010
Figure 112004029241444-PAT00010

Figure 112004029241444-PAT00011
Figure 112004029241444-PAT00011

Figure 112004029241444-PAT00012
Figure 112004029241444-PAT00012

Figure 112004029241444-PAT00013
Figure 112004029241444-PAT00013

(상기 식에서, R1 및 R2는 수소(hydrogen), 또는 탄소수 1 내지 40개의 알킬기(alkyl group)이다.) (Wherein R 1 and R 2 are hydrogen or an alkyl group having 1 to 40 carbon atoms)

상기 화학식 4로 표시되는 스핑고리피드 유도체는 바람직하게는 하기 화학식 4a(이하, SG-5) 또는 4b(이하, SG-6)의 화합물이다.
The sphingolipid derivative represented by Formula 4 is preferably a compound of Formula 4a (hereinafter, SG-5) or 4b (hereinafter, SG-6).

Figure 112004029241444-PAT00014
Figure 112004029241444-PAT00014

Figure 112004029241444-PAT00015
Figure 112004029241444-PAT00015


Figure 112004029241444-PAT00016
Figure 112004029241444-PAT00016

(상기 식에서, R은 수소(hydrogen), 또는 탄소수 1 내지 40개의 알킬기(alkyl group)이다.) (Wherein R is hydrogen or an alkyl group having 1 to 40 carbon atoms)

상기 화학식 5로 표시되는 스핑고리피드 유도체는 바람직하게는 하기 화학식 5a(이하, SG-7)의 화합물이다.
The sphingolipid derivative represented by Formula 5 is preferably a compound of Formula 5a (hereinafter, SG-7).

Figure 112004029241444-PAT00017
Figure 112004029241444-PAT00017

Figure 112004029241444-PAT00018
Figure 112004029241444-PAT00018

(상기 식에서, R은 수소(hydrogen), 또는 탄소수 1 내지 40개의 알킬기(alkyl group)이다.) (Wherein R is hydrogen or an alkyl group having 1 to 40 carbon atoms)

상기 화학식 6으로 표시되는 스핑고리피드 유도체는 바람직하게는 하기 화학식 6a(이하, SG-9) 또는 6b(이하, SG-12)의 화합물이다.
The sphingolipid derivative represented by Formula 6 is preferably a compound of Formula 6a (hereinafter, SG-9) or 6b (hereinafter, SG-12).

Figure 112004029241444-PAT00019
Figure 112004029241444-PAT00019

Figure 112004029241444-PAT00020
Figure 112004029241444-PAT00020

Figure 112004029241444-PAT00021
Figure 112004029241444-PAT00021

(상기 식에서, R은 수소(hydrogen), 또는 탄소수 1 내지 40개의 알킬기(alkyl group)이다.) (Wherein R is hydrogen or an alkyl group having 1 to 40 carbon atoms)

상기 화학식 7로 표시되는 스핑고리피드 유도체는 바람직하게는 하기 화학식 7a(이하, SG-11)의 화합물이다.
The sphingolipid derivative represented by Formula 7 is preferably a compound of Formula 7a (hereinafter, SG-11).

Figure 112004029241444-PAT00022
Figure 112004029241444-PAT00022

본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염을 유효성분으로 함유하는 스핑고신키나아제 억제용 조성물을 제공한다. The present invention provides a sphingosine kinase inhibiting composition containing the sphingolipid derivative represented by Formula 1, an isomer thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.                     

또한, 상기 스핑고신키나아제 억제용 조성물은 암 또는 암 관련 질환을 치료 또는 예방하기 위한 용도로 사용되는 것을 특징으로 한다.In addition, the sphingosine kinase inhibitory composition is characterized in that it is used for the purpose of treating or preventing cancer or cancer-related diseases.

본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염을 유효성분으로 함유하는 아폽토시스 유도용 조성물을 제공한다. The present invention provides a composition for inducing apoptosis, which comprises a sphingolipid derivative represented by Formula 1, an isomer thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.

또한, 상기 아폽토시스 유도용 조성물은 암 또는 암 관련 질환을 치료 또는 예방하기 위한 용도로 사용되는 것을 특징으로 한다.In addition, the composition for inducing apoptosis is characterized in that it is used for the purpose of treating or preventing cancer or cancer-related diseases.

본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염을 유효성분으로 함유하는 과증식성 질환의 치료 또는 예방용 조성물을 제공한다.The present invention provides a composition for the treatment or prophylaxis of hyperproliferative diseases containing the sphingolipid derivative represented by Formula 1, an isomer thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.

또한, 상기 과증식성 질환은 건선인 것을 특징으로 한다.In addition, the hyperproliferative disease is characterized in that psoriasis.

본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염을 유효성분으로 함유하는 암의 치료 또는 예방을 위한 항암용 조성물을 제공한다.The present invention provides an anticancer composition for the treatment or prevention of cancer containing the sphingolipid derivative represented by Formula 1, an isomer thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.

본 발명에 의한 상기 신규 스핑고리피드 유도체는 하기와 같은 단계를 거쳐 제조할 수 있다.The novel sphingolipid derivative according to the present invention can be prepared through the following steps.

먼저, 상기 화학식 2로 표시되는 스핑고리피드 유도체 화합물(2)의 제조방법은 화합물 (7)의 멘톨 에스테르를 아마이드로 전환하는 반응으로, O,N-다이메틸하이드록시 아민을 사용하여 와이네브(Weinreb) 아마이드 형태로 전환하여 화합물 (8)을 수득하는 단계 a1, 상기 단계 a1에서 수득한 화합물 (8)의 아마이드를 벤질 브로마이드와 마그네슘을 사용하여 벤질기가 붙은 케톤형태로 전환한 후 리튬알루미늄하이드라이드를 사용하여 케톤을 2차 알코올로 환원하여 화합물 (9)를 수득하는 단계 b1, 상기 단계 b1에서 수득한 화합물 (9)를 아세트산을 사용하여, 아세틸기의 친핵성 공격에 의한 아지리딘 고리열림 반응으로 아셀틸기가 첨가되고 아지리딘 고리가 열리게 한 후, 수산화칼륨을 이용하여 아세틸기를 수산화기로 치환하여 화합물 (10)을 수득하는 단계 c1, 상기 단계 c1에서 수득한 화합물 (10)의 2차 아민을 팔라듐하이드록사이드와 아세트산을 사용하여 1차 아민으로 환원하여 화합물 (11)을 수득하는 단계 d1; 및First, the method for preparing the sphingolipid derivative compound (2) represented by Chemical Formula 2 is a reaction for converting the menthol ester of compound (7) to amide, and using Y, N-dimethylhydroxy amine Step a1 of obtaining a compound (8) by converting to an amide form, and converting the amide of the compound (8) obtained in the step a1 to a benzyl group-containing ketone form using benzyl bromide and magnesium, followed by lithium aluminum hydride Reduction of ketone to secondary alcohol using a lide to obtain compound (9), aziridine ring opening by nucleophilic attack of acetyl group using acetic acid to compound (9) obtained in step b1 Reacting with the addition of the acetyl group and opening the aziridine ring, then replacing the acetyl group with a hydroxyl group using potassium hydroxide to obtain a compound (10), c1, The method comprising the secondary amine of the compound (10) obtained in step c1 group using palladium hydroxide in acetic acid and reduced to a primary amine to give the compound (11) d1; And

상기 단계 d1에서 수득한 화합물 (11)의 아민을 아실클로라이드(R: 수소 또는 C1 ∼ C40)를 사용하여 아민을 아마이드로 전환하는 단계 e1을 포함하는 방법으로 수득할 수 있다(하기 반응식 1 참조).
The amine of compound (11) obtained in step d1 may be obtained by a method comprising the step e1 of converting the amine into an amide using acyl chloride (R: hydrogen or C 1 to C 40 ) (Scheme 1 below) Reference).

Figure 112004029241444-PAT00023
Figure 112004029241444-PAT00023

상기 화학식 3으로 표시되는 스핑고리피드 유도체 화합물(3)의 제조방법은 화합물 (7)의 멘톨 에스테르를 아마이드로 전환하는 반응으로, O,N-다이메틸하이드록시 아민을 사용하여 와이네브(Weinreb) 아마이드 형태로 전환하여 화합물 (8)을 수득하는 단계 a2, 상기 단계 a2에서 수득한 화합물 (8)의 아마이드를 벤질브로마이드와 마그네슘을 사용하여 벤질기가 붙은 케톤형태로 전환한 후 리튬알루미늄하이드라이드를 사용하여 케톤을 2차 알코올로 환원하여 화합물 (9)를 수득하는 단계 b2, 상기 단계 b2에서 수득한 화합물 (9)를 클로로트라이메틸실란의 염소음이온의 친핵석 공격에 의한 아지리딘 고리열림반응으로 염소기가 첨가되고 아지리딘 고리가 열리게 한 후, 요오드나트륨의 요오드 음이온과 염소음이온의 치환반응을 거쳐서 피롤리딘의 친핵성 공격에 의하여 요오드기가 피롤리딘기로 치환시켜 화합물 (13)을 수득하는 단계 c2, 상기 단계 c2에서 수득한 화합물 (13)의 2차 아민을 팔라듐하이드록사이드와 아세트산을 사용하여 1차 아민으로 환원하여 화합물 (14)를 수득하는 단계 d2; 및Method for preparing a sphingolipid derivative compound (3) represented by the formula (3) is a reaction for converting the menthol ester of the compound (7) to amide, Weinreb using O, N-dimethylhydroxy amine Step a2 to obtain the compound (8) by converting to the amide form, the amide of the compound (8) obtained in the step a2 is converted to the ketone form attached to the benzyl group using benzyl bromide and magnesium and then lithium aluminum hydride Reduction of the ketone with a secondary alcohol using the step b2 to obtain the compound (9), the compound (9) obtained in the step b2 by the aziridine ring opening reaction by nucleophilic attack of chlorine anion of chlorotrimethylsilane After adding the chlorine group and opening the aziridine ring, the nucleophilic attack of pyrrolidine through the substitution reaction of iodine anion of sodium iodine and chlorine anion Step c2, wherein the iodine group is substituted with a pyrrolidine group to obtain compound (13), and the secondary amine of compound (13) obtained in step c2 is reduced to primary amine using palladium hydroxide and acetic acid. Step d2 to obtain (14); And

상기 단계 d2에서 수득한 화합물 (14)의 아민을 아실클로라이드(R: 수소 또는 C1 ∼ C40)를 사용하여 아민을 아마이드로 전환하는 단계 e2를 포함하는 방법으로 수득할 수 있다(하기 반응식 2 참조). The amine of compound (14) obtained in step d2 may be obtained by a method comprising the step e2 of converting the amine to an amide using acylchloride (R: hydrogen or C 1 to C 40 ) (Scheme 2 below) Reference).

Figure 112004029241444-PAT00024
Figure 112004029241444-PAT00024

상기 화학식 4 및 5로 표시되는 스핑고리피드 유도체 화합물((4) 및 (4-1))의 제조방법은 화합물 (13)의 멘톨 에스테르를 리튬알루미늄하이드라이드를 사용하여, 알코올로 환원하여 화합물 (16)을 수득하는 단계 a3, 상기 단계 a3에서 수득한 화합물 (16)을 N,N`-다이카보닐이미다졸을 이용하여 아지리딘 고리열림 반응 후, 옥사졸린을 형성시키고, 요오도트라이메틸실란을 이용하여, 알코올을 요오드로 치환하여 화합물 (17)을 수득하는 단계 b3, 단계 b3에서 수득한 화합물 (17)의 3차 아민을 아니솔과 메탄설폰산을 이용하여, 2차 아민으로 환원하여 화합물 (18)을 수득하는 단계 c3, 상기 단계 c3에서 수득한 화합물 (18)의 2차 아민을 트라이페닐포스핀을 사용하여 요오드와 치환하여 화합물 (19)를 수득하는 단계 d3, 상기 단계 d3에서 수득한 화합물 (19)를 리튬헥사메틸다이실라자인을 사용하여 포스포랜을 형성한 후, 알데하이드기와의 비딕반응에 의해 알킬첨가 반응과 이중결합을 형성시켜 화합물 (20)을 수득하는 단계 e3, 및In the preparation method of the sphingolipid derivative compounds ((4) and (4-1)) represented by Chemical Formulas 4 and 5, the menthol ester of Compound (13) is reduced to alcohol using lithium aluminum hydride to give a compound ( 16) obtaining step a3, the compound (16) obtained in step a3 was subjected to aziridine ring opening reaction using N, N`-dicarbonylimidazole, to form oxazoline, and iodotrimethyl Using silane, the tertiary amine of compound (17) obtained in step b3, obtained in step b3 by substituting alcohol with iodine is reduced to secondary amine, using anisole and methanesulfonic acid. Step c3 to obtain compound (18), the second amine of the compound (18) obtained in step c3 with iodine using triphenylphosphine to obtain compound (19) d3, step d3 Compound (19) obtained from Forming a phosphoran using disilazaine, and then forming a double bond with an alkylation reaction by a biddy reaction with an aldehyde group to obtain a compound (20), and

상기 단계 e3에서 수득한 화합물 (20)을 팔라듐차콜과 수소를 이용하여 이중결합을 환원한 후, 수산화리튬을 사용하여 옥사졸린을 알코올과 아민으로 분리하는 단계 f3를 포함하는 방법으로 화학식 5로 표시되는 스핑고리피드 유도체 화합물(4-1)을 수득할 수 있으며, Compound (20) obtained in step e3 is reduced to a double bond using palladium charcoal and hydrogen, and then represented by Formula 5 by a method comprising step f3 of separating oxazoline into alcohol and amine using lithium hydroxide. It is possible to obtain a sphingolipid derivative compound (4-1),

또한, 상기 단계 f3에서 수득한 아민을 아실클로라이드(R: 수소 또는 C1 ∼ C40)를 사용하여 아민을 아마이드로 전환하는 단계 g3를 포함하는 방법으로 화학식 4로 표시되는 스핑고리피드 유도체 화합물(4)을 수득할 수 있다(하기 반응식 3 참조).
In addition, the sphingolipid derivative compound represented by the formula (4) by a method comprising the step g3 of converting the amine to an amide using acyl chloride (R: hydrogen or C 1 to C 40 ) obtained in step f3 ( 4) can be obtained (see Scheme 3 below).

Figure 112004029241444-PAT00025
Figure 112004029241444-PAT00025

상기 화학식 6으로 표시되는 스핑고리피드 유도체 화합물(5)의 제조방법은 화합물 (7)의 멘톨 에스테르를 아마이드로 전환하는 반응으로, O,N-다이메틸하이드록시 아민을 사용하여 와이네브(Weinreb) 아마이드 형태로 전환하여 화합물 (8)을 수득하는 단계 a4, 상기 단계 a4에서 수득한 화합물 (8)의 아마이드를 벤질브로마이드와 마그네슘을 사용하여 벤질기가 붙은 케톤형태로 전환한 후 리튬알루미늄하이드라이드를 사용하여 케톤을 2차 알코올로 환원하여 화합물 (21)을 수득하는 단계 b4, 상기 단계 b4에서 수득한 화합물 (21)을 아세트산을 사용하여, 아세틸기의 친핵성 공격에 의한 아지리딘 고리열림 반응으로 아셀틸기가 첨가되고 아지리딘 고리가 열리게 한 후, 수산화칼륨을 이용하여 아세틸기를 수산화기로 치환하여 화합 물 (22)를 수득하는 단계 c4, 및 Method for preparing a sphingolipid derivative compound (5) represented by the formula (6) is a reaction for converting the menthol ester of compound (7) to an amide, Weinreb using O, N-dimethylhydroxy amine Step a4 to obtain the compound (8) by converting to the amide form, the amide of the compound (8) obtained in the step a4 is converted to the ketone form attached to the benzyl group using benzyl bromide and magnesium and then lithium aluminum hydride Reduction of the ketone to the secondary alcohol using the step b4 to obtain the compound (21), the compound (21) obtained in the step b4 using acetic acid, by aziridine ring opening reaction by nucleophilic attack of the acetyl group After the acetyl group is added and the aziridine ring is opened, the acetyl group is substituted with potassium hydroxide to obtain a compound (22), and

상기 단계 c4에서 수득한 화합물 (22)의 2차 아민을 팔라듐하이드록사이드와 아세트산을 사용하여 1차 아민으로 환원하는 단계 d4를 포함하는 방법으로 수득할 수 있다(하기 반응식 4 참조).
The secondary amine of Compound (22) obtained in step c4 can be obtained by a method comprising the step d4 of reducing palladium hydroxide and primary amine using acetic acid (see Scheme 4 below).

Figure 112004029241444-PAT00026
Figure 112004029241444-PAT00026

상기 화학식 7로 표시되는 스핑고리피드 유도체 화합물(6)의 제조방법은 화합물 (7)의 멘톨 에스테르를 아마이드로 전환하는 반응으로, O,N-다이메틸하이드록시 아민을 사용하여 와이네브(Weinreb) 아마이드 형태로 전환하여 화합물 (8)을 수득하는 단계 a5, 상기 단계 a5에서 수득한 화합물 (8)의 아마이드를 벤질브로마이드와 마그네슘을 사용하여 벤질기가 붙은 케톤 형태로 전환한 후 리튬알루미늄하이드라이드를 사용하여 케톤을 2차 알코올로 환원하여 화합물 (9)를 수득하는 단계 b5, 상기 단계 b5에서 수득한 화합물 (9)를 메탄설포닐클로라이드를 사용하여 알코올에 메탄설포닐기를 도입하여 활성화이탈기로 만든 후, 리튬알루미늄하이드라이드를 사용하여 환원하여 화합물 (23)을 수득하는 단계 c5, 상기 단계 c5에서 수득한 화합물 (23)을 클로로트라이메틸실란의 염소음이온의 친핵석 공격에 의한 아지리딘 고리열림반응으로 염소기가 첨가되고 아지리딘 고리가 열리게 한 후, 요오드나트륨의 요오드 음이온과 염소음이온의 치환반응을 거쳐서 피롤리딘의 친핵성 공격에 의하여 요오드기가 피롤리딘기로 치환시켜 화합물 (24)를 수득하는 단계 d5, 상기 단계 d5에서 수득한 화합물 (24)의 2차 아민을 팔라듐하이드록사이드와 아세트산을 사용하여 1차 아민으로 환원하여 화합물 (25)를 수득하는 단계 e5; 및 Method for preparing a sphingolipid derivative compound (6) represented by the formula (7) is a reaction for converting the menthol ester of compound (7) to amide, by using O, N-dimethylhydroxy amine Weinreb Step a5 to obtain the compound (8) by converting to the amide form, the amide of the compound (8) obtained in step a5 is converted to the ketone form attached to the benzyl group using benzyl bromide and magnesium, and then lithium aluminum hydride Reducing the ketone to secondary alcohol using the compound b9 to obtain compound (9), the compound (9) obtained in step b5 was prepared by using methanesulfonyl chloride to introduce a methanesulfonyl group into the alcohol Thereafter, reduction using lithium aluminum hydride to obtain compound (23) was carried out in step c5, and the compound (23) obtained in step c5 was converted to chlorotrime. After the aziridine ring opening reaction by the nucleophilic attack of chlorine anion of silane, the chlorine group is added and the aziridine ring is opened, and then through the substitution reaction of iodine anion of sodium iodine and chlorine anion, Step d5, in which the iodine group is substituted with a pyrrolidine group, to obtain a compound (24). The secondary amine of the compound (24) obtained in the step d5 is reduced to a primary amine using palladium hydroxide and acetic acid. Obtaining e) 25); And

상기 단계 e5에서 수득한 화합물 (25)의 아민을 아실클로라이드(R: 수소 또는 C1 ∼ C40)를 사용하여 아민을 아마이드로 전환하는 단계 f5를 포함하는 방법으로 수득할 수 있다(하기 반응식 5 참조).

The amine of compound (25) obtained in step e5 may be obtained by a method comprising the step f5 of converting the amine to an amide using acylchloride (R: hydrogen or C 1 to C 40 ) (Scheme 5) Reference).

Figure 112004029241444-PAT00027
Figure 112004029241444-PAT00027

상기에서 수득된 화학식 1로 표시되는 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염은 약제학적으로 허용되는 염의 형태로 사용할 수 있다. 상기 염으로는 약제학적으로 허용되는 것이면 특별히 한정되지 않으며, 예를 들어 염산, 황산, 질산, 인산, 불화수소산, 브롬화수소산, 포름산 아세트산, 타르타르산, 젖산, 시트르산, 푸마르산, 말레산, 숙신산, 메탄술폰산, 벤젠술폰산, 톨루엔술폰산, 나프탈렌술폰산 등을 사용할 수 있다.The sphingolipid derivative, its isomer, or pharmaceutically acceptable salt thereof represented by Formula 1 obtained above may be used in the form of a pharmaceutically acceptable salt. The salt is not particularly limited as long as it is pharmaceutically acceptable, and for example, hydrochloric acid, sulfuric acid, nitric acid, phosphoric acid, hydrofluoric acid, hydrobromic acid, formic acid acetic acid, tartaric acid, lactic acid, citric acid, fumaric acid, maleic acid, succinic acid, methanesulfonic acid , Benzene sulfonic acid, toluene sulfonic acid, naphthalene sulfonic acid and the like can be used.

본 발명의 상기 신규 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염을 함유하는 약학조성물은, 전체 조성물 중 상기 화합물을 0.001 내지 20 중량 %의 농도로 함유하는 것이 바람직하다. 이는 0.001 중량 % 미만의1 농도에서는 그 효과를 얻기 어려우며, 20 중량 % 초과의 농도에서는 생식기능에 이상을 초래할 수 있기 때문이다.The pharmaceutical composition containing the novel sphingolipid derivative, the isomer thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof of the present invention preferably contains the compound in a concentration of 0.001 to 20% by weight in the total composition. This is difficult to obtain the effect at a concentration of less than 0.001% by weight, and at a concentration of more than 20% by weight can cause reproductive function abnormalities.

본 발명의 상기 신규 스핑고리피드 유도체는 스핑고신키나아제의 활성을 저해하여 세포의 사멸을 촉진하는 세라마이드와 스핑고신의 세포내 축적을 유도함과 동시에, 스핑고신키나아제의 산물인 S1P(sphingosine 1-phosphate)의 종양유발 효과를 차단하는 이중의 항암 효과를 기대할 수 있다. The novel sphingolipid derivative of the present invention inhibits the activity of sphingosine kinase and induces intracellular accumulation of ceramide and sphingosine which promotes cell death, and is a product of sphingosine kinase S1P (sphingosine 1-phosphate) Dual anticancer effects can be expected to block the oncogenic effects of

본 발명자들은 상기 신규 스핑고리피드 유도체의 스핑고신키나아제 저해 활성을 측정한 결과, 그 효능을 확인하였고, 동시에 DMS(Dimethylsphingosine)보다 스핑고신키나아제 저해효능이 더 우수함을 확인하였다.The present inventors measured the sphingosine kinase inhibitory activity of the novel sphingolipid derivatives, and confirmed the efficacy, and at the same time, confirmed that the sphingosine kinase inhibitory effect was superior to that of dimethylsphingosine (DMS).

본 발명의 상기 신규 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염을 함유하는 약학조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.Pharmaceutical compositions containing the novel sphingolipid derivatives, isomers thereof or pharmaceutically acceptable salts thereof of the present invention may further comprise suitable carriers, excipients and diluents commonly used in the manufacture of pharmaceutical compositions.

본 발명의 화합물의 약학적 투여 형태는 이들의 약학적 허용가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 또한 단독으로 또는 타 약학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다. Pharmaceutical dosage forms of the compounds of the present invention may be used in the form of their pharmaceutically acceptable salts, and may be used alone or in combination with other pharmaceutically active compounds as well as in a suitable collection.

본 발명에 따른 화합물을 포함하는 약학조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 연고, 크림 등의 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액 등을 비롯하여 약제학적 제제에 적합한 어떠한 형태로든 제형화하여 사용될 수 있다. Pharmaceutical compositions comprising a compound according to the present invention, powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, oral formulations, such as aerosols, ointments, creams, external preparations, suppositories, and sterilization, respectively. It may be formulated into any form suitable for pharmaceutical preparations, including injection solutions and the like.                     

본 발명의 화합물의 바람직한 투여량은 대상자의 연령, 성별, 체중, 증상, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 화합물은 1일 0.001 ㎍ 내지 1000 mg/kg으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 또한, 그 투여량은 연령, 성별, 체중, 질병의 정도, 투여경로 등에 따라서 증감될 수 있다. 따라서, 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.Preferred dosages of the compounds of the present invention vary depending on the subject's age, sex, weight, symptoms, extent of disease, drug form, route of administration and duration, and may be appropriately selected by those skilled in the art. However, for the desired effect, the compound of the present invention is preferably administered at 0.001 μg to 1000 mg / kg per day. Administration may be administered once a day or may be divided several times. In addition, the dosage may be increased or decreased depending on age, sex, weight, degree of disease, route of administration, and the like. Therefore, the above dosage does not limit the scope of the present invention in any aspect.

본 발명의 화합물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 비경구, 경구 등의 다양한 경로로 투여될 수 있으며, 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내(intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다. The compounds of the present invention can be administered to mammals such as rats, mice, livestock, humans, etc. by various routes such as parenteral, oral, and all modes of administration can be expected, for example, oral, rectal or intravenous. , Intramuscular, subcutaneous, intrauterine dural or intracerebroventricular injection.

한편, 본 발명의 화합물, 및 그를 포함하는 염은 그다지 심각한 독성 및 부작용은 없으므로 예방 목적으로 장기간 사용 시에도 안심하고 사용할 수 있다.On the other hand, the compound of the present invention, and the salt containing the same is not so serious toxicity and side effects can be used with confidence even for long-term use for the purpose of prevention.

이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예에 의거하여 더욱 상세히 설명하고자 하되, 본 발명의 권리범위는 이들 실시예 및 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail based on the following Examples and Experimental Examples, but the scope of the present invention is not limited to these Examples and Experimental Examples.

[실시예 1] 화학식 2의 화합물(2)의 합성.Example 1 Synthesis of Compound (2) of Chemical Formula 2

(단계 a1) 화합물 (8)의 제조(Step a1) Preparation of Compound (8)

(2S)-1-[(1R)-1-페닐에틸]-2-아지리딘카복실릭산 (-)-멘톨 에스테르(화합물 (7)) 100 mg(0.304 mmol)과 O, N-다이메틸하이드록시아민 45 mg(0.737 mmol)을 테트라하이드로퓨란 1 ㎖에 가하고, 0.46 ㎖의 아이소프로필마그네슘브로마이드(2.0 M solution in THF)를 0 oC에서 천천히 적가한 후, 아르곤 분위기에서 상기 용액의 온도를 상온으로 올리고 10분간 교반한 다음, TLC로 아지리딘 멘톨 에스테르가 사라졌음을 확인한 후, 다이클로로메탄과 물을 가하고 유기층을 추출하여 수득한 추출액에 마그네슘 설페이트를 가하여 수분을 제거하고 농축한 다음, 이를 컬럼크로마토그래피로 정제하여 화합물 (8)인 (S)-N-메톡시-N-메틸-1-((R)-1-페닐에틸)아지리딘-2-카복사아마이드를 얻었다.
(2S) -1-[(1R) -1-phenylethyl] -2-aziridinecarboxylic acid (-)-menthol ester (Compound (7)) 100 mg (0.304 mmol) with O, N-dimethylhydroxy 45 mg (0.737 mmol) of amine were added to 1 ml of tetrahydrofuran, 0.46 ml of isopropyl magnesium bromide (2.0 M solution in THF) was slowly added dropwise at 0 ° C., and the temperature of the solution was changed to room temperature in an argon atmosphere. The mixture was stirred for 10 minutes, and after confirming that the aziridine menthol ester disappeared by TLC, dichloromethane and water were added, and the organic layer was extracted. Magnesium sulfate was added to the extract to remove water, and then concentrated. Purification by chromatography gave (S) -N-methoxy-N-methyl-1-((R) -1-phenylethyl) aziridine-2-carboxamide as compound (8).

(단계 b1) 화합물 (9)의 제조(Step b1) Preparation of Compound (9)

상기 단계 a1에서 수득한 화합물 (8)인 (S)-N-메톡시-N-메틸-1-((R)-1-페닐에틸)아지리딘-2-카복사아마이드 2 g(8.53 mmol)을 무수 테트라히드로퓨란(0.3 M)에 가하고, 마그네슘 800 mg(34.2 mmol)과 벤질브로마이드 1.52 ㎖ (12.8 mmol)를 아르곤 분위기 하, 상온에서 가한 다음, 이를 100 oC에서 6시간 동안 환류한 후, 에틸아세테이트와 물로 추출한 후, 마그네슘설페이트로 수분을 제거하고 농축하고, 이를 컬럼크로마토그래피로 정제하여 2-페닐-1-((S)-1-((R)-1-페닐에틸)아지리딘-2-일)에타논을 얻었다.2 g (8.53 mmol) of (S) -N-methoxy-N-methyl-1-((R) -1-phenylethyl) aziridine-2-carboxamide as compound (8) obtained in step a1 Was added to anhydrous tetrahydrofuran (0.3 M), 800 mg (34.2 mmol) of magnesium and 1.52 mL (12.8 mmol) of benzylbromide were added under an argon atmosphere at room temperature, and then refluxed at 100 ° C. for 6 hours, After extraction with ethyl acetate and water, water was removed with magnesium sulfate and concentrated, and the residue was purified by column chromatography to obtain 2-phenyl-1-((S) -1-((R) -1-phenylethyl) aziridine- 2-yl) ethanone was obtained.

그 다음, 2-페닐-1-((S)-1-((R)-1-페닐에틸)아지리딘-2-일)에타논 2.6 g(9.8 mmol)을 무수 테트라히드로퓨란(0.3 M) 에 가하고, 리튬알루미늄하이드라이드 600 mg (19.6 mmol)을 0oC에서 가하고 1시간동안 교반한 다음, 포타슘하이드로젠설페이트로 반응을 종결한 후, 에틸아세테이트와 물로 추출하고, 마그네슘 설페이 트로 건조하여 농축하고, 이를 컬럼크로마토그래피로 정제하여 화합물 (9)인 2-페닐-1-((S)-1-[(R)-1-페닐에틸]아지리딘-2-일)에탄올을 얻었다.
Then, 2.6 g (9.8 mmol) of 2-phenyl-1-((S) -1-((R) -1-phenylethyl) aziridin-2-yl) ethanone was dissolved in anhydrous tetrahydrofuran (0.3 M). 600 mg (19.6 mmol) of lithium aluminum hydride were added at 0 ° C., stirred for 1 hour, the reaction was terminated with potassium hydrogensulfate, extracted with ethyl acetate and water, and dried over magnesium sulfate. Concentration was purified by column chromatography to obtain 2-phenyl-1-((S) -1-[(R) -1-phenylethyl] aziridin-2-yl) ethanol as compound (9).

(단계 c1) 화합물 (10) 제조(Step c1) Preparation of the compound (10)

상기 단계 b1에서 수득한 화합물 (9)인 2-페닐-1-((S)-1-[(R)-1-페닐에틸]아지리딘-2-일)에탄올을 다이클로로메탄(0.5 M)에 가하고, 아세트산(10 eq)을 적가하였다. 이 용액을 12시간동안 상온에서 교반 후, 소듐바이카보네이트를 가한 후, 다이클로로메탄으로 추출하였다. 이 추출액을 마그네슘 설페이트로 수분을 제거한 후, 농축한 다음, 이를 컬럼크로마토그래피로 정제하여 (S)-2-[(R)-1-페닐에틸아미노]-3-하이드록시-4-페닐부틸 아세테이트를 얻었다.2-phenyl-1-((S) -1-[(R) -1-phenylethyl] aziridin-2-yl) ethanol, which is the compound (9) obtained in step b1, was converted to dichloromethane (0.5 M). Was added dropwise to acetic acid (10 eq). The solution was stirred at room temperature for 12 hours, after which sodium bicarbonate was added and extracted with dichloromethane. The extract was dried with magnesium sulfate, concentrated, and then purified by column chromatography (S) -2-[(R) -1-phenylethylamino] -3-hydroxy-4-phenylbutyl acetate Got.

그 다음, (S)-2-[(R)-1-페닐에틸아미노]-3-하이드록시-4-페닐부틸 아세테이트 135 mg (0.412 mmol)을 메탄올(0.3 M)에 가하고, 수산화칼륨 46 mg(0.9 mmol)을 상온에서 가하여, 3시간 동안 교반한 후, 다이클로로메탄으로 추출한 다음, 마그네슘 설페이트로 건조하고 농축하고, 이를 컬럼크로마토그래피로 정제하여 화합물 (10)인 (S)-2-[(R)-1-페닐에틸아미노]-3-하이드록시-4-페닐부탄올을 얻었다.
Then 135 mg (0.412 mmol) of (S) -2-[(R) -1-phenylethylamino] -3-hydroxy-4-phenylbutyl acetate were added to methanol (0.3 M) and 46 mg of potassium hydroxide. (0.9 mmol) was added at room temperature, stirred for 3 hours, extracted with dichloromethane, dried over magnesium sulfate, concentrated, and purified by column chromatography to give (S) -2- [ (R) -1-phenylethylamino] -3-hydroxy-4-phenylbutanol was obtained.

(단계 d1) 화합물 (11) 제조(Step d1) Preparation of the compound (11)

상기 단계 c1에서 수득한 화합물 (10)인 (S)-2-[(R)-1-페닐에틸아미노]-3-하이드록시-4-페닐부탄올을 에탄올(0.5 M)과 팔라듐하이드록사이드 용액에 가하고, 아세트산(2 eq.)을 가하고, 상온 수소분위기 하에서 교반한 다음, TLC로 반응을 체 크한 후, 셀라이트로 여과하여 수득된 여액을 마그네슘 설페이트로 건조하고, 농축하여 농축액으로써 화합물 (11)을 수득하였다.
(S) -2-[(R) -1-phenylethylamino] -3-hydroxy-4-phenylbutanol, which is the compound (10) obtained in the above step c1, with ethanol (0.5 M) and a palladium hydroxide solution To the mixture was added acetic acid (2 eq.), Stirred under a room temperature hydrogen atmosphere, and the reaction was checked by TLC, and then the filtrate obtained by filtration with celite was dried over magnesium sulfate, concentrated to give a compound (11) as a concentrate. ) Was obtained.

(단계 e1) 화학식 2의 화합물(2) 제조(Step e1) Preparation of Compound (2) of Chemical Formula 2

단계 d1에서 수득된 화합물 (11)을 테트라하이드로퓨란에 녹이고, 10 % 수산화나트륨 수용액을 가하여, 상온에서 교반한 다음, 20분 후에 아실클로라이드(2 eq.)을 가하고 상온에서 교반한 후, 소듐바이카보네이트를 가하여 반응을 종결시키고, 에틸아세테이트로 추출한 후, 마그네슘 설페이트로 건조하고 농축한 다음, 이를 컬럼크로마토그래피로 정제하여 화학식 2의 화합물(2)을 얻었다(상기 반응식 1 참조).Compound (11) obtained in step d1 was dissolved in tetrahydrofuran, 10% aqueous sodium hydroxide solution was added thereto, stirred at room temperature, and after 20 minutes, acyl chloride (2 eq.) Was added thereto, followed by stirring at room temperature. The reaction was terminated by addition of carbonate, extracted with ethyl acetate, dried over magnesium sulfate and concentrated, and then purified by column chromatography to obtain Compound (2) of Chemical Formula 2 (see Scheme 1).

[실시예 2] 화학식 3의 화합물(3) 합성Example 2 Synthesis of Compound (3) of Chemical Formula 3

(단계 a2) 화합물 (8) 제조(Step a2) Preparation of the compound (8)

(2S)-1-[(1R)-1-페닐에틸]-2-아지리딘카복실릭산 (-)-멘톨 에스테르(화합물 (7))부터 상기 단계 a1과 같은 방법으로 화합물 (8)을 얻었다.
Compound (8) was obtained by the same method as Step a1 from (2S) -1-[(1R) -1-phenylethyl] -2-aziridinecarboxylic acid (-)-menthol ester (compound (7)).

(단계 b2) 화합물 (9) 제조(Step b2) Preparation of the compound (9)

상기 단계 a2에서 수득한 화합물 (8)로부터 단계 b1과 같은 방법으로 화합물 (9)를 얻었다.Compound (9) was obtained by the same method as Step b1 from compound (8) obtained in step a2.

(단계 c2) 화합물 (13) 제조(Step c2) Preparation of the compound (13)

요오드나트륨 170 mg(1.1 mmol)을 아세토나이트릴(0.5 M)에 가하고, 클로로 트라이메틸실란 0.15 ㎖(1.1 mmol)를 상온에서 적가하고 교반하였다. 2시간 후, 반응용액에 상기 단계 b2에서 수득한 화합물 (9)인 2-페닐-1-((S)-1-[(R)-1-페닐에틸]아지리딘-2-일)에탄올 100 mg(0.374 mmol)을 아세토나이트릴 1 ㎖에 녹여 상온에서 적가하고 2시간 동안 다시 교반하였다. 2시간 후, 피롤리딘 0.1 ㎖(1.1 mmol)를 가하고 2 시간동안 90 oC에서 환류한 다음, 1.2 N 염산으로 반응을 종결한 후, 소듐바이카보네이트를 넣고 에틸아세테이트로 3회 추출한 다음, 브라인으로 유기층을 씻어준 후, 마그네슘 설페이트로 건조하고 농축한 후, 이를 컬럼크로마토그래피로 정제하여 화합물 (13)을 얻었다.170 mg (1.1 mmol) of sodium iodine was added to acetonitrile (0.5 M), and 0.15 mL (1.1 mmol) of chloro trimethylsilane was added dropwise at room temperature, followed by stirring. After 2 hours, 2-phenyl-1-((S) -1-[(R) -1-phenylethyl] aziridin-2-yl) ethanol, which is Compound (9) obtained in step b2, was added to the reaction solution. mg (0.374 mmol) was dissolved in 1 ml of acetonitrile and added dropwise at room temperature, followed by stirring for 2 hours. After 2 hours, 0.1 ml (1.1 mmol) of pyrrolidine was added, refluxed at 90 ° C. for 2 hours, and the reaction was terminated with 1.2 N hydrochloric acid. Then, sodium bicarbonate was added and extracted three times with ethyl acetate. The organic layer was washed with, dried over magnesium sulfate, concentrated, and purified by column chromatography to obtain compound (13).

(단계 d2) 화합물 (14) 제조(Step d2) Preparation of the compound (14)

상기 단계 c2에서 수득한 화합물 (13)로부터 상기 단계 d1과 동일한 방법으로 화합물 (14)를 얻었다.
Compound (14) was obtained by the same method as Step d1 from Compound (13) obtained in Step c2.

(단계 e2) 화학식 3의 화합물(3)의 제조(Step e2) Preparation of Compound (3) of Chemical Formula 3

상기 단계 d2에서 수득한 화합물 (14)로부터 상기 단계 e1과 동일한 방법으로 화학식 3의 화합물(3)을 얻었다(상기 반응식 2 참조).
Compound (3) of formula (3) was obtained from compound (14) obtained in step d2 in the same manner as step e1 (see Scheme 2).

[실시예 3] 화학식 5의 화합물(4-1) 및 화학식 4의 화합물(4) 합성Example 3 Synthesis of Compound (4-1) and Compound (4) of Formula 4

(단계 a3) 화합물 (16) 제조(Step a3) Preparation of the compound (16)

(2R)-1-[(1R)-1-페닐에틸]-2-아지리딘카복실릭산 (-)-멘톨 에스테르(화합물 (15))로부터 상기 단계 a1과 같은 방법으로 화합물 (16)인 (2R)-1-[(1R)-1-페닐에틸]아지리딘-2-일-메탄올을 얻었다.
(2R)-(2R) -1-[(1R) -1-phenylethyl] -2-aziridinecarboxylic acid (-)-menthol ester (Compound (15)) in the same manner as step a1 above, ) -1-[(1R) -1-phenylethyl] aziridin-2-yl-methanol.

(단계 b3) 화합물 (17) 제조(Step b3) Preparation of the compound (17)

상기 단계 a3에서 수득한 화합물 (16)인 (2R)-1-[(1R)-1-페닐에틸]아지리딘-2-일-메탄올 1.3 g을 아세토나이트릴(0.3 M)에 가하고. N, N`-다이카보닐이미다졸 1.43 g을 적가한 후, 상온에서 교반하였다. 2시간 후, 1.6 ㎖의 아이요도트라이메틸실란을 적가하고, 반응종결 후, 에틸아세테이트로 추출한 다음, 추출액을 브라인으로 씻어준 후, 마그네슘 설페이트로 건조하고 농축하고, 이를 컬럼크로마토그래피로 정제하여 화합물 (17)인 (S)-4-요오도메틸-3-[(R)-1-페닐에틸]옥사졸리딘-2-원을 얻었다.
1.3 g of (2R) -1-[(1R) -1-phenylethyl] aziridin-2-yl-methanol, which is the compound (16) obtained in step a3, was added to acetonitrile (0.3 M). 1.43 g of N, N`-dicarbonylimidazole was added dropwise, followed by stirring at room temperature. After 2 hours, 1.6 ml of iyodotrimethylsilane was added dropwise, and after completion of the reaction, the mixture was extracted with ethyl acetate, the extract was washed with brine, dried over magnesium sulfate, concentrated, and purified by column chromatography. (S) -4-iodomethyl-3-[(R) -1-phenylethyl] oxazolidine-2-one as (17) was obtained.

(단계 c3) 화합물 (18) 제조(Step c3) Preparation of the compound (18)

상기 단계 b3에서 수득한 화합물 (17)인 (S)-4-요오도메틸-3-[(R)-1-페닐에틸]옥사졸리딘-2-원 1.3 g(3.93 mmol)과 1.1 ㎖의 아니솔과 1.3 ㎖의 메탄설폰산을 톨루엔(0.3 M)에 가하고, 50 oC까지 가온하여 2시간동안 교반한 후, 상온으로 식히며 교반하였다. 소듐바이카보네이트로 반응을 종결하고, 유기층을 추출하여 브라인으로 씻어준 다음, 마그네슘설페이트로 건조하고 농축한 후, 이를 컬럼크로마토그래피로 정제하여 화합물 (18)인 (S)-4-(요오도메틸)옥사졸리딘-2-원을 얻었다.
1.3 g (3.93 mmol) of (S) -4-iodomethyl-3-[(R) -1-phenylethyl] oxazolidine-2-one as compound (17) obtained in step b3, and 1.1 ml. Anisole and 1.3 ml of methanesulfonic acid were added to toluene (0.3 M), warmed to 50 ° C. and stirred for 2 hours, and then cooled to room temperature. The reaction was terminated with sodium bicarbonate, the organic layer was extracted, washed with brine, dried over magnesium sulfate and concentrated, and then purified by column chromatography to give (S) -4- (iodomethyl) as a compound (18). ) Oxazolidine-2-one was obtained.

(단계 d3) 화합물 (19) 제조(Step d3) Preparation of the compound (19)

상기 단계 c3에서 수득한 화합물 (18)인 (S)-4-(요오도메틸)옥사졸리딘-2-원 800 mg (3.52 mmol)과 트라이페닐포스핀 3 g을 다이메틸포름아마이드(0.3 M)에 가하고 온도를 90 oC 까지 가온하여 24 시간 동안 교반한 다음, 과량의 트라이페닐포스핀을 제거하기 위해서 에틸에테르를 가하고, 테트라 하이드로퓨란으로 씻어 주어, 화합물 (19)인 [(4S)-2-옥소-1,3-옥사졸리딘-4-일](트라이페닐)포스포늄 아이요다이드를 얻었다.
800 mg (3.52 mmol) of (S) -4- (iodomethyl) oxazolidine-2-one, which is the compound (18) obtained in step c3, and 3 g of triphenylphosphine were added to dimethylformamide (0.3 M). ) And warmed to 90 o C and stirred for 24 hours, then ethyl ether was added to remove excess triphenylphosphine and washed with tetrahydrofuran to give [(4S)-as compound (19). 2-oxo-1,3-oxazolidin-4-yl] (triphenyl) phosphonium iodide was obtained.

(단계 e3) 화합물 (20) 제조(Step e3) Preparation of the compound (20)

상기 단계 d3에서 수득한 화합물 (19)인 [(4S)-2-옥소-1,3-옥사졸리딘-4-일](트라이페닐)포스포늄 아이요다이드 200 mg(0.41 mmol)을 무수 테트라하이드로퓨란 (0.3 M)에 가하고 리튬헥사메틸다이실라자인 0.9 ㎖(1.0 M solution)를 -78 oC에서 적가한 후, 교반한 다음, 1시간 후, 4-옥틸벤즈알데하이드 0.9 ㎖를 -78 oC에서 적가하였다. 2시간동안 상온에서 교반한 후에, 암모늄클로라이드 수용액으로 반응을 종결하고, 에틸아세테이트로 추출하여 수득한 여액을 브라인으로 씻어주고, 마그네슘 설페이트로 건조하고 농축한 다음, 이를 컬럼크로마토그래피로 정제하여 화합물 (20)인 (R)-4-(4-옥틸스티릴)옥사졸리딘-2-원을 얻었다.
200 mg (0.41 mmol) of [(4S) -2-oxo-1,3-oxazolidin-4-yl] (triphenyl) phosphonium iodide, which is the compound (19) obtained in step d3, was added to anhydrous tetra. Hydrofuran (0.3 M) was added dropwise with 0.9 ml (1.0 M solution) of lithium hexamethyldisilazine at -78 o C, then stirred, and after 1 hour, 0.9 ml of 4-octylbenzaldehyde was added to -78 o. Dropwise at C. After stirring for 2 hours at room temperature, the reaction was terminated with an aqueous solution of ammonium chloride, and the filtrate obtained by extraction with ethyl acetate was washed with brine, dried over magnesium sulfate, concentrated and purified by column chromatography to obtain a compound ( 20), (R) -4- (4-octylstyryl) oxazolidine-2-one was obtained.

(단계 f3) 화학식 5의 화합물(4-1) 제조(Step f3) Preparation of the compound of formula 5 (4-1)

상기 단계 e3에서 수득한 화합물 (20)인 (R)-4-(4-옥틸스티릴)옥사졸리딘-2-원 40 mg(0.21 mmol)을 에탄올(0.3 M)에 가하고, 팔라듐/차콜(20 wt %)을 가한 다음, 수소풍선을 달고서 2시간동안 상온에서 교반한 후, 반응액을 여과하여 수득된 여액을 농축하고 리튬하이드록사이드 87 mg을 에탄올 (0.3M)에 녹여서 적가하여 2시간동안 환류한 후, 상온으로 식혔다. 그 다음 에틸아세테이트와 물로 추출하고, 유기층을 마그네슘 설페이트로 건조하고 농축한 후, 이를 컬럼크로마토그래피로 정제하여 화학식 5의 화합물(4-1)을 얻었다.
40 mg (0.21 mmol) of (R) -4- (4-octylstyryl) oxazolidine-2-one, which is the compound (20) obtained in step e3, was added to ethanol (0.3 M), and palladium / charcoal ( 20 wt%) was added, followed by stirring for 2 hours at room temperature with a hydrogen balloon. The reaction solution was filtered and the filtrate was concentrated, and 87 mg of lithium hydroxide was dissolved in ethanol (0.3M) and added dropwise thereto for 2 hours. After refluxing, it was cooled to room temperature. Then, the mixture was extracted with ethyl acetate and water, the organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated, and then purified by column chromatography to obtain the compound of formula 5 (4-1).

(단계 g3) 화학식 4의 화합물(4) 제조(Step g3) Preparation of the compound of formula 4 (4)

상기 단계 f3에서 수득한 화학식 5의 화합물(4-1)로부터 단계 g1과 동일한 방법으로 화학식 4의 화합물(4)을 얻었다(상기 반응식 3참조).
Compound (4) of formula (4) was obtained by the same method as step g1 from compound (4-1) of formula (5) obtained in step f3 (see Scheme 3).

[실시예 4] 화학식 6의 화합물(5) 합성Example 4 Synthesis of Compound (5) of Chemical Formula 6

(단계 a4) 화합물 (8) 제조(Step a4) Preparation of the compound (8)

(2S)-1-[(1R)-1-페닐에틸]-2-아지리딘카복실릭산 (-)-멘톨 에스테르(화합물(7))로부터 상기 단계 a1과 동일한 방법으로 화합물 (8)을 얻었다.
Compound (8) was obtained by the same method as Step a1 from (2S) -1-[(1R) -1-phenylethyl] -2-aziridinecarboxylic acid (-)-menthol ester (Compound (7)).

(단계 b4) 화합물 (21) 제조(Step b4) Preparation of the compound (21)

상기 단계 a1에서 수득한 화합물 (8)로부터 상기 단계 b1과 동일한 방법으로 화합물(21)을 얻었다.
Compound (21) was obtained by the same method as Step b1 from Compound (8) obtained in Step a1.

(단계 c4) 화합물 (22) 제조(Step c4) Preparation of the compound (22)

상기 단계 b4에서 수득한 화합물 (21)로부터 상기 단계 c1과 동일한 방법으로 화합물(22)를 얻었다.
Compound (22) was obtained in the same manner as Step c1 from Compound (21) obtained in Step b4.

(단계 d4) 화학식 6의 화합물의 제조(Step d4) Preparation of a compound of Formula 6

상기 단계 c4에서 수득한 화합물 (22)로부터 상기 단계 d1과 동일한 방법으로 화학식 6의 화합물(5)을 얻었다(상기 반응식 4 참조).
Compound (5) of Chemical Formula 6 was obtained from Compound (22) obtained in Step c4 in the same manner as Step d1 (see Scheme 4).

[실시예 5] 화학식 7의 화합물(6)의 합성Example 5 Synthesis of Compound (6) of Formula 7

(단계 a5) 화합물 (8)의 제조(Step a5) Preparation of Compound (8)

(2S)-1-[(1R)-1-페닐에틸]-2-아지리딘카복실릭산 (-)-멘톨 에스테르(화합물 (7))로부터 상기 단계 a1과 동일한 방법으로 화합물 (8)을 얻었다.
Compound (8) was obtained by the same method as Step a1 from (2S) -1-[(1R) -1-phenylethyl] -2-aziridinecarboxylic acid (-)-menthol ester (Compound (7)).

(단계 b5) 화합물 (9) 제조(Step b5) Preparation of the compound (9)

상기 단계 a1에서 수득한 화합물 (8)로부터 상기 단계 b1과 동일한 방법으로 화합물(9)인 (R)-2-페닐-1-((S)-1-[(R)-1-페닐에틸)아지리딘-2-일]에탄올을 얻었다.
(R) -2-phenyl-1-((S) -1-[(R) -1-phenylethyl) which is compound (9) from compound (8) obtained in said step a1 by the same method as said step b1. Aziridin-2-yl] ethanol was obtained.

(단계 c5) 화합물 (23) 제조(Step c5) Preparation of compound (23)

상기 단계 b5로부터 수득한 화합물 (9)인 (R)-2-페닐-1-((S)-1-[(R)-1-페닐에틸)아지리딘-2-일]에탄올 500 mg(1.87 mmol)을 다이클로로메탄(0.3 M)에 가하고, 트리에틸아민 0.52 ㎖와 메탄설포닐클로라이드 0.24 ㎖를 0 oC에서 적가한 다음, 한시간 후에, 다이클로로메탄과 물로 추출하고, 유기층을 마그네슘 설페이트로 건조하고 농축한 다음, 이를 컬럼크로마토그래피로 정제하여 화합물 (23)을 얻었다.
500 mg (1.87) of (R) -2-phenyl-1-((S) -1-[(R) -1-phenylethyl) aziridin-2-yl] ethanol as compound (9) obtained from step b5. mmol) was added to dichloromethane (0.3 M), and 0.52 ml of triethylamine and 0.24 ml of methanesulfonyl chloride were added dropwise at 0 ° C., and after 1 hour, the mixture was extracted with dichloromethane and water, and the organic layer was extracted with magnesium sulfate. After drying and concentrating, it was purified by column chromatography to give the compound (23).

(단계 d5) 화합물 (24) 제조(Step d5) Preparation of the compound (24)

상기 단계 c5로부터 수득한 화합물 (23)으로부터 상기 단계 c2와 동일한 방법으로 화합물 (24)를 얻었다.
Compound (24) was obtained by the same method as Step c2 from Compound (23) obtained from Step c5.

(단계 e5) 화합물 (25) 제조(Step e5) Preparation of compound (25)

상기 단계 d5로부터 수득한 화합물 (25)로부터 상기 단계 d1과 동일한 방법으로 화합물 (25)를 얻었다.
Compound (25) was obtained in the same manner as Step d1 from Compound (25) obtained in Step d5.

(단계 f5) 화학식 7의 화합물(6) 제조(Step f5) Preparation of the compound of formula 7 (6)

상기 단계 e5로부터 수득한 화합물 (25)로부터 단계 e1과 동일한 방법으로 화학식 7의 화합물(6)을 얻었다(상기 반응식 5 참조).
Compound (6) of formula (7) was obtained from compound (25) obtained from step e5 in the same manner as step e1 (see Scheme 5).

실험예 1. 신규 스핑고리피드 유도체의 스핑고신키나아제 활성 억제 효과Experimental Example 1. Inhibitory effect of sphingosine kinase activity of novel sphingolipid derivatives

상기 실시예 1 내지 6으로부터 제조된 신규 스핑고리피드 유도체의 스핑고신키나아제 활성 억제 효과를 측정하기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다. In order to measure the inhibitory effect of sphingosine kinase activity of the novel sphingolipid derivatives prepared from Examples 1 to 6, the following experiment was performed.

먼저, 스핑고신키나아제 활성 분석(Sphingosine kinase activity assay)은 32P 표지된 ATP(32P labelled ATP)를 이용하여 표지(labelling)된 스핑고신-1-포스페이트(sphingosine-1-phosphate)를 TLC에 전개시킨 후 방사선량을 측정하는 방법으로 수행하였다. 이 때, 사용한 32P 표지된 ATP는 퍼킨 엘머(Perkin Elmer)의 NEG 002(2 uCi/㎖)를 사용하였으며, 스핑고신키나아제 분석용 완충용액(assay buffer) SK1 및 SK2의 조성은 하기 표 1과 같았다. 또한, 1 mM PMSF와 0.5 % 아프로티닌(aprotinin)은 로쉬(Roche)사의 프로테아제 저해제 칵테일(protease inhibitor cocktail)을 50X의 저장용액(stock solution)으로 제조하여 사용하였으며, DTT는 200 mM, 인산 저해제(Phosphate inhibitor)인 NaVO3는 1 M의 농도로 제조하여 사용 전에 첨가하였고, 프로테아제 저해제와 NaVO3는 4 ℃에서 보관하고 DTT는 20 ℃에서 보관하면서 사용하였다.

First, the sphingosine kinase activity analysis (Sphingosine kinase activity assay) is deployed to cover (labelling) a sphingosine-1-phosphate (sphingosine-1-phosphate) by using a 32 P-labeled ATP (32 P ATP labelled) in TLC After the radiation dose was measured. At this time, 32 P labeled ATP was used as Perkin Elmer (NEG 002 (2 uCi / ㎖) of Perkin Elmer), the composition of the assay buffer SK1 and SK2 for sphingosine kinase assay is shown in Table 1 and It was like In addition, 1 mM PMSF and 0.5% aprotinin were prepared using Roche's protease inhibitor cocktail as a stock solution of 50X, and DTT was 200 mM, a phosphate inhibitor ( Phosphate inhibitor NaVO 3 was prepared at 1 M and added before use. The protease inhibitor and NaVO 3 were stored at 4 ° C and DTT was stored at 20 ° C.

SK1 완충용액SK1 buffer SK2 완충용액SK2 buffer 20 mM 트리스(Tris) HCl(pH 7.5) 20 mM Tris HCl, pH 7.5 20 mM 트리스 HCl(pH 7.5) 20 mM Tris HCl (pH 7.5) 0.25 mM EDTA 2 Na 0.25 mM EDTA 2 Na 0.25 mM EDTA 2Na 0.25 mM EDTA 2Na 1 mM MgCl2 1 mM MgCl 2 1 mM MgCl2 1 mM MgCl 2 12 mM β-글리세로인산 (β-glycerophosphate) 12 mM β-glycerophosphate 12 mM β-글리세로인산 12 mM β-glycerophosphate 1 mM Na4P2O7·12 H2O1 mM Na 4 P 2 O 7 12 H 2 O 1 mM Na4P2O7·12 H2O1 mM Na 4 P 2 O 7 12 H 2 O 5 mM NaF 5 mM NaF 5 mM NaF 5 mM NaF 5 mM NaVO3 5 mM NaVO 3 5 mM NaVO3 5 mM NaVO 3 5 % 글리세롤(glycerol) 5% Glycerol 5 % 글리세롤(glycerol) 5% Glycerol 1 mM PMSF 1 mM PMSF 1 mM PMSF 1 mM PMSF 2 mM DTT 2 mM DTT 2 mM DTT 2 mM DTT 0.5 % 아프로티닌(aprotinin) 0.5% aprotinin 0.5 % 아프로티닌 0.5% aprotinin 0.5 mM 4-디옥시피리독신 (4-deoxypyridoxine) 0.5 mM 4-dioxypyridoxine 0.5 mM 4-디옥시피리독신 0.5 mM 4-dioxypyridoxine 200 mM KCl 200 mM KCl

스핑고신키나아제 분석(Shingosine kinase assay)은 E-튜브(tube)에 CHO-K1(Chinese Hamster Ovary: ATCC Number: CCL-61, 스핑고신키나아제 유전자들이 트렌스펙션 된 세포주) 세포 라이세이트(lysate), 기질(substrate; 10∼40 μM), 시험시료인 상기 실시예 1 내지 6의 신규 스핑고리피드 유도체(10∼100 μM), ATP(0.5 mM, Hot 2uCi/㎖)를 첨가하고, 나머지는 상기 스핑고신키나아제 분석용 SK1 및 SK2 완충용액을 첨가하여 반응 볼륨(reaction volume)을 맞추었다. 또한, -80 ℃에서 꺼낸 라이세이트(lysate)를 얼음 위에서 녹인 후, 25∼30 A로 10초 동안 소니케이션(sonication)한 후 5초 냉각하는 방식으로 2회 반복한 다음, 적당량(트렌스펙션 후 발현 수준(expression level)을 확인하여 결정)을 반응액에 첨가한 후 37 ℃에서 30분간 효소반응을 수행하였다. 효소반응이 끝난 다음(reaction volume 50 ㎕) 클로로포름: 메탄올: 염산 = 100: 200: 1의 용액을 200 ㎕ 첨가한 후 1 분 간 보텍스(vortex)하여 반응을 종결시켰다. 그 후, 다시 클로로포름 65 ㎕ 와 1 M KCl 용액 650 ㎕를 첨가한 후 5 분간 보텍스(vortex)하고 5,000 rpm에서 3분간 원심분리한 다음, 상등액을 완전히 제거한 후 증발(evaporation)시켰다. 증발이 끝난 다음 클로로포름: 메탄올= 2: 1 용액을 20 ㎕ 첨가하고 TLC 플레이트(plate)에 점적한 후, 1-부탄올(butanol): 아세트산(acetic acid): 물(water) = 3: 1: 1의 용액을 전개용매로 사용하여 전개하고 노출(Exposure)시킨 후 방사선량을 측정하여 표지된 스핑고신-1-p(labelled sphingosine-1-p)를 계산하였다. 이 때, 대조군으로서 DMS(Dimethylsphingosine)를 사용하였다. Singosine kinase assay is a CHO-K1 (Chinese Hamster Ovary: ATCC Number: CCL-61, cell line transfected with sphingosine kinase genes) cell lysate, substrate in an E-tube. (substrate; 10-40 μM), the novel sphingolipid derivative (10-100 μM), ATP (0.5 mM, Hot 2 uCi / ml) of Examples 1 to 6, which are test samples, were added, and the rest was the sphingosine. Kinase assay SK1 and SK2 buffers were added to adjust the reaction volume. In addition, the lysate taken out at -80 ° C (lysate) was dissolved on ice, sonicated at 25 to 30 A for 10 seconds and then repeated twice by cooling for 5 seconds, and then appropriate amount (after transfection). The expression level (determined by checking the expression level) was added to the reaction solution, and the enzyme reaction was performed at 37 ° C for 30 minutes. After completion of the enzymatic reaction (reaction volume 50 µl), 200 µl of a solution of chloroform: methanol: hydrochloric acid = 100: 200: 1 was added, followed by vortex for 1 minute to terminate the reaction. Thereafter, 65 μl of chloroform and 650 μl of 1 M KCl solution were further added, followed by vortex for 5 minutes, centrifugation at 5,000 rpm for 3 minutes, and then the supernatant was completely removed and evaporated. After evaporation, 20 μl of chloroform: methanol = 2: 1 solution was added to the TLC plate, and then 1-butanol: acetic acid: water = 3: 1: 1 Labeled sphingosine-1-p was calculated by using a solution of, as a developing solvent, and exposing and exposing. At this time, DMS (Dimethylsphingosine) was used as a control.

그 결과, 상기 실시예 1 내지 6에서 수득한 신규 스핑고리피드 유도체는 도 1a 내지 1d에서 알 수 있는 것처럼, 스핑고신키나아제 1(SPHK 1)에 대해 우수한 효과를 보이진 못했으며, 단지 몇몇의 유도체(SG-5 내지 SG-7)이 20 uM의 농도에서부터 약간의 억제효능을 나타내었다. 이와는 반대로, 도 2a 내지 2d에서 알 수 있는 것처럼, DNA 합성억제에 관여하는 스핑고신키나아제 2(SPHK 2)에 대해서 상기 신규 스핑고리피드 유도체들은 우수한 활성 억제효능을 보였다. 특히, SG-1, SG-5, SG-7, SG-12 및 SG-14는 20 uM의 농도에서부터 우수한 효소억제효능을 나타내었다.As a result, the novel sphingolipid derivatives obtained in Examples 1 to 6 did not show an excellent effect on sphingosine kinase 1 (SPHK 1), as can be seen in Figures 1a to 1d, but only a few derivatives ( SG-5 to SG-7) showed some inhibitory effect from the concentration of 20 uM. In contrast, as shown in Figures 2a to 2d, the novel sphingolipid derivatives showed excellent activity inhibitory activity against sphingosine kinase 2 (SPHK 2) involved in DNA synthesis inhibition. In particular, SG-1, SG-5, SG-7, SG-12 and SG-14 showed excellent enzyme inhibitory effect from the concentration of 20 uM.

하기에 상기 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.Examples of the formulation of the composition will be described below, but the present invention is not intended to be limited thereto, but is intended to be described in detail.

<제형예 1: SG-5 2 % 크림><Formulation Example 1: SG-5 2% Cream>

[표 1]TABLE 1

성분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) SG-5 SG-5 2.0 %2.0% 프로필렌 글리콜 Propylene glycol 20.0 %20.0% 스테아릴 알코올 Stearyl alcohol 6.5 %6.5% 세틸 알코올 Cetyl alcohol 3.5 %3.5% 소르비탄 모노스테아레이트 Sorbitan monostearate 3.0 %3.0% 폴리소르베이트 60 Polysorbate 60 2.0 %2.0% 이소프로필 미리스테이트 Isopropyl myristate 1.0 %1.0% 무수 나트륨 설파이트 Anhydrous sodium sulfite 0.2 %0.2% 폴리소르베이트 80 Polysorbate 80 0.1 %0.1% 정제수 Purified water 61.7 %61.7%

스테아릴 알코올, 세틸알코올, 소르비탄 모노스테아레이트 및 이소프로필 미리스테이트를 이중벽 용기에 도입시키고 혼합물이 완전히 용융될 때까지 가열하였다. 이 혼합물을 70 내지 75 ℃ 에서 액체에 대한 균질기를 사용하면서 따로 제조한 정제수, 프로필렌 글리콜 및 폴리소르베이트 60의 혼합물에 가하였다. 생성된 에멀젼을 계속 혼합하면서 25 ℃ 미만으로 냉각시켰다. SG-5, 폴리소르베이트 80 및 정제수의 용액 및 정제수 중의 무수 나트륨 설파이트 용액을 이어서 계속 혼합하면서 에멀젼에 가하였다. 크림을 균질화시키고 적당한 튜브에 충전시켰다.


Stearyl alcohol, cetyl alcohol, sorbitan monostearate and isopropyl myristate were introduced into the double walled vessel and heated until the mixture melted completely. This mixture was added to a mixture of purified water, propylene glycol and polysorbate 60, prepared separately using a homogenizer for the liquid at 70 to 75 ° C. The resulting emulsion was cooled to below 25 ° C. with continued mixing. A solution of SG-5, Polysorbate 80 and purified water and anhydrous sodium sulfite solution in purified water was then added to the emulsion with continued mixing. The cream was homogenized and filled into a suitable tube.


<제형예 2: SG-5 2 % 국소용 젤><Formulation Example 2: SG-5 2% topical gel>

[표 2]TABLE 2

성분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) SG-5 SG-5 2.0 %2.0% 프로필렌 글리콜 Propylene glycol 4.0 %4.0% 하이드록시프로필 베타-사이클로덱스트린 Hydroxypropyl beta-cyclodextrin 25.0 %25.0% 에틸 알코올 95 % (v/v) Ethyl alcohol 95% (v / v) 4.0 %4.0% 카라기난 PJ Carrageenan PJ 1.0 %1.0%

염산을 용액이 될 때까지 적당량을 가하였다. 수산화 나트륨을 pH 6.0 이 될 때까지 적당량을 가하였다. 정제수를 적당량을 가하여 100 mg 이 되게 하였다.An appropriate amount was added until hydrochloric acid became a solution. Appropriate amount of sodium hydroxide was added until pH 6.0. Appropriate amount of purified water was added to make 100 mg.

정제수 중의 하이드록시프로필 베타-사이클로덱스트린의 용액에 교반하면서 SG-5를 가하였다. 염산을 용액이 될 때까지 가하고 이어서 수산화나트륨을 pH 6.0 이 될 때까지 가하였다. 이 용액을 혼합하면서 프로필렌 글리콜 중의 카라기난 PJ의 분산액에 가하였다. 서서히 혼합하면서 혼합물을 50℃로 가열하고 에틸 알코올을 가하여 약 35℃로 냉각시켰다. 정제수의 잔량을 가하고 혼합물을 균질할 때까지 혼합하였다.
SG-5 was added to the solution of hydroxypropyl beta-cyclodextrin in purified water with stirring. Hydrochloric acid was added until solution and then sodium hydroxide was added until pH 6.0. This solution was added to the dispersion of carrageenan PJ in propylene glycol while mixing. The mixture was heated to 50 ° C. with slow mixing and cooled to about 35 ° C. by adding ethyl alcohol. The remaining amount of purified water was added and the mixture was mixed until homogeneous.

<제형예 3: SG-5 나노분산액><Formulation Example 3: SG-5 Nano Dispersion Solution>

[표 3]TABLE 3

SG-5 나노분산액 전상SG-5 Nano Dispersion Phase

성분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) SG-5 SG-5 36.6 %36.6% 포스파티딜 콜린 Phosphatidyl choline 9.0 %9.0% 폴리솔베이트 80 Polysorbate 80 34.0 %34.0% 에틸 알코올 ethyl alcohol 7.4 %7.4% 미글리올 812 Miggliol 812 13.0 %13.0%

미글리올 812, SG-5 및 폴리솔베이트 80을 혼합하였다. 포스파티딜 콜린을 에탄올에 용해시키고 상기 혼합물에 가하여 균질성 투명 액체를 얻었다.
Migliol 812, SG-5 and Polysorbate 80 were mixed. Phosphatidylcholine was dissolved in ethanol and added to the mixture to obtain a homogeneous clear liquid.

[표 4]TABLE 4

SG-5 나노분산액 수상Awarded SG-5 Nano Dispersion

성분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) SG-5 SG-5 2.0 %2.0% 포스파티딜 콜린 Phosphatidyl choline 0.49 %0.49% 폴리솔베이트 80 Polysorbate 80 1.86 %1.86% 에틸 알코올 ethyl alcohol 0.63 %0.63% 미글리올 812 Miggliol 812 0.71 %0.71% 정제수 Purified water 100.0 % 가 되도록 첨가Add 100.0%

SG-5를 함유하는 수상 (예를 들어 94.54 g)을 교반시키면서 50 ℃에서 용기 내에 두었다. 액체 나노분산액 전상 (예를 들어 5.46 g)을 교반시키면서 수상에 가하였다.
The aqueous phase containing SG-5 (eg 94.54 g) was placed in a vessel at 50 ° C. with stirring. The liquid nanodispersion phase (eg 5.46 g) was added to the aqueous phase with stirring.

상기 설명한 바와 같이, 본 발명에 따른 신규 스핑고리피드 유도체 및 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염은 스핑고신키나아제의 활성을 뛰어나게 억제하여 스핑고신키나아제에 의해 세라마이드와 스핑고신이 인산화되는 것을 막음으로써 세라마이드와 스핑고신의 농도를 높게 유지시켜 이에 의해 암세포에서 아폽토시스가 유발되므로 항암 활성을 나타내며, 또한 스핑고신키나아제의 세포 증식 촉진 활성을 억제함으로써 암과 건선 등과 같은 과증식성 질환을 치료 또는 예 방하는 효과가 있으므로, 이를 함유하는 조성물은 스핑고신키나아제 억제용 조성물, 암 또는 과증식성 질환의 치료 또는 예방을 위한 조성물로써 사용될 수 있다.












As described above, the novel sphingolipid derivatives and their isomers or pharmaceutically acceptable salts thereof according to the present invention prohibit the phosphorylation of ceramides and sphingosines by sphingosine kinases with excellent inhibition of the activity of sphingosine kinases. By maintaining high concentrations of ceramide and sphingosine, which induces apoptosis in cancer cells, it exhibits anti-cancer activity, and also inhibits cell growth promoting activity of sphingosine kinase, thereby treating or preventing hyperproliferative diseases such as cancer and psoriasis Since there is an effect, the composition containing the same can be used as a composition for inhibiting sphingosine kinase, or as a composition for treating or preventing cancer or hyperproliferative diseases.












Claims (20)

하기 화학식 1로 표시되는 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염.A sphingolipid derivative represented by the following formula (1), an isomer thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof. [화학식 1][Formula 1]
Figure 112004029241444-PAT00028
Figure 112004029241444-PAT00028
 (상기 식에서, (Wherein R1은 수소(hydrogen), 또는 탄소수 1 내지 40개의 알킬기(alkyl group), 알케닐기(alkenyl group), 아실기(acyl group) 또는 아릴기(aryl group)이고; R 1 is hydrogen or an alkyl group having 1 to 40 carbon atoms, an alkenyl group, an acyl group, or an aryl group; R2는 수소(hydrogen), 또는 탄소수 1 내지 40개의 알킬기(alkyl group), 알케닐기(alkenyl group), 아실기(acyl group) 또는 아릴기(aryl group)이고; R 2 is hydrogen or an alkyl group having 1 to 40 carbon atoms, an alkenyl group, an acyl group, or an aryl group; R3는 수소(hydrogen), 또는 탄소수 1 내지 40개의 알킬기(alkyl group), 알케닐기(alkenyl group), 아실기(acyl group) 또는 아릴기(aryl group)이거나, 피롤리딘기와 몰포린기를 포함하는 헤테로고리기이고;R 3 is hydrogen or an alkyl group having 1 to 40 carbon atoms, an alkenyl group, an acyl group or an aryl group, or include a pyrrolidine group and a morpholine group A heterocyclic group; R4는 수산기를 포함한 수소(hydrogen), 또는 탄소수 1 내지 40개의 알킬기(alkyl group), 알케닐기(alkenyl group), 아실기(acyl group) 또는 아릴기(aryl group)이고;R 4 is hydrogen including a hydroxyl group, or an alkyl group having 1 to 40 carbon atoms, an alkenyl group, an acyl group or an aryl group; R5는 수소(hydrogen), 또는 탄소수 1 내지 40개의 알킬기(alkyl group), 알케닐기(alkenyl group), 아실기(acyl group) 또는 아릴기(aryl group)이다.) R 5 is hydrogen, or an alkyl group having 1 to 40 carbon atoms, an alkenyl group, an acyl group, or an aryl group. 제 1항에 있어서, 상기 스핑고리피드 유도체는 하기 화학식 2로 표시되는 화합물인 것을 특징으로 하는 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염.The sphingolipid derivative, an isomer thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, according to claim 1, wherein the sphingolipid derivative is a compound represented by the following Chemical Formula 2. [화학식 2][Formula 2]
Figure 112004029241444-PAT00029
Figure 112004029241444-PAT00029
 (상기 식에서, R은 수소(hydrogen), 또는 탄소수 1 내지 40개의 알킬기(alkyl group)이다.)(Wherein R is hydrogen or an alkyl group having 1 to 40 carbon atoms) 제 2항에 있어서, 상기 스핑고리피드 유도체는 하기 화학식 2a(SG-1), 2b(SG-2), 2c(SG-3), 또는 2d(SG-4)의 화합물인 것을 특징으로 하는 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염.The sphing of claim 2, wherein the sphingolipid derivative is a compound of Formula 2a (SG-1), 2b (SG-2), 2c (SG-3), or 2d (SG-4). Cyclic feed derivatives, isomers thereof or pharmaceutically acceptable salts thereof. [화학식 2a][Formula 2a]
Figure 112004029241444-PAT00030
Figure 112004029241444-PAT00030
 [화학식 2b][Formula 2b]
Figure 112004029241444-PAT00031
Figure 112004029241444-PAT00031
 [화학식 2c][Formula 2c]
Figure 112004029241444-PAT00032
Figure 112004029241444-PAT00032
 [화학식 2d][Formula 2d]
Figure 112004029241444-PAT00033
Figure 112004029241444-PAT00033
 제 1항에 있어서, 상기 스핑고리피드 유도체는 하기 화학식 3으로 표시되는 화합물인 것을 특징으로 하는 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염.The sphingolipid derivative, an isomer thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, according to claim 1, wherein the sphingolipid derivative is a compound represented by the following Chemical Formula 3. [화학식 3][Formula 3]
Figure 112004029241444-PAT00034
Figure 112004029241444-PAT00034
 (상기 식에서, R은 수소(hydrogen), 또는 탄소수 1 내지 40개의 알킬기(alkyl group)이다.)(Wherein R is hydrogen or an alkyl group having 1 to 40 carbon atoms) 제 4항에 있어서, 상기 스핑고리피드 유도체는 하기 화학식 3a(SG-13), 3b(SG-14), 3c(SG-15), 3d(SG-10), 또는 3e(SG-16)의 화합물인 것을 특징으로 하는 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염.The method according to claim 4, wherein the sphingolipid derivative of Formula 3a (SG-13), 3b (SG-14), 3c (SG-15), 3d (SG-10), or 3e (SG-16) Sphingolipid derivatives, isomers thereof or pharmaceutically acceptable salts thereof, characterized in that the compound is a compound. [화학식 3a][Formula 3a]
Figure 112004029241444-PAT00035
Figure 112004029241444-PAT00035
 [화학식 3b][Formula 3b]
Figure 112004029241444-PAT00036
Figure 112004029241444-PAT00036
 [화학식 3c][Formula 3c]
Figure 112004029241444-PAT00037
Figure 112004029241444-PAT00037
 [화학식 3d][Formula 3d]
Figure 112004029241444-PAT00038
Figure 112004029241444-PAT00038
 [화학식 3e][Formula 3e]
Figure 112004029241444-PAT00039
Figure 112004029241444-PAT00039
 상기 제 1항에 있어서, 상기 스핑고리피드 유도체는 하기 화학식 4로 표시되는 화합물인 것을 특징으로 하는 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염.The sphingolipid derivative, an isomer thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, according to claim 1, wherein the sphingolipid derivative is a compound represented by the following Chemical Formula 4. [화학식 4][Formula 4]
Figure 112004029241444-PAT00040
Figure 112004029241444-PAT00040
 (상기 식에서, R1 및 R2는 수소(hydrogen), 또는 탄소수 1 내지 40개의 알킬기(alkyl group)이다.) (Wherein R 1 and R 2 are hydrogen or an alkyl group having 1 to 40 carbon atoms) 제 6항에 있어서, 상기 스핑고리피드 유도체는 하기 화학식 4a(SG-5)또는 4b(SG-6)의 화합물인 것을 특징으로 하는 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염.The sphingolipid derivative, an isomer thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, according to claim 6, wherein the sphingolipid derivative is a compound of Formula 4a (SG-5) or 4b (SG-6). . [화학식 4a][Formula 4a]
Figure 112004029241444-PAT00041
Figure 112004029241444-PAT00041
 [화학식 4b][Formula 4b]
Figure 112004029241444-PAT00042
Figure 112004029241444-PAT00042
 제 1항에 있어서, 상기 스핑고리피드 유도체는 하기 화학식 5로 표시되는 화 합물인 것을 특징으로 하는 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염.The sphingolipid derivative, an isomer thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, according to claim 1, wherein the sphingolipid derivative is a compound represented by the following Chemical Formula 5. [화학식 5][Formula 5]
Figure 112004029241444-PAT00043
Figure 112004029241444-PAT00043
 (상기 식에서, R은 수소(hydrogen), 또는 탄소수 1 내지 40개의 알킬기(alkyl group)이다.)(Wherein R is hydrogen or an alkyl group having 1 to 40 carbon atoms) 제 8항에 있어서, 상기 스핑고리피드 유도체는 하기 화학식 5a(SG-7)의 화합물인 것을 특징으로 하는 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염.The sphingolipid derivative, an isomer thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, according to claim 8, wherein the sphingolipid derivative is a compound of Formula 5a (SG-7). [화학식 5a][Formula 5a]
Figure 112004029241444-PAT00044
Figure 112004029241444-PAT00044
 상기 제 1항에 있어서, 상기 스핑고리피드 유도체는 하기 화학식 6의 화합물인 것을 특징으로 하는 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염.The sphingolipid derivative, an isomer thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, according to claim 1, wherein the sphingolipid derivative is a compound represented by the following Chemical Formula 6. [화학식 6][Formula 6]
Figure 112004029241444-PAT00045
Figure 112004029241444-PAT00045
 (상기 식에서, R은 수소(hydrogen), 또는 탄소수 1 내지 40개의 알킬기(alkyl group)이다.) (Wherein R is hydrogen or an alkyl group having 1 to 40 carbon atoms) 제 10항에 있어서, 상기 스핑고리피드 유도체는 하기 화학식 6a(SG-9) 또는 6b(SG-12)의 화합물인 것을 특징으로 하는 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염.The sphingolipid derivative, an isomer thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, according to claim 10, wherein the sphingolipid derivative is a compound represented by Chemical Formula 6a (SG-9) or 6b (SG-12). . [화학식 6a][Formula 6a]
Figure 112004029241444-PAT00046
Figure 112004029241444-PAT00046
 [화학식 6b][Formula 6b]
Figure 112004029241444-PAT00047
Figure 112004029241444-PAT00047
 제 1항에 있어서, 상기 스핑고리피드 유도체는 하기 화학식 7의 화합물인 것을 특징으로 하는 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염.The sphingolipid derivative, an isomer thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, according to claim 1, wherein the sphingolipid derivative is a compound represented by the following Chemical Formula 7. [화학식 7][Formula 7]
Figure 112004029241444-PAT00048
Figure 112004029241444-PAT00048
 (상기 식에서, R은 수소(hydrogen), 또는 탄소수 1 내지 40개의 알킬기(alkyl group)이다.) (Wherein R is hydrogen or an alkyl group having 1 to 40 carbon atoms) 제 12항에 있어서, 상기 스핑고리피드 유도체는 하기 화학식 7a(SG-11)의 화합물인 것을 특징으로 하는 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염.The sphingolipid derivative, an isomer thereof, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, according to claim 12, wherein the sphingolipid derivative is a compound of Formula 7a (SG-11). [화학식 7a][Formula 7a]
Figure 112004029241444-PAT00049
Figure 112004029241444-PAT00049
 제 1항 내지 제 13항 중 어느 한 항의 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염을 유효성분으로 함유하는 스핑고신키나아제 억제용 조성물.A sphingosine kinase inhibiting composition comprising the sphingolipid derivative of any one of claims 1 to 13, an isomer thereof or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient. 제 14항에 있어서, 암 또는 암 관련 질환을 치료 또는 예방하기 위한 용도로 사용되는 것을 특징으로 하는 스핑고신카나아제 억제용 조성물.The composition for inhibiting sphingoscincanase according to claim 14, which is used for the treatment or prevention of cancer or cancer-related diseases. 제 1항 내지 제 13항 중 어느 한 항의 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염을 유효성분으로 함유하는 아폽토시스 유도용 조성물.14. A composition for inducing apoptosis comprising the sphingolipid derivative of any one of claims 1 to 13, an isomer thereof or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient. 제 16항에 있어서, 암 또는 암 관련 질환을 치료 또는 예방하기 위한 용도로 사용되는 것을 특징으로 하는 아폽토시스 유도용 조성물.The composition for inducing apoptosis according to claim 16, which is used for the treatment or prevention of cancer or cancer-related diseases. 제 1항 내지 제 13항 중 어느 한 항의 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또 는 그것의 약제학적으로 허용되는 염을 유효성분으로 함유하는 과증식성 질환의 치료 또는 예방용 조성물.14. A composition for the treatment or prophylaxis of hyperproliferative diseases, comprising the sphingolipid derivative of any one of claims 1 to 13, an isomer thereof or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient. 제 18항에 있어서, 상기 과증식성 질환은 건선인 것을 특징으로 하는 과증식성 질환의 치료 또는 예방용 조성물.19. The composition for treating or preventing hyperproliferative diseases according to claim 18, wherein the hyperproliferative disease is psoriasis. 제 1항 내지 제13항 중 어느 한 항의 스핑고리피드 유도체, 그 이성질체 또는 그것의 약제학적으로 허용되는 염을 유효성분으로 함유하는 암의 치료 또는 예방용 조성물.14. A composition for the treatment or prophylaxis of cancer comprising the sphingolipid derivative of any one of claims 1 to 13, an isomer thereof or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
KR1020040051250A 2004-07-01 2004-07-01 New sphingolipid derivatives and the composition for anti-cancer containing the same KR20060002290A (en)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020040051250A KR20060002290A (en) 2004-07-01 2004-07-01 New sphingolipid derivatives and the composition for anti-cancer containing the same
PCT/KR2005/002102 WO2006004359A1 (en) 2004-07-01 2005-07-01 Sphingolipid derivatives and the composition for anti-cancer containing the same

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020040051250A KR20060002290A (en) 2004-07-01 2004-07-01 New sphingolipid derivatives and the composition for anti-cancer containing the same

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20060002290A true KR20060002290A (en) 2006-01-09

Family

ID=35783122

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020040051250A KR20060002290A (en) 2004-07-01 2004-07-01 New sphingolipid derivatives and the composition for anti-cancer containing the same

Country Status (2)

Country Link
KR (1) KR20060002290A (en)
WO (1) WO2006004359A1 (en)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2010513382A (en) * 2006-12-22 2010-04-30 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー Compounds and methods for the synthesis of amino-alkylenediols
US8314151B2 (en) 2008-04-29 2012-11-20 Enzo Therapeutics, Inc. Sphingosine kinase type 1 inhibitors, and processes for using same
US8372888B2 (en) * 2008-04-29 2013-02-12 Enzo Therapeutics, Inc. Sphingosine kinase type 1 inhibitors, compositions and processes for using same
EP2166094A1 (en) 2008-09-23 2010-03-24 Ecole Normale Superieure De Lyon Methods for prolonging the health benefits triggered by a dietary restriction using a sphingosine kinase inhibitor
CA3061201A1 (en) 2017-06-23 2018-12-27 Enzo Biochem, Inc. Sphingosine pathway modulating compounds for the treatment of cancers
US10660879B2 (en) 2017-06-23 2020-05-26 Enzo Biochem, Inc. Sphingosine pathway modulating compounds for the treatment of cancers

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5948820A (en) * 1994-08-22 1999-09-07 Yoshitomi Pharmaceutical Industries, Ltd. Benzene compound and pharmaceutical use thereof
EP1482896A4 (en) * 2002-03-01 2005-11-23 Merck & Co Inc Aminoalkylphosphonates and related compounds as edg receptor agonists

Also Published As

Publication number Publication date
WO2006004359A1 (en) 2006-01-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP4880847B2 (en) Anti-inflammatory and psoriasis treatments and protein kinase inhibition with hydroxylstilbene and novel stilbene derivatives and analogs
EP2744773B1 (en) Fluorinated bisphenol ether compounds and methods for their use
Kim et al. Synthesis and biological evaluation of phenyl-1H-1, 2, 3-triazole derivatives as anti-inflammatory agents
JP2023017818A (en) Prodrugs of ketamine, compositions and uses thereof
CN103124727B (en) Substituted 3-phenyl-1,2,4-oxadiazole compounds
KR20080086546A (en) Method for treatment of neuropathic pain
JP2015505856A (en) Novel benzopyran compounds, their composition and use
CN1181077A (en) Benzopyran-containing compounds and method for their use
CN105358522A (en) Ester derivatives of androgen receptor modulators and methods for their use
AU2002336311B2 (en) bicyclic compound
CN103420942B (en) Second, butyrylcholine esterase had dual restraining activities compound
WO2016058080A1 (en) Fluoro-chloro bisphenol ether compounds and methods for their use
WO1992005162A1 (en) Isoxazole compound, pharmaceutically acceptable salt thereof, and medicinal use thereof
CS208660B2 (en) Method of making the n-/2-phenyl-2-hydroxyethyl/-1,1-dimethyl-3-phenylpropylamin derivatives
EP0888289A1 (en) Anticonvulsant enantiomeric amino acid derivatives
WO2006004359A1 (en) Sphingolipid derivatives and the composition for anti-cancer containing the same
JP2007510737A (en) PPMP as a ceramide catabolism inhibitor for cancer treatment
KR20200108330A (en) Phosphor (phosphorone) amidatacetal and phosph (one) atalcetal compounds
WO2005014603A1 (en) Phosphinane compounds with immunomodulating activity
BR112021016457A2 (en) COMPOUND, DRUG, AND METHOD TO TREAT PAIN OR A CENTRAL NERVOUS SYSTEM DISORDER IN A PATIENT WHO NEED THE SAME
WO2015154716A1 (en) Phenanthroline phosphonic acid derivative and preparation method therefor and application thereof
AU2012298567B2 (en) New ligands for targeting of S1P receptors for in vivo imaging and treatment of diseases
CA3173458A1 (en) Novel pharmacological chaperone compounds of human acid alpha-glucosidase and the therapeutic use thereof
US20060100289A1 (en) Nitrone compounds, pharmaceutical compositions containing the same and methods for treating inflammation and neuropathic pain
KR100705054B1 (en) Monomethylphytosphingosine and the composition for anti-cancer containing the same

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E601 Decision to refuse application