KR20050105616A - A composition of skin agent containing extract of saussurea spp and selaginella tamariscina - Google Patents

A composition of skin agent containing extract of saussurea spp and selaginella tamariscina Download PDF

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Abstract

본 발명은 설련(Saussurea spp) 추출물 및 권백(Selaginella tamariscina) 추출물을 포함하는 피부 노화방지 및 자극완화 기능을 갖는 피부외용제 조성물에 관한 것으로 설련 추출물과 권백 추출물을 동시에 적용하여 두 원료의 시너지 효과에 의해 각각 단독으로 사용했을 경우보다 훨씬 향상된 효과를 갖도록 하는 피부 노화방지 및 자극완화 효과가 우수한 피부외용제 조성물에 관한 것이다.The present invention by the synergistic effect of the two materials by applying to seolryeon extracts of Selaginella tamariscina Spring extract on the skin composition for external application having a seolryeon (Saussurea spp) extract and Selaginella tamariscina Spring (Selaginella tamariscina) the prevention of skin aging comprising an extract and irritation simultaneously It relates to an external skin composition having excellent skin anti-aging and stimulating effect to have a much improved effect than when used alone.

Description

설련 추출물 및 권백 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부외용제 조성물{A composition of skin agent containing extract of Saussurea spp and Selaginella tamariscina}A composition of skin agent containing extract of Saussurea spp and Selaginella tamariscina}

본 발명은 설련 추출물과 권백 추출물을 주요 활성성분으로 함유하는 피부외용제 조성물에 관한 것으로 좀더 상세히는 설련 추출물과 권백 추출물을 0.001 - 30.0 중량% 함유하며 항산화효과, 기질 금속단백질 분해효소의 활성억제와 발현 조절에 효과적이며 항염증효과, 콜라겐 생합성효과 등에 효과가 있는 항노화 효과 및 자극완화효과가 우수한 피부외용제 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a skin external preparation composition containing the extract of sorghum and baekbaek as the main active ingredient, more specifically 0.001-30.0% by weight of the extract and baekbaek extract, the antioxidant effect, the activity inhibition and expression of the substrate metalloproteinase The present invention relates to a skin external composition having an excellent anti-aging effect and an irritant-lowering effect, which is effective in regulating and having an anti-inflammatory effect, collagen biosynthesis effect, and the like.

사람의 피부는 노화과정에서 다양한 물리·화학적인 변화가 일어나며 그 원인으로는 크게 내적인 노화(intrinsic aging)와 광노화(photo-aging)로 구분되며 이에 관한 연구가 활발히 이루어져 왔다. 즉, 자외선, 스트레스, 질병상태, 환경인자, 상처, 나이가 들어감에 따라 프리라디칼이 활성화되어 야기될 수 있으며, 이런 상태가 심화될 경우 생체 내에 존재하는 항산화 방어망을 파괴하고, 세포 및 조직을 손상시켜 성인병 및 노화를 촉진하게 된다. 좀 더 구체적으로 말하자면, 피부의 주요 구성물질인 지질, 단백질, 다당류 및 핵산 등이 산화되어 피부세포 및 조직이 파괴되고, 결국 피부노화 현상이 생겨나는 것이다. 특히 단백질의 산화는 피부의 결합조직인 콜라겐, 히야루론산(hyaluronic acid), 엘라스틴(elastin), 프로테오글리칸(proteoglycan), 파이브로넥틴(fibronectin) 등이 절단되어 심한 과다 염증반응과 피부의 탄력에 지장을 주게 되고 이것이 더 심해질 경우 DNA의 변이에 의해 돌연변이, 암의 유발, 면역기능 저하의 사태에 이르게 된다. Human skin has various physical and chemical changes in the aging process, and its causes are classified into internal aging and photo-aging. In other words, UV rays, stress, disease conditions, environmental factors, wounds, and age can be caused by the activation of free radicals, if this condition is intensified, destroys the antioxidant defenses in vivo, damage cells and tissues To promote adult disease and aging. More specifically, lipids, proteins, polysaccharides, and nucleic acids, which are major constituents of the skin, are oxidized to destroy skin cells and tissues, resulting in skin aging. In particular, the oxidation of protein is caused by severe cuts in the skin's connective tissues such as collagen, hyaluronic acid, elastin, proteoglycan, and fibronectin, resulting in severe over-inflammatory reaction and skin elasticity. If this is exacerbated, mutations in the DNA can lead to mutations, cancer, and reduced immune function.

그러므로 신체의 대사 과정 중 발생하는 자유라디칼이나 자외선 조사, 염증반응에 의해 매개되는 프리라디칼을 소거하여 세포막을 보호하고, 또 이미 손상받은 세포는 활발한 신진대사에 의해 재생화시켜서 세포를 증식시켜야 피부는 빠르게 회복되고 건강한 피부를 유지할 수 있다. 노화에는 프리라디칼 뿐만 아니라 MMP라는 효소가 관여하는데 생체 내에서 콜라겐과 같은 세포외기질의 합성과 분해는 적절하게 조절되나 노화가 진행되면서 그 합성이 감소하며 콜라겐을 분해하는 효소인 기질 금속단백질 분해효소(MMP)의 발현이 촉진되어 피부의 탄력이 저하되고 주름이 형성된다. 또한 자외선 조사에 의해 이러한 분해효소가 활성화되기도 한다. 그러므로 세포내에서 활성화가 유도되는 MMP 발현을 조절하거나 그 활성을 억제할 수 있는 물질의 개발이 요구되고 있다. 이제까지 화장품의 소재로서 사용된 원료들은 단순히 효소 활성만을 억제하는 것이 대부분이었다. 이에 세포내 자연노화와 광노화에 의해 그 발현이 유도되는 MMP 발현양 및 활성을 조절하고자 하였다.Therefore, cell membranes are protected by eliminating free radicals generated by metabolic processes in the body, ultraviolet rays, and inflammatory reactions.Also, damaged cells must be regenerated by active metabolism to proliferate the skin. You can recover quickly and maintain healthy skin. Aging involves not only free radicals, but also an enzyme called MMP. In vivo, the synthesis and degradation of extracellular substrates such as collagen is properly regulated, but the synthesis decreases as aging progresses, and the substrate metalloproteinase, an enzyme that degrades collagen ( MMP) expression is promoted, the elasticity of the skin is reduced, wrinkles are formed. Ultraviolet irradiation also activates these degrading enzymes. Therefore, there is a need for the development of a substance capable of regulating MMP expression that inhibits activation or inhibiting its activity in cells. Until now, most of the raw materials used as materials for cosmetics simply inhibited enzyme activity. Therefore, we tried to regulate the expression and activity of MMP expression induced by intracellular aging and photoaging.

최근 여러 화학물질 등에 의한 피부자극을 줄이기 위해 천연물을 사용한 화장품이 다양하게 개발되고 있다. 천연 재료는 피부에 부작용이 적을 뿐 아니라, 소비자들의 호응이 높아짐에 따라 화장품 원료로서 개발가치가 한층 늘어나고 있다.  Recently, various cosmetic products using natural products have been developed to reduce skin irritation caused by various chemicals. Natural ingredients not only have less side effects on the skin, but also increase the value of development as a raw material for cosmetics as consumers' response increases.

설련화는 복수초 또는 원일초라고도 일컫으며, 국화과로서 Saussurea DC. 토우히렌(엉거시) 속이며 쌍자엽 식물로서 북반구에 널리 분포하는 다년초 또는 월년초로서, 약 400종에 이른다. 대부분의 종은 동아시아의 산악지대에 생육하며, 25종이 일본에 있다.Sulwhahwa is also called as plural or Wonilcho, and as asteraceae Saussurea DC. It is a genus of Tohiren (Ungeri) and dicotyledonous plants, widely distributed in the northern hemisphere, perennial or monthly, about 400 species. Most of them live in the mountains of East Asia, with 25 in Japan.

권백은 부처손과(Selaginellaceae)에 속하는 여러해살이 늘푸른 초본식물이다. 이 식물은 5 ~20cm 내외로 자라며 밑에서 파생된 근경은 매우 단단하고 짧은데 많은 수염뿌리가 나고 다소 직립하며 거칠게 자란다. 줄기는 여러 갈래로 갈라지고 줄기 끝에 넓적하고 가늘고 작은 바늘 모양의 잎이 밀생하며 그 겉면은 녹색이고 뒷면은 백녹색이다. 대체로 옆으로 퍼져 있으나 건조하게 되면 주먹모양으로 오그라지기 때문에 생약명을 권백(卷柏 Selaginellae Herba)이라 한다. 대체로 습한 바위 위에서 자라며 습기가 있을 때에는 역우산 모양으로 퍼져 있으나 건조하면 오그라지게 된다. 건조한 생약은 황갈색이고 아주 많은 수의 수염뿌리를 착생한 채 시판 거래되고 있다. 제주도를 위시하며 우리나라 전지역에서 자라며 일본, 대만, 중국에도 분포한다. 대개 채약의 시기는 가을에서 이듬해 봄 사이에 하나, 봄에 수집한 것이 질적으로 더 좋은 것으로 되어 있다. 불순물을 제거하거나 그대로 썰어서 사용하거나 권백탄(券栢炭)을 만들어 사용하고 있다. 이 생약은 생으로 쓸 때는 파혈(破血)의 효과가 있어 경폐(經閉), 타박상, 복통, 천식 치료에 이용되고 볶아서 사용하면 지혈(止血)효과가 있어 혈변(血便), 혈뇨(血尿), 탈항(脫肛)치료의 효과가 있다고 한다. 한편, 전초는 하혈(下血), 상피암(上皮癌), 폐암(肺癌) 등에 쓰인다. 이 생약에 대한 성분학적 연구는 1971년경부터 비롯되었다. 즉 비플라보노이드(Biflavonoid) 화합물로서 아멘토플라본(amentoflavone), 히노키플라본 (hinokiflavone), 이소크립토메린(isocryptomerine) 및 소테추플라본 (sotetsuflavone) 등이 분리 보고되었다.  Kwonbaek is a perennial herbaceous plant belonging to the Selaginellaceae family. The plant grows around 5-20cm and the roots derived from the root are very hard and short with many beard roots, somewhat upright and rough. The stem is divided into several branches, and broad, narrow, needle-shaped leaves are dense at the end of the stem, and the surface is green and the back is white green. Generally, it spreads sideways, but when dried, it becomes wedge-shaped, so the name of herbal medicine is called Kwonbaek (卷柏 Selaginellae Herba). It usually grows on moist rocks and spreads in the shape of an inverted umbrella when there is moisture, but when it dries, it becomes dark. The dry herb is yellowish brown and is marketed with a large number of beard roots. It is located in Jeju Island and grows all over Korea and is distributed in Japan, Taiwan and China. Usually, the harvest season is between autumn and the next spring, and the collection in the spring is of better quality. It is used by removing impurities or cutting them as they are or making Kwonbaek charcoal. This herbal medicine is effective in bleeding when used in the treatment of menstruation, bruises, abdominal pain, asthma, and when used stir-fry for hemostasis (blood stool, hematuria, It is said that the effect of anti-depressant treatment. On the other hand, outpost is used to lower blood (下 血), epithelial cancer (上皮 癌), lung cancer (肺癌). Elemental studies of this herb began around 1971. That is, as a biflavonoid compound, amentoflavone, hinokiflavone, isocryptomerine, and sotsutsuflavone have been reported separately.

일본 공개특허 제2000-143488호는 권백 외 여러 식물 추출물을 함유하는 화장료 조성물에 대하여 청구하고 있으며, 주로 지속적인 보습 성능에 대하여 기재하고 있다.Japanese Patent Laid-Open No. 2000-143488 claims a cosmetic composition containing various plant extracts including Kwonbaek, and mainly describes continuous moisturizing performance.

본 발명은 여러 천연물들 중 설련 추출물과 권백 추출물을 선택하여, 이들을 동시 함유하므로써 각각을 개별적으로 사용하는 것보다 효능이 훨씬 상승된 기능을 갖는 피부외용제를 제공하는 것을 목적으로 한다. An object of the present invention is to provide a skin external preparation having a much higher function than the use of each of them by selecting them and extracting them from the various natural products.

즉, 화장료, 연고 및 기타 피부외용제 조성물에 적용이 가능하고, 이들을 유효성분으로 함유시에 항산화효과, 콜라겐 합성효과, 콜라게나아제 발현저해효과, 피부 잔주름 완화효과 등의 항노화 및 자외선 조사 등에 의한 염증매개 물질에 의한 피부 자극완화 효과 등에 있어 탁월한 효과를 나타내는 피부외용제 조성물을 제공하는 것이다.That is, it can be applied to cosmetics, ointment, and other external skin composition, and when it is contained as an active ingredient, anti-aging and ultraviolet irradiation such as antioxidant effect, collagen synthesis effect, collagenase expression inhibition effect, skin wrinkle relief effect, etc. It is to provide an external preparation composition for skin that exhibits an excellent effect on the skin irritation-reducing effect by an inflammation mediator.

또한, 본 발명은 설련 및 권백 추출물 제조시에 특정 추출용매를 선택하므로써 목적 효능이 더욱 크게 나타난 점으로부터 이들 물질을 함유하는 화장료 조성물을 제공하고자 하는 것이다. In addition, the present invention is to provide a cosmetic composition containing these substances from the point that the target efficacy is greater by selecting a specific extraction solvent at the time of preparation of extracts of snow and white.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명자들은 여러 천연물들에 있어서 피부외용제로의 응용 가능성을 연구한 결과, 중국 설련화와 권백을 선정하고 이를 추출방법에 따라 피부 항산화 효과, 콜라겐 생합성효과, 콜라게나아제 발현 저해효과,피부 잔주름 완화효과를 측정한 결과 우수하여 그 효능이 기대 이상으로 커질 수 있다는 것을 확인하였다.In order to achieve the above object, the present inventors have studied the possibility of applying as a skin external preparation in a variety of natural products, select the Chinese sulphur and baekbaek and according to the extraction method, skin antioxidant effect, collagen biosynthesis effect, collagenase As a result of measuring the expression inhibitory effect and skin wrinkle relief effect, it was confirmed that the effect could be greater than expected.

본 발명은 설련(Saussurea spp)추출물 및 권백(Selaginella tamariscina)추출물을 유효성분으로 함유하는 노화방지 및 자극완화 기능을 갖는 피부외용제 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to an external skin composition having anti-aging and anti-irritant function, which contains Saussurea spp extract and Selaginella tamariscina extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 추출물을 상온에서 냉침, 가열 여과하여 얻어진 액상물, 추가로 용매를 감압농축 또는 동결건조하여 얻은 것을 특징으로 한다.In addition, the present invention is characterized in that the liquid obtained by cooling the extract at room temperature, heat filtration, and further obtained by concentrating the solvent under reduced pressure or lyophilization.

또한, 본 발명은 추출용매로서 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄 및 헥산 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하는 것을 특징으로 한다.In addition, the present invention is characterized by using at least one solvent selected from purified water, methanol, ethanol, glycerin, ethyl acetate, butylene glycol, propylene glycol, dichloromethane and hexane as the extraction solvent.

또한, 본 발명은 보다 바람직하게 10-95% 에탄올을 추출용매로 사용하여 추출하는 것을 특징으로 한다.In addition, the present invention is more preferably characterized in that the extraction using 10-95% ethanol as the extraction solvent.

또한, 본 발명은 설련 추출물 및 권백 추출물을 피부외용제 조성물 전체중량에 대해서 0.001-30.0중량%를 함유하는 것을 특징으로 한다.In addition, the present invention is characterized in that it contains 0.001-30.0% by weight of the extract and Kwonbaek extract based on the total weight of the skin external preparation composition.

또한, 본 발명은 상기 설련추출물 및 권백추출물이 1:5 ~ 5:1의 비로 혼합되는 것을 특징으로 한다. 이들의 혼합비는 용도에 따라서 적절히 정할 수 있으며, 바람직하게는 1:1로 혼합한다.In addition, the present invention is characterized in that the water extract and the white extract is mixed in a ratio of 1: 5 ~ 5: 1. These mixing ratio can be suitably determined according to a use, Preferably it mixes in 1: 1.

뿐만 아니라, 본 발명은 상기 피부외용제 조성물이 화장수, 젤, 수용성 리퀴드, 크림, 에센스, 수중유(O/W)형 또는 유중수(W/O)형의 제형 중에서 선택되는 것으로 제형화되는 화장료 조성물인 것을 특징으로 한다.In addition, the present invention is a cosmetic composition wherein the external composition for skin is formulated as being selected from a lotion, gel, water-soluble liquid, cream, essence, oil-in-water (O / W) type or water-in-oil (W / O) type formulation. It is characterized by that.

이하, 실시예를 통해 본 발명을 좀더 구체적으로 설명한다. 단, 이들 실시예는 본 발명의 예시적인 기재일 뿐이며 본 발명의 범위가 이들 실시예에 국한되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. However, these Examples are only illustrative description of the present invention and the scope of the present invention is not limited to these Examples.

실시예 1: 설련 추출물 제조Example 1: Preparation of Extract

세절하여 음건한 설련을 95%(V/V) 에탄올 수용액으로 5시간씩 3회 환류추출하고 냉침한 후 와트만(Whatman) #5 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 50℃ 이하에서 감압농축 또는 동결건조하였다. 감압농축물 또는 동결건조물이 0.001 - 30.0중량% 함유되게 정제수, 에탄올, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여 설련 추출물을 제조하였다.The dried pulp was then refluxed three times for 5 hours with 95% (V / V) ethanol aqueous solution, cooled, and filtered through Whatman # 5 filter paper. The filtered extract was concentrated under reduced pressure or lyophilized at 50 ° C or lower. The extract was prepared using one or more solvents selected from purified water, ethanol, butylene glycol, and propylene glycol so as to contain 0.001 to 30.0% by weight of a reduced pressure concentrate or lyophilisate.

실시예 2: 권백 추출물 제조Example 2: Kwonbaek Extract Preparation

세절하여 음건한 권백을 95%(V/V) 에탄올 수용액으로 5시간씩 3회 환류추출하고 냉침한 후 와트만(Whatman) #5 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 50℃ 이하에서 감압농축 또는 동결건조하였다. 감압농축물 또는 동결건조물이 0.001 - 30.0중량% 함유되게 정제수, 에탄올, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여 권백 추출물을 제조하였다.The dried rolled wine was refluxed three times for 5 hours with an aqueous 95% (V / V) ethanol solution, cooled, and filtered through Whatman # 5 filter paper. The filtered extract was concentrated under reduced pressure or lyophilized at 50 ° C or lower. Kwonbaek extract was prepared using one or more solvents selected from purified water, ethanol, butylene glycol, and propylene glycol so as to contain 0.001 to 30.0% by weight of the vacuum concentrate or lyophilisate.

실험예 1: NBT(Nitro Blue Tetrazolium)법을 이용한 항산화 효과 측정 실험Experimental Example 1 Experiment for Measuring Antioxidant Effect Using NBT (Nitro Blue Tetrazolium) Method

본 실험예는 실시예 1, 2에서 제조한 설련 및 권백 추출물의 항산화 효과를 확인하기 위해 실험실 조건에서 잘 알려진항산화제인 레티놀과 BHT를 비교샘플로 하고 NBT(Nitro Blue Tetrazolium)법을 이용하여 항산화 활성을 측정하였다.This Experimental Example is a comparative sample of retinol and BHT, a well-known antioxidant under laboratory conditions, to determine the antioxidant effect of the extracts of Slough and Kwonbaek prepared in Examples 1 and 2 and antioxidant activity using NBT (Nitro Blue Tetrazolium) method. Was measured.

항산화 효과를 측정하기 위해서 크산틴과 크산틴옥시다제에 의해 생성되는 활성산소를 NBT법에 의해 측정하고 피검물질이 활성산소를 제거하는 효과, 즉 활성산소 소거효과를 평가한다. 크산틴과 크산틴옥시다제에 의해 활성산소를 생성시킨다. 이 활성산소가 니트로블루테트라졸리움(Nitro Blue Tetrazolium;NBT)과 반응하여 이것에 의해 생성되는 청색을 파장 560nm에서 측정하는 것으로 활성산소 소거율을 측정한다.In order to measure the antioxidant effect, the active oxygen produced by xanthine and xanthine oxidase is measured by the NBT method, and the effect of the test substance removing the active oxygen, that is, the active oxygen scavenging effect, is evaluated. Free radicals are produced by xanthine and xanthine oxidase. This active oxygen reacts with Nitro Blue Tetrazolium (NBT) to measure the active oxygen scavenging rate by measuring the blue color produced by this at a wavelength of 560 nm.

측정방법으로서 As a measuring method

1. 0.05M Na2CO3 ------------------------------------ 2.4ml0.05M Na 2 CO 3 ------------------------------------ 2.4ml

2. 3mM 크산틴 용액---------------------------------- 0.1ml 2.3mM xanthine solution ---------------------------------- 0.1ml

3. 3mM EDTA 용액------------------------------------ 0.1ml 3.3mM EDTA Solution ------------------------------------ 0.1ml

4. BSA 용액----------------------------------------- 0.1ml 4.BSA solution ---------------------------------------- 0.1ml

5. 0.72mM NBT 용액---------------------------------- 0.1ml 5.0.72 mM NBT solution ---------------------------------- 0.1ml

6. 크산틴 옥시다제 용액----------------------------- 0.1ml 6.Xanthine Oxidase Solution ----------------------------- 0.1ml

7. 6mM CuCl2 용액----------------------------------- 0.1ml7.6 mM CuCl 2 solution ----------------------------------- 0.1ml

① 바이엘병에 1,2,3,4,5를 가하고 여기에 시료용액 0.1ml을 첨가하고 25℃에서 10분간 방치한다.① Add 1,2,3,4,5 to Bayer's bottle and add 0.1ml of sample solution to it and leave at 25 ℃ for 10 minutes.

② 6을 가하여 빨리 교반하고 25℃에서 20분간의 배양을 개시한다. ② Add 6 and stir quickly, and start incubation for 20 minutes at 25 ℃.

③ 그 후 7을 가하여 반응을 정지시키고 560nm에서의 흡광도 St를 측정한다.③ After that, add 7 to stop the reaction and measure the absorbance St at 560nm.

④ 공시험은 시료용액 대신에 증류수를 사용한 것을 상기와 똑같이 조작해 흡광도 Bt를 측정한다.④ For the blank test, measure the absorbance Bt by using distilled water instead of the sample solution as above.

⑤ 역시, 시료용액의 블랭크(Blank)는 6대신에 증류수를 사용해 똑같이 조작하여 흡광도 Bo를 측정한다.⑤ Also, the blank of the sample solution is operated in the same manner using distilled water instead of 6 to measure the absorbance Bo.

효과의 결과는 수학식 1에 의하여 산출하였으며, 결과는 표1과 같다.The result of the effect was calculated by Equation 1, the results are shown in Table 1.

억제율(%) = 〔{1-(St-So)}/(Bt-Bo)〕X 100% Inhibition = [{1- (St-So)} / (Bt-Bo)] X 100

St : 시료용액의 효소 반응 후의 560nm에서의 흡광도 St: absorbance at 560 nm after enzyme reaction of sample solution

Bt : 공시험용액의 효소 반응 후의 560nm에서의 흡광도 Bt: absorbance at 560 nm after enzymatic reaction of blank test solution

So : 시료용액의 효소 무첨가시 반응전의 560nm에서의 흡광도 So: absorbance at 560 nm before reaction without enzyme addition of sample solution

Bo : 공시험용액의 효소 무첨가시 반응전의 560nm에서의 흡광도 Bo: absorbance at 560 nm before reaction without enzyme in blank test solution

결과는 표 1과 같이 시험한 모든 시료에서 우수한 항산화 효과를 나타내었고, 설련 추출물, 권백 추출물, 설련 추출물과 권백 추출물의 혼합물은 레티놀과 BHT와 유사하거나 우수한 산화력을 갖고 있음이 확인되었다.The results showed excellent antioxidant effects in all the samples tested as shown in Table 1, and it was confirmed that the mixtures of the extracts of Sullen extract, Kwonbaek extract, Sullen extract and Kwonbaek extract had similar or superior oxidizing power to retinol and BHT.

시료명Sample Name 항산화효과(%)Antioxidative effect(%) 설련 추출물 0.1%Sullen Extract 0.1% 8989 권백 추출물 0.1%Kwonbaek Extract 0.1% 9292 설련 추출물 0.05% +권백 추출물 0.05%Sullen Extract 0.05% + Kwonbaek Extract 0.05% 9797 레티놀Retinol 9393 BHTBHT 9090

실험예 2: DPPH법을 이용한 항산화 효과 측정 실험Experimental Example 2 Experiment of Measuring Antioxidant Effect Using DPPH Method

본 실험예는 실시예 1, 2에서 수득한 설련 추출물, 권백 추출물의 항산화 효과를 측정하기 위해 실험실 조건에서 레티놀과 BHT와 같은 항산화제를 비교 샘플로 하고 DPPH법을 이용하여 항산화 활성을 측정하였다.In this experimental example, antioxidant activity such as retinol and BHT was used as a comparative sample under laboratory conditions in order to measure the antioxidant effect of the extracts of sulfur and baekbaek extracts obtained in Examples 1 and 2, and the antioxidant activity was measured using the DPPH method.

DPPH법은 DPPH(2,2-Di(4-tert-octylphenyl)-1-picrylhydrazyl free radical) 라는 유리기를 사용하여 환원력에 의한 항산화 활성을 측정한다. 피검물질에 의해 DPPH가 환원되어 흡광도가 감소하는 정도를 공시험액의 흡광도와 비교하여 파장 560nm에서 자유라디칼 소거율을 측정한다.The DPPH method measures antioxidant activity by reducing power using a free group called DPPH (2,2-Di (4-tert-octylphenyl) -1-picrylhydrazyl free radical). The free radical scavenging rate is measured at a wavelength of 560 nm by comparing the degree to which the DPPH is reduced by the test substance to reduce the absorbance.

사용한 시약으로서는 DPPH(Aldrich Chem. Co., MW=618.76) 0.1mM 용액으로서 61.88mg을 메탄올에 용해하여 100ml로 한다.As the reagent used, 61.88 mg of a 0.1 mM solution of DPPH (Aldrich Chem. Co., MW = 618.76) was dissolved in methanol to make 100 ml.

측정방법으로서 As a measuring method

① 96-웰 플레이트에 0.1mM DPPH 용액 0.15ml에 시료용액 0.15ml를 가하여 빨리 교반하고 25℃에서 10분간의 배양을 개시한다. ① Add 0.15ml of sample solution to 0.15ml of 0.1mM DPPH solution in 96-well plate, stir rapidly, and incubate for 10 minutes at 25 ℃.

② 그 후 560nm에서의 흡광도 St를 측정한다. (2) Then measure the absorbance St at 560nm.

③ 공시험은 시료용액 대신에 증류수를 사용한 것을 상기와 똑같이 조작해 흡광도 Bt를 측정한다. ③ In the blank test, measure the absorbance Bt by using distilled water instead of the sample solution as above.

④ 역시, 시료용액의 블랭크(Blank)는 0.1mM DPPH 용액 대신에 메탄올을 사용해 똑같이 조작하여 흡광도 Bo를 측정한다. ④ Again, the blank of the sample solution was operated in the same manner using methanol instead of the 0.1 mM DPPH solution to measure the absorbance Bo.

억제율은 수학식 2에 의하여 산출하였으며, 결과는 표 2에 나타내었다.Inhibition rate was calculated by Equation 2, the results are shown in Table 2.

억제율(%) = 〔{1-(St-So)}/(Bt-Bo)〕X 100% Inhibition = [{1- (St-So)} / (Bt-Bo)] X 100

St : 시료용액의 자유라디칼 소거 후의 560nm에서의 흡광도 St: absorbance at 560 nm after free radical scavenging of sample solution

Bt : 공시험용액의 자유라디칼 소거 후의 560nm에서의 흡광도 Bt: absorbance at 560 nm after free radical scavenging of blank test solution

So : 시료용액의 자유라디칼 무첨가시 반응 전의 560nm에서의 흡광도 So: Absorbance at 560 nm before reaction without free radicals in sample solution

Bo : 공시험용액의 자유라디칼 무첨가시 반응 전의 560nm에서의 흡광도 Bo: absorbance at 560 nm before reaction without free radicals in blank test solution

표 2에서 확인할 수 있듯이 설련 및 권백 추출물은 항산화제로 많이 이용되고 있는 레티놀과 BHT보다 우수한 항산화력을 갖고 있음을 알 수 있었다.As can be seen in Table 2, it was found that the extracts of sulfur and baekbaek have better antioxidant power than retinol and BHT, which are widely used as antioxidants.

시료명Sample Name 항산화효과(%)Antioxidative effect(%) 설련 추출물 0.1%Sullen Extract 0.1% 9191 권백 추출물 0.1%Kwonbaek Extract 0.1% 8484 설련 추출물 0.05% +권백 추출물 0.05%Sullen Extract 0.05% + Kwonbaek Extract 0.05% 9494 RetinolRetinol 8282 BHTBHT 8888

실험예 3: 콜라겐 생합성 촉진효과Experimental Example 3: Collagen Biosynthesis Promoting Effect

실시예 1, 2의 설련추출물과 권백추출물에 대한 인비트로(in vitro) 방법으로 콜라겐 생합성 촉진효과를 검토하였다. 시험방법은 인체 피부 섬유아세포(Human skin fibroblast)를 24웰에 웰당 3 X 104개씩 심어(seeding) 90% 정도로 발전할 때까지 배양하였다. 이를 PBS로 한번 씻어낸 후, 설련추출물, 권백추출물, 설련추출물과 권백 추출물의 혼합물을 처리하고 48시간 동안 CO2 배양기에서 배양하였다. 이들의 상층액을 떠내어 프로콜라겐(procollagen) 타입 (1) C-펩타이드(PICP)의 양을 ELISA 킷트를 이용하여 프로콜라겐 증감여부를 살펴보았다. 합성능은 대조군(비처리군)을 100으로 하여 대비한 것이다. 콜라겐 합성효과는 수식 3에 의해 산출하였으며, 결과는 표 3에 나타내었다.The effects of promoting collagen biosynthesis were examined by in vitro methods for the extracts of white sugar and the whites of Examples 1 and 2. In the test method, human skin fibroblasts were cultured in 24 wells until 3% 10 4 seedings per well were developed to about 90%. This was washed once with PBS, and then treated with a mixture of extracts, baekbaek extract, baeksu extract and baekbaek extract and incubated in a CO 2 incubator for 48 hours. The supernatant was removed, and the amount of procollagen (procollagen) type (1) C-peptide (PICP) was examined using the ELISA kit. Synthetic capacity is prepared by using a control (non-treated group) as 100. Collagen synthesis effect was calculated by the formula 3, the results are shown in Table 3.

콜라겐 합성효과(%) = (추출물의 세포배양액의 반응흡광도/대조군의 반응흡광도) X 100Collagen Synthesis Effect (%) = (Responsive Absorption of Extract Cell Cultures / Responsive Absorption of Control) X 100

표 3에 나타난 바와 같이 설련 및 권백 추출물은 콜라겐 생합성 촉진 효과가 우수한 것을 확인하였다.As shown in Table 3, it was confirmed that the extracts of sulfur and Kwonbaek were excellent in promoting collagen biosynthesis.

시료명Sample Name 콜라겐생합성(%)Collagen Biosynthesis (%) 설련 추출물 0.1%Sullen Extract 0.1% 108108 권백 추출물 0.1%Kwonbaek Extract 0.1% 131131 설련 추출물 0.05% +권백 추출물 0.05%Sullen Extract 0.05% + Kwonbaek Extract 0.05% 139139 대조군(비처리군)Control (untreated) 100100

실험예 4: 인비트로 기질 금속단백질분해효소 억제 어세이(in vitro MMP-1 inhibition assay)Experimental Example 4: in vitro MMP-1 inhibition assay

기질 금속단백질분해효소(MMP-1) 저해 활성은 테스트관 내에서 스크리닝 타입의 생화학적 모델에서 측정하였는데 이는 정제된 콜라게나제 및 이의 기질인 플루오레세인에 접합된 콜라겐과 젤라틴의 이용을 기초로 하였다(EnzChek(상표명) 젤라티나제/콜라게나제 키트, 몰큘라프루브). 클로스트리디움 히스토리티컴으로부터 정제된 콜라게나제를 상기 EnzChek(상표명)젤라티나제/콜라게나제 키트내에 공급하였다. 돼지 피부로부터 정제하고 플로오레세인에 접합된 DQ-콜라겐과 0.05M 트리스-HCl, 0.15M NaCl, 5mM CaCl2 및 0.2mM 나트륨 아지드(pH 7.6)로 이루어지는 반응완충액은 EnzChek(상표명)젤라티나제/콜라게나제 키트(몰큘라 프로브스)를 이용하였다. 설련 추출물과 권백 추출물은 상기 반응완충액 내에 용해시켰다. 이는 4; 2; 0.4; 0.2; 0.1%(w/v)에서 테스트하였다. 테스트 추출물의 희석액은 25ug/ml의 DQ-콜라겐 및 0.1U/ml의 콜라게나제와 함께 실온에서 15분, 45분, 120분 동안 항온처리하였다.Substrate metalloproteinase (MMP-1) inhibitory activity was measured in vitro in a screening type biochemical model based on the use of collagen and gelatin conjugated to purified collagenase and its substrate, fluorescein. (EnzChek ™ Gelatinase / Collagenase Kit, Molecule Prove). Collagenase purified from Clostridium histiocom was supplied in the EnzChek ™ gelatinase / collagenase kit. The reaction buffer consisting of DQ-collagen purified from porcine skin and conjugated to fluorescein with 0.05M Tris-HCl, 0.15M NaCl, 5mM CaCl 2 and 0.2mM sodium azide (pH 7.6) was obtained from EnzChek® gelatinase. Collagenase kit (Molcula Probes) was used. Sullen extract and Kwonbaek extract were dissolved in the reaction buffer. It is 4; 2; 0.4; 0.2; Test at 0.1% (w / v). Dilutions of the test extracts were incubated with 25 ug / ml of DQ-collagen and 0.1 U / ml of collagenase for 15 minutes, 45 minutes, and 120 minutes at room temperature.

각각의 실험조건에서 콜라게나제와 DQ-콜라겐 혼합물에 상응하는 대조용 혼합물(control)도 동일하게 항온처리하였다. 또한 각각의 실험 조건에서 Blank, 이하 '효소 비함유 blank'이라 칭하는 샘플은 DQ-콜라겐의 존재 및 콜라게나제의 부재하에서 항온처리하였다. 각각의 실험은 3회 수행하였다.In each experimental condition, the control corresponding to the collagenase and DQ-collagen mixture was also incubated in the same manner. Also in each experimental condition a sample called Blank, hereinafter 'enzyme free blank', was incubated in the presence of DQ-collagen and in the absence of collagenase. Each experiment was performed three times.

15분, 45분, 120분 경과 후 DQ-콜라겐의 분해에 상응하는 신호는 형광측정기(여기:485nm, 방출 505nm)로 측정하였다. '효소 비함유 blank' 형광값을 기준으로 하여 각각의 샘플의 형광값을 측정하였다. 결과는 샘플당 형광 단위 및 대조군에 대한 변이율(%)로 나타냈다. 결론적으로 선택된 실험조건하에서 0.04 내지 4%(v/v)에서 테스트된 설련 추출물과 권백 추출물은 투여랑 의존성 항콜라게나제/젤라티나제 활성을 보유하였다. After 15, 45 and 120 minutes, the signal corresponding to the degradation of DQ-collagen was measured with a fluorometer (excitation: 485 nm, emission 505 nm). The fluorescence value of each sample was measured based on the 'enzyme free blank' fluorescence value. Results are expressed as percent variance for fluorescence units per sample and control. In conclusion, the extracts of vulgar and baekbaek extracts tested at 0.04 to 4% (v / v) under selected experimental conditions retained dose-dependent anticollagenase / gelatinase activity.

결과는 표 4에 나타냈으며 설련 추출물과 권백 추출물을 0.1% 씩 처리시 클로스트리디움 콜라게나제의 콜라겐 분해활성을 각각 80%, 87% 억제하였으며 이는 녹차추출물의 저해 효과와 유사하거나 보다 우수하였다.The results are shown in Table 4, and the treatment of the collagen degrading activity of Clostridium collagenase by 80% and 87%, respectively, was performed when 0.1% of the extracts of the soybean extract and the white bean extract were treated, which was similar to or better than the inhibitory effect of the green tea extract.

실험샘플 및 처리농도(%)Experimental sample and treatment concentration (%) 저해율(%)% Inhibition 설련 추출물 0.1%Sullen Extract 0.1% 8080 권백 추출물 0.1%Kwonbaek Extract 0.1% 8787 설련 추출물 0.05% + 권백 추출물 0.05%Sullen Extract 0.05% + Kwonbaek Extract 0.05% 9292 레티놀Retinol 6464 녹차추출물Green Tea Extract 8383

실험예 5: 자외선 조사 후 설련 추출물에 의한 MMP-1 발현억제 평가Experimental Example 5: Evaluation of MMP-1 Expression Inhibition by Extracts from Sulfur After Ultraviolet Irradiation

본 실험예는 실시예 1, 2에서 수득한 설련 추출물과 권백 추출물의 UV 조사 및 시료 첨가 후 MMP-1 농도를 측정하기 위해서 ELISA를 실시하였다. In this experimental example, ELISA was performed to measure the concentration of MMP-1 after UV irradiation and sample addition of the sulfur extract and the Kwonbaek extract obtained in Examples 1 and 2.

UV 챔버를 이용하여 인간 진피 섬유아세포에 UVA를 6.3J/㎠의 에너지로 조사하였다. 자외선 조사량과 배양시간은 예비실험을 통하여 섬유아세포에서 MMP 발현량이 최대가 되는 조건을 확립하였다. 음성 대조군은 은박지로 싸서 UVA의 환경에 같은 시간 유지하였다. UVA 방출량은 UV 라디오미터를 이용하여 측정하였다. UVA가 조사되는 동안의 세포는 이전에 분주된 배지 그대로이고 UVA를 조사 한 후 샘플이 들어간 배지로 교환하여 24시간 배양 후 배지를 회수하여 96-웰에 코팅한다. 일차항체(MMP-1 단일클론항체)를 처리하고 37℃에서 60분 반응시킨다. 이차항체인 안티마우스 IgG(whole mouse, alkaline phosphatase conjugated)를 다시 60분 정도 반응시킨 후, 알카린 포스파타제 기질 용액(1mg/ml ρ-nitrophenyl phosphate in diethanolamine 완충용액)을 상온에서 30분간 반응시키고 마이크로플레이트 리더로 405nm에서 흡광도를 측정한다. 대조군으로는 시료를 첨가하지 않은 것을 사용한다.Human dermal fibroblasts were irradiated with UVA at an energy of 6.3 J / cm 2 using a UV chamber. UV irradiation amount and incubation time were established through preliminary experiments to maximize the expression of MMP in fibroblasts. Negative controls were wrapped in tinfoil and maintained at the same time in the environment of UVA. UVA emission was measured using a UV radiometer. The cells during the UVA irradiation are intact in the previously dispensed medium and irradiated with UVA and then exchanged with the medium containing the sample for 24 hours of incubation, and then the medium is recovered and coated in 96-well. The primary antibody (MMP-1 monoclonal antibody) is treated and reacted at 37 ° C. for 60 minutes. After reacting the secondary antibody anti-mouse IgG (whole mouse, alkaline phosphatase conjugated) again for about 60 minutes, the alkaline phosphatase substrate solution (1mg / ml ρ-nitrophenyl phosphate in diethanolamine buffer solution) was reacted at room temperature for 30 minutes and microplates. Measure the absorbance at 405 nm with a reader. As a control, the one without addition of the sample is used.

자외선 조사시에 발현이 유도되는 MMP-1에 대하여 시료를 처리하지 않은 대조군에 비해 설련 추출물과 권백 추출물은 각각 28%, 76%, 설련추출물과 권백추출물의 혼합물을 처리하였을 경우에는 87%의 억제율을 보였으며 이는 대조군으로 사용한 레티놀의 억제율에 비해 상당히 우수한 결과를 나타내었다.Inhibition rate was 28% and 76% for MMP-1, and 28% and 76%, respectively, for MMP-1, which was induced during UV irradiation, and 87% for the mixture of the extract and the extract. This was a very good result compared to the inhibition rate of the retinol used as a control.

시험군Test group MMP-1 발현억제율(%)MMP-1 expression inhibition rate (%) 대조군Control -- 설련 추출물 0.1%Sullen Extract 0.1% 2828 권백 추출물 0.1%Kwonbaek Extract 0.1% 7676 설련 추출물 0.05% + 권백 추출물 0.05%Sullen Extract 0.05% + Kwonbaek Extract 0.05% 8787 레티놀Retinol 3131

실험예 6: 자외선조사에 의한 프로스타글란딘 생합성 억제 효과Experimental Example 6: Inhibitory Effect of Prostaglandin Biosynthesis by UV Irradiation

본 실험예는 실시예 1,2에서 수득한 설련 추출물과 권백 추출물의 프로스타글란딘 생합성 억제 효과를 평가하기 위하여 사람의 표피 조직에서 분리한 각질형성세포(Keratinocyte)를 24-웰 시험 플레이트에 5x104개씩 넣고 24시간 동안 부착시켰다. FBS가 포함되지 않은 배지로 교체하고, 18시간동안 배양한 다음, 상기의 각질형성세포에 최종 농도가 50uM이 되도록 아스피린(aspirin)을 처리하여 각질형성세포에 존재하는 프로스타글란딘 생합성 효소(prostaglandin E2 synthetase, 또는 cyclooxygenase, 이하 COX)의 활성을 제거하였다. 아스피린 처리 2시간 후에 각질형성세포가 들어있는 각 웰을 PBS로 2회 세척하고 각 웰에 100ul의 PBS를 넣었다. 이 각질형성세포에 자외선 B(UVB) 램프(Model : F15T8, UV B 15W, Sankyo Dennki사, Japan)를 이용하여 자외선 30mJ/cm2를 조사한 후 PBS를 덜어내고 각 웰에 각질형성세포 배양액(keratinocyte growth media, Clonetics, Biowhittacker사, MD, USA) 250ul를 첨가하였다. 여기에 평가하고자 하는 설련 추출물과 권백 추출물, 그리고 설련 추출물과 권백 추출물을 혼합한 시료를 처리한 후 16시간 동안 배양하였다. 배양 상층액을 적당량 취하여 16시간동안 생합성된 PGE2(prostaglandin E2)를 정량함으로서 설련 추출물, 권백 추출물, 설련 추출물과 권백 추출물의 혼합물의 프로스타글란딘 억제 효과를 판단하였다. PGE2의 양은 효소면역분석법(enzyme immunoassay)를 이용하여 정량화하였으며 실험결과 설련 추출물과 권백 추출물, 설련 추출물과 권백 추출물의 혼합물은 자외선에 의한 프로스타글란딘의 생성을 효과적으로 억제함을 알 수 있었다. 특히 생성되는 PGE2는 주로 COX-2 효소에 의해 만들어지는 것으로 알려져 있으므로 상기 실험을 통해 설련 추출물, 권백 추출물, 설련 추출물과 권백 추출물 혼합물이 COX-2 효소의 유도작용 또는 활성을 억제함을 알 수 있었다(표 6).In this experimental example, to evaluate the inhibitory effect of prostaglandin biosynthesis between the extracts of narcissus and baekbaek extracts obtained in Examples 1 and 2, 5 × 10 4 keratinocytes isolated from human epidermal tissue were placed in a 24-well test plate. Attached for 24 hours. After replacing with medium containing no FBS, and incubating for 18 hours, prostaglandin biosynthetic enzyme (prostaglandin E 2 synthetase) present in keratinocytes was treated with aspirin to achieve a final concentration of 50 uM on the keratinocytes. , Or cyclooxygenase (hereinafter referred to as COX) was removed. Two hours after aspirin treatment, each well containing keratinocytes was washed twice with PBS and 100 ul of PBS was added to each well. The keratinocytes were irradiated with UV 30mJ / cm 2 using an ultraviolet B (UVB) lamp (Model: F15T8, UV B 15W, Sankyo Dennki, Japan), and then PBS was removed and each cell was cultured with keratinocytes. growth media, Clonetics, Biowhittacker, MD, USA) 250ul was added. Here, the samples were treated with the extracts of the extracts of sulfur and Kwonbaek, and the samples of the extracts of Seokyeon and Kwonbaek were incubated for 16 hours. The prostaglandin inhibitory effect of the mixtures of the extracts of cholesterol, baekbaek extract, baekmul extract and baekbaek extract was determined by quantifying PGE 2 (prostaglandin E 2 ) biosynthesized for 16 hours by taking an appropriate amount of the culture supernatant. The amount of PGE 2 was quantified by enzyme immunoassay, and the results of the experiment showed that the mixtures of the extracts of cholera, baekbaek extract, baekmul extract and baekbaek extract effectively inhibited the production of prostaglandins by UV light. Particularly, the produced PGE 2 is known to be mainly produced by the COX-2 enzyme. Therefore, it can be seen from the above experiments that the mixture of the extracts of the extract, Kwon-baek, Seol- extract and Kwon-baek extract inhibits the induction or activity of the COX-2 enzyme. (Table 6).

시료sample PGE2 억제율(%)PGE 2 Inhibition Rate (%) (-) UV B(-) UV B -- (+) UV B(+) UV B -- (+) UV B + 설련 추출물 0.1%(+) UV B + Sullen Extract 0.1% 8383 (+) UV B + 권백 추출물 0.1%(+) UV B + Kwonbaek Extract 0.1% 2121 (+) UV B + 설련 추출물 0.05% + 권백 추출물 0.05%(+) UV B + Sullen Extract 0.05% + Kwonbaek Extract 0.05% 8787

실시예 3 내지 5 및 비교예 1Examples 3 to 5 and Comparative Example 1

본 실시예는 실시예 1,2에서 수득한 설련 추출물, 권백 추출물과 설련 추출물과 권백 추출물 혼합물을 함유한 화장료를 제조하여 사람을 대상으로 피부 잔주름 개선 효과와 피부미용효과를 비교예 1과 비교실험을 행하여 평가하였다.This Example is to prepare a cosmetic composition containing the mixture of the extracts of the sulphur extract, baekbaek extract and baekryul extract and baekbaek extract obtained in Examples 1 and 2 to compare the skin wrinkle effect and skin beauty effect in Comparative Example 1 Evaluation was performed.

비교실험에 사용된 화장료는 크림형태이고, 그 조성은 표 8에 나타낸 바와 같다. 우선 표 8에 기록되어 있는 나)상을 가열하여 70℃에 보존한다. 이것에 가)상을 가하여 예비유화 후 호모믹서로 균일하게 유화하고 다음에 서서히 냉각하여 크림(실시예 8 내지 10, 비교예 1)을 제조한다. 실험자(20세-35세의 여성) 20명을 대상으로 얼굴 오른쪽 부위에는 실시예 8 내지 10에서 제조된 크림을 얼굴 왼쪽 부위에는 비교예 1에서 제조된 크림을 각각 1일 2회씩 연속 3개월간 도포하였다.The cosmetics used in the comparative experiments are in the form of a cream, the composition of which is shown in Table 8. First, the phase b) recorded in Table 8 is heated and stored at 70 ° C. To this, a) phase is added, and after pre-emulsification, it is emulsified uniformly with a homomixer, and then cooled slowly to prepare a cream (Examples 8 to 10, Comparative Example 1). For 20 experimenters (20-35 year old female), the cream prepared in Examples 8 to 10 was applied to the right side of the face, and the cream prepared in Comparative Example 1 was applied twice a day for 3 consecutive months to the left side of the face. It was.

실험완료 후 피부 잔주름 완화 효과는 제품 사용 전과 2개월간 사용 후에 안면 눈꼬리 주위의 주름을 실리콘 수지 복사물(레플리카)로 채취하고, 이것을 피부 미세 주름 장치와 피부 영상 분석기로 눈가 잔주름의 상태를 비교한다.After completion of the experiment, the skin wrinkle relief effect is obtained by using a silicone resin copy (replica) before and after using the product for 2 months, and comparing the state of the eye wrinkles with a skin fine wrinkle device and a skin image analyzer.

원료Raw material 실시예 3Example 3 실시예 4Example 4 실시예 5Example 5 비교예1Comparative Example 1 end 스테아릴 알콜Stearyl alcohol 88 88 88 88 스테아린산Stearic acid 22 22 22 22 스테아린산 콜레스테롤Stearic cholesterol 22 22 22 22 스쿠알란Squalane 44 44 44 44 2-옥틸도데실알콜2-octyldodecyl alcohol 66 66 66 66 폴리옥시에틸렌(25몰부가)알콜에스테르Polyoxyethylene (25 mol addition) alcohol ester 33 33 33 33 글리세릴모노스테아린산아스테르Glyceryl monostearic acid ester 22 22 22 22 I 설련 추출물Sullen Extract 1One -- -- -- 권백 추출물Kwonbaek Extract -- 1One -- -- 설련 추출물 + 권백 추출물Sullen Extract + Kwonbaek Extract -- -- 0.5 + 0.50.5 + 0.5 -- 프로필렌글리콜Propylene glycol 55 55 55 55 정제수Purified water 적량Quantity 적량Quantity 적량Quantity 적량Quantity

주)단위: 중량%Note) Unit: Weight%

표 8은 실시예 3 내지 5에서 제조된 크림을 사용한 실험자의 눈가 평균 잔주름 깊이 및 주름 감소율을 비교예 1의 크림을 사용한 실험자와 비교한 것이다. 표 9에서 나타난 바와 같이 설련 추출물과 권백 추출물 혼합물을 함유한 크림을 도포한 실험자의 안면 눈주위 피부에서 피부 주름 개선 효과가 우수함을 알 수 있다.Table 8 compares the average eye wrinkle depth and wrinkle reduction rate of the experimenter using the creams prepared in Examples 3 to 5 with the experimenter using the cream of Comparative Example 1. As shown in Table 9, it can be seen that the skin wrinkle improvement effect is excellent in the skin around the face of the experimenter who applied the cream containing the mixture of the extract of white gold and baekbaek.

기간 term 실시예3Example 3 실시예4Example 4 실시예 5Example 5 비교예 1Comparative Example 1 사용전Before use 2개월후2 months later 사용전Before use 2개월후2 months later 사용전Before use 2개월후2 months later 사용전Before use 2개월후2 months later 평균 잔주름 깊이Average fine wrinkle depth 0.1980.198 0.1860.186 0.1960.196 0.1730.173 0.1990.199 0.1720.172 0.1970.197 0.1930.193 주름깊이감소율(%)Wrinkle depth reduction rate (%) 6.06%6.06% 11.73%11.73% 13.56%13.56% 2.03%2.03%

n=20,p<0.01       n = 20, p <0.01

실시예 6: 실시예 1, 2에서 수득한 설련 추출물과 권백 추출물을 함유한 화장수의 제조Example 6: Preparation of a lotion containing the sorrel extract and the baekbaek extract obtained in Examples 1 and 2

95% 에탄올 8g에 폴리피로리돈 0.05g, 올레일알콜 0.1g, 폴리옥시에틸렌모노올레이트 0.2g, 향료 0.2g, 파라옥시안식향산메틸에스테르 0.1g, 소량의 산화방지제, 소량의 색소를 혼합용해 한다. 실시예 1, 2에서 수득한 설련 추출물 0.05g + 권백 추출물 0.05g, 글리세린 5g을 정제수 85.33g에 용해한 것에 상기 혼합액을 첨가한 후 교반하여 피부개선효과가 있는 화장수를 얻었다.To 8 g of 95% ethanol, 0.05 g of polypyrrolidone, 0.1 g of oleyl alcohol, 0.2 g of polyoxyethylene monooleate, 0.2 g of fragrance, 0.1 g of paraoxybenzoic acid methyl ester, a small amount of antioxidant, and a small amount of pigment are dissolved. . The mixture was added to 0.05 g of the soybean extract obtained in Examples 1 and 2, and 0.05 g of the white bean extract and 5 g of glycerin in 85.33 g of purified water, followed by stirring to obtain a skin lotion having a skin improvement effect.

실시예 7: 실시예 1, 2에서 수득한 설련 추출물과 권백 추출물을 함유한 유액의 제조Example 7 Preparation of Latex Containing the Extract of Sulolum and Kwonbaek Extract Obtained in Examples 1 and 2

세틸알콜 1.2g, 스쿠알란 10g, 바세린 2g, 파라옥시안식향산에틸에스테르 0.2g, 글리세린모노에스테아레이드 1g, 폴리옥시에틸렌(20몰부가)모노올레이트 1g 및 향료 0.1g을 70℃에서 가열혼합용해하고, 실시예 1, 2에서 수득한 설련 추출물 0.05g + 권백 추출물 0.05g, 디프로필렌글리콜 5g, 폴리에틸렌글리콜-1500 2g, 트리에탄올아민 0.2g, 정제수 76.2g을 75℃로 가열해서 용해시킨다. 양자를 혼합하여 유화시킨 후 냉각하여 수중유(O/W)형의 피부개선효과가 있는 유액을 얻었다.1.2 g of cetyl alcohol, 10 g of squalane, 2 g of petrolatum, 0.2 g of paraoxybenzoic acid ethyl ester, 1 g of glycerin monoesteralide, 1 g of polyoxyethylene (20 mole added) monooleate and 0.1 g of fragrance were mixed and dissolved at 70 ° C. , 0.05 g of the scomil extract obtained in Examples 1 and 2, 0.05 g of baekbaek extract, 5 g of dipropylene glycol, 2 g of polyethylene glycol-1500, 0.2 g of triethanolamine, and 76.2 g of purified water were heated to 75 ° C to dissolve it. Both mixtures were emulsified and cooled to obtain an emulsion having an oil-in-water (O / W) type skin improvement effect.

실시예 8: 실시예 1, 2에서 수득한 설련 추출물과 권백 추출물을 함유한 미용액의 제조Example 8 Preparation of Cosmetic Liquid Containing the Extract of Sulolum and Kwonbaek Extract Obtained in Examples 1 and 2

95% 에틸알콜 5g에 폴리옥시에틸렌솔비탄모노올레이트 1.2g, 키툴로오즈 0.3g, 히야론산나트륨 0.2g, 비타민 E-아세테이트 0.2g, 감초산 나트륨 0.2g, 파라옥시안식향산에틸에스테르 0.1g, 실시예 1, 2에서 수득한 설련 추출물 0.05g + 권백 추출물 0.05g 및 적량의 색소를 혼합하여 피부개선효과가 있는 미용액을 얻었다.5 g of 95% ethyl alcohol, 1.2 g of polyoxyethylene sorbitan monooleate, 0.3 g of kitulose, 0.2 g of sodium hyaluronate, 0.2 g of vitamin E-acetate, 0.2 g of sodium licorice, 0.1 g of paraoxybenzoic acid ethyl ester, 0.05 g of the white gold extract + 0.05 g of the white extract and the appropriate amount of pigments obtained in Examples 1 and 2 were mixed to obtain a cosmetic solution having a skin improvement effect.

이상에서 설명한 바와 같이, 본 발명은 설련 또는 권백 추출물을 개별적으로 사용했을 경우에 비해, 상기 두 추출물을 동시에 사용함에 의하여 항산화 효과, 콜라겐 생합성효과, MMP 저해 효과와 자외선 조사에 의한 MMP 발현 조절효과, 잔주름 개선효과 등의 항노화 효과와 자외선 조사 후 야기되는 피부 자극을 완화시켜 주는 효과이 훨씬 상승된 피부외용제 조성물을 제공할 수 있다.As described above, the present invention is compared with the case of using the extracts of the white or white, respectively, by using the two extracts at the same time, the antioxidant effect, collagen biosynthesis effect, MMP inhibitory effect and MMP expression control effect by ultraviolet irradiation, The anti-aging effect, such as the improvement of fine wrinkles, and the effect of alleviating the skin irritation caused after ultraviolet irradiation can provide a much improved external skin composition.

또한, 본 발명은 상기 효과를 바탕으로 설련 추출물과 권백 추출물을 유효성분으로 하는 화장수, 크림, 유액, 팩, 파우더 등의 화장료 조성물로 제공할 수 있다.In addition, the present invention can be provided as a cosmetic composition such as a lotion, cream, milky lotion, pack, powder, etc., based on the above effects, the extract of suolyeo and baekbaek extract as an active ingredient.

Claims (7)

설련(Saussurea spp)추출물 및 권백(Selaginella tamariscina)추출물을 유효성분으로 함유하는 노화방지 및 자극완화 기능을 갖는 피부외용제 조성물.A skin external preparation composition having anti-aging and stimulating function, which contains extracts of Saussurea spp and Selaginella tamariscina as active ingredients. 제1항에 있어서, 상기 추출물은 상온에서 냉침, 가열 여과하여 얻어진 액상물, 추가로 용매를 감압농축 또는 동결건조하여 얻은 것을 특징으로 하는, 설련추출물 및 권백추출물을 유효성분으로 함유하는 노화방지 및 자극완화 기능을 갖는 피부외용제 조성물.The method of claim 1, wherein the extract is obtained by cold condensation at room temperature, heating and filtration, further obtained by concentrating the solvent under reduced pressure or lyophilization, anti-aging containing sulphur extract and Kwonbaek extract as an active ingredient and Skin external composition having a stimulating function. 제2항에 있어서, 추출용매로서 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄 및 헥산 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하는 것을 특징으로 하는, 설련(Saussurea spp)추출물 및 권백(Selaginella tamariscina)추출물을 유효성분으로 함유하는 노화방지 및 자극완화 기능을 갖는 피부외용제 조성물.The method of claim 2, characterized in that at least one solvent selected from purified water, methanol, ethanol, glycerin, ethyl acetate, butylene glycol, propylene glycol, dichloromethane and hexane as extractant, Saussurea spp An external skin composition having an anti-aging and stimulating function, which contains an extract and a baekbaek ( Selaginella tamariscina ) extract as an active ingredient. 제3항에 있어서, 10-95% 에탄올을 추출용매로 사용하여 추출하는 것을 특징으로 하는, 설련(Saussurea spp)추출물 및 권백(Selaginella tamariscina)추출물을 유효성분으로 함유하는 노화방지 및 자극완화 기능을 갖는 피부외용제 조성물.According to claim 3, characterized in that the extraction using 10-95% ethanol as an extraction solvent, the anti-aging and stimulating function containing Saussurea spp extract and Selaginella tamariscina extract as an active ingredient Having a skin external preparation composition. 제1항에 있어서, 설련 추출물 및 권백 추출물은 피부외용제 조성물 전체중량에 대해서 0.001-30.0중량%를 함유하는 것을 특징으로 하는, 설련추출물 및 권백추출물을 유효성분으로 함유하는 노화방지 및 자극완화 기능을 갖는 피부외용제 조성물.The anti-aging and stimulating function of claim 1, characterized in that the extract of scomil and baekbaek extract contains 0.001-30.0% by weight based on the total weight of the external skin preparation composition, scomil extract and baekbaek extract as an active ingredient. Having a skin external preparation composition. 제1항에 있어서, 상기 설련추출물 및 권백추출물은 1:5 ~ 5:1의 비로 혼합되는 것을 특징으로 하는, 설련(Saussurea spp)추출물 및 권백(Selaginella tamariscina)추출물을 유효성분으로 함유하는 노화방지 및 자극완화 기능을 갖는 피부외용제 조성물.The anti-aging of claim 1, wherein the sulphate extract and the baekbaek extract are mixed in a ratio of 1: 5 to 5: 1, and the sulcus (Saussurea spp) extract and the baekbaek ( Selaginella tamariscina ) extract as an active ingredient. And an external skin composition having a stimulating function. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 피부외용제 조성물은 화장수, 젤, 수용성 리퀴드, 크림, 에센스, 수중유(O/W)형 또는 유중수(W/O)형의 제형 중에서 선택되는 것으로 제형화되는 화장료 조성물인 것을 특징으로 하는, 설련추출물 및 권백추출물을 유효성분으로 함유하는 노화방지 및 자극완화 기능을 갖는 피부외용제 조성물.The skin preparation composition according to any one of claims 1 to 6, wherein the skin external preparation composition is in a formulation of a lotion, gel, water-soluble liquid, cream, essence, oil-in-water (O / W) type or water-in-oil (W / O) type. Skin cosmetic composition having an anti-aging and anti-irritant function, characterized in that the cosmetic composition to be formulated to be selected, containing sulphur extract and baekbaek extract as an active ingredient.
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Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100669362B1 (en) * 2005-07-25 2007-01-16 한불화장품주식회사 Manufacturing method for extract of selaginella tamariscina using traditional process and cosmetic composition containing the same
KR100924920B1 (en) * 2007-05-18 2009-11-05 김수남 Composition for preventing and curing acne
KR101123653B1 (en) * 2009-06-26 2012-03-20 대전보건대학 산학협력단 Cosmetic composition for controlling anti-acne
KR20150135757A (en) * 2015-11-19 2015-12-03 (주)아모레퍼시픽 Composition for promoting the volume of skin
WO2021060714A1 (en) * 2019-09-26 2021-04-01 한국생명공학연구원 Cosmetic composition for preventing skin aging and reducing skin wrinkles, comprising selaginella rossii warb. extract
CN115531272A (en) * 2022-04-18 2022-12-30 广东芭薇生物科技股份有限公司 Antioxidant composition derived from alpine plants and preparation method and application thereof

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100902173B1 (en) * 2007-06-01 2009-06-10 (주)아모레퍼시픽 Anti-wrinkle composition for external applications to the skin containing Biflavonoid derivatives
KR102490075B1 (en) * 2017-01-17 2023-01-18 주식회사 엘지생활건강 Cosmetic composition for wound healing or skin regeneration comprising extract of Selaginella tamariscina
CN112218616A (en) 2018-03-23 2021-01-12 玫琳凯有限公司 Topical compositions and methods

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100669362B1 (en) * 2005-07-25 2007-01-16 한불화장품주식회사 Manufacturing method for extract of selaginella tamariscina using traditional process and cosmetic composition containing the same
KR100924920B1 (en) * 2007-05-18 2009-11-05 김수남 Composition for preventing and curing acne
KR101123653B1 (en) * 2009-06-26 2012-03-20 대전보건대학 산학협력단 Cosmetic composition for controlling anti-acne
KR20150135757A (en) * 2015-11-19 2015-12-03 (주)아모레퍼시픽 Composition for promoting the volume of skin
WO2021060714A1 (en) * 2019-09-26 2021-04-01 한국생명공학연구원 Cosmetic composition for preventing skin aging and reducing skin wrinkles, comprising selaginella rossii warb. extract
KR20210036803A (en) * 2019-09-26 2021-04-05 한국생명공학연구원 Cosmetic composition for preventing skin aging and improving skin winkle comprising extracts of Selaginella rossii
CN115531272A (en) * 2022-04-18 2022-12-30 广东芭薇生物科技股份有限公司 Antioxidant composition derived from alpine plants and preparation method and application thereof
CN115531272B (en) * 2022-04-18 2023-09-26 广东芭薇生物科技股份有限公司 Antioxidant composition derived from alpine plants and preparation method and application thereof

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