KR20030097235A - Medium for lactic acid producing bacteria not affecting taste, color and flavour of product - Google Patents

Medium for lactic acid producing bacteria not affecting taste, color and flavour of product Download PDF

Info

Publication number
KR20030097235A
KR20030097235A KR1020020034518A KR20020034518A KR20030097235A KR 20030097235 A KR20030097235 A KR 20030097235A KR 1020020034518 A KR1020020034518 A KR 1020020034518A KR 20020034518 A KR20020034518 A KR 20020034518A KR 20030097235 A KR20030097235 A KR 20030097235A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
lactic acid
medium
acid bacteria
culture
bacteriocin
Prior art date
Application number
KR1020020034518A
Other languages
Korean (ko)
Inventor
이연희
백경수
Original Assignee
(주) 피엘바이오
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by (주) 피엘바이오 filed Critical (주) 피엘바이오
Priority to KR1020020034518A priority Critical patent/KR20030097235A/en
Publication of KR20030097235A publication Critical patent/KR20030097235A/en

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
    • C12P1/04—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using bacteria
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

PURPOSE: A medium for activating functional lactic acid bacteria which do not affect characteristic taste, color and flavor of a product is provided, thereby rapidly activating lactic acid bacteria and producing high concentration of bacteriocin. CONSTITUTION: A medium for activating functional lactic acid bacteria which do not affect characteristic taste, color and flavor of a product comprises a minimal medium and at least one compound selected from MnSO4, glucose, alanine, glycine and asparagine, wherein the minimal medium comprises K2HPO4, KH2PO4, MgSO4 7H2O, C6H5Na3O7, (NH4)2SO4 and distilled water; and the medium comprises (a) 0.5 to 5 wt.% of K2HPO4, 0.1 to 5 wt.% of KH2PO4, 0.1 to 5 wt.% of MgSO4 7H2O, 0.01 to 5 wt.% of C6H5Na3O7, 0.01 to 1 wt.% of (NH4)2SO4 and 79 to 99.28 wt.% of distilled water; and (b) at least one compound is selected from the group consisting of 0.01 to 1 wt.% of MnSO4, 0.005 to 1 wt.% of glucose, 0.005 to 1 wt.% of alanine, 0.005 to 1 wt.% of glycine and 0.005 to 1 wt.% of asparagine.

Description

제품 고유의 맛, 색 및 향에 영향이 없는 기능성 유산균 활성화 배지{MEDIUM FOR LACTIC ACID PRODUCING BACTERIA NOT AFFECTING TASTE, COLOR AND FLAVOUR OF PRODUCT}Functional lactobacillus activation medium without affecting the inherent taste, color and aroma {MEDIUM FOR LACTIC ACID PRODUCING BACTERIA NOT AFFECTING TASTE, COLOR AND FLAVOUR OF PRODUCT}

[발명이 속하는 기술분야][TECHNICAL FIELD OF THE INVENTION]

본 발명은 제품 고유의 맛, 색 및 향에 영향이 없는 기능성 유산균 활성화 배지에 관한 것으로, 보다 상세하게는 유산균을 단시간내에 활성화시켜 고농도의 박테리오신을 생산할 수 있는 활성화 배지에 관한 것이다.The present invention relates to a functional lactic acid bacteria activation medium that does not affect the inherent taste, color and aroma of the product, and more particularly, to an activation medium capable of activating the lactic acid bacteria in a short time to produce a high concentration of bacteriocin.

[종래기술][Private Technology]

박테리오신은 미생물이 생산하는 천연의 무독성 방부제로 많은 그람양성세균과 그람음성세균에 의해 생산되는 항균물질이다. 박테리오신은 단백질 또는 탄수화물로 구성되어 있으며, 인체에 섭취되면 소화기관의 단백질 가수 분해 효소에 의해 분해되어 인체에 무독하고 잔류성이 없는 천연 방부제이다.Bacteriocin is a natural nontoxic preservative produced by microorganisms and is an antibacterial substance produced by many gram-positive bacteria and gram-negative bacteria. Bacteriocin is composed of proteins or carbohydrates, and when ingested in the human body, it is decomposed by proteolytic enzymes of the digestive organs and is a natural preservative that is nontoxic and non-residual to the human body.

현재 산업적으로 가장 관심의 대상이 되고 있는 박테리오신은 주로 유산균이 생산하는 박테리오신들로서, 유산균 군을 형성하고 있는 다섯 개의 주요 속(Lactobacillus, Lactococcus, Leuconostoc, Pediococcus, Camobacterium)에서 생산되어지고 있다.Bacteriocin, which is currently of most interest in the industry, is mainly produced by lactic acid bacteria, and is produced in five major genera ( Lactobacillus, Lactococcus, Leuconostoc, Pediococcus, Camobacterium ) that form a group of lactic acid bacteria.

박테리오신은 발효유, 발효 알콜 음료, 통조림 제품, 냉장, 냉동 제품, 고추장, 된장, 두부, 유산균 발효 제품 등의 저장성을 향상시키고, 전통 식품(김치, 약주, 탁주 등)의 산패 및 변질 방지한다. 또한 박테리오신은 고온에서의 활성을 유지하고, 광범위한 pH에서 안정성을 가지며, 무독, 무색, 무취인 성질을 가지고 있다. 따라서 이러한 박테리오신은 화학 합성 방부제를 대체할 수 있는 천연방부제로서의 가능성이 높게 평가되고 있으며, 실제 최소의 열처리와 저온 유통으로 식품의 안전성을 확보할 수 있는 수단으로 사용되고 있다.Bacteriocin improves shelf life of fermented milk, fermented alcoholic beverages, canned products, refrigerated, frozen products, red pepper paste, miso, tofu, lactic acid bacteria fermentation products, and prevents rancidity and deterioration of traditional foods (kimchi, medicinal herbs, Takju, etc.). Bacteriocin also maintains activity at high temperatures, is stable at a wide range of pH, and is non-toxic, colorless, and odorless. Therefore, such bacteriocin is highly regarded as a natural preservative that can replace a chemical synthetic preservative, and is actually used as a means to secure food safety with minimal heat treatment and low temperature distribution.

박테리오신 생산은 주로 유산균을 MRS(bacto proteose peptone No.3 10 g,bacto beef extract 10 g, bacto yeast extract 5 g, bacto dextrose 20 g, polysorbate 80 g, ammonium citrate 2 g, sodium acetate 5 g, magnesium sulfate 0.1 g, manganese sulfate 0.05 g, dipotassium phosphate 2 g /L) 등의 일반 유산균 배지와 배지 주성분이 웨이(Whey)로 이루어지고 고기추출물(Beef extract)이 첨가된 배지에서 배양하여, 배양액으로부터 균을 윈심분리와 여과법으로 분리하는 방법으로 이루어지고 있다. 그러나, 일반 유산균 배지의 경우 단시간에 고농도의 박테리오신을 생산하기 어려울 뿐만 아니라, 유산균 배양액을 건조하였을 때 효모 추출물과 고기 추출물 등 배지 성분에 의해 색깔과 맛과 향이 좋지 않아 다양한 식품에 적용하기 어렵다.Bacteriocin production mainly consists of lactic acid bacteria, MRS (bacto proteose peptone No.3 10 g, bacto beef extract 10 g, bacto yeast extract 5 g, bacto dextrose 20 g, polysorbate 80 g, ammonium citrate 2 g, sodium acetate 5 g, magnesium sulfate General lactic acid bacteria medium such as 0.1 g, manganese sulfate 0.05 g, dipotassium phosphate 2 g / L) and cultured in a medium consisting of Whey and the addition of a beef extract, winsim bacteria from the culture It consists of a method of separation by separation and filtration. However, in the case of general lactic acid bacteria medium, not only is it difficult to produce a high concentration of bacteriocin in a short time, and when the lactic acid bacteria culture medium is dried, it is difficult to apply to various foods due to poor color, taste and aroma due to media components such as yeast extract and meat extract.

상기 종래 기술의 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로서, 본 발명은 단시간에 고농도의 박테리오신을 생산시킬 수 있는 배지를 제공하는 것을 목적으로 한다.In order to solve the problems of the prior art, an object of the present invention is to provide a medium capable of producing a high concentration of bacteriocin in a short time.

또한 본 발명은 단시간내의 유산균을 활성화시킬 수 있는 배지를 제공하는 것을 목적으로 한다.It is another object of the present invention to provide a medium capable of activating lactic acid bacteria in a short time.

또한 본 발명은 유산균을 단시간 내에 활성화시킬 수 있는 최소구성성분을 포함하는 배양배지를 제공하는 것을 목적으로 한다.In addition, an object of the present invention is to provide a culture medium containing a minimum component capable of activating the lactic acid bacteria in a short time.

또한 본 발명은 유산균 배양액을 건조하여 식품에 첨가하였을 때 식품 고유의 색, 맛 및 향을 변화시키지 않는 유산균 배양배지를 제공하는 것을 목적으로 한다.In another aspect, the present invention is to provide a lactic acid bacteria culture medium that does not change the color, taste and aroma of the food when the lactic acid bacteria culture medium is added to the food dried.

도 1a는 본 발명의 활성화 배지에서 배양하여 수득한 유산균 배양여액에 의한 헬리코박터 필로리의 성장 억제정도를 나타낸 사진이고, 도 1b는 유산균이 접종 안된 배지에 의해서는 헬리코박터 필로리의 성장이 억제되지 않는 대조군 사진이고,Figure 1a is a photograph showing the degree of growth inhibition of Helicobacter filament by the lactic acid bacteria culture filtrate obtained by culturing in the activation medium of the present invention, Figure 1b is the growth of Helicobacter filament is not inhibited by the medium not inoculated with lactic acid bacteria Control picture,

도 2는 유산균 배양여액을 희석하였을 때, 헬리코박터 균에 대한 성장 억제능을 나타낸 그래프이고,2 is a graph showing the growth inhibitory ability against Helicobacter bacteria when the lactic acid bacteria culture filtrate was diluted,

도 3은 유산균 배양여액을 증류수로 1 % 되도록 희석한 다음 웰 테스트를 실시하였을 때 헬리코박터 필로리의 성장 억제정도를 나타낸 사진이고,Figure 3 is a photograph showing the degree of growth inhibition of Helicobacter Philo when the lactic acid bacteria culture filtrate is diluted to 1% with distilled water and then subjected to a well test,

도 4는 MRS에서 유산균을 배양한 다음 제조한 배양여액(A) 및 활성화 배지에서 유산균을 배양한 다음 제조한 배양여액(B)의 색상 차이를 비교한 사진이다.4 is a photograph comparing the color difference between the culture filtrate prepared after culturing the lactic acid bacteria in MRS (A) and the culture filtrate (B) prepared after culturing the lactic acid bacteria in the activation medium.

상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 최소배지 및, MnSO4, 글루코스, 알라닌, 글리신 및 아스파라진으로 이루어진 군으로부터 1종이상 선택된 화합물을 포함하는 것인 유산균 활성화 배지를 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a lactic acid bacteria activation medium comprising a minimum medium and at least one compound selected from the group consisting of MnSO 4 , glucose, alanine, glycine and asparagine.

또한 본 발명은 (a) 최소배지에 MnSO4, 글루코스, 알라닌, 글리신 및 아스파라진으로 이루어진 군으로부터 1종이상 선택된 화합물을 혼합하여 활성화 배지를 준비하는 단계 및 (b) 상기 배지에 유산균을 접종하고 배양하여 배양물을 제조하는 단계를 포함하는 박테리오신 생산방법을 제공한다.In another aspect, the present invention (a) at least one compound selected from the group consisting of MnSO 4 , glucose, alanine, glycine and asparagine to prepare an activation medium and (b) inoculating lactic acid bacteria in the medium and It provides a bacteriocin production method comprising the step of culturing to prepare a culture.

또한 본 발명은 상기의 박테리오신 생산방법으로 제조된 박테리오신을 제공한다.In another aspect, the present invention provides a bacteriocin prepared by the above method for producing bacteriocin.

또한 본 발명은 (a) 최소배지에 MnSO4, 글루코스, 알라닌, 글리신 및 아스파라진으로 이루어진 군으로부터 1종이상 선택된 화합물을 혼합하여 활성화 배지를 준비하는 단계 및 (b) 상기 배지에 유산균을 접종하고 배양하여 배양물을 제조하는 단계를 포함하는 방법으로 제조된 유산균 활성액을 제공한다.In another aspect, the present invention (a) at least one compound selected from the group consisting of MnSO 4 , glucose, alanine, glycine and asparagine to prepare an activation medium and (b) inoculating lactic acid bacteria in the medium and It provides a lactic acid bacteria active solution prepared by the method comprising the step of culturing to prepare a culture.

또한 본 발명은 (a) 최소배지에 MnSO4, 글루코스, 알라닌, 글리신 및 아스파라진으로 이루어진 군으로부터 1종이상 선택된 화합물을 혼합하여 활성화 배지를 준비하는 단계,(b) 상기 배지에 유산균을 접종하고 배양하여 배양물을 제조하는 단계 및 (c) 상기 배양물로부터 배양여액을 수득하는 단계를 포함하는 방법으로 제조된 유산균 활성액을 제공한다.In another aspect, the present invention (a) mixing the at least one compound selected from the group consisting of MnSO 4 , glucose, alanine, glycine and asparagine in a minimal medium to prepare an activation medium, (b) inoculating the medium to lactic acid bacteria It provides a lactic acid bacteria active solution prepared by the method comprising the step of culturing to prepare a culture and (c) obtaining a culture filtrate from the culture.

이하 본 발명을 상세하게 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명자들은 유산균을 단시간내에 증식시키고, 고농도의 박테리오신을 생산할 수 있는 유산균 활성화 배지를 제조하였다.The present inventors produced lactic acid bacteria activating medium capable of propagating lactic acid bacteria in a short time and producing a high concentration of bacteriocin.

본 발명의 유산균 활성화 배지는 최소배지에 MnSO4, 글루코스, 알라닌, 글리신 및 아스파라진으로 이루어진 군으로부터 1종이상 선택된 화합물을 포함하는 것을 특징으로 한다.The lactic acid bacteria activation medium of the present invention is characterized in that it contains at least one compound selected from the group consisting of MnSO 4 , glucose, alanine, glycine and asparagine in a minimal medium.

상기 최소배지는 K2HPO4, KH2PO4, MgSO4.7H20, C6H5Na3O7,(NH4)2SO4및 증류수를 포함하는 것으로, 바람직하게는 0.5 내지 5 중량%의 K2HPO4, 0.1 내지 5 중량%의 KH2PO4, 0.1 내지 5 중량%의 MgSO4.7H20, 0.01 내지 5 중량%의 C6H5Na3O7, 0.01 내지 1 중량%의 (NH4)2SO4및 79 내지 99.28 중량%의 증류수를 포함한다.The minimal medium was K 2 HPO 4, KH 2 PO 4, MgSO 4 .7H 2 0, C 6 H 5 Na 3 O 7, (NH 4) 2 SO 4 and distilled as comprising a, preferably from 0.5 to 5 % by weight of K 2 HPO 4, 0.1 to 5% by weight of KH 2 PO 4, 0.1 to 5% by weight of MgSO 4 .7H 2 0, 0.01 to 5% by weight of C 6 H 5 Na 3 O 7 , 0.01 to 1 Wt% (NH 4 ) 2 SO 4 and 79 to 99.28 wt% distilled water.

본 발명의 유산균 활성화 배지에 포함되는 MnSO4는 0.01 내지 1 중량%가 바람직하며, 글루코스, 알라닌 또는 글리신은 각각 0.005 내지 1 중량%가 바람직하다.The MnSO 4 contained in the lactic acid bacteria activation medium of the present invention is preferably 0.01 to 1% by weight, and preferably 0.005 to 1% by weight of glucose, alanine or glycine, respectively.

가장 바람직한 유산균 활성화 배지는 K2HPO4, KH2PO4, MgSO4.7H20, C6H5Na3O7, (NH4)2SO4,MnSO4, 증류수, 글루코스, 알라닌, 글리신 및 아스파라진을 포함하는 것이다.The most preferred active lactic acid bacteria culture medium K 2 HPO 4, KH 2 PO 4, MgSO 4 .7H 2 0, C 6 H 5 Na 3 O 7, (NH 4) 2 SO 4, MnSO 4, distilled water, glucose, alanine, glycine And asparagine.

본 발명의 유산균 활성화 배지에 유산균을 접종하여 배양하므로써 유산균 활성액을 제조할 수 있다. 본 발명의 유산균 활성액은 유산균 배양액 또는 유산균 배양여액 모두를 의미한다.By inoculating the lactic acid bacteria into the lactic acid bacteria activating medium of the present invention, the lactic acid bacteria active liquid can be prepared. Lactobacillus active liquid of the present invention means both lactic acid bacteria culture solution or lactic acid bacteria culture filtrate.

유산균은 통상적인 박테리오신을 생산하는 모든 종류의 유산균이 바람직하며, 분말 유산균, 동결건조 유산균, 배양된 유산균 또는 유산균 배양액으로 접종할 수 있다. 바람직하게는 1 X 108내지 5.0 X 108cfu/ml의 유산균을 액상 배지에 첨가하여 30 내지 40 ℃에서 5-10시간 배양하는 것이 좋다.The lactic acid bacteria are preferably all kinds of lactic acid bacteria producing conventional bacteriocin, and may be inoculated with powdered lactic acid bacteria, lyophilized lactic acid bacteria, cultured lactic acid bacteria or lactic acid bacteria culture solution. Preferably, 1 × 10 8 to 5.0 × 10 8 cfu / ml of lactic acid bacteria are added to the liquid medium, and then incubated at 30 to 40 ° C. for 5-10 hours.

본 발명의 유산균 배양여액은 유산균 배양액에서 유산균을 제거하므로써 수득할 수 있으며, 이 때 통상적으로 실시되는 방법은 원심분리법 또는 여과법이다. 그러나 유산균 배양여액 수득 방법은 이에 한정되는 것은 아니다.The lactic acid bacteria culture filtrate of the present invention can be obtained by removing the lactic acid bacteria from the lactic acid bacteria culture medium, in which the usual practice is centrifugation or filtration. However, the method for obtaining lactic acid bacteria filtrate is not limited thereto.

본 발명의 유산균 활성액은 고농도의 박테리오신을 포함하고 있어, 식품첨가물, 보존제 또는 식중독균 방지를 위한 용도로 사용할 수 있다.The lactic acid bacterium active liquid of the present invention contains a high concentration of bacteriocin and can be used for food additives, preservatives or food poisoning.

본 발명의 유산균 활성액은 (a) 유산균 활성화 배지를 준비하는 단계, (b) 상기 배지에 유산균을 접종하고 배양하여 배양물을 제조하는 단계를 포함하는 방법으로 제조될 수 있으며, 또는 (a) 유산균 활성화 배지를 준비하는 단계, (b) 상기 배지에 유산균을 접종하고 배양하여 배양물을 제조하는 단계, 및 (c) 상기 배양물로부터 배양여액을 수득하는 단계를 포함하는 방법으로 제조될 수 있다.The lactic acid bacteria active solution of the present invention may be prepared by a method comprising the steps of (a) preparing a lactic acid bacteria activation medium, (b) inoculating and culturing the lactic acid bacteria in the medium, or (a) lactic acid bacteria It may be prepared by a method comprising the steps of preparing an activation medium, (b) inoculating and incubating the lactic acid bacteria in the medium, and (c) obtaining a culture filtrate from the culture.

본 발명은 유산균의 생균 또는 사균체가 동시에 포함된 배양여액을 제조하여 유해균의 부착억제력과 살균 억제력이 높은 식품 첨가물, 보존제, 식중독균 방지를 위한 용도로 사용할 수 있다.The present invention can be used for the production of a culture filtrate containing live or dead bacteria of lactic acid bacteria at the same time, food additives, preservatives, food poisoning bacteria prevention of high adhesion inhibitory and bactericidal.

또한 본 발명은 최소배지에 MnSO4, 글루코스, 알라닌, 글리신 및 아스파라진으로 이루어진 군으로부터 1종이상 선택된 화합물을 혼합하여 활성화 배지를 준비하는 단계, 상기 배지에 유산균을 접종하여 배양하여 배양물을 제조하는 단계를 포함하는 박테리오신 생산방법 및, 이로부터 제조된 박테리오신을 제공한다.In another aspect, the present invention is to prepare a culture medium by incorporating at least one compound selected from the group consisting of MnSO 4 , glucose, alanine, glycine and asparagine in a minimal medium, inoculated with lactic acid bacteria in the medium to prepare a culture. It provides a method for producing bacteriocin, and the bacteriocin prepared therefrom.

본 발명의 박테리오신 생산방법은 상기 배양물로부터 배양여액을 수득하는 단계 또는 상기 배양물 또는 배양여액으로부터 박테리오신을 분리하는 단계를 더욱 포함할 수 있다. 박테리오신 분리방법은 통상의 방법으로 실시할 수 있다. 일예로 암모늄 셀페이트 침전, 분자량에 따른 크로마토그래피(molecular sieve columnchromatography) 방법 등으로 박테리오신을 분리할 수 있다.The bacteriocin production method of the present invention may further include obtaining a culture filtrate from the culture or separating the bacteriocin from the culture or the culture filtrate. The bacteriocin separation method can be carried out by conventional methods. For example, bacteriocin may be separated by ammonium sulphate precipitation, molecular sieve chromatography (molecular sieve column chromatography).

본 발명의 유산균 활성화 배지는 유산균을 단시간내에 활성화시켜 고농도의 박테리오신의 생산을 가능하게 할 수 있을 뿐만 아니라 유산균 배양액 또는 배양여액을 식품 첨가물로 이용할 경우 식품 고유의 맛, 색 및 향을 해치지 않는다.The lactic acid bacteria activating medium of the present invention not only enables the production of high concentrations of bacteriocin by activating the lactic acid bacteria in a short time, but also does not harm the intrinsic taste, color and aroma of the food when the lactic acid bacteria culture medium or the filtrate is used as a food additive.

이하 본 발명의 실시예를 기재한다. 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐 본 발명이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, examples of the present invention will be described. The following examples are only for illustrating the present invention and the present invention is not limited to the following examples.

실시예: 활성화 배지Example: Activation Medium

(1) 활성화 배지의 조성 (1) Composition of Activation Medium

K2HPO47g/l, KH2PO42g/l, MgSO4.7H20 1g/l, 소듐 사이트레이트 0.5g/l 및 (NH4)2SO40.1 g/l, 물 100 mL을 최소배지로 하였으며, 여기에 MnSO40.2g/l, 글루코스 1%, 알라닌 100 ug/ml, 글리신 100 ug/ml 또는 아스파라진 100 ug/ml을 첨가하여 하기 표 1의 활성화배지들을 제조하였다. 상기 활성화배지는 HCl로 pH 7.0으로 적정하고, 고압 증기 멸균하여 사용하였다. K 2 HPO 4 7g / l, KH 2 PO 4 2g / l, MgSO 4 .7H 2 0 1g / l, sodium sites rate 0.5g / l and (NH 4) 2 SO 4 0.1 g / l, to 100 mL with water To the minimum medium, 0.2g / l MnSO 4 , 1% glucose, 100 ug / ml alanine, 100 ug / ml glycine or 100 ug / ml asparagine was added to prepare the activation medium of Table 1 below. The activation medium was titrated to pH 7.0 with HCl, and used by autoclaving.

실시예Example 활성화 배지 조성Activation medium composition 실시예 1Example 1 최소배지 + 글루코스 + 알라닌 + 글리신 + 아스파라진Minimum medium + glucose + alanine + glycine + asparagine 실시예 2Example 2 최소배지 + MnSO4+ 글루코스 + 알라닌 + 글리신 + 아스파라진Minimum medium + MnSO 4 + glucose + alanine + glycine + asparagine 실시예 3Example 3 최소배지 + MnSO4+ 글루코스Minimum medium + MnSO 4 + glucose 실시예 4Example 4 최소배지 + MnSO4+ 알라닌Minimum medium + MnSO 4 + Alanine 실시예 5Example 5 최소배지 + MnSO4+ 글리신Minimum medium + MnSO 4 + glycine 실시예 6Example 6 최소배지 + MnSO4+ 아스파라진Minimum medium + MnSO 4 + Asparagine 실시예 7Example 7 최소배지 + MnSO4+ 글루코스 + 알라닌Minimum medium + MnSO 4 + glucose + alanine 실시예 8Example 8 최소배지 + MnSO4+ 글루코스 + 글리신Minimum medium + MnSO 4 + glucose + glycine 실시예 9Example 9 최소배지 + MnSO4+ 글루코스 + 아스파라진Minimum medium + MnSO 4 + glucose + asparagine 실시예 10Example 10 최소배지 + MnSO4+ 글루코스 + 알라닌 + 글리신Minimum medium + MnSO 4 + glucose + alanine + glycine 실시예 11Example 11 최소배지 + MnSO4+ 글루코스 + 알라닌 + 아스파라진Minimum medium + MnSO 4 + glucose + alanine + asparagine 실시예 12Example 12 최소배지 + MnSO4+ 글루코스 + 글리신 + 아스파라진Minimum medium + MnSO 4 + glucose + glycine + asparagine 실시예 13Example 13 최소배지 + MnSO4+ 알라닌 + 글리신Minimum medium + MnSO 4 + Alanine + Glycine 실시예 14Example 14 최소배지 + MnSO4+ 알라닌 + 아스파라진Minimum medium + MnSO 4 + Alanine + Asparagine 실시예 15Example 15 최소배지 + MnSO4+ 글리신 + 아스파라진Minimum medium + MnSO 4 + glycine + asparagine 실시예 16Example 16 최소배지 + MnSO4+ 알라닌 + 글리신 + 아스파라진Minimum medium + MnSO 4 + Alanine + Glycine + Asparagine 실시예 17Example 17 최소배지 + MnSO4 Minimum Medium + MnSO 4 비교예Comparative example 최소배지Minimum badge 대조군Control MH 배지MH Badge

대조군으로 사용한 MH 배지는 물러 힌턴배지(Muller Hinton; beef extract 3.0 g, acid hydrolysate of casein 17.5 g, starch 1.5 g)이다.MH medium used as a control is Muller Hinton; beef extract 3.0 g, acid hydrolysate of casein 17.5 g, starch 1.5 g.

실험예 1: 활성화 배지의 효과검증 IExperimental Example 1: Effect Verification of Activation Medium I

락토바실러스 컨퓨서스 PL 9001 (KCCM-10245), 스트렙토코커스 패칼리스 PL 9003(KCCM-10247), 락토바실러스 컨퓨서스 PL 9004(KCCM-10248), 락토바실러스 퍼멘텀 PL 9005(KCCM-10250), 락토바실러스 퍼멘텀 PL 9006 (KCCM-10251), 락토바실러스 플란타룸 9010 및 락토바실러스 플란타룸 9011를 실험에 이용하였다. 각각의 유산균은 MRS 배지(Difco, bacto proteose peptone No.3 10 g, bacto beef extract 10 g, bacto yeast extract 5 g, bacto dextrose 20 g, polysorbate 80 g, ammonium citrate 2 g, sodium acetate 5 g, magnesium sulfate 0.1 g, manganesesulfate 0.05 g, dipotassium phosphate 2 g /L)에 접종하여 37 ℃에서 하룻밤 배양하였고, 유산균 또는 동결건조된 유산균 5.0 X 108cfu/ml을 활성화 배지에 첨가하여 30 ℃에서 5-10시간 활성화시켰다.Lactobacillus Confluence PL 9001 (KCCM-10245), Streptococcus faecalis PL 9003 (KCCM-10247), Lactobacillus Confluence PL 9004 (KCCM-10248), Lactobacillus Fermentum PL 9005 (KCCM-10250), Lactobacillus Permanent PL 9006 (KCCM-10251), Lactobacillus plantarum 9010 and Lactobacillus plantarum 9011 were used in the experiment. Each lactic acid bacteria was MRS medium (Difco, bacto proteose peptone No.3 10 g, bacto beef extract 10 g, bacto yeast extract 5 g, bacto dextrose 20 g, polysorbate 80 g, ammonium citrate 2 g, sodium acetate 5 g, magnesium 0.1 g of sulfate, 0.05 g of manganesesulfate, and 2 g / L of dipotassium phosphate were incubated overnight at 37 ° C. Lactic acid bacteria or lyophilized Lactobacillus 5.0 X 10 8 cfu / ml was added to the activation medium and 5-10 at 30 ° C. Time activated.

유산균 배양여액과 MH 배지 동량을 혼합하여 여기에 대표적인 식중독 균인E. coliO157을 접종하였다. 이후 6 시간 배양 후E. coliO157의 성장정도를 O.D.로 측정하였다.Lactobacillus culture filtrate and the same amount of MH medium was mixed and inoculated therein E. coli O157, a representative food poisoning bacteria. After 6 hours of incubation the growth of E. coli O157 was measured by OD.

실시예Example 유산균 배양액 무첨가No addition of lactic acid bacteria culture medium 유산균 배양액 첨가Addition of Lactic Acid Bacteria Culture 실시예 1Example 1 0.0370.037 0.110.11 실시예 2Example 2 0.0810.081 0.0430.043 실시예 3Example 3 0.0230.023 0.0160.016 실시예 4Example 4 0.0290.029 0.0120.012 실시예 5Example 5 0.0590.059 0.0220.022 실시예 6Example 6 0.0590.059 0.0360.036 실시예 7Example 7 0.0480.048 0.0040.004 실시예 8Example 8 -0.008-0.008 0.0020.002 실시예 9Example 9 0.0880.088 0.0480.048 실시예 10Example 10 0.0560.056 0.0240.024 실시예 11Example 11 0.0590.059 0.0320.032 실시예 12Example 12 0.0690.069 0.0430.043 실시예 13Example 13 0.0470.047 0.0220.022 실시예 14Example 14 0.0620.062 0.030.03 실시예 15Example 15 0.0710.071 0.0350.035 실시예 16Example 16 0.0990.099 0.0180.018 실시예 17Example 17 0.0610.061 0.0190.019 비교예Comparative example 0.0150.015 0.0410.041 대조군Control 0.2210.221 0.1880.188

표 2에서 나타난 바와 같이, 실시예 1 내지 실시예 17의 활성화배지에서 배양하여 수득한 배양여액은E. coliO157의 성장을 억제하는 것으로 확인되었다. 특히, 실시예 2, 실시예 16 및 실시예 17의 활성화 배지가 유산균의 증식에 매우 효과적임을 확인할 수 있었다. 하지만 최소배지의 경우는 유산균 배양여액을 첨가할 경우 배양액의 영양분이 의해 대조군인 최소배지만 사용한 경우보다 오히려E.coliO157의 성장을 촉진하는 것으로 확인되었다.As shown in Table 2, the culture filtrate obtained by culturing in the activation medium of Examples 1 to 17 was confirmed to inhibit the growth of E. coli O157. In particular, it was confirmed that the activation medium of Example 2, Example 16 and Example 17 is very effective for the proliferation of lactic acid bacteria. However, in the case of the minimal medium, the addition of the lactic acid bacterium filtrate was found to promote the growth of E. coli O157 rather than the use of only the minimum medium, which is the control medium.

실험예 2: 활성화 배지의 효과검증 IIExperimental Example 2: Effect Verification of Activation Medium II

실험예 1과 동일한 방법으로 유산균을 활성화 배지에서 배양하였고, 배양여액을 수득하여 이의 헬리코박터 필로리 성장억제능을 확인하였다.Lactobacillus was cultured in the activation medium in the same manner as in Experimental Example 1, the culture filtrate was obtained to check the Helicobacter Philophyll growth inhibitory ability.

PL9001 생균 원분말을 108cfu/ml로 실시예 2 및 비교예 배지에 각각 접종한 다음 37 ℃에서 5시간 배양하였다. 원심분리(15000 rpm, 10 min)하여 상등액을 수득하고, 멸균된 MQ로 1/2 희석한 후 인돌페놀(indophenol)방법에 의한 유레아제(urease)성분을 측정하였다. 측정된 수치는 헬리코박터 필로리로부터 유래한 유레아제 활성에 비례하므로 시료 상에 존재하는 헬리코박터 필로리 균의 양을 알 수 있다. 이러한 원리를 통하여 헬리코박터 필로리에 대한 PL균주 배양여액의 처리에 따른 헬리코박터 성장억제 효과를 측정하였다.PL9001 viable cell powder was inoculated into Example 2 and Comparative Medium at 10 8 cfu / ml, and then incubated at 37 ° C. for 5 hours. Centrifugation (15000 rpm, 10 min) to obtain a supernatant, diluted 1/2 with sterile MQ and then measured the urease (urease) component by the indophenol method. Since the measured value is proportional to the urease activity derived from Helicobacter Philophyll, it is possible to know the amount of Helicobacter Philobacteria present on the sample. Through this principle, the effect of Helicobacter growth inhibition according to the treatment of PL strain culture filtrate on Helicobacter Philophyllium was measured.

배지badge O.D630 OD 630 비교예Comparative example 3.253.25 실시예 2Example 2 1.481.48

표 3에서 실시예 2의 배지에서 배양하여 수득한 배양여액이 헬리코박터 필로리의 성장을 억제함을 확인할 수 있다. 즉 본 발명의 활성화 배지는 유산균의 증식 및 박테리오신의 생산을 현저히 증가시킨다.In Table 3 it can be seen that the culture filtrate obtained by culturing in the medium of Example 2 inhibits the growth of Helicobacter pylori. In other words, the activation medium of the present invention significantly increases the proliferation of lactic acid bacteria and the production of bacteriocin.

실험예 3: 활성화 배지의 효과검증 IIIExperimental Example 3: Effect Verification of Activation Medium III

락토바실러스 컨퓨서스 PL 9001 (KCCM-10245), 스트렙토코커스 패칼리스 PL 9003(KCCM-10247), 락토바실러스 컨퓨서스 PL 9004(KCCM-10248), 락토바실러스 퍼멘텀 PL 9005(KCCM-10250), 락토바실러스 퍼멘텀 PL 9006 (KCCM-10251), 락토바실러스 플란타룸 9010 및 락토바실러스 플란타룸 9011을 각각 실시예 2의 배지에 접종하여 37 ℃에서 24시간 배양한 후 원심분리하여 상등액을 분리한 다음 상기 상등액을 배양여액으로 준비하였다.Lactobacillus Confluence PL 9001 (KCCM-10245), Streptococcus faecalis PL 9003 (KCCM-10247), Lactobacillus Confluence PL 9004 (KCCM-10248), Lactobacillus Fermentum PL 9005 (KCCM-10250), Lactobacillus Fermentum PL 9006 (KCCM-10251), Lactobacillus plantarum 9010 and Lactobacillus plantarum 9011 were respectively inoculated into the medium of Example 2, incubated at 37 ° C for 24 hours, and then centrifuged to separate the supernatant. The supernatant was prepared as a culture filtrate.

PL 균주 배양여액에 의한 헬리코박터 성장 억제실험을 실시하였다. 브루세라 고형배지(Brucella broth)에 멸균된 파스퇴르 파이펫을 이용하여 구멍(well)을 만들었다. 고형배지에 헬리코박터 필로리를 도말하고, 구멍에 배양여액을 첨가하고, 이산화탄소 배양기(5 % 내지 10 % CO2)에서 배양하고 이틀 뒤 배양액여내의 억제 물질로 인하여 헬리코박터 필로리의 성장이 억제된 환의 지름을 측정하였다.Helicobacter growth inhibition experiment by PL strain culture filtrate was performed. Wells were made using Pasteur pipettes sterilized in Brucella broth. Staining Helicobacter Philophyllum on a solid medium, adding a filtrate to the pores, incubating in a carbon dioxide incubator (5% to 10% CO 2 ), and two days later. The diameter was measured.

도 1은 본 발명의 활성화 배지에서 배양된 유산균 배양여액에 의한 헬리코박터 필로리의 성장억제정도를 나타낸 사진으로, 도 1a는 실시예 2의 배지에서 배양한 배양여액들(락토바실러스 컨퓨서스 PL 9001 (KCCM-10245), 스트렙토코커스 패칼리스 PL 9003(KCCM-10247), 락토바실러스 컨퓨서스 PL 9004(KCCM-10248), 락토바실러스 퍼멘텀 PL 9005(KCCM-10250), 락토바실러스 퍼멘텀 PL 9006 (KCCM-10251), 락토바실러스 플란타룸 9010 및 락토바실러스 플란타룸 9011) 모두 헬리코박터 필로리의 성장을 억제함을 확인할 수 있었다. 반면에 유산균이 접종 안된 배지에 의해서는 도 1b와 같이 헬리코박터 필로리 성장이 억제되지 않았다.1 is a photograph showing the degree of growth inhibition of Helicobacter filament by the lactic acid bacteria culture filtrate cultured in the activation medium of the present invention, Figure 1a is the culture filtrates cultured in the medium of Example 2 (Lactobacillus compass PL 9001 ( KCCM-10245), Streptococcus faecalis PL 9003 (KCCM-10247), Lactobacillus confluence PL 9004 (KCCM-10248), Lactobacillus latement PL 9005 (KCCM-10250), Lactobacillus latement PL 9006 (KCCM- 10251), Lactobacillus plantarum 9010, and Lactobacillus plantarum 9011) were found to inhibit the growth of Helicobacter pylori. On the other hand, helicobacter pylori growth was not inhibited by lactic acid bacteria-inoculated medium as shown in FIG.

따라서 본 발명의 활성화 배지는 다양한 종류의 유산균의 박테리오신 생산을 위한 배지로 사용할 수 있을 뿐만 아니라 유산균 박테리오신 함유 배양액 제조에사용될 수 있다.Therefore, the activation medium of the present invention can be used not only as a medium for the production of bacteriocin of various kinds of lactic acid bacteria, but also can be used for the production of lactic acid bacteriocin-containing culture solution.

또한 유산균 배양여액을 1% , 5% 및 10%로 배지에 희석하고, 여기에 헬리코박터 균을 접종하였다. 하룻밤 지난 후 활성화 액이 첨가되지 않은 곳에서 자란 헬리코박터 균의 O.D.를 측정하여 활성화액이 첨가되지 않은 경우의 성장값 (O.D.)와의 차이를 억제력으로 환산하였다.In addition, the lactic acid bacteria culture filtrate was diluted in the medium at 1%, 5% and 10%, and inoculated with Helicobacter bacteria. After overnight, O.D. of Helicobacter bacteria grown in the place where the activating solution was not added was measured, and the difference from the growth value (O.D.) when the activating solution was not added was converted into inhibitory power.

도 2는 유산균 배양여액을 희석하였을 때, 헬리코박터 균에 대한 성장 억제능을 나타낸 그래프이다. 도 3에서 헬리코박터 균 성장 억제능은 10% 희석된 배양여액에서 가장 강하게 나타났으나 1% 혼합액에서도 억제력능이 관찰되었디. 이때 배양여액을 무첨가한 배지는 O.D.=6.0, 배양여액 대신 물을 첨가한 경우 O.D.=6.5였다.Figure 2 is a graph showing the growth inhibitory ability against Helicobacter bacteria when the lactic acid bacteria culture filtrate is diluted. In Figure 3, the growth inhibition of Helicobacter bacteria was the strongest in the culture filtrate diluted 10%, but the inhibitory activity was also observed in 1% mixed solution. At this time, the medium without addition of the culture filtrate was O.D. = 6.0, and O.D. = 6.5 when water was added instead of the culture filtrate.

또한 1% 희석된 배양여액의 헬리코박터 균 성장 억제능을 웰 테스트로 더욱 확인한 결과, 도 3에 나타난 바와 같이, 1% 희석한 경우에서도 헬리코박터 필로리의 성장을 억제함을 확인할 수 있었다.In addition, as a result of further confirming the Helicobacter bacteria growth inhibition ability of the culture filtrate diluted 1% by a well test, it was confirmed that the growth of Helicobacter Philosophy even when diluted 1%.

실험예 4: 유산균 활성화 배지를 이용하여 제조된 배양여액의 맛, 색 및 향 검증Experimental Example 4: Verification of taste, color and aroma of the culture filtrate prepared using the lactic acid bacteria activation medium

실시예 2의 배지에서 유산균을 배양하여 수득한 배양액에서 유산균을 제거한 다음 배양여액을 동결건조하였다. 이후 동결건조된 배양여액의 맛, 색 및 향을 검증하였다. 또한 비교예의 배지에서 동일한 방법으로 준비한 배양여액의 맛, 색 및 향과 비교하였다.The lactic acid bacteria were removed from the culture solution obtained by culturing the lactic acid bacteria in the medium of Example 2, and the culture filtrate was lyophilized. Then, the taste, color and aroma of the lyophilized culture filtrate were verified. In addition, it was compared with the taste, color and aroma of the culture filtrate prepared by the same method in the medium of Comparative Example.

MRS 배지MRS Badge 활성화 배지Activation badge 맛flavor 찝찌름하다Poke 무미insipidity 색color 황갈색partridge 무색Colorless 향incense 구수하다Save water 무취Odorless

표 4에서, 본 발명의 활성화 배지는 무미, 무색 및 무취를 나타내어 다른 식품의 첨가물로 사용하더라도 식품의 미감을 해치지 않는다.In Table 4, the activation medium of the present invention exhibits tasteless, colorless and odorless so as not to impair the aesthetics of the food even when used as an additive of other food.

도 4는 MRS에서 유산균을 배양한 다음 제조한 배양여액(A) 및 활성화 배지에서 유산균을 배양한 다음 제조한 배양여액(B)를 나타낸 것이다. 색상을 비교하여 보면 A는 황갈색을 나타내지만, B는 무색을 나타냄을 알 수 있었다.Figure 4 shows the culture filtrate prepared after culturing the lactic acid bacteria in MRS (A) and the culture filtrate prepared after culturing the lactic acid bacteria in the activation medium (B). Comparing the color, A showed yellowish brown color, but B showed colorlessness.

상기에 언급한 바와 같이, 본 발명의 유산균 활성화 배지는 유산균을 단시간내에 활성화시켜 고농도의 박테리오신의 생산을 가능하게 할 뿐만 아니라 유산균 배양여액을 식품 첨가물로 이용할 경우 식품 고유의 맛, 색 및 향을 해치지 않는다. 따라서, 본 발명의 유산균 배양여액은 고농도의 박테리오신을 포함하고 있어, 식품첨가물, 보존제 또는 식중독균 방지를 위한 용도로 사용할 수 있다.As mentioned above, the lactic acid bacteria activating medium of the present invention activates lactic acid bacteria in a short time to enable the production of high concentrations of bacteriocins, and does not harm the intrinsic taste, color and aroma of the food when the lactic acid bacteria culture filtrate is used as a food additive. Do not. Therefore, the lactic acid bacteria culture filtrate of the present invention contains a high concentration of bacteriocin, and can be used for food additives, preservatives or food poisoning prevention.

Claims (11)

최소배지 및, MnSO4, 글루코스, 알라닌, 글리신 및 아스파라진으로 이루어진 군으로부터 1종이상 선택된 화합물을 포함하는 유산균 활성화 배지.A lactic acid bacteria activation medium comprising a minimal medium and at least one compound selected from the group consisting of MnSO 4 , glucose, alanine, glycine and asparagine. 제 1항에 있어서, 상기 최소배지는 K2HPO4, KH2PO4, MgSO4.7H20, C6H5Na3O7,(NH4)2SO4및 증류수를 포함하는 것인 유산균 활성화 배지.The method of claim 1 wherein the minimal medium is K 2 HPO 4, KH 2 PO 4, MgSO 4 .7H 2 0, C 6 H 5 Na 3 O 7, (NH 4) 2 SO 4 and distilled water and comprises Lactic acid bacteria activation medium. 제 1항에 있어서, 상기 유산균 활성화 배지는The method of claim 1, wherein the lactic acid bacteria activation medium (a) 0.5 내지 5 중량%의 K2HPO4, 0.1 내지 5 중량%의 KH2PO4, 0.1 내지 5 중량%의 MgSO4.7H20, 0.01 내지 5 중량%의 C6H5Na3O7, 0.01 내지 1 중량%의 (NH4)2SO4및 79 내지 99.28 중량%의 증류수 및(a) 0.5 to 5% by weight of K 2 HPO 4, 0.1% to 5% of MgSO of KH 2 PO 4, 0.1 to 5% by weight of 4 .7H 2 0, 0.01 to 5% by weight of C 6 H 5 Na 3 O 7 , 0.01-1 wt% (NH 4 ) 2 SO 4 and 79-99.28 wt% distilled water and (b) 0.01 내지 1 중량%의 MnSO4, 0.005 내지 1 중량%의 글루코스, 0.005 내지 1중량%의 알라닌, 0.005 내지 1 중량%의 글리신 및 0.005 내지 1 중량%의 아스파라진으로 이루어진 군으로부터 1종 이상 선택된 화합물을 포함하는 것인 유산균 활성화 배지.(b) one type from the group consisting of 0.01 to 1 wt% MnSO 4 , 0.005 to 1 wt% glucose, 0.005 to 1 wt% alanine, 0.005 to 1 wt% glycine and 0.005 to 1 wt% asparagine Lactic acid bacteria activation medium comprising a compound selected above. (a) 최소배지에 MnSO4, 글루코스, 알라닌, 글리신 및 아스파라진으로 이루어진 군으로부터 1종이상 선택된 화합물을 혼합하여 활성화 배지를 준비하는 단계; 및(a) preparing an activation medium by mixing at least one compound selected from the group consisting of MnSO 4 , glucose, alanine, glycine and asparagine in a minimal medium; And (b) 상기 배지에 유산균을 접종하고 배양하여 배양물을 제조하는 단계;(b) inoculating and culturing the lactic acid bacteria in the medium to prepare a culture; 를 포함하는 박테리오신 생산방법.Bacteriocin production method comprising a. 제 4항에 있어서, 상기 (b) 단계의 유산균은 분말화된 유산균, 동결건조된 유산균 또는 배양된 유산균인 것인 생산방법.The production method according to claim 4, wherein the lactic acid bacteria of step (b) is powdered lactic acid bacteria, lyophilized lactic acid bacteria or cultured lactic acid bacteria. 제 4항에 있어서, 상기 (b) 단계 이후에 상기 배양물로부터 박테리오신을 분리하는 단계를 더욱 포함하는 것인 생산방법.The method of claim 4, further comprising separating bacteriocin from the culture after step (b). 제 4항에 있어서, 상기 (b) 단계 이후에 상기 배양물로부터 배양여액을 수득하는 단계를 더욱 포함하는 것인 생산방법.The method of claim 4, further comprising obtaining a culture filtrate from the culture after the step (b). 제 7항에 있어서, 상기 배양여액으로부터 박테리오신을 분리하는 단계를 더욱 포함하는 것인 생산방법.The method of claim 7, further comprising the step of separating the bacteriocin from the culture filtrate. 제 4항 내지 8항 중 어느 한 항에 따른 박테리오신 제조방법으로 제조된 박테리오신.A bacteriocin prepared by the method for producing bacteriocin according to any one of claims 4 to 8. (a) 최소배지에 MnSO4, 글루코스, 알라닌, 글리신 및 아스파라진으로 이루어진 군으로부터 1종이상 선택된 화합물을 혼합하여 활성화 배지를 준비하는 단계; 및(a) preparing an activation medium by mixing at least one compound selected from the group consisting of MnSO 4 , glucose, alanine, glycine and asparagine in a minimal medium; And (b) 상기 배지에 유산균을 접종하고 배양하여 배양물을 제조하는 단계(b) inoculating and culturing the lactic acid bacteria in the medium to prepare a culture 를 포함하는 방법으로 제조된 유산균 활성액.Lactic acid bacteria active liquid prepared by a method comprising a. (a) 최소배지에 MnSO4, 글루코스, 알라닌, 글리신 및 아스파라진으로 이루어진 군으로부터 1종이상 선택된 화합물을 혼합하여 활성화 배지를 준비하는 단계;(a) preparing an activation medium by mixing at least one compound selected from the group consisting of MnSO 4 , glucose, alanine, glycine and asparagine in a minimal medium; (b) 상기 배지에 유산균을 접종하고 배양하여 배양물을 제조하는 단계; 및(b) inoculating and culturing the lactic acid bacteria in the medium to prepare a culture; And (c) 상기 배양물로부터 배양여액을 수득하는 단계;(c) obtaining a culture filtrate from the culture; 를 포함하는 방법으로 제조된 유산균 활성액.Lactic acid bacteria active liquid prepared by a method comprising a.
KR1020020034518A 2002-06-20 2002-06-20 Medium for lactic acid producing bacteria not affecting taste, color and flavour of product KR20030097235A (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020020034518A KR20030097235A (en) 2002-06-20 2002-06-20 Medium for lactic acid producing bacteria not affecting taste, color and flavour of product

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020020034518A KR20030097235A (en) 2002-06-20 2002-06-20 Medium for lactic acid producing bacteria not affecting taste, color and flavour of product

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20030097235A true KR20030097235A (en) 2003-12-31

Family

ID=32387797

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020020034518A KR20030097235A (en) 2002-06-20 2002-06-20 Medium for lactic acid producing bacteria not affecting taste, color and flavour of product

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR20030097235A (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113444766A (en) * 2021-06-04 2021-09-28 佛山市海天（江苏）调味食品有限公司 Enrichment medium for spoilage bacteria in fermented wine aging process and detection method

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR0139398B1 (en) * 1994-12-07 1998-06-15 이은선 Culture medium for lactococcus which produce bacteriocin
KR0148340B1 (en) * 1995-05-31 1998-10-15 서중일 Method of antibiotic bacteriocin using lactobacillus acidophilus
US5877272A (en) * 1990-03-13 1999-03-02 Microlife Technics, Inc. Bacteriocin from lactococcus lactis
KR20000047065A (en) * 1998-12-31 2000-07-25 박호군 Novel lactobacillus sp. mt-1077 (kctc 8903p) and novel bacteriocin produced therefrom

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5877272A (en) * 1990-03-13 1999-03-02 Microlife Technics, Inc. Bacteriocin from lactococcus lactis
KR0139398B1 (en) * 1994-12-07 1998-06-15 이은선 Culture medium for lactococcus which produce bacteriocin
KR0148340B1 (en) * 1995-05-31 1998-10-15 서중일 Method of antibiotic bacteriocin using lactobacillus acidophilus
KR20000047065A (en) * 1998-12-31 2000-07-25 박호군 Novel lactobacillus sp. mt-1077 (kctc 8903p) and novel bacteriocin produced therefrom

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113444766A (en) * 2021-06-04 2021-09-28 佛山市海天（江苏）调味食品有限公司 Enrichment medium for spoilage bacteria in fermented wine aging process and detection method
CN113444766B (en) * 2021-06-04 2024-05-24 海天醋业集团有限公司 Enrichment medium for spoilage bacteria in fermentation wine ageing process and detection method

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Drosinos et al. Phenotypic and technological diversity of lactic acid bacteria and staphylococci isolated from traditionally fermented sausages in Southern Greece
Ogunbanwo et al. Influence of cultural conditions on the production of bacteriocin by Lactobacillus brevis OG1
US4746512A (en) Anticariogenic or antiperiodontitic agent
KR100919213B1 (en) Function-related fermentation raw materials using the composition which mixed chlorella in Rubus coreanus and Method to produce thereof
Margalho et al. Brazilian artisanal cheeses are rich and diverse sources of nonstarter lactic acid bacteria regarding technological, biopreservative, and safety properties—Insights through multivariate analysis
Yin et al. Effect of lactic acid bacterial fermentation on the characteristics of minced mackerel
Janes et al. Identification and characterization of two bacteriocin-producing bacteria isolated from garlic and ginger root
Sun et al. Production, purification and biochemical characterization of the microbial protease produced by Lactobacillus fermentum R6 isolated from Harbin dry sausages
KR100979448B1 (en) Functional beverage for health adding whey protein hydrolysate and probiotic bacteria and process for preparing the same
AU2005233240A1 (en) Method for reducing the content of pathogenic organisms present in food materials
JPWO2005045053A1 (en) Method for producing bacteriocin-containing lactic acid bacteria culture and food preservation method using the same
CA2281102A1 (en) Stabilization of cooked meat compositions using whey from nisin-producing cultures
Lyon et al. Inhibition of psychrotrophic organisms by propionicin PLG-1, a bacteriocin produced by Propionibacterium thoenii
CN103667106B (en) A kind of plant lactobacillus, its bacteriocin and cultivation and separation purification method
Yang et al. Antimicrobial activity of 2-pyrrolidone-5-carboxylic acid produced by lactic acid bacteria
KR101514335B1 (en) Lactic acid bacterial salt using fermentates thereof and lactic acid bacterial powder
Polyanskaya et al. Quasicapsulation of probiotics.
KR100413335B1 (en) Lactococcus lactis BH5(KCCM-10275) which is produced antimicrobial peptide
KR102275530B1 (en) Composition for promoting growth of Lactic acid bacteria and a culture medium for Lactic acid bacteria
KR0123946B1 (en) Lactococcus sp. which produces novel bacteriocin
JP2004313171A (en) New lactic acid bacteria, bacteriocin produced from the same, method for processing fish and bean food and product obtained by the mehtod
Mojgani et al. Characterization of bacteriocins produced by Lactobacillus brevis NM 24 and L. fermentum NM 332 isolated from green olives in Iran
KR20030097235A (en) Medium for lactic acid producing bacteria not affecting taste, color and flavour of product
JP3001338B2 (en) Novel microbial strains, bacterial preparations containing the same, and the use of said strains and preparations for the control of yeast and mold
Khider et al. Extending the shelf life of Camembert cheese via controlling over-ripening by bacteriocin of newly lactic acid bacterial isolate LAB100

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E601 Decision to refuse application