KR20020047760A - 백선피 추출물을 포함하는 미백제 - Google Patents

백선피 추출물을 포함하는 미백제 Download PDF

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Abstract

본 발명은 백선피 추출물을 포함하는 미백제에 관한 것이다. 본 발명에 따른 백선피 추출물은 뛰어난 티로시나제 활성 저해효과 및 멜라닌 생성 억제 효과를 보임으로써 우수한 미백제를 제공할 수 있다.

Description

백선피 추출물을 포함하는 미백제{Cosmetics comprising dictamnus root extracts for skin whitening}
본 발명은 백선피 추출물을 포함하는 미백제에 관한 것이다.
일반적으로 자외선에 피부가 노출되면 피부 표피가 검게 된다. 이는 멜라닌 세포 내에서 멜라닌이 합성되고 방출되는 것에 기인하며, 구체적으로는 세포 내의 티로신(Tyrosine)을 기질로 티로시나아제(Tyrosinase)라는 효소가 작용하여 도파퀴논(Dopaquinone)을 생성시키고, 이러한 도파퀴논으로부터 자발적인 산화 반응을 거쳐 멜라닌이 생성된다.
따라서 피부가 검게 되는 것을 막기 위해서는 상기 멜라닌 생성 과정 중의 일부 반응을 저해함으로써 멜라닌의 생성을 감소시켜 주는 방법이 가장 간단하며 일반적이다. 이를 위해 종래에는 하이드로퀴논(Hydroquinone), 아스코르브산 (Ascorbic acid), 코직산(Kojic acid), 글루타치온, 상백피 추출물, 알부틴 (Arbutin)을 비롯한 다양한 추출물들이 이용되어 왔다.
이 중에서 아스코르브산, 상백피 추출물, 코직산, 글루타치온 등은 피부 흑색화나 피부병의 치료에 사용되어 왔지만, 피부의 안전성과 화장료 제형의 안정성에 문제점을 가지고 있어 그 사용이 제한되어 왔다. 또한 하이드로퀴논은 기미 치료가 목적인 약으로 이미 미국 시장에서 판매되고 있지만 피부 자극성 있고, 아스코르브산은 광, 열에 대한 안정성의 문제와 사용 비용이 높으므로 사용상에 어려움이 있었다.
본 발명자들은 종래 알려져 있는 미백 물질이 갖는 문제점을 극복하고 보다 우수한 미백 원료를 찾기 위하여, 안전성이 이미 확보된 생약 및 식물을 추출하여 미백의 효능을 검색한 결과 백선피가 티로시나아제 활성 억제 효과가 높아 미백효과를 가진다는 것을 발견하여 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서, 본 발명은 백선피 추출물을 포함하는 미백제를 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명에 따른 미백제는 티로시나제 활성 억제 성분으로 백선피 추출물을 포함한다.
백선피추출물은 운향과(芸香科 ;Rutaceae) 식물인 백선(白蘚:Dictamnus albus L. var. dasycarpus (Turcz.) T. N. Liou et Y. H. Chang.)의 근피 추출물을 말한다. 백선피는 한방에서 간헐열, 두통, 류마티스, 척수 신경근염, 뇌막염, 월경장애, 황달, 해열, 진통, 거풍, 진경, 진정, 이뇨, 습진, 사상균성 피부질환, 태선, 악창, 종창, 옴, 두드러기, 대머리 등에 사용된다(참조: 약초의 성분과 이용 ). 또한 백선피의 성분으로는 딕탐닌(Dictamnine), 딕탐노락톤(Dictamnolac-tone), 오바큘락톤(Obaculactone), 리모닌(Limonin), 시토스테롤(Sitosterol), 오바큐논산(Obacunonic acid), 트리고넬린(Trigonelline), 콜린(Choline), 프락시넬론(Fracxinellone), 캄페스테롤(Campesterol), 스킴미아닌(Skimmianin), 독시카파인(Doxycarpaine), γ-파가린(Fagarin) 등이 있다(참조: 중약 대사전, 약초의 성분과 이용 ).
상기 백선피 추출물은 건조된 백선피를 탄소수 1∼3의 무수 또는 함수 알코올 내지 에틸 아세테이트로 4∼30℃에서 3∼20일간 추출한 다음, 농축하여 제조할 수 있다.
또한, 상기 백선피 추출물은 백선피를 물, 탄소수 1∼3의 무수 또는 함수 알코올 내지 에틸 아세테이트로 50∼100℃에서 3∼24시간 동안 추출한 다음, 농축하여 제조할 수도 있다.
한편, 상기 추출공정의 수행 전 또는 후에 디에틸에테르 가용성분을 제거한 다음, 농축함으로써 더욱 정제된 백선피 추출물로 제조할 수 있다.
상기 추출공정에 있어서, 백선피를 잘게 세절하여 사용하고, 추출용매는 시료중량에 대하여 1∼15배 부피량으로 가하며, 유효 성분의 증발을 방지하기 위하여 냉각 콘덴서를 장착하여 추출하는 것이 바람직하다.
상기와 같이 제조된 백선피 추출물은 통상적인 기초 화장료, 예를 들면, 유연화장수(스킨), 영양화장수(밀크로션), 영양크림, 맛사지크림, 엣센스, 팩 등에 첨가되어 미백제로 제조될 수 있다. 상기 화장료에 사용되는 백선피 추출물량은 화장료의 중량에 대하여 0.0001∼5중량%, 바람직하게는 0.001∼3중량%로 첨가된다.0.0001중량% 이하의 농도에서는 실질적인 미백효과를 얻기 어려우며, 5중량% 이상의 농도에서는 제품 안정성에 좋지 않은 영향을 미친다.
이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예를 통하여 더욱 상세히 설명하나 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1
백선피 100g를 잘게 세절하여 70% 에틸알코올 1L에 넣고 실온에서 10일간 침적시켜 추출한 후 300메쉬 여과지로 여과하고 1주일간 방치하여 침전물을 에드벤텍 7번 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기를 이용하여 50℃에서 완전히 농축하여 건조 중량 17.38g을 얻었다.
실시예 2
백선피 100g를 잘게 세절하여 30% 에틸알코올 1L에 넣고 실온에서 10일간 침적시켜 추출한 후 300메쉬 여과지로 여과하고 1주일간 방치하여 침전물을 에드벤텍 7번 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기를 이용하여 50℃로 완전히 농축하여 건조 중량 20.04g을 얻었다.
실시예 3
백선피 100g를 잘게 세절하여 70% 에틸알코올 1L에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 100℃로 8시간 끓여서 추출한 후 300메쉬 여과지로 여과하고 1주일간방치하여 침전물을 에드벤텍 7번 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기를 이용하여 50℃에서 완전히 농축하여 건조 중량 22.38g을 얻었다.
실시예 4
백선피 100g를 잘게 세절하여 30% 에틸알코올 1L에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 100℃로 8시간 끓여서 추출한 후 300메쉬 여과지로 여과하고 1주일간 방치하여 침전물을 에드벤텍 7번 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기를 이용하여 50℃로 완전히 농축하여 건조 중량 28.46g을 얻었다.
실시예 5
백선피 100g를 잘게 세절하여 30% 에틸알코올 1L에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 100℃로 8시간 끓여서 추출한 후 300메쉬 여과지로 여과하고 1주일간 방치하여 침전물을 에드벤텍 7번 여과지로 2번 여과하였다. 이 추출물을 디에틸에테르 1L를 가하여 잘 섞어준 후 두 층으로 완전히 분리시킨 다음, 하층인 수층에 다시 1L의 에틸아세테이트를 가하여 잘 섞어준 후 두 층으로 완전히 분리시켰다. 이 에틸아세테이트 층을 감압 농축기를 이용하여 50℃로 완전히 농축하여 건조 중량 9.12g를 얻었다.
실험예 1
실시예 1에 대하여 티로시나제 활성 억제 효과를 측정하였으며 비교 물질로알부틴을 사용하였다.
효소 티로시나제는 버섯류에서 추출한 것으로 시그마(SIGMA)사의 것을 사용하였다. 먼저 기질인 티로신을 증류수에 0.3mg/ml의 용액으로 만들어서 그 용액을 1ml씩 시험관에 넣고, 여기에 포타슘-포스페이트 완충용액(0.1M, pH 6.8) 1ml와 각각의 시료 0.9ml를 넣은 뒤 37℃ 항온조에서 10분 동안 반응시켰다. 이때 대조군은 각 시료 대신 용매만을 0.9ml 넣었다. 이 반응액에 2500unit/ml의 티로시나제 용액 0.1ml씩을 넣고 다시 37℃ 항온조에서 10분 동안 반응시켰다. 이 반응액이 든 시험관을 얼음물 속에 넣어서 급냉시켜 반응을 중지시키고 광전 분광분석계로 파장 475nm에서의 흡광도를 측정하였다. 각각 시료의 티로시나제 활성 억제효과는 하기 수학식 1로 구하였으며 그 결과를 아래의 표 1에 나타내었다.
백선피 추출물의 티로시나제 활성 억제 효과
실험농도(%, W/V)------------------------------------------------------0.07 0.1 0.5 1.0
실시예 1 40.15% 52.09% 74.69% 98.20%
알부틴 20.20% 33.30% 71.90% 97.40%
백선피 추출물의 IC50(Inhibition Concentration 50)은 0.093%농도인데 반하여알부틴의 IC50은 0.394%농도 였다.
실험예 2
실시예 1에 대하여 세포배양을 이용한 멜라닌 생성 억제 효과를 측정하였으며 비교 물질로는 알부틴을 사용하였다.
세포는 BL6 멜라노사이트를 사용하여 실험 하였다. 96 웰 마이크로플레이트 (96 well micro plate)에 5,000/웰(well) 의 BL6 멜라노사이트를 분주하고, 24시간 후에 시료를 농도 별로 처리한 후 72시간 후에 멜라닌의 생성량을 475nm에서 흡광도를 측정하였으며, 대조군은 세포를 제외한 시료와 배지로 하여 동시에 측정하였다. 결과는 시료의 세포 독성을 측정하여 세포 독성이 없는 농도 범위 내에서 그리고 세포 수를 고려하여 멜라닌 생성억제 효과를 알부틴과 비교 하였다.
세포 독성 및 증식 실험은 다음과 같이 하였다. 96 웰 마이크로플레이트에 5,000/웰의 3T3 세포를 분주하고, 24시간 후에 시료를 농도 별로 처리하였다. 44시간 후에 티아졸린 블루(thiazoline blue)를 투여하고 4시간 후에 570nm에서 흡광도를 측정하였다(시험시 10 % 소태아혈청(Fetal Bovine Serum, FBS)배지를 함께 사용). 그 결과는 하기 표 2와 같다.
백선피 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과(세포독성을 고려한 결과)
실험농도(%, W/V)---------------------------------------------------0.0025 0.005 0.01 0.025
실시예 1 12.26% 13.66% 18.38% 22.63%
알부틴 9.74% 14.9% 20.68% 14.14%
표 1,2에서 확인할 수 있는 바와 같이 백선피 추출물의 티로시나제 활성 저해 효과 및 멜라닌 생성 억제 효과가 우수한 것으로 나타났다.
처방예 1
백선피 추출물을 포함하는 화장료 중 유연화장수(스킨)의 처방예는 다음과 같다. 여기서 백선피 추출물은 실시예 1의 것을 말한다.
성 분 함량(중량%)
부틸렌글리콜글리세린카르복시비닐폴리머디소듐 에틸렌디아민테트라아세틱에시드에탄올트리에탄올아민소르비탄모노스테아레이트하이드로지네이티드 캐스터 오일페닐트리메티콘방부제향료색소정제수백선피 추출물 4.08.00.060.017.00.20.80.43.50.40.10.01잔량5.0
100
처방예 2
백선피 추출물을 포함하는 화장료 중 로션의 처방예는 다음과 같다. 여기서 백선피 추출물은 실시예 1의 것을 말한다.
성 분 함량(중량%)
스테아린산세틸알코올글리세릴모노스테아레이트폴리옥시에틸렌솔비탄모노스테아레이트솔비탄세스퀴올레이트유동파라핀스쿠알란카르릴릭/카프릭트리글리세라이드카르복시비닐폴리머부틸렌글리콜트리에탄올아민방부제향료색소정제수백선피 추출물 1.01.01.01.01.04.03.04.00.15.00.20.40.10.01잔량5.0
100
처방예 3
백선피 추출물을 포함하는 화장료 조성물 중 영양크림의 처방예는 다음과 같다. 여기서 백선피 추출물은 실시예 1의 것을 말한다.
성 분 함량(중량%)
스테아린산세틸알코올글리세릴모노스테아레이트폴리옥시에틸렌소르비탄모노스테아레이트솔비탄세스퀴올레이트글리세릴모노스테아레이트/글리세릴스테아레이트/폴리옥시에틸렌 스테아레이트왁스유동파라핀스쿠알란카르릴릭/카프릭트리글리세라이드카르복시비닐폴리머부틸렌글리콜글리세린트리에탄올아민방부제향료색소정제수백선피 추출물 2.02.02.00.50.51.01.04.04.04.00.35.03.00.50.40.10.01잔량5.0
100
본 발명에 따른 백선피 추출물은 뛰어난 티로시나제 활성 저해효과 및 멜라닌 생성 억제 효과를 보이기 때문에 피부자극이 없으면서 미백효과가 우수하고 제품으로서의 안정성 역시 뛰어난 미백제를 제공할 수 있다.

Claims (6)

  1. 백선피 추출물을 포함하는 미백제.
  2. 제1항에 있어서, 백선피 추출물이 백선피를 탄소 수 1∼3의 무수 또는 함수 알코올 내지 에틸 아세테이트로 4∼30℃에서 3∼20일간 추출한 다음, 농축하여 제조된 것임을 특징으로 하는 미백제.
  3. 제1항에 있어서, 백선피 추출물이 백선피를 물, 탄소 수 1∼3의 무수 또는 함수 알코올 내지 에틸 아세테이트로 50∼100℃에서 3∼24시간 동안 추출한 다음, 농축하여 제조된 것임을 특징으로 하는 미백제.
  4. 제2항 또는 제3항에 있어서, 백선피 추출물이 추출공정의 수행 전 또는 후에 디에틸에테르 가용성분을 제거한 다음, 농축하여 제조된 것임을 특징으로 하는 미백제.
  5. 제1항에 있어서, 백선피 추출물이 미백제에 건조 중량으로 0.0001∼5중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 미백제.
  6. 제1항에 있어서, 백선피 추출물이 유연 화장수, 영양 화장수, 영양크림, 맛사지 크림, 엣센스 또는 팩에서 선택된 기초 화장료에 첨가된 것임을 특징으로 하는 미백제.
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