KR19990063847A - Method to improve the efficiency of chemical pulping process by pretreatment of wood and pulp materials using white lot fungus - Google Patents

Abstract

본 발명은 고품질의 제품을 생성하는 보다 일정하고 보다 효율적인 방법을 수득하기위해 목재 또는 펄프재를 전처리에서의 특정한 바시디오마이세트 진균, 특히 화이트 로트 진균, 예를 들면 프레비아 트레멜로사, 트리찹텀 비포르메, 시조필룸 코문 및 파네로차에트 기간테아의 사용에 관한 것이다. 이런 처리는 또한 특히 비살균된 목재 기재를 포함하는 목재 기재의 다공성을 증가시키는 것으로 발견된다. 이런 다공성 증가는 후속적인 화학 처리 방법에서 보다 다공성인 목재 또는 펄프재의 세포로의 액체 침투를 개선시킨다. 선택적인 화이트 로트 진균은 깊게 침투하여 피치 및/또는 수지가 제거된 공동을 남길수 있고 세포벽을 변형시킨다는 사실에도 불구하고 이런 공극은 실질적으로 펄프 또는 목재펄프에서 리그닌 함량에 영향을 미치지 않을수 있다. 그럼에도 불구하고 이후에 화학 처리를 하였을때 생성된 진균으로 처리된 펄프는 점도의 상당한 증가없이 증가된 광도, 증가된 수율 및 카파수의 동시 감소를 나타낸다. 본 발명은 또한 상기 언급된 군에서 선택된 하나 이상의 진균을 피치 감소 효과량으로 재목 또는 목재의 하나 이상의 단부에 접종시키고 재목 또는 목재의 피치가 감소되기에 충분한 시간동안 상기 재목 또는 목재에서 또는 재목 또는 목재 내부로 진균이 성장시키고 그런 다음 상기와 같이 처리된 재목 또는 목재를 기계적으로 정련함을 포함하는, 재목 또는 목재를 펄프로 기계적으로 정련하는동안의 전기 에너지 소비를 감소시키는 방법에 관한 것이다.The present invention relates to certain variciomyset fungi, in particular white lot fungi, such as previa tremelosa, trichoptum, in pretreatment of wood or pulp material in order to obtain a more consistent and more efficient way of producing high quality products. It relates to the use of Viforme, Sizofilum Komun and Panerochaette Guinthea. This treatment is also found to increase the porosity of wood substrates, particularly including unsterilized wood substrates. This increase in porosity improves liquid penetration of cells with more porous wood or pulp material in subsequent chemical treatment methods. Although the selective white lot fungus can penetrate deeply and leave pitch and / or resin removed cavities and modify cell walls, these pores may not substantially affect lignin content in pulp or wood pulp. Nevertheless, the pulp treated with the resulting fungi upon subsequent chemical treatment shows increased brightness, increased yield and simultaneous kappa number without significant increase in viscosity. The present invention also relates to inoculating one or more fungi selected from the above-mentioned group into a plunging effective amount at one or more ends of the timber or timber and for a time sufficient to reduce the pitch of the timber or timber, or in the timber or timber or timber or timber A method of reducing electrical energy consumption during mechanical refining of lumber or timber with pulp, including fungi growing therein and then mechanically refining the treated timber or timber as described above.

Description

화이트 로트 진균을 이용한 목재 및 펄프재의 전처리에 의해 화학적 펄프화 공정의 효율을 개선시키는 방법Method for improving the efficiency of chemical pulping process by pretreatment of wood and pulp materials with white lot fungi

목재는 셀룰로스, 헤미-셀룰로스, 리그닌 및 목재 추출물 또는 "피치(pitch)", "수지" 또는 "목재 수지"로 일반적으로 명명되는 수지성 물질로 구성된 복합 물질이다. 피치의 조성이 연구되었으며 예를 들면 문헌[Wood Extractives and Their Significance to the Pulp and Paper Industry, Chapter 10 "Wood Resins" by D. B. Mutton; W. E. Hillis, Ed, Academic Press, N. Y.(1962)]에 널리 보고되어 있다.Wood is a composite material consisting of cellulose, hemi-cellulose, lignin and wood extracts or resinous materials commonly named "pitch", "resin" or "wood resin". The composition of the pitch was studied and described, for example, in Wood Extractives and Their Significance to the Pulp and Paper Industry , Chapter 10 "Wood Resins" by DB Mutton; WE Hillis, Ed, Academic Press, NY (1962).

목재 펄프로부터 제품을 제조할때, 피치의 점성 및 고착성으로 인해 제거하기 힘든 침착물을 형성시켜, 상대적으로 빈번하고 긴 세척시간이 소요되며, 수지가 여과기 판, 필터 및 종이 가공 장치 전체에 침전물로서 축적되는 경향이 있기때문에 피치의 존재는 바람직하지 않다. 세척 전에 피치가 너무 오랫동안 축적되면 또한 펄프 및 이로부터 제조된 종이를 변색시킬수 있킨다는 것이 공지되어 있다. 피치 축적으로부터 생성되는 다른 단점, 예를 들면 폐기물 스트림 오염이 당해 분야에 공지되어 있다.When manufacturing products from wood pulp, they form deposits that are difficult to remove due to the viscosity and stickiness of the pitch, resulting in a relatively frequent and long cleaning time, and resins as sediment throughout filter plates, filters and paper processing equipment. The presence of pitch is undesirable because it tends to accumulate. It is known that if the pitch accumulates too long before washing, it may also discolor the pulp and the paper made therefrom. Other disadvantages resulting from pitch accumulation, such as waste stream contamination, are known in the art.

닐슨(Nilsson) 등의 미국 특허 제 3,486,969 호에서, 목재의 다른 성분의 분해, 특히 셀룰로스 및 헤미셀룰로스의 분해를 최소화하면서 목재칩의 수지 함량을 감소시키기위해 목재칩 및 이로부터의 펄프에 접종하기위해 특정한 진균을 사용할수 있다는 것이 개시한다. 그러나 본원에 개시된 진균의 종은 목재에 감염시켰을때 쉽게 편평해질수 있는 표면 또는 외면의 반점을 필수적으로 생성하는 외관상 모든 곰팡이 형 또는 평면 형성 진균이다(보이스(J. S. Boyce)의 문헌[Forest Pathology, 3rd. Ed., 1961, McGraw-Hill Book Co. pp. 493-512, 특히 496-512]를 참조할수 있다). 이런 진균은 우리가 알고있는한 실용적으로 성공하지 못했다.In US Pat. No. 3,486,969 to Nielsson et al., In order to inoculate wood chips and pulp therefrom to reduce the resin content of wood chips while minimizing the degradation of other components of wood, in particular cellulose and hemicellulose. It is disclosed that certain fungi can be used. However, the species of fungi disclosed herein are all apparently fungal or planar fungi that essentially produce surface or exterior spots that can be flattened when infected with wood (JS Boyce, Forest Pathology , 3rd). Ed., 1961, McGraw-Hill Book Co. pp. 493-512, in particular 496-512). These fungi have not been practically successful as we know it.

공개된 유럽 특허원 제 EP 03 87 187 A2 호에서 펄프재 및 펄프의 피치 함량을 감소시키기위해 이들에, 일반적으로 아스코마이세테스(Ascomycetes) 또는 듀테로마이세테스(Deuteromycetes)로 분류된 특정한 목재-침투 진균을 도포함이 기술된다. 유사하게 유용한 목재-침투 진균 유도체가 또한 공개된 유럽원 제 EP 04 70 929 A2 호에 개시된다.Specific woods, generally classified as Ascomycetes or Deuteromycetes, to reduce the pitch content of pulp material and pulp in published European Patent Application EP 03 87 187 A2. The inclusion of infiltrating fungi is described. Similarly useful wood-penetrating fungal derivatives are also disclosed in published European Application EP 04 70 929 A2.

공개된 프랑스 특허원 제 2 692 590 호에서 처리된 기재상에서 백색 또는 무색으로 성장하면서 매우 우수한 피치 분해 및 공격적인 성장 특성을 나타내는 바람직한 목재-침투 진균인 오피오스토마 필리페룸(Osphiostoma piliferum)의 다른 균주 유도체가 기술된다.Another strain derivative of Osphiostoma piliferum , which is a preferred wood-penetrating fungus that grows white or colorless on a substrate treated in published French Patent Application No. 2 692 590 and exhibits very good pitch degradation and aggressive growth properties. Is described.

상기 기술된 오피오스토마 필리페룸의 바람직하고 개선된 목재-침투 균주 계열은 상업적인 가능성을 나타내고 상업적인 성공을 이루었다. 피치 감소에 대한 실질적인 절감에 추가해서, 더 큰 종이 강도(다시 말하면 더 빠른 기계 속도)의 초기 징조가 확인되었으며 추측상 수지 관 및 방사 유조직 세포를 실질적으로 개방시키는 진균의 능력때문에, 더 큰 펄프화 효율을 추가로 나타낸다. 실용적으로 유용한 이런 진균의 능력은 부분적으로 비-살균된 기재에서 경쟁적으로 성장하는 진균의 능력에 기여하며, 목재 원료를 자연적으로 감염시키는 다른 진균 또는 유기체에 의해 축출되지 않으며 억제되지 않는다. 소급해보면, 명시된 목재-침투 진균이 유용할수 있는 이유를 최소한 이론화할수 있으며, 명시된 잇점을 제공할수 있다. 예를 들면, 명시된 목재-침투 진균은 죽은 목재에 초기에 콜로니를 형성하고 따라서 목재 부패 과정의 초기에 기여하는 것으로 공지되어 있다. 따라서 이런 진균의 주요한 본래의 목적은 목재에서 수지를 실질적으로 제거 및 감소시키는 것으로, 이는 수지 관 및 유조직 세포를 또한 개방하여 예를 들면 진균 분류시 바시디오마이세테스(바시디오마이코티나(Basidiomycetina))로 일반적으로 밝혀지는 화이트 로트 및 브라운 로트와 같은, 나중에 콜로니를 형성하는 부패 진균이 침입하게하는 것으로 가정할수 있다. 상당량의 수지가 존재할때 다른 진균보다 우세한 명시된 목재-침투 진균의 능력은 아마도 이들의 피치-분해 목적이 제공되고 일차적인 본래의 자연 목적이 피치 분해일수 있다는 이론과 일치함을 보증한다.The preferred and improved wood-penetrating strain family of opiostoma Filipferum described above represents commercial possibilities and has achieved commercial success. In addition to the substantial savings for pitch reduction, an initial sign of greater paper strength (ie faster machine speed) has been identified and speculatively greater pulping due to the fungus' ability to substantially open the resin tube and spinous tissue cells. The efficiency is further shown. The ability of these fungi to be practically useful contributes to the ability of fungi to grow competitively on partially non-sterile substrates and is not toppled and inhibited by other fungi or organisms that naturally infect wood raw materials. Retrospectively, it can at least theorize why specified wood-penetrating fungi can be useful and provide the stated benefits. For example, the specified wood-penetrating fungi are known to initially form colonies on dead wood and thus contribute early in the wood decay process. Thus the main original purpose of these fungi is to substantially remove and reduce resin in wood, which also opens the resin tube and parenchymal cells, for example Bassidiomycetes (Basidiomycetina) in fungal sorting. Can be assumed to cause invading decay fungi that later form colonies, such as the white lot and the brown lot, which are commonly found. The ability of specified wood-penetrating fungi to prevail over other fungi in the presence of a significant amount of resin presumably is consistent with the theory that their pitch-decomposition objectives are provided and that the primary original natural objective may be pitch degradation.

바시디오마이세테스는 특히 건축용 목재로서 목재의 질에 불리한 영향없이 목재의 피치를 분해하는 화이트 로트 진균을 포함한다. 피치를 분해하고 비-살균 목재에서 잘 성장하는 화이트 로트 진균은 예를 들면 미국 특허 제 5,472,874 호 및 제 5,476,790 호에 개시된 시조필룸 코문(Schizophyllum commune), 트리찹텀 비포르메(Trichaptum biforme), 파네로차에트 기간테아(Phanerochaete gigantea) 및 프레비아 트레멜로사(Phlebia Tremellosa)를 포함한다.Bassidiomycetes are particularly construction wood and contain white lot fungi that degrade the pitch of wood without adversely affecting the quality of the wood. White lot fungi that degrade pitch and grow well in non-sterile wood are described, for example, in Schizophyllum commune , Trichaptum biforme , Panero, as disclosed in US Pat. Nos. 5,472,874 and 5,476,790. Phanerochaete gigantea and Phlebia Tremellosa .

바시디오마이세테스는 여러 형태학상으로 다른 패턴의 목재로부터 리그닌을 제거한다. "선택적인 탈리그닌화"로 알려진 부패의 한 유형은 셀룰로스의 양에 비해 더 많은 양의 리그닌을 분해할때 분명하다. 부패의 상기 유형에서, 세포벽의 S2 층의 다량의 셀룰로스가 그대로 남아있으면서 이차 벽 및 중간 박막층의 리그닌은 거의 대부분 제거될수 있다. 화이트 로트 진균은 또한 "동시 부패"를 야기한다. 부패의 상기 유형은 빈구멍 및 침식된 골 또는 매우 얇아진 이차 벽 투성이인 세포를 남기고 셀룰로스 및 리그닌을 모두 제거하는 것을 특징으로 한다. 이들 부패 유형에는 많은 변형이 존재한다.Basidiomycetes remove lignin from morphologically different patterns of wood. One type of rot known as "selective delignification" is evident when breaking down a greater amount of lignin relative to the amount of cellulose. In this type of rot, almost all of the lignin in the secondary wall and intermediate thin film layer can be removed while large amounts of cellulose in the S2 layer of the cell wall remain intact. White lot fungi also cause "simultaneous rot". This type of decay is characterized by the removal of both cellulose and lignin, leaving voids and eroded bone or very thin secondary wally cells. There are many variations on these types of corruption.

일부 바시디오마이세테스가 단지 동시 부패를 일으키는 반면 다른 것은 기재의 한 부분에서는 동시 부패를 일으키고 또다른 부분에서 주로 탈리그닌화를 일으킨다. 이런 경우에, 전체 기재의 화학적인 분석은 선택적으로 리그닌을 제거하는 이들 진균의 잠재력을 오도할수 있다. 목재로부터 분해된 리그닌, 셀룰로스 및 헤미셀룰로스의 양의 차이 및 이들 세포벽 성분이 공격된 순서가 보고되어있다. 몇몇 화이트 로트 진균은 셀룰로스를 단지 약간 손실시키고 헤미셀룰로스를 중간 내지 소량 손실시키면서 많은 양의 리그닌을 선택적으로 제거하는 능력을 갖는다. 몇몇 다른 화이트 로트 진균은 초기에는 리그닌에 매우 선택적이지만 나중에는 남은 셀룰로스를 공격하는 것으로 나타난다. 따라서, 리그닌에 대한 몇몇 진균의 선택성은 화학 분석이 행해지는 부패의 단계에 의존하여 변할수 있다.Some bacsidomycetes only cause co-rotation while others cause co-rotation in one part of the substrate and mainly delignification in another part. In such cases, chemical analysis of the entire substrate can mislead the potential of these fungi to selectively remove lignin. Differences in the amount of lignin, cellulose and hemicellulose degraded from wood and the order in which these cell wall components were attacked are reported. Some white lot fungi have the ability to selectively remove large amounts of lignin with only a slight loss of cellulose and medium to small amounts of hemicellulose. Some other white lot fungi are initially highly selective for lignin but later appear to attack the remaining cellulose. Thus, the selectivity of some fungi for lignin can vary depending on the stage of decay in which the chemical analysis is performed.

종이 제조에 진균 및 진균성 효소의 잠재적인 용도 연구의 일반적인 분야에서, 바시디오마이세테스, 특히 화이트 로트 진균은 리그닌을 분해하고 리그닌 분해 효소를 생산하는 이들의 능력때문에 흥미롭다. "생펄프화"이라고 지칭되는 이런 진균을 사용하는 원래 개념은 펄프밀에 넣기전에 펄프화 또는 리그닌 제거의 공정을 시작하기위한, 예를 들면 목재 칩의 형태의 펄프재의 초기 처리의 개념을 근간으로 한다.In the general field of research on the potential use of fungi and fungal enzymes in paper manufacture, bacidiomycetes, especially white lot fungi, are of interest because of their ability to degrade lignin and produce lignin degrading enzymes. The original concept of using such fungi, referred to as "live pulping," is based on the concept of initial treatment of pulp material in the form of wood chips, for example, to begin the process of pulping or lignin removal before entering the pulp mill. do.

이런 목적에 특히 적합하다고 판단되는 화이트 로트 진균는 미국 특허 제 5,055,159 호에 기술된 세리포리옵시스 섭버미스포라(Ceriporiopsis subvermispora)이다. 이의 바람직한 효과를 수득하기위한 이런 진균의 작용의 동기 및 기작은 선택적인 리그닌 분해에 관련된 특허원에 나타나지만, 몇몇 보고된 잇점이 또한 우리의 상기 지적한 피치 분해 진균에 의해 수득된 것들을 시사함을 주목한다. 바시디오마이세테스에 관한 우리의 일반적인 지식에 일치해서 세리포리옵시스 섭버미스포라는 비-살균 기재에서는 잘 성장하지않으며 본 특허는 진균을 접종하기전에 기재를 살균함을 개시한다.White lot is determined to be particularly suitable for this purpose jingyunneun united serie Poly option seopbeo system described in Patent No. 5,055,159 is a miss Fora (Ceriporiopsis subvermispora). It is noted that the motivation and mechanism of action of these fungi to obtain their desired effect appears in the patent applications related to selective lignin degradation, but some reported advantages also suggest those obtained by our above-mentioned pitch degraded fungi. . Consistent with our general knowledge about Bassidiomycetes, Seriphoropsis subversispora does not grow well on non-sterile substrates and the patent discloses that the substrates are sterilized prior to inoculation of the fungi.

다양한 목재 섬유에 화이트 로트 진균을 사용하여 생펄프화 시스템을 생성하려는 노력에 대해 여러가지 보고가 있었다. 이전의 연구는 단일 또는 상대적으로 적은 진균의 종에 집중된다. 이런 종래의 시스템에 가장 일반적으로 사용되는 진균은 화이트 로트 진균인 파네로차에트 크리소스포리움(Phanerchaete chrysosporium)이다. 종래 기술은 일반적으로 셀룰로스 섬유의 기계적인 또는 열 기계적인 펄프화의 단계와 결합하여 목재를 처리하는 공정의 일부로서 화이트 로트 진균과 같은 생물학적 유기체를 사용하고자 노력하였음을 인식하고 있다.There have been several reports of efforts to create live pulping systems using white lot fungi on various wood fibers. Previous research has focused on single or relatively few fungal species. The fungus most commonly used in this conventional system is the white lot fungus Phanerchaete chrysosporium . The prior art generally recognizes the effort to use biological organisms, such as white lot fungi, as part of the process of treating wood in combination with the mechanical or thermomechanical pulping of cellulose fibers.

리그닌 분해에 선택적이지 않고 다량의 폴리사카라이드를 또한 제거하는 많은 화이트 로트 진균이 있다. 코리올러스 버시콜러(Coriolus versicolor)는 모든 세포벽 성분의 동시 분해를 야기하는 화이트 로트 진균의 한 예이다. 이것은 모든 화이트 로트 진균의 대표로 분석에 반복적으로 사용된 종이다. 그러나, 화이트 로트사이에 많은 변종이 있다. 리그닌 분해에 선택적이거나 비선택적인 이들 이외에, 하나의 기재내에 화이트 로트 공격의 두가지 유형을 모두 일으키는 진균을 발견하는 것이 가능하다. 이것은 탈리그닌된 목재 및 동시 백색 부패된 목재의 반점 패턴을 야기한다. 예를 들면 셀룰로스 또는 헤미셀룰로스에 대한 화이트 로트 공격의 다른 유형이 또한 보고되어 있다.There are many white lot fungi that are not selective for lignin degradation and also remove large amounts of polysaccharides. Coriolus versicolor is an example of a white lot fungus that causes simultaneous degradation of all cell wall components. This is a species that has been used repeatedly for analysis as a representative of all white lot fungi. However, there are many variants between white lots. In addition to those that are selective or non-selective for lignin degradation, it is possible to find fungi that cause both types of white lot attacks in one substrate. This results in a spot pattern of talignined wood and simultaneous white rotted wood. Other types of white lot attacks, for example against cellulose or hemicellulose, have also been reported.

화이트 로트 진균, 특히 목재로부터 리그닌을 선택적으로 분해하는 화이트 로트 진균에 의한 리그닌의 분해는, 이들을 리그닌 또는 여러 페놀성 화합물이 변화되거나 또는 제거되어야하는 종이 제조와 같은 산업적인 용도에 이상적으로 적합하게 만드는 특성이다. 생펄프화, 생표백 및 펄프밀 폐기 유출액의 처리를 위한 화이트 로트 진균의 잠재적인 용도가 또한 제안되나, 실제적으로 효과적인 결과는 알기 어렵다.Degradation of lignin by white lot fungi, particularly white lot fungi that selectively degrade lignin from wood, makes them ideally suited for industrial applications such as paper making where lignin or various phenolic compounds have to be changed or removed. Characteristic. Potential uses of white lot fungi for the treatment of live pulping, live bleaching and pulp mill waste effluents are also proposed, but the practically effective results are unknown.

사실, 목재 섬유의 리그닌과 셀룰로스의 상호작용에 대해 어느 정도 공지되어 있지만 관계의 심한 복잡성 및 화이트 로트 진균의 변종에 의해 생성된 효소의 변형때문에 이런 진균을 이용하여 부분적으로 분해된 목재로부터 제조된 펄프 또는 종이가 바람직한 양을 갖는지의 여부를 목재에 대해 주어진 진균의 작용으로부터 예상하는 것은 쉽게 가능하지 않다. 선택적인 리그닌 분해에 근거하여 생펄프화 용도에 화이트 로트 진균을 선택하는 것이 합리적인 것으로 보일수 있으나, 이것은 생성된 종이의 질을 나쁘게 하는 것으로 밝혀졌다. 리그닌의 분해와 펄프화 최종 공정에 제조된 펄프 및 종이의 생성된 바람직한 품질사이의 정확한 관계는 전혀 명백하지 않다. 따라서, 기존의 기술 기준 및 리그닌과 셀룰로스의 복잡한 상호작용에 대한 기존의 주어진 지식으로는 주어진 생물학적 펄프화 공정을 통해 제조된 종이의 질 및 이런 공정을 통해 이루어진 임의의 에너지의 양 또는 화학적 처리제 절감을 실험적으로 측정하는 것만이 가능하다.In fact, pulp made from wood partially degraded using these fungi is known to some extent about the interaction of lignin with cellulose in wood fibers, but due to the severe complexity of the relationships and the modification of enzymes produced by the strains of the white lot fungi. Or it is not readily possible to predict from the action of a given fungus on wood whether the paper has the desired amount. It may seem reasonable to select white lot fungi for live pulping applications based on selective lignin degradation, but this has been found to degrade the quality of the resulting paper. The exact relationship between the degradation of lignin and the resulting desired quality of the pulp and paper produced in the pulping final process is not at all clear. Thus, existing technical standards and existing knowledge of the complex interactions of lignin with cellulose can provide a measure of the quality of paper produced through a given biological pulping process and any amount of energy or chemical treatment saved through such a process. Only experimental measurements are possible.

본 발명은 펄프 및 종이 제품의 제조에 사용되는 셀룰로스성 물질의 처리에서의 특정한 진균의 용도에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 공정의 효율 및/또는 제조된 펄프의 질을 개선하기위해 화학적 증연 공정과 함께, 목재 칩을 포함하는 목재의 전-처리를 위한 진균, 특히 바시디오마이세테스(Basidiomycetes) 강의 용도에 관한 것이다.The present invention relates to the use of certain fungi in the treatment of cellulosic materials used in the manufacture of pulp and paper products. More specifically, the invention relates to fungi, in particular Basidiomycetes, for the pre-treatment of wood, including wood chips, in combination with a chemical vaporization process to improve the efficiency of the process and / or the quality of the pulp produced. ) The use of steel.

본 발명의 목적은, 특히 비-살균 목재 기재에서 펄프 및 펄프재의 처리에 유용한 진균의 영역을 확장하는 것이다.It is an object of the present invention to expand the area of fungi useful for the treatment of pulp and pulp material, especially in non-sterile wood substrates.

본 발명의 또다른 목적은 목재 칩이 보다 쉽고 균일하게 펄프화되고 고품질의 종이 제품을 제조하는 화학적인 펄프화 공정에 진균 전처리를 제공하는 것이다.It is another object of the present invention to provide fungal pretreatment in a chemical pulping process where wood chips are pulped more easily and uniformly and produce high quality paper products.

본 발명에 따르면, 특정한 바시디오마이세트 진균, 특히 화이트 로트 진균 예를 들면 프레비아 트레멜로사, 트리찹텀 비포르메, 시조필룸 코문 및 파네로차에트 기간테아가 이렇게 처리된 목재 또는 펄프재를 전처리하기에 바람직하게 효율적이어서 보다 균일하고 보다 효율적인 공정을 수득하여 더 높은 질의 제품을 제조하는 것으로 밝혀졌다. 이런 처리는 또한 특히 비-살균 목재 기재를 포함하는, 목재 기재의 다공성을 증가시키는 것으로 밝혀졌다. 다공성의 이런 증가는 후속적인 화학적인 처리 공정에서 더 다공성인 목재 또는 펄프재 세포로의 액체 침투를 개선시킨다. 선택적인 화이트 로트 진균이 깊이 침투하여 피치 및/또는 수지가 제거된 공동을 남기거나 세포벽을 변형시킬수 있다는 사실에도 불구하고 이런 공동은 실질적으로 펄프 또는 펄프재의 리그닌 함량에 영향을 주지않는 것으로 밝혀졌다. 그럼에도 불구하고, 생성된 진균으로 처리된 펄프는 이후 화학적인 처리를 가했을때 점도의 상당한 감소없이, 증가된 광도, 증가된 수율 및 이에 수반되는 카파수의 감소를 나타낸다.According to the present invention, wood or pulp materials treated with certain bacidiomycetes fungi, in particular white lot fungi such as Previa Tremelosa, Trichoptum Biforme, Sizophilum Komun and Panerzaet Guatea It has been found to be preferably efficient to pretreat to obtain a more uniform and more efficient process to produce higher quality products. This treatment has also been found to increase the porosity of wood substrates, particularly including non-sterile wood substrates. This increase in porosity improves liquid penetration into more porous wood or pulp material cells in subsequent chemical treatment processes. Despite the fact that selective white lot fungi can penetrate deeply, leaving voids and / or resin removed cavities or modifying cell walls, these cavities have been found to have substantially no effect on the lignin content of pulp or pulp material. Nevertheless, the pulp treated with the resulting fungi then exhibited increased brightness, increased yield and accompanying kappa number reduction without significant decrease in viscosity upon subsequent chemical treatment.

펄프화 공정에서의 화이트 로트 진균의 잠재적인 용도는 매우 흥미롭다. 사실 몇몇 제한된 성공이 연구실에서 살균된(예를 들면, 고압살균된) 목재에서 관찰되지만(예를 들면 AT-B-397 589; 미국 특허 제 5,055,159 호; 메스너(Messner) 등의 문헌["Biopulping: An overview of developments in an environmentally safe paper-making technology, FEMS MICRO. REV, 13: 351-364(1994)"]를 참조할수 있다) 비-살균 목재에 대한 효율은 이전까지 입증되지 않았고 이런 실험실적인 결과로부터 예상할수도 없다. 실제로 한천, 살균된 목재 칩 또는 다른 살균 기재인 순수한 영양원에 콜로니를 형성하는 기회가 주어지면, 모든 리그닌을 분해하는 진균이 목재에서 성장할 것으로 예상되며, 나중에 경쟁적 진균에 의해 도전될때까지 어느 정도 성공적으로 계속 자란다.The potential use of white lot fungi in pulping processes is very interesting. In fact some limited success has been observed in wood sterilized (eg autoclaved) in a laboratory (eg AT-B-397 589; U.S. Patent 5,055,159; Messner et al., "Biopulping: An overview of developments in an environmentally safe paper-making technology, FEMS MICRO. REV, 13: 351-364 (1994) "). Effects on non-sterile wood have not been demonstrated before and these laboratory results You can't expect it from. Indeed, given the opportunity to form colonies in pure nutrient sources, which are agar, sterile wood chips, or other sterile substrates, all lignin-degrading fungi are expected to grow on wood, with some success until later challenged by competitive fungi. Keep growing

그러나 진균이 종이밀 장치에서 발견되는 비살균된 목재에서 다른 미생물과 성공적으로 경쟁하기위해서는 진균은 기재에 이미 존재하는 경쟁 미생물의 성장을 방해하는데 필요한 성장 독성의 어떤 특성을 가져야만 한다. 그렇지 않으면 진균은 목재를 보다 쉽게 펄프화되게 만들기위한 가치가 없거나 실용적 용도가 없다.However, for fungi to compete successfully with other microorganisms in unsterilized wood found in paper mill devices, the fungi must have certain characteristics of growth toxicity necessary to prevent the growth of competing microorganisms already present in the substrate. Otherwise the fungus has no value or practical use to make the wood pulped more easily.

따라서 본 발명은 생물학적으로 전처리되지않은 펄프보다 후속적인 화학 증연후 더 나은 펄프를 제조하도록 전처리된 목재 또는 펄프재를 부드럽게 하는 방법을 제공한다. 이런 진균 전처리는 세포벽을 변형시키고/시키거나 목재 특히 펄프재 및 펄프의 다공성을 증가시켜 목재 또는 펄프재에 증연 화학적 처리제가 더 쉽게 침투하고 이어서 더 쉽고 균일하게 펄프화되게 하는 것으로 생각되고 상기 방법은 바시디오마이세테스 진균, 특히 화이트 로트 진균의 접종물을 펄프재 또는 펄프에 도포하는 단계; 그런 다음 접종된 펄프재 또는 펄프를 셀룰로스성 기재(예를 들면 목재 또는 펄프재)를 전처리하기에 충분한 시간동안 진균을 성장하게하는 조건하에서 유지시켜 목재를 화학적으로 펄프화하기쉽게 하기위해 증연 화학적 처리제가 침투하도록, 예를 들면 목재를 부드럽게 하기위해 세포벽을 변형시키고/시키거나 핵막을 분해하고/하거나 펄프재 또는 펄프의 다공성을 증가시킴으로써 더 나은 펄프를 제조하는 단계를 포함한다. 이런 "전처리 효과"는 SEM 조사에 의해 명백하게 나타난다.The present invention therefore provides a method of softening pretreated wood or pulp material to produce better pulp after subsequent chemical expansion than pulp that has not been biologically pretreated. This fungal pretreatment is believed to deform the cell walls and / or increase the porosity of wood, especially pulp and pulp, so that the evaporation chemical treatment agent penetrates the wood or pulp material more easily and then pulsates more easily and uniformly. Applying an inoculum of bacidiomycetes fungi, in particular white lot fungus, to the pulp material or pulp; The inoculated pulp material or pulp is then subjected to a steam chemical treatment to keep the wood chemically pulped by keeping it under conditions that allow fungi to grow for a sufficient time to pretreat the cellulosic substrate (eg wood or pulp material). Producing a better pulp for me to penetrate, for example by deforming the cell wall and / or breaking down the nuclear membrane and / or increasing the porosity of the pulp material or pulp to soften the wood. This "pretreatment effect" is evident by SEM irradiation.

본 발명은 또한 종이 제조용 펄프를 위한 비살균된 목재 또는 목재 칩의 생물학적인 전처리에 관한 것이다. 프레비아 트레멜로사, 파네로차에트 기간테아, 시조필룸 코문 및 트리찹텀 비포르메와 같은 화이트 로트 진균의 특별한 종의 사용 및 상기 진균에 의한 목재 또는 목재 칩의 처리동안 상대적으로 완화된 조건의 유지를 통해 화학적인 펄프화 공정의 한 부분으로 생물학적인 처리 또는 전처리를 사용하는 것이 가능하다는 것이 본원에서 밝혀졌다. 상기 공정은 순수한 화학적인 펄프화에 의해 제조된 종이에 증가되는 강도를 제공하는 동시에 기계적인 및/또는 화학적인 펄프화 공정동안 소비되는 에너지를 막대하게 절약하는 종이를 생성한다는 것으로 밝혀졌다. 더구나 화학적인 펄프화 공정은 화학적 처리제의 절약, 단축된 증연 시간 및/또는 개선된 수율에 의해 입증된 것처럼 보다 효과적이다.The invention also relates to biological pretreatment of unsterilized wood or wood chips for pulp for paper making. The use of special species of white lot fungi, such as Previa Tremelosa, Panerchaet Guatea, Sizofilum Komun and Trichoptum Biforme and of relatively mild conditions during the treatment of wood or wood chips by the fungus. It has been found herein that it is possible to use biological treatment or pretreatment as part of a chemical pulping process through fats and oils. The process has been found to provide paper with increased strength to paper made by pure chemical pulping, while at the same time producing paper that enormously saves energy consumed during mechanical and / or chemical pulping processes. Moreover, chemical pulping processes are more effective, as evidenced by the savings in chemical treatment, shorter steaming times, and / or improved yields.

따라서 본 발명의 공정에 사용된 진균은 리그닌에 선택적이거나 선택적이지 않을수 있다. 본원에서 전처리로 지칭되는 중요한 생물학적으로 유도된 효과는 하나 이상의 세포벽 및/또는 다공성의 증가 및/또는 핵막 분해때문에 목재를 보다 쉽게 펄프화되게하여 화학적인 펄프화를 보다 효과적으로 진행하여 예상치않은 화학적인 펄프화 결과를 생성시킨다. 이런 진균은 목재 "시이즈닝(seasoning)"을 촉진시키기위해 가해져서 보다 단축되고 보다 효율적인 증연 시간 및 펄프화 공정을 생성하여 개선된 펄프 및 종이 제품의 제조에 사용되는 펄프재의 피치 함량의 감소 및/또는 세포벽의 변형 및/또는 핵막의 분해를 야기한다.Thus the fungi used in the process of the invention may or may not be selective for lignin. An important biologically induced effect, referred to herein as a pretreatment, is that the wood is more easily pulped due to one or more cell wall and / or increases in porosity and / or nuclear membrane degradation, leading to more efficient chemical pulping and unexpected chemical pulping. Produces results These fungi are applied to promote wood "seasoning", resulting in shorter and more efficient addition times and pulping processes, resulting in a reduction in the pitch content of pulp material used to produce improved pulp and paper products, and And / or deformation of the cell wall and / or degradation of the nuclear membrane.

생펄프화 공정에 이런 화이트 로트 진균을 사용하면 적당하지않거나 또는 불균일하게 증연되어 밀에 의해 제거되는 목재 칩의 양을 더욱 작게할뿐만 아니라 화학적인 처리동안 리그닌을 더 효율적으로 용해시켜 카파수를 더 빠르게 감소시킨다. 놀랍게도, 화이트 로트 전처리 그자체가 본질적으로 리그닌 함량을 상당한 감소시키지못할때조차도 이런 공정은 효과적이다. 그럼에도 불구하고, 이런 발견은 이런 공정에 유용한 진균의 범위를 후속적인 화학적 증연으로부터 개선된 제품 또는 공정을 제조하기위해 셀룰로스성 기재를 전처리할수 있는 이들 비-리그닌 분해 진균 예를 들면 화이트 로트 진균으로 확장시킨다. 이런 생펄프화 공정은 또한 환경적으로 해로운 염소-함유 조성물에 대한 필요성을 감소시킨다.The use of these white lot fungi in a live pulping process not only reduces the amount of wood chips that are unsuitably or non-uniformly removed by the mill, but also dissolves lignin more efficiently during chemical treatment, resulting in more kappa water. Decreases quickly. Surprisingly, this process is effective even when the white lot pretreatment itself does not essentially reduce the lignin content significantly. Nevertheless, this finding extends the range of fungi useful for these processes to these non-lignin-degrading fungi, such as white lot fungi, which can pretreat cellulosic substrates to produce improved products or processes from subsequent chemical expansion. Let's do it. This live pulping process also reduces the need for environmentally harmful chlorine-containing compositions.

목재 또는 펄프재가 100 내지 200℃ 범위의 온도에서 예를 들면 설페이트, 산 설페이트, 비설페이트 및/또는 중성설페이트 처리하면서 열의 존재하에 화학적으로 처리되는, 이런 화학적인 "생펄프화" 공정, 특히 크래프트(설페이트) 또는 설파이트 공정은 감소된 염소 또는 염소-함유 화합물의 사용, 보다 단축된 증연 시간, H-인자의 감소, 카파수(탈리그닌)의 더 빨라진 감소 및 증가된 다공성에 기인한 목재로의 더 큰 화학적인 침투를 포함하는 많은 추가의 잇점을 수득하는 것으로 보인다. 본 발명의 특히 바람직한 양태에서 전처리된 목재 또는 펄프재를 160 내지 180℃ 범위의 온도에서 설페이트 또는 알칼리 용액을 포함하는 화학적 처리를 수행한다. 따라서, 이온 및 목재 또는 펄프재로부터 용해된 리그닌 생성물이 확산되므로 후속적인 목재 또는 펄프재로의 침투를 사용하여 보다 효과적인 펄프화 공정을 야기한다.Such chemical "live pulping" processes, in particular krafts, in which wood or pulp material is chemically treated in the presence of heat at a temperature ranging from 100 to 200 ° C., for example, with sulfates, acid sulfates, unsulfates and / or neutral sulfates. Sulfate) or sulfite process to wood due to the use of reduced chlorine or chlorine-containing compounds, shorter expansion times, reduction of H-factors, faster reduction of kappa number (talignin) and increased porosity. Many additional benefits appear to be obtained, including greater chemical penetration. In a particularly preferred embodiment of the invention the pretreated wood or pulp material is subjected to a chemical treatment comprising a sulfate or alkaline solution at a temperature in the range from 160 to 180 ° C. Thus, the lignin product dissolved from the ions and wood or pulp material diffuses, resulting in a more efficient pulping process using subsequent penetration into the wood or pulp material.

추가로, 본 발명의 화이트 로트 진균을 목재 기재에 사용하면 일반적으로 목재를 "부드럽게 하고" 펄프화 공정에서 종이 산업에서 일반적으로 소비하는 전기 및/또는 기계 에너지를 상당히 절약하는 것으로 보인다. 이런 에너지 절약을 평가하는 믿을만한 모델은 시몬스(Simons) 염색이다. 시몬스 염색 과정은 블란체트(Blanchette)의 문헌[Using Simmons' Stain to Evaluate Fiber Characteristics of Biomechanical Pulping, TAPPI Journal 75:121-124, 1992]) 등 및 1995년 유(Yu)의 문헌[Mechanism of Action of Simon's stain TAPPI Journal 78:175-180]) 등에 의해 나타나고 논의된다. 정련된 섬유의 목적에 맞는 색 변화의 강도는 에너지 절약을 예상하기위해 확실하게 사용될수 있다. 오렌지색-황색 착색은 목재를 펄프로 기계적으로 정련(악타(Akhtar, M.), 블란체트 및 번스(T. A. Burnes)의 문헌[1995년; Using Simmons' Stain to Predict Energy Savings During Biochemical Pulping, Wood and Fiber Science 27:258-264])하는동안 상당한 전기 에너지 절약이 일어나는 것의 인디케이터이다.In addition, the use of the white lot fungus of the present invention in wood substrates generally appears to "soften" wood and significantly save the electrical and / or mechanical energy typically consumed in the paper industry in the pulping process. A reliable model for evaluating this energy saving is the Simons stain. The Simmons staining process is described by Blanchette, Using Simmons' Stain to Evaluate Fiber Characteristics of Biomechanical Pulping, TAPPI Journal 75: 121-124, 1992, and Yu, 1995, Mechanism of Action of Simon's stain TAPPI Journal 78: 175-180] and the like. The intensity of the color change to suit the purpose of the refined fiber can be reliably used to anticipate energy savings. Orange-yellow coloring mechanically refines wood into pulp (Akhtar, M., Blanchett and TA Burnes, 1995) Using Simmons' Stain to Predict Energy Savings During Biochemical Pulping, Wood and Fiber Science 27: 258-264] is an indicator of the significant electrical energy savings that occur.

"수지" 또는 "피치"라는 용어(상호교환적으로 사용됨)는 중성 유기 용매, 예를 들면 메틸렌 클로라이드, 디에틸 에테르, 벤질 알콜 등에서 용해되는, 추출물로 또한 알려진 목재의 소수성 물질의 복합 혼합물을 의미한다. 이들 추출물은 테르펜, 디테르펜("수지") 산, 지방산 및 에스테르, 예를 들면 스테릴 에스테르, 글리세라이드 및 왁스 및 알콜, 탄화수소 및 이와 결합된 다른 화합물을 포함한다. 본 발명의 목적을 위해, 디클로로메탄을 사용하는 표준 TAPPI 추출 분석은 본 발명의 목적인 바람직하지않은 목재 수지의 감소를 측정하기에 충분할 것이다. 그러나, 다른 인식된 용매 시스템 예를 들면 에탄올/톨루엔은 본질적으로 동일하게 나타난다.The term "resin" or "pitch" (used interchangeably) means a complex mixture of wood hydrophobic substances, also known as extracts, dissolved in neutral organic solvents such as methylene chloride, diethyl ether, benzyl alcohol, and the like. do. These extracts include terpenes, diterpene (“resin”) acids, fatty acids and esters such as steryl esters, glycerides and waxes and alcohols, hydrocarbons and other compounds bound thereto. For the purposes of the present invention, a standard TAPPI extraction assay using dichloromethane will be sufficient to measure the reduction in undesirable wood resins that is the object of the present invention. However, other recognized solvent systems such as ethanol / toluene appear essentially the same.

수지 또는 피치는 사시나무, 단풍나무, 자작나무 및 참나무를 포함하는, 남미산 소나무, 침엽수 및 참나무와 같은 연질목재 및 베툴라(Betula) 및 포풀러스(Populus)와 같은 경질목재 모두의 중요한 성분이고, 기계적인 또는 화학적인 펄프화 공정에 보내지는 공급물의 4 % 정도, 펄프화에 사용되는 대부분의 목재의 일반적으로 1.5 내지 4.0 %를 구성할수 있다. 연질목재는 일반적으로 경질목재보다 더 많은 수지를 포함하고, 소나무는 연질목재중에 가장 높은 수지 함량을 갖는다. 경질목재에서, 수지는 목재가 펄프화될때 섬유 분획의 다수를 형성하는 방사 유조직에 주로 위치한다. 연질목재에서, 수지는 방사 유조직 세포 및 또한 수지관 모두에 함유되어 있다.Resin or pitch is an important component of both softwoods such as South American pines, conifers and oaks and hardwoods such as Betula and Populus, including aspen, maple, birch and oak It can comprise about 4% of the feed sent to the mechanical or chemical pulping process, and generally 1.5 to 4.0% of most wood used for pulping. Softwoods generally contain more resin than hardwoods, and pines have the highest resin content of softwoods. In hardwoods, the resin is primarily located in the spinning oily tissue, which forms a large number of fiber fractions when the wood is pulped. In softwood, the resin is contained in both the spinoid tissue cells and also the resin tubes.

본원에 사용된 "펄프재"라는 용어는 펄프화전에 종이, 마분지 또는 비스코스와 같은 다른 셀룰로스성 제품의 제조에 사용되는 재목 물질의 임의의 수확된(절단된) 형태를 의미하고 목재, 통나무, 목재 칩, 톱밥 등을 포함한다. "정련된 펄프재"라는 용어는 펄프화 공정에 도입되기 전의 다수의 큰 표면적, 작은 조각, 예를 들면 목재 칩 및 톱밥을 수득하기위해 통나무와 같은 전체 펄프재에 기계력 및/또는 전단력을 사용하여 생성된 펄프재를 의미한다. 본 발명은 리그닌 함량을 상당히 감소시키고 함유된 피치를 유지시키기위해 충분한 처리를 하여야 하는 펄프 특히 제 1 단계의 기계적인 펄프와 같은, 원래 리그닌 함량의 60 % 이상을 아직도 보유하는 펄프로 분류된 리그닌-함유 셀룰로스성 물질에 또한 사용된다.As used herein, the term "pulp material" means any harvested (cut) form of timber material used in the manufacture of other cellulosic products such as paper, cardboard or viscose prior to pulping and Chips, sawdust and the like. The term "refined pulp material" uses mechanical and / or shear forces on the entire pulp material, such as logs, to obtain a number of large surface areas, small pieces, for example wood chips and sawdust, prior to their introduction into the pulping process. It means the produced pulp material. The present invention relates to lignin classified as pulp which still retains at least 60% of the original lignin content, such as pulp, especially mechanical pulp of the first stage, which must be sufficiently treated to significantly reduce the lignin content and maintain the contained pitch. It is also used for containing cellulosic material.

따라서 본 발명은 화이트 로트 진균, 특히 프레비아 트레멜로사, 파네로차에트 기간테아, 시조필룸 코문 및 트리찹텀 비포르메로 구성된 그룹으로부터 선택된 화이트 로트 진균의 접종물을 펄프재 또는 펄프에 도포하고, 접종된 펄프재 또는 펄프를 매스(mass)로 축적하고, 진균에 의해 펄프재 또는 펄프의 피치 및/또는 수지 성분의 감소에 영향을 주기에 충분한 시간동안 매스에서 진균을 성장하게하거나 증진시키는 조건하에서 축적된 매스를 유지함으로써, 비살균된, 정련된 펄프재 및 불완전하게 정련된 펄프의 피치 및/또는 수지 성분을 적어도 부분적으로 감소시키기위한 본 발명의 하나의 양태에 사용될수 있다. 더구나 본 발명의 화학적인 및/또는 크래프트 펄프화 공정과 관계된 이런 진균의 접종물의 사용은 목재 또는 펄프재를 후속적인 화학적 처리를 위해 처리시킨다. 전처리 또는 시이즈닝의 정확한 성질은 알려지지 않았지만 특히 펄프재 또는 목재의 다공성을 증가시키고/시키거나 핵막 및/또는 세포벽을 분해함으로써 목재 또는 펄프재를 전처리하고 부드럽게 하고/하거나 시이즈닝하기에 효과적인 양의 접종물을 사용하는 증연공정동안 셀룰로스성 기재를 후속적인 화학적 침투에 더 순응하게 만드는 것을 포함한다고 생각된다. 이어서 처리된 목재 또는 펄프재는 비-전처리된 목재 또는 펄프재보다 더 쉽고 균일하게 증연된다.Thus, the present invention applies to the pulp material or pulp a white lot fungus, in particular an inoculum of a white lot fungus selected from the group consisting of previa tremelosa, panerochaet gintea, schizophyllum komun and trichoptum biforme, Under conditions that accumulate inoculated pulp material or pulp into a mass and allow fungi to grow or promote fungi in the mass for a time sufficient to affect the pitch and / or resin content of the pulp material or pulp by the fungus. By maintaining the accumulated mass, it can be used in one embodiment of the present invention to at least partially reduce the pitch and / or resin components of unsterilized, refined pulp material and incompletely refined pulp. Moreover, the use of such fungal inoculum in connection with the chemical and / or kraft pulping process of the present invention treats wood or pulp material for subsequent chemical treatment. The exact nature of the pretreatment or seasoning is unknown, but an amount effective to pretreat, soften and / or season the wood or pulp material, in particular by increasing the porosity of the pulp material or wood and / or degrading the nuclear membrane and / or cell walls. It is contemplated to include making the cellulosic substrate more compliant with subsequent chemical penetration during the expansion process using an inoculum of. The treated wood or pulp material is then expanded more easily and uniformly than the non-pretreated wood or pulp material.

진균은, 바람직하게 비박피된 목재의 경우 바람직하게는 적어도 부분적으로 칼자국이 난 목재를 접종하고, 이를 위해 목재 기재상 및 기재내로 진균이 성장하기에 충분한 시간동안 목재를 유지하여 전처리된 목재 기재를 수득함으로써, 박피된 또는 비박피된 형태의 절단된 목재와 같은 비살균된, 비정련된 펄프재에 사용될수 있다. 이런 전처리는 세포벽을 변형시키고/시키거나 이의 피치 및/또는 수지 성분을 감소시키고/시키거나 핵막을 분해하고/하거나 셀룰로스성 기재의 다공성을 증가시키는 것을 포함하는 것으로 생각된다. 더구나, 진균은 본질적으로 셀룰로스성 기재의 리그닌 성분을 반드시 제거할 필요는 없지만, 진균은 리그닌 발색단 또는 다른 리그닌 분해 생성물이 방출되고/되거나 변형되도록 리그닌 성분을 변형시킬수 있다. 이런 효과는 또한 더 큰 광도 효과를 설명한다.The fungus preferably inoculates the pretreated wood substrate by inoculating a wood that is preferably at least partially cut in the case of unpeeled wood, and holding the wood for a time sufficient for the fungus to grow on and into the wood substrate. By obtaining, it can be used for unsterilized, unrefined pulp material, such as cut wood in peeled or unpeeled form. Such pretreatment is believed to include modifying the cell wall and / or reducing its pitch and / or resin components and / or degrading the nuclear membrane and / or increasing the porosity of the cellulosic substrate. Moreover, fungi do not necessarily have to remove cellulosic based lignin components, but fungi can modify the lignin components to release and / or modify lignin chromophores or other lignin degradation products. This effect also accounts for the greater luminous effect.

본원에 사용된 "접종물" 등의 용어는 기재에 도포될때 진균을 성장시키기에 충분히 가능한 임의의 진균 물질을 의미한다. 전형적인 진균 접종물은 진균 배양물, 바람직하게는 생물학적으로 순수한 배양물로부터 수득된 진균 배양물 및 제조물을 포함한다. 대개의 진균의 기초 구조 단위는 진균 필라멘트 또는 균사이다. 응집체에서, 이들 필라멘트는 균사체라 불리는 진균체를 포함한다. 진균은 전형적으로 후막포자로 불리는 지지 구조를 갖는 균사체에 의해 방출되는 분생자로 불리는 포자에 의해 무성적으로 생식하거나 담자포자에 의해 유성적으로 생식할수 있다. 모든 이런 형태 및 진균 성분 예를 들면 균사체 및 포자는 본 발명의 접종물로 적합하게 사용될수 있다. 접종물 형태는 임의의 통상적인 방법으로 진균을 배양함으로써 제공될수 있다. 고체 또는 액체 배양 배지가 바람직하게 또는 필요하게, 바람직하게는 액체 배지가 사용될수 있다. 가능하다면 포자 형성에 바람직한 조건하에서 진균을 배양시키는 것이 일반적으로 바람직하고, 일반적으로 바람직한 접종물은 진균 배양으로부터 생산된 많은 포자를 포함할 것이다. 포자가 생성되지 않을때는 균사체 부분이 접종물로 사용된다.As used herein, the term “inoculation” and the like means any fungal material that is sufficiently capable of growing fungi when applied to a substrate. Typical fungal inoculum includes fungal cultures and preparations obtained from fungal cultures, preferably biologically pure cultures. The basic structural unit of the fungus is a fungal filament or mycelium. In aggregates, these filaments contain fungi called mycelium. Fungi can be reproduced asexually by spores called conidia, which are released by mycelium having a supporting structure called thick-film spores, or sexually by spore spores. All these forms and fungal components such as mycelium and spores can be suitably used in the inoculum of the present invention. Inoculum forms can be provided by culturing fungi in any conventional manner. Solid or liquid culture medium is preferably or required, preferably liquid medium may be used. If possible, it is generally desirable to cultivate fungi under conditions desirable for sporulation, and generally preferred inoculum will include many spores produced from fungal culture. When spores are not produced, the mycelium part is used as inoculum.

접종물은 고체 또는 액체 형태일수 있다. 전체 액체 배양물 또는 이의 일부 예를 들면 균사체 및 포자의 혼합물이 사용될수 있다. 포자의 높은 함량이 배양에서 사용가능할때, 생성물은 포자가 접종후 진균을 발생시킬수 있는 생존가능한 성분을 구성하는 건조 접종물을 수득하기위해 동결 건조되거나 또는 분무 건조될수 있다. 사용할때 물로 희석되는 농축물 형태의 접종물은 일반적으로 바람직한 발아능을 보존하는 온도에서 저장된다. 액체 형태는 일반적으로 -5℃ 내지 -80℃, 보다 일반적으로 -10℃ 내지 -75℃의 온도에서 일반적으로 동결 저장된다. 조작할수있는 접종물로서 포자를 포함한 동결 건조된 형태가 종종 더 안정하고 대조되는 액체 형태보다 더 높은 온도에서 저장될수 있지만, 건조 형태도 유사하게 저장된다. 접종물 조성물은 건조 공정의 임의의 유형에 도입되는 방부제 및 안정화제 또는 불활성 담체와 같은 다른 성분을 포함할수 있다.The inoculum may be in solid or liquid form. Whole liquid cultures or portions thereof, for example mixtures of mycelium and spores may be used. When a high content of spores is available in the culture, the product can be lyophilized or spray dried to obtain a dry inoculum that constitutes a viable component that can give rise to fungi after inoculation. In use, inoculum in concentrate form, diluted with water, is generally stored at a temperature that preserves the desired germination capacity. The liquid form is generally stored frozen at temperatures of -5 ° C to -80 ° C, more generally -10 ° C to -75 ° C. Lyophilized forms, including spores as operable inoculum, can often be stored at higher temperatures than the more stable and contrasting liquid forms, but dry forms are similarly stored. The inoculum composition may comprise other ingredients such as preservatives and stabilizers or inert carriers which are incorporated into any type of drying process.

진균 접종물은 여러 목적을 위해 하나 이상의 성장 지속 보조제와 혼합되거나 또는 동시에 사용될수 있다. 예를 들면, 증산억제제(건조 방지를 위함)는 낮은 습도 또는 고온의 경우에 접종물을 위해 적합한 초기 성장 조건을 보증하기위해 접종물과 함께 사용될수 있다. 또한, 스티커 및/또는 영양물질로 작용하는 물질이 발아를 보증하거나 또는 유지하고 성장에 유익한 환경을 제공하기위해 사용될수 있다. 다양한 물질이 사용될수 있지만, 카복실메틸-셀룰로스가 이들 목적에 바람직하다.Fungal inoculum may be mixed or used simultaneously with one or more growth sustaining aids for several purposes. For example, transcript inhibitors (to prevent drying) can be used with the inoculum to ensure suitable initial growth conditions for the inoculum in the case of low humidity or high temperatures. In addition, stickers and / or nutrients can be used to ensure or maintain germination and provide a beneficial environment for growth. Although various materials can be used, carboxymethyl-cellulose is preferred for these purposes.

접종물은 다양한 방법으로 목재 기재에 사용될수 있다. 전형적으로 접종물은 체계적인 또는 방법적인 방식으로 사용된다. 예를 들면, 접종물은 정련된 목재의 매스에서 간격을 두고 또는 절단된 목재의 외부 표면에, 바람직하게는 일정한 간격으로 분배된다. 보다 바람직하게는 접종물은 균일한 또는 일정한 방식으로, 즉 실질적으로 정련된 펄프재의 매스에 전체적으로 분배된다. 일반적인 예는 목재에 분무하는 것을 포함한다. 그러나, 각각 개별적인 목재 칩, 톱밥 입자 등을 반드시 접종할 필요는 없다. 비접종된 조각은 접종된 조각과 접촉한채로 축적되므로 10 % 미만, 바람직하게는 약 20 % 이상, 보다 바람직하게는 약 50 % 이상의 개별적인 조각이 접종될수 있다. 예를 들면, 접종물은 목재를 절단하는 체인 톱을 윤활하는데 사용될수 있는, 식물성 및/또는 광유와 같은 적합한 배지에 혼입될수 있다. 성장시, 감염은 매우 쉽게 퍼진다.Inoculum can be used on wood substrates in a variety of ways. Typically the inoculum is used in a systematic or methodical manner. For example, the inoculum is distributed at intervals in the mass of refined wood or on the outer surface of the cut wood, preferably at regular intervals. More preferably the inoculum is distributed throughout the mass of pulp material in a uniform or constant manner, ie substantially refined. Common examples include spraying wood. However, it is not necessary to inoculate each individual wood chip, sawdust particles, and the like. Uninoculated pieces accumulate in contact with the inoculated pieces, so less than 10%, preferably at least about 20%, more preferably at least about 50% of individual pieces can be inoculated. For example, the inoculum can be incorporated into a suitable medium such as vegetable and / or mineral oil, which can be used to lubricate chain saws cutting wood. On growth, the infection spreads very easily.

목재 칩의 매스의 완전한 또는 일정한 접종은 일반적으로 진균이 실질적으로 매스에 전체적으로 성장한다는 사실에 의해 나타난다. 그러나, 매스의 몇몇 부분, 특히 정련된 목재 또는 펄프재의 더미의 외부층은 접종되었지만, 매스의 나머지에 비해 거의 성장이 없거나 전혀 성장이 없을수 있다.Complete or constant inoculation of the mass of wood chips is generally indicated by the fact that the fungi grow substantially throughout the mass. However, some parts of the mass, especially the outer layer of the pile of refined wood or pulp material, have been inoculated, but may have little or no growth compared to the rest of the mass.

한 바람직한 양태에서, 정련 작동으로부터 목재 칩 또는 톱밥을 배출시키지만 더미로 축적시키기전에 접종물을 이들위에 분무한다. 예를 들면, 목재 분쇄 장치는 일반적으로 새로 제조된 칩을 수용하고 이들을 축적 더미로 운반하는 콘베이어 수단을 갖는다. 콘베이어로부터 낙하하기 바로전에 칩에 분무하기위해, 접종물 제조물을 함유하는 분무 도포기는 편의상 바람직하게는 칩이 공기로 운반되는, 예를 들면 자유 낙하 또는 텀블링할때는 분쇄기의 연결부에서 또는 콘베이어의 최종 가장자리에서 콘베이어에 부착된다. 다르게는, 접종물을 축적한 더미에 다소 연속적으로 분무함으로써 목재칩의 축적의 과정에서 이의 더미에 사용할수 있다.In one preferred embodiment, the wood chips or sawdust are discharged from the refining operation but the inoculum is sprayed on them before accumulating in the heap. For example, wood crushing apparatuses generally have conveyor means for receiving newly manufactured chips and transporting them to the accumulation pile. In order to spray onto the chip just before dropping from the conveyor, the spray applicator containing the inoculum preparation is conveniently for convenience, preferably at the connection of the grinder at the end of the conveyor or when the chip is carried by air, for example during free fall or tumbling. It is attached to the conveyor. Alternatively, by spraying the inoculum accumulating piles more or less continuously, it can be used in the pile of wood chips in the process of accumulation.

펄프 또는 정련된 펄프재를 처리할때, 도포량은 여러 인자 예를 들면 처리된 목재, 목재의 조건 또는 나이, 성장 조건, 바람직한 처리 시간 등에 의존해서 변할수 있다. 일반적으로, 처리될 펄프 또는 펄프재 100 g당 0.5 내지 10 g의 균사체(탈수된 균사체의 습윤 중량), 바람직하게는 처리될 기재 100 g당 1 내지 5 g의 균사체를 포함하는 접종물을 사용하면 만족스런 결과를 수득할수 있다. 탈수전에 이런 균사체를 하기 실시예 1 또는 실시예 A, 바람직하게는 실시예 A에 기술된 것처럼 제조할수 있고, 이는 포자를 포함할수 있다. 주로 또는 단독으로 포자를 기본으로 한 접종 투여량은 일정하게 결정될수 있고 기재 kg당 10⁵내지 10¹⁰CFU(콜로니 형성 단위), 보다 일반적으로 kg당 10⁶내지 10⁹CFU의 범위를 나타낼수 있다. 유사하게 균사체의 표현된 투여량을 측정하고 사용할수 있다. 예를 들면, 균사체를 예를 들면 5-10분동안 균질화시키고 영양 배지에서 성장할때 조각으로부터 형성된 콜로니의 수를 주어진 부피에 대한 CFU를 측정하기위한 통상적인 방법으로 추정할수 있다.When treating pulp or refined pulp material, the application amount can vary depending on several factors, such as treated wood, wood conditions or age, growth conditions, preferred treatment time, and the like. Generally, using inoculum comprising from 0.5 to 10 g of mycelium (wet weight of dehydrated mycelium) per 100 g of pulp or pulp material to be treated, preferably from 1 to 5 g of mycelium per 100 g of substrate to be treated Satisfactory results can be obtained. Such mycelium can be prepared before dehydration as described in Example 1 or Example A, preferably Example A, which may include spores. Inoculation doses based on spores predominantly or alone can be determined and can range from 10 ⁵ to 10 ¹⁰ CFU (colony forming units) per kg substrate, more generally 10 ⁶ to 10 ⁹ CFU per kg . Similarly, the expressed dose of mycelium can be measured and used. For example, the mycelium can be homogenized, for example for 5-10 minutes, and the number of colonies formed from pieces when grown in nutrient medium can be estimated by conventional methods for measuring CFU for a given volume.

접종물 투여량은 일반적으로 물로 희석된 분무할수 있는 조성물, 예를 들면 기재 kg당 20 내지 60 ml의 부피로 사용될수 있는 조성물로 사용될 것이다. 진균을 바람직하게는 처리할때까지 새로 절단된 또는 정련된 펄프재 또는 감소된 온도에서 냉동된 또는 저장된 새로 절단된 기재에 사용하거나 또는 기재를 살균할수 있다. 처리전에 숙성된 비살균 펄프재, 예를 들면 처리 약 5일 이상전에 제조된 목재 칩에 사용할때, 접종전에 자연적으로 목재에 감염된 진균의 배경 성장의 영향을 피하거나, 억제하거나 또는 극복하기위해 접종물 투여량을 투여량의 범위의 상한까지 증가시키는 것이 바람직할수 있다.Inoculum dosages will generally be used in sprayable compositions diluted with water, for example compositions that can be used in volumes of 20 to 60 ml per kg substrate. The fungus may be used on freshly cut or refined pulp material or freshly cut substrate frozen or stored at reduced temperatures until treatment, or the substrate may be sterilized. Inoculated to non-sterile pulp material aged prior to treatment, for example, wood chips made at least about 5 days prior to treatment, to avoid, inhibit or overcome the effects of background growth of naturally infected wood prior to inoculation. It may be desirable to increase the water dose to the upper limit of the range of doses.

진균을 임의의 다양한 형태 및 방법으로 통나무 단부에 사용할수 있다. 진균을 진균의 성장을 일으키는 임의의 접종물 형태, 예를 들면 균사체 또는 포자의 형태로 사용할수 있다. 이런 접종물은 또한 액체 또는 건조 형태일수 있다. 예를 들면, 균사체 및/또는 포자의 수성 현탁액을 사용할수 있거나 또는 균사체 및/또는 포자를 건조 또는 동결 건조시켜 건조 형태를 제조할수 있다. 희석액 또는 배지 농축물의 액체 수성 형태가 일반적으로 바람직하다. 따라서, 진균의 접종물을 건조 형태의 분말로 사용하거나 액체 형태일때 분무하거나 손으로 바를수 있다. 통나무 단부를 전체 통나무로부터 흘러내리도록 통나무 단부에 분무하거나, 또는 예를 들면 균사체의 배지 농축된 액체를 바름으로써 접종물로 완전하게 덮을수 있다.Fungi can be used on log ends in any of a variety of forms and methods. Fungi can be used in the form of any inoculum that causes fungal growth, for example in the form of mycelium or spores. Such inoculum may also be in liquid or dry form. For example, an aqueous suspension of mycelium and / or spores may be used or the dry form may be prepared by drying or lyophilizing mycelium and / or spores. Liquid aqueous forms of diluents or medium concentrates are generally preferred. Thus, inoculum of fungi can be used as a dry powder, sprayed or hand-wound when in liquid form. The log end can be sprayed onto the log end to flow down from the entire log, or completely covered with the inoculum by, for example, applying a medium concentrated liquid of the mycelium.

또다른 양태에서, 본 발명의 방법에 따라서 전에 접종되고 배양된 칩을 신선한 칩에 분산시켜 접종을 일으키거나 향상시킬수 있다. 이런 접종물은 생물학적으로 순수하지 않을 것이다. 그러나, 이것은 접종물의 20 % 이상, 바람직하게는 40 % 이상, 보다 바람직하게는 50 % 이상의 종래의 접종물이 바람직한 진균임을 나타낸다.In another embodiment, chips previously inoculated and incubated in accordance with the methods of the present invention may be dispersed in fresh chips to inoculate or enhance inoculation. Such inoculum will not be biologically pure. However, this indicates that at least 20%, preferably at least 40%, more preferably at least 50% of the conventional inoculum of the inoculum is the preferred fungus.

접종후, 매스에서 실질적으로 전체적으로 진균이 성장하거나 성장을 증진시킬 조건하에서 축적된 매스를 유지시킨다. 본 발명은 대개의 경우에 개방 대기에서 실행될 것이고 따라서 다양한 기후 조건이 가해진다는 사실을 고려하면 전체 처리 기간을 통해 임의로 주어진 이상적인 조건의 유지는 일반적으로 이루어지기가 너무 어렵고 종종 실행하는 것이 불필요하다. 매스를 진균이 죽는 고온을 피하면서 진균이 성장하는 온도에서 실질적으로 유지시키면 일반적으로 충분하다. 본 발명의 진균은 0℃ 이하에서 일부 적합한 성장을 나타낼수 있지만 5℃ 이상의 온도, 바람직하게는 10℃ 내지 50℃, 보다 바람직하게는 15℃ 내지 45℃, 가장 바람직하게는 20℃ 내지 40℃의 온도를 갖는 것이 일반적으로 더 적합할 것이다.After inoculation, the mass is maintained under conditions that will allow fungi to grow or promote growth substantially in the mass. In view of the fact that the present invention will in most cases be carried out in an open atmosphere and therefore various climatic conditions are applied, maintenance of an ideal condition given arbitrarily throughout the entire treatment period is generally too difficult to achieve and often not necessary to implement. It is generally sufficient to maintain the mass substantially at the temperature at which the fungus grows, while avoiding the high temperatures at which the fungi die. Fungi of the present invention may exhibit some suitable growth below 0 ° C., but at temperatures above 5 ° C., preferably between 10 ° C. and 50 ° C., more preferably between 15 ° C. and 45 ° C., most preferably between 20 ° C. and 40 ° C. Having a temperature will generally be more suitable.

온화하거나 따뜻한 기후 조건에서는, 주위 온도에 영향을 주는 것은 불필요하고 접종된 매스를 특별한 유지없이 개방 공기에 유지되게 남겨둔다. 추운 날씨 조건에서, 더 적합한 온도를 유지하기위한 수단을 접종된 매스에 제공하는 것이 바람직할수 있다. 이것은 큰 플라스틱 시이트와 같은 접종된 매스상에 위치된 열-보유 덮개일수 있다. 다르게는 접종된 매스가 위치된 지면 바닥에 가열 및/또는 냉각 파이프 또는 따뜻한 공기 또는 스트림을 방출하거나 냉각 공기 또는 다른 유체를 통과시키기위한 다수의 개구를 제공할수 있다. 유사한 방법으로, 견고한 "이글루" 또는 내부적으로 가열되고 복사열을 방출할수 있는 동일한 구조물을 사용하여 펄프재의 축적된 매스를 유지할수 있다. 가열수단을 제공할때, 과다한 건조를 피하기위해 습기 상태를 조절하는 것이 또한 바람직할 것이다. 이것을 위해, 열 또는 스트림을 배출하는 수단이 적합할 것이다. 그러나, 진균 성장 및 다른 미생물로부터 축적된 매스에서 발생된 열 또는 자연적인 효과때문에, 많은 추운 기후 조건하에서 작동은, 필요하다면, 축적된 열을 방출하기위해 매스의 내부를 배출하는 것이외에는 거의 보조장치없이 만족스럽게 진행할수 있다.In mild or warm climatic conditions, it is unnecessary to affect the ambient temperature and leaves the inoculated mass kept in open air without special maintenance. In cold weather conditions, it may be desirable to provide the inoculated mass with a means to maintain a more suitable temperature. This may be a heat-retaining cover placed on an inoculated mass such as a large plastic sheet. Alternatively, the ground floor on which the inoculated mass may be located may provide a plurality of openings for releasing heating and / or cooling pipes or warm air or streams or for passing cooling air or other fluids. In a similar manner, a solid "igloo" or the same structure that is internally heated and can radiate radiant heat can be used to maintain the accumulated mass of pulp material. When providing heating means, it will also be desirable to control the moisture conditions to avoid excessive drying. For this purpose, means for discharging the heat or stream will be suitable. However, due to the heat or natural effects generated in the mass accumulated from fungal growth and other microorganisms, operation under many cold climatic conditions, if necessary, is almost an auxiliary device other than venting the interior of the mass to release the accumulated heat. You can proceed satisfactorily without.

접종된 정련된 펄프재 매스를 처리하는 기간은 바람직한 수지 및/또는 피치 제거량, 바람직한 전처리, 온도 및 습기 조건, 접종의 범위 등을 포함하는 수많은 인자에 상당히 의존하면서 변할수 있다. 그러나, 만족스런 결과를 일반적으로 2일, 바람직하게는 3 내지 40일, 보다 바람직하게는 4 내지 30일후에 수득할수 있다. 바람직한 조건하에서, 매우 효과적인 결과, 예를 들면 약 20 % 이상의 피치 감소를 접종후 4 내지 20일, 보다 일반적으로 5 내지 15일후에 수득할수 있다.The duration of treatment of the inoculated refined pulp material mass can vary considerably depending on a number of factors including the desired resin and / or pitch removal amount, preferred pretreatment, temperature and moisture conditions, range of inoculation, and the like. However, satisfactory results can generally be obtained after 2 days, preferably 3 to 40 days, more preferably 4 to 30 days. Under preferred conditions, very effective results, for example a pitch reduction of at least about 20%, can be obtained 4-20 days after inoculation, more generally 5-15 days after inoculation.

절단된 목재와 같은 비정련된 펄프재의 처리는 일반적으로 정련된 펄프재보다 다소 더 길어질 것이고 2주까지 연장될수있다. 그러나, 명시된 진균을 이용한 펄프 및 펄프재의 처리는 기재(들)의 셀룰로스 성분이 임의의 실질적인 공격을 받을수 있는 과다한 기간을 피하면서 바람직한 피치 감소 및/또는 전처리되는 기간동안 수행해야 한다. 비정련된 펄프재에 대한 투여량은 정련된 펄프재의 경우와 동일할수 있고 사용가능한 표면이 10 % 내지 100 %, 보다 일반적으로 사용가능한 표면의 15 % 내지 50 %에 사용될수 있다.Treatment of unrefined pulp material such as chopped wood will generally be somewhat longer than refined pulp material and can extend up to two weeks. However, the treatment of pulp and pulp material with the specified fungi should be carried out for a period of time during which the desired pitch reduction and / or pretreatment is avoided while avoiding excessive periods in which the cellulose component of the substrate (s) may be subjected to any substantial attack. The dosage for unrefined pulp material may be the same as for refined pulp material and may be used at 10% to 100% usable surface, and more generally 15% to 50% of available surface.

본 발명을 실행하는데 사용된 진균은 종래의 공지된 종이고 공지된 방법, 예를 들면 공중 배양 수집으로부터 또는 목재 또는 자연적으로 성장하는 다른 원료로부터 분리하여 수득될수 있다. 균주가 분리되는 원료와 같은 인자에 의존하여 균주중의 몇몇 변종이 예상될수 있는 반면, 본 발명의 진균은 비살균된 남미산 황송, 적송 또는 로블롤리 소나무 및 또한 경질목재 예를 들면 단풍나무, 참나무, 사시나무 및 자작나무에서의 상당한 성장을 나타냈고, 셀룰로스성 제품에 일반적으로 사용된 다른 목재에서 잘 성장할 것이라고 예상할수 있다. 그럼에도 불구하고, 관찰된 전처리 영향은 균주 특이성이라기 보다는 각각의 종에 대개 통상적이라고 생각된다. 본 발명의 진균의 자연적으로 일어나는 분리물은 이들의 동일한 종 특성을 잃지않고 균주 선택, 짝짓기 및 돌연변이의 여러 공지된 수단에 의해 변형될수 있다.Fungi used to practice the present invention can be obtained from conventional known species and known methods, for example from aerial culture collection or separately from wood or other naturally growing raw materials. While several strains of the strains can be expected depending on factors such as the raw material from which the strain is isolated, the fungi of the present invention are unsterilized South American yellow pine, red pine or loboli pine and also hardwoods such as maple, oak In particular, they showed significant growth in aspen and birch trees and can be expected to grow well in other woods commonly used in cellulosic products. Nevertheless, it is believed that the observed pretreatment effects are usually common for each species rather than strain specificity. Naturally occurring isolates of the fungi of the invention can be modified by several known means of strain selection, mating and mutation without losing their same species properties.

본 발명의 바람직한 천연의 분리물은 하기 상술된 노던 리져날 리서치 센타(NRRL)에 기탁되었지만 이것은 변형될수 있으며, 바람직한 진균 균주가 이런 분리물뿐만아니라 임의의 기탁된 균주의, 살균된 남미산 황송에서의 적어도 피치 분해 및/또는 성장 성질을 실질적으로 갖는 다른 분리물 및 변형물을 포함할 것이다. 본 발명에 사용된 진균은 펄프재 또는 펄프에서 백색 또는 본질적으로 무색으로 성장할 것이다. 이들은 비살균된 기재를 자연적으로 감염시키는 다른 더 어두운 색으로 성장하는 진균보다 대개 또는 완전히 우세하도록 사용될수 있기 때문에, 본 발명의 방법에서 사용된 진균을 최종 종이 제품을 수득하기위해 더 적은 표백을 필요로 하는 우수한 제품을 제조하는데 사용할 것이다.Preferred natural isolates of the present invention have been deposited in the Northern Regional Research Center (NRRL) detailed below, but this can be modified, with preferred fungal strains in sterilized South American Hwangsong, as well as any of the deposited strains. Other isolates and modifications substantially having at least pitch decomposition and / or growth properties. Fungi used in the present invention will grow white or essentially colorless in pulp material or pulp. Since they can be used to predominantly or completely prevail over other darker fungi that naturally infect non-sterile substrates, less bleaching is required to obtain the final paper product from the fungi used in the methods of the present invention. It will be used to make excellent products.

기탁submission

부다페스트 조약에 따라, 미국 일리노이주 페오리아 소재의 노던 리져날 리서치 센타(NRRL)에 10개의 분리물의 생물학적으로 순수한 견본을 기탁했고 이들의 기탁 날짜와 함께 하기 주어진 기탁 번호를 받았다. 모든 견본은 수탁소에서 접수시 시험되고 생존한채로 발견되었고 대중에 의한 견본의 사용가능성에 대한 모든 제한은 본 출원에 대한 특허가 허여되면 비소급적으로 제거될 것이다.In accordance with the Budapest Treaty, biologically pure samples of 10 isolates were deposited in the Northern Regional Research Center (NRRL), Peoria, Illinois, USA and received the deposit numbers given below along with their deposit dates. All specimens were tested and survived upon receipt at the depository and any restrictions on the availability of the specimens by the public will be removed retroactively if the patent for this application is granted.

진균Fungus 기탁 번호Deposit number 기탁 일자Deposit date 시조필룸 코문Sijophilum Komun NRRL 21056NRRL 21056 1993년 3월 16일March 16, 1993 트리찹텀 비포름Trichoptum Nonform NRRL 21055NRRL 21055 1993년 3월 16일March 16, 1993 파네로차에트 기간테아Panerchaet Guettea NRRL 21054(TE1)NRRL 21054 (TE1) 1993년 3월 16일March 16, 1993 NRRL 21467NRRL 21467 1995년 6월 15일June 15, 1995 NRRL 21468NRRL 21468 1995년 6월 15일June 15, 1995 NRRL 21469NRRL 21469 1995년 6월 15일June 15, 1995 NRRL 21470NRRL 21470 1995년 6월 15일June 15, 1995 NRRL 21471NRRL 21471 1995년 6월 15일June 15, 1995 프레비아 트레멜로사 BRI-94Previa Tremelosa BRI-94 NRRL 21200NRRL 21200 1994년 2월 17일February 17, 1994 프레비아 트레멜로사 BRI-118Previa Tremelosa BRI-118 NRRL 20253NRRL 20253 1994년 5월 16일May 16, 1994

상기 프레비아 트레멜로사 기탁물의 균주는 분리물 BRI-94 및 분리물 BRI-118로서 하기에 동정된다.Strains of the previa tremelosa deposits are identified below as isolate BRI-94 and isolate BRI-118.

상기 기탁물을 미국 미네소타주의 쓰러진 목재로부터 천연의 분리물로 수득했고 다른 분리물을 다양한 다른 지역으로부터 수득할수 있었다. 진균 프레비아 트레멜로사를 경질목재로부터 분리했다. 프레비아 트레멜로사로서 본 발명의 진균을 분류한 것은 문헌[Ainsworth & Bisby's dictionary of the Fungi, 7th Edition, 1983 D. L. Hawksworth, B. C. Sutton, & G. C. Ainsworth, Commonwealth Mycological Institute Kew, Surrey UK]에 따른 것이다.The deposits were obtained as natural isolates from the fallen wood in Minnesota, USA and other isolates could be obtained from a variety of different locations. Fungal Previa Tremelosa was isolated from hardwood. The classification of fungi of the invention as previa tremelo is according to Ainsworth & Bisby's dictionary of the Fungi, 7th Edition, 1983 D. L. Hawksworth, B. C. Sutton, & G. C. Ainsworth, Commonwealth Mycological Institute Kew, Surrey UK.

시조필룸 코문 및 트리찹텀 비포르메를 또한 경질목재로부터 분리했고 파네로차에트 기간테아를 적송으로부터 분리했다. 트리찹텀 비포르메는 이전에 또한 폴리포러스 페르가메너스(Popyporous pergamenus) 및 히르시오포러스 파가메너스(Hirschioporous paramenus)로 지칭되었음을 명심해야하고 길버트(Gilbert) 등의 문헌[North American Polypores, Vol. 2, Fungiflore, Oslo, Norway 1987, pages 770-772] 및 오트젠(Otjen) 등의 문헌["Selective Delignification of Birch Wood(Betula papyrifera) byHirschioporus paramenusin the Field and Laboratory", Holzforschung 40(1986) 183-189]을 참조할수 있다. 또한, 파네로차에트 기간테아는 또한 이전에 페니오포라 기간테아(Peniophora gigantea)로 공지되고 버드살 에이치 에이치 쥬니어(Burdsall, H, H., Jr.)의 문헌["A Contribution to the Taxonomy of the Genus Phanerochaete", Mycological Memoir, No. 10, J. Cramer Publishers, Braunschweig,Germany(1985)]를 참조할수 있다.Sijofilum Komun and Trichoptum Biforme were also separated from hardwood and Panerchaet Guetthea was isolated from red pine. It should be borne in mind that Trichoptum Biforme was previously also referred to as Popyporous pergamenus and Hirschioporous paramenus and described by Gilbert et al., North American Polypores, Vol. 2, Fungiflore, Oslo, Norway 1987, pages 770-772 and Otjen et al., "Selective Delignification of Birch Wood ( Betula papyrifera ) by Hirschioporus paramenus in the Field and Laboratory", Holzforschung 40 (1986) 183 -189. In addition, Panerochaet Guitea is also previously known as Peniophora gigantea and described by Budsall H. Junior (Burdsall, H, H., Jr.), "A Contribution to the Taxonomy of the Genus Phanerochaete ", Mycological Memoir, No. 10, J. Cramer Publishers, Braunschweig, Germany (1985).

다음의 실시예는 본 발명의 단지 예시 및 발명의 실시일뿐이고 어떤 면으로도 이를 제한하고자 함이 아니다.The following examples are merely illustrative of the invention and practice of the invention and are not intended to be limiting in any respect.

일반적인 실험 과정: 배양 및 접종General Experiment Process: Culture and Inoculation

피치 감소 및 성장을 측정하기위해 여러 평가를 펄프재에서 한다. 연질목재 특성을 평가하기위해, 살균 및 비살균 남미산 황송 목재 칩을 사용했다. 경질목재 특성의 평가를 위해, 사시나무, 참나무, 자작나무 및 단풍나무를 포함하는 비살균 목재 칩을 사용했다. 목재 칩을 평가전에 5℃에 보관했다. 각각의 평가를 동일한 나무 종의 기재 및 동일한 목재 칩 원료로부터 수득된 목재 칩 샘플에서 수행했다. 각각의 시험에서, 목재 칩의 각각의 샘플 로트를 무게를 잰후 살균할 목재 칩을 121℃의 오토클레이브에서 20분간 가열하고 시험 시작전에 실온으로 냉각시켰다. 비살균 형태였던 목재 칩 샘플을 비처리하고 이들의 자연 조건에서 사용했다. 각각의 샘플 로트를 각각의 투명한 플라스틱 백에 측정된 양의 목재 칩을 위치시킴으로써 제조했다; 백은 밀봉될수 있는(완전히 밀봉되지는 않지만) 충분한 크기였다. 투명한 백의 사용은 칩의 성장을 시각적으로 조사할수 있게하고 추가로 평가되는 목재 칩의 샘플에 주위 광이 들어가게했다.Several evaluations are made on pulp material to measure pitch reduction and growth. To evaluate softwood properties, sterile and non-sterile South American Hwangsong wood chips were used. For the evaluation of hardwood properties, non-sterile wood chips were used, including aspen, oak, birch and maple. Wood chips were stored at 5 ° C. before evaluation. Each evaluation was performed on wood chip samples obtained from the same substrate of wood species and from the same wood chip stock. In each test, each sample lot of wood chips was weighed and the wood chips to be sterilized were heated in an autoclave at 121 ° C. for 20 minutes and cooled to room temperature before the start of the test. Wood chip samples that were in sterile form were untreated and used in their natural conditions. Each sample lot was prepared by placing the measured amount of wood chips in each clear plastic bag; The bag was large enough to be sealed (but not completely sealed). The use of a transparent bag allowed visual inspection of the growth of the chip and allowed ambient light to enter the sample of wood chips for further evaluation.

YNPD 액체 배양 배지를 다음의 성분(양은 제조된 액체 배양 배지의 리터당 그램이다)을 사용하여 제조했다:YNPD liquid culture medium was prepared using the following components (amount is in grams per liter of liquid culture medium prepared):

10 g10 g 글루코스Glucose 10 g10 g 맥아 추출물Malt Extract 2 g2 g 펩톤peptone 2 g2 g 이스트 추출물Yeast extract 2 g2 g KH₂PO₄ KH ₂ PO ₄ 1 g1 g 아스파라긴Asparagine 1 g1 g MgSO₄·7H₂OMgSO _{4 7} H ₂ O

상기를 1 ℓ의 증류수에 순차적으로 첨가하고, 이어서 약 20분동안 121℃ 오토클레이브에서 가열하고 실온으로 냉각시켰다. 이후, 1 mg의 티아민을 다른 성분에 첨가한후 YNPD 배지를 사용할 준비가 된다.It was added sequentially to 1 L of distilled water, then heated in a 121 ° C. autoclave for about 20 minutes and cooled to room temperature. Thereafter, 1 mg of thiamin is added to the other ingredients and the YNPD medium is ready for use.

상기 나타난 것처럼 제조된 YNPD 배양 배지를 사용하여 각각의 진균을 다음의 일반적인 조건하에서 제조했다:Each fungus was prepared under the following general conditions using the YNPD culture medium prepared as indicated above:

(a) 특별한 진균의 샘플을 사용하여 상기 제조된 YNPD 배양 배지를 포함한 살균 페트리 디쉬에 접종하고 디쉬를 닫고;(a) inoculating a sterile Petri dish containing the YNPD culture medium prepared above using a sample of a particular fungus and closing the dish;

(b) 접종된 진균이 균사체 매트의 형태로 YNPD 배양 배지에서 잘 성장한 것(약 5일)이 가시적으로 식별될때까지 접종된 YNPD 배양 배지를 실온(약 20℃)에서 유지시켰고;(b) the inoculated YNPD culture medium was maintained at room temperature (about 20 ° C.) until the inoculated fungi visually identified good growth in the YNPD culture medium in the form of mycelium mat (about 5 days);

(c) 충분한 성장이 관찰된 후, 이어서 페트리 디쉬로부터 손(고무장갑을 낌)으로 균사체 매트를 제거하고, 추가로 제거될 물이 없을때까지 매트를 손으로 짜고 짠 매트를 무게를 재서 "습윤 중량"을 측정했다. 짜거나 또는 탈수된 매트를 깨끗한 연구실 비이커에 넣고 이어서 여기에서 5-10 ml의 증류수를 첨가하여 균질화시켜서 비이커로부터 제거할수 있고 기재를 접종하는데 사용할수 있는 피펫팅 가능한 슬러리를 형성하고;(c) After sufficient growth is observed, the mycelium mat is then removed from the Petri dishes by hand (rubber-clad), and the mat is hand-weaved and weighed the woven mat until there is no water to be removed. Weight "was measured. The squeezed or dehydrated mat is placed in a clean laboratory beaker followed by homogenization by adding 5-10 ml of distilled water to form a pipetable slurry that can be removed from the beaker and used to inoculate the substrate;

(d) 이어서 비이커의 내용물을 눈금이 있는 실린더내로 도입시켜서 피펫팅 가능한 슬러리의 부피를 측정하고 일단 측정하면 내용물을 실험실의 비이커로 옮겨, 샘플의 접종을 위해 이들을 회수했다.(d) The contents of the beaker were then introduced into a graduated cylinder to measure the volume of the pipetting slurry, and once measured, the contents were transferred to a laboratory beaker and recovered for inoculation of the sample.

목재 칩의 샘플의 접종을 각각 100 g의 목재 칩에 대해 습윤 중량 2-5 g의 균사체 매트를 포함하는 피펫의 내용물을 주사함으로써 시행한 후, 백의 개봉 단부를 절첩하고 접종제와 접촉하는 칩의 수를 최대화하기위해 진탕시키고 텀블링시켰다. 백의 절첩된 단부를 두군데에서 고정시켰다. 이어서 모든 접종된 목재 칩 샘플을 각각의 특정한 시험에 나타난 기간동안 실온에서 연구실 벤치탑에 두었다.Inoculation of a sample of wood chips was carried out by injecting the contents of a pipette containing a wet weight of 2-5 g of a mycelium mat to 100 g of wood chips each, followed by folding the opening end of the bag and contacting the inoculant. Shake and tumble to maximize the number. The folded end of the bag was fixed in two places. All inoculated wood chip samples were then placed on the laboratory benchtop at room temperature for the period indicated in each particular test.

각각의 시험을 2 내지 5개의 샘플에서 실행했고; 본원에 보고된 진균의 성장의 보고는 이들 다수 결과의 평균이다.Each test was run on 2-5 samples; The report of growth of fungi as reported herein is the average of these multiple results.

피치 함량 평가:Pitch content rating:

기재의 피치의 평가를 메틸렌 클로라이드(디클로로메탄)인 "DCM"으로 추출된 기재의 그램(g)당 피치 함량의 밀리그램(mg)으로 표현된 결과를 제공하는 표준 TAPPI 과정 T204 OM-88에 따라서 측정했다. 목재 칩과 같은 기재에 사용된 TAPPI 과정에 따라서, 처리된 목재 칩을 60℃에서 밤새 건조시키고 이어서 10-메쉬 스크린(10 게이지 와이어 스크린)을 갖는 토마스-윌리 밀(Thomas-Willey mill)을 사용하여 분쇄하여 톱밥이 되었다. 3 g의 건조된 톱밥을 30 ml의 DCM과 혼합하고 생성된 혼합물을 실온(약 20℃)에서 밤새(약 15시간) 교반한다. 액체 배지를 혼합물로부터 피펫으로 빼내고, 0.45 ㎛의 공극 크기를 갖는 유기 필터를 통해 여과시키고, 이어서 액체를 무게를 잰(미리 무게를 잰) 디쉬에서 밤새 실온에서 증발시킨다. 이어서 디쉬 잔여물을 30분동안 60℃의 공기-순환 오븐에서 가열시켜서 추가로 임의의 잔여 DCM을 제거한 후 디쉬를 실온으로 냉각시키고 다시 무게를 측정하여; 남은 잔여물, 즉 남은 피치의 중량을 측정하여 mg의 단위로 표현하고 기재 목재 칩 샘플의 g당 피치의 mg으로 표현되거나 또는 다르게는 기재 목재 칩에 존재하는 DCM 추출율(%)로 평가하기위해 원래의 샘플량과 비교하며 상기의 결과는 기재중의 피치의 %에 상응한다.Evaluation of the pitch of the substrate is measured according to the standard TAPPI procedure T204 OM-88, which gives the results expressed in milligrams (mg) of pitch content per gram (g) of substrate extracted with methylene chloride (dichloromethane) "DCM". did. According to the TAPPI procedure used for substrates such as wood chips, the treated wood chips were dried overnight at 60 ° C. and subsequently using a Thomas-Willey mill with a 10-mesh screen (10 gauge wire screen). Crushed to sawdust. 3 g of dried sawdust is mixed with 30 ml of DCM and the resulting mixture is stirred at room temperature (about 20 ° C.) overnight (about 15 hours). The liquid medium is pipetted out of the mixture, filtered through an organic filter with a pore size of 0.45 μm, and then the liquid is evaporated overnight at room temperature in a weighed (pre-weighed) dish. The dish residue is then heated in an air-circulating oven at 60 ° C. for 30 minutes to further remove any residual DCM, then the dish is cooled to room temperature and weighed again; The remaining residue, ie the weight of the remaining pitch, is expressed in units of mg and is expressed in mg of the pitch per gram of the base wood chip sample, or alternatively in terms of the percent DCM extraction present in the base wood chip. Compared with the sample amount of, the above result corresponds to the percentage of the pitch in the substrate.

피치 평가를 살균 및 비살균 기재 모두에서 실행할수 있다. 살균된 기재의 평가는 일반적으로 기재를 자연적으로 감염시키는 다른 유기체의 임의의 가능한 영향을 제거할 것이다. 살균된 기재에서의 평가는 일반적으로 특별한 기재의 피치를 감소시키는 진균의 보다 객관적인 측정법으로 생각된다. 그러나, 살균된 기재에서 실행되든 비살균된 기재에서 실행되든, 피치 감소를 일반적으로 시험 기간(비살균된 기재 평가)동안 냉동 상태에서 유지된 살균된(살균된 기재 시험을 위함) 비처리된 대조군에 대해 평가했다. 일반적으로, 접종후 단지 21일후, 바람직하게는 단지 14일후 이런 대조군에 비해 20 % 이상의 피치 감소를 이루는 것이 바람직하다. 피치를 단지 21일후 25 % 감소시키고 특히 이런 감소를 단지 14일후에 이룰때, 특별하게 우수한 결과를 나타낸다.Pitch evaluation can be performed on both sterile and non-sterile substrates. Evaluation of sterile substrates will generally eliminate any possible effect of other organisms that naturally infect the substrate. Evaluation on sterile substrates is generally considered to be a more objective measure of fungi that reduces the pitch of particular substrates. However, whether run on sterile substrates or non-sterile substrates, the pitch reduction is typically a sterile (for sterile substrate testing) untreated control that was kept frozen for the duration of the test (non-sterile substrate evaluation). Rated for In general, it is desirable to achieve a pitch reduction of at least 20% compared to this control only 21 days after inoculation, preferably only 14 days. A particularly good result is when the pitch is reduced by 25% after only 21 days and especially when this decrease is achieved after only 14 days.

성장 평가:Growth rating:

진균의 성장을 성장이 측정된 각각의 여러 시험에서 평가된 각각의 모든 샘플에 대해 가능한한 균일하고 가능한한 거의 동일한 방법으로 평가한다. 일관성있는 기준을 사용하고 각각의 평가 간격(여기서 시험하는 동안 중간 평가를 실행함) 및 각각의 시험의 끝에서 실행하는 프로토콜로 단순한 가시적인 관찰을 사용하여 평가를 한다. 프로토콜은 일반적인 판독 거리에서 육안으로 각각의 개별적인 목재 칩 또는 기재에서 관찰하거나 확인할수 있는 가능한 진균의 성장의 색 범주를 기초로 한다. 기재를 살균할때, 본 발명 후보인 단지 하나의 색 범주를 인식할 것이고 프로토콜은 후보 진균의 가시적인 성장을 나타내는 칩의 수 또는 %를 측정하기위해 모든 목재 칩의 단순한 가시적인 조사를 포함한다. 성장 평가를 비살균 기재에서 실행할때, 본 발명 또는 접종된 진균과 자연적으로 기재를 감염시킨 진균을 구별하기위해 상이한 색 범주를 일반적으로 인식할 것이다. 전형적으로 가장 연한 색인 접종된 후보를 확인할 것이고 이런 성장을 가시적으로 나타내는 목재 칩의 수 또는 %를 계산할 것이다. 하기 보고된 결과를 각각의 시험 경우에 본 발명의 바람직한 진균의 성장을 나타내는 것으로 관찰된 목재 칩의 %로 제시한다. 처리된, 비살균 목재 칩은 흑색 진균과 같은 다른 유기체의 칩의 상이한 영역에서의 성장을 나타낼 것이고, 이런 배경 성장 착색을 유사한 유형으로 분리해서 기록할 것이다. 이런 배경 성장은 접종된 진균을 갖는 다르게는 양성인 성장 결과를 부정하는 것으로 생각되어서는 않되지만 보다 바람직한 진균 후보는 명백하게 이런 배경 성장을 가장 잘 억압하거나 이들보다 우세한 것이다.Fungal growth is assessed in the same way possible and as nearly as possible for each and every sample evaluated in each of the various tests in which growth was measured. Evaluations are made using simple visual observations with consistent criteria and with protocols that run at the end of each test, with each evaluation interval (where intermediate runs are performed during the test). The protocol is based on the color category of possible fungal growth that can be observed or identified on each individual wood chip or substrate with the naked eye at a typical reading distance. When sterilizing the substrate, it will recognize only one color category that is a candidate of the present invention and the protocol includes a simple visual inspection of all wood chips to measure the number or percentage of chips indicative of the visible growth of the candidate fungi. When a growth assessment is performed on a non-sterile substrate, different color categories will generally be recognized to distinguish the present invention or inoculated fungi from fungi that naturally infected the substrate. Typically the lightest indexed candidates will be identified and the number or percentage of wood chips indicative of this growth will be calculated. The results reported below are given in% of wood chips observed to exhibit the desired fungal growth of the present invention in each test case. Treated, non-sterile wood chips will show growth in different areas of the chip of other organisms, such as black fungi, and this background growth coloring will be recorded separately in a similar type. This background growth should not be considered to negate the otherwise positive growth results with the inoculated fungi, but more preferred fungal candidates are obviously the best suppressor or superior to these background growths.

생펄프화 성장 평가Raw pulping growth evaluation

기재의 피치 함량을 표준 TAPPI 과정 T204 OM-88에 따라서 측정하고 DCM(메틸렌 클로라이드)으로 추출된 기재의 g당 피치 함량 mg으로 표현할수 있다.The pitch content of the substrate can be measured according to standard TAPPI procedure T204 OM-88 and expressed in mg of pitch content per gram of substrate extracted with DCM (methylene chloride).

기재의 카파수를 증연후(크래프트 공정에 의한 부분 증연) 목재 칩의 리그닌 함량을 나타내기위해 표준 TAPPI 과정 T236 cm-85에 따라서 측정한다. 크래프트(화학적인) 공정은 활성 알칼리(AA)(NaOH + Na₂S), 및 황화도, Na₂S/(NaOH + Na₂S) 또는 Na₂S/활성 알칼리(AA)가 특징인 증연 화학물로 목재 칩의 가열함을 포함한다.The kappa number of the substrate is measured according to the standard TAPPI procedure T236 cm-85 to indicate the lignin content of the wood chips after addition (partial addition by the craft process). The kraft (chemical) process is a vapor-deposited chemistry characterized by active alkali (AA) (NaOH + Na ₂ S), and sulphide, Na ₂ S / (NaOH + Na ₂ S) or Na ₂ S / active alkali (AA). Heating of wood chips with water.

관례(브룸(Vrooom, K. E.)의 문헌["The H Factor: The Means of Expressing Cooking Times and Temperatures as a Single Variable", Pulp and Paper Magazine of Canada ,58(3):228-231(1957)])에 의하면, H-인자로 공지된 단일 변수로 증연 시간 및 온도를 표현하기위해 100℃에 대해 1의 상대적인 반응 속도를 준다. 상대 반응 속도를 증연 시간(시간)에 대해 플롯할때, 곡선하의 면적이 H-인자로 특징지워진다.Practice (Vrooom, KE, "The H Factor: The Means of Expressing Cooking Times and Temperatures as a Single Variable", Pulp and Paper Magazine of Canada, 58 (3): 228-231 (1957)). , Gives a relative reaction rate of 1 for 100 ° C. to express the steaming time and temperature with a single variable known as the H-factor. When plotting the relative reaction rate against the expansion time (hours), the area under the curve is characterized by the H-factor.

목재 칩과 같은 기재에 사용할때, 처리된 칩을 60℃에서 밤새 건조시키고 이어서 10-메쉬 스크린(10 게이지 와이어 스크린)을 갖는 토마스-윌리 밀을 사용하여 톱밥이 되게 분쇄시킨다. 톱밥을 TAPPI 과정 T 204 OM-88에 기술된 것처럼 DCM 또는 다른 용매로 추출시킨다. 잔여물의 중량을 피치 함량(mg)으로서 측정하고 기재 g당 피치 함량 mg 또는 원래 기재에서 피치의 %(추출율(%))로 표현한다. 접종된 진균이 대조군에 비해 통계적으로 피치 함량의 상당한 감소를 나타낼때 피치 감소가 일반적으로 나타난다. 바람직하게는 피치를 대조군에 비해 10 % 이상, 보다 바람직하게는 15 % 이상 감소시킨다.When used on substrates such as wood chips, the treated chips are dried overnight at 60 ° C. and then ground to sawdust using a Thomas-Willy mill with a 10-mesh screen (10 gauge wire screen). Sawdust is extracted with DCM or other solvent as described in TAPPI Procedure T 204 OM-88. The weight of the residue is measured as pitch content (mg) and expressed as mg pitch content per gram of substrate or as% of pitch (% extraction) in the original substrate. Pitch reduction is generally seen when the inoculated fungi show a statistically significant decrease in pitch content compared to the control. Preferably the pitch is reduced by at least 10%, more preferably at least 15% relative to the control.

실시예 1Example 1

비살균 연질목재(소나무)에서의 피치 제거:Pitch Removal in Non-sterile Softwoods (Pine):

BRI-94 및 BRI-118로 지칭된 프레비아 트레멜로사 진균의 2개의 상이한 분리물을 비살균 남미산 황송에서의 피치 제거에 대한 및 이들의 효율 및 다른 특성을 평가했다. 대조군 샘플을 또한 비교용 인디케이터를 제공하기위해 평가했다. 대조군 샘플은 시험의 기간동안 냉동(-20℃)으로 유지된 비접종된 대조군 샘플 및 실온에서 유지된 수 접종된 주위 대조군 샘플을 포함했다. 주위 온도 대조군을 비살균 목재 칩 샘플에 존재하는 배경 유기체의 피치 감소에 대한 영향의 인디케이터로 사용했고 진균 분리물의 피치 제거를 주위 대조군 이하의 감소율(%)로 측정했다. 모든 평가를 접종후 14일의 성장후 500 g의 비살균 남미산 황송 목재 칩 샘플에서 실행했고 각각의 시험 실행을 3번을 하고 결과를 평균을 냈다. 목재 칩은 나이를 알수 없으나 접종시 20 %의 청색 염색 및 2 %의 황색 염색 배경 성장을 가졌고 다시 숙성된 목재 원료 및 기재를 피치 제거가 어려움을 나타냈다. 비교를 위해 시험은 또한 일반적으로 비살균 남미산 황송에서 잘 성장하는 등록 상표 카타피프(CARTAPIP) 97(클라리언트 코포레이션(Clariant Corp.))으로 시판된 제품의 형태인 진균종 오피오스토마 필리페룸을 포함했다.Two different isolates of the Previa Tremelosa fungi, referred to as BRI-94 and BRI-118, were evaluated for their removal and their efficiency and other properties on unsterile South American yellow pine. Control samples were also evaluated to provide a comparative indicator. Control samples included uninoculated control samples kept frozen (-20 ° C.) for the duration of the test and several inoculated peripheral control samples kept at room temperature. The ambient temperature control was used as an indicator of the effect on the pitch reduction of the background organisms present in the non-sterile wood chip samples and the pitch removal of the fungal isolates was measured at% reduction below the ambient control. All assessments were performed on 500 g of non-sterile South American yellow pine wood chip samples after 14 days of inoculation and each test run was performed three times and the results averaged. The wood chips were of unknown age but had 20% blue staining and 2% yellow staining background growth upon inoculation and showed difficulty in pitch removal of the re-aged wood raw material and substrate. For comparison, the test also includes the fungal species opiostoma Philipperum, which is usually in the form of a product sold under the trademark CARTAPIP 97 (Clariant Corp.), which grows well in non-sterile South American yellow pine. did.

각각의 샘플을 TAPPI 과정 T204 OS-76에 기술된 프로토콜에 따라서 DCM 추출물의 양에 대해 측정했다. 클라슨(Klason) 리그닌의 분석을 선택된 목재 칩 샘플에서 실행하여 샘플 칩의 리그닌의 분해의 인디케이터를 제공하였다; 5개의 주요한 모노사카라이드(글루칸, 만난, 아라비안, 자일란 및 갈락탄)의 정량적인 측정을 목재의 탄화수소 조성을 정의하기위해 절대 기준에서 실행했다. 클라슨 리그닌 분석을 TAPPI T222 om-85의 시험 프로토콜에 따라서 일반적으로 실행했다. 요약하면, TAPPI T222 om-88 프로토콜에 따른 클라슨 리그닌 분석은 다음과 같다; 추출물이 없는 목재의 샘플을 블렌더 또는 밀에서 붕괴시키고; 탄화수소를 황산에 의해 가수분해시키고 용해시키고; 산 불용성 리그닌을 여과해내고, 건조시키고 중량을 잰다.Each sample was measured for the amount of DCM extract according to the protocol described in TAPPI Procedure T204 OS-76. Analysis of Klason lignin was performed on selected wood chip samples to provide an indicator of the degradation of lignin in the sample chips; Quantitative measurements of five major monosaccharides (glucan, mannan, arabian, xylan and galactan) were performed on an absolute basis to define the hydrocarbon composition of wood. Clarson lignin assays were generally performed following the test protocol of TAPPI T222 om-85. In summary, Clarson lignin analysis according to the TAPPI T222 om-88 protocol is as follows; Disintegrating the sample of wood without extract in a blender or wheat; Hydrolyze and dissolve the hydrocarbon with sulfuric acid; The acid insoluble lignin is filtered off, dried and weighed.

추가로, 선택된 목재 칩 샘플에 대한 탄화수소의 분석을 셀룰로스 및 헤미셀룰로스 분해의 범위를 평가하기위해 실행했다. 탄화수소 분석을 일반적으로 TAPPI T249 cm85, 문헌["Carbohydrate composition of extractive-free wood and good pulp by gas-liquid chromatography"]의 시험 프로토콜에 따라서 실행했다. 요약하면, 샘플을 두단계 기술을 사용하여 황산으로 가수분해시킨다; 이어서 가수분해물의 일부를 중화시키고 샘플에 존재하는 당을 나트륨 보로하이드레이트를 이용하여 알디톨로 환원시키고 이어서 무수 아세트산 및 피리딘으로 아세틸화시키고, 이어서 알디톨 아세테이트를 메틸렌 클로라이드에서 용해시키고 이어서 기체 크로마토그래프로의 주입을 위해 사용한다.In addition, analysis of hydrocarbons on selected wood chip samples was performed to evaluate the extent of cellulose and hemicellulose degradation. Hydrocarbon analysis was generally performed according to the test protocol of TAPPI T249 cm85, "Carbohydrate composition of extractive-free wood and good pulp by gas-liquid chromatography". In summary, samples are hydrolyzed to sulfuric acid using a two step technique; Then neutralize a portion of the hydrolyzate and reduce the sugar present in the sample to alditol using sodium borohydrate and then acetylate with acetic anhydride and pyridine, then dissolve the alditol acetate in methylene chloride and then with gas chromatograph Use for injection.

상기 실시예에서 접종물은 BRI-94의 경우에 균질화된 균사체 매트의 2.3 x 10⁶/g의 CFU 계수 및 BRI-118의 경우에 균질화된 균사체 매트의 3.5 x 10⁶/g의 CFU 계수를 나타내는 15 g의 균사체(습윤 중량)를 포함했다.The inoculum in this example shows a CFU coefficient of 2.3 × 10 ⁶ / g of homogenized mycelium mat for BRI-94 and a CFU coefficient of 3.5 × 10 ⁶ / g of homogenized mycelium mat for BRI-118 15 g of mycelium (wet weight) was included.

샘플의 결과를 평가하면, DCM 추출율(%), 피치 감소 및 클라슨 리그닌 %를 표 1에 보고하고, 선택된 샘플의 탄화수소 분석을 모두 하기 표 2에 보고한다.When evaluating the results of the samples, the percent DCM extraction, pitch reduction and% Clarson lignin are reported in Table 1, and all hydrocarbon analyzes of the selected samples are reported in Table 2 below.

DCM 추출율(%) 및 클라슨 리그닌 %DCM extraction rate (%) and Clarson lignin% 진균Fungus DCM 추출율(%)DCM extraction rate (%) 주위 대조군에 대한 % 피치 감소% Pitch reduction for ambient control 클라슨 리그닌 %Clarson Lignin% 비-접종된 냉동 대조군Non-Inoculated Frozen Controls 2.662.66 ------ 29.4 %29.4% 비-접종된 주위 대조군Non-Inoculated Peripheral Control 2.352.35 ------ 29.6 %29.6% 카타피프 97(등록상표)(CARTARPIP)Katafif 97 (registered trademark) (CARTARPIP) 2.112.11 10.2 %10.2% ------ BRI-94BRI-94 1.321.32 44 %44% ------ BRI-118BRI-118 1.521.52 35.3 %35.3% 29.5 %29.5% ^a)칩 500 g당 5 x 10⁸CFU의 양은 오피오스토마 필리페룸에 대한 포자 계수만을기본으로 한 콜로니 형성 단위를 나타낸다(생성물은 포자만을 포함한다). ^a) The amount of 5 x 10 ⁸ CFU per 500 grams of chips represents colony forming units based only on the spore count for opiostoma Filipferum (product contains only spores).

BRI-118 칩에 대한 탄화수소 분석Hydrocarbon Analysis on BRI-118 Chip 샘플Sample 아라비안Arabian 자일란Xylan 만난Met 갈락탄Galactan 글루칸Glucan 주위 대조군Ambient control 1.071.07 5.65.6 11.511.5 2.42.4 40.540.5 BRI-118BRI-118 1.061.06 5.65.6 11.311.3 2.52.5 39.539.5

클라슨 리그닌 시험 결과로부터 나타난 것처럼, 프레비아 트레멜로사인 진균은 본질적으로 소나무 목재 칩 샘플의 리그닌 함량에 감지할수 있는 변화를 미치지 않는다는 것을 발견했다. 그러나, 사시나무 목재 칩에 프레비아 트레멜로사-처리로부터 발생된 크래프트 펄프에서 명확한 효과를 관찰했고 이를 화학적인 펄프화 처리(실시예 4)를 했다.As shown from the results of the Clarson lignin test, it was found that the previa tremelosine fungi essentially did not have a detectable change in the lignin content of pine wood chip samples. However, a clear effect was observed on kraft pulp resulting from previa tremelosa-treatment on aspen wood chips and subjected to chemical pulping treatment (Example 4).

표 2의 결과로부터 나타난 것처럼, 주위 대조군 샘플에 비해 본 발명의 진균으로 처리한 소나무 목재 칩의 샘플에 탄화수소의 양의 감지할수 있는 손실은 없었다. 따라서, 피치 감소 처리의 결과로 셀룰로스 및/또는 헤미셀룰로스의 감소는 나타나지 않았다.As can be seen from the results in Table 2, there was no appreciable loss of the amount of hydrocarbons in the samples of pine wood chips treated with the fungus of the present invention compared to the surrounding control samples. Thus, no decrease in cellulose and / or hemicellulose was seen as a result of the pitch reduction treatment.

실시예 1과 관련되어 실행된 성장 시험에서, 12일후에 조차도 평지의 성장을 탐지하는 것은 어려웠다. 카타피프 97(등록상표)의 경우 쉽게 탐지할수 있는 성장이 본질적으로 나타나지않고 BRI-94는 단지 20 %, 및 BRI-118는 단지 10 % 성장하였다. 상기 현상의 여러 가능한 설명은 칩의 숙성 조건, 무색으로 성장하는 이들 진균의 경향 및/또는 진균에 의한 침투 및 내부 작용을 포함한다.In the growth tests conducted in connection with Example 1, it was difficult to detect the growth of rapeseed even after 12 days. Catafef 97® had essentially no detectable growth and BRI-94 grew only 20%, and BRI-118 grew only 10%. Several possible explanations for this phenomenon include the maturing conditions of the chip, the tendency of these fungi to grow colorless and / or penetrating and internal action by the fungi.

실시예 2Example 2

경질목재(자작나무)에서의 피치 제거:Pitch Removal in Hardwood (Birch):

본 발명과 관련된 기탁된 진균 균주를 사시나무에서 이들의 효율 및 다른 특성에 대해 평가했다. 대조군 샘플을 또한 비교용 인디케이터를 제공하기위해 평가했다. 대조군 샘플은 시험의 기간동안 냉동(-20℃)으로 유지된 비접종된 대조군 샘플 및 실온에서 유지된 비-접종된 주위 대조군 샘플을 포함했다. 주위 온도 대조군을 비살균 목재 칩 샘플에 존재하는 배경 유기체의 피치 감소에 대한 영향의 인디케이터로 사용했다. 모든 평가를 접종후 14일의 성장후 400 g의 비살균 사시나무 목재 칩 샘플에서 실행했고 각각의 시험 실행을 3번을 하고 결과를 평균을 냈다(목재 칩을 접종전에 약 5일동안 숙성시켰다). 비교를 위해 시험은 또한 카타피프 97(등록상표)(클라리언트 코포레이션(Clariant Corp.))으로 처리를 포함했다.The deposited fungal strains associated with the present invention were evaluated for their efficiency and other properties in aspen. Control samples were also evaluated to provide a comparative indicator. Control samples included uninoculated control samples kept frozen (-20 ° C.) for the duration of the test and non-inoculated peripheral control samples kept at room temperature. An ambient temperature control was used as an indicator of the effect on pitch reduction of background organisms present in non-sterile wood chip samples. All evaluations were performed on 400 g non-sterile aspen wood chip samples after 14 days of inoculation growth and each test run was performed three times and averaged (wood chips were aged for about 5 days before inoculation). . For comparison, the test also included treatment with Catafef 97® (Clariant Corp.).

각각의 샘플을 TAPPI 과정 T204 OS-76에 기술된 프로토콜에 따라서 DCM 추출물의 양에 대해 평가했다. 클라슨 리그닌의 분석을 이전처럼 샘플 칩의 리그닌의 분해의 인디케이터를 제공하기위해 선택된 목재 칩 샘플에서 실행했다. 5개의 주요한 모노사카라이드(글루칸, 만난, 아라비안, 자일란 및 갈락탄)의 정량적인 측정을 이전처럼 목재의 탄화수소 조성을 정의하기위해 절대 기본에서 실행했다.Each sample was evaluated for the amount of DCM extract according to the protocol described in TAPPI Procedure T204 OS-76. Clarson lignin analysis was performed on selected wood chip samples to provide an indicator of the degradation of lignin in the sample chip as before. Quantitative measurements of the five major monosaccharides (glucan, mannan, arabian, xylan and galactan) were carried out on an absolute basis to define the hydrocarbon composition of wood as before.

샘플의 결과를 평가하면, DCM 추출율(%) 및 클라슨 리그닌 %를 표 3에 보고하고, 선택된 샘플의 탄화수소 분석을 모두 하기 표 4에 보고한다.When evaluating the results of the samples, the percent DCM extraction and% Clarson Lignin are reported in Table 3, and all of the hydrocarbon analyzes of the selected samples are reported in Table 4 below.

접종량, DCM 추출율(%) 및 클라슨 리그닌 %Inoculation Amount, DCM Extraction Rate, and Clarson Lignin% 진균Fungus 마이셀리아의 습윤 중량/400 g의 목재Mycelia wet weight / 400 g of wood DCM 추출율(%)DCM extraction rate (%) 클라슨 리그닌 %Clarson Lignin% 비-접종된 냉동 대조군Non-Inoculated Frozen Controls 00 1.921.92 ------ 비-접종된 주위 대조군Non-Inoculated Peripheral Control 00 1.611.61 18.018.0 오피오스토마 필리페룸카타피프 97(등록상표)Office of Philippe Room Katape 97 (registered trademark) 4 x 10⁸cfu4 x 10 ⁸ cfu 1.371.37 ------ 시조필룸 코문Sijophilum Komun 21 g21 g 1.331.33 17.917.9 트리찹텀 비포름Trichoptum Nonform 22 g22 g 1.291.29 18.118.1 파네로차에트 기간테아 TE1Panerchaet Guettea TE1 20 g20 g 약 1.30About 1.30 ------ ^a)CFU는 오피오스토마 필리페룸에 대한 포자 계수만을 기본으로 한 콜로니 형성 단위이다(생성물은 포자만을 포함한다). ^a) CFU is a colony forming unit based solely on the spore count for opiostoma Filipferum (the product contains only spores).

탄화수소 분석Hydrocarbon Analysis 샘플Sample 아라비안Arabian 자일란Xylan 만난Met 갈락탄Galactan 글루칸Glucan 주위 대조군Ambient control 0.330.33 18.018.0 1.31.3 0.40.4 45.145.1 트리찹텀 비포름Trichoptum Nonform 0.130.13 17.917.9 1.41.4 0.50.5 43.943.9 시조필룸 코문Sijophilum Komun 0.230.23 18.418.4 1.21.2 0.50.5 45.345.3

클라슨 리그닌 시험 결과로부터 나타날 수 있는 것처럼, 본 발명의 화이트 로트 진균 종은 목재 칩 샘플의 리그닌 함량에 감지할수 있게 영향을 미치는 것으로 보이지 않았다. 그러나, 카타피프 97(등록상표)을 피치의 잠재적인 분해제로 여기기 때문에, 본 발명의 진균종은 샘플의 피치함량의 상당한 감소를 야기한다.As can be seen from the Clarson lignin test results, the white lot fungal species of the present invention did not appear to have a appreciable effect on the lignin content of wood chip samples. However, because catapipe 97® is regarded as a potential disintegrant of pitch, the fungal species of the present invention cause a significant reduction in the pitch content of the sample.

표 4의 결과로부터 나타난 것처럼, 주위 대조군 샘플에 비해 본 진균으로 처리된 사시나무 목재 칩의 샘플에서 탄화수소 양의 인식될만한 감소는 없었다. 따라서 셀룰로스 및/또는 헤미셀룰로스의 감소가 없음은 피치 감소 처리의 결과로 나타난다.As shown from the results in Table 4, there was no appreciable decrease in the amount of hydrocarbons in the samples of Aspen wood chips treated with the present fungi compared to the surrounding control samples. Thus, the absence of a reduction in cellulose and / or hemicellulose results in a pitch reduction treatment.

실시예 3Example 3

약 25 내지 40년된 적송인 피너스 레시노사(pinus resinosa)를 미네소타주 크로퀘트 클로퀘트 포레스트리 센터에서 베었다. 상기 재목을 약 20 cm 길이 및 직경 10 cm의 통나무로 절단하고 백에 넣어서 연구실로 보냈다. 절단후 2 내지 3일에 임의의 비살균된 통나무를 접종했다.Pinus resinosa, a 25- to 40-year-old red pine, was cut at the Croquet Clawquet Forestry Center, Minnesota. The lumber was cut into logs about 20 cm long and 10 cm in diameter and placed in bags and sent to the laboratory. Any unsterilized logs were inoculated 2 to 3 days after cleavage.

연구실에서 사용된 진균은 파네로차에트 기간테아 균주 TE1의 배양물으로 구성되었다. 통나무를 접종하기위해, 진균 매트를 형성하기위해 접종전 14일동안 2 %의 맥아 추출물 브로스의 일반적인 조명이 있는 조건하에서 실온에서 배양물을 성장시켰다. 탈수된 진균 매트를 사용하여 각각의 통나무 단부에 접종했다. 균사체 접종액의 평균 중량을 측정하기위해, 접종에 사용되지않은 매트를 건조시키고 무게를 쟀다. 평균 건조 매트 중량은 매트당 0.101 g +/- 0.009 g이었다.The fungus used in the laboratory consisted of a culture of Panerachate periodate strain TE1. To inoculate logs, the cultures were grown at room temperature under general lighting conditions of 2% malt extract broth for 14 days prior to inoculation to form a fungal mat. A dehydrated fungal mat was used to inoculate each log end. To determine the average weight of mycelial inoculum, mats not used for inoculation were dried and weighed. The average dry mat weight was 0.101 g +/- 0.009 g per mat.

처리는 파네로차에트 기간테아로의 접종 및 비접종된 대조군 통나무를 포함한다. 처리당 총 20개의 통나무를 사용했다. 추가의 통나무를 냉장고에 위치시켜서 비접종된 대조군으로 사용하고 시간 0에서 목재의 특성을 측정했다.Treatments include inoculation with Panerochaet periodtea and uninoculated control logs. A total of 20 logs were used per treatment. An additional log was placed in the refrigerator to use as an uninoculated control and the wood was characterized at time zero.

적송 통나무의 각각의 단부에 하나의 진균 매트를 위치시킴으로써 통나무 단부를 접종했다. 살균 장갑을 사용하여 진균 매트를 접착을 확인하기에 충분히 확실하게 가압하여 통나무의 전체 단부에 골고루 뿌렸다. 두 진균의 동시 접종은 비이커에서 손으로 양 매트를 혼합하고 20초동안 볼텍스하고 이들을 통나무 단부에 위치시키는 것을 포함했다.Log ends were inoculated by placing one fungal mat at each end of the red log. Using sterile gloves, the fungal mat was pressed sufficiently firmly to confirm adhesion and evenly spread over the entire end of the log. Simultaneous inoculation of both fungi involved mixing both mats by hand in a beaker, vortexing for 20 seconds and placing them at the log end.

접종후, 진균은 공기로 채워지고 하나의 습한 수건으로 폐쇄된 채 묶인 투명한 플라스틱 백에 일반적인 조명이 있는 조건하에서 실온에서 저장된 통나무에서 성장시켰다. 가방을 접종후 20일동안 개봉해서 공기 교환을 시키고 과량의 액체를 제거하고 공기로 재충전하고, 폐쇄된 채 묶었다. 통나무의 샘플링 및 분석을 접종후 16, 32 및 64일에 수행했다.After inoculation, the fungi were grown in logs stored at room temperature under normal lighting conditions in a transparent plastic bag filled with air and closed closed with one wet towel. The bags were opened for 20 days after inoculation to exchange air, remove excess liquid, refill with air, and tie closed. Sampling and analysis of logs were performed 16, 32 and 64 days post inoculation.

분석을 피치 함량(추출물에 의함)의 측정 및 시몬스 염색을 위해 실행했다.Analysis was performed for the determination of pitch content (by extract) and for Simmons staining.

분석에 사용된 목재를 박피하고 심재의 중심 칼럼을 제거했다. 백목질을 1인치 x 1 인치의 칩으로 분쇄하고 공기 건조시켰다. 피치 분석의 경우 목재 칩을 분쇄하여 40 메시 스크린을 통과시키고 TAPPI 표준 과정 T204 OM-88을 사용하여 디클로로메탄(DCM)으로 추출시켰다. 결과를 표 5에 나타낸다.The wood used for analysis was peeled off and the core column of the heartwood was removed. Whitewood was ground into chips of 1 inch by 1 inch and air dried. For pitch analysis, the wood chips were ground and passed through a 40 mesh screen and extracted with dichloromethane (DCM) using the TAPPI standard procedure T204 OM-88. The results are shown in Table 5.

시몬스 염색 분석에 사용된 추가의 칩을 0.04 인치로 고정된 기계적인 펄프 정련기를 사용하여 정련했다. 정련기를 통해 한번 통과한 후 수득된 조질의 섬유를 수집하고 시몬스 염색 시약으로 염색시켰다(과정에 대해서는 문헌[TAPPI Journal 75:121-124]을 참조할수 있다). 결과를 표 6에 나타낸다.Additional chips used for Simmons staining analysis were refined using a mechanical pulp refiner fixed at 0.04 inches. The crude fiber obtained after one pass through a refiner was collected and stained with Simmons staining reagent (see TAPPI Journal 75: 121-124 for the procedure). The results are shown in Table 6.

파네로차에트 기간테아에 의해 콜로니를 형성한 접종 처리에서 추출율(%)Extraction rate (%) in inoculation treatment which formed colonies by Panerechate periodtea 접종후 일수Days after vaccination 시간후 추출율(%)% Extraction after time 대조군Control 처리군Treatment group 00 2.62.6 --- 1616 2.12.1 2.52.5 3232 2.42.4 1.51.5 6464 2.62.6 1.31.3

통나무의 접종후 일수Days after inoculation of log 시몬스 염색 반응Simmons staining reaction 00 청색blue 1616 청색 내지 연함Blue to light 3232 중간middle 6464 진보됨Advanced

에너지 절약(문헌[Wood and Fiber Science, Vol. 27]에 따름)은 다음과 같다:Energy savings (according to Wood and Fiber Science, Vol. 27) are as follows:

연함 = 3-18 %Lightness = 3-18%

중간 = 12-22 %Medium = 12-22%

진보됨 = 16-30 %Advanced = 16-30%

실시예 4Example 4

사시나무 목재 통나무를 손으로 박피하고, 분쇄시키고, 체질하고 이어서 균질화시킨다. 3개의 플라스틱 백을 각각 10 ml의 카타피프 97(등록상표)(5 x 10⁶세포/ml), 10 ml의 프레비아 트레멜로사 균주 BRI-118(1 x 10⁶세포/ml) 또는 10 ml의 물로 접종된 475 g의 목재 칩(52-53 %)로 각각 채운다.Aspen wood logs are peeled by hand, ground, sieved and then homogenized. Three plastic bags were each dispensed with 10 ml of Catafipe 97® (5 × 10 ⁶ cells / ml), 10 ml of Previa Tremelosa strain BRI-118 (1 × 10 ⁶ cells / ml) or 10 ml Fill each with 475 g of wood chips (52-53%) inoculated with water.

각각의 처리 샘플을 처리후 1, 2, 3 및 6주에 중복 관찰하고 이후에 처리된 칩의 크래프트 펄프화를 측정하는 동안 통상적인 화학적인 펄프화(액체: 물/비를 약 4:1에 고정시키고(처리를 포함하지않음); 액체 농도는 약 16 %의 활성 알칼리 및 약 25 %의 황화도이고; 칩을 83 내지 190분동안 150 내지 400℃로 증연시키고; H-인자는 800 내지 1400 범위이다. 상기 실시예에서 칩을 1400의 H-인자에서 83 내지 90분동안 170℃까지 증연시킨다)한다.Each treated sample was observed at 1, 2, 3, and 6 weeks post-treatment, and then subjected to conventional chemical pulping (liquid: water / ratio at about 4: 1) while measuring the craft pulping of the treated chips. Fixation (does not include treatment); liquid concentration is about 16% active alkali and about 25% sulphide; chips are steamed at 150 to 400 ° C. for 83 to 190 minutes; H-factor is 800 to 1400 In the above example, the chip is expanded to 170 ° C. for 83-90 minutes in an H-factor of 1400).

펄프 수율, 카파수, 펄프 광도 및 점도에 대한 비교 자료는 각각 하기 표 7 내지 10에 개시된다.Comparative data for pulp yield, kappa number, pulp luminosity and viscosity are set forth in Tables 7-10, respectively.

액체: 목재비를 약 4:1에 고정시키고; 액체 농도는 약 16 %의 활성 알칼리 및 약 25 %의 황화도이고; 칩을 83 내지 190분동안 150 내지 400℃로 증연시키고; H-인자는 800 내지 1400 범위이다. 상기 실시예에서 칩을 1400의 H-인자에서 83 내지 240분동안 100 내지 250℃로 증연한다.Liquid: fix the wood ratio to about 4: 1; The liquid concentration is about 16% active alkali and about 25% sulphide; The chip was expanded to 150-400 ° C. for 83-190 minutes; H-factors range from 800 to 1400. In this embodiment the chip is expanded to 100-250 ° C. for 83-240 minutes in an H-factor of 1400.

펄프 수율 %Pulp yield% 주 수Weeks 00 1One 22 33 66 카타피프 97(등록상표)Katafif 97 (registered trademark) 55.755.7 55.355.3 55.955.9 54.954.9 54.954.9 프레비아 트레멜로사Previa Tremelosa 55.755.7 55.755.7 55.855.8 54.7^* 54.7 ^* 53.753.7 대조군Control 55.755.7 55.455.4 55.255.2 54.854.8 56.056.0 ^*단지 한 번의 측정임. ^* Only one measurement.

카파수Kappasu 주 수Weeks 00 1One 22 33 66 카타피프 97(등록상표)Katafif 97 (registered trademark) 15.515.5 16.516.5 16.116.1 14.514.5 14.814.8 프레비아 트레멜로사Previa Tremelosa 15.515.5 15.615.6 15.315.3 13.213.2 13.813.8 대조군Control 15.415.4 16.016.0 16.016.0 15.215.2 15.115.1

광도(%)magnitude(%) 주 수Weeks 00 1One 22 33 66 카타피프 97(등록상표)Katafif 97 (registered trademark) 32.3732.37 31.2431.24 32.7532.75 32.8932.89 33.733.7 프레비아 트레멜로사Previa Tremelosa 32.3732.37 32.7632.76 33.4633.46 33.7033.70 34.034.0 대조군Control 32.3732.37 31.6231.62 32.2732.27 33.0633.06 32.532.5

점도(mPa s)Viscosity (mPa s) 주 수Weeks 00 1One 22 33 66 카타피프 97(등록상표)Katafif 97 (registered trademark) 48.648.6 45.045.0 46.446.4 47.647.6 43.143.1 프레비아 트레멜로사Previa Tremelosa 48.648.6 44.444.4 46.746.7 45.945.9 42.942.9 대조군Control 48.648.6 44.144.1 47.047.0 46.446.4 44.444.4

상기 주어진 값은 2회 측정의 평균이다.The value given above is the average of two measurements.

결과는 프레비아 트레멜로사로 전처리한후 통상적인 화학적 처리하면 카파수를 명백하게 감소시키고 또한 점도에 수반하는 손실없이 높은 수율 및 광도의 펄프를 제조한다는 것을 나타낸다. 추가로, 관찰된 물성은 하기 표 11 내지 13에 개시된, 개선된 강도의 종이와 일치한다.The results indicate that conventional chemical treatment after pretreatment with Previa Tremelosa results in a markedly reduced kappa number and also produces pulp of high yield and brightness without loss associated with viscosity. In addition, the observed physical properties are consistent with the paper of improved strength, set forth in Tables 11-13 below.

파열 지수(KPam2/g)Burst Index (KPam2 / g) 주 수Weeks 00 1One 22 33 66 카타피프 97(등록상표)Katafif 97 (registered trademark) 2.802.80 2.852.85 2.492.49 2.682.68 2.822.82 프레비아 트레멜로사Previa Tremelosa 2.802.80 2.812.81 2.732.73 2.892.89 2.792.79 대조군Control 2.802.80 2.462.46 2.732.73 2.882.88 2.992.99

인열 지수(4-겹; mNm2/g)Tear index (4-ply; mNm2 / g) 주 수Weeks 00 1One 22 33 66 카타피프 97(등록상표)Katafif 97 (registered trademark) 6.786.78 7.097.09 6.696.69 7.657.65 6.916.91 프레비아 트레멜로사Previa Tremelosa 6.786.78 6.756.75 6.946.94 7.907.90 6.996.99 대조군Control 6.786.78 7.027.02 6.906.90 7.447.44 7.207.20

파단 길이(Km)Breaking length (Km) 주 수Weeks 00 1One 22 33 66 카타피프 97(등록상표)Katafif 97 (registered trademark) 6.196.19 6.806.80 6.266.26 7.047.04 6.656.65 프레비아 트레멜로사Previa Tremelosa 6.196.19 6.146.14 6.506.50 6.536.53 6.786.78 대조군Control 6.196.19 6.196.19 6.486.48 6.236.23 6.846.84

실시예 5Example 5

남미산 황송 통나무를 박피하고 분쇄시킨다. 4개의 플라스틱 백을 각각의 냉동되고 숙성된 대조군에 각각 10 ml의 파네로차에트 기간테아 균주 TE1(1 x 10⁶세포/ml), 10 ml의 프레비아 트레멜로사 균주 BRI-118(1 x 10⁶세포/ml) 또는 10 ml의 물로 접종된 300 g의 목재 칩(o. d.)으로 각각 채운다.Peel and crush the South American larch logs. Four plastic bags were added to each frozen and matured control group with 10 ml of Panerozate periodate strain TE1 (1 × 10 ⁶ cells / ml) and 10 ml of Previa Tremelosa strain BRI-118 (1 ×, respectively). 10 ⁶ cells / ml) or 300 g of wood chips (od) inoculated with 10 ml of water, respectively.

각각의 처리는 14일동안 지속하고 각각의 샘플을 공기 건조시키고, 체를 치고, 균질화시킨후 종래의 화학적 펄프화(액체:물/비를 약 4:1에 고정시키고(처리를 포함하지않음); 액체 강도는 개별적인 실시예에서 약 11, 13, 15 또는 17 %의 활성 알칼리 및 약 25 %의 황화도이고; 칩을 98 내지 135분동안 170℃로 증연시키고; H-인자는 780 내지 830 범위이다)한후 이동안 처리된 칩의 크래프트 펄프화를 중복 측정하였다.Each treatment lasts for 14 days and each sample is air dried, sieved and homogenized before conventional chemical pulping (liquid: water / ratio fixed at about 4: 1 (does not include treatment)). The liquid strength is about 11, 13, 15 or 17% active alkali and about 25% sulfidation in the individual examples; the chips are expanded to 170 ° C. for 98 to 135 minutes; the H-factor is in the range from 780 to 830; After that, the craft pulping of the treated chips was repeated.

DCM 추출율(%) 감소, 펄프 수율(체를 치고 치지 않음), 카파수 및 불합격율(%) 의 비교 자료를 각각 하기의 표 14 내지 18에 개시한다.Comparison data of DCM extraction percentage (%) reduction, pulp yield (without sieve), kappa number and% rejection are set forth in Tables 14-18, respectively.

진균Fungus DCM 추출율(%)DCM extraction rate (%) 비접종된 냉동된 대조군Uninoculated Frozen Controls 5.65.6 비접종된 주위 대조군Uninoculated Peripheral Control 4.44.4 파네로차에트 기간테아 TE1Panerchaet Guettea TE1 3.453.45 프레비아 트레멜로사 BRI-118Previa Tremelosa BRI-118 3.53.5

액체:물/비를 약 4:1에 고정시키고; 액체 농도를 약 11, 13, 15 또는 17 %의 활성 알칼리 및 약 25 %의 황화도에서 고정시키고; 칩을 98 내지 135분동안 170℃로 증연시키고; H-인자는 780 내지 830 범위이다.The liquid: water / ratio was fixed at about 4: 1; The liquid concentration is fixed at about 11, 13, 15 or 17% active alkali and about 25% sulphide; The chip was expanded to 170 ° C. for 98-135 minutes; H-factor ranges from 780 to 830.

샘플Sample 처리process % AA% AA H-인자H-factor 시간(분)Minutes 체질되지않은 수율(%)Unsieved yield (%) 체질된 수율(%)Sieved Yield (%) 불합격%fail% 카파수Kappasu 숙성된 대조군Aged control AA 1111 823823 100100 61.761.7 59.559.5 0.900.90 138.2138.2 숙성된 대조군Aged control BB 1111 789789 110110 60.560.5 58.458.4 0.480.48 127.4127.4 파네로차에트 기간테아TE1Panerochaet Periodea TE1 AA 1111 823823 100100 59.959.9 58.658.6 0.550.55 126.0126.0 프레비아 트레멜로사BRI 118Previa TremelorosaBRI 118 AA 1111 823823 100100 60.160.1 59.859.8 0.790.79 137.9137.9 프레비아 트레멜로사BRI 118Previa TremelorosaBRI 118 BB 1111 789789 110110 58.758.7 57.157.1 0.490.49 118.7118.7

샘플Sample 처리process % AA% AA H-인자H-factor 시간(분)Minutes 체질되지 않은 수율(%)Unsieved yield (%) 체질된 수율(%)Sieved Yield (%) 불합격 %fail % 카파수Kappasu 숙성된 대조군Aged control AA 1313 809809 117117 51.851.8 49.949.9 0.350.35 94.794.7 숙성된 대조군Aged control BB 1313 815815 9898 53.753.7 52.452.4 0.260.26 97.397.3 파네로차에트 기간테아TE1Panerochaet Periodea TE1 AA 1313 809809 117117 52.052.0 50.850.8 0.440.44 84.384.3 파네로차에트 기간테아TE1Panerochaet Periodea TE1 BB 1313 815815 9898 51.751.7 50.250.2 0.370.37 85.785.7 프레비아 트레멜로사BRI 118Previa TremelorosaBRI 118 AA 1313 809809 117117 51.051.0 50.350.3 0.510.51 83.583.5 프레비아 트레멜로사BRI 118Previa TremelorosaBRI 118 BB 1313 815815 9898 51.851.8 50.850.8 0.360.36 89.789.7

샘플Sample 처리process % AA% AA H-인자H-factor 시간(분)Minutes 체질되지 않은 수율(%)Unsieved yield (%) 체질된 수율(%)Sieved Yield (%) 불합격 %fail % 카파수Kappasu 숙성된 대조군Aged control AA 1515 804804 132132 48.748.7 46.846.8 0.210.21 59.159.1 숙성된 대조군Aged control BB 1515 815815 130130 48.448.4 47.247.2 0.160.16 56.156.1 파네로차에트 기간테아 TE1Panerchaet Guettea TE1 AA 1515 804804 132132 46.746.7 46.446.4 0.260.26 50.450.4 프레비아 트레멜로사BRI 118Previa TremelorosaBRI 118 AA 1515 804804 132132 47.047.0 46.346.3 0.190.19 54.154.1 프레비아 트레멜로사BRI 118Previa TremelorosaBRI 118 BB 1515 815815 130130 48.648.6 48.348.3 0.200.20 59.359.3

샘플Sample 처리process % AA% AA H-인자H-factor 시간(분)Minutes 체질되지 않은 수율(%)Unsieved yield (%) 체질된 수율(%)Sieved Yield (%) 불합격 %fail % 카파수Kappasu 숙성된 대조군Aged control AA 1717 787787 117117 45.445.4 44.044.0 0.060.06 41.441.4 숙성된 대조군Aged control BB 1717 822822 135135 44.444.4 43.443.4 0.100.10 34.134.1 파네로차에트 기간테아 TE1Panerchaet Guettea TE1 AA 1717 787787 117117 45.845.8 44.644.6 0.230.23 42.742.7 프레비아 트레멜로사BRI 118Previa TremelorosaBRI 118 AA 1717 787787 117117 46.246.2 45.745.7 0.170.17 44.944.9 프레비아 트레멜로사BRI 118Previa TremelorosaBRI 118 BB 1717 822822 135135 45.445.4 43.943.9 0.120.12 34.834.8

실시예 6Example 6

소나무 목재 통나무(길이 2 및 8 피트)를 각각의 냉동되고 숙성된 대조군에 각각 10 ml의 카타피프 97(등록상표)(5 x 10⁶세포/ml), 10 ml의 파네로차에트 기간테아 균주 BRI-118(1 x 10⁶세포/ml) 또는 10 ml의 물로 20주동안 접종시키고 이후 손으로 박피하고, 분쇄시키고, 체질하고 이어서 균질화시킨다. 각각의 처리 샘플(300 g의 목재 칩, o. d.)을 통상적인 화학적인 펄프화(액체:목재 비를 약 4:1에 고정시키고; 액체 농도는 개별적인 실시예에서 약 14 또는 16 %의 활성 알칼리 및 약 25 %의 황화도이고; 칩을 101 내지 180분동안 증연시키고; H-인자는 약 800이다)을 하는동안 처리된 통나무로부터 제조된 칩을 처리후 10 및 20주에 중복 평가한다.Pine wood logs (2 and 8 feet in length) were added to each frozen and matured control group with 10 ml of Catafipe 97® (5 × 10 ⁶ cells / ml) and 10 ml of Panerozate periodate strain, respectively. Inoculate with BRI-118 (1 × 10 ⁶ cells / ml) or 10 ml of water for 20 weeks and then peel off by hand, crush, sieve and then homogenize. Each treated sample (300 g of wood chips, od) was fixed with a conventional chemical pulping (liquid: wood ratio at about 4: 1; liquid concentration was about 14 or 16% active alkali and Chips made from treated logs during a degree of sulfidation of about 25%; chips are stretched for 101-180 minutes; H-factor is about 800) are assessed in duplicate at 10 and 20 weeks post-treatment.

추출율(%) 감소, 펄프 수율(체를 치고 치지않음), 카파수 및 % 제거의 비교 자료는 각각 하기의 표 21 내지 24에 개시된다. 10 및 20주에서의 DMC 추출물 및 처리후 20주 후의 시몬스 염색은 표 19 내지 20에 나타난다.Comparative data of percent extraction, pulp yield (without sieve), kappa number and percent removal are set forth in Tables 21 to 24, respectively. DMC extracts at 10 and 20 weeks and Simmons staining 20 weeks after treatment are shown in Tables 19-20.

진균Fungus 통나무 길이(ft)Log length (ft) DCM 추출율(%)DCM extraction rate (%) 00 10 주10 Weeks 20 주20 Weeks 비접종된 냉동된 대조군Uninoculated Frozen Controls 22 2.72.7 88 3.53.5 비접종된 숙성된 대조군Uninoculated, Aged Control 22 4.34.3 0.90.9 88 2.02.0 1.41.4 파네로차에트 기간테아Panerchaet Guettea 22 1.41.4 0.70.7 88 1.81.8 1.01.0 카타피프 97(등록상표)Katafif 97 (registered trademark) 22 2.22.2 0.90.9 88

진균Fungus 시몬스 염색 반응Simmons staining reaction 비접종된 냉동된 대조군Uninoculated Frozen Controls 청색blue 비접종된 숙성된 대조군Uninoculated, Aged Control 청색blue 파네로차에트 기간테아Panerchaet Guettea 황색yellow

샘플 IDSample ID 처리process % AA% AA H-인자H-factor 시간(분)Minutes 체질되지 않은 수율(%)Unsieved yield (%) 체질된 수율(%)Sieved Yield (%) 불합격 %fail % 카파수Kappasu 대조군 2'Control 2 ' AA 1111 828828 105105 66.866.8 65.065.0 1.64^* 1.64 ^* 143.2143.2 대조군 2'Control 2 ' BB 1111 816816 101101 66.366.3 64.664.6 0.480.48 132.7132.7 대조군 8'Control 8 ' AA 1111 828828 105105 60.560.5 59.159.1 0.380.38 124.3124.3 대조군 8'Control 8 ' BB 1111 816816 101101 62.062.0 60.360.3 0.320.32 128.6128.6 카타피프 97(등록상표) 2'Katafif 97 (registered trademark) 2 ' AA 1111 828828 105105 66.666.6 64.664.6 0.520.52 140.8140.8 파네로차에트 기간테아 8'Panerochaet Guintea 8 ' AA 1111 828828 105105 60.960.9 59.459.4 0.720.72 123.8123.8 파네로차에트 기간테아 8'Panerochaet Guintea 8 ' BB 1111 816816 101101 59.659.6 57.257.2 0.340.34 123.4123.4 ^*큰 토막은 정련할수 없었다. ^* Large pieces could not be refined.

샘플 IDSample ID 처리process % AA% AA H-인자H-factor 시간(분)Minutes 체질되지 않은 수율(%)Unsieved yield (%) 체질된 수율(%)Sieved Yield (%) 불합격 %fail % 카파수Kappasu 대조군 2'Control 2 ' AA 1313 800800 105105 59.559.5 57.757.7 1.441.44 108.9108.9 대조군 2'Control 2 ' BB 1313 816816 138138 58.058.0 56.356.3 0.350.35 107.3107.3 대조군 8'Control 8 ' AA 1313 800800 105105 55.155.1 53.753.7 0.270.27 81.881.8 대조군 8'Control 8 ' BB 1313 816816 138138 52.952.9 51.351.3 0.310.31 73.073.0 카타피프 97(등록상표) 2'Katafif 97 (registered trademark) 2 ' AA 1313 800800 105105 59.459.4 56.956.9 0.600.60 104.3104.3 카타피프 97(등록상표) 2'Katafif 97 (registered trademark) 2 ' BB 1313 816816 138138 56.556.5 55.255.2 0.170.17 103.0103.0 파네로차에트 기간테아 8'Panerochaet Guintea 8 ' AA 1313 800800 105105 52.152.1 49.949.9 0.230.23 77.977.9 파네로차에트 기간테아 8'Panerochaet Guintea 8 ' BB 1313 816816 138138 52.152.1 50.750.7 0.330.33 69.369.3

샘플 IDSample ID 처리process % AA% AA H-인자H-factor 시간(분)Minutes 체질되지 않은 수율(%)Unsieved yield (%) 체질된 수율(%)Sieved Yield (%) 불합격 %fail % 카파수Kappasu 대조군 2'Control 2 ' AA 1515 825825 120120 43.9^** 43.9 ^** 42.642.6 0.210.21 55.855.8 대조군 2'Control 2 ' BB 1515 813813 116116 52.252.2 51.951.9 0.190.19 67.567.5 대조군 8'Control 8 ' AA 1515 825825 120120 51.651.6 50.050.0 0.150.15 62.762.7 대조군 8'Control 8 ' BB 1515 813813 116116 48.948.9 46.946.9 0.220.22 46.746.7 카타피프 97(등록상표) 2'Katafif 97 (registered trademark) 2 ' AA 1515 825825 120120 55.955.9 52.752.7 0.110.11 72.672.6 카타피프 97(등록상표) 2'Katafif 97 (registered trademark) 2 ' BB 1515 813813 116116 52.052.0 49.949.9 0.150.15 62.062.0 파네로차에트 기간테아 8'Panerochaet Guintea 8 ' AA 1515 825825 120120 49.049.0 48.048.0 0.260.26 52.652.6 파네로차에트 기간테아 8'Panerochaet Guintea 8 ' BB 1515 813813 116116 48.548.5 46.646.6 0.190.19 45.845.8 ^**의심스러운 결과(번외) ^** Suspicious Results (extra)

샘플 IDSample ID 처리process % AA% AA H-인자H-factor 시간(분)Minutes 체질되지 않은 수율(%)Unsieved yield (%) 체질된 수율(%)Sieved Yield (%) 불합격 %fail % 카파수Kappasu 대조군 2'Control 2 ' AA 1717 842842 127127 47.647.6 47.647.6 0.090.09 37.637.6 대조군 2'Control 2 ' BB 1717 850850 180180 46.746.7 44.844.8 0.100.10 39.539.5 대조군 8'Control 8 ' AA 1717 842842 127127 50.850.8 50.850.8 0.300.30 47.947.9 대조군 8'Control 8 ' BB 1717 850850 180180 48.548.5 46.946.9 0.160.16 35.435.4 카타피프 97(등록상표) 2'Katafif 97 (registered trademark) 2 ' AA 1717 842842 127127 49.649.6 49.649.6 0.140.14 44.844.8 파네로차에트 기간테아 8'Panerochaet Guintea 8 ' AA 1717 842842 127127 47.947.9 47.947.9 0.290.29 38.038.0 파네로차에트 기간테아 8'Panerochaet Guintea 8 ' BB 1717 850850 180180 46.046.0 43.543.5 0.060.06 29.929.9

실시예 7Example 7

적송 목재 통나무(길이 8 피트)를 10 ml의 파네로차에트 기간테아 균주 TE1(1 x 10⁶세포/ml) 또는 10 ml의 물로 각각 접종시킨다. 이어서 상기 통나무를 손으로 박피하고, 분쇄시키고, 체질하고, 이어서 균질화시킨다.Red pine logs (8 feet long) are inoculated with 10 ml of Panerochaette periodate strain TE1 (1 × 10 ⁶ cells / ml) or 10 ml of water, respectively. The logs are then peeled by hand, ground, sieved and then homogenized.

처리된 통나무로부터 제조된 칩의 성질을 처리후 16, 32 및 64 일에 중복 측정한다. 그런 다음 64일 처리된 샘플(300 g의 목재 칩, o. d.)을 통상적인 화학적인 펄프화(액체:목재비는 약 4:1에 고정시키고; 액체 농도는 약 14 및 16 %의 활성 알칼리 및 약 25 %의 황화도에 고정시키고; 칩을 90 내지 180분동안 증연시키고; H-인자는 약 800이다)한다.The properties of chips made from treated logs are duplicated at 16, 32 and 64 days after treatment. The 64 days treated sample (300 g of wood chips, od) is then fixed to conventional chemical pulping (liquid: wood ratio at about 4: 1; liquid concentrations at about 14 and 16% active alkali and about Fix to 25% sulphide; add chips for 90-180 minutes; H-factor is about 800).

추출율(%) 감소 및 시몬스 염색의 비교 자료는 각각 하기의 표 25 내지 26에 개시된다.Comparative data of% extraction reduction and Simmons staining are disclosed in Tables 25 to 26, respectively.

샘플Sample DCM 추출율(%)DCM extraction rate (%) 0 일0 days 16 일16 days 32 일32 days 64 일64 days 대조군Control 2.62.6 파네로차에트 기간테아 TE1Panerchaet Guettea TE1 2.52.5 1.51.5 1.31.3

샘플Sample 시몬스 염색 반응Simmons staining reaction 0 일0 days 16 일16 days 32 일32 days 64 일64 days 대조군Control 청색blue 파네로차에트 기간테아 TE1Panerchaet Guettea TE1 청색/연함Blue / light 중간middle 진보됨Advanced

실시예 8Example 8

상기 실시예(실시예 7)의 증연 조건을 파네로차에트 기간테아와 숙성된 대조군을 비교하는 목재 칩(300 g(o.d.))의 3개의 후속적인 화학적 증연기에서 변형시켰다. 제 1 증연기(A)를 16 %의 활성 알칼리에서 고정시키고 190분동안 지속했다(H-인자 = 830). 제 2 증연기(B)를 14 %의 활성 알칼리에서 고정시키고 385℃로 예열하고 128분동안 지속했다(H-인자 = 856). 제 3 증연기(C)를 14 %의 활성 알칼리에서 고정시키고, 385℃로 예열하고, 114분동안 지속했다(H-인자 = 816).The steaming conditions of this example (Example 7) were modified in three subsequent chemical vaporizers of wood chips (300 g (o.d.)) comparing the Panerochaet gintea and the aged control. The first steamer (A) was fixed in 16% active alkali and lasted 190 minutes (H-factor = 830). The second steamer (B) was fixed in 14% active alkali and preheated to 385 ° C. and lasted for 128 minutes (H-factor = 856). The third steamer (C) was fixed in 14% active alkali, preheated to 385 ° C. and continued for 114 minutes (H-factor = 816).

% 수율(체질됨), 불합격 % 및 카파수에 대한 각각의 증연기의 결과를 하기 표 27에 개시한다.The results of each steamer for% yield (sieved),% fail and kappa number are set forth in Table 27 below.

샘플Sample % 체질된 수율% Sieved yield 불합격 %fail % 카파수Kappasu 대조군(A)Control group (A) 45.945.9 00 42.842.8 파네로차에트 기간테아 TE1(A)Panerchaet Guettea TE1 (A) 46.946.9 00 37.637.6 대조군(B)Control group (B) 52.352.3 0.4000.400 87.987.9 파네로차에트 기간테아 TE1(B)Panerochaette Guintea TE1 (B) 52.152.1 0.6000.600 89.389.3 대조군(C)Control group (C) 51.651.6 0.030.03 84.784.7 파네로차에트 기간테아 TE1(C)Panerchaet Guettea TE1 (C) 52.252.2 0.030.03 84.184.1

추가로, 증연기 A에 의해 제조된 펄프에 대한 하기 표 28에 설명된 것처럼, 관찰된 물성은 개선된 강도의 펄프/종이와 일치한다.In addition, the observed physical properties are consistent with the improved strength pulp / paper, as described in Table 28 below for pulp produced by Steam A.

샘플 IDSample ID PFI 밀의회전Rotation of PFI Mill 자유도CSFDegrees of freedomCSF 기저 중량g/m2Basis weight g / m2 겉보기밀도 g/m3Apparent density g / m3 파쇄지수KPam2/gFracture IndexKPam2 / g 인열지수mNm2/gTear index mNm2 / g 인장지수Nm/gTensile Index Nm / g STFIklbf-ft/lbSTFIklbf-ft / lb 숙성된 대조군Aged control 14001400 730730 132.92132.92 0.52750.5275 6.616.61 17.8817.88 69.3069.30 55.855.8 파네로차에트기간테아Panerchaetgige Thetea 14001400 743743 130.91130.91 0.53630.5363 6.666.66 15.9515.95 73.4073.40 77.377.3 숙성된 대조군Aged control 60006000 680680 129.69129.69 0.68810.6881 9.009.00 13.3813.38 94.4294.42 10.5210.52 파네로차에트기간테아Panerchaetgiatea 60006000 677677 130.27130.27 0.61130.6113 8.158.15 14.6214.62 90.4890.48 9.209.20 숙성된 대조군Aged control 90009000 614614 139.27139.27 0.71960.7196 9.579.57 13.5413.54 96.2596.25 10.8910.89 파네로차에트기간테아Panerchaetgiatea 90009000 624624 133.78133.78 0.70890.7089 8.968.96 13.0513.05 90.4890.48 11.1411.14 숙성된 대조군Aged control 1300013000 516516 129.97129.97 0.75250.7525 9.899.89 11.9911.99 98.6998.69 10.8310.83 파네로차에트기간테아Panerchaetgiatea 1300013000 524524 131.66131.66 0.70810.7081 9.379.37 12.4612.46 96.0896.08 10.6510.65

실시예 9Example 9

살균된 소나무 목재 통나무를 10 ml의 파네로차에트 기간테아 균주 TE1(1 x 10⁶세포/ml) 또는 10 ml의 물로 각각 접종시키고, 6일후에 손으로 박피하고, 분쇄시키고, 체질하고, 이어서 균질화시킨다. 300 g(o. d.)의 목재 칩을 통상적인 화학적인 펄프화(액체:목재비를 약 4:1에 고정시키고; 액체 농도를 약 16 %의 활성 알칼리 및 약 25 %의 황화도에 고정시키고; 칩을 83 내지 190분동안 170℃로 증연시키고; H-인자는 약 800이다)을 하고 이동안 처리된 통나무로부터 제조된 칩을 중복 평가한다.Sterilized pine wood logs were inoculated with 10 ml of Panerozate gintea strain TE1 (1 × 10 ⁶ cells / ml) or 10 ml of water, respectively, and after 6 days peeled by hand, crushed, sieved, and then Homogenize. 300 g (od) of wood chips were fixed with conventional chemical pulping (liquid: wood ratio at about 4: 1; liquid concentration at about 16% active alkali and about 25% sulphide; chips Is added at 170 ° C. for 83-190 min; H-factor is about 800) and chips made from the logs treated during this time are duplicated.

추출율(%) 감소, 클라슨 리그닌 %, 탄화수소 분석, 펄프 수율(체를 치고 치지않음), 카파수 및 불합격 %의 비교 자료는 각각 하기의 표 29 내지 31에 개시된다.Comparative data for% extraction reduction, Clarson lignin%, hydrocarbon analysis, pulp yield (without sieve), kappa number and% rejection, respectively, are set forth in Tables 29-31 below.

진균Fungus DCM 추출율(%)DCM extraction rate (%) 클라슨 리그닌 %Clarson Lignin% 비접종된 숙성된 대조군Uninoculated, Aged Control 3.853.85 29.629.6 파네로차에트 기간테아 TE1Panerchaet Guettea TE1 2.102.10 28.428.4

진균Fungus 시몬스 염색 반응Simmons staining reaction 비접종된 숙성된 대조군Uninoculated, Aged Control 청색blue 파네로차에트 기간테아 TE1Panerchaet Guettea TE1 중간middle

샘플Sample 아라비안Arabian 자일란Xylan 만난Met 갈락탄Galactan 글루칸Glucan 숙성된 대조군Aged control 1.21.2 6.16.1 11.111.1 2.52.5 41.841.8 파네로차에트 기간테아 TE1Panerchaet Guettea TE1 1.11.1 5.75.7 10.510.5 2.62.6 42.542.5

실시예 10Example 10

상기 실시예(실시예 9)의 증연 조건을 파네로차에트 기간테아 TE1-처리된 소나무 칩(300 g(o.d.))을 160분동안 지속하는(H-인자 = 790) 후속적인 화학적 펄프화에서 변형시켰다. 활성 알칼리의 여러 값에서 4개의 개별적인 증연기의 결과를 하기 표 32에 제공한다.In the subsequent chemical pulping the steaming conditions of this example (Example 9) were sustained for 160 minutes (H-factor = 790) of the Panerchaette periodtea TE1-treated pine chips (300 g (od)). Modified. The results of four separate steamers at different values of active alkali are provided in Table 32 below.

처리process 1One 22 33 44 % AA% AA 14.014.0 14.514.5 15.015.0 15.515.5 체질된 수율 %Sieved Yield% 45.945.9 44.844.8 43.843.8 41.541.5 불합격 %fail % 0.010.01 0.010.01 0.0030.003 00 카파수Kappasu 73.973.9 64.664.6 58.758.7 44.944.9

실시예 11Example 11

상기 실시예(실시예 10)의 증연 조건을 대조군 및 파네로차에트 기간테아 TE1-처리된 소나무 칩(300 g(o.d.))의 2개의 후속적인 화학적 펄프화에서 다시 변형시켰다. 제 1 증연기(A)를 16 %의 활성 알칼리에서 고정시켰고 115분동안 지속했고(H-인자 ∼ 909)(50분동안의 열전쌍 고장으로 자료가 근사값임), 제 2 증연기(B)를 15.5 %의 활성 알칼리에서 고정시키고 148분동안 지속했다(H-인자 = 846).The expansion conditions of this example (Example 10) were again modified in two subsequent chemical pulpings of the control and Panerchatte periodate TE1-treated pine chips (300 g (o.d.)). The first steamer (A) was fixed in 16% active alkali and lasted for 115 minutes (H-factor 909) (data is approximate due to thermocouple failure for 50 minutes) and the second steamer (B) was Fixed in 15.5% active alkali and lasted for 148 minutes (H-factor = 846).

각각의 결과를 하기 표 33에 제공한다:Each result is provided in Table 33 below:

샘플Sample % 체질된 수율% Sieved yield 불합격 %fail % 카파수Kappasu 대조군(A)Control group (A) 54.254.2 0.0070.007 55.055.0 파네로차에트 기간테아 TE1(B)Panerochaette Guintea TE1 (B) 42.542.5 0.0070.007 46.246.2 대조군(A)Control group (A) 50.150.1 0.0020.002 49.849.8 파네로차에트 기간테아 TE1(B)Panerochaette Guintea TE1 (B) 40.240.2 0.0010.001 50.550.5

실시예 12Example 12

상기 실시예(실시예 11)의 증연 조건을 대조군 및 파네로차에트 기간테아 TE1-처리된 소나무 칩(300 g(o.d.))의 2개의 후속적인 화학적 펄프화에서 다시 변형시켰다. 두 증연기 모두를 15 %의 활성 알칼리에서 고정시켰다. 제 1 증연기(A)를 103분동안 지속했고(H-인자 = 808), 제 2 증연기(B)를 113분동안 지속했다(H-인자 = 823). 각각의 증연기의 결과를 하기 표 34에 제공한다. 추가로, 표 35에 하기 나타난 것처럼, 관찰된 물성은 개선된 강도의 펄프/종이와 일치한다.The expansion conditions of this example (Example 11) were again modified in two subsequent chemical pulpings of the control and Panerchaette periodate TE1-treated pine chips (300 g (o.d.)). Both steamers were fixed in 15% active alkali. The first steamer A lasted 103 minutes (H-factor = 808) and the second steamer B lasted 113 minutes (H-factor = 823). The results of each steamer are provided in Table 34 below. In addition, as shown below in Table 35, the observed physical properties are consistent with the improved strength of pulp / paper.

샘플Sample % 체질된 수율% Sieved yield 불합격 %fail % 카파수Kappasu 대조군(A)Control group (A) 61.061.0 0.0030.003 102.0102.0 파네로차에트 기간테아 TE1(B)Panerochaette Guintea TE1 (B) 52.352.3 0.0010.001 94.794.7 대조군(A)Control group (A) 59.159.1 0.080.08 110.2110.2 파네로차에트 기간테아 TE1(B)Panerochaette Guintea TE1 (B) 50.450.4 0.030.03 98.998.9

샘플 IDSample ID PFI 밀의회전Rotation of PFI Mill 자유도CSFDegrees of freedomCSF 기저 중량g/m2Basis weight g / m2 겉보기밀도 g/m3Apparent density g / m3 파쇄지수KPam2/gFracture IndexKPam2 / g 인열지수mNm2/gTear index mNm2 / g 인장지수Nm/gTensile Index Nm / g STFIklbf-ft/lbSTFIklbf-ft / lb 대조군Control 14001400 764764 129.6129.6 0.38920.3892 3.793.79 19.9819.98 36.6336.63 5.0795.079 파네로차에트기간테아Panerchaetgiatea 14001400 767767 133.0133.0 0.34400.3440 3.523.52 19.8519.85 41.3041.30 4.9764.976 대조군Control 60006000 699699 128.6128.6 0.50330.5033 5.935.93 20.9220.92 62.7262.72 8.0248.024 파네로차에트기간테아Panerchaetgiatea 60006000 713713 134.5134.5 0.49440.4944 5.535.53 20.4620.46 66.3566.35 8.2288.228 대조군Control 90009000 670670 128.7128.7 0.54840.5484 6.636.63 20.0320.03 73.1673.16 9.4639.463 파네로차에트기간테아Panerchaetgiatea 90009000 632632 129.9129.9 0.53720.5372 6.526.52 20.0120.01 73.6173.61 9.2779.277 대조군Control 1300013000 496496 132.6132.6 0.59460.5946 7.267.26 18.8318.83 80.8180.81 10.4710.47 파네로차에트기간테아Panerchaetgiatea 1300013000 513513 131.6131.6 0.58810.5881 7.067.06 18.3518.35 80.4280.42 10.1510.15

실시예 13Example 13

살균 및 비살균 남미산 황송에서의 성장:Growth in sterile and non-sterile South American yellow pine:

목재 칩을 약 5일동안 숙성시키고, 남미산 황송에 진균 성장의 평가를 살균 목재 칩 샘플 및 비살균 목재 칩 샘플 모두에서 실행했다. 각각의 샘플은 상기 기술된 것처럼 제조된 100 g의 목재 칩을 포함했다. 각각의 진균의 접종제를 상기 개시된 것처럼 제조했고 5 g의 균사체 매트(습윤 중량)를 사용하여 상기 개시된 방법으로 100 g의 칩을 접종했다. 이어서 백을 12일동안 실온에서 저장했다. 진균의 성장의 평가를 샘플의 접종후 2, 5 및 12일째에 실행했다. 살균 및 비살균 남미산 소나무에 상기 성장의 결과를 하기 표 36 및 37에 보고한다. 비살균 기재의 결과(표 37)에서는 12일후에 소수의 배경 성장을 몇몇 목재 칩에서 관찰했고 다른 백색 성장 진균의 하부에 배경의 일부가 나타났다.Wood chips were aged for about 5 days and evaluation of fungal growth in South American Hwangsong was performed on both sterile wood chip samples and non-sterile wood chip samples. Each sample contained 100 g of wood chips made as described above. Inoculators of each fungus were prepared as described above and 100 g of chips were inoculated by the method disclosed above using 5 g of mycelium mat (wet weight). The bag was then stored at room temperature for 12 days. Assessment of fungal growth was performed on days 2, 5 and 12 after inoculation of the samples. The results of this growth on sterile and non-sterile South American pines are reported in Tables 36 and 37 below. In the non-sterile substrate results (Table 37), after 12 days a few background growths were observed in some wood chips and some of the background appeared underneath other white growth fungi.

살균된 남미산 황송에서 진균의 성장Fungal Growth in Sterilized South American Yellow Pine 종Bell 2일 성장2-day growth 5일 성장5 days growth 12일 성장12 days growth 시조필룸 코문Sijophilum Komun 100 %100% 100 %100% 100 %100% 트리찹텀 비포름Trichoptum Nonform 100 %100% 100 %100% 100 %100%

비살균된 남미산 황송에서 진균의 성장Fungal Growth in Unsterilized South American Yellow Pine 종Bell 2일 성장2-day growth 5일 성장5 days growth 12일 성장12 days growth 시조필룸 코문Sijophilum Komun 100 %100% 100 %100% 90 %90% 트리찹텀 비포름Trichoptum Nonform 100 %100% 100 %100% 90 %90%

실시예 14Example 14

비살균 경질목재에서의 성장 및 피치 감소Growth and Pitch Reduction in Unsterile Hardwoods

전술된 실시예의 과정을 따라 카타피프 97(등록상표)와 함께, 프레비아 트레멜로사 균주 BRI-118이 접종시 배경 성장을 나타내지 않고 분쇄후 제 1일에 접종된 비살균 혼합된 경질목재 칩의 샘플 500 g의 성장 및 피치 감소에 대해 평가했다. 경질목재 혼합물은 75 %의 단풍나무, 20 %의 황색 자작나무 및 5 %의 참나무를 포함했다. BRI-118 샘플을 8일간 진탕 플라스크 배양으로부터 수득했고 각각의 접종물은 7.1 x 10⁵/매트 g의 예상 CFU 계수를 갖는 3 g의 균사체 매트를 포함했다. 처리 시간은 14일이었다. 성장 결과를 표 38, 피치 감소를 표 39에 보고한다(주위 대조군에 대해 비교함).In accordance with the procedure of the above-described example, the previa tremelosa strain BRI-118, together with catapip 97®, exhibited no background growth at the time of inoculation and was prepared from the non-sterile mixed hardwood chips inoculated on day 1 after grinding. The growth and pitch reduction of 500 g of samples were evaluated. Hardwood mixtures included 75% maple, 20% yellow birch and 5% oak. BRI-118 samples were obtained from shake flask culture for 8 days and each inoculum contained 3 g of mycelium mat with an expected CFU coefficient of 7.1 × 10 ⁵ / mat g. Treatment time was 14 days. The growth results are reported in Table 38 and the pitch reduction in Table 39 (compare for the periphery control).

비살균 혼합된 경질목재에서의 BRI-118의 성장Growth of BRI-118 in Non-sterile Mixed Hardwoods 분리물Isolate 3일 성장3-day growth 14일 성장14 days growth BRI-118BRI-118 50 %50% 90 %90%

비살균 혼합된 경질목재에서의 BRI-118 에 의한 피치 감소Pitch Reduction by BRI-118 in Non-sterile Mixed Hardwoods 분리물Isolate 에탄올/톨루엔 추출율 %Ethanol / Toluene Extraction% 주위 대조군에 대한 감소율 %% Reduction for ambient control 냉동된 대조군Frozen control 4.124.12 ------ 주위 대조군Ambient control 3.553.55 ------ BRI-118BRI-118 2.732.73 23.0 %23.0% 카타피프 97(등록상표)Katafif 97 (registered trademark) 2.922.92 17.7 %17.7%

표 38은 경질 목재에서의 본 발명의 진균의 우수한 감지할수 있는 성장을 나타내고, 표 39는 카타피프 97(등록상표)와 비교시 프레비아 트레멜로사의 우수한 피치 감소를 나타낸다.Table 38 shows a good detectable growth of the fungus of the present invention in hard wood, and Table 39 shows a good pitch reduction of Previa Tremelosa compared to Catafef 97.

실시예 AExample A

액체 진탕 플라스크 배양물에서의 진균의 성장 특성Growth Characteristics of Fungi in Liquid Shake Flask Cultures

프레비아 트레멜로사(BRI-118)을 상기 기술된 것처럼 제조된 500 ml의 YNPD 배지를 사용하여 진탕 플라스크 액체 배양으로 성장시켰다. 배지를 활발하게 성장하는 맥아/이스트 추출물 아가 플레이트로부터의 균사체의 작은 플러그로 접종했다. 플라스크를 11일동안 23 내지 25℃에서 200 rpm으로 진탕했고 각각의 배양물로부터 1 ml의 살균 샘플을 현미경 분석을 위해 수득했다. 배양물은 균사체 볼의 밀집 성장을 나타냈고 배양물 매스는 또한 약 0.5 내지 1.5 %의 분아포자를 포함하는 것을 나타냈다. 상기 생성물을 접종물로 사용하거나 사후 사용을 위해 접종물 형태를 제조하는 여러 방법, 예를 들면, 균질화 및 냉동시켜 가공할수 있다. 본질적으로 배양물의 포자 내용물을 기본으로 하는 접종물을 동결 건조에 의해 또한 제조할수 있었다.Previa Tremelosa (BRI-118) was grown in shake flask liquid culture using 500 ml of YNPD medium prepared as described above. Medium was inoculated with a small plug of mycelium from actively growing malt / yeast extract agar plates. The flask was shaken at 200 rpm at 23-25 ° C. for 11 days and 1 ml of sterile sample was obtained for microscopic analysis from each culture. The culture showed dense growth of mycelial balls and the culture mass was also shown to contain about 0.5-1.5% of spores. The product can be used as an inoculum or processed in various ways to prepare an inoculum form for post use, for example homogenization and freezing. Inoculum, based essentially on the spore contents of the culture, could also be prepared by freeze drying.

시조필룸 코문 및 트리찹텀 비포르메를 각각 증류수에 20 g의 맥아 및 2 g 이스트 추출물을 용해시켜 1 ℓ의 전체 부피가 되게하여 제조된 50 ml의 맥아 추출물/이스트 추출물 배지를 사용하여 진탕 플라스크 액체 배양으로 개별적으로 성장시켰다. 배지를 활발하게 성장하는 맥아/이스트 추출물 아가 플레이트로부터 균사체의 작은 플러그로 접종했다. 플라스크를 5일동안 23 내지 25℃에서 200 rpm으로 진탕했고 각각의 배양물로부터 1 ml의 살균 샘플을 현미경 분석을 위해 수득했다. 두 배양물은 균사체 볼의 밀집 성장을 나타냈고 배양물 매스가 또한 약 40 내지 60 %의 분아포자(트리찹텀 비포르메의 경우 약 40 % 및 시조필룸 코문의 경우 50-60 %)를 포함하는 것을 나타냈다. 두 생성물을 접종물로 사용하거나 사후 사용을 위해 접종물 형태를 제조하는 여러 방법, 예를 들면, 균질화 및 냉동시켜 가공할수 있다. 본질적으로 배양물의 포자 내용물을 기본으로 한 접종물을 동결 건조에 의해 또한 제조할수 있었다.Shake flask liquid using 50 ml malt extract / yeast extract medium prepared by dissolving 20 g malt and 2 g yeast extract in distilled water to a total volume of 1 liter, respectively. Individually grown in culture. Medium was inoculated with a small plug of mycelium from actively growing malt / yeast extract agar plates. The flask was shaken at 200 rpm at 23-25 ° C. for 5 days and 1 ml of sterile sample was obtained for microscopic analysis from each culture. Both cultures showed dense growth of mycelial balls and the culture mass also contained about 40 to 60% of the spores (about 40% for Trichoptum biforme and 50-60% for Sijofilum komun). I did. Both products can be used as inoculum or processed in various ways to prepare the inoculum form for post use, such as homogenization and freezing. Inoculum, based essentially on the spore contents of the culture, could also be prepared by freeze drying.

Claims (23)

목재 또는 펄프재에 진균이 성장하기에 충분한 양의 바시디오마이세트(Basidiomycete) 진균의 접종물을 도포하여, 열의 존재하에서 후속적인 화학적 처리에 의해 상기 목재 또는 펄프재가 보다 효율적으로 증연되도록 상기 목재 또는 펄프재를 전처리하는 단계;The wood or pulp material is coated with an inoculum of Basidiomycete fungi sufficient for the fungus to grow, so that the wood or pulp material is more efficiently expanded by subsequent chemical treatment in the presence of heat. Pretreatment of the pulp material; 접종물이 도포된 목재 또는 펄프재를, 접종물로부터의 진균 성장에 의한 목재 또는 펄프재의 전처리가 이루어지기에 충분한 시간동안 접종물로부터 진균을 성장시키는 조건하에서 유지시키는 단계; 및Maintaining the wood or pulp material coated with the inoculum under conditions for growing fungi from the inoculum for a time sufficient to pretreat the wood or pulp material by fungal growth from the inoculum; And 그후에, 비-전처리된 목재 또는 펄프재보다 더 효율적으로 증연된 목재 또는 펄프재를 수득하기위해 화학적 처리제가 침투하기에 충분한 시간동안 열의 존재하에서 상기 전처리된 목재 또는 펄프재를 화학적으로 처리하는 단계를 포함하는Thereafter, chemically treating the pretreated wood or pulp material in the presence of heat for a time sufficient to infiltrate the chemical treatment agent to obtain a wood or pulp material that is expanded more efficiently than the non-pretreated wood or pulp material. Containing 목재 또는 펄프재의 펄프화 방법.Pulping method of wood or pulp material. 제 1 항에 있어서,The method of claim 1, 펄프재가 정련된 펄프재인 방법.The pulp material is a refined pulp material. 제 2 항에 있어서,The method of claim 2, 정련된 목재가 목재 칩이고, 접종물을 분무에 의해 도포하고, 상기 목재 칩을 분무후 바로 매스(mass)로 축적하는 방법.Refined wood is wood chips, the inoculum is applied by spraying, and the wood chips accumulate to mass immediately after spraying. 제 1 항 내지 제 3 항중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 1 to 3, 접종물을 생물학적으로 순수한 진균 배양물로부터 수득하는 방법.A method of obtaining an inoculum from a biologically pure fungal culture. 제 1 항 내지 제 4 항중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 1 to 4, 진균이 프레비아 트레멜로사(Phlebia Tremellosa), 파네로차에트 기간테아(Phanerochaete gigantea), 시조필룸 코문(Schizophyllum commune) 및 트리찹텀 비포르메(Trichaptum biforme)로 구성된 그룹으로부터 선택되는 방법.How the fungus is pre Via Tre Mello four (Phlebia Tremellosa), selected from the group consisting of a primary Ipanema eth- period Te (Phanerochaete gigantea), progenitor pilrum komun (Schizophyllum commune) and Tree chapteom non-methoxy formate (Trichaptum biforme). 제 2 항에 있어서,The method of claim 2, 박피되거나 비박피된 목재 또는 통나무를 처리하여 이로부터 제조된 목재 칩을 전처리하는 방법.A method of pretreating wood chips made therefrom by treating wood or logs that have been peeled or unpeeled. 제 1 항 내지 제 6 항중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 1 to 6, 접종물이 도포된 목재 또는 펄프재를 접종한지 4 내지 20일의 기간동안 진균 성장 조건하에서 유지시키는 방법.The method is maintained under fungal growth conditions for a period of 4 to 20 days after inoculation of the inoculated wood or pulp material. 제 4 항 내지 제 7 항중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 4 to 7, 펄프재가 연질목재 칩 또는 경질목재 칩, 바람직하게는 자작나무 목재칩의 형태인 방법.The pulp material is in the form of softwood chips or hardwood chips, preferably birch wood chips. 제 1 항 내지 제 8 항중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 1 to 8, 접종물을 목재 또는 펄프재 100 g당 균사체 0.5 내지 10 g의 양으로 도포하는 방법.The inoculum is applied in an amount of 0.5 to 10 g of mycelium per 100 g of wood or pulp material. 제 1 항 내지 제 8 항중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 1 to 8, 접종물을 목재 또는 펄프재 Kg당 10⁵내지 10¹⁰CFU의 양으로 도포하는 방법.The inoculum is applied in an amount of 10 ⁵ to 10 ¹⁰ CFU per kg of wood or pulp material. 제 1 항 내지 제 10 항중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 1 to 10, 진균 성장 조건이 0℃이상의 온도를 포함하는 방법.Fungal growth conditions include a temperature of 0 ° C. or higher. 제 11 항에 있어서,The method of claim 11, 온도가 10 내지 50℃의 범위인 방법.The temperature is in the range of 10 to 50 ° C. 제 1 항 내지 제 12 항중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 1 to 12, 화학적 처리제가 설페이트; 설파이트; 비설파이트; 중성 설파이트; 및 알칼리 용액 및 설페이트로 구성된 그룹으로부터 선택되는 방법.Chemical treating agents are sulfates; Sulfite; Bisulfite; Neutral sulfite; And an alkali solution and sulfate. 제 13 항에 있어서,The method of claim 13, 알칼리 용액이 나트륨 하이드록사이드를 포함하는 방법.Wherein the alkaline solution comprises sodium hydroxide. 제 1 항 내지 제 14 항중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 1 to 14, 화학적 처리를 2 내지 4시간동안 지속하고, 열의 온도가 160 내지 180℃인 방법.The chemical treatment is continued for 2-4 hours and the temperature of heat is 160-180 ° C. 진균이 성장하기에 충분한 양의 바시디오마이세트 진균의 접종물을 목재 또는 펄프재에 도포하여, 열의 존재하에서 상기 목재 또는 펄프재의 화학적 처리에 따른 (a) 사용되는 총 염소량의 감소; (b) 전체 화학적 증연 시간의 감소; 및 (c) 반송되는 비펄프화된 목재 칩의 감소 효과 중 하나이상을 얻는 것을 포함하는Applying an inoculum of bacidiomycete fungus in an amount sufficient for the fungus to grow on wood or pulp material, thereby reducing (a) the total amount of chlorine used following chemical treatment of the wood or pulp material in the presence of heat; (b) reduction in total chemical steaming time; And (c) obtaining at least one of the reducing effects of the non-pulped wood chips being returned. 목재 또는 펄프재의 펄프화 방법.Pulping method of wood or pulp material. 진균이 성장하기에 충분한 양의 바시디오마이세트 진균의 접종물을 목재 또는 펄프재에 도포하여 (a) 사용되는 전기 및/또는 기계 에너지의 전체 소비의 감소; 및 (b) 목재 기재의 다공성의 증가 효과 중 하나이상을 얻는 것을 포함하는Applying an inoculum of bacidiomycete fungus in an amount sufficient for the fungus to grow on wood or pulp material to (a) reduce the overall consumption of electrical and / or mechanical energy used; And (b) obtaining at least one of the effects of increasing the porosity of the wood substrate. 목재 또는 펄프재의 펄프화 방법.Pulping method of wood or pulp material. 제 1 항 내지 제 17 항중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 1 to 17, 접종물을 하나 이상의 성장 지속 보조제와 혼합하는 방법.A method of mixing an inoculum with one or more growth sustaining aids. 제 18 항에 있어서,The method of claim 18, 하나 이상의 성장 지속 보조제가 증산 억제제 및/또는 영양물질을 포함하는 방법.At least one growth sustaining aid comprises a transpiration inhibitor and / or a nutrient. 시조필룸 코문, 트리찹텀 비포르메, 파네로차에트 기간테아 및 프레비아 트레멜로사로 구성된 그룹으로부터 선택된 하나 이상의 진균을 피치 감소 효과량으로 재목 또는 목재의 하나 이상의 단부에 접종시키고; 재목 또는 목재의 피치가 감소되기에 충분한 시간동안 상기 재목 또는 목재상에서 또는 상기내로 진균을 성장시키고 그런 다음 상기와 같이 처리된 재목 또는 목재를 기계적으로 정련함을 포함하는,At least one fungus selected from the group consisting of Sizophilu komun, Trichoptum biforme, Panerchaet Guttea and Previa Tremelosa is inoculated at one or more ends of the timber or wood in a pitch reducing effective amount; Growing fungi on or into the timber or timber for a time sufficient to reduce the pitch of the timber or timber and then mechanically refining the timber or timber treated as above, 재목 또는 목재를 펄프로 기계적으로 정련하는동안 전기 에너지 소비를 감소시키는 방법.A method of reducing electrical energy consumption while mechanically refining lumber or wood into pulp. 제 1 항 내지 제 20 항중 어느 한 항의 방법에서 바시디오마이세트 진균의 용도.Use of a bacidiomycete fungus in the method of any one of claims 1-20. 제 21 항에 있어서,The method of claim 21, 진균이 시조필룸 코문, 트리찹텀 비포르메, 파네로차에트 기간테아 및 프레비아 트레멜로사로 구성된 그룹으로부터 선택된 하나 이상의 진균인 용도.The fungus is one or more fungi selected from the group consisting of Sizophilu komun, Trichoptum Biforme, Panerchaet Guttea and Previa Tremelosa. 제 1 항 내지 제 19 항중 어느 한 항의 방법에 의해 제조된 증연된 목재 또는 펄프재.20. Expanded wood or pulp material produced by the method of any one of claims 1-19.