KR102659689B1 - 유근피로부터 (2R,3R)-에피카테킨-7-O-β-D-아피오퓨라노사이드를 고수율로 추출하는 방법 - Google Patents
유근피로부터 (2R,3R)-에피카테킨-7-O-β-D-아피오퓨라노사이드를 고수율로 추출하는 방법 Download PDFInfo
- Publication number
- KR102659689B1 KR102659689B1 KR1020220094032A KR20220094032A KR102659689B1 KR 102659689 B1 KR102659689 B1 KR 102659689B1 KR 1020220094032 A KR1020220094032 A KR 1020220094032A KR 20220094032 A KR20220094032 A KR 20220094032A KR 102659689 B1 KR102659689 B1 KR 102659689B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- bone
- root bark
- extract
- minutes
- extraction
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 42
- 241001106462 Ulmus Species 0.000 title description 27
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 72
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 64
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 claims abstract description 51
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 37
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 36
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 17
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 81
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 57
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 39
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 23
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 20
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 claims description 13
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 12
- 239000012453 solvate Substances 0.000 claims description 12
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 11
- 208000029725 Metabolic bone disease Diseases 0.000 claims description 6
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 6
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 230000007547 defect Effects 0.000 claims description 6
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims description 5
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 241001300088 Ulmus macrocarpa Species 0.000 claims description 4
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 206010068975 Bone atrophy Diseases 0.000 claims description 3
- 206010065687 Bone loss Diseases 0.000 claims description 3
- 208000017701 Endocrine disease Diseases 0.000 claims description 3
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 claims description 3
- 206010031149 Osteitis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000010191 Osteitis Deformans Diseases 0.000 claims description 3
- 206010031243 Osteogenesis imperfecta Diseases 0.000 claims description 3
- 208000003076 Osteolysis Diseases 0.000 claims description 3
- 206010031264 Osteonecrosis Diseases 0.000 claims description 3
- 206010049088 Osteopenia Diseases 0.000 claims description 3
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000027868 Paget disease Diseases 0.000 claims description 3
- 208000018339 bone inflammation disease Diseases 0.000 claims description 3
- 208000019664 bone resorption disease Diseases 0.000 claims description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 claims description 3
- 208000030172 endocrine system disease Diseases 0.000 claims description 3
- 201000010103 fibrous dysplasia Diseases 0.000 claims description 3
- 208000029791 lytic metastatic bone lesion Diseases 0.000 claims description 3
- 208000027202 mammary Paget disease Diseases 0.000 claims description 3
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 claims description 3
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 claims description 3
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000005368 osteomalacia Diseases 0.000 claims description 3
- 201000001245 periodontitis Diseases 0.000 claims description 3
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000007442 rickets Diseases 0.000 claims description 3
- 208000030136 Marchiafava-Bignami Disease Diseases 0.000 claims 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 claims 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 claims 2
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 claims 1
- 210000002997 osteoclast Anatomy 0.000 abstract description 41
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 abstract description 23
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 14
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 11
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 11
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 abstract description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 38
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 32
- -1 bezene Chemical compound 0.000 description 26
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 17
- 230000036541 health Effects 0.000 description 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 16
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 14
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 14
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 12
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 11
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 10
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 10
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 10
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 9
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 8
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 101710151542 Nuclear factor of activated T-cells, cytoplasmic 1 Proteins 0.000 description 7
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 7
- 229940105922 elm extract Drugs 0.000 description 7
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 7
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 7
- 230000004044 response Effects 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 6
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 6
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 6
- 241000501754 Astronotus ocellatus Species 0.000 description 5
- 102100024940 Cathepsin K Human genes 0.000 description 5
- 102100024230 Dendritic cell-specific transmembrane protein Human genes 0.000 description 5
- 101710190014 Dendritic cell-specific transmembrane protein Proteins 0.000 description 5
- OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N Deuterated methanol Chemical compound [2H]OC([2H])([2H])[2H] OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 101000761509 Homo sapiens Cathepsin K Proteins 0.000 description 5
- 101000992377 Homo sapiens Osteoclast-associated immunoglobulin-like receptor Proteins 0.000 description 5
- 102100034404 Nuclear factor of activated T-cells, cytoplasmic 1 Human genes 0.000 description 5
- 102100032159 Osteoclast-associated immunoglobulin-like receptor Human genes 0.000 description 5
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 5
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 5
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 5
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 5
- 239000000469 ethanolic extract Substances 0.000 description 5
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 5
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 5
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 5
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 4
- 102100028123 Macrophage colony-stimulating factor 1 Human genes 0.000 description 4
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 4
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 4
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 239000011651 chromium Substances 0.000 description 4
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 4
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 4
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 4
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 4
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 4
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 4
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 4
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 4
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 4
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 4
- XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-N phthalic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1C(O)=O XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 4
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 4
- 238000005211 surface analysis Methods 0.000 description 4
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 4
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 4
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 4
- PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N (+)-catechin Chemical compound C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N 0.000 description 3
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 3
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- OISVCGZHLKNMSJ-UHFFFAOYSA-N 2,6-dimethylpyridine Chemical compound CC1=CC=CC(C)=N1 OISVCGZHLKNMSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 3
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000014128 RANK Ligand Human genes 0.000 description 3
- 108010025832 RANK Ligand Proteins 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000949731 Ulmus davidiana Species 0.000 description 3
- 241000417365 Ulmus davidiana var. japonica Species 0.000 description 3
- 241000892564 Ulmus parvifolia Species 0.000 description 3
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 3
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 3
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 3
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 239000007844 bleaching agent Substances 0.000 description 3
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 3
- ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N catechin Natural products OC1Cc2cc(O)cc(O)c2OC1c3ccc(O)c(O)c3 ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000005487 catechin Nutrition 0.000 description 3
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 3
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 3
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 3
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 3
- 229950001002 cianidanol Drugs 0.000 description 3
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 3
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 3
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 3
- 238000013461 design Methods 0.000 description 3
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 238000000132 electrospray ionisation Methods 0.000 description 3
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 3
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 3
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 210000005088 multinucleated cell Anatomy 0.000 description 3
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 3
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 3
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 3
- OSFCFXQMAHURHU-UHFFFAOYSA-N taxifolin-6-C-glucoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1C1=C(O)C=C(OC(C(O)C2=O)C=3C=C(O)C(O)=CC=3)C2=C1O OSFCFXQMAHURHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 3
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 3
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 3
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 3
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 1-prop-2-ynoxypropan-2-ol Chemical compound CC(O)COCC#C GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000013563 Acid Phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 108010051457 Acid Phosphatase Proteins 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- ZKQDCIXGCQPQNV-UHFFFAOYSA-N Calcium hypochlorite Chemical compound [Ca+2].Cl[O-].Cl[O-] ZKQDCIXGCQPQNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 2
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 2
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004606 Fillers/Extenders Substances 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 2
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 description 2
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 2
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 239000000783 alginic acid Chemical class 0.000 description 2
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 2
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 2
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 159000000009 barium salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 2
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 2
- 238000010609 cell counting kit-8 assay Methods 0.000 description 2
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 2
- PAFZNILMFXTMIY-UHFFFAOYSA-N cyclohexylamine Chemical compound NC1CCCCC1 PAFZNILMFXTMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 2
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 2
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 2
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 2
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229940013688 formic acid Drugs 0.000 description 2
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 2
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 2
- 235000011087 fumaric acid Nutrition 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 238000001052 heteronuclear multiple bond coherence spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000000990 heteronuclear single quantum coherence spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 2
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 2
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 2
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 2
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 2
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 2
- LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M monosodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M 0.000 description 2
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 description 2
- 210000001721 multinucleated osteoclast Anatomy 0.000 description 2
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 2
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 2
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 239000006186 oral dosage form Substances 0.000 description 2
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 2
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 2
- LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N pectic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)O[C@H](C(O)=O)[C@@H]1OC1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O2)C(O)=O)O)[C@@H](C(O)=O)O1 LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 2
- 239000010318 polygalacturonic acid Substances 0.000 description 2
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 2
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 2
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 2
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 2
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 2
- 238000010993 response surface methodology Methods 0.000 description 2
- 235000019204 saccharin Nutrition 0.000 description 2
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940081974 saccharin Drugs 0.000 description 2
- 239000000901 saccharin and its Na,K and Ca salt Substances 0.000 description 2
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 2
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 2
- GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L sodium sulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])=O GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- VSIVTUIKYVGDCX-UHFFFAOYSA-M sodium;4-[2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)-3-(4-nitrophenyl)tetrazol-2-ium-5-yl]benzene-1,3-disulfonate Chemical compound [Na+].COC1=CC([N+]([O-])=O)=CC=C1[N+]1=NC(C=2C(=CC(=CC=2)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)=NN1C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 VSIVTUIKYVGDCX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 2
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 2
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 2
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 2
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 2
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 2
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 2
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 2
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N (+/-)-1,3-Butanediol Chemical compound CC(O)CCO PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASNHGEVAWNWCRQ-KLFYCJEISA-N (3R)-4-(hydroxymethyl)oxolane-2,3,4-triol Chemical group OCC1(O)COC(O)[C@@H]1O ASNHGEVAWNWCRQ-KLFYCJEISA-N 0.000 description 1
- DDMOUSALMHHKOS-UHFFFAOYSA-N 1,2-dichloro-1,1,2,2-tetrafluoroethane Chemical compound FC(F)(Cl)C(F)(F)Cl DDMOUSALMHHKOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CHHHXKFHOYLYRE-UHFFFAOYSA-M 2,4-Hexadienoic acid, potassium salt (1:1), (2E,4E)- Chemical compound [K+].CC=CC=CC([O-])=O CHHHXKFHOYLYRE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- XWKFPIODWVPXLX-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-5-methylpyridine Natural products CC1=CC=C(C)N=C1 XWKFPIODWVPXLX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BSKHPKMHTQYZBB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpyridine Chemical compound CC1=CC=CC=N1 BSKHPKMHTQYZBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- 235000006491 Acacia senegal Nutrition 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N Aglycone of yadanzioside D Natural products COC(=O)C12OCC34C(CC5C(=CC(O)C(O)C5(C)C3C(O)C1O)C)OC(=O)C(OC(=O)C)C24 TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 108010011485 Aspartame Proteins 0.000 description 1
- PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N Astrantiagenin E-methylester Natural products CC12CCC(O)C(C)(CO)C1CCC1(C)C2CC=C2C3CC(C)(C)CCC3(C(=O)OC)CCC21C PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 description 1
- 208000006386 Bone Resorption Diseases 0.000 description 1
- 208000020084 Bone disease Diseases 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- PTHCMJGKKRQCBF-UHFFFAOYSA-N Cellulose, microcrystalline Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 PTHCMJGKKRQCBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 241000938605 Crocodylia Species 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- ASNHGEVAWNWCRQ-LJJLCWGRSA-N D-apiofuranose Chemical compound OC[C@@]1(O)COC(O)[C@@H]1O ASNHGEVAWNWCRQ-LJJLCWGRSA-N 0.000 description 1
- ASNHGEVAWNWCRQ-UHFFFAOYSA-N D-apiofuranose Natural products OCC1(O)COC(O)C1O ASNHGEVAWNWCRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010012335 Dependence Diseases 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N Dicyclohexylamine Chemical compound C1CCCCC1NC1CCCCC1 XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GGLIEWRLXDLBBF-UHFFFAOYSA-N Dulcin Chemical compound CCOC1=CC=C(NC(N)=O)C=C1 GGLIEWRLXDLBBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004278 EU approved seasoning Substances 0.000 description 1
- 239000001856 Ethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N Ethyl cellulose Chemical compound CCOCC1OC(OC)C(OCC)C(OCC)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OEIJRRGCTVHYTH-UHFFFAOYSA-N Favan-3-ol Chemical compound OC1CC2=CC=CC=C2OC1C1=CC=CC=C1 OEIJRRGCTVHYTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 206010017076 Fracture Diseases 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- 208000007882 Gastritis Diseases 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 244000147568 Laurus nobilis Species 0.000 description 1
- 235000017858 Laurus nobilis Nutrition 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229920000715 Mucilage Polymers 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- 208000004210 Pressure Ulcer Diseases 0.000 description 1
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004288 Sodium dehydroacetate Substances 0.000 description 1
- 239000005708 Sodium hypochlorite Substances 0.000 description 1
- 244000228451 Stevia rebaudiana Species 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 235000005212 Terminalia tomentosa Nutrition 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- 235000009470 Theobroma cacao Nutrition 0.000 description 1
- 208000026062 Tissue disease Diseases 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000218220 Ulmaceae Species 0.000 description 1
- 241000051616 Ulmus minor Species 0.000 description 1
- 241001473768 Ulmus rubra Species 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N acetic acid trimethyl ester Natural products COC(C)=O KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 235000013334 alcoholic beverage Nutrition 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 1
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000006053 animal diet Substances 0.000 description 1
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021405 artificial diet Nutrition 0.000 description 1
- 239000000605 aspartame Substances 0.000 description 1
- 235000010357 aspartame Nutrition 0.000 description 1
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 229960003438 aspartame Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 1
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 1
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940092714 benzenesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 210000004979 bone marrow derived macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000024279 bone resorption Effects 0.000 description 1
- 235000008429 bread Nutrition 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N butylated hydroxyanisole Chemical compound COC1=CC=C(O)C(C(C)(C)C)=C1.COC1=CC=C(O)C=C1C(C)(C)C CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000378 calcium silicate Substances 0.000 description 1
- 229910052918 calcium silicate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012241 calcium silicate Nutrition 0.000 description 1
- OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N calcium;dioxido(oxo)silane Chemical compound [Ca+2].[O-][Si]([O-])=O OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960004424 carbon dioxide Drugs 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 238000003570 cell viability assay Methods 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 150000001793 charged compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 235000019219 chocolate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 239000007799 cork Substances 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 229940097362 cyclodextrins Drugs 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 239000000645 desinfectant Substances 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- UMNKXPULIDJLSU-UHFFFAOYSA-N dichlorofluoromethane Chemical compound FC(Cl)Cl UMNKXPULIDJLSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940099364 dichlorofluoromethane Drugs 0.000 description 1
- 229940087091 dichlorotetrafluoroethane Drugs 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N diethanolamine Chemical compound OCCNCCO ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019621 digestibility Nutrition 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000008482 dysregulation Effects 0.000 description 1
- 230000007937 eating Effects 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 235000019325 ethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001249 ethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 238000010812 external standard method Methods 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 229930182497 flavan-3-ol Natural products 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 238000007667 floating Methods 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 229940014144 folate Drugs 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 235000010855 food raising agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000011194 food seasoning agent Nutrition 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 239000004519 grease Substances 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 230000008821 health effect Effects 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 238000003919 heteronuclear multiple bond coherence Methods 0.000 description 1
- 238000001511 high performance liquid chromatography nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N homoegonol Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC=C1C1=CC2=CC(CCCO)=CC(OC)=C2O1 PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 description 1
- 239000003978 infusion fluid Substances 0.000 description 1
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 1
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000395 magnesium oxide Substances 0.000 description 1
- CPLXHLVBOLITMK-UHFFFAOYSA-N magnesium oxide Inorganic materials [Mg]=O CPLXHLVBOLITMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AXZKOIWUVFPNLO-UHFFFAOYSA-N magnesium;oxygen(2-) Chemical compound [O-2].[Mg+2] AXZKOIWUVFPNLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N maltitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N 0.000 description 1
- 239000000845 maltitol Substances 0.000 description 1
- 235000010449 maltitol Nutrition 0.000 description 1
- 229940035436 maltitol Drugs 0.000 description 1
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 description 1
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000004223 monosodium glutamate Substances 0.000 description 1
- ACTNHJDHMQSOGL-UHFFFAOYSA-N n',n'-dibenzylethane-1,2-diamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1CN(CCN)CC1=CC=CC=C1 ACTNHJDHMQSOGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- 235000021096 natural sweeteners Nutrition 0.000 description 1
- 239000012454 non-polar solvent Substances 0.000 description 1
- 235000012149 noodles Nutrition 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 235000014593 oils and fats Nutrition 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940021222 peritoneal dialysis isotonic solution Drugs 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 235000013550 pizza Nutrition 0.000 description 1
- 238000004161 plant tissue culture Methods 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940086065 potassium hydrogentartrate Drugs 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000004302 potassium sorbate Substances 0.000 description 1
- 235000010241 potassium sorbate Nutrition 0.000 description 1
- 229940069338 potassium sorbate Drugs 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 1
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 1
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N rebaudioside A Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000000611 regression analysis Methods 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 1
- 235000013580 sausages Nutrition 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 239000011669 selenium Substances 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 108010027322 single cell proteins Proteins 0.000 description 1
- 201000009890 sinusitis Diseases 0.000 description 1
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000011888 snacks Nutrition 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- WXMKPNITSTVMEF-UHFFFAOYSA-M sodium benzoate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 WXMKPNITSTVMEF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004299 sodium benzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010234 sodium benzoate Nutrition 0.000 description 1
- 229960003885 sodium benzoate Drugs 0.000 description 1
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000019259 sodium dehydroacetate Nutrition 0.000 description 1
- 229940079839 sodium dehydroacetate Drugs 0.000 description 1
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010265 sodium sulphite Nutrition 0.000 description 1
- DSOWAKKSGYUMTF-GZOLSCHFSA-M sodium;(1e)-1-(6-methyl-2,4-dioxopyran-3-ylidene)ethanolate Chemical compound [Na+].C\C([O-])=C1/C(=O)OC(C)=CC1=O DSOWAKKSGYUMTF-GZOLSCHFSA-M 0.000 description 1
- 238000000935 solvent evaporation Methods 0.000 description 1
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 1
- 235000014347 soups Nutrition 0.000 description 1
- 235000013599 spices Nutrition 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000010421 standard material Substances 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000007940 sugar coated tablet Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 235000018553 tannin Nutrition 0.000 description 1
- 229920001864 tannin Polymers 0.000 description 1
- 239000001648 tannin Substances 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- JBQYATWDVHIOAR-UHFFFAOYSA-N tellanylidenegermanium Chemical compound [Te]=[Ge] JBQYATWDVHIOAR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000892 thaumatin Substances 0.000 description 1
- 235000010436 thaumatin Nutrition 0.000 description 1
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- CYRMSUTZVYGINF-UHFFFAOYSA-N trichlorofluoromethane Chemical compound FC(Cl)(Cl)Cl CYRMSUTZVYGINF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940029284 trichlorofluoromethane Drugs 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N vanillin Chemical compound COC1=CC(C=O)=CC=C1O MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012141 vanillin Nutrition 0.000 description 1
- FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N vanillin Natural products COC1=CC(O)=CC(C=O)=C1 FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 1
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 1
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 1
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 229940046001 vitamin b complex Drugs 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000012431 wafers Nutrition 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- 229940100445 wheat starch Drugs 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H17/04—Heterocyclic radicals containing only oxygen as ring hetero atoms
- C07H17/06—Benzopyran radicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
- C07H1/06—Separation; Purification
- C07H1/08—Separation; Purification from natural products
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Botany (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
본 발명은 유근피로부터 (2R,3R)-에피카테킨-7-O-β-D-아피오퓨라노사이드를 고수율로 추출하는 방법 및 상기 방법으로 추출한 화합물의 골 관련 질환 치료, 개선 및 예방 용도에 관한 것이다.
일 양상에 따르면, 본 발명의 E7A 제조방법 및 유근피 추출물 제조방법을 이용하면 파골세포 분화 억제능이 우수한 유효물질을 효과적으로 분리/수득할 수 있음을 확인하였는 바, 상기 방법을 이용하여 골 관련 질환의 치료 또는 예방용 조성물을 효율적으로 제조할 수 있다.
일 양상에 따르면, 본 발명의 E7A 제조방법 및 유근피 추출물 제조방법을 이용하면 파골세포 분화 억제능이 우수한 유효물질을 효과적으로 분리/수득할 수 있음을 확인하였는 바, 상기 방법을 이용하여 골 관련 질환의 치료 또는 예방용 조성물을 효율적으로 제조할 수 있다.
Description
본 발명은 유근피로부터 (2R,3R)-에피카테킨-7-O-β-D-아피오퓨라노사이드를 고수율로 추출하는 방법 및 상기 방법으로 추출한 화합물의 골 관련 질환 치료, 개선 및 예방 용도에 관한 것이다.
식품의약품안전처의 조사에 따르면 국내의 고령화 속도는 2010년 10.5%에서 2019년 14.9%로 가파른 증가현상을 보임과 동시에 이러한 고령화의 영향과 맞물려 건강기능 식품 시장 또한 2010년(17,875억원) 대비 2019년(37,257억원)로 증가하는 경향을 보이고 있다. 또한, 통계청 인구 분석에 따르면 현재 65세 이상 노인의 비율이 전체 인구 중 13.5%를 차지하고 있어 고령화 사회에 해당되며, 2040년에는 전체 인구의 32.3%로 예상되어 초고령화 사회(65세 이상 인구 20% 이상)가 될 것으로 예상된다. 이러한 사회 배경과 동향을 바탕으로 앞으로의 뼈/관절 기능성 시장은 지속적으로 확대될 것으로 추정된다.
유근피는 일반적으로 느릅나무속 식물의 뿌리 껍질을 지칭하고 민간에서는 물에 닿게 되면 코처럼 진액이 나온다 하여 코나무로도 불리고 있으며, 축농증, 위염, 위암과 욕창 등에 사용해 오고 있다. 유근피는 원물자체가 같은 느릅나무 속의 식물들을 구분하기 어려워 식품공전 및 대한민국 약전 외 한약(생약)규격집에서 규정한 왕느릅나무가 아닌 일반 느릅나무로 유통 및 연구가 진행되어 연구분야에서 조차 혼란을 야기하고 있다.
이러한 배경 하에, 유근피 추출물로부터 유효한 단일 화합물을 효율적으로 분리하는 공정을 개발하였으며, 상기 공정을 토대로 제조한 유근피 추출물 및 단일 화합물의 우수한 효능을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
일 양상은 1) 유근피 및 추출 용매를 이용하여 열수 추출을 수행하는 단계; 및 2) 상기 열수 추출물 또는 이의 분획물로부터 E7A [(2R,3R)-epicatechin-7-O-beta-D-apiofuranoside], 이의 입체이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물, 또는 이의 용매화물을 분리하는 단계를 포함하는, E7A 제조 방법으로서, 상기 추출 용매의 pH는 4 내지 6인 것인, 방법을 제공한다.
다른 양상은 유근피 및 추출 용매를 이용하여 열수 추출을 수행하는 단계를 포함하는, 유근피 추출물 제조 방법으로서, 상기 추출 용매의 pH는 4 내지 6인 것인, 방법을 제공한다.
또 다른 양상은 E7A [(2R,3R)-epicatechin-7-O-beta-D-apiofuranoside], 이의 입체이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물, 또는 이의 용매화물을 유효성분으로 포함하는, 골 관련 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
또 다른 양상은 유근피 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는, 골 관련 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물로서, 상기 유근피 추출물은 상기 방법을 이용하여 수득된 것인, 조성물을 제공한다.
일 양상은 1) 유근피 및 추출 용매를 이용하여 열수 추출을 수행하는 단계; 및 2) 상기 열수 추출물 또는 이의 분획물로부터 E7A [(2R,3R)-epicatechin-7-O-beta-D-apiofuranoside], 이의 입체이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물, 또는 이의 용매화물을 분리하는 단계를 포함하는, E7A 제조 방법으로서, 상기 추출 용매의 pH는 4 내지 6인 것인, 방법을 제공하는 것이다.
본 명세서에서의 용어 "유근피"는 느릅나무과(Ulmaceae)에 속하는 느릅나무의 코르크층을 벗긴 수피 또는 근피를 의미한다. 일반적으로 뿌리껍질을 사용하고 있지만 줄기 껍질의 경우에도 동일한 성분을 가지고 있는 것으로 알려져 있으며, 플라보노이드, 사포닌, 탄닌 및 점액질을 함유하고 있는 것으로 알려져 있다.
상기 유근피는 참느릅나무(Ulmus parvifolia Jacq), 당느릎나무(Ulmus davidiana Planchon), 느릅나무(Ulmus davidiana var. japonica (Rehder) Nakai) 및/또는 왕느릅나무 (Ulmus macrocarpa Hance)의 껍질(수피 또는 근피)을 의미하는 것일 수 있으며, 구체적으로, 왕느릅나무의 껍질(수피 또는 근피)을 의미하는 것일 수 있다.
상기 유근피는 해당 식물의 천연, 잡종 또는 변종 식물로부터 수득된 것일 수 있으며, 식물 조직 배양물로부터 수득된 것일 수 있다. 구체적으로, 상기 유근피는 건조된 원물일 수 있다.
상기 추출 용매는 물; 메탄올(methanol), 에탄올(ethanol), 프로판올(propanol), 뷰탄올(buthanol) 등의 C1 내지 C4의 저급 알코올; 글리세린 (glycerine), 부틸렌글리콜 (butylene glycol), 프로필렌글리콜 (propylene glycol) 등의 다가 알코올; 및 메틸아세테이트(methyl acetate), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 아세톤(acetone), 벤젠(bezene), 헥산(hexane), 디에틸에테르(diethyl ether), 디클로로메탄(dichloromethane) 등의 탄화수소계 용매로 구성된 군에서 선택된 하나 이상일 수 있으며, 구체적으로, 상기 추출 용매는 물 및/또는 에탄올을 포함하는 것일 수 있으며, 보다 구체적으로 상기 추출 용매는 물(증류수, 정제수 등)일 수 있다.
본 명세서에서의 용어 "열수 추출"은 용매와 용질을 혼합하여 용액을 만든 후, 직접 가열방식으로 가열, 교반하여 유효성분을 추출하는 방법을 의미한다. 또한, 열수 추출의 경우 실온 이상의 온도에서 추출하는 조건은 모두 열수 추출로 볼 수 있다.
상기 방법에서 열수 추출을 수행하는 단계는 유근피 및 추출 용매를 혼합하여 용액을 만든 후 실온 이상의 반응 조건에서 유효성분을 추출하는 것일 수 있다.
본 명세서에서의 용어 "추출물"은 목적하는 물질을 다양한 용매에 침지한 다음, 상온 또는 가온상태에서 일정시간 동안 추출하여 수득한 액상성분, 상기 액상성분으로부터 용매를 제거하여 수득한 고형분 등의 결과물을 의미할 수 있다. 뿐만 아니라, 상기 결과물에 더하여, 상기 결과물의 희석액, 이들의 농축액, 이들의 조정제물, 정제물 또는 이들의 혼합물 등 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함하는 것으로 포괄적으로 해석될 수 있다.
본 명세서에서의 용어 "분획물"은 여러 다양한 구성 성분들을 포함하는 혼합물로부터 특정 성분 또는 특정 성분 그룹을 분리하기 위하여 분획을 수행하여 얻어진 결과물을 의미한다.
상기 분획물을 얻는 분획 방법은 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 수행될 수 있다. 상기 분획 방법의 비제한적인 예로는, 다양한 용매를 처리하여 수행하는 분획법, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 통과시켜 수행하는 한외여과 분획법, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)를 수행하는 크로마토그래피 분획법, 및 이들의 조합 등이 있다.
상기 분획물을 얻는 데 사용되는 분획 용매의 종류는 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 분획 용매의 비제한적인 예로는 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 등의 극성 용매; 헥산(Hexane), 에틸 아세테이트(Ethyl acetate), 클로로포름(Chloroform), 디클로로메탄(Dichloromethane) 등의 비극성 용매; 또는 이들의 혼합용매 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 1종 이상 혼합하여 사용될 수 있지만, 이에 제한되는 것은 아니다.
일 구체예에 따르면, 상기 분획물은 유근피 물 추출물(열수 추출물)을 탄소수 1 내지 4의 알코올로 분획한 것일 수 있으며, 구체적으로 뷰탄올로 분획한 것일 수 있다.
상기 "E7A [(2R,3R)-epicatechin-7-O-beta-D-apiofuranoside]"는 하기 화학식 1로 표현되는 것일 수 있다.
[화학식 1]
본 명세서에서의 용어 "약학적으로 허용가능한 염"이란, 양이온과 음이온이 정전기적 인력에 의해 결합하고 있는 물질인 염 중에서도 약제학적으로 사용될 수 있는 형태의 염을 의미하는데, 통상적으로 금속염, 유기 염기와의 염, 무기산과의 염, 유기산과의 염, 염기성 또는 산성 아미노산과의 염 등이 될 수 있다. 예를 들어, 금속염으로는 알칼리 금속염(나트륨염, 칼륨염 등), 알칼리 토금속염(칼슘염, 마그네슘염, 바륨염 등), 알루미늄염 등이 될 수 있고; 유기 염기와의 염으로는 트리에틸아민, 피리딘, 피콜린, 2,6-루티딘, 에탄올아민, 디에탄올아민, 트리에탄올아민, 시클로헥실아민, 디시클로헥실아민, N,N-디벤질에틸렌디아민 등과의 염이 될 수 있으며; 무기산과의 염으로는 염산, 브롬화수소산, 질산, 황산, 인산 등과의 염이 될 수 있고; 유기산과의 염으로는 포름산, 아세트산, 트리플루오로아세트산, 프탈산, 푸마르산, 옥살산, 타르타르산, 말레인산, 시트르산, 숙신산, 메탄술폰산, 벤젠술폰산, p-톨루엔술폰산 등과의 염이 될 수 있으며; 염기성 아미노산과의 염으로는 아르기닌, 라이신, 오르니틴 등과의 염이 될 수 있고; 산성 아미노산과의 염으로는 아스파르트산, 글루탐산 등과의 염이 될 수 있다. 특히 바람직한 염으로는, 화합물이 그 내에 산성관능기를 가지는 경우, 알칼리 금속염 (예컨대, 나트륨염, 칼륨염 등), 알칼리 토금속염 (예컨대, 칼슘염, 마그네슘염, 바륨염 등) 등과 같은 무기염, 및 암모늄염과 같은 유기 염이 있으며, 화합물이 그 내에 염기성 관능기를 가지는 경우, 염산, 브롬화수소산, 질산, 황산, 인산 등과 같은 무기산과의 염, 아세트산, 프탈산, 푸마르산, 옥살산, 타르타르산, 말레인산, 시트르산, 숙신산, 메탄술폰산, p-톨루엔술폰산 등과 같은 유기산과의 염이 있다.
상기 추출 용매의 pH는 4 내지 6일 수 있으며, 구체적으로 4.0 내지 6.0, 4.0 내지 5.8, 4.0 내지 5.6, 4.0 내지 5.4, 4.0 내지 5.2, 4.0 내지 5.0, 4.2 내지 6.0, 4.2 내지 5.8, 4.2 내지 5.6, 4.2 내지 5.4, 4.2 내지 5.2, 4.2 내지 5.0, 4.4 내지 6.0, 4.4 내지 5.8, 4.4 내지 5.6, 4.4 내지 5.4, 4.4 내지 5.2, 4.4 내지 5.0, 4.6 내지 6.0, 4.6 내지 5.8, 4.6 내지 5.6, 4.6 내지 5.4, 4.6 내지 5.2, 4.6 내지 5.0, 4.8 내지 6.0, 4.8 내지 5.8, 4.8 내지 5.6, 4.8 내지 5.4, 4.8 내지 5.2, 4.8 내지 5.0, 5.0 내지 6.0, 5.0 내지 5.8, 5.0 내지 5.6, 5.0 내지 5.4 또는 5.0 내지 5.2일 수 있다.
상기 열수 추출은 80 내지 100℃ 조건에서 수행되는 것일 수 있으며, 구체적으로 80 내지 100℃, 80 내지 98℃, 80 내지 96℃, 80 내지 94℃, 80 내지 92℃, 80 내지 90℃, 82 내지 100℃, 82 내지 98℃, 82 내지 96℃, 82 내지 94℃, 82 내지 92℃, 82 내지 90℃, 84 내지 100℃, 84 내지 98℃, 84 내지 96℃, 84 내지 94℃, 84 내지 92℃, 84 내지 90℃, 86 내지 100℃, 86 내지 98℃, 86 내지 96℃, 86 내지 94℃, 86 내지 92℃, 86 내지 90℃, 88 내지 100℃, 88 내지 98℃, 88 내지 96℃, 88 내지 94℃, 88 내지 92℃, 88 내지 90℃, 90 내지 100℃, 90 내지 98℃, 90 내지 96℃, 90 내지 94℃ 또는 90 내지 92℃일 수 있다.
상기 열수 추출은 60분 내지 120분 동안 수행되는 것일 수 있으며, 구체적으로 60분 내지 120분, 60분 내지 115분, 60분 내지 110분, 60분 내지 105분, 60분 내지 100분, 65분 내지 120분, 65분 내지 115분, 65분 내지 110분, 65분 내지 105분, 65분 내지 100분, 70분 내지 120분, 70분 내지 115분, 70분 내지 110분, 70분 내지 105분, 70분 내지 100분, 75분 내지 120분, 75분 내지 115분, 75분 내지 110분, 75분 내지 105분, 75분 내지 100분, 80분 내지 120분, 80분 내지 115분, 80분 내지 110분, 80분 내지 105분, 80분 내지 100분, 85분 내지 120분, 85분 내지 115분, 85분 내지 110분, 85분 내지 105분, 85분 내지 100분, 90분 내지 120분, 90분 내지 115분, 90분 내지 110분, 90분 내지 105분, 90분 내지 100분, 95분 내지 120분, 95분 내지 115분, 95분 내지 110분, 95분 내지 105분 또는 95분 내지 100분동안 수행되는 것일 수 있다.
상기 방법에서 추출 용매 및 용질(유근피)의 부피/중량비 [추출용매 부피/용질 중량(mL/g)]는 80 내지 120 (mL/g)일 수 있으며, 구체적으로, 80 내지 120 (mL/g), 80 내지 115 (mL/g), 80 내지 110 (mL/g), 80 내지 105 (mL/g), 80 내지 100 (mL/g), 85 내지 120 (mL/g), 85 내지 115 (mL/g), 85 내지 110 (mL/g), 85 내지 105 (mL/g), 85 내지 100 (mL/g), 90 내지 120 (mL/g), 90 내지 115 (mL/g), 90 내지 110 (mL/g), 90 내지 105 (mL/g), 90 내지 100 (mL/g), 95 내지 120 (mL/g), 95 내지 115 (mL/g), 95 내지 110 (mL/g), 95 내지 105 (mL/g), 95 내지 100 (mL/g), 100 내지 120 (mL/g), 100 내지 115 (mL/g), 100 내지 110 (mL/g) 또는 100 내지 105 (mL/g)일 수 있다.
상기 방법은 1) 추출 용매의 pH가 4.5 내지 6.5, 2) 추출 온도가 85 내지 95℃, 3) 추출 시간은 90 내지 105분 및 4) 추출용매/용질의 비율이 95 내지 105 mL/g으로 구성된 조건에서 선택된 하나 이상으로 수행되는 것일 수 있다.
상기 방법은 E7A 제조 방법으로서, 하기 수학식을 통해 E7A 수득량(농도)를 조절할 수 있으며, 구체적으로 유근피 추출물 내 E7A 함량(농도)를 계산함으로서 조절할 수 있다:
[수학식 2]
E7A = 8.64+1.23X1+5.86X2-4.48X3+0.43X4+1.78X1X2-0.058X1X3 +0.45X1X4-7.13X2X3-0.40X2X4+0.39X3X4-0.71X1 2+1.45X2 2-3.85X3 2-1.15X4 2
[E7A = E7A 수율(mg/g), X1 = 원물과 추출 용매의 비율(용매/원물, mL/g), X2 = 추출 온도 (℃), X3 = 추출 용매 pH (pH), X4 = 추출 시간 (min)]
다른 양상은 유근피 및 추출 용매를 이용하여 열수 추출을 수행하는 단계를 포함하는, 유근피 추출물 제조 방법으로서, 상기 추출 용매의 pH는 4 내지 6인 것인, 방법을 제공하는 것이다. 상기에서 설명한 내용과 동일한 부분은 상기 방법에도 공히 적용된다.
구체적으로, 상기 유근피 추출물은 열수 추출물일 수 있다.
상기 방법에 있어서, 구체적인 추출 조건은 상기의 E7A 제조 방법과 동일할 수 있으며, 구체적으로 1) 추출 용매의 pH가 4.5 내지 6.5, 2) 추출 온도가 85 내지 95℃, 3) 추출 시간은 90 내지 105분 및 4) 추출용매/용질의 비율이 95 내지 105 mL/g으로 구성된 조건에서 선택된 하나 이상으로 수행되는 것일 수 있다.
상기 방법은 E7A [(2R,3R)-epicatechin-7-O-beta-D-apiofuranoside], 이의 입체이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물, 또는 이의 용매화물의 함량이 증대된 유근피 추출물을 제조하기 위한 것일 수 있다.
상기 방법으로 제조된 유근피 추출물은 추출물 전체 중량 대비 E7A 중량이 20 내지 30 mg/g의 농도로 포함되는 것일 수 있으며, 구체적으로 20 내지 30 mg/g, 20 내지 28 mg/g, 20 내지 26 mg/g, 22 내지 30 mg/g, 22 내지 28 mg/g, 22 내지 26 mg/g, 24 내지 30 mg/g, 24 내지 28 mg/g, 24 내지 26 mg/g, 26 내지 30 mg/g 또는 26 내지 28 mg/g의 농도로 포함되는 것일 수 있다.
상기 방법은 E7A 함량이 증가된 유근피 추출물 제조 방법으로서, 하기 수학식을 통해 E7A 수득량(농도)를 조절할 수 있으며, 구체적으로 유근피 추출물 내 E7A 함량(농도)를 계산함으로서 조절할 수 있다:
[수학식 2]
E7A = 8.64+1.23X1+5.86X2-4.48X3+0.43X4+1.78X1X2-0.058X1X3 +0.45X1X4-7.13X2X3-0.40X2X4+0.39X3X4-0.71X1 2+1.45X2 2-3.85X3 2-1.15X4 2
[E7A = E7A 수율(mg/g), X1 = 원물과 추출 용매의 비율(용매/원물, mL/g), X2 = 추출 온도 (℃), X3 = 추출 용매 pH (pH), X4 = 추출 시간 (min)]
또 다른 양상은 E7A [(2R,3R)-epicatechin-7-O-beta-D-apiofuranoside], 이의 입체이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물, 또는 이의 용매화물을 유효성분으로 포함하는, 골 관련 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는 것이다. 상기에서 설명한 내용과 동일한 부분은 상기 조성물에도 공히 적용된다.
상기 E7A는 하기의 화학식 1로 표현되는 화합물일 수 있다.
[화학식 1]
상기 E7A는 본 발명의 E7A 제조방법을 이용하여 수득한 것일 수 있다.
본 명세에서의 용어 "골 관련 질환"이란, 조골세포 및 파골세포의 불균형으로 인해 유발되어 골조직의 장애를 초래하거나 또는 골조직을 파괴하는 질환을 의미하는데, 상기 골 관련 질환은 특별히 이에 제한되지 않는다.
상기 골 관련 질환은 골다공증(osteoporosis), 골연화증(osteomalacia), 골감소증(osteopenia), 골결손, 골위축(bone atrophy), 골괴사, 섬유성골이형성증(fibrous dysplasia), 섬유성 골염, 페이젯병(Paget's disease), 칼슘 조절 이상 등의 대사성 골질환, 암세포의 골전이나 인공관절의 피로잔해(wear debris) 등에 의해 초래되는 뼈의 용해, 암(cancer) 관련 골재흡수 질병, 뼈의 종양성 파괴(neoplastic destruction), 골절(fracture), 골용해(osteolysis), 골관절염(osteoarthritis), 골형성 부전증(osteogenesis imperfecta), 구루병, 내분비 질환 또는 약물에 의한 이차성 골소실, 치주염(periodontitis)에 의한 치조골 결손 및 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis) 으로 이루어진 군에서 선택되는 것일 수 있다.
상기 골 관련 질환은 파골세포 발현/활성 또는 파골세포 분화와 관련된 골 질환일 수 있으며, 구체적으로 파골세포 과발현 또는 과분화로 인해 발병하는 것일 수 있다.
상기 화합물, 이의 입체이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이를 포함하는 조성물은 파골세포 분화 억제 또는 파골세포 발현/활성 억제 효과를 갖는 것일 수 있다.
본 명세서에서의 용어 "파골세포(osteoclast)"란, 파골세포 전구체(osteoclast precursor)로부터 분화되는 세포로서 파골세포 전구세포들은 M-CSF 및 RANKL 존재 하에서 파골세포로 분화되며, 융합을 통해 다핵 파골세포(multinucleated osteoclast)를 형성한다. 파골세포는 αvβ3 인테그린(integrin) 등을 통해 골(bone)에 결합하며 산성 환경을 조성하는 한편 각종 콜라게네이즈(collagenase) 및 프로테아제(protease)를 분비하여 골 흡수(bone resorption)를 일으킨다. 파골세포는 완전히 분화된 세포로 증식하지 않으며 약 2주간의 수명이 다하면 세포 사멸(apotosis)를 일으킨다.
상기 조성물, 추출물 또는 이의 분획물은 파골세포 분화 또는 발현 관련 마커의 발현 수준을 억제하는 것일 수 있으며, 구체적으로 NFATc1, OSCAR, DC-STAMP 및 CTSK으로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 발현 수준을 억제하는 것일 수 있다.
본 명세서에서의 용어 "치료"는, 본 발명의 조성물의 투여에 의해 골 관련 질환의 증세가 호전되거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다.
본 명세서에서의 용어 "예방"은, 본 발명의 조성물의 투여에 의해 골 관련 질환 또는 질환의 발병 가능성이 억제되거나 지연되는 모든 행위를 의미한다.
상기 약학적 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있다. 상기 "약학적으로 허용 가능한 담체"란 생물체를 자극하지 않으면서, 주입되는 화합물의 생물학적 활성 및 특성을 저해하지 않는 담체 또는 희석제를 의미할 수 있다. 여기서 "약학적으로 허용되는"의 의미는 유효성분의 활성을 억제하지 않으면서 적용(처방) 대상이 적응 가능한 이상의 독성을 지니지 않는다는 의미이다. 상기 약학적 조성물에 사용 가능한 상기 담체의 종류는 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되고 약학적으로 허용되는 담체라면 어느 것이든 사용할 수 있다. 상기 담체의 비제한적인 예로는, 락토스, 덱스트로스, 말토 덱스트린, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 글리세롤, 에탄올, 전분, 아카시아 고무, 알기네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로스, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사 용액, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트, 또는 광물유 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상을 혼합하여 사용될 수 있다. 상기 약학적 조성물은 유효성분 이외에 약학적으로 허용되는 담체를 포함하여 당업계에 공지된 통상의 방법으로 투여 경로에 따라 경구용 제형 또는 비경구용 제형으로 제조될 수 있다. 상기 약학적 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제제화하여 사용될 수 있다.
상기 약학적 조성물을 제제화할 경우, 일반적으로 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 또는 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
상기 약학적 조성물이 경구용 제형으로 제조될 경우, 적합한 담체와 함께 당업계에 공지된 방법에 따라 분말, 과립, 정제, 환제, 당의정제, 캡슐제, 액제, 겔제, 시럽제, 현탁액, 웨이퍼 등의 제형으로 제조될 수 있다. 이때 약학적으로 허용되는 적합한 담체의 예로서는 락토스, 글루코스, 슈크로스, 덱스트로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨 등의 당류, 옥수수 전분, 감자 전분, 밀 전분 등의 전분류, 셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 에틸셀룰로오스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스, 하이드록시프로필메틸셀룰로오스 등의 셀룰로오스류, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 마그네슘 스테아레이트, 광물유, 맥아, 젤라틴, 탈크, 폴리올, 식물성유 등을 들 수 있다. 제제화활 경우 필요에 따라 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 및/또는 부형제를 포함하여 제제화할 수 있다.
상기 약학적 조성물이 비경구용 제형으로 제조될 경우, 적합한 담체와 함께 당업계에 공지된 방법에 따라 주사제, 경피 투여제, 비강 흡입제 및 좌제의 형태로 제제화될 수 있다. 주사제로 제제화활 경우 적합한 담체로서는 멸균수, 에탄올, 글리세롤이나 프로필렌 글리콜 등의 폴리올 또는 이들의 혼합물을 들 수 있으며, 바람직하게는 링거 용액, 트리에탄올 아민이 함유된 PBS(phosphate buffered saline)나 주사용 멸균수, 5% 덱스트로스 같은 등장 용액 등을 사용할 수 있다. 경피 투여제로 제제화할 경우 연고제, 크림제, 로션제, 겔제, 외용액제, 파스타제, 리니멘트제, 에어롤제 등의 형태로 제제화될 수 있다. 비강 흡입제의 경우 디클로로플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소 등의 적합한 추진제를 사용하여 에어로졸 스프레이 형태로 제제화될 수 있으며, 좌제로 제제화할 경우 그 기제로는 위텝솔(witepsol), 트윈(tween) 61, 폴리에틸렌글리콜류, 카카오지, 라우린지, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르류, 폴리옥시에틸렌 스테아레이트류, 소르비탄 지방산 에스테르류 등이 사용될 수 있다.
상기 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여될 수 있다. 상기 용어 "약학적으로 유효한 양"이란 의학적 치료 또는 예방에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료 또는 예방하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 질환의 중증도, 약물의 활성, 환자의 연령, 체중, 건강, 성별, 환자의 약물에 대한 민감도, 사용된 본 발명 조성물의 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율 치료기간, 사용된 본 발명의 조성물과 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 단독으로 투여하거나 공지된 골 관련 질환에 대한 치료 효과를 나타내는 것으로 알려진 성분과 병용하여 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하다.
상기 약학적 조성물의 투여량은 사용목적, 질환의 중독도, 환자의 연령, 체중, 성별, 기왕력, 또는 유효성분으로서 사용되는 물질의 종류 등을 고려하여 당업자가 결정할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 약학적 조성물은 성인 1인당 약 0.1ng 내지 약 1,000 mg/kg, 바람직하게는 1 ng 내지 약 100 mg/kg로 투여할 수 있고, 본원의 조성물의 투여빈도는 특별히 이에 제한되지 않으나, 1일 1회 투여하거나 또는 용량을 분할하여 수회 투여할 수 있다. 상기 투여량 또는 투여횟수는 어떠한 면으로든 본원의 범위를 한정하는 것은 아니다.
또 다른 양상은 상기 골 관련 질환 치료 또는 예방용 약학 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 골 관련 질환 치료 또는 예방 방법을 제공하는 것이다. 상기에서 설명한 내용과 동일한 부분은 상기 방법에도 공히 적용된다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "개체"는 골 관련 질환이 발병되거나 발병할 위험이 있는 개, 고양이, 쥐, 가축, 인간 등을 포함하는 포유동물, 조류, 파충류, 양식어류 등을 제한 없이 포함할 수 있으며, 상기 개체는 인간을 제외하는 것일 수 있다.
상기 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 이때, 조성물은 액제, 산제, 에어로졸, 주사제, 수액제(링겔), 캡슐제, 환제, 정제, 좌제 또는 패치의 형태로 제형화되어 투여할 수 있다. 상기 골 관련 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여도 투여될 수 있다.
상기 약학적 조성물은 특별히 이에 제한되지 않으나, 목적하는 바에 따라 복강내 투여, 정맥내 투여, 근육내 투여, 피하 투여, 피내 투여, 경피패치투여, 경구 투여, 비내 투여, 폐내 투여, 직장내 투여 등의 경로를 통해 투여 될 수 있다. 다만, 경구 투여 시에는 제형화되지 않은 형태로도 투여할 수 있고, 위산에 의하여 상기 약학 조성물의 유효성분이 변성 또는 분해될 수 있기 때문에 경구용 조성물은 활성 약제를 코팅하거나 위에서의 분해로부터 보호되도록 제형화된 형태 또는 경구용 패치형태로 구강내에 투여할 수도 있다. 또한, 상기 조성물은 활성 물질이 표적세포로 이동할 수 있는 임의의 장치에 의해 투여될 수 있다.
또 다른 양상은 E7A [(2R,3R)-epicatechin-7-O-beta-D-apiofuranoside], 이의 입체이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물, 또는 이의 용매화물을 유효성분으로 포함하는, 골 관련 질환 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다. 상기에서 설명한 내용과 동일한 부분은 상기 조성물에도 공히 적용된다.
본 명세서에서의 용어 "개선"은, 본 발명의 조성물의 투여에 의해 골 관련 질환의 증세가 호전되거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다.
본 명세서에서의 용어 "식품"은 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료, 비타민 복합제, 건강 기능 식품 및 건강 식품 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함한다.
상기 식품은 당 업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조 가능하며, 상기 제조시에는 당 업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한, 상기 식품의 제형 또한 식품으로 인정되는 제형이면 제한 없이 제조될 수 있다. 상기 식품 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고 휴대성이 뛰어나므로, 본 발명의 식품 조성물은 골 관련 질환의 개선의 효과를 증진시키기 위한 보조제로 섭취가 가능하다.
상기 식품 조성물은 건강기능식품 조성물일 수 있다.
본 명세서에서의 용어 "건강기능식품"은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 의미하며, '기능성'이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다.
상기 건강 식품(health food)은 일반식품에 비해 적극적인 건강유지나 증진 효과를 가지는 식품을 의미하고, 건강보조식품(health supplement food)은 건강 보조 목적의 식품을 의미한다. 경우에 따라, 건강 기능 식품, 건강 식품, 건강 보조 식품의 용어는 혼용될 수 있다. 구체적으로, 상기 건강 기능 식품은 조성물을 음료, 차류, 향신료, 껌, 과자류 등의 식품 소재에 첨가하거나, 캡슐화, 분말화, 현탁액 등으로 제조한 식품으로, 이를 섭취할 경우 건강상 특정한 효과를 가져오는 것을 의미하나, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용이 없는 장점이 있다.
상기 식품 조성물은, 일상적으로 섭취하는 것이 가능하기 때문에 골 관련 질환의 개선에 대하여 높은 효과를 기대할 수 있으므로, 매우 유용하게 사용될 수 있다.
상기 식품 조성물은 생리학적으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함할 수 있는데, 담체의 종류는 특별히 제한되지 않으며 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 담체라면 어느 것이든 사용할 수 있다. 구체적으로, 상기 식품 조성물은 식품 조성물에 통상 사용되어 냄새, 맛, 시각 등을 향상시킬 수 있는 추가 성분을 포함할 수 있다. 예들 들어, 비타민 A, C, D, E, B1, B2, B6, B12, 니아신 (niacin), 비오틴 (biotin), 폴레이트 (folate), 판토텐산 (panthotenic acid) 등을 포함할 수 있다. 또한, 아연(Zn), 철(Fe), 칼슘(Ca), 크롬(Cr), 마그네슘(Mg), 망간(Mn), 구리(Cu), 크륨(Cr) 등의 미네랄을 포함할 수 있다. 또한, 라이신, 트립토판, 시스테인, 발린 등의 아미노산을 포함할 수 있다.
또한, 상기 식품 조성물은 방부제 (소르빈산 칼륨, 벤조산나트륨, 살리실산, 데히드로초산나트륨 등), 살균제 (표백분과 고도 표백분, 차아염소산나트륨 등), 산화방지제 (부틸히드록시아니졸(BHA), 부틸히드록시톨류엔(BHT) 등), 착색제 (타르색소 등), 발색제 (아질산 나트륨, 아초산 나트륨 등), 표백제 (아황산나트륨), 조미료 (MSG 글루타민산나트륨 등), 감미료 (둘신, 사이클레메이트, 사카린, 나트륨 등), 향료 (바닐린, 락톤류 등), 팽창제 (명반, D-주석산수소칼륨 등), 강화제, 유화제, 증점제(호료), 피막제, 검기초제, 거품억제제, 용제, 개량제 등의 식품 첨가물 (food additives)을 포함할 수 있다. 상기 첨가물은 식품의 종류에 따라 선별되고 적절한 양으로 사용될 수 있다.
상기 식품 조성물은 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합양은 그의 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 본 발명의 식품 조성물은 식품 또는 음료에 대하여 50 중량부 이하, 구체적으로 20 중량부 이하의 양으로 첨가될 수 있다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 장기간 섭취할 경우에는 상기 범위 이하의 함량을 포함할 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
상기 식품 조성물의 일 예로 건강음료 조성물로 사용될 수 있으며, 이 경우 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드; 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드; 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드; 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜일 수 있다. 감미제는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제; 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 건강음료 조성물 100 mL 당 일반적으로 약 0.01 ~ 0.04 g, 구체적으로 약 0.02 ~ 0.03 g이 될 수 있다.
상기 외에 건강음료 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산, 펙트산의 염, 알긴산, 알긴산의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올 또는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 천연 과일주스, 과일주스 음료, 또는 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 건강음료 조성물 100 중량부당 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
상기 식품 조성물은 골 관련 질환의 개선 또는 예방 효과를 나타낼 수 있다면 본 발명의 추출물을 다양한 중량%로 포함할 수 있으며, 구체적으로 상기 화합물을 식품 조성물의 총 중량 대비 0.00001 내지 100 중량% 또는 0.01 내지 80 중량%로 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또 다른 양상은 E7A [(2R,3R)-epicatechin-7-O-beta-D-apiofuranoside], 이의 입체이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물, 또는 이의 용매화물을 유효성분으로 포함하는, 골 관련 질환 예방 또는 개선용 사료 조성물을 제공하는 것이다. 상기에서 설명한 내용과 동일한 부분은 상기 조성물에도 공히 적용된다.
본 명세서에서의 용어 "사료"는 동물이 먹고, 섭취하며, 소화시키기 위한 또는 이에 적당한 임의의 천연 또는 인공 규정식, 한끼식 등 또는 상기 한끼식의 성분을 의미할 수 있다.
상기 사료의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 사료를 사용할 수 있다. 상기 사료의 비제한적인 예로는, 곡물류, 근과류, 식품 가공 부산물류, 조류, 섬유질류, 제약 부산물류, 유지류, 전분류, 박류 또는 곡물 부산물류 등과 같은 식물성 사료; 단백질류, 무기물류, 유지류, 광물성류, 유지류, 단세포 단백질류, 동물성 플랑크톤류 또는 음식물 등과 같은 동물성 사료를 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상을 혼합하여 사용될 수 있다.
상기 사료 조성물은 제제에 따라 골 관련 질환 개선 또는 예방을 위해 첨가 가능한 공지의 첨가물을 더 포함할 수 있다. 상기 사료 조성물은 고농축액, 분말 또는 과립 형태일 수 있다. 상기 사료 조성물은 동물의 식이 요구를 충족시키는데 통상적으로 사용되는 임의의 단백질-함유 유기 곡분을 더 포함할 수 있다. 상기 사료 조성물은 동물 사료에 침지, 분무, 또는 혼합으로 첨가하여 사용될 수 있다.
상기 사료 조성물은 영양소 보충 및 체중감소 예방, 사료 내 섬유소의 소화 이용성 증진, 유질 개선, 번식장애 예방 및 수태율 향상, 하절기 고온 스트레스 예방 등 다양한 효과를 나타내는 물질을 추가로 포함할 수 있다. 예를 들어 탄산수소나트륨, 벤토나이트(bentonite), 산화마그네슘, 복합광물질 등의 광물질제제, 아연, 구리, 코발트, 셀레늄 등의 미량 광물질인 미네랄제제, 케로틴, 비타민 E, 비타민 A, D, E, 니코틴산, 비타민 B 복합체 등의 비타민제, 메티오닌, 리이산 등의 보호아미노산제, 지방산 칼슘염 등의 보호지방산제, 생균제(유산균제), 효모배양물, 곰팡이 발효물 등의 생균, 효모제 등이 추가로 포함될 수 있다.
상기 사료 조성물은 포유류, 가금류를 포함하는 다수의 동물 식이 즉, 사료 및 음용수에 적용할 수 있다.
상기 사료 조성물은 사료에 첨가되는 물질 (즉, 사료 첨가제), 사료 원료 또는 개체에 급여되는 사료 자체를 모두 포함하는 것일 수 있다.
또 다른 양상은 유근피 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는, 골 관련 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는 것일 수 있다. 상기에서 설명한 내용과 동일한 부분은 상기 조성물에도 공히 적용된다.
상기 유근피 추출물은 본 발명의 유근피 추출물 제조방법을 이용하여 수득된 것일 수 있다.
또 다른 양상은 유근피 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는, 골 관련 질환 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다. 상기에서 설명한 내용과 동일한 부분은 상기 조성물에도 공히 적용된다.
또 다른 양상은 유근피 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는, 골 관련 질환 예방 또는 개선용 사료 조성물을 제공하는 것이다. 상기에서 설명한 내용과 동일한 부분은 상기 조성물에도 공히 적용된다.
일 양상에 따르면, 본 발명의 E7A 제조방법 및 유근피 추출물 제조방법을 이용하면 파골세포 분화 억제능이 우수한 유효물질을 효과적으로 분리/수득할 수 있음을 확인하였는 바, 상기 방법을 이용하여 골 관련 질환의 치료 또는 예방용 조성물을 효율적으로 제조할 수 있다.
도 1은 추출 용매에 따른 유근피 추출물의 파골세포 분화 억제 효능을 나타낸 도면이다.
도 2는 추출 용매에 따른 유근피 추출물의 세포 독성 여부를 나타낸 도면이다.
도 3은 추출 용매에 따른 유근피 추출물의 LC/MS 분석 결과를 나타낸 도면이다.
도 4는 유근피 추출물의 1H NMR, 13C NMR, COSY, HSQC, HMBC 스펙트럼 분석 결과를 나타낸 도면이다.
도 5는 느릅나무속 식물 추출물의 LC/MS 분석 결과를 나타낸 도면이다.
도 6은 느릅나무속 식물 추출물의 MS 분석 결과를 나타낸 도면이다.
도 7의 A 및 B는 E7A 처리에 따른 TRAP 염색 결과를 나타낸 도면이고, C는 세포 독성 결과를 나타낸 도면이다.
도 8은 E7A 처리에 따른 PIT 어세이 결과를 나타낸 도면이다.
도 9는 E7A 처리에 따른 NFATc1, TRAP, DC-STAMP, CTSK 및 OSCAR의 발현 수준을 qPCR을 이용하여 분석한 결과를 나타낸 도면이다.
도 10은 E7A 처리에 따른 TRAP 염색 결과를 Ulmoside A 및 Catechin와 비교하여 나타낸 도면이다.
도 11은 추출 조건에 따른 E7A 수율을 반응표면 다이어그램으로 나타낸 도면이다.
도 12의 A 및 B는 본 발명의 방법으로 추출한 유근피 추출물의 처리에 따른 TRAP 염색 결과를 나타낸 도면이고, C는 세포 독성 결과를 나타낸 도면이다.
도 13은 본 발명의 방법으로 추출한 유근피 추출물의 처리에 따른 PIT 어세이 결과를 나타낸 도면이다.
도 14는 본 발명의 방법으로 추출한 유근피 추출물의 처리에 따른 NFATc1, TRAP, DC-STAMP, CTSK 및 OSCAR의 발현 수준을 qPCR을 이용하여 분석한 결과를 나타낸 도면이다.
도 2는 추출 용매에 따른 유근피 추출물의 세포 독성 여부를 나타낸 도면이다.
도 3은 추출 용매에 따른 유근피 추출물의 LC/MS 분석 결과를 나타낸 도면이다.
도 4는 유근피 추출물의 1H NMR, 13C NMR, COSY, HSQC, HMBC 스펙트럼 분석 결과를 나타낸 도면이다.
도 5는 느릅나무속 식물 추출물의 LC/MS 분석 결과를 나타낸 도면이다.
도 6은 느릅나무속 식물 추출물의 MS 분석 결과를 나타낸 도면이다.
도 7의 A 및 B는 E7A 처리에 따른 TRAP 염색 결과를 나타낸 도면이고, C는 세포 독성 결과를 나타낸 도면이다.
도 8은 E7A 처리에 따른 PIT 어세이 결과를 나타낸 도면이다.
도 9는 E7A 처리에 따른 NFATc1, TRAP, DC-STAMP, CTSK 및 OSCAR의 발현 수준을 qPCR을 이용하여 분석한 결과를 나타낸 도면이다.
도 10은 E7A 처리에 따른 TRAP 염색 결과를 Ulmoside A 및 Catechin와 비교하여 나타낸 도면이다.
도 11은 추출 조건에 따른 E7A 수율을 반응표면 다이어그램으로 나타낸 도면이다.
도 12의 A 및 B는 본 발명의 방법으로 추출한 유근피 추출물의 처리에 따른 TRAP 염색 결과를 나타낸 도면이고, C는 세포 독성 결과를 나타낸 도면이다.
도 13은 본 발명의 방법으로 추출한 유근피 추출물의 처리에 따른 PIT 어세이 결과를 나타낸 도면이다.
도 14는 본 발명의 방법으로 추출한 유근피 추출물의 처리에 따른 NFATc1, TRAP, DC-STAMP, CTSK 및 OSCAR의 발현 수준을 qPCR을 이용하여 분석한 결과를 나타낸 도면이다.
이하 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 식물 재료 및 샘플 준비
건조된 왕느릅나무(Ulmus macrocarpa Hance)는 현지 회사(진성 F.M)에서 구입했다. 느릅나무속에 속하는 다른 식물인 참느릅나무(Ulmus parvifolia Jacq), 당느릎나무(Ulmus davidiana Planchon) 및 느릅나무(Ulmus davidiana var. japonica (Rehder) Nakai)는 서울대학교 산림과학부(SNUF)에서 제공받았다. 상기 식물들은 최종 제품의 품질을 보장하기 위해 온도, 상대 습도 및 풍속이 제어된 건조실에서 탈수되었다. 말린 나무 껍질은 믹서기를 사용하고 손으로 따서 작은 조각으로 자르고 고운 가루로 만든 다음 체로 걸러 ~20 mesh의 고운 가루를 수득하였다. 그런 다음 분말 샘플을 폴리프로필렌 지퍼 백으로 옮기고 사용할 때까지 -80℃에서 보관하였다.
실시예 2: 실험 기기의 사용 조건
UV 스펙트럼은 Hitachi JP/U-3010 UV spectrophotometer(Tokyo, Japan)를 사용하여 얻었다.
모든 NMR 스펙트럼은 MeOH-d4(Gif-sur-Yvette, France)를 용매로 하여, Bruker Ascend 700 분광계(Billerica Middlesex County, MA, USA)를 사용하여 얻었으며, 각 용매 피크(메탄올-d4의 경우 HH 3.31 및 CC 49.0)를 참조하여 화학적 이동을 얻었다.
저해상도 LC-MS 데이터는 Agilent Technologies 6130 사중극자 질량 분석기에 연결된 Agilent Technologies 1200 시리즈 HPLC에서 수집되었다. 고해상도 질량 데이터는 Quadrupole/TOF 질량 분석기가 있는 Triple TOF 5600 고해상도 질량 분석기로 기록되었다.
모든 질량 데이터는 전자 분무 이온화 방법을 사용하여 얻었다.
고성능 액체 크로마토그래피(High-performance liquid chromatography, HPLC)는 Waters 2998 광다이오드 어레이 검출기 및 Waters 1525 바이너리 펌프가 장착된 Waters HPLC 시스템(Milford Worces County, MA)을 사용하여 수행되었다.
HPLC 분석에는 HPLC급 용매(대전, 한국)를 사용하였으며, NMR 용매는 Cambridge Isotope Laboratory(Andover, MA, USA)에서 구입했다.
실시예 3: 파골세포 분화 및 TRAP(artrate-resistant acid phosphatase) 염색 어세이
파골세포 분화 및 TRAP 염색은 기존에 공개된 문헌을 토대로 수행되었다. 한편, 골수 세포(BMC) 분리는 순천대학교 동물 연구 표준 프로토콜(SCNU)에 따라 수행되었으며, 동물 사용 프로토콜은 SCNU 기관 동물 관리 및 사용 위원회의 승인을 받았다(허가번호: SCNU IACUC 2021-05). 구체적으로, 5주령 ICR 마우스의 대퇴골과 경골을 세척하여 골수 세포(bone marrow cells, BMC)를 분리하였다. 분리된 BMC는 10% 소 태아 혈청(FBS) 및 10ng/mL M-CSF이 보충된 α-MEM에서 하루 동안 배양했다. 부유 세포를 제거하고, 부착된 세포를 파골세포 전구체(osteoclast precursor: Bone Marrow-Derived Macrophage: BMM)로 이용하여 파골세포 분화에 사용하였다. 파골세포 분화를 위해 상기 BMM을 6-웰 플레이트에 1x106 cells/well)로 시딩하고, M-CSF(30ng/mL) 및 RANKL(10ng/mL, R&D Systems)을 첨가하고 3일간 배양하여 전파골세포(preosteoclast)를 생성했다. 상기 전파골세포를 M-CSF(30ng/mL)의 존재 하에 30분 동안 비히클 또는 실험 샘플로 처리한 다음 RANKL(10ng/mL)로 하루 더 배양하여 성숙한 TRAP+-MNC (tartrate-resistant acid phosphatase-positive multinucleated cells)로 분화시켰다. 하루 후, 세포를 3.7% 포름알데히드로 5분간 고정하고, 0.1% Triton X-100으로 5분간 투과화한 후, leukocyte acid phosphatase kit 387-A를 사용하여 염색하였다. 3개 이상의 핵을 가진 TRAP 양성 다핵세포(TRAPpositive multinucleate cells: TRAP+ MNCs)를 파골세포로 계수하였다.
실시예 4: 세포 생존력 분석 어세이
세포 생존을 평가하기 위해, 비히클 또는 실험 샘플을 처리하고 72시간 후 WST [2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium, monosodium salt]에서 포르마잔 (formazan)으로의 전환을 평가하였다. 구체적으로, 분리된 BMM(1 x 104 cells/well)을 M-CSF(30ng/mL)의 존재 하에 96-웰 플레이트에서 12시간 동안 인큐베이션한 다음, 각 웰에 표시된 농도에서 DMSO 또는 실험 샘플로 처리했다. 3일 후, 10μL WST-8 용액을 각 웰에 첨가하고, 플레이트를 37 ℃에서 4시간 동안 인큐베이션하였다. 이 후 광학 밀도는 표준 마이크로플레이트 판독기(Thermo, Varioskan Flash, UK)를 사용하여 450 nm에서 측정되었다.
실시예 5: 통계적 분석
결과는 3 반복 결과의 평균 ± 표준편차로 표시하였다. 통계적 차이는 스튜던트 t-검정을 사용하여 분석되었다. 0.05보다 낮은 P-값은 유의한 것으로 간주되었다(P-값 * <0.05, ** <0.01, *** <0.001).
실험예 1: 왕느릅나무 추출물의 추출 용매별 파골세포 억제능 평가
식품 제조공정에서 사용되는 용매로 왕느릎나무(Ulmus macrocarpa Hance)를 추출하였을 때, 파골세포 분화 억제 능력이 가장 우수한 조건을 찾기 위해 하기와 같은 실험을 수행하였다.
구체적으로, 추출 용매로서 물(0% 에탄올), 70% 에탄올 및 100% 에탄올을 사용한 경우, 추출물의 파골세포 분화 억제 효능을 TRAP 염색법으로 평가하였다. 그 결과, 100% 물 추출물의 경우 TRAP 양성 NMCs/well 값은 1ug/ml의 낮은 농도에서도 비히클에 비해 82.7% 감소한 반면, 100% 에탄올 추출물은 1ug/ml에서 12.2% 감소를 보였고, 에탄올 70% 추출물은 1ug/ml에서 9.7% 감소를 보였다. 따라서, 열수 추출물은 에탄올 추출물보다 현저히 우수한 파골세포 분화 억제 효능을 갖는 것을 알 수 있다(도 1).
또한, CCK-8(Cell Counting Kit-8) 분석을 통해 상기 추출물들의 세포 독성을 확인한 결과, 상기 실험에서 사용한 최대 농도(20 μM)의 추출물 모두 BMM에 대한 유의한 세포독성 효과를 나타내지 않았다 (도 2).
실험예 2: 왕느릅나무 추출물의 유효 활성성분 발굴
상기 실험예 1의 결과를 토대로 에탄올 추출물보다 열수 추출물에서 파골세포 분화 억제에 더 효과적인 유효 활성물질이 있을 것이라고 가정하였으며, 3가지 추출물(열수, 100% 에탄올, 70% 에탄올)을 LC/MS를 이용하여 비교하였다. 그 결과, 70% 에탄올 추출물 및 100% 에탄올 추출물에서는 거의 볼 수 없는 피크(15.53)가 열수 추출물에서는 쉽게 검출되는 것을 확인하였다 (도 3).
다음으로, 상기 유효 활성물질을 확인하기 위해 1H NMR, 13C NMR, COSY, HSQC, HMBC 스펙트럼으로 분리정제하였으며, 하기와 같은 화합물이 발굴되었다 (도 4).
(2R,3R)-epicatechin-7-O-beta-D-apiofuranoside : white and brown amorphous powder; [α]20D -19.6 (c 0.52, MeOH); UV (MeOH) λmax (log ε) 203, 278; 1H NMR (methanol-d4, 700 MHz) δ 6.98 (d,J = 1.7 Hz, H-2′), 6.80 (dd, J = 8.1, 1.7 Hz, H-6′), 6.76 (d,J = 8.1 Hz, H-5′), 6.14 (d, J = 3.8 Hz, 1H, H6), 6.14 (d, J = 3.8 Hz, 1H, H8),4.82 (br s, H-2), 4.19 (m, H-3), 2.88 (dd, J = 16.8, 4.4 Hz, H-4a), 2.74 (dd, J = 16.8,2.6 Hz, H-4b), 2.88 (H-4a), 2.74 (H-4b), 2.86 (H-4a), 2.54 (H-4b), 5.49 (d, J = 2.9 Hz, H-1″), 4.14 (d, J = 2.9 Hz, H-2″), 4.09 (m, H-4″a), 3.85 (d, J = 9.7 Hz, H4″b), 3.62 (m, H-5″), 5.49 (d, J = 2.9 Hz, H-1″) ; 13C NMR (methanol-d4, 175 MHz) δ 108.72 (C-1″),79.94 (C-3″), 78.27 (C-2″), 75.40 (C-4″), 64.96 (C-5″), 158.01 (C-7), 157.95 (C-9), 157.31 (C-5), 145.95 (C-4′), 145.83 (C3′),132.15 (C-1′), 119.36 (C-6′), 115.90 (C-5′), 115.28 (C-2′), 102.51 (C-10), 97.40 (C-6), 97.17 (C-8), 80.29 (C-2), 67.29 (C-3), 29.27 (C4) ; ESIMS m/z 423 [M + H]+, 421 [M - H]-
구체적으로 왕느릅나무 열수 추출물에서 분리된 화합물은 flavan-3-ol aglycone과 당 모이어티로 구성되어 있으며, 203 nm (최대) 및 280nm(최대)에서 UV 흡수를 나타냈다. 분자식 C20H22O10 은 각각 m/z 423 [M + H]+ 및 421 [M - H]- 에서 양이온성 및 음이온성 ESI(electrospray ionization) MS 분자 이온 피크에 의해 환원되었다. 1H NMR 스펙트럼은 1,2,3,5-테트라치환된 벤젠 고리에서 H-6 및 H-8에 대해 δ 6.13에서 2개의 중첩된 방향족 단일항(singlets)을 나타냈고, ABX 스핀 시스템에서 δ 6.98, 6.80 및 6.76에서 3개의 방향족 신호를 나타냈다. H-2의 양성자 신호는 메탄올-d4에서 δ 4.82에서 넓은 단일선 신호로, DMSO-d6에서 3.5Hz의 작은 결합 상수와 함께 δ 4.72에서 이중선으로 관찰되었으며, 이는 2,3-시스 상대 구성을 나타낸다. 2R, 3R 절대 구성은 -19.6([α]22 D)의 광학 회전에 의해 제안되었다. 나머지 5개의 지방족 proton 신호는 δ 5.49, 4.14, 4.09, 3.85 및 3.62에서 관찰되었으며, 이는 D-apiofuranose의 존재를 시사한다. β 당 결합은 apiofuranose 모이어티의 아노머 양성자의 커플링 상수(J = 2.9Hz)를 기반으로 결정되었다. C-7에서 당 모이어티의 7-O-연결은 H-1''에서 인접 탄소 원자 C-6, C-7 및 C-8까지의 HMBC 상관 관계에 의해 확인되었다.
상기에서 발굴한 화합물은 (2R,3R)-epicatechin-7-O-beta-D-apiofuranoside(E7A)로서, 하기의 화학식을 갖는다.
[화학식 1]
실험예 3: 느릅나무속 식물의 E7A 함량 평가
상기 실험예들을 토대로 확인한 배당체 플라보노이드인 E7A가 현재 다양하게 이용되는 다른 느릅나무속 식물에 어느 정도로 함유되어 있는 지 확인하기 위해, 하기와 같은 실험을 수행하였다.
구체적으로, 느릅나무속 식물로서 참느릅나무(Ulmus parvifolia Jacq), 당느릎나무(Ulmus davidiana Planchon) 및 느릅나무(Ulmus davidiana var. japonica (Rehder) Nakai)의 전처리된 건조시료를 이용하여 동일한 조건(원물 300mg, 용매 30ml, 90℃, 90분, pH 5, 210nm, 20uL injection)에서 추출하였으며, 추출된 용액 샘플을 LC/MS를 통해 분석하였다. 그 결과, 15.53분에 상기 느릅나무속 추출물에서 UV(210nm) 신호 피크가 검출된 것을 확인하였다 (도 5). 또한, HPLC의 표준 곡선 방법을 사용하여 분석한 결과, E7A는 왕느릅나무 추출물에서 현저히 우수한 함량을 갖고 있으며, 다른 느릅나무속 추출물에서는 2.5 ug/ml 이하 정도로 포함되어 있음을 확인하였다.
다음으로, 정성 실험의 정확도를 높이기 위해 15.53분의 MS 결과에 대해 추가적인 실험을 수행하였다. 상기에서 확인한 바와 같이 표준 활성 화합물로 선택한 E7A는 m/z 423 [M + H]+ 및 421 [M - H]- 값을 가졌다. 그 결과, 질량 데이터는 423.150 m/z가 나타났으며, 동일한 MS 결과는 왕느릅나무 추출물에서만 도출되었다 (도 6).
상기 결과를 토대로, E7A는 느릅나무속 식물 중 왕느릅나무에서 고함량으로 함유하고 있는 것을 알 수 있는 바, E7A를 고순도 및 효율적으로 추출하기 위해서는 왕느릅나무를 이용하는 것이 가장 효과적이라는 것을 알 수 있다.
실험예 4: E7A의 파골세포 억제 효능 평가
상기 느릅나무속 식물(유근피)로부터 추출하여 수득한 E7A의 파골세포 억제 효능을 평가하기 위해 하기와 같은 실험을 수행하였다.
먼저, E7A의 파골세포 분화 억제 효능을 평가하기 위해, TRAP 염색 분석을 수행한 결과, 1, 3, 10, 20 μM의 E7A을 처리한 경우 분화된 BMM 세포가 감소하였으며, 특히 다핵세포의 수는 E7A의 농도 의존적으로 감소하였다 (도 7A 및 B). 한편, 상기 농도의 E7A는 세포 독성을 나타내지 않았다 (도 7C). 또한, 파골세포 분화 수준을 확인할 수 있는 PIT 어세이에서도 E7A의 농도의존적으로 파골세포 분화가 억제됨을 확인하였다 (도 8).
다음으로, 20 μM의 E7A을 처리한 경우 파골세포 특이적 마커 유전자인 NFATc1, TRAP, DC-STAMP, CTSK 및 OSCAR의 발현 수준을 qPCR을 이용하여 분석한 결과, 대조군에 비해 마커 유전자의 발현이 억제됨을 확인하였다 (도 9A). 상기 결과는 NFATc1의 단백질 발현 수준을 웨스턴 블랏팅으로 확인한 결과에서도 동일하게 나타났다(도 9B).
다음으로, E7A의 파골세포 분화 억제효능을 왕느릅나무 추출물로부터 수득할 수 있는 활성성분인 Ulmoside A 및 Catechin과 비교하였다. 그 결과, E7A는 Ulmoside A 및 Catechin와 비교하여 현저히 우수한 파골세포 분화 억제 효능을 나타내는 것을 확인하였다(도 10).
실험예 5: E7A 추출 조건 확립
5.1: 반응 표면 방법론(response surface methodology, RSM)에 의한 추출 최적화 설계
상기 실험예에서 확인한 느릅나무속 식물의 유효 활성물질인 E7A를 고효율로 추출하는 조건을 확립하기 위해 하기와 같은 실험을 수행하였다.
먼저, 유근피로부터 최대 함량의 E7A를 추출하는 공정의 모델링 및 최적화 조건 수립을 위해 3-level-4-factor 실험계획인 Box-Behnken design과 반응표면분석법을 이용하였다. 추출공정에 중요한 독립변수(Xn)로서 고려되는 인자 즉, 원물과 추출 용매의 비율[(L/S ratio, mL/g), X1], 추출 온도[(T, ℃), X2], 추출 용매 pH[pH, X3], 추출 시간[(t, min), X4]을 요인변수로 하여, 3단계(-1, 0, 1)로 부호화 하였으며, Box-behnken design에 따라, 하기 표 1과 같이 15구간으로 설정하여 추출실험을 실시하였다. 또한, 상기의 독립변수에 영향을 받는 종속변수는 E7A의 함량(Y)으로 측정하여 회귀분석을 실시하였다.
Standard order | Ratio (mL/g) |
Temp (℃) |
pH | Time (min) |
E7A content (mg/g extract) |
|
Actual | Predicted | |||||
1 | 60 | 50 | 9 | 90 | 2.939982 | 3.583875 |
2 | 100 | 50 | 9 | 90 | 2.923131 | 3.695148 |
3 | 60 | 90 | 9 | 90 | 2.958002 | 6.0283 |
4 | 100 | 90 | 9 | 90 | 8.488186 | 11.68661 |
5 | 80 | 70 | 5 | 60 | 7.16491 | 9.473598 |
6 | 80 | 70 | 13 | 60 | 0.093011 | -0.08326 |
7 | 80 | 70 | 5 | 120 | 5.606503 | 9.625085 |
8 | 80 | 70 | 13 | 120 | 0 | 1.533627 |
9 | 60 | 70 | 9 | 60 | 6.519959 | 7.161999 |
10 | 100 | 70 | 9 | 60 | 9.131182 | 9.142613 |
11 | 60 | 70 | 9 | 120 | 7.84878 | 7.142008 |
12 | 100 | 70 | 9 | 120 | 12.26836 | 10.93097 |
13 | 80 | 50 | 5 | 90 | 2.42369 | 2.715729 |
14 | 80 | 90 | 5 | 90 | 9.64775 | 11.69112 |
15 | 80 | 50 | 13 | 90 | 0.387739 | -2.35098 |
16 | 80 | 90 | 13 | 90 | 0.096894 | -0.89049 |
17 | 60 | 70 | 5 | 90 | 12.19584 | 7.613251 |
18 | 100 | 70 | 5 | 90 | 16.72217 | 12.64207 |
19 | 60 | 70 | 13 | 90 | 0 | 0.933125 |
20 | 100 | 70 | 13 | 90 | 0.238274 | 1.673885 |
21 | 80 | 50 | 9 | 60 | 1.520334 | 2.216257 |
22 | 80 | 90 | 9 | 60 | 11.7217 | 8.239884 |
23 | 80 | 50 | 9 | 120 | 3.571285 | 3.906127 |
24 | 80 | 90 | 9 | 120 | 12.16128 | 8.318384 |
25 | 80 | 70 | 9 | 90 | 6.210983 | 8.644835 |
26 | 80 | 70 | 9 | 90 | 6.399325 | 8.644835 |
27 | 80 | 70 | 9 | 90 | 9.958712 | 8.644835 |
28 | 80 | 70 | 9 | 90 | 10.30981 | 8.644835 |
29 | 80 | 70 | 9 | 90 | 10.34535 | 8.644835 |
반응표면분석에서 독립변수의 종속변수에 대한 2차 회귀식은 다음과 같았다.
[수학식 1]
(상기 수학식 1에서, Xi 및 Xj는 독립 변수를 나타내고, Y는 종속 변수를 나타내고, β0, βi, βij 및 βii는 각각 절편, 선형, 2차 및 상호 작용 항에 대한 회귀 계수를 나타낸다)
추출특성의 모니터링과 최적조건범위 예측은 각 종속변수의 반응표면분석법을 이용하여 분석하였다.
5.2: 추출 공정
상기의 독립변수를 이용하여 유근피 추출물을 수득하기 위해 하기와 같은 실험을 수행하였다.
구체적으로, HAE(heat-assisted extraction)의 최적화는 용매 증발을 피하기 위해 밀봉된 용기를 사용하는 항온 히터에서 수행되었다. 추출 시간(t, 60-120분), 온도(T, 50-90 ℃), 용매의 pH(pH, pH 5-13), 고액/고체 비율(S/L, 60-100%)에 따라 29개의 실험군으로 설정하여 추출하였으며, 추출 후 원심분리(4000rpm, 1000초, 상온)하고, 상등액을 Whatman 여과지 4호로 여과하였다.
추출물 내 E7A의 함량은 0.45μm 필터를 거친 추출물을 HPLC Waters HPLC system (Milford Worces County, MA)를 이용하여 분석하였다. 이때, 분석조건으로 컬럼은 Phenomenex Luna C18, 5 μm, 100 Å, 250Х100 mm, 이동상은 0.1% formicacid, 유속은 1 ml/min, 검출기는 UV(210 nm)를 각각 사용하였다. 정량은 외부표준법으로 검량선을 작성하여 실시하였다. 즉, 표준물질 E7A(상업적으로는 입수할 수 없는 98% 정제)를 정제수에 녹여 250 ppm으로 한 후, 이 액을 희석하여 125, 62.5, 31.125, 15.63 ppm별로 표준용액을 조제하고, HPLC로 분석한 후, 검량선을 작성하여 정량하였다.
한편, 상기 유근피 추출물로부터 E7A를 분리하기 위해, 건조된 물 추출물(312.5mg)을 증류수(250mL)에 다시 채우고, 상기 용액을 디클로로메탄(250mL), 에틸 아세테이트(250mL), n-부탄올(250mL)에 순차적으로 분배하였다. n-부탄올 층을 Sephadex LH-20 크기 배제 크로마토그래피에 적용하고 메탄올로 용출하여 46개의 분획(UMB1-UMB46)을 얻었다. UMB 13-46 분획에는 유사한 화학 성분이 포함되어 있어, UMB13-46의 조합을 HPLC로 정제했다.
5.3: E7A 추출 최적화 조건 확립
상기 실험예 5.1의 Box-behnken design를 기반으로 구축된 추출 조건별 실험 및 예측 E7A 함량은 표 1에 나타낸 바와 같았고, 결과에 대한 반응표면 회귀식은 2차 다항식 방정식으로서 하기와 같이 도출되었다.
[수학식 2]
E7A = 8.64+1.23X1+5.86X2-4.48X3+0.43X4+1.78X1X2-0.058X1X3 +0.45X1X4-7.13X2X3-0.40X2X4+0.39X3X4-0.71X1 2+1.45X2 2-3.85X3 2-1.15X4 2
[E7A = E7A 수율(mg/g), X1 = 원물과 추출 용매의 비율(용매/원물, mL/g), X2 = 추출 온도 (℃), X3 = 추출 용매 pH (pH), X4 = 추출 시간 (min)]
상기 E7A 함량에 대한 회귀식은 R2은 0.85로 높은 상관관계를 보였다.
상기 추출물에서 E7A 함량에 대한 추출 매개변수의 효과를 3차원 반응표면 다이어그램으로 도 11에 나타냈다. 상기 도 11을 살펴보면, 추출 조건 중 추출 용매의 pH가 E7A 함량에 가장 큰 영향을 주었으며, 추출 용매의 pH가 낮을수록 E7A의 함량이 증가하는 경향을 나타내었다. 또한, 원물과 추출용매 비율 역시 E7A 함량에 영향을 주었으며, '원물:추출 용매'의 비율이 높을수록 E7A의 함량이 증가하는 것을 확인할 수 있었고, 추출온도가 높을수록 E7A의 함량 이 증가하는 것을 확인할 수 있었고, 추출시간 역시 E7A 함량에 영향을 주었다.
반응표면분석에 따라 예측된 E7A의 최대값은 26.0487 mg/g extract (E7A양/추출물양)으로 예측되었고(표 2), 이때의 추출 조건은 추출 용매 pH5, 추출 온도 90 ℃, 추출 시간 96.82분 및 원물과 추출 용매의 비율 1:100로 각각 결정되었다. 즉, pH가 낮은 증류수에 원물:추출용매=1:100 비율로 90℃에서 97분 추출할 경우 가장 높은 수율의 E7A를 얻을 수 있는 것으로 확인되었다.
Ratio (mL/g) |
Temp (℃) |
pH | Time (min) |
E7A content (mg/g extract) | |
Predicted | Actual | ||||
100 | 90 | 5 | 97 | 26.0487 | 26.05±0.96 |
상기 결과를 토대로, 유근피로부터 최대 E7A 함량을 갖는 추출물을 수득하기 위한 추출 공정은 추출 용매 pH, 추출 온도, 추출용매 비율 및 추출 시간을 포함하는 추출 조건의 영향을 받은 것으로 확인되었고, 모든 변인조건에서 영향을 크게 받는 것으로 확인되었다. 또한, 추출조건에 따른 E7A 함량을 설명하는 유의성을 가진 회귀식이 수립되었고, E7A 추출에 최적인 추출조건을 결정할 수 있다.
실험예 6: 최적화 조건으로 추출된 유근피 추출물의 파골세포 억제효능 평가
상기 실험예 5에서 확립한 최적화 조건을 통하여 수득한 유근피(왕느릅나무) 추출물의 효능을 평가하기 위해 하기와 같은 실험을 수행하였다.
먼저, 최적화 유근피 추출물(이하, Opti)의 파골세포 분화 억제 효능을 평가하기 위해, TRAP 염색 분석을 수행한 결과, 1, 3, 10, 20 μM의 Opti를 처리한 경우 분화된 BMM 세포가 감소하였으며, 특히 다핵세포의 수는 E7A의 농도 의존적으로 감소하였다 (도 12A 및 B). 한편, 상기 농도의 Opti는 세포 독성을 나타내지 않았다 (도 12C). 또한, 파골세포 분화 수준을 확인할 수 있는 PIT 어세이에서도 Opti의 농도의존적으로 파골세포 분화가 억제됨을 확인하였다 (도 13).
다음으로, 20 μM의 Opti를 처리한 경우 파골세포 특이적 마커 유전자인 NFATc1, TRAP, DC-STAMP, CTSK 및 OSCAR의 발현 수준을 qPCR을 이용하여 분석한 결과, 대조군에 비해 마커 유전자의 발현이 억제됨을 확인하였다 (도 14A). 상기 결과는 NFATc1의 단백질 발현 수준을 웨스턴 블랏팅으로 확인한 결과에서도 동일하게 나타났다(도 14B).
상기 결과를 토대로, 본 발명에서 확립한 최적화 조건으로 추출한 유근피 추출물은 E7A 함량이 최대치로 포함되어 있는 바, 파골세포 분화 억제능이 우수한 것을 알 수 있다.
전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.
Claims (11)
1) 유근피 및 추출 용매를 이용하여 열수 추출을 수행하는 단계; 및
2) 상기 열수 추출물 또는 이의 분획물로부터 (2R,3R)-에피카테킨-7-O-β-D-아피오퓨라노사이드 [(2R,3R)-epicatechin-7-O-beta-D-apiofuranoside, E7A], 이의 입체이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물, 또는 이의 용매화물을 분리하는 단계
를 포함하는, E7A 제조 방법으로서,
상기 추출 용매의 pH는 4 내지 6인 것이고,
상기 열수 추출은 80 내지 100℃ 조건에서 수행되는 것이고,
상기 열수 추출은 60분 내지 120분 동안 수행되는 것이며,
상기 추출 용매 및 유근피의 부피/중량비는 80 (mL/g) 내지 120 (mL/g)인 것인, 방법.
2) 상기 열수 추출물 또는 이의 분획물로부터 (2R,3R)-에피카테킨-7-O-β-D-아피오퓨라노사이드 [(2R,3R)-epicatechin-7-O-beta-D-apiofuranoside, E7A], 이의 입체이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물, 또는 이의 용매화물을 분리하는 단계
를 포함하는, E7A 제조 방법으로서,
상기 추출 용매의 pH는 4 내지 6인 것이고,
상기 열수 추출은 80 내지 100℃ 조건에서 수행되는 것이고,
상기 열수 추출은 60분 내지 120분 동안 수행되는 것이며,
상기 추출 용매 및 유근피의 부피/중량비는 80 (mL/g) 내지 120 (mL/g)인 것인, 방법.
삭제
삭제
삭제
청구항 1에 있어서, 상기 유근피는 왕느릅나무(Ulmus macrocarpa)로부터 유래된 것인, 방법.
유근피 및 추출 용매를 이용하여 열수 추출을 수행하는 단계를 포함하는, 유근피 추출물 제조 방법으로서,
상기 추출 용매의 pH는 4 내지 6인 것이고,
상기 열수 추출은 80 내지 100℃ 조건에서 수행되는 것이고,
상기 열수 추출은 60분 내지 120분 동안 수행되는 것이며,
상기 추출 용매 및 유근피의 부피/중량비는 80 (mL/g) 내지 120 (mL/g)인 것이며,
상기 유근피 추출물은 (2R,3R)-에피카테킨-7-O-β-D-아피오퓨라노사이드 [(2R,3R)-epicatechin-7-O-beta-D-apiofuranoside, E7A], 이의 입체이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물, 또는 이의 용매화물을 포함하는 것인, 방법.
상기 추출 용매의 pH는 4 내지 6인 것이고,
상기 열수 추출은 80 내지 100℃ 조건에서 수행되는 것이고,
상기 열수 추출은 60분 내지 120분 동안 수행되는 것이며,
상기 추출 용매 및 유근피의 부피/중량비는 80 (mL/g) 내지 120 (mL/g)인 것이며,
상기 유근피 추출물은 (2R,3R)-에피카테킨-7-O-β-D-아피오퓨라노사이드 [(2R,3R)-epicatechin-7-O-beta-D-apiofuranoside, E7A], 이의 입체이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물, 또는 이의 용매화물을 포함하는 것인, 방법.
삭제
청구항 6에 있어서, 상기 유근피 추출물은 20 mg/g 내지 30 mg/g의 E7A를 포함하는 것인, 방법.
(2R,3R)-에피카테킨-7-O-β-D-아피오퓨라노사이드 [(2R,3R)-epicatechin-7-O-beta-D-apiofuranoside, E7A], 이의 입체이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물, 또는 이의 용매화물을 유효성분으로 포함하는, 골 관련 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물로서,
상기 골 관련 질환은 골다공증(osteoporosis), 골연화증(osteomalacia), 골감소증(osteopenia), 골결손, 골위축(bone atrophy), 골괴사, 섬유성골이형성증(fibrous dysplasia), 섬유성 골염, 페이젯병(Paget's disease), 칼슘 조절 이상의 대사성 골질환, 암세포의 골전이나 인공관절의 피로잔해(wear debris)에 의해 초래되는 뼈의 용해, 암(cancer)에 의한 골재흡수 질병, 뼈의 종양성 파괴(neoplastic destruction), 골절(fracture), 골용해(osteolysis), 골관절염(osteoarthritis), 골형성 부전증(osteogenesis imperfecta), 구루병, 내분비 질환 또는 약물에 의한 이차성 골소실, 치주염(periodontitis)에 의한 치조골 결손 및 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis) 으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것인, 약학 조성물.
상기 골 관련 질환은 골다공증(osteoporosis), 골연화증(osteomalacia), 골감소증(osteopenia), 골결손, 골위축(bone atrophy), 골괴사, 섬유성골이형성증(fibrous dysplasia), 섬유성 골염, 페이젯병(Paget's disease), 칼슘 조절 이상의 대사성 골질환, 암세포의 골전이나 인공관절의 피로잔해(wear debris)에 의해 초래되는 뼈의 용해, 암(cancer)에 의한 골재흡수 질병, 뼈의 종양성 파괴(neoplastic destruction), 골절(fracture), 골용해(osteolysis), 골관절염(osteoarthritis), 골형성 부전증(osteogenesis imperfecta), 구루병, 내분비 질환 또는 약물에 의한 이차성 골소실, 치주염(periodontitis)에 의한 치조골 결손 및 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis) 으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것인, 약학 조성물.
청구항 9에 있어서, 상기 E7A, 이의 입체이성질체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물, 또는 이의 용매화물은 청구항 1 및 5 중 어느 한 항의 방법을 이용하여 수득된 것인, 조성물.
유근피 추출물을 유효성분으로 포함하는, 골 관련 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물로서,
상기 유근피 추출물은 청구항 6 및 8 중 어느 한 항의 방법을 이용하여 수득된 것이고,
상기 골 관련 질환은 골다공증(osteoporosis), 골연화증(osteomalacia), 골감소증(osteopenia), 골결손, 골위축(bone atrophy), 골괴사, 섬유성골이형성증(fibrous dysplasia), 섬유성 골염, 페이젯병(Paget's disease), 칼슘 조절 이상의 대사성 골질환, 암세포의 골전이나 인공관절의 피로잔해(wear debris)에 의해 초래되는 뼈의 용해, 암(cancer)에 의한 골재흡수 질병, 뼈의 종양성 파괴(neoplastic destruction), 골절(fracture), 골용해(osteolysis), 골관절염(osteoarthritis), 골형성 부전증(osteogenesis imperfecta), 구루병, 내분비 질환 또는 약물에 의한 이차성 골소실, 치주염(periodontitis)에 의한 치조골 결손 및 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis) 으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것인, 조성물.
상기 유근피 추출물은 청구항 6 및 8 중 어느 한 항의 방법을 이용하여 수득된 것이고,
상기 골 관련 질환은 골다공증(osteoporosis), 골연화증(osteomalacia), 골감소증(osteopenia), 골결손, 골위축(bone atrophy), 골괴사, 섬유성골이형성증(fibrous dysplasia), 섬유성 골염, 페이젯병(Paget's disease), 칼슘 조절 이상의 대사성 골질환, 암세포의 골전이나 인공관절의 피로잔해(wear debris)에 의해 초래되는 뼈의 용해, 암(cancer)에 의한 골재흡수 질병, 뼈의 종양성 파괴(neoplastic destruction), 골절(fracture), 골용해(osteolysis), 골관절염(osteoarthritis), 골형성 부전증(osteogenesis imperfecta), 구루병, 내분비 질환 또는 약물에 의한 이차성 골소실, 치주염(periodontitis)에 의한 치조골 결손 및 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis) 으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것인, 조성물.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020220094032A KR102659689B1 (ko) | 2022-07-28 | 2022-07-28 | 유근피로부터 (2R,3R)-에피카테킨-7-O-β-D-아피오퓨라노사이드를 고수율로 추출하는 방법 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020220094032A KR102659689B1 (ko) | 2022-07-28 | 2022-07-28 | 유근피로부터 (2R,3R)-에피카테킨-7-O-β-D-아피오퓨라노사이드를 고수율로 추출하는 방법 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR20240016020A KR20240016020A (ko) | 2024-02-06 |
KR102659689B1 true KR102659689B1 (ko) | 2024-04-22 |
Family
ID=89858236
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020220094032A KR102659689B1 (ko) | 2022-07-28 | 2022-07-28 | 유근피로부터 (2R,3R)-에피카테킨-7-O-β-D-아피오퓨라노사이드를 고수율로 추출하는 방법 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
KR (1) | KR102659689B1 (ko) |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR102334305B1 (ko) | 2018-12-24 | 2021-12-03 | 건국대학교 글로컬산학협력단 | 블루베리 추출물을 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 조성물 |
KR102259909B1 (ko) * | 2019-08-14 | 2021-06-02 | 광주여자대학교 산학협력단 | 느릅나무속 식물로부터 카테킨 배당체를 고함량 포함하는 추출물을 제조하는 방법 |
-
2022
- 2022-07-28 KR KR1020220094032A patent/KR102659689B1/ko active IP Right Grant
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
ACS Omega, 2022, 7, 4840-4849 (2022.01.31.) |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
KR20240016020A (ko) | 2024-02-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR101697146B1 (ko) | 큰엉겅퀴로부터 실리마린의 고효율 추출하는 방법 | |
KR101062670B1 (ko) | 2,5-비스-아릴-3,4-디메틸테트라하이드로퓨란 리그난을 유효성분으로 포함하는 에이엠피케이의 활성화에 의해 매개되는 비만 관련 질환의 예방 또는 치료용 조성물 | |
KR102081984B1 (ko) | 새싹밀 추출물을 포함하는 골다공증 예방 또는 치료용 조성물 | |
KR101776001B1 (ko) | 판두라틴 또는 핑거루트(보에센베르기아 판두라타) 추출물을 포함하는 골 손실 질환 치료, 예방 또는 개선용 조성물 | |
KR101830222B1 (ko) | 포도 줄기 껍질로부터 분리된 레스베라트롤 유도체 화합물을 포함하는 항암제 조성물 | |
KR102659689B1 (ko) | 유근피로부터 (2R,3R)-에피카테킨-7-O-β-D-아피오퓨라노사이드를 고수율로 추출하는 방법 | |
KR20140129492A (ko) | 꾸지뽕나무 잎 추출물을 유효성분으로 포함하는 관절염의 예방 또는 치료용 조성물 | |
KR20220152006A (ko) | 귀리 추출물을 포함하는 골질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물 | |
KR102191279B1 (ko) | 헛개나무 뿌리 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 화합물을 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물 | |
KR101132174B1 (ko) | 에리스리나 아비시니카로부터 얻은 에이엠피케이를 활성화시키는 화합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 대사증후군 관련 질환의 예방 또는 치료용 조성물 | |
KR102565433B1 (ko) | 유근피 추출물 또는 이로부터 분리한 유효 단일물질을 포함하는 골 질환의 치료, 예방 및 개선용 조성물 | |
KR101332074B1 (ko) | 에스큘레틴을 유효성분으로 함유하는 골 손실 억제용 조성물 | |
KR101422189B1 (ko) | 신규한 로테논 유도체 및 이를 유효성분으로 함유하는 비만 예방 및 치료용 약학적 조성물 | |
KR100590726B1 (ko) | 목질진흙버섯 추출물 또는 이로부터 분리된 페린신 에이를유효성분으로 포함하는 심장순환계 질환의 예방 및 치료용조성물 | |
KR101791830B1 (ko) | 밀배아 추출물을 포함하는 여성암 억제 및 치료용 조성물 및 이의 제조방법 | |
KR101750854B1 (ko) | 프로폴리스 추출분획물, 또는 이로부터 소분획된 추출물을 유효성분으로 포함하는 항 헬리코박터 파이로리 조성물 | |
KR101713526B1 (ko) | 헛개나무 씨 유래 탁시폴린을 유효성분으로 하는 간독성 질환 치료, 예방 또는 개선용 조성물 | |
KR20200117501A (ko) | 신경세포 손상 개선 또는 신경세포 사멸 억제용 조성물 | |
KR101678646B1 (ko) | 빵 나무의 추출물, 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 암 예방 또는 치료용 조성물 | |
KR100909572B1 (ko) | 오보바톨 및 그 합성 유도체들을 유효성분으로 함유하는 당뇨와 대사증후군 질환 예방 및 치료용 조성물 | |
KR101130640B1 (ko) | 감국 추출물을 함유하는 골다공증 예방 또는 치료용 조성물 | |
US11864575B2 (en) | Composition comprising low temperature water extract of hibiscus manihot for anti-obesity | |
KR101470613B1 (ko) | 라티폴린을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 조성물 | |
KR102336045B1 (ko) | 신규 화합물 및 이를 유효성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 조성물 | |
KR101398737B1 (ko) | 아카시아속 나무 껍질 유래물을 함유하는 종양의 예방 및/또는 치료용 조성물 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
E902 | Notification of reason for refusal | ||
E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
GRNT | Written decision to grant |