KR102585965B1 - Manufacturing method of green tea extract with lower EGCG content to have improved hepatoprotective effect - Google Patents

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Abstract

본 발명의 일 측면에 따른 녹차 추출물 제조방법은 (1) 수분을 조정한 녹차 70 내지 90 중량%에 페니바실러스속(Paenibacillus sp.) 액상 균주 10 내지 30 중량 %를 접종하고, 70

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내지 80
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에서 숙성시키는 단계, (2) 상기 숙성 단계에서 숙성된 녹차를 건조 및 분쇄하여 녹차 분말을 수득하는 단계, (3) 상기 녹차 분말에 물 및 탄소수 1 내지 4의 알코올 중 적어도 어느 하나를 포함하는 용매를 가하고 50
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내지 70
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에서 추출하는 단계, 및 (4) 상기 추출단계에서 추출된 녹차 추출물에 80
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이상 100
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이하의 고온의 스팀을 3시간 이상 7시간 이하의 시간동안 가하는 고온처리 단계를 포함한다. 이에 따라, 녹차 추출물의 총 카테킨 함량은 증가하면서도, 간독성을 나타내는 특정 화합물의 함량이 감소하여, 기존의 녹차 추출물에 비해 간세포 손상이 적고 다량 섭취시에도 안정성이 높다. The method for producing green tea extract according to one aspect of the present invention is (1) inoculating 10 to 30% by weight of a liquid strain of the Paenibacillus sp. into 70 to 90% by weight of green tea whose moisture has been adjusted, and
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to 80
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(2) drying and pulverizing the green tea aged in the ripening step to obtain green tea powder, (3) adding a solvent containing at least one of water and an alcohol having 1 to 4 carbon atoms in the green tea powder. Add 50
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to 70
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80 to the green tea extract extracted in the extraction step, and (4)
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more than 100
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It includes a high temperature treatment step of applying the following high temperature steam for a period of time between 3 hours and 7 hours. Accordingly, while the total catechin content of the green tea extract increases, the content of specific compounds showing hepatotoxicity decreases, resulting in less liver cell damage and higher stability even when consumed in large quantities compared to existing green tea extracts.

Description

개선된 간보호 효과를 갖도록, EGCG함량을 낮춘 녹차추출물의 제조방법 {Manufacturing method of green tea extract with lower EGCG content to have improved hepatoprotective effect}Manufacturing method of green tea extract with lower EGCG content to have improved hepatoprotective effect}

본 발명은 성분 함량이 변화되어 특정 성분의 함량이 저하됨으로써 간독성이 완화될 수 있는 녹차 추출물의 제조 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method for producing a green tea extract in which hepatotoxicity can be alleviated by changing the content of ingredients and reducing the content of specific ingredients.

녹차는 오랜 전통을 지닌 음료로 동백과(Teaceac), 동백속(Camellia)에 속하는 차나무(Camellia sinensis)의 싹이나 잎을 가공한 것으로 한국을 비롯한 동아시아에서는 오랜 기간 동안 기호식품으로 사용되어 왔다. 녹차에는 생엽 중 75 내지 80%는 수분이고 나머지가 고형물로 폴리페놀 화합물(flavanols, flavandiols, flavonoid, phenolic acid)을 포함하고 있다. 특히, 녹차에 있는 카테킨(catechin)은 체중감량 및 콜레스테롤 저하 효능을 가지고 있는 것으로 알려져, 녹차 추출물이 비만 혹은 대사 질환을 개선시키기 위한 보조 식품 등으로 널리 쓰이고 있다. Green tea is a beverage with a long tradition, made from the buds or leaves of Camellia sinensis, a member of the Camellia family, and has been used as a favorite food for a long time in East Asia, including Korea. Green tea contains polyphenol compounds (flavanols, flavandiols, flavonoids, and phenolic acids), with 75 to 80% of the fresh leaves being water and the remainder being solids. In particular, catechin in green tea is known to have weight loss and cholesterol-lowering effects, and green tea extract is widely used as a supplement to improve obesity or metabolic diseases.

하지만 최근 다량의 녹차 추출물을 섭취하게 되면 간에 손상을 줄 수 있다는 연구 결과들이 보고되고 있어 녹차 추출물에 대한 안전성 이슈가 대두되고 있다. 따라서, 녹차의 간 손상을 줄인 녹차 추출물의 조성 발굴이 필요한 실정이다. 특히, 녹차 추출물에 포함된 (-)-에피갈로카테킨 갈레이트((-)-epigallocatechin gallate, EGCG)는 간독성으로 인해 식약처로부터 일일섭취량이 300 mg 이하로 설정된 성분으로, EGCG의 함량을 줄여 간독성을 완화할 수 있는 녹차 추출물 제조 방법의 발굴이 필요한 실정이다. However, recent studies have reported that consuming large amounts of green tea extract can cause liver damage, raising safety issues regarding green tea extract. Therefore, there is a need to discover the composition of green tea extract that reduces liver damage from green tea. In particular, (-)-epigallocatechin gallate (EGCG), contained in green tea extract, is an ingredient whose daily intake has been set at 300 mg or less by the Ministry of Food and Drug Safety due to hepatotoxicity, and the content of EGCG must be reduced. There is a need to discover a method of producing green tea extract that can alleviate hepatotoxicity.

본 발명은 녹차 카테킨 중 (-)-에피갈로카테킨 갈레이트((-)-epigallocatechin gallate, EGCG)의 함량을 저하시켜, 간독성이 완화될 수 있는 녹차 추출물의 제조 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다. The purpose of the present invention is to provide a method for producing a green tea extract that can alleviate hepatotoxicity by reducing the content of (-)-epigallocatechin gallate (EGCG) among green tea catechins. .

상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 (1) 수분을 조정한 녹차 70 내지 90 중량%에 페니바실러스속(Paenibacillus sp.) 액상 균주 10 내지 30 중량 %를 접종하고, 70oC 내지 80oC에서 숙성시키는 단계, (2) 상기 숙성 단계에서 숙성된 녹차를 건조 및 분쇄하여 녹차 분말을 수득하는 단계, (3) 상기 녹차 분말에 물 및 탄소수 1 내지 4의 알코올 중 적어도 어느 하나를 포함하는 용매를 가하고 50oC 내지 70oC에서 추출하는 단계, 및 (4) 상기 추출단계에서 추출된 녹차 추출물에 80oC 이상 100oC 이하의 고온의 스팀을 3시간 이상 7시간 이하의 시간동안 가하는 고온처리 단계를 포함하는 녹차 추출물 제조방법을 제공한다. In order to achieve the above object, the present invention (1) inoculates 10 to 30% by weight of a liquid strain of Paenibacillus sp. into 70 to 90% by weight of green tea with adjusted moisture, and inoculates 70 to 30% by weight of liquid strain at 70 o C to 80 o Aging in C, (2) drying and pulverizing the green tea aged in the ripening step to obtain green tea powder, (3) the green tea powder containing at least one of water and an alcohol having 1 to 4 carbon atoms. Adding a solvent and extracting at 50 o C to 70 o C, and (4) applying high temperature steam of 80 o C to 100 o C to the green tea extract extracted in the extraction step for a period of not less than 3 hours but not more than 7 hours. A method for producing green tea extract including a high temperature treatment step is provided.

본 발명의 일 측면에 따르면, 녹차 추출물 제조 방법은 페니바실러스속 균주 접종과 고온 스팀처리를 병행함에 따라 녹차 추출물의 총 카테킨 함량 대비 (-)-에피갈로카테킨 갈레이트((-)-epigallocatechin gallate, EGCG)의 함량을 20% 미만의 낮은 값으로 가질 수 있어, 기존의 녹차 추출물에 비해 간독성이 낮아 간세포 손상이 적고 다량 섭취시에도 안정성이 높을 수 있다. According to one aspect of the present invention, the method for producing green tea extract involves inoculating a strain of the genus Pennybacillus and high-temperature steaming in parallel, thereby producing (-)-epigallocatechin gallate ((-)-epigallocatechin gallate) compared to the total catechin content of the green tea extract. , EGCG) content can be as low as less than 20%, so it has lower hepatotoxicity compared to existing green tea extracts, resulting in less damage to liver cells and higher stability even when consumed in large quantities.

도 1은 실험예 2에 따른 녹차 추출물의 간세포 독성 확인 실험 결과를 나타낸 것이다.Figure 1 shows the results of an experiment confirming hepatocellular toxicity of green tea extract according to Experimental Example 2.

본 명세서에서 "녹차 추출물"은 추출방법, 추출용매, 추출된 성분 또는 추출물의 형태를 불문하고, 차과에 속하는 상록수인 차(카멜리아 시넨시스; Camellia sinensis)로부터 추출한 것 또는 바실러스 서브틸리스(Bacillussubtilis spp.)를 접종하고 발효시킨 차잎 등으로부터 추출한 것을 포함하고, 상기 추출한 것을 특정 용매로 분획한 분획물을 포함한다. 상기 차는 차나무 잎, 꽃, 줄기, 열매, 뿌리, 줄기, 및 뿌리의 심재로 구성된 군에서 선택되는 하나 이상이 포함되며, 바람직하게는 잎일 수 있다. 또한, 상기 추출물의 형태는 바람직하게는 분말형태일 수 있다. 상기 추출 또는 분획은 물, 유기 용매, 또는 이들의 혼합용매를 사용하여 할 수 있다. 유기용매는 알코올, 이소프로판올, 아세톤, 헥산, 에틸아세테이트, 이산화탄소, 또는 이들 중 둘 이상의 혼합용매를 사용할 수 있으나 이에 한정되지는 않으며, 녹차의 유효 성분이 파괴되지 않거나 최소화된 조건에서 실온 또는 가온하여 추출 또는 분획할 수 있다. 상기 알코올은 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올일 수 있다. 추출 또는 분획의 횟수나 방법은 특별히 제한되지 않으며, 예를 들어 냉침 추출, 초음파 추출, 환류 냉각 추출, 열수 추출 등의 방법을 사용할 수 있고, 바람직하게는 냉침 또는 가온하여 유효성분을 추출 또는 분획하고 여과한 다음, 그 여과액을 감압농축하여 본 발명의 녹차 추출물을 얻을 수 있다.In this specification, “green tea extract” refers to extract from tea (Camellia sinensis), an evergreen tree belonging to the tea family, or Bacillus subtilis spp, regardless of the extraction method, extraction solvent, extracted component, or form of the extract. .) includes extracts from inoculated and fermented tea leaves, etc., and includes fractions obtained by fractionating the extracted extracts with a specific solvent. The tea includes one or more selected from the group consisting of tea tree leaves, flowers, stems, fruits, roots, stems, and root heartwood, and may preferably be leaves. Additionally, the extract may preferably be in powder form. The extraction or fractionation can be performed using water, an organic solvent, or a mixed solvent thereof. The organic solvent may be alcohol, isopropanol, acetone, hexane, ethyl acetate, carbon dioxide, or a mixed solvent of two or more of these, but is not limited thereto, and is extracted at room temperature or by heating under conditions in which the active ingredients of green tea are not destroyed or minimized. Or it can be fractionated. The alcohol may be a lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms. The number or method of extraction or fractionation is not particularly limited, and for example, methods such as cold immersion extraction, ultrasonic extraction, reflux cooling extraction, hot water extraction, etc. can be used. Preferably, the active ingredient is extracted or fractionated by cold immersion or heating. After filtration, the filtrate is concentrated under reduced pressure to obtain the green tea extract of the present invention.

본 명세서에서 "에피 카테킨"이란, 에피갈로카테킨(epigallocatechin, EGC), (-)에피카테킨((-)epicatechin, EC), (-)-에피갈로카테킨 갈레이트((-)-epigallocatechin gallate, EGCG), 및 에피카테킨 3-O-갈레이트(epicatechin-3-O-gallate, ECG)를 포함하는 것이다. As used herein, “epigallocatechin” refers to epigallocatechin (EGC), (-)epicatechin (EC), (-)-epigallocatechin gallate, EGCG), and epicatechin-3-O-gallate (ECG).

본 명세서에서 "에피 카테킨 에피머"란, 갈로카테킨(gallocatechin, GC), 카테킨(catechin, C), (-)-갈로카테킨 갈레이트((-)-gallocatechin gallate, GCG) 및 카테킨 갈레이트(catechin gallate, CG)를 포함하는 것이다.As used herein, “epicatechin epimer” refers to gallocatechin (GC), catechin (C), (-)-gallocatechin gallate (GCG), and catechin gallate (catechin). gallate, CG).

본 명세서에서 "총 카테킨"은 에피 카테킨 4종(에피갈로카테킨(EGC), (-)에피카테킨(EC), (-)-에피갈로카테킨갈레이트(EGCG), 에피카테킨 3-O-갈레이트(ECG)), 갈로카테킨(gallocatechin, GC), 카테킨(catechin, C), (-)-갈로카테킨 갈레이트((-)-gallocatechin gallate, GCG) 및 카테킨 갈레이트(catechin gallate, CG)의 총합을 의미한다.In this specification, “total catechin” refers to four types of epicatechin (epigallocatechin (EGC), (-)epicatechin (EC), (-)-epigallocatechin gallate (EGCG), and epicatechin 3-O-gallate. (ECG)), the sum of gallocatechin (GC), catechin (C), (-)-gallocatechin gallate (GCG), and catechin gallate (CG) means.

본 발명은 일 측면에서, 총 카테킨 전체 함량을 기준으로, (-)-에피갈로카테킨 갈레이트((-)-epigallocatechin gallate, EGCG)의 함량이 20 중량% 이하인, 간독성이 완화된 녹차 추출물에 관한 것일 수 있다. In one aspect, the present invention provides a green tea extract with reduced hepatotoxicity, wherein the content of (-)-epigallocatechin gallate (EGCG) is 20% by weight or less, based on the total catechin content. It may be about.

일 측면에서, 상기 EGCG는 상기 총 카테킨 전체 함량을 기준으로 20 중량% 이하, 15 중량% 이하, 13 중량% 이하, 12 중량% 이하, 11 중량% 이하, 10 중량% 이하일 수 있으며, 다른 측면에서 상기 EGCG는 상기 총 카테킨 전체 함량을 기준으로 5 중량% 이상, 6 중량% 이상, 7 중량% 이상, 8 중량% 이상, 9 중량% 이상, 9.7 중량% 이상일 수 있다. 상기 EGCG가 상기 함량 범위로 포함되는 경우에 우수한 간독성 완화 효능을 나타낼 수 있다. In one aspect, the EGCG may be 20% by weight or less, 15% by weight or less, 13% by weight or less, 12% by weight or less, 11% by weight or less, and 10% by weight or less based on the total catechin content. In another aspect, The EGCG may be at least 5% by weight, at least 6% by weight, at least 7% by weight, at least 8% by weight, at least 9% by weight, and at least 9.7% by weight based on the total catechin content. When the EGCG is included in the above content range, it can exhibit excellent hepatotoxicity alleviating efficacy.

일 측면에서, 상기 EGCG의 함량은 추출물 총 중량을 기준으로, 10 중량% 이하일 수 있다. 상기 EGCG의 함량은 추출물 총 중량을 기준으로 10 중량% 이하, 9 중량% 이하, 8.7 중량% 이하, 8.5 중량% 이하일 수 있다. In one aspect, the content of EGCG may be 10% by weight or less, based on the total weight of the extract. The content of the EGCG may be 10% by weight or less, 9% by weight or less, 8.7% by weight or less, and 8.5% by weight or less based on the total weight of the extract.

일 측면에서, 총 카테킨 전체 함량을 기준으로, (-)-에피카테킨 갈레이트((-)-epicatechingallate, EGC) 함량은 4 내지 15 중량% 일 수 있다. 총 카테킨 전체 함량을 기준으로, (-)-에피카테킨 갈레이트((-)-epicatechingallate, EGC) 함량은 6 내지 10 중량% 일 수 있다. In one aspect, based on the total catechin content, the (-)-epicatechin gallate ((-)-epicatechingallate, EGC) content may be 4 to 15% by weight. Based on the total catechin content, the (-)-epicatechin gallate ((-)-epicatechingallate, EGC) content may be 6 to 10% by weight.

상기 EGC는 상기 총 카테킨 전체 함량을 기준으로 4 중량% 이상, 5 중량% 이상, 5.2 중량% 이상, 5.27 중량% 이상, 5.5 중량% 이상, 6 중량% 이상, 7중량% 이상, 8중량% 이상, 9 중량% 이상일 수 있다. 다른 측면에서, 상기 EGCG는 상기 총 카테킨 전체 함량을 기준으로 15 중량% 이하, 14 중량% 이하, 13 중량% 이하, 12 중량% 이하, 11 중량% 이하, 10 중량% 이하 일 수 있다. The EGC is more than 4% by weight, more than 5% by weight, more than 5.2% by weight, more than 5.27% by weight, more than 5.5% by weight, more than 6% by weight, more than 7% by weight, more than 8% by weight based on the total catechin content. , may be 9% by weight or more. In another aspect, the EGCG may be 15% by weight or less, 14% by weight or less, 13% by weight or less, 12% by weight or less, 11% by weight or less, and 10% by weight or less based on the total catechin content.

일 측면에서, 총 카테킨 전체 함량을 기준으로, (-)-갈로카테킨 갈레이트((-)-gallocatechin gallate, GCG)의 함량은 15 내지 35 중량% 일 수 있다. 총 카테킨 전체 함량을 기준으로, (-)-갈로카테킨 갈레이트((-)-gallocatechin gallate, GCG)의 함량은 22 내지 27 중량% 일 수 있다.In one aspect, based on the total catechin content, the content of (-)-gallocatechin gallate (GCG) may be 15 to 35% by weight. Based on the total catechin content, the content of (-)-gallocatechin gallate (GCG) may be 22 to 27% by weight.

(-)-갈로카테킨 갈레이트((-)-gallocatechin gallate, GCG)의 함량은 상기 총 카테킨 전체 함량을 기준으로 15 중량% 이상, 18 중량% 이상, 20 중량% 이상, 21 중량% 이상, 22 중량% 이상, 23 중량% 이상, 24 중량% 이상, 24.5 중량% 이상 일 수 있다. (-)-갈로카테킨 갈레이트((-)-gallocatechin gallate, GCG)의 함량은 상기 총 카테킨 전체 함량을 기준으로 35 중량% 이하, 32 중량% 이하, 30 중량% 이하, 28 중량% 이하, 27 중량% 이하, 26 중량% 이하, 25 중량% 이하 일 수 있다.The content of (-)-gallocatechin gallate (GCG) is 15% by weight or more, 18% by weight or more, 20% by weight or more, 21% by weight or more, 22% based on the total catechin content. It may be more than weight%, more than 23% by weight, more than 24% by weight, and more than 24.5% by weight. The content of (-)-gallocatechin gallate (GCG) is 35% by weight or less, 32% by weight or less, 30% by weight or less, 28% by weight or less, 27% based on the total catechin content. It may be % by weight or less, 26% by weight or less, and 25% by weight or less.

다른 구현 예로서, 상기 추출물 내의 ECG, EGCG 및 GCG의 총 함량은 상기 추출물 총 중량을 기준으로 30 중량% 이하일 수 있다. 일 측면에서 상기 ECG, EGCG 및 GCG의 총 함량은 추출물 총 중량을 기준으로 30 중량% 이하, 25 중량%이하, 20 중량% 이하, 18 중량% 이하, 16 중량% 이하, 15 중량% 이하, 14 중량% 이하, 12 중량% 이하, 11 중량% 이하, 10.86 중량% 이하, 10 중량% 이하 또는 9 중량% 이하일 수 있다. 다른 측면에서 상기 ECG, EGCG 및 GCG의 총 함량은 상기 추출물 총 중량을 기준으로 8 중량% 이상, 10 중량% 이상, 10.86 중량% 이상, 11 중량% 이상, 12 중량% 이상, 13 중량% 이상, 14 중량% 이상, 16 중량% 이상, 18 중량% 이상, 20 중량% 이상 또는 25 중량% 이상일 수 있다. 상기 추출물 내의 ECG, EGCG 및 GCG의 총 함량은 예를 들어, 20 중량% 이상 25 중량% 이하일 수 있다. As another embodiment, the total content of ECG, EGCG, and GCG in the extract may be 30% by weight or less based on the total weight of the extract. In one aspect, the total content of the ECG, EGCG and GCG is 30% by weight or less, 25% by weight or less, 20% by weight or less, 18% by weight or less, 16% by weight or less, 15% by weight or less, 14% by weight or less, based on the total weight of the extract. It may be less than 10% by weight, less than 12% by weight, less than 11% by weight, less than 10.86% by weight, less than 10% by weight, or less than 9% by weight. In another aspect, the total content of the ECG, EGCG and GCG is 8% by weight or more, 10% by weight or more, 10.86% by weight or more, 11% by weight or more, 12% by weight or more, 13% by weight or more, based on the total weight of the extract. It may be at least 14% by weight, at least 16% by weight, at least 18% by weight, at least 20% by weight, or at least 25% by weight. The total content of ECG, EGCG and GCG in the extract may be, for example, 20% by weight or more and 25% by weight or less.

다른 구현 예로서, 상기 추출물 내의 에피 카테킨 함량, 즉, (-)-에피갈로카테킨 갈레이트((-)-epigallocatechin gallate, EGCG), 에피갈로카테킨(epigallocatechin, EGC), (-)에피카테킨((-)epicatechin, EC), 및 에피카테킨 3-O-갈레이트(epicatechin 3-O-gallate, ECG)의 총 함량은 상기 추출물 총 중량을 기준으로 10 중량% 이상 20 중량% 이하일 수 있다. 일 측면에서 상기 에피 카테킨 함량은 상기 추출물 총 중량을 기준으로 20 중량% 이하, 18 중량% 이하, 16 중량% 이하, 15 중량% 이하, 14 중량% 이하, 12 중량% 이하, 11.1 중량% 이하 또는 10 중량% 이하일 수 있다. 다른 측면에서 상기 에피 카테킨 함량은 상기 추출물 총 중량을 기준으로 9 중량% 이상, 10 중량% 이상, 11 중량% 이상, 12 중량% 이상, 13 중량% 이상, 14 중량% 이상, 16 중량% 이상 또는 18 중량% 이상일 수 있다.As another embodiment, the epicatechin content in the extract, i.e., (-)-epigallocatechin gallate (EGCG), epigallocatechin (EGC), (-)epicatechin ( The total content of (-)epicatechin (EC) and epicatechin 3-O-gallate (ECG) may be 10% by weight or more and 20% by weight or less based on the total weight of the extract. In one aspect, the epicatechin content is 20% by weight or less, 18% by weight or less, 16% by weight or less, 15% by weight or less, 14% by weight or less, 12% by weight or less, 11.1% by weight or less, or It may be 10% by weight or less. In another aspect, the epicatechin content is 9% by weight, 10% by weight, 11% by weight, 12% by weight, 13% by weight, 14% by weight, 16% by weight or more based on the total weight of the extract. It may be 18% by weight or more.

다른 구현 예로서, 상기 추출물 내의 8종 카테킨의 총 카테킨 함량, 즉, 상기 추출물 내의 (-)-에피갈로카테킨 갈레이트((-)-epigallocatechin gallate, EGCG), 에피갈로카테킨(epigallocatechin, EGC), (-)에피카테킨((-)epicatechin, EC), 에피카테킨 3-O-갈레이트(epicatechin 3-O-gallate, ECG), 갈로카테킨 갈레이트(gallocatechin gallate, GCG), 갈로카테킨(gallocatechin, GC), 카테킨(catechin, C) 및 카테킨 갈레이트(catechin gallate, CG)의 총 함량은 상기 추출물 총 중량을 기준으로 37 내지 47 중량%일 수 있다. 일 측면에서 상기 총 카테킨 함량은 상기 추출물 총 중량을 기준으로 37 중량% 이상, 38 중량% 이상, 39 중량% 이상, 40 중량% 이상, 41 중량% 이상, 42 중량% 이상, 42.5 중량% 이상일 수 있다. 다른 측면에서 상기 총 카테킨 함량은 상기 추출물 총 중량을 기준으로 47 중량% 이하, 46 중량% 이하, 45 중량% 이하, 44 중량% 이하, 43 중량% 이하, 42.7 중량% 이하일 수 있다. As another embodiment, the total catechin content of eight types of catechins in the extract, i.e., (-)-epigallocatechin gallate (EGCG), epigallocatechin (EGC) in the extract ), (-)epicatechin (EC), epicatechin 3-O-gallate (ECG), gallocatechin gallate (GCG), gallocatechin (GC) ), the total content of catechin (C) and catechin gallate (CG) may be 37 to 47% by weight based on the total weight of the extract. In one aspect, the total catechin content may be at least 37% by weight, at least 38% by weight, at least 39% by weight, at least 40% by weight, at least 41% by weight, at least 42% by weight, and at least 42.5% by weight, based on the total weight of the extract. there is. In another aspect, the total catechin content may be 47% by weight or less, 46% by weight or less, 45% by weight or less, 44% by weight or less, 43% by weight or less, and 42.7% by weight or less based on the total weight of the extract.

또 다른 구현 예로서, 상기 추출물은 물 및 C1 내지 C4의 알코올 중 어느 하나 이상에 의해 1회 이상 추출한 추출물일 수 있다. 일 측면에서 상기 알코올은 에탄올일 수 있다. 다른 측면에서 상기 알코올은 20% 이상, 30% 이상, 40% 이상, 50% 이상, 60% 이상 또는 70% 이상의 에탄올일 수 있다. 또 다른 측면에서 상기 알코올은 70% 이하, 60% 이하, 50% 이하, 40% 이하 또는 30% 이하의 에탄올일 수 있다. As another embodiment, the extract may be an extract extracted one or more times with any one or more of water and C1 to C4 alcohol. In one aspect, the alcohol may be ethanol. In another aspect, the alcohol may be 20% or more, 30% or more, 40% or more, 50% or more, 60% or more, or 70% or more ethanol. In another aspect, the alcohol may be 70% or less, 60% or less, 50% or less, 40% or less, or 30% or less ethanol.

일 실시양태로서, 상기 추출물은 식품 또는 약학 조성물에 함유될 수 있다. In one embodiment, the extract may be contained in a food or pharmaceutical composition.

일 구현 예로서, 상기 식품 또는 약학 조성물 내 상기 녹차 추출물의 함량은 상기 조성물 전체 중량 대비 1 중량% 내지 100 중량% 일 수 있다. 일 측면에서, 상기 조성물 내 상기 추출물의 함량은 1 중량% 이상, 10 중량% 이상, 20 중량% 이상, 30 중량% 이상, 40 중량% 이상, 50 중량% 이상, 60 중량% 이상, 70 중량% 이상, 80 중량% 이상 또는 90 중량% 이상일 수 있다. 다른 측면에서, 상기 조성물 내 상기 추출물의 함량은 100 중량% 이하, 90 중량% 이하, 80 중량% 이하, 70 중량% 이하, 60 중량% 이하, 50 중량% 이하, 40 중량% 이하, 30 중량% 이하 또는 20 중량% 이하일 수 있다.As one embodiment, the content of the green tea extract in the food or pharmaceutical composition may be 1% by weight to 100% by weight based on the total weight of the composition. In one aspect, the content of the extract in the composition is at least 1% by weight, at least 10% by weight, at least 20% by weight, at least 30% by weight, at least 40% by weight, at least 50% by weight, at least 60% by weight, and at least 70% by weight. It may be more than 80% by weight or more than 90% by weight. In another aspect, the content of the extract in the composition is 100% by weight or less, 90% by weight or less, 80% by weight or less, 70% by weight or less, 60% by weight or less, 50% by weight or less, 40% by weight or less, 30% by weight. It may be less than or equal to 20% by weight.

다른 구현 예로서, 상기 녹차 추출물의 투여량은 5mg/kg/일 내지 1000mg/kg/일일 수 있다. 일 측면에서, 상기 투여량은 5mg/kg/일 이상, 100mg/kg/일 이상, 200mg/kg/일 이상, 300mg/kg/일 이상, 400mg/kg/일 이상, 500mg/kg/일 이상, 600mg/kg/일 이상, 700mg/kg/일 이상, 800mg/kg/일 이상, 또는 900mg/kg/일 이상일 수 있다. 다른 측면에서, 상기 투여량은 1000mg/kg/일 이하, 900mg/kg/일 이하, 800mg/kg/일 이하, 700mg/kg/일 이하, 600mg/kg/일 이하, 500mg/kg/일 이하, 400mg/kg/일 이하, 300mg/kg/일 이하, 200mg/kg/일 이하, 100mg/kg/일 이하, 50mg/kg/일 이하 또는 10mg/kg/일 이하일 수 있다. As another embodiment, the dosage of the green tea extract may be 5 mg/kg/day to 1000 mg/kg/day. In one aspect, the dosage is 5 mg/kg/day or more, 100 mg/kg/day or more, 200 mg/kg/day or more, 300 mg/kg/day or more, 400 mg/kg/day or more, 500 mg/kg/day or more, It may be more than 600 mg/kg/day, more than 700 mg/kg/day, more than 800 mg/kg/day, or more than 900 mg/kg/day. In another aspect, the dosage is 1000 mg/kg/day or less, 900 mg/kg/day or less, 800 mg/kg/day or less, 700 mg/kg/day or less, 600 mg/kg/day or less, 500 mg/kg/day or less, It may be 400 mg/kg/day or less, 300 mg/kg/day or less, 200 mg/kg/day or less, 100 mg/kg/day or less, 50 mg/kg/day or less, or 10 mg/kg/day or less.

상기 식품 조성물의 제형은 특별히 한정되지 않으나, 예를 들어, 정제, 과립제, 환제, 분말제, 드링크제와 같은 액제, 캐러멜, 겔, 바, 티백 등으로 제형화될 수 있다. 각 제형의 식품 조성물은 유효 성분 이외에 해당 분야에 서 통상적으로 사용되는 성분들을 제형 또는 사용 목적에 따라 당업계의 통상의 기술자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있으며, 다른 원료와 동시에 적용할 경우 상승 효과가 일어날 수 있다. 또한 상기 식품은 건강기능식품일 수도 있다. The formulation of the food composition is not particularly limited, but may be formulated into, for example, tablets, granules, pills, powders, liquids such as drinks, caramels, gels, bars, tea bags, etc. The food composition of each formulation can be appropriately selected and mixed by a person skilled in the art without difficulty, depending on the formulation or purpose of use, of ingredients commonly used in the field in addition to the active ingredients, and can increase when applied simultaneously with other raw materials. effects can occur. Additionally, the food may be a health functional food.

상기 조성물은 단순 섭취, 음용, 주사 투여, 스프레이 투여 또는 스퀴즈 투여 등 다양한 방법으로 투여될 수 있다. The composition can be administered in various ways, such as simple ingestion, drinking, injection, spray administration, or squeeze administration.

본 발명의 일측면에 따른 식품 조성물에 있어서, 상기 유효 성분의 투여량 결정은 당업계의 통상의 기술자의 수준 내에 있으며, 투여하고자 하는 대상의 연령, 건강 상태, 합병증 등 다양한 요인에 따라 달라질 수 있다. In the food composition according to one aspect of the present invention, the determination of the dosage of the active ingredient is within the level of a person skilled in the art, and may vary depending on various factors such as the age of the subject to be administered, health status, complications, etc. .

본 발명의 일측면에 따른 식품 조성물은, 예를 들어, 츄잉껌, 캐러멜 제품, 캔디류, 빙과류, 과자류 등의 각종 식품류, 청량 음료, 미네랄 워터, 알코올 음료 등의 음료 제품, 비타민이나 미네랄 등을 포함한 건강기능식품 제품일 수 있다. Food compositions according to one aspect of the present invention include, for example, various food products such as chewing gum, caramel products, candies, ice cream, and confectionery, beverage products such as soft drinks, mineral water, and alcoholic beverages, and health products containing vitamins and minerals, etc. It may be a functional food product.

상기 외에, 본 발명의 일 측면에 따른 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 증진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 포함할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 일측면에 따른 식품 조성물들은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 포함할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.In addition to the above, the food composition according to one aspect of the present invention contains various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), flavoring agents such as synthetic and natural flavors, colorants and enhancers (cheese, chocolate, etc.), pectic acid, and the like. It may include salts, alginic acid and its salts, organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohol, carbonating agents used in carbonated beverages, etc. In addition, food compositions according to one aspect of the present invention may include pulp for the production of natural fruit juice, fruit juice beverages, and vegetable beverages. These ingredients can be used independently or in combination.

이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않으나 본 발명의 일측면에 따른 조성물 100 중량부 당 0 내지 약 60 중량부의 범위에서 포함되는 것이 일반적이다.The ratio of these additives is not that important, but is generally included in the range of 0 to about 60 parts by weight per 100 parts by weight of the composition according to one aspect of the present invention.

본 발명의 일 측면에 따른 상기 식품 조성물은 녹차 추출물의 간독성이 완화된 것일 수 있다. 보다 구체적으로, 상기 식품 조성물은 녹차 추출물 중 EGCG에 의한 간독성이 완화된 것일 수 있다.The food composition according to one aspect of the present invention may have reduced hepatotoxicity of green tea extract. More specifically, the food composition may have reduced hepatotoxicity caused by EGCG in green tea extract.

본 발명의 일측면에 따른 상기 약학 조성물은 경구, 비경구, 직장, 국소, 경피, 정맥 내, 근육 내, 복강 내, 피하 등으로 투여될 수 있다. 경구 투여를 위한 제형은 정제(錠劑), 환제(丸劑), 연질 및 경질 캅셀제, 과립제(顆粒劑), 산제, 세립제, 액제, 유탁제(乳濁濟) 또는 펠렛제일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 비경구 투여를 위한 제형은 용액제, 현탁제, 유액제, 겔, 주사제, 점적제, 좌제(坐劑), 패취 또는 분무제일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 제형은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 용이하게 제조될 수 있으며, 계면 활성제, 부형제, 수화제, 유화 촉진제, 현탁제, 삼투압 조절을 위한 염 또는 완충제, 착색제, 향신료, 안정화제, 방부제, 보존제 또는 기타 상용하는 보조제를 추가로 포함할 수 있다. The pharmaceutical composition according to one aspect of the present invention may be administered orally, parenterally, rectally, topically, transdermally, intravenously, intramuscularly, intraperitoneally, subcutaneously, etc. Dosage forms for oral administration may be tablets, pills, soft and hard capsules, granules, powders, fine granules, solutions, emulsions, or pellets, but are limited thereto. That is not the case. Formulations for parenteral administration may be solutions, suspensions, emulsions, gels, injections, drops, suppositories, patches, or sprays, but are not limited thereto. The formulation can be easily prepared according to conventional methods in the field, and contains surfactants, excipients, wetting agents, emulsification accelerators, suspending agents, salts or buffers for adjusting osmotic pressure, colorants, flavorings, stabilizers, preservatives, preservatives or Other commonly used supplements may be additionally included.

본 발명의 일 측면에 따른 상기 약학 조성물은 약학적으로 허용가능한 염을 포함할 수도 있는데, 상기 염은 (1)염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산 등과 같은 무기산으로 형성되거나; 또는 아세트산, 프로파이온산, 헥사노산, 시클로펜테인프로피온산, 글라이콜산, 피루브산, 락트산, 말론산, 숙신산, 말산, 말레산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 3-(4-히드록시벤조일) 벤조산, 신남산, 만델산, 메테인설폰산, 에테인설폰산, 1,2-에테인-디설폰산, 2-히드록시에테인설폰산, 벤젠설폰산, 4-클로로벤젠설폰산, 2-나프탈렌설폰산, 4-톨루엔설폰산, 캄퍼설폰산, 4-메틸바이시클로 [2,2,2]-oct-2-엔-1-카르복실산, 글루코헵톤산, 3-페닐프로파이온산, 트리메틸아세트산, tert-부틸아세트산, 라우릴 황산, 글루콘산, 글루탐산, 히드록시나프토산, 살리실산, 스테아르산, 뮤콘산과 같은 유기산으로 형성되는 산 부가염(acid addition salt); 또는 (2) 모 화합물에 존재하는 산성 프로톤이 치환될 때 형성되는 염을 포함할 수 있다. The pharmaceutical composition according to one aspect of the present invention may include a pharmaceutically acceptable salt, which (1) is formed from an inorganic acid such as hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, nitric acid, phosphoric acid, etc.; or acetic acid, propionic acid, hexanoic acid, cyclopentanepropionic acid, glycolic acid, pyruvic acid, lactic acid, malonic acid, succinic acid, malic acid, maleic acid, fumaric acid, tartaric acid, citric acid, benzoic acid, 3-(4-hydroxybenzoyl) Benzoic acid, cinnamic acid, mandelic acid, methanesulfonic acid, ethanesulfonic acid, 1,2-ethane-disulfonic acid, 2-hydroxyethanesulfonic acid, benzenesulfonic acid, 4-chlorobenzenesulfonic acid, 2-naphthalenesulfonic acid, 4-Toluenesulfonic acid, camphorsulfonic acid, 4-methylbicyclo [2,2,2]-oct-2-ene-1-carboxylic acid, glucoheptonic acid, 3-phenylpropionic acid, trimethylacetic acid, tert -acid addition salts formed with organic acids such as butylacetic acid, lauryl sulfate, gluconic acid, glutamic acid, hydroxynaphthoic acid, salicylic acid, stearic acid, and muconic acid; or (2) a salt formed when an acidic proton present in the parent compound is replaced.

본 발명의 일측면에 따른 상기 약학 조성물의 적용량 또는 투여량은 투여 받을 대상의 연령, 성별, 체중, 병리상태 및 그 심각도, 투여 경로 또는 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 유효성분 투여량 결정은 당업계 통상의 기술자의 수준 내에 있다.The application amount or dosage of the pharmaceutical composition according to one aspect of the present invention will vary depending on the age, gender, weight, pathological condition and severity of the subject to be administered, route of administration, or the judgment of the prescriber. Determination of active ingredient dosage based on these factors is within the level of those skilled in the art.

본 발명은 다른 측면에서, (1) 녹차 70 내지 90 중량%에 페니바실러스속(Paenibacillus sp.) 액상 균주 10 내지 30 중량 %를 접종하고, 70oC 내지 80oC에서 숙성시키는 단계; (2) 상기 숙성 단계에서 숙성된 녹차를 건조 및 분쇄하여 녹차 분말을 수득하는 단계; (3) 상기 녹차 분말에 물 및 탄소수 1 내지 4의 알코올 중 적어도 어느 하나를 포함하는 용매를 가하고 50oC내지 70oC에서 추출하는 단계; 및 (4) 상기 추출단계에서 추출된 녹차 추출물에 80oC 이상 100oC 이하의 고온의 스팀을 3시간 이상 7시간 이하의 시간동안 가하는 고온처리 단계를 포함하는, 성분 함량이 변화된 녹차 추출물을 제조하는 방법일 수 있다.In another aspect, the present invention includes the steps of (1) inoculating 70 to 90% by weight of green tea with 10 to 30% by weight of a liquid strain of the genus Paenibacillus (Paenibacillus sp.) and maturing at 70 o C to 80 o C; (2) drying and grinding the green tea aged in the ripening step to obtain green tea powder; (3) adding a solvent containing at least one of water and an alcohol having 1 to 4 carbon atoms to the green tea powder and extracting the green tea powder at 50 o C to 70 o C; and (4) a high-temperature treatment step of applying high-temperature steam of 80 o C to 100 o C to the green tea extract extracted in the extraction step for a period of not less than 3 hours but not more than 7 hours. It may be a manufacturing method.

일 측면에서, 상기 (1) 단계의 균주는 페니바실러스속(Paenibacillus sp.)에 속하는 균주 중 하나 이상의 균주로부터 선택될 수 있다.In one aspect, the strain in step (1) may be selected from one or more strains belonging to the genus Paenibacillus (Paenibacillus sp.).

페니바실러스(Paenibacillus)속으로 분류되는 미생물로서는, 예를 들어 페니바실러스 애스투아리이(Paenibacillus aestuarii), 페니바실러스 알기놀리티커스(Paenibacillus alginolyticus), 페니바실러스 알고리폰티콜라(Paenibacillus algorifonticola), 페니바실러스 알베이(Paenibacillus alvei), 페니바실러스 아밀롤리티커스(Paenibacillus amylolyticus), 페니바실러스 아피아리우스(Paenibacillus apiarius), 페니바실러스 아사멘시스(Paenibacillus assamensis), 페니바실러스 아조리두센스(Paenibacillus azoreducens), 페니바실러스 바렌골트지이(Paenibacillus barengoltzii), 페니바실러스 치티놀리티커스(Paenibacillus chitinolyticus), 페니바실러스 콘드로이티너스(Paenibacillus chondroitinus), 페니바실러스 커들라놀리티커스(Paenibacillus curdlanolyticus), 페니바실러스 대전엔시스(Paenibacillus daejeonensis), 페니바실러스 듀러스(Paenibacillus durus), 페니바실러스 에히멘시스(Paenibacillus ehimensis), 페니바실러스 엘기이(Paenibacillus elgii), 페니바실러스 필리시스(Paenibacillus filicis), 페니바실러스 프리고리레시스텐스(Paenibacillus frigoriresistens), 페니바실러스 간수엔시스(Paenibacillus gansuensis), 페니바실러스 진셍기후미(Paenibacillus ginsengihumi), 페니바실러스 글루카놀리티커스(Paenibacillus glucanolyticus), 페니바실러스 클리카닐리티커스(Paenibacillus glycanilyticus), 페니바실러스 그라미니스(Paenibacillus graminis), 페니바실러스 호도가이엔시스(Paenibacillus hodogayensis), 페니바실러스 호르데이(Paenibacillus hordei), 페니바실러스 휴미커스(Paenibacillus humicus), 페니바실러스 일리노이센시스(Paenibacillus illinoisensis), 페니바실러스 자밀라에(Paenibacillus jamilae), 페니바실러스 코벤시스(Paenibacillus kobensis), 페니바실러스 콜레오보란스(Paenibacillus koleovorans), 페니바실러스 콘시덴시스(Paenibacillus konsidensis), 페니바실러스 크리벤시스(Paenibacillus kribbensis), 페니바실러스 라바에 아종 라바에(Paenibacillus larvae subsp. larvae), 페니바실러스 라바에 아종 풀비파시엔스(Paenibacillus larvae subsp. pulvifaciens), 페니바실러스 맥쿠아리엔시스 아종데펜서(Paenibacillus macquariensis subsp. defensor), 페니바실러스 멘델리(Paenibacillus mendelii), 페니바실러스 모토부엔시스(Paenibacillus motobuensis), 페니바실러스 오세아니세디미니스(Paenibacillus oceanisediminis), 페니바실러스 오도리퍼(Paenibacillus odorifer), 페니바실러스 파불리(Paenibacillus pabuli), 페니바실러스 파사데넨시스(Paenibacillus pasadenensis), 페니바실러스 페오리아에(Paenibacillus peoriae), 페니바실러스 포에니시스(Paenibacillus phoenicis), 페니바실러스 피니(Paenibacillus pini), 페니바실러스 피니후미(Paenibacillus pinihumi), 페니바실러스 폴리믹사(Paenibacillus polymyxa), 페니바실러스 테리게나(Paenibacillus terrigena), 페니바실러스 써모필러스(Paenibacillus thermophilus), 페니바실러스 티아미놀리티커스(Paenibacillus thiaminolyticus), 페니바실러스 툰드라에(Paenibacillus tundrae), 페니바실러스 발리더스(Paenibacillus validus), 페니바실러스 불네리스(Paenibacillus vulneris), 페니바실러스 우포넨시스(Paenibacillus wooponensis), 페니바실러스 크실라니클라스티커스(Paenibacillus xylaniclasticus) 등을 들 수 있다.Microorganisms classified into the genus Paenibacillus include, for example, Paenibacillus aestuarii, Paenibacillus alginolyticus, Paenibacillus algorifonticola, and Paenibacillus algorifonticola. Bay (Paenibacillus alvei), Paenibacillus amylolyticus, Paenibacillus apiarius, Paenibacillus assamensis, Paenibacillus azoreducens, Paenibacillus Barengoldt Paenibacillus barengoltzii, Paenibacillus chitinolyticus, Paenibacillus chondroitinus, Paenibacillus curdlanolyticus, Paenibacillus daejeonensis, Paenibacillus daejeonensis Paenibacillus durus, Paenibacillus ehimensis, Paenibacillus elgii, Paenibacillus filicis, Paenibacillus frigoriresistens, Paenibacillus bittern Paenibacillus gansuensis, Paenibacillus ginsengihumi, Paenibacillus glucanolyticus, Paenibacillus glycanilyticus, Paenibacillus graminis, Paenibacillus hodogayensis, Paenibacillus hordei, Paenibacillus humicus, Paenibacillus illinoisensis, Paenibacillus jamilae, Paenibacillus coben Paenibacillus kobensis, Paenibacillus koleovorans, Paenibacillus konsidensis, Paenibacillus kribbensis, Paenibacillus larvae subsp. larvae), Paenibacillus larvae subsp. pulvifaciens, Paenibacillus macquariensis subsp. defensor, Paenibacillus mendelii, Paenibacillus motobuensis (Paenibacillus motobuensis), Paenibacillus oceanisediminis, Paenibacillus odorifer, Paenibacillus pabuli, Paenibacillus pasadenensis, Paenibacillus peoriae (Paenibacillus peoriae), Paenibacillus phoenicis, Paenibacillus pini, Paenibacillus pinihumi, Paenibacillus polymyxa, Paenibacillus terrigena, Paenibacillus thermophilus, Paenibacillus thiaminolyticus, Paenibacillus tundrae, Paenibacillus validus, Paenibacillus vulneris, Paenibacillus Examples include Paenibacillus wooponensis and Paenibacillus xylaniclasticus.

일 구현 예로서, 상기 균주는 한국식품연구원 '식품 미생물 유전자은행'으로부터 분양받은 균주이거나, 기타 연구기관 보유군주 또는 상용화된 균주일 수 있으며, 구체적으로 페니바실러스 폴리믹사(Paenibacillus polymyxa) 균주일 수 있다.As an example of an embodiment, the strain may be a strain distributed from the Korea Food Research Institute's 'Food Microbial Gene Bank', a strain owned by another research institution, or a commercialized strain. Specifically, it may be a Paenibacillus polymyxa strain. .

일 측면에서, (1) 단계에서 숙성된 녹차 잎은 충분한 시간 동안 건조 과정을 거친 후 분쇄될 수 있다. 분쇄 방법은 공지된 방법이라면 제한없이 사용가능하다. 분쇄된 건조 녹차 잎을 메쉬 체에 통과시키는 단계를 거쳐 녹차 분말을 수득할 수 있다. In one aspect, the green tea leaves aged in step (1) may be ground after undergoing a drying process for a sufficient period of time. The grinding method can be used without limitation as long as it is a known method. Green tea powder can be obtained by passing crushed dried green tea leaves through a mesh sieve.

일 측면에서, (1) 단계에서 분쇄 시, 포도씨나, 수박씨를 가루 형태로 첨가할 수 있다. 상기 씨앗에는 콜레스테롤 수치를 낮추어주는 리놀렌산 성분, 또는 심혈관질환을 예방해주는 폴리페놀 성분을 함유되어 있어, 최종 생성된 녹차 추출물의 기능성을 더 강화할 수 있다. 상기 씨의 가루는 숙성된 녹차 잎 질량을 기준으로 0.3 내지 1 질량%로 함유되는 것을 특징으로 한다. In one aspect, when grinding in step (1), grape seeds or watermelon seeds may be added in powder form. The seeds contain linolenic acid, which lowers cholesterol levels, or polyphenol, which prevents cardiovascular disease, and can further enhance the functionality of the final green tea extract. The seed powder is characterized in that it is contained in an amount of 0.3 to 1% by mass based on the mass of mature green tea leaves.

일 측면에서, 수득된 녹차 분말에 물 및 C1 내지 C4의 알코올 중 어느 하나를 포함하는 용매를 가하고 50oC내지 70oC에서 30분 내지 4시간 동안 추출하여 녹차 추출물을 수득하는 단계를 더 포함할 수 있다. 상기 추출단계 후에는 여과 및 감압하여 상기 물 및 C1 내지 C4의 알코올 중 어느 하나 이상을 제거하는 단계를 더 포함할 수 있다. In one aspect, the method further includes adding a solvent containing any one of water and C1 to C4 alcohol to the obtained green tea powder and extracting at 50 o C to 70 o C for 30 minutes to 4 hours to obtain a green tea extract. can do. After the extraction step, the step of removing any one or more of the water and C1 to C4 alcohol by filtration and reduced pressure may be further included.

일 측면에서, 상기 C1 내지 C4의 알코올은 에탄올일 수 있다.In one aspect, the C1 to C4 alcohol may be ethanol.

일 측면에서, 상기 에탄올은 20% 이상, 30% 이상, 40% 이상, 50% 이상, 60% 이상 또는 70% 이상의 에탄올일 수 있다. 다른 측면에서 상기 에탄올은 70% 이하, 60% 이하, 50% 이하, 40% 이하 또는 30% 이하의 에탄올일 수 있다.In one aspect, the ethanol may be 20% or more, 30% or more, 40% or more, 50% or more, 60% or more, or 70% or more. In another aspect, the ethanol may be 70% or less, 60% or less, 50% or less, 40% or less, or 30% or less.

일 측면에서 상기 제1 녹차 추출물을 수득하는 단계의 추출 온도는 50oC이상, 55oC이상, 60oC이상, 62oC이상 또는 64oC이상일 수 있으며, 또한, 70oC이하, 65oC이하, 60oC이하, 55oC이하 또는 52oC이하일 수 있다.In one aspect, the extraction temperature in the step of obtaining the first green tea extract may be 50 o C or higher, 55 o C or higher, 60 o C or higher, 62 o C or higher, or 64 o C or higher, and may also be 70 o C or lower, It may be below 65 o C, below 60 o C, below 55 o C or below 52 o C.

일 측면에서 상기 제1 녹차 추출물을 수득하는 단계의 추출 시간은 30분 이상, 40분 이상, 50분 이상, 60분 이상, 70분 이상, 80분 이상, 90분 이상, 100분 이상, 120분 이상, 140분 이상, 160분 이상, 180분 이상, 200분 이상 또는 220분 이상일 수 있으며, 240분 이하, 220분 이하, 200분 이하, 180분 이하, 160분 이하, 140분 이하, 120분 이하, 100분 이하, 90분 이하, 80분 이하, 70분 이하, 60분 이하, 50분 이하 또는 40분 이하일 수 있다. In one aspect, the extraction time in the step of obtaining the first green tea extract is at least 30 minutes, at least 40 minutes, at least 50 minutes, at least 60 minutes, at least 70 minutes, at least 80 minutes, at least 90 minutes, at least 100 minutes, and 120 minutes. It can be 140 minutes or more, 160 minutes or more, 180 minutes or more, 200 minutes or more, or 220 minutes or more, and 240 minutes or less, 220 minutes or less, 200 minutes or less, 180 minutes or less, 160 minutes or less, 140 minutes or less, 120 minutes. It may be 100 minutes or less, 90 minutes or less, 80 minutes or less, 70 minutes or less, 60 minutes or less, 50 minutes or less, or 40 minutes or less.

일 측면에서, 녹차 추출물을 수득하는 단계에서 상기 녹차 분말에 상기 용매를 가한 후, 상기 녹차 분말이 용해된 녹차 용액을 교반시키는 단계를 더 포함할 수 있다. 교반 단계는 항온 수조에 녹차 분말 및 용매를 가한 후, 80rpm 내지 130rpm으로 교반하는 것일 수 있다. In one aspect, the step of obtaining the green tea extract may further include adding the solvent to the green tea powder and then stirring the green tea solution in which the green tea powder is dissolved. The stirring step may include adding green tea powder and solvent to a constant temperature water bath and then stirring at 80 rpm to 130 rpm.

일 측면에서, 상기 녹차 추출물에 80oC 이상 100oC 이하의 고온의 스팀을 1 내지 2 kgf/cm2의 압력으로 3시간 이상 7시간 이하의 시간동안 가하는 고온처리 단계를 포함한다. In one aspect, it includes a high temperature treatment step of applying high temperature steam of 80 o C to 100 o C to the green tea extract at a pressure of 1 to 2 kgf/cm 2 for a period of time from 3 hours to 7 hours.

일 측면에서 상기 고온처리 단계의 스팀 온도는 75oC이상, 80oC이상, 90oC이상, 95oC이상 또는 98oC이상일 수 있다. 다른 측면에서 상기 고온처리 단계의 온도는 100oC이하, 95oC이하, 90oC이하, 85oC이하, 83oC이하 또는 80oC이하일 수 있다.In one aspect, the steam temperature in the high temperature treatment step may be 75 o C or higher, 80 o C or higher, 90 o C or higher, 95 o C or higher, or 98 o C or higher. In another aspect, the temperature of the high temperature treatment step may be 100 o C or less, 95 o C or less, 90 o C or less, 85 o C or less, 83 o C or less, or 80 o C or less.

일 측면에서 상기 고온처리 단계의 스팀 압력은 1 kgf/cm2 이상, 1.2 kgf/cm2 이상, 1.4 kgf/cm2 이상, 1.5kgf/cm2 이상, 1.7 kgf/cm2 이상 또는 1.8 kgf/cm2 이상일 수 있다. In one aspect, the steam pressure in the high temperature treatment step is 1 kgf/cm 2 or more, 1.2 kgf/cm 2 or more, 1.4 kgf/cm 2 or more, 1.5 kgf/cm 2 or more, 1.7 kgf/cm 2 or more, or 1.8 kgf/cm. It can be 2 or more.

일 측면에서 상기 고온처리 단계의 교반 시간은 1시간 이상, 2시간 이상, 3시간 이상, 4시간 이상, 5시간 이상 또는 6시간 이상일 수 있다. 다른 측면에서 상기 고온처리 단계의 교반 시간은 7시간 이하, 6시간 이하, 5시간 이하, 4시간 이하, 3시간 이하 또는 2시간 이하일 수 있다. In one aspect, the stirring time of the high temperature treatment step may be 1 hour or more, 2 hours or more, 3 hours or more, 4 hours or more, 5 hours or more, or 6 hours or more. In another aspect, the stirring time of the high temperature treatment step may be 7 hours or less, 6 hours or less, 5 hours or less, 4 hours or less, 3 hours or less, or 2 hours or less.

일 측면에서, 상기 고온처리 단계 이후에 여과 및 감압농축 시키는 단계를 더 포함할 수 있다.In one aspect, the steps of filtration and reduced pressure concentration may be further included after the high temperature treatment step.

이하, 실시예, 실험예, 및 제형예를 들어 본 명세서의 구성 및 효과를 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들예는 본 명세서에 대한 이해를 돕기 위해 예시의 목적으로만 제공된 것일 뿐 본 명세서의 범주 및 범위가 하기 예에 의해 제한되는 것은 아니다. Hereinafter, the configuration and effects of the present specification will be described in more detail through examples, experimental examples, and formulation examples. However, these examples are provided only for illustrative purposes to aid understanding of the present specification, and the scope and scope of the present specification are not limited by the examples below.

[실시예 1] 페니바실러스 균을 접종한 녹차 분말 제조[Example 1] Preparation of green tea powder inoculated with Pennybacillus bacteria

녹차(Camellia sinensis, 제주 오설록 농장) 잎으로 만든 녹차(건엽)에 물을 첨가하여 수분 함량을 40중량%으로 조정하였다. 여기에 페니바실러스 폴리믹사(Paenibacillus polymyxa) 액상균을 녹차 80 중량%: 페니바실러스 액상균 20중량%로 혼합하여, 50oC에서 3일간 유지시키고, 이후 77oC에서 36 내지 48시간 숙성하였다. 이후, 숙성된 녹차를 수분함량이 3% 내지 5%가 될 때까지 건조시킨 후, 분쇄기를 사용하여 분쇄하여 녹차 분말(시료 1)을 제조하였다. Water was added to green tea (dried leaves) made from green tea (Camellia sinensis, Jeju Osulloc Farm) leaves, and the moisture content was adjusted to 40% by weight. Here, Paenibacillus polymyxa liquid bacteria were mixed with 80% by weight of green tea and 20% by weight of Paenibacillus liquid bacteria, maintained at 50 o C for 3 days, and then aged at 77 o C for 36 to 48 hours. Thereafter, the aged green tea was dried until the moisture content was 3% to 5%, and then ground using a grinder to prepare green tea powder (sample 1).

한편, 다른 균주를 접종했을 경우와의 비교를 위해, 전술한 녹차 분말 제조 과정에서 페니바실러스 폴리믹사(Paenibacillus polymyxa) 액상균 대신 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtillis)를 접종시켜 제조한 녹차 분말(시료 2)을 제조하였고, 균주를 접종하지 않았을 경우와의 비교를 위해, 전술한 녹차 분말 제조 과정에서 페니바실러스 폴리믹사(Paenibacillus polymyxa) 액상균을 접종시키지 않고 제조한 녹차 분말(시료 3)을 제조하였다. Meanwhile, for comparison with the case of inoculation with other strains, green tea powder prepared by inoculating Bacillus subtilis instead of Paenibacillus polymyxa liquid bacteria in the green tea powder manufacturing process described above (sample 2) ) was prepared, and for comparison with the case where the strain was not inoculated, green tea powder (sample 3) prepared without inoculating the liquid bacteria of Paenibacillus polymyxa in the green tea powder manufacturing process described above was prepared.

[실시예 2] 녹차 추출물의 제조[Example 2] Preparation of green tea extract

전술한 단계를 통해 제조된 시료 1 100g에 50% 에탄올 1000ml를 가하여 60oC에서 1시간 환류 교반하였다. 이후 온도를 실온으로 낮추고 여과하여 얻은 용액을 감압증류하여 진한갈색분말의 녹차 추출물 27g을 수득하였다. 1000 ml of 50% ethanol was added to 100 g of Sample 1 prepared through the above-described steps, and the mixture was refluxed and stirred at 60 o C for 1 hour. Afterwards, the temperature was lowered to room temperature, filtered, and the obtained solution was distilled under reduced pressure to obtain 27 g of green tea extract as a dark brown powder.

이후, 녹차 추출물을 농축한 다음 100oC의 스팀을 1.5kgf/cm2-으로 가하며 5시간 교반하였다. 이후 온도를 실온으로 낮추고 여과하여 얻은 용액을 감압농축하여 최종 녹차 추출물(시료 1-1)을 수득하였다. Afterwards, the green tea extract was concentrated, steam at 100 o C was added at 1.5 kgf/cm 2- and the mixture was stirred for 5 hours. Afterwards, the temperature was lowered to room temperature, filtered, and the resulting solution was concentrated under reduced pressure to obtain the final green tea extract (sample 1-1).

한편, 고온처리 과정이 생략되었을 경우와의 비교를 위해, 고온의 스팀을 가하기 이전의 녹차 추출물을 시료 1-2로 하였다. Meanwhile, for comparison with the case where the high temperature treatment process was omitted, the green tea extract before applying high temperature steam was used as Sample 1-2.

다른 균주를 접종했을 경우와의 비교를 위해, 동일한 방식으로 전술한 단계를 통해 제조된 시료 2 100g에 50% 에탄올 1000ml를 가하여 60oC에서 1시간 환류 교반하였다. 이후 온도를 실온으로 낮추고 여과하여 얻은 용액을 감압증류하여 진한갈색분말의 녹차 추출물을 수득하였다. For comparison with the case of inoculation with other strains, 1000 ml of 50% ethanol was added to 100 g of Sample 2 prepared through the above-described steps in the same manner, and the mixture was refluxed and stirred at 60 o C for 1 hour. Afterwards, the temperature was lowered to room temperature, filtered, and the obtained solution was distilled under reduced pressure to obtain a green tea extract as a dark brown powder.

이후, 녹차 추출물을 농축한 다음 100oC의 스팀을 1.5kgf/cm2-으로 가하며 5시간 교반하였다. 이후 온도를 실온으로 낮추고 여과하여 얻은 용액을 감압농축하여 최종 녹차 추출물(시료 2-1)을 수득하였다. Afterwards, the green tea extract was concentrated, steam at 100 o C was added at 1.5 kgf/cm 2- and the mixture was stirred for 5 hours. Afterwards, the temperature was lowered to room temperature, filtered, and the obtained solution was concentrated under reduced pressure to obtain the final green tea extract (sample 2-1).

한편, 고온처리 과정이 생략되었을 경우와의 비교를 위해, 고온의 스팀을 가하기 이전의 녹차 추출물을 시료 2-2로 하였다. Meanwhile, for comparison with the case where the high temperature treatment process was omitted, the green tea extract before applying high temperature steam was used as Sample 2-2.

균주를 접종하지 않았을 경우와의 비교를 위해, 동일한 방식으로 전술한 단계를 통해 제조된 시료 2 100g에 50% 에탄올 1000ml를 가하여 60oC에서 1시간 환류 교반하였다. 이후 온도를 실온으로 낮추고 여과하여 얻은 용액을 감압증류하여 진한갈색분말의 녹차 추출물을 수득하였다. For comparison with the case where the strain was not inoculated, 1000 ml of 50% ethanol was added to 100 g of sample 2 prepared through the above-described steps in the same manner, and the mixture was refluxed and stirred at 60 o C for 1 hour. Afterwards, the temperature was lowered to room temperature, filtered, and the obtained solution was distilled under reduced pressure to obtain a green tea extract as a dark brown powder.

이후, 녹차 추출물을 농축한 다음 100oC의 스팀을 1.5kgf/cm2- 으로 가하며 5시간 교반하였다. 이후 온도를 실온으로 낮추고 여과하여 얻은 용액을 감압농축하여 최종 녹차 추출물(시료 3-1)을 수득하였다. Afterwards, the green tea extract was concentrated, steam at 100 o C was added at 1.5 kgf/cm 2- and the mixture was stirred for 5 hours. Afterwards, the temperature was lowered to room temperature, filtered, and the resulting solution was concentrated under reduced pressure to obtain the final green tea extract (sample 3-1).

한편, 고온처리 과정이 생략되었을 경우와의 비교를 위해, 고온의 스팀을 가하기 이전의 녹차 추출물을 시료 3-2로 하였다. Meanwhile, for comparison with the case where the high-temperature treatment process was omitted, the green tea extract before applying high-temperature steam was used as sample 3-2.

수득된 총 여섯 종류의 추출물의 조성을 분석한 조건과 결과는 각각 하기 표 1(시료 1-1, 1-2, 2-1, 2-2, 3-1, 3-2의 조성 분석 조건) 및 표 2(시료 1-1, 1-2, 2-1, 2-2, 3-1, 3-2의 조성 분석 결과)와 같다. The conditions and results for analyzing the composition of a total of six types of extracts obtained are shown in Table 1 below (composition analysis conditions for samples 1-1, 1-2, 2-1, 2-2, 3-1, and 3-2) and Table 2 (composition analysis results of samples 1-1, 1-2, 2-1, 2-2, 3-1, 3-2).

컬럼column Thermofisher C18 5um, 4.6 X 250mmThermofisher C18 5um, 4.6 디텍터detector UV 280nmUV 280nm 희석dilution 그래디언트(Gradient) A-0.1% TFA (Trifluoro acetic acid) 내의물B-아세토나이트릴(Acetonitrile)Gradient A-0.1% TFA (Trifluoro acetic acid) B-Acetonitrile 그래디언트 프로파일(Gradient profile)Gradient profile 0 min A(90) : B(10)
30min A(85) : B(15)
42min A(80) : B(20)
44min A(5) : B(95)
49min A(90) : B(10)0 min A(90) : B(10)
30min A(85) : B(15)
42min A(80) : B(20)
44min A(5) : B(95)
49min A(90) : B(10) 속도(flow rate)flow rate 1ml/min1ml/min 주입량Injection amount 20μl20μl

구분division GCGC EGCEGC CC ECEC GCGGCG EGCGEGCG CGCG ECGECG CaffeineCaffeine 총 카테킨total catechins 시료 1-1Sample 1-1 6.266.26 3.513.51 4.944.94 2.542.54 10.5110.51 8.258.25 2.942.94 3.653.65 4.74.7 42.642.6 시료 1-2Sample 1-2 2.12.1 11.311.3 3.323.32 6.196.19 4.114.11 23.5223.52 1.711.71 6.516.51 4.14.1 58.7658.76 시료 2-1Sample 2-1 0.810.81 0.680.68 0.350.35 0.190.19 3.673.67 2.162.16 0.450.45 0.130.13 3.743.74 8.448.44 시료 2-2Sample 2-2 00 1.451.45 00 0.450.45 3.13.1 4.154.15 0.360.36 0.390.39 3.453.45 9.99.9 시료 3-1Sample 3-1 4.94.9 3.543.54 1.61.6 1.011.01 5.555.55 5.265.26 1.321.32 1.261.26 3.923.92 24.4424.44 시료 3-3Sample 3-3 00 9.19.1 00 3.613.61 00 20.9120.91 00 2.652.65 3.23.2 36.2736.27

(상기 표 2에서, GC는 갈로카테킨, EGC는 에피갈로카테킨, C는 카테킨, EC는 (-)에피카테킨, GCG는 갈로카테킨 갈레이트, EGCG는 에피갈로카테킨 갈레이트, CG는 카테킨 갈레이트, ECG는 에피카테킨 3-O-갈레이트)(In Table 2 above, GC is gallocatechin, EGC is epigallocatechin, C is catechin, EC is (-) epicatechin, GCG is gallocatechin gallate, EGCG is epigallocatechin gallate, and CG is catechin gallate. , ECG epicatechin 3-O-gallate)

(상기 표 2의 단위는 모두 녹차 추출물(시료 1-1 내지 3-2) 전체 중량 대비 해당 물질의 중량%) (All units in Table 2 above are weight percent of the substance relative to the total weight of green tea extract (samples 1-1 to 3-2))

분석 결과를 볼 때, 시료 1-1의 경우 다른 녹차 추출물과 조성이 다름을 확인할 수 있었다. 구체적으로, 시료 1-1의 경우 균주를 접종하지 않았을 경우인 시료 3-1 및 3-2에 비해 총 카테킨 함량(42.6 중량%)이 증가하였으며, 균주를 접종하지 않고 고온스팀 처리한 시료 3-1에 비해 낮은 EGCG 함량(8.25 중량%)을 가지는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 시료 1-1의 경우 페니바실러스속 균주를 접종한 후 고온스팀 처리하지 않은 시료 1-2에 비해 현저히 낮은 EGCG 함량을 가지는 것을 확인할 수 있었다. Looking at the analysis results, it was confirmed that Sample 1-1 had a different composition from other green tea extracts. Specifically, in the case of Sample 1-1, the total catechin content (42.6% by weight) increased compared to Samples 3-1 and 3-2, which were not inoculated with the strain, and Sample 3- which was treated with high-temperature steam without inoculating the strain. It was confirmed that it had a lower EGCG content (8.25% by weight) compared to 1. In addition, it was confirmed that Sample 1-1 had a significantly lower EGCG content compared to Sample 1-2, which was not treated with high-temperature steam after inoculation with a Pennybacillus strain.

분석 결과를 볼 때, 시료 1-1의 경우 다른 시료에 비해 총 카테킨 함량 대비 EGCG 함량이 약 19.37% 로 낮은 수치를 가지는 것을 확인할 수 있었다. 시료 2-1 및 시료 2-2와 같이 다른 균주를 접종시켰을 경우 EGCG가 크게 감소하나, 전체 카테킨 함량도 크게 줄어들어 총 카테킨 함량 대비 EGCG 함량은 시료 2-1이 약 25.59%, 시료 2-2가 약 41.91%로 시료 1-1에 비해 높은 수치를 가지는 것을 확인할 수 있었다. 균주를 접종하지 않은 경우에도, 총 카테킨 함량 대비 EGCG 함량은 시료 3-1이 약 21.52%, 시료 3-2가 약 57.65%로 시료 1-1에 비해 높은 수치를 가지는 것을 확인할 수 있었다. 페니바실러스속 균주를 접종한 후 고온스팀 처리하지 않은 시료 1-2의 경우에도 총 카테킨 함량 대비 EGCG 함량은 약 40.03%로 시료 1-1에 비해 높은 수치를 가지는 것을 확인할 수 있었다. Looking at the analysis results, it was confirmed that Sample 1-1 had a low EGCG content of about 19.37% compared to the total catechin content compared to other samples. When other strains are inoculated, such as Sample 2-1 and Sample 2-2, EGCG is greatly reduced, but the total catechin content is also greatly reduced, so that the EGCG content relative to the total catechin content is about 25.59% in Sample 2-1 and 25.59% in Sample 2-2. It was confirmed that it had a higher value than Sample 1-1, at about 41.91%. Even when the strain was not inoculated, the EGCG content compared to the total catechin content was confirmed to be higher than that of Sample 1-1, at approximately 21.52% for Sample 3-1 and approximately 57.65% for Sample 3-2. Even in the case of Sample 1-2, which was not treated with high-temperature steam after inoculation with the Pennybacillus strain, the EGCG content compared to the total catechin content was confirmed to be about 40.03%, which is higher than that of Sample 1-1.

[실험예 1] 녹차 추출물의 간세포 독성 확인 실험[Experimental Example 1] Experiment to confirm hepatocellular toxicity of green tea extract

상기 실시예 2에서 수득한 녹차 추출물들에 의한 간독성을 확인하기 위하여, 한국세포주은행에서 구한 간세포주(HepG2 cell line)를 96웰 플레이트(well plate, FALCON)에 웰 당 1X105씩 시딩하고(seeding), 24시간 동안 37oC, 5% CO2 인큐베이터에서 배양 후, 시료 1-1, 1-2, 2-1, 2-2, 3-1 및 3-2를 각각 총 카테킨 농도가 10, 25, 50, 100 μg/ml 가 되도록 처리하여 24시간 동안 추가 배양한 뒤 배지를 제거하고 CellTiter 96 AQueous One Solution Cell Proliferation Assay Kit(MTS, Promega Co. Madison, WI, USA)를 이용하여 세포 생존율을 확인하였다. RPMI1640 (Lonza) 100 μl에 CellTiter 96 AQueous One Solution Cell Proliferation Assay Kit(MTS, Promega Co. Madison, WI, USA) 용액 20 μl를 첨가하여 세포에 처리 후 490 nm에서 흡광도를 확인하여 살아있는 세포의 수를 정량화 하였다. 세포 수 또는 세포 생존율(%)은 하기 식에 의해 계산되었다.In order to confirm hepatotoxicity caused by the green tea extracts obtained in Example 2, the hepatocyte cell line (HepG2 cell line) obtained from the Korea Cell Line Bank was seeded at 1X10 5 per well in a 96-well plate (FALCON). ), after culturing in a 37 o C, 5% CO2 incubator for 24 hours, samples 1-1, 1-2, 2-1, 2-2, 3-1, and 3-2 were grown at total catechin concentrations of 10 and 25, respectively. , 50, and 100 μg/ml, cultured for additional 24 hours, removed medium, and checked cell viability using CellTiter 96 AQueous One Solution Cell Proliferation Assay Kit (MTS, Promega Co. Madison, WI, USA). did. Add 20 μl of CellTiter 96 AQueous One Solution Cell Proliferation Assay Kit (MTS, Promega Co. Madison, WI, USA) solution to 100 μl of RPMI1640 (Lonza), treat the cells, and check the absorbance at 490 nm to determine the number of living cells. Quantified. Cell number or cell viability (%) was calculated by the following formula.

세포 생존율 (%) = (시료 처리군 흡광도 - 반응시약만의 흡광도) / (무처리군 흡광도 - 반응시약만의 흡광도) X 100Cell viability (%) = (Absorbance of sample treatment group - Absorbance of reaction reagent only) / (Absorbance of untreated group - Absorbance of reaction reagent only)

그 결과는 도 1과 같으며, 본원 발명에 따른 시료 1-1은 다른 녹차 추출물들에 비해 간세포 독성이 낮음을 확인할 수 있었다. 특히, 시료 1-1은 페니바실러스속 균주를 접종한 후 고온스팀 처리하지 않은 시료 1-2와 비교하여 간세포 독성이 낮았고, 고온스팀 처리를 하더라도 다른 균주를 접종시켰을 경우인 시료 2-1이나 균주를 접종하지 않은 시료 3-1 등에 비해 시료 1-1이 간세포 독성이 낮은 것을 확인할 수 있다. 이는 총 카테킨 농도를 동일하게 적용하였을 때, 페니바실러스속 균주를 접종한 후 고온스팀 처리한 시료 1-1의 경우 총 카테킨 함량 대비 EGC 및 EGCG 등 간독성을 크게 나타내는 물질의 함량이 감소하여, 간세포 독성이 낮게 나타나는 것으로 생각된다. The results are shown in Figure 1, and it was confirmed that Sample 1-1 according to the present invention had lower hepatocellular toxicity compared to other green tea extracts. In particular, Sample 1-1 had lower hepatocellular toxicity compared to Sample 1-2, which was not treated with high-temperature steam after inoculation with a strain of the Pennybacillus genus, and even with high-temperature steam treatment, Sample 2-1 or the strain when inoculated with another strain. It can be confirmed that sample 1-1 has lower hepatocellular toxicity compared to sample 3-1, which was not inoculated. This means that when the total catechin concentration is applied equally, in the case of sample 1-1, which was inoculated with a strain of the genus Pennybacillus and then treated with high-temperature steam, the content of substances showing significant hepatotoxicity such as EGC and EGCG decreased compared to the total catechin content, resulting in hepatocellular toxicity. This is thought to appear low.

일 측면의 녹차 추출물 제조 방법에 의해 제조된 녹차 추출물은 페니바실러스속 균주의 접종을 통해 기존 녹차 추출물 제조 방법에 비해 높은 카테킨 함량의 추출물을 수득하는 것이 가능하며, 고온 스팀 처리를 통해 간독성이 높은 (-)-에피갈로카테킨 갈레이트의 함량을 낮출 수 있다. 또한, 일 측면의 녹차 추출물 제조 방법에 의해 제조된 녹차 추출물은 페니바실러스속 균주의 접종 단계와 고온 스팀 처리 단계를 모두 포함함에 따라, 총 카테킨 함량에 비해 20 중량% 미만의 낮은 (-)-에피갈로카테킨 갈레이트 함량을 가질 수 있고, 이에 따라 기존의 녹차 추출물에 비해 간세포 손상이 적고 다량 섭취시에도 안정성이 높다. The green tea extract produced by one aspect of the green tea extract production method is capable of obtaining an extract with a higher catechin content compared to the existing green tea extract production method through inoculation with a strain of the genus Pennybacillus, and has high hepatotoxicity through high-temperature steam treatment ( -)-The content of epigallocatechin gallate can be lowered. In addition, the green tea extract prepared by the green tea extract production method of one aspect includes both the inoculation step and the high-temperature steam treatment step of the Pennybacillus strain, and thus has a low (-)-epi of less than 20% by weight compared to the total catechin content. It may have gallocatechin gallate content, and as a result, it causes less damage to liver cells and is more stable even when consumed in large quantities compared to existing green tea extracts.

Claims (5)

(1) 수분을 조정한 녹차 70 내지 90 중량%에 페니바실러스속(Paenibacillus sp.) 액상 균주 10 내지 30 중량 %를 접종하고, 70oC 내지 80oC에서 숙성시키는 단계;
(2) 상기 숙성 단계에서 숙성된 녹차를 건조 및 분쇄하여 녹차 분말을 수득하는 단계;
(3) 상기 녹차 분말에 물 및 탄소수 1 내지 4의 알코올 중 적어도 어느 하나를 포함하는 용매를 가하고 50oC내지 70oC에서 추출하는 단계; 및
(4) 상기 추출단계에서 추출된 녹차 추출물에 80oC 이상 100oC 이하의 고온의 스팀을 3시간 이상 7시간 이하의 시간동안 가하는 고온처리 단계를 포함하는 녹차 추출물 제조방법. (1) inoculating 10 to 30 wt% of a liquid strain of the genus Paenibacillus sp. into 70 to 90 wt% of green tea with adjusted moisture, and maturing at 70 o C to 80 o C;
(2) drying and grinding the green tea aged in the ripening step to obtain green tea powder;
(3) adding a solvent containing at least one of water and an alcohol having 1 to 4 carbon atoms to the green tea powder and extracting the green tea powder at 50 o C to 70 o C; and
(4) A method for producing green tea extract comprising a high temperature treatment step of applying high temperature steam of 80 o C to 100 o C to the green tea extract extracted in the extraction step for a period of 3 hours to 7 hours. 제1항에 있어서,
상기 추출단계에서, 상기 녹차 분말에 상기 용매를 가한 후, 상기 녹차 분말이 용해된 녹차 용액을 교반시키는 단계를 더 포함하는 녹차 추출물 제조방법.
According to paragraph 1,
In the extraction step, the green tea extract production method further includes adding the solvent to the green tea powder and then stirring the green tea solution in which the green tea powder is dissolved.
 제1항에 있어서,
상기 고온처리 단계 이후에, 여과 및 감압농축하여 분말 형태의 녹차 추출물을 수득하는 단계를 더 포함하는 녹차 추출물 제조방법.
According to paragraph 1,
After the high-temperature treatment step, the green tea extract production method further includes the step of obtaining a green tea extract in powder form by filtering and concentrating under reduced pressure.
 제1항에 있어서,
상기 용매는 에탄올인 녹차 추출물 제조방법.
According to paragraph 1,
A method of producing green tea extract wherein the solvent is ethanol.
 추출물 내의 (-)-에피갈로카테킨 갈레이트((-)-epigallocatechin gallate, EGCG), 에피갈로카테킨(epigallocatechin, EGC), (-)에피카테킨((-)epicatechin, EC), 에피카테킨 3-O-갈레이트(epicatechin 3-O-gallate, ECG), 갈로카테킨 갈레이트(gallocatechin gallate, GCG), 갈로카테킨(gallocatechin, GC), 카테킨(catechin, C) 및 카테킨 갈레이트(catechin gallate, CG)의 총 함량 기준으로, (-)-에피갈로카테킨 갈레이트((-)-epigallocatechin gallate, EGCG)의 함량이 20 중량% 미만인 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 제조방법으로 제조된 녹차 추출물. (-)-epigallocatechin gallate (EGCG), epigallocatechin (EGC), (-)epicatechin (EC), epicatechin 3-O in the extract - Gallate (epicatechin 3-O-gallate, ECG), gallocatechin gallate (GCG), gallocatechin (GC), catechin (C) and catechin gallate (CG) Based on the total content, the product manufactured by the manufacturing method according to any one of claims 1 to 4 has a content of (-)-epigallocatechin gallate (EGCG) of less than 20% by weight. Green tea extract.
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윤현 외 2명. 천일염과 녹차를 발효시켰을 때 Catechin류의 추출량 변화. 한국콘텐츠학회논문지 12(11)(2012년)

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