KR102569532B1 - 스타필로코커스 속, 스트렙토코커스 속, 쿠티박테리움 속, 인하이드로박터 균주 및 dna 단편 혼합물을 포함하는 화장료 조성물 - Google Patents
스타필로코커스 속, 스트렙토코커스 속, 쿠티박테리움 속, 인하이드로박터 균주 및 dna 단편 혼합물을 포함하는 화장료 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
화장료 조성물에 관한 것으로, 피부 관련 상태의 예방, 개선 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
Description
화장료 조성물에 관한 것이다.
인간의 피부에서 거주하고 있는 미생물은 숙주인 인간과 공생관계를 유지하며 인간과 상호작용을 함으로써 피부 노화에 다양한 영향을 미친다고 알려져 있다. 이러한 미생물 및 이들이 가진 유전자를 비롯한 다양한 정보를 스킨 마이크로바이옴(skin microbiome)이라고 하며, 최근 차세대 염기서열 분석 기술(Next generation sequencing, NGS)이 발달함에 따라, 이를 분석하는 방법이 간소화 되었으며, 균주에 대한 전반적인 분석이 가능하게 되었다.
상기 미생물의 서식지인 인간의 피부는 외부 환경과 접촉하며 다양한 미생물(진균, 세균, 바이러스 및 작은 유충)의 집합소 역할을 한다. 또한, 상기 미생물은 물리적, 화학적 기능의 선택에 따라 적응함으로써 서식처를 마련한다.
한편, 피부의 표면은 차갑고, 약산성의 성질을 나타내며, 건조한 상태로 유지된다. 구조적으로 표피(epidermis)는 피부장벽을 이루고 있으며, 미생물과 독소가 침투하는 것을 차단하고, 수분을 유지하는 중요한 역할을 한다. 표피의 최상위층은 각질층(stratum corneum)으로 구성되어 있다. 표피는 일명 '벽돌과 몰탈 구조'라고 불리는 형태를 띠고 있는데, 피부 조직은 계속적인 자가 회복 과정을 거치고, 분화과정의 마지막을 거친 비늘(squames)은 끊임없이 피부조직에서 탈락되는 과정을 반복하게 되는데, 이러한 피부의 변화에는 미생물이 영향을 준다는 것들이 밝혀지고 있다.
일반적으로 노화된 피부에서는 진피에 존재하는 기질 단백질의 변화로 인해 주름살과 피부의 탄력 감소, 피부 처짐 및 건조 현상 등이 나타난다. 진피는 피부 내에서 피부의 강도와 형태를 지지하는 역할을 하고 있기 때문에, 노화가 진행될 때 이 영역에서의 형태적인 변화가 일어나게 되면, 주름 생성 및 피부 처짐에 결정적인 역할을 하게 된다. 이러한 기질 단백질을 분해하는 효소로 Matrix metalloproteinases(MMPs)가 대표적이며, 한 번의 자외선 조사에도 피부 내의 MMPs 활성이 증가되고, 피부 내의 콜라겐 및 기타 기질단백질을 분해하여 피부 노화를 촉진하는데 주요한 요인으로 작용한다.
피부 노화 중 광노화는 피부의 가장 큰 노화 인자로 고려되고 있으며, 이에 따라 광노화를 예방하기 위한 제품이 많이 출시되고 있으나, 천연 소재를 이용한 광노화 방지 기술은 사용이 제한적이고 효능 검증시 여러 가지 문제가 발생하는 경우가 많다는 한계가 있다.
따라서, 상기와 같은 문제점을 개선하기 위하여 미생물 발효 혼합물과 기능성 물질을 포함함으로써 피부 상태 개선의 시너지 효과를 발휘할 수 있는 기능성 화장품을 개발할 필요가 있다.
일 양상은 스타필로코커스 속(Staphylococcus sp.) 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물; 스트렙토코커스 속(Streptococcus sp.) 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물; 쿠티박테리움 속(Cutibacterium sp.) 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물; 인하이드로박터 속(Enhydrobacter sp.) 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물; 및 DNA 단편 혼합물을 유효성분으로 포함하는 피부 상태 개선용 조성물을 제공하는 것이다.
일 양상은 일 양상은 스타필로코커스 속(Staphylococcus sp.) 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물; 스트렙토코커스 속(Streptococcus sp.) 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물; 쿠티박테리움 속(Cutibacterium sp.) 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물; 인하이드로박터 속(Enhydrobacter sp.) 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물; 및 DNA 단편 혼합물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 제공한다.
본 명세서에서 용어"배양액"은 "배양 상층액", "조건 배양액" 또는 "조정 배지"와 호환적으로 사용될 수 있고, 스타필로코커스 속, 스트렙토코커스 속, 쿠티박테리움 속, 및/또는 인하이드로박터 균주가 시험관 내에서 성장 및 생존할 수 있도록 영양분을 공급할 수 있는 배지에 상기 균주를 일정기간 배양하여 얻는 상기 균주, 이의 대사물, 여분의 영양분 등을 포함하는 전체 배지를 의미할 수 있다. 또한, 상기 배양액은 균주를 배양하여 얻은 균체 배양액에서 균체를 제거한 배양액을 의미할 수 있다. 한편, 상기 배양액 중 균체를 제거한 액체를 "상등액"이라고도 하며, 배양액을 일정시간 가만히 두어 하층에 가라앉은 부분을 제외한 상층의 액체만을 취하거나, 여과를 통해 균체를 제거하거나, 배양액을 원심분리하여 하부의 침전을 제거하고 상부의 액체만을 취하여 획득할 수 있다. 상기 "균체"는 본 발명의 균주 자체를 의미하는 것으로 피부 샘플 등으로부터 분리하여 선별한 균주 자체 또는 상기 균주를 배양하여 배양액으로부터 분리한 균주를 포함한다. 상기 균체는 배양액을 원심분리하여 하층에 가라앉은 부분을 취하여 획득할 수 있고, 또는 중력에 의해 배양액의 하층으로 가라앉으므로 일정 시간동안 가만히 두었다가 상부의 액체를 제거함으로써 획득할 수 있다.
상기 배양액은 균주를 배양하여 수득된 배양액 자체, 그의 농축물, 또는 동결건조물 또는 배양액로부터 균주를 제거하여 수득된 배양 상층액, 그의 농축물 또는 동결건조물을 포함할 수 있다.
상기 배양액은 스타필로코커스 속, 스트렙토코커스 속, 쿠티박테리움 속, 및/또는 인하이드로박터 속 균주를 배지(예를 들면, R2A, TSB, TSA, BHI 또는 RCM 배지) 에서 10℃ 초과 또는 40℃ 미만 중 어느 온도에서 일정 시간, 예를 들면, 4 내지 50시간 동안 배양하여 수득된 것일 수 있다.
일 구체예에서, 균주의 배양 상층액은 균주 배양액을 원심분리나 여과시켜 균주를 제거하는 단계에 의해 수득될 수 있다.
다른 구체예에서, 농축물은 상기 균주 배양액 자체, 또는 상기 배양액을 원심분리나 필터를 이용하여 여과한 후 수득된 상층액을 농축하는 단계에 의해 수득될 수 있다.
상기 스타필로코커스 속, 스트렙토코커스 속, 쿠티박테리움 속, 및/또는 인하이드로박터 속 균주를 배양하기 위한 배양용 배지 및 배양 조건은 통상의 지식을 가진 자가 적절하게 선택하거나 변형하여 이용할 수 있다.
본 명세서에서 용어 "파쇄액"은 균주 자체를 화학적 또는 물리적 힘에 의하여 균주의 세포벽을 파쇄하여 얻은 산물을 의미할 수 있다.
본 명세서에서 용어 "배양액 추출물"은 상기 배양액 또는 그의 농축액로부터 추출한 것을 의미하며, 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 또는 이들 조정제물 또는 정제물, 이를 분획한 분획물을 포함할 수 있다.
일 실시예에서는 스타필로코커스 속, 스트렙토코커스 속, 쿠티박테리움 속, 인하이드로박터 속 균주 및 DNA 단편 혼합물이 자외선에 의해 감소된 COL1A1 및 엘라스틴의 발현을 증가시키고, 피부 보습 관련 인자(HAS3) 및 피부 장벽 관련 인자(ABCA12)의 발현을 증가시키는 것을 확인하였다. 따라서, 상기 조성물은 피부 상태 개선, 피부 미용 개선, 피부 질환의 예방, 개선 또는 치료 등에 사용될 수 있다.
상기 피부 상태 개선 또는 피부 미용 개선은 피부 노화 억제 또는 개선, 항 주름, 피부 장벽 강화, 또는 피부 보습일 수 있다.
본 명세서에서 용어 "피부 노화"란 나이가 들어가면서 피부에 나타나게 되는 유형과 무형상의 변화를 통틀어 말하는 것으로, 예컨대 표피 두께가 얇아지는 현상, 진피의 세포 수나 혈관 수, DNA 손상복구 능력, 세포교체주기, 상처 회복, 피부장벽기능, 표피의 수분 유지, 땀분비, 피지분비, 비타민D 생산, 물리적 손상방어, 화학물질 제거능력, 면역반응, 감각 기능, 체온조절의 감소를 말한다.
상기 균주 또는 이의 배양액은 외인성 요인 또는 내인성 요인에 의해 유발되는 피부 노화 개선용일 수 있다. 상기 외인성 요인은 여러 가지 외부 요인, 예컨대 자외선(광)을 말하고 내인성 요인은 연대기적 요인이라고도 지칭되며 주로 시간의 흐름에 의해 발생하는 요인을 말한다. 즉, 상기 피부 노화는 구체적으로는 자외선, 공해, 담배연기, 화학물질 등에 의한 외부 자극에 의해 유도되는 조기 노화 증상 뿐만 아니라, 나이가 들어감에 의해 피부세포의 증식이 감소함에 따라 발생하는 자연노화 현상을 포함하며 주름, 탄력 감소, 피부 쳐짐 및 건조 현상 등을 모두 포함하는 개념이다. 또한 주름은 내ㆍ외부 요인의 변화에 의한 자극이 피부조직을 구성하고 있는 성분을 변화시켜 주름을 유발하는 것을 포함한다.
상기 노화는 광노화일 수 있다. 용어 "광노화(Photoaging)"는 외부 환경적인 요인에 의해 유발되는 현상으로, 가장 대표적인 인자로는 자외선이 있다. 자외선은 단백질 분해효소의 활성화와 기질단백질의 사슬절단 및 비정상적인 교차결합 등의 생체 구성 성분들의 손상을 가져오고, 이러한 메커니즘의 반복은 외관상으로도 확연한 피부노화를 초래하게 된다.
본 명세서에서 용어 "주름"은 피부의 탄력성이 상실되어 느슨해진 상태를 의미하며, 예를 들면 피부가 접히는 것일 수 있다. 상기 "피부 주름 예방 또는 개선"이란 주름과 관련된 인자의 발현을 억제하여 주름을 방지 또는 개선하거나, 콜라겐 총량을 증가시키는 모든 작용을 의미할 수 있다.
상기 "피부 장벽 강화"는 피부 가장 바깥쪽에 위치하여 수분과 영양 손실을 막아주는 피부 장벽의 기능이 증진되는 모든 작용을 의미할 수 있다.
상기 "피부 보습"은 피부 수분을 유지하거나 수분 손실을 방지하는 모든 작용을 의미할 수 있다.
상기 "피부 질환"은 피부 장벽 기능 손상에 의한 질환, 피부 노화, 피부 상처, 피부 흉터, 또는 피부 염증일 수 있다. 용어, "예방"은 질병의 발생을 억제하는 것을 포함한다. 용어, "치료"는 질병의 발전의 억제, 경감, 또는 제거를 포함한다. 상기 피부 장벽 기능 손상은 피부 장벽의 기능이 저하되거나 손상되어 피부에 나타나는 모든 변화를 의미할 수 있다. 예를 들어, 피부 주름 증가, 건조, 피부염, 아토피 피부염, 알레르기성 피부염, 여드름 등을 포함할 수 있다.
상기 스타필로코커스 속(Staphylococcus sp.) 균주는 예를 들어, 스타필로코커스 에피데르미스(Staphylococcus epidermidis), 스타필로코커스 호미니스(Staphylococcus hominis), 스타필로코커스 와르네리(Staphylococcus warneri), 스타필로코커스 카프라에(Staphylococcus caprae), 스타필로코커스 캐피티스(Staphylococcus capitis) 등인 것일 수 있다.
일 구체예에 있어서, 상기 스타필로코커스 속 균주는 스타필로코커스 에피데르미스(Staphylococcus epidermidis)(기탁번호 KCCM12559P)인 것일 수 있다.
다른 구체예에 있어서, 상기 스타필로코커스 속 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물은 조성물 총 중량에 대하여 5 내지 20 중량%로 포함되는 것일 수 있다. 상기 스타필로코커스 속 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물은 조성물 총 중량에 대하여 예를 들어, 5 내지 20 중량%, 5 내지 18 중량%, 5 내지 16 중량%, 7 내지 20 중량%, 7 내지 17 중량%, 8 내지 15 중량% 또는 10 내지 13 중량%로 포함될 수 있다. 이때, 상기 스타필로코커스 속 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물의 함량이 상기 범위 미만이거나 또는 상기 범위를 초과하는 경우, 피부 상태 개선 효과를 충분히 발휘할 수 없다는 문제점이 있다.
상기 스트렙토코커스 속(Streptococcus sp.) 균주는 예를 들어, 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophiles), 스트렙토코커스 미티스(Streptococcus mitis), 스트렙토코커스 인판티스(Streptococcus infantis), 스트렙토코커스 뉴모니에(streptococcus pneumonia) 등인 것일 수 있다.
일 구체예에 있어서, 상기 스트렙토코커스 속 균주는 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophiles)(기탁번호 KCCM12004P)인 것일 수 있다.
다른 구체예에 있어서, 상기 스트렙토코커스 속 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물은 조성물 총 중량에 대하여 5 내지 30 중량%로 포함되는 것일 수 있다. 상기 스트렙토코커스 속 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물은 조성물 총 중량에 대하여 5 내지 30 중량%, 5 내지 28 중량%, 5 내지 25 중량%, 5 내지 20 중량%, 8 내지 30 중량%, 8 내지 24 중량%, 8 내지 18 중량%, 10 내지 27 중량%, 10 내지 20 중량% 또는 10 내지 15 중량%롤 포함될 수 있다. 이때, 상기 스트렙토코커스 속 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물의 함량이 상기 범위 미만이거나 또는 상기 범위를 초과하는 경우, 피부 상태 개선 효과를 충분히 발휘할 수 없다는 문제점이 있다.
상기 쿠티박테리움 속(Cutibacterium sp.) 균주는 예를 들어, 큐티박테리움 아크네스(Cutibacterium acnes), 큐티박테리움 그래뉼러섬(cutibacterium granulosum) 등인 것일 수 있다.
일 구체예에 있어서, 상기 쿠티박테리움 속 균주는 큐티박테리움 아크네스(Cutibacterium acnes)(기탁번호 KCCM12680P)인 것일 수 있다.
다른 구체예에 있어서, 상기 쿠티박테리움 속 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물은 조성물 총 중량에 대하여 50 내지 90 중량%로 포함되는 것일 수 있다. 상기 쿠티박테리움 속 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물은 조성물 종 중량에 대하여 예를 들어, 50 내지 90 중량%, 50 내지 80 중량%, 50 내지 70 중량%, 55 내지 90 중량%, 55 내지 85 중량%, 55 내지 75 중량%, 60 내지 90 중량%, 60 내지 80 중량% 또는 70 내지 75 중량%로 포함될 수 있다. 이때, 상기 쿠티박테리움 속 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물의 함량이 상기 범위 미만이거나 또는 상기 범위를 초과하는 경우, 피부 상태 개선 효과를 충분히 발휘할 수 없다는 문제점이 있다.
상기 인하이드로박터 속(Enhydrobacter sp.) 균주는 예를 들어, 인하이트로박터 에어로사커스(Enhydrobacter aerosaccus)(기탁번호 KCCM13073P)인 것일 수 있다.
일 구체예에 있어서, 상기 인하이드로박터 속 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물은 조성물 총 중량에 대하여 0.5 내지 10 중량%로 포함되는 것일 수 있다. 상기 인하이드로박터 속 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물은 조성물 총 중량에 대하여 예를 들어, 0.5 내지 10 중량%, 0.5 내지 8 중량%, 0.5 내지 5 중량%, 1 내지 7 중량%, 1 내지 6 중량%, 2 내지 9 중량%, 또는 2 내지 5 중량%로 포함될 수 있다. 이때, 상기 인하이드로박터 속 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물의 함량이 상기 범위 미만이거나 또는 상기 범위를 초과하는 경우, 피부 상태 개선 효과를 충분히 발휘할 수 없다는 문제점이 있다.
본 명세서에서 용어, "DNA 단편 혼합물"은 인산, 4종류의 염기 및 데옥시리보오스(deoxyribose)로 이루어진 생체 고분자에 해당하는 DNA가 추출된 형태로서 다양한 분자량을 갖는 DNA 단편 형태로 혼합되어 존재한다.
일 구체예에 있어서, 상기 DNA 단편 혼합물은 가수분해(hydrolyzed)된 것일 수 있다.
상기 DNA 단편 혼합물은 예를 들어, 폴리데옥시리보뉴클레오티드(polydeoxyribonucleotide; PDRN), 폴리뉴클레오티드(polynucleotide) 등인 것일 수 있다. 상기 폴리데옥시리보뉴클레오티드(polydeoxyribonucleotide; PDRN)는 짧은 데옥시리보뉴클레오타이드(short deoxyribonucleotide)의 혼합물(mixture)로서, DNA사슬을 일정 크기로 분획화하여 만든 저분자량 DNA 복합체(low molecular weight DNA complex)의 일종이다. 또한, 상기 폴리뉴클레오티드(polynucleotide)는 뉴클레오티드 단위체(monomer)가 공유결합에 의해 사슬모양으로 이어진 뉴클레오티드의 중합체(polymer)로 일정한 길이 이상의 DNA 또는 RNA 가닥을 의미한다. 상기 폴리뉴클레오티드는 예를 들어, 폴리데옥시리보뉴클레오티드에 비해 상대적으로 핵산의 길이가 길거나 분자량이 큰 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
다른 구체예에 있어서, 상기 DNA 단편 혼합물의 분자량은 50 내지 10,000 kDa인 것일 수 있다. 상기 DNA 단편 혼합물의 분자량은 예를 들어, 50 내지 10,000 kDa, 50 내지 5,000 kDa, 50 내지 3,000 kDa, 50 내지 1,500 kDa, 1,000 내지 10,000 kDa, 1,000 내지 5,000 kDa 또는 5,000 내지 10,000 kDa인 것일 수 있다.
다른 구체예에 있어서, 상기 DNA 단편 혼합물은 어류의 정소 또는 정액에서 추출하여 수득한 DNA 단편 혼합물인 것일 수 있으며, 상기 어류는 연어과, 구체적으로 연어 또는 송어인 것일 수 있다. 다른 구체예에 있어서, 상기 DNA 단편 혼합물은 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 1 중량%로 포함되는 것일 수 있다. 상기 DNA 단편 혼합물은 조성물 총 중량에 대하여 예를 들어, 0.01 내지 1 중량%, 0.01 내지 0.7 중량%, 0.03 내지 0.7 중량%, 0.1 내지 0.8 중량% 또는 0.3 내지 0.6 중량%로 포함될 수 있다. 이때, 상기 DNA 단편 혼합물의 함량이 상기 범위 미만이거나 또는 상기 범위를 초과하는 경우, 피부 상태 개선 효과를 충분히 발휘할 수 없다는 문제점이 있다.
상기 조성물은 스타필로코커스 속, 스트렙토코커스 속, 쿠티박테리움 속, 인하이드로박터 속 균주 및 DNA 단편 혼합물을 특정 중량비로 포함함으로써 피부 상태 개선의 시너지 활성을 갖는 것일 수 있다.
일 구체예에 있어서, 상기 상기 스타필로코커스 속 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물; 스트렙토코커스 속 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물; 쿠티박테리움 속 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물; 인하이드로박터 속 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물; 및 DNA 단편 혼합물은 1:1 내지 2:5 내지 7:0.1 내지 0.5:0.01 내지 0.06의 중량비로 혼합된 것일 수 있다. 상기 스타필로코커스 속, 스트렙토코커스 속, 쿠티박테리움 속, 인하이드로박터 속 균주 및 DNA 단편 혼합물은 예를 들어, 1:1 내지 2:5 내지 7:0.1 내지 0.5:0.01 내지 0.06, 1:1 내지 1.5:5 내지 6.5:0.1 내지 0.3:0.01 내지 0.05, 또는 1:1 내지 1.3:5.5 내지 7:0.2 내지 0.5:0.03 내지 0.05의 중량비로 혼합된 것일 수 있다. 이때, 상기 스타필로코커스 속, 스트렙토코커스 속, 쿠티박테리움 속, 인하이드로박터 속 균주 및 DNA 단편 혼합물의 혼합 중량비가 상기 범위 미만이거나 또는 상기 범위를 초과하는 경우, 피부 상태 개선 효과를 충분히 발휘할 수 없다는 문제점이 있다.
따라서, 일 양상에 따른 조성물은 스타필로코커스 속(Staphylococcus sp.) 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물; 스트렙토코커스 속(Streptococcus sp.) 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물; 쿠티박테리움 속(Cutibacterium sp.) 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물; 인하이드로박터 속(Enhydrobacter sp.) 균주, 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물; 및 DNA 단편 혼합물을 특정 함량 및 중량비로 포함함으로써 피부 상태 개선의 시너지 효과를 발휘할 수 있다.
본 명세서에서 용어, "유효성분으로 포함"은 상기에서 언급한 효과를 나타낼 수 있는 정도로 본 명세서의 균주, 이의 파쇄액, 배양액, 또는 이의 배양액의 추출물이 첨가되는 것을 의미하고, 약물전달 및 안정화 등을 위하여 다양한 성분을 부성분으로 첨가하여 다양한 형태로 포뮬레이션 (formulation)되는 것을 포함하는 의미이다.
일 구체예에 있어서, 상기 조성물은 화장료 조성물일 수 있다.
상기 화장료 조성물은 예를 들면, 유연화장수, 영양화장수, 마사지크림, 영양크림, 에센스, 팩, 젤, 앰플 또는 피부 점착 타입의 화장료 제형을 갖는 것일 수 있다.
상기 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 상기 조성물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예를 들면, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함할 수 있다.
다른 구체예에 있어서, 상기 조성물은 피부외용제용 조성물일 수 있다.
본 명세서에서, 상기 피부외용제는 크림, 겔, 연고, 피부 유화제, 피부 현탁액, 경피전달성 패치, 약물 함유 붕대, 로션, 또는 그 조합일 수 있다. 상기 피부외용제는 통상 화장품이나 의약품 등의 피부외용제에 사용되는 성분, 예를 들면 수성성분, 유성성분, 분말성분, 알코올류, 보습제, 증점제, 자외선흡수제, 미백제, 방부제, 산화방지제, 계면활성제, 향료, 색제, 각종 피부 영양제, 또는 이들의 조합과 필요에 따라서 적절하게 배합될 수 있다. 상기 피부외용제는, 에데트산이나트륨, 에데트산삼나트륨, 시트르산나트륨, 폴리인산나트륨, 메타인산나트륨, 글루콘산 등의 금속봉쇄제, 카페인, 탄닌, 벨라파밀, 감초추출물, 글라블리딘, 칼린의 과실의 열수추출물, 각종생약, 아세트산토코페롤, 글리틸리틴산, 트라넥삼산 및 그 유도체 또는 그 염등의 약제, 비타민 C, 아스코르브산인산마그네슘, 아스코르브산글루코시드, 알부틴, 코지산, 글루코스, 프룩토스, 트레할로스 등의 당류등도 적절하게 배합할 수 있다.
다른 구체예에 있어서, 상기 조성물은 건강기능식품 조성물일 수 있다.
상기 건강기능식품 조성물은 상기 균주 또는 이의 배양액 단독 또는 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적 (예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 본 명세서의 조성물은 원료에 대하여 15 중량부 이하의 양으로 첨가될 수 있다. 상기 건강기능식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 건강기능식품의 종류 중 음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 건강식품 조성물은 또한 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제, 또는 그 조합을 함유할 수 있다. 상기 건강기능식품 조성물은 또한, 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료, 야채 음료의 제조를 위한 과육, 또는 그 조합을 함유할 수 있다.
또한, 다른 양상은 유효한 양의 상기한 조성물을 그를 필요로 하는 개체에 처리 또는 투여하는 단계를 포함하는 개체의 상태를 예방, 개선, 또는 치료하는 방법을 제공한다.
상기 개체의 상태는 피부와 관련된 상태와 관련된 상태일 수 있다.
본 명세서에서 용어, "투여하는", "도입하는", 및 "이식하는"은 상호교환적으로 사용되고 일 구체예에 따른 조성물의 원하는 부위로의 적어도 부분적 국소화를 초래하는 방법 또는 경로에 의한 개체 내로의 일 구체예에 따른 조성물의 배치를 의미할 수 있다.
투여는 당업계에 알려진 방법에 의하여 투여될 수 있다. 투여는 예를 들면, 정맥내, 근육내, 경구, 경피 (transdermal), 점막, 코안 (intranasal), 기관내 (intratracheal) 또는 피하 투여와 같은 경로로, 임의의 수단에 의하여 개체로 직접적으로 투여될 수 있다. 상기 투여는 전신적으로 또는 국부적으로 투여될 수 있다.
상기 개체는 포유동물, 예를 들면, 사람, 소, 말, 돼지, 개, 양, 염소, 또는 고양이일 수 있다. 상기 개체는 피부미용 개선, 예를 들어 피부 보습, 피부 장벽 강화, 피부 염증 억제, 피부 주름 개선 효과를 필요로 하는 개체일 수 있다.
상기 투여는 일 구체예에 따른 조성물을 개체당 일당 0.1 ㎎ 내지 1,000 ㎎, 예를 들면, 0.1 ㎎ 내지 500 ㎎, 0.1 ㎎ 내지 100 ㎎, 0.1 ㎎ 내지 50 ㎎, 0.1 ㎎ 내지 25 ㎎, 1 ㎎ 내지 1,000 ㎎, 1 ㎎ 내지 500 ㎎, 1 ㎎ 내지 100 ㎎, 1 ㎎ 내지 50 ㎎, 1 ㎎ 내지 25 ㎎, 5 ㎎ 내지 1,000 ㎎, 5 ㎎ 내지 500 ㎎, 5 ㎎ 내지 100 ㎎, 5 ㎎ 내지 50 ㎎, 5 ㎎ 내지 25 ㎎, 10 ㎎ 내지 1,000 ㎎, 10 ㎎ 내지 500 ㎎, 10 ㎎ 내지 100 ㎎, 10 ㎎ 내지 50 ㎎, 또는 10 ㎎ 내지 25 ㎎을 투여하는 것일 수 있다. 다만, 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성별, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있고, 당업자라면 이러한 요인들을 고려하여 투여량을 적절히 조절할 수 있다. 투여 횟수는 1일 1회 또는 임상적으로 용인가능한 부작용의 범위 내에서 2회 이상이 가능하고, 투여 부위에 대해서도 1개소 또는 2개소 이상에 투여할 수 있으며, 매일 또는 2 내지 5일 간격으로 총 투여 일수는 한번 치료 시 1일에서 30일까지 투여될 수 있다. 필요한 경우, 적정 시기 이후에 동일한 치료를 반복할 수 있다. 인간 이외의 동물에 대해서도, kg당 인간과 동일한 투여량으로 하거나, 또는 예를 들면 목적의 동물과 인간과의 기관(심장 등)의 용적비(예를 들면, 평균값) 등으로 상기의 투여량을 환산한 양을 투여할 수 있다.
일 양상에 따른 조성물은 콜라겐, 엘라스틴, HAS3 및 ABCA12의 발현을 증가시키는 바, 피부 노화, 피부 장벽 강화, 피부 주름, 또는 피부 탄력과 같은 피부 상태 개선에 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 일 양상에 따른 조성물이 COL1A1 발현에 미치는 영향을 나타낸 결과이다.
도 2는 일 양상에 따른 조성물이 ELN 발현에 미치는 영향을 나타낸 결과이다.
도 3은 일 양상에 따른 조성물이 HAS3 발현에 미치는 영향을 나타낸 결과이다.
도 4는 일 양상에 따른 조성물이 ABCA12 발현에 미치는 영향을 나타낸 결과이다.
도 2는 일 양상에 따른 조성물이 ELN 발현에 미치는 영향을 나타낸 결과이다.
도 3은 일 양상에 따른 조성물이 HAS3 발현에 미치는 영향을 나타낸 결과이다.
도 4는 일 양상에 따른 조성물이 ABCA12 발현에 미치는 영향을 나타낸 결과이다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.
[제조예]
제조예 1. 스타필로코커스 에피데르미스 균주 배양액의 제조
스타필로코커스 에피데르미스 균주 배양액을 제조하였다. 구체적으로, 한국미생물보존센터(Korean Culture Center of Microorganisms, KCCM)로부터 스타필로코커스 에피데르미디스(Staphylococcus epidermidis sp.) 균주(수탁번호 KCCM12559P)를 분양 받아 R2A 배지에서 150 rpm/min으로 현탁하여 증균 배양하였다. 배양 기간 동안 온도를 약 30 ℃로 유지하여 주고, 72시간 동안 배양한 후, 0.45 ㎛ 필터를 사용하여 배양액을 여과하였다.
제조예 2. 스트렙토코커스 썰모필러스 균주 배양액의 제조
스트렙토코커스 썰모필러스(Streptococcus thermophiles sp.) 균주(수탁번호 KCCM12004P) 및 TSB 배지를 사용하였다는 점을 제외하고는 상기 제조예 1과 동일한 방법으로 스트렙토코커스 썰모필러스 균주 배양액을 제조하였다.
제조예 3. 쿠티박테리움 아크네스 균주 배양액의 제조
쿠티박테리움 아크네스(Cutibacterium acnes sp.) 균주(수탁번호 KCCM12680P) 및 RCM 배지를 사용하여 정치 배양하였다는 점을 제외하고는 상기 제조예 1과 동일한 방법으로 쿠티박테리움 아크네스 균주 배양액을 제조하였다.
제조예 4. 인하이드로박터 에어로사커스 균주 배양액의 제조
인하이드로박터 에어로사커스(Enhydrobacter aerosaccus sp.) 균주(수탁번호 KCCM13073P)를 사용하였다는 점을 제외하고는 상기 제조예 3과 동일한 방법으로 인하이드로박터 에어로사커스 균주 배양액을 제조하였다.
[실시예]
실시예 1. 균주 배양액 및 DNA 단편 혼합물을 포함하는 조성물의 제조
하기 표 1의 성분 및 함량을 포함하는 조성물을 제조하였다. 구체적으로, 제조예 1~4의 배양액과 흰색 또는 미백색 분말로서, DNA 단편 혼합물로서 분자량 50~1,500 kDa의 hydrolyzed DNA(㈜파마리서치 제조)을 혼합하여 조성물을 제조하였다. 본 명세서에서 다른 언급이 없는 한 함량은 중량%이다.
| 성분 | 함량 |
| 제조예 1 | 11 |
| 제조예 2 | 14 |
| 제조예 3 | 71.5 |
| 제조예 4 | 3 |
| hydrolyzed DNA | 0.5 |
[비교예]
비교예 1~2. 균주 배양액 및 DNA 단편 혼합물을 포함하는 조성물의 제조
하기 표 2의 성분 및 함량을 포함하였다는 점을 제외하고는 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 조성물을 제조하였다.
| 성분 | 비교예 1 | 비교예 2 |
| 제조예 1 | 11 | 24.875 |
| 제조예 2 | 14 | 24.875 |
| 제조예 3 | 71.5 | 24.875 |
| 제조예 4 | 3 | 24.875 |
| 멸균 증류수 | 0.5 | 0.5 |
[실험예]
항노화 및 항주름 활성 확인
일 양상에 따른 조성물의 피부 노화 및 주름 개선 활성을 확인하였다. 구체적으로, 인간 섬유아세포 세포주(Human dermal fibroblast, Hs68)를 6 웰 플레이트에 3.5x105로 분주한 후, 37℃ 5% CO2 조건의 배양기에서 24 시간 동안 배양하였다. 이후 배지를 제거하고 DPBS를 넣은 후 20 mJ/cm2의 UVB를 조사하거나 조사하지 않았다. UVB 조사 직후 DPBS를 제거하고 FBS가 없는 배지로 갈아 준 후, 상기 실시예 및 비교예에서 제조한 혼합물을 처리하고 24시간 동안 추가 배양하였다. 음성 대조군으로 자외선 처리 및 균주 배양액 비처리군을 사용하였다. 그 후 각 시료의 세포에서 트리졸(RNA iso, DAKARA, 일본)을 이용하여 RNA를 분리한 뒤 nanodrop으로 260 ㎚에서 RNA를 정량한 후, 각각 2㎍의 RNA를 사용하여 증폭기에서 cDNA를 합성하였다(C1000 Thermal Cycler, Bio-Rad, 미국). 합성된 cDNA를 주형으로 타겟 유전자인 COL1A1, 및 ELN(elstin)에 대하여 사이버그린 (SYBR Green supermix, Applied Biosystems, USA)을 프라이머 및cDNA와 함께 첨가하여 실시간(real-time) PCR 기계(Step One Plus, AppliedBiosystems, 미국)에서 실시간 중합효소 연쇄반응을 수행하였다. 유전자의 발현량은 β-actin 유전자에 대한 보정을 통해 최종적으로 분석하였다.
도 1은 일 양상에 따른 조성물이 COL1A1 발현에 미치는 영향을 나타낸 결과이다.
도 2는 일 양상에 따른 조성물이 ELN 발현에 미치는 영향을 나타낸 결과이다.
그 결과, 도 1 및 도 2에 나타낸 바와 같이, 자외선 조사에 의하여 섬유아세포주에서 COL1A1 및 엘라스틴의 발현이 감소하였고, 실시예 1 및 비교예 1~2의 처리에 의하여 COL1A1 및 엘라스틴의 발현 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 구체적으로, 실시예 1은 비교예 1 및 비교예 2와 비교하여 COL1A1 및 엘라스틴의 발현이 유의하게 증가하는 것을 확인할 수 있었다.
즉, 일 양상에 따른 조성물은 4가지 종류의 균주 배양액 및 DNA 단편 혼합물을 유효성분으로 포함함으로써 자외선에 의해 감소된 COL1A1 및 엘라스틴의 발현을 증가시키는 바, 피부 노화, 주름 개선, 예방 또는 치료에 효과가 있다.
피부 보습 활성 확인
일 양상에 따른 조성물의 피부 보습 활성을 확인하였다. 구체적으로, 인간 각질형성 세포주(human keratinocyte)인 HaCaT 세포를 10% 우혈청 (fetal bovine serum)을 포함한 DMEM 배지(Dulbecco'smodified Eagle's Medium, Gibco 1210-0038)에서 배양하였고, 배양은 모두 37℃ 5% CO2 배양기에서 수행하였다. 상기 배양된 세포주에 상기 실시예 및 비교예에서 제조한 혼합물을 처리하여 24시간 동안 추가 배양하였다. 그 후 각 시료의 세포에서 트리졸(RNA iso, TAKARA, 일본)을 이용하여 RNA를 분리한 뒤 nanodrop으로 260㎚에서 RNA를 정량한 후, 각각 2㎍의 RNA를 사용하여 증폭기에서 cDNA를 합성하였다(C1000 Thermal Cycler, Bio-Rad, 미국). 합성된 cDNA를 주형으로 보습과 관련된 타겟 유전자 HAS3(히알루론산 합성 효소)에 대한 프라이머 및 cDNA와 함께 첨가하여 실시간(real-time) PCR 기계 (Step One Plus, Applied Biosystems, 미국)에서 실시간 중합효소 연쇄반응을 수행하였다. 유전자의 발현량은 β-actin 유전자에 대한 보정을 통해 최종적으로 분석하였다.
도 3은 일 양상에 따른 조성물이 HAS3 발현에 미치는 영향을 나타낸 결과이다.
그 결과, 도 3에 나타낸 바와 같이, 실시예 1은 비교예 1~2와 비교하여 HAS3 발현이 유의하게 증가한 것을 확인할 수 있었다.
즉, 일 양상에 따른 조성물은 4가지 종류의 균주 배양액 및 DNA 단편 혼합물을 유효성분으로 포함함으로써 HAS3의 발현을 유의하게 증가시키는 바, 피부 보습 개선에 유용하게 사용될 수 있다.
피부 장벽 기능 개선 활성 확인
일 양상에 따른 조성물의 피부 장벽 기능 개선 활성을 확인하였다. 구체적으로, 인간 각질형성세포주(human keratinocyte)인 HaCaT 세포에 인터페론 생산을 촉진하는 합성 리보핵산인 폴리 IC(polyinosinic:polycytidylic acid; Poly I:C)를 처리한 후, 24시간 동안 배양하여 HaCaT 세포주를 자극하였다. 이후, 자극에 의해 노화된 세포에 상기 실시예 및 비교예에서 제조한 혼합물 1%(w/w)을 처리하고 24시간 동안 추가 배양하였다. 이후, RNA를 추출하고, RNA를 정량(nano drop)하였다. RNA 16 ㎕를 정량하여 70℃에서 5분 동안 처리한 후, PCR premix에 넣고 약하게 볼택싱(vertexing)하였다. 이후 42℃에서 55분 처리하고, 70℃에서 15분 처리하고 4℃에 보관하여 cDNA를 합성하였다. 합성한 cDNA를 PCR를 이용하여 증폭하였다. cDNA 2 ㎕, 각각의 유전자를 타겟으로 하는 정방향 프라이머 1 ㎕, 역방향 프라이머 1 ㎕, 증류수 6 ㎕, 프리믹스(premix) 시료 10 ㎕를 혼합한 후, 95℃ 3분, {95℃ 30초, 49 내지 53℃ 30초, 72℃ 1분} 40 사이클을 처리하여 증폭하였다.
도 4는 일 양상에 따른 조성물이 ABCA12 발현에 미치는 영향을 나타낸 결과이다.
그 결과, 도 4에 나타낸 바와 같이, 실시예 1은 비교예 1~2와 비교하여 ABCA12 발현이 유의하게 증가한 것을 확인할 수 있었다.
즉, 일 양상에 따른 조성물은 4가지 종류의 균주 배양액 및 DNA 단편 혼합물을 유효성분으로 포함함으로써, ABCA12의 발현을 유의하게 증가시키는 바, 피부 장벽 개선에 유용하게 사용될 수 있다.
전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.
Claims (11)
- 스타필로코커스 에피데르미디스(Staphylococcus epidermidis) 균주(수탁번호: KCCM12559P), 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물;
스트렙토코커스 썰모필러스(Streptococcus thermophiles) 균주(수탁번호: KCCM12004P), 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물;
쿠티박테리움 아크네스(Cutibacterium acnes) 균주(수탁번호: KCCM12680P), 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물;
인하이드로박터 에어로사커스(Enhydrobacter aerosaccus) 균주(수탁번호: KCCM13073P), 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물; 및
DNA 단편 혼합물을 유효성분으로 포함하는 피부 상태 개선용 화장료 조성물. - 청구항 1에 있어서, 상기 피부 상태는 피부 장벽 강화, 피부 주름, 또는 피부 탄력인 것인 화장료 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 스타필로코커스 에피데르미디스 균주(수탁번호: KCCM12559P), 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물은 조성물 총 중량에 대하여 5 내지 25 중량%로 포함되는 것인 화장료 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 스트렙토코커스 썰모필러스 균주(수탁번호: KCCM12004P), 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물은 조성물 총 중량에 대하여 5 내지 30 중량%로 포함되는 것인 화장료 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 쿠티박테리움 아크네스 균주(수탁번호: KCCM12680P), 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물은 조성물 총 중량에 대하여 50 내지 90 중량%로 포함되는 것인 화장료 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기, 인하이드로박터 에어로사커스 균주(수탁번호: KCCM13073P), 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물은 조성물 총 중량에 대하여 0.5 내지 10 중량%로 포함되는 것인 화장료 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 DNA 단편 혼합물은 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 1 중량%로 포함되는 것인 화장료 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 DNA 단편 혼합물은 폴리데옥시리보뉴클레오티드(polydeoxyribonucleotide), 폴리뉴클레오티드(polynucleotide) 또는 이들의 혼합물인 것인 화장료 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 DNA 단편 혼합물의 분자량은 50 내지 10,000 kDa인 것인 화장료 조성물.
- 청구항 1에 있어서,
상기 스타필로코커스 에피데르미디스 균주(수탁번호: KCCM12559P), 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물;
스트렙토코커스 썰모필러스 균주(수탁번호: KCCM12004P), 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물;
쿠티박테리움 아크네스 균주(수탁번호: KCCM12680P), 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물;
인하이드로박터 에어로사커스 균주(수탁번호: KCCM13073P), 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물; 및
DNA 단편 혼합물은 1:1 내지 2:5 내지 7:0.1 내지 0.5:0.01 내지 0.06의 중량비로 혼합된 것인 화장료 조성물. - 스타필로코커스 에피데르미디스(Staphylococcus epidermidis) 균주(수탁번호: KCCM12559P), 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물;
스트렙토코커스 썰모필러스(Streptococcus thermophiles) 균주(수탁번호: KCCM12004P), 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물;
쿠티박테리움 아크네스(Cutibacterium acnes) 균주(수탁번호: KCCM12680P), 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물;
인하이드로박터 에어로사커스(Enhydrobacter aerosaccus) 균주(수탁번호: KCCM13073P), 그의 파쇄액, 배양액, 배양액의 추출물 또는 이들의 혼합물; 및
DNA 단편 혼합물을 유효성분으로 포함하는 피부 상태 개선용 피부외용제 조성물.
Priority Applications (2)
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|---|---|---|---|
| KR1020220093390A KR102569532B1 (ko) | 2022-07-27 | 2022-07-27 | 스타필로코커스 속, 스트렙토코커스 속, 쿠티박테리움 속, 인하이드로박터 균주 및 dna 단편 혼합물을 포함하는 화장료 조성물 |
| PCT/KR2023/009049 WO2024025173A1 (ko) | 2022-07-27 | 2023-06-28 | 스타필로코커스 속, 스트렙토코커스 속, 쿠티박테리움 속, 인하이드로박터 속 균주 및 dna 단편 혼합물을 포함하는 화장료 조성물 |
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| KR1020220093390A KR102569532B1 (ko) | 2022-07-27 | 2022-07-27 | 스타필로코커스 속, 스트렙토코커스 속, 쿠티박테리움 속, 인하이드로박터 균주 및 dna 단편 혼합물을 포함하는 화장료 조성물 |
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