KR102548602B1 - Automatic inoculation device for tubercle bacillus culture media and mycobacterium tuberculosis drug resistance diagnosis method using the same - Google Patents
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Abstract
본 발명은 6 well plate를 포함하는 결핵균 배양 액체 배지 자동 접종 장치 및 이를 이용한 결핵균 약제 내성 진단 방법에 관한 것으로, 더욱 구체적으로는 결핵균이 배양된 액체배지를 자동 접종 장치를 이용하여 6 well plate에 분주되어 있는 색소 및 항생제가 포함된 배지원료에 접종하여 다양한 종류의 항생제 중 어떤 항생제에 내성이 있는지 간단하게 진단이 가능한 기술에 관한 것이다.The present invention relates to an automatic inoculation device for Mycobacterium tuberculosis culture liquid medium containing a 6-well plate and a method for diagnosing drug resistance of Mycobacterium tuberculosis using the same. It relates to a technology that can simply diagnose which antibiotic is resistant among various types of antibiotics by inoculating medium raw materials containing dyes and antibiotics.
Description
본 발명은 6 well plate를 포함하는 결핵균 배양 액체 배지 자동 접종 장치 및 이를 이용한 결핵균 약제 내성 진단 방법에 관한 것으로, 더욱 구체적으로는 결핵균이 배양된 액체배지를 자동 접종 장치를 이용하여 6 well plate에 분주되어 있는 색소 및 항생제가 포함된 배지원료에 접종하여 다양한 종류의 항생제 중 어떤 항생제에 내성이 있는지 간단하게 진단이 가능한 기술에 관한 것이다.The present invention relates to an automatic inoculation device for Mycobacterium tuberculosis culture liquid medium containing a 6-well plate and a method for diagnosing drug resistance of Mycobacterium tuberculosis using the same. It relates to a technology that can simply diagnose which antibiotic is resistant among various types of antibiotics by inoculating medium raw materials containing dyes and antibiotics.
결핵은 전파가능성을 고려하여 발생 또는 유행 시 24시간 이내에 신고하고 격리가 필요한 감염병 2급 법정 전염병으로 WHO의 'Global Tuberculosis Report 2018'에 따르면 2017년 기준 우리나라는 10만명 당 결핵발생률이 70명, 사망률이 5명으로 OECD 35개 회원국 중 1위이며 OECD 평균 10만명 당 결핵발생율 11.1명, 사망률 0.9명과 비교하여 현저하게 높다. 이러한 결핵은 최초에 흉부엑스레이와 객담검사를 통하여 감염여부를 확인하고 감염되었을 경우 항생제를 처방하여 치료를 진행한다. 그 후 경과에 따라 1차 또는 2차, 3차의 단계별 항생제를 복용하게 되는데 단계별 항생제 복용을 위해서는 항생제 별로 내성유무를 판단해야 한다. 내성유무는 처방하는 항생제가 포함된 배지를 사용하여 결핵균주 집락의 증식 여부로 판단한다. 내성을 검사하는 항생제 배지는 항생제의 종류와 농도에 따라 10여 종 이상으로 개별로 검사하기에는 비용이나 시간, 검사 시 감염위험, 검사자 간의 숙련도에 따른 결과 차이 등 단점이 많다. 그러나 항생제내성 검사를 하지 않고 약을 처방하게 되면 약제에 내성을 가진 다제내성결핵으로 발전할 위험이 있어 필수적으로 진행해야 하는 검사이다.Tuberculosis is a class 2 statutory contagious disease that requires reporting and isolation within 24 hours of occurrence or epidemic in consideration of the possibility of transmission. This number is 1st among 35 OECD member countries, and is remarkably high compared to the OECD average of 11.1 cases of tuberculosis and 0.9 cases of death per 100,000 people. Such tuberculosis is first confirmed through a chest x-ray and sputum test, and if infected, antibiotics are prescribed and treated. After that, depending on the progress, the first, second, or third antibiotics are taken. The presence or absence of resistance is determined by the proliferation of tuberculosis strain colonies using a medium containing prescribed antibiotics. There are more than 10 types of antibiotic media for testing resistance depending on the type and concentration of antibiotics, and there are many disadvantages such as cost and time, risk of infection during testing, and differences in results depending on the skill level of testers to test individually. However, if a drug is prescribed without an antibiotic resistance test, there is a risk of developing drug-resistant multidrug-resistant tuberculosis.
한편, 결핵 내성 진단 방법에 관한 종래기술로는 대한민국공개특허 제10-2016-0056342호가 있다.Meanwhile, Korean Patent Publication No. 10-2016-0056342 is a prior art related to a method for diagnosing tuberculosis resistance.
본 발명은 상술한 바와 같은 종래 기술의 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로, 결핵균이 배양된 액체배지를 자동 접종 장치를 이용하여 6 well plate에 분주되어 있는 색소 및 항생제가 포함된 배지원료에 접종하여 다양한 종류의 항생제 중 어떤 항생제에 내성이 있는지 간단하게 진단이 가능한 기술을 제공하는 데 그 목적이 있다.The present invention has been made to solve the problems of the prior art as described above, and inoculates a liquid medium in which Mycobacterium tuberculosis is cultured into medium raw materials containing pigments and antibiotics dispensed in a 6-well plate using an automatic inoculation device Its purpose is to provide a technology that can easily diagnose which antibiotic is resistant among various types of antibiotics.
본 발명이 해결하려는 과제는 전술한 과제로 제한되지 아니하며, 언급되지 아니한 또 다른 기술적 과제들은 후술할 내용으로부터 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.The problem to be solved by the present invention is not limited to the above problem, and other technical problems not mentioned will be clearly understood by those skilled in the art from the description below.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명에 따른 6 well plate를 포함하는 결핵균 배양 액체 배지 자동 접종 장치는 외부로부터 밀폐된 공간에 설치되는 본체; 상기 본체에 좌우로 이동 가능하게 설치되는 구동부; 상기 본체의 하단 일측에 구비되며 배지원료가 분주된 복수개의 6 well plate가 안착되는 제1안착부; 상기 본체의 하단 타측에 구비되며 결핵균이 배양된 액체배지가 수용된 액체배지 수용 용기가 안착되는 제2안착부; 상기 제2안착부의 측면에 배치되어 상기 구동부에 의해 상기 제2안착부로부터 이동되어 온 상기 액체배지 수용 용기를 고정하는 거치부;를 포함하여 형성되는 것을 특징으로 한다.An automatic inoculation device for tuberculosis culture liquid medium including a 6-well plate according to the present invention for achieving the above object is a main body installed in a closed space from the outside; a drive unit installed to be movable left and right on the main body; a first seating part provided on one side of the lower end of the main body and on which a plurality of 6-well plates to which culture medium materials are dispensed are seated; a second seat provided on the other side of the lower end of the main body and in which a liquid medium containing container containing a liquid medium in which Mycobacterium tuberculosis is cultured is seated; It is characterized in that it is formed including; a holding portion disposed on the side of the second seating portion to fix the liquid medium accommodating container moved from the second seating portion by the driving unit.
이때, 상기 구동부는, 상기 6 well plate의 덮개를 개폐하기 위한 제1개폐장치; 상기 액체배지 수용 용기를 이송하고 상기 액체배지 수용 용기의 뚜껑을 개폐하기 위한 제2개폐장치; 상기 액체배지 수용 용기에 수용된 결핵균이 배양된 액체배지를 흡입한 후 상기 6 well plate에 분주된 배지원료에 접종하기 위한 팁;을 포함하며, 상기 제1개폐장치, 제2개폐장치 및 팁은 상기 구동부에 상하로 승강 가능하도록 형성되는 것을 특징으로 한다.At this time, the driving unit may include a first opening and closing device for opening and closing the cover of the 6-well plate; a second opening/closing device for transferring the liquid medium accommodating container and opening and closing the lid of the liquid medium accommodating container; A tip for inoculating the medium material dispensed into the 6-well plate after aspirating the liquid medium in which Mycobacterium tuberculosis is cultured in the liquid medium container, wherein the first switchgear, the second switchgear and the tip are Characterized in that the driving unit is formed to be able to move up and down.
또한, 상기 제2안착부의 전면에는 하강하는 상기 팁을 수용하여 상기 팁의 끝단이 오염되는 것을 방지하는 팁삽입부가 구비되는 것을 특징으로 한다.In addition, a tip insertion portion for accommodating the descending tip and preventing the tip from being contaminated is provided on the front surface of the second seating portion.
또한, 상기 6 well plate의 배지원료에 결핵균을 접종할 때 상기 제1안착부가 일정한 패턴으로 유동하는 것을 특징으로 한다.In addition, when inoculating Mycobacterium tuberculosis into the medium raw material of the 6-well plate, it is characterized in that the first seating portion flows in a constant pattern.
또한, 상기 6 well plate에 분주되는 배지원료에 색소가 첨가되는 것을 특징으로 한다.In addition, it is characterized in that a dye is added to the medium raw material dispensed in the 6 well plate.
한편, 상기 목적을 달성하기 위한 본 발명에 따른 6 well plate는 복수개의 원형 공간; 상기 복수개의 원형 공간에 분주되는 배지원료; 상기 배지원료에 첨가되는 서로 다른 종류의 항생제; 및 상기 배지원료에 첨가되어 결핵균이 증식하여 생성된 집락이 잘 보이도록 하는 색소;를 포함하는 것을 특징으로 한다.On the other hand, a 6 well plate according to the present invention for achieving the above object includes a plurality of circular spaces; medium raw materials dispensed into the plurality of circular spaces; Different types of antibiotics added to the medium raw material; and a pigment added to the medium raw material to make colonies produced by the proliferation of Mycobacterium tuberculosis clearly visible.
한편, 상기 목적을 달성하기 위한 본 발명에 따른 결핵균 약제 내성 진단 방법은 구동부의 제1개폐장치가 6 well plate의 덮개를 개방하는 단계; 상기 구동부의 제2개폐장치가 결핵균이 배양된 액체배지가 수용된 액체배지 수용 용기를 거치부로 이동시켜 고정하는 단계; 상기 구동부의 제2개폐장치가 상기 액체배지 수용 용기의 뚜껑을 연 다음 상기 구동부의 팁이 결핵균이 배양된 액체배지를 일정량만큼 흡입한 후 상기 구동부의 제2개폐장치가 액체배지 수용 용기의 뚜껑을 닫는 단계; 상기 구동부의 팁이 결핵균이 배양된 액체배지를 상기 6 well plate에 분주된 배지원료에 접종하는 단계; 상기 구동부의 제1개폐장치가 상기 6 well plate의 덮개를 덮은 후 상기 구동부의 제2개폐장치가 상기 거치부에 고정된 액체배지 수용 용기를 상기 제2안착부로 이동시키는 단계; 및 상기 6 well plate를 인큐베이터에서 3주간 배양하여 집락의 발생 여부를 확인하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 한다.On the other hand, the method for diagnosing drug resistance of Mycobacterium tuberculosis according to the present invention for achieving the above object includes the steps of opening the cover of a 6-well plate by a first opening/closing device of a driving unit; moving and fixing, by the second opening/closing device of the driving unit, a liquid medium accommodating container containing a liquid medium in which Mycobacterium tuberculosis is cultured; After the second opening/closing device of the driving unit opens the lid of the liquid medium accommodating container, and then the tip of the driving unit sucks in a certain amount of the liquid medium in which Mycobacterium tuberculosis is cultured, the second opening/closing device of the driving unit opens the lid of the liquid medium accommodating container. closing step; inoculating the liquid medium in which Mycobacterium tuberculosis is cultured into the medium material dispensed in the 6-well plate by the tip of the drive unit; moving the liquid medium accommodating container fixed to the holding unit to the second seating unit by the second opening and closing unit of the driving unit after the first opening/closing unit of the driving unit covers the cover of the 6-well plate; and culturing the 6-well plate in an incubator for 3 weeks to determine whether colonies are generated.
본 발명은 결핵균이 배양된 액체배지를 자동 접종 장치를 이용하여 6 well plate에 분주되어 있는 색소 및 항생제가 포함된 각각의 배지원료에 접종하여 다양한 종류의 항생제 중 어떤 항생제에 내성이 있는지 간단하게 진단할 수 있다.In the present invention, a liquid medium in which Mycobacterium tuberculosis is cultured is inoculated into each medium containing pigments and antibiotics distributed in a 6-well plate using an automatic inoculation device to easily diagnose which antibiotics are resistant among various types of antibiotics. can do.
또한, 밀폐된 공간에서 자동 접종 장치를 이용하여 6 well plate에 분주되어 있는 각각의 배지원료에 결핵균을 접종하며, 자동 접종 장치의 개폐장치를 이용하여 6 well plate 및 액체배지 수용 용기의 뚜껑을 자동으로 개방하여 결핵균을 배지원료에 접종한 후 덮개를 자동으로 닫기 때문에 원내 감염을 방지할 수 있다.In addition, tuberculosis bacillus is inoculated into each medium material dispensed into a 6-well plate using an automatic inoculation device in an enclosed space, and the lid of the 6-well plate and the liquid medium container is automatically opened using the opening and closing device of the automatic inoculation device. It is opened to inoculate tuberculosis bacillus into the medium material and then the cover is automatically closed to prevent nosocomial infection.
또한, 자동 접종 장치를 이용하여 미리 설정된 접종 속도 및 용량에 따라 일정한 속도 및 용량으로 배지원료에 결핵균이 배양된 액체배지를 분주하여 결핵균을 접종하며, 결핵균 접종 시 제1안착부가 일정한 패턴으로 유동하여 액체배지가 배지원료에 일정한 패턴으로 분주되기 때문에 결핵균 내성 진단의 정확성이 향상되는 효과가 있다.In addition, an automatic inoculation device is used to inoculate tuberculosis bacteria by dispensing a liquid medium in which tuberculosis bacteria are cultured in the medium raw material at a constant speed and capacity according to a preset inoculation speed and capacity, and when inoculating tuberculosis bacteria, the first seating part flows in a constant pattern Since the liquid medium is dispensed in a regular pattern to the medium raw material, there is an effect of improving the accuracy of tuberculosis resistance diagnosis.
또한, 항생제가 포함된 배지원료에 색소를 첨가함으로써 결핵균이 증식하여 생성된 집락이 배지원료에 첨가된 색소에 의해 잘 보이도록 하여 결핵균이 다양한 종류의 항생제 중 어떤 항생제에 내성이 있는지 명확하게 진단할 수 있다.In addition, by adding a pigment to the medium raw material containing the antibiotic, the colonies generated by the proliferation of Mycobacterium tuberculosis are clearly visible by the pigment added to the medium raw material, so that it is possible to clearly diagnose which antibiotics the Mycobacterium tuberculosis is resistant to among various types of antibiotics. can
본 발명의 효과들은 이상에서 언급한 효과들로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 효과들은 청구범위의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.The effects of the present invention are not limited to the effects mentioned above, and other effects not mentioned will be clearly understood by those skilled in the art from the description of the claims.
도 1은 본 발명의 실시예에 따른 6 well plate를 포함하는 결핵균 배양 액체 배지 자동 접종 장치의 사시도이다.
도 2 내지 도 6은 본 발명의 실시예에 따른 6 well plate를 포함하는 결핵균 배양 액체 배지 자동 접종 장치를 이용한 결핵균 약제 내성 진단 방법을 설명하기 위한 도면이다.
도 7은 본 발명의 실시예에 따른 6 well plate를 포함하는 결핵균 배양 액체 배지 자동 접종 장치에서 6 well plate가 안착된 제1안착부가 일정한 패턴으로 유동하여 결핵균이 배양된 액체배지가 6 well plate의 배지원료에 일정한 패턴으로 분주되는 상태를 도시한 도면이다.
도 8 및 도 9는 본 발명의 실시예에 따른 6 well plate를 포함하는 결핵균 배양 액체 배지 자동 접종 장치의 6 well plate에 결핵균이 증식하여 집락이 발생된 상태를 도시한 도면이다.1 is a perspective view of an automatic inoculation device for Mycobacterium tuberculosis culture liquid medium including a 6-well plate according to an embodiment of the present invention.
2 to 6 are views for explaining a method for diagnosing drug resistance of Mycobacterium tuberculosis using an automatic inoculation device for Mycobacterium tuberculosis culture liquid medium including a 6-well plate according to an embodiment of the present invention.
7 is an automatic inoculation device for tuberculosis culture liquid medium containing a 6-well plate according to an embodiment of the present invention, in which the first seating portion on which the 6-well plate is seated flows in a regular pattern, and the liquid medium in which Mycobacterium tuberculosis is cultured flows in a 6-well plate It is a diagram showing a state in which the medium material is dispensed in a certain pattern.
8 and 9 are diagrams showing a state in which Mycobacterium tuberculosis proliferates and colonies occur in a 6-well plate of an automatic inoculation device for Mycobacterium tuberculosis culture liquid medium including a 6-well plate according to an embodiment of the present invention.
이하에서는 본 발명의 바람직한 실시예를 첨부된 도면을 참조하여 설명한다. 다만 발명의 요지와 무관한 일부 구성은 생략 또는 압축할 것이나, 생략된 구성이라고 하여 반드시 본 발명에서 필요가 없는 구성은 아니며, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 결합되어 사용될 수 있다.Hereinafter, preferred embodiments of the present invention will be described with reference to the accompanying drawings. However, some configurations irrelevant to the gist of the present invention will be omitted or compressed, but the omitted configurations are not necessarily unnecessary in the present invention, and can be combined and used by those skilled in the art to which the present invention belongs. can
도 1은 본 발명의 실시예에 따른 6 well plate를 포함하는 결핵균 배양 액체 배지 자동 접종 장치의 사시도이고, 도 2 내지 도 6은 본 발명의 실시예에 따른 6 well plate를 포함하는 결핵균 배양 액체 배지 자동 접종 장치를 이용한 결핵균 약제 내성 진단 방법을 설명하기 위한 도면이고, 도 7은 본 발명의 실시예에 따른 6 well plate를 포함하는 결핵균 배양 액체 배지 자동 접종 장치에서 6 well plate가 안착된 제1안착부가 일정한 패턴으로 유동하여 결핵균이 배양된 액체배지가 6 well plate의 배지원료에 일정한 패턴으로 분주되는 상태를 도시한 도면이고, 도 8 및 도9는 본 발명의 실시예에 따른 6 well plate를 포함하는 결핵균 배양 액체 배지 자동 접종 장치의 6 well plate에 결핵균이 증식하여 집락이 발생된 상태를 도시한 도면이다.1 is a perspective view of an automatic inoculation device for Mycobacterium tuberculosis culture medium containing a 6-well plate according to an embodiment of the present invention, and FIGS. 2 to 6 are a Mycobacterium tuberculosis culture medium containing a 6-well plate according to an embodiment of the present invention. 7 is a diagram for explaining a method for diagnosing drug resistance of Mycobacterium tuberculosis using an automatic inoculation device, and FIG. 7 is a first seat in which a 6-well plate is seated in an automatic inoculation device for Mycobacterium tuberculosis culture liquid medium including a 6-well plate according to an embodiment of the present invention. It is a view showing a state in which the liquid medium in which Mycobacterium tuberculosis is cultured is dispensed in a regular pattern to the medium raw material of the 6-well plate by flowing in a certain pattern, and FIGS. 8 and 9 include a 6-well plate according to an embodiment of the present invention. It is a diagram showing a state in which Mycobacterium tuberculosis proliferates and colonies occur in a 6-well plate of an automatic tuberculosis culture liquid medium inoculation device.
도 1 내지 도 8에 도시된 바와 같이, 본 발명의 실시예에 따른 6 well plate를 포함하는 결핵균 배양 액체 배지 자동 접종 장치는 본체(100)와, 본체(100)에 좌우로 이동 가능하게 설치되는 구동부(110)와, 6 well plate(121)가 안착되는 제1안착부(120)와, 결핵균이 배양된 액체배지가 수용된 액체배지 수용 용기(132)가 안착되는 제2안착부(130)를 포함하여 형성된다.As shown in FIGS. 1 to 8, the automatic inoculation device for Mycobacterium tuberculosis culture liquid medium including a 6-well plate according to an embodiment of the present invention is installed to be movable left and right on the
본체(100)는 자동 접종 장치의 각 구성이 설치되는 공간을 제공하며, 도면에는 도시되지 않았지만 하우징(미도시) 내부에 구비되어 외부로부터 완전히 밀폐된다.The
구동부(110)는 본체(100)의 상단에 좌우로 이동 가능하게 설치되며, 6 well plate(121)의 덮개를 개폐하기 위한 제1개폐장치(111), 결핵균이 배양된 액체배지가 수용된 액체배지 수용 용기(132)를 이동시키고 액체배지 수용 용기(132)의 뚜껑을 개폐하기 위한 제2개폐장치(113) 및 액체배지 수용 용기(132)에 수용된 결핵균이 배양된 액체배지를 흡입한 후 6 well plate(121)의 배지원료에 접종하기 위한 팁(112)이 구비된다. 또한, 제1개폐장치(111), 제2개폐장치(113) 및 팁(112)은 구동부(110)에 상하로 승강 가능하도록 형성되며, 제2개폐장치(113) 및 팁(112)은 일체로 상하 승강한다. 이때, 제1개폐장치(111)는 6 well plate(121)의 덮개를 진공흡착 또는 파지 등 공지기술을 이용하여 개폐할 수 있으며, 제2개폐장치(113)는 액체배지 수용 용기(132)의 뚜껑을 진공 흡착, 파지 등 공지기술을 이용하여 고정한 후 회전시켜 개폐할 수 있다. 진공흡착, 파지를 위한 구성은 공지된 기술이기 때문에 구체적인 설명은 생략하도록 한다.The
제1안착부(120)에는 색소 및 항생제를 포함하는 배지원료가 분주된 복수개의 6 well plate(121)가 안착되며, 팁(112)을 이용하여 6 well plate(121)의 배지원료에 결핵균이 배양된 액체배지를 접종할 때 도 7에 도시된 바와 같이 제1안착부(120)가 일정한 패턴으로 유동하여 상단에 안착된 6 well plate(121)를 일정한 패턴으로 유동시킴으로써 결핵균을 포함하는 액체배지가 배지원료에 일정한 패턴으로 분주되도록 한다. 이때, 6 well plate(121)는 6개의 원형 공간을 갖도록 형성되며, 각각의 공간에는 분주장비(미도시)를 이용하여 서로 다른 각각의 항생제와 색소가 혼합된 각각의 배지원료가 일정량 분주된다. 또한, 본 발명에서 항생제에 혼합되는 색소는 금속광택을 가진 청색의 알맹이 또는 분말 형태이며, 3-[N-에틸-N-[4-[[4-[N-에틸-N-(3-설포네이트벤질)아미노]페닐](2-설포네이트페닐)메틸렌]-2,5-시클로헥사디에닐리덴]암모니오메틸]벤젠설폰산이나트륨(C37H31O9N2S3Na2)을 85.0% 이상을 함유하는 식용색소청색1호를 사용한다. 한편, 제1안착부(120)의 일측 끝단에는 6 well plate(121)의 덮개를 임시로 거치할 수 있는 덮개 거치대(122)가 구비된다.A plurality of 6-
제2안착부(130)에는 결핵균이 배양된 액체배지가 수용된 액체배지 수용 용기(132)가 안착되며, 제2안착부(130)의 전면에는 액체배지 수용 용기(132)를 이동시키기 위해 제2개폐장치(113)가 하강할 때 동시에 하강하는 팁(112)을 수용하여 팁(112)의 끝단이 오염되는 것을 방지하기 위한 팁삽입부(133)가 구비된다. 팁(112)은 액체배지 수용 용기(132) 내부로 인입되어 결핵균이 수용된 액체배지와 직접 맞닿아 액체배지를 흡입한 후 배지원료에 접종하는 역할을 하기 때문에 오염에 가장 민감한 구성일 뿐만 아니라 본 발명에서는 최소 개수의 구동수단을 이용하여 액체배지 수용 용기(132)의 이동, 액체배지 수용 용기(132)의 뚜껑 개방, 팁(112)을 이용한 용액 흡입 등을 모두 수행할 수 있게 한 것이어서 팁(112)이 제2개폐장치(113)와 동일한 구동수단을 통해 동시에 이동된다. 따라서, 제2개폐장치(113)와 동시에 상하 승강하는 팁(112)이 제2개폐장치(113)의 하강 시 동시에 하강하면서 팁(112)의 끝단이 본체(100)의 바닥면에 직접 접촉하게 되면 오염에 노출될 수 있기 때문에 팁삽입부(133)에 수용되도록 함으로써 팁(112)의 끝단이 오염되는 것을 방지할 수 있는 것이다.The liquid medium accommodating
또한, 제2안착부(130)의 측면 일측에는 제2개폐장치(113)를 이용하여 이동된 액체배지 수용 용기(132)를 고정하기 위한 거치부(131)가 구비된다. 이러한 거치부(131)는 액체배지(132)가 수용된 하우징을 완전히 고정하여 제2개폐장치(113)를 이용하여 액체배지(132)의 뚜껑을 개방할 때 하우징이 움직이지 않도록 고정한다. 또한, 거치부(131)는 홈(134)의 내부에서 전후로 이동할 수 있도록 형성된다.In addition, a
한편, 도면에는 도시되지 않았지만 자동 접종 장치의 각 구성을 제어하기 위한 제어부(미도시)가 별도로 마련된다.On the other hand, although not shown in the drawing, a controller (not shown) for controlling each component of the automatic inoculation device is provided separately.
이하, 도 2 내지 도 6을 참고하여 본 발명의 실시예에 따른 6 well plate를 포함하는 결핵균 배양 액체 배지 자동 접종 장치를 이용한 결핵균 약제 내성 진단 방법에 대하여 구체적으로 설명하도록 한다.Hereinafter, with reference to FIGS. 2 to 6, a method for diagnosing drug resistance of Mycobacterium tuberculosis using an automatic inoculation device for Mycobacterium tuberculosis culture liquid medium including a 6-well plate according to an embodiment of the present invention will be described in detail.
먼저, 도 2(a)에 도시된 바와 같이 구동부(110)가 제1안착부(120)에 안착된 복수개의 6 well plate(121) 중 하나의 상단으로 이동한 다음 구동부(110)의 제1개폐장치(111)가 하강하여 해당 6 well plate(121)의 덮개를 개방한 후 도 2(b)와 같이 개방된 덮개를 제1안착부(120)의 일측 끝단에 형성된 덮개 거치대(122)에 거치한다.First, as shown in FIG. 2(a), the
이후, 도 3(a)에 도시된 바와 같이 구동부(110)가 제2안착부(130) 쪽으로 이동한 후 구동부(110)의 제2개폐장치(113)가 하강하여 결핵균이 배양된 액체배지가 수용된 액체배지 수용 용기(132)를 잡고 거치부(131)로 이동시켜 고정한다. 다음으로, 도 3(b)와 같이 제2개폐장치(113)가 액체배지 수용 용기(132)의 뚜껑을 회전시켜 열면 도 3(c)와 같이 거치부(131)가 홈(134)의 내측 전단으로 이동하여 거치부(131)에 고정된 액체배지 수용 용기(132)가 팁(112)의 하단에 위치하게 되고, 이후 팁(112)이 하강하여 액체배지 수용 용기(132) 내측으로 진입하여 결핵균이 배양된 액체배지를 일정량만큼 흡입한다. 이후, 도 3(d)와 같이 거치부(131)가 홈(134)의 내측 후단으로 이동하여 거치부(131)에 고정된 액체배지 수용 용기(132)가 제2개폐장치(113)의 하단에 위치하게 되면 제2개폐장치(113)가 결핵균이 배양된 액체배지(132)의 뚜껑을 닫는다.Thereafter, as shown in FIG. 3 (a), after the
다음으로, 도 4에 도시된 바와 같이 구동부(110)가 덮개가 개방된 6 well plate(121)의 상단으로 이동한 후 구동부(110)의 팁(112)이 결핵균이 배양된 액체배지를 6 well plate(121)의 각각의 공간에 분주된 배지원료에 일정한 양 및 속도로 분주하여 결핵균을 접종한다. 이때, 6 well plate(121)가 안착된 제1안착부(120)가 일정한 패턴으로 유동함으로써 도 7에 도시된 바와 같이 제1안착부(120)의 상단에 안착된 6 well plate(121)가 일정한 패턴으로 유동하여 결핵균이 배양된 액체배지가 배지원료에 일정한 패턴으로 분주되도록 한다.Next, as shown in FIG. 4, after the
상기와 같이 미리 설정된 접종 속도 및 용량에 따라 일정한 속도 및 용량으로 배지원료에 결핵균이 배양된 액체배지를 분주하여 결핵균을 접종하며, 결핵균 접종 시 제1안착부(120)가 일정한 패턴으로 유동하여 결핵균이 배양된 액체배지가 6 well plate(121)의 배지원료에 일정한 패턴으로 분주되기 때문에 내성 진단의 정확성이 향상된다.Tuberculosis bacteria are inoculated by dispensing liquid medium in which Mycobacterium tuberculosis is cultured into medium raw materials at a constant speed and capacity according to the inoculation speed and capacity set in advance as described above, and when inoculating Mycobacterium tuberculosis, the
이후, 도 5(a) 및 도 5(b)에 도시된 바와 같이 구동부(110)의 제1개폐장치(111)가 6 well plate(121)의 덮개를 덮은 후 도 6(a) 및 도 6(b)에 도시된 바와 같이 구동부(110)의 제2개폐장치(113)가 거치부(131)에 고정된 액체배지 수용 용기(132)를 제2안착부(130)로 다시 이동시킨다.Thereafter, as shown in FIGS. 5(a) and 5(b), after the
상기와 같은 과정을 반복하여 제1안착부(120)에 안착된 복수개의 6 well plate(121)의 배지원료 모두에 결핵균이 배양된 액체배지를 분주하여 결핵균을 접종할 수 있다.By repeating the above process, tuberculosis bacteria can be inoculated by dispensing the liquid medium in which Mycobacterium tuberculosis is cultured to all of the medium raw materials of the plurality of 6-
이후, 결핵균을 접종하고 덮개를 덮어 밀봉한 6 well plate(121)는 인큐베이터에서 3주간 배양하여 집락의 발생 여부를 확인한다. 결핵검사지침에 따라 집락 수를 확인하여 내성 및 감수성 여부를 판단한다.Thereafter, the 6-well plate (121) inoculated with Mycobacterium tuberculosis and covered and sealed is cultured in an incubator for 3 weeks to check the occurrence of colonies. According to the tuberculosis test guidelines, the number of colonies is checked to determine resistance and susceptibility.
이때, 본 발명에서는 6 well plate(121)에 분주된 항생제가 포함된 배지원료에 색소를 첨가함으로써 결핵균 집락의 색상과 잘 구분되는 배경색을 배지원료에 부여하여 결핵균이 증식하여 집락이 발생할 경우 배지원료에 첨가된 색소에 의해 노란 덩어리로 보여 지는 집락이 즉시 보이도록 하여 결핵균이 다양한 종류의 항생제 중 어떤 항생제에 내성이 있는지 간단하게 진단할 수 있다.At this time, in the present invention, by adding a pigment to the medium raw material containing the antibiotics dispensed in the 6 well plate (121), a background color that is well distinguished from the color of the Mycobacterium tuberculosis colony is given to the medium raw material, so that when Mycobacterium tuberculosis proliferates and colonies occur, the medium raw material It is possible to simply diagnose which antibiotics the tuberculosis bacillus is resistant to among various types of antibiotics by making colonies seen as yellow lumps immediately visible by the dye added to the tube.
구체적으로, 색소가 첨가되지 않은 상태의 배지원료에 집락이 형성될 경우 배지원료의 색과 집락이 색이 잘 구분이 되지 않아 집락의 발생 여부를 확인하기가 어려운데, 본 발명에서는 배지원료에 청색 색소를 첨가하여 도 8 및 도 9에 도시된 바와 같이 노란 덩어리로 보여 지는 집락이 육안으로도 잘 보이도록 함으로써 결핵균 집락의 분포 면적(증식량)이 잘 드러나 결핵균의 증식량을 정밀하게 측정할 수 있다. 이때, 도 9의 좌측 하단은 결핵균을 접종하지 않아 집락이 발생하지 않은 상태이고, 좌측 상단은 항생제가 포함되지 않은 배지원료에 결핵균을 접종한 것이어서 집락이 발생한 상태이고, 그 외에 집락이 발생하지 않은 곳은 각 항생제별 내성이 없어 결핵균이 자라지 못해 집락이 없는 상태이고, 집락이 발생한 곳은 항생제에 내성이 있어 약효가 작용하지 못하고 결핵균이 자란 것이다.Specifically, when colonies are formed in the medium raw material in which no dye is added, it is difficult to determine whether colonies have occurred because the color of the medium raw material and the colony are not well distinguished. In the present invention, the blue pigment in the medium raw material As shown in FIGS. 8 and 9, the colonies shown as yellow lumps are visible to the naked eye, so that the distribution area (growth) of the Mycobacterium tuberculosis colonies is well revealed, and the amount of proliferation of Mycobacterium tuberculosis can be precisely measured. . At this time, the lower left side of FIG. 9 is a state in which tuberculosis bacillus is not inoculated and no colonization has occurred, and the upper left side is a state in which tuberculosis bacillus is inoculated with medium raw materials that do not contain antibiotics, so colonies have occurred, and other colonies have not occurred. There is no resistance to each antibiotic, so there is no colony because tuberculosis bacillus does not grow, and the place where colonization occurs is resistant to antibiotics, so the drug effect does not work and tuberculosis bacillus grows.
이상에서 상세히 설명한 바와 같이, 본 발명은 결핵균이 배양된 액체배지를 자동 접종 장치를 이용하여 6 well plate에 분주되어 있는 색소 및 항생제가 포함된 각각의 배지원료에 접종하여 다양한 종류의 항생제 중 어떤 항생제에 내성이 있는지 간단하게 진단할 수 있다.As described in detail above, the present invention inoculates a liquid medium in which Mycobacterium tuberculosis is cultured into each medium containing pigments and antibiotics dispensed in a 6-well plate using an automatic inoculation device, thereby inoculating any antibiotic among various types of antibiotics. You can easily diagnose whether you are resistant to .
또한, 밀폐된 공간에서 자동 접종 장치를 이용하여 6 well plate에 분주되어 있는 각각의 배지원료에 결핵균을 접종하며, 자동 접종 장치의 개폐장치를 이용하여 6 well plate 및 액체배지 수용 용기의 뚜껑을 자동으로 개방하여 결핵균을 배지원료에 접종한 후 덮개를 자동으로 닫기 때문에 원내 감염을 방지할 수 있다.In addition, tuberculosis bacillus is inoculated into each medium material dispensed into a 6-well plate using an automatic inoculation device in an enclosed space, and the lid of the 6-well plate and the liquid medium container is automatically opened using the opening and closing device of the automatic inoculation device. It is opened to inoculate tuberculosis bacillus into the medium material and then the cover is automatically closed to prevent nosocomial infection.
또한, 자동 접종 장치를 이용하여 미리 설정된 접종 속도 및 용량에 따라 일정한 속도 및 용량으로 배지원료에 결핵균이 배양된 액체배지를 분주하여 결핵균을 접종하며, 결핵균 접종 시 제1안착부가 일정한 패턴으로 유동하여 액체배지가 배지원료에 일정한 패턴으로 분주되기 때문에 결핵균 내성 진단의 정확성이 향상되는 효과가 있다.In addition, an automatic inoculation device is used to inoculate tuberculosis bacteria by dispensing a liquid medium in which tuberculosis bacteria are cultured in the medium raw material at a constant speed and capacity according to a preset inoculation speed and capacity, and when inoculating tuberculosis bacteria, the first seating part flows in a constant pattern Since the liquid medium is dispensed in a regular pattern to the medium raw material, there is an effect of improving the accuracy of tuberculosis resistance diagnosis.
또한, 항생제가 포함된 배지원료에 색소를 첨가함으로써 결핵균이 증식하여 생성된 집락이 배지원료에 첨가된 색소에 의해 잘 보이도록 하여 결핵균이 다양한 종류의 항생제 중 어떤 항생제에 내성이 있는지 명확하게 진단할 수 있다.In addition, by adding a pigment to the medium raw material containing the antibiotic, the colonies generated by the proliferation of Mycobacterium tuberculosis are clearly visible by the pigment added to the medium raw material, so that it is possible to clearly diagnose which antibiotics the Mycobacterium tuberculosis is resistant to among various types of antibiotics. can
위에서 설명한 바와 같이 본 발명에 대한 구체적인 설명은 첨부된 도면을 참조한 실시예에 의해서 이루어졌지만, 상술한 실시예는 본 발명의 바람직한 예를 들어 설명하였을 뿐이기 때문에, 본 발명이 상기의 실시예에만 국한되는 것으로 이해되어져서는 아니 되며, 본 발명의 권리범위는 후술하는 청구범위 및 그 등가개념으로 이해되어져야 할 것이다.As described above, the detailed description of the present invention has been made by the embodiments with reference to the accompanying drawings, but since the above-described embodiments have only been described as preferred examples of the present invention, the present invention is limited to the above embodiments. It should not be understood that it is, and the scope of the present invention should be understood as the following claims and their equivalent concepts.
100 : 본체
110 : 구동부
111 : 제1개폐장치
112 : 팁
113 : 제2개폐장치
120 : 제1안착부
121 : 6 well plate
122 : 덮개 거치대
130 : 제2안착부
131 : 거치부
132 : 액체배지 수용 용기
133 : 팁삽입부
134 : 홈100: body
110: driving unit
111: first switchgear
112: Tips
113: second switchgear
120: first seating part
121: 6 well plate
122: cover holder
130: second seating part
131: mounting part
132: liquid medium container
133: tip insertion part
134: home
Claims (7)
상기 본체에 좌우로 이동 가능하게 설치되는 구동부;
상기 본체의 하단 일측에 구비되며 배지원료가 분주된 복수개의 6 well plate가 안착되는 제1안착부;
상기 본체의 하단 타측에 구비되며 결핵균이 배양된 액체배지가 수용된 액체배지 수용 용기가 안착되는 제2안착부;
상기 제2안착부의 측면에 배치되어 상기 구동부에 의해 상기 제2안착부로부터 이동되어 온 상기 액체배지 수용 용기를 고정하는 거치부;를 포함하여 형성되며,
상기 구동부는,
상기 6 well plate의 덮개를 개폐하기 위한 제1개폐장치;
상기 액체배지 수용 용기를 이송하고 상기 액체배지 수용 용기의 뚜껑을 개폐하기 위한 제2개폐장치;
상기 액체배지 수용 용기에 수용된 결핵균이 배양된 액체배지를 흡입한 후 상기 6 well plate에 분주된 배지원료에 접종하기 위한 팁;을 포함하고,
상기 제1개폐장치, 상기 제2개폐장치 및 상기 팁은 상기 구동부에 상하로 승강 가능하도록 형성되되 상기 제2개폐장치 및 상기 팁은 일체로 상하 승강하도록 형성되며,
상기 제2안착부의 전면에는 상기 액체배지 수용 용기를 이동시키기 위해 상기 제2개폐장치가 하강할 때 동시에 하강하는 상기 팁을 수용하여 상기 팁의 끝단이 오염되는 것을 방지하는 팁삽입부가 구비되고,
상기 거치부는 홈의 내부에 형성되되 상기 홈의 내부에서 전후로 이동 가능하도록 형성되고,
상기 제2개폐장치에 의해 상기 액체배지 수용 용기가 상기 거치부로 이동되어 고정된 후 뚜껑이 개방되면 상기 거치부가 상기 홈의 내측 전단으로 이동하여 상기 거치부에 고정된 상기 액체배지 수용 용기가 상기 팁의 하단에 위치되도록 하는 것을 특징으로 하는 6 well plate를 포함하는 결핵균 배양 액체 배지 자동 접종 장치.
A body installed in an enclosed space from the outside;
a drive unit installed to be movable left and right on the main body;
a first seating part provided on one side of the lower end of the main body and on which a plurality of 6-well plates to which culture medium materials are dispensed are seated;
a second seat provided on the other side of the lower end of the main body and in which a liquid medium containing container containing a liquid medium in which Mycobacterium tuberculosis is cultured is seated;
It is formed to include; a holding portion disposed on the side of the second seating portion to fix the liquid medium accommodating container moved from the second seating portion by the driving unit,
the driving unit,
a first opening and closing device for opening and closing the cover of the 6-well plate;
a second opening/closing device for transferring the liquid medium accommodating container and opening and closing the lid of the liquid medium accommodating container;
A tip for inoculating the medium material dispensed in the 6 well plate after aspirating the liquid medium in which Mycobacterium tuberculosis is cultured in the liquid medium container;
The first opening/closing device, the second opening/closing device, and the tip are formed to be able to move up and down in the drive unit, and the second switchgear and the tip are integrally formed to be able to move up and down,
A tip insertion portion is provided on the front surface of the second seating portion to prevent the tip of the tip from being contaminated by receiving the tip that descends simultaneously when the second opening and closing device descends to move the liquid medium accommodating container,
The mounting portion is formed inside the groove and is formed to be movable back and forth inside the groove,
After the liquid medium accommodating container is moved and fixed to the holder by the second opening/closing device, when the cover is opened, the holder moves to the inner front end of the groove, and the liquid medium accommodating container fixed to the holder moves to the tip. Tuberculosis culture liquid medium automatic inoculation device comprising a 6-well plate, characterized in that to be located at the bottom of the.
상기 6 well plate의 배지원료에 결핵균을 접종할 때 상기 제1안착부가 일정한 패턴으로 유동하는 것을 특징으로 하는 6 well plate를 포함하는 결핵균 배양 액체 배지 자동 접종 장치.
According to claim 1,
When inoculating Mycobacterium tuberculosis into the medium raw material of the 6-well plate, the automatic inoculation device for tuberculosis culture liquid medium comprising a 6-well plate, characterized in that the first seating portion flows in a certain pattern.
상기 6 well plate에 분주되는 배지원료에 색소가 첨가되는 것을 특징으로 하는 6 well plate를 포함하는 결핵균 배양 액체 배지 자동 접종 장치.
According to claim 1,
An automatic inoculation device for tuberculosis culture liquid medium comprising a 6-well plate, characterized in that a dye is added to the medium raw material dispensed in the 6-well plate.
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