KR102481470B1 - Biomarker for evaluating disease activity of rheumatoid arthritis and use thereof - Google Patents

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KR102481470B1 KR1020190141957A KR20190141957A KR102481470B1 KR 102481470 B1 KR102481470 B1 KR 102481470B1 KR 1020190141957 A KR1020190141957 A KR 1020190141957A KR 20190141957 A KR20190141957 A KR 20190141957A KR 102481470 B1 KR102481470 B1 KR 102481470B1
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Abstract

본 발명은 류마티스 관절염의 질병활성도 평가용 바이오마커 및 이의 이용에 관한 것으로, 본 발명에 따른 VEGF(vascular endothelial growth factor)는 류마티스 관절염 환자의 혈청에서 발현이 증가되어 있으며, 질환조절항류마티스약제(Disease-modifying antirheumatic drug, 이하 DMARD) 중 특히 생물학적 DMARD(bDMARD) 처리 시 치료 효과에 상관없이 감소하는 경향을 보이는 기존의 류마티스 관절염 질병활성도 평가 마커와는 달리, bDMARD 치료 전후 수치 변화가 치료 수준을 제대로 반영하여 나타나는 것을 확인하였다. 따라서, 본 발명에 따른 VEGF는 류마티스 관절염 치료 전후의 질병활성도 평가 및 류마티스 관절염 치료제 스크리닝 등 류마티스 관절염 치료제 개발 분야에 유용하게 이용될 것으로 기대된다.The present invention relates to a biomarker for evaluating disease activity in rheumatoid arthritis and its use. The expression of VEGF (vascular endothelial growth factor) according to the present invention is increased in the serum of patients with rheumatoid arthritis, and is a disease-modifying anti-rheumatic agent (Disease -Unlike existing rheumatoid arthritis disease activity evaluation markers, which tend to decrease regardless of treatment effect when treated with biologic DMARD (bDMARD) among modifying antirheumatic drugs (hereinafter referred to as DMARDs), changes in values before and after bDMARD treatment properly reflect the level of treatment It was confirmed that it appeared. Therefore, the VEGF according to the present invention is expected to be usefully used in the field of developing a treatment for rheumatoid arthritis, such as evaluating disease activity before and after treatment for rheumatoid arthritis and screening for a treatment for rheumatoid arthritis.

Description

류마티스 관절염의 질병활성도 평가용 바이오마커 및 이의 이용 {Biomarker for evaluating disease activity of rheumatoid arthritis and use thereof}Biomarker for evaluating disease activity of rheumatoid arthritis and use thereof {Biomarker for evaluating disease activity of rheumatoid arthritis and use thereof}

본 발명은 류마티스 관절염 치료제 처리 전후의 질병활성도 평가용 바이오마커 및 이의 이용에 관한 것이다.The present invention relates to a biomarker for evaluating disease activity before and after treatment for a therapeutic agent for rheumatoid arthritis and its use.

류마티스 관절염(rheumatoid arthritis, 이하 RA)은 대표적인 자가면역질환으로, 관절 주위를 둘러싸고 있는 활막이라는 조직의 염증 때문에 일어나며, 전체 인구의 약 1~2% 가량이 발병하는 것으로 알려진 질환이다. 류마티스 관절염의 발병은 유전적-환경적 인자가 작용하며, 유전적인 요인이 대략 60% 정도 기여하는 것으로 알려져 있다. 대표적인 증상은 활막관절(synovial joint)에 나타나는 염증으로, 관절이 붓고 통증이 있으며, 질환이 발전하면 영구적으로 관절이 변형되고 관절의 기능에 심각한 손상을 주어 삶의 질이 크게 저하되는 질환이다. 류마티스 관절염은 질병활성도가 조절되지 않으면 시간 경과에 따라 비가역적 관절변형과 장애가 발생하며 이를 조절하기 위한 면역억제제 및 생물학적 제제 등에 대한 약물반응 정도에 따라 관절파괴가 영향을 받는다.Rheumatoid arthritis (RA) is a representative autoimmune disease, caused by inflammation of a tissue called a synovium surrounding a joint, and is known to affect about 1-2% of the total population. It is known that the onset of rheumatoid arthritis is affected by genetic-environmental factors, and that genetic factors contribute about 60%. A representative symptom is inflammation of the synovial joint, which causes swelling and pain in the joint. When the disease develops, the joint is permanently deformed and the function of the joint is severely damaged, resulting in a greatly reduced quality of life. In rheumatoid arthritis, if the disease activity is not controlled, irreversible joint deformation and disability occur over time, and joint destruction is affected by the degree of drug response to immunosuppressants and biological agents to control it.

류마티스 관절염을 치료하는 것은 조직 파괴, 연골 손실 및 관절 침식의 관점에서 질병의 진행을 늦추거나 막아야 한다는 기대에 기초한 것으로서, 류마티스 관절염의 진행은 병인과 관련된 인자들의 활성화에 기인한 것인 바, 질병의 진행과 활성의 관계를 잘 분석하는 것이 중요하다. 일예로, 질병의 활성을 주기적으로 모니터링하는 경우 더 차도가 나타난다고 보고된 바 있다. Treatment of rheumatoid arthritis is based on the expectation that the progression of the disease should be slowed or prevented in terms of tissue destruction, cartilage loss and joint erosion, and the progression of rheumatoid arthritis is due to the activation of factors related to the etiology, and thus the It is important to analyze the relationship between progression and activity well. For example, it has been reported that better remission occurs when disease activity is monitored periodically.

현재 류마티스 관절염의 질병활성도를 측정하기 위해서는 DAS 28 (disease activity score 28)이라고 하는 측정 방법을 이용하여야 한다. DAS 28을 측정하기 위해서는 의사가 환자의 총 28개의 관절에 대한 붓기와 압통 유무를 확인하고, 혈액을 통해 전신적 염증정도를 비특이적으로 확인해 볼 수 있는 적혈구 침강 속도 (erythrocyte sedimentation rate, ESR) 혹은 C-반응성 단백질 (C reactive protein) 수치를 확인하고 이들을 합산하여 최종 질병활성도 점수를 산출한다. 이렇게 산출된 질병활성도 수치는 비교적 정확하기는 하나, 환자의 내원 및 전문적인 의료인력이 투입되어야 하므로 여러 번 자주 수행하기 어려운 부분이 있고, 환자 스스로 질병 정도를 측정하는 등의 편의성이 근본적으로 확보될 수 없는 면이 있다고 할 수 있다. 또한, 환자의 DAS를 정확히 결정하기 위해서는 넓은 오퍼레이터 변이성(operator variability)을 최소화하기 위해 숙련된 평가자를 필요로 하게 되어, DAS의 활용이 제한적인 문제가 있다. 그러므로 신속하고 간편하게 그리고 필요한 경우에 즉각적으로 자주 류마티스 관절염 활성도를 측정할 수 있는 강력한 바이오마커의 개발이 필요한 실정이다.Currently, in order to measure the disease activity of rheumatoid arthritis, a measurement method called DAS 28 (disease activity score 28) must be used. To measure DAS 28, the doctor checks for swelling and tenderness in a total of 28 joints of the patient, and the erythrocyte sedimentation rate (ESR) or C- The final disease activity score is calculated by checking the reactive protein (C reactive protein) level and summing them. Although the disease activity numbers calculated in this way are relatively accurate, it is difficult to perform several times frequently because the patient's visit and professional medical personnel must be put in. It can be said that there is an aspect that is not possible. In addition, in order to accurately determine the patient's DAS, a skilled evaluator is required to minimize wide operator variability, which limits the use of the DAS. Therefore, it is necessary to develop a powerful biomarker capable of measuring rheumatoid arthritis activity quickly, conveniently, and immediately and frequently when necessary.

한편, 최근에 류마티스 관절염 치료에서는 빠질 수 없는 생물학적 질환조절항류마티스약제 (biologic disease-modifying anti-rheumatic drugs, bDMARD) 중 항-IL-6 제제에 의해 특히 CRP의 경우 관절염의 실제 완화 여부와 관계 없이 그 값이 낮아진다는 연구 결과들이 보고되고 있다. bDMARD의 경우 류마티스 관절염 치료에 없어서는 안될 치료제들이 있으므로, bDMARD로 치료를 받은 류마티스 환자의 경우 관절염의 질병활성도를 정확하게 보여줄 새로운 바이오마커의 개발이 필수적으로 대두되고 있다고 할 수 있다.On the other hand, recently, anti-IL-6 agents among biological disease-modifying anti-rheumatic drugs (bDMARDs), which are indispensable in the treatment of rheumatoid arthritis, have been used regardless of actual relief of arthritis, especially in the case of CRP. Research results that the value is lowered have been reported. Since bDMARDs are indispensable for the treatment of rheumatoid arthritis, it can be said that the development of new biomarkers that accurately show the disease activity of arthritis in patients with rheumatoid arthritis treated with bDMARDs is essential.

이에, 본 발명자들은 생물학적 질환조절항류마티스약제(bDMARD) 치료 전후에 다른 수치를 나타내는 인자를 바이오마커로 개발하여 bDMARD 처리 후 류마티스 관절염의 질병활성도를 평가하는데 활용하고자 하였다.Accordingly, the present inventors developed a biomarker that exhibits different values before and after treatment with a biological disease-modifying anti-rheumatic drug (bDMARD) and tried to use it to evaluate the disease activity of rheumatoid arthritis after treatment with bDMARD.

한국공개특허공보 제10-2019-0000212호Korean Patent Publication No. 10-2019-0000212

본 발명자들은 기존에 류마티스 관절염의 질병활성도 측정을 위해 사용한 마커들의 문제점을 해결하기 위해 연구한 결과, 질환조절항류마티스약제(DMARD), 특히 생물학적 DMARD(bDMARD)를 투여한 류마티스 관절염 환자의 혈청에서 VEGF만이 bDMARD 치료 전후 수치 변화가 치료 수준을 제대로 반영하여 나타나는 것을 확인하여, 기존의 마커들인 ESR 및 CRP에 비해 더 정확도가 높은 것을 확인하였는 바, 이에 기초하여 본 발명을 완성하였다.As a result of research to solve the problems of markers previously used to measure disease activity of rheumatoid arthritis, the present inventors found that VEGF Only BDMARD confirmed that the numerical change before and after treatment properly reflected the treatment level, and it was confirmed that it was more accurate than ESR and CRP, which are existing markers, and based on this, the present invention was completed.

이에, 본 발명의 목적은 VEGF(vascular endothelial growth factor)를 포함하는, 류마티스 관절염의 질병활성도 평가용 바이오마커 및 이의 이용을 제공하는 것이다.Accordingly, an object of the present invention is to provide a biomarker for evaluating the disease activity of rheumatoid arthritis, including VEGF (vascular endothelial growth factor), and its use.

그러나, 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.However, the technical problem to be achieved by the present invention is not limited to the above-mentioned problems, and other problems not mentioned can be clearly understood by those skilled in the art from the description below. There will be.

상기와 같은 목적을 달성하기 위해 본 발명은 VEGF(vascular endothelial growth factor)를 포함하는, 류마티스 관절염의 질병활성도 평가용 바이오마커 조성물을 제공한다. In order to achieve the above object, the present invention provides a biomarker composition for evaluating disease activity of rheumatoid arthritis, including VEGF (vascular endothelial growth factor).

또한, 본 발명은 상기 VEGF의 발현 또는 활성 수준을 측정하는 제제를 포함하는, 류마티스 관절염의 질병활성도 평가용 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a composition for evaluating the disease activity of rheumatoid arthritis, including an agent for measuring the expression or activity level of the VEGF.

또한, 본 발명은 혈청에서의 VEGF(vascular endothelial growth factor) 발현 또는 활성 수준을 확인하는 단계를 포함하는, 류마티스 관절염의 질병활성도 평가를 위한 정보제공 방법을 제공한다.In addition, the present invention provides an information providing method for evaluating the disease activity of rheumatoid arthritis, including the step of checking the expression or activity level of VEGF (vascular endothelial growth factor) in serum.

또한, 본 발명은 혈청에서의 VEGF(vascular endothelial growth factor) 발현 또는 활성 수준을 확인하는 단계를 포함하는, 류마티스 관절염의 질병활성도 평가 방법을 제공한다.In addition, the present invention provides a method for evaluating the disease activity of rheumatoid arthritis, including the step of checking the expression or activity level of VEGF (vascular endothelial growth factor) in serum.

또한, 본 발명은 VEGF(vascular endothelial growth factor)를 포함하는 바이오마커 조성물의 류마티스 관절염의 질병활성도 평가 용도를 제공한다.In addition, the present invention provides a use of a biomarker composition containing VEGF (vascular endothelial growth factor) for evaluating the disease activity of rheumatoid arthritis.

또한, 본 발명은 VEGF(vascular endothelial growth factor)의, 류마티스 관절염의 질병활성도 평가에 이용되는 바이오마커로서의 용도를 제공한다.In addition, the present invention provides the use of VEGF (vascular endothelial growth factor) as a biomarker used for evaluating disease activity in rheumatoid arthritis.

본 발명의 일 구현예로서, 상기 혈청에서의 VEGF 발현 또는 활성 수준이 정상 대조군에 비해 증가되어 있는 경우, 류마티스 관절염의 질병활성도가 높은 것으로 평가하는 단계를 더 포함할 수 있다.As one embodiment of the present invention, when the level of VEGF expression or activity in the serum is increased compared to a normal control group, the step of evaluating the disease activity of rheumatoid arthritis as high may further include.

또한, 본 발명은 류마티스 관절염 환자로부터 혈청을 분리하여 질환조절항류마티스약제(disease-modifyig anti-rheumatic drugs, DMARD)를 처리하는 단계; 및In addition, the present invention is a disease-modifying anti-rheumatic drug (DMARD) by separating the serum from the patient with rheumatoid arthritis; and

상기 질환조절항류마티스약제 처리 후 류마티스 관절염 환자의 혈청에서 VEGF 발현 또는 활성 수준을 질환조절항류마티스약제 처리 전과 비교하는 단계를 포함하는, 질환조절항류마티스약제의 효과 확인 방법을 제공한다.It provides a method for confirming the effect of a disease-modifying anti-rheumatic drug, comprising comparing the expression or activity level of VEGF in the serum of a patient with rheumatoid arthritis after treatment with the disease-modifying anti-rheumatic drug with that before treatment with the disease-modifying anti-rheumatic drug.

본 발명의 일 구현예로서, 상기 질환조절항류마티스약제는 생물학적 질환조절항류마티스약제(biologic disease-modifying anti-rheumatic drugs, bDMARD)일 수 있다.As one embodiment of the present invention, the disease-modifying anti-rheumatic drug may be a biological disease-modifying anti-rheumatic drug (bDMARD).

본 발명의 다른 구현예로서, 상기 질환조절항류마티스약제 처리 후 류마티스 관절염 환자의 혈청에서 VEGF 발현 또는 활성 수준이 질환조절항류마티스약제 처리 전과 비교하여 감소한 경우, 상기 질환조절항류마티스약제는 류마티스 관절염에 대해 높은 치료 반응성을 가지는 것으로 판정하는 단계를 더 포함할 수 있다.In another embodiment of the present invention, when the expression or activity level of VEGF in the serum of rheumatoid arthritis patients after treatment with the disease-modifying anti-rheumatic drug is reduced compared to before treatment with the disease-modifying anti-rheumatic drug, the disease-modifying anti-rheumatic drug is effective for rheumatoid arthritis It may further include the step of determining that it has a high therapeutic response to.

또한, 본 발명은 류마티스 관절염 환자로부터 혈청을 분리하여 후보물질을 처리하는 단계; 및In addition, the present invention comprises the steps of separating the serum from rheumatoid arthritis patients and processing the candidate substance; and

상기 후보물질 처리 후 류마티스 관절염 환자의 혈청에서 VEGF 발현 또는 활성 수준을 후보물질 처리 전과 비교하는 단계를 포함하는, 류마티스 관절염 치료용 물질의 스크리닝 방법을 제공한다.It provides a screening method for a substance for treating rheumatoid arthritis, comprising the step of comparing the expression or activity level of VEGF in the serum of rheumatoid arthritis patients after treatment with the candidate substance and before treatment with the candidate substance.

본 발명의 일 구현예로서, 상기 후보물질 처리 후 류마티스 관절염 환자의 혈청에서 VEGF 발현 또는 활성 수준이 후보물질 처리 전에 비해 감소한 경우, 상기 후보물질을 류마티스 관절염 치료용 물질로 선택하는 단계를 더 포함할 수 있다. As one embodiment of the present invention, when the expression or activity level of VEGF in the serum of a patient with rheumatoid arthritis after treatment with the candidate substance is reduced compared to before treatment with the candidate substance, the step of selecting the candidate substance as a substance for treating rheumatoid arthritis is further included. can

본 발명에 따른 VEGF(vascular endothelial growth factor)는 류마티스 관절염 환자의 혈청에서 발현이 증가되어 있으며, 질환조절항류마티스약제(Disease-modifying antirheumatic drug, 이하 DMARD) 중 특히 생물학적 DMARD(bDMARD) 처리 시 치료 효과에 상관없이 감소하는 경향을 보이는 기존의 류마티스 관절염 질병활성도 평가 마커와는 달리, bDMARD 치료 전후 수치 변화가 치료 수준을 제대로 반영하여 나타나는 것을 확인하였다. 따라서, 본 발명에 따른 VEGF는 류마티스 관절염 치료 전후의 질병활성도 평가 및 류마티스 관절염 치료제 스크리닝 등 류마티스 관절염 치료제 개발 분야에 유용하게 이용될 것으로 기대된다.VEGF (vascular endothelial growth factor) according to the present invention has increased expression in the serum of patients with rheumatoid arthritis, and among disease-modifying antirheumatic drugs (hereinafter referred to as DMARDs), especially when treated with biological DMARDs (bDMARDs), it has a therapeutic effect Unlike the existing rheumatoid arthritis disease activity evaluation markers, which tend to decrease regardless of the condition, it was confirmed that the change in values before and after bDMARD treatment properly reflected the level of treatment. Therefore, the VEGF according to the present invention is expected to be usefully used in the field of developing a treatment for rheumatoid arthritis, such as evaluating disease activity before and after treatment for rheumatoid arthritis and screening for a treatment for rheumatoid arthritis.

도 1a는 본 발명의 일 구현예에 따른 c-DMARD 투여군(n=53)에서 연구개시시점 및 6개월 후의 혈청 VEGF, IL-6, CRP 및 ESR 수준의 변화를 나타낸 도면으로, 왼쪽 패널은 좋은/중간(good and moderate) 반응군(n=40)을 나타내며, 오른쪽 패널은 비반응군(n=13)을 나타낸다.
도 1b는 본 발명의 일 구현예에 따른 c-DMARD 투여군의 △DAS28과 △ESR, △CRP, △VEGF 및 △IL-6 수준 사이의 상관관계를 나타낸 도면이다.
도 2a는 본 발명의 일 구현예에 따른 b-DMARD 투여군(n=49)에서 연구개시시점 및 6개월 후의 혈청 VEGF, IL-6, CRP 및 ESR 수준의 변화를 나타낸 도면으로, 왼쪽 패널은 좋은/중간 반응군(n=41)을 나타내며, 오른쪽 패널은 비반응군(n=8)을 나타낸다. ns=not significant, **p < 0.01, ***p < 0.001.
도 2b는 본 발명의 일 구현예에 따른 b-DMARD, Tocilizumab(TCZ) 및 non-TCZ 바이오의약품 투여 받은 환자의 △DAS28과 △ESR, △CRP, △VEGF 및 △IL-6 수준 사이의 상관관계를 나타낸 도면이다.Figure 1a is a diagram showing changes in serum VEGF, IL-6, CRP and ESR levels at the start of the study and 6 months after the study in the c-DMARD administered group (n = 53) according to an embodiment of the present invention, the left panel is good / Shows good and moderate responders (n=40), right panel shows non-responders (n=13).
Figure 1b is a diagram showing the correlation between the levels of ΔDAS28 and ΔESR, ΔCRP, ΔVEGF, and ΔIL-6 in the c-DMARD-administered group according to an embodiment of the present invention.
Figure 2a is a diagram showing changes in serum VEGF, IL-6, CRP and ESR levels at the start of the study and 6 months later in the b-DMARD administered group (n = 49) according to an embodiment of the present invention, the left panel is good / shows intermediate responders (n = 41), right panel shows non-responders (n = 8). ns=not significant, **p < 0.01, ***p < 0.001.
Figure 2b is a correlation between the levels of ΔDAS28 and ΔESR, ΔCRP, ΔVEGF and ΔIL-6 in patients receiving b-DMARD, Tocilizumab (TCZ) and non-TCZ biopharmaceuticals according to an embodiment of the present invention. is a drawing showing

본 발명은 VEGF(vascular endothelial growth factor)를 포함하는, 류마티스 관절염의 질병활성도 평가용 바이오마커 조성물을 제공한다. The present invention provides a biomarker composition for evaluating disease activity of rheumatoid arthritis, including VEGF (vascular endothelial growth factor).

본 발명에 있어서, 상기 "류마티스 관절염의 질병활성도"는 류마티스 관절염 환자의 전반적인 염증 정도, 또는 류마티스 관절염의 진행 정도를 의미하는 것으로, 치료에 대한 반응 또는 관해 여부를 평가하는데 유용하게 사용될 수 있다.In the present invention, the "disease activity of rheumatoid arthritis" refers to the overall degree of inflammation or progression of rheumatoid arthritis in patients with rheumatoid arthritis, and can be usefully used to evaluate response to treatment or remission.

본 발명에서는 상기 류마티스 관절염의 질병활성도를 평가하기 위한 바이오마커로서 VEGF를 제공하며, 상기 "VEGF(vascular endothelial growth factor)"는 상피성장인자 수용체(epidermal growth factor receptor; EGFR/ErbB)의 일원이다. VEGF는 세포 증식 및 분화를 조절하는 데 필수적인 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 구체적으로 세포 외 성장 인자가 결합하면 다른 HER 수용체와 함께 동형- 및/또는 이형이합체로 조립되는 강한 경향성을 갖고, 이는 다양한 형태의 신호 전달 경로 활성화를 초래하여, 세포자멸, 생존, 또는 세포 증식을 유도한다. 본 발명에 있어서, 상기 VEGF는 이를 갖는 동물의 VEGF라면 한정되지 않으며, 예컨대 인간 또는 마우스의 VEGF일 수 있다. 상기 VEGF는 폴리펩타이드 길이 전체를 포함할 수도 있고 이의 단편을 포함할 수도 있다. 바람직하게, 상기 VEGF는 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열(genebank: AAA35789.1)을 포함할 수 있다. In the present invention, VEGF is provided as a biomarker for evaluating the disease activity of the rheumatoid arthritis, and the "vascular endothelial growth factor (VEGF)" is a member of the epidermal growth factor receptor (EGFR/ErbB). VEGF is known to play an essential role in regulating cell proliferation and differentiation. Specifically, when extracellular growth factor binds, it has a strong tendency to assemble into homo- and/or heterodimers with other HER receptors, resulting in activation of various types of signal transduction pathways, leading to apoptosis, survival, or cell proliferation. induce In the present invention, the VEGF is not limited as long as it is VEGF of an animal having it, and may be, for example, human or mouse VEGF. The VEGF may include the entire length of the polypeptide or a fragment thereof. Preferably, the VEGF may include the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1 (genebank: AAA35789.1).

본 발명에서 사용되는 용어 "바이오마커(biomarker)"는 단백질이나 DNA, RNA, 대사물질 등을 이용해 몸 안의 변화를 알아낼 수 있는 지표를 의미하고, 바이오마커를 활용하면 생명체의 정상 또는 병리적인 상태, 약물에 대한 반응 정도 등을 객관적으로 측정할 수 있다. 암을 비롯해 뇌졸증, 치매 등 각종 난치병을 진단하는데 바이오마커가 활용되고 있으며, 본 발명에 있어서는 류마티스 관절염 또는 류마티스 관절염의 질병활성도를 진단, 평가하는데 이용될 수 있다. 또한, 신약개발과정에서 바이오마커를 활용할 수 있고, 이를 통해서 신약의 안전성을 확보할 수 있고 신약 개발 과정에서 소요되는 비용을 절감할 수 있는 효과도 얻을 수 있다.The term "biomarker" used in the present invention refers to an index that can detect changes in the body using proteins, DNA, RNA, metabolites, etc. The degree of response to the drug can be objectively measured. Biomarkers are used to diagnose various incurable diseases such as cancer, stroke, and dementia, and in the present invention, they can be used to diagnose and evaluate rheumatoid arthritis or disease activity of rheumatoid arthritis. In addition, biomarkers can be used in the new drug development process, and through this, the safety of the new drug can be secured and the cost required in the new drug development process can be reduced.

또한, 본 발명은 상기 VEGF의 발현 또는 활성 수준을 측정하는 제제를 포함하는, 류마티스 관절염의 질병활성도 평가용 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a composition for evaluating the disease activity of rheumatoid arthritis, including an agent for measuring the expression or activity level of the VEGF.

본 발명에 있어서, 상기 "VEGF의 발현 또는 활성 수준을 측정하는 제제"는 VEGF의 단백질 또는 이를 코딩하는 mRNA에 특이적으로 결합하여, VEGF의 발현 또는 활성 수준을 확인함으로써 VEGF의 검출에 사용될 수 있는 물질을 의미한다. 예컨대, VEGF에 특이적으로 결합하는 항체, 앱타머, 리간드, PNA(peptide nucleic acid), 올리고펩티드, 안티센스 올리고뉴클레오티드, 프라이머 쌍 또는 프로브일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. In the present invention, the "agent for measuring the expression or activity level of VEGF" can be used for detecting VEGF by specifically binding to a protein of VEGF or mRNA encoding it to determine the expression or activity level of VEGF means substance. For example, it may be an antibody, aptamer, ligand, PNA (peptide nucleic acid), oligopeptide, antisense oligonucleotide, primer pair or probe that specifically binds to VEGF, but is not limited thereto.

본 발명에서 사용되는 용어"항체"는 항원에 특이적으로 결합하여 인식하는 면역글로불린 유전자 또는 이의 단편에서 유래하는 프레임워크 영역을 포함하는 폴리펩티드를 의미한다. 인식된 면역글로불린 유전자는 카파, 람다, 알파, 감마, 델타, 엡실론, 및 뮤 불변 영역 유전자를 비롯하여, 무수한 면역글로불린 가변 영역 유전자를 포함한다. 경쇄는 카파 또는 람다로 분류되며, 중쇄는 감마, 뮤, 알파, 델타, 또는 엡실론으로 분류되고, 결과적으로 각각 면역글로불린 부류 IgG, IgM, IgA, IgD 및 IgE를 한정한다. 전형적으로, 항체의 항원-결합 영역은 결합 특이성 및 친화성에서 가장 핵심적이게 된다. 일부 실시형태에서, 항체 또는 항체의 단편은 인간, 마우스, 래트, 햄스터, 토끼, 낙타 등을 포함한, 상이한 유기체에서 유래될 수 있다.As used herein, the term "antibody" refers to a polypeptide comprising a framework region derived from an immunoglobulin gene or a fragment thereof that specifically binds to and recognizes an antigen. Recognized immunoglobulin genes include a myriad of immunoglobulin variable region genes, including kappa, lambda, alpha, gamma, delta, epsilon, and mu constant region genes. Light chains are classified as kappa or lambda, and heavy chains as gamma, mu, alpha, delta, or epsilon, consequently defining the immunoglobulin classes IgG, IgM, IgA, IgD, and IgE, respectively. Typically, the antigen-binding region of an antibody becomes most critical for binding specificity and affinity. In some embodiments, antibodies or fragments of antibodies may be from different organisms, including humans, mice, rats, hamsters, rabbits, camels, and the like.

본 발명에서 사용되는 용어 "앱타머(aptamer)"는 올리고뉴클레오타이드 물질로서, 그 자체로 안정된 삼차구조를 가지면서 표적분자에 높은 친화성과 특이성으로 결합할 수 있는 특징을 가진 단일가닥 핵산(DNA, RNA 또는 변형핵산)을 의미하며, 화학적으로 합성이 가능하고 열과 pH 변화에 대하여 비교적으로 유연한 특징을 가지고 있고, SELEX(Systematic Evolution of Ligands of Exponential enrichment)라는 방법으로 원하는 다양한 목적 물질 (단백질, 펩타이드, 지질, 무기 화합물, 저분자 유기물질, 당, 염색물질, DNA, 금속이온, 세포, 항생제 등)에 대한 앱타머를 개발할 수 있다.As used herein, the term "aptamer" is an oligonucleotide material, which is a single-stranded nucleic acid (DNA, RNA) having a stable tertiary structure and capable of binding to a target molecule with high affinity and specificity. or modified nucleic acid), which can be chemically synthesized, has relatively flexible characteristics with respect to heat and pH changes, and is a method called SELEX (Systematic Evolution of Ligands of Exponential Enrichment) to produce various target substances (proteins, peptides, lipids) , inorganic compounds, low-molecular-weight organic substances, sugars, dyes, DNA, metal ions, cells, antibiotics, etc.)

본 발명에 있어서, 상기 "VEGF의 발현 또는 활성 수준을 측정"하는 것은 류마티스 관절염의 질병활성도를 평가하기 위하여 시료에서 VEGF 단백질 또는 이를 코딩하는 mRNA의 존재 여부와 발현 정도 또는 활성 정도를 확인하는 과정일 수 있으며, 예컨대 상기 VEGF 단백질 또는 이를 코딩하는 mRNA에 대하여 특이적으로 결합하는 분자를 이용하여 단백질 또는 이를 코딩하는 mRNA의 양 또는 활성 수준을 확인하는 방법이 적용될 수 있다. In the present invention, "measuring the expression or activity level of VEGF" is a process of confirming the presence and expression level or activity level of VEGF protein or mRNA encoding it in a sample in order to evaluate the disease activity of rheumatoid arthritis It can be, for example, a method for determining the amount or activity level of the protein or the mRNA encoding it using a molecule that specifically binds to the VEGF protein or the mRNA encoding it can be applied.

본 발명에 있어서, 상기 VEGF의 발현 또는 활성 수준은 종래에 개발된 다양한 정량적 또는 정성적 면역분석 프로토콜에 따라 확인할 수 있다. 예컨대, 상기 면역분석 포맷은 효소면역분석법(ELISA), 방사능면역분석법(radioimmnoassay, RIA), 샌드위치 측정법(sandwich assay), 웨스턴 블롯팅, 면역침강법, 면역조직화학염색법(immnohistochemical staining), 유체 세포 측정법(flow cytometry), 형광활성화 세포분류법(FACS), 효소기질발색법 및 항원-항체 응집법을 포함한다. 본 발명의 일 구현예에 따르면 효소면역분석법(ELISA)을 이용하여 VEGF의 발현 또는 활성 수준을 확인할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In the present invention, the expression or activity level of the VEGF can be confirmed according to various quantitative or qualitative immunoassay protocols previously developed. For example, the immunoassay format includes enzyme immunoassay (ELISA), radioimmunoassay (RIA), sandwich assay, western blotting, immunoprecipitation, immunohistochemical staining, and fluid cytometry. (flow cytometry), fluorescence-activated cell sorting (FACS), enzyme substrate staining, and antigen-antibody aggregation. According to one embodiment of the present invention, the expression or activity level of VEGF may be confirmed using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), but is not limited thereto.

또한, 본 발명은 혈청에서의 VEGF(vascular endothelial growth factor) 발현 또는 활성 수준을 확인하는 단계를 포함하는, 류마티스 관절염의 질병활성도 평가를 위한 정보제공 방법을 제공한다.In addition, the present invention provides an information providing method for evaluating the disease activity of rheumatoid arthritis, including the step of checking the expression or activity level of VEGF (vascular endothelial growth factor) in serum.

또한, 본 발명은 혈청에서의 VEGF(vascular endothelial growth factor) 발현 또는 활성 수준을 확인하는 단계를 포함하는, 류마티스 관절염의 질병활성도 평가 방법을 제공한다.In addition, the present invention provides a method for evaluating the disease activity of rheumatoid arthritis, including the step of checking the expression or activity level of VEGF (vascular endothelial growth factor) in serum.

본 발명에 있어서, 상기 혈청에서의 VEGF 발현 또는 활성 수준이 정상 대조군에 비해 증가되어 있는 경우, 류마티스 관절염의 질병활성도가 높은 것으로 평가하는 단계를 더 포함할 수 있다.In the present invention, when the level of VEGF expression or activity in the serum is increased compared to the normal control group, the step of evaluating that the disease activity of rheumatoid arthritis is high may be further included.

또한, 본 발명은 류마티스 관절염 환자로부터 혈청을 분리하여 질환조절항류마티스약제(disease-modifyig anti-rheumatic drugs, DMARD)를 처리하는 단계; 및In addition, the present invention is a disease-modifying anti-rheumatic drug (DMARD) by separating the serum from the patient with rheumatoid arthritis; and

상기 질환조절항류마티스약제 처리 후 류마티스 관절염 환자의 혈청에서 VEGF 발현 또는 활성 수준을 질환조절항류마티스약제 처리 전과 비교하는 단계를 포함하는, 질환조절항류마티스약제의 효과 확인 방법을 제공한다.It provides a method for confirming the effect of a disease-modifying anti-rheumatic drug, comprising comparing the expression or activity level of VEGF in the serum of a patient with rheumatoid arthritis after treatment with the disease-modifying anti-rheumatic drug with that before treatment with the disease-modifying anti-rheumatic drug.

본 발명에 있어서, 상기 "질환조절항류마티스약제(disease-modifyig anti-rheumatic drugs, DMARD)"는 류마티스 관절염 치료제를 의미하며, 류마티스 관절염의 증세를 호전시키거나 이롭게 변경시키는 물질이라면 이의 종류에 제한은 없으나, 바람직하게는 생물학적 질환조절항류마티스약제(biologic disease-modifying anti-rheumatic drugs, bDMARD)일 수 있고, 예컨대 아달리무맙(adalimumab), 골리무맙(golimumab), 에타너셉트(etanercept), 아바타셉트(abatacept), 인플릭시맙(infliximab), 리툭시맙(rituximab), 및 토실리주맙(tocilizumab)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있다.In the present invention, the "disease-modifying anti-rheumatic drugs (DMARDs)" means a treatment for rheumatoid arthritis, and if it is a substance that improves or beneficially changes the symptoms of rheumatoid arthritis, its type is limited None, but may preferably be biologic disease-modifying anti-rheumatic drugs (bDMARDs), such as adalimumab, golimumab, etanercept, and abatacept , Infliximab (infliximab), rituximab (rituximab), and tocilizumab (tocilizumab) may be one or more selected from the group consisting of.

본 발명에 있어서, 상기 "질환조절항류마티스약제의 효과"는 류마티스 관절염에 대한 질환조절항류마티스약제의 치료 반응성을 의미하며, 상기 질환조절항류마티스약제 처리 후 류마티스 관절염 환자의 혈청에서 VEGF 발현 또는 활성 수준이 질환조절항류마티스약제 처리 전과 비교하여 감소한 경우, 상기 질환조절항류마티스약제는 류마티스 관절염에 대해 높은 치료 반응성을 가지는 것일 수 있다.In the present invention, the "effect of the disease-modifying anti-rheumatic drug" means the treatment responsiveness of the disease-modifying anti-rheumatic drug for rheumatoid arthritis, and VEGF expression or activity in the serum of rheumatoid arthritis patients after treatment with the disease-modifying anti-rheumatic drug If the level is reduced compared to before treatment with the disease-modifying anti-rheumatic agent, the disease-modifying anti-rheumatic agent may have a high therapeutic response to rheumatoid arthritis.

또한, 본 발명은 류마티스 관절염 환자로부터 혈청을 분리하여 후보물질을 처리하는 단계; 및In addition, the present invention comprises the steps of separating the serum from rheumatoid arthritis patients and processing the candidate substance; and

상기 후보물질 처리 후 류마티스 관절염 환자의 혈청에서 VEGF 발현 또는 활성 수준을 후보물질 처리 전과 비교하는 단계를 포함하는, 류마티스 관절염 치료용 물질의 스크리닝 방법을 제공한다.It provides a screening method for a substance for treating rheumatoid arthritis, comprising the step of comparing the expression or activity level of VEGF in the serum of rheumatoid arthritis patients after treatment with the candidate substance and before treatment with the candidate substance.

본 발명에서 사용되는 용어 “후보물질”은 류마티스 관절염 환자의 치료 여부를 확인하기 위하여 스크리닝에 사용되는 미지의 물질을 의미하며, 본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 류마티스 관절염 치료용 후보물질은 뉴클레오티드, DNA, RNA, 아미노산, 앱타머, 단백질, 화합물, 천연물, 및 천연추출물로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한은 없다.The term “candidate” used in the present invention refers to an unknown substance used in screening to determine whether a patient with rheumatoid arthritis is treated, and according to one embodiment of the present invention, the candidate substance for treating rheumatoid arthritis is a nucleotide , DNA, RNA, amino acids, aptamers, proteins, compounds, natural products, and may be one or more selected from the group consisting of natural extracts, but is not limited thereto.

본 발명에 있어서, 상기 후보물질 처리 후 류마티스 관절염 환자의 혈청에서 VEGF 발현 또는 활성 수준이 후보물질 처리 전에 비해 감소한 경우, 상기 후보물질을 류마티스 관절염 치료용 물질로 선택하는 단계를 더 포함할 수 있다. In the present invention, when the expression or activity level of VEGF in the serum of a rheumatoid arthritis patient after treatment with the candidate substance is reduced compared to before treatment with the candidate substance, the step of selecting the candidate substance as a substance for treating rheumatoid arthritis may be further included.

본 발명의 일 실험예에서는, 류마티스 관절염 환자에서 생물학적 질환조절항류마티스약제(b-DMARD) 처리 후 치료반응과 무관하게 비특이적으로 감소하는 CRP와는 달리, 혈청 혈관신생유발 인자 VEGF가 좋은 치료반응을 나타내는 환자에게서만 감소하는 것을 확인하여, 상기 VEGF를 b-DMARD에 대한 치료 반응성 평가 인자로서 사용할 수 있음을 확인하였으며(실험예 1 참조), DMARD에 대한 좋은 반응성 및 중간 반응성에 대한 독립적인 예측 인자로 사용할 수 있음을 확인하였다(실험예 2 참조).In one experimental example of the present invention, unlike CRP, which is non-specifically reduced regardless of the treatment response after treatment with a biological disease-modifying anti-rheumatic drug (b-DMARD) in patients with rheumatoid arthritis, serum angiogenesis-inducing factor VEGF shows a good treatment response By confirming the decrease only in patients, it was confirmed that the VEGF can be used as a treatment responsiveness evaluation factor for b-DMARD (see Experimental Example 1), and it can be used as an independent predictor for good and intermediate responsiveness to DMARD. It was confirmed that it can (see Experimental Example 2).

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, a preferred embodiment is presented to aid understanding of the present invention. However, the following examples are provided to more easily understand the present invention, and the content of the present invention is not limited by the following examples.

실시예Example 1. 혈청 시료 채취 1. Serum sample collection

류마티스 관절염(RA) 환자(n=157)는 2010 ACR/EULAR RA 분류 기준을 충족하였다. Patients with rheumatoid arthritis (RA) (n=157) met the 2010 ACR/EULAR RA classification criteria.

RA 환자의 혈청 시료는 연구 개시시점에서 RA 환자(n=157) 및 골관절염(osteoarthritis, OA) 환자 대조군(n=50)으로부터 채취하였으며, 157명의 RA 환자 중에서, 중등도(moderate) 또는 중증(high)의 질병활성도(n=103, DAS28 >3.2)를 갖는 환자는 임의적으로 c-DMARD (n=53), b-DMARD (n=49) 및 ts-DMARD (n=1)를 투여하고, 투여 6개월 후 혈청을 채취하였으며, 이들의 특징을 하기 표 1에 나타내었다.Serum samples from RA patients were collected from RA patients (n=157) and a control group of osteoarthritis (OA) patients (n=50) at the start of the study, and among 157 RA patients, moderate or severe (high) Patients with disease activity of (n=103, DAS28 >3.2) were optionally administered c-DMARD (n=53), b-DMARD (n=49) and ts-DMARD (n=1), and administration 6 Serum was collected after six months, and their characteristics are shown in Table 1 below.

VariableVariable Total (n=157)Total (n=157) Low DA (n=54)Low DA (n=54) ModerateorModerateor High DA (n=103)* High DA (n=103)* p valuep value Age, yearsAge, years 56 (11.6)56 (11.6) 55.9 (11.8)55.9 (11.8) 56 (11.6)56 (11.6) 0.9510.951 Female, n (%)Female, n (%) 136 (86.6)136 (86.6) 45 (83.3)45 (83.3) 91 (88.3)91 (88.3) 0.3800.380 BMI, kg/m2 BMI , kg/m2 23 (20.8-24.4)23 (20.8-24.4) 22.8 (20.5-23.9)22.8 (20.5-23.9) 23.1 (21-24.9)23.1 (21-24.9) 0.1250.125 Duration of disease, yearsDuration of disease, years 5 (1-13.5)5 (1-13.5) 7 (3-12.3)7 (3-12.3) 4 (0-15)4 (0-15) 0.0260.026 ESR, mm/hourESR, mm/hour 26 (13-44)26 (13-44) 12 (3.8-21)12 (3.8-21) 36 (20-52)36 (20-52) <0.001<0.001 CRP, mg/dLCRP, mg/dL 0.42 (0.08-1.42)0.42 (0.08-1.42) 0.06 (0.02-0.21)0.06 (0.02-0.21) 0.90 (0.34-2.0)0.90 (0.34-2.0) <0.001<0.001 RF, IU/mLRF, IU/mL 99 (33.7-362.7)99 (33.7-362.7) 69.7 (19.9-156.2)69.7 (19.9-156.2) 121 (40.4-476.7)121 (40.4-476.7) 0.0150.015 ACPA, U/mLACPA, U/mL 171.3 (37-340)171.3 (37-340) 200 (42.3-340)200 (42.3-340) 163.5 (34.9-340)163.5 (34.9-340) 0.9490.949 Glucocorticoid use, n (%)Glucocorticoid use, n (%) 110 (70.1)110 (70.1) 39 (72.2)39 (72.2) 71 (68.9)71 (68.9) 0.6690.669 PD equivalent, mg/dayPD equivalent, mg/day 2.5 (0-5)2.5 (0-5) 2.5 (0-5)2.5 (0-5) 2.5 (0-5)2.5 (0-5) 0.7720.772 Previous c-DMARD use, n (%)Previous c-DMARD use, n (%) 135 (86.0)135 (86.0) 51 (94.4)51 (94.4) 84 (81.6)84 (81.6) 0.0270.027 MTX dose, mg/weekMTX dose, mg/week 7.5 (0-10)7.5 (0-10) 7.5 (0-10)7.5 (0-10) 7.5 (0-10)7.5 (0-10) 0.5320.532 Previous b-DMARD use, n (%)Previous b-DMARD use, n (%) 28 (17.8)28 (17.8) 19 (35.2)19 (35.2) 9 (8.7)9 (8.7) <0.001<0.001

상기 표 1에서 데이터는 연속 변수에 대한 평균(표준편차) 또는 중앙값(interquartile range)으로 표시된다. DA: 질병활성도(disease activity), BMI: 체질량 지수(body mass index), ESR: 적혈구 침강 속도(erythrocyte sedimentation rate), CRP: C-반응성 단백질(C-reactive protein), RF: 류마티스성 인자(rheumatoid factor), ACPA: 항-시트룰린화 펩티드 항체(anti-citrullinated peptide antibodies), PD: prednisone, c-DMARD: 종래의 질환조절항류마티스약제(conventional disease-modifying anti-rheumatic drug), MTX: methotrexate, b-DMARD: 생물학적 질환조절항류마티스약제(biologic disease-modifying anti-rheumatic drug).본 발명은 가톨릭대학교 병원 임상연구심의위원회로부터 승인 받았으며(No.KC14TIMI0697), 연구 참여자로부터 서면으로 동의를 받았다.In Table 1, data are presented as averages (standard deviations) or medians (interquartile ranges) for continuous variables. DA: disease activity, BMI: body mass index, ESR: erythrocyte sedimentation rate, CRP: C-reactive protein, RF: rheumatoid factor), ACPA: anti-citrullinated peptide antibodies, PD: prednisone, c-DMARD: conventional disease-modifying anti-rheumatic drug, MTX: methotrexate, b -DMARD: biologic disease-modifying anti-rheumatic drug. The present invention was approved by the Clinical Research Review Committee of The Catholic University of Korea Hospital (No.KC14TIMI0697), and written consent was obtained from the study participants.

실시예Example 2. 2. VEGFVEGF 및 IL-6 측정 and IL-6 measurement

증식하는 활막세포에서 주로 분비되는 주요한 혈관신생 유발인자인 VEGF 및 IL-6의 농도를 RA 및 OA 환자의 혈청에서 알려진 방법(Yoo SA, Kim M, Kang MC, et al. Nat Immunol 2019;20:1348-59.)에 따라 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)로 측정하였다. ELISA의 VEGF 및 IL-6 검출한계는 10 pg/ml이었다.Concentrations of VEGF and IL-6, which are major angiogenic factors mainly secreted from proliferating synovial cells, were measured in the serum of RA and OA patients by known methods (Yoo SA, Kim M, Kang MC, et al. Nat Immunol 2019;20: 1348-59.) and measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The ELISA detection limit for VEGF and IL-6 was 10 pg/ml.

실시예Example 3. 임상 파라미터 평가 3. Assessment of clinical parameters

RA 환자의 ESR과 CRP 수준을 연구 개시시점과 그 이후에 측정하였다. 또한, 류마티스 인자(rheumatoid factor, RF) 및 ACPA(anti-citrullinated peptide antibodies)를 포함하는 혈청학적 마커에 대한 데이터를 얻었다. 손과 발에 대한 방사선 촬영 검사를 실시하여, 관절열극(joint space)의 좁은 정도와 침식 정도를 van der Heijde-modified Sharp score (vdH Sharp score)에 따라 점수화 하였다. RA 환자의 질병활성도를 질병(disease) 활성도(activity) 점수 28ESR (DAS28ESR)에 기초하여 결정하였다: DAS28≤3.2 = 낮은 질병활성도; DAS28>3.2 = 중등도(moderate) 또는 중증(high) 질병활성도. 또한, EULAR(European League Against Rheumatism) 반응 기준(response criteria)을 치료 반응성을 평가하는데 적용하였다.ESR and CRP levels of RA patients were measured at the beginning of the study and thereafter. In addition, data on serological markers including rheumatoid factor (RF) and anti-citrullinated peptide antibodies (ACPA) were obtained. Radiographic examinations were performed on the hands and feet, and the degree of narrowing and erosion of the joint space was scored according to the van der Heijde-modified Sharp score (vdH Sharp score). The disease activity of RA patients was determined based on the disease activity score 28 ESR (DAS28 ESR ): DAS28≤3.2 = low disease activity; DAS28>3.2 = moderate or high disease activity. In addition, European League Against Rheumatism (EULAR) response criteria were applied to evaluate treatment responsiveness.

실시예Example 4. 통계 분석 4. Statistical analysis

연속 변수의 비교를 student’s unpaired t 테스트 또는 Mann-Whitney U 테스트로 조사하였으며, 범주형 변수의 비교를 Chi-Square 테스트 또는 Fisher’s exact 테스트로 조사하였다. 두 변수 사이의 상관관계를 Pearson’s correlation 테스트로 분석하였다. 동일 대상에서 연구 개시시점과 그 이후의 측정 값 사이의 차이를 조사하기 위하여 paired t test를 적용하였다. 치료에 대한 좋은(good) 또는 중간(moderate) 반응과 관련된 인자를 조사하기 위하여 단순 및 다중 로지스틱 회기 분석을 실시하였다. 다중 로지스틱 회기 분석은 단순 로지스틱 회기 분석에서 0.05 미만의 p 값을 갖는 변수에 대하여 실시하였다. 통계 분석은 IBM SPSS Statistics 20 (IBM Corp., Armonk, NY, USA)을 사용하여 실시하였고, 그래프는 GraphPad Prism 5 (GraphPad Software, San Diego, CA, USA)를 사용하여 그렸다. Comparisons of continuous variables were investigated using the student's unpaired t test or Mann-Whitney U test, and comparisons of categorical variables were investigated using the Chi-Square test or Fisher's exact test. The correlation between the two variables was analyzed by Pearson's correlation test. A paired t test was applied to investigate the difference between the measurement values at the beginning of the study and thereafter in the same subject. Simple and multiple logistic regression analyzes were performed to investigate factors associated with good or moderate response to treatment. Multiple logistic regression analysis was performed for variables with a p value of less than 0.05 in simple logistic regression analysis. Statistical analysis was performed using IBM SPSS Statistics 20 (IBM Corp., Armonk, NY, USA), and graphs were drawn using GraphPad Prism 5 (GraphPad Software, San Diego, CA, USA).

실험예Experimental example 1. b- 1. b- DMARD에to DMARD 대한 반응성을 평가하는데 우수한 혈청 Serum excellent for evaluating reactivity to VEGF의VEGF 효과 확인 Check the effect

혈청 혈관신생유발 인자 VEGF 및 IL-6가 생물학적 질환조절항류마티스약제(b-DMARD)에 대한 치료 반응성 평가 인자로서 사용할 수 있는지 조사하였다. 이를 위하여, 연구 개시시점에서 DAS28 점수가 >3.2인 진행성 RA 환자에서 ESR과 CRP 뿐만 아니라, 혈청 VEGF 및 IL-6를 연속적으로 모니터링하고, EULAR 반응 기준과 비교하였다. c-DMARD 투여군(n=53) 및 b-DMARD 투여군(n=49)의 연구 개시시점에서의 특징을 하기 표 2에 나타내었다(ts-DMARD(표적 합성 질환조절항류마티스약제, targeted synthetic disease-modifying anti-rheumatic drug) 투여 받은 한 명의 환자는 분석에서 제외하였다). Whether serum angiogenesis-inducing factors VEGF and IL-6 can be used as treatment responsiveness evaluation factors for biological disease-modifying anti-rheumatic drugs (b-DMARDs) was investigated. To this end, serum VEGF and IL-6 as well as ESR and CRP were continuously monitored and compared with EULAR response criteria in patients with advanced RA with a DAS28 score >3.2 at the start of the study. The characteristics of the c-DMARD administration group (n = 53) and the b-DMARD administration group (n = 49) at the start of the study are shown in Table 2 below (ts-DMARD (targeted synthetic disease-modifying antirheumatic drug, targeted synthetic disease- One patient who received a modifying anti-rheumatic drug was excluded from the analysis).

VariableVariable c-c- DMARDDMARD users (n=53) users (n=53) b-b- DMARDDMARD users (n=49) users (n=49) p valuep value Age, yearsAge, years 55.9 (11.9)55.9 (11.9) 56.0 (11.5)56.0 (11.5) 0.9600.960 Female, n (%)Female, n (%) 46 (86.8)46 (86.8) 44 (89.8)44 (89.8) 0.6380.638 BMI, kg/m2 BMI , kg/m2 23.1 (21.3-25.1)23.1 (21.3-25.1) 23.1 (20.8-24.5)23.1 (20.8-24.5) 0.4670.467 Duration of disease, yearsDuration of disease, years 2 (0-14.5)2 (0-14.5) 5 (1-16)5 (1-16) 0.0820.082 ESR, mm/hourESR, mm/hour 32 (19-46)32 (19-46) 43 (25-60)43 (25-60) 0.0240.024 CRP, mg/dLCRP, mg/dL 0.78 (0.33-1.84)0.78 (0.33-1.84) 1.03 (0.37-2.53)1.03 (0.37-2.53) 0.2690.269 Baseline DAS28Baseline DAS28 4.6 (0.9)4.6 (0.9) 5.0 (1.1)5.0 (1.1) 0.0300.030 RF, IU/mLRF, IU/mL 129.9 (28.3-484.6)129.9 (28.3-484.6) 138.1 (47.8-528.6)138.1 (47.8-528.6) 0.3500.350 ACPA, U/mLACPA, U/mL 165 (32.3-340)165 (32.3-340) 152 (35.2-340)152 (35.2-340) 0.5250.525 vdH Sharp scorevdH Sharp score 8 (0-33)8 (0-33) 17 (5-38.5)17 (5-38.5) 0.0900.090 Glucocorticoid use, n (%)Glucocorticoid use, n (%) 31 (58.5)31 (58.5) 40 (81.6)40 (81.6) 0.0110.011 PD equivalent, mg/dayPD equivalent, mg/day 2.5 (0-5)2.5 (0-5) 5 (2.5-5)5 (2.5-5) 0.0190.019 MTX dose, mg/weekMTX dose, mg/week 7.5 (0-10)7.5 (0-10) 10 (7.5-12.5)10 (7.5-12.5) 0.0450.045

DAS28: 질병활성도 점수(disease activity score) 28, vdH: van der Heijde.나이, 성별, BMI 및 자가항체(autoantibody) 상태는 두 그룹 간 유사하였다. 그러나, 연구 개시시점에서의 ESR 및 DAS28은 c-DMARD 투여군에 비하여 b-DMARD 투여군에서 더 높았다. DAS28: disease activity score 28, vdH: van der Heijde. Age, sex, BMI and autoantibody status were similar between the two groups. However, ESR and DAS28 at the start of the study were higher in the b-DMARD group compared to the c-DMARD group.

실험 결과, 도 1a에 나타낸 바와 같이, c-DMARD에 좋은 반응 및 중간 반응(good and moderate)을 보인 환자에서, ESR과 CRP뿐만 아니라, 혈청 VEGF 및 IL-6는 치료 6개월 후 상당히 감소하였으나, 비반응군에서는 변화되지 않았다. 이러한 결과는 ESR과 CRP에 더하여 혈관신생유발 사이토카인 VEGF 및 IL-6의 변화는 c-DMARD에 대한 좋은 치료 반응성을 반영함을 보여주며, 치료 비반응군으로부터 치료 반응군을 구별할 수 있음을 보여준다. 이것을 뒷받침하는 것으로, 도 1b에 나타낸 바와 같이 △DAS28은 △ESR 및 △CRP뿐만 아니라, △VEGF 및 △IL-6와 양의 상관관계를 나타내었다.Experimental results, as shown in Figure 1a, in patients who showed a good and moderate response to c-DMARD, not only ESR and CRP, but also serum VEGF and IL-6 decreased significantly after 6 months of treatment, There was no change in the non-responder group. These results show that changes in the angiogenic cytokines VEGF and IL-6, in addition to ESR and CRP, reflect good treatment responsiveness to c-DMARD, and can distinguish treatment responders from treatment non-responders. show In support of this, as shown in Figure 1b, ΔDAS28 showed a positive correlation with ΔESR and ΔCRP, as well as ΔVEGF and ΔIL-6.

b-DMARD 투여군의 경우, 도 2a에 나타낸 바와 같이 c-DMARD 투여군의 결과와 유사하게 혈청 VEGF는 좋은 반응군과 중간 반응군에서 상당히 감소하였으나, 비반응군에서는 변화를 보이지 않았다. 그러나, 혈청 IL-6 수준은 반응군과 비반응군 모두에서 변화를 보이지 않았는데, 이는 IL-6가 b-DMARD에 대한 치료 반응성을 예측하는 능력이 없음을 보여준다. 이러한 IL-6의 예측 능력이 없는 것은, 도 2b에 나타낸 바와 같이 하위 그룹(subgroup) 분석에서 △IL-6가 Tocilizumab 투여 받은 환자의 △DAS28과 관련성을 보이지 않았으나, 비- Tocilizumab 바이오의약품 투여군에서는 관련성을 나타냈기 때문에, IL-6 수용체에 대한 항체인 Tocilizumab의 사용과 관련 있는 것으로 보인다. 흥미롭게도, 도 2a에 나타낸 바와 같이 비록 CRP 수준은 반응군에서 상당히 감소하였으나, b-DMARD 치료에 의한 비반응군에서도 감소하였으며, ESR 수준 역시 유사한 경향을 보였다.In the case of the b-DMARD administration group, as shown in FIG. 2a, serum VEGF significantly decreased in the good and intermediate responders, similar to the results of the c-DMARD administration group, but showed no change in the non-responder group. However, serum IL-6 levels showed no change in both responders and non-responders, indicating that IL-6 has no ability to predict treatment responsiveness to b-DMARDs. As shown in FIG. 2b, the reason for this lack of predictive ability of IL-6 was that △IL-6 did not show an association with △DAS28 in Tocilizumab-treated patients in a subgroup analysis, but in the non-Tocilizumab biopharmaceutical-administered group, , it seems to be related to the use of Tocilizumab, an antibody against the IL-6 receptor. Interestingly, as shown in Figure 2a, although the CRP level was significantly decreased in the responder group, it was also decreased in the non-responder group by b-DMARD treatment, and the ESR level also showed a similar trend.

종합하면, 상기와 같은 실험결과는 c-DMARD 투여군과 대조적으로, b-DMARD 투여군에서 CRP는 치료반응과 무관하게 비특이적으로 감소할 수 있음을 보여주며, △VEGF는 바이오의약품 투여 환자의 특정 하위 그룹(subgroup)에서 치료 반응성을 평가하기 위한 좋은 대안임을 시사한다.Taken together, the above experimental results show that, in contrast to the c-DMARD-administered group, CRP in the b-DMARD-administered group can be non-specifically decreased regardless of the treatment response, and ΔVEGF is a specific subgroup of biopharmaceutical-administered patients. (subgroup), suggesting that it is a good alternative for evaluating treatment responsiveness.

실험예Experimental example 2. 2. DMARD에to DMARD 대한 좋은 반응성 및 중간 반응성에 대한 독립적인 예측 인자로서의 혈청 Serum as an independent predictor of good and moderate reactivity to VEGFVEGF 수준 level

혈청 VEGF가 CRP와 달리 c-DMARD 및 b-DMARD 투여 받은 환자 모두에서 질병활성도 및 치료 반응성을 잘 나타냈음에 기초하여, VEGF가 치료 반응성의 예측인자로서 기능하는지 추가적으로 조사하였다. 이를 위해, 좋은/중간 반응군(n=82) 및 비반응군(n=21)의 연구 개시시점에서의 특징을 하기 표 3에 나타내었다. Based on the fact that serum VEGF, unlike CRP, showed disease activity and treatment responsiveness in both c-DMARD and b-DMARD-treated patients, whether VEGF functions as a predictor of treatment responsiveness was further investigated. To this end, the characteristics at the start of the study of good/intermediate responders (n = 82) and non-responders (n = 21) are shown in Table 3 below.

VariableVariable Good or moderate response (n=82)Good or moderate response (n=82) No response (n=21)No response (n=21) p valuep value Age, yearsAge, years 57.3 (11.0)57.3 (11.0) 50.9 (12.8)50.9 (12.8) 0.0220.022 Female, n (%)Female, n (%) 70 (85.4)70 (85.4) 21 (100)21 (100) 0.1200.120 BMI, kg/m2 BMI , kg/m2 23.2 (21.1-25.1)23.2 (21.1-25.1) 22.3 (20.8-24.9)22.3 (20.8-24.9) 0.4660.466 Duration of disease, yearsDuration of disease, years 4 (0-15)4 (0-15) 2 (0-13)2 (0-13) 0.3400.340 ESR, mm/hourESR, mm/hour 36 (19-52.3)36 (19-52.3) 38 (23.5-50.5)38 (23.5-50.5) 0.8630.863 CRP, mg/dLCRP, mg/dL 0.84 (0.34-2.09)0.84 (0.34-2.09) 1.09 (0.36-1.86)1.09 (0.36-1.86) 0.7970.797 Baseline DAS28Baseline DAS28 4.9 (1.0)4.9 (1.0) 4.5 (1.0)4.5 (1.0) 0.0870.087 RF, IU/mLRF, IU/mL 119.2 (37.9-499.8)119.2 (37.9-499.8) 129.9 (49.5-405.1)129.9 (49.5-405.1) 0.9250.925 ACPA, U/mLACPA, U/mL 147 (28-340)147 (28-340) 198.5 (141.9-340)198.5 (141.9-340) 0.1300.130 vdH Sharp scorevdH Sharp score 10 (4-35)10 (4-35) 12 (3-42)12 (3-42) 0.9370.937 TreatmentTreatment Glucocorticoid use, n (%)Glucocorticoid use, n (%) 60 (73.2)60 (73.2) 11 (52.4)11 (52.4) 0.0660.066 PD equivalent, mg/dayPD equivalent, mg/day 2.5 (0-5)2.5 (0-5) 2.5 (0-5)2.5 (0-5) 0.3330.333 c-DMARD users, n (%)c-DMARD users, n (%) 40 (48.8)40 (48.8) 13 (61.9)13 (61.9) 0.2830.283 b-DMARD users, n (%)b-DMARD users, n (%) 41 (50.0)41 (50.0) 8 (38.1)8 (38.1) 0.3300.330 △VEGF (Baseline-F/U)△VEGF (Baseline-F/U) 0.010 (0, 0.031)0.010 (0, 0.031) -0.001 (-0.015, 0.016)-0.001 (-0.015, 0.016) 0.0110.011 △IL-6 (Baseline-F/U)△IL-6 (Baseline-F/U) 0.003 (-0.003, 0.011)0.003 (-0.003, 0.011) 0 (-0.005, 0.009)0 (-0.005, 0.009) 0.4940.494 △ESR (Baseline-F/U)△ESR (Baseline-F/U) 17 (9, 36.5)17 (9, 36.5) 6 (-3.5, 22)6 (-3.5, 22) 0.0050.005 △CRP (Baseline-F/U)△CRP (Baseline-F/U) 0.62 (0.10, 1.77)0.62 (0.10, 1.77) 0.61 (0.02, 1.17)0.61 (0.02, 1.17) 0.3070.307

VEGF: vascular endothelial growth factor, IL-6: interleukin-6, F/U: follow-up.cDMARD 투여군과 bDMARD 투여군의 비율은 좋은/중간 반응군과 비반응군 사이에 별 차이가 없었다. 실험실 파라미터 및 △VEGF 수준(연구 개시시점에서의 혈청 VEGF 농도 - DMARD 투여 6개월 후 VEGF 농도)을 두 그룹 간 비교한 경우, 좋은/중간 반응군은 비반응군에 비하여 더 많은 나이, 높은 △ESR 및 높은 △VEGF을 나타내었으며, 이는 VEGF를 포함한 이러한 파라미터들이 DMARD에 대한 치료 반응성을 예측하기 위한 대리 바이오마커로서 기능할 수 있음을 보여준다.VEGF: vascular endothelial growth factor, IL-6: interleukin-6, F/U: follow-up. There was no significant difference between the good/intermediate responders and non-responders in the ratio between the cDMARD and bDMARD groups. When laboratory parameters and ΔVEGF levels (serum VEGF concentration at the start of the study minus VEGF concentration 6 months after DMARD administration) were compared between the two groups, the good/intermediate responders had a higher ΔESR at an older age than the non-responders. and high ΔVEGF, indicating that these parameters, including VEGF, can function as surrogate biomarkers for predicting treatment responsiveness to DMARD.

또한, 혈청 △VEGF가 DMARD에 대한 치료 반응성을 독립적으로 예측할 수 있는지 알아보기 위하여, 다중 로지스틱 회기 분석을 실시하였다. 다중 로지스틱 회기 분석은 일변량 분석(univariable analysis)에서 통계적 유의성을 보인 나이, △ESR/△CRP 및 △VEGF로 구성되었다. 그 결과, 하기 표 4에 나타낸 바와 같이 △VEGF는 DMARD에 대한 좋은/중간 반응성을 예측하는 독립 인자임을 확인하였다(odds ratio 3.55). 물론, 임상적 결과와 무관하게 b-DMARD에 의하여 CRP가 비특이적으로 감소한 결과와 일치하게(도 2a 참조), △ESR 및 △CRP 수준은 유의성 있는 예측력을 보이지 못하였다.In addition, multiple logistic regression analysis was performed to determine whether serum ΔVEGF could independently predict treatment responsiveness to DMARD. Multiple logistic regression analysis consisted of age, ΔESR/ΔCRP and ΔVEGF showing statistical significance in univariable analysis. As a result, as shown in Table 4 below, it was confirmed that ΔVEGF was an independent factor predicting good/intermediate responsiveness to DMARD (odds ratio 3.55). Of course, consistent with the non-specific decrease in CRP by b-DMARD regardless of the clinical results (see Fig. 2a), the ΔESR and ΔCRP levels did not show significant predictive power.

VariableVariable UnivariableUnivariable MultivariableMultivariable Unadjusted ORUnadjusted OR pp Adjusted ORAdjusted OR pp AgeAge 1.05 (1.01-1.10)1.05 (1.01-1.10) 0.0260.026 1.05 (0.99-1.10)1.05 (0.99-1.10) 0.0560.056 BMI ≥25BMI ≥25 1.46 (0.44-4.84)1.46 (0.44-4.84) 0.5330.533 Duration of disease, yearsDuration of disease, years 1.02 (0.96-1.08)1.02 (0.96-1.08) 0.5370.537 Abnormal ESRAbnormal ESR 0.60 (0.18-1.99)0.60 (0.18-1.99) 0.4060.406 Abnormal CRPAbnormal CRP 1.02 (0.37-2.82)1.02 (0.37-2.82) 0.9720.972 Baseline DAS28Baseline DAS28 1.60 (0.93-2.74)1.60 (0.93-2.74) 0.0880.088 High-positive RFHigh-positive RF 0.87 (0.32-2.39)0.87 (0.32-2.39) 0.7820.782 High-positive ACPAHigh-positive ACPA 0.34 (0.07-1.59)0.34 (0.07-1.59) 0.1700.170 vdH Sharp scorevdH Sharp score 0.99 (0.98-1.00)0.99 (0.98-1.00) 0.1320.132 Glucocorticoid useGlucocorticoid use 2.48 (0.93-6.65)2.48 (0.93-6.65) 0.0710.071 bDMARD usebDMARD use 1.63 (0.61-4.34)1.63 (0.61-4.34) 0.3320.332 - Abatacept use- Abatacept use 0.58 (0.13-2.65)0.58 (0.13-2.65) 0.4800.480 - Tocilizumab use- Tocilizumab use 2.13 (0.38-11.83)2.13 (0.38-11.83) 0.3890.389 High △VEGF (baseline-F/U)High △VEGF (baseline-F/U) 4.67 (1.70-12.82)4.67 (1.70-12.82) 0.0030.003 3.55 (1.15-10.93)3.55 (1.15-10.93) 0.0270.027 High △IL-6 (baseline-F/U)High △IL-6 (baseline-F/U) 1.88 (0.71-5.02)1.88 (0.71-5.02) 0.2070.207 High △ESR (baseline-F/U)High △ESR (baseline-F/U) 4.21 (1.53-11.54)4.21 (1.53-11.54) 0.0050.005 2.27 (0.72-7.10)2.27 (0.72-7.10) 0.1600.160 High △CRP (baseline-F/U)High △CRP (baseline-F/U) 8.93 (1.14-70.26)8.93 (1.14-70.26) 0.0380.038 5.76 (0.68-48.62)5.76 (0.68-48.62) 0.1080.108

OR: odds ratio, p<0.05.OR: odds ratio, p<0.05.

전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야 한다.The above description of the present invention is for illustrative purposes, and those skilled in the art can understand that it can be easily modified into other specific forms without changing the technical spirit or essential features of the present invention. will be. Therefore, it should be understood that the embodiments described above are illustrative in all respects and not restrictive.

<110> CATHOLIC UNIVERSITY INDUSTRY ACADEMIC COOPERATION FOUNDATION <120> Biomarker for evaluating disease activity of rheumatoid arthritis and use thereof <130> MP19-290 <160> 1 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 191 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Met Asn Phe Leu Leu Ser Trp Val His Trp Ser Leu Ala Leu Leu Leu 1 5 10 15 Tyr Leu His His Ala Lys Trp Ser Gln Ala Ala Pro Met Ala Glu Gly 20 25 30 Gly Gly Gln Asn His His Glu Val Val Lys Phe Met Asp Val Tyr Gln 35 40 45 Arg Ser Tyr Cys His Pro Ile Glu Thr Leu Val Asp Ile Phe Gln Glu 50 55 60 Tyr Pro Asp Glu Ile Glu Tyr Ile Phe Lys Pro Ser Cys Val Pro Leu 65 70 75 80 Met Arg Cys Gly Gly Cys Cys Asn Asp Glu Gly Leu Glu Cys Val Pro 85 90 95 Thr Glu Glu Ser Asn Ile Thr Met Gln Ile Met Arg Ile Lys Pro His 100 105 110 Gln Gly Gln His Ile Gly Glu Met Ser Phe Leu Gln His Asn Lys Cys 115 120 125 Glu Cys Arg Pro Lys Lys Asp Arg Ala Arg Gln Glu Asn Pro Cys Gly 130 135 140 Pro Cys Ser Glu Arg Arg Lys His Leu Phe Val Gln Asp Pro Gln Thr 145 150 155 160 Cys Lys Cys Ser Cys Lys Asn Thr Asp Ser Arg Cys Lys Ala Arg Gln 165 170 175 Leu Glu Leu Asn Glu Arg Thr Cys Arg Cys Asp Lys Pro Arg Arg 180 185 190 <110> CATHOLIC UNIVERSITY INDUSTRY ACADEMIC COOPERATION FOUNDATION <120> Biomarker for evaluating disease activity of rheumatoid arthritis and use it <130> MP19-290 <160> 1 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 191 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Met Asn Phe Leu Leu Ser Trp Val His Trp Ser Leu Ala Leu Leu Leu 1 5 10 15 Tyr Leu His His Ala Lys Trp Ser Gln Ala Ala Pro Met Ala Glu Gly 20 25 30 Gly Gly Gln Asn His His Glu Val Val Lys Phe Met Asp Val Tyr Gln 35 40 45 Arg Ser Tyr Cys His Pro Ile Glu Thr Leu Val Asp Ile Phe Gln Glu 50 55 60 Tyr Pro Asp Glu Ile Glu Tyr Ile Phe Lys Pro Ser Cys Val Pro Leu 65 70 75 80 Met Arg Cys Gly Gly Cys Cys Asn Asp Glu Gly Leu Glu Cys Val Pro 85 90 95 Thr Glu Glu Ser Asn Ile Thr Met Gln Ile Met Arg Ile Lys Pro His 100 105 110 Gln Gly Gln His Ile Gly Glu Met Ser Phe Leu Gln His Asn Lys Cys 115 120 125 Glu Cys Arg Pro Lys Lys Asp Arg Ala Arg Gln Glu Asn Pro Cys Gly 130 135 140 Pro Cys Ser Glu Arg Arg Lys His Leu Phe Val Gln Asp Pro Gln Thr 145 150 155 160 Cys Lys Cys Ser Cys Lys Asn Thr Asp Ser Arg Cys Lys Ala Arg Gln 165 170 175 Leu Glu Leu Asn Glu Arg Thr Cys Arg Cys Asp Lys Pro Arg Arg 180 185 190

Claims (9)

VEGF(vascular endothelial growth factor) 단백질; 또는 이를 코딩하는 mRNA의 발현 수준을 측정하는 제제를 포함하는, 생물학적 질환조절항류마티스약제(biologic disease-modifyig anti-rheumatic drugs, bDMARD) 처리에 의한 류마티스 관절염의 질병활성도 평가용 조성물로서,
상기 조성물은 bDMARD 처리 후 VEGF 단백질 또는 이를 코딩하는 mRNA의 발현 수준이 bDMARD 처리 전에 비해 감소된 경우 류마티스 관절염 질병활성도가 감소한 것으로 평가하기 위한 것이고,
상기 bDMARD 처리 후, VEGF 단백질 또는 이를 코딩하는 mRNA의 발현 수준 변화량은 류마티스 관절염의 질병활성도 점수(disease activity score, DAS) 28의 변화량과 양의 상관관계를 가지는 것을 특징으로 하는, 조성물.
vascular endothelial growth factor (VEGF) protein; Or a composition for evaluating the disease activity of rheumatoid arthritis by biological disease-modifying anti-rheumatic drugs (bDMARD) treatment, including an agent measuring the expression level of mRNA encoding the same,
The composition is for evaluating that the disease activity of rheumatoid arthritis is reduced when the expression level of VEGF protein or mRNA encoding it after bDMARD treatment is reduced compared to before bDMARD treatment,
After the bDMARD treatment, the change in the expression level of the VEGF protein or mRNA encoding it is characterized in that it has a positive correlation with the change in the disease activity score (DAS) 28 of rheumatoid arthritis, composition.
 제1항에 있어서,
상기 측정은 피검체로부터 채취된 혈청에서 이루어지는 것을 특징으로 하는, 조성물.
According to claim 1,
The composition, characterized in that the measurement is made in serum collected from the subject.
 제1항에 있어서,
상기 제제는 VEGF 단백질; 또는 이를 코딩하는 mRNA에 특이적으로 결합하는 항체, 앱타머, 리간드, PNA(peptide nucleic acid), 올리고펩티드, 안티센스 올리고뉴클레오티드, 프라이머 쌍 및 프로브로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 조성물.
According to claim 1,
The agent may include VEGF protein; Or at least one selected from the group consisting of antibodies, aptamers, ligands, peptide nucleic acids (PNAs), oligopeptides, antisense oligonucleotides, primer pairs and probes that specifically bind to mRNA encoding them. .
 삭제delete 제1항의 조성물을 포함하는, 생물학적 질환조절항류마티스약제(biologic disease-modifyig anti-rheumatic drugs, bDMARD) 처리에 의한 류마티스 관절염의 질병활성도 평가용 키트.
A kit for evaluating the disease activity of rheumatoid arthritis by treatment with biologic disease-modifying anti-rheumatic drugs (bDMARD), comprising the composition of claim 1.
 생물학적 질환조절항류마티스약제(biologic disease-modifyig anti-rheumatic drugs, bDMARD) 처리 후의 피검체로부터 분리된 시료에서의 VEGF(vascular endothelial growth factor) 단백질 또는 이를 코딩하는 mRNA의 발현 수준을 확인하는 단계; 및
상기 VEGF 단백질 또는 이를 코딩하는 mRNA의 발현 수준이 bDMARD 처리 전과 비교하여 감소한 경우, bDMARD 처리에 의해 류마티스 관절염의 질병활성도가 감소한 것으로 평가하는 단계를 포함하는, 생물학적 질환조절항류마티스약제 처리에 의한 류마티스 관절염의 질병활성도 평가를 위한 정보제공방법으로서,
상기 bDMARD 처리 후, VEGF 단백질 또는 이를 코딩하는 mRNA의 발현 수준 변화량은 류마티스 관절염의 질병활성도 점수(disease activity score, DAS) 28의 변화량과 양의 상관관계를 가지는 것을 특징으로 하는, 정보제공방법.Checking the expression level of vascular endothelial growth factor (VEGF) protein or mRNA encoding it in a sample isolated from the subject after treatment with a biologic disease-modifying anti-rheumatic drug (bDMARD); and
When the expression level of the VEGF protein or mRNA encoding it is reduced compared to before bDMARD treatment, rheumatoid arthritis by biological disease-modifying anti-rheumatic agent treatment, comprising the step of evaluating that the disease activity of rheumatoid arthritis is reduced by bDMARD treatment As a method of providing information for evaluating disease activity,
After the bDMARD treatment, the amount of change in the expression level of the VEGF protein or mRNA encoding it is characterized in that it has a positive correlation with the amount of change in the disease activity score (DAS) 28 of rheumatoid arthritis, information providing method. 삭제delete 삭제delete 삭제delete
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