KR102433268B1

KR102433268B1 - 엑소좀을 함유한 피부 미용 개선용 조성물

Info

Publication number: KR102433268B1
Application number: KR1020220032127A
Authority: KR
Inventors: 김봉준; 김은지; 오승익; 이혜연; 류한슬; 최승희
Original assignee: 주식회사 다산씨엔텍
Priority date: 2022-03-15
Filing date: 2022-03-15
Publication date: 2022-08-18

Abstract

본 발명은 피부 미용 개선용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 엑소좀 생성이 촉진된 인간줄기세포배양액 (STEMATURE-Exosome^TM)을 포함하는 피부 미용 개선용 조성물에 관한 것이다.

Description

엑소좀을 함유한 피부 미용 개선용 조성물 {Composition Comprising Exosome for Improving Skin Beauty}

엑소좀 (Exosome)은 세포 간 신호전달을 하기 위하여, 단백질, DNA, RNA 등을 가지고 세포 밖으로 분비되는 50 - 200 nm 크기의 막구조의 작은 소낭을 가리킨다.

이러한 엑소좀은 전자 현미경을 통한 연구에서 원형질막 (plasma membrane)으로부터 직접 떨어져 나가는 것이 아니라, 다낭체(Multivesicular bodies, MVBs)라고 불리는 세포 내 특정 구획에서 기원하여 세포 밖으로 방출, 분비되는 것으로 관찰되었다. 즉, 다낭체와 원형질막의 융합이 일어나면, 그러한 소낭들은 세포 밖 환경으로 방출되는데, 이를 엑소좀이라 명명한다.

B-림프구, T-림프구, 수지상세포, 거대핵세포(megakaryocyte), 대식세포 등을 포함한 다양한 종류의 면역 세포들과 줄기세포 및 종양세포 등에서 엑소좀을 생산하여 분비한다고 알려져 있다.

엑소좀에는 세포 내의 다양한 단백질, DNA, RNA 등이 포함되어 있다. 이러한 엑소좀에 포함되어 세포 밖으로 분비되는 물질들은 세포막과의 융합 (fusion) 혹은 내포작용 (endocytosis)에 의해 다른 세포 내로 다시 유입되어 세포 간의 통신자로서의 역할을 하기도 한다. 또한, 이러한 엑소좀에 포함되어 세포 밖으로 분비되는 물질들이 피부 기능 개선 등에 이용될 수 있다.

이러한 기술적 배경하에서, 본 출원의 발명자들은 엑소좀 생성이 촉진된 인간줄기세포배양액 (STEMATURE-Exosome^TM)을 통해 피부 미용을 개선시킬 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.

1. 한국등록특허공보 등록번호 10-2284517 (2021.07.27)

본 발명이 해결하고자 하는 기술적 과제는 엑소좀을 함유한 피부 미용 개선용 조성물을 제공함에 있다.

상술한 기술적 과제를 해결하기 위하여 엑소좀 생성이 촉진된 인간줄기세포배양액 (STEMATURE-Exosome^TM)을 포함하는 피부 미용 개선용 조성물을 제공한다.

상기 조성물은 정제수, 글리세린, 부틸렌글라이콜, 글리세레스, 다이프로필렌글라이콜, 세틸에틸헥사노에이트, 트라이에틸헥사노인, 수크로오스올리에이트, 구주소나무잎추출물, 알란토인, 글리세릴아크릴레이트/아크릴릭애씨드코폴리머, 폴리글리세릴-10다이올리에이트, 펜틸렌글라이콜, 카프릴릴글라이콜, 1,2-헥산다이올 및 다이소듐이디티에이로 구성된 군에서 선택되는 하나 이상을 추가로 포함할 수 있다.

상기 조성물 전체 중량을 기준으로 엑소좀 생성이 촉진된 인간줄기세포배양액 (STEMATURE-Exosome^TM) 15-25%(w/w) 및 정제수 40-50%(w/w)를 포함할 수 있다.

상기 엑소좀 생성이 촉진된 인간줄기세포배양액 (STEMATURE-Exosome^TM)은 인간 중간엽 줄기세포를 인간 혈소판 용해물, 혈청 대체제, 소듐 피루베이트, 인슐린, 트랜스페린 및 소듐 셀레나이트를 포함하는 복합조성물로 처리된 배지에서 배양하는 단계를 포함하는, 엑소좀 및/또는 세포외 소포체의 생성 촉진 방법으로 수득한 인간줄기세포배양액 (Human Stem Cell Conditioned Media)이다.

상기 피부 기능 개선은 피부 보습 개선, 피부톤 개선, 과색소 침착에 의한 피부 미백 개선, 눈가 주름 개선, 피부탄력 피로도 개선 또는 피부 치밀도 개선을 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 조성물은 피부 보습 개선, 피부톤 개선, 과색소 침착에 의한 피부 미백 개선, 눈가 주름 개선, 피부탄력 피로도 개선 또는 피부 치밀도 개선 효과를 나타내어, 피부 기능 개선에 유용하게 사용할 수 있다.

본 발명의 기술적 효과들은 이상에서 언급한 것들로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 기술적 효과들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물을 처리한 경우 안면 피부의 색소 변화를 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물을 처리한 경우 안면 피부의 탄력 변화를 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물을 처리한 경우 눈가 피부의 치밀도 변화를 나타낸 것이다.

본 발명이 여러 가지 수정 및 변형을 허용하면서도, 그 특정 실시예들이 도면들로 예시되어 나타내어지며, 이하에서 상세히 설명될 것이다. 그러나 본 발명을 개시된 특별한 형태로 한정하려는 의도는 아니며, 오히려 본 발명은 청구항들에 의해 정의된 본 발명의 사상과 합치되는 모든 수정, 균등 및 대용을 포함한다.

비록 제1, 제2 등의 용어가 여러 가지 요소들, 성분들, 영역들, 층들 및/또는 지역들을 설명하기 위해 사용될 수 있지만, 이러한 요소들, 성분들, 영역들, 층들 및/또는 지역들은 이러한 용어에 의해 한정되어서는 안 된다는 것을 이해할 것이다.

본 발명은 엑소좀 생성이 촉진된 인간줄기세포배양액 (STEMATURE-Exosome^TM)을 포함하는 피부 미용 개선용 조성물에 관한 것이다.

상기 "줄기세포"는 개체의 모든 조직의 세포로 분화할 수 있는 다능성(pluripotent)이거나 전능성(totipotent)이 있는 자가-재생산능(self-renewal)을 갖는 세포를 의미하며, 상기 줄기세포는 성체줄기세포, 만능줄기세포, 유도만능줄기세포 또는 배아줄기세포를 포함한다. 상기 "성체 줄기세포"는 발생과정이 진행되어 배아의 각 장기가 형성되는 단계 혹은 성체단계에서 나타나는 줄기세포를 의미한다.

"중간엽 줄기세포"는 뼈, 연골, 지방, 힘줄, 신경 조직, 섬유아세포 및 근육 세포 등 구체적인 장기의 세포로 분화되기 전의 중간엽 유래의 만능 전구 세포를 말한다. 상기 중간엽 줄기세포는 인간 탯줄(cord), 와튼 젤리(wharton's jelly), 제대혈, 태반, 지방 조직, 골수, 편도, 인간의 배낭(embryonic yolk sac), 제대, 피부, 말초혈액, 근육, 간, 신경 조직, 골막, 태아막, 활액막, 활액, 양막, 반월상연골, 전십자 인대, 관절 연골세포, 유치, 혈관주위세포, 지주 골, 슬개골하 지방괴, 비장 및 흉선 등에서 유래할 수 있다. 구체적으로, 상기 중간엽 줄기세포는 지방, 골수, 제대 또는 제대혈 유래 줄기세포일 수 있다.

상기 줄기세포는 지방 유래 줄기세포일 수 있으며, 인간 지방조직으로부터 분리된 것일 수 있다. 상기 지방 유래 줄기세포는 지방전구세포, 기질세포, 다분화능 지방 유래 세포(multipotent adipose-derived cells) 또는 지방 유래 성체 줄기세포(adipose derived adult stem cells)일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

상기 '줄기세포 배양액'이란 체외배양 조건에서 줄기세포 성장 및 생존을 지지할 수 있게 하는 배지 중에서 줄기세포가 배양된 것으로, 본 발명은 엑소좀 생성이 촉진된 인간줄기세포배양액 (STEMATURE-Exosome^TM)을 포함한다.

상기 엑소좀 생성이 촉진된 인간줄기세포배양액의 제조방법은 한국등록특허 제10-2284517호에 구체적으로 기재되어 있으며 본 발명에 참조로서 도입될 수 있다.

하나의 실시예에서, 상기 혈청 대체제의 농도는 5 내지 15%, 바람직하게는 7 내지 12% 보다 바람직하게는 9 내지 11%의 범위, 가장 바람직하게는 10%일 수 있다.

하나의 실시예에서, 상기 소듐 피루베이트의 농도는 500 내지 2000μM, 바람직하게는 700 내지 1600μM, 보다 바람직하게는 900 내지 1300μM의 범위, 가장 바람직하게는 1000μM일 수 있다.

하나의 실시예에서, 상기 인슐린의 농도는 0.86 내지 3.44μM, 바람직하게는 0.96 내지 2.44μM, 보다 바람직하게는 1.06 내지 2.08μM의 범위, 가장 바람직하게는 1.72μM일 수 있다.

하나의 실시예에서, 상기 트랜스페린의 농도는 0.03 내지 0.14μM 바람직하게는 0.04 내지 0.13μM, 보다 바람직하게는 0.05 내지 0.12μM의 범위, 가장 바람직하게는 0.07μM일 수 있다.

하나의 실시예에서, 상기 소듐 셀레나이트의 농도는 0.01 내지 0.08μM, 바람직하게는 0.02 내지 0.07μM, 보다 바람직하게는 0.03 내지 0.06μM의 범위, 가장 바람직하게는 0.04μM일 수 있다.

본 발명의 조성물은 정제수, 글리세린, 부틸렌글라이콜, 글리세레스, 다이프로필렌글라이콜, 세틸에틸헥사노에이트, 트라이에틸헥사노인, 수크로오스올리에이트, 구주소나무잎추출물, 알란토인, 글리세릴아크릴레이트/아크릴릭애씨드코폴리머, 폴리글리세릴-10다이올리에이트, 펜틸렌글라이콜, 카프릴릴글라이콜, 1,2-헥산다이올 및 다이소듐이디티에이로 구성된 군에서 선택되는 하나 이상을 추가로 포함할 수 있다.

구체적으로, 본 발명의 조성물은 인간줄기세포배양액 (STEMATURE-Exosome^TM) 이외에 추가 성분을 포함할 수 있다. 예를 들어, 정제수, 글리세린, 부틸렌글라이콜, 글리세레스, 다이프로필렌글라이콜, 세틸에틸헥사노에이트, 트라이에틸헥사노인, 수크로오스올리에이트, 구주소나무잎추출물, 알란토인, 글리세릴아크릴레이트/아크릴릭애씨드코폴리머, 폴리글리세릴-10다이올리에이트, 펜틸렌글라이콜, 카프릴릴글라이콜, 1,2-헥산다이올 및 다이소듐이디티에이을 포함할 수 있다.

상기 인간줄기세포배양액 (STEMATURE-Exosome^TM)은 조성물 전체 중량을 기준으로 15-25%(w/w), 구체적으로 18-22%(w/w), 더욱 구체적으로 20%(w/w)로 포함될 수 있다.

상기 정제수는 조성물 전체 중량을 기준으로 40-50%(w/w), 구체적으로 43-48%(w/w), 더욱 구체적으로 47-48%(w/w)로 포함될 수 있다.

추가적으로, 본 발명의 조성물은 글리세린, 부틸렌글라이콜, 글리세레스-26, 다이프로필렌글라이콜, 세틸에틸헥사노에이트, 트라이에틸헥사노인으로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 성분을 포함할 수 있다.

상기 글리세린은 조성물 전체 중량을 기준으로 10-20%(w/w), 구체적으로 12-15%(w/w)로 포함되고, 부틸렌글라이콜은 조성물 전체 중량을 기준으로 5-15%(w/w), 구체적으로 8-12%(w/w)로 포함되며, 글리세레스-26은 조성물 전체 중량을 기준으로 1-5%(w/w), 구체적으로 2-4%(w/w)로 포함되며, 다이프로필렌글라이콜은 조성물 전체 중량을 기준으로 1-5%(w/w), 구체적으로 1-3%(w/w)로 포함되며, 세틸에틸헥사노에이트, 트라이에틸헥사노인은 조성물 전체 중량을 기준으로 0.5-3%(w/w), 구체적으로 0.5-2%(w/w)로 포함될 수 있다.

이외에, 추가적으로 수크로오스올리에이트, 구주소나무잎추출물, 알란토인, 글리세릴아크릴레이트/아크릴릭애씨드코폴리머, 폴리글리세릴-10다이올리에이트, 펜틸렌글라이콜, 카프릴릴글라이콜, 1,2-헥산다이올 및/또는 다이소듐이디티에이이가 조성물 전체 중량을 기준으로 각각 0.001 내지 0.9%(w/w)로 포함될 수 있다.

본 발명의 조성물에 포함되는 성분 및 각각의 구체적 함량은 다음과 같다.

본 발명은 피부 미용 개선용 조성물로, 피부(skin)는 표피(epidermis), 진피(dermis) 및 피하조직(subcutaneous tissue)으로 이루어진다. 피부의 바깥층인 표피는 중층편평상피(stratified squamous epithelium)로 구성되며, 외부 환경에 대한 신체의 보호 장벽으로 작용한다. 표피는 바깥에서부터 각질층(stratum corneum), 투명층(stratum lucidum), 과립층(stratum granulosum), 유극층(stratum spinosum) 및 기저층(stratum basale)으로 나뉜다. 진피는 표피와 피하조직(subcutaneous tissue) 사이의 층으로서, 유두층(papillary dermis) 및 망상층(reticular dermis)으로 나뉘며, 표피에는 없는 혈관, 콜라겐, 엘라스틴 섬유, 모공, 입모근, 피지선, 한선, 여러 가지 감각신경, 섬유아세포 및 대식세포 등이 존재하며 피부 중 가장 많은 부위를 차지한다.

진피는 주로 콜라겐과 엘라스틴 섬유로 이루어지는데, 이들은 피부를 지지하는 역할을 한다. 따라서 이러한 진피에 문제가 발생하면 주름이 생기고 피부탄력이 없어져서 피부 노화가 진행된다.

본 발명에 따른 조성물은 피부 미용 개선 예를 들어, 피부 보습 개선, 피부톤 개선, 과색소 침착에 의한 피부 미백 개선, 눈가 주름 개선, 피부탄력 피로도 개선 또는 피부 치밀도 개선에 사용될 수 있다.

상기 조성물은 화장료 조성물일 수 있고, 화장수, 스킨, 토너, 에센스, 앰플, 유액, 젤, 워터, 고체, 현탁액, 포말, 에어로졸, 폼, 팩, 패치 또는 크림 등의 제형으로 제조될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

경우에 따라서, 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1 종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 예를 들어 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 또는 냉감제 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

실시예

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

제조예. 조성물 구체사항

본 발명에 따른 조성물을 포함하는 샘플을 'STEMATURE-Exosome^TM 20% 앰플'로 명명한다.

[STEMATURE-Exosome^TM 20% 앰플]

'STEMATURE-Exosome^TM 20% 앰플'의 피부임상적 효용성을 검증하고자 하였다. 구체적 연구 방법은 다음과 같다.

(1) 임상연구대상자: 40~50대 여성 10명

(2) 연구시료: STEMATURE-Exosome^TM 20% 앰플 1종

① 4주간 (28일) 아침, 저녁으로 하루 두 번씩 3 mL를 안면 전체에 도포하였다.

② 시료를 도포 후, 손대지 않고 방치하여 흡수되도록 하였다.

(3) 임상시험 기간: 2021년 9월 9일 ~ 10월 22일

(4) 피부측정

① 연구대상자는 항목에 따른 피부측정 시행 시, 측정 부위인 안면을 세안하고, 30분 동안 항온항습(온도 22±2℃, 습도 40~60%) 환경에서 피부안정화를 유도한 후 피부측정을 시행하였다.

실시예: 결과

1. 안면 피부 보습의 변화

① 피부의 수분함유량 8.9% 유의한 증가(p<.05)하였다.

② 경피수분손실량 6.2% 감소하였다.

2. 안면 피부의 색소 변화 (도 1)

① 피부톤 0.3% 증가하였다.

② 멜라닌 색소 3.1% 유의한 감소(p<.05) 하였다.

3. 안면 피부의 탄력 변화 (도 2)

① 눈가 주름 7.4% 유의한 감소(p<.05)하였다.

② 피부 피로도의 3.8% 감소하였다.

4. 피부의 치밀도 변화 : 확인 결과를 도 3에 나타내었다.

위 데이터를 통해 다음의 사항을 확인할 수 있다.

(1) 'STEMATURE-Exosome^TM 20% 앰플'은 피부 보습에 효용성이 있다.

(2) 'STEMATURE-Exosome^TM 20% 앰플'은 피부톤을 밝게 하는데 도움이 된다.

(3) 'STEMATURE-Exosome^TM 20% 앰플'은 기미, 주근깨 등의 과색소침착에 미백개선 효용성이 있다.

(4) 'STEMATURE-Exosome^TM 20% 앰플'은 눈가 주름 개선에 효용성이 있다.

(5) 'STEMATURE-Exosome^TM 20% 앰플'은 피부탄력 피로도 개선에 도움이 된다.

(6) 'STEMATURE-Exosome^TM 20% 앰플'은 피부 치밀도 개선에 도움이 된다.

이상으로 본 발명의 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims

피부 미용 개선용 조성물로,
조성물 전체 중량을 기준으로 정제수 47-48 중량%,
엑소좀이 함유된 인간줄기세포배양액 20 중량%,
글리세린 12-15 중량%,
부틸렌글라이콜 8-12 중량%,
글리세레스-26 2-4 중량%,
다이프로필렌글라이콜 1-3 중량%,
세틸에틸헥사노에이트 0.5-2 중량%,
트라이에틸헥사노인 0.5-2 중량%,
수크로오스올리에이트, 구주소나무잎추출물, 알란토인, 글리세릴아크릴레이트/아크릴릭애씨드코폴리머, 폴리글리세릴-10다이올리에이트, 펜틸렌글라이콜, 카프릴릴글라이콜, 1,2-헥산다이올 및 다이소듐이디티에이를 각각 0.001 내지 0.9 중량%로 포함하는, 피부 미용 개선용 조성물.
삭제
삭제
제1항에 있어서, 상기 엑소좀 함유 인간줄기세포배양액은 인간 중간엽 줄기세포를 인간 혈소판 용해물, 혈청 대체제, 소듐 피루베이트, 인슐린, 트랜스페린 및 소듐 셀레나이트를 포함하는 복합조성물로 처리된 배지에서 배양하는 단계를 포함하는, 엑소좀 및/또는 세포외 소포체의 생성 촉진 방법으로 수득한 인간줄기세포배양액 (Human Stem Cell Conditioned Media)을 포함하는 피부 미용 개선용 조성물.
제1항에 있어서, 상기 피부 미용 개선은 피부 보습 개선, 피부톤 개선, 과색소 침착에 의한 피부 미백 개선, 눈가 주름 개선, 피부탄력 피로도 개선 또는 피부 치밀도 개선을 포함하는, 피부 미용 개선용 조성물.