KR102380081B1

KR102380081B1 - 면역력 강화를 위한 캔디 및 이의 제조방법

Info

Publication number: KR102380081B1
Application number: KR1020190133118A
Authority: KR
Inventors: 강민식; 이영옥; 이영진; 이진석
Original assignee: 농업회사법인 주식회사 캔디 원
Priority date: 2019-10-24
Filing date: 2019-10-24
Publication date: 2022-03-29
Also published as: KR20210048882A

Abstract

본 발명은 면역력 강화를 위한 캔디에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 항산화성, 항염증성 및 면역활성이 현격히 우수한 동시에, 풍미가 우수하고, 입에 넣고 씹을 때 치아에 부착하지 않을 뿐만 아니라, 바삭한 식감이 우수하며, 제조 시 작업성 우수한 효과를 발현하는 면역력 강화를 위한 캔디 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

Description

면역력 강화를 위한 캔디 및 이의 제조방법{Candy for enhancing immunity and manufacturing method thereof}

사탕은 당류를 주원료로 하는 과자의 총칭으로서, 일반적으로 사탕은 물엿과 설탕을 바탕으로 하여 인공향료나 인공색소 등의 첨가물을 혼합하고 이를 고온에 가열하여 농축한 다음, 냉각 및 성형시켜 제조된다.

대체적으로 사탕은 그 성상이 딱딱한 상태를 유지하게 되어 치아가 약한 사람은 특히 공기 기포가 많이 함유되어 있어 바삭바삭한 식감과 함께 부서지기 쉬운 상태의 사탕의 형태를 선호한다.

또한, 대체적으로 사탕은 그 성상이 딱딱한 상태를 유지하게 되어 입속과 치아에 손상을 줄 수 있고, 처음 입속에 넣을 때만 향의 맛을 느끼며 오랫동안 입안에 머금고 있으면 단조로운 단맛밖에 느끼지 못하며, 일정량을 투입하더라도 제대로 된 향의 맛을 낼 수가 없다. 또한, 사탕은 특유의 끈적함으로 입에 넣고 씹을 때 치아에 부착하기 쉬운 결점이 있다.

게다가 종래의 사탕의 경우 항산화성, 항염증성 및 면역활성이 우수한 효과를 발현할 수 없었고, 항산화성, 항염증성 및 면역활성을 일정수준 발현하더라도, 풍미가 우수하고, 입에 넣고 씹을 때 치아에 부착하지 않을 뿐만 아니라, 바삭한 식감이 우수하며, 제조 시 작업성 우수한 효과까지 동시에 발현할 수 없었다.

이에, 항산화성, 항염증성 및 면역활성이 현격히 우수한 동시에, 풍미가 우수하고, 입에 넣고 씹을 때 치아에 부착하지 않을 뿐만 아니라, 바삭한 식감이 우수하며, 제조 시 작업성 우수한 효과를 발현하는 캔디를 개발하고자 본 발명에 다다르게 되었다.

대한민국등록특허 제10-1911448호 (공고일: 2018.12.19)

본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로, 본 발명의 해결하려는 과제는 항산화성, 항염증성 및 면역활성이 현격히 우수한 동시에, 풍미가 우수하고, 입에 넣고 씹을 때 치아에 부착하지 않을 뿐만 아니라, 바삭한 식감이 우수하며, 제조 시 작업성 우수한 효과를 발현하는 면역력 강화를 위한 캔디 및 이의 제조방법을 제공하는데 있다.

상술한 과제를 해결하기 위해 본 발명은 이당류, 구연산, 향료, 색소를 포함하고, 당근추출물을 유효성분으로 포함하는 면역력 강화를 위한 캔디를 제공한다.

본 발명의 실시예에 따르면, 상기 이당류 100 중량부에 대하여 상기 당근추출물을 0.3 ~ 3 중량부 포함할 수 있다.

또한, 상기 당근추출물은 농도 1500 ~ 3000㎍/㎖의 당근추출물일 수 있다.

또한, 상기 당근추출물은 아데노신을 1.5mg/g 이상 포함할 수 있다.

또한, 상기 이당류는 맥아엿 및 설탕을 1 : 3 ~ 5의 중량비로 포함할 수 있다.

또한, 상기 이당류 100 중량부에 대하여 상기 구연산을 0.3 ~ 0.5 중량부 포함할 수 있다.

또한, 상기 이당류 100 중량부에 대하여 상기 향료를 0.1 ~ 1.2 중량부 포함할 수 있다.

또한, 상기 이당류 100 중량부에 대하여 상기 색소를 0.1 ~ 1 중량부 포함할 수 있다.

한편 상술한 과제를 해결하기 위해 본 발명은 이당류, 향료 및 당근추출물을 포함하는 사탕시럽을 제조하는 제1단계; 상기 사탕시럽에 색소 및 구연산을 혼합 및 냉각하여 제1캔디베이스를 제조하고, 상기 사탕시럽에 색소를 혼합 및 냉각하여 코팅 반죽물을 제조하는 제2단계; 상기 제1캔디베이스의 온도를 소정의 온도로 유지한 상태에서, 제1캔디베이스를 일방향 연신하고 연신 방향과 동일한 방향으로 접어 포개는 과정을 반복수행하여 제2캔디베이스를 제조하는 제3단계; 상기 코팅 반죽물이 상기 제2캔디베이스 전제를 감싸도록 랩핑(wrapping)하여 제3캔디베이스를 제조하는 제4단계; 및 상기 제3캔디베이스를 일방향으로 연신하고, 컷팅하여 캔디를 제조하는 제5단계;를 포함하는 면역력 강화를 위한 캔디 제조방법을 제공한다.

본 발명의 실시예에 따르면, 상기 제1단계는, 물과 상기 이당류를 140 ~ 180℃의 온도에서 10 ~ 40분 동안 혼합하여 혼합액을 제조하는 제1-1단계; 및 상기 혼합액에 향료를 혼합하여 사탕시럽을 제조하는 제1-2단계;를 포함할 수 있다.

또한, 상기 제3단계는, 90 ~ 120℃의 온도로 유지한 상태로 수행할 수 있다.

또한, 상기 제3단계는, 제1캔디베이스를 일방향 연신하고 연신 방향과 동일한 방향으로 접어 포개는 과정을 1세트로 하여 30 ~ 50세트 수행할 수 있다.

또한, 상기 제3단계의 연신은 길이가 60 ~ 90㎝가 되도록 수행할 수 있다.

또한, 상기 제4단계의 제3캔디베이스는 제2캔디베이스를 70 ~ 90 중량% 및 코팅 반죽물을 10 ~ 30 중량% 포함할 수 있다.

또한, 상기 당근추출물은, 당근 및 물을 1 : 5 ~ 15의 중량비로 포함하는 당근혼합물을, 50 ~ 70℃의 온도로 3.3 ~ 4.8시간 동안 열수추출하여 제조될 수 있다.

본 발명의 면역력 강화를 위한 캔디 및 이의 제조방법은 항산화성, 항염증성 및 면역활성이 현격히 우수한 동시에, 풍미가 우수하고, 입에 넣고 씹을 때 치아에 부착하지 않을 뿐만 아니라, 바삭한 식감이 우수하며, 제조 시 작업성 우수한 효과가 있다.

도 1은 준비예 1-1 내지 준비예 1-5에 따른 당근추출물에 대한 RAW 264.7 세포에서의 NO 생성량과 세포생존율을 나타낸 그래프, 그리고,
도 2는 준비예 1-1 내지 준비예 1-4에 따른 당근추출물에 대한 iNOS와 COX-2 단백질의 발현을 평가한 웨스턴 블롯(Western blot) X-ray 필름 사진이다.

이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.

본 발명의 일 실시예에 따른 면역력 강화를 위한 캔디는, 이당류, 구연산, 향료, 색소를 포함하고, 당근추출물을 유효성분으로 포함하여 구현된다.

먼저, 상기 당근추출물에 대하여 설명한다.

상기 당근추출물을 후술하는 방법을 통해 당근을 추출하여 제조되며, 우수한 항산화성, 항염증성 및 면역활성을 발현하는 기능을 수행한다.

상기 당근추출물은 아데노신을 1.5mg/g 이상, 바람직하게는 1.55mg/g 이상, 보다 바람직하게는 1.6mg/g 이상 포함할 수 있다. 만일 상기 당근추출물의 아데노신이 1.5mg/g 미만이면 목적하는 수준의 항산화성, 항염증성 및 면역활성을 발현할 수 없는 문제가 발생할 수 있다.

또한, 상기 당근추출물은 농도 1500 ~ 3000㎍/㎖의 당근추출물일 수 있고, 바람직하게는 농도 1700 ~ 2500㎍/㎖의 당근추출물일 수 있다. 만일 상기 당근추출물의 농도가 상기 범위를 벗어나면 목적하는 수준의 항염증성 및 면역활성을 발현할 수 없는 문제가 발생할 수 있다.

그리고, 상기 당근추출물은 상기 이당류 100 중량부에 대하여 0.3 ~ 3 중량부로, 바람직하게는 0.5 ~ 2.5 중량부로 포함될 수 있다. 만일 상기 당근추출물이 상기 이당류 100 중량부에 대하여 0.3 중량부 미만이면 목적하는 수준의 항산화성, 항염증성 및 면역활성을 발현할 수 없는 문제가 발생할 수 있고, 3 중량부를 초과하면 식감 및/또는 풍미가 저하될 수 있다.

또한, 상기 이당류는 맥아엿 및 설탕을 1 : 3 ~ 5의 중량비로, 바람직하게는 1 : 4 ~ 6의 중량비로 포함할 수 있다. 만일 상기 이당류에 포함되는 맥아엿 및 설탕의 중량비가 상기 범위를 벗어나면, 제조 시 작업성이 저하되거나, 식감 및 풍미가 저하되는 문제가 있을 수 있다.

또한, 상기 구연산은 천연방부제의 기능과 산도조절 기능을 발현하는 것으로 널리 사용되는 식품첨가물이다.

상기 구연산은 상기 이당류 100 중량부에 대하여 0.3 ~ 0.5 중량부로, 바람직하게는 0.35 ~ 0.43 중량부로 포함될 수 있다. 상기 이당류 100 중량부에 대하여 상기 구연산이 0.3 중량부 미만이면 목적하는 수준의 방부제 효과를 발현할 수 없고, 0.5 중량부를 초과하면 풍미가 저하되는 문제가 발생할 수 있다.

한편, 음식의 맛은 향기가 좌우한다고 할 수 있을 정도로 식품에서 향은 중요하다고 볼 수 있다. 실제 단맛, 감칠맛, 신맛, 짠맛 및 쓴맛 5가지 맛 이외에 예를 들어 사과에는 사과맛, 딸기에는 딸기맛이 난다고 느끼지만, 실제로는 향에 의한 기전이라고 볼 수 있다.

상기 향료는 상술한 바와 같이 캔디가 당근의 향을 발현하도록 하는 기능을 수행한다.

이때, 상기 향료는 상기 이당류 100 중량부에 대하여 0.1 ~ 1.2 중량부로, 바람직하게는 0.5 ~ 0.7 중량부로 포함될 수 있다. 만일 상기 이당류 100 중량부에 대하여 상기 향료가 0.1 중량부 미만이면 목적하는 수준으로 당근 향을 발현할 수 없고 단맛만이 느껴짐에 따라 풍미가 저하될 수 있고, 1.2 중량부를 초과하면 사탕이 본연의 맛을 발현할 수 없음에 따라 풍미가 저하될 수 있다.

또한, 상기 색소는 상기 이당류 100 중량부에 대하여 0.1 ~ 1 중량부로, 바람직하게는 0.4 ~ 0.6 중량부로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

한편, 본 발명의 일 실시예에 따른 면역력 강화를 위한 캔디는, 이당류, 향료 및 당근추출물을 포함하는 사탕시럽을 제조하는 제1단계; 상기 사탕시럽에 색소 및 구연산을 혼합 및 냉각하여 제1캔디베이스를 제조하고, 상기 사탕시럽에 색소를 혼합 및 냉각하여 코팅 반죽물을 제조하는 제2단계; 상기 제1캔디베이스의 온도를 소정의 온도로 유지한 상태에서, 제1캔디베이스를 일방향 연신하고 연신 방향과 동일한 방향으로 접어 포개는 과정을 반복수행하여 제2캔디베이스를 제조하는 제3단계; 상기 코팅 반죽물이 상기 제2캔디베이스 전제를 감싸도록 랩핑(wrapping)하여 제3캔디베이스를 제조하는 제4단계; 및 상기 제3캔디베이스를 일방향으로 연신하고, 컷팅하여 캔디를 제조하는 제5단계;를 포함하여 제조된다.

후술하는 면역력 강화를 위한 캔디의 제조방법에 대한 설명에서, 상술한 설명과 동일한 부분은 생략하고 설명하도록 한다.

먼저, 상기 제1단계에 대하여 설명한다.

상기 제1단계는 물과 상기 이당류를 혼합하여 혼합액을 제조하는 제1-1단계; 및 상기 혼합액에 향료를 혼합하여 사탕시럽을 제조하는 제1-2단계;를 포함할 수 있다.

이때, 상기 제1-1단계는, 140 ~ 180℃의 온도에서 10 ~ 40분 동안, 바람직하게는 150 ~ 170℃의 온도에서 15 ~ 35분 동안 혼합하여 수행할 수 있다. 만일 상기 혼합 온도 및 시간 범위를 벗어나면 식감 및 풍미가 저하될 수 있고, 제조 시 작업성이 저하될 수 있다.

또한, 상기 제1-1단계에서 상기 혼합액은 상기 이당류 100 중량부에 대하여 상기 물을 15 ~ 25 중량부로, 바람직하게는 물을 17 ~ 23 중량부로 포함할 수 있다. 만일 상기 물이 상기 함량을 벗어나면 제조 시 작업성, 식감 및 풍미가 저하될 수 있다.

그리고, 상기 제1-2단계의 혼합은 10 ~ 100초 동안, 바람직하게는 40 ~ 80초 동안 수행할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

다음, 상기 제2단계에 대하여 설명한다.

상기 제2단계는 제1캔디베이스 및 코팅 반죽물을 각각 독립적인 과정으로 제조할 수 있다.

구체적으로, 제1단계에서 제조한 사탕시럽에 색소 및 구연산을 혼합 및 냉각하여 제1캔디베이스를 제조하고, 제1단계에서 제조한 사탕시럽에 색소를 혼합 및 냉각하여 코팅 반죽물을 제조한다. 이때, 상기 코팅 반죽물에 구연산을 더 혼합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

또한, 상기 냉각은 15 ~ 35℃ 바람직하게는 25 ~ 30℃의 온도에서 10 ~ 100초, 바람직하게는 45 ~ 75초 동안 수행할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

다음, 상기 제3단계에 대하여 설명한다.

상기 제3단계는 상기 제1캔디베이스의 온도를 소정의 온도로 유지한 상태에서, 제1캔디베이스를 일방향 연신하고 연신 방향과 동일한 방향으로 접어 포개는 과정을 반복수행하여 제2캔디베이스를 제조하는 단계이다.

이때, 상기 제3단계는 90 ~ 120℃의 온도로, 바람직하게는 100 ~ 110℃의 온도로 유지한 상태로 수행할 수 있다. 만일 상기 온도가 90℃ 미만이면 제1캔디베이스가 굳어져 제2캔디베이스를 제조할 수 없음에 따라 작업성이 저하될 수 있고, 120℃를 초과하면 제1캔디베이스의 형태가 무너져 제2캔디베이스를 제조할 수 없음에 따라 작업성이 저하될 수 있다.

또한, 상기 제3단계는, 제1캔디베이스를 일방향 연신하고 연신 방향과 동일한 방향으로 접어 포개는 과정을 1세트로 하여 30 ~ 50세트, 바람직하게는 35 ~ 45세트 수행할 수 있다. 만일 상기 세트가 30세트 미만이면 식감 및 풍미가 저하될 수 있고, 50세트를 초과하면 제1캔디베이스가 굳어져 제2캔디베이스를 제조할 수 없음에 따라 작업성이 저하될 수 있다.

그리고, 상기 연신은 길이가 60 ~ 90㎝가 되도록 수행할 수 있고, 바람직하게는 길이가 70 ~ 80㎝가 되도록 수행할 수 있다. 만일 상기 연신의 길이 범위를 벗어나면 작업성이 저하되는 문제가 발생할 수 있다.

다음, 상기 제4단계에 대하여 설명한다.

상기 제4단계는 상기 제2단계에서 제조한 코팅 반죽물이 상기 제2캔디베이스 전제를 감싸도록 랩핑(wrapping)하여 제3캔디베이스를 제조하는 단계이다.

이때, 상기 제3캔디베이스는 제2캔디베이스를 70 ~ 90 중량% 및 코팅 반죽물을 10 ~ 30 중량%, 바람직하게는 제2캔디베이스를 75 ~ 85 중량% 및 코팅 반죽물을 15 ~ 25 중량%포함할 수 있다. 만일 상기 함량 범위를 벗어나면 식감 및 풍미가 저하될 수 있다.

다음, 상기 제5단계에 대하여 설명한다.

상기 제5단계는 상기 제3캔디베이스를 일방향으로 연신하고, 컷팅하여 캔디를 제조하는 단계로써, 상기 연신 및 컷팅의 방법과 조건은 당업계에서 통상적으로 사용할 수 있는 방법과 조건이라면 제한 없이 적용할 수 있음에 따라, 본 발명에서는 이를 특별히 한정하지 않는다.

한편, 상술한 당근추출물은 당근을 열수추출하여 제조할 수 있다.

구체적으로, 당근 및 물을 혼합하여 제조한 당근혼합물을 열수추출하여 당근추출물을 제조할 수 있다.

이때, 상기 당근은 소정의 조건으로 분쇄된 당근일 수 있으며, 상기 분쇄 조건은 당업계에서 통상적으로 사용할 수 있는 분쇄 조건이라면 제한 없이 사용할 수 있음에 따라, 본 발명에서는 이를 특별히 한정하지 않는다.

또한, 상기 당근혼합물은 당근 및 물을 1 : 5 ~ 15의 중량비로, 바람직하게는 1 : 7 ~ 13의 중량비로 포함할 수 있다. 만일 상기 당근혼합물에 포함되는 당근 및 물의 중량비가 상기 범위를 벗어나면 추출효율이 저하될 수 있다.

한편, 상기 열수추출을 통해 당근추출물을 제조함에 따라, 알코올 등의 유기용매를 통해 당근추출물을 제조하는 것에 비하여 항산화성 및 면역활성이 우수한 효과를 동시에 발현할 수 있다.

또한, 상기 열수추출은 50 ~ 70℃의 온도로 3.3 ~ 4.8시간 동안, 바람직하게는 55 ~ 65℃의 온도로 3.5 ~ 4.5시간 동안 수행할 수 있다. 만일 상기 열수추출 온도가 50℃ 미만이면 추출수율이 저하되고, 항산화성이 저하되며, 아데노신의 함량이 저하될 수 있고, 온도가 70℃를 초과하면 추출수율이 저하되고, 아데노신의 함량이 저하될 수 있다. 또한, 만일 상기 열수추출 시간이 3.3 시간 미만이면 추출수율이 저하되고, 항산화성이 저하되며, 아데노신의 함량이 저하될 수 있고, 열수추출 시간이 4.8 시간을 초과하면 추출수율이 저하되고, 항산화성이 저하되며, 아데노신의 함량이 저하될 수 있다.

이하, 본 발명을 하기 실시예들을 통해 설명한다. 이때, 하기 실시예들은 발명을 예시하기 위하여 제시된 것일 뿐, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예들에 의해 한정되는 것은 아니다.

[실시예]

준비예 1: 당근추출물의 제조

분쇄한 당근과 물을 1 : 10의 중량비로 혼합하여 제조한 당근혼합물을 60℃의 온도로 4시간 동안 열수추출하고, 농도 95%의 에탄올과 디메틸설폭사이드(DMSO)를 1 : 1의 중량비로 혼합한 용매에 농도 100 mg/ml로 녹인 후 원심분리기로 13,000 rpm에서 3분 간 원심분리 후 상층액을 수득하여 당근추출물을 제조하였다.

준비예 2 ~ 준비예 8

상기 준비예 1과 동일하게 실시하여 제조하되, 열수추출의 온도 및 시간을 변경하여 하기 표 2 및 표 3과 같은 당근추출물을 제조하였다.

실험예 1

1. 추출수율 측정

상기 준비예 1 ~ 8에 따라 제조한 당근추출물에 대하여 하기 수학식 1에 따라 추출수율을 측정하여 하기 표 2 및 표 3에 나타내었다.

[수학식 1]

추출수율(%) = (수득된 추출물 무게(g)/추출 양(g)) × 100(%)

2. 아데노신 함량 측정

상기 준비예 1 ~ 8에 따라 제조한 당근추출물에 대하여, 당근추출물의 농도를 10 mg/ml로 조절하고, 각각의 당근추출물에서 분획 후 지표 성분을 분리하였다(미동정, Peak Retention time: 8.7 min).

구체적으로, 컬럼(Column) : C18 (4.6*250 mm, 5㎛, XBridge BEH), 유속(Flow rate) : 0.8 mL/min, 주입량(Injection vol.) : 10 ㎕, 파장(Wavelength) : 260 nm, 하기 표 1과 같은 이동상(Mobile phase) 조건으로 분석을 수행하였다.

시간(분)	A(증류수)	B(MeOH)
0	90	10
30	0	100
35	0	100
36	90	10
42	90	10

그리고, HPLC 분석 조건에서 8.733 min의 머무름을 보이는 피크(peak)를 분취하여 정제하였다. 이후 NMR을 이용하여 구조를 분석하여 당근추출물이 아데노신을 포함한다는 것을 확인하였다.

그리고, 각각의 추출물에 대한 피크를 정량하여, 아데노신 함량을 측정하여 하기 표 2 및 표 3에 나타내었다.

3. 항산화성(DPPH 라디칼 소거활성 평가)

상기 준비예 1 ~ 8에 따라 제조한 당근추출물에 대하여 12.5 ㎍/㎖의 농도에서의 항산화성을 평가하여 하기 표 2 및 표 3에 나타내었다.

구체적으로, 상기 준비예 1 ~ 8에 따라 제조한 당근추출물에 0.4 mM DPPH 용액을 동량 첨가하고 517㎚에서 흡광도를 측정하였다. 흡광도의 값이 1.000 (±0.02)이 되도록 희석하여 제조하고 각각의 당근추출물에 DPPH 용액을 동량 가하여 30분 동안 반응시킨 후 흡광도 값을 측정하였다. 대조군인 메탄올의 흡광도와 비교하여 흡광도를 감소시키는 정도를 하기 수학식 2에 따라 계산하였으며, 양성대조군으로는 아스코르브산(ascorbic acid)을 사용하였다.

[수학식 2]

DPPH 라디칼 소거 활성(%) = ((A - B) / A) × 100(%)

A : 농도 0의 흡광도 값 - 농도 0의 blank 흡광도 값

B : 당근추출물의 흡광도 값 - 당근추출물의 blank 흡광도 값

구분		준비예1	준비예2	준비예3	준비예4
열수추출	온도(℃)	60	20	40	80
열수추출	시간(hr)	4	4	4	4
추출수율(%)		2.983	2.694	2.245	2.877
아데노신 함량(mg/g)		1.66	1.33	1.66	1.55
DPPH 라디칼 소거 활성(%)		37.0	25.4	24.8	30.7

구분		준비예5	준비예6	준비예7	준비예8
열수추출	온도(℃)	60	60	60	60
열수추출	시간(hr)	1	2	3	5
추출수율(%)		2.745	2.781	2.807	2.579
아데노신 함량(mg/g)		1.55	1.65	1.65	1.63
DPPH 라디칼 소거 활성(%)		27.0	27.5	25.8	27.2

상기 표 2 및 표 3에서 알 수 있듯이, 본 발명에 따른 추출 온도 및 시간 조건을 모두 만족하는 준비예 1이, 이 중에서 하나라도 만족하지 못하는 실시예 2 ~ 8에 비하여, 추출수율이 우수하고, 아데노신 함량이 높으며, DPPH 라디칼 소거 활성이 높음에 따라 항산화성이 우수한 효과를 모두 동시에 발현하는 것을 확인할 수 있다.

실험예 2

1. 항염활성 및 세포독성 평가

RAW 264.7 세포를 2.0×10⁵ cells/mL로 분주하고 37

CO2 incubator 조건 하에 20시간 동안 배양하고, 각각 농도 250㎍/㎖, 500㎍/㎖, 1000㎍/㎖, 2000㎍/㎖, 4000㎍/㎖(이하 준비예 1-1, 1-2, 1-3, 1-4, 1-5로 명명함)로 처리한 후 1시간 후에 LPS(0.1 ㎍/mL)를 첨가하여 24시간 동안 배양하였다. 그리고, 생성된 NO(nitric oxide)의 양은 그리스(Griess) 시약을 이용하여 세포 배양액 내에 존재하는 NO^2-(nitrite)의 형태로 측정하였다.

또한, 세포독성 평가는 MTT assay 실험법을 사용하여, 세포배양액에 MTT를 첨가하여 살아있는 세포와 반응하여 생긴 포르마잔(formazan) 침전물의 양을 측정하였으며, 대조군과 비교하여 RAW 264.7 세포에 대한 준비예 1-1 ~ 1-5의 세포독성을 평가하였다. 이를 도 1에 나타내었다.

그 결과, 도 1에 도시된 바와 같이, 본 발명에 따른 당근추출물의 농도를 만족하는 준비예 1-4(2000㎍/㎖)가, 이를 만족하지 못하는 준비예 1-1 ~ 1-3 및 1-5에 비하여 NO생성량이 많고, RAW 264.7 대식세포의 세포생존율이 낮음에 따라 항염활성 및 세포독성이 높은 것을 확인할 수 있다.

2. 면역활성 평가

RAW 264.7 세포를 폴리부틸렌 석시네이트(PBS)로 2회 세척 후 1 mM PMSF(phenylmethylsulfonyl fluoride), 1 mM Na₃VO₄, 1 mM NaF, 1 ㎍/mL 아프로티닌(aprotinin), 1 ㎍/mL 펩스타틴(pepstatin) 및 1 ㎍/mL 류펩틴(leupeptin)이 첨가된 RIPA 라이시스 버퍼(lysis buffer)로 1시간 동안 라이시스(lysis) 시킨 후 원심분리 (15,000 RPM, 20분)하고 상층액을 수거하였다. 단백질 농도는 BSA(bovine serum albumin)을 표준으로 브래드포드 프로테인 에세이 키트(Bradford protein assay kit)를 사용하여 정량하였다. 단백질을 8-10% SDS-폴리아크릴아미드겔(SDS-polyacrylamide gel) 전기영동으로 분리하고 PVDF(poly vinylidene difluoride) 멤브레인(membrane)에 전이(transfer)했다. 단백질이 전이된 PVDF 멤브레인은 상온에서 1시간 동안 5% 탈지우유(skim milk)로 블로킹(blocking) 시킨 후, 1차 항체와 반응. 1차 항체 반응이 끝난 멤브레인은 0.1% Tween 20이 포함된 TTBS(tris buffered saline) 용액으로 10분씩 5회 세척한 후 페록시다아제(peroxidase)-공액(conjugated)된 2차 항체를 1:5,000 또는 1:10,000으로 희석하여 상온에서 1시간 동안 반응한 후 TTBS로 10분씩 5회 세척하였다. 단백질은 WEST-ZOL 웨스턴 블롯 디텍션 시스템(western blot detection system)으로 반응시켜 X-ray 필름으로 결과를 검출하였다.

RAW 264.7 대식세포에 발생하는 면역 활성에 효과적인 물질을 탐색하고자 하였으며, 도 2에 도시된 바와 같이, 본 발명에 따른 당근추출물의 농도를 만족하는 준비예 1-4(2000㎍/㎖)가, 이를 만족하지 못하는 준비예 1-1 ~ 1-3에 비하여 대식세포에서 iNOS와 COX-2 단백질 발현을 증가시킴으로써 면역활성이 우수한 것을 확인할 수 있다.

실시예 1

(1) 이당류 100 중량부에 대하여 물 20 중량부를 160℃의 온도에서 20분 간 혼합하여 혼합액을 제조하였다. 이 때, 이당류로 맥아엿 및 설탕이 1 : 4 중량비로 혼합된 것을 사용하였다. 그리고, 제조한 혼합액에 이당류 100 중량부에 대하여 향료를 0.6 중량부 및 상기 준비예 1에 따라 제조한 당근추출물 1.5 중량부를 60초 동안 혼합하여 사탕시럽을 제조하였다. 이때, 상기 당근추출물은 농도 2000㎍/㎖의 당근추출물이었다.

(2) 상기 제조한 사탕시럽에, 이당류 100 중량부에 대하여 색소 0.5 중량부 및 구연산 0.4 중량부를 혼합하고, 25℃에서 60초 동안 냉각시켜서 제1캔디베이스를 제조하고, 상기 제조한 사탕시럽에, 이당류 100 중량부에 대하여 색소 0.5 중량부를 혼합하고, 25℃에서 60초 동안 냉각시켜서 코팅 반죽물을 제조하였다.

(3) 상기 제조한 제1캔디베이스의 온도를 105℃로 유지한 상태에서, 제1캔디베이스의 길이가 75cm이 되도록 일방향으로 연신하고 연신 방향과 동일한 방향으로 접어 포개는 과정을 1세트로 하여 40세트 반복 수행하여 제2캔디베이스를 제조하였다.

(4) 상기 (2)에서 제조한 코팅 반죽물이 상기 제조한 제2캔디베이스 전체를 감싸도록 랩핑(wrapping)하여 제3캔디베이스를 제조하였다. 이때, 제조한 제3캔디베이스는 제2캔디베이스를 80 중량% 및 코팅 반죽물을 20 중량%로 포함하였다.

(5) 상기 제조한 제3캔디베이스의 모양을 성형하고, 일방향으로 연신하여 늘린 후, 컷팅롤러를 통과시켜 컷팅하여 면역력 강화를 위한 캔디를 제조하였다.

실시예 2 ~ 14 및 비교예 1

실시예 1과 동일하게 실시하여 제조하되, 맥아엿과 설탕의 중량비, 향료 함량과 포함여부, 구연산 함량, 제1단계의 가열온도, 제3단계의 유지 온도, 세트 수 및 연신 길이 등을 변경하여 하기 표 4 내지 표 6과 같은 면역력 강화를 위한 캔디를 제조하였다.

실험예 3

상기 실시예 및 비교예에 따른 면역력 강화를 위한 캔디에 대하여 하기의 항목을 평가하여 하기 표 4 내지 표 6에 나타내었다.

1. 풍미 평가

상기 실시예 및 비교예에 따른 면역력 강화를 위한 캔디에 대하여 100명의 훈련된 관능평가요원이 각각 시식하도록 하여 7점법에 의한 풍미를 평가하였다(1-매우 나쁘다, 2-나쁘다, 3-약간 나쁘다, 4-보통이다, 5-약간 좋다, 6-좋다, 7-매우 좋다).

2. 치아부착성 및 식감 평가

상기 실시예 및 비교예에 따른 면역력 강화를 위한 캔디에 대하여 100명의 훈련된 관능평가요원이 각각 시식하도록 하여 사탕을 입에 넣고 씹을 때 치아에 부착되는 정도와 바삭한 식감을 종합적으로 평가하여, 7점법으로 평가하였다(1-매우 나쁘다, 2-나쁘다, 3-약간 나쁘다, 4-보통이다, 5-약간 좋다, 6-좋다, 7-매우 좋다).

3. 작업성 평가

상기 실시예 및 비교예에 따른 면역력 강화를 위한 캔디에 대하여, 캔디 제조 시, 아무런 문제가 없는 경우 - ○, 물성이 강해서 작업이 용이하지 않음, 물성이 약해서 세공이 용이하지 않음, 성상이 묽어서 작업이 용이하지 않음, 굳어져서 작업 불가, 형태가 무너져서 작업 불가 및 작업 효율 저하 등 어떠한 문제라도 발생하는 경우 - ×로 하여 작업성을 평가하였다.

구분		실시예 1	실시예 2	실시예 3	실시예 4	실시예 5
이당류	맥아엿과 설탕 중량비	1:4	1:2.5	1:3.5	1:4	1:4
향료	함량(중량부)	0.6	0.6	0.6	0.05	1.5
구연산	함량(중량부)	0.4	0.4	0.4	0.4	0.4
제1단계	가열온도(℃)	160	160	160	160	160
제3단계	유지온도(℃)	105	105	105	105	105
	세트수(세트)	40	40	40	40	40
	연신길이(cm)	75	75	75	75	75
풍미평가(점)		6.8	3.5	4.4	3.4	4.6
치아부착성 및 식감 평가(점)		6.7	4.1	3.8	6.2	6.1
작업성 평가		○	×	×	○	○

구분		실시예 6	실시예 7	실시예 8	실시예 9	실시예 10
이당류	맥아엿과 설탕 중량비	1:4	1:4	1:4	1:4	1:4
향료	함량(중량부)	0.6	0.6	0.6	0.6	0.6
구연산	함량(중량부)	0.7	0.4	0.4	0.4	0.4
제1단계	가열온도(℃)	160	120	200	160	160
제3단계	유지온도(℃)	105	105	105	75	135
	세트수(세트)	40	40	40	40	40
	연신길이(cm)	75	75	75	75	75
풍미평가(점)		4.1	5.9	4.5	제조 불가	제조 불가
치아부착성 및 식감 평가(점)		6.1	6.0	4.2	제조불가	제조 불가
작업성 평가		○	×	○	×	×

구분		실시예 11	실시예 12	실시예 13	실시예 14	비교예 1
이당류	맥아엿과 설탕 중량비	1:4	1:4	1:4	1:4	1:4
향료	함량(중량부)	0.6	0.6	0.6	0.6	0
구연산	함량(중량부)	0.4	0.4	0.4	0.4	0.4
제1단계	가열온도(℃)	160	160	160	160	160
제3단계	유지온도(℃)	105	105	105	105	105
	세트수(세트)	20	60	40	40	40
	연신길이(cm)	75	75	45	105	75
풍미평가(점)		4.6	제조 불가	6.1	6.2	2.9
치아부착성 및 식감 평가(점)		4.8	제조불가	6.3	6.0	6.1
작업성 평가		○	×	×	×	○

상기 표 4 내지 표 6에서 알 수 있듯이, 본 발명에 따른 맥아엿과 설탕의 중량비, 향료 함량과 포함여부, 구연산 함량, 제1단계의 가열온도, 제3단계의 유지 온도, 세트 수 및 연신 길이 등을 모두 만족하는 실시예 1이, 이 중에서 하나라도 만족하지 못하는 실시예 2 ~ 14 및 비교예 1에 비하여 풍미, 식감 및 작업성이 현격히 우수하고, 치아부착성 평가 결과가 현격히 우수한 것을 확인할 수 있다.

이상에서 본 발명의 일 실시 예에 대하여 설명하였으나, 본 발명의 사상은 본 명세서에 제시되는 실시 예에 제한되지 아니하며, 본 발명의 사상을 이해하는 당업자는 동일한 사상의 범위 내에서, 구성요소의 부가, 변경, 삭제, 추가 등에 의해서 다른 실시 예를 용이하게 제안할 수 있을 것이나, 이 또한 본 발명의 사상범위 내에 든다고 할 것이다.

Claims

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이당류, 향료 및 당근추출물을 포함하는 사탕시럽을 제조하는 제1단계;
상기 사탕시럽에 색소 및 구연산을 혼합 및 냉각하여 제1캔디베이스를 제조하고, 상기 사탕시럽에 색소를 혼합 및 냉각하여 코팅 반죽물을 제조하는 제2단계;
상기 제1캔디베이스의 온도를 소정의 온도로 유지한 상태에서, 제1캔디베이스를 일방향 연신하고 연신 방향과 동일한 방향으로 접어 포개는 과정을 반복수행하여 제2캔디베이스를 제조하는 제3단계;
상기 코팅 반죽물이 상기 제2캔디베이스 전체를 감싸도록 랩핑(wrapping)하여 제3캔디베이스를 제조하는 제4단계; 및
상기 제3캔디베이스를 일방향으로 연신하고, 컷팅하여 캔디를 제조하는 제5단계;를 포함하고,
상기 당근추출물은 당근 및 물을 1 : 5 ~ 15의 중량비로 포함하는 당근혼합물을 50 ~ 70℃의 온도로 3.3 ~ 4.8시간 동안 열수추출 하여 제조되는 면역력 강화를 위한 캔디 제조방법.
제9항에 있어서, 상기 제1단계는,
물과 상기 이당류를 140 ~ 180℃의 온도에서 10 ~ 40분 동안 혼합하여 혼합액을 제조하는 제1-1단계; 및
상기 혼합액에 향료를 혼합하여 사탕시럽을 제조하는 제1-2단계;를 포함하는 면역력 강화를 위한 캔디 제조방법.
제9항에 있어서, 상기 제3단계는,
90 ~ 120℃의 온도로 유지한 상태로 수행하는 면역력 강화를 위한 캔디 제조방법.
제9항에 있어서, 상기 제3단계는,
제1캔디베이스를 일방향 연신하고 연신 방향과 동일한 방향으로 접어 포개는 과정을 1세트로 하여 30 ~ 50세트 수행하는 면역력 강화를 위한 캔디 제조방법.
제9항에 있어서,
상기 제3단계의 연신은 길이가 60 ~ 90㎝가 되도록 수행하는 면역력 강화를 위한 캔디 제조방법.
제9항에 있어서,
상기 제4단계의 제3캔디베이스는 제2캔디베이스를 70 ~ 90 중량% 및 코팅 반죽물을 10 ~ 30 중량% 포함하는 면역력 강화를 위한 캔디 제조방법.
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