KR102379274B1 - Method for producing funtional oat including useful ingredients - Google Patents
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Abstract
본 발명은 유용성분을 함유하는 기능성 귀리 제조방법에 관한 것이다. 이를 위해 기능성 귀리의 제조방법은 (a) 밀리타리스 동충하초(Cordyceps militaris) 종균을 평판배지에 접종한 후 광을 조사하는 단계; (b) 상기 평판배지로부터 광 조사가 완료된 상기 종균을 분리한 후, 액체배지에서 암배양 및 광배양하는 단계; (c) 상기 액체배지로부터 암배양 및 광배양이 완료된 상기 종균을 분리한 후, 귀리함유배지에 접종하여 암배양 및 광배양하는 단계; 및 (d) 암배양 및 광배양이 완료된 상기 귀리함유배지에 귀리 껍질 발효추출물을 첨가하여 추가 배양하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 한다.The present invention relates to a method for producing functional oats containing useful ingredients. For this, the production method of functional oats is (a) Militaris Cordyceps militaris ) irradiating light after inoculating the seed on a plate medium; (b) isolating the seed, which has been irradiated with light, from the plate medium, followed by dark culture and light culture in a liquid medium; (c) isolating the seed, which has been cultured in cancer and light culture, from the liquid medium, and then inoculated in an oat-containing medium to perform cancer culture and light culture; and (d) further culturing by adding the oat hull fermentation extract to the oat-containing medium after dark culture and light culture have been completed.
Description
본 발명은 기능성 귀리 제조방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 유용성분을 함유하는 기능성 귀리 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method for manufacturing functional oats, and more particularly, to a method for manufacturing functional oats containing useful ingredients.
동충하초(冬蟲夏草)라 함은 겨울에는 곤충이었다가 여름에는 식물로 변한다는 뜻의 한자풀이이다. 분류학적 위치로 보면 자낭균강 맥각균과에 속하고 동충하초속, 즉 코디셉스속(Cordiceps sp.)에 포함되는 것만을 의미하며, 실과 같은 나선형으로 된 자낭포자를 만들어 내는 고등균류만을 총칭하기도 한다.Dongchunghacho (冬蟲夏草) is a Chinese word meaning that it is an insect in winter and turns into a plant in summer. In terms of taxonomic position, it belongs to Ascomyceae ergotomycetes and means only to be included in the genus Cordyceps, that is, the genus Cordiceps sp .
히말라야 산맥 해발 4,000미터 고산지대의 박쥐나방유충에서 시넨시스 동충하초(Cordyceps sinensis)의 자실체를 채취하여 강장식품으로 사용하기 시작한 것이 동충하초의 기원이며, 지금도 네팔 등지의 고산지대에서는 주요 수입원으로 시넨시스 동충하초의 채취가 이루어지고, 홍콩 시장에서 전 세계 동충하초의 90%가 유통되고 있다.The origin of Cordyceps sinensis is that the fruiting bodies of Cordyceps sinensis were collected from bat moth larvae at an altitude of 4,000 meters in the Himalayas and used as a tonic food. 90% of the world's cordyceps is distributed in the Hong Kong market.
동충하초는 고대 중국에서부터 불로장생의 비약으로 알려져 결핵, 천식, 황달 등의 치료와 아편 중독의 해독제, 병후의 보양 및 강장제, 면역기능 강화제로 인삼, 녹용과 함께 3대 보약으로 취급되어 왔다. 본초 종신의 기록에 따르면, 동충하초는 신장과 폐질환 치료에도 효과가 있는 것으로 나타나 있으며, 중국대사전에도 달고 온화하여 폐를 강화하는 등 호흡기 질환에 대한 동충하초의 효능이 기록되어 있다.Cordyceps has been known as the elixir of immortality since ancient China, and has been treated as one of the three major herbal remedies along with ginseng and antler as an antidote for opioid addiction, as an aphrodisiac and tonic for illness, and as an immune function enhancer for the treatment of tuberculosis, asthma, and jaundice. According to the records of the herbal medicine lifetime, Cordyceps Cordyceps has been shown to be effective in treating kidney and lung diseases, and the Chinese Dictionary also records the efficacy of Cordyceps Cordyceps for respiratory diseases, such as strengthening the lungs because it is sweet and mild.
최근에는 코디셉스속 계열의 동충하초가 항암작용, 피로회복, 면역강화, 항산화작용, 조혈작용, 구충작용을 한다는 연구가 보고되고 있다. 또한, 간이나 심장, 신장, 폐 등과 연계된 질환에 탁월한 예방 및 치료효과가 있다는 연구결과도 나타나고 있으며, 이는 동충하초 내에 존재하는 기능성 생리활성물질에 의한 것으로 알려져 있다.Recently, studies have been reported that Cordyceps Cordyceps, a member of the Cordyceps genus, has anti-cancer activity, fatigue recovery, immunity enhancement, antioxidant activity, hematopoietic activity, and anthelmintic activity. In addition, research results showing that it has an excellent preventive and therapeutic effect on diseases related to the liver, heart, kidney, lung, etc. are also shown, which is known to be due to functional physiologically active substances present in Cordyceps Cordyceps.
동충하초 중에 함유된 대표적인 생리활성(기능성)물질에는 각종 뉴클레오시드 및 뉴클레오시드와 같이 염기가 중심이 되는 성분, 갈락토오스와 만노오스로 구성된 다당류, 에르고스테롤, 코디세픽 산(cordycepic acid), 각종 아미노산 및 불포화 지방산 등이 있다. 이들 모든 물질이 복합적으로 질병의 예방 및 치료에 작용할 수도 있지만, 가장 주도적인 기능성을 나타내는 물질은 코디세핀(Cordycepin; 3'-deoxyadenosine)이라는 점에는 이견이 없다.Representative physiologically active (functional) substances contained in Cordyceps Cordyceps include various nucleosides and base-centered components such as nucleosides, polysaccharides composed of galactose and mannose, ergosterol, cordycepic acid, various amino acids and unsaturated fatty acids and the like. Although all these substances may act in the prevention and treatment of diseases in combination, there is no disagreement that the substance exhibiting the most leading functionality is Cordycepin (3'-deoxyadenosine).
한편, 코디세핀을 포함하는 것으로 확인된 동충하초는 대표적으로 박쥐나방 애벌레를 기주로 생성되는 시넨시스 동충하초(Cordyceps sinensis)와 누에 또는 번데기를 기주로 생성되는 밀리타리스 동충하초(Cordyceps militaris)가 있다. 이들 내 코디세핀의 함량은 자실체보다 균사체내에, 시넨시스종보다는 밀리타리스종 내에 더 많이 분포하는 것으로 알려져 있다. 그러나, 국내에서 생산되고 있는 눈꽃동충하초(Paecilomyces japonica)에는 코디세핀이 전혀 발견되지 않는 것으로 알려져 있다.On the other hand, Cordyceps Cordyceps, which has been confirmed to contain cordycepin , is typically produced from bat moth larvae as a host. sinensis ) and Militaris Cordyceps produced by silkworms or pupae as hosts militaris ). It is known that the content of cordycepin in these is more distributed in the mycelium than in the fruiting body, and in the Militaris species rather than the Sinensis species. However, it is known that cordycepin is not found at all in Paecilomyces japonica produced in Korea.
한편, 최근에는 코디세핀과 같은 다양한 유용성분을 식품 분야에 적용함으로써 기능성을 부여하는 방법에 관한 연구가 다수 이루어지고 있다. 누에 번데기를 이용해 동충하초를 재배함으로써 기능성을 부여하는 방법, 동충하초의 균사체 배양을 통해 코디세핀을 함유하는 기능성 쌀의 생산방법 등 동충하초 내에 함유된 유용성분을 중심으로 식품에 기능성을 부여하고자 하는 기술이 개발된 바 있다.On the other hand, recently, a number of studies on a method for imparting functionality by applying various useful ingredients such as cordycepin to the food field have been conducted. A method of imparting functionality to food by cultivating Cordyceps pupa using silkworm pupae and a method of producing functional rice containing cordycepin through the mycelium culture of Cordyceps cultivar. has been
다만, 이들은 동충하초의 접종원을 누에로 사용함으로써 접종 효율이 떨어지고 배양기간이 늘어난다는 단점을 지니고 있으며, 자실체 형성 능력의 차이가 심하고 광 조건, 환기, 습도 등 재배조건의 복잡성으로 대량생산이나 효율성에 한계가 있다. 또한, 쌀을 배지로 사용해 동충하초를 재배하는 경우 최종제품의 균일화에 어려운 문제도 존재한다.However, by using the inoculum of Cordyceps as a silkworm, inoculation efficiency is lowered and the incubation period is extended. there is In addition, in the case of cultivating Cordyceps Cordyceps using rice as a medium, there is a difficult problem in uniformity of the final product.
본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위한 것으로서, 본 발명의 목적은 귀리를 포함하는 배지 상에서 동충하초를 배양함으로써 코디세핀과 같은 각종 유용성분을 함유하는 기능성 귀리의 제조방법을 제공하는데 있다.The present invention is to solve the above problems, and an object of the present invention is to provide a method for producing functional oats containing various useful ingredients such as cordycepin by culturing Cordyceps Cordyceps on a medium containing oats.
본 발명의 상기 및 다른 목적과 이점은 바람직한 실시예를 설명한 하기의 설명으로부터 분명해질 것이다.These and other objects and advantages of the present invention will become apparent from the following description of preferred embodiments.
상기 목적은, (a) 밀리타리스 동충하초(Cordyceps militaris) 종균을 평판배지에 접종한 후 광을 조사하는 단계; (b) 상기 평판배지로부터 광 조사가 완료된 상기 종균을 분리한 후, 액체배지에서 암배양 및 광배양하는 단계; (c) 상기 액체배지로부터 암배양 및 광배양이 완료된 상기 종균을 분리한 후, 귀리함유배지에 접종하여 암배양 및 광배양하는 단계; 및 (d) 암배양 및 광배양이 완료된 상기 귀리함유배지에 귀리 껍질 발효추출물을 첨가하여 배양하는 단계;를 포함하는, 기능성 귀리 제조방법에 의해 달성될 수 있다.The purpose is, (a) Militaris Cordyceps ( Cordyceps militaris ) irradiating light after inoculating the seed on a plate medium; (b) isolating the seed, which has been irradiated with light, from the plate medium, followed by dark culture and light culture in a liquid medium; (c) isolating the seed, which has been cultured in cancer and light culture, from the liquid medium, and then inoculated in an oat-containing medium to perform cancer culture and light culture; And (d) culturing by adding a fermented oat hull extract to the oat-containing medium after dark culture and light culture;
이 때, 상기 액체배지는 수소수(Hydrogen water)를 포함할 수 있고, 상기 (b) 단계의 암배양은 20~30시간 동안 수행되고, 광배양은 40~60시간 동안 수행될 수 있다.At this time, the liquid medium may contain hydrogen water, the dark culture of step (b) may be performed for 20 to 30 hours, and the light culture may be performed for 40 to 60 hours.
또한, 상기 귀리함유배지는 귀리 40~60중량부 및 물 60~80중량부를 포함할 수 있다.In addition, the oat-containing medium may contain 40 to 60 parts by weight of oats and 60 to 80 parts by weight of water.
또한, 상기 (c) 단계의 암배양은 4~6일 동안 수행되고, 광배양은 8~12일 동안 수행될 수 있다.In addition, the dark culture of step (c) may be performed for 4 to 6 days, and the light culture may be performed for 8 to 12 days.
또한, 상기 (c) 단계의 광배양은 800~1,200lux의 조명도 하에 수행될 수 있다.In addition, the photoculturing in step (c) may be performed under an illumination degree of 800 to 1,200 lux.
또한, 상기 귀리 껍질 발효추출물의 함량은 5~15중량부일 수 있다.In addition, the content of the oat hull fermented extract may be 5 to 15 parts by weight.
본 발명에 따르면, 사전에 일정 수준의 광을 조사하여 우량한 밀리타리스 동충하초 균주를 생성한 다음, 일정 조건 하에 암배양과 광배양을 순차로 수행하고 최종적으로 귀리함유배지에서 귀리 껍질 발효추출물을 첨가한 상태로 배양함으로써 동충하초의 유용성분을 다량 함유한 기능성 귀리를 제조할 수 있다.According to the present invention, a superior Militaris Cordyceps strain is generated by irradiating a certain level of light in advance, then dark culture and light culture are sequentially performed under certain conditions, and finally the oat hull fermented extract is added in an oat-containing medium. By culturing in one state, functional oats containing a large amount of useful components of Cordyceps Cordyceps can be produced.
다만, 본 발명의 효과들은 이상에서 언급한 효과로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 효과들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.However, the effects of the present invention are not limited to the above-mentioned effects, and other effects not mentioned will be clearly understood by those skilled in the art from the following description.
이하, 본 발명의 실시예와 도면을 참조하여 본 발명을 상세히 설명한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위해 예시적으로 제시한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가지는 자에 있어서 자명할 것이다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to embodiments and drawings of the present invention. It will be apparent to those of ordinary skill in the art that these examples are merely presented by way of example to explain the present invention in more detail, and that the scope of the present invention is not limited by these examples. .
또한, 달리 정의하지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속하는 기술분야의 숙련자에 의해 통상적으로 이해되는 바와 동일한 의미를 가지며, 상충되는 경우에는, 정의를 포함하는 본 명세서의 기재가 우선할 것이다.In addition, unless otherwise defined, all technical and scientific terms used herein have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which this invention belongs, and in case of conflict, this specification, including definitions will take precedence.
도면에서 제안된 발명을 명확하게 설명하기 위해서 설명과 관계없는 부분은 생략하였으며, 명세서 전체를 통하여 유사한 부분에 대해서는 유사한 도면 부호를 붙였다. 그리고, 어떤 부분이 어떤 구성 요소를 "포함"한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성 요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다. 또한, 명세서에서 기술한 "부"란, 특정 기능을 수행하는 하나의 단위 또는 블록을 의미한다.In order to clearly explain the invention proposed in the drawings, parts irrelevant to the description are omitted, and similar reference numerals are assigned to similar parts throughout the specification. And, when a part "includes" a certain component, this means that other components may be further included, rather than excluding other components, unless otherwise stated. In addition, "unit" described in the specification means one unit or block that performs a specific function.
각 단계들에 있어 식별부호(제1, 제2, 등)는 설명의 편의를 위하여 사용되는 것으로 식별부호는 각 단계들의 순서를 설명하는 것이 아니며, 각 단계들은 문맥상 명백하게 특정 순서를 기재하지 않는 이상 명기된 순서와 다르게 실시될 수 있다. 즉, 각 단계들은 명기된 순서와 동일하게 실시될 수도 있고 실질적으로 동시에 실시될 수도 있으며 반대의 순서대로 실시될 수도 있다.In each step, identification numbers (first, second, etc.) are used for convenience of description, and identification numbers do not describe the order of each step, and each step does not clearly describe a specific order in context. It may be performed differently from the order specified above. That is, each step may be performed in the same order as the specified order, may be performed substantially simultaneously, or may be performed in the reverse order.
본 발명의 일 실시예에 따른 기능성 귀리 제조방법은 (a) 밀리타리스 동충하초(Cordyceps militaris) 종균을 평판배지에 접종한 후 광을 조사하는 단계; (b) 상기 평판배지로부터 광 조사가 완료된 상기 종균을 분리한 후, 액체배지에서 암배양 및 광배양하는 단계; (c) 상기 액체배지로부터 암배양 및 광배양이 완료된 상기 종균을 분리한 후, 귀리함유배지에 접종하여 암배양 및 광배양하는 단계; 및 (d) 암배양 및 광배양이 완료된 상기 귀리함유배지에 귀리 껍질 발효추출물을 첨가하여 배양하는 단계;를 포함한다.Functional oat manufacturing method according to an embodiment of the present invention comprises the steps of (a) inoculating a Militaris Cordyceps militaris seed into a plate medium and then irradiating light; (b) isolating the seed, which has been irradiated with light, from the plate medium, followed by dark culture and light culture in a liquid medium; (c) isolating the seed, which has been cultured in cancer and light culture, from the liquid medium, and then inoculated in an oat-containing medium to perform cancer culture and light culture; and (d) culturing by adding a fermented oat hull extract to the oat-containing medium on which dark culture and light culture have been completed.
상기 동충하초는 코디셉스속(Codyceps sp.)에 속하는 동충하초일 수 있고, 바람직하게는 밀리타리스 동충하초(Cordyceps militaris)일 수 있다.The cordyceps cordyceps genus ( Codyceps sp. ) It may be a cordyceps cord belonging to, preferably Militaris cordyceps ( Cordyceps ) militaris ).
코디셉스속에 속하는 동충하초도 약리효과가 규명되지 않은 종이 대부분이고, 세계적인 학술논문을 통해 약리효과가 밝혀진 동충하초는 시넨시스 동충하초(Cordyceps sinensis)와 밀리타리스 동충하초(Cordyceps militaris)가 대표적이다. Cordyceps , which belongs to the genus Cordyceps , is also a species for which pharmacological effects have not been identified . militaris ) is an example.
밀리타리스 동충하초(Cordyceps militaris)는 자연 상태에서 주로 나비목 곤충의 번데기를 기주로 하여 다발로 자실체를 형성하는 버섯으로서, 이미 중국에서는 3,000∼4,000년간 식용으로 복용하여 왔고 약효 또한 오랫동안 인정되어 왔기 때문에 지금까지도 각광받고 있다. 또한, 상용하면 허약 체질을 튼튼히 하고 면역력을 높이는 분명한 효과가 있어 폐질환이나 신장질환에도 사용해오고 있는 것으로 전해지고 있다.Militaris Cordyceps militaris ) is a mushroom that forms fruiting bodies in bundles mainly from the pupae of Lepidoptera insects in the natural state. In addition, it is said that it has been used for lung disease and kidney disease because it has a clear effect of strengthening the weak constitution and increasing immunity.
밀리타리스 동충하초의 주요성분 중 하나인 코디세핀은 아데닌 뉴클레오시드(adenine nucleoside)의 유사체로, 3'의 위치에 수산화기(hydroxyl group)가 없기 때문에 전사사슬종결자(transcription chain terminator)로 작용하여 RNA 합성을 저해함으로써 암세포의 증식을 억제하는 항암치료제로 사용되고 있다.Cordycepin, one of the main components of Militaris Cordyceps, is an analog of adenine nucleoside, and since there is no hydroxyl group at the 3' position, it acts as a transcription chain terminator. It is used as an anticancer agent to inhibit the proliferation of cancer cells by inhibiting RNA synthesis.
코디세핀은 특히 백혈병 치료에 탁월한 효과를 나타낸다. 세포 수준의 연구에 따르면 자연살해세포(natural killer cells)의 활력을 증진시키고, 인터류킨 및 종양괴사인자(tumor necrosis factor)의 생성을 향상시킨다는 사실이 보고되었다. 또한, ATP 합성을 증가시키고(운동력 증강), 수퍼옥시드 디스무타아제(SOD, superoxide dismutase)의 역가를 증가시키며(노화방지), 혈당을 감소시키는(당뇨치료) 효과를 나타내며, 유아설사병 예방 및 치료 등에도 뛰어난 효능을 보인다는 연구결과가 보고된 바 있다.Cordycepin is particularly effective in treating leukemia. Cell-level studies have reported that it enhances the vitality of natural killer cells and enhances the production of interleukins and tumor necrosis factor. In addition, it increases ATP synthesis (increasing athletic performance), increases the titer of superoxide dismutase (SOD) (anti-aging), reduces blood sugar (diabetes treatment), and prevents infant diarrhea and Research results have been reported that show excellent efficacy in treatment, etc.
그 밖에도, 밀리타리스 동충하초에 포함된 만니톨(mannitol) 성분은 뇌혈전, 뇌일혈, 신장쇠약의 예방과 치료에 사용되고, 다당류(polysaccharide)는 항암 및 노화방지, 면역증강물질로 알려져 있다. 또한, 노화방지 물질로 알려진 SOD(Superoxide dismutase)와 기타 유용물질들이 시넨시스 동충하초에 비해 밀리타리스 동충하초에 고함량으로 포함되어 있다는 다수의 연구결과가 발표되고 있다.In addition, mannitol component contained in Militaris Cordyceps is used for the prevention and treatment of cerebral thrombosis, cerebral extravasation, and renal weakness, and polysaccharide is known as an anti-cancer, anti-aging, and immune-enhancing substance. In addition, a number of research results have been published that show that SOD (Superoxide dismutase) and other useful substances, known as anti-aging substances, are contained in higher content in Militaris Cordyceps than Sinensis Cordyceps.
상기 (a) 단계는 밀리타리스 동충하초 종균의 자실체를 형성하기 위한 준비 단계일 수 있다. 이 때, 사용하는 평판배지로는 통상 미생물이나 버섯 등을 배양할 때 사용하는 YM 배지 또는 MRS 배지일 수 있으며, 바람직하게는 YM 배지일 수 있다.The step (a) may be a preparation step for forming a fruiting body of the Militaris Cordyceps spp. In this case, the plate medium used may be YM medium or MRS medium, which is usually used for culturing microorganisms or mushrooms, and preferably YM medium.
YM 배지를 사용하는 경우 배지 조성은 효모추출물, 맥아추출물, 펩톤, 글루코오스 등을 함유할 수 있으며, 구체적인 함량은 배지 1L당 효모추출물 3g, 맥아추출물 3g, 펩톤 5g 및 글루코오스 10g일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.When YM medium is used, the medium composition may contain yeast extract, malt extract, peptone, glucose, etc., and the specific content may be 3 g of yeast extract, 3 g of malt extract, 5 g of peptone and 10 g of glucose per 1 L of medium, but limited thereto it is not going to be
상기 (a) 단계에서 평판배지에 밀리타리스 동충하초 종균을 접종한 후 일정 수준의 광을 조사하여 사전에 우량한 균주를 준비할 수 있다. 구체적인 광의 조명도는 200~300lux일 수 있으며, 바람직하게는 250lux일 수 있다. 상기 조명도가 200lux 미만이면 광 조사 효과가 미미할 수 있고, 300lux 이상이면 균주의 성장 제어가 어려울 수 있다.In step (a), a superior strain can be prepared in advance by irradiating a certain level of light after inoculating a seed strain of Militaris Cordyceps Cordyceps into the plate medium. The specific light intensity may be 200 to 300 lux, preferably 250 lux. If the illumination intensity is less than 200 lux, the light irradiation effect may be insignificant, and if it is 300 lux or more, it may be difficult to control the growth of the strain.
한편, 상기 (a) 단계의 광 조사를 수행하기 이전에 상온에서 일정 기간, 예를 들어 3~7일 동안 암배양을 선행할 수 있다. 암배양을 먼저 수행하는 경우 자실체의 발이효율을 향상시킬 수 있으며, 이에 따라 최종적으로 수득되는 밀리타리스 동충하초의 길이와 중량을 증가시킬 수 있다. 밀리타리스 동충하초의 생장에 유리한 환경이 주어질수록 기능성 귀리에 더욱 많은 양의 유용성분(코디세핀 등)을 제공할 수 있음을 의미한다.On the other hand, before performing the light irradiation of step (a), the dark culture may be preceded for a certain period of time at room temperature, for example, 3 to 7 days. When dark culture is performed first, the germination efficiency of fruiting bodies can be improved, and thus, the length and weight of the finally obtained Militaris Cordyceps Cordyceps can be increased. It means that the more favorable environment is given for the growth of Militaris Cordyceps, the more useful ingredients (cordycepin, etc.) can be provided to functional oats.
상기 (a) 단계에서 밀리타리스 동충하초 균사의 직경이 약 40㎜ 정도까지 성장하면, 상기 밀리타리스 동충하초 종균을 상기 평판배지로부터 분리 및 분쇄한 다음, 미리 준비해둔 액체배지로 접종하면서 상기 (b) 단계를 진행할 수 있다.When the diameter of the Militaris Cordyceps mycelium grows to about 40 mm in step (a), the Militaris Cordyceps cordyceps starter is separated and pulverized from the plate medium, and then inoculated with a previously prepared liquid medium (b) ) can proceed.
상기 액체배지는 밀리타리스 동충하초의 발이 및 생육에 유리한 환경을 제공하기 위해 설탕, 콩가루, 식용유, 물 등을 포함할 수 있다. 이 때, 상기 액체배지에 함유된 물은 통상의 증류수 외에 수소수(Hydrogen water)를 사용함으로써 동충하초의 생장효율을 향상시킬 수 있다.The liquid medium may contain sugar, soybean flour, edible oil, water, etc. to provide an environment favorable for the feet and growth of Militaris Cordyceps. At this time, the water contained in the liquid medium can improve the growth efficiency of Cordyceps by using hydrogen water in addition to ordinary distilled water.
이후, 분쇄된 밀리타리스 동충하초 종균을 액체배지에 접종하고 암배양 및 광배양을 순차로 수행하여 균주의 증식능을 향상시킬 수 있다. 상기 암배양은 20~30시간, 바람직하게는 24시간 동안 수행될 수 있으며, 상기 광배양은 40~60시간, 바람직하게는 48시간 동안 수행될 수 있다. 상기 (a) 단계와 마찬가지로 암배양을 통해 자실체의 발이효율을 향상시킬 수 있으며, 광배양을 통해 생장능을 향상시킬 수 있다.Thereafter, the pulverized Militaris Cordyceps spp. is inoculated into a liquid medium, and dark culture and light culture are sequentially performed to improve the proliferative capacity of the strain. The dark culture may be performed for 20 to 30 hours, preferably for 24 hours, and the light culture may be performed for 40 to 60 hours, preferably for 48 hours. As in step (a), the germination efficiency of fruiting bodies can be improved through dark culture, and growth ability can be improved through light culture.
상기 (c) 단계에서는 액체배지에서 배양된 동충하초 종균을 귀리에 접종시켜 배양함으로써 동충하초 고유의 유용성분을 귀리에 전달할 수 있다. 이 때, 상기 (b) 단계에서와 동일하게 수소수를 사용할 수 있으며, 귀리의 함량이 40~60중량부, 바람직하게는 50중량부일 수 있고, 물(수소수)의 함량은 60~80중량부, 바람직하게는 70중량부일 수 있다. 귀리와 수소수의 함량이 상기 범위를 벗어나는 경우 밀리타리스 동충하초 종균의 발이효율 내지 생육효율 저하에 따라 귀리에 충분한 유용성분이 제공되지 않을 수 있어 각각의 함량을 상기 범위 내로 조절하는 것이 바람직하다.In the step (c), by inoculating and culturing the oats with a Cordyceps seedling cultured in a liquid medium, a unique useful component of Cordyceps Cordyceps can be delivered to the oats. At this time, hydrogen water may be used in the same manner as in step (b), and the content of oats may be 40 to 60 parts by weight, preferably 50 parts by weight, and the content of water (hydrogen water) is 60 to 80 parts by weight. parts, preferably 70 parts by weight. If the content of oats and hydrogen water is out of the above range, sufficient useful ingredients may not be provided to the oats due to a decrease in germination efficiency or growth efficiency of the Militaris Cordyceps seed spawn, so it is preferable to adjust each content within the above range.
상기 (a) 및 (b) 단계에서와 마찬가지로 상기 (c) 단계의 귀리함유배지에서도 암배양 및 광배양이 순차로 수행될 수 있다. 암배양은 4~6일, 바람직하게는 5일 동안 수행될 수 있으며, 광배양은 800~1,200lux의 조명도 하에 8~12일, 바람직하게는 10일 동안 수행될 수 있다.As in steps (a) and (b), dark culture and light culture may be sequentially performed in the oat-containing medium in step (c). Dark culture may be performed for 4 to 6 days, preferably 5 days, and light culture may be performed for 8 to 12 days, preferably 10 days under an illumination degree of 800 to 1,200 lux.
이와 같은 방법은 각 단계에서 암배양과 광배양을 번갈아 수행함으로써 발이 및 생육 이전에 우량종의 자실체를 형성할 수 있으며, 이에 따라 최종적으로 수득하는 동충하초의 길이, 중량 등을 증가시키고 귀리에 유용한 성분을 제공할 수 있다.In this method, by alternately performing dark culture and light culture at each stage, fruiting bodies of good species can be formed before germination and growth, and thus the length, weight, etc. of the finally obtained Cordyceps Cordyceps is increased, and useful ingredients for oats can provide
나아가, 상기 (d) 단계에서는 (c) 단계의 암배양 및 광배양이 완료된 귀리함유배지에 귀리 껍질의 발효추출물을 첨가하여 배양함으로써 동충하초의 유용성분을 귀리에 더욱 효과적으로 전달할 수 있다.Furthermore, in step (d), the useful component of Cordyceps cordyceps can be more effectively delivered to the oats by culturing by adding the fermentation extract of oat hulls to the oat-containing medium on which the dark culture and light culture of step (c) have been completed.
상기 귀리 껍질은 귀리를 식용으로 가공한 이후 버려지는 것이 일반적이나, 최근 연구결과에 따르면 귀리 껍질을 주정이나 물로 추출하여 얻어지는 물질은 파골세포의 활성 억제 및 조골세포의 분화 촉진을 통해 골형성을 촉진하는 등 골다공증과 같은 질병에 효과적임이 입증된 바 있다. 특히, 물을 용매로 하여 귀리 껍질을 추출할 때 조골세포 분화 촉진 및 파골세포 활성 억제의 두 가지 기능을 모두 효과적으로 구현할 수 있다는 것도 확인되었다.The oat hulls are generally thrown away after processing oats for food, but according to recent research results, substances obtained by extracting oat hulls with alcohol or water promote bone formation through inhibition of osteoclast activity and differentiation of osteoblasts. It has been proven to be effective in diseases such as osteoporosis. In particular, it was also confirmed that both functions of promoting osteoblast differentiation and inhibiting osteoclast activity can be effectively implemented when oat hulls are extracted using water as a solvent.
이러한 귀리 껍질 고유의 효능에 착안하여, 본 발명자들은 귀리 껍질의 발효추출물을 사용하는 경우 귀리 내 코디세핀 등의 유용성분 함량을 효과적으로 증가시킬 수 있음을 실험으로부터 확인하였다. 이 때, 발효균주로는 효모(yeast), 또는 유산균을 사용할 수 있고, 바람직하게는 효모와 유산균의 혼합균주를 사용할 수 있으나, 발효 조건이나 달성하고자 하는 효과 등에 따라 효모나 유산균 외 다른 균주를 사용할 수도 있다.Paying attention to the inherent efficacy of such oat hulls, the present inventors confirmed from experiments that the content of useful components such as cordycepin in oats can be effectively increased when the fermented extract of oat hulls is used. At this time, yeast or lactic acid bacteria can be used as the fermenting strain, and preferably a mixed strain of yeast and lactic acid bacteria can be used. there is.
동충하초에 함유된 코디세핀은 핵산물질의 종류로, 세포의 유전정보에 관여하면서 저하된 면역기능을 활성화하여 정상세포가 암세포로 전이되는 것을 방지한다는 것이 기존에 널리 알려져 있다. 그 밖에도, 상기 코디세핀은 BMP(Bone morphogenetic protein) 신호전달 경로를 통해 조골세포의 분화를 촉진하고, RANKL에 의해 유도되는 MAPK(Mitogen-activated protein kinase) 패밀리의 인산화 억제를 통해 파골세포의 형성을 효과적으로 억제시킬 수 있다.Cordyceps contained in Cordyceps Cordyceps is a type of nucleic acid, and it is widely known that it prevents normal cells from metastasizing to cancer cells by activating the reduced immune function while participating in the genetic information of cells. In addition, the cordycepin promotes the differentiation of osteoblasts through the bone morphogenetic protein (BMP) signaling pathway, and inhibits the phosphorylation of the MAPK (mitogen-activated protein kinase) family induced by RANKL to inhibit the formation of osteoclasts. can be effectively suppressed.
이러한 코디세핀의 기작은 귀리 껍질 내에 함유된 다양한 성분과 유사한 경로를 거칠 수 있으며, 그 과정에서 상기 귀리 껍질 발효추출물이 동충하초로부터 귀리로 코디세핀이 전달될 때 전달효율을 향상시킬 수 있다. 즉, 상기 귀리 껍질 추출물을 최종 단계에서 추가로 첨가함으로써 동충하초에 함유된 코디세핀을 보다 효과적으로 귀리에 전달할 수 있다.The mechanism of this cordycepin can go through a similar route to the various components contained in the oat hull, and in the process, the fermented oat hull extract can improve the delivery efficiency when the cordycepin is transferred from Cordyceps to oats. That is, by further adding the oat hull extract in the final step, it is possible to more effectively deliver the cordycepin contained in Cordyceps to oats.
상기 귀리 껍질 발효추출물을 귀리함유배지에 첨가함에 있어서, 액체상태의 발효추출물을 적가하거나 스프레이 분사 방식을 이용할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며, 균일화 측면에서 더욱 효과적인 방법을 적절히 선택할 수 있다.In adding the oat hull fermentation extract to the oat-containing medium, a liquid fermentation extract may be added dropwise or a spray spray method may be used, but the present invention is not limited thereto, and a more effective method in terms of uniformity may be appropriately selected.
한편, 상기 귀리 껍질 발효추출물의 함량은 5~15중량부일 수 있고, 바람직하게는 10중량부일 수 있다. 상기 귀리 껍질 발효추출물의 함량이 5중량부 미만이면 동충하초의 유용성분 전달 효과가 충분히 향상되지 않을 수 있고, 10중량부 초과이면 동충하초의 생장효율이 저하될 수 있다.On the other hand, the content of the fermented oat hull extract may be 5 to 15 parts by weight, preferably 10 parts by weight. If the content of the fermented oat hull extract is less than 5 parts by weight, the effect of delivering useful components of Cordyceps cordyceps may not be sufficiently improved, and if it exceeds 10 parts by weight, the growth efficiency of Cordyceps cordyceps may be reduced.
종래 쌀이나 콩 등을 함유한 배지를 이용해 밀리타리스 동충하초를 재배하는 방법 내지 이를 이용하여 기능성 식품소재를 제조하는 방법 등이 개발된 바 있으나, 귀리를 사용하는 경우 동충하초의 생장효율을 월등히 향상시킬 수 있으면서도 귀리 자체에 동충하초 내 기능성 성분을 함유시킬 수 있어 식품소재로서의 활용도 또한 제고할 수 있다.Conventionally, methods for cultivating Militaris Cordyceps using a medium containing rice or soybeans or a method for manufacturing functional food materials using the same have been developed. It can also be used as a food material because functional ingredients in Cordyceps Cordyceps can be contained in the oats themselves.
이하, 구체적인 실시예와 비교예를 통하여 본 발명의 구성 및 그에 따른 효과를 보다 상세히 설명하고자 한다. 그러나, 본 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the configuration of the present invention and its effects will be described in more detail through specific examples and comparative examples. However, these examples are for explaining the present invention in more detail, and the scope of the present invention is not limited to these examples.
[실시예][Example]
YM 배지로 구성된 페트리디쉬에 밀리타리스 동충하초(Cordyceps militaris) 종균을 접종한 뒤, 25℃에서 5일 동안 암배양한 후 균사의 직경이 20㎜이 되었을 때 조명도 250lux의 광을 조사하며 배양하였다. 그 다음, 균사의 직경이 40㎜까지 성장하였을 때, 균질기(Homogenizer, Nissei AM-7)를 이용해 4,500rpm에서 30초간 분쇄하였다.Militaris Cordyceps in Petri dishes with YM medium. militaris ) After inoculation, dark culture at 25°C for 5 days. Then, when the diameter of the mycelia grew to 40 mm, it was pulverized at 4,500 rpm for 30 seconds using a homogenizer (Homogenizer, Nissei AM-7).
20L 유리 배양병에 갈색설탕(Brown sugar) 550g, 콩가루(Soybean flour) 550g, 수소수(Hydrogen water) 18L, 식용유 5cc를 넣은 뒤, 121℃에서 60분간 고압살균하고 냉각하여 액체배지를 준비하였다. 분쇄한 밀리타리스 동충하초 종균을 무균 조건에서 1.5L/min의 에어량으로 상기 액체배지에 접종하고 24시간 동안 암배양한 후 48시간 동안 광배양하여 액체종균을 준비하였다.After putting 550g of brown sugar, 550g of soybean flour, 18L of hydrogen water, and 5cc of cooking oil in a 20L glass culture bottle, high-pressure sterilization at 121℃ for 60 minutes, cooling, and cooling to prepare a liquid medium. The pulverized Militaris Cordyceps seedlings were inoculated into the liquid medium at an air volume of 1.5 L/min under aseptic conditions, darkly cultured for 24 hours, and then light-cultured for 48 hours to prepare a liquid spawn.
다음으로, 850cc 폴리프로필렌(PP) 병에 귀리 10~100g을 10g 단위로 조절하고 수소수 10~100cc를 10cc 단위로 조절하여 투여함으로써 귀리와 수소수의 함량이 상이한 배지를 제작하였고, 각각의 배지를 121℃에서 30분 동안 고압살균하였다. 배지를 서서히 냉각시켜 25℃ 이하가 되었을 때, 준비한 액체종균을 접종하고 25℃에서 5일 동안 암배양한 뒤 23℃에서 10일 동안 1,000lux 조건으로 광배양하였다.Next, a medium having a different content of oats and hydrogen water was prepared by administering 10 to 100 g of oats to an 850 cc polypropylene (PP) bottle by 10 g, and 10 to 100 cc of hydrogen water in 10 cc units. was autoclaved at 121 °C for 30 minutes. When the medium was cooled slowly to 25°C or lower, the prepared liquid seed was inoculated, darkly cultured at 25°C for 5 days, and then photocultured at 23°C for 10 days under 1,000 lux conditions.
마지막으로, 암배양 및 광배양이 완료된 각각의 배지에 10g의 귀리 껍질 발효추출물을 첨가한 다음, 25℃에서 2일 동안 암배양하고 23℃에서 3일 동안 1,000lux 조건으로 광배양함으로써 기능성 귀리를 제조하였다.Finally, functional oats were grown by adding 10 g of oat hull ferment extract to each medium on which dark culture and light culture were completed, and then dark cultured at 25 ° C for 2 days and light cultured at 23 ° C for 3 days under 1,000 lux conditions. prepared.
이 때, 상기 귀리 껍질 발효추출물은 다음과 같은 과정을 통해 수득하였다. 먼저, 귀리 껍질 1㎏을 분쇄한 다음, 20L 추출기에 넣고 정제수를 10L만큼 투입하였으며 80℃에서 24시간 동안 증류수로 추출함으로써 귀리 껍질 추출물을 제조하였다. 그 다음, 500㎖ 플라스크에 귀리 껍질 추출물 200㎖을 투입하고, 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 유산균(Lactobacillus plantarum)을 각각 105cell/㎖ 농도로 접종한 뒤, 28℃에서 3일 동안 Shaking Incubator를 이용해 발효를 진행하였다. 발효물은 250메쉬 및 0.5㎛ 필터를 이용해 여과되었으며, 40℃에서 감압농축한 후 동결건조함으로써 귀리 껍질 발효추출물을 고형분으로 수득하였다.At this time, the oat hull fermented extract was obtained through the following process. First, 1 kg of oat husks were crushed, put into a 20L extractor, 10L of purified water was added, and an oat husk extract was prepared by extracting with distilled water at 80°C for 24 hours. Then, 200ml of oat husk extract is put into a 500ml flask, and yeast ( Saccharomyces cerevisiae ) and lactic acid bacteria ( Lactobacillus plantarum ) are inoculated at a concentration of 10 5 cells/ml, respectively, and then at 28°C for 3 days using a Shaking Incubator Fermentation was carried out. The fermented product was filtered using a 250 mesh and 0.5 μm filter, concentrated under reduced pressure at 40° C., and then freeze-dried to obtain a fermented oat hull extract as a solid content.
[실험예 1: 귀리 및 수소수의 함량에 따른 동충하초 생장효율 관찰][Experimental Example 1: Observation of Cordyceps growth efficiency according to the content of oats and hydrogen water]
상기 실시예에서 귀리와 수소수의 함량을 달리함에 따른 밀리타리스 동충하초의 생장효율을 관찰하기 위해, 각 조건별로 목표 배양일수, 자실체의 길이, 상대중량을 측정하여 각각 하기 표 1 내지 3에 나타내었다. 이 때, 상대중량은 가장 생육상태가 우수한 조건(귀리 50g, 물 70cc)의 중량을 0으로 설정하고, 이에 대한 중량(g)의 차이를 표시하였다.In order to observe the growth efficiency of Militaris Cordyceps according to the different contents of oats and hydrogen water in the above example, the target culture days, length of fruiting bodies, and relative weights were measured for each condition and shown in Tables 1 to 3, respectively. it was In this case, the relative weight was set to 0 under the conditions with the best growth condition (oats 50 g, water 70 cc), and the difference in weight (g) was displayed.
상기 표 1 내지 3을 참고하면, 귀리 40~60g 및 수소수 60~80cc를 함유하는 배지에서 종균의 목표배양일수가 단축되었고, 자실체의 길이 및 중량이 증가하였으며, 그 효과는 귀리 50g 및 수소수 70cc을 혼합한 경우에 가장 우수한 것을 확인할 수 있다.Referring to Tables 1 to 3 above, in a medium containing 40-60 g of oats and 60-80 cc of hydrogen water, the target culture day of the seed was shortened, and the length and weight of the fruiting body increased, and the effect was 50 g of oats and 60-80 cc of hydrogen water. It can be seen that the best results are obtained when 70cc is mixed.
[비교예 1][Comparative Example 1]
YM 배지에서 밀리타리스 동충하초 종균을 배양할 때 광 조사를 생략한 것을 제외하면, 상기 실시예(귀리 50g, 수소수 70cc)와 동일한 조건으로 기능성 귀리를 제조하였다.Functional oats were prepared under the same conditions as in the above Example (oats 50 g, hydrogen water 70 cc), except that light irradiation was omitted when culturing Militaris Cordyceps seed in YM medium.
[비교예 2][Comparative Example 2]
귀리함유배지(귀리 50g, 수소수 70cc)를 대체하여 동량의 현미가 함유된 배지를 사용한 것을 제외하면, 상기 실시예와 동일한 조건으로 기능성 귀리를 제조하였다.Functional oats were prepared under the same conditions as in Example, except that a medium containing the same amount of brown rice was used to replace the oat-containing medium (oats 50g, hydrogen water 70cc).
[비교예 3][Comparative Example 3]
귀리함유배지(귀리 50g, 수소수 70cc)를 대체하여 동량의 일반미가 함유된 배지를 사용한 것을 제외하면, 상기 실시예와 동일한 조건으로 기능성 귀리를 제조하였다.Functional oats were prepared under the same conditions as in Example, except that a medium containing the same amount of regular rice was used to replace the oat-containing medium (50 g of oats, 70 cc of hydrogen water).
[비교예 4][Comparative Example 4]
귀리함유배지(귀리 50g, 수소수 70cc)를 대체하여 동량의 밀이 함유된 배지를 사용한 것을 제외하면, 상기 실시예와 동일한 조건으로 기능성 귀리를 제조하였다.Functional oats were prepared under the same conditions as in Example, except that a medium containing the same amount of wheat was used to replace the oat-containing medium (oats 50g, hydrogen water 70cc).
[실험예 2: 사전 광 조사 유무 및 배지 구성에 따른 동충하초 생장효율 관찰][Experimental Example 2: Observation of Cordyceps growth efficiency according to the presence or absence of prior light irradiation and medium composition]
상기 실시예에 따라 YM 배지에서 사전 광 조사를 실시한 개체(귀리 50g, 수소수 70cc)와 상기 비교예 1에 따라 광 조사를 생략한 개체 간의 동충하초 생장효율을 비교하여 관찰하였다. 또한, 귀리 50g 및 수소수 70cc를 함유하는 실시예의 배지 및 비교예 2~4에 따라 다른 곡물을 함유한 배지에서의 동충하초 생장효율을 비교, 관찰하였다.The growth efficiency of Cordyceps Cordyceps was observed by comparing the individual (50 g of oats, 70 cc of hydrogen water) irradiated with light in the YM medium according to the above example and the individual omitting the light irradiation according to Comparative Example 1. In addition, the growth efficiency of Cordyceps cordyceps in the medium containing 50 g of oats and 70 cc of hydrogen water and the medium containing other grains according to Comparative Examples 2 to 4 was compared and observed.
구체적인 결과는 하기 표 4에 나타내었으며, 발이일수는 개체가 10㎝ 길이까지 성장하는데 소요되는 일수로 표시하였고 발이개수는 적음(+), 보통(++), 많음(+++)의 상대적인 값으로 표시하였다. 또한, 생육 10일차에 상기 실험예 1의 기준과 같이 자실체의 길이 및 상대중량을 측정하였다.Specific results are shown in Table 4 below, and the number of days of foot growth was expressed as the number of days required for an individual to grow to a length of 10 cm. indicated as Also, on the 10th day of growth, the length and relative weight of the fruiting body were measured as in Experimental Example 1.
상기 표 4를 참고하면, 액체배지에 접종하기 전 평판배지에서 광을 조사하고 귀리 함유 배지에서 균종을 배양한 경우, 발이일수 단축과 함께 발이개수를 증가시켜 전체적인 생산성을 향상시킬 수 있으며, 자실체의 길이와 상대중량이 우량한 동충하초를 재배할 수 있음을 확인할 수 있다.Referring to Table 4 above, when light is irradiated on a plate medium before inoculation in a liquid medium and the strain is cultured in an oat-containing medium, the overall productivity can be improved by shortening the number of nailing days and increasing the number of nailing. It can be confirmed that Cordyceps Cordyceps with excellent length and relative weight can be cultivated.
[비교예 5][Comparative Example 5]
액체배지 및 귀리함유배지에서 수소수를 대체하여 증류수를 사용한 것을 제외하면, 상기 실시예(귀리 50g, 수소수 70cc)와 동일한 조건으로 기능성 귀리를 제조하였다.Functional oats were prepared under the same conditions as in the above example (50 g of oats, 70 cc of hydrogen water), except that distilled water was used instead of hydrogen water in the liquid medium and the oat-containing medium.
[실험예 3: 수소수 사용여부에 따른 동충하초 생장효율 관찰][Experimental Example 3: Observation of Cordyceps growth efficiency according to the use of hydrogen water]
일반적으로 사용되는 증류수를 대체하여 수소수를 사용함에 따른 생장효율 향상 효과를 확인하기 위해, 상기 실시예(귀리 50g, 수소수 70cc) 및 비교예 5에 따른 동충하초 생장효율을 관찰하였으며, 그 결과를 하기 표 5에 나타내었다. 구체적인 실험 조건은 상기 실험예 2와 동일하게 진행하였다.In order to confirm the effect of improving the growth efficiency by using hydrogen water instead of distilled water, the growth efficiency of Cordyceps Cordyceps according to the above Example (50 g of oats, 70 cc of hydrogen water) and Comparative Example 5 was observed, and the results were It is shown in Table 5 below. Specific experimental conditions were carried out in the same manner as in Experimental Example 2.
상기 표 5를 참고하면, 증류수를 사용하는 경우에 비해 수소수를 사용하여 동충하초를 배양 및 생육하는 경우 발이일수, 발이개수 등에 근거한 생장효율이 향상되었음을 확인할 수 있다.Referring to Table 5, when culturing and growing Cordyceps Cordyceps using hydrogen water, compared to the case using distilled water, it can be confirmed that the growth efficiency based on the number of days and the number of buds is improved.
[실험예 4: 동충하초 배양조건에 따른 귀리 내 코디세핀 함량 측정][Experimental Example 4: Measurement of Cordycepin Content in Oats according to Cordyceps Cultivation Conditions]
상기 실험예 1~3의 결과는 각각의 배양조건에 따른 동충하초의 생장효율을 관찰한 것으로, 실제 동충하초의 생장효율이 귀리 내 코디세핀 함량에 직접적인 영향을 미치는지 확인하고자 상기 실시예 및 비교예 1~5에 따라 제조된 기능성 귀리 내 코디세핀 함량을 측정하였다.The results of Experimental Examples 1 to 3 are observations of the growth efficiency of Cordyceps Cordyceps according to each culture condition. Cordycepin content in functional oats prepared according to 5 was measured.
구체적으로, 시판되는 코디세핀(Sigma)을 표준물질로 하여 아래와 같은 조건의 고속액체크로마토그래피(HPLC)를 통해 각각에 대한 코디세핀 함량을 측정하였으며, 측정 결과는 하기 표 6에 나타내었다.Specifically, using commercially available cordycepin (Sigma) as a standard material, the content of cordycepin was measured for each through high-performance liquid chromatography (HPLC) under the following conditions, and the measurement results are shown in Table 6 below.
- 이동상(Mobil phase): 아세토니트릴 : 물 = 10 : 90- Mobile phase: acetonitrile: water = 10: 90
- 유속: 0.8㎖/min- Flow rate: 0.8ml/min
- 온도: 25℃- Temperature: 25℃
- 파장: 260nm- Wavelength: 260nm
- 컬럼(Collumn): ODS-C18, 250ⅹ4㎜- Column: ODS-C 18 , 250×4 mm
- 검측기: SPD-10A- Detector: SPD-10A
(㎎/g)Cordycepin content
(mg/g)
상기 표 6을 참고하면, 실제 밀리타리스 동충하초의 생장효율이 우수한 실시예의 경우, 상대적으로 생장효율이 낮은 비교예 1~5에 비해 귀리 내 코디세핀의 함량이 월등히 높게 측정된 것을 확인할 수 있다.Referring to Table 6, in the case of Examples having excellent growth efficiency of actual Militaris Cordyceps Cordyceps, it can be seen that the content of cordycepin in oats was significantly higher than Comparative Examples 1 to 5, which had relatively low growth efficiency.
이러한 결과로부터, 실제 동충하초의 생장효율을 향상시키는 경우 식품소재, 특히 귀리 내 코디세핀과 같은 유용성분의 함량을 증대시킬 수 있음을 알 수 있다.From these results, it can be seen that when the actual growth efficiency of Cordyceps Cordyceps is improved, the content of useful ingredients such as cordycepin in food materials, especially oats, can be increased.
[비교예 6][Comparative Example 6]
귀리 껍질 발효추출물의 첨가를 생략한 것을 제외하면, 상기 실시예와 동일한 조건으로 기능성 귀리를 제조하였다.Except for omitting the addition of the fermented oat shell extract, functional oats were prepared under the same conditions as in Example.
[실험예 5: 귀리 껍질 발효추출물 첨가 여부에 따른 귀리 내 코디세핀 함량 측정][Experimental Example 5: Measurement of Cordycepin Content in Oats according to whether fermented oat hull extract was added]
귀리 껍질 발효추출물의 첨가가 동충하초 내 유용성분의 전달 효율에 실질적인 영향을 미치는지 확인하기 위해, 상기 실시예와 비교예 6에 따른 기능성 귀리 내 코디세핀 함량을 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 7에 나타내었다. 이 때, 구체적인 실험조건은 상기 실험예 4와 동일하게 설정하였다.In order to confirm whether the addition of the fermented oat hull extract has a substantial effect on the delivery efficiency of useful components in Cordyceps Cordyceps, the content of cordycepin in functional oats according to Examples and Comparative Example 6 was measured, and the results are shown in Table 7 below it was At this time, the specific experimental conditions were set in the same manner as in Experimental Example 4.
상기 표 7을 참고하면, 귀리함유배지에 동충하초를 접종한 후 암배양 및 광배양만을 수행하여 제조한 비교예 6의 기능성 귀리에 비해, 귀리 껍질 발효추출물 첨가와 함께 추가배양 단계를 거친 실시예의 기능성 귀리가 더욱 높은 농도의 코디세핀을 함유하고 있는 것을 확인할 수 있다.Referring to Table 7 above, compared to the functional oats of Comparative Example 6 prepared by inoculating Cordyceps Cordyceps in an oat-containing medium and performing only dark culture and light culture, the functionalities of Examples that were subjected to an additional culturing step with the addition of oat hull fermented extract It can be seen that oats contain a higher concentration of cordycepin.
이를 통해, 기능성 귀리의 제조 시 코디세핀을 보다 효율적으로 전달하기 위해서는 귀리 껍질 추출물의 첨가 및 배양 과정이 필요하다는 것을 알 수 있다.Through this, it can be seen that the addition and culture process of oat husk extract are necessary to more efficiently deliver cordycepin during the production of functional oats.
본 명세서에서는 본 발명자들이 수행한 다양한 실시예 가운데 몇 개의 예만을 들어 설명하는 것이나 본 발명의 기술적 사상은 이에 한정하거나 제한되지 않고, 당업자에 의해 변형되어 다양하게 실시될 수 있음은 물론이다.In this specification, only a few examples among the various embodiments performed by the present inventors are described, but the technical spirit of the present invention is not limited or limited thereto, and it is of course that it may be modified and variously implemented by those skilled in the art.
Claims (7)
(b) 상기 (a) 단계의 암배양 및 광배양이 완료된 상기 종균을 평판배지로부터 분리한 후, 액체배지에 접종하여 암배양 및 광배양하는 단계;
(c) 상기 (b) 단계의 암배양 및 광배양이 완료된 상기 종균을 액체배지로부터 분리한 후, 귀리 50중량부 및 수소수 70중량부를 포함하는 귀리함유배지에 접종하여 암배양 및 광배양하는 단계; 및
(d) 상기 (c) 단계의 암배양 및 광배양이 완료된 상기 귀리함유배지에 귀리 껍질 발효추출물 10중량부를 첨가하여 배양하는 단계;를 포함하고,
상기 귀리 껍질 발효추출물은, 귀리 껍질 분쇄물을 80℃에서 24시간 동안 증류수 추출하여 제조된 귀리 껍질 추출물에, 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 유산균(Lactobacillus plantarum)을 각각 105cell/㎖ 농도로 접종하고 28℃에서 3일 동안 발효시킨 다음, 감압농축 및 동결건조하여 제조된 것인, 기능성 귀리 제조방법.
(A) Militaris Cordyceps militaris ( Cordyceps militaris ) After inoculation of the spawn in a plate medium, dark culture and light culture;
(b) separating the seed from which the dark culture and photo-culture of step (a) have been completed, and then inoculating it in a liquid medium for dark-culturing and photo-culturing;
(c) after separating the seed from which the dark culture and light culture of step (b) have been completed, inoculated into an oat-containing medium containing 50 parts by weight of oats and 70 parts by weight of hydrogen water to darkly culture and light culture step; and
(d) culturing by adding 10 parts by weight of oat hull fermented extract to the oat-containing medium on which the dark culture and light culture of step (c) have been completed; and
The oat hull fermented extract, yeast ( Saccharomyces cerevisiae ) and lactic acid bacteria ( Lactobacillus plantarum ) to the oat hull extract prepared by extracting the pulverized oat hulls with distilled water at 80° C. for 24 hours, inoculated with each 10 5 cell/ml concentration Fermented at 28 ° C. for 3 days, then concentrated under reduced pressure and prepared by freeze-drying, a functional oat manufacturing method.
상기 액체배지는 수소수(Hydrogen water)를 포함하는, 기능성 귀리 제조방법.
The method of claim 1,
The liquid medium comprises a hydrogen water (Hydrogen water), functional oat manufacturing method.
상기 (b) 단계의 암배양은 20~30시간 동안 수행되고, 광배양은 40~60시간 동안 수행되는, 기능성 귀리 제조방법.
3. The method of claim 2,
The dark culture of step (b) is performed for 20 to 30 hours, and the light culture is performed for 40 to 60 hours, a functional oat manufacturing method.
상기 (c) 단계의 암배양은 4~6일 동안 수행되고, 광배양은 8~12일 동안 수행되는, 기능성 귀리 제조방법.
The method of claim 1,
The dark culture of step (c) is performed for 4 to 6 days, and the light culture is performed for 8 to 12 days, a functional oat manufacturing method.
상기 (c) 단계의 광배양은 800~1,200lux의 조명도 하에 수행되는, 기능성 귀리 제조방법.
6. The method of claim 5,
The photoculturing of step (c) is performed under an illumination degree of 800 to 1,200 lux, a functional oat manufacturing method.
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