KR102289346B1 - 피부진정과 아토피 개선용 인퓨즈드 오일의 제조방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 추출기간을 효과적으로 단축시키는 인퓨즈드 오일의 제조방법 및 이를 이용하여 피부진정 또는 아토피 개선 용도를 갖는 인퓨즈드 오일의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명의 인퓨즈드 오일 제조방법은 유화제인 레시틴을 이용하여 특정 순차적 단계를 거침으로써 약용식물의 유효성분을 파괴하지 않으면서 빠른 시간 내에 유효성분을 추출할 수 있다. 또한, 본 발명의 피부진정 또는 아토피 개선용 인퓨즈드 오일의 제조방법으로 제조된 인퓨즈드 오일의 경우 피부 장벽 손상에 따른 경표피수분손실을 감소시키고, 혈중 내 IgE 농도를 효과적으로 감소시킬 수 있는바, 기능성 화장료 소재 또는 의약품 소재로 유용하게 사용될 수 있다.

Description

피부진정과 아토피 개선용 인퓨즈드 오일의 제조방법{Preparation method of infused oil for skin soothing and atopy improvement}

본 발명은 추출기간을 효과적으로 단축시키는 인퓨즈드 오일의 제조방법 및 이를 이용하여 피부진정 또는 아토피 개선 용도를 갖는 인퓨즈드 오일의 제조방법에 관한 것이다.

인체의 피부는 물리적, 화학적으로 외계로부터 신체를 보호하는 동시에 전신의 대사에 필요한 생화학적 기능을 영위하는 생명유지에 필수 불가결한 기관이다. 사람의 피부에 나타나는 모든 이상 소견을 피부질환, 즉 피부병이라 한다. 피부는 신체의 표면을 덮고 있으므로 외계로부터 자극이나 여러 병원체에 직접 접촉될 기회가 많고, 체내로부터의 영향을 강하게 받는다. 더욱이 피부의 근소한 변화도 눈으로 보고 손으로 만질 수 있으며, 병변부의 일부를 채취하여 병리조직학적으로 검사하거나, 미생물의 검색 등의 검사를 하기 쉽고, 개개의 질병의 진단을 명확하게 하는 것이 용이하므로, 그 종류는 다른 장기에 비해 상당한 수에 이르며, 병명도 복잡 다양하다. 비교적 흔한 피부질환으로는 아토피 피부염, 접촉성 피부염, 지루성 피부염, 두드러기, 무좀, 완선, 건선, 단순포진, 대상포진, 피부 건조증, 주부 습진, 여드름 등이 있다.

피부 질환 중 하나인 아토피 피부염(atopic dermatitis, AD)은 면역학적, 유전적, 약리 및 생리학적, 그리고 환경적 등 다인자적 요인에 의해 발병되는데 특히, 병인과 발병기전은 감염, 스트레스, 계절과 기후 변화, 자극 및 알러젠 등이 주요 원인이다. 아토피 피부염은 만성적인 염증성 피부질환으로 영유아부터 성인에까지 광범위하게 유발된다.

아토피 피부염의 병인론은 아직 확실하게 밝혀지지 않았지만, 현재까지의 연구에 의하면 이뮤노글로블린 E(IgE) 항체의 증가에 따른 고감작 반응에 의하거나, 세포매개성 면역기능의 저하로 나타나는 T 림프구의 불균열 분화에 의한 기능적 결여, 피부에 존재하는 아드레날린 수용체의 차단 등이 발명의 원인으로 추정되고 있다.

아토피 피부염의 치료 및 관리를 위해, 대부분의 피부과 진료 시 피부 표면의 수분을 유지시켜주는 보습제와 함께 염증반응을 호전시키기 위하여 스테로이드 호르몬 즉, 국소 부신피질호르몬 제제를 동시에 처방하는 것이 일반적이다. 하지만, 국소 부신피질호르몬을 장기간 사용하는 경우, 피부 위축, 혈관 확장, 색소 탈실 및 팽창 선조의 발생 등 다양한 피부 부작용을 야기시킨다는 문제점이 있다.

이에 따라 안전성이 입증된 천연물로부터 치료효과가 높고 부작용이 적은 치료제를 찾고자 하는 시도가 많이 이루어지고 있다. 현재까지 알려진 항아토피 관련 물질로는 천연식물 및 한약재가 주를 이루고 있다.

한편, 인퓨즈드 오일(Infused oil)은 식물의 오일성분을 추출할 때 추출용매로써 오일을 사용하여 추출하여 수득한 오일을 일컫는다. 이러한 인퓨즈드 오일은 식물의 오일성분을 추출하기 위하여 용매로 사용한 오일의 기능성 성분과, 식물로부터 추출된 오일의 유효성분이 함께 시너지 효과를 내어 유효성분의 함량이 증대되고 기능성이 향상되어 화장품 제조시 다양한 제품에 적용할 수 있는 장점을 가진다.

그러나, 종래 인퓨즈드 오일의 제조공정은 유효성분을 기름에 녹아 나오게 하기 위하여 추출기간이 오래걸리는 단점이 있으며, 이러한 추출기간을 단축시키기 위하여 열을 가하는 공정을 거칠 수 있으나, 이러한 공정은 유효성분의 활성을 파괴시키는 문제점이 있다.

이에, 본 발명자는 약용식물의 유효성분을 파괴하지 않으면서 빠른 시간 내에 유효성분을 추출할 수 있는 공정을 찾고자 연구하였으며, 그 결과 유화제인 레시틴을 이용하여 특정 순차적 단계를 통해 인퓨즈드 오일을 제조하는 경우 오일에 열을 가하는 공정이 없이도 1일 내지 6일 동안의 매우 단축된 추출기간에도 유효성분이 충분히 기름에 녹아나올 수 있는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

한국등록특허 제10-1896908호 한국등록특허 제10-1943346호

따라서 본 발명의 목적은 추출기간을 효과적으로 단축시킬 수 있는 인퓨즈드 오일의 제조방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 제조방법을 이용하여 피부진정 또는 아토피 개선 활성이 우수한 인퓨즈드 오일의 제조방법을 제공하는 것이다.

상기와 같은 본 발명의 목적을 달성하기 위해서,

본 발명은 a) 레시틴과 1,2-헥산다이올을 혼합하여 1차 혼합물을 제조하는 단계; b) 상기 1차 혼합물에 수성(aqueous) 성분을 첨가한 후 혼합하여 2차 혼합물을 제조하는 단계; c) 상기 2차 혼합물에 약용식물 추출물을 첨가한 후 실온에서 교반하면서 3차 혼합물을 제조하는 단계; d) 상기 3차 혼합물에 오일을 첨가한 후 교반하면서 4차 혼합물을 제조하는 단계; 및 e) 상기 4차 혼합물을 1일 내지 6일간 숙성시키는 단계를 포함하는, 인퓨즈드 오일의 제조방법을 제공한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 레시틴은 5 내지 10중량%로 혼합될 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 수성(aqueous) 성분은 5 내지 15중량%로 첨가될 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 약용식물 추출물은 1 내지 5중량%로 첨가될 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 오일은 70 내지 80중량%로 첨가될 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 인퓨즈드 오일의 제조방법은 추출기간을 단축시킬 수 있다.

또한, 본 발명은 ⅰ) 레시틴과 1,2-헥산다이올을 혼합하여 1차 혼합물을 제조하는 단계; ⅱ) 상기 1차 혼합물에 캐모마일꽃수 및 알로에베라잎즙을 첨가한 후 혼합하여 2차 혼합물을 제조하는 단계; ⅲ) 상기 2차 혼합물에 약용식물 추출물을 첨가한 후 실온에서 교반하면서 3차 혼합물을 제조하는 단계; ⅳ) 상기 3차 혼합물에 오일을 첨가한 후 교반하면서 4차 혼합물을 제조하는 단계; 및 ⅴ) 상기 4차 혼합물을 1일 내지 6일간 숙성시키는 단계를 포함하는, 피부진정 또는 아토피 개선용 인퓨즈드 오일의 제조방법을 제공한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 약용식물 추출물은 약모밀 추출물, 맥아 추출물, 당느릅나무껍질 추출물, 프리클리페어 추출물, 창질경이잎 추출물, 댑싸리 추출물, 쇠비름 추출물 및 프로폴리스로 이루어질 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 오일은 동백오일, 호호바오일 및 올리브오일로 이루어질 수 있다.

또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 피부진정 또는 아토피 개선용 인퓨즈드 오일일 제공한다.

본 발명의 인퓨즈드 오일 제조방법은 유화제인 레시틴을 이용하여 특정 순차적 단계를 거침으로써 약용식물의 유효성분을 파괴하지 않으면서 빠른 시간 내에 유효성분을 추출할 수 있다. 또한, 본 발명의 피부진정 또는 아토피 개선용 인퓨즈드 오일의 제조방법으로 제조된 인퓨즈드 오일의 경우 피부 장벽 손상에 따른 경표피수분손실을 감소시키고, 혈중 내 IgE 농도를 효과적으로 감소시킬 수 있는바, 기능성 화장료 소재 또는 의약품 소재로 유용하게 사용될 수 있다.

도 1은 본 발명의 피부진정 또는 아토피 개선용 인퓨즈드 오일의 제조 공정을 계략적으로 나타낸 것이다.
도 2는 아토피 피부염 동물 모델에서 본 발명 <실시예 1>의 인퓨즈드 오일 또는 <비교예 1>의 인퓨즈드 오일 처리(도포)에 따른 경표피수분손실을 측정하여 그래프로 나타낸 것이다(Normal: 정상 마우스, Vehicle: 음성대조군, BM: 양성대조군).
도 3은 아토피 피부염 동물 모델에서 본 발명 <실시예 1>의 인퓨즈드 오일 또는 <비교예 1>의 인퓨즈드 오일 처리(도포)에 따른 피부 두께를 측정하여 그래프로 나타낸 것이다(Normal: 정상 마우스, Vehicle: 음성대조군, BM: 양성대조군).
도 4는 아토피 피부염 동물 모델에서 본 발명 <실시예 1>의 인퓨즈드 오일 또는 <비교예 1>의 인퓨즈드 오일 처리(도포)에 따른 혈중 IgE 농도를 측정하여 그래프로 나타낸 것이다(Normal: 정상 마우스, Vehicle: 음성대조군, BM: 양성대조군).

본 발명은 a) 레시틴과 1,2-헥산다이올을 혼합하여 1차 혼합물을 제조하는 단계; b) 상기 1차 혼합물에 수성(aqueous) 성분을 첨가한 후 혼합하여 2차 혼합물을 제조하는 단계; c) 상기 2차 혼합물에 약용식물 추출물을 첨가한 후 실온에서 교반하면서 3차 혼합물을 제조하는 단계; d) 상기 3차 혼합물에 오일을 첨가한 후 교반하면서 4차 혼합물을 제조하는 단계; 및 e) 상기 4차 혼합물을 1일 내지 6일간 숙성시키는 단계를 포함하는, 인퓨즈드 오일의 제조방법을 제공함에 그 특징이 있다.

본 명세서에서 언급하는 ‘인퓨즈드 오일(Infused oil, 침출유)’란 식물성 오일에 허브 또는 식물의 꽃이나 뿌리를 담궈 열을 가하거나, 햇빛에 몇 주간 우려내고 마지막 찌꺼기를 걸려 사용하는 오닐로서, 즉 우려낸 오일을 의미한다. 이러한 인퓨즈드 오일은 천연 식물에서 추출된 비타민 함량이 매우 높기 때문에 피분에 풍부한 수분과 영양을 공급하여 매끄러운 피부를 만들어 주며, 별도로 색소를 첨가하지 않아도 천연의 색소가 우러나온다. 인퓨즈드 오일은 세인존스워트(성요한풀)나 카렌듈라가 대표적으로 알려져 있다.

종래 인퓨즈드 오일의 제조공정은 유효성분을 기름에 녹아 나오게 하기 위하여 추출기간이 오래걸리는 단점이 있으며, 이러한 추출기간을 단축시키기 위하여 열을 가하는 공정을 거칠 수 있으나, 이러한 공정은 유효성분의 활성을 파괴시키는 문제점이 있어 왔다.

본 발명에서는 상기와 같은 종래 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로, 상기 a) 내지 e)단계를 순차적 단계를 거침으로써 약용식물의 유효성분을 파괴하지 않으면서 빠른 시간 내에 유효성분을 추출하는 특징으로 가진다.

본 발명의 a) 단계는 유화제와 방부제를 혼합하여 1차 혼합물을 제조하는 단계로서, 자세하게는 물-기름(W-O) 계면을 형성할 수 있는 유중수적형(water in oil: W/O형) 유화제인 레시틴과 방부제인 1,2-헥산다이올을 혼합하여 1차 혼합물을 제조하는 단계이다.

본 발명의 일구체예에서, 상기 레시틴은 5 내지 10중량%로 혼합될 수 있으며, 바람직하게는 6 내지 8중량%로 혼합될 수 있다.

본 발명의 b) 단계는 레시틴 유화제 조성물에 수성(aqueous) 성분을 첨가 혼합하는 단계로서, 자세하게는 상기 a) 단계를 통해 제조한 1차 혼합물에 수성(aqueous) 성분을 첨가한 후 혼합하여 2차 혼합물을 제조하는 단계이다.

본 명세서에서 언급하는 ‘수성(aqueous) 성분’이라 함은 물(water)의 성질을 가진 성분을 의미한다.

본 발명의 일구체에에서, 상기 수성(aqueous) 성분은 5 내지 15중량%로 첨가될 수 있다.

본 발명의 c) 단계는 약용식물 추출물을 첨가하여 혼합하는 단계로서, 자세하게는 상기 b) 단계를 통해 제조한 2차 혼합물에 약용식물 추출물을 첨가한 후 실온에서 교반하면서 3차 혼합물을 제조하는 단계이다.

본 명세서에서 언급하는 ‘약용식물’이라 함은 인퓨즈드 오일에서 약리작용을 부여할 수 있는 허브 또는 식물을 의미한다.

본 발명의 일구체에에서, 상기 약용식물 추출물은 1 내지 5중량%로 첨가될 수 있다.

본 발명의 d) 단계는 오일을 첨가하여 혼합하는 단계로서, 자세하게는 상기 c) 단계를 통해 제조한 3차 혼합물에 오일을 첨가한 후 교반하면서 4차 혼합물을 제조하는 단계이다.

본 명세서에서 언급하는 ‘오일’이라 함은 유효성분을 우려내는 용매제로서, 대체적으로 식물성이고 저장기간이 길고 안정적인 오일을 의미한다. 예를 들어, 올리브 오일, 마카다미아 오일, 해바라기씨 오일, 샤풀라워 오일, 스윗아몬드 오일, 피너트 오일, 홍화씨 오일, 동백오일, 호호바오일 등을 예시할 수 있으나 특별히 이를 한정하는 것은 아니다.

본 발명의 일구체에에서, 상기 오일은 70 내지 80중량%로 첨가될 수 있다.

본 발명의 상기 a) 내지 e) 단계를 포함하는 인퓨즈드 오일의 제조방법은 종래 기술 대비 추출기간을 효과적으로 단축시킬 수 있다.

또한, 본 발명은 ⅰ) 레시틴과 1,2-헥산다이올을 혼합하여 1차 혼합물을 제조하는 단계; ⅱ) 상기 1차 혼합물에 캐모마일꽃수 및 알로에베라잎즙을 첨가한 후 혼합하여 2차 혼합물을 제조하는 단계; ⅲ) 상기 2차 혼합물에 약용식물 추출물을 첨가한 후 실온에서 교반하면서 3차 혼합물을 제조하는 단계; ⅳ) 상기 3차 혼합물에 오일을 첨가한 후 교반하면서 4차 혼합물을 제조하는 단계; 및 ⅴ) 상기 4차 혼합물을 1일 내지 6일간 숙성시키는(실온에서 보관하는) 단계를 포함하는, 피부진정 또는 아토피 개선용 인퓨즈드 오일의 제조방법을 제공한다.

본 발명의 일구체예에서, 상기 약용식물 추출물은 약모밀 추출물, 맥아 추출물, 당느릅나무껍질 추출물, 프리클리페어 추출물, 창질경이잎 추출물, 댑싸리 추출물, 쇠비름 추출물 및 프로폴리스로 이루어질 수 있다.

본 발명의 다른 구체예에서, 상기 오일은 동백오일, 호호바오일 및 올리브오일로 이루어질 수 있다.

또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 피부진정 또는 아토피 개선용 인퓨즈드 오일을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 피부진정 또는 아토피 개선용 인퓨즈드 오일을 유효성분으로 포함하는 기능성 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 인퓨즈드 오일은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.00001 내지 20.0중량%로 포함될 수 있다.

상기 인퓨즈드 오일의 함량이 0.00001 중량% 미만인 경우에는 본래 목적하는 피부진정 또는 아토피 개선 효과를 충분하게 달성할 수 없어 바람직하지 못하며, 함량이 20 중량%를 초과하는 경우에는 화장료의 제형 안정성에 문제가 발생할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 상기 인퓨즈드 오일 이외에 본 발명의 효과를 해치지 않는 범위 내에서 보습제, 증점제, 계면활성제, 유상기제, 방부제, 산화방지제, 알코올, 향료, pH 조절제, 천연추출물 등은 물론 피부진정 또는 아토피 개선 효과를 배가시키기 위한 화학적 성분을 적당한 양으로 배합할 수 있다.

한편, 상기 인퓨즈드 오일을 함유하여 제조된 화장료 조성물은 화장수류, 에센스류, 스킨류, 로션류, 크림류, 삼푸류와 같은 다양한 제형으로 제조될 수 있으며, 구체적으로는 헤어 컨디셔너, 헤어 토닉, 헤어 크림, 헤어 로션, 헤어 오일, 헤어 스프레이, 샴푸 또는 린스의 제형으로 제조될 수 있으며, 통상적인 화장료 제조법을 이용하여 제조할 수 있다.

또한, 본 발명은 상기 인퓨즈드 오일을 유효성분으로 포함하는 피부진정 또는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제공한다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.

< 실시예 1>

본 발명의 피부진정 및 아토피 개선을 위한 인퓨즈드 오일 제조

<1-1> 소재 준비

본 발명의 인퓨즈드 오일 제조에 사용된 소재의 구입처는 다음과 같다.

인퓨즈드 오일 제조에 사용된 성분 및 이의 구입처

구성성분	구입처
레시틴	주식회사 아미코스
1, 2-헥산티올	주식회사 아미코스
캐모마일꽃수	주식회사 아미코스
알로에베라잎즙	주식회사 아미코스
약모밀추출물	주식회사 아미코스
맥아추출물	주식회사 아미코스
당느릅나무껍질추출물	주식회사 아미코스
프리클리페어 추출물	주식회사 아미코스
창질경이잎 추출물	주식회사 아미코스
댑싸리 추출물	주식회사 아미코스
쇠비름 추출물	주식회사 아미코스
프로폴리스 추출물	주식회사 아미코스
동백오일	주식회사 아미코스
호호바오일	주식회사 아미코스
올리브오일	주식회사 아미코스

<1-2> 본 발명의 인퓨즈드 오일 제조

본 발명의 인퓨즈드 오일을 제조하기 위하여 먼저, 레시틴(7중량%) + 1,2-헥산다이올(2.7중량%)을 혼합하였다. 이후, 상기 혼합물에 캐모마일꽃수(6.9중량%)와 알로에베라잎즙(6.1중량%)를 넣고 혼합한 다음, 여기에 8가지 약용식물 추출분말(2.4중량% = 약모밀 추출물, 맥아 추출물, 당느릅나무껍질 추출물, 프리클리페어 추출물, 창질경이잎 추출물, 댑싸리 추출물, 쇠비름 추출물 및 프로폴리스 추출물)을 넣고 실온에서 5000rpm으로 교반하면서 식물성 추출분말을 녹여주었다. 이후, 동백오일(37중량%), 호호바오일(10중량%), 올리브오일(27.9중량%)을 담고 다시 실온에서 5000rpm으로 교반하였다. 최종적으로 상기 원료를 밀봉하여 일주일간 숙성함으로써 본 발명의 인퓨즈드 오일을 제조하였다. 참고로, 상기 8가지의 약용식물 추출분말은 각 동량의 비로 혼합하여 사용하였다.

< 비교예 1>

종래 방법을 통한 인퓨즈드 오일 제조

동백오일(40중량%), 호호바오일(15중량%) 및 올리브오일(30중량%)에 10가지 약용식물 분말(5중량% = 약모밀 추출물, 맥아 추출물, 당느릅나무껍질 추출물, 프리클리페어 추출물, 창질경이잎 추출물, 댑싸리 추출물, 쇠비름 추출물 및 프로폴리스 추출물)을 넣고 혼합하여 32~38℃의 온도에서 3~5주 동안 교반하면서 인퓨즈드 오일을 제조하였다. 참고로, 상기 10가지의 약용식물 추출분말은 각 동량의 비로 혼합하여 사용하였다.

< 실험예 1>

본 발명의 인퓨즈드 오일의 아토피 피부염 억제 효과

<1-1> 아토피 피부염 동물 모델 제작 및 인퓨즈드 오일 처리

본 발명의 인퓨즈드 오일의 아토피 피부염 억제 효과를 알아보기 위하여 피부염을 인위적으로 유발시키는 합텐(hapten) 형성 물질인 옥사졸론(oxazolone)을 BALB/c 마우스(Orient Bio Inc., Seongnam, Republic of Korea)의 등 부위에 도포하여 아토피 피부염 유사 마우스 모델을 만든 후, 본 발명의 인퓨즈드 오일의 처리에 따른 아토피 피부염 증상에 미치는 영향을 살펴보았다.

먼저 마우스의 등 부위를 깨끗하게 제모한 후, 10, 0.3% 농도의 옥사졸론 용액(에탄올 용매에 옥사졸론을 10%, 0.3%녹인 용액)을 마우스의 등 부위에 16일 동안 반복적으로 도포하여 아토피 피부염을 유발하였으며, 도포 7일부터 16일까지는 매일 2회 상기 <실시예 1>을 통해 제조된 본 발명의 인퓨즈드 오일 또는 <비교예 1>을 통해 제조된 인퓨즈드 오일을 50 μl씩 각각 피부에 처리하였다. 한편, 양성대조군으로 스테로이드 가운데 소염 작용이 가장 큰 베타메타손(betamethason)을 0.01% 농도로 사용하여 실험하였다. 마지막 처리 후 24시간이 경과되었을 때 마우스를 희생하여 하기 실험에 사용하였다.

<1-2> 피부 장벽 손상에 따른 경표피수분손실 측정

본 실험에서 TEWL 측정은 vapometer (Delfin®) 를 이용하며 단위면적당, 시간당 소실되는 수분양의 양(g/m²h)의 단위로 측정하였다.

그 결과 도 2에서 나타낸 바와 같이, 아토피 피부염을 유발한 마우스에 본 발명의 인퓨즈드 오일을 처리(도포)한 경우 경표피수분손실 정도가 감소되는 것을 확인할 수 있었다. 상기와 같은 결과는, 본 발명의 인퓨즈드 오일 처리(도포)가 피부장벽의 손상을 줄이고 피부수분손실을 효과적으로 줄임으로써 아토피 피부염 증상 유발을 억제할 수 있음을 나타내는 것이다. 특히, 본 발명 <실시예 1>의 인퓨즈드 오일이 <비교예 1>의 인퓨즈드 오일 대비 피부수분손실을 더욱 효과적으로 감소시킬 수 있음을 확인하였다.

<1-3> 피부 두께 측정

본 실험에서는 염증반응의 지표로 표피의 과증식화 정도를 평가하기 위하여 folding method로 caliper이용하여 두께(mm)를 측정하였다.

그 결과 도 3에서 나타낸 바와 같이, 아토피 피부염을 유발한 마우스에 본 발명의 인퓨즈드 오일을 처리(도포)한 경우 마우스의 표피층 두께가 감소되는 것을 확인할 수 있었다. 특히, <비교예 1>의 인퓨즈드 오일 처리한 경우 마우스의 표피층 두께 감소 효과가 크지 않았으나, 본 발명 <실시예 1>의 인퓨즈드 오일을 처리한 경우에는 마우스의 표피층 두께가 유의하게 감소되는 것으로 나타났다.

<1-4> 혈중 IgE 농도 측정

실험 종료일에 마우스의 안와정맥에서 채혈한 후 5,000 rpm, 4℃에서 3분 동안 원심분리하여 혈청을 분리하였다. 실험에 사용하기 전까지 -70℃ 냉동고에서 보관하였다가 녹여서 실험에 사용하였다. Hairless mice의 혈청 IgE의 농도는 각각 마우스용 ELISA 키트 (SHIBAYAGI Co., Ltd, Japan)을 사용하여 측정하였다. IgE 는 IgE 마우스용 ELISA 키트(SHIBAYAGI Co., Ltd, Japan)의 방법에 따라 정량하였다. 모든 시약은 상온으로 맞추어 준비 후 즉시 사용하였다.

자세하게는, 세척 버퍼로 3회 플레이트를 씻어낸 후 IgE 표준 용액이나 샘플 용액(sample 5μl + buffer 45μl)을 50μl씩 각 웰에 분주하고 마이크로플레이트 쉐이커(microplate shaker)로 가볍게 섞은 후, 두 시간 동안 실온(20-25℃)에서 배양시켜 반응시킨 후 완충용액으로 플레이트를 3회 세척하였다. 비오틴-컨쥬게이트된 항-IgE 항체 50μl를 각 웰에 분주하고 마이크로플레이트 쉐이커(microplate shaker)로 가볍게 섞은 후, 두 시간 동안 실온에서 배양시켜 반응시킨 후 세척버퍼(washing buffer)로 플레이트를 3회 세척하고, 각 웰에 HRP-아비딘 용액 50μl를 넣고 마이크로플레이트 쉐이커(microplate shaker)로 가볍게 섞은 후 한 시간동안 실온에서 배양시켜 반응시키고, 크로마제닉 기질 용액(chromagenic substrate solution) 50μl를 넣고 마이크로플레이트 쉐이커 (microplate shaker)로 가볍게 섞은 후 20분 동안 실온에서 배양시켜 반응시킨 후, 각 웰에 반응 중단제 (reaction stopper) 50 μl를 넣어 변색이 멈추게 잘 섞어 준 후 30분 안에 450nm에서 흡광도를 측정하였다.

그 결과 도 4에서 나타낸 바와 같이, 아토피 피부염을 유발한 마우스에 본 발명 <실시예 1>의 인퓨즈드 오일을 처리(도포)한 경우 음성대조군(vehicle) 및 <비교예 1>의 인퓨즈드 오일 처리군과 비교하여 혈중 내 IgE 농도가 두드러지게 감소된 것을 확인할 수 있었다. 특히, 베타메타손(betamethasone)을 처리한 양성대조군과 비교하여, 본 발명 <실시예 1>의 인퓨즈드 오일을 처리한 실험군에서 혈중 내 IgE 농도 더욱 감소된 것으로 나타났다.

< 실험예 2>

본 발명의 인퓨즈드 오일의 피부 자극도 실험

자극성 시험용 반창고를 이용하여 본 발명의 인퓨즈드 오일의을 반창고의 거즈 부분에 1ml 흡수시킨 후 사람의 팔 윗부분에서 붙인다. 붙인 후 48시간이 경과하여 반창고를 제거하고 1시간 후 피부를 관찰하였다. 평가방법은 아래 평가표에 의해 평가하였다.

판정은 각 실시예별 50명(총 100명)을 대상으로 실험하여 그 결과를 하기 표에 나타내었다.

피부 자극도 평가표

등급	상태
0	피부에 대한 반응이 전혀 없다
1	부분적으로 피부 홍반이 일어난다
2	전반적으로 피부 홍반이 일어난다
3	피부 홍반이 일어나며 피부가 부어 오른다
4	피부 홍분이 일어나며 피부가 심하게 갈라진다

본 발명의 인퓨즈드 오일의 피부 자극도

평가항목	비교예 1	실시예 1
피부자극도	0.1	0.1

상기 표 3에서 나타낸 바와 같이, <비교예 1> 및 <실시예 1>의 인퓨즈드 오일의 경우 피부자극도가 거의 없는 것으로 나타나, 사용시 피부에 안정한 것을 확인할 수 있었다.

< 실험예 3>

본 발명의 인퓨즈드 오일의 보습력 , 상처 치유 효과, 가려움증 완화 효과, 피부강화 및 아토피 피부 증산 완화 효과 실험

본 발명의 인퓨즈드 오일의 보습력, 상처 치유 효과, 가려움증 증상 완화 효과, 피부강화, 아토피 피부 증상 완화에 대하여 50 여명의 아토피 피부염을 가진 환자를 25명씩 나누어 2군으로 하여 아침, 저녁 두 번에 걸쳐서 아토피 피부염 증상을 보이는 부위에 사용하게 하여 효과를 평가하였다.

이 때 평가는 매우우수 10점, 우수 8점, 보통 6점, 나쁨 4점, 매우나쁨 2점의 기준에 따라 평가하였고 이에 따른 결과를 표 4에 나타냈다.

본 발명의 인퓨즈드 오일의 보습력, 상처 치유 효과, 가려움증 완화 효과, 피부강화 및 아토피 피부 증산 완화 효과 평가

평가항목	비교예 1	실시예 1
보습력	8.6	9.0
상처 치유	7.0	9.2
가려움증 완화	5.0	9.2
피부강화	7.0	8.8
아토피 피부 증상 완화	5.0	9.4

상기 표 4에서 나타낸 바와 같이, 본 발명의 <실시예 1>의 인퓨즈드 오일의 경우 <비교예 1>과 대비하여 보습력, 상처 치유 효과, 가려움증 완화 효과, 피부강화 및 아토피 피부 증상 완화 효과가 우수한 것을 확인할 수 있었다.

이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims (10)

1. 삭제
2. 삭제
3. 삭제
4. 삭제
5. 삭제
6. 삭제
7. ⅰ) 레시틴과 1,2-헥산다이올을 혼합하여 1차 혼합물을 제조하는 단계;
   ⅱ) 상기 1차 혼합물에 캐모마일꽃수 및 알로에베라잎즙을 첨가한 후 혼합하여 2차 혼합물을 제조하는 단계;
   ⅲ) 상기 2차 혼합물에 약용식물 추출물을 첨가한 후 실온에서 교반하면서 3차 혼합물을 제조하는 단계;
   ⅳ) 상기 3차 혼합물에 오일을 첨가한 후 교반하면서 4차 혼합물을 제조하는 단계; 및
   ⅴ) 상기 4차 혼합물을 1일 내지 6일간 숙성시키는 단계를 포함하는, 피부진정 또는 아토피 개선용 인퓨즈드 오일의 제조방법.
8. 제7항에 있어서,
   상기 약용식물 추출물은 약모밀 추출물, 맥아 추출물, 당느릅나무껍질 추출물, 프리클리페어 추출물, 창질경이잎 추출물, 댑싸리 추출물, 쇠비름 추출물 및 프로폴리스로 이루어진 것을 특징으로 하는 방법.
9. 제7항에 있어서,
   상기 오일은 동백오일, 호호바오일 및 올리브오일로 이루어진 것을 특징으로 하는 방법.
10. 제7항 내지 제9항 중 어느 한 항의 방법으로 제조된 피부진정 또는 아토피 개선용 인퓨즈드 오일.

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