KR102286683B1

KR102286683B1 - (2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤을 함유하는 피부 미백용 조성물

Info

Publication number: KR102286683B1
Application number: KR1020140171862A
Authority: KR
Inventors: 박준성; 김동현; 이옥찬; 황경환; 홍용덕
Original assignee: (주)아모레퍼시픽
Priority date: 2014-12-03
Filing date: 2014-12-03
Publication date: 2021-08-09
Also published as: KR20160066732A

Abstract

본 발명은 (2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤을 함유하는 미백용 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 (2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤을 사용함으로써 현저하게 우수한 미백 효과를 나타내며, 특히 기미, 주근깨와 같은 색소 침착 증상 또는 피부의 칙칙함을 개선하고, 피부색을 균일하고 밝게 보일 수 있게 하는 조성물에 관한 것이다.

Description

(2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤을 함유하는 피부 미백용 조성물{Composition for skin whitening containing (2S)-1-O-linolenoyl-3-O-β-D-galactopyranosyl-sn-glycerol}

사람의 피부색은 멜라닌 색소를 만드는 멜라노사이트(melanocyte)의 활동성, 혈관의 분포, 피부의 두께, 및 카로티노이드, 빌리루빈 등 인체 내외의 색소 함유 유무와 같은 여러 요인들에 의해 결정된다. 특히 멜라노사이트에서 타이로시나제(tyrosinase) 등의 여러 효소가 작용하여 생성되는 멜라닌이라는 흑색 색소가 가장 중요한 요인이다. 멜라닌 색소의 형성에는 유전적 요인, 호르몬 분비, 스트레스 등과 관련된 생리적 요인 및 자외선 조사 등과 같은 환경적 요인이 영향을 미친다. 멜라닌은 피부에 존재하여 자외선 등으로부터 신체를 보호하는 중요한 기능을 하지만 멜라닌이 과잉생산됨으로써 색소침착 및 피부노화를 촉진하고 피부암 유발에도 주요한 작용을 하는 것으로 알려져 있다. 피부색소 이상 침착 증상과 자외선 노출 등에 의해 발생된 과도한 멜라닌 색소 침착을 치료 또는 경감시켜주기 위해서 이전부터 아스코르빈산(ascorbic acid), 코지산(kojic adcid), 알부틴(arbutin), 하이드로퀴논(hudroquinone), 글루타치온(glutathione) 또는 이들의 유도체, 타이로시나제 저해활성을 가진 물질들을 화장료나 의약품에 배합하여 사용해 왔는데, 이들은 불충분한 미백 효과, 피부에 대한 안전성 문제, 및 화장료에 배합시 제형 내에서의 안정성 문제 등으로 인해 그 사용이 제한되고 있다.

한편, (2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤은 항암, 항염 등의 효과를 가진다고 알려져 있으나(Cha B-J et al., Glycosyl glycerides from hydrophobic Panax ginseng inhibited NO production in LPS-stimulated RAW264.7 cells, Journal of Ginseng Research (2014), doi:10.1016/j.jgr.2014.10.005), 상기 화합물이 그 이외에 피부 상태 개선과 관련하여 나타내는 효능에 대해서는 아직 구체적으로 알려진 바가 없다.

한국 공개특허 10-2012-0083943호(2012년 7월 27일 공개)

Cha B-J et al., Glycosyl glycerides from hydrophobic Panax ginseng inhibited NO production in LPS-stimulated RAW264.7 cells, Journal of Ginseng Research (2014), doi:10.1016/j.jgr.2014.10.005

이에 본 발명자들은 우수한 피부 미백 효과 등을 나타내는 물질을 찾고자 연구하던 중, (2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤이 우수한 피부 미백 효과를 제공할 수 있으면서 피부에 대한 자극은 작음을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명은 (2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤을 사용함으로써 우수한 피부 미백 효과를 나타내는 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하기 화학식 1로 표현되는 화합물인 (2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤을 유효성분으로 함유하는 미백용 피부 외용제 조성물 또는 약학 조성물을 제공한다.

본 발명의 조성물은 (2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤을 함유함으로써 우수한 피부 미백 효과를 제공하여 기미, 주근깨와 같은 색소 침착 증상을 감소시키고, 피부 칙칙함을 개선시키며, 피부색을 균일하고 밝게 보일 수 있게 한다.

본 발명의 조성물은 (2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤((2S)-1-O-linolenoyl-3-O-β-D-galactopyranosyl-sn-glycerol)을 유효성분으로 함유하여, 우수한 피부 미백 효과를 제공한다.

본 발명에서 사용되는 (2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤은 하기 화학식 1의 구조를 가지며, 분자량은 514인 화합물이다.

[화학식 1]

본 발명에서 사용되는 (2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤은 글리코실 글리세라이드에 관한 논문[Cha B-J et al., Glycosyl glycerides from hydrophobic Panax ginseng inhibited NO production in LPS-stimulated RAW264.7 cells, Journal of Ginseng Research (2014), doi:10.1016/j.jgr.2014.10.005]에 공지된 방법으로 분리하였으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 식물에서 추출될 수도 있고, 당업계에 공지된 방법에 따라 합성하여 사용할 수도 있으며, 상업적으로 시판되는 것을 사용할 수도 있다.

본 발명에 의한 조성물은 (2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤을 조성물 총 중량에 대하여 0.001~50중량%, 바람직하게는 0.01~30 중량%, 보다 바람직하게는 0.1~10% 중량%의 양으로 함유할 수 있다. 상기 (2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤의 함량이 0.001중량% 미만이면 상기 성분에 의한 효능, 효과가 미약하고, 50중량%를 초과하면 피부 안전성 또는 제형상의 문제가 있기 때문이다.

본 발명의 조성물은 피부 외용제 조성물, 특히 화장료 조성물로서 제형화될 수 있으며, 화장품학 또는 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유하여 제형화될 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 국소 적용에 적합한 모든 제형으로 제공될 수 있으며, 예를 들어 용액, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 유상에 수상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 고체, 겔, 분말, 페이스트, 포말(foam) 또는 에어로졸 조성물의 제형으로 제공될 수 있다. 구체적으로 본 발명의 조성물은 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 이러한 제형의 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 조성물은 상기한 물질 이외에 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서, 바람직하게는 주 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분들을 포함할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 조성물은 보습제, 에몰리언트제, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, pH 조정제, 유기 및 무기 안료, 향료, 냉감제 또는 제한제를 더 포함할 수 있다. 상기 성분의 배합량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 당업자가 용이하게 선정 가능하며, 그 배합량은 조성물 총 중량에 대하여 0.01~5중량%, 구체적으로 0.01~3중량%일 수 있다.

또한, 본 발명의 조성물은 약학 조성물로서 제형화될 수 있다. 본 발명에 따른 조성물을 의약품에 적용할 경우에는, 본 발명에서 사용되는 유효성분에 상용되는 무기 또는 유기의 담체를 가하여 고체, 반고체 또는 액상의 형태로 경구 투여제 혹은 비경구 투여제로 제형화할 수 있으며, 본 발명에 따른 상기 약학 조성물은 경구, 비경구, 직장, 국소, 경피, 정맥 내, 근육 내, 복강 내, 피하 등으로 투여될 수 있다.

상기 경구 투여를 위한 제형으로서는 정제, 환제, 과립제, 캡슐제, 산제, 세립제, 분제, 유탁제, 시럽제, 펠렛제 등을 들 수 있다. 또한, 상기 비경구 투여를 위한 제형으로는 주사제, 점적제, 연고, 로션, 스프레이, 현탁제, 유제, 좌제 등을 들 수 있다. 본 발명에 따른 조성물은 상법에 따라 실시함으로써, 유효성분을 용이하게 제형화할 수 있으며, 이 때 계면활성제, 부형제, 착색료, 향신료, 보존료, 안정제, 완충제, 현탁제, 기타 상용하는 보조제를 적당히 사용할 수 있다.

본 발명의 약학 조성물의 유효 성분의 투여 용량은 투여받을 대상의 연령, 성별, 체중, 병리 상태 및 그 심각도, 투여 경로 또는 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 적당한 용량의 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 이의 1일 투여 용량은 예를 들어 0.1mg/kg/일 내지 100mg/kg/일, 보다 구체적으로는 5mg/kg/일 내지 50mg/kg/일이 될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

[참고예 1] (2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤의 준비

본 발명의 조성물의 효능을 실험하기 위한 (2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤은 선행기술(Cha B-J et al., Glycosyl glycerides from hydrophobic Panax ginseng inhibited NO production in LPS-stimulated RAW264.7 cells, Journal of Ginseng Research (2014), doi:10.1016/j.jgr.2014.10.005)에 공지된 방법으로 인삼 추출물로부터 분리하여 사용하였다.

[시험예 1] 티로시나제 저해 효과

티로시나제 효소는 버섯류(Mushroom)로부터 추출된 것으로 시그마(SIGMA)사의 것을 사용하였다. 먼저 기질인 티로신을 증류수에 용해시켜 0.3mg/ml의 용액으로 만들고 그 용액을 1.0ml씩 시험관에 넣은 다음, 여기에 포타슘-포스페이트 완충용액(0.1mol 농도, pH 6.8) 1.0ml 및 증류수 0.7ml를 첨가하였다.

상기 참고예 1의 (2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤을 에탄올 용액에 적당한 농도로 혼합하여 준비한 시료액 0.2ml를 반응액에 넣은 다음 37℃ 항온조에서 10분 동안 반응시켰다. 이때 음성대조군(무첨가)으로는 시료액 대신 용매만을 0.2ml 넣은 것으로 준비하였고, 양성대조군으로는 아스코르브산을 사용하였다. 이 반응액에 2500유닛/ml의 티로시나제 용액 0.1ml씩을 넣고 다시 37℃ 항온조에서 10분 동안 반응시켰다. 이 반응액이 든 시험관을 얼음물 속에 넣어서 급냉시켜 반응을 중지시키고 광전분광분석계로 파장 475nm에서의 흡광도를 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다. 각각의 티로시나제 저해 효과는 하기 수학식 1로 산출하였다.

시험물질	티로시나제 저해율(%)
대조군(무첨가)	0
아스코르브산	52
(2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤	42

상기 표 1의 결과에서, 본 발명에서 사용되는 (2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤의 티로시나제 억제율이 우수함을 확인할 수 있다.

[시험예 2] B16/F10 멜라노마 세포를 이용한 멜라닌 생성 억제 효과

본 시험예에 사용된 B16/F10 멜라노마는 마우스에서 유래한 세포주이며, 멜라닌이라는 흑색색소를 분비하는 세포의 악성화로 생긴 암세포이다. 이 세포의 인공 배양 중에 시험물질을 처리하여 멜라닌 생성이 감소하는 정도를 비교 평가 하였다. 본 시험예에서 사용된 B16/F10 멜라노마는 한국세포주은행(KCLB No: 8008)으로부터 분양받아 사용하였다.

B16/F10 멜라노마의 멜라닌 생합성 억제효과 측정은 다음과 같이 행하였다. B16/F10 멜라노마를 6 웰 플레이트에 5×10⁵/웰로 분주하여 37℃, 5% CO₂ 배양기(MCO-20AIC, Sanyo)에서 약 24시간동안 10% FBS(fetal bovine serum)를 함유한 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)에서 배양하였다. FBS가 없는 새로운 DMEM 배지에 시험물질로서 상기 참고예 1의 (2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤을 0.1중량%로 첨가하고 72시간 경과시켰다. 트립신-EDTA를 처리하고 원심분리하여 세포를 분리한 후, DMSO를 함유한 1N NaOH를 이용해 95℃에서 멜라닌을 용해하였다. ELISA 리더(DIbiotech, Korea)를 활용하여 405nm에서 흡광도를 측정하였다. 시험물질을 첨가하지 않은 세포를 대조군으로 하여 대조군에서의 멜라닌 함량과 비교하여 각 시험물질의 멜라닌 생성 저해 정도를 측정하였다. 수학식 2에 따라 멜라닌 생성 억제율을 계산하여 그 결과를 표 2에 나타내었다.

시험물질	멜라닌생성 저해율(%)
대조군(무첨가)	0
코지산	53
(2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤	42

상기 표 2의 결과에서, 본 발명에서 사용되는 (2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤의 멜라닌 생성 억제율이 우수함을 확인할 수 있다.

[제형예 1 및 비교제형예 1]

하기 표 3의 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양크림을 제조하였다(단위: 중량%).

배합성분	제형예 1	비교제형예 1
정제수	To 100	To 100
(2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤	0.1	-
식물성 경화유	1.50	1.50
스테아린산	0.60	0.60
글리세롤 스테아레이트	1.00	1.00
스테아릴 알코올	2.00	2.00
폴리글리세릴-10 펜타스테아레이트 & 베헤닐 알코올 &소디움 스테아로일 락틸에이트	1.00	1.00
아라키딜 베헤닐 알코올 &아라키딜글루코사이드	1.00	1.00
세틸아릴 알코올 & 세테아릴글루코사이드	2.00	2.00
PEG-100 스테아레이트 & 글리세롤올레이트 & 프로필렌글리콜	1.50	1.50
카프릴릭/카르릭 트리 글리세라이드	11.00	11.00
사이클로메디콘	6.00	6.00
방부제, 향	적량	적량
트리에탄올 아민	0.1	0.1

[시험예 3] 피부톤 개선 효과

(2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤의 피부톤 개선 효과를 알아보기 위하여 20명의 피험자를 10명씩 2개 군으로 나누고 각 군의 피험자에게 상기 제형예 1 및 비교제형예 1을 각각 사용(저녁 1회/일 도포, 총 1주간)하도록 한 후, Facial Stage DM-3(Moritex, Japan) 기기를 활용하여 피부톤 개선 정도를 평가하였다. 피부톤 개선율은 피부의 명도 및 색채 측정값으로부터 피부의 명도 및 색채 변화 값을 구하여 판단하였으며, 그 결과의 평균값을 구하여 하기 표 4에 나타내었다. 명도 및 색체 변화값이 클수록 피부톤이 개선되었음을 의미한다.

시험물질	피부톤 개선율(%)
시험물질	명도	색채
제형예 1	14	12
비교제형예 1	10	9

표 4의 결과를 보면, (2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤을 함유하지 않는 비교제형예 1은 유의적인 피부톤 개선 효능을 보이지 않은 반면, (2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤을 유효성분으로 함유하는 제형예 1은 사용전보다 사용후의 피부톤이 많이 개선되는 것을 확인할 수 있다.

[제제예 1] 화장수

아래 표 5에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 화장수를 제조한다.

	함량(중량%)
(2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤	2.0
글리세린	3.0
부틸렌글리콜	2.0
프로필렌글리콜	2.0
카르복시비닐폴리머	0.1
PEG 12 노닐페닐에테르	0.2
폴리솔베이트 80	0.4
에탄올	10.0
트리에탄올아민	0.1
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	잔량

[제제예 2] 영양 크림

아래 표 6에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 영양 크림을 제조한다.

	함량(중량%)
(2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤	2.0
폴리솔베이트 60	1.5
솔비탄세스퀴올리에이트	0.5
PEG 60 경화피마자유	2.0
유동파라핀	10.0
스쿠알란	5.0
카프릴릭/카프락트리글리세라이드	5.0
글리세린	5.0
부틸렌글리콜	3.0
프로필렌글리콜	3.0
트리에탄올아민	0.2
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	잔량

[제제예 3] 마사지 크림

아래 표 7에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 마사지 크림을 제조한다.

	함량(중량%)
(2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤	1.0
밀납	10.0
폴리솔베이트 60	1.5
PEG 60 경화피마자유	2.0
솔비탄세스퀴올레이트	0.8
유동파라핀	40.0
스쿠알란	5.0
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드	4.0
글리세린	5.0
부틸렌글리콜	3.0
프로필렌글리콜	3.0
트리에탄올아민	0.2
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	잔량

[제제예 4] 팩

아래 표 8에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 팩을 제조한다.

	함량(중량%)
(2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤	1.0
폴리비닐알콜	13.0
소듐카르복시메틸셀룰로오스	0.2
글리세린	5.0
알란토인	0.1
에탄올	6.0
PEG 12 노닐페닐에테르	0.3
폴리솔베이트 60	0.3
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	잔량

[제제예 5] 젤

아래 표 9에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 젤을 제조한다.

	함량(중량%)
(2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤	0.5
에틸렌디아민초산나트륨	0.05
글리세린	5.0
카르복시비닐폴리머	0.3
에탄올	5.0
PEG 60 경화피마자유	0.5
트리에탄올아민	0.3
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	잔량

[제제예 6] 연고

아래 표 10에 기재된 조성으로 통상적인 방법으로 연고를 제조하였다.

	함량(중량%)
(2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤	0.1
글리세린	8.0
부틸렌글리콜	4.0
유동파라핀	15.0
베타글루칸	7.0
카보머	0.1
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드	3.0
스쿠알란	1.0
세테아릴 글루코사이드	1.5
소르비탄 스테아레이트	0.4
세테아릴 알코올	1.0
밀납	4.0
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	잔량

[제제예 7] 연질캅셀제

(2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤 0.0025g, 비타민 C 0.0025g, 팜유 2mg, 팜경화유 8mg, 황납 4mg 및 레시틴 6mg을 혼합하고, 통상의 방법에 따라 1 캡슐당 400 mg씩 충진하여 연질캅셀을 제조하였다.

[제제예 8] 정제

(2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤 0.0025g, 비타민 C 0.0025g, 포도당 100mg, 전분 96mg 및 마그네슘 스테아레이트 4mg을 혼합하고 30% 에탄올을 40mg 첨가하여 과립을 형성한 후, 60℃에서 건조하고 타정기를 이용하여 정제로 타정하였다.

[제제예 9] 과립제

(2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤 150mg, 비타민 C 150mg, 포도당 100mg, 및 전분 600mg을 혼합하고 30% 에탄올을 100 mg 첨가하여 과립을 형성한 후, 60℃에서 건조하여 과립을 형성한 다음 포에 충진하였다. 내용물의 최종 중량은 1 g으로 하였다.

[제제예 10] 드링크제

(2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤 0.0025g, 비타민 C 0.0025g, 포도당 10g, 구연산 2g 및 정제수 187.8g을 혼합하고 병에 충진하였다. 내용물의 최종 용량은 200ml로 하였다.

이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시태양일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims

하기 화학식 1로 표현되는 (2S)-1-O-리놀레노일-3-O-β-D-갈락토피라노실-sn-글리세롤을 유효성분으로 함유하여 혈색 및 피부톤을 개선시키는 피부 미백용 화장료 조성물.
[화학식 1]
제1항에 있어서, 상기 유효성분은 조성물 총 중량에 대하여 0.001~50중량%의 양으로 함유되는 화장료 조성물.
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