KR102269988B1 - Composition for preventing or treating of cancer comprising BRD4-NUTM1 specific siRNA - Google Patents

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Abstract

본 발명은 BRD4 - NUTM1에 특이적으로 결합하는 siRNA를 포함하는 암 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 BRD4 - NUTM1 융합 유전자 특이적 siRNA는 BRD4 - NUTM1 융합 유전자에 대한 특이성이 높으며 이에 결합하여 BRD4 - NUTM1 융합 유전자의 발현을 특이적으로 억제하는 우수한 효과가 있고, 암세포의 증식 억제 작용을 나타내므로 암 예방, 개선 또는 치료에 유용하게 사용할 수 있다. The present invention relates to a composition for preventing or treating cancer comprising an siRNA that specifically binds to BRD4 -NUTM1. BRD4 - NUTM1 of the present invention Fusion gene specific siRNA is BRD4 - NUTM1 It has high specificity for the fusion gene and binds to it, BRD4 - NUTM1 Since it has an excellent effect of specifically inhibiting the expression of the fusion gene, and exhibits an action of inhibiting the proliferation of cancer cells, it can be usefully used for cancer prevention, improvement or treatment.

Description

BRD4-NUTM1 특이적 siRNA를 포함하는 암 예방 또는 치료용 조성물{Composition for preventing or treating of cancer comprising BRD4-NUTM1 specific siRNA}Composition for preventing or treating of cancer comprising BRD4-NUTM1 specific siRNA

본 발명은 BRD4 - NUTM1에 특이적으로 결합하는 siRNA를 포함하는 암 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for preventing or treating cancer comprising an siRNA that specifically binds to BRD4 -NUTM1.

NUT (Nuclear protein in testis) 육아종 (또는 NUT midline carcinoma로 알려짐)은 1991년 문헌에 처음 소개된 치명적인 악성 종양으로, 여러 다른 종류(heterogeneity)로 이루어진 임상병리적 특성을 보인다. 이는 신생아부터 70대까지 다양한 연령에서 성별에 관계없이 발병하며, 십대 후반에 최고의 발병률을 보이는 것으로 알려져 있다. NUT 육아종은 분화가 좋지 않은 암으로 정중선 해부학적 구조인 상층부 경구 및 전측두엽에서 가장 빈번하게 나타나며, 대개 전이성 질환으로 화학요법에 좋지 않은 환자 생존력을 보이고 있다. NUT 육아종은 전이성 및 악성 임상 경과와 중첩되어 다양한 종류로 존재하기 때문에, NMC 환자들은 종종 다른 악성 암종으로 잘못 분류되기도 하여 지금까지 실제 빈도는 거의 알려지지 않았다가, 최근 특정 유전체 재배열(genomic rearrangements)에 의해 정의된 독립적인 진단 범주로 부상하였다.Nuclear protein in testis (NUT) granuloma (also known as NUT midline carcinoma) is a deadly malignant tumor first introduced in the literature in 1991, and exhibits a heterogeneity of clinicopathological characteristics. It occurs at various ages from newborns to 70s, regardless of gender, and is known to show the highest incidence in the late teens. NUT granuloma is a poorly differentiated cancer that occurs most frequently in the upper oral and anterior temporal lobes, which are midline anatomical structures. It is usually a metastatic disease and shows poor patient survival for chemotherapy. Because NUT granulomas exist in various types with overlapping metastatic and malignant clinical course, NMC patients are often misclassified as other malignant carcinomas, so their actual frequency is unknown until now. emerged as an independent diagnostic category defined by

NUT 육아종의 유전적 특징은 일련의 파트너 유전자와의 NUT 유전자의 재배열로, 염색체 15q와 19p 사이의 염색체간 전이가 주로 관찰되며, BRD4 (Bromodomain containing protein 4)-NUTM1 융합 암 유전자를 만든다. 이와 같은 BRD4 - NUTM1 융합 암 단백질 (fusion oncoprotein)은 크로마틴 리모델링 (chromatin remodeling), Myc의 과발현 그리고 p53을 통한 유전자 발현 프로그램의 붕괴를 초래한다. NUT 유전자 재배열의 또다른 파트너인 BRD3 또는 NSD3는 기능적으로 BRD4와 관련되어 있으며, 이는 BET (bromodomain and extra terminal) 계열 단백질을 통해 NUT가 크로마틴에 동원 (recruitment)됨이 NUT 육아종의 병의 진행에 필요하다는 것을 의미한다. 이러한 이유로 저분자 억제제 (small molecular inhibitors)의 사용이 NUT 육아종을 위한 새로운 치료 방법으로 제안되고 있으나, 저분자 억제제는 암 유전자에 대한 특이성이 낮아 정상유전자의 발현에도 영향을 미치며 일정 기간 후에는 약물에 대한 내성이 발생한다는 한계가 있다. The genetic feature of NUT granuloma is the rearrangement of the NUT gene with a series of partner genes, and interchromosomal transfer is mainly observed between chromosomes 15q and 19p, resulting in a BRD4 (Bromodomain containing protein 4) -NUTM1 fusion oncogene. This BRD4 - NUTM1 fusion oncoprotein causes chromatin remodeling, overexpression of Myc , and disruption of gene expression programs through p53. Another partner of the NUT gene rearrangement, BRD3 or NSD3, is functionally related to BRD4 , which suggests that the recruitment of NUT to chromatin through BET (bromodomain and extra terminal) family proteins is critical to the disease progression of NUT granuloma. means it is necessary For this reason, the use of small molecular inhibitors has been proposed as a new treatment method for NUT granuloma, but small molecule inhibitors have low specificity for cancer genes, affecting the expression of normal genes, and resistance to drugs after a certain period of time. There is a limit to this happening.

이와 관련하여, 현재까지 융합 유전자를 표적하는 난치암 치료를 위한 siRNA 치료제 개발은 전임상 및 임상단계에서 경쟁 물질이 없으며, 바이오 시밀러 또는 제네릭 약물 또한 개발되거나 시판되고 있지 않다. 특히, siRNA를 기반으로 하는 새로운 치료제의 시장이 더욱 확대되고 있으나, 난치암에서 융합 유전자를 표적으로 하는 약물 개발은 전무한 상태이다.In this regard, there are no competing substances in the preclinical and clinical stages in the development of siRNA therapeutics for the treatment of intractable cancer targeting the fusion gene to date, and biosimilars or generic drugs have not been developed or marketed. In particular, although the market for new therapeutic agents based on siRNA is expanding, there is no development of drugs targeting fusion genes in intractable cancer.

난치암 특이적 융합 유전자를 표적으로 하는 siRNA 치료제의 경우, 유전자 기반 치료제의 특성상 상대적으로 짧은 개발 기간과 적은 비용으로 다양한 질병을 대상으로 치료제 개발이 가능하여 개발 기술의 과학적 의미와 함께 산업적 활용 가치가 매우 크며 이에 선진국을 중심으로 경쟁적으로 연구 투자가 이루어지고 있다. 따라서, 개인 맞춤의학구축 및 난치암 환자의 생존율 증가를 위한 융합 유전자 특이적 siRNA 치료제 개발에 대한 요구가 증가하고 있다.In the case of siRNA therapeutics targeting intractable cancer-specific fusion genes, due to the characteristics of gene-based therapeutics, it is possible to develop therapeutics for various diseases with a relatively short development period and low cost. It is very large, and research investment is being made competitively, mainly in developed countries. Therefore, there is an increasing demand for the development of fusion gene-specific siRNA therapeutics for constructing personalized medicine and increasing the survival rate of intractable cancer patients.

LEE JK, et al. Complex chromosomal rearrangements by single catastrophic pathogenesis in NUT midline carcinoma. Ann Oncol. 2017 Apr 1;28(4):890-897.LEE JK, et al. Complex chromosomal rearrangements by single catastrophic pathogenesis in NUT midline carcinoma. Ann Oncol. 2017 Apr 1:28(4):890-897. Christopher A. French, NUT Carcinoma: Clinicopathologic features, pathogenesis, and treatment, Pathol Int. 2018 Nov;68(11):583-595.Christopher A. French, NUT Carcinoma: Clinicopathologic features, pathogenesis, and treatment, Pathol Int. 2018 Nov;68(11):583-595.

이에, 본 발명자들은 BRD4 - NUTM1 융합 유전자의 발현에 특이적으로 작용하는 siRNA에 대한 연구를 수행한 결과, BRD4 - NUTM1 융합 유전자의 발현을 특이적으로 억제하는 siRNA를 설계하고 상기 siRNA가 암의 예방 또는 치료에 효과가 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.Accordingly, the present inventors BRD4 - NUTM1 As a result of conducting a study on siRNA that specifically acts on the expression of the fusion gene, BRD4 - NUTM1 The present invention was completed by designing an siRNA that specifically inhibits the expression of the fusion gene and confirming that the siRNA is effective in preventing or treating cancer.

본 발명의 목적은 서열번호 1 내지 15로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 염기서열로 표시되는 siRNA (small interfering RNA)를 포함하는 암 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는 것이다.An object of the present invention is to provide a composition for preventing or treating cancer comprising siRNA (small interfering RNA) represented by any one nucleotide sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 1 to 15.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 서열번호 1 내지 15로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 염기서열로 표시되는 siRNA (small interfering RNA)를 포함하는 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating cancer comprising siRNA (small interfering RNA) represented by any one nucleotide sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 1 to 15.

또한, 본 발명은 서열번호 1 내지 15로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 염기서열로 표시되는 siRNA (small interfering RNA)를 포함하는 암 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다. In addition, the present invention provides a food composition for preventing or improving cancer comprising siRNA (small interfering RNA) represented by any one base sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 1 to 15.

또한, 본 발명은 서열번호 1 내지 15로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 염기서열로 표시되는 siRNA (small interfering RNA)를 포함하는 항암 보조용 조성물을 제공한다. In addition, the present invention provides a composition for adjuvant anticancer comprising siRNA (small interfering RNA) represented by any one nucleotide sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 1 to 15.

본 발명의 BRD4 - NUTM1 융합 유전자 특이적 siRNA는 BRD4 - NUTM1 융합 유전자에 대한 특이성이 높으며 이에 결합하여 BRD4 - NUTM1 융합 유전자의 발현을 특이적으로 억제하는 우수한 효과가 있고, 암세포의 증식 억제 작용을 나타내므로 암 예방, 개선 또는 치료에 유용하게 사용할 수 있다. BRD4 - NUTM1 of the present invention Fusion gene specific siRNA is BRD4 - NUTM1 It has high specificity for the fusion gene and binds to it, BRD4 - NUTM1 Since it has an excellent effect of specifically inhibiting the expression of the fusion gene, and exhibits an action of inhibiting the proliferation of cancer cells, it can be usefully used for cancer prevention, improvement or treatment.

도 1은 NUT 육아종에서 브레이크 포인트 서열 및 염색체 재배열 패턴을 나타낸 도이다.
도 2는 NUT 유전자 인근의 유전자 재배열 및 그 전사체의 패턴을 나타낸 도이다.
도 3은 다양한 암 세포주에서 BRD4 - NUTM1 융합 유전자의 브레이크 포인트 서열을 나타낸 도이다.
도 4A는 BRD4 - NUTM1 융합 유전자에 특이적인 siRNA 서열을 나타낸 도이다. 상기 siRNA에서, 야생형 BRD4, NUTM1 전사체 서열 (transcript sequence)과 동일한 서열을 밑줄과 볼드체로 표시하였다.
도 4B는 HCC2429 세포에서 본 발명에 따른 siRNA 처리에 의한 BRD4-UTR 및 BRD4-NUTM1 mRNA 발현량 변화를 나타낸 도이다.
도 5는 HCC2429 세포에서 본 발명에 따른 siRNA 처리에 의한 BRD4-NUTM1 단백질 발현량 변화(A) 및 세포 증식(B)을 나타낸 도이다.
도 6은 HCC2429 세포에서 본 발명에 따른 siRNA 처리에 의한 정상 NUTM1 mRNA 발현량 변화를 나타낸 도이다.1 is a diagram showing a breakpoint sequence and a chromosomal rearrangement pattern in NUT granuloma.
2 is a diagram illustrating a gene rearrangement near a NUT gene and a pattern of its transcript.
3 shows BRD4 - NUTM1 in various cancer cell lines. A diagram showing the breakpoint sequence of the fusion gene.
4A shows BRD4 - NUTM1 A diagram showing the siRNA sequence specific to the fusion gene. In the siRNA, the sequence identical to the wild-type BRD4, NUTM1 transcript sequence is indicated by underline and bold type.
4B is a diagram showing changes in the expression levels of BRD4-UTR and BRD4-NUTM1 mRNA by siRNA treatment according to the present invention in HCC2429 cells.
5 is a diagram showing the change in the expression level of BRD4-NUTM1 protein (A) and cell proliferation (B) by siRNA treatment according to the present invention in HCC2429 cells.
6 is a diagram showing changes in normal NUTM1 mRNA expression level by siRNA treatment according to the present invention in HCC2429 cells.

이하, 본 발명에 대해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 서열번호 1 내지 15로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 염기서열로 표시되는 siRNA (small interfering RNA)를 포함하는 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다. The present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating cancer comprising siRNA (small interfering RNA) represented by any one nucleotide sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 1 to 15.

본 발명에서, 용어 “siRNA (small interfering RNA)"는 이중가닥 RNA가 다이서(Dicer) 효소에 의해 절단되어 생성되는 18~23 뉴클레오티드 크기의 작은 RNA 조각으로, 상보적인 서열을 갖는 mRNA에 특이적으로 결합하여 당해 단백질, mRNA의 발현을 억제하는 데 사용할 수 있다.In the present invention, the term “siRNA (small interfering RNA)” refers to a small RNA fragment of 18 to 23 nucleotides in size produced by cleaving double-stranded RNA by Dicer enzyme, and is specific for mRNA having a complementary sequence. It can be used to inhibit the expression of the protein or mRNA.

본 발명의 siRNA는 리보핵산 서열 자체, 또는 이를 발현하는 재조합 벡터 (발현 벡터) 형태를 모두 포함하는 개념이다. 또한, 상기 발현 벡터는 플라스미드 또는 아데노-부속 바이러스 (adeno-associated virus), 레트로바이러스, 백시니아 바이러스, 암세포 용해성 바이러스 (oncolytic adenovirus) 등으로 이루어진 군에서 선택되는 바이러스 벡터일 수 있다.The siRNA of the present invention is a concept including both the ribonucleic acid sequence itself, or the form of a recombinant vector (expression vector) expressing the same. In addition, the expression vector may be a plasmid or a viral vector selected from the group consisting of adeno-associated virus, retrovirus, vaccinia virus, oncolytic adenovirus, and the like.

본 발명에서, siRNA는 변형되지 않고 자연에 존재하는 리보핵산 단위 구조를 가지고 있는 것이거나, 화학적으로 변형된 것일 수 있다. 이러한 siRNA의 화학적 변형은 생체 내 안정성 향상, 핵산 분해효소 저항성 부여 및 비 특이적 면역반응 감소를 위한 것이다. In the present invention, the siRNA may have an unmodified and naturally occurring ribonucleic acid unit structure, or may be chemically modified. These chemical modifications of siRNA are for improving in vivo stability, conferring nuclease resistance, and reducing non-specific immune responses.

상기 화학적 변형을 통해, RNAi 능력에는 영향을 미치지 않고, 뉴클레아제(nuclease)에 대한 저항성 증진, 세포 내 흡수 (uptake) 증가, 세포 표적화 향상, 안정성 증가, 인터페론 활성 감소, 면역 반응 및 센스 (sense) 효과와 같은 타겟 이외의 (off-target) 효과 감소 등을 포함하는 siRNA의 다양한 특성을 변형되지 않은 siRNA 보다 향상시킬 수 있다.Through the chemical modification, without affecting RNAi ability, resistance to nucleases (nuclease) enhancement, intracellular uptake (uptake) increase, cell targeting enhancement, stability increase, interferon activity decrease, immune response and sense (sense) ), various properties of siRNA, including reduction of off-target effects, such as effect, can be improved compared to unmodified siRNA.

이러한 siRNA의 화학적 변형 방법은 특별히 제한되지 않으며, 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 지식을 가진 당업자라면 당해 기술 분야에 공지된 방법을 이용하여 원하는 방식대로 상기 siRNA를 합성하고 변형시킬 수 있다. 예컨대 뉴클레오티드 내 당 구조의 2´ 탄소 위치에서 -OH기가 -CH3(메틸), -OCH3(methoxy), -NH2, -F(불소), -O-2-메톡시에틸 -O-프로필(propyl), -O-2-메틸티오에틸 (methylthioethyl), -O-3-아미노프로필, -O-3-디메틸아미노프로필, -O-N-메틸아세트아미도 또는 -O-디메틸아미도옥시에틸로의 치환에 의한 변형; 뉴클레오티드 내 당 (sugar) 구조 내의 산소가 황으로 치환된 변형; 또는 뉴클레오티드결합의 포스포로티오에이트(phosphorothioate) 또는 보라노포스페이트(boranophosphate), 메틸 포스포네이트(methyl phosphonate) 결합으로의 변형에서 선택된 하나 이상의 변형이 조합되어 사용될 수 있으며, PNA (peptide nucleic acid), LNA(locked nucleic acid) 또는 UNA(unlocked nucleic acid) 형태로의 변형도 사용이 가능하고, siRNA의 5' 또는 3'- 말단에 콜레스테롤, 비오틴, 세포 투과성 펩타이드 (cell penetrating peptide)와 같은 리간드(ligand)를 붙이는 것도 가능하다.The method for chemical modification of siRNA is not particularly limited, and those skilled in the art to which the present invention pertains can synthesize and modify the siRNA in a desired manner using methods known in the art. For example, the -OH group at the 2' carbon position of the sugar structure in the nucleotide is -CH 3 (methyl), -OCH 3 (methoxy), -NH 2 , -F (fluorine), -O-2-methoxyethyl -O-propyl (propyl), -O-2-methylthioethyl, -O-3-aminopropyl, -O-3-dimethylaminopropyl, -ON-methylacetamido or -O-dimethylamidooxyethyl transformation by substitution of ; a modification in which the oxygen in the sugar structure in the nucleotide is substituted with sulfur; Or one or more modifications selected from the modification of nucleotide bonds into phosphorothioate or boranophosphate, methyl phosphonate bonds may be used in combination, and PNA (peptide nucleic acid), Modification into LNA (locked nucleic acid) or UNA (unlocked nucleic acid) form can also be used, and ligands such as cholesterol, biotin, and cell penetrating peptide at the 5' or 3'-terminus of siRNA ) can also be added.

상기 화학적 변형 중 siRNA 센스 (sense) 및 안티센스 (antisense) 가닥의 포스포디에스테르 결합을 포스포로티오에이트 (phosphorothioate) 또는 보라노포스페이트 (boranophosphate) 결합으로 치환하는 방법을 통해 뉴클레아제 (nuclease)의 핵산 분해에 대한 저항성을 높일 수 있다. 예컨대, siRNA 센스 (sense)와 안티센스 (antisense) 양쪽 가닥의 3'-말단 포스포디에스테르 결합을 포스포로티오에이트 결합으로 변경할 수 있다.Nucleic acid of a nuclease through a method of replacing the phosphodiester bond of the siRNA sense and antisense strands with a phosphorothioate or boranophosphate bond among the chemical modifications It can increase the resistance to decomposition. For example, the 3'-terminal phosphodiester bond of both the siRNA sense and antisense strands may be changed to a phosphorothioate bond.

상기 화학적 변형 중 siRNA 센스(sense) 또는 안티센스 가닥의 5' 말단, 3' 말단, 또는 양 말단에 ENA (Ethylene bridge nucleic acid), PNA (peptide nucleic acid), LNA (locked nucleic acid) 또는 UNA (unlocked nucleic acid)를 도입하는 방법이 있을 통해 RNAi 능력에 영향을 미치지 않고 siRNA 안정성을 증가시키고 비특이적 억제 효과를 줄일 수 있다.Among the chemical modifications, ENA (Ethylene bridge nucleic acid), PNA (peptide nucleic acid), LNA (locked nucleic acid) or UNA (unlocked) at the 5' end, 3' end, or both ends of the siRNA sense or antisense strand nucleic acid) can increase siRNA stability and reduce non-specific inhibitory effects without affecting RNAi ability.

상기 화학적 변형 외에도 다양한 화학적 변형을 가할 수 있으며, 이러한 화학적 변형은 어느 한 가지 형태의 변형만 이루어질 수도 있고, 여러 가지 화학적 변형이 함께 이루어질 수도 있다. 다만, 상기 변형에 있어서 siRNA 이중 가닥구조를 안정화시키는 동시에 유전자 발현 저해활성을 감소시키지 않도록, 바람직하게는 최소한의 변형이 이루어지도록 하는 것이 좋다.In addition to the above chemical transformation, various chemical transformations may be applied, and only one type of transformation may be made, or various chemical transformations may be made together. However, in the above modification, it is preferable that the siRNA double-stranded structure is stabilized and the gene expression inhibitory activity is not reduced, preferably, minimal modification is made.

본 발명에 따른 siRNA는 BRD4 - NUTM1 융합 유전자에 특이적으로 결합하여 BRD4-NUTM1 융합 유전자의 발현을 억제함으로써 암 세포의 증식을 억제하는 등 항암 효과를 나타내는 것을 특징으로 한다. SiRNA according to the invention BRD4 - characterized in that, by the specific binding to the fusion gene NUTM1 inhibit BRD4-NUTM1 expression of the fusion gene showing the anti-cancer effects, and to inhibit proliferation of cancer cells.

본 발명에 있어서, siRNA는 서열번호 1 내지 15로 표시되는 센스(sense) 서열 및 상기 센스 서열에 상보적인 안티센스 (antisense) 서열, 바람직하게는 서열번호 16 내지 30으로 표시되는 안티센스 서열을 포함하며, 상기 센스 서열과 안티센스 서열은 3' 말단에 올리고 dT 오버행을 포함하는 듀플렉스(duplex) 형태일 수 있다. 본 발명에 따른 siRNA는 바람직하게는 말단에 tt를 포함하는 서열이며, 이를 통해 dicer의 cleavage/binding이 향상될 수 있다. In the present invention, the siRNA comprises a sense sequence represented by SEQ ID NOs: 1 to 15 and an antisense sequence complementary to the sense sequence, preferably an antisense sequence represented by SEQ ID NOs: 16 to 30, The sense sequence and the antisense sequence may be in the form of a duplex including an oligo dT overhang at the 3' end. The siRNA according to the present invention is preferably a sequence including tt at the end, through which cleavage/binding of dicer can be improved.

보다 구체적으로, 본 발명에 따른 siRNA는 서열번호 1 내지 15로 표시되는 센스서열만으로 이루어진 단일가닥의 형태일 수 있으며, 또는 상기 siRNA는 서열번호 1 내지 15로 표시되는 센스(sense) 서열 및 상기 센스 서열에 상보적인 서열번호 16 내지 30으로 표시되는 안티센스 (antisense) 서열이 이중가닥 복합체를 이룬 형태일 수 있다. More specifically, the siRNA according to the present invention may be in the form of a single strand consisting only of the sense sequence shown in SEQ ID NOs: 1 to 15, or the siRNA is a sense sequence shown in SEQ ID NOs: 1 to 15 and the sense sequence The antisense sequence represented by SEQ ID NOs: 16 to 30 complementary to the sequence may be in the form of a double-stranded complex.

상기 siRNA는 바람직하게는 서열번호 7 또는 서열번호 9 중 어느 하나의 염기서열로 표시되는 siRNA이며, 이는 정상 NUTM1 mRNA 발현에는 영향을 미치지 않으면서도 BRD4-NUTM1 mRNA 발현을 억제하는 바, 그 특이성이 매우 우수하다. The siRNA is preferably an siRNA represented by any one of SEQ ID NO: 7 or SEQ ID NO: 9, which does not affect normal NUTM1 mRNA expression and BRD4-NUTM1 Since it inhibits mRNA expression, its specificity is very good.

본 발명에 있어서, 암은 BRD4 - NUTM1 양성 고형암인 것을 특징으로 하며, 주로, 흉선, 기도, 폐 등의 체내 상부 조직에서의 상피성 세포암 (midline carcinoma) 또는 NUT (Nuclear protein in testis) 육아종을 포함하고, 바람직하게는 폐암, 흉선암, 신장암, 또는 NUT 육아종일 수 있다. 상기 NUT 육아종은 특정 조직에 제한되지 않고 모든 조직에서 발생될 수 있다. In the present invention, the cancer is characterized as a BRD4 - NUTM1- positive solid cancer, and mainly consists of midline carcinoma or Nuclear protein in testis (NUT) granuloma in upper body tissues such as thymus, airway, and lung. and preferably lung cancer, thymus cancer, renal cancer, or NUT granuloma. The NUT granuloma is not limited to a specific tissue and may occur in any tissue.

본 발명의 조성물은 핵산 전달체를 더 포함할 수 있다. The composition of the present invention may further comprise a nucleic acid carrier.

본 발명에서, 용어 “핵산 전달체(nucleic acid delivery system)”는 체내로의 전달효율을 높이기 위한 것으로, 체내에서의 안정성이 우수할 뿐 아니라 약물로서의 제조 공정이 간단하다는 장점이 있다.In the present invention, the term “nucleic acid delivery system” is intended to increase delivery efficiency into the body, and has the advantage of excellent stability in the body and a simple manufacturing process as a drug.

상기 핵산 전달체는, 이에 제한되는 것은 아니나, 바이러스성 벡터, 비바이러스성 벡터, 리포좀, 양이온성 고분자, 미셀(micelle), 에멀젼, 지질 나노입자(solid lipid nanoparticles) 등을 포함할 수 있다. 바이러스성 벡터는 전달 효율이 높고 지속 시간이 긴 이점이 있고, 레트로바이러스 벡터(retroviral vector), 아데노바이러스 벡터(adenoviral vector), 백시니아바이러스 벡터, 아데노 부속 바이러스 벡터(adeno-associated viral vector), 암세포 용해성 바이러스 벡터 등이 포함된다. 비바이러스 벡터(nonviral vector)는 플라즈미드를 포함할 수 있다. 그 외에도 리포좀, 양이온성 고분자, 미셀(micelle), 에멀젼, 지질 나노입자(solid lipid nanoparticles) 등의 다양한 제형이 사용될 수 있다. 핵산 전달을 위한 양이온성 고분자에는 키토산, 아텔로콜라겐(atelocollagen), 양이온성 폴리펩타이드(cationic polypeptide) 등과 같은 천연고분자와 poly(L-lysin), 선형 또는 분지형 PEI(polyethylene imine), 사이클로덱스트린계열 다가양이온(cyclodextrin-based polycation), 덴드리머(dendrimer) 등과 같은 합성고분자가 포함될 수 있다.The nucleic acid carrier may include, but is not limited to, viral vectors, non-viral vectors, liposomes, cationic polymers, micelles, emulsions, solid lipid nanoparticles, and the like. Viral vectors have advantages of high delivery efficiency and long duration, retroviral vectors, adenoviral vectors, vacciniavirus vectors, adeno-associated viral vectors, cancer cells soluble viral vectors and the like. A nonviral vector may comprise a plasmid. In addition, various formulations such as liposomes, cationic polymers, micelles, emulsions, and solid lipid nanoparticles may be used. Cationic polymers for nucleic acid delivery include natural polymers such as chitosan, atelocollagen, and cationic polypeptide, poly(L-lysin), linear or branched PEI (polyethylene imine), and cyclodextrin series. Synthetic polymers such as cyclodextrin-based polycations, dendrimers, and the like may be included.

siRNA가 상기와 같은 핵산 전달체와의 복합체 형태로 조성물에 포함되는 경우, siRNA를 효율적으로 타겟 세포로 전달을 촉진하여, 비교적 낮은 농도의 투여량으로도 타겟 세포로 전달되어 높은 타겟 유전자 발현 조절 기능을 나타낼 수 있다. 또한 타겟 이외의 타 장기 및 세포로의 비 특이적인 siRNA의 전달을 방지할 수 있다는 장점이 있다.When the siRNA is included in the composition in the form of a complex with the nucleic acid carrier as described above, the siRNA is efficiently delivered to the target cell and delivered to the target cell even at a relatively low dose, thereby providing a high target gene expression control function. can indicate In addition, there is an advantage in that the delivery of non-specific siRNA to other organs and cells other than the target can be prevented.

본 발명의 조성물의 투여 대상 환자는 포유 동물, 바람직하게는 사람, 원숭이, 설치류 (마우스, 래트)일 수 있으며, 특히 BRD4 - NUTM1 융합 유전자 발현과 관련되는 질병이나 증상을 가지거나, BRD4 - NUTM1 융합 유전자를 가지며 BRD4 - NUTM1 의 발현 억제를 필요로 하는 모두 포유 동물, 예컨대, 사람일 수 있다.A patient to be administered the composition of the present invention may be a mammal, preferably a human, monkey, or rodent (mouse, rat), particularly having a disease or symptom related to BRD4- NUTM1 fusion gene expression, or BRD4 - NUTM1 fusion All of which have genes and require inhibition of expression of BRD4 - NUTM1 may be mammals, such as humans.

본 발명의 조성물은 상기의 유효성분 이외에 추가로 약학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 포함하여 제조할 수 있다. 약학적으로 허용 가능한 담체는 본 발명의 유효성분과 양립 가능하여야 하며, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로즈 용액, 말토덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 한 성분 또는 둘 이상의 성분을 혼합하여 사용할 수 있고, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형으로 제제화 할 수 있다. 더 나아가 당 분야의 적정한 방법으로 또는 레밍톤 약학 과학(Remington's pharmaceutical Science, Mack Publishing company, Easton PA)에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질병에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.The composition of the present invention may be prepared by including one or more pharmaceutically acceptable carriers in addition to the above active ingredients. A pharmaceutically acceptable carrier must be compatible with the active ingredient of the present invention, and contains saline, sterile water, Ringer's solution, buffered saline, dextrose solution, maltodextrin solution, glycerol, ethanol, and one or two or more of these components. They can be mixed and used, and other conventional additives such as antioxidants, buffers, and bacteriostats can be added as needed. In addition, diluents, dispersants, surfactants, binders and lubricants may be additionally added to form an injectable formulation such as an aqueous solution, suspension, emulsion, and the like. Furthermore, it may be preferably formulated according to each disease or component using a method disclosed in Remington's Pharmaceutical Science (Mack Publishing company, Easton PA) or by an appropriate method in the art.

본 발명의 조성물에 포함되는 유효성분 등의 함량 및 투여방법은 통상의 환자의 증후와 질병의 심각도에 기초하여 본 기술분야의 통상의 전문가가 결정할 수 있다. 또한, 산제, 정제, 캡슐제, 액제, 주사제, 연고제, 시럽제 등의 다양한 형태로 제제화할 수 있으며 단위-투여량 또는 다-투여량 용기, 예를 들면 밀봉된 앰플 및 병 등으로 제공될 수도 있다.The content and administration method of the active ingredient included in the composition of the present invention can be determined by a person skilled in the art based on the symptoms and severity of the disease of ordinary patients. In addition, it may be formulated in various forms such as powders, tablets, capsules, liquids, injections, ointments, syrups, etc., and may be provided in unit-dose or multi-dose containers, such as sealed ampoules and bottles. .

본 발명의 조성물은 경구 또는 비경구 투여가 가능하다. 본 발명에 따른 조성물의 투여경로는 이들로 한정되는 것은 아니지만, 예를 들면, 구강, 정맥 내, 근육 내, 동맥 내, 골수 내, 경막 내, 심장 내, 경피, 피하, 복강 내, 장관, 설하 또는 국소 투여가 가능하다. 본 발명에 따른 조성물의 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 방법, 배설율 또는 질병의 중증도 등에 따라 그 범위가 다양하며, 본 기술분야의 통상의 전문가가 용이하게 결정할 수 있다. 또한, 임상 투여를 위해 공지의 기술을 이용하여 본 발명의 조성물을 적합한 제형으로 제제화할 수 있다.The composition of the present invention can be administered orally or parenterally. The route of administration of the composition according to the present invention is not limited thereto, but for example, oral, intravenous, intramuscular, intraarterial, intramedullary, intrathecal, intracardiac, transdermal, subcutaneous, intraperitoneal, intestinal, sublingual Alternatively, topical administration is possible. The dosage of the composition according to the present invention varies depending on the patient's weight, age, sex, health status, diet, administration time, method, excretion rate or severity of disease, etc. can decide In addition, the composition of the present invention may be formulated into a suitable dosage form for clinical administration using known techniques.

본 발명의 siRNA는 암의 치료를 위해 in vivo 또는 ex vivo 상에서 세포 내로 도입될 수 있다. 본 발명의 siRNA를 세포 내에 도입하게 되면 표적인 BRD4 -NUTM1 융합 유전자를 가진 환자에서 BRD4 - NUTM1 융합 유전자의 발현을 특이적으로 억제하여 암 세포의 증식억제 작용을 나타내고, 궁극적으로는 암의 치료가 가능하게 된다.The siRNA of the present invention can be introduced into cells in vivo or ex vivo for the treatment of cancer. When the siRNA of the present invention is introduced into a cell, it specifically inhibits the expression of the BRD4- NUTM1 fusion gene in a patient having a target BRD4 - NUTM1 fusion gene, thereby exhibiting an antiproliferative action of cancer cells, and ultimately, cancer treatment it becomes possible

또한, 본 발명은 서열번호 1 내지 15로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 염기서열로 표시되는 siRNA (small interfering RNA)를 포함하는 암 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다. In addition, the present invention provides a food composition for preventing or improving cancer comprising siRNA (small interfering RNA) represented by any one base sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 1 to 15.

본 발명의 식품 조성물은 건강기능식품으로서 사용될 수 있다. 상기 "건강기능식품"이라 함은 건강기능식품에 관한 법률에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 의미하며, "기능성"이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다.The food composition of the present invention can be used as a health functional food. The term "health functional food" means a food manufactured and processed using raw materials or ingredients useful for the human body in accordance with the Health Functional Food Act, and "functionality" refers to the structure and function of the human body. It refers to ingestion for the purpose of obtaining useful effects for health purposes such as regulating nutrients or physiological effects.

본 발명의 식품 조성물은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 상기 "식품 첨가물"로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한, 식품의약품안전처에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다.The food composition of the present invention may contain conventional food additives, and the suitability as the "food additive" is determined according to the general rules and general test methods of food additives approved by the Ministry of Food and Drug Safety, unless otherwise specified. It is judged according to the standards and standards for the items.

또한, 본 발명의 식품 조성물은 암의 예방 또는 개선을 목적으로, 정제, 캡슐, 분말, 과립, 액상, 환 등의 형태로 제조 및 가공할 수 있다.In addition, the food composition of the present invention may be manufactured and processed in the form of tablets, capsules, powders, granules, liquids, pills, etc. for the purpose of preventing or improving cancer.

또한, 본 발명은 서열번호 1 내지 15로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 염기서열로 표시되는 siRNA (small interfering RNA)를 포함하는 항암 보조용 조성물을 제공한다. In addition, the present invention provides a composition for adjuvant anticancer comprising siRNA (small interfering RNA) represented by any one nucleotide sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 1 to 15.

본 발명에 있어서, '항암 보조용'이란 당업계에서 일반적으로 사용되는 항암 치료법의 효과를 증진시키기 위하여 보조적으로 사용될 수 있는 제재를 의미한다. 상기 조성물은 약학적 조성물 또는 식품 조성물의 형태일 수 있다. In the present invention, the term 'anticancer adjuvant' refers to a preparation that can be used as an adjuvant to enhance the effect of anticancer therapy generally used in the art. The composition may be in the form of a pharmaceutical composition or a food composition.

본 발명에 따른 항암 보조용 조성물은 화학요법을 병용하여 화학요법제에 대한 민감도를 높임으로써 치료효과를 극대화하고 부작용을 감소시킬 수 있을 뿐 아니라, 각종 성장인자 (예컨대 VEGF, EGF, PDGF 등), 성장 인자 수용체 및 하위 신호전달 단백질, 바이러스성 종양유발인자, 항암제 내성 유전자의 발현을 저해하는 siRNA와 병용하여 암의 여러 경로를 동시에 차단함으로 항암 효과를 극대화할 수 있다.The anticancer adjuvant composition according to the present invention can maximize the therapeutic effect and reduce side effects by increasing the sensitivity to the chemotherapeutic agent in combination with chemotherapy, as well as various growth factors (eg, VEGF, EGF, PDGF, etc.), In combination with siRNA that inhibits the expression of growth factor receptors and sub-signaling proteins, viral oncogenic factors, and anticancer drug resistance genes, it can maximize the anticancer effect by simultaneously blocking multiple cancer pathways.

본 명세서에서 달리 정의되지 않은 용어들은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상적으로 사용되는 의미를 갖는 것이다.Terms not otherwise defined herein have meanings commonly used in the art to which the present invention pertains.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by way of Examples. However, the following examples are merely illustrative of the present invention, and the content of the present invention is not limited to the following examples.

실시예Example 1. One. BRD4BRD4 -- NUTM1NUTM1 융합 유전자의 브레이크 포인트 (breakpoint) 확인 및 Identification of breakpoints of fusion genes and BRD4BRD4 -- NUTM1NUTM1 특이적 specific siRNA의siRNA 설계 design

1-1. 세포주의 선별 및 1-1. selection of cell lines and BRD4BRD4 -- NUTM1NUTM1 의of 브레이크 포인트 확인 breakpoint check

먼저, 기 보고된 문헌(Ann Oncol. 2017 Apr 1;28(4):890-897)을 통하여 NUT 육아종(NUT carcinoma)의 원인 유전자로 알려진 BRD4 - NUTM1 융합 유전자의 브레이크 포인트 서열을 확보하였다. 이를 위해 도 1 및 도 2에 나타낸 바와 같이, 브레이크 포인트 서열 및 염색체 재배열 패턴을 확인하고, NUT 유전자 인근의 유전자 재배열 및 그 전사체의 패턴을 확인하였다. First, the breakpoint sequence of the BRD4 - NUTM1 fusion gene, known as the causative gene for NUT carcinoma, was obtained through previously reported literature (Ann Oncol. 2017 Apr 1:28(4):890-897). To this end, as shown in FIGS. 1 and 2 , a breakpoint sequence and a chromosomal rearrangement pattern were checked, and a gene rearrangement near the NUT gene and a pattern of its transcript were confirmed.

또한, BRD4 - NUTM1 융합 유전자를 갖는 양성 세포주를 선별하고 선별한 세포주에 대하여 Sanger 시퀀싱을 수행한 결과를 도 3에 나타내었다. Also, BRD4 - NUTM1 A result of selecting a positive cell line having a fusion gene and performing Sanger sequencing on the selected cell line is shown in FIG. 3 .

도 3에 나타낸 바와 같이, 인간 종양 세포주인 HCC2429 (폐암), Ty-82 (흉선암), SNU2792-1, SNU3178S (NUT 육아종) 세포주에서 BRD4 - NUTM1 융합 유전자의 브레이크 포인트를 확인하였다. 그 결과, 상기 4개 세포주에서 확인된 BRD4 - NUTM1 융합 유전자 전사체는 모두 동일한 mRNA 서열을 가지고 있음을 확인하였다 (좌: BRD4, 우: NUT, 밑줄: wild type BRD4 또는 NUTM1 mRNA 서열과 동일).As shown in Figure 3, human tumor cell lines HCC2429 (lung cancer), Ty-82 (thymic cancer), SNU2792-1, SNU3178S (NUT granuloma) BRD4 - NUTM1 in cell line A breakpoint of the fusion gene was identified. As a result, it was confirmed that the transcripts of the BRD4- NUTM1 fusion gene identified in the four cell lines all had the same mRNA sequence (left: BRD4, right: NUT, underline: same as wild type BRD4 or NUTM1 mRNA sequence).

Figure 112019122318685-pat00001
Figure 112019122318685-pat00001

1-2. 1-2. BRD4BRD4 -- NUTM1NUTM1 융합 유전자 특이적 fusion gene specific siRNA의siRNA 설계 design

상기 실시예 1-1에서 확인한 BRD4 - NUTM1 융합 유전자의 브레이크 포인트에 특이적으로 작용하는 siRNA를 디자인하기 위해서, 3' 말단에 oligo dT 오버행 (overhang)을 포함시킨 15개의 BRD4 - NUTM1 siRNA를 제작하였다. 그 구체적인 서열 정보를 표 1에 나타내었다. siRNA는 센스 서열 및 안티센스 서열을 이중가닥 복합체 형태로 제조하여 이용하였다. BRD4 - NUTM1 confirmed in Example 1-1 To design an siRNA that specifically acts on the breakpoint of the fusion gene, 15 BRD4 - NUTM1 containing an oligo dT overhang at the 3' end siRNA was constructed. The specific sequence information is shown in Table 1. siRNA was used by preparing a sense sequence and an antisense sequence in the form of a double-stranded complex.

센스 (sense ( 5' - 3‘)5' - 3') 안티센스antisense (5' - 3‘) (5' - 3') siBRD4siBRD4 -- NUTM1NUTM1 _1_One CAGCAUCUGCAUUGCCGGGttCAGCAUCUGCAUUGCCGGGtt CCCGGCAAUGCAGAUGCUGttCCCGGCAAUGCAGAUGCUGtt siBRD4siBRD4 -- NUTM1NUTM1 _2_2 ACAGCAUCUGCAUUGCCGGttACAGCAUCUGCAUUGCCGGtt CCGGCAAUGCAGAUGCUGUttCCGGCAAUGCAGAUGCUGUtt siBRD4siBRD4 -- NUTM1NUTM1 _3_3 AACAGCAUCUGCAUUGCCGttAACAGCAUCUGCAUUGCCGtt CGGCAAUGCAGAUGCUGUUttCGGCAAUGCAGAUGCUGUUtt siBRD4siBRD4 -- NUTM1NUTM1 _4_4 AAACAGCAUCUGCAUUGCCttAAACAGCAUCUGCAUUGCCtt GGCAAUGCAGAUGCUGUUUttGGCAAUGCAGAUGCUGUUUtt siBRD4siBRD4 -- NUTM1NUTM1 _5_5 GAAACAGCAUCUGCAUUGCttGAAACAGCAUCUGCAUUGCtt GCAAUGCAGAUGCUGUUUCttGCAAUGCAGAUGCUGUUUCtt siBRD4siBRD4 -- NUTM1NUTM1 _6_6 CGAAACAGCAUCUGCAUUGttCGAAACAGCAUCUGCAUUGtt CAAUGCAGAUGCUGUUUCGttCAAUGCAGAUGCUGUUUCGtt siBRD4siBRD4 -- NUTM1NUTM1 _7_7 CCGAAACAGCAUCUGCAUUttCCGAAACAGCAUCUGCAUUtt AAUGCAGAUGCUGUUUCGGttAAUGCAGAUGCUGUUUCGGtt siBRD4siBRD4 -- NUTM1NUTM1 _8_8 UCCGAAACAGCAUCUGCAUttUCCGAAACAGCAUCUGCAUtt AUGCAGAUGCUGUUUCGGAttAUGCAGAUGCUGUUUCGGatt siBRD4siBRD4 -- NUTM1NUTM1 _9_9 CUCCGAAACAGCAUCUGCAttCUCCGAAACAGCAUCUGCAtt UGCAGAUGCUGUUUCGGAGttUGCAGAUGCUGUUUCGGAGtt siBRD4siBRD4 -- NUTM1NUTM1 _10_10 ACUCCGAAACAGCAUCUGCttACUCCGAAACAGCAUCUGCtt GCAGAUGCUGUUUCGGAGUttGCAGAUGCUGUUUCGGAGUtt siBRD4siBRD4 -- NUTM1NUTM1 _11_11 GACUCCGAAACAGCAUCUGttGACUCCGAAACAGCAUCUGtt CAGAUGCUGUUUCGGAGUCttCAGAUGCUGUUUCGGAGUCtt siBRD4siBRD4 -- NUTM1NUTM1 _12_12 AGACUCCGAAACAGCAUCUttAGACUCCGAAACAGCAUCUtt AGAUGCUGUUUCGGAGUCUttAGAUGCUGUUUCGGAGUCUtt siBRD4siBRD4 -- NUTM1NUTM1 _13_13 AAGACUCCGAAACAGCAUCttAAGACUCCGAAACAGCAUCtt GAUGCUGUUUCGGAGUCUUttGAUGCUGUUUCGGAGUCUUtt siBRD4siBRD4 -- NUTM1NUTM1 _14_14 GAAGACUCCGAAACAGCAUttGAAGACUCCGAAACAGCAUtt AUGCUGUUUCGGAGUCUUCttAUGCUGUUUCGGAGUCUUCtt siBRD4siBRD4 -- NUTM1NUTM1 _15_15 CGAAGACUCCGAAACAGCAttCGAAGACUCCGAAACAGCAtt UGCUGUUUCGGAGUCUUCGttUGCUGUUUCGGAGUCUUCGtt

실시예Example 2. 2. BRD4BRD4 -- NUTM1NUTM1 특이적 specific siRNA의siRNA 활성 분석 activity assay

실시예 1에서 확보한 siRNA 중 BRD4 - NUTM1 융합 유전자에 보다 특이적인 siRNA를 스크리닝하기 위해서 in vitro 상에서 활성을 분석하였다. 구체적으로, BRD4-NUTM1 융합유전자를 발현하는 HCC2429 세포주에 15개의 siRNA (도 4A)를 전기천공법으로 (pulse voltage: 1600V pulse width: 10ms pulse number: 3) 트랜스펙션시키고, 72시간 후 세포의 기능 변화를 관찰하였다. 이를 위해, 일부 샘플로부터 mRNA를 분리하고 역전사 효소 (reverse transcriptase)를 이용하여 cDNA를 만든 후 qPCR(quantitative PCR) 방법으로 세포 내 BRD4-NUTM1 mRNA의 발현 여부를 확인하였다. 그 결과를 도 4에 나타내었다. Among the siRNAs obtained in Example 1, BRD4 - NUTM1 In order to screen for siRNA more specific for the fusion gene, the activity was analyzed in vitro. Specifically, 15 siRNAs (FIG. 4A) were transfected into the HCC2429 cell line expressing the BRD4-NUTM1 fusion gene by electroporation (pulse voltage: 1600V pulse width: 10ms pulse number: 3), and after 72 hours, the cells were Functional changes were observed. To this end, mRNA was isolated from some samples, cDNA was prepared using reverse transcriptase, and the expression of BRD4-NUTM1 mRNA in cells was checked by qPCR (quantitative PCR). The results are shown in FIG. 4 .

도 4의 B에 나타낸 바와 같이, BRD4-UTR region의 발현을 확인하는 프라이머를 이용하여 BRD4 mRNA 발현을 확인함으로써, 정상적인 BRD4 단백질의 발현에 영향을 미치지 않으면서 BRD4-NUTM1 특이적으로 발현을 억제하는 siRNA를 선별한 결과, 15개의 siRNA 후보 중 siRNA # 7, # 9, # 12의 활성이 특히 우수함을 확인하였다. siRNA #15의 경우 BRD4-NUTM1의 발현을 억제하기는 하나 BRD4-UTR의 발현, 즉 정상적인 BRD4의 발현을 억제하고 있어 부적합하다. As shown in FIG. 4B, by confirming the expression of BRD4 mRNA using a primer that confirms the expression of the BRD4-UTR region, BRD4-NUTM1-specific expression is inhibited without affecting the expression of normal BRD4 protein. As a result of screening siRNAs, it was confirmed that the activities of siRNAs # 7, # 9, and # 12 among 15 siRNA candidates were particularly excellent. In the case of siRNA #15, although it suppresses the expression of BRD4-NUTM1, it is inappropriate because it suppresses the expression of BRD4-UTR, that is, the normal expression of BRD4.

다음으로, 1차 선별된 siRNA # 7, # 9, # 12를 동일한 방법으로 HCC2429 세포주에 처리한 후, BRD4-NUTM1 단백질 발현과 세포 증식 능력의 변화를 확인하였다. 상기 HCC2429 세포주는 NUT 육아종 세포주(midline carcinoma cell line)로 BRD4-NUTM1 융합유전자에 의해서 암이 발생된 세포이다. 이와 함께 정상 기능을 하는 NUTM1의 mRNA 발현에 미치는 영향도 확인하였다. siRNA #6은 실험의 음성 대조군으로 사용하였으며, NUTM1 siRNA는 기존에 사용되고 있는 BRD4-NUTM1 발현을 억제하기 위해 사용되는 양성 대조군에 해당한다. 그 결과를 도 5 및 도 6에 각각 나타내었다. Next, after the primary-selected siRNAs # 7, # 9, and # 12 were treated in the HCC2429 cell line in the same manner, changes in BRD4-NUTM1 protein expression and cell proliferation ability were confirmed. The HCC2429 cell line is a NUT granuloma cell line (midline carcinoma cell line) in which cancer is generated by the BRD4-NUTM1 fusion gene. In addition, the effect on the mRNA expression of NUTM1, which functions normally, was also confirmed. siRNA #6 was used as a negative control for the experiment, and NUTM1 siRNA corresponds to a positive control used to suppress the expression of BRD4-NUTM1, which has been previously used. The results are shown in FIGS. 5 and 6 , respectively.

도 5A 및 5B에 나타낸 바와 같이, siRNA # 7, # 9, # 12는 BRD4-NUTM1 단백질의 발현을 특이적으로 억제하고, 암세포의 증식 역시 억제함을 확인하였다. 그러나 siRNA # 12는 정상기능을 하는 BRD4의 발현도 일부 억제하는 것이 확인되었다. As shown in FIGS. 5A and 5B , it was confirmed that siRNAs # 7, # 9, and # 12 specifically inhibited the expression of BRD4-NUTM1 protein and also inhibited the proliferation of cancer cells. However, it was confirmed that siRNA #12 also partially suppressed the expression of normally functioning BRD4.

또한, 도 6에 나타낸 바와 같이, 양성 대조군으로 사용된 NUTM1 siRNA가 정상 기능을 하는 NUTM1 mRNA의 발현까지 억제하는데 반해, 본 발명에 따른 siRNA # 7, # 9는 NUTM1 mRNA에 대해서는 특이적인 영향이 없음을 확인하였다. 따라서 1차 선별된 siRNA # 7, # 9, # 12 중 siRNA # 7, # 9가 가장 우수한 항암 효과를 나타냄을 확인하였다. In addition, as shown in FIG. 6 , while the NUTM1 siRNA used as a positive control suppressed even the expression of normally functioning NUTM1 mRNA, siRNAs # 7 and # 9 according to the present invention had no specific effect on NUTM1 mRNA. was confirmed. Therefore, it was confirmed that siRNAs #7 and #9 showed the best anticancer effect among the siRNAs #7, #9, and #12 that were first selected.

종합적으로, 이상의 실험 결과를 통해, 본 발명의 BRD4 - NUTM1 융합 유전자 특이적 siRNA는 암세포에 존재하는 BRD4 - NUTM1 융합 유전자에 특이적으로 작용하여 이의 발현을 억제하고 암세포 증식을 억제시키는 효과가 우수한바, 암의 예방 또는 치료에 유용하게 사용할 수 있음을 확인하였다.Overall, through the above experimental results, the BRD4 - NUTM1 of the present invention Fusion gene-specific siRNA is BRD4 - NUTM1 present in cancer cells It was confirmed that it can be usefully used for the prevention or treatment of cancer, since it specifically acts on the fusion gene to suppress its expression and inhibit the proliferation of cancer cells.

비록 본 발명이 상기에 언급된 바람직한 실시예로서 설명되었으나, 발명의 요지와 범위로부터 벗어남이 없이 다양한 수정이나 변형을 하는 것이 가능하다. 또한, 첨부된 청구 범위는 본 발명의 요지에 속하는 이러한 수정이나 변형을 포함한다.Although the present invention has been described as the above-mentioned preferred embodiment, it is possible to make various modifications and variations without departing from the spirit and scope of the invention. It is also intended that the appended claims cover such modifications and variations as fall within the subject matter of the present invention.

<110> SAMSUNG LIFE PUBLIC WELFARE FOUNDATION <120> Composition for preventing or treating of cancer comprising BRD4-NUTM1 specific siRNA <130> SS1-63P <150> KR 10-2019-0002614 <151> 2019-01-09 <160> 30 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 19 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> siBRD4-NUTM1_1_S <400> 1 cagcaucugc auugccggg 19 <210> 2 <211> 19 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> siBRD4-NUTM1_2_S <400> 2 acagcaucug cauugccgg 19 <210> 3 <211> 19 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> siBRD4-NUTM1_3_S <400> 3 aacagcaucu gcauugccg 19 <210> 4 <211> 19 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> siBRD4-NUTM1_4_S <400> 4 aaacagcauc ugcauugcc 19 <210> 5 <211> 19 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> siBRD4-NUTM1_5_S <400> 5 gaaacagcau cugcauugc 19 <210> 6 <211> 19 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> siBRD4-NUTM1_6_S <400> 6 cgaaacagca ucugcauug 19 <210> 7 <211> 19 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> siBRD4-NUTM1_7_S <400> 7 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Artificial Sequence <220> <223> siBRD4-NUTM1_12_AS <400> 27 agaugcuguu ucggagucu 19 <210> 28 <211> 19 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> siBRD4-NUTM1_13_AS <400> 28 gaugcuguuu cggagucuu 19 <210> 29 <211> 19 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> siBRD4-NUTM1_14_AS <400> 29 augcuguuuc ggagucuuc 19 <210> 30 <211> 19 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> siBRD4-NUTM1_15_AS <400> 30 ugcuguuucg gagucuucg 19

Claims (7)

서열번호 7 또는 서열번호 9 중 어느 하나의 염기서열로 표시되는 siRNA (small interfering RNA)를 포함하는 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
A pharmaceutical composition for preventing or treating cancer, comprising siRNA (small interfering RNA) represented by any one of SEQ ID NO: 7 or SEQ ID NO: 9.
 제1항에 있어서, 상기 siRNA는 BRD4 (Bromodomain containing protein 4)-NUTM1 (Nuclear protein in testis) 융합 유전자에 특이적으로 결합하는 것을 특징으로 하는, 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
The method of claim 1, wherein the siRNA is BRD4 (Bromodomain containing protein 4) -NUTM1 (Nuclear protein in testis) A pharmaceutical composition for preventing or treating cancer, characterized in that it specifically binds to the fusion gene.
 삭제delete 제1항에 있어서, 상기 암은 BRD4 - NUTM1 양성 암인 것을 특징으로 하는, 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
The pharmaceutical composition for preventing or treating cancer according to claim 1, wherein the cancer is a BRD4 - NUTM1 positive cancer.
제4항에 있어서, 상기 암은 폐암, 흉선암, 신장암 또는 NUT 육아종인 것을 특징으로 하는, 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
The pharmaceutical composition for preventing or treating cancer according to claim 4, wherein the cancer is lung cancer, thymus cancer, renal cancer or NUT granuloma.
 서열번호 7 또는 서열번호 9 중 어느 하나의 염기서열로 표시되는 siRNA (small interfering RNA)를 포함하는 암 예방 또는 개선용 식품 조성물.
A food composition for preventing or improving cancer, comprising siRNA (small interfering RNA) represented by any one of SEQ ID NO: 7 or SEQ ID NO: 9.
 서열번호 7 또는 서열번호 9 중 어느 하나의 염기서열로 표시되는 siRNA (small interfering RNA)를 포함하는 항암 보조용 조성물. A composition for adjuvant anticancer comprising siRNA (small interfering RNA) represented by any one of the nucleotide sequences of SEQ ID NO: 7 or SEQ ID NO: 9.
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Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010011700A2 (en) * 2008-07-23 2010-01-28 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Treatment of cancers characterized by chromosomal rearrangement of the nut gene
US20170007595A1 (en) 2014-01-24 2017-01-12 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Nsd3 inhibitors for treatment of cancers

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010011700A2 (en) * 2008-07-23 2010-01-28 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Treatment of cancers characterized by chromosomal rearrangement of the nut gene
US20170007595A1 (en) 2014-01-24 2017-01-12 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Nsd3 inhibitors for treatment of cancers

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
GenBank accession no. AY166680.1 (2003.01.20.) 1부.*
비특허문헌 1: CANCER RES. 2011

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