KR102248563B1 - 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 및 그 제조 방법 - Google Patents
음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 및 그 제조 방법 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명의 일 실시예에 따른 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 제조 방법은, 바실러스 아밀로리퀘패시엔스(Bacillus amyloliquefaciens) WYH-1 균주(KACC 92286P), 라이시니바실러스 마크로이데스(Lysinibacillus macroides) WYH-2 균주(KACC 92287P), 라이시니바실러스 푸시포르미스(Lysinibacillus fusiformis) WYH-3 균주(KACC 92288P) 중 적어도 1종 이상을 포함하는 미생물을 20시간 내지 30시간동안 액상 배양하여 액상 배양액을 제조하는 배양액 제조 단계; 및 액상 배양액을 대두박에 분무한 후, 이를 30℃ 내지 38℃에서 20시간 내지 30시간 동안 고상 발효하여 고상 발효물을 생성하는 고상 발효 단계를 포함한다.
Description
본 발명은 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 및 그 제조 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 미생물 고상발효방법 또는 고상흡착방법을 이용한 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 및 그 제조 방법에 관한 것이다.
현재 음식물 쓰레기와 가축의 분뇨를 퇴비화하여 농가에 보급하면서 발생되는 악취와 독가스로 인해 농가의 피해가 극심하다.
음식물 쓰레기에서 나는 악취로 인해 민원이 발생하여 지자체마다 골머리를 안고 있으며, 특별한 해결 방법이 없어 막대한 비용이 투입됨에 따른 부담이 급증하고 있다.
또한, 음식물 쓰레기를 매립하였을 경우 발생되는 지독한 악취와 함께 매립지에서 해충 및 병원성 세균이 발생되는 문제가 있으며, 토양과 수질이 오염되어 땅의 황폐화가 심각한 실정이다.
이에, 음식물 쓰레기를 분해하여 비료화할 수 있는 미생물 제제의 개발 필요성이 제기되었다.
본 발명은 음식물쓰레기를 분해하여 비료화 하는데 사용되는 기존 미생물을 대상으로 최적화된 배양 환경을 적용하여 이들 미생물들이 음식물을 분해하는데 필요한 분해 효소를 다량으로 생산할 수 있는 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 및 그 제조 방법을 제공하는 데 있다.
또한, 본 발명은 균주별로 고상발효방법 또는 고상흡착방법을 적용하여, 안정적인 균수를 확보하고 효소 생성량이 증대됨과 동시에 기존 배지 대비 생산 단가를 낮출 수 있는 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 및 그 제조 방법을 제공하는 데 있다.
본 발명의 일 실시예에 따른 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 제조 방법은, 바실러스 아밀로리퀘패시엔스(Bacillus amyloliquefaciens) WYH-1 균주(KACC 92286P), 라이시니바실러스 마크로이데스(Lysinibacillus macroides) WYH-2 균주(KACC 92287P), 라이시니바실러스 푸시포르미스(Lysinibacillus fusiformis) WYH-3 균주(KACC 92288P) 중 적어도 1종 이상을 포함하는 미생물을 20시간 내지 30시간동안 액상 배양하여 액상 배양액을 제조하는 배양액 제조 단계; 및 액상 배양액을 대두박에 분무한 후, 이를 30℃ 내지 38℃에서 20시간 내지 30시간 동안 고상 발효하여 고상 발효물을 생성하는 고상 발효 단계를 포함한다.
본 발명의 일 실시예에 따른 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 제조 방법은, 바실러스 아밀로리퀘패시엔스(Bacillus amyloliquefaciens), 라이시니바실러스 마크로이데스(Lysinibacillus macroides), 라이시니바실러스 푸시포르미스(Lysinibacillus fusiformis) 중 적어도 1종 이상을 포함하는 미생물을 액상 배양하여 액상 배양액을 제조하는 배양액 제조 단계; 및 액상 배양액을 대두박, 옥분, 밀배아 중 어느 하나에 분무한 후, 이를 30℃ 내지 38℃에서 20시간 내지 30시간 동안 고상 흡착하여 고상 흡착물을 생성하는 고상 흡착 단계를 포함한다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 배양액 제조 단계는, 30℃ 내지 38℃의 배지 환경 내에서 100 rpm 내지 200 rpm 조건으로 이루어진다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 고상 발효물 또는 고상 흡착물을 건조하여 건조물을 생성하는 건조 단계를 더 포함한다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 건조 단계는, 고상 발효물 또는 고상 흡착물의 수분 함량이 5% 내지 10%가 되도록 20시간 내지 30시간 동안 이루어진다.
본 발명의 일 실시예에 따른 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 제조 방법은, 건조물을 분쇄하는 분쇄 단계를 포함한다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 분쇄 단계는, 건조물이 100 mesh 내지 200 mesh의 입자를 갖도록 이루어진다.
본 발명의 일 실시예에 따른 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제는 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 제조 방법에 의해 제조된다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제는 리파아제(Lipase), 아밀라아제(Amylase), 프로테아제(Protase) 중 적어도 1종 이상의 효소를 포함한다.
본 발명의 일 실시예에 따른 음식물 쓰레기 분해 방법은, 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제를 대상에 처리하는 방법을 포함한다.
본 발명의 일 실시예에 따른 음식물 쓰레기 분해 방법은, 음식물 쓰레기에 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제를 혼합 처리하는 방법을 포함한다.
본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제들은 이상에서 언급한 기술적 과제들로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 다른 기술적 과제들은 아래의 기재로부터 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
본 발명의 일 실시예에 따른 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 및 그 제조 방법을 활용하면, 음식물 쓰레기를 분해하여 비료화 하는데 사용되는 기존 미생물을 대상으로 최적화된 배양 환경을 적용하여 이들 미생물들이 음식물을 분해하는데 필요한 분해 효소를 다량으로 생산할 수 있는 효과가 있다.
또한, 균주별로 고상발효방법 또는 고상흡착방법을 적용하여, 안정적인 균수를 확보하고 효소 생성량이 증대됨과 동시에 기존 배지 대비 생산 단가를 낮출 수 있는 효과가 있다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제의 제조 방법을 도시한 순서도이다.
본 발명은 다양한 변환을 가할 수 있고 여러 가지 실시 예를 가질 수 있는 바, 특정 실시 예들을 도면에 예시하고 상세한 설명에서 상세하게 설명하고자 한다. 그러나, 이는 본 발명을 특정한 실시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변환, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 첨부되는 도면과 함께 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나, 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.
본 출원에서 사용한 용어는 단지 특정한 실시예를 설명하기 위해 사용된 것으로, 본 발명을 한정하려는 의도가 아니다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다. 본 출원에서, "포함하다" 또는 "가지다" 등의 용어는 명세서상에 기재된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성요소 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이지, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나 숫자, 단계, 동작, 구성요소 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.
종래의 음식물 분해제는 화학성분을 첨가한 제품이 대다수이며, 중금속을 비롯한 유해물질을 포함하는 제품을 사용할 경우, 이차적인 환경 오염을 발생시킬 우려가 있었다.
하지만, 본 발명의 일 실시예에 따른 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제는 미생물을 배양하여 생성되는 효소를 이용하는 것으로, 유해물질을 포함하지 않는 친환경적인 물질로 구성되며, 음식물 쓰레기의 분해능을 갖는 것을 특징으로 하는 발명이다.
본 발명의 미생물 제제는 음식물 쓰레기 뿐만 아니라 가축 분뇨의 악취 제거제로도 사용될 수 있다. 그러나, 본 발명의 미생물 제제는 그 사용 목적을 이에 한정하지 않으며 다양한 분야에 활용될 수 있을 것이다.
이하, 본 발명의 일 실시예에 따른 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 제조 방법을 단계별로 설명한다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제의 제조 방법을 도시한 순서도이다.
도 1을 참조하면, 본 발명의 일 실시예에 따른 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 제조 방법(100)은, 배양액 제조 단계(S110) 및 고상 발효 단계(S120-1)를 포함하도록 제공될 수 있다.
먼저, 배양액 제조 단계(S110)가 수행된다.
배양액 제조 단계(S110)는 음식물 쓰레기 분해용 미생물을 액상 배양액의 형태로 제조하는 단계이다.
본 발명에 사용되는 미생물은, 바실러스 아밀로리퀘패시엔스(Bacillus amyloliquefaciens), 라이시니바실러스 마크로이데스(Lysinibacillus macroides), 라이시니바실러스 푸시포르미스(Lysinibacillus fusiformis) 중 적어도 1종 이상을 포함하는 것일 수 있다.
상기 미생물들은 효소 생성능이 높아 음식물 쓰레기 분해용 미생물로 본 발명에 적용하기에 매우 적합하다. 다만, 본 발명의 미생물 제제에 적용 가능한 미생물은 상술한 것들에 한정되는 것은 아니며, 음식물 쓰레기 분해용으로 사용되는 미생물이라면 모두 적용 가능하다.
이렇게 준비된 상기 미생물들은 통상적으로 기존 균주 분양센터에서 추천하는 배지(1L당 약 289원, 배지 조성: Pancreatic digest of casein 17.0g, Papaic digest of soy bean 3.0g, Dextrose 2.5g, Sodium chloride 5.0g, Dipotassium phosphate 2.5g)를 통해 배양할 수 있다.
또는, 최적화된 배지(1L 당 약 103원, 배지조성: Yeast extract 16.0g, Sodium chloride 0.1g, Starch 20.0g)를 통해 배양할 수도 있다.
또는, 산업용 배지(1L 당 약 63원, 배지조성: Yeast extract 9.0g, Sodium chloride 0.1g, Soy peptone 4.0g, Glucose 2.0g, K2HPO4 2.0g)에서 배양할 수도 있다.
상술한 배지를 사용하는 경우, 미생물을 약 30℃ 내지 약 38℃의 배지 환경 내에서 약 130 rpm 내지 약 170 rpm 조건으로 약 20시간 내지 약 30시간 동안 액상 배양하여 액상 배양액을 제조하는 과정이 수행된다.
또는 약 32℃ 내지 약 36℃의 배지 환경 내에서 약 130 rpm 내지 약 170 rpm 조건으로 약 23시간 내지 약 27시간 동안 액상 배양을 수행할 수도 있다.
상기 배양 조건 내에서는 분무용으로 사용이 적합한 정도의 포자가 형성되는 바, 하기 단계에서 그 사용이 적합하게 된다.
그러나 상기 배양 조건을 벗어날 경우에는 포자가 너무 과도하게 형성되어 오히려 후술할 고상 발효 단계(S120-1)에서의 분무 처리가 용이하지 못하게 되거나, 포자가 너무 적게 형성될 우려가 있다.
따라서, 본 발명이 목적하는 우수한 분해능을 갖는 배양액을 배양하기 위해서는 배지 환경을 상술한 적정 범위 내에서 유지하는 것이 요구된다.
이어서, 고상 발효 단계(S120-1)가 수행된다.
고상 발효(Solid State Fermentations; SSF)는 일반적인 생균제 발효 방법으로서, 환경적 요인에 의해 미생물 생장과 제품형성에 중요한 영향을 미치는 바, 이 단계를 통해 효소 및 유기산 등의 대사산물 생산을 최대로 생산할 수 있게 된다.
고상 발효 단계(S120-1)에서는, 액상 배양액을 대두박에 골고루 분무한 후, 이를 약 30℃ 내지 약 38℃에서 약 20시간 내지 약 30시간 동안 고상 발효하여 고상 발효물을 생성하는 작업이 수행된다. 실시예에 있어서, 약 32℃ 내지 약 36℃의 온도 하에서 약 23시간 내지 약 27시간 동안 수행될 수도 있다.
이 때, 상기 온도 범위를 벗어나는 환경에서 고상 발효가 수행된 경우에는 상기 미생물들의 생성에 오히려 악영향을 미치게 된다. 또한, 약 20시간 미만으로 발효 시에는 본 발명이 목적하는 정도의 효소 생성능 수치가 달성되지 못하므로 우수한 효능을 얻기 어려우며, 약 30시간을 초과할 경우에는 초과된 시간 대비 상승된 효소 생성능을 얻지 못하게 된다. 따라서, 상기 환경 조건 범위를 하는 것이 매우 중요하게 된다.
본 발명의 일 실시예에 따르면, 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 제조 방법(100)은 배양액 제조 단계(S110) 및 고상 흡착 단계(S120-2)를 포함하도록 제공될 수 있다.
먼저, 배양액 제조 단계(S110)에서는 음식물 쓰레기 분해용 미생물을 액상 배양하여 액상 배양액을 제조한다.
해당 단계는 전술한 본 발명의 일 실시예의 배양액 제조 단계(S110)와 동일한 미생물을 사용하여 동일한 배지 환경 조건에서 수행되므로 전술한 바를 참조하며 자세한 설명은 생략한다.
이어서, 본 발명의 일 실시예에 따르면, 고상 발효 단계(S120-1) 대신 고상 흡착 단계(S120-2)가 수행된다.
고상 흡착 단계(S120-2)에서는 배양액 제조 단계(S110)에서 생성된 액상 배양액을 대두박, 옥분, 밀배아 중 어느 하나에 골고루 분무한 후, 고상 흡착하여 고상 흡착물을 생성하는 작업이 수행된다.
고상 흡착은 약 30℃ 내지 약 38℃에서 약 20시간 내지 약 30시간 동안 수행될 수 있으며, 실시예에 있어서, 약 32℃ 내지 약 36℃에서 약 23시간 내지 약 27시간 동안 수행될 수도 있다.
상술한 본 발명의 실시예들에 따르면, 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 제조 방법으로 제조된 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제가 제공될 수 있다.
상기 미생물 제제는 상술한 본 발명의 실시예들을 통해 얻어진 고상 발효물 혹은 고상 흡착물일 수 있으며, 리파아제(Lipase), 아밀라아제(Amylase), 프로테아제(Protase) 중 적어도 1종 이상의 효소를 포함하게 된다.
상기 효소는 어떠한 균주를 사용하느냐에 따라, 각각 상이한 효소들이 생성될 수 있으며, 그 생성능에 있어서도 차이가 나타날 수 있다.
예를 들면, 바실러스 아밀로리퀴훼시엔스(Bacillus amyloliquefaciens) WYH-1은 리파아제(Lipase), 라이시니바실러스 마크로이데스(Lysinibacillus macroides) WYH-2는 아밀라아제(Amylase) 위주의 생성능을 나타낼 수 있으며, 라이시니바실러스 푸시포르미스(Lysinibacillus fusiformis) WYH-3에서는 프로테아제(Protease) 생성능을 주요하게 나타낼 수 있다.
특히, 상기 균주들이 나타내는 효소활성들이 각기 다르므로, 각 효소 활성 특성에 맞춰 상술한 고상 발효 단계 혹은 고상 흡착 단계를 선택적으로 적용함에 따라 보다 상승된 효소 생성능을 갖도록 할 수 있다.
본 발명의 실시예들이 이와 같이 상승된 효소 생성능을 갖게 됨에 따라, 기존 배지와 동일한 환경 및 동일한 균주를 사용하면서도 우수한 효소 생성능을 나타내게 되므로, 생산 단가를 절감할 수 있는 이점이 있게 된다.
이와 같은 효과를 가지는 본 발명의 미생물 제제는 음식물 쓰레기에 혼합하여 사용할 수 있으며, 음식물 쓰레기에 분사하는 스프레이와 같은 액상 형태로 활용될 수도 있다.
본 발명의 미생물 제제의 사용 방법은 상술한 활용 방법에 한정되는 것은 아니며, 음식물 쓰레기 뿐만 아니라 가축의 분뇨 등 다양한 분야에 다양한 방식으로 활용될 수 있을 것이다.
나아가, 본 발명의 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제는 다음과 같은 단계를 더 수행함에 따라 분말의 형태로 제공될 수 있다.
계속해서 도 1을 참조하면, 본 발명의 일 실시예에 따른 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 제조 방법(100)은, 건조 단계(S130) 및 분쇄 단계(S140)를 더 포함하도록 제공될 수 있다.
먼저, 건조 단계(S130)는 상기 고상 발효 단계(S120-1) 혹은 고상 흡착 단계(S120-2) 이후, 수행되는 단계로서, 전술한 단계들에서 얻어진 고상 발효물 또는 고상 흡착물을 건조하는 작업이 수행된다.
건조 작업은 상기 고상 발효물 또는 상기 고상 흡착물의 수분을 제거하는 작업으로서, 음식물 쓰레기와의 혼합 시 부패 없이 분해능 만을 높이기 위해서는 상기 고상 발효물 또는 상기 고상 흡착물의 수분 함량이 약 5 내지 약 10% 정도 인 것이 좋다.
따라서, 건조 단계(S130)는 고상 발효물 또는 고상 흡착물의 수분함량이 약 5% 내지 약 10%가 되도록 약 20시간 내지 약 30시간 동안 어루어지는 것이 바람직하다.
만약, 상기 범위를 벗어나는 조건에서 건조 단계(S130)가 수행될 시, 본 발명이 목적하는 분해능에 도달하지 못하는 문제점이 발생할 가능성이 있다.
예를 들면, 고상 발효물 또는 고상 흡착물의 수분 함량이 약 10%를 초과하게 되는 경우 수분 함량이 너무 높아 부패가 발생할 우려가 있으며, 수분 함량이 약 5% 미만이 되는 경우 수분 함량이 너무 낮아 오히려 미생물의 분해능이 떨어지게 될 우려가 있게 된다.
이어서 분쇄 단계(S140)가 수행된다.
분쇄 단계(S140)는 상기 건조 단계(S130)에서 생성된 건조물을 분쇄하는 작업이 수행된다.
이 때, 분쇄 단계(S140)에서는 음식물 쓰레기와 잘 혼합되어 분해능을 보다 높여주기 위해 상기 건조물이 약 100 mesh 내지 약 200 mesh 입자를 갖도록 분쇄 작업을 수행하는 것이 바람직하다.
실시예에 있어서, 분쇄가 완료된 건조물은 약 120 mesh 내지 약 180 mesh의 입자를 가질 수 있으며, 약 140 mesh 내지 약 160 mesh의 입자를 가질 수도 있다.
이러한 단계들을 포함하는 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 제조 방법(100)을 사용하면 분말 형태의 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제가 제공될 수 있다.
이 때, 상기 미생물 제제는 상술한 건조 단계(S130) 및 분쇄 단계(S140)를 통해 얻어진 건조물일 수 있으며, 리파아제(Lipase), 아밀라아제(Amylase), 프로테아제(Protase) 중 적어도 1종 이상의 효소를 포함하게 된다.
이에 따라, 본 발명의 미생물 제제는 음식물 쓰레기의 분해능을 나타내게 되며, 다음과 같은 음식물 쓰레기 분해 방법을 통해 사용될 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 따른 음식물 쓰레기 분해 방법은 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제를 대상에 처리하는 방법을 포함한다.
예를 들면, 음식물 쓰레기에 본 발명의 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제를 혼합 처리함으로써, 음식물 쓰레기의 분해를 촉진시켜 음식물 쓰레기를 자원화할 수 있다.
또한, 상기 미생물 제제를 토양에 뿌려주는 경우, 미생물과 효소가 작용하여 식물이 자라기 좋은 상태로 바뀌어, 작물의 성장이 촉진할 수 있다.
또한, 상기 미생물 제제를 퇴비용 원료에 첨가하여 퇴비를 제조할 수 있다. 퇴비용 원료는 일반적인 퇴비 제조 시에 사용되는 원료를 의미하는 것으로, 가축의 분뇨를 사용할 수 있다.
본 발명의 미생물 제제의 활용 방식은 상기 예시들에 한정되는 것은 아니며, 다양한 사용처에서 다양한 활용 방법을 통해 본 발명을 실시할 수 있을 것이다.
아래에서는 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예를 들어 설명한다. 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 제조
먼저, 미생물 액상배양액을 제조하였다.
이때, 상기 미생물로는 바실러스 아밀로리퀴훼시엔스(Bacillus amyloliquefaciens) WYH-1, 라이시니바실러스 마크로이데스(Lysinibacillus macroides) WYH-2, 라이시니바실러스 푸시포르미스(Lysinibacillus fusiformis) WYH-3를 준비하였다.
상기 미생물들은 배지 환경에서 배양되도록 하였으며, 배지의 환경 조건은 아래와 같이 마련하였다.
하기 표 1은 최적 배지와 산업용 배지의 1L 당 구성 성분들을 나타낸 것이다.
최적 배지 성분(1L당) | 산업용 배지(1L당) |
Yeast extract------- 16.0g | Yeast extract--------- 9.0g |
Sodium chloride---- 0.1g | Sodium chloride------ 0.1g |
Starch------------- 20.0g | Soy peptone---------- 4.0g |
Glucose--------------- 2.0g | |
K2HPO4---------------- 2.0g |
표 1과 같은 배지를 준비하여 약 35℃에서 약 150 rpm의 배양 조건 하에서 약 24시간 동안 미생물을 배양하여 미생물 액상 배양액들을 제조하였다.그 결과, 하기 표 2와 같이 나타났다.
구분 | 균수 (균주:cfu/g, 효소:u/g) | |
최적 배지 | 산업용 배지 | |
WYH-1 | 7.0E+07 | 6.4E+07 |
리파아제 | 1.4 | 2.6 |
WYH-2 | 8.4E+07 | 7.1E+07 |
아밀라아제 | 3.2 | 3.9 |
WYH-3 | 5.3E+08 | 3.2E+07 |
프로테아제 | 5.2 | 1.4 |
상기 표 2에 나타난 바와 같이, 상술한 액상 배양 상태의 경우, 효소 생성량에서 큰 유의 차를 보이지 않음을 확인할 수 있었다.이에 본 발명에서는 상기 미생물 액상 배양액들을 고상 발효방법을 적용하되, 먼저 대두박에 상기 제조한 미생물 액상 배양액을 분무한 후, 이를 약 35℃에서 약 24시간 동안 고상 발효하여 고상 발효물을 생성하였다.
이 후, 고상 발효물을 약 24시간 동안 건조한 다음 분쇄하여 본 발명의 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제를 제조하였다.
실시예 2: 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제2 제조
미생물 액상배양액은 상기 실시예 1과 같은 방법으로 제조하여 준비한 후, 여기에 고상 발효 단계 대신 고상 흡착 단계를 적용하여 본 발명의 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제를 제조하였다.
고상 흡착 방법으로는 우선 대두박, 옥분(옥수수전분), 밀배아를 준비한 후, 대두박에는 프로테아제 생성능을 갖는 균주인 상기 라이시니바실러스 푸시포르미스(Lysinibacillus fusiformis) WYH-3로 구성된 미생물 액상 배양액을 각각 분무한 후, 이를 약 35℃에서 흡착시킨 다음 약 24시간 동안 건조한 후, 분쇄하여 상기 미생물 제제를 제조하였다.
상기 대두박 대신 옥분(옥수수 전분)을 적용하는 경우, 아밀라아제 생성능을 갖는 균주인 상기 라이시니바실러스 마크로이데스(Lysinibacillus macroides) WYH-2로 구성된 미생물 액상 배양액을 적용하여 미생물 제제를 제조하였다.
상기 대두박 대신 밀배아를 적용 시에는 리파아제 생성능을 갖는 상기 바실러스 아밀로리퀴훼시엔스(Bacillus amyloliquefaciens) WYH-1로 구성된 미생물 액상 배양액을 적용하여 미생물 제제를 제조하였다.
실시예 3: 효소 증가 확인 실험
1. 실험 방법
종래의 음식물 쓰레기 분해 처리시 일반적으로 사용되는 상기 3가지 균주를 대상으로 상기 실시예 1 및 실시예 2의 제조 방법에서 적용된 고상 발효 및 고상 흡착 처리 시 변화되는 각 효소들의 수치를 확인하였다.
그 결과, 바실러스 아밀로리퀴훼시엔스(Bacillus amyloliquefaciens) WYH-1는 리파아제 생성능, 라이시니바실러스 마크로이데스(Lysinibacillus macroides) WYH-2는 아밀라아제 생성능을 나타내었으며, 라이시니바실러스 푸시포르미스(Lysinibacillus fusiformis) WYH-3에서는 프로테아제 생성능을 확인하였다.
2. 실험 결과
상기 실험 결과 하기 표 3과 같이 나타났다.
구분 | 균수 (균주:cfu/g, 효소:u/g) | ||
산업용 배지 | 고상 흡착 | 고상 발효 | |
WYH-1 | 6.4E+07 | 6.9E+05 | 5.2E+08 |
리파아제 | 2.6 | 21.7 | 11.9 |
WYH-2 | 7.1E+07 | 3.1E+05 | 3.1E+08 |
아밀라아제 | 2.7 | 22.9 | 10.4 |
WYH-3 | 3.2E+07 | 1.6E+05 | 1.1E+08 |
프로테아제 | 5.9 | 24.6 | 5.6 |
안정성 | 1주일 이내 | 1년 이내 | 1년 이내 |
상기 표 3에 나타나 있듯이, 균주별로 균수에 대해서는 고상 발효 단계를 수행한 샘플이 월등히 높게 나타났으나, 효소 생산에 대해서는 고상 흡착 단계를 수행한 샘플에서 더 높게 나타나는 것으로 확인되었다.또한 액상 발효에 비하여 고상 발효 및 고상 흡착 건조 샘플들이 균의 안정성이 오래 지속됨을 확인하였다.
실시예 4: 음식물 쓰레기 분해능 확인 실험
1. 실험 방법
상기 실시예 1 및 2에서 준비된 본 발명의 미생물 제제를 음식물 쓰레기 침출수에 처리하여 음식물 쓰레기 침출수에서 발생하는 아민가스의 농도를 측정하였다.
이때, 상기 음식물 쓰레기 침출수 중량대비 10 중량%를 상기 실시예 1 또는 2에서 준비된, 본 발명의 미생물인 리파아제 생성능을 갖는 WYH-1 균주, 아밀라아제 생성능을 갖는 WYH-2, 프로테아제 생성능을 갖는 WYH-3 균주의 미생물 제제로 7일동안 처리하여 아민가스 농도를 측정하였다.
이때, gas tec 검지관 측정농도는 20ppm으로 설정하여 측정하였다.
2. 실험 결과
상기 실험 결과 하기 표 4와 같이 나타났다.
구분 | 산업용 배지 | 고상 흡착 | 고상 발효 |
WYH-1 | - | ++ | + |
WYH-2 | - | + | ++ |
WYH-3 | - | + | ++ |
WYH-1+WYH-2+WYH-3 | + | +++ | +++ |
+++: 0.01 ppm 이하, ++: 1 ppm 이하, +: 5 ppm 이하, -: 10 ppm 이상 |
상기 표 4에 개시된 바와 같이, 상기 미생물 제제들을 고상 흡착 혹은 고상 발효시키는 경우, 아민 가스의 농도가 매우 낮아지는 것으로 나타났다. 즉, 상기 미생물들에 대해 고상 흡착 혹은 고상 발효를 수행함에 따라, 미생물 제제의 음식물 쓰레기 분해능이 향상되는 것으로 판단할 수 있다.이것으로 미루어보아, 본 발명의 미생물 제제를 실질적으로 음식물 쓰레기에 적용하는 경우에도 분해능을 가지며 동시에 음식물 쓰레기의 악취가 함께 제거될 것으로 예상되므로, 미생물 제제로서의 기능을 충분히 수행할 것으로 판단된다.
또한, 각각의 효소능을 나타내는 균주별로, 고상 발효 단계를 수행하였을 때 효소능이 우수한 균주가 있는 반면, 고상 흡착 단계를 수행하였을 때 효소능이 우수한 균주가 있는 것으로 나타나, 균주별 제조 단계의 차이에 따라 분해능 특성이 상이한 것을 알 수 있다.
이에, 각각의 균에 대하여 고상 발효 건조를 수행한 샘플과 고상 흡착 건조를 수행한 샘플을 적절히 배합하여 음식물 쓰레기 분해 미생물 제제로 사용한 결과, 가장 우수한 분해능을 갖는 것으로 확인되었다.
따라서, 상기 균주들을 모두 혼합한 제품을 제조하는 것이 가장 우수한 분해능을 나타낼 것으로 판단된다.
이상에서 살펴본 바와 같이, 본 발명의 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 및 그 제조 방법을 활용하면, 안정적인 균수 확보가 가능함과 동시에 효소 생성량을 증대시키며 기존 배지 대비 생산단가를 낮출 수 있는 이점이 있다.
이로 인해, 음식물 쓰레기를 자원화 하는 과정에서 소요되는 단가를 절감하는 것이 가능해짐에 따라, 작물의 성장에 도움을 줄 수 있는 비료를 만들 수 있는 이점이 있다.
전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.
100 : 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 제조 방법
S110 : 배양액 제조 단계
S120-1 : 고상 발효 단계
S120-2 : 고상 흡착 단계
S130 : 건조 단계
S140 : 분쇄 단계
S110 : 배양액 제조 단계
S120-1 : 고상 발효 단계
S120-2 : 고상 흡착 단계
S130 : 건조 단계
S140 : 분쇄 단계
<110> REPUBLIC OF KOREA, REPUBLIC OF KOREA
<120> MICROBIAL PREPARATIONS FOR THE DECOMPOSITION OF FOOD WASTE AND
MANUFACTURING METHOD THEREOF
<130> FP-1910108-KR
<160> 3
<170> KoPatentIn 3.0
<210> 1
<211> 1421
<212> DNA
<213> Bacillus amyloliquefaciens
<400> 1
tgcagtcgag cggacagatg ggagcttgct ccctgatgtt agcggcggac gggtgagtaa 60
cacgtgggta acctgcctgt aagactggga taactccggg aaaccggggc taataccgga 120
tggttgtttg aaccgcatgg ttcagacata aaaggtggct tcggctacca cttacagatg 180
gacccgcggc gcattagcta gttggtgagg taacggctca ccaaggcgac gatgcgtagc 240
cgacctgaga gggtgatcgg ccacactggg actgagacac ggcccagact cctacgggag 300
gcagcagtag ggaatcttcc gcaatggacg aaagtctgac ggagcaacgc cgcgtgagtg 360
atgaaggttt tcggatcgta aagctctgtt gttagggaag aacaagtgcc gttcaaatag 420
ggcggcacct tgacggtacc taaccagaaa gccacggcta actacgtgcc agcagccgcg 480
gtaatacgta ggtggcaagc gttgtccgga attattgggc gtaaagggct cgcaggcggt 540
ttcttaagtc tgatgtgaaa gcccccggct caaccgggga gggtcattgg aaactgggga 600
acttgagtgc agaagaggag agtggaattc cacgtgtagc ggtgaaatgc gtagagatgt 660
ggaggaacac cagtggcgaa ggcgactctc tggtctgtaa ctgacgctga ggagcgaaag 720
cgtggggagc gaacaggatt agataccctg gtagtccacg ccgtaaacga tgagtgctaa 780
gtgttagggg gtttccgccc cttagtgctg cagctaacgc attaagcact ccgcctgggg 840
agtacggtcg caagactgaa actcaaagga attgacgggg gcccgcacaa gcggtggagc 900
atgtggttta attcgaagca acgcgaagaa ccttaccagg tcttgacatc ctctgacaat 960
cctagagata ggacgtcccc ttcgggggca gagtgacagg tggtgcatgg ttgtcgtcag 1020
ctcgtgtcgt gagatgttgg gttaagtccc gcaacgagcg caacccttga tcttagttgc 1080
cagcattcag ttgggcactc taaggtgact gccggtgaca aaccggagga aggtggggat 1140
gacgtcaaat catcatgccc cttatgacct gggctacaca cgtgctacaa tggacagaac 1200
aaagggcagc gaaaccgcga ggttaagcca atcccacaaa tctgttctca gttcggatcg 1260
cagtctgcaa ctcgactgcg tgaagctgga atcgctagta atcgcggatc agcatgccgc 1320
ggtgaatacg ttcccgggcc ttgtacacac cgcccgtcac accacgagag tttgtaacac 1380
ccgaagtcgg tgaggtaacc tttaggagcc agccgccgaa g 1421
<210> 2
<211> 1411
<212> DNA
<213> Unknown
<220>
<223> Lysinibacillus marcroides
<400> 2
agaaaaggag cttgctcctt tgacgttagc ggcggacggg tgagtaacac gtgggcaacc 60
taccctatag tttgggataa ctccgggaaa ccggggctaa taccgaataa tctcttttgc 120
ttcatggtga aagactgaaa gacggtttcg gctgtcgcta taggatgggc ccgcggcgca 180
ttagctagtt ggtgaggtaa cggctcacca aggcgacgat gcgtagccga cctgagaggg 240
tgatcggcca cactgggact gagacacggc ccagactcct acgggaggca gcagtaggga 300
atcttccaca atgggcgaaa gcctgatgga gcaacgccgc gtgagtgaag aaggttttcg 360
gatcgtaaaa ctctgttgta agggaagaac aagtacagta gtaactggct gtaccttgac 420
ggtaccttat tagaaagcca cggctaacta cgtgccagca gccgcggtaa tacgtaggtg 480
gcaagcgttg tccggaatta ttgggcgtaa agcgcgcgca ggcggtcctt taagtctgat 540
gtgaaagccc acggctcaac cgtggagggt cattggaaac tgggggactt gagtgcagaa 600
gaggaaagtg gaattccaag tgtagcggtg aaatgcgtag agatttggag gaacaccagt 660
ggcgaaggcg actttctggt ctgtaactga cgctgaggcg cgaaagcgtg gggagcaaac 720
aggattagat accctggtag tccacgccgt aaacgatgag tgctaagtgt tagggggttt 780
ccgcccctta gtgctgcagc taacgcatta agcactccgc ctggggagta cggtcgcaag 840
actgaaactc aaaggaattg acgggggccc gcacaagcgg tggagcatgt ggtttaattc 900
gaagcaacgc gaagaacctt accaggtctt gacatcccgt tgaccactgt agagatatag 960
tttccccttc gggggcaacg gtgacaggtg gtgcatggtt gtcgtcagct cgtgtcgtga 1020
gatgttgggt taagtcccgc aacgagcgca acccttgatc ttagttgcca tcatttagtt 1080
gggcactcta aggtgactgc cggtgacaaa ccggaggaag gtggggatga cgtcaaatca 1140
tcatgcccct tatgacctgg gctacacacg tgctacaatg gacgatacaa acggttgcca 1200
actcgcgaga gggagctaat ccgataaagt cgttctcagt tcggattgta ggctgcaact 1260
cgcctacatg aagccggaat cgctagtaat cgcggatcag catgccgcgg tgaatacgtt 1320
cccgggcctt gtacacaccg cccgtcacac cacgagagtt tgtaacaccc gaagtcggtg 1380
aggtaacctt tggagccagc cgccgaaggt g 1411
<210> 3
<211> 1408
<212> DNA
<213> Unknown
<220>
<223> Lysinibacillus fusiformis
<400> 3
agagaaggag cttgctcctt cgacgttagc ggcggacggg tgagtaacac gtgggcaacc 60
taccctatag tttgggataa ctccgggaaa ccggggctaa taccgaataa tttgtttcac 120
ctcatggtga aacactgaaa gacggtttcg gctgtcgcta taggatgggc ccgcggcgca 180
ttagctagtt ggtgaggtaa cggctcacca aggcgacgat gcgtagccga cctgagaggg 240
tgatcggcca cactgggact gagacacggc ccagactcct acgggaggca gcagtaggga 300
atcttccaca atgggcgaaa gcctgatgga gcaacgccgc gtgagtgaag aaggatttcg 360
gttcgtaaaa ctctgttgta agggaagaac aagtacagta gtaactggct gtaccttgac 420
ggtaccttat tagaaagcca cggctaacta cgtgccagca gccgcggtaa tacgtaggtg 480
gcaagcgttg tccggaatta ttgggcgtaa agcgcgcgca ggtggtttct taagtctgat 540
gtgaaagccc acggctcaac cgtggagggt cattggaaac tgggagactt gagtgcagaa 600
gaggatagtg gaattccaag tgtagcggtg aaatgcgtag agatttggag gaacaccagt 660
ggcgaaggcg actatctggt ctgtaactga cactgaggcg cgaaagcgtg gggagcaaac 720
aggattagat accctggtag tccacgccgt aaacgatgag tgctaagtgt tagggggttt 780
ccgcccctta gtgctgcagc taacgcatta agcactccgc ctggggagta cggtcgcaag 840
actgaaactc aaaggaattg acgggggccc gcacaagcgg tggagcatgt ggtttaattc 900
gaagcaacgc gaagaacctt accaggtctt gacatcccgt tgaccactgt agagatatag 960
tttccccttc gggggcaacg gtgacaggtg gtgcatggtt gtcgtcagct cgtgtcgtga 1020
gatgttgggt taagtcccgc aacgagcgca acccttgatc ttagttgcca tcatttagtt 1080
gggcactcta aggtgactgc cggtgacaaa ccggaggaag gtggggatga cgtcaaatca 1140
tcatgcccct tatgacctgg gctacacacg tgctacaatg gacgatacaa acggttgcca 1200
actcgcgaga gggagctaat ccgataaagt cgttctcagt tcggattgta ggctgcaact 1260
cgcctacatg aagccggaat cgctagtaat cgcggatcag catgccgcgg tgaatacgtt 1320
cccgggcctt gtacacaccg cccgtcacac cacgagagtt tgtaacaccc gaagtcggtg 1380
aggtaacctt tggagccagc cgccgaag 1408
Claims (11)
- 바실러스 아밀로리퀘패시엔스(Bacillus amyloliquefaciens) WYH-1 균주(KACC 92286P), 라이시니바실러스 마크로이데스(Lysinibacillus macroides) WYH-2 균주(KACC 92287P), 및 라이시니바실러스 푸시포르미스(Lysinibacillus fusiformis) WYH-3 균주(KACC 92288P)를 포함하는 혼합균주를 20시간 내지 30시간동안 액상 배양하여 액상 배양액을 제조하는 배양액 제조 단계; 및
상기 액상 배양액을 대두박에 분무한 후, 이를 30℃ 내지 38℃에서 20시간 내지 30시간 동안 고상 발효하여 고상 발효물을 생성하는 고상 발효 단계를 포함하는 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 제조 방법. - 바실러스 아밀로리퀘패시엔스(Bacillus amyloliquefaciens) WYH-1 균주(KACC 92286P), 라이시니바실러스 마크로이데스(Lysinibacillus macroides) WYH-2 균주(KACC 92287P), 및 라이시니바실러스 푸시포르미스(Lysinibacillus fusiformis) WYH-3 균주(KACC 92288P)를 포함하는 혼합균주를 액상 배양하여 액상 배양액을 제조하는 배양액 제조 단계; 및
상기 액상 배양액을 대두박, 옥분, 밀배아 중 어느 하나에 분무한 후, 이를 30℃ 내지 38℃에서 20시간 내지 30시간 동안 고상 흡착하여 고상 흡착물을 생성하는 고상 흡착 단계를 포함하는 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 제조 방법. - 제1 항 또는 제2 항에 있어서,
상기 배양액 제조 단계는, 30℃ 내지 38℃의 배지 환경 내에서 100 rpm 내지 200 rpm 조건으로 이루어지는 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 제조 방법. - 제3 항에 있어서,
상기 고상 발효물 또는 상기 고상 흡착물을 건조하여 건조물을 생성하는 건조 단계를 더 포함하는 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 제조 방법. - 제4 항에 있어서,
상기 건조 단계는, 상기 고상 발효물 또는 상기 고상 흡착물의 수분 함량이 5% 내지 10%가 되도록 20시간 내지 30시간 동안 이루어지는 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 제조 방법. - 제4 항에 있어서,
상기 건조물을 분쇄하는 분쇄 단계를 포함하는 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 제조 방법. - 제6 항에 있어서,
상기 분쇄 단계는, 상기 건조물이 100 mesh 내지 200 mesh의 입자를 갖도록 이루어지는 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 제조 방법. - 제1 항 또는 제2 항의 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 제조 방법에 의해 제조되는 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제.
- 제8 항의 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제는 리파아제(Lipase), 아밀라아제(Amylase), 프로테아제(Protase)를 포함하는 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제.
- 제9 항의 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제를 대상에 처리하는 방법을 포함하는 음식물 쓰레기 분해 방법.
- 제10 항의 음식물 쓰레기 분해 방법은, 음식물 쓰레기에 상기 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제를 혼합 처리하는 방법을 포함하는 음식물 쓰레기 분해 방법.
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KR1020190163369A KR102248563B1 (ko) | 2019-12-10 | 2019-12-10 | 음식물 쓰레기 분해용 미생물 제제 및 그 제조 방법 |
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KR102248563B1 true KR102248563B1 (ko) | 2021-05-06 |
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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KR102688401B1 (ko) | 2022-02-24 | 2024-07-24 | 제주대학교 산학협력단 | 신규 미생물 리시니바실러스 마크로이데이즈 ijk1-3 균주 및 이의 용도 |
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KR20180023583A (ko) * | 2016-08-26 | 2018-03-07 | 경북대학교 산학협력단 | 혐기성 조건에서의 음식물 분해를 위한 친환경 미생물제제 |
KR20190027805A (ko) * | 2019-03-08 | 2019-03-15 | 주식회사 템셀코리아 | 음식물 쓰레기 분해 소멸용 조성물 |
KR20190043989A (ko) * | 2017-10-19 | 2019-04-29 | 재단법인 전라북도생물산업진흥원 | 음식물쓰레기 분해 혼합균주 및 이를 이용한 음식물쓰레기 분해 방법 |
-
2019
- 2019-12-10 KR KR1020190163369A patent/KR102248563B1/ko active IP Right Grant
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