KR102213694B1 - 사람 cd30 리간드 항원 결합 단백질 - Google Patents
사람 cd30 리간드 항원 결합 단백질 Download PDFInfo
- Publication number
- KR102213694B1 KR102213694B1 KR1020207000990A KR20207000990A KR102213694B1 KR 102213694 B1 KR102213694 B1 KR 102213694B1 KR 1020207000990 A KR1020207000990 A KR 1020207000990A KR 20207000990 A KR20207000990 A KR 20207000990A KR 102213694 B1 KR102213694 B1 KR 102213694B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- seq
- cd30l
- antigen binding
- antibody
- ser
- Prior art date
Links
- 101000638255 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 8 Proteins 0.000 title claims abstract description 41
- 102000054539 human TNFSF8 Human genes 0.000 title claims abstract description 40
- 102000025171 antigen binding proteins Human genes 0.000 title abstract description 360
- 108091000831 antigen binding proteins Proteins 0.000 title abstract description 360
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 116
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 21
- 102100032100 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 8 Human genes 0.000 claims description 293
- 101000851376 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Proteins 0.000 claims description 83
- 102100036857 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Human genes 0.000 claims description 83
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims description 43
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 40
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 33
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 33
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 claims description 27
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 24
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 18
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 claims description 16
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 claims description 16
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims description 13
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 claims description 10
- 208000037893 chronic inflammatory disorder Diseases 0.000 claims description 9
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims description 9
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 8
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 5
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 101100207070 Homo sapiens TNFSF8 gene Proteins 0.000 claims 4
- 101100207071 Mus musculus Tnfsf8 gene Proteins 0.000 claims 4
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 abstract description 44
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 abstract description 44
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 abstract description 44
- 239000013598 vector Substances 0.000 abstract description 35
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 30
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 225
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 146
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 137
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 126
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 118
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 112
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 98
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 97
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 95
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 90
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 71
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 67
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 61
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 61
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 58
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 58
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 58
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 53
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 51
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 49
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 43
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 39
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 37
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 36
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical group OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 31
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 25
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 24
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 24
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 24
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 24
- 241000894007 species Species 0.000 description 23
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 21
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 21
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 21
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 20
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 20
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 19
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 19
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 19
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 19
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Chemical group OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 18
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 18
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical group CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 17
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 17
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 17
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 17
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 17
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 description 17
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical group OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 16
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 16
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 16
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 16
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 16
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 15
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 14
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical group CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 14
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 14
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 14
- LNICFEXCAHIJOR-DCAQKATOSA-N Pro-Ser-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O LNICFEXCAHIJOR-DCAQKATOSA-N 0.000 description 14
- RMRFSFXLFWWAJZ-HJOGWXRNSA-N Tyr-Tyr-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 RMRFSFXLFWWAJZ-HJOGWXRNSA-N 0.000 description 14
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 14
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 14
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 14
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 14
- BTYTYHBSJKQBQA-GCJQMDKQSA-N Ala-Asp-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](C)N)O BTYTYHBSJKQBQA-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 13
- ZDILXFDENZVOTL-BPNCWPANSA-N Ala-Val-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O ZDILXFDENZVOTL-BPNCWPANSA-N 0.000 description 13
- JXFLPKSDLDEOQK-JHEQGTHGSA-N Gln-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O JXFLPKSDLDEOQK-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 13
- UESYBOXFJWJVSB-AVGNSLFASA-N Gln-Phe-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UESYBOXFJWJVSB-AVGNSLFASA-N 0.000 description 13
- FNAJNWPDTIXYJN-CIUDSAMLSA-N Gln-Pro-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O FNAJNWPDTIXYJN-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 13
- ZFBBMCKQSNJZSN-AUTRQRHGSA-N Gln-Val-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O ZFBBMCKQSNJZSN-AUTRQRHGSA-N 0.000 description 13
- YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 13
- PDUHNKAFQXQNLH-ZETCQYMHSA-N Gly-Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)NCC(O)=O PDUHNKAFQXQNLH-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 13
- PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N L-Arginyl-L-glutamin-acetat Natural products NC(=N)NCCCC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 13
- ZTLGVASZOIKNIX-DCAQKATOSA-N Leu-Gln-Glu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N ZTLGVASZOIKNIX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 13
- FEHQLKKBVJHSEC-SZMVWBNQSA-N Leu-Glu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 FEHQLKKBVJHSEC-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 13
- LINKCQUOMUDLKN-KATARQTJSA-N Leu-Thr-Cys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N)O LINKCQUOMUDLKN-KATARQTJSA-N 0.000 description 13
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Chemical group CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- YTJFXEDRUOQGSP-DCAQKATOSA-N Lys-Pro-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YTJFXEDRUOQGSP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 13
- HBOABDXGTMMDSE-GUBZILKMSA-N Ser-Arg-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O HBOABDXGTMMDSE-GUBZILKMSA-N 0.000 description 13
- KDGARKCAKHBEDB-NKWVEPMBSA-N Ser-Gly-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)CNC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O KDGARKCAKHBEDB-NKWVEPMBSA-N 0.000 description 13
- HDBOEVPDIDDEPC-CIUDSAMLSA-N Ser-Lys-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O HDBOEVPDIDDEPC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 13
- PPCZVWHJWJFTFN-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O PPCZVWHJWJFTFN-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 13
- YOOAQCZYZHGUAZ-KATARQTJSA-N Thr-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YOOAQCZYZHGUAZ-KATARQTJSA-N 0.000 description 13
- MNYNCKZAEIAONY-XGEHTFHBSA-N Thr-Val-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MNYNCKZAEIAONY-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 13
- KZTLZZQTJMCGIP-ZJDVBMNYSA-N Thr-Val-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O KZTLZZQTJMCGIP-ZJDVBMNYSA-N 0.000 description 13
- GQHAIUPYZPTADF-FDARSICLSA-N Trp-Ile-Arg Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)=CNC2=C1 GQHAIUPYZPTADF-FDARSICLSA-N 0.000 description 13
- SMLCYZYQFRTLCO-UWJYBYFXSA-N Tyr-Cys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SMLCYZYQFRTLCO-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 13
- PZTZYZUTCPZWJH-FXQIFTODSA-N Val-Ser-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N PZTZYZUTCPZWJH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 13
- QHSSPPHOHJSTML-HOCLYGCPSA-N Val-Trp-Gly Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)NCC(=O)O)N QHSSPPHOHJSTML-HOCLYGCPSA-N 0.000 description 13
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 13
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 13
- 108010008355 arginyl-glutamine Proteins 0.000 description 13
- 108010038850 arginyl-isoleucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 13
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 13
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 13
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 13
- 108010010147 glycylglutamine Proteins 0.000 description 13
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 13
- 108010072986 threonyl-seryl-lysine Proteins 0.000 description 13
- RTFXPCYMDYBZNQ-SRVKXCTJSA-N Asn-Tyr-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O RTFXPCYMDYBZNQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 12
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 12
- MIIVFRCYJABHTQ-ONGXEEELSA-N Gly-Leu-Val Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O MIIVFRCYJABHTQ-ONGXEEELSA-N 0.000 description 12
- PXKACEXYLPBMAD-JBDRJPRFSA-N Ile-Ser-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N PXKACEXYLPBMAD-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 12
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 12
- UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 12
- OVLIFGQSBSNGHY-KKHAAJSZSA-N Val-Asp-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O OVLIFGQSBSNGHY-KKHAAJSZSA-N 0.000 description 12
- 108010086434 alanyl-seryl-glycine Proteins 0.000 description 12
- 108010077245 asparaginyl-proline Proteins 0.000 description 12
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 12
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 12
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 12
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 12
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 12
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 12
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 12
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 11
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 11
- OCQUNKSFDYDXBG-QXEWZRGKSA-N Gly-Arg-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CCCN=C(N)N OCQUNKSFDYDXBG-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 11
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical group NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 11
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical group C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 11
- WRODMZBHNNPRLN-SRVKXCTJSA-N Lys-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WRODMZBHNNPRLN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 11
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 11
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 11
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 11
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 11
- 230000004044 response Effects 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 10
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 10
- HSRJKNPTNIJEKV-UHFFFAOYSA-N Guaifenesin Chemical compound COC1=CC=CC=C1OCC(O)CO HSRJKNPTNIJEKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Chemical group NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 230000004988 N-glycosylation Effects 0.000 description 10
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 10
- SIEBDTCABMZCLF-XGEHTFHBSA-N Ser-Val-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O SIEBDTCABMZCLF-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 10
- KBBRNEDOYWMIJP-KYNKHSRBSA-N Thr-Gly-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N)O KBBRNEDOYWMIJP-KYNKHSRBSA-N 0.000 description 10
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 10
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 10
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 10
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 10
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 10
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 10
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 10
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 10
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Chemical group CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 10
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 10
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 10
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 10
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 10
- YTSVAIMKVLZUDU-YUMQZZPRSA-N Gly-Leu-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O YTSVAIMKVLZUDU-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 9
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 9
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 9
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 9
- OJFFAQFRCVPHNN-JYBASQMISA-N Ser-Thr-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O OJFFAQFRCVPHNN-JYBASQMISA-N 0.000 description 9
- WRUWXBBEFUTJOU-XGEHTFHBSA-N Thr-Met-Ser Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N)O WRUWXBBEFUTJOU-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 9
- YOPQYBJJNSIQGZ-JNPHEJMOSA-N Thr-Tyr-Tyr Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 YOPQYBJJNSIQGZ-JNPHEJMOSA-N 0.000 description 9
- ASQFIHTXXMFENG-XPUUQOCRSA-N Val-Ala-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O ASQFIHTXXMFENG-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 9
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 9
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 9
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N aspartic acid group Chemical group N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 9
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 9
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 9
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 9
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 9
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 9
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 9
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 9
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 9
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 9
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 9
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 9
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 9
- FBLMOFHNVQBKRR-IHRRRGAJSA-N Arg-Asp-Tyr Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 FBLMOFHNVQBKRR-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 8
- JJGRJMKUOYXZRA-LPEHRKFASA-N Asn-Arg-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)C(=O)O JJGRJMKUOYXZRA-LPEHRKFASA-N 0.000 description 8
- -1 D-amino acids) Chemical class 0.000 description 8
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 8
- YBHKCXNNNVDYEB-SPOWBLRKSA-N Ile-Trp-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N YBHKCXNNNVDYEB-SPOWBLRKSA-N 0.000 description 8
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical group NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 8
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical group OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 8
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical group OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 8
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- LGEYOIQBBIPHQN-UWJYBYFXSA-N Tyr-Ala-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 LGEYOIQBBIPHQN-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 8
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 8
- 108010050475 glycyl-leucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 8
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 8
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 8
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 8
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 8
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 description 8
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 8
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 8
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 8
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 8
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 8
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 8
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical compound [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 7
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 7
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 7
- WQOHKVRQDLNDIL-YJRXYDGGSA-N Tyr-Thr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WQOHKVRQDLNDIL-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 7
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 description 7
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 7
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 7
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 description 7
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 7
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 7
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 7
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 7
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 7
- ARHJJAAWNWOACN-FXQIFTODSA-N Ala-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O ARHJJAAWNWOACN-FXQIFTODSA-N 0.000 description 6
- WLVLIYYBPPONRJ-GCJQMDKQSA-N Asn-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O WLVLIYYBPPONRJ-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 6
- VAWNQIGQPUOPQW-ACZMJKKPSA-N Asp-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VAWNQIGQPUOPQW-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 6
- YNJBLTDKTMKEET-ZLUOBGJFSA-N Cys-Ser-Ser Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YNJBLTDKTMKEET-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 6
- KUBFPYIMAGXGBT-ACZMJKKPSA-N Gln-Ser-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O KUBFPYIMAGXGBT-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 6
- UQJNXZSSGQIPIQ-FBCQKBJTSA-N Gly-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CN UQJNXZSSGQIPIQ-FBCQKBJTSA-N 0.000 description 6
- FBGXMKUWQFPHFB-JBDRJPRFSA-N Ile-Ser-Cys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N FBGXMKUWQFPHFB-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 6
- ZLFNNVATRMCAKN-ZKWXMUAHSA-N Ile-Ser-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)O)N ZLFNNVATRMCAKN-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 6
- OIQSIMFSVLLWBX-VOAKCMCISA-N Lys-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O OIQSIMFSVLLWBX-VOAKCMCISA-N 0.000 description 6
- 239000004472 Lysine Chemical group 0.000 description 6
- 241000829100 Macaca mulatta polyomavirus 1 Species 0.000 description 6
- JMVQDLDPDBXAAX-YUMQZZPRSA-N Pro-Gly-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1 JMVQDLDPDBXAAX-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 6
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 6
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 6
- XXXAXOWMBOKTRN-XPUUQOCRSA-N Ser-Gly-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O XXXAXOWMBOKTRN-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 6
- ZOPISOXXPQNOCO-SVSWQMSJSA-N Ser-Ile-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N ZOPISOXXPQNOCO-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 6
- MUJQWSAWLLRJCE-KATARQTJSA-N Ser-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O MUJQWSAWLLRJCE-KATARQTJSA-N 0.000 description 6
- RTXKJFWHEBTABY-IHPCNDPISA-N Ser-Trp-Tyr Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC3=CC=C(C=C3)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N RTXKJFWHEBTABY-IHPCNDPISA-N 0.000 description 6
- DIPIPFHFLPTCLK-LOKLDPHHSA-N Thr-Gln-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N)O DIPIPFHFLPTCLK-LOKLDPHHSA-N 0.000 description 6
- CKTMJBPRVQWPHU-JSGCOSHPSA-N Val-Phe-Gly Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(=O)O)N CKTMJBPRVQWPHU-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 6
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 6
- 238000004422 calculation algorithm Methods 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 6
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 6
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 230000006870 function Effects 0.000 description 6
- XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N glycyl-glycyl-glycine Natural products NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 238000002169 hydrotherapy Methods 0.000 description 6
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 6
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 6
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 6
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 6
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 6
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010070409 phenylalanyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 6
- 210000004896 polypeptide structure Anatomy 0.000 description 6
- 230000001603 reducing effect Effects 0.000 description 6
- 108010026333 seryl-proline Proteins 0.000 description 6
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 6
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 6
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 6
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 6
- BTRULDJUUVGRNE-DCAQKATOSA-N Ala-Pro-Lys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O BTRULDJUUVGRNE-DCAQKATOSA-N 0.000 description 5
- ALMIMUZAWTUNIO-BZSNNMDCSA-N Asp-Tyr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O ALMIMUZAWTUNIO-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 5
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 5
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 5
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 5
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical group C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 5
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical group CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 5
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 5
- 108010071690 Prealbumin Proteins 0.000 description 5
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- FQPDRTDDEZXCEC-SVSWQMSJSA-N Thr-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FQPDRTDDEZXCEC-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 5
- 102000009190 Transthyretin Human genes 0.000 description 5
- VTFWAGGJDRSQFG-MELADBBJSA-N Tyr-Asn-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N)C(=O)O VTFWAGGJDRSQFG-MELADBBJSA-N 0.000 description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 5
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 5
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 5
- 230000000779 depleting effect Effects 0.000 description 5
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 5
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 5
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 5
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 5
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Chemical group OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 5
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 5
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 5
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 5
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 5
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Chemical group OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 5
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 5
- 238000003118 sandwich ELISA Methods 0.000 description 5
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 5
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 5
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 5
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 5
- 108010003137 tyrosyltyrosine Proteins 0.000 description 5
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 4
- DPSUVAPLRQDWAO-YDHLFZDLSA-N Asn-Tyr-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N DPSUVAPLRQDWAO-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 4
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 4
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 4
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GPISLLFQNHELLK-DCAQKATOSA-N Gln-Gln-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N GPISLLFQNHELLK-DCAQKATOSA-N 0.000 description 4
- UZWUBBRJWFTHTD-LAEOZQHASA-N Glu-Val-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O UZWUBBRJWFTHTD-LAEOZQHASA-N 0.000 description 4
- QXUPRMQJDWJDFR-NRPADANISA-N Glu-Val-Ser Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O QXUPRMQJDWJDFR-NRPADANISA-N 0.000 description 4
- FMNHBTKMRFVGRO-FOHZUACHSA-N Gly-Asn-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)CN FMNHBTKMRFVGRO-FOHZUACHSA-N 0.000 description 4
- NPSWCZIRBAYNSB-JHEQGTHGSA-N Gly-Gln-Thr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O NPSWCZIRBAYNSB-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 4
- NYEYYMLUABXDMC-NHCYSSNCSA-N Ile-Gly-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)N NYEYYMLUABXDMC-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 4
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 4
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 4
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 4
- 208000009527 Refractory anemia Diseases 0.000 description 4
- 206010072684 Refractory cytopenia with unilineage dysplasia Diseases 0.000 description 4
- OBXVZEAMXFSGPU-FXQIFTODSA-N Ser-Asn-Arg Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CO)N)CN=C(N)N OBXVZEAMXFSGPU-FXQIFTODSA-N 0.000 description 4
- UBRMZSHOOIVJPW-SRVKXCTJSA-N Ser-Leu-Lys Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O UBRMZSHOOIVJPW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 4
- RXSWQCATLWVDLI-XGEHTFHBSA-N Ser-Met-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O RXSWQCATLWVDLI-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 4
- OLKICIBQRVSQMA-SRVKXCTJSA-N Ser-Ser-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O OLKICIBQRVSQMA-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 4
- SGAOHNPSEPVAFP-ZDLURKLDSA-N Thr-Ser-Gly Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SGAOHNPSEPVAFP-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 4
- NSTPFWRAIDTNGH-BZSNNMDCSA-N Tyr-Asn-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O NSTPFWRAIDTNGH-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 4
- URIRWLJVWHYLET-ONGXEEELSA-N Val-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)C(C)C URIRWLJVWHYLET-ONGXEEELSA-N 0.000 description 4
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 4
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 4
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 4
- 208000037979 autoimmune inflammatory disease Diseases 0.000 description 4
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 4
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 4
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 4
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 4
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 4
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010085325 histidylproline Proteins 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 4
- 125000000741 isoleucyl group Chemical group [H]N([H])C(C(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[H])C(=O)O* 0.000 description 4
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 4
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 4
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 4
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 4
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 4
- 201000006845 reticulosarcoma Diseases 0.000 description 4
- 208000029922 reticulum cell sarcoma Diseases 0.000 description 4
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 125000002987 valine group Chemical group [H]N([H])C([H])(C(*)=O)C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 3
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RTZCUEHYUQZIDE-WHFBIAKZSA-N Ala-Ser-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O RTZCUEHYUQZIDE-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 3
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 3
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 3
- QAODJPUKWNNNRP-DCAQKATOSA-N Arg-Glu-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O QAODJPUKWNNNRP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 3
- FNXCAFKDGBROCU-STECZYCISA-N Arg-Ile-Tyr Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 FNXCAFKDGBROCU-STECZYCISA-N 0.000 description 3
- UVTGNSWSRSCPLP-UHFFFAOYSA-N Arg-Tyr Natural products NC(CCNC(=N)N)C(=O)NC(Cc1ccc(O)cc1)C(=O)O UVTGNSWSRSCPLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 108010017987 CD30 Ligand Proteins 0.000 description 3
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 3
- 206010011878 Deafness Diseases 0.000 description 3
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010020195 FLAG peptide Proteins 0.000 description 3
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 3
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 3
- RZSLYUUFFVHFRQ-FXQIFTODSA-N Gln-Ala-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O RZSLYUUFFVHFRQ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 3
- OJNZVYSGVYLQIN-BQBZGAKWSA-N Gly-Met-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O OJNZVYSGVYLQIN-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 3
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 3
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 3
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 3
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 3
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 3
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 3
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 3
- AFVOKRHYSSFPHC-STECZYCISA-N Met-Ile-Tyr Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 AFVOKRHYSSFPHC-STECZYCISA-N 0.000 description 3
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 3
- 230000004989 O-glycosylation Effects 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 3
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 3
- UIMCLYYSUCIUJM-UWVGGRQHSA-N Pro-Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1 UIMCLYYSUCIUJM-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 3
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 3
- 108010022394 Threonine synthase Proteins 0.000 description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 description 3
- XXROXFHCMVXETG-UWVGGRQHSA-N Val-Gly-Val Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O XXROXFHCMVXETG-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 3
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 3
- 108010008685 alanyl-glutamyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 3
- 108010041407 alanylaspartic acid Proteins 0.000 description 3
- 108010001271 arginyl-glutamyl-arginine Proteins 0.000 description 3
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 3
- 125000000613 asparagine group Chemical group N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 3
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 3
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 3
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 3
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 3
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 3
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 3
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 3
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 3
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 3
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 3
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 3
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 3
- 230000022811 deglycosylation Effects 0.000 description 3
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 3
- 102000004419 dihydrofolate reductase Human genes 0.000 description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 3
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 3
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 3
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 3
- BRZYSWJRSDMWLG-CAXSIQPQSA-N geneticin Natural products O1C[C@@](O)(C)[C@H](NC)[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C(C)O)O2)N)[C@@H](N)C[C@H]1N BRZYSWJRSDMWLG-CAXSIQPQSA-N 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 230000010370 hearing loss Effects 0.000 description 3
- 231100000888 hearing loss Toxicity 0.000 description 3
- 208000016354 hearing loss disease Diseases 0.000 description 3
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 3
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 3
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 3
- 230000021995 interleukin-8 production Effects 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 3
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 3
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 3
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 3
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 3
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 3
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 3
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 3
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 description 3
- 238000004704 ultra performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- VYEWZWBILJHHCU-OMQUDAQFSA-N (e)-n-[(2s,3r,4r,5r,6r)-2-[(2r,3r,4s,5s,6s)-3-acetamido-5-amino-4-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[2-[(2r,3s,4r,5r)-5-(2,4-dioxopyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]-2-hydroxyethyl]-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]-5-methylhex-2-enamide Chemical class N1([C@@H]2O[C@@H]([C@H]([C@H]2O)O)C(O)C[C@@H]2[C@H](O)[C@H](O)[C@H]([C@@H](O2)O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](N)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)NC(=O)/C=C/CC(C)C)C=CC(=O)NC1=O VYEWZWBILJHHCU-OMQUDAQFSA-N 0.000 description 2
- 229940117976 5-hydroxylysine Drugs 0.000 description 2
- VJVQKGYHIZPSNS-FXQIFTODSA-N Ala-Ser-Arg Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N VJVQKGYHIZPSNS-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000032467 Aplastic anaemia Diseases 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- HPBNLFLSSQDFQW-WHFBIAKZSA-N Asn-Ser-Gly Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O HPBNLFLSSQDFQW-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- BYLPQJAWXJWUCJ-YDHLFZDLSA-N Asp-Tyr-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O BYLPQJAWXJWUCJ-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 2
- 208000000659 Autoimmune lymphoproliferative syndrome Diseases 0.000 description 2
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 2
- 208000006373 Bell palsy Diseases 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 208000034628 Celiac artery compression syndrome Diseases 0.000 description 2
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 2
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 2
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 2
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 208000016192 Demyelinating disease Diseases 0.000 description 2
- 206010012305 Demyelination Diseases 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XZWYTXMRWQJBGX-VXBMVYAYSA-N FLAG peptide Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XZWYTXMRWQJBGX-VXBMVYAYSA-N 0.000 description 2
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 2
- DYFJZDDQPNIPAB-NHCYSSNCSA-N Glu-Arg-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O DYFJZDDQPNIPAB-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 2
- FGGKGJHCVMYGCD-UKJIMTQDSA-N Glu-Val-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O FGGKGJHCVMYGCD-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 2
- SCWYHUQOOFRVHP-MBLNEYKQSA-N Gly-Ile-Thr Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O SCWYHUQOOFRVHP-MBLNEYKQSA-N 0.000 description 2
- 102000005744 Glycoside Hydrolases Human genes 0.000 description 2
- 108010031186 Glycoside Hydrolases Proteins 0.000 description 2
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 description 2
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 description 2
- 208000035186 Hemolytic Autoimmune Anemia Diseases 0.000 description 2
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 2
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- DFFTXLCCDFYRKD-MBLNEYKQSA-N Ile-Gly-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N DFFTXLCCDFYRKD-MBLNEYKQSA-N 0.000 description 2
- SAEWJTCJQVZQNZ-IUKAMOBKSA-N Ile-Thr-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N SAEWJTCJQVZQNZ-IUKAMOBKSA-N 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 2
- 102000019223 Interleukin-1 receptor Human genes 0.000 description 2
- 108050006617 Interleukin-1 receptor Proteins 0.000 description 2
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 2
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 2
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 2
- FUKDBQGFSJUXGX-RWMBFGLXSA-N Lys-Arg-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)C(=O)O FUKDBQGFSJUXGX-RWMBFGLXSA-N 0.000 description 2
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 102000012750 Membrane Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108010090054 Membrane Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 206010049567 Miller Fisher syndrome Diseases 0.000 description 2
- OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N N-Acetyl-D-Galactosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N 0.000 description 2
- MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N N-acetyl-D-galactosamine Natural products CC(=O)NC(C=O)C(O)C(O)C(O)CO MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010079364 N-glycylalanine Proteins 0.000 description 2
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 2
- 102100023050 Nuclear factor NF-kappa-B p105 subunit Human genes 0.000 description 2
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 2
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- 201000011152 Pemphigus Diseases 0.000 description 2
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 2
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 208000025747 Rheumatic disease Diseases 0.000 description 2
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 2
- OSFZCEQJLWCIBG-BZSNNMDCSA-N Ser-Tyr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O OSFZCEQJLWCIBG-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 2
- 206010040799 Skin atrophy Diseases 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 2
- DJDSEDOKJTZBAR-ZDLURKLDSA-N Thr-Gly-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DJDSEDOKJTZBAR-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 2
- 101000980463 Treponema pallidum (strain Nichols) Chaperonin GroEL Proteins 0.000 description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 2
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- TZXFLDNBYYGLKA-BZSNNMDCSA-N Tyr-Asp-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 TZXFLDNBYYGLKA-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 2
- CTDPLKMBVALCGN-JSGCOSHPSA-N Tyr-Gly-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O CTDPLKMBVALCGN-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 2
- OSXNCKRGMSHWSQ-ACRUOGEOSA-N Tyr-His-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O OSXNCKRGMSHWSQ-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 2
- UMSZZGTXGKHTFJ-SRVKXCTJSA-N Tyr-Ser-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 UMSZZGTXGKHTFJ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- QRCBQDPRKMYTMB-IHPCNDPISA-N Tyr-Trp-Ser Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC3=CC=C(C=C3)O)N QRCBQDPRKMYTMB-IHPCNDPISA-N 0.000 description 2
- MQUYPYFPHIPVHJ-MNSWYVGCSA-N Tyr-Trp-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@H](CC3=CC=C(C=C3)O)N)O MQUYPYFPHIPVHJ-MNSWYVGCSA-N 0.000 description 2
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 2
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 2
- AEFJNECXZCODJM-UWVGGRQHSA-N Val-Val-Gly Chemical compound CC(C)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC([O-])=O AEFJNECXZCODJM-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 description 2
- 108010026331 alpha-Fetoproteins Proteins 0.000 description 2
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 2
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 2
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 2
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 2
- 201000003710 autoimmune thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000008512 biological response Effects 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- BQRGNLJZBFXNCZ-UHFFFAOYSA-N calcein am Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(C)=O)=C(OC(C)=O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(=O)C)C(OC(C)=O)=C1 BQRGNLJZBFXNCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 description 2
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 2
- YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N delta-DL-hydroxylysine Natural products NCC(O)CCC(N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 2
- YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N erythro-5-hydroxy-L-lysine Chemical compound NC[C@H](O)CC[C@H](N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003325 follicular Effects 0.000 description 2
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 2
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 2
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 2
- 230000000155 isotopic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001503 joint Anatomy 0.000 description 2
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 2
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 2
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 2
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 2
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 2
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 238000000569 multi-angle light scattering Methods 0.000 description 2
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 2
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 2
- 201000001119 neuropathy Diseases 0.000 description 2
- 230000007823 neuropathy Effects 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 2
- 238000001668 nucleic acid synthesis Methods 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 238000006384 oligomerization reaction Methods 0.000 description 2
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 2
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 2
- 201000001976 pemphigus vulgaris Diseases 0.000 description 2
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 2
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 2
- 108010012581 phenylalanylglutamate Proteins 0.000 description 2
- PHEDXBVPIONUQT-RGYGYFBISA-N phorbol 13-acetate 12-myristate Chemical compound C([C@]1(O)C(=O)C(C)=C[C@H]1[C@@]1(O)[C@H](C)[C@H]2OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)C(CO)=C[C@H]1[C@H]1[C@]2(OC(C)=O)C1(C)C PHEDXBVPIONUQT-RGYGYFBISA-N 0.000 description 2
- GZHCNRONBGZNAH-UHFFFAOYSA-N phosphanylidynelanthanum Chemical compound [La]#P GZHCNRONBGZNAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 2
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 2
- 208000002574 reactive arthritis Diseases 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 2
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 2
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 2
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 2
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 2
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 2
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 2
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 2
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 2
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- 238000012384 transportation and delivery Methods 0.000 description 2
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 2
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 2
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 2
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 229910052727 yttrium Inorganic materials 0.000 description 2
- XSYUPRQVAHJETO-WPMUBMLPSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1h-imidaz Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(O)=O)C1=CN=CN1 XSYUPRQVAHJETO-WPMUBMLPSA-N 0.000 description 1
- KYBXNPIASYUWLN-WUCPZUCCSA-N (2s)-5-hydroxypyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound OC1CC[C@@H](C(O)=O)N1 KYBXNPIASYUWLN-WUCPZUCCSA-N 0.000 description 1
- IYVFNTXFRYQLRP-VVSTWUKXSA-N 2-[3,4-bis(2-hydroxyethoxy)phenyl]-5-hydroxy-7-(2-hydroxyethoxy)-3-{[(2s,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-({[(2r,3r,4r,5r,6s)-3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy}methyl)oxan-2-yl]oxy}-4h-chromen-4-one Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](OC=2C(C3=C(O)C=C(OCCO)C=C3OC=2C=2C=C(OCCO)C(OCCO)=CC=2)=O)O1 IYVFNTXFRYQLRP-VVSTWUKXSA-N 0.000 description 1
- 125000000979 2-amino-2-oxoethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C(=O)N([H])[H] 0.000 description 1
- OQPDPIPLWCUACY-UHFFFAOYSA-N 2-aminoethylthiourea;hydrobromide Chemical compound [Br-].NCC[NH+]=C(N)S OQPDPIPLWCUACY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BRMWTNUJHUMWMS-UHFFFAOYSA-N 3-Methylhistidine Natural products CN1C=NC(CC(N)C(O)=O)=C1 BRMWTNUJHUMWMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010082808 4-1BB Ligand Proteins 0.000 description 1
- 102000002627 4-1BB Ligand Human genes 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- JYCQQPHGFMYQCF-UHFFFAOYSA-N 4-tert-Octylphenol monoethoxylate Chemical compound CC(C)(C)CC(C)(C)C1=CC=C(OCCO)C=C1 JYCQQPHGFMYQCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AGFIRQJZCNVMCW-UAKXSSHOSA-N 5-bromouridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 AGFIRQJZCNVMCW-UAKXSSHOSA-N 0.000 description 1
- 206010000234 Abortion spontaneous Diseases 0.000 description 1
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 description 1
- 206010069754 Acquired gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 208000030090 Acute Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010000748 Acute febrile neutrophilic dermatosis Diseases 0.000 description 1
- 208000026872 Addison Disease Diseases 0.000 description 1
- SDMAQFGBPOJFOM-GUBZILKMSA-N Ala-Arg-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O SDMAQFGBPOJFOM-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- GMGWOTQMUKYZIE-UBHSHLNASA-N Ala-Pro-Phe Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 GMGWOTQMUKYZIE-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- OLVCTPPSXNRGKV-GUBZILKMSA-N Ala-Pro-Pro Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 OLVCTPPSXNRGKV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- YYAVDNKUWLAFCV-ACZMJKKPSA-N Ala-Ser-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O YYAVDNKUWLAFCV-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- VNFSAYFQLXPHPY-CIQUZCHMSA-N Ala-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O VNFSAYFQLXPHPY-CIQUZCHMSA-N 0.000 description 1
- IETUUAHKCHOQHP-KZVJFYERSA-N Ala-Thr-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)N)[C@@H](C)O)C(O)=O IETUUAHKCHOQHP-KZVJFYERSA-N 0.000 description 1
- ZJLORAAXDAJLDC-CQDKDKBSSA-N Ala-Tyr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ZJLORAAXDAJLDC-CQDKDKBSSA-N 0.000 description 1
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 1
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 description 1
- 241001156002 Anthonomus pomorum Species 0.000 description 1
- 108020000948 Antisense Oligonucleotides Proteins 0.000 description 1
- YUIGJDNAGKJLDO-JYJNAYRXSA-N Arg-Arg-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O YUIGJDNAGKJLDO-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- USNSOPDIZILSJP-FXQIFTODSA-N Arg-Asn-Asn Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O USNSOPDIZILSJP-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- TTXYKSADPSNOIF-IHRRRGAJSA-N Arg-Asp-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O TTXYKSADPSNOIF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- YSUVMPICYVWRBX-VEVYYDQMSA-N Arg-Asp-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O YSUVMPICYVWRBX-VEVYYDQMSA-N 0.000 description 1
- OFIYLHVAAJYRBC-HJWJTTGWSA-N Arg-Ile-Phe Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(O)=O OFIYLHVAAJYRBC-HJWJTTGWSA-N 0.000 description 1
- UHFUZWSZQKMDSX-DCAQKATOSA-N Arg-Leu-Asn Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N UHFUZWSZQKMDSX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- CVXXSWQORBZAAA-SRVKXCTJSA-N Arg-Lys-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N CVXXSWQORBZAAA-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- ATABBWFGOHKROJ-GUBZILKMSA-N Arg-Pro-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ATABBWFGOHKROJ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- BECXEHHOZNFFFX-IHRRRGAJSA-N Arg-Ser-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O BECXEHHOZNFFFX-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- INOIAEUXVVNJKA-XGEHTFHBSA-N Arg-Thr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O INOIAEUXVVNJKA-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- CTAPSNCVKPOOSM-KKUMJFAQSA-N Arg-Tyr-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O CTAPSNCVKPOOSM-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- 240000003291 Armoracia rusticana Species 0.000 description 1
- 235000011330 Armoracia rusticana Nutrition 0.000 description 1
- 206010003267 Arthritis reactive Diseases 0.000 description 1
- BVLIJXXSXBUGEC-SRVKXCTJSA-N Asn-Asn-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O BVLIJXXSXBUGEC-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- SPIPSJXLZVTXJL-ZLUOBGJFSA-N Asn-Cys-Ser Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SPIPSJXLZVTXJL-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- OWUCNXMFJRFOFI-BQBZGAKWSA-N Asn-Gly-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O OWUCNXMFJRFOFI-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- BZWRLDPIWKOVKB-ZPFDUUQYSA-N Asn-Leu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O BZWRLDPIWKOVKB-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- DJIMLSXHXKWADV-CIUDSAMLSA-N Asn-Leu-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DJIMLSXHXKWADV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- FTSAJSADJCMDHH-CIUDSAMLSA-N Asn-Lys-Asp Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N FTSAJSADJCMDHH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- AYOAHKWVQLNPDM-HJGDQZAQSA-N Asn-Lys-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O AYOAHKWVQLNPDM-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- NCXTYSVDWLAQGZ-ZKWXMUAHSA-N Asn-Ser-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O NCXTYSVDWLAQGZ-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- QYRMBFWDSFGSFC-OLHMAJIHSA-N Asn-Thr-Asn Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)O QYRMBFWDSFGSFC-OLHMAJIHSA-N 0.000 description 1
- FYRVDDJMNISIKJ-UWVGGRQHSA-N Asn-Tyr Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 FYRVDDJMNISIKJ-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- QNNBHTFDFFFHGC-KKUMJFAQSA-N Asn-Tyr-Lys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)O QNNBHTFDFFFHGC-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- LRCIOEVFVGXZKB-BZSNNMDCSA-N Asn-Tyr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O LRCIOEVFVGXZKB-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- GHWWTICYPDKPTE-NGZCFLSTSA-N Asn-Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N GHWWTICYPDKPTE-NGZCFLSTSA-N 0.000 description 1
- RQYMKRMRZWJGHC-BQBZGAKWSA-N Asp-Gly-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(=O)O)N RQYMKRMRZWJGHC-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- CJUKAWUWBZCTDQ-SRVKXCTJSA-N Asp-Leu-Lys Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O CJUKAWUWBZCTDQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- UZFHNLYQWMGUHU-DCAQKATOSA-N Asp-Lys-Arg Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O UZFHNLYQWMGUHU-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- USNJAPJZSGTTPX-XVSYOHENSA-N Asp-Phe-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O USNJAPJZSGTTPX-XVSYOHENSA-N 0.000 description 1
- MNQMTYSEKZHIDF-GCJQMDKQSA-N Asp-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O MNQMTYSEKZHIDF-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 1
- GXHDGYOXPNQCKM-XVSYOHENSA-N Asp-Thr-Phe Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)O GXHDGYOXPNQCKM-XVSYOHENSA-N 0.000 description 1
- GCACQYDBDHRVGE-LKXGYXEUSA-N Asp-Thr-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@H](O)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O GCACQYDBDHRVGE-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 1
- HCOQNGIHSXICCB-IHRRRGAJSA-N Asp-Tyr-Arg Chemical compound N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)O HCOQNGIHSXICCB-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- CZIVKMOEXPILDK-SRVKXCTJSA-N Asp-Tyr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CZIVKMOEXPILDK-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 206010064539 Autoimmune myocarditis Diseases 0.000 description 1
- 206010069002 Autoimmune pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 238000012935 Averaging Methods 0.000 description 1
- 241000713842 Avian sarcoma virus Species 0.000 description 1
- 210000002237 B-cell of pancreatic islet Anatomy 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 208000027496 Behcet disease Diseases 0.000 description 1
- 208000009137 Behcet syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010004446 Benign prostatic hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000701822 Bovine papillomavirus Species 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000011691 Burkitt lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 108010046080 CD27 Ligand Proteins 0.000 description 1
- 102000007499 CD27 Ligand Human genes 0.000 description 1
- 108010029697 CD40 Ligand Proteins 0.000 description 1
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 description 1
- 101100013695 Caenorhabditis elegans fut-8 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000282832 Camelidae Species 0.000 description 1
- 241000282836 Camelus dromedarius Species 0.000 description 1
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 1
- 206010007134 Candida infections Diseases 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- JZUFKLXOESDKRF-UHFFFAOYSA-N Chlorothiazide Chemical compound C1=C(Cl)C(S(=O)(=O)N)=CC2=C1NCNS2(=O)=O JZUFKLXOESDKRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010008874 Chronic Fatigue Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000000668 Chronic Pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 108091062157 Cis-regulatory element Proteins 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- 208000011038 Cold agglutinin disease Diseases 0.000 description 1
- 206010009868 Cold type haemolytic anaemia Diseases 0.000 description 1
- 241000557626 Corvus corax Species 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- 244000301850 Cupressus sempervirens Species 0.000 description 1
- 206010011686 Cutaneous vasculitis Diseases 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZEXHDOQQYZKOIB-ACZMJKKPSA-N Cys-Glu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ZEXHDOQQYZKOIB-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- OHLLDUNVMPPUMD-DCAQKATOSA-N Cys-Leu-Val Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N OHLLDUNVMPPUMD-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- CAXGCBSRJLADPD-FXQIFTODSA-N Cys-Pro-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O CAXGCBSRJLADPD-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- 201000003883 Cystic fibrosis Diseases 0.000 description 1
- LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N D-cystine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CSSC[C@@H](N)C(O)=O LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N D-lysine Chemical compound NCCCC[C@@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- 108090000204 Dipeptidase 1 Proteins 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 206010014561 Emphysema Diseases 0.000 description 1
- 201000009273 Endometriosis Diseases 0.000 description 1
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- IMROMDMJAWUWLK-UHFFFAOYSA-N Ethenol Chemical compound OC=C IMROMDMJAWUWLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 1
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 1
- 108091006020 Fc-tagged proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 1
- 241000724791 Filamentous phage Species 0.000 description 1
- 241000700662 Fowlpox virus Species 0.000 description 1
- 235000016623 Fragaria vesca Nutrition 0.000 description 1
- 240000009088 Fragaria x ananassa Species 0.000 description 1
- 235000011363 Fragaria x ananassa Nutrition 0.000 description 1
- 102000006471 Fucosyltransferases Human genes 0.000 description 1
- 108010019236 Fucosyltransferases Proteins 0.000 description 1
- 206010017711 Gangrene Diseases 0.000 description 1
- JRZJKWGQFNTSRN-UHFFFAOYSA-N Geldanamycin Natural products C1C(C)CC(OC)C(O)C(C)C=C(C)C(OC(N)=O)C(OC)CCC=C(C)C(=O)NC2=CC(=O)C(OC)=C1C2=O JRZJKWGQFNTSRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000007465 Giant cell arteritis Diseases 0.000 description 1
- WUAYFMZULZDSLB-ACZMJKKPSA-N Gln-Ala-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O WUAYFMZULZDSLB-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- REJJNXODKSHOKA-ACZMJKKPSA-N Gln-Ala-Asp Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N REJJNXODKSHOKA-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- KVYVOGYEMPEXBT-GUBZILKMSA-N Gln-Ala-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O KVYVOGYEMPEXBT-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- OFPWCBGRYAOLMU-AVGNSLFASA-N Gln-Asp-Tyr Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)O OFPWCBGRYAOLMU-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- PKVWNYGXMNWJSI-CIUDSAMLSA-N Gln-Gln-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O PKVWNYGXMNWJSI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- DBNLXHGDGBUCDV-KKUMJFAQSA-N Gln-Phe-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O DBNLXHGDGBUCDV-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- UXXIVIQGOODKQC-NUMRIWBASA-N Gln-Thr-Asn Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)O UXXIVIQGOODKQC-NUMRIWBASA-N 0.000 description 1
- DUGYCMAIAKAQPB-GLLZPBPUSA-N Gln-Thr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O DUGYCMAIAKAQPB-GLLZPBPUSA-N 0.000 description 1
- AKDOUBMVLRCHBD-SIUGBPQLSA-N Gln-Tyr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O AKDOUBMVLRCHBD-SIUGBPQLSA-N 0.000 description 1
- JTWZNMUVQWWGOX-SOUVJXGZSA-N Gln-Tyr-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)C(=O)O JTWZNMUVQWWGOX-SOUVJXGZSA-N 0.000 description 1
- ZZLDMBMFKZFQMU-NRPADANISA-N Gln-Val-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZZLDMBMFKZFQMU-NRPADANISA-N 0.000 description 1
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- AVZHGSCDKIQZPQ-CIUDSAMLSA-N Glu-Arg-Ala Chemical compound C[C@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C(O)=O AVZHGSCDKIQZPQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- JVSBYEDSSRZQGV-GUBZILKMSA-N Glu-Asp-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O JVSBYEDSSRZQGV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- MWMJCGBSIORNCD-AVGNSLFASA-N Glu-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MWMJCGBSIORNCD-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- RFTVTKBHDXCEEX-WDSKDSINSA-N Glu-Ser-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O RFTVTKBHDXCEEX-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- CGWHAXBNGYQBBK-JBACZVJFSA-N Glu-Trp-Tyr Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)N)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 CGWHAXBNGYQBBK-JBACZVJFSA-N 0.000 description 1
- SITLTJHOQZFJGG-XPUUQOCRSA-N Glu-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- XUDLUKYPXQDCRX-BQBZGAKWSA-N Gly-Arg-Asn Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O XUDLUKYPXQDCRX-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- DTPOVRRYXPJJAZ-FJXKBIBVSA-N Gly-Arg-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CCCN=C(N)N DTPOVRRYXPJJAZ-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 1
- WKJKBELXHCTHIJ-WPRPVWTQSA-N Gly-Arg-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CCCN=C(N)N WKJKBELXHCTHIJ-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 1
- JVWPPCWUDRJGAE-YUMQZZPRSA-N Gly-Asn-Leu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O JVWPPCWUDRJGAE-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- UESJMAMHDLEHGM-NHCYSSNCSA-N Gly-Ile-Leu Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O UESJMAMHDLEHGM-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- TWTPDFFBLQEBOE-IUCAKERBSA-N Gly-Leu-Gln Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O TWTPDFFBLQEBOE-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- LHYJCVCQPWRMKZ-WEDXCCLWSA-N Gly-Leu-Thr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O LHYJCVCQPWRMKZ-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- VBOBNHSVQKKTOT-YUMQZZPRSA-N Gly-Lys-Ala Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VBOBNHSVQKKTOT-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- IFHJOBKVXBESRE-YUMQZZPRSA-N Gly-Met-Gln Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)CN IFHJOBKVXBESRE-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- LCRDMSSAKLTKBU-ZDLURKLDSA-N Gly-Ser-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CN LCRDMSSAKLTKBU-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- DNVDEMWIYLVIQU-RCOVLWMOSA-N Gly-Val-Asp Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O DNVDEMWIYLVIQU-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 1
- NGRPGJGKJMUGDM-XVKPBYJWSA-N Gly-Val-Gln Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O NGRPGJGKJMUGDM-XVKPBYJWSA-N 0.000 description 1
- 208000003807 Graves Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000015023 Graves' disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035895 Guillain-Barré syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010056557 Gulf war syndrome Diseases 0.000 description 1
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 description 1
- 208000002250 Hematologic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108091005904 Hemoglobin subunit beta Proteins 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 229920000209 Hexadimethrine bromide Polymers 0.000 description 1
- ZUPVLBAXUUGKKN-VHSXEESVSA-N His-Gly-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)CNC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)N)C(=O)O ZUPVLBAXUUGKKN-VHSXEESVSA-N 0.000 description 1
- NTXIJPDAHXSHNL-ONGXEEELSA-N His-Gly-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NTXIJPDAHXSHNL-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- QMUHTRISZMFKAY-MXAVVETBSA-N His-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N QMUHTRISZMFKAY-MXAVVETBSA-N 0.000 description 1
- LPBWRHRHEIYAIP-KKUMJFAQSA-N His-Tyr-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O LPBWRHRHEIYAIP-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- JATYGDHMDRAISQ-KKUMJFAQSA-N His-Tyr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O JATYGDHMDRAISQ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 1
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 101000934338 Homo sapiens Myeloid cell surface antigen CD33 Proteins 0.000 description 1
- 101000764263 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 4 Proteins 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 241000701109 Human adenovirus 2 Species 0.000 description 1
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 1
- XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N IDUR Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- 201000009794 Idiopathic Pulmonary Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- NKVZTQVGUNLLQW-JBDRJPRFSA-N Ile-Ala-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)N NKVZTQVGUNLLQW-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- FJWYJQRCVNGEAQ-ZPFDUUQYSA-N Ile-Asn-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N FJWYJQRCVNGEAQ-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- AFERFBZLVUFWRA-HTFCKZLJSA-N Ile-Ile-Cys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N AFERFBZLVUFWRA-HTFCKZLJSA-N 0.000 description 1
- DMSVBUWGDLYNLC-IAVJCBSLSA-N Ile-Ile-Phe Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 DMSVBUWGDLYNLC-IAVJCBSLSA-N 0.000 description 1
- KBAPKNDWAGVGTH-IGISWZIWSA-N Ile-Ile-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 KBAPKNDWAGVGTH-IGISWZIWSA-N 0.000 description 1
- XLXPYSDGMXTTNQ-UHFFFAOYSA-N Ile-Phe-Leu Natural products CCC(C)C(N)C(=O)NC(C(=O)NC(CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XLXPYSDGMXTTNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XHBYEMIUENPZLY-GMOBBJLQSA-N Ile-Pro-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O XHBYEMIUENPZLY-GMOBBJLQSA-N 0.000 description 1
- JERJIYYCOGBAIJ-OBAATPRFSA-N Ile-Tyr-Trp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)C(=O)O)N JERJIYYCOGBAIJ-OBAATPRFSA-N 0.000 description 1
- 235000003332 Ilex aquifolium Nutrition 0.000 description 1
- 241000209027 Ilex aquifolium Species 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 1
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 description 1
- 102000012745 Immunoglobulin Subunits Human genes 0.000 description 1
- 108010079585 Immunoglobulin Subunits Proteins 0.000 description 1
- 206010021518 Impaired gastric emptying Diseases 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N Inosine Chemical class O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC(O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 1
- 102000010789 Interleukin-2 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038453 Interleukin-2 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000010787 Interleukin-4 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038486 Interleukin-4 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100021592 Interleukin-7 Human genes 0.000 description 1
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 1
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 1
- 208000001126 Keratosis Diseases 0.000 description 1
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 1
- FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N L-Phenylalanyl-L-lysin Natural products NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SITWEMZOJNKJCH-UHFFFAOYSA-N L-alanine-L-arginine Natural products CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCNC(N)=N SITWEMZOJNKJCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 125000000510 L-tryptophano group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2N([H])C([H])=C(C([H])([H])[C@@]([H])(C(O[H])=O)N([H])[*])C2=C1[H] 0.000 description 1
- PPTAQBNUFKTJKA-BJDJZHNGSA-N Leu-Cys-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O PPTAQBNUFKTJKA-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- PNUCWVAGVNLUMW-CIUDSAMLSA-N Leu-Cys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O PNUCWVAGVNLUMW-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- KAFOIVJDVSZUMD-UHFFFAOYSA-N Leu-Gln-Gln Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O KAFOIVJDVSZUMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GLBNEGIOFRVRHO-JYJNAYRXSA-N Leu-Gln-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O GLBNEGIOFRVRHO-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- YVKSMSDXKMSIRX-GUBZILKMSA-N Leu-Glu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O YVKSMSDXKMSIRX-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- PDQDCFBVYXEFSD-SRVKXCTJSA-N Leu-Leu-Asp Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O PDQDCFBVYXEFSD-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- JLWZLIQRYCTYBD-IHRRRGAJSA-N Leu-Lys-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O JLWZLIQRYCTYBD-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- LVTJJOJKDCVZGP-QWRGUYRKSA-N Leu-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O LVTJJOJKDCVZGP-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- VCHVSKNMTXWIIP-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VCHVSKNMTXWIIP-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- MVHXGBZUJLWZOH-BJDJZHNGSA-N Leu-Ser-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O MVHXGBZUJLWZOH-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- HWMQRQIFVGEAPH-XIRDDKMYSA-N Leu-Ser-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 HWMQRQIFVGEAPH-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- RDFIVFHPOSOXMW-ACRUOGEOSA-N Leu-Tyr-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O RDFIVFHPOSOXMW-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 1
- MVJRBCJCRYGCKV-GVXVVHGQSA-N Leu-Val-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O MVJRBCJCRYGCKV-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- YQFZRHYZLARWDY-IHRRRGAJSA-N Leu-Val-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN YQFZRHYZLARWDY-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- QESXLSQLQHHTIX-RHYQMDGZSA-N Leu-Val-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QESXLSQLQHHTIX-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- 108010022337 Leucine Enkephalin Proteins 0.000 description 1
- 208000012309 Linear IgA disease Diseases 0.000 description 1
- 208000016604 Lyme disease Diseases 0.000 description 1
- 206010049459 Lymphangioleiomyomatosis Diseases 0.000 description 1
- DFXQCCBKGUNYGG-GUBZILKMSA-N Lys-Gln-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN DFXQCCBKGUNYGG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- DRCILAJNUJKAHC-SRVKXCTJSA-N Lys-Glu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O DRCILAJNUJKAHC-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- OWRUUFUVXFREBD-KKUMJFAQSA-N Lys-His-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O OWRUUFUVXFREBD-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- NJNRBRKHOWSGMN-SRVKXCTJSA-N Lys-Leu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O NJNRBRKHOWSGMN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- SBQDRNOLGSYHQA-YUMQZZPRSA-N Lys-Ser-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SBQDRNOLGSYHQA-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- UIJVKVHLCQSPOJ-XIRDDKMYSA-N Lys-Ser-Trp Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(O)=O UIJVKVHLCQSPOJ-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- DNDVVILEHVMWIS-LPEHRKFASA-N Met-Asp-Pro Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N DNDVVILEHVMWIS-LPEHRKFASA-N 0.000 description 1
- XMQZLGBUJMMODC-AVGNSLFASA-N Met-His-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O XMQZLGBUJMMODC-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- ORRNBLTZBBESPN-HJWJTTGWSA-N Met-Ile-Phe Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ORRNBLTZBBESPN-HJWJTTGWSA-N 0.000 description 1
- QAVZUKIPOMBLMC-AVGNSLFASA-N Met-Val-Leu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C QAVZUKIPOMBLMC-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- 101100369993 Mus musculus Tnfsf10 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000000112 Myalgia Diseases 0.000 description 1
- 101710107068 Myelin basic protein Proteins 0.000 description 1
- 201000003793 Myelodysplastic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102100025243 Myeloid cell surface antigen CD33 Human genes 0.000 description 1
- JDHILDINMRGULE-LURJTMIESA-N N(pros)-methyl-L-histidine Chemical compound CN1C=NC=C1C[C@H](N)C(O)=O JDHILDINMRGULE-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-valine Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JJIHLJJYMXLCOY-BYPYZUCNSA-N N-acetyl-L-serine Chemical compound CC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O JJIHLJJYMXLCOY-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 1
- PYUSHNKNPOHWEZ-YFKPBYRVSA-N N-formyl-L-methionine Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC=O PYUSHNKNPOHWEZ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 108091008604 NGF receptors Proteins 0.000 description 1
- 206010028741 Nasal inflammation Diseases 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 description 1
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 description 1
- 206010033649 Pancreatitis chronic Diseases 0.000 description 1
- 241001631646 Papillomaviridae Species 0.000 description 1
- 108091093037 Peptide nucleic acid Proteins 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 208000031845 Pernicious anaemia Diseases 0.000 description 1
- UHRNIXJAGGLKHP-DLOVCJGASA-N Phe-Ala-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UHRNIXJAGGLKHP-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- DDYIRGBOZVKRFR-AVGNSLFASA-N Phe-Asp-Glu Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N DDYIRGBOZVKRFR-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- KNYPNEYICHHLQL-ACRUOGEOSA-N Phe-Leu-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 KNYPNEYICHHLQL-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 1
- MMJJFXWMCMJMQA-STQMWFEESA-N Phe-Pro-Gly Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(O)=O)C1=CC=CC=C1 MMJJFXWMCMJMQA-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- MSSXKZBDKZAHCX-UNQGMJICSA-N Phe-Thr-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O MSSXKZBDKZAHCX-UNQGMJICSA-N 0.000 description 1
- ZYNBEWGJFXTBDU-ACRUOGEOSA-N Phe-Tyr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N ZYNBEWGJFXTBDU-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 1
- 206010034972 Photosensitivity reaction Diseases 0.000 description 1
- 241001505332 Polyomavirus sp. Species 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- KIZQGKLMXKGDIV-BQBZGAKWSA-N Pro-Ala-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 KIZQGKLMXKGDIV-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- JARJPEMLQAWNBR-GUBZILKMSA-N Pro-Asp-Arg Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O JARJPEMLQAWNBR-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- XKHCJJPNXFBADI-DCAQKATOSA-N Pro-Asp-Lys Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O XKHCJJPNXFBADI-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- NXEYSLRNNPWCRN-SRVKXCTJSA-N Pro-Glu-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O NXEYSLRNNPWCRN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- FNGOXVQBBCMFKV-CIUDSAMLSA-N Pro-Ser-Glu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O FNGOXVQBBCMFKV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- 208000004403 Prostatic Hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 201000001263 Psoriatic Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 208000036824 Psoriatic arthropathy Diseases 0.000 description 1
- 101800001295 Putative ATP-dependent helicase Proteins 0.000 description 1
- 101800001006 Putative helicase Proteins 0.000 description 1
- 208000006311 Pyoderma Diseases 0.000 description 1
- 102000014128 RANK Ligand Human genes 0.000 description 1
- 108010025832 RANK Ligand Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 208000012322 Raynaud phenomenon Diseases 0.000 description 1
- 208000033464 Reiter syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010038381 Renal atrophy Diseases 0.000 description 1
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 241000714474 Rous sarcoma virus Species 0.000 description 1
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- WXUBSIDKNMFAGS-IHRRRGAJSA-N Ser-Arg-Tyr Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 WXUBSIDKNMFAGS-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- RDFQNDHEHVSONI-ZLUOBGJFSA-N Ser-Asn-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RDFQNDHEHVSONI-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- CNIIKZQXBBQHCX-FXQIFTODSA-N Ser-Asp-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O CNIIKZQXBBQHCX-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N Ser-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- GZFAWAQTEYDKII-YUMQZZPRSA-N Ser-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CO GZFAWAQTEYDKII-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- UAJAYRMZGNQILN-BQBZGAKWSA-N Ser-Gly-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O UAJAYRMZGNQILN-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- CICQXRWZNVXFCU-SRVKXCTJSA-N Ser-His-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O CICQXRWZNVXFCU-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N Ser-Leu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- PJIQEIFXZPCWOJ-FXQIFTODSA-N Ser-Pro-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O PJIQEIFXZPCWOJ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- JURQXQBJKUHGJS-UHFFFAOYSA-N Ser-Ser-Ser-Ser Chemical compound OCC(N)C(=O)NC(CO)C(=O)NC(CO)C(=O)NC(CO)C(O)=O JURQXQBJKUHGJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SQHKXWODKJDZRC-LKXGYXEUSA-N Ser-Thr-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O SQHKXWODKJDZRC-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 1
- SNXUIBACCONSOH-BWBBJGPYSA-N Ser-Thr-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SNXUIBACCONSOH-BWBBJGPYSA-N 0.000 description 1
- ZWSZBWAFDZRBNM-UBHSHLNASA-N Ser-Trp-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ZWSZBWAFDZRBNM-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- FGBLCMLXHRPVOF-IHRRRGAJSA-N Ser-Tyr-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O FGBLCMLXHRPVOF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- UBTNVMGPMYDYIU-HJPIBITLSA-N Ser-Tyr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O UBTNVMGPMYDYIU-HJPIBITLSA-N 0.000 description 1
- VVKVHAOOUGNDPJ-SRVKXCTJSA-N Ser-Tyr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VVKVHAOOUGNDPJ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- PMTWIUBUQRGCSB-FXQIFTODSA-N Ser-Val-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O PMTWIUBUQRGCSB-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 101000857870 Squalus acanthias Gonadoliberin Proteins 0.000 description 1
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 1
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010042033 Stevens-Johnson syndrome Diseases 0.000 description 1
- 231100000168 Stevens-Johnson syndrome Toxicity 0.000 description 1
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- NHUHCSRWZMLRLA-UHFFFAOYSA-N Sulfisoxazole Chemical compound CC1=NOC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=C1C NHUHCSRWZMLRLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010265 Sweet syndrome Diseases 0.000 description 1
- 201000009594 Systemic Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 206010042953 Systemic sclerosis Diseases 0.000 description 1
- PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N TCEP Chemical compound OC(=O)CCP(CCC(O)=O)CCC(O)=O PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010076818 TEV protease Proteins 0.000 description 1
- 208000000491 Tendinopathy Diseases 0.000 description 1
- 206010043255 Tendonitis Diseases 0.000 description 1
- UNURFMVMXLENAZ-KJEVXHAQSA-N Thr-Arg-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O UNURFMVMXLENAZ-KJEVXHAQSA-N 0.000 description 1
- JVTHIXKSVYEWNI-JRQIVUDYSA-N Thr-Asn-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O JVTHIXKSVYEWNI-JRQIVUDYSA-N 0.000 description 1
- IOWJRKAVLALBQB-IWGUZYHVSA-N Thr-Asp Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O IOWJRKAVLALBQB-IWGUZYHVSA-N 0.000 description 1
- OHAJHDJOCKKJLV-LKXGYXEUSA-N Thr-Asp-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O OHAJHDJOCKKJLV-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 1
- BIYXEUAFGLTAEM-WUJLRWPWSA-N Thr-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O BIYXEUAFGLTAEM-WUJLRWPWSA-N 0.000 description 1
- XOWKUMFHEZLKLT-CIQUZCHMSA-N Thr-Ile-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O XOWKUMFHEZLKLT-CIQUZCHMSA-N 0.000 description 1
- BVOVIGCHYNFJBZ-JXUBOQSCSA-N Thr-Leu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O BVOVIGCHYNFJBZ-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 1
- ZXIHABSKUITPTN-IXOXFDKPSA-N Thr-Lys-His Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N)O ZXIHABSKUITPTN-IXOXFDKPSA-N 0.000 description 1
- JMBRNXUOLJFURW-BEAPCOKYSA-N Thr-Phe-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O)N)O JMBRNXUOLJFURW-BEAPCOKYSA-N 0.000 description 1
- PRTHQBSMXILLPC-XGEHTFHBSA-N Thr-Ser-Arg Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O PRTHQBSMXILLPC-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- WPSKTVVMQCXPRO-BWBBJGPYSA-N Thr-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WPSKTVVMQCXPRO-BWBBJGPYSA-N 0.000 description 1
- NDZYTIMDOZMECO-SHGPDSBTSA-N Thr-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O NDZYTIMDOZMECO-SHGPDSBTSA-N 0.000 description 1
- QYDKSNXSBXZPFK-ZJDVBMNYSA-N Thr-Thr-Arg Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O QYDKSNXSBXZPFK-ZJDVBMNYSA-N 0.000 description 1
- ZMYCLHFLHRVOEA-HEIBUPTGSA-N Thr-Thr-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ZMYCLHFLHRVOEA-HEIBUPTGSA-N 0.000 description 1
- JNKAYADBODLPMQ-HSHDSVGOSA-N Thr-Trp-Val Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O)=CNC2=C1 JNKAYADBODLPMQ-HSHDSVGOSA-N 0.000 description 1
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 1
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 1
- 102100026890 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 4 Human genes 0.000 description 1
- 102100033725 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 16 Human genes 0.000 description 1
- YJQCOFNZVFGCAF-UHFFFAOYSA-N Tunicamycin II Natural products O1C(CC(O)C2C(C(O)C(O2)N2C(NC(=O)C=C2)=O)O)C(O)C(O)C(NC(=O)C=CCCCCCCCCC(C)C)C1OC1OC(CO)C(O)C(O)C1NC(C)=O YJQCOFNZVFGCAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OLWFDNLLBWQWCP-STQMWFEESA-N Tyr-Gly-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O OLWFDNLLBWQWCP-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- NKUGCYDFQKFVOJ-JYJNAYRXSA-N Tyr-Leu-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 NKUGCYDFQKFVOJ-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- VKYDVKAKGDNZED-STECZYCISA-N Tyr-Val-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N VKYDVKAKGDNZED-STECZYCISA-N 0.000 description 1
- RVGVIWNHABGIFH-IHRRRGAJSA-N Tyr-Val-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RVGVIWNHABGIFH-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 206010046851 Uveitis Diseases 0.000 description 1
- PVPAOIGJYHVWBT-KKHAAJSZSA-N Val-Asn-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O PVPAOIGJYHVWBT-KKHAAJSZSA-N 0.000 description 1
- DBOXBUDEAJVKRE-LSJOCFKGSA-N Val-Asn-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N DBOXBUDEAJVKRE-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- CELJCNRXKZPTCX-XPUUQOCRSA-N Val-Gly-Ala Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CELJCNRXKZPTCX-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- WNZSAUMKZQXHNC-UKJIMTQDSA-N Val-Ile-Gln Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N WNZSAUMKZQXHNC-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 1
- UJMCYJKPDFQLHX-XGEHTFHBSA-N Val-Ser-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O UJMCYJKPDFQLHX-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- OFTXTCGQJXTNQS-XGEHTFHBSA-N Val-Thr-Ser Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O OFTXTCGQJXTNQS-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- DOBHJKVVACOQTN-DZKIICNBSA-N Val-Tyr-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)CC1=CC=C(O)C=C1 DOBHJKVVACOQTN-DZKIICNBSA-N 0.000 description 1
- IECQJCJNPJVUSB-IHRRRGAJSA-N Val-Tyr-Ser Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O IECQJCJNPJVUSB-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- VVIZITNVZUAEMI-DLOVCJGASA-N Val-Val-Gln Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O VVIZITNVZUAEMI-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- IXKSXJFAGXLQOQ-XISFHERQSA-N WHWLQLKPGQPMY Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C1=CNC=N1 IXKSXJFAGXLQOQ-XISFHERQSA-N 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 238000012452 Xenomouse strains Methods 0.000 description 1
- FJWGYAHXMCUOOM-QHOUIDNNSA-N [(2s,3r,4s,5r,6r)-2-[(2r,3r,4s,5r,6s)-4,5-dinitrooxy-2-(nitrooxymethyl)-6-[(2r,3r,4s,5r,6s)-4,5,6-trinitrooxy-2-(nitrooxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-3-yl]oxy-3,5-dinitrooxy-6-(nitrooxymethyl)oxan-4-yl] nitrate Chemical compound O([C@@H]1O[C@@H]([C@H]([C@H](O[N+]([O-])=O)[C@H]1O[N+]([O-])=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O[N+]([O-])=O)[C@H](O[N+]([O-])=O)[C@@H](CO[N+]([O-])=O)O1)O[N+]([O-])=O)CO[N+](=O)[O-])[C@@H]1[C@@H](CO[N+]([O-])=O)O[C@@H](O[N+]([O-])=O)[C@H](O[N+]([O-])=O)[C@H]1O[N+]([O-])=O FJWGYAHXMCUOOM-QHOUIDNNSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 206010000210 abortion Diseases 0.000 description 1
- 231100000176 abortion Toxicity 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 208000037883 airway inflammation Diseases 0.000 description 1
- 108010024078 alanyl-glycyl-serine Proteins 0.000 description 1
- 108010087924 alanylproline Proteins 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 208000004631 alopecia areata Diseases 0.000 description 1
- 108010050122 alpha 1-Antitrypsin Proteins 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 102000013529 alpha-Fetoproteins Human genes 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003466 anti-cipated effect Effects 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 230000009830 antibody antigen interaction Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 1
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 1
- 238000003782 apoptosis assay Methods 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003230 arteritis Diseases 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 1
- 108010068265 aspartyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 108010044540 auristatin Proteins 0.000 description 1
- 201000000448 autoimmune hemolytic anemia Diseases 0.000 description 1
- 201000004982 autoimmune uveitis Diseases 0.000 description 1
- 210000003050 axon Anatomy 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 102000006635 beta-lactamase Human genes 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 229920000249 biocompatible polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 125000004057 biotinyl group Chemical group [H]N1C(=O)N([H])[C@]2([H])[C@@]([H])(SC([H])([H])[C@]12[H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 208000019748 bullous skin disease Diseases 0.000 description 1
- HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N calicheamicin Chemical compound C1[C@H](OC)[C@@H](NCC)CO[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@@H]2C\3=C(NC(=O)OC)C(=O)C[C@](C/3=C/CSSSC)(O)C#C\C=C/C#C2)O[C@H](C)[C@@H](NO[C@@H]2O[C@H](C)[C@@H](SC(=O)C=3C(=C(OC)C(O[C@H]4[C@@H]([C@H](OC)[C@@H](O)[C@H](C)O4)O)=C(I)C=3C)OC)[C@@H](O)C2)[C@@H]1O HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N 0.000 description 1
- 229930195731 calicheamicin Natural products 0.000 description 1
- 201000003984 candidiasis Diseases 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 239000002458 cell surface marker Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- UFWLHIVKHDCSHZ-UHFFFAOYSA-N chembl1595789 Chemical compound NC1=NC(N)=NC(C=2C(=CC=CC=2)O)=N1 UFWLHIVKHDCSHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 235000015218 chewing gum Nutrition 0.000 description 1
- 208000003167 cholangitis Diseases 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 208000025302 chronic primary adrenal insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 238000000975 co-precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 210000000860 cochlear nerve Anatomy 0.000 description 1
- 229960003950 combination of corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000010924 continuous production Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 238000013211 curve analysis Methods 0.000 description 1
- 208000004921 cutaneous lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 1
- 239000000430 cytokine receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 description 1
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 201000001981 dermatomyositis Diseases 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 125000004431 deuterium atom Chemical group 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 1
- NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-K dioxido-sulfanylidene-sulfido-$l^{5}-phosphane Chemical compound [O-]P([O-])([S-])=S NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 108010054813 diprotin B Proteins 0.000 description 1
- 125000002228 disulfide group Chemical group 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 208000000718 duodenal ulcer Diseases 0.000 description 1
- 210000003027 ear inner Anatomy 0.000 description 1
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 210000000750 endocrine system Anatomy 0.000 description 1
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001976 enzyme digestion Methods 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- 230000008029 eradication Effects 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 210000001508 eye Anatomy 0.000 description 1
- 208000030533 eye disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 1
- 206010016256 fatigue Diseases 0.000 description 1
- 210000004996 female reproductive system Anatomy 0.000 description 1
- 230000003176 fibrotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 238000002825 functional assay Methods 0.000 description 1
- 238000007499 fusion processing Methods 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 210000005095 gastrointestinal system Anatomy 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- QTQAWLPCGQOSGP-GBTDJJJQSA-N geldanamycin Chemical compound N1C(=O)\C(C)=C/C=C\[C@@H](OC)[C@H](OC(N)=O)\C(C)=C/[C@@H](C)[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H](C)CC2=C(OC)C(=O)C=C1C2=O QTQAWLPCGQOSGP-GBTDJJJQSA-N 0.000 description 1
- 210000001280 germinal center Anatomy 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 102000018146 globin Human genes 0.000 description 1
- 108060003196 globin Proteins 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 229960002743 glutamine Drugs 0.000 description 1
- 108010057083 glutamyl-aspartyl-leucine Proteins 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 1
- JYPCXBJRLBHWME-UHFFFAOYSA-N glycyl-L-prolyl-L-arginine Natural products NCC(=O)N1CCCC1C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(O)=O JYPCXBJRLBHWME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010025801 glycyl-prolyl-arginine Proteins 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000003284 homeostatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000710 homodimer Substances 0.000 description 1
- 229920001519 homopolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002349 hydroxyamino group Chemical group [H]ON([H])[*] 0.000 description 1
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 1
- 230000002989 hypothyroidism Effects 0.000 description 1
- 208000003532 hypothyroidism Diseases 0.000 description 1
- 208000013617 idiopathic gastroparesis Diseases 0.000 description 1
- 125000001841 imino group Chemical group [H]N=* 0.000 description 1
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000014726 immortalization of host cell Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 1
- 230000002998 immunogenetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 201000008319 inclusion body myositis Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 1
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 229940100994 interleukin-7 Drugs 0.000 description 1
- 208000036971 interstitial lung disease 2 Diseases 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 230000037427 ion transport Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 150000002519 isoleucine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003907 kidney function Effects 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- URLZCHNOLZSCCA-UHFFFAOYSA-N leu-enkephalin Chemical compound C=1C=C(O)C=CC=1CC(N)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)NC(C(=O)NC(CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 URLZCHNOLZSCCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001909 leucine group Chemical group [H]N(*)C(C(*)=O)C([H])([H])C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 201000011486 lichen planus Diseases 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000001638 lipofection Methods 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 238000011866 long-term treatment Methods 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 description 1
- 238000013178 mathematical model Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004001 molecular interaction Effects 0.000 description 1
- 238000000302 molecular modelling Methods 0.000 description 1
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 1
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 208000029766 myalgic encephalomeyelitis/chronic fatigue syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010028417 myasthenia gravis Diseases 0.000 description 1
- 108010065781 myosin light chain 2 Proteins 0.000 description 1
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 230000036963 noncompetitive effect Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 210000004248 oligodendroglia Anatomy 0.000 description 1
- 210000004789 organ system Anatomy 0.000 description 1
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 208000008494 pericarditis Diseases 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 201000010076 persian gulf syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 108010064486 phenylalanyl-leucyl-valine Proteins 0.000 description 1
- PTMHPRAIXMAOOB-UHFFFAOYSA-N phosphoramidic acid Chemical compound NP(O)(O)=O PTMHPRAIXMAOOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LFGREXWGYUGZLY-UHFFFAOYSA-N phosphoryl Chemical group [P]=O LFGREXWGYUGZLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- BZQFBWGGLXLEPQ-REOHCLBHSA-N phosphoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)COP(O)(O)=O BZQFBWGGLXLEPQ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 230000036211 photosensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 230000027086 plasmid maintenance Effects 0.000 description 1
- 208000008423 pleurisy Diseases 0.000 description 1
- 229920000191 poly(N-vinyl pyrrolidone) Polymers 0.000 description 1
- 229920001583 poly(oxyethylated polyols) Polymers 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 208000005987 polymyositis Diseases 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000009465 prokaryotic expression Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 108010029020 prolylglycine Proteins 0.000 description 1
- 108010090894 prolylleucine Proteins 0.000 description 1
- 201000007094 prostatitis Diseases 0.000 description 1
- 238000001498 protein fragment complementation assay Methods 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 description 1
- 238000002708 random mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000000552 rheumatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 230000002784 sclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- JRPHGDYSKGJTKZ-UHFFFAOYSA-K selenophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=[Se] JRPHGDYSKGJTKZ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000037439 somatic mutation Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003393 splenic effect Effects 0.000 description 1
- 108010005652 splenotritin Proteins 0.000 description 1
- 201000005671 spondyloarthropathy Diseases 0.000 description 1
- 208000000995 spontaneous abortion Diseases 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 208000003265 stomatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000011834 subacute cutaneous lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 206010043207 temporal arteritis Diseases 0.000 description 1
- 201000004415 tendinitis Diseases 0.000 description 1
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 238000011285 therapeutic regimen Methods 0.000 description 1
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 210000003371 toe Anatomy 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000037317 transdermal delivery Effects 0.000 description 1
- 230000002463 transducing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N triflic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C(F)(F)F ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- MEYZYGMYMLNUHJ-UHFFFAOYSA-N tunicamycin Natural products CC(C)CCCCCCCCCC=CC(=O)NC1C(O)C(O)C(CC(O)C2OC(C(O)C2O)N3C=CC(=O)NC3=O)OC1OC4OC(CO)C(O)C(O)C4NC(=O)C MEYZYGMYMLNUHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 108010051110 tyrosyl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 210000002229 urogenital system Anatomy 0.000 description 1
- 229910052720 vanadium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 1
- 208000005925 vesicular stomatitis Diseases 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2875—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF/TNF superfamily, e.g. CD70, CD95L, CD153, CD154
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/06—Antigout agents, e.g. antihyperuricemic or uricosuric agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
- A61P5/16—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4 for decreasing, blocking or antagonising the activity of the thyroid hormones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/38—Drugs for disorders of the endocrine system of the suprarenal hormones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70575—NGF/TNF-superfamily, e.g. CD70, CD95L, CD153, CD154
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/55—Fab or Fab'
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
- C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/20—Fusion polypeptide containing a tag with affinity for a non-protein ligand
- C07K2319/21—Fusion polypeptide containing a tag with affinity for a non-protein ligand containing a His-tag
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/40—Fusion polypeptide containing a tag for immunodetection, or an epitope for immunisation
- C07K2319/43—Fusion polypeptide containing a tag for immunodetection, or an epitope for immunisation containing a FLAG-tag
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/50—Fusion polypeptide containing protease site
Abstract
본 발명에는 사람 CD30L 항원 결합 단백질과 관련된 조성물 및 방법이 제공된다. 본원에 기술된 조성물은 사람 CD30L 항원 결합 단백질, 사람 CD30L 항원 결합 단백질을 코드화하는 폴리뉴클레오티드, 이들 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터, 숙주 세포 및 제약학적 조성물을 포함한다. 이들 각각의 조성물을 제조하고 사용하는 방법이 또한 제공된다.
Description
본 발명은 CD30L에 결합하는 항원 결합 단백질에 관한 것이다.
CD30에 대한 자연 발생적인 리간드인 CD30 리간드(CD30L, CD153)는 CD30에 특이적으로 결합하는 유형 II 막 당단백질로, 그것의 세포질 도메인을 경유하여 신호를 전파하도록 CD30을 촉발시킨다. CD30과 CD30L은 각각 TNFR과 TNF 슈퍼패밀리의 구성원인 상호작용하는 세포 표면 당단백질이다(Durkop et al, Cell, 68:421, 1992; Smith et al, Cell, 73:1349, 1993; 미국 특허 번호 5,480,981; 5,677,430; 6,143,869 및 6,652,854). CD30과 CD30L의 발현은 면역계의 세포에 제한되고 엄격하게 조절된다. CD30은 주로 활성화된 B 세포 및 T 세포의 하위세트에서 활성화된/기억 표현형으로 발현된다(Ellis et al., J. Immun., 151:2380, 1993; Falini et al., Blood, 85:1, 1995). CD30L은 활성화된 마우스 및 사람 T 세포 상에서 고수준으로 발현된다(Shimozato et al, Biochem. & Biophys. Res. Comm., 256:519, 1999; Armitage, J. Biological Regulators & Homeostatic Agents, 14:142, 2000). CD30L의 상대적인 유전자 발현의 극적인 변화는 B 세포가 배중심(germinal center)을 통해 수송됨에 따라 발생한다(Klein et al, Proc. Nat. Acad. Sci., USA, 100:2639, 2003). 그로써 B 세포 상에서의 CD30L의 발현은 단계 및 맥락 특이적일 수 있다. CD30L은 또한 T 세포가 B 세포와 상호작용하는 장소인 비장 여포(splenic follicle)에 존재하는 마우스 수지상세포-유사 부속 세포의 독특한 집단의 마커일 것으로 여겨진다(Kim et al., Immunity, 18:643, 2003).
CD30/CD30L을 발현하는 세포들 사이의 상호작용은 강력한 T-세포 의존성 이차 또는 부류간 스위칭된 항체 반응의 생성에 중요한 것으로 여겨진다. 그런 역할에 대한 증거는 마우스 시스템에서 이루어진 시험관 내 연구(Shanebeck et al., Eur. J. Immunol., 25:2147-53, 1995) 및 생체 내 연구(Gaspal et al,. J. Immunol., 174:3891-6, 2005)로부터의 데이터를 포함한다. 또한, 마우스 CD30L에 대한, 차단성이지만 비-고갈성인 쥐 mAb로 마우스를 생체 내 처리하면 T 및/또는 B 세포-의존성 자가면역 질병의 많은 모델에서 질병의 발생 또는 진전을 억제하는 것으로 밝혀졌다(미국 특허 번호 6,667,039). 강력한 체액 면역 성분을 포함한 모델에서, 질병의 억제는 질병-관련 항체 반응의 억제와 상관관계가 있다.
그러므로 치료 및 진단 용도에 사용하기 위하여 CD30L에 결합하는 사람 항체 및/또는 항원 결합 영역을 포함하는 조성물을 제공하는 것이 유용할 것이다.
CD30L, 특히 사람 CD30L에 결합하는 항원 결합 단백질이 제공된다. 사람 CD30L 항원 결합 단백질은 CD30L/CD30 상호작용에 관련된 적어도 하나의 생물학적 반응을 감소, 억제, 간섭 및/또는 조절할 수 있고, 그로써 CD30L-관련 질병 또는 장애의 효과를 개선시키는 데 유용하다. CD30L 항원 결합 단백질은 예를 들면 CD30L/CD30 상호작용을 감소, 억제, 간섭 및/또는 조절하기 위해 사용될 수 있다.
한 구체예에서, 분리된 항원 결합 단백질은 AA 201 내지 234를 포함하는 CD30L의 C-말단 영역에 결합한다. 추가의 구체예에서는 AA 201 내지 234를 포함하는 CD30L의 C-말단 영역 및 AA 75 내지 95에 의해 규정되는, 세포외재성 영역의 N-말단 부분에 위치한 CD30L의 추가 영역에 결합하는 항원 결합 단백질이 제공된다. 본 발명의 추가의 구체예에서, 항원 결합 단백질은 a) CD30/CD30L 상호작용의 억제; b) CD30L-유도된 IL-8 유도의 억제; c) 사람 CD30L에의 결합에 대한 항체 A 내지 F 중 하나와의 교차-경합; d) 최대 70pM의 사람 CD30L에 대한 해리 상수 및 e) 항체 A 내지 F 중 하나와 실질적으로 동일하거나 더 높은 친화성(더 낮은 KD)으로 사람 CD30L에 대한 결합으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 한 가지의 특성을 가진다. 친화성(또는 KD)은, 예를 들면 본원의 실시예 4에서 기술되는 것과 같은 SPR 또는 FACS에 의해 기술분야의 숙련된 사람들에게 공지되어 있는 것과 같이 측정될 수 있다.
추가의 구체예에서, 항원 결합 단백질은 CD30L에 결합하고, CD30L에의 결합에 대해 항체 A, B, C, D, E 및 F의 하나 또는 그 이상의 Fab와 경합한다. 또는 다르게는 상기 항원 결합 단백질은 hCD30L에의 결합이 하나 또는 그 이상의 항체 A, B, C, D, E 및 F의 Fab의 결합에 의해 억제되는 항원 결합 단백질로서 특징지어진다. 추가의 특정 구체예에서, Fab는 A1, A2, A3, A4, A5 및 A6의 각각을 포함하여 항체 A의 Fab이다.
한 구체예에서, a) 표 3에 제시된 것과 같은 CDRH1과 4, 3, 2 또는 하나의 아미노산 치환, 삽입 또는 결실이 다른 CDRH1; b) 표 3에 제시된 것과 같은 CDRH2와 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 하나의 아미노산 치환, 삽입 및/또는 결실이 다른 CDRH2; c) 표 3에 제시된 것과 같은 CDRH3와 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 하나의 아미노산 치환, 삽입 및/또는 결실이 다른 CDRH3로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRH1, CDRH2 및 CDRH3를 포함하는 적어도 하나의 중쇄 가변 영역을 포함하고; d) 표 3에 제시된 것과 같은 CDRL1과 4, 3, 2 또는 하나의 아미노산 치환, 삽입 및/또는 결실이 다른 CDRL1; e) 표 3에 제시된 것과 같은 CDRL2와 2 또는 하나의 아미노산 치환, 삽입 또는 결실이 다른 CDRL2; f) 표 3에 제시된 것과 같은 CDRL3와 2 또는 하나의 아미노산 치환, 삽입 또는 결실이 다른 CDRL3로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRL1, CDRL2 및 CDRL3를 포함하는 적어도 하나의 경쇄 가변 영역을 포함하는, CD30L에 결합하는 분리된 항원 결합 단백질이 제공된다. 관련된 구체예에서는, SEQ ID NO:14, 15, 16, 17, 18 및 33으로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRH1; SEQ ID O:19, 20, 21, 22, 23, 24 및 34로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRH2; SEQ ID NO:25, 26, 27, 28, 29 및 35로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRH3; SEQ ID NO:1, 2, 3, 4, 5, 6 및 30으로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRL1; SEQ ID NO:7, 8, 9, 10 및 31로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRL2; 및 SEQ ID NO:11, 12, 13 및 32로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRL3가 제공된다.
다른 구체예는 SEQ ID NO:36, 28, 40, 42 또는 44의 아미노산 잔기 23 내지 36을 포함하는 CDR1, 아미노산 잔기 52 내지 58을 포함하는 CDR2 및 아미노산 잔기 91 내지 100을 포함하는 CDR3를 포함하는 적어도 하나의 경쇄 가변 영역; 또는 b) SEQ ID NO:46의 아미노산 잔기 25 내지 36을 포함하는 CDR1, 아미노산 잔기 52 내지 58을 포함하는 CDR2 및 아미노산 잔기 91 내지 100을 포함하는 CDR3를 포함하는 경쇄 가변 영역; 및 SEQ ID NO:48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70 또는 72의 아미노산 잔기 31 내지 35를 포함하는 CDR1, 아미노산 잔기 50 내지 65를 포함하는 CDR2 및 아미노산 잔기 98 내지 113을 포함하는 CDR3를 포함하는 적어도 하나의 중쇄 가변 영역을 포함하는, 사람 CD30L에 결합하는 분리된 항원 결합 단백질을 제공한다. 관련된 구체예에서, 적어도 하나의 중쇄 가변 영역과 적어도 하나의 경쇄 가변 영역을 포함하는 항원 결합 단백질이 제공된다. 또 다른 구체예에서, 적어도 2개의 중쇄 가변 영역과 적어도 2개의 경쇄 가변 영역을 포함하는 항원 결합 단백질이 제공된다.
또 다른 구체예에서, 중쇄 가변 영역과 경쇄 가변 영역을 포함하는, CD30L에 결합하는 분리된 항원 결합 단백질이 제공되는데, 이때 중쇄 가변 영역 서열은 표 2에 제시된 것과 같은 중쇄 가변 영역 서열과 31, 30, 29, 28, 27, 26, 25, 24, 23, 22, 21, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9 ,8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 하나의 아미노산 치환, 첨가 및/또는 결실이 다르고; 경쇄 가변 영역 서열은 표 1에 제시된 것과 같은 경쇄 가변 영역 서열과 30, 29, 28, 27, 26, 25, 24, 23, 22, 21, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9 ,8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 하나의 아미노산 치환, 첨가 및/또는 결실이 다르다.
또 다른 구체예는 SEQ ID NO:48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70 및 72에 대해 적어도 80%의 서열 동일성을 가지는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역과 SEQ ID NO:36, 38, 40, 42, 44 및 46에 대해 적어도 88%의 서열 동일성을 가지는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, CD30L에 결합하는 분리된 항원 결합 단백질을 제공한다.
한 구체예에서는, a) SEQ ID NO:48, 50, 52, 54, 56, 58, 60 및 62로 이루어진 군으로부터 선택된 중쇄 가변 영역과 SEQ ID NO:36의 경쇄 가변 영역; b) SEQ ID NO:64의 중쇄 가변 영역과 SEQ ID NO:38의 경쇄 가변 영역; c) SEQ ID NO:66의 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO:40의 경쇄 가변 영역; d) SEQ ID NO:68의 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO:42의 경쇄 가변 영역; e) SEQ ID NO:70의 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO:44의 경쇄 가변 영역; 및 f) SEQ ID NO:72의 중쇄 가변 영역 및 SEQ ID NO:46의 경쇄 가변 영역으로 이루어진 군으로부터 선택된, CD30L에 결합하는 분리된 항원 결합 단백질이 제공된다. 관련된 구체예에서, 분리된 항원 결합 단백질은 항체이다. 또 다른 관련 구체예에서, 항체는 단클론성 항체, 재조합 항체, 사람 항체, 인간화된 항체, 키메릭 항체, 다중특이성 항체 또는 그것들의 항체 단편이다. 추가의 구체예에서, 항체 단편은 Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')2 단편, Fv 단편, 이중체 또는 단일 사슬 항체 분자이다. 관련된 구체예에서, 항원 결합 단백질은 사람 항체이다. 또 다른 관련 구체예에서, 항원 결합 단백질은 단클론성 항체이다. 추가의 관련 구체예에서, 항원 결합 단백질은 IgG1-, IgG2-, IgG3- 또는 IgG4-유형의 것이다. 관련된 구체예에서, 항원 결합 단백질은 IgG1- 또는 IgG2-유형의 것이다.
또 다른 구체예는 상기에서 기술된 것과 같은 항원 결합 단백질을 코드화하는 분리된 핵산 분자를 제공한다. 관련된 구체예에서, 적어도 하나의 중쇄 가변 영역은 SEQ ID NO:49, 51, 53, 55, 57, 59, 61, 63, 65, 67, 69, 71 및 73으로 이루어진 군으로부터 선택된 분리된 핵산 분자에 의해 코드화되고, 적어도 하나의 경쇄 가변 영역은 SEQ ID NO:37, 39, 41, 43, 45 및 47로 이루어진 군으로부터 선택된 분리된 핵산 분자에 의해 코드화된다. 또 다른 관련 구체예에서, 핵산 분자는 제어 서열에 작동가능하게 연결된다. 추가의 관련 구체예에서는, 상기에서 기술된 핵산을 포함하는 벡터와 그런 벡터를 포함하는 숙주 세포가 제공된다. 또 다른 추가의 구체예에서는, 상기에서 기술된 것과 같은 핵산 분자의 단편 또는 그것의 상보물인 혼성화 프로브, PCR 프라이머 또는 서열화 프라이머로서 사용하기에 충분한 분리된 폴리뉴클레오티드가 제공된다.
또 다른 구체예는 항원 결합 단백질을 분비하는 숙주 세포로부터 항원 결합 단백질을 제조하는 단계를 포함하는, 상기에서 기술된 것과 같은 항원 결합 단백질의 제조 방법을 제공한다.
또 다른 구체예는 a) CD30/CD30L 상호작용을 억제하고; b) CD30L-유도된 IL-8 유도를 억제하며; c) 사람 CD30L에의 결합에 대해 항체 A 내지 F 중 하나와 교차-경합하고; d) 해리 상수가 ≤70pM이며 e) 항체 A 내지 F 중 하나와 실질적으로 동일한 Kd로 사람 CD30L에 결합하는 것으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 한 가지의 특성을 가지는, 상기에서 기술된 것과 같은 분리된 항원 결합 단백질을 제공한다.
또 다른 구체예에서는, 상기에서 기술된 것과 같은 적어도 하나의 항원 결합 단백질과 제약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 제약학적 조성물이 제공된다. 관련된 구체예는 추가로 표지화 그룹 또는 이펙터 그룹을 포함하는 그런 제약학적 조성물을 추가로 제공한다. 또 다른 관련 구체예에서, 표지화 그룹은 동위원소 표지, 자성 표지, 산화환원 활성 부분, 광학 염료, 비오티닐화된 기 및 이차 리포터에 의해 인지되는 예정된 폴리펩티드 에피토프로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 관련 구체예에서, 이펙터 기는 방사성 동위원소, 방사성 핵종, 독소, 치료 기 및 화학요법 기로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 관련 구체예에서, 항원 결합 단백질은 표지화 그룹에 결합된다.
또 다른 구체예는 환자에서 CD30L과 관련된 질환을 치료 또는 예방하는 방법을 제공하는데, 그 방법은 치료나 예방의 필요가 있는 환자에게 상기에서 기술된 것과 같은 적어도 하나의 분리된 항원 결합 단백질의 효과적인 양을 투여하는 것으로 이루어진다. 또 다른 관련 구체예에서, 분리된 항원-결합 단백질은 단독으로 또는 조합 치료법으로서 투여된다.
또 다른 구체예는 상기에서 기술된 것과 같은 적어도 하나의 항원 결합 단백질의 효과적인 양을 투여하는 것으로 이루어지는, 환자에서 CD30L 활성을 감소시키는 방법을 제공한다.
또 다른 구체예에서, 상기에서 기술된 것과 같은 적어도 하나의 항원 결합 단백질과 경합하는 항원 결합 단백질이 제공된다.
또 다른 구체예에서는, 전체적으로 또는 부분적으로 아퓨코실레이트화된(afucosylated) 상기에서 기술된 것과 같은 항원 결합 단백질이 제공된다.
도 1a는 Ramos 세포와 NK 이펙터를 도시한다. 하얀색 사각형: 리툭산(IgG1), 검은색 다이아몬드형: 항체 A1 IgG1f, 검은색 사각형: 항체 A1 IgG1, 하얀색 원: 항체 A1 IgG2.
도 1b는 JD38 세포와 NK 이펙터를 도시한다. 하얀색 사각형: 리툭산(IgG1), 검은색 다이아몬드형: 항체 A1 IgG1f, 검은색 사각형: 항체 A1 IgG1, 하얀색 원: 항체 A1 IgG2.
도 1c는 DS179 세포와 NK 이펙터를 도시한다. 하얀색 사각형: 리툭산(IgG1), 검은색 다이아몬드형: 항체 A1 IgG1f, 검은색 사각형: 항체 A1 IgG1, 하얀색 원: 항체 A1 IgG2.
도 1d는 EW36 세포와 NK 이펙터를 도시한다. 하얀색 사각형: 리툭산(IgG1), 검은색 다이아몬드형: 항체 A1 IgG1f, 검은색 사각형: 항체 A1 IgG1, 하얀색 원: 항체 A1 IgG2.
도 1b는 JD38 세포와 NK 이펙터를 도시한다. 하얀색 사각형: 리툭산(IgG1), 검은색 다이아몬드형: 항체 A1 IgG1f, 검은색 사각형: 항체 A1 IgG1, 하얀색 원: 항체 A1 IgG2.
도 1c는 DS179 세포와 NK 이펙터를 도시한다. 하얀색 사각형: 리툭산(IgG1), 검은색 다이아몬드형: 항체 A1 IgG1f, 검은색 사각형: 항체 A1 IgG1, 하얀색 원: 항체 A1 IgG2.
도 1d는 EW36 세포와 NK 이펙터를 도시한다. 하얀색 사각형: 리툭산(IgG1), 검은색 다이아몬드형: 항체 A1 IgG1f, 검은색 사각형: 항체 A1 IgG1, 하얀색 원: 항체 A1 IgG2.
본 발명은 CD30L과 CD30사이의 상호작용을 차단하는 항원 결합 단백질, 예를 들면 항-CD30L 항체, 항체 단편 및 항체 유도체, 예컨대 중화 항-CD30L 항체, 항체 단편 또는 항체 유도체를 포함하는, CD30L 항원 결합 단백질에 관련된 조성물, 키트 및 방법을 제공한다. 또한 CD30L에 결합하는 폴리펩티드의 전부 또는 부분을 코드화하는 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드, 그것의 유도체 및 단편, 예를 들면 항-CD30L 항체의 전부 또는 부분, 항체 단편, 또는 항체 유도체를 코드화하는 폴리뉴클레오티드, 그런 핵산을 포함하는 플라스미드 및 벡터, 및 그런 폴리뉴클레오티드 및/또는 벡터 및 플라스미드를 포함하는 세포 또는 셀라인이 제공된다. 또한 생체 내 또는 시험관 내의 방법들, 예를 들면 CD30L 항원 결합 단백질, 예컨대 항-CD30L 항체를 제조하거나, 확인하거나, 또는 분리하는 방법, 분자가 CD30L과 CD30 사이의 상호작용을 차단하는 지의 여부를 측정하는 방법, 분자가 CD30L을 길항하는 지의 여부를 측정하는 방법, 조성물, 예컨대 CD30L 항원 결합 단백질을 포함하는 제약학적 조성물의 제조 방법 및 CD30L 항원 결합 단백질을 대상에게 투여하기 위한 방법, 예를 들면 CD30L에 의해 중재된 질환을 치료하기 위한, 그리고 CD30L과 CD30 사이의 상호작용을 차단하기 위한 방법이 제공된다.
본원에서 다르게 규정되지 않는 한, 본 발명과 관련하여 사용된 과학적 및 기술적 용어들은 해당 기술분야에 통상적인 지식을 가진 사람들에 의해 보편적으로 이해되는 의미를 가져야 할 것이다. 나아가, 맥락에 의해 다르게 요구되지 않는 한, 단일 형태의 용어들은 복수의 것을 포함하고, 복수의 용어들은 단일한 것을 포함할 것이다. 일반적으로, 본원에 기술된 세포 및 조직 배양물, 분자 생물학, 면역학, 미생물학, 유전학 및 핵산 화학 및 혼성화와 관련하여 사용된 명명법, 및 기법들은 해당 기술분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용된다. 본 발명의 방법 및 기법은 일반적으로 다른 표시가 없는 한 해당 기술분야에 잘 공지되어 있고, 본 명세서를 통털어 인용되고 논의된 다양한 일반적이고 더 구체적인 참조에서 기술되어 있는 것과 같은 종래 방법에 따라 수행된다(예컨대 Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (2001) and Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Associates (1992), and Harlow and Lane Antibodies: A Laboratory Manual Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1990) 참조). 효소 반응과 정제 기법은 제조업체의 지시에 따라, 해당 기술분야에서 통상적으로 수립된 것과 같이 또는 본원에 기술되는 것과 같이 수행된다. 본원에 기술된 분석 화학, 합성 유기 화학 및 의학 및 약제학 화학과 관련하여 사용된 용어 및 그것들의 실험실 과정 및 기법들은 해당 기술분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것들이다. 화학적 합성, 화학적 분석, 제약학적 제제, 제형 및 전달, 및 환자의 치료에 표준 기법들이 사용될 수 있다.
본 출원에서 인용된 모든 문서 또는 문서의 부분들, 이를테면 그것에 한정되는 것은 아니지만 특허, 특허 출원, 기사, 책, 및 논문들은 예를 들면 본원에 기술된 정보와 관련하여 사용될 수 있을 그런 공보물에 기술된 방법론들을 기술하고 개시할 목적에 대해 전체적으로 참조로 본원에 포함된다.
용어 "CD30-리간드"(CD30L)는 문헌(Smith et al., Cell 73:1349-1360, 1993) 및 미국 특허 번호 5,480,981에 개시된 것과 같이 CD30에 결합할 수 있는 폴리펩티드 속을 말하며, 그것의 CD30-결합 뮤테인을 포함하고; 그런 폴리펩티드는 막-결합 단백질(세포질 도메인, 경막 영역 및 세포외재성 도메인을 포함한다)뿐 아니라 CD30-결합 특성을 보유한 절단된 단백질을 포함한다. 그런 절단된 단백질은, 예를 들면 세포외재성(수용체 결합) 도메인만을 포함하는 가용성 CD30L을 포함한다. 또한 CD30에 결합하는 능력을 보유하거나 CD30 폴리펩티드 또는 NF-κB의 활성화와 같은 생물학적 신호를 전달할 수 있는 전-길이 CD30의 부분과 특이적으로 결합하는 항체를 유도할 수 있는 전-길이 CD30L 폴리펩티드의 부분을 포함하여 CD30L 단편이 절단된 단백질에 포함된다.
용어 "CD30"은 TNF/NGF 수용체 슈퍼패밀리의 구성원인 수용체를 말하며, 그것의 클로닝에 대해서는 Durkop et al. (Cell 68:421, 1992)에 기술되어 있다. 구절 "가용성 CD30"(sCD30)은 CD30 단백질의 세포 외재성 도메인의 전부 또는 부분을 포함하고, CD30L과 특이적으로 결합할 수 있는 가용성 분자를 말한다. 가용성 CD30 폴리펩티드는 재조합 sCD30과 고도로 정제된 형태의 자연 발생적인 sCD30 단백질을 포함한다.
본원에서 사용되는 것과 같은 구절 "CD30의 단편"은 CD30L에 결합하는 능력을 보유하거나 CD30 폴리펩티드 또는 NF-κB의 활성화와 같은 생물학적 신호를 전달할 수 있는 전-길이 CD30의 부분과 특이적으로 결합하는 항체를 유도할 수 있는 전-길이 CD30L 폴리펩티드의 부분을 말한다.
본원에서 사용되는 것과 같은 구절 "CD30/CD30L 상호작용"은 CD30L에 대한 CD30의 특이한 결합을 나타내는 것으로, 그것은 CD30에 의한 신호 변환을 초래한다. 이것은 적어도 하나의 결합 파트너가 CD30 또는 CD30L 중 어느 하나인 경우를 포함하는 것으로, 이 용어는 CD30L에 대한 CD30 단편의 결합 상호작용, CD30L 단편에 대한 CD30의 결합 상호작용 또는 CD30L 단편에 대한 CD30 단편의 결합 상호작용을 포함할 수 있다. 또한 CD30/CD30L 상호작용은 CD30L에 특이적으로 결합할 수 있는 CD30의 유사체(예컨대 대립유전자 변이체 또는 뮤테인)를 포함할 수 있거나, 또는 CD30과 특이적으로 결합할 수 있는 CD30L의 유사체(예컨대 대립유전자 변이체 또는 뮤테인)를 포함할 수 있다. 더욱이, CD30/CD30L 상호작용은 내인성 CD30 또는 CD30L 단백질을 포함할 수 있거나 또는 재조합 단백질을 코드화하는 핵산으로 형질전환된 세포에 의해 발현된 재조합 CD30 또는 CD30L을 포함할 수 있다.
용어 "폴리뉴클레오티드"는 단일-가닥 및 이중-가닥 핵산을 둘 다 포함하고, 게놈의 DNA, RNA, mRNA, cDNA 또는 정상적으로 자연에서 발견되는 서열과 관련이 없는 합성 기원 또는 그것들의 일부의 조합을 포함한다. 명시된 서열을 포함하는 분리된 폴리뉴클레오티드는 명시된 서열 외에, 10개 또는 심지어 12개까지의 다른 단백질 또는 그것의 부분들에 대한 코딩 서열을 포함할 수 있고, 또는 인용된 핵산 서열의 코딩 서열의 발현을 제어하는 작동가능하게 연결된 조절 서열을 포함할 수 있으며, 및/또는 벡터 서열을 포함할 수 있다. 폴리뉴클레오티드를 포함하는 뉴클레오티드는 리보뉴클레오티드 또는 데옥시리보뉴클레오티드 또는 어느 한 유형의 뉴클레오티드의 변형된 형태일 수 있다. 변형은 브로모유리딘 및 이노신 유도체와 같은 염기 변형, 2',3'-다이데옥시리보스와 같은 리보스 변형 및 포스포로싸이오에이트, 포스포로다이싸이오에이트, 포스포로셀레노에이트, 포스포로다이셀레노에이트, 포스포로아닐로싸이오에이트, 포스포로아닐라데이트 및 포스포로아미데이트와 같은 뉴클레오티드내 연쇄 변형을 포함한다.
용어 "올리고뉴클레오티드"는 100 또는 그것보다 적은 수의 뉴클레오티드를 포함하는 폴리뉴클레오티드를 의미한다. 어떤 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 길이가 10 내지 60 염기이다. 다른 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 길이가 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20 내지 40 뉴클레오티드이다. 올리고뉴클레오티드는 예를 들어 돌연변이 유전자의 구성에 사용하기 위하여 단일 가닥 또는 이중 가닥일 수 있다. 올리고뉴클레오티드는 센스 또는 안티센스 올리고뉴클레오티드일 수 있다. 올리고뉴클레오티드는 검출 분석을 위해 검출가능한 표지, 예를 들면 방사성 표지, 형광 표지, 합텐 또는 항원성 표지를 포함할 수 있다. 올리고뉴클레오티드는 예를 들면 PCR 프라이머, 클로닝 프라이머 또는 혼성화 프로브로서 사용될 수 있다.
용어 "폴리펩티드" 또는 "단백질"은 천연 단백질의 아미노산 서열을 가지는 마크로분자, 즉 자연-발생적인 및 비-재조합 세포에 의해 생성된; 또는 유전자-공학처리된 또는 재조합 세포에 의해 생성된 단백질을 의미하고, 천연 단백질의 아미노산 서열을 가지는 분자 또는 천연 서열의 아미노산 잔기로부터 하나 또는 그 이상의 결실, 그것에 대한 삽입 및/또는 그것의 치환을 가지는 분자를 포함한다. 이 용어는 또한 하나 또는 그 이상의 아미노산이 해당하는 자연-발생 아미노산 및 중합체의 화학적 유사체인 아미노산 중합체를 포함한다. 용어 "폴리펩티드" 및 "단백질"은 CD30L 항원 결합 단백질(예컨대 항체) 및 그 항원 결합 단백질 서열의 아미노산 잔기로부터의 하나 또는 그 이상의 결실, 그것에 대한 첨가 및/또는 그것의 치환을 가지는 서열을 포함한다. 용어 "폴리펩티드 단편"은 전-길이 천연 단백질과 비교하여 아미노-말단 결실, 카복실-말단 결실 및/또는 내부 결실을 가지는 폴리펩티드를 나타낸다. 그런 단편은 또한 천연 단백질과 비교하여 변형된 아미노산을 함유할 수 있다. 특정 구체예에서, 단편은 약 5 내지 500개의 아미노산 길이이다. 예를 들면 단편은 적어도 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 50, 70, 100, 110, 150, 200, 250, 300, 350, 400 또는 450개의 아미노산 길이일 수 있다. 유용한 폴리펩티드 단편은 결합 도메인을 포함하여, 항체의 면역학적으로 기능적인 단편을 포함한다. CD30L 항원 결합 단백질의 경우에, 그런 항체, 유용한 단편은 그것들에 한정되는 것은 아니지만 하나 또는 그 이상의 CDR 영역, 중쇄 또는 경쇄의 가변 도메인, 항체 사슬의 부분, 세 개 미만의 CDR을 포함하는 가변 영역의 부분 등을 포함한다.
"아미노산"은 기술분야에서의 그것의 정상적인 의미를 포함한다. 20개의 자연 발생적인 아미노산과 그것의 유도체는 종래의 용법을 따른다(Immunology-A Synthesis, 2nd Edition, (E. S. Golub and D. R. Gren, eds.), Sinauer Associates: Sunderland, Mass. (1991) 참조). 20개의 종래의 아미노산의 입체 이성질체(예컨대 D-아미노산), 비천연 아미노산, 예컨대 [알파]-, [알파]-이중치환된 아미노산, N-알킬 아미노산 및 다른 비종래 아미노산들이 또한 폴리펩티드에 대한 적당한 성분일 수 있다. 비종래 아미노산의 실례로는 다음을 포함한다: 4-하이드록시프롤린, [감마]-카복시글루타메이트, [엡실론]-N,N,N-트라이메틸라이신, [엡실론]-N-아세틸라이신, O-포스포세린, N-아세틸세린, N-포밀메티오닌, 3-메틸히스티딘, 5-하이드록시라이신, [시그마]-N-메틸아르기닌 및 다른 유사한 아미노산 및 이미노산(예컨대 4-하이드록시프롤린). 본원에서 사용된 폴리펩티드에 대한 언급에서, 표준 용법 및 관례에 따라 좌측-손 방향은 아미노 말단 방향이고, 우측-손 방향은 카복실-말단 방향이다.
용어 "분리된 단백질"은 예를 들면 그것의 치료적, 진단적, 예방적, 연구 또는 다른 용도를 간섭할 수 있을 단백질 또는 폴리펩티드 또는 다른 오염물로부터 정제된 항원 결합 단백질(그것의 한 예는 항체일 수 있다)과 같은 단백질을 말한다. 본원에서 사용되는 것과 같이, "실질적으로 순수한"은 기술된 분자 종이 존재하는 우세한 종인 것, 즉 분자를 기초로 동일한 혼합물에 있는 어떠한 다른 개별적인 종보다 풍부한 것을 의미한다. 특정 구체예에서, 실질적으로 순수한 분자는 그 중의 대상 종이 존재하는 모든 마크로분자 종의 적어도 50%(분자를 기초로)를 포함하는 조성물이다. 다른 구체예에서, 실질적으로 순수한 조성물은 조성물에 존재하는 모든 마크로분자 종의 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99%를 포함할 것이다. 특정 구체예에서, 본질적으로 균질한 물질은 오염시키는 종이 종래의 검출 방법에 의해 조성물 중에서 검출될 수 없고 그로써 조성물이 단일한 검출가능한 마크로분자 종으로 구성되는 정도로까지 정제되었다.
폴리펩티드의 "변이체"(예컨대 항체와 같은 항원 결합 단백질)는 하나 또는 그 이상의 아미노산 잔기가 다른 폴리펩티드 서열에 관련하여 그 아미노산 서열 안으로 삽입되거나, 그것으로부터 결실되거나 및/또는 치환되는 경우의 아미노산 서열을 포함한다. 변이체는 융합 단백질을 포함한다. 폴리펩티드의 "유도체"는 삽입, 결실 또는 치환 변이체와는 구별되는 어떤 방식으로, 예컨대 다른 화학적 부분과의 포합을 통해 화학적으로 변형된 폴리펩티드이다.
본 명세서를 통털어 폴리펩티드, 핵산, 숙주 세포 등과 같은 생물학적 물질과 관련하여 사용되는 용어 "자연 발생적인" 또는 "천연"은 자연에서 발견되는 물질을 말한다. 이런 맥락에서 "재조합 단백질"은 재조합 기법을 사용하여, 즉 본원에 기술된 것과 같은 재조합 핵산을 통해 만들어진 단백질이다. 재조합 단백질의 제조 방법 및 기법들은 해당 기술분야에 잘 알려져 있다.
용어 "항체"는 표적 항원에 대한 특이한 결합에 대해 무상 항체와 경합할 수 있는 어떠한 아이소타입의 무상 면역글로불린 또는 그것의 단편을 말하고, 예를 들면 키메릭, 인간화된, 전체 사람 및 이중특이성 항체를 포함한다. 항체는 그 자체로서 항원 결합 단백질의 종이다. 다르게 표시되지 않는 한, 용어 "항체"는 두 개의 전-길이 중쇄 및 두 개의 전-길이 경쇄를 포함하는 항체 외에, 그것의 유도체, 변이체, 단편 및 뮤테인을 포함하며, 그것들의 실례는 아래에서 기술된다. 무상 항체는 일반적으로 적어도 두 개의 전-길이 중쇄 및 두 개의 전-길이 경쇄를 포함하겠지만, 어떤 경우에는 하나의 중쇄만을 포함할 수 있는 낙타과에서 자연 발생적인 항체와 같이 더 적은 수의 사슬을 포함하기도 한다. 항체는 단독으로 단일 공급원으로부터 유도될 수 있거나, 또는 "키메릭", 즉 항체의 상이한 부분들이 아래에서 추가로 기술되는 것과 같이 두 개의 상이한 항체로부터 유도될 수 있다. 항원 결합 단백질, 항체 또는 결합 단편은 하이브리도마에서, 재조합 DNA 기법에 의해, 또는 무상 항체의 효소적 또는 화학적 절단에 의해 생성될 수 있다.
항체 또는 면역글로불린 사슬(중쇄 또는 경쇄)의 "기능적 단편"(또는 간단히 "단편")이란 용어는 본원에서 사용되는 것과 같이, 전-길이 사슬에 존재하는 아미노산의 적어도 일부가 부족하지만 항원에 특이적으로 결합할 수 있는 항체의 부분(그 부분이 얻어지고 합성되는 방법과는 무관하다)을 포함하는 항원 결합 단백질이다. 그런 단편은 그것이 표적 항원에 특이적으로 결합하고, 주어진 에피토프에 대한 특이적 결합에 대해 무상 항체를 포함하여 다른 항원 결합 단백질과 경합할 수 있다는 점에서 생물학적으로 활성이다. 한 측면으로, 그런 단편은 전-길이 경쇄 또는 중쇄에 존재하는 적어도 하나의 CDR을 보유할 것이고, 어떤 구체예에서는 단일한 중쇄 및/또는 경쇄 또는 그것의 부분을 포함할 것이다. 이들 생물학적으로 활성인 단편은 재조합 DNA 기법에 의해 생성될 수 있거나, 또는 무상 항체를 포함하여 항원 결합 단백질의 효소적 또는 화학적 절단에 의해 생성될 수 있다. 단편으로는, 그것들에 한정되는 것은 아니지만 면역학적으로 기능적인 단편, 예컨대 Fab, Fab', F(ab')2, Fv, 도메인 항체 및 단일 사슬 항체를 포함하고, 어떠한 포유류 공급원, 이를테면 그것들에 한정되는 것은 아니지만 사람, 마우스, 쥐, 낙타 또는 토끼로부터 유도될 수 있다. 또한 본원에 기술된 항원 결합 단백질의 기능적 부분, 예컨대 하나 또는 그 이상의 CDR은 두 번째 단백질 또는 작은 분자에 공유 결합될 수 있어서, 이중기능성 치료적 특성을 가지거나 연장된 혈청 반감기를 가지는, 신체의 특별한 표적에 대해 지시되는 치료적 제제를 생성할 수 있는 것으로 여겨진다.
용어 "경합하다"는 항원 결합 단백질(예컨대 중화 항원 결합 단백질 또는 중화 항체)의 맥락에서 사용될 때, 시험되는 항원 결합 단백질(예컨대 항체 또는 그것의 면역학적으로 기능적인 단편)이 공통 항원(예컨대 CD30L 단백질 또는 그것의 단편)에 대한 참조 항원 결합 단백질(예컨대 리간드 또는 참조 항체)의 특이한 결합을 방지하거나 억제하는 분석에 의해 측정되는 바와 같이, 항원 결합 단백질들 사이의 경합을 의미한다. 경합 결합 분석의 많은 유형이 사용될 수 있는데, 예를 들면 고체상 직접 또는 간접 방사성 면역 분석(RIA), 고체상 직접 또는 간접 효소 면역분석(EIA), 샌드위치 경합 분석(Stahli et al., 1983, Methods in Enzymology 92:242-253); 고체상 직접 비오틴-아비딘 EIA(Kirkland et al., 1986, J. Immunol. 137:3614-3619), 고체상 직접 표지된 분석, 고체상 직접 표지된 샌드위치 분석(Harlow and Lane, 1988, Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press); I-125 표지를 사용하는 고체상 직접 표지 RIA(Morel et al., 1988, Molec. Immunol. 25:7-15); 고체상 직접 비오틴-아비딘 EIA(Cheung, et al., 1990, Virology 176:546-552); 및 직접 표지된 RIA(Moldenhauer et al., 1990, Scand. J. Immunol. 32:77-82)가 있다. 전형적으로, 그런 분석은 고체 표면, 또는 미표지된 시험 항원 결합 단백질과 표지된 참조 항원 결합 단백질 중 어느 하나를 포함하고 있는 세포에 결합된 정제된 항원의 사용을 포함한다. 숙련된 사람들에 의해 상이한 접근법이 사용될 수 있다. 대체 선택은 임의로 가요성 매트릭스를 경유하여 플레이트에 결합된 참조 항원 결합 단백질을 사용하는 것을 포함한다. 추가의 변용은 첨가 순서를 기초로, 즉 항원이 먼저 플레이트 결합된 참조 항원 결합 단백질과 혼합되거나 시험 항원 결합 단백질과 혼합된다면 첨가 순서를 기초로 한 것일 수 있다. 모든 시나리오에서 항원 결합 단백질에 의한 항원의 포화는 잘못된 비-경합 결과를 피하기 위해 필요하다.
경합성 억제는 시험 항원 결합 단백질의 존재 하에 고체 표면 또는 세포에 결합된 표지의 양을 측정함으로써 측정된다. 경합 분석에 의해 확인된 항원 결합 단백질(경합하는 항원 결합 단백질)은 참조 항원 결합 단백질과 동일한 에피토프에 결합하는 항원 결합 단백질 및 입체 장애의 발생에 대해 참조 항원 결합 단백질에 의해 결합된 에피토프에 충분히 가까이 있는 인접한 에피토프에 결합하는 항원 결합 단백질을 포함한다. 통상적으로, 경합하는 항원 결합 단백질이 과잉으로 존재할 때, 그것은 공통 항원에 대한 참조 항원 결합 단백질의 특이적 결합을 적어도 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70% 또는 75% 억제할 것이다. 어떤 경우에 결합은 적어도 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상 억제된다.
경합 실험은 상이한 민감성을 가질 수 있는 상이한 유형의 분자를 사용하여 이루어질 수 있다. 만약 항원 결합 단백질이 항체라면, 분자는 2가일 것이다. 만약 항원 결합 단백질이 Fab라면, 그것은 일가 및 실질적으로 전-길이 항체보다 더 작은 분자여서 더 적은 입체 장애를 유발할 것이다. 경합 실험에서, 이것은 특정 항원 결합 단백질의 경우, hCD30L에 대한 결합이 본원에 기술된 것과 같이 항체 항원 결합 단백질, 예컨대 항체 A, B, C, D, E 및 F 중 어느 하나의 Fab의 결합에 의해 억제된다.
용어 "에피토프" 또는 "항원 결정기"는 항원 결합 단백질이 결합하는 항원 상의 한 부위를 말한다. 에피토프는 연속적인 아미노산으로부터 또는 단백질의 삼차원 접힘에 의해 나란히 놓여 있는 비연속적인 아미노산으로부터 모두 형성될 수 있다. 연속적인 아미노산으로부터 형성된 에피토프는 전형적으로 변성 용매에 노출될 때에도 보유되는 한편, 삼차원 접힘에 의해 형성된 에피토프는 변성 용매로 처리될 때 전형적으로 상실된다. 에피토프 결정기는 아미노산, 당 측사슬, 포스포릴 또는 설포닐 기와 같은 분자들의 화학적으로 활성인 부류를 포함할 수 있고, 특이한 삼차원 구조적 특성 및/또는 특이한 전하 특성을 가질 수 있다. 에피토프는 전형적으로 적어도 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35개의 아미노산을 독특한 공간 형태로 포함한다. 에피토프는 해당 기술분야에 공지되어 있는 방법을 사용하여 측정될 수 있다.
항원 결합 단백질의 결합은 또한 항원 결합 단백질과 상호작용하는 항원의 영역 또는 영역들에 의해 설명될 수 있다. 그런 상호작용의 영역(들)은 해당 기술분야에 공지되어 있는 다양한 방법에 의해, 예를 들면 다양한 항원 분자를 사용하는 결합 분석을 수행함으로써 또는 본원에서 예시하는 것과 같이(실시예 6 참조) HX-MS에 의해 측정될 수 있고, 그로써 항원 결합 단백질과 항원의 상호작용의 영역(들)이 측정된다.
HX-MS 기술은 단백질의 수소 교환(HX)과 쉽게 이어질 수 있는 질량 분석(MS)을 활용한다. 수소를 함유하고 있는 수성 용매를 중수소를 함유하고 있는 수성 용매로 교체함으로써, 단백질의 주어진 자리에서 중수소 원자의 통합이 1Da의 질량의 증가를 유발한다. 이 질량의 증가는 교환 반응의 퀀칭된 샘플에서 질량 분석에 의해 시간의 함수로서 모니터될 수 있다. 중수소 표지화 정보는 퀀칭 조건 하에서 펩신 소화 및 그에 뒤따르는 그 결과의 펩티드의 질량 증가에 의해 단백질의 영역에 한층 더 국한될 수 있다. HX-MS는 항체-항원 상호작용을 포함하는 단백질-단백질 복합체 형성 시에 감소된 수소 교환의 영역들을 확인함으로써 분자의 상호작용에 포함된 부위들에 대해 프로브하기 위해 사용될 수 있다. 통상적으로, 결합 계면은 용매의 입체적인 축출로 인한 수소 교환의 현저한 감소에 의해 드러날 것이다. 단백질-단백질 복합체 형성은 시간의 함수로서 각각의 결합 파트너의 존재 및 부재 시의 어느 하나의 단백질 구성원에 통합된 중수소의 총 량을 측정함으로써 간단하게 HX-MS에 의해 검출될 수 있다. HX-MS 기법은 천연 성분들, 즉 단백질 및 항체 또는 Fab 단편을 사용하고, 용액 중에서 수행된다. 그로써 HX-MS는 생체 내 조건을 모방하는 가능성을 제공한다(HX-MS 기술에 대한 참조, 예컨대 Wales and Engen, Mass Spectrom. Rev. 25, 158 (2006)).
본원에 기술된 것과 같은 특정 항원 결합 단백질은 CD30L과 AA201 내지 234에 의해 규정된 사람 CD30L의 C-말단 영역을 통해 상호작용하거나 결합한다. 항원 결합 단백질은 AA 201 내지 234에 의해 규정된 사람 CD30L의 C-말단 영역 또는 AA 205 내지 230 또는 AA 211 내지 226과 같은 더 작은 영역에 결합한다. 상기에서 기술된 것과 같이 에피토프는 비-연속적일 수 있고 따라서 상호작용의 영역일 수 있다. 한 구체예에서, 본 발명에 따르는 항원 결합 단백질은 CD30L의 적어도 두 개의 영역에 결합한다. 본 발명에 따르는 그런 추가의 항원 결합 단백질은 상기에서 규정된 것과 같이 C-말단 영역 및 세포외재성 도메인의 N-말단 부분에 위치한 사람 CD30L의 추가의 영역, 예컨대 전 길이 hCD30L의 AA70 내지 100에 의해 규정된 영역과 상호작용할 수 있다. 그런 항원 결합 단백질은 AA201 내지 234, AA 205 내지 230 또는 AA 211 내지 226에 의해 규정된 C-말단 영역 외에 AA 75 내지 95 또는 그것보다 짧은 영역, 예컨대 AA 80 내지 90 또는 AA 82 내지 88에 결합할 수 있다.
CD30L 항원 결합 단백질
본원에서 사용된 것과 같이 "항원 결합 단백질"은 명시된 표적 항원에 특이적으로 결합하는 단백질을 의미하고; 본원에서 제공되는 것과 같은 항원은 CD30L 특히 사람 CD30L이다. 항원 결합 단백질은, 예를 들면 CD30L과 CD30의 상호작용을 차단하거나 억제하는 것들을 포함한다. 그런 "차단하는" 항원 결합 단백질은 CD30L, 또는 그것의 단편, 변이체 또는 유도체를 향해 개발되고, CD30L 및 CD30의 상호작용을 간섭하는 능력에 대해 종래의 분석법으로 선별될 수 있다. CD30L과 CD30의 상호작용을 억제하는 능력에 대해 항원 결합 단백질을 시험하는 적당한 분석의 실례는 본원에 기술된다. 항원 결합 단백질은 또한 CD30L을 억제하거나 CD30L을 활성화하는 것들을 포함한다. 그런 억제 또는 중화는 항원 결합 단백질의 부재시 반응에 비교하여 항원 결합 단백질의 존재시의 생물학적 반응을 파괴하고, 해당 기술분야에 공지되어 있고 본원에 기술된 분석들을 사용하여 측정될 수 있다. 본원에 제공된 항원 결합 단백질은 예를 들면 CD30+ 세포로부터 IL-8 생성을 유도한다. 본원에 개시된 것과 같은 항원 결합 단백질은 또한 다른 TNF 슈퍼패밀리 구성원들, 특히 4-1BBL, OX-40L, TNFα, TNFβ, RANKL, Trail, CD40L 또는 CD27L에 결합하지 않는다.
상이한 CD30L 항원 결합 단백질은 CD30L의 상이한 도메인 또는 에피토프에 결합하거나 상이한 작용 메커니즘에 의해 작용할 수 있다. CD30L 항원 결합 단백질은 본원에 기술된 것과 같이 사용되기 위하여 CD30L 유도된 활성을 완전하게 억제할 필요는 없고; 오히려 CD30L의 특별한 활성을 감소시키는 항원 결합 단백질이 사용하기에 적당할 것으로 여겨진다. 항원 결합 단백질은 또한 본원에 기술된 참조 항원 결합 단백질들 중 어느 것과도 같이 사람 CD30L과 결합하기 위해 교차-경합하고; 사람 CD30L의 동일한 에피토프에 결합하며; 사람 CD30L에 실질적으로 동일한 Kd로 결합하고; CD30L에 실질적으로 동일한 제거 속도(off rate)로 결합하는 것들을 포함한다. 그런 특징들을 측정하는 다양한 방법이 해당 기술분야에 공지되어 있고 본원에서 기술된다.
또한 본원에는 CD30L+ 세포를 고갈시키는 CD30L 항원 결합 단백질이 제공된다. 그런 고갈시키는 CD30L 항원 결합 단백질과 함께, 그것의 항원 표적을 포함하는 세포에 대한 항원 결합 단백질의 결합은 항원 또는 세포 기능의 억제를 유발하거나 세포의 사망을 유발한다. 한 구체예에서, 본 발명의 고갈시키는 항체는 CD30L에 결합하고 CD30에 대한 CD30L의 결합을 차단하거나 차단하지 않을 수 있다. 그로써 고갈시키는 항원 결합 단백질은 특이적으로 차단 및 비-차단 항원 결합 단백질을 포함한다. 한 측면으로, CD30L+ 세포를 고갈시키는 CD30L 항원 결합 단백질은 해당 기술분야에 공지되어 있는 아폽토시스 분석에 의해 측정되는 바와 같이, 아폽토시스 또는 계획된 세포 사망을 유도할 수 있다. 그런 CD30L 항원 결합 단백질은 1) CD30L+ 세포와 상호작용하여 면역 반응을 유도하는 세포를 제거함으로써 및/또는 2) CD30L이 특정 면역 반응에 참여하는 세포 유형의 세포 표면 마커이지만 그렇게 하기 위해 반드시 CD30+ 세포와 상호작용할 필요가 없는 세포를 제거함으로써 면역 조절 효과를 나타낼 수 있다. 이 경우, CD30L은 특정 질병과 관련된 세포 유형의 마커일 것이고, CD30/CD30L 상호작용은 질병 자체의 발병에는 포함되지 않을 수 있다. 다른 구체예는 포합된 독소 또는 세포독성제를 포함하는 고갈시키는 항원 결합 단백질을 포함하며, 이때 독소 또는 세포독성제는 항원 결합 단백질 포합체에 결합하는 세포의 고갈을 유도한다.
항원 결합 단백질은 항원에 결합하는 부분, 및 임의로 항원 결합 부분이 항원에 결합하는 항원의 결합을 촉진하는 형태를 채택하는 것을 허용하는 스캐폴드 또는 프레임워크 부분을 포함할 수 있다. 항원 결합 단백질의 실례는 항체, 항체 단편(예컨대 항체의 항원 결합 부분), 항체 유도체 및 항체 유사체를 포함한다. 항원 결합 단백질은 이식된 CDR 또는 CDR 유도체를 가지는 대체 단백질 스캐폴드 또는 인공 스캐폴드를 포함할 수 있다. 그런 스캐폴드의 예를 들면, 그것들에 한정되는 것은 아니지만, 예를 들어 항원 결합 단백질의 삼차원 구조를 안정화시키 위해 도입된 돌연변이를 포함하는 항체-유도된 스캐폴드뿐 아니라 예를 들어 생체 내 적합성 중합체를 포함하는 전체 합성 스캐폴드를 포함한다(Korndorfer et al., Proteins: Structure, Function and Bioinformatics, (2003) Volume 53, Issue 1:121-129; Roque et al., Biotechnol. Prog., 2004, 20:639-654). 또한 펩티드 항체 모방물("PAM"), 파이브로넥틴 성분을 활용하여 모방하는 항체를 기초로 한 스캐폴드가 또한 스캐폴드로서 사용될 수 있다.
본원에 기술된 특정 항원 결합 단백질은 항체이거나 항체로부터 유도된다. 그런 항원 결합 단백질은, 그것들에 한정된 것은 아니지만 단클론성 항체, 이중특이성 항체, 미니바디, 도메인 항체, 합성 항체, 항체 모방물, 키메릭 항체, 인간화된 항체, 사람 항체, 항체 융합물, 항체 포합체, 단일 사슬 항체 및 그것들의 단편을 각각 포함한다. 어떤 경우에 항원 결합 단백질은 항체의 면역학적 단편(예컨대 Fab, Fab', F(ab')2 또는 scFv)이다. 다양한 구조는 본원에서 추가로 설명되고 규정된다.
제공되는 특정 항원 결합 단백질은 본원에 기술되는 것과 같이 하나 또는 그 이상의 CDR(예컨대 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 그 이상의 CDR)을 포함할 수 있다. 어떤 경우에, 항원 결합 단백질은 (a) 폴리펩티드 구조 및 (b) 폴리펩티드 구조 안에 삽입되거나 및/또는 연결되는 하나 또는 그 이상의 CDR을 포함한다. 폴리펩티드 구조는 다양하고 상이한 형태를 취할 수 있다. 예를 들어 폴리펩티드 구조는 자연 발생적인 항체의 프레임워크, 또는 그것의 단편이거나 그것들을 포함할 수 있고, 또는 본질적으로 완전히 합성된 것일 수 있다. 다양한 폴리펩티드 구조의 실례는 추가로 아래에 기술된다.
본원에 제공되는 것과 같은 항원 결합 단백질중 어떤 것들은 사람 CD30L에 특이하게 결합한다. 본원에서 사용되는 것과 같은 "특이적으로 결합한다"는 평형 해리 상수(KD)가 <10-8 내지 <10-10M, 또는 다르게는 <10-9 내지 <10-10M, 보다 구체적으로 <10-11M 내지 <10-12M인 것을 의미한다. 한 구체예에서, 항원 결합 단백질은 10-8, 또는 예컨대 5.0×10-9 또는 예컨대 10-9 또는 심지어 5.0×10-10인 평형 해리 상수(KD)로 표시되는 고친화성으로 결합한다. 평형 해리 상수는 해당 기술분야에 공지되어 있는 것과 같이 측정될 수 있다. 그런 구체예에서, KD는 전형적으로 저밀도로 종을 고정시키고(이 종은 다가일 수 있다) 다가 종의 적정 시리즈를 주입한(결합 단계) 후, 복합체가 떨어져 나가는 해리 단계를 허용함으로써 측정된다. 다가 복합체의 결합과 해리에 해당하는 속도 상수는 각각 결합 속도 상수 k a 및 해리 속도 상수 k d 로 언급된다. 그 결과의 데이터는 다음 단계로 3개의 매개변수를 적용하는 1:1 결합 모델에 적용된다: 결합 속도 상수 k a , 해리 속도 상수 k d 및 표면 밀도와 화학양론에 관련된 Rmax. k d /k a 의 비율은 평형 해리 상수 KD와 동일하다.
KD는 또한 본원의 실시예 4에서 기술되는 것과 같이 FACS 분석을 사용하여 측정될 수 있는데, 이때 항체는 Ramos 세포 상에 발현되는 CD30L에 결합된다.
한 구체예는 본원에 기술된 것과 같이 분리된 항원 결합 단백질에 관련되는데, 이때 상기 항원 결합 단백질은 적어도 75pM, 예컨대 50pM, 예컨대 40pM의 사람 CD30L에 대한 친화성(KD)을 가진다. 추가의 구체예에서, 항원 결합 단백질의 사람 CD30L에 대한 해리 상수(KD)는 최대 35pM, 예컨대 최대 25pM, 예컨대 20pM, 예컨대 최대 15pM이다. 그런 구체예에서 친화성(또는 KD)은 본원의 실시예 4에 기술된 것과 같이 FACS에 의해 측정될 수 있다.
또 다른 측면은 시험관 내 또는 생체 내에서(예컨대 사람 대상에게 투여될 때) 적어도 하루의 반감기를 가지는 항원 결합 단백질을 제공한다. 한 구체예에서, 항원 결합 단백질은 적어도 3일의 반감기를 가진다. 다른 구체예에서, 항체 또는 그것의 부분은 4일 또는 그것보다 긴 반감기를 가진다. 또 다른 구체예에서, 항체 또는 그것의 부분은 8일 또는 그것보다 긴 반감기를 가진다. 또 다른 구체예에서, 항체 또는 그것의 항원 결합 부분은 유도체화되지 않거나 변형되지 않은 항체에 비교하여 더 긴 반감기를 가지도록 유도체화되거나 변형된다. 또 다른 구체예에서, 항원 결합 단백질은 예컨대 WIPO 공보 번호 WO 00/09560에 기술되어 있는 것과 같이, 혈청 반감기를 증가시키기 위하여 점 돌연변이를 포함한다.
항원 결합 단백질이 치료적 용도로 사용되는 구체예에서, 항원 결합 단백질은 CD30L의 하나 또는 그 이상의 생물학적 활성을, CD30+ 세포로부터의 IL-8 생성의 유도와 같이 감소, 억제, 간섭하거나 조절할 수 있다.
제공되는 항원 결합 단백질의 일부는 전형적으로 자연 발생적인 항체와 관련된 구조를 가진다. 이들 항체의 구조 단위는 전형적으로 하나 또는 그 이상의 4량체를 포함하고, 각각의 4량체는 폴리펩티드 사슬의 2개의 동일한 2행 사슬로 구성되지만, 어떤 포유류 종들은 또한 단지 하나의 중쇄만을 가지는 항체를 생성한다. 전형적인 항체에서, 각각의 쌍 또는 2행 사슬은 하나의 전-길이 "경쇄"(어떤 구체예에서 약 25kDa) 및 하나의 전-길이 "중쇄"(어떤 구체예에서 약 50 내지 70kDa)를 포함한다. 각각의 개별적인 면역글로불린 사슬은 여러 개의 "면역글로불린 도메인"으로 구성되고, 각각은 대략 90 내지 110개의 아미노산으로 구성되며 특징적인 접힘 패턴을 나타낸다. 이들 도메인은 항체 폴리펩티드를 구성하는 기본적인 단위들이다. 각 사슬의 아미노-말단 부분은 전형적으로 항원 인지에 기여하는 가변 영역을 포함한다. 카복시-말단 부분은 사슬의 다른 쪽 단부보다 진화적으로 더 보존된 부분이고 따라서 "불변 영역" 또는 "C 영역"으로서 언급된다. 사람 경쇄는 일반적으로 카파 및 람다 경쇄로 분류되고, 이것들은 각각 하나의 가변 영역과 하나의 불변 도메인을 가지고 있다. 중쇄는 전형적으로 뮤, 델타, 감마, 알파 또는 엡실론 사슬로서 분류되며, 이것들은 각각 항체의 아이소타입을 IgM, IgD, IgG, IgA 및 IgE로서 규정한다. IgG는 여러 개의 하위유형, 이를테면 그것들에 한정되는 것은 아니지만 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4를 가지고 있다. IgM 하위유형은 IgM과 IgM2를 포함한다. IgA 하위유형은 IgA1과 IgA2를 포함한다. 사람에서 IgA와 IgD 아이소타입은 4개의 중쇄 및 4개의 경쇄를 함유하고; IgG 및 IgE 아이소타입은 두 개의 중쇄 및 두 개의 경쇄를 함유하며; IgM 아이소타입은 5개의 중쇄 및 5개의 경쇄를 함유한다. 중쇄 불변 영역(CH)은 전형적으로 이펙터 기능에 기여할 수 있는 하나 또는 그 이상의 도메인을 포함한다. 중쇄 불변 영역 도메인의 수는 아이소타입에 따라 다를 것이다. 예를 들어 IgG 중쇄의 경우, 각각은 CH1, CH2 및 CH3로 알려져 있는 세 개의 CH 영역 도메인을 함유한다. 제공되는 항원 결합 단백질은 이들 아이소타입 및 하위유형 중 어느 것이든지 가질 수 있는데, 예를 들면 CD30L 항원 결합 단백질은 IgG1, IgG2 또는 IgG4 하위유형의 것이다. 만약 IgG4가 바람직하다면, 그것은 또한 문헌에 기술되어 있는 것과 같이(Bloom et al., 1997, Protein Science 6:407) 힌지 영역에 점 돌연변이(CPSCP->CPPCP)가 도입되어 IgG4 항체에서 이종성을 유도할 수 있는 H-사슬간 이황화 결합으로의 경향성이 경감되는 것이 바람직할 것이다. 한 유형의 것인 본원에 제공된 항체는 하위부류 스위칭 방법을 사용하여 상이한 유형으로 교환될 수 있다(예컨대 Lantto et al., 2002, Methods Mol. Biol. 178:303-316 참조).
전-길이 경쇄 및 중쇄에서, 가변 및 불변 영역은 약 12 또는 그 이상의 아미노산의 "J" 영역에 의해 연결되고, 이때 중쇄는 또한 약 10 또는 그 이상의 아미노산의 "D" 영역을 포함한다(Fundamental Immunology, 2nd ed., Ch. 7 (Paul, W., ed.) 1989, New York: Raven Press). 각 경쇄/중쇄 쌍의 가변 영역은 전형적으로 항원 결합 부위를 형성한다.
가변 영역
본원에 제공된 다양한 중쇄 및 경쇄 가변 영역(또는 도메인)은 아래의 표 1 및 표 2에 제시된다. 이들 각각의 가변 영역은 예를 들면 상기에서 기술된 중쇄 및 경쇄 불변 영역에 부착될 수 있다. 나아가, 그렇게 생성된 중쇄 및 경쇄 서열은 각각 완전한 항원 결합 단백질 구조를 형성하기 위해 조합될 수 있다.
상보성 결정 영역(CDR)은 진한 이탤릭체로 표시되고, 프레임워크 영역(FR)은 보통의 활자로 표시된다. 요소들의 순서는 다음과 같다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 및 FR4.
상보성 결정 영역(CDR)은 진한 이탤릭체로 표시되고, 프레임워크 영역(FR)은 보통의 활자로 표시된다. 요소들의 순서는 다음과 같다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 및 FR4.
표 1 및 표 2에 제시된 것과 같은 VH1, VH2, VH3, VH4, VH5, VH6, VH7, VH8, VH9, VH10, VH11, VH12 및 VH13으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 중쇄 가변 영역(VH) 및/또는 VL1, VL2, VL3, VL4, VL5, VL6로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 경쇄 가변 영역(VL)을 함유하는 항원이 제공된다.
표 2에 열거된 중쇄 가변 영역은 각각 표 1에 제시된 경쇄 가변 영역 중 어느 것과 조합되어 항원 결합 단백질을 형성할 수 있다. 어떤 경우에, 항원 결합 단백질은 표 1 및 표 2에 열거된 것들로부터 적어도 하나의 중쇄 가변 영역 및/또는 하나의 경쇄 가변 영역을 포함한다. 어떤 경우에, 항원 결합 단백질은 표 1 및 표 2에 열거된 것들로부터 적어도 두 개의 중쇄 가변 영역 및/또는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 중쇄 가변 영역의 다양한 조합이 경쇄 가변 영역의 다양한 조합의 어느 것과도 조합될 수 있다.
다른 경우에, 항원 결합 단백질은 두 개의 동일한 경쇄 가변 영역 및/또는 두 개의 동일한 중쇄 가변 영역을 함유한다. 실례로서, 항원 결합 단백질은 두 개의 경쇄 가변 영역과 두 개의 중쇄 가변 영역을 표 1과 표 2에 열거된 것과 같이 경쇄 가변 영역의 쌍과 중쇄 가변 영역의 쌍의 조합으로 포함하는 항체 또는 면역학적으로 기능하는 단편일 수 있다. 두 개의 동일한 중쇄 및 경쇄 가변 영역을 포함하는 그런 항원 결합 단백질의 실례로는 다음을 포함한다: 항체 A VH2/VL1; 항체 A1 VH1/VL1; 항체 A2 VH3/VL1; 항체 A3 VH4/VL1; 항체 A4 VH5/VL1; 항체 A5 VH6/VL1; 항체 A6 VH7/VL1; 항체 A7 VH8/VL1; 항체 B VH9/VL2; 항체 C VH10/VL3; 항체 D VH11/VL4; 항체 E VH12/VL5 및 항체 F VH13/VL6.
제공된 어떤 항원 결합 단백질은 표 1 및 표 2로부터 선택된 중쇄 가변 영역 및/또는 경쇄 가변 영역의 서열과 단지 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30, 31 또는 그 이상의 아미노산 잔기가 상이한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 경쇄 가변 영역을 포함하는데, 이때 각각의 그런 서열의 차이는 독립적으로 한 아미노산의 결실, 삽입 또는 치환이다. 어떤 항원 결합 단백질에서, 경쇄 및 중쇄 가변 영역은 표 1 및 표 2에 제시된 아미노산 서열에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85% 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%의 서열 동일성을 가지는 아미노산을 포함한다. 다른 항원 결합 단백질, 예컨대 항체 또는 면역학적으로 기능적인 단편은 또한 본원에 기술된 것과 같이 다양한 중쇄 영역 형태 및/또는 다양한 경쇄 영역 형태를 포함한다.
용어 "동일성"은 배열 및 서열 비교에 의하여 측정되는 바와 같이, 둘 또는 그 이상의 폴리펩티드 분자 또는 둘 또는 그 이상의 폴리뉴클레오티드의 서열 사이의 관계를 나타낸다. "% 동일성"은 비교된 분자의 아미노산 또는 뉴클레오티드 사이의 동일한 잔기의 %를 의미하고, 비교되는 분자들의 가장 작은 크기를 기초로 계산된다. 이 계산을 위해서는 (있다면) 배열의 갭은 특별한 수학적 모델 또는 컴퓨터 프로그램(즉 "알고리즘")에 의해 해결되어야 한다. 배열된 핵산 또는 폴리펩티드의 동일성을 계산하기 위해 사용될 수 있는 방법은 다음의 문헌들에 기술되어 있는 방법들을 포함한다: Computational Molecular Biology, (Lesk, A. M., ed.), 1988, New York: Oxford University Press; Biocomputing Informatics and Genome Projects, (Smith, D. W., ed.), 1993, New York: Academic Press; Computer Analysis of Sequence Data, Part I, (Griffin, A. M., and Griffin, H. G., eds.), 1994, New Jersey: Humana Press; von Heinje, G., 1987, Sequence Analysis in Molecular Biology, New York: Academic Press; Sequence Analysis Primer, (Gribskov, M. and Devereux, J., eds.), 1991, New York: M. Stockton Press; 및 Carillo et al., 1988, SIAM J. Applied Math. 48:1073.
% 동일성을 계산할 때, 비교되는 서열은 서열 사이의 가장 큰 매치를 제공하는 방식으로 배열된다. % 동일성을 측정하기 위해 사용된 컴퓨터 프로그램은 GCG 프로그램 패키지로, 그것은 GAP을 포함한다(Devereux et al., 1984, Nucl. Acid Res. 12:387; Genetics Computer Group, University of Wisconsin, Madison, WI). 컴퓨터 알고리즘 GAP는 그것들에 대한 % 서열 동일성을 측정하고자 하는 두 개의 폴리펩티드 또는 폴리뉴클레오티드를 배열하기 위해 사용된다. 서열들은 그것들의 각각의 아미노산 또는 뉴클레오티드의 최적의 매칭(matching)을 위해 배열된다(알고리즘에 의해 측정되는 것과 같이, "매치된 스팬"). 갭 오프닝 페널티(3×평균 대각선으로서 계산되는데, 이때 "평균 대각선"은 사용되는 비교 매트릭스의 대각선의 평균이고, "대각선"은 특별한 비교 매트릭스에 의해 각각의 완벽한 아미노산 매치에 배정된 점수 또는 수이다) 및 갭 연장 페널티(보통 갭 오프닝 페널티의 1/10배이다)뿐 아니라 PAM 250 또는 BLOSUM 62와 같은 비교 매트릭스가 알고리즘과 함께 사용된다. 특정 구체예에서, 표준 비교 매트릭스(PAM 250 비교 매트릭스에 대해 Dayhoff et al., 1978, Atlas of Protein Sequence and Structure 5:345-352; BLOSUM 62 비교 매트릭스에 대해서 Henikoff et al., 1992, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 89:10915-10919)가 또한 알고리즘에 의해 사용된다.
GAP 프로그램을 사용하여 폴리펩티드 또는 뉴클레오티드 서열에 대한 % 동일성을 측정하기 위해 권장된 변수들은 다음과 같다: 알고리즘: Needleman et al., 1970, J. Mol. Biol. 48:443-453; 비교 매트릭스: Henikoff et al., 1992, 상기 동일의 BLOSUM 62; 갭 페널티: 12(단부 갭에 대해서는 페널티가 없다), 갭 길이 페널티: 4, 유사성의 한계점: 0. 두 개의 아미노산 서열을 배열하기 위한 특정 배열 계획은 두 서열의 단지 짧은 영역만의 매칭을 초래할 수 있고, 이 작게 배열된 영역은 두 개의 전-길이 서열 사이에 유의미한 관계가 없을지라도 매우 높은 서열 동일성을 가질 수 있다. 따라서, 선택된 배열 방법(GAP 프로그램)은 만약 표적 폴리펩티드의 적어도 50개의 연속적인 아미노산에 걸쳐있는 배열을 유발하는 것이 바람직하다면 조정될 수 있다.
상보성 결정 영역
상보성 결정 영역 또는 "CDR"은 중쇄 및 경쇄 가변 영역의 프레임워크 내에 삽입되며, 그곳에서 CDR은 항원 결합 및 인지에 기여하는 영역을 구성한다. 예를 들어 동일한 종의 면역글로불린 사슬의 가변 도메인은 일반적으로 유사한 전체 구조를 나타낸다; 즉 초가변 CDR 영역에 의해 연결된 상대적으로 보존된 프레임워크 영역(FR)을 포함한다. 항원 결합 단백질은 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 그 이상의 CDR을 가질 수 있다. 예를 들어 상기에서 논의된 가변 영역은 전형적으로 3개의 CDR을 포함한다. 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역으로부터의 CDR은 전형적으로 표적 항원(예컨대 CD30L) 상에서 특이적으로 결합하는 구조를 형성하기 위해 프레임워크 영역에 의해 배열된다. 자연-발생적인 경쇄 및 중쇄 가변 영역은 둘 다 N-말단으로부터 C-말단 쪽으로 이들 요소의 다음의 순서를 따른다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 및 FR4. 예시적인 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인의 CDR 및 FR 영역은 표 1 및 표 2에서 강조된다. CDR 및 FR 영역의 경계는 강조된 그것들로부터 달라질 수 있다. 넘버링 시스템은 이들 도메인의 각각에 위치한 아미노산의 번호를 매기기 위해 고안되었다. 주어진 항원 결합 단백질의 상보성 결정 영역 및 프레임워크 영역은 이들 시스템을 사용하여 확인될 수 있다. 넘버링 시스템은 문헌에서 규정된다: Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed., US Dept. of Health and Human Services, PHS, NIH, NIH Publication No. 91-3242, 1991, or Chothia & Lesk, 1987, J. Mol. Biol. 196:901-917; Chothia et al., 1989, Nature 342:878-883. 면역글로불린 사슬의 아미노산에 대한 다른 넘버링 시스템은 IMGT®(the international ImMunoGeneTics information system; Lefranc et al, Dev. Comp. Immunol. 2005, 29:185-203) 및 AHo(Honegger and Pluckthun, J. Mol. Biol. 2001, 309(3):657-670)를 포함한다. 본원에 제공된 CDR은 관례적인 항체 구조의 항원 결합 도메인을 규정하기 위해서일뿐 아니라, 본원에 기술된 것과 같이, 다양한 다른 폴리펩티드 구조에 내장될 수 있다.
본원에 개시된 항원 결합 단백질은 하나 또는 그 이상의 CDR이 그 안으로 접목, 삽입, 내장 및/또는 연결되는 폴리펩티드이다. 예를 들어 항원 결합 단백질은 하나의 중쇄 CDR1("CDRH1"), 및/또는 하나의 중쇄 CDR2("CDRH2"), 및/또는 하나의 중쇄 CDR3("CDRH3"), 및/또는 하나의 경쇄 CDR1("CDRL1"), 및/또는 하나의 경쇄 CDR2("CDRL2") 및/또는 하나의 경쇄 CDR3("CDRL3")를 가질 수 있다. 어떤 항원 결합 단백질들은 CDRH3와 CDRL3를 둘 다 포함한다. 특정 구체예는 일반적으로 반복적이지 않은 CDR의 조합을 활용하는데, 예를 들면 항원 결합 단백질들은 일반적으로 하나의 가변 중쇄 영역에 두 개의 CDRH2 영역을 포함하는 등의 방식으로 만들어지지는 않는다. 항원 결합 단백질은 표 3에 제시된 CDR의 하나 또는 그 이상의 아미노산 서열과 단지 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16 또는 그 이상의 아미노산 잔기에서 동일하거나 상이한 하나 또는 그 이상의 아미노산 서열을 포함할 수 있고, 이때 각각의 그런 서열 차이는 독립적으로 한 아미노산의 결실, 삽입 또는 치환이다. 어떤 항원 결합 단백질에서 CDR은 표 3에 제시된 CDR 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90%, 91%, 92, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%의 서열 동일성을 가지는 아미노산의 서열을 포함한다. 어떤 항원 결합 단백질에서, CDR은 "프레임워크" 영역 안에 내장되고, 그 프레임워크는 CDR(들)을 CDR(들)의 적절한 항원 결합 특성이 이루어지도록 적응시키는 역할을 한다.
SEQ ID NO:1 | TGTSSDVGVYDYVS |
SEQ ID NO:2 | TGTSSDVGLYNYVS |
SEQ ID NO:3 | TGTSSDIGLYDYVS |
SEQ ID NO:4 | TGTSSDIGLYNYVS |
SEQ ID NO:5 | TGSSSDIGTYNYVS |
SEQ ID NO:6 | TGTSSDVGLYNYVS |
SEQ ID NO:7 | EVSNRPS |
SEQ ID NO:8 | EVNNRPS |
SEQ ID NO:9 | EVINRPS |
SEQ ID NO:10 | EVSKRPS |
SEQ ID NO:11 | SSYTSRSTWV |
SEQ ID NO:12 | SSYTSSSTWV |
SEQ ID NO:13 | SSYSSSSTWV |
SEQ ID NO:14 | SYIWS |
SEQ ID NO:15 | SYYWT |
SEQ ID NO:16 | SYSWS |
SEQ ID NO:17 | NNYWS |
SEQ ID NO:18 | SYYWS |
SEQ ID NO:19 | RIYASGNTNYNPSLKS |
SEQ ID NO:20 | RIYASGQTNYNPSLKS |
SEQ ID NO:21 | RIYTSGITNYNPSLKS |
SEQ ID NO:22 | RTSTSGRNNYNPSLKS |
SEQ ID NO:23 | RVYSSGLTNYKPSLKS |
SEQ ID NO:24 | RIFASGSTNYNPSLRS |
SEQ ID NO:25 | DYRVAGTYYYYYGLDV |
SEQ ID NO:26 | ERVVGASRYYYYGVDV |
SEQ ID NO:27 | DFTIAARRYYYYGMDV |
SEQ ID NO:28 | ERATVTTRYHYDGMDV |
SEQ ID NO:29 | ERVGVQDYYHYSGMDV |
본원에는 SEQ ID NO:36, 38, 40, 42 및 44의 아미노산 잔기 23 내지 36; SEQ ID NO:46의 아미노산 잔기 25 내지 36 및 SEQ ID NO:48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70 및 72의 아미노산 잔기 31 내지 35를 포함하는 CDR1 영역이 제공된다. SEQ ID NO:36, 38, 40, 42, 44 및 46의 아미노산 잔기 52 내지 58 및 SEQ ID NO:48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70 및 72의 아미노산 잔기 50 내지 65를 포함하는 CDR2 영역이 제공된다. SEQ ID NO:36, 38, 40, 42, 44 및 46의 아미노산 잔기 91 내지 100 및 SEQ ID NO:48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70 및 72의 아미노산 잔기 98 내지 113을 포함하는 CDR2 영역이 제공된다.본원에서 개시된 CDR은 관련된 서열 군으로부터 유도된 공통 서열을 포함한다. CDRL1 공통 서열은 TGX1SSDX2GX3YX4YVS(SEQ ID NO:30)로 이루어지는데, 이때 X1은 쓰레오닌 또는 세린이고, X2는 발린 또는 아이소로이신이며, X3은 발린, 쓰레오닌 또는 로이신이고, X4는 아스파트산 또는 아스파라긴이다.CDRL2 공통 서열은 EVX1X2RPS(SEQ ID NO:31)로 구성되고, 이때 X1은 세린, 아스파라긴 또는 아이소로이신이며 X2는 아스파라긴 또는 라이신이다.
CDRL3 공통 서열은 SSYX1SX2STWV(SEQ IDN NO:32)를 포함하고, 이때 X1은 쓰레오닌 또는 세린이며 X2는 아르기닌 또는 세린이다.
CDRH1 공통 서열은 X1X2X3WX4(SEQ ID NO:33)로 구성되며, 이때 X1은 세린 또는 아스파라긴이고, X2는 타이로신 또는 아스파라긴이며, X3은 아이소로이신, 타이로신 또는 세린이고, X4는 쓰레오닌 또는 세린이다. 상이한 구체예에서, CDRH1 공통 서열은 SYX3WX5(SEQ ID NO:75)로 구성되고, 이때 X3는 I, S 또는 Y이며, X5는 T 또는 S이다.
CDRH2 공통 서열은 RX1X2X3SGX4X5NYX6PSLX7S(SEQ ID NO:34)로 구성되며, 이때 X1은 아이소로이신, 발린 또는 쓰레오닌이고, X2는 타이로신, 페닐알라닌 또는 세린이며, X3는 쓰레오닌, 세린 또는 알라닌이고, X4는 아이소로이신, 로이신, 아스파라긴, 세린, 아르기닌 또는 글루타민이며, X5는 쓰레오닌 또는 아스파라긴이고, X6는 아스파라긴 또는 라이신이며, X7은 라이신 또는 아르기닌이다.
CDRH3 공통 서열은 X1X2X3X4X5X6X7X8YX9YX10GX11DV(SEQ ID NO:35)로 구성되고, 이때 X1은 글루탐산 또는 아스파트산이고, X2는 아르기닌, 타이로신 또는 페닐알라닌이며, X3는 발린, 알라닌, 아르기닌 또는 쓰레오닌이고, X4는 발린, 쓰레오닌, 글리신 또는 아이소로이신이며, X5는 발린, 알라닌 또는 글리신이며, X6는 알라닌, 쓰레오닌, 글리신 또는 글루타민이고, X7은 쓰레오닌, 아스파트산, 아르기닌 또는 세린이며, X8은 아르기닌 또는 타이로신이고, X9는 타이로신 또는 히스티딘이며, X10은 타이로신, 아스파트산 또는 세린이고, X11은 메티오닌, 로이신 또는 발린이다.
단클론성 항체
본원에 제공된 항원 결합 단백질은 CD30L에 결합하는 단클론성 항체를 포함한다. 단클론성 항체는 해당 기술분야에 공지되어 있는 어떠한 기법을 사용하여, 예를 들면 면역화 스케줄이 완료된 후에 유전자 도입 동물로부터 수득된 비장 세포를 불멸화시킴으로써 제조될 수 있다. 비장 세포는 해당 기술분야에 공지되어 있는 어떠한 기법을 사용하여, 예컨대 비장 세포를 골수종 세포와 융합시켜 하이브리도마를 생성함으로써 불멸화될 수 있다. 하이브리도마-생성 융합 과정에 사용하기 위한 골수종 세포는 바람직하게는 비-항체 생산성이고, 고융합 효율을 가지며, 원하는 융합된 세포(하이브리도마)만의 성장을 지지하는 특정 선택 배지에서 성장할 수 없도록 만드는 효소 결핍을 가지고 있다. 마우스 융합에 사용하기에 적당한 셀라인의 실례로는 Sp-20, P3-X63/Ag8, P3-X63-Ag8.653, NS1/1.Ag 4 1, Sp210-Ag14, FO, NSO/U, MPC-11, MPC11-X45-GTG 1.7 및 S194/5XXO Bul이 있고; 쥐 융합에 사용된 셀라인의 실례로는 R210.RCY3, Y3-Ag 1.2.3, IR983F 및 4B210이 있다. 세포 융합에 유용한 다른 셀라인들은 U-266, GM1500-GRG2, LICR-LON-HMy2 및 UC729-6이다.
어떤 경우에, 하이브리도마 셀라인은 동물(예컨대 사람 면역글로불린 서열을 가지는 유전자 도입 동물)을 CD30L 면역원으로 면역화하고; 면역된 동물로부터 비장 세포를 수득하며; 그 수득된 비장 세포를 골수종 셀라인에 융합시킴으로써 하이브리도마 세포를 생성하고; 하이브리도마 세포로부터 하이브리도마 셀라인을 수립하며, CD30L 폴리펩티드에 결합하는 항체를 생성하는 하이브리도마 셀라인을 확인함으로써 생성된다. 그런 하이브리도마 셀라인, 및 그것에 의해 생성된 항-CD30L 단클론성 항체는 본 출원의 측면들이다.
하이브리도마 셀라인에 의해 분비된 단클론성 항체는 해당 기술분야에 공지되어 있는 어떠한 기법이든지 사용하여 정제될 수 있다. 하이브리도마 또는 mAb는 추가로 특별한 특성, 예컨대 CD30과의 CD30L 상호작용을 감소, 억제, 간섭 또는 조절하는 능력을 가지는 mAb를 확인하기 위해 선별될 수 있다.
키메릭 및 인간화된 항체
전술한 서열을 기초로 한 키메릭 및 인간화된 항체가 또한 제공된다. 치료제로서 사용하기 위한 단클론성 항체는 사용 전에 다양한 방법으로 변형될 수 있다. 한 실례는 키메릭 항체로, 그것은 기능적 면역글로불린 경쇄 또는 중쇄 또는 그것의 면역학적으로 기능적인 부분들을 생성하기 위해 공유 연결되는, 상이한 항체로부터의 단백질 절편들로 구성된 항체이다. 일반적으로 중쇄 및/또는 경쇄의 부분은 특별한 종으로부터 유도된 또는 특별한 항체 부류 또는 하위부류에 속하는 항체의 해당하는 서열과 동일하거나 상동성인 한편, 사슬(들)의 나머지는 다른 종으로부터 유도되거나 다른 항체 부류 또는 하위부류에 속하는 항체의 해당하는 서열과 동일하거나 상동성이다. 키메릭 항체와 관련된 방법들은 예를 들면 미국 특허 번호 4,816,567; 및 Morrison et al., 1985, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81:6851-6855를 참조한다. CDR 그라프팅은 예를 들면 미국 특허 번호 6,180,370, 5,693,762, 5,693,761, 5,585,089 및 5,530,101에서 기술된다.
키메릭 항체의 한 가지 유용한 유형은 "인간화된" 항체이다. 일반적으로, 인간화된 항체는 비-사람 동물에서 초기에 발생된 단클론성 항체로부터 생성된다. 전형적으로 항체의 비-항원 인지 부분으로부터 유래한 이 단클론성 항체의 특정 아미노산 잔기는 해당하는 아이소타입의 사람 항체의 해당하는 잔기에 대해 상동하도록 변형된다. 인간화는 예를 들면 설치류 가변 영역의 적어도 일부분을 사람 항체의 해당하는 영역에 대해 치환하는 것에 의한 다양한 방법을 사용하여 수행될 수 있다(예컨대 미국 특허 번호 5,585,089 및 5,693,762; Jones et al., 1986, Nature 321:522-525; Riechmann et al., 1988, Nature 332:323-27; Verhoeyen et al., 1988, Science 239:1534-1536 참조).
특정 구체예에서, 사람 이외의 종으로부터 유래한 불변 영역은 하이브리드 항체를 생성하기 위해 사람 가변 영역(들)과 함께 사용될 수 있다.
전체 사람 항체
전체 사람 항체가 또한 제공된다. 주어진 항원에 대해 특이적인 전체 사람 항체를, 사람을 그 항원에 노출시키지 않으면서 제조하기 위하여 많은 방법들이 활용될 수 있다("전체 사람 항체"). 전체 사람 항체의 제조를 시행하기 위해 제공된 한 가지 구체적인 수단은 마우스 체액 면역 시스템의 "인간화"이다. 사람 면역글로불린(Ig)을 내인성 Ig 유전자들이 비활성화되어 있는 마우스에 도입하는 것은 마우스에서 전체 사람 단클론성 항체(mAb)를 생성하는 한 가지 수단이고, 이때 그 동물은 어떠한 원하는 항원으로 면역될 수 있다. 전체 사람 항체를 사용하는 것으로 인해 때로 마우스 또는 마우스-유도체화된 mAb를 치료제로서 사람에게 투여함으로써 유발될 수 있는 면역원성 및 알레르기 반응을 최소화할 수 있다.
전체 사람 항체는 내인성 면역글로불린 생성이 없을 때 사람 항체의 레퍼토리를 생성할 수 있는 유전자 도입 동물(통상적으로 마우스)을 면역시킴으로써 제조될 수 있다. 이 목적을 위한 항원은 전형적으로 6 또는 그 이상의 연속적인 아미노산을 가지고, 임의로 담체, 예컨대 합텐에 포합된다(Jakobovits et al., 1993, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:2551-2555; Jakobovits et al., 1993, Nature 362:255-258; and Bruggermann et al., 1993, Year in Immunol. 7:33). 그런 방법의 한 실례에서, 유전자 도입 동물은 마우스 중쇄 및 경쇄 면역글로불린을 코드화하는 내인성 마우스 면역글로불린 유전자좌를 그 안에서 무능화시키고, 사람 중쇄 및 경쇄 단백질을 코드화하는 유전자좌를 함유하는 사람 게놈 DNA의 마우스 게놈 큰 단편 안에 삽입시킴으로써 생성된다. 그런 다음 사람 면역글로불린 유전자좌의 전체보다 적은 상보물을 가지게 된 부분적으로 변형된 동물이 교차-교배되어 원하는 면역 시스템 변형을 모두 가지는 동물이 얻어진다. 면역원이 투여될 때, 이들 유전자도입 동물은 면역원에 대해서는 면역학적으로 특이하지만 쥐과 아미노산 서열 이외의 사람 아미노산 서열, 이를테면 가변 영역을 가지는 항체를 생성한다. 그런 방법의 추가의 설명은 예를 들면 WIPO 특허 공보 WO96/33735 및 WO94/02602를 참조한다. 사람 항체를 만들기 위한 유전자 도입 마우스와 관련된 추가의 방법은 미국 특허 번호 5,545,807; 6,713,610; 6,673,986; 6,162,963; 5,545,807; 6,300,129; 6,255,458; 5,877,397; 5,874,299 및 5,545,806; WIPO 특허 공보 WO91/10741, WO90/04036 및 EP 546073B1 및 EP 546073A1에 기술된다.
상기에서 기술된 유전자도입 마우스는 재배열되지 않은 사람 중쇄([뮤] 및 [감마]) 및 [카파] 경쇄 면역글로불린 서열을 코드화하는 사람 면역글로불린 유전자 미니유전자좌를, 내인성 [뮤] 및 [카파] 사슬 유전자좌를 비활성화시키는 표적화된 돌연변이와 함께 함유한다(Lonberg et al., 1994, Nature 368:856-859). 따라서 마우스는 면역화에 대한 반응으로 마우스 IgM 또는 [카파]의 감소된 발현을 나타내고, 도입된 사람 중쇄 및 경쇄 이식유전자는 부류간 스위칭 및 체세포성 돌연변이를 진행시켜서 고친화성 사람 IgG [카파] 단클론성 항체를 생성한다(Lonberg et al., 상기 동일; Lonberg and Huszar, 1995, Intern. Rev. Immunol. 13: 65-93; Harding and Lonberg, 1995, Ann. N.Y Acad. Sci. 764:536-546). 그런 마우스의 제조는 문헌에 상세하게 기술되어 있다(Taylor et al., 1992, Nucleic Acids Research 20:6287-6295; Chen et al., 1993, International Immunology 5:647-656; Tuaillon et al., 1994, J. Immunol. 152:2912-2920; Lonberg et al., 1994, Nature 368:856-859; Lonberg, 1994, Handbook of Exp. Pharmacology 113:49-101; Taylor et al., 1994, International Immunology 6:579-591; Lonberg and Huszar, 1995, Intern. Rev. Immunol. 13:65-93; Harding and Lonberg, 1995, Ann. N.Y Acad. Sci. 764:536-546; Fishwild et al., 1996, Nature Biotechnology 14:845-85). 추가로 미국 특허 번호 5,545,806; 5,569,825; 5,625,126; 5,633,425; 5,789,650; 5,877,397; 5,661,016; 5,814,318; 5,874,299; 및 5,770,429; 뿐만 아니라 미국 특허 번호 5,545,807; WIPO 공보 WO 93/1227; WO 92/22646; 및 WO 92/03918을 참조한다. 이들 유전자도입 마우스에서 사람 항체를 생성하기 위해 활용된 기법들은 WIPO 공보 WO98/24893 및 Mendez et al., 1997, Nature Genetics 15:146-156에서 개시된다. 예를 들어 HCo7과 HCo12 유전자도입 마우스 계통은 항-CD30L 항체를 생성하기 위해 사용될 수 있다.
하이브리도마 기술을 사용하여, 원하는 특이성을 가지는 항원-특이적 사람 mAb가 제조될 수 있고 상기에서 기술된 것과 같은 유전자도입 마우스들로부터 선택될 수 있다. 그런 항체는 적당한 벡터 또는 숙주 세포를 사용하여 클론되고 발현될 수 있고, 또는 항체는 배양된 하이브리도마 세포로부터 수득될 수 있다.
전체 사람 항체는 또한 파지-디스플레이 라이브러리로부터 유도될 수 있다(Hoogenboom et al., 1991, J. Mol. Biol. 227:381; Marks et al., 1991, J. Mol. Biol. 222:581; WIPO 공보 WO 99/10494). 파지 디스플레이 기법은 필라멘트형 박테리오파지의 표면상에 항체 레퍼토리의 디스플레이와, 이어서 선택된 항원에 대한 결합에 의한 파지의 선택을 통해 면역 선택을 모방한다.
이중특이성 또는 이중기능성 항원 결합 단백질
"이중특이성", "이중적-특이성" 또는 "이중기능성" 항원 결합 단백질 또는 항체는 각각 두 개의 상이한 항원 결합 부위, 예컨대 상기 기술된 것과 같이 하나또는 그 이상의 CDR 또는 하나 또는 그 이상의 가변 영역을 가지는 하이브리드 항원 결합 단백질 또는 항체이다. 어떤 경우에, 그것은 두 개의 상이한 중쇄/경쇄 쌍과 두 개의 상이한 결합 부위를 가지는 인공 하이브리드 항체이다. 다중특이성 항원 결합 단백질 또는 "다중특이성 항체"는 하나 이상의 항원 또는 에피토프를 표적으로 하는 것이다. 이중특이성 항원 결합 단백질 및 항체는 다중특이성 항원 결합 단백질 항체의 종이고, 다양한 방법, 이를테면 그것들에 한정되는 것은 아니지만 하이브리도마의 융합 또는 Fab' 단편의 연결에 의해 제조될 수 있다. 예컨대 Songsivilai and Lachmann, 1990, Clin. Exp. Immunol. 79:315-321; Kostelny et al., 1992, J. Immunol. 148:1547-1553 참조.
면역학적 단편
항원 결합 단백질은 또한 항체의 면역학적 단편들(예컨대 Fab, Fab', F(ab')2 또는 scFv)을 포함한다. "Fab 단편'은 하나의 경쇄(경쇄 가변 영역(VL) 및 그것의 해당하는 불변 도메인(CL))와 하나의 중쇄(중쇄 가변 영역(VH)과 첫 번째 불변 영역(CH1))로 구성된다. Fab 분자의 중쇄는 다른 중쇄 분자와 이황화 결합을 형성할 수 없다. "Fab' 단편"은 하나의 경쇄 및 CH1과 CH2 도메인 사이의 영역을 또한 함유하는 하나의 중쇄 부분을 함유하고 있어서, 사슬간 이황화 결합이 두 개의 Fab' 단편의 두 개의 중쇄 사이에 형성되어 F(ab')2 분자를 형성할 수 있다. 그러므로 "F(ab')2 단편"은 두 개의 중쇄 사이에서 이황화 결합에 의해 함께 유지되는 두 개의 Fab' 단편으로 구성된다. "Fv 단편"은 항체의 단일 아암의 가변 경쇄 영역과 가변 중쇄 영역으로 구성된다. 단일-사슬 항체 "scFv"는 중쇄 및 경쇄 가변 영역들이 가요성 링커에 의해 연결되어 있는 Fv 분자이고, 그것은 항원 결합 영역을 형성한다. 단일 사슬 항체는 WIPO 공보 WO 88/1649, 미국 특허 번호 4,946,778 및 5,260,203; Bird, 1988, Science 242:423; Huston et al., 1988, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 85:5879; Ward et al., 1989, Nature 334:544, de Graaf et al., 2002, Methods Mol Biol. 178:379-387; Kortt et al., 1997, Prot. Eng. 10:423; Kortt et al., 2001, Biomol. Eng. 18:95-108 및 Kriangkum et al., 2001, Biomol. Eng. 18:31-40에서 상세하게 논의된다. "Fc" 영역은 항체의 CH2 및 CH3 도메인을 포함하는 두 개의 중쇄 단편을 함유한다. 두 개의 중쇄 단편은 둘 또는 그 이상의 이황화 결합 CH3 도메인의 소수성 상호작용에 의해 함께 유지된다.
또한 도메인 항체, 중쇄의 가변 영역 또는 경쇄의 가변 영역만을 함유하는 면역학적으로 기능적인 면역글로불린 단편이 포함된다. 어떤 경우에, 둘 또는 그 이상의 VH 영역은 펩티드 링커와 공유적으로 연결되어서 이가의 도메인 항체를 생성한다. 이가 도메인 항체의 두 개의 VH 영역은 동일하거나 상이한 항원을 표적으로 할 수 있다. 이중체는 두 개의 폴리펩티드 사슬을 포함하는 이가 항체이고, 이때 각각의 폴리펩티드 사슬은 동일한 사슬 상의 두 개의 도메인 사이에서 쌍을 이루는 것을 허용하기에는 너무 짧은 링커에 의해 연결된 VH 및 VL 도메인을 포함함으로써 각각의 도메인이 또 다른 폴리펩티드 사슬 상의 상보성 도메인과 쌍을 이루는 것을 허용하게 된다(Holliger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-48, 1993 and Poljak et al., Structure 2:1121-23, 1994). 유사하게, 삼중체 및 사중체는 각각 3개 및 4개의 폴리펩티드 사슬을 포함하는 항체로, 각각 동일하거나 상이할 수 있는 3 또는 4개의 항원 결합 부위를 형성한다. 맥시바디(maxibodies)는 IgG1의 Fc 영역에 공유적으로 부착된 이가의 scFv를 포함한다(Fredericks et al, 2004, Protein Engineering, Design & Selection, 17:95-106; Powers et al., 2001, Journal of Immunological Methods, 251:123-135; Shu et al., 1993, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:7995-7999; Hayden et al., 1994, Therapeutic Immunology 1:3-15).
다양한 다른 형태
또한 상기에서 기술된 항원 결합 단백질의 변종 형태가 제공되는데, 예를 들어 하나 또는 그 이상의 중쇄 또는 경쇄 가변 영역 또는 CDR에 하나 또는 그 이상의 보존성 아미노산 치환을 가지고 있는 항원 결합 단백질의 일부가 표 1 및 표 2에 열거된다.
자연-발생적인 아미노산은 공통적인 측쇄 특성을 기초로 다음과 같은 부류들로 나누어질 수 있다: 소수성(노르로이신, Met, Ala, Val, Leu, Ile); 중성 친수성(Cys, Ser, Thr, Asn, Gln); 산성(Asp, Glu); 염기성(His, Lys, Arg); 사슬 방향에 영향을 미치는 잔기(Gly, Pro); 및 방향족(Trp, Tyr, Phe).
보존성 아미노산 치환은 이들 부류 중 하나의 구성원의 동일한 부류의 다른 구성원으로의 교환을 포함할 수 있다. 보존성 아미노산 치환은 비-자연 발생적인 아미노산 잔기를 포함할 수 있는데, 그것은 전형적으로 생물학적 시스템에서 합성 이외의 화학적 펩티드 합성에 의해 통합된다. 이것들은 펩티드 유사 모방물(peptidomimetics)과 아미노산 부분의 다른 반전된 또는 반대 형태를 포함한다. 본원에 기술된 항원 결합 단백질의 기능적 및/또는 생화학적 특징의 그런 실질적인 변형은 (a) 치환되는 지역의 분자 골격의 구조를, 예컨대 쉬트 또는 나선 형태로서 유지하고, (b) 표적 부위에서 분자의 전하 또는 소수성을 유지하며, 또는 (c) 측쇄의 풍만성(bulkiness)을 유지하는 것에 미치는 효과에서 상당히 다른 중쇄 및 경쇄의 아미노산 서열에 치환을 생성함으로써 이루어질 수 있다.
비-보존성 치환은 다른 부류로부터의 구성원에 대해 상기 부류들 중 하나의 구성원의 교환을 포함할 수 있다. 그렇게 치환된 잔기는 사람 항체의 상동하는 항체의 영역 안으로, 또는 분자의 비-상동성 영역 안으로 도입될 수 있다.
특정 구체예에 따르면, 그런 변화를 만드는 데 있어서, 아미노산의 수치요법 지수를 고려할 수 있다. 단백질의 수치요법 프로필은 각각의 아미노산에 수치("수치 지수")를 배정한 후 반복적으로 이들 값을 펩티드 사슬을 따라 평균을 냄으로써 계산된다. 각각의 아미노산은 그것의 소수성 및 전하 특성을 토대로 수치 지수가 배정되었다. 그것들은 다음과 같다: 이소로이신(+4.5); 발린(+4.2); 로이신(+3.8); 페닐알라닌(+2.8); 시스테인/시스틴(+2.5); 메티오닌(+1.9); 알라닌(+1.8); 글리신(-0.4); 쓰레오닌(-0.7); 세린(-0.8); 트립토판(-0.9); 타이로신(-1.3); 프롤린(-1.6); 히스티딘(-3.2); 글루타메이트(-3.5); 글루타민(-3.5); 아스파테이트(-3.5); 아스파라긴(-3.5); 라이신(-3.9); 및 아르기닌(-4.5).
단백질에 상호적인 생물학적 기능을 부여하는 데 있어 수치요법 프로필의 중요성은 해당 기술분야에서 인지된다(예컨대 Kyte et al., 1982, J. Mol. Biol. 157:105-131). 특정 아미노산은 유사한 수치요법 지수 또는 점수를 가지는 다른 아미노산에 대해 치환될 수 있고, 여전히 유사한 생물학적 활성을 보유하는 것으로 알려져 있다. 수치요법 지수를 토대로 변화를 만들 때에, 특정 구체예에서, 그것의 수치요법 지수가 ±2 내에 있는 아미노산의 치환이 포함된다. 어떤 측면으로는 ±1 내에 있는 것들이 포함되며, 다른 측면으로는 ±0.5 내에 있는 것들이 포함된다.
또한 해당 기술분야에서 유사한 아미노산의 치환은 친수성을 토대로, 특히 그렇게 생성된 생물학적으로 기능적인 단백질 또는 펩티드가 본 발명에서와 같이 면역학적 구체예에서 사용되도록 의도되는 경우에 효과적으로 이루어질 수 있다는 것이 인지되어야 한다. 특정 구체예에서, 단백질의 가장 큰 국소적 평균 친수성은 그것의 인접한 아미노산의 친수성에 의해 지배되는 것과 같이, 그것의 면역원성 및 항원 결합 또는 면역원성과, 즉 단백질의 생물학적 특성과 상관된다.
다음의 친수성 값이 이들 아미노산 잔기에 배정되었다: 아르기닌(+3.0); 라이신(+3.0); 아스파테이트(+3.0±1); 글루타메이트(+3.0±1); 세린(+0.3); 아스파라긴(+0.2); 글루타민(+0.2); 글리신(0); 쓰레오닌(-0.4); 프롤린(-0.5±1); 알라닌(-0.5); 히스티딘(-0.5); 시스테인(-1.0); 메티오닌(-1.3); 발린(-1.5); 로이신(-1.8); 아이소로이신(-1.8); 타이로신(-2.3); 페닐알라닌(-2.5) 및 트립토판(-3.4). 유사한 친수성 값을 토대로 하여 변화를 만들 때, 특정 구체예에서는, 그것의 친수성 값이 ±2 내에 있는 아미노산의 치환이 포함되며, 다른 구체예에서는 ±1 내에 있는 것들이 포함되고, 또 다른 구체예에서는 ±0.5 내에 있는 것들이 포함된다. 어떤 경우에 친수성을 토대로 하여 일차 아미노산 서열로부터 에피토프를 확인할 수도 있다. 이들 영역은 또한 "에피토프 코어 영역"으로서 언급된다.
예시적인 보존성 아미노산 치환을 아래의 표 4에 나타낸다.
잔기 | 치환 | 잔기 | 치환 | 잔기 | 치환 | 잔기 | 치환 | |||
Ala | Ser | Gln | Asn | Leu | Ile, Val | Thr | Ser | |||
Arg | Lys | Glu | Asp | Lys | Arg, Gln, Glu | Trp | Tyr | |||
Asn | Gln, His | Gly | Pro | Met | Leu, Ile | Tyr | Trp, Phe | |||
Asp | Glu | His | Asn, Gln | Phe | Met, Leu, Tyr | Val | Ile, Leu | |||
Cys | Ser | Ile | Leu, Val | Ser | Thr | Thr | Ser |
잔기 = 원래의 잔기; 치환 = 예시적인 치환숙련된 전문가는 본원에서 표시한 것과 같은 폴리펩티드의 적당한 변이체를 잘 알려져 있는 기법들을 사용하여 측정할 수 있을 것이다. 해당 기술분야의 숙련자는 활성에 중요할 것으로 여겨지지 않는 영역을 표적화함으로써 활성을 파괴하지 않으면서 변화될 수 있는 분자의 적당한 지역을 확인할 수 있다. 숙련된 전문가는 또한 유사한 폴리펩티드들 중에서도 보존된 분자들의 잔기 및 부분을 확인할 수 있을 것이다. 추가의 구체예에서는, 생물학적 활성 또는 구조에 중요할 수 있는 지역조차도 생물학적 활성을 파괴하지 않으면서 또는 폴리펩티드 구조에 불리하게 영향을 미치지 않으면서 보존적인 아미노산 치환이 수행될 수 있다.또한, 해당 기술분야의 숙련자는 활성 또는 구조에 중요한 유사한 폴리펩티드의 잔기를 확인하는 구조-기능 연구를 리뷰할 수 있다. 그런 비교의 관점에서, 누구든지 유사한 단백질의 활성 또는 구조에 중요한 아미노산 잔기에 해당하는 단백질의 아미노산 잔기의 중요성을 예상할 수 있다. 해당 기술분야의 숙련자는 그렇게 예상된 중요한 아미노산 잔기에 대한 화학적으로 유사한 아미노산 치환을 선택할 수 있다.
해당 기술분야의 숙련자는 또한 유사한 폴리펩티드의 구조와 관련하여 3-차원 구조 및 아미노산 서열을 분석할 수 있다. 그런 정보의 관점에서, 해당 기술분야의 숙련자는 그것의 삼차원 구조와 관련하여 항체의 아미노산 잔기의 배열을 예측할 수 있다. 해당 기술분야의 숙련자는 단백질의 표면에 있을 것으로 예측된 아미노산 잔기에 대한 라디칼 변화를 만들지 않는 것을 선택할 수 있는데, 왜냐하면 그런 잔기는 다른 분자와의 중요한 상호작용에 포함될 수 있기 때문이다. 더욱이, 해당 기술분야의 숙련자는 각각의 원하는 아미노산 잔기에서 단일한 아미노산 치환을 함유하는 시험 변이체를 생성할 수 있다. 이들 변이체는 그런 다음에 CD30L 활성에 대한 분석을 사용하여 선별될 수 있고(예컨대 아래의 실시예 단원 참조), 그로써 어떤 아미노산이 교체될 수 있고 어떤 것이 교체되지 않아야 하는지에 관한 정보를 얻을 수 있다. 다르게 표현하면, 그런 기본적인 실험으로부터 모아진 정보를 토대로, 해당 기술분야의 숙련자는 추가의 치환이 단독으로 또는 다른 돌연변이와 조합하여 피해야 하는 아미노산 위치를 쉽게 결정할 수 있다.
많은 과학적 출판물이 이차 구조의 예측에 할애되었다. 예컨대 Moult, 1996, Curr. Op. in Biotech. 7:422-427; Chou et al., 1974, Biochem. 13:222-245; Chou et al., 1974, Biochemistry 113:211-222; Chou et al., 1978, Adv. Enzymol. Relat. Areas Mol. Biol. 47:45-148; Chou et al., 1979, Ann. Rev. Biochem. 47:251-276; and Chou et al., 1979, Biophys. J. 26:367-384 참조. 더욱이, 이차 구조를 예측하는 것을 보조하는 컴퓨터 프로그램이 현재 활용가능하다. 이차 구조를 예측하는 한 가지 방법은 상동성 모델링을 토대로 한다. 예를 들어 30%보다 큰 서열 동일성, 또는 40%보다 큰 유사성을 가지는 두 개의 폴리펩티드 또는 단백질은 자주 유사한 구조적 위상기하학을 가진다. 단백질 구조 데이터베이스(PDB)의 최근의 성장은 폴리펩티드 또는 단백질의 구조 내에서 잠재적인 접힘의 수를 포함하여, 이차 구조에 대한 증대된 예측가능성을 증명하고 있다(예컨대 Holm et al., 1999, Nucl. Acid. Res. 27:244-247 참조). 주어진 폴리펩티드 또는 단백질에서 접힘의 수는 제한되어 있고, 일단 결정적인 수의 구조가 풀리면, 구조적 예측은 극적으로 보다 정확해질 것이라는 것이 제안되었다(Brenner et al., 1997, Curr. Op. Struct. Biol. 7:369-376).
이차 구조를 예측하는 추가의 방법으로는 "쓰레딩(threading)"(Jones, 1997, Curr. Opin. Struct. Biol. 7:377-387; Sippl et al., 1996, Structure 4:15-19), "프로필 분석"(Bowie et al., 1991, Science 253:164-170; Gribskov et al., 1990, Meth. Enzym. 183:146-159; Gribskov et al., 1987, Proc. Nat. Acad. Sci. 84:4355-4358) 및 "진화적 관련성"(Holm, 1999, supra; and Brenner, 1997, 상기 동일)이 있다.
어떤 구체예에서, (1) 단백질 가수분해에 대한 민감성을 감소시키고, (2) 산화에 대한 민감성을 감소시키며, (3) 단백질 복합체를 형성하기 위한 결합 친화성을 변경시키고, (4) 리간드 또는 항원 결합 친화성을 변경시키며, 및/또는 (5) 다른 물리화학적 또는 기능적 특성을 그런 폴리펩티드에 부여하거나 변형시키는, 예컨대 치환 지역의 분자 골격의 구조를, 예를 들면 쉬트 또는 나사 형태로서 유지하는; 표적 부위에서 분자의 전하 또는 소수성을 유지하거나 변경시키는, 또는 측쇄의 풍만성을 유지하거나 변경시키는 아미노산 치환이 만들어진다.
예를 들면 단일 또는 다중 아미노산 치환(특정 구체예에서, 보존성 아미노산 치환)이 자연-발생적인 서열에 만들어질 수 있다. 치환은 분자간 접촉을 형성하는 도메인(들)의 밖에 있는 항체 부분에서 만들어질 수 있다. 그런 구체예에서, 원래의 서열의 구조적 특징을 실질적으로 변화시키지 않는 보존성 아미노산 치환이 사용될 수 있다(예컨대 원래의 또는 천연 항원 결합 단백질을 특징짓는 이차 구조를 파괴하지 않는 하나 또는 그 이상의 대체 아미노산). 해당 기술분야에서 인지된 폴리펩티드 이차 및 삼차 구조의 실례는 Proteins, Structures and Molecular Principles (Creighton, Ed.), 1984, W. H. New York: Freeman and Company; Introduction to Protein Structure (Branden and Tooze, eds.), 1991, New York: Garland Publishing; 및 Thornton et al., 1991, Nature 354:105에 기술되어 있다.
추가의 변이체는 원래의 또는 천연 아미노산 서열의 하나 또는 그 이상의 시스테인 잔기가 결실되어 있거나 다른 아미노산(예컨대 세린)으로 치환되어 있는 시스테인 변이체를 포함한다. 시스테인 변이체는 무엇보다도, 항체(예를 들어)가 생물학적으로 활성인 형태로 접혀져야 할 때 유용하다. 시스테인 변이체는 천연 단백질보다 더 적은 수의 시스테인 잔기를 가질 수 있고, 전형적으로 쌍을 이루지 않은 시스테인으로부터 유발되는 상호작용을 최소화하기 위해 짝수를 가진다.
본원에 개시된 중쇄 및 경쇄 가변 영역 및 CDR은 CD30L 폴리펩티드에 특이적으로 결합할 수 있는 항원 결합 영역을 함유하는 항원 결합 단백질을 제조하기 위해 사용될 수 있다. "항원 결합 영역"은 명시된 항원에 특이적으로 결합하는 단백질 또는 단백질의 영역, 예컨대 항원과 상호작용하고 항원 결합 단백질에 표적 항원에 대한 그것의 특이성 및 친화성을 부여하는 아미노산 잔기를 함유하는 영역을 의미한다. 항원 결합 영역은 하나 또는 그 이상의 CDR을 포함할 수 있고, 특정 항원 결합 영역은 또한 하나 또는 그 이상의 "프레임워크" 영역을 포함한다. 예를 들어 표 3에 열거된 하나 또는 그 이상의 CDR은 공유적으로 또는 비공유적으로 분자(예컨대 폴리펩티드) 안에 통합되어 면역접착성을 만들 수 있다. 면역접착성은 CDR(들)을 더 큰 폴리펩티드 사슬의 부분으로서 통합할 수 있고, CDR(들)을 다른 폴리펩티드 사슬에 공유적으로 연결시키거나, 또는 CDR(들)을 비공유적으로 통합시킬 수 있다. CDR(들)은 면역접착성이 관심의 특별한 항원(예컨대 CD30L 폴리펩티드)에 특이적으로 결합하는 것을 가능하게 한다.
다른 항원 결합 단백질은 본원에 기술된 가변 영역 및 CDR을 토대로 한 모방물(예컨대 "펩티드 모방물" 또는 "펩티드 유사 모방물")을 포함한다. 이들 유사체는 펩티드, 비-펩티드 또는 펩티드와 비-펩티드 영역의 조합물일 수 있다(Fauchere, 1986, Adv. Drug Res. 15:29; Veber and Freidinger, 1985, TINS p. 392; and Evans et al., 1987, J. Med. Chem. 30:1229). 치료적으로 유용한 펩티드에 구조적으로 유사한 펩티드 모방물은 유사한 치료적 또는 예방적 효과를 생성하기 위해 사용될 수 있다. 그런 화합물들은 자주 컴퓨터화된 분자 모델링의 도움을 받아 개발된다. 일반적으로 펩티드 유사 모방물은 원하는 생물학적 활성, 예컨대 CD30과 CD30L의 상호작용을 억제하거나 차단하는 능력을 나타내는 항원 결합 단백질에 구조적으로 유사한 단백질이지만, 펩티드 유사 모방물은 예를 들면 -CH2NH-, -CH2S-, -CH2-CH2-, -CH-CH-(시스 및 트란스), -COCH2-, -CH(OH)CH2- 및 -CH2SO-로부터 해당 기술분야에 잘 알려져 있는 방법에 의해 선택된 연쇄로 임의로 교체된 하나 또는 그 이상의 펩티드 연쇄를 가진다. 공통 서열의 하나 또는 그 이상의 아미노산의 동일한 유형의 D-아미노산으로의 체계적 치환(예컨대 L-라이신 대신 D-라이신)은 더 안정한 단백질을 생성하기 위해 특정 구체예에서 사용될 수 있다. 또한 공통 서열 또는 실질적으로 동일한 공통 서열 변화를 포함하는 제약된 펩티드는 해당 기술분야에 공지되어 있는 방법들(Rizo and Gierasch, 1992, Ann. Rev. Biochem. 61:387)에 의해, 예를 들면 펩티드를 고리화하는 분자내 이황화 가교를 형성할 수 있는 내부 시스테인 잔기를 첨가함으로써 생성될 수 있다.
본원에 기술된 항원 결합 단백질의 유도체가 또한 제공된다. 유도체화된 항원 결합 단백질은 그 항원 결합 단백질 또는 단편에 원하는 특성, 예컨대 특별한 용도에서 증가된 반감기를 부여하는 어떠한 분자 또는 물질을 포함할 수 있다. 유도체화된 항원 결합 단백질은 예를 들면 검출가능한(또는 표지화) 부분(예컨대 방사성, 비색성, 항원성 또는 효소적 분자, 검출가능한 비드(예컨대 자성 또는 전기적으로 조밀한(예컨대 금) 비드), 또는 다른 분자에 결합하는 분자(예컨대 비오틴 또는 스트렙트아비딘)), 치료적 또는 진단용 부분(예컨대 방사성, 세포독성, 또는 제약학적으로 활성인 부분), 또는 특별한 용도(예컨대 대상, 예를 들면 사람 대상에의 투여, 또는 다른 생체 내 또는 시험관 내 용도)에 대해 항원 결합 단백질의 적합성을 증가시키는 분자를 포함할 수 있다. 항원 결합 단백질을 유도체화하기 위해 사용될 수 있는 분자들의 실례로는 알부민(예컨대 사람 혈청 알부민) 및 폴리에틸렌 글리콜(PEG)을 포함한다. 항원 결합 단백질의 알부민-연결된 및 페길화된 유도체는 해당 기술분야에 잘 알려져 있는 기법들을 사용하여 제조될 수 있다. 한 구체예에서, 항원 결합 단백질은 트랜스싸이레틴(TTR) 또는 TTR 변이체에 포합되거나 그렇지 않으면 연결된다. TTR 또는 TTR 변이체는 화학적으로, 예를 들면 덱스트란, 폴리(n-비닐 피롤리돈), 폴리에틸렌 글리콜, 프로프로필렌 글리콜 단일중합체, 폴리프로필렌 옥사이드/에틸렌 옥사이드 공중합체, 폴리옥시에틸화된 폴리올 및 폴리비닐 알코올로 이루어진 군으로부터 선택된 화학물질로 변형될 수 있다.
다른 유도체는 다른 단백질 또는 폴리펩티드와 CD30L 항원 결합 단백질의 공유 또는 응집성 포합체를, 예컨대 CD30L 항원 결합 단백질의 N-말단 또는 C-말단에 융합된 이종성 폴리펩티드를 포함하는 재조합 융합 단백질의 발현에 의해서 포함한다. 예를 들어 포합된 펩티드는 이종성 신호(또는 리더) 폴리펩티드, 예를 들면 이스트 알파-인자 리더, 또는 펩티드, 예컨대 에피토프 태그일 수 있다. CD30L 항원 결합 단백질-함유 융합 단백질은 CD30L 항원 결합 단백질의 정제 또는 확인을 용이하게 하기 위해 첨가된 펩티드(예컨대 폴리-His)를 포함할 수 있다. CD30L 항원 결합 단백질은 또한 문헌에 기술되어 있는 것과 같이 FLAG 펩티드에 연결될 수 있다(Hopp et al., 1988, Bio/Technology 6:1204; 및 미국 특허 번호 5,011,912). FLAG 펩티드는 고도로 항원성이며 특이적 단클론성 항체(mAb)에 의해 역으로 결합된 에피토프를 제공함으로써 발현된 재조합 단백질의 신속한 분석 및 용이한 정제를 가능하게 한다. FLAG 펩티드가 주어진 폴리펩티드에 융합되는 융합 단백질을 제조하기에 유용한 시약은 상업적으로 활용가능하다(Sigma, St. Louis, MO).
하나 또는 그 이상의 CD30L 항원 결합 단백질을 함유하는 올리고머는 CD30L 길항체로서 사용될 수 있다. 올리고머는 공유적으로 연결되거나 비-공유적으로 연결된 이량체, 삼량체 또는 그것보다 큰 올리고머의 형태일 수 있다. 둘 또는 그 이상의 CD30L 항원 결합 단백질을 포함하는 올리고머가 사용될 것으로 고려되는데, 한 실례는 동종이량체이다. 다른 올리고머로는 이종이량체, 동종삼량체, 이종삼량체, 동종사량체, 이종사량체 등이 있다. CD30L 항원 결합 단백질에 융합된 펩티드 부분들 사이의 공유적 또는 비-공유적 상호작용을 통해 연결된 다수의 CD30L 결합 단백질을 포함하는 올리고머도 포함된다. 그런 펩티드는 펩티드 링커(스페이서), 또는 올리고머화를 촉진하는 특성을 가지는 펩티드일 수 있다. 적당한 펩티드 링커 중에는 미국 특허 번호 4,751,180 및 4,935,233에 기술되어 있는 것들이 있다. 그것에 부착된 CD30L 항원 결합 단백질의 올리고머화를 촉진할 수 있는 펩티드들 중에는 로이신 지퍼 및 항체로부터 유도된 특정 폴리펩티드가 있다. 가용성 올리고머 단백질을 생성하기에 적당한 로이신 지퍼 도메인의 실례는 WIPO 공보 번호 WO 94/10308; Hoppe et al., 1994, FEBS Letters 344:191; 및 Fanslow et al., 1994, Semin. Immunol. 6:267-278에 기술되어 있다. 한 접근법에서, CD30L 항원 결합 단백질 단편 또는 로이신 지퍼 펩티드에 융합된 유도체를 포함하는 재조합 융합 단백질이 적당한 숙주 세포에서 발현되고, 형성된 가용성 올리고머 CD30L 항원 결합 단백질 단편 또는 유도체는 배양 상층액으로부터 회수된다.
그런 올리고머는 2 내지 4개의 CD30L 항원 결합 단백질을 포함할 수 있다. 올리고머의 CD30L 항원 결합 단백질 부분은 상기에서 기술된 형태 중 어느 것, 예컨대 변이체 또는 단편일 수 있다. 바람직하게는, 올리고머는 CD30L 결합 활성을 가지는 CD30L 항원 결합 단백질을 포함한다. 올리고머는 면역글로불린으로부터 유도된 폴리펩티드를 사용하여 제조될 수 있다. 항체-유도된 폴리펩티드의 다양한 부분(Fc 도메인을 포함함)에 융합된 특정 이종성 폴리펩티드를 포함하는 융합 단백질의 제조는 예컨대 문헌들에 기술되어 있다: Ashkenazi et al., 1991, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:10535; Byrn et al., 1990, Nature 344:677; 및 Hollenbaugh et al., 1992 "Construction of Immunoglobulin Fusion Proteins", in Current Protocols in Immunology, Suppl. 4, pages 10.19.1-10.19.11.
또한 항체의 Fc 영역에 CD30L 항원 결합 단백질을 융합시킴으로써 생성된 두 개의 융합 단백질을 포함하는 이량체가 포함된다. 이량체는 예를 들면 융합 단백질을 코드화하는 유전자 융합을 적절한 발현 벡터에 삽입하고, 재조합 발현 벡터로 형질전환된 숙주 세포에서 유전자 융합을 발현시키며, 발현된 융합 단백질이 훨씬 더 많이 항체 분자로 조립되도록 허용함으로써 만들어질 수 있고, 이때 사슬간 이황화 결합이 Fc 부분 사이에 형성되어 이량체가 만들어진다. Fc 폴리펩티드는 항체의 Fc 영역으로부터 유도된 폴리펩티드의 천연 및 뮤테인 형태를 포함한다. 이량체화를 촉진하는 힌지 영역을 함유하는 그런 폴리펩티드의 절단된 형태도 또한 포함된다. Fc 부분(및 그것으로부터 형성된 올리고머)을 포함하는 융합 단백질은 단백질 A 또는 단백질 G 칼럼 상에서의 친화성 크로마토그래피에 의한 용이한 정제라는 장점을 제공한다. WIPO 공보 WO 93/10151 및 미국 특허 번호 5,426,048 및 5,262,522에 기술되어 있는 한 가지 적당한 Fc 폴리펩티드는 사람 IgG1 항체의 Fc 영역의 N-말단 힌지 영역으로부터 천연 C-말단까지 뻗어있는 단일 사슬 폴리펩티드이다. 다른 유용한 Fc 폴리펩티드는 미국 특허 번호 5,457,035 및 Baum et al., 1994, EMBO J. 13:3992-4001에 기술되어 있는 Fc 뮤테인이다. 이 뮤테인의 아미노산 서열은 WIPO 공보 WO 93/10151에 표시된 천연 Fc 서열과 동일한데, 단 아미노산 19는 Leu에서 Ala로 바뀌었고, 아미노산 20은 Leu에서 Glu로 바뀌었으며, 아미노산 22는 Gly에서 Ala로 바뀌었다. 뮤테인은 Fc 수용체에 대해 감소된 친화성을 나타낸다.
글리코실화
항원 결합 단백질은 천연 종에서 발견되는 것과 상이하거나 변경된 글리코실화 패턴을 나타낸다. 해당 기술분야에서 알 수 있는 것과 같이, 글리코실화 패턴은 단백질의 서열(예컨대 아래에서 논의되는 것과 같이 특별한 글리코실화 아미노산 잔기의 존재 또는 부재), 또는 그 단백질이 생성되는 숙주 세포 또는 유기체 둘 다에 좌우될 수 있다. 특별한 발현 시스템은 아래에서 논의된다.
폴리펩티드의 글리코실화는 전형적으로 N-연결되거나 O-연결된다. N-연결된이란 아스파라긴 잔기의 측쇄에 탄수화물 부분이 부착되는 것을 말한다. 3-펩티드 서열, 아스파라긴-X-세린 및 아스파라긴-X-쓰레오닌(X는 프롤린을 제외한 어떠한 아미노산)은 아스파라긴 측쇄에 탄수화물 부분을 효소적으로 부착하기 위한 인지 서열이다. 그러므로, 폴리펩티드 중의 이들 3-펩티드 서열 중 어느 하나의 존재는 잠재적인 글리코실화 부위를 생성한다. O-연결된 글리코실화는 당 N-아세틸갈락토사민, 갈락토스 또는 자일로스 중 하나가 하이드록시아미노산, 대부분 통상적으로 세린 또는 쓰레오닌에 부착되는 것을 말하며, 5-하이드록시프롤린 또는 5-하이드록시라이신이 사용될 수도 있다.
글리코실화 부위의 항원 결합 단백질에의 첨가는 아미노산 서열을, 그것이 하나 또는 그 이상의 상기에서 기술된 3-펩티드 서열(N-연결된 글리코실화 부위에 대해)을 포함하도록 변경시킴으로써 관례적으로 이루어진다. 변경은 또한 출발 서열에 하나 또는 그 이상의 세린 또는 쓰레오닌 잔기를 첨가하거나 치환함으로써 이루어질 수도 있다(O-연결된 글리코실화 부위에 대해). 용이하게 하기 위해서는 항원 결합 단백질 아미노산 서열은 DNA 수준에서, 특히 표적 폴리펩티드를 코드화하는 DNA를 미리 선택한 염기에서 돌연변이시킴으로써 원하는 아미노산으로 번역하게 될 코돈을 생성하는 방식의 변화를 통해 변경될 수 있다.
항원 결합 단백질 상의 탄수화물 부분의 수를 증가시키는 다른 수단은 단백질에 글리코시드를 화학적으로 또는 효소적으로 결합시키는 것이다. 이들 과정은 그것이 N- 및 O-연결된 글리코실화에 대한 글리코실화 능력을 가지는 숙주에서 단백질을 생성할 필요가 없다는 장점이 있다. 사용된 결합 방식에 따라, 당(들)은 (a) 아르기닌 및 히스티딘, (b) 유리 카복실기, (c) 유리 설프하이드릴기, 예컨대 시스테인의 유리 설프하이드릴기, (d) 유리 하이드록실기, 예컨대 세린, 쓰레오닌 또는 하이드록시프롤린의 유리 하이드록실기, (e) 방향족 잔기, 예컨대 페닐알라닌, 타이로신 또는 트립토판의 방향족 잔기 또는 (f) 글루타민의 아마이드 기에 부착될 수 있다. 방법들은 PCT 공보 번호 WO 87/05330, 및 Aplin and Wriston, 1981, CRC Crit. Rev, Biochem., pp. 259-306에 기술되어 있다.
출발 항원 결합 단백질 상에 존재하는 탄수화물 부분의 제거는 화학적으로 또는 효소적으로 이루어질 수 있다. 화학적 탈글리코실화는 단백질의 화합물 트라이플루오로메탄설폰산, 또는 동등한 화합물에의 노출을 필요로 한다. 이 처리는 연결 당(N-아세틸글루코사민 또는 N-아세틸갈락토사민)을 제외한 대부분 또는 모든 당의 절단을 초래하지만, 한편으로로 폴리펩티드는 무상으로 남겨둔다. 화학적 탈글리코실화는 문헌에 설명되어 있다(Hakimuddin et al., 1987, Arch. Biochem. Biophys. 259:52 및 Edge et al., 1981, Anal. Biochem. 118:131). 폴리펩티드 상의 탄수화물 부분의 효소적 절단은 문헌에 설명되어 있는 것과 같이 다양한 엔도- 및 엑소-글리코시다제를 사용함으로써 이루어질 수 있다(Thotakura et al., 1987, Meth. Enzymol. 138:350). 잠재적인 글리코실화 부위에서의 글리코실화는 문헌에 설명되어 있는 것과 같이 튜니카마이신 화합물을 사용함으로써 방지될 수 있다(Duskin et al., 1982, J. Biol. Chem. 257:3105). 튜니카마이신은 단백질-N-글리코시드 연쇄의 형성을 차단한다.
그러므로, 본 발명의 어떤 측면은 글리코실화 부위(들)의 수 및/또는 유형이 원래의 폴리펩티드의 아미노산 서열에 비교하여 변경되어 있는 항원 결합 단백질의 글리코실화 변이체를 포함한다. 특정 구체예에서, 항원 결합 단백질 변이체는 원래의 폴리펩티드보다 많거나 적은 N-연결된 글리코실화 부위를 포함한다. 이 서열을 제거하거나 변경하는 치환은 원래의 폴리펩티드에 존재하는 N-연결된 탄수화물 사슬의 첨가를 방지할 것이다. 예를 들면 글리코실화는 Asn을 결실시키거나 또는 상이한 아미노산을 사용하여 Asn을 치환함으로써 감소될 수 있다. 항체는 전형적으로 Fc 영역에 N-연결된 글리코실화 부위를 가진다.
표지 및 이펙터 그룹
항원 결합 단백질은 하나 또는 그 이상의 표지를 포함할 수 있다. 용어 "표지" 또는 "표지화 그룹"은 어떠한 검출가능한 표지를 말한다. 일반적으로 표지는 그것이 검출되어야 하는 분석에 따라 다음과 같이 다양한 부류로 나누어진다: a) 방사성 또는 중동위원소일 수 있는 동위원소 표지; b) 자성 표지(예컨대 자성 입자); c) 산화환원 활성 부분; d) 광학 염료; 효소 기(예컨대 서양고추냉이 산화환원효소, β-갈락토시다제, 루시페라제, 알칼리 포스파타제); e) 비오티닐화된 기; 및 f) 이차 리포터(예컨대 로이신 지퍼 쌍 서열, 이차 항체에 대한 결합 부위, 금속 결합 도메인, 에피토프 태그 등)에 의해 인지된 예정된 폴리펩티드 에피토프. 어떤 구체예에서, 표지화 그룹은 다양한 길이의 스페이서 아암을 통해 항원 결합 단백질에 결합되어 잠재적인 입체 장애가 감소된다. 단백질을 표지화하는 다양한 방법이 해당 기술분야에 공지되어 있다. 적당한 표지화 그룹의 실례로는, 그것들에 한정되는 것은 아니지만 다음과 같은 것들을 포함한다: 방사성 동위원소 또는 방사성 핵종(예컨대 3H, 14C, 15N, 35S, 90Y, 99Tc, 111In, 125I, 131I), 형광 기(예컨대, FITC, 로다민, 란탄계 인광체), 효소 기(예컨대 서양고추냉이 과산화효소, β-갈락토시다제, 루시페라제, 알칼리 포스파타제), 화학발광기, 비오티닐기 또는 이차 리포터(예컨대 로이신 지퍼 쌍 서열, 이차 항체에 대한 결합 부위, 금속 결합 도메인, 에피토프 태그)에 의해 인지된 예정된 폴리펩티드 에피토프. 어떤 구체예에서, 표지화 그룹은 다양한 길이의 스페이서 아암을 통해 항원 결합 단백질에 결합되어 잠재적인 입체 장애가 감소된다. 단백질을 표지화하는 다양한 방법이 해당 기술분야에 공지되어 있고 잘 맞는 것처럼 사용될 수 있다.
용어 "이펙터 그룹"은 세포독성제로서 작용하는 항원 결합 단백질에 결합될 수있는 어떠한 기를 의미한다. 적당한 이펙터 그룹의 실례로는 방사성 동위원소 또는 방사성핵종(예컨대 3H, 14C, 15N, 35S, 90Y, 99Tc, 111In, 125I, 131I)이 있다. 다른 적당한 기로는 독소, 치료기 또는 화학요법 기가 있다. 적당한 그룹의 실례로는 칼리케아마이신, 아우리스타틴, 겔다나마이신 및 마이탄신이 있다. 어떤 구체예에서, 이펙터 그룹은 다양한 길이의 스페이서 아암을 통해 항원 결합 단백질에 결합되어 잠재적인 입체 장애가 감소된다.
CD30L 항원 결합 단백질을 코드화하는 폴리뉴클레오티드
본원에 기술된 항원 결합 단백질 또는 그것의 부분들을 코드화하는 폴리뉴클레오티드가 또한 제공되는데, 이를테면 항체의 하나 또는 두 개의 사슬, 또는 그것의 단편, 유도체, 뮤테인 또는 변이체를 코드화하는 폴리뉴클레오티드, 중쇄 가변 영역 또는 CDR만을 코드화하는 폴리뉴클레오티드, 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드의 확인, 분석, 돌연변이 또는 증폭시키기 위한 혼성화 프로브, PCR 프라이머 또는 서열화 프라이머로서 사용하기에 충분한 폴리뉴클레오티드, 폴리뉴클레오티드의 발현을 억제하기 위한 안티-센스 핵산 및 전술한 것들의 상보성 서열이 제공된다. 폴리뉴클레오티드는 어떠한 길이든지 될 수 있다. 예를 들면 폴리뉴클레오티드는 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 75, 85, 95, 100, 125, 150, 175, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 750, 1,000, 1,500, 3,000, 5,000 또는 그 이상의 길이, 및 그 사이의 어떤 값의 핵산일 수 있고, 및/또는 하나 또는 그 이상의 추가 서열, 예를 들면 조절 서열을 포함할 수 있고, 및/또는 더 큰 폴리뉴클레오티드, 예를 들면 벡터의 부분일 수 있다. 폴리뉴클레오티드는 단일-가닥 또는 이중-가닥일 수 있으며 RNA 및/또는 DNA 핵산 및 그것의 인공 변이체(예컨대 펩티드 핵산)를 포함할 수 있다.
특정 항원 결합 단백질, 또는 그것의 일부(예컨대 전체 길이 항체, 중쇄 또는 경쇄, 가변 도메인, 또는 CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 또는 CDRL3)를 코드화하는 폴리뉴클레오티드는 CD30L 또는 그것의 면역원성 단편으로 면역된 마우스의 B-세포로부터 분리될 수 있다. 폴리뉴클레오티드는 중합효소 연쇄 반응(PCR)과 같은 종래 과정에 의해 분리될 수 있다. 파지 디스플레이는 그것에 의해 항체 및 다른 항원 결합 단백질의 유도체들이 제조될 수 있는 공지된 기법의 또 다른 실례이다. 한 접근법에서, 관심의 항원 결합 단백질의 성분인 폴리펩티드는 어떠한 적당한 재조합 발현 시스템에서 발현되고, 발현된 폴리펩티드는 조립되도록 허용되어 항원 결합 단백질 분자가 형성된다. 파지 디스플레이는 또한 상이한 특성(예컨대 그것이 결합하는 항원에 대해 달라지는 친화성)을 가지는 항원 결합 단백질을 사슬 셔플링(Marks et al., 1992, BioTechnology 10:779)을 통해 유도하기 위해 사용된다.
유전자 코드의 축퇴성으로 인해, 본원에서 묘사된 각각의 폴리펩티드 서열은 또한 제공된 것 외에도 대다수의 다른 폴리뉴클레오티드 서열에 의해 코드화된다. 예를 들어 본원에 제공된 중쇄 가변 도메인은 폴리뉴클레오티드 서열 SEQ ID NO:49, 51, 53, 55, 57, 59, 61, 63, 65, 67, 69, 71 및 73에 의해 코드화될 수 있다. 경쇄 가변 도메인은 폴리뉴클레오티드 서열 SEQ ID NO:37, 39, 41, 43, 45 및 47에 의해 코드화될 수 있다. 해당 기술분야의 숙련자는 따라서 본 발명이 각각의 항원 결합 단백질을 코드화하는 각각의 축퇴성 뉴클레오티드 서열에 대한 적당한 서면상의 설명 및 구현을 제공한다는 것을 인정할 것이다.
발명의 한 측면은 추가로 특별한 혼성화 조건 하에서 다른 폴리뉴클레오티드 분자에 혼성화하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다. 핵산을 혼성화하기 위한 방법, 혼성화 조건의 선택에 영향을 미치는 기본적인 변수들 및 적당한 조건을 고안하기 위한 지침들은 해당 기술분야에 잘 알려져 있다. 예컨대 Sambrook, Fritsch, and Maniatis (2001, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. 및 Current Protocols in Molecular Biology, 1995, Ausubel et al., eds., John Wiley & Sons, Inc. 참조. 본원에서 규정된 바와 같이, 적당하게 엄격한 혼성화 조건은 5×염화나트륨/시트르산 나트륨(SSC), 0.5%의 SDS, 1.0mM이 EDTA(pH 8.0), 약 50% 폼아마이드의 혼성화 완충액, 6×SSC 및 55℃의 혼성화 온도(또는 다른 유사한 혼성화 용액, 예컨대 약 50%의 폼아마이드를 함유하는 용액과 42℃의 혼성화 온도)를 함유하는 사전 세척 용액, 및 0.5×SSC, 0.1% SDS 중에서의 60℃의 세척 조건을 사용한다. 엄격한 혼성화 조건은 45℃에서 6×SSC에서 혼성화하고, 이어서 68℃에서 0.1×SSC, 0.2% SDS중에서 1회 또는 그 이상 세척한다. 나아가 해당 기술분야의 숙련자는 혼성화의 엄격성을 증가 또는 줄이기 위하여 혼성화 및/또는 세척 조건을 조작할 수 있어서, 상호간에 적어도 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한(그 사이의 모든 값을 포함함) 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드가 전형적으로 상호간에 혼성화된 상태를 유지할 수 있다.
변화는 폴리뉴클레오티드 안으로의 돌연변이에 의해 도입될 수 있어서, 그것이 코드화하는 폴리펩티드(예컨대 항원 결합 단백질 또는 항원 결합 단백질 유도체)의 아미노산 서열의 변화를 초래한다. 돌연변이는 해당 기술분야에 공지되어 있는 어떠한 기법, 예를 들면 부위-특정 돌연변이생성 및 무작위 돌연변이생성을 사용하여 도입될 수 있다. 돌연변이 폴리펩티드는 발현되고 원하는 특성에 대해 선택될 수 있다. 돌연변이는 그것이 코드화하는 폴리펩티드의 생물학적 활성을 유의미하게 변경시키지 않으면서 폴리뉴클레오티드 안에 도입될 수 있다. 예를 들면 비-필수 아미노산 잔기에서의 치환을 들 수 있다. 또는 달리 하나 또는 그 이상의 돌연변이가 그것이 코드화하는 폴리펩티드의 생물학적 활성을 선택적으로 바꾸는 폴리뉴클레오티드 안에 도입될 수 있다. 예를 들면 돌연변이는 생물학적 활성을 정량적으로 또는 정성적으로 바꿀 수 있는데, 예를 들면 항원 결합 단백질의 활성을 증가, 감소 또는 제거하고 항원 특이성을 변화시킬 수 있다.
또 다른 측면은 핵산 서열의 검출을 위한 프라이머 또는 혼성화 프로브로서 사용하기에 적당한 폴리뉴클레오티드를 제공한다. 폴리뉴클레오티드는 전체-길이 폴리펩티드를 코드화하는 핵산 서열의 단지 일부, 예를 들면 프로브 또는 프라이머로서 사용될 수 있는 단편 또는 폴리펩티드의 활성 부분(예컨대 CD30L 결합 부분)을 코드화하는 단편을 포함할 수 있다. 핵산의 서열을 기초로 한 프로브는 핵산 또는 유사한 핵산, 예를 들면 폴리펩티드를 코드화하는 전사물을 검출하기 위해 사용될 수 있다. 프로브는 표지 그룹, 예컨대 방사성 동위원소, 형광 화합물, 효소 또는 효소 보조-인자를 포함할 수 있다. 그런 프로브는 폴리펩티드를 발현하는 세포를 확인하기 위해 사용될 수 있다.
항원 결합 단백질의 발현 방법
본원에 제공된 항원 결합 단백질은 많은 종래의 기법들 중 어느 것에 의해 제조될 수 있다. 예를 들면 CD30L 항원 결합 단백질은 재조합 발현 시스템에 의해, 해당 기술분야에 공지되어 있는 어떠한 기법이든지 사용하여 제조될 수 있다. 예컨대 Monoclonal Antibodies, Hybridomas: A New Dimension in Biological Analyses, Kennet et al.(eds.) Plenum Press, New York (1980); 및 Antibodies: A Laboratory Manual, Harlow and Lane (eds.), Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1988) 참조.
상기에서 기술된 것과 같은 적어도 하나의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 시스템 및 플라스미드, 발현 벡터, 전사 또는 발현 카세트 형태의 구성물뿐 아니라 그런 발현 시스템 또는 구성물을 포함하는 숙주 세포가 또한 본원에 제공된다. 본원에서 사용된 것과 같이, "벡터"는 숙주 세포 안에 단백질 코딩 정보를 전달하기 위해 사용하기에 적당한 어떠한 분자 또는 실체(예컨대 핵산, 플라스미드, 박테리오파지 또는 바이러스)를 의미한다. 벡터의 실례로는, 그것들에 한정되는 것은 아니지만, 플라스미드, 바이러스 벡터, 비-에피솜성 포유류 벡터 및 발현 벡터, 예를 들면 재조합 발현 벡터를 포함한다. 발현 벡터, 예컨대 재조합 발현 벡터는 숙주 세포의 형질전환에 유용하고 그것에 작동가능하게 연결된 하나 또는 그 이상의 이종성 코딩 영역의 발현을 지시 및/또는 제어하는(숙주 세포와 함께) 핵산 서열을 함유한다. 발현 구성물은 예를 들면 그것에 한정되는 것은 아니지만, 전사, 번역 및 존재하는 경우 인트론에 영향을 미치거나 제어하는, 그것에 작동하게 연결된 코딩 영역의 RNA 스플라이싱에 영향을 미치는 서열들을 포함한다. "작동가능하게 연결된"은 이 용어가 적용되는 성분들이 그것들의 고유한 기능을 수행할 수 있는 관계에 있는 것을 의미한다. 예를 들면 단백질 코딩 서열에 "작동가능하게 연결되어 있는" 제어 서열, 예컨대 프로모터는 제어 서열의 정상적인 활성이 단백질 코딩 서열의 전사를 유도하여 코드화된 단백질의 재조합 발현을 초래하도록 배열된다.
또 다른 측면은 발현 벡터, 예컨대 재조합 발현 벡터가 도입되는 숙주 세포를 제공한다. 숙주 세포는 어떠한 원핵 세포(예컨대 대장균) 또는 진핵 세포(예컨대 효모, 곤충 또는 포유류 세포(예를 들면 CHO 세포))일 수 있다. 벡터 DNA는 원핵 또는 진핵 세포에 종래의 형질전환 기법들을 통해 도입될 수 있다. 포유류 세포의 안정적인 형질전환을 위해, 사용된 발현 벡터 및 형질전환 기법에 따라 단지 세포의 작은 분획이 외래 DNA를 그것의 게놈 안으로 통합시킬 수 있다. 이들 통합물을 확인하고 선택하기 위하여, 선택가능한 마커(예컨대 항생물질에 대한 내성에 대한 마커)를 코드화하는 유전자가 일반적으로 관심의 유전자와 함께 숙주 세포 안으로 도입된다. 바람직한 선택가능한 마커는 G418, 하이그로마이신 및 메토트렉세이트와 같은 약물에 대한 내성을 부여하는 것들을 포함한다. 도입된 폴리뉴클레오티드로 안정적으로 형질전환된 세포는 다른 방법들 중에서도 약물 선택(예컨대 선택가능한 마커를 통합한 세포들은 생존하는 한편, 다른 세포들은 죽음)에 의해 확인될 수 있다.
항원 결합 단백질은 하이브리도마 셀라인에서(예컨대 특별한 항체는 하이브리도마에서 발현될 수 있다) 또는 하이브리도마 외의 셀라인에서 발현될 수 있다. 항원 결합 단백질을 코드화하는 발현 구성물이 포유류, 곤충 또는 미생물 숙주 세포를 형질전환하기 위해 사용될 수 있다. 형질전환은 숙주 세포 안으로 폴리뉴클레오티드를 도입하기 위한 어떠한 공지된 방법, 이를테면 예컨대 미국 특허 번호 4,399,216; 4,912,040; 4,740,461; 4,959,455에 의해 예시되어 있는 것과 같이, 바이러스 또는 박테리오파지에 폴리뉴클레오티드를 패키징하고 숙주 세포를 해당 기술분야에 공지되어 있는 형질전환 과정에 의해 구성물로 형질도입함으로써 수행될 수 있다. 사용된 최적의 형질전환 과정은 형질전환시키고자 하는 숙주 세포의 유형에 따라 좌우될 것이다. 포유류 세포 안에 이종성 폴리뉴클레오티드를 도입하기 위한 방법은 해당 기술분야에 잘 알려져 있고, 예를 들면 그것들에 한정되는 것은 아니지만, 덱스트란-중재된 형질전환, 칼슘 포스페이트 침전, 폴리브렌 중재된 형질전환, 원형질체 융합, 일렉트로포레이션, 폴리뉴클레오티드(들)의 리포솜에의 캡슐화, 핵산과 포지티브-전하 지질과의 혼합 및 DNA의 핵 안으로의 직접 마이크로주사가 있다.
재조합 발현 구성물은 전형적으로 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 포함한다. 폴리펩티드는 하나 또는 그 이상의 다음의 것들을 포함할 수 있다: 하나 또는 그 이상의 본원에서 제공된 것과 같은 CDR; 경쇄 가변 영역; 중쇄 가변 영역; 경쇄 불변 영역; 중쇄 불변 영역(예컨대 CH1, CH2 및/또는 CH3); 및/또는 CD30L 항원 결합 단백질의 또 다른 스캐폴드 부분. 이들 핵산 서열은 표준 결찰 기법을 사용하여 적절한 발현 벡터 안으로 삽입된다. 한 구체예에서, 중쇄 또는 경쇄 불변 영역은 본원에 제공된 중쇄 또는 경쇄 가변 영역의 C-말단에 첨부되고 발현 벡터 안으로 결찰된다. 벡터는 전형적으로 사용된 특별한 숙주 세포에서 기능적이 되도록 선택된다(즉 벡터는 숙주 세포 기계와 부합할 수 있어서 유전자의 증폭 및/또는 발현이 일어나는 것을 허용한다). 어떤 구체예에서, 단백질 리포터, 예컨대 다이하이드로폴레이트 환원효소를 사용하여 단백질-단편 상보 분석을 사용하는 벡터가 사용된다(예컨대 미국 특허 번호 6,270,964 참조). 적당한 발현 벡터는 예를 들면 Invitrogen Life Technologies(Carlsbad, CA) 또는 BD Biosciences(San Jose, CA)로부터 구매할 수 있다. 항체 및 단편의 클로닝 및 발현을 위한 다른 유용한 벡터로는 Bianchi and McGrew, 2003, Biotech. Biotechnol. Bioeng. 84:439-44에 기술된 것들을 포함한다. 추가의 적당한 발현 벡터는 예를 들면 Methods Enzymol., vol. 185 (D. V. Goeddel, ed.), 1990, New York: Academic Press에서 논의된다.
전형적으로, 숙주 세포 중 어느 것에서든지 사용된 발현 벡터는 플라스미드 유지 및 외인성 뉴클레오티드 서열의 클로닝 및 발현을 위한 서열을 함유할 것이다. 그런 서열은 어떤 구체예에서는 포괄적으로, 전형적으로 하나 또는 그 이상의 다음의 뉴클레오티드 서열을 포함할 "플랭킹 서열"을 언급한다: 프로모터, 하나 또는 그 이상의 인핸서 서열, 복제 기원, 전사 종결 서열, 공여체 및 수용체 스플라이스 부위를 함유하는 완전한 인트론 서열, 폴리펩티드 분비를 위한 리더 서열을 코드화하는 서열, 리보솜 결합 부위, 폴리아데닐화 서열, 발현될 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 삽입하기 위한 폴리링커 영역 및 선택가능한 마커 요소. 제공되는 발현 벡터는 상업적으로 활용할 수 있는 벡터와 같은 출발 벡터로부터 구성될 수 있다. 하나 또는 그 이상의 본원에 기술된 플랭킹 서열이 이미 벡터에 존재하지 않는 경우, 플랭킹 서열은 개별적으로 얻어질 수 있고 벡터 안에 결찰될 수 있다. 각각의 플랭킹 서열을 얻기 위해 사용된 방법은 해당 기술분야의 숙련자에게 잘 알려져 있다.
임의로, 벡터는 "태그"-코드화 서열, 즉 CD30L 항원 결합 단백질 코딩 서열의 5' 또는 3' 단부에 위치한 올리고뉴클레오티드 분자; 폴리His(예컨대 헥사His)를 코드화하는 올리고뉴클레오티드 서열, 또는 또 다른 "태그", 예컨대 그것들에 대한 항체가 상업적으로 활용가능한 FLAG®, HA(헤마글루티닌 인플루엔자 바이러스), 또는 myc를 함유할 수 있다. 이 태그는 전형적으로 폴리펩티드의 발현 시에 폴리펩티드에 융합되고, 숙주 세포로부터 CD30L 항원 결합 단백질의 친화성 정제 또는 검출을 위한 수단으로서 활용될 수 있다. 친화성 정제는 예를 들면 태그에 대한 항체를 친화성 매트릭스로서 사용하는 칼럼 크로마토그래피에 의해 이루어질 수 있다. 임의로, 태그는 계속해서 정제된 CD30L 항원 결합 단백질로부터 다양한 수단, 예를 들면 절단용 특정 펩티다제를 사용하여 제거될 수 있다.
플랭킹 서열은 상동성이거나(즉 숙주 세포와 동일한 종 및/또는 균주로부터), 이종성이거나(즉 숙주 세포 종 또는 균주 이외의 종으로부터), 하이브리드이거나(즉 하나 이상의 공급원으로부터의 플랭킹 서열의 조합), 합성 또는 천연의 것일 수 있다. 플랭킹 서열의 공급원은 그 자체로 플랭킹 서열이 그 안에서 기능적이기만 하다면 원핵 또는 진핵 유기체, 어떠한 척추동물 또는 무척추동물 유기체, 또는 어떠한 식물일 수 있고, 숙주 세포 기계에 의해 활성화될 수 있다.
벡터에 유용한 플랭킹 서열은 해당 기술분야에 잘 알려져 있는 여러 방법 중 어느 것에 의해서든지 얻어질 수 있다. 전형적으로, 본원에서 유용한 플랭킹 서열은 지도화에 의해 및/또는 제한 엔도뉴클레아제 소화에 의해 이미 확인되어 있을 것이고, 따라서 적절한 제한 엔도뉴클레아제를 사용하여 적절한 조직 공급원으로부터 분리될 수 있다. 어떤 경우에, 플랭킹 서열의 완전한 뉴클레오티드 서열이 알려질 수 있다. 본원에서 플랭킹 서열은 핵산 합성 또는 클로닝을 위해 본원에 기술된 방법들을 사용하여 합성될 수 있다.
플랭킹 서열의 전체 또는 부분만이 알려져 있더라도, 플랭킹 서열은 중합효소 연쇄 반응(PCR)을 사용하여 및/또는 적당한 프로브, 예컨대 동일한 또는 다른 종으로부터의 올리고뉴클레오티드 및/또는 플랭킹 서열 단편을 사용하여 게놈 라이브러리를 선별함으로써 얻어질 수 있다. 플랭킹 서열이 공지되어 있지 않은 경우, 플랭킹 서열을 함유하는 DNA의 단편은 예를 들면 코딩 서열 또는 심지어 또 다른 유전자 또는 유전자들을 함유할 수 있는 DNA의 더 큰 조각으로부터 분리될 수 있다. 분리는 적절한 DNA 단편을 생성하기 위한 제한 엔도뉴클레아제 소화와 이어서 아가로스 겔 정제, Qiagen® 칼럼 크로마토그래피(QiagenM Chatsworth, CA) 또는 숙련된 전문가에게 공지되어 있는 다른 방법들을 사용한 분리에 의해 이루어질 수 있다. 이 목적을 달성하기 위한 적당한 효소의 선택은 해당 기술분야의 숙련자에게 쉽게 드러날 것이다.
복제 기원은 전형적으로 상업적으로 구매할 수 있는 원핵 발현 벡터의 부분이고, 그것은 숙주 세포에서 벡터의 증폭을 보조한다. 만약 선택된 벡터가 복제 기원 부위를 함유하고 있지 않다면, 누구든지 공지된 서열을 토대로 화학적으로 합성하고, 벡터에 결찰시킬 수 있다. 예를 들어 플라스미드 pBR322(New England Biolabs, Beverly, MA)로부터의 복제 기원은 대부분의 그람-네거티브 박테리아에 적당하고, 다양한 바이러스 기원(예컨대 SV40, 폴리오마, 아데노바이러스, 수포성 구내염 바일스(VSV) 또는 유두종 바이러스, 예컨대 HPV 또는 BPV)은 포유류 세포에 벡터를 클로닝하는 데 유용하다. 일반적으로 복제 기원 성분은 포유류 발현 벡터에는 필요하지 않다(예를 들어 SV40 기원은 단지 그것이 바이러스 초기 프로모터를 함유하기 때문에 자주 사용된다).
전사 종결 서열은 전형적으로 폴리펩티드 코딩 영역의 단부의 3'에 위치하고 전사를 종결시키는 작용을 한다. 통상적으로, 원핵 세포의 전사 종결 서열은 G-C가 풍부한 단편이고, 그 뒤에 폴리-T 서열이 이어진다. 서열은 쉽게 라이브러리로부터 클론되거나 벡터의 부분으로서 상업적으로 구매할 수 있지만, 또한 본원에 기술된 것과 같은 핵산 합성을 위한 방법들을 사용하여 쉽게 합성될 수 있다.
선택가능한 마커 유전자는 선택적 배양 배지에서 성장된 숙주 세포의 생존 및 성장에 필요한 단백질을 코드화한다. 전형적인 선택 마커 유전자는 (a) 원핵 숙주 세포에 대해 항생물질 또는 다른 독소, 예컨대 암피실린, 테트라사이클린 또는 카나마이신에 대한 내성을 부여하고; (b) 세포의 보충물 영양요구성이 결핍되며; 또는 (c) 복합체 또는 규정된 배지로부터 활용할 수 없는 결정적 영양분을 공급하는 단백질을 코드화한다. 특이적인 선택가능한 마커는 카나마이신 내성 유전자, 암피실린 내성 유전자 및 테트라사이클린 내성 유전자이다. 유익하게도, 네오마이신 내성 유전자가 또한 원핵 및 진핵 숙주 세포 둘 다에서의 선택을 위해 사용될 수 있다.
다른 선택가능한 유전자는 발현될 유전자를 증폭시키기 위해 사용될 수 있다. 증폭은 성장 또는 세포 성장에 결정적인 단백질의 생성에 필요한 유전자가 재조합 세포의 연속적인 생성의 염색체 내에서 한줄로 반복되는 과정이다. 포유류 세포에 대한 적당한 선택가능한 마커의 실례는 다이하이드로폴레이트 환원효소(DHFR) 및 프로모터가 없는 싸이미딘 키나제 유전자를 포함한다. 포유류 세포 형질전환체는 선택 압력 하에 놓이는데, 그 환경에서 단지 형질전환체만이 벡터에 존재하는 선택가능한 유전자에 의해 생존하도록 유일하게 채택된다. 선택 압력은 배지 중의 선택제 농도가 연속적으로 증가되는 조건 하에서 형질전환된 세포를 배양함으로써 부과되는데, 그로써 선택가능한 유전자와 다른 유전자, 예컨대 CD30L에 결합하는 항원 결합 단백질을 코드화하는 DNA가 둘 다 증폭되는 것이 유도된다. 그 결과로서, 증가된 양의 폴리펩티드, 예컨대 항원 결합 단백질이 증폭된 DNA로부터 합성된다.
리보솜-결합 부위는 통상적으로 mRNA의 번역 개시에 필요하고, 샤인-달가노 서열(원핵 세포) 또는 Kozak 서열(진핵 세포)을 특징으로 한다. 이 요소는 전형적으로 프로모터에 대해 3'에, 발현될 폴리펩티드의 코딩 서열에 대해 5'에 위치한다.
어떤 경우에, 예컨대 진핵 숙주 세포 발현 시스템에서 글리코실화가 바람직한 경우에, 글리코실화 또는 수율을 향상시키기 위하여 다양한 프레- 또는 프로-서열을 조작할 수 있다. 예를 들어 특별한 신호 펩티드의 펩티다제 절단 부위를 변경하거나, 글리코실화에 또한 영향을 미칠 수 있는 프로서열을 첨가할 수 있다. 최종 단백질 생성물은 -1 위치(성숙한 단백질의 첫 번째 아미노산과 관련하여)에 하나 또는 그 이상의 추가의 아미노산 사건을 포함할 수 있고, 그것은 전체적으로 제거되지 않을 수 있다. 예를 들어 최종 단백질 생성물은 펩티다제 절단 분위에서 발견되고 아미노-말단에 부착된 하나 또는 두 개의 아미노산 잔기를 가질 수 있다. 또는 다르게는, 어떤 효소 절단 부위의 사용은, 그 효소가 성숙한 폴리펩티드 내에서 그런 지역을 절단한다면 원하는 폴리펩티드의 약간 절단된 형태를 유발할 수 있다.
발현 및 클로닝은 전형적으로 숙주 유기체에 의해 인지되고 CD30L 항원 결합 단백질을 코드화하는 분자에 작동가능하게 연결된 프로모터를 함유할 것이다. 프로모터는 구조적 유전자의 전사를 제어하는 구조적 유전자(대체로 약 100 내지 1000bp 내에 있다)의 출발 코돈에 대해 상류(즉 5')에 위치한 미전사 서열이다. 프로모터는 관례적으로 두 가지 부류 중 하나로 그룹화된다: 유도성 프로모터와 본질성 프로모터. 유도성 프로모터는 배양 조건의 어떤 변화, 예컨대 영양분의 존재 또는 부재 또는 온도 변화에 대한 반응으로 제어하에 DNA로부터 증가된 수준의 전사를 개시한다. 다른 한편으로, 본질성 프로모터는 그것들이 작동가능하게 연결되는 유전자를 균질하게 전사한다, 즉 유전자 발현에 대해 약간 제어되거나 전혀 제어되지 않는다. 다양한 잠재적인 숙주 세포에 의해 인지되는 대다수의 프로모터가 잘 알려져 있다. 적당한 프로모터는 제한 효소 소화에 의해 공급원 DNA로부터 프로모터를 제거하고, 원하는 프로모터 서열을 벡터 안에 삽입함으로써, CD30L 항원 결합 단백질의 중쇄 가변 영역 또는 경쇄 가변 영역을 코드화하는 DNA에 작동가능하게 연결된다.
효모 숙주와 함께 사용하기에 적당한 프로모터는 해당 기술분야에 잘 알려져 있다. 효모 인핸서는 유익하게도 효모 프로모터와 함께 사용된다. 포유류 숙주 세포와 함께 사용하기에 적당한 프로모터는 잘 알려져 있으며, 예를 들면 그것들에 한정되는 것은 아니지만, 바이러스, 예컨대 폴리오마 바이러스, 계두 바이러스, 아데노바이러스(예컨대 아데노바이러스 2), 소 유두종 바이러스, 조류 육종 바이러스, 사이토메갈로바이러스, 레트로바이러스, B형 간염 바이러스 및 유인원 바이러스 40(SV40)의 게놈으로부터 얻어진 것들을 포함한다. 다른 적당한 포유류 프로모터로는 이종성 포유류 프로모터, 예를 들면 열충격 프로모터 및 액틴 프로모터를 포함한다.
관심의 대상인 추가의 프로모터로는, 그것들에 한정되는 것은 아니지만 다음과 같은 것들을 포함한다: SV40 초기 프로모터(Benoist and Chambon, 1981, Nature 290:304-310); CMV 프로모터(Thornsen et al., 1984, Proc. Natl. Acad. U.S.A. 81:659-663); 라우스 육종 바이러스의 3' 긴 말단 반복부에 함유된 프로모터(Yamamoto et al., 1980, Cell 22:787-797); 헤르페스 싸이미딘 키나제 프로모터(Wagner et al., 1981, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 78:1444-1445); 메탈로티오닌 유전자로부터의 프로모터 및 조절 서열(Prinster et al., 1982, Nature 296:39-42); 및 베타-락타마제 프로모터(Villa-Kamaroff et al., 1978, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 75:3727-3731) 또는 tac 프로모터(DeBoer et al., 1983, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 80:21-25)와 같은 원핵 프로모터. 또한 관심의 대상은 조직 특이성을 나타내고 유전자도입 동물에서 활용되는 다음의 동물 전사 제어 영역이다: 췌장 선포세포에서 활성인 엘라스타제 I 유전자 제어 영역(Swift et al., 1984, Cell 38:639-646; Ornitz et al., 1986, Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol. 50:399-409; MacDonald, 1987, Hepatology 7:425-515); 췌장 베타 세포에서 활성인 인슐린 유전자 제어 영역(Hanahan, 1985, Nature 315:115-122); 림프종 세포에서 활성인 면역글로불린 유전자 제어 영역(Grosschedl et al., 1984, Cell 38:647-658; Adames et al., 1985, Nature 318:533-538; Alexander et al., 1987, Mol. Cell. Biol. 7:1436-1444); 고환, 유방, 림프종 및 비만 세포에서 활성인 마우스 유방암종 바이러스 제어 영역(Leder et al., 1986, Cell 45:485-495); 간에서 활성인 알부민 유전자 제어 영역(Pinkert et al., 1987, Genes and Devel. 1 :268-276); 간에서 활성인 알파-태아-단백질 유전자 제어 영역(Krumlauf et al., 1985, Mol. Cell. Biol. 5:1639-1648; Hammer et al., 1987, Science 253:53-58); 간에서 활성인 알파 1-항트립신 유전자 제어 영역(Kelsey et al., 1987, Genes and Devel. 1:161-171); 골수종 세포에서 활성인 베타-글로빈 유전자 제어 영역(Mogram et al., 1985, Nature 315:338-340; Kollias et al., 1986, Cell 46:89-94); 뇌의 희소 돌기 아교 세포에서 활성인 미엘린 염기성 단백질 유전자 제어 영역(Readhead et al., 1987, Cell 48:703-712); 골격근에서 활성인 미오신 경쇄-2 유전자 제어 영역(Sani, 1985, Nature 314:283-286); 및 시상하부에서 활성인 고나도트로핀 방출 호르몬 유전자 제어 영역(Mason et al., 1986, Science 234:1372-1378).
인핸서 서열은 고등 진핵생물에 의해 전사를 증가시키기 위해 벡터 안에 삽입될 수 있다. 인핸서는 DNA의 시스-작용 요소이며, 통상적으로 약 10 내지 300pb 길이이고, 전사를 증가시키기 위해 프로모터에 대해 작용한다. 인핸서는 상대적으로 방향 및 위치와 무관하며, 전사 유닛의 5' 및 3' 양 위치에서 발견된다. 포유류 유전자로부터 활용할 수 있는 여러 인핸서 서열이 알려져 있다(예컨대 글로빈, 엘라스타제, 알부민, 알파-태아-단백질 및 인슐린). 그러나 전형적으로, 바이러스로부터 유래된 인핸서가 사용된다. 해당 기술분야에 공지되어 있는 SV40 인핸서, 사이토메갈로바이러스 초기 프로모터 인핸서, 폴리오마 인핸서 및 아데노바이러스 인핸서가 진핵생물 프로모터의 활성화에 대한 예시적인 증강 요소이다. 인핸서는 코딩 서열의 5' 및 3'의 어느 쪽이든 벡터에 위치할 수 있지만, 전형적으로는 프로모터로부터 5'쪽 부위에 위치한다. 적절한 천연 또는 이종성 신호 서열(리더 서열 또는 신호 펩티드)을 코드화하는 서열이 항체의 세포외재성 분비를 촉진하기 위하여 발현 벡터 안에 통합될 수 있다. 신호 펩티드 또는 리더의 선택은 항체가 생성되고, 이종성 신호 서열이 천연 신호 서열을 대신할 수 있는 숙주 세포의 유형에 따라 좌우된다. 포유류 숙주 세포에서 기능적인 신호 펩티드의 실례는 다음의 것들을 포함한다: 미국 특허 번호 4,965,195에 기술된 인터류킨-7에 대한 신호 서열; Cosman et al.,1984, Nature 312:768에 기재되어 있는 인터류킨-2 수용체에 대한 신호 서열; 유럽 특허 번호 0 367 566에 기술되어 있는 인터류킨-4 수용체 신호 펩티드; 미국 특허 번호 4,968,607에 기술된 제 I 유형 인터류킨-1 수용체 신호 펩티드; 유럽 특허 번호 0 460 846에 기술된 제 II 유형 인터류킨-1 수용체 신호 펩티드.
벡터가 구성된 후에, 완성된 벡터는 증폭 및/또는 폴리펩티드 발현을 위해 적당한 숙주 세포 안에 삽입될 수 있다. 항원 결합 단백질에 대한 발현 벡터의 선택된 숙주 세포 안으로의 형질전환은 형질전환, 감염, 칼슘 포스페이트 공동-침전, 일렉트로포레이션, 마이크로주입, 리포펙션, DEAE-덱스트란 중재된 형질전환 또는 다른 공지된 기법들을 포함한 잘 알려져 있는 방법들에 의해 이루어질 수 있다. 선택된 방법은 부분적으로는, 사용되는 숙주 세포 유형의 기능일 것이다. 이들 방법 및 다른 적당한 방법은 숙련된 전문가에게 잘 알려져 있으며, 예를 들면 문헌에 설명되어 있다(Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (2001)).
숙주 세포는 적절한 조건 하에서 배양될 때, 배양 배지로부터(만약 숙주 세포가 단백질을 배지 안으로 분비한다면) 또는 그것을 생성하는 숙주 세포로부터 직접(만약 단백질이 분비되지 않는다면) 계속해서 수집될 수 있는 단백질을 합성한다. 적절한 숙주 세포의 선택은 다양한 요인, 예컨대 원하는 발현 수준, 활성에 대해 바람직한 또는 필요한 폴리펩티드 변형(예컨대 글리코실화 또는 인산화) 및 생물학적으로 활성인 분자로의 용이한 접힘에 따라 좌우될 것이다.
발현을 위한 숙주로서 활용할 수 있는 포유류 셀라인은 해당 기술분야에 공지이고 예를 들면 그것들에 한정되는 것은 아니지만, 아메리칸 타입 컬춰 콜렉션(ATCC)으로부터 활용할 수 있는 불멸화된 셀라인, 이를테면 차이니즈 햄스터 난소(CHO) 세포, HeLa 세포, 어린 햄스터 신장(BHK) 세포, 원숭이 신장 세포(COS), 사람 간세포 암종 세포(예컨대 Hep G2) 및 많은 다른 셀라인이 있다. 특정 구체예에서, 셀라인은 어떤 셀라인이 높은 발현 수준을 나타내고 CD30L 결합 특성을 가지는 항원 결합 단백질을 본질적으로 생성하는 지에 대한 측정을 통해 선택될 수 있다. 다른 구체예에서, 자체의 항체를 만들지는 못하지만 이종성 항체를 만들고 분비할 수 있는 능력을 가지고 있는 B 세포 계통으로부터의 셀라인도 또한 선택될 수 있다. 다른 구체예에서, 퓨코실트란스페라제는 전체 또는 부분적인 아퓨코실화된 항체를 생성하는 셀라인을 녹-아웃시킨다(미국 특허 6,946,292, US 7,425,446, US 7,846,725, US 8,067,232, Potelligent® 세포, BioWa, Princeton, NJ).
CD30L 시험관 내 생체분석
또한 본 발명에는 CD30/CD3L 상호작용을 억제하는 길항체를 확인하기 위한 방법이 제공된다. 이들 방법은 CD30L에 대한 반응으로 CD30+ 세포로부터 생성된 마커 사이토킨의 유도를 사용한다. 방법은 CD30L의 공급원과 관심의 시험 화합물을 조합시키는 단계; 시험 화합물/CD30L 조합을 CD30과 CD30L의 상호작용에 대한 반응으로 마커 사이토킨을 발현할 수 있는 CD30+ 세포에 첨가하는 단계; 세포 상층액을 수득하는 단계; 그리고 세포 상층액에서 생성된 및/또는 상층액으로 방출된 마커 사이토킨의 양을 측정함으로써 시험화합물이 CD30/CD30L 상호작용을 억제하는 지의 여부를 측정하는 단계를 포함한다. 예를 들어 그런 CD30L-의존성 시험관내 생체분석은 사람 악성 큰세포 림프종(ALCL) 셀라인, 내인성 CD30의 Karpas-299(K299) 발현 및 CD30과 CD30L의 상호작용에 대한 반응으로 이들 세포로부터의 IL-8의 방출을 활용할 수 있다. 이들 방법은 나아가 본원에 제공된 실시예에서 예시된다.
시험 화합물은 CD30L 항원 결합 단백질, 이를테면, 그것들에 한정되는 것은 아니지만 항체, 그것의 항원 결합 단편 및 그것들의 유도체를 포함한다. 시험 화합물은 또한 재조합 가용성 CD30 화합물(예컨대 Fc 태그, 폴리-HIS 태그, FLAG®-태그 등과 융합된 CD30 세포외재성 도메인)뿐 아니라 작은 분자를 포함할 수 있다. 적당한 CD30+ 셀라인은 CD30과 CD30L의 상호작용에 대한 반응으로 마커 사이토킨을 발현하고; 그런 셀라인은 사람 CD30+ 악성 큰세포 림프종 셀라인 K299(Karpas-299, DSMZ, Germany)를 포함한다.
CD30L에 대한 공급원은 가용성 CD30L 구성물 및 막 결합된 CD30L을 포함한다. 가용성 CD30L은 CD30L 단편, 바람직하게는 CD30L의 세포외재성 영역의 단편을 포함하는 키메릭 조성물을 포함한다. 그런 가용성 구성물은 다량체 로이신 또는 아이소로이신 지퍼 구성물을 포함한다. 그런 구성물은 사람 또는 게먹이 원숭이 CD30L의 세포외재성 도메인의 N-말단에 부착된 33개의 아미노산 로이신 지퍼 모티프를 포함한다. 가용성 재조합 CD30L 구성물은 또한 상업적으로 활용가능하다(R&D Systems, Minneapolis, MN). 다른 가용성 CD30L은 또한 FLAG®-태그(Axxora LLC, San Diego, CA)에 융합된 CD30L 세포외재성 도메인을 포함한다. 막 결합된 CD30L은 천연 및 형질전환된 CD30L 발현 세포 및 셀라인을 포함한다. 그런 셀라인은, 그것에 한정되는 것은 아니지만 예컨대 CD30L+ 사람 B 셀라인 Ramos(ATCC, Manassas, VA)을 포함한다. 또한 게먹이 원숭이 혈액 T 세포와 마우스 수지상 돌기 셀라인이 포함된다.
본원에는 CD30L이 CD30+ 세포로부터 IL-8 생성을 유도하는 것을 측정하기 위한 방법이 제공되는데, 그 방법은 시험 화합물을 CD30L의 공급원과 조합하는 단계; 그 시험 화합물-CD30L 조합을 조사된(irradiated) CD30+ 세포에 첨가하는 단계; 세포 상층액을 수득하는 단계; 그리고 세포 상층액으로 방출된 IL-8의 양을 측정하는 단계를 포함한다. 이 CD30L-의존성 시험관 내 생체분석은 사람 악성 큰세포 림프종(ALCL) 셀라인, 내인성 CD30의 Karpas-299(K-299) 발현 및 CD30과 CD30L의 상호작용에 대한 반응으로 이들 세포로부터의 IL-8의 방출을 활용할 수 있다. 방출된 IL-8은 예를 들면 IL-8 ELISA에 의해 정량될 수 있다. CD30L 길항체, 예컨대 본원에 기술된 항원 결합 단배질은 가용성 CD30L(단일 세포 분석) 또는 막 결합된 CD30L(이중 세포 분석)과 함께 인큐베이션된 후 K299 세포와 함께 배양된다. 그런 다음 세포 상층액이 수득되고 CD30L 길항체, 예컨대 본원에 기술된 것과 같은 항원 결합 단백질에 의한 차단에 대한 반응으로 K299 세포로부터의 IL8 방출의 억제가 IL-8 샌드위치 ELISA를 사용하여 측정된다.
단일 세포 분석에 대해서, CD30L 길항체가 96-웰 미소역가 플레이트, 예컨대 Costar® 96 웰 플레이트(Corning; Acton, MA)에 원하는 범위의 최종 농도, 예를 들면 1㎍/ml 내지 10pg/ml로 적정된다. CD30L 항원 결합 단백질, 예컨대 본원에 기술된 것과 같은 것들이 포지티브 대조표준으로서 사용될 수 있다. 플레이트는 약 45분 동안 실온에서 인큐베이션되었다. 그런 다음 각 웰에 CD30+ 세포 공급원이 첨가되었다. 플레이트는 37℃, 5% CO2에서 24시간 동안 인큐베이션되었다.
이중 세포 분석에 대해서, CD30L 공급원은 막 결합되고 조사된다. CD30L 발현 세포로는, 그것들에 한정되는 것은 아니지만, 사람 CD30L+ 사람 B 셀라인 Ramos(ATCC, Manassas, VA), 활성화된 게먹이 원숭이 혈액 T 세포 또는 마우스 쥐과 DC 셀라인과 같은 세포들이 있다. CD30L 발현 세포는 가장 높은 세포 표면 CD30L 발현 수준을 나타내는 그런 세포를 선택하기 위해 사용 전에 FACS 분류가 시행될 수 있다. CD30L 발현 세포는 CD30L 길항체와 조합되고, 45분 동안 인큐베이션된 후 CD30+ 세포 공급원에 첨가된다. 다시 한 번, 플레이트는 24시간 동안 37℃, 5% CO2에서 인큐베이션된다.
두 가지 분석에 대해 방출된 IL8은 IL-8을 검출하기 위한 어떠한 방법, 예를 들면 IL-8 샌드위치 ELISA에 의해 측정되고 정량될 수 있다. 그런 분석은 상업적으로 활용가능하며, 예를 들면 R&D Systems(Minneapolis, MN)에 의해 제공되는 것들이다. IL-8 수준은 ELISA 표준 곡선 및 상업적으로 활용가능한 소프트웨어, 예를 들면 DeltaSoft(DeltaSoft, Inc., Hillsborough, NJ) 및 GraphPad PRISM (GraphPad Software Inc., San Diego, CA)을 사용하여 측정된 IC50 값으로부터 설명될 수 있다.
진단 및 치료 목적을 위한 사람 CD30L 항원 결합 단백질의 용도
본원에 제공된 항원 결합 단백질은 생물학적 샘플 중의 CD30L을 검출하고, CD30L을 생성하는 세포 또는 조직을 확인하는 데 유용하다. CD30L에 특이적으로 결합하는 항원 결합 단백질은 진단 및/또는 치료의 필요가 있는 환자에서 CD30L과 관련된 질병의 진단 및/또는 치료에 사용될 수 있는데, 예를 들면 CD30L 항원 결합 단백질은 진단 분석에, 예컨대 CD30+ 세포로부터 IL-8을 유도하기 위해 사용될 수 있다. CD30L에 결합하는 항원 결합 단백질은 CD30L과 관련된 질병의 개선에 치료적으로 사용될 수 있다.
지표
본 발명은 또한 본원에 개시된 것과 같은 질병의 예방 또는 치료적 치료에 사용하기 위한 CD30L 항원 결합 단백질의 용도에도 관련된다. CD30L 항원 결합 단백질은 CD30L이 근원적인 질병 또는 장애에 기여하는 또는 그렇지 않으면 네거티브 증상에 기여하는 데 관련이 되어 있거나 그런 역할을 하는 다양한 상태를 치료하는 데 유용하다.
본원에는 다양한 질병, 예컨대 자가면역 및 만성 염증성 질병 및 암을, 본원에 기술된 하나 또는 그 이상의 C30L 항원 결합 단백질을 포함하는 조성물의 효과적인 양을 치료의 필요가 있는 환자에게 투여함으로써 치료하는 방법이 제공된다. 그런 조성물은 CD30+와 CD30L+ 세포 사이의 상호작용을 차단하고; CD30L+ 세포를 고갈시키거나; 또는 CD30L+ 세포상의 활성을 길항함으로써 생체 내에서 면역 반응을 조절하는 데 유용하다. CD30L은 "역 신호화"를 나타낼 수 있고, 호중구 및 말초혈 T 세포 상에서 발현된 CD30L은 그런 세포에서 대사적 활성을 자극하기 위해 교차-결합됨으로써 활성화될 수 있다(Wiley et al., J Immunol 157: 3235-39, 1996; Cerutti et al., J. Immunol. 165: 786, 2000; Cerutti et al., Nat. Immunol. 2: 150, 2001). CD30L에 결합하는 본원에 기술된 항원 결합 단백질은 그 자체로서 역 CD30L 신호화를 차단하거나 CD30L+ 세포를 자극하기 위해 사용될 수 있었다.
CD30+ 세포는 호지킨병과 강력하게 관련되고, CD30은 많은 혈액학상의 악성종양에 대해 광범위하게 사용되는 임상적 마커이다(개관을 위해서는 Horie and Watanabe, Immuno. 10:457-470, 1998 참조). 본원에 기술된 하나 또는 그 이상의 CD30L 항원 결합 단백질을 단독으로 또는 다른 치료제와 함께 포함하는 조성물은 그런 상태를 치료하는 데 유용할 수 있다.
CD30L은 활성화된 T 세포 및 특정 B 세포 및 수지상 세포 집단에서 발현된다. CD30은 활성화된 T 및 B 세포의 부분에서 발현된다. 이 발현 패턴은 CD30L을 표적화하는 것이 T 세포, B 세포 및 수지상 세포 사이의 상호작용을 조절하는 데 유용할 것임을 시사한다. CD30L은 체액성 면역성에 영향을 미치는 것으로 밝혀졌다. 본원에 기술된 항원 결합 단백질은 염증성 질병, 특히 T-세포 의존성 B 세포 반응에 의해 유발된 질병에 관련된 치료적 처방에 사용될 수 있다.
관절염은 본원에 개시된 방법 및 조성물에 의해 치료될 수 있다. 본원에서 사용되는 것과 같이, 용어 "관절염"은 다양한 신체 기관 또한 영향을 받을 수 있긴 하지만 주로 관절 또는 관절을 둘러싸고 있는 연결조직에 영향을 미치는 만성 염증성 질환을 말한다. 관절염은 기원적으로 자가면역 또는 외상에 의한 것일 수 있으며, 또는 외래 항원에 노출됨으로써 촉발된 후, 더 이상은 촉발시키는 항원의 지속적인 존재에 의존하지 않는 만성 상태로 이어질 수 있다. 용어 "관절염"은 본원에서 사용되는 것과 같이, 변형성 관절염; 골관절염; 류머티스성 관절염(성인 및 청소년); 라임병 관절염; 반응성 관절염, 이를테면 라이터병; 건선성 관절염; 결절성 관절염; 혈청음성 척추관절염, 이를테면 그것에 한정되는 것은 아니지만 강직성 척추염을 포함한다.
본원에 기술된 항원 결합 단백질은, 본원에서 고통스럽고 흔히 관절, 근육, 신경, 힘줄, 피부, 눈, 연결 조직 또는 다양한 다른 기관 시스템의 다수의 곳에 위치한 염증을 포함한 어떠한 만성 장애로서 규정된 다양한 류머티스성 장애를 치료하는 데 유용하다. 그러한 것으로는, 이것들에 한정되는 것은 아니지만 관절염; 경피증; 통풍; 전신성 홍반성 루푸스; 류머티스성 다발성 근육통; 스틸병; 만성 포도막염; 수의근의 염증을 초래하는 장애, 이를테면 피부근염 및 다발성 근염, 이를테면 산발성 봉입체 근염을 포함한다. 전신성 홍반성 루푸스는 관절, 피부, 신장, 심장, 폐, 혈관 및 뇌의 염증을 유발할 수 있다. 전신성 홍반성 루푸스는 그것의 진전된 형태로 신장 질환을 쵸래할 수 있다.
또한 본원에 기술된 항원 결합 단백질을 내분비계의 다양한 장애를 치료하기 위한 치료제에 사용하는 방법이 제공되는데, 그러한 장애로는 그것들에 한정되는 것은 아니지만, 청소년기 또는 성인기 개시 당뇨병(이를테면 자가면역성 인슐린-의존성 유형의 당뇨병; 비-인슐린 의존성 유형 및 비만-중재된 당뇨병); 특발성 신장 부근 위축; 애디슨병; 갑상성 기능 저하증; 그레이브병; 자가면역 갑상선염, 예컨대 하시모토 갑상선염; 및 다선성 자가면역 증후군(제 I 유형 및 II 유형)을 포함한다.
본원에 기술된 항원 결합 단백질은 또한 위장계의 질환, 이를테면 그것들에 한정되는 것은 아니지만 자가면역 경화성 담관염; 만성 소화 장애증; 염증성 장 질환, 이를테면 크론병 및 궤양성 대장염; 자가면역 췌장염, 이를테면 만성 췌장염; 특발성 위마비; 및 특발성 궤양, 이를테면 위 및 십이지장 궤양을 치료하기 위한 치료제에 유용하다.
또한 본원에는 본원에 기술된 항원 결합 단백질을 비뇨생식계의 장애, 예를 들면 자가면역 및 특발성 신사구체염; 및 만성 특발성 전립선염(비-박테리아성), 이를테면 양성 전립선 비대증을 치료하기 위한 치료법에 사용하는 방법이 포함된다.
또한 본원에는 본원에 기술된 항원 결합 단백질을 다양한 혈액학상의 질환, 이를테면 그것들에 한정되는 것은 아니지만, 빈혈 및 혈액학상의 장애, 이를테면 악성 빈혈 및 재생불량성 빈혈, 및 판코니 재생불량성 빈혈; 자가면역 용혈성 빈혈; 특발성 혈소판 감소성 자반증(ITP); 골수 이형성 증후군(난치성 빈혈, 관상 철아구가 포함되는 난치성 빈혈, 과잉 배(blast)를 포함한 난치성 빈혈, 형질전환시 과잉 배를 포함한 난치성 빈혈); 및 자가면역 림프증식 증후군(ALPS)을 치료하기 위한 치료법에 사용하는 방법이 포함된다.
나아가 개시된 항원 결합 단백질은 간에 영향을 미치는 질환, 예컨대 자가면역 또는 만성 염증성 간염을 치료하는 데 유용하다.
또한, 개시된 항원 결합 단백질 및 조합은 청력 상실을 포함하는 다양한 자가면역 또는 만성 염증성 장애를 치료하기 위해 사용된다. 그런 장애중 하나는 자가면역 과정으로부터 유발되는 것으로 여겨지는 내이 또는 달팽이관 신경-관련 청력 상실, 즉 자가면역 청력 상실이다. 이 질환은 현재 스테로이드, 메토트렉세이트 및/또는 사이클로포스파미드로 치료되며, 그것들은 CD30/CD30L 상호작용의 억제제 또는 차단제와 함께 투여될 수 있다.
많은 염증성 폐 장애가 또한 개시된 항원 결합 단백질로 치료될 수 있는데, 이를테면 특발성 림프관평활근종증; 만성 비-감염성 기관지염 또는 기종과 관련된 만성 폐색성 폐질환(COPD); 및 섬유상 폐질환, 예컨대 낭포성 섬유증 및 특발성 폐 섬유증이 치료될 수 있다.
또한 이식과 관련된 장애들, 이를테면 이식편-대-숙주 질병이 개시된 항원 결합 단백질로 치료될 수 있다. 이식편-대-숙주 질병을 예방 또는 개선하기 위하여, 하나 또는 그 이상의 개시된 항원 결합 단백질을 포함하는 조성물이 심장, 간, 폐, 피부, 신장 또는 다른 기관의 이식을 포함하여 골수 또는 고형 기관 이식 전에, 동시에 또는 후에 투여될 수 있다.
개시된 항원 결합 단백질은 또한 만성 염증성 눈 질병, 이를테면 자가면역 포도막염을 치료하는 데 유용하다.
그러한 조성물은 기도 염증과 관련된 질병, 예컨대 천식을 치료하기 위해 유용할 수 있다.
본원에 기술된 항원 결합 단백질은 또한 여성 생식계에 영향을 미치는 염증성 장애, 이를테면 다발성 이식 장애/불임; 유산 증후군 또는 제 IV배 상실(자연 유산); 및 자궁내막증을 치료하는 데 유용하다.
본원에 기술된 항원 결합 단백질을 사용하여 치료될 수 있는 다른 질병으로는 만성 염증 및/또는 중추신경계의 퇴행성 질병을 포함한다. 이것은 예를 들면 탈수초화와 관련된 질병, 예컨대 다발성 경화증, 전신성 경화증 및 길랑-바레 증후군(급성 염증성 탈수초화 다발성 신경장애, 급성 운동 축색돌기 신경병증 및 피셔 증후군을 포함함)을 포함한다. 다발성 경화증은 대표적인 중추신경계의 만성 퇴행성 질병으로, CD30과 CD30L의 상호작용을 억제하거나 차단할 수 있는 제제로 치료될 수 있다. 예컨대 미국 특허 번호 6,652,854 참조.
개시된 항원 결합 단백질로 치료될 수 있는 다른 만성 염증성 질환으로는 한랭응집소병; 베체트 증후군; 쇼그렌 증후군; 및 특발성 건초염뿐 아니라, 유전적 결핍과 관련된 다양한 만성 염증성 장애가 있다. 본 발명의 억제제, 조성물 및 조합 치료법은 나아가 안면 신경마비(특발성 안면 마비); 만성 피로 증후군(진행중인 감염과 관련되지 않은); 만성 퇴행성 척추 디스크 질환; 걸프전 증후군; 및 중증 근무력증을 포함하며, 이것들은 코르티코스테로이드를 함께 사용하여 치료될 수 있다.
피부 또는 점막을 포함한 장애 또한 본원에 기술된 항원 결합 단백질을 사용하여 치료될 수 있다. 그러한 장애로는 다음을 포함한다: 극세포분리증, 이를테면 원판성 루푸스, 아급성 피부 홍반성 루푸스, 피부 맥관염, 다리에병, 모낭 각화증, 심상성 천포창 및 종양수반성 천포창; 여드름 딸기코; 원형 탈모증; 수포성 류천포창; 습진; 홍반, 이를테면 다형홍반 및 수포성 다형홍반(스티븐스-존슨 증후군); 염증성 피부 질병; 편평태선; 선형 IgA 수포성 질병(만성 아동 수포성 피부병); 피부 탄성의 상실; 호중구 피부염(스위트 증후군); 모공성 홍색비강진; 건선; 괴저성 농피증; 피부 탄성의 상실; 및 중독성 표피 박리.
개시된 항원 결합 단백질로 치료될 수 있는 다른 질병으로는 자가면역-관련 만성 피부점막 칸디다증; 알레르기; 유육종증; 다중심 망내조직구증; 베그너 육아종증; 동맥염, 이를테면 거대세포 동맥염; 맥관염 및 만성 자가면역 심근염이 있다.
본원에 개시된 항원 결합 단백질을 사용하여 질병을 치료하기 위해서는, 치료적으로 효과적인 양의 치료제가 그럴 필요가 있는 포유류에 투여된다. 제제는 장애의 심각성을 반영하는 적어도 하나의 지표의 지속적인 개선을 유도하기에 적당한 투여 용량 및 빈도의 처방을 따른다. 개선은 환자가 적어도 하루의 간격을 두고, 바람직하게는 1주, 2주, 3주 또는 4 또는 그 이상의 주 간격으로 적어도 2회의 기회에 개선을 나타낸다면 "지속된" 것으로 간주된다. 장애의 심각성은 신호 또는 증상을 토대로 측정되며, 또는 환자에게 주어지는 설문지에 의해, 예컨대 만성 질병 질환의 상태를 평가하기 위해 의사들이 자주 사용하는 생활의 질 설문지에 의해 측정될 수 있다.
환자의 질환의 심각성을 반영하는 하나 또는 그 이상의 지표는 약물 투여의 빈도 및 기간이 충분한지를 측정하기 위해 평가될 수 있다. 선택된 지표에 대한 기준선 값은 치료제의 첫 번째 용량의 투여 전에 환자의 조사에 의해 수립된다. 바람직하게는 기준선 조사는 첫 번째 용량을 투여하고 약 60일 이내에 이루어진다.
만약 치료되는 상태가 전신성 홍반성 루푸스인 경우, 치료의 충분한 정도를 측정하는 지표는 다음의 것들 중 하나에서 관찰되는 개선으로 구성될 수 있다: 피로; 열; 입과 코의 궤양; 안면 발진("접형발진"); 감광성(SLE는 자주 햇빛에 노출된 후에 확 올라온다); 흉막염; 심막염; 레이노 현상(저온에 노출됨으로써 손가락과 발가락에 혈액순환이 줄어듬); 신장 기능; 및 백혈구 수(SLE 환자는 자주 백혈구 수가 감소된다).
제약학적으로 허용되는 담체와 함께 제형된, 본원에 개시된 항원 결합 단백질을 포함하는 제약학적 조성물이 제공된다. 어떤 구체예에서, 제약학적으로 허용되는 담체는 사람 대상에 투여하기에 적당하다.
진단 방법
기술된 항원 결합 단백질은 CD30/CD30L 상호작용과 관련된 질병 및/또는 질환을 검출, 진단 또는 모니터하기 위한 진단 목적에 사용될 수 있다. CD30L의 존재의 검출에 유용한 방법들의 실례로는 면역분석, 예컨대 효소 결합 면역흡착 분석(ELISA) 및 방사성 면역분석(RIA)이 있다.
진단 용도에 대해서는, 항원 결합 단백질은 전형적으로 검출가능한 표지화 그룹으로 표지될 수 있다. 적당한 표지화 그룹으로는, 그것들에 한정되는 것은 아니지만, 다음과 같은 것들이 있다: 방사성 동위원소 또는 방사성 핵종(예컨대 3H, 14C, 15N, 35S, 90Y, 99Tc, 111In, 125I, 131I), 형광 기(예컨대, FITC, 로다민, 란탄계 인광체), 효소 기(예컨대 서양고추냉이 과산화효소, β-갈락토시다제, 루시페라제, 알칼리 포스파타제), 화학발광기, 비오티닐기 또는 이차 리포터(예컨대 로이신 지퍼 쌍 서열, 이차 항체에 대한 결합 부위, 금속 결합 도메인, 에피토프 태그)에 의해 인지된 예정된 폴리펩티드 에피토프. 어떤 구체예에서, 표지화 그룹은 다양한 길이의 스페이서 아암을 통해 항원 결합 단백질에 결합되어 잠재적인 입체 장애가 감소된다. 단백질을 표지화하는 다양한 방법이 해당 기술분야에 공지되어 있고 사용될 수 있다.
다른 진단 방법들이 CD30L을 발현하는 세포 또는 세포들을 확인하기 위해 제공된다. 특정 구체예에서, 항원 결합 단백질은 표지화 그룹으로 표지되고, CD30L에의 표지된 항원 결합 단백질의 결합이 검출된다. 추가의 특정 구체예에서, 항원 결합 단백질의 CD30L에의 결합은 생체 내에서 검출된다. 추가의 특정 구체예에서, CD30L 항원 결합 단백질이 분리되고 해당 기술분야에 공지되어 있는 기법들을 사용하여 측정된다. 예를 들어 Harlow and Lane, 1988, Antibodies: A Laboratory Manual, New York: Cold Spring Harbor (ed. 1991 and periodic supplements); John E. Coligan, ed., 1993, Current Protocols In Immunology New York: John Wiley & Sons 참조.
다른 방법들은 제공된 항원 결합 단백질과 CD30L에의 결합에 대해 경합하는 시험 분자의 존재의 검출을 제공한다. 그런 분석의 한 실례는 시험 분자의 존재 또는 부재하에 CD30L의 일정량을 함유하는 용액 중의 유리 항원 결합 단백질의 양을 검출하는 것을 포함할 것이다. 유리 항원 결합 단백질(즉 CD30L에 결합하지 않는 항원 결합 단백질)의 양의 증가는 항원 결합 단백질과 CD30L 결합에 대해 경합할 수 있는 시험 분자를 가리킬 것이다. 한 구체예에서, 항원 결합 단백질은 표지화 그룹으로 표지된다. 또는 다르게는, 시험 분자가 표지되고, 유리 시험 분자의 양이 항원 결합 단백질의 존재 및 부재 하에 모니터된다.
치료 방법: 제약학적 제형, 투여 경로
하나의 또는 다수의 항원 결합 단백질의 치료적으로 효과적인 양과 제약학적으로 허용되는 부형체, 희석제, 담체, 가용화제, 유화제, 보존제 및/또는 보조제를 포함하는 제약학적 조성물이 제공된다. 또한 그런 제약학적 조성물을 투여함으로써 환자를 치료하는 방법이 포함된다. 용어 "환자"는 사람 환자를 포함한다. 용어 "치료하다"와 "치료"는 적어도 하나의 증상 또는 장애의 다른 측면의 완화 또는 예방, 또는 질병 심각성의 감소 등을 포함한다. 용어 "치료적으로 효과적인 양" 또는 "효과적인 양"은 포유류에서 어떠한 치료적 반응을 생성하는 것으로 측정된 CD30L 항원 결합 단백질의 양을 말한다. 그러한 치료적으로 효과적인 양은 해당 기술분야에 숙련된 사람에 의해 쉽게 확인된다. 이 개시내용의 목적에 대해 용어 "병", "질병", "질환", "비정상 상태", "고질병", "의학적 장애", "장애" 등은 상호교환적으로 사용된다.
항원 결합 단백질은 성공적인 치료제를 구성하기 위하여 질병의 모든 증상 또는 징후의 완전한 치유, 또는 퇴치에 영향을 미칠 필요는 없다. 적절한 분야에서 인지되는 것과 같이, 치료제로서 사용된 약물은 주어진 질병 상태의 심각성을 감소시킬 수는 있지만, 유용한 치료제로서 간주되기 위해 질병의 모든 징후를 다 없애야 하는 것은 아니다. 유사하게, 예방학적으로 투여된 치료제는 성공적인 예방제를 구성하기 위하여 질환의 개시를 예방하는 데 완전히 효과적일 필요는 없다. 단순히 질병의 충격을 감소시킴으로써(예를 들면 질병의 증상의 수 또는 심각성을 감소시킴으로써, 또는 다른 치료의 유효성을 증가시킴으로써 또는 다른 유익한 효과를 발생시킴으로써) 또는 질병이 대상에서 일어날 또는 악화될 가능성을 감소시키는 것으로 충분하다. 본원에 제공된 특정 방법은 환자에게 CD30L 길항체(예컨대 본원에 개시된 항원 결합 단백질)를 특별한 장애의 심각성을 반영하는 지표의 기준선 이상으로 지속적인 개선을 유도하기에 충분한 양으로 및 시간 동안 투여하는 것을 포함한다.
적절한 분야에서 인지되는 것과 같이, 본 발명의 분자를 포함하는 제약학적 조성물은 징후에 적절한 방식으로 환자에게 투여된다. 제약학적 조성물은 어떠한 적당한 기법에 의해, 이를테면 그것에 한정되는 것은 아니지만, 비경구로, 국소적으로 또는 흡입에 의해 투여될 수 있다. 주입되는 경우에는, 제약학적 조성물은 예를 들면 동맥 내로, 정맥 내로, 근육 내로, 병변 내로, 복강 내로 또는 피하 경로를 통해, 거환 주사에 의해, 또는 연속적인 주입에 의해 투여될 수 있다. 예를 들어 질병 또는 상해 부위에 국소적인 투여가 고려된다면, 경피 전달 및 이식편으로부터의 지속적인 방출이 고려된다. 흡입에 의한 전달은 예를 들면 코 또는 구강 흡입, 분무기의 사용, 에어로졸 형태의 길항체의 흡입 등을 포함한다. 다른 대체물은 점안액; 환, 시럽, 당의정 또는 씹는 검을 포함하는 경구용 제제; 및 로션, 겔, 분무제 및 연고와 같은 국소용 제제를 포함한다.
항원 결합 단백질을 생체 외 과정에 사용하는 것이 또한 본 발명에 포함된다. 예를 들어 환자의 혈액 또는 다른 체액이 CD30L에 결합하는 항원 결합 단백질과 체외에서 접촉될 수 있다. 항원 결합 단백질은 적당한 불용성 매트릭스 또는 고체 지지체 물질에 결합될 수 있다.
유익하게도, 항원 결합 단백질은 하나 또는 그 이상의 추가의 성분들, 예컨대 생리적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는 조성물의 형태로 투여된다. 임의로, 조성물은 추가로 조합 치료법을 위해 하나 또는 그 이상의 생리적 활성 제제를 포함한다. 제약학적 조성물은 완충제, 항산화제, 예컨대 아스코브산, 저분자량 폴리펩티드(예컨대 10개 이하의 아미노산을 가지는 것들), 단백질, 아미노산, 탄수화물, 예컨대 글루코스, 슈크로스 또는 덱스트란, 킬레이트화제, 예컨대 EDTA, 글루타티온, 안정화제 및 부형제로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상의 물질과 함께 CD30L 항원 결합 단백질을 포함할 수 있다. 중성 완충된 식염수 또는 동종의 혈청 알부민과 혼합된 식염수는 적절한 희석제의 실례이다. 적절한 산업 표준에 따르면, 벤질 알코올과 같은 보존제가 또한 첨가될 수 있다. 조성물은 희석제로서 적절한 부형제 용액(예컨대 슈크로스)을 사용한 리오필리제이트로서 제형될 수 있다. 적당한 성분들은 사용된 단위용량 및 농도에서 부형제에 비독성이다. 제약학적 제형에 사용될 수 있는 성분들의 추가의 실례는 21판(2005)을 포함하여 어떠한 레밍턴 조제학[Remington's Pharmaceutical Sciences]에서 제시된다(Mack Publishing Company, Easton, PA).
의료 종사자에 의해 사용되는 키트는 본원에서 논의된 질환 중 어느 것이든지 치료하는 데 사용하기 위한 CD30L 항원 결합 단백질 및 표지 또는 다른 지시사항을 포함한다. 한 구체예에서, 키트는 상기에서 개시된 것과 같은 조성물의 형태로 존재하고, 하나 또는 그 이상의 바이알에 있을 수 있는, 하나 또는 그 이상의 CD30L 결합 항원 결합 단백질의 멸균 제제를 포함한다.
투여의 단위용량 및 빈도는 질환이 급성 또는 만성이든지 투여 경로, 사용된 특별한 항원 결합 단백질, 치료하고자 하는 질병의 성질 및 심각성, 및 대상의 크기 및 일반적 상태와 같은 인자들에 따라 달라질 수 있다. 적절한 단위용량은 적절한 기술분야, 예컨대 단계적 연구에 포함될 수 있는 임상 실험에서 공지되어 있는 과정에 의해 측정될 수 있다.
전형적인 단위용량은 상기에서 언급된 인자들에 따라 약 0.1㎍/kg 내지 약 30mg/kg 또는 그 이상의 범위일 수 있다. 특정 구체예에서, 단위용량은 0.1㎍/kg부터 약 30mg/kg까지, 임의로 1㎍/kg부터 약 30mg/kg까지, 임의로 10㎍/kg부터 약 10mg/kg까지, 임의로 약 0.1mg/kg 내지 5mg/kg 또는 임의로 약 0.3mg/kg 내지 3mg/kg의 범위일 수 있다.
투약 빈도는 사용된 제형 중의 특별한 CD30L 항원 결합 단백질의 약물학적 변수들에 좌우될 것이다. 전형적으로, 임상의는 단위용량이 원하는 효과를 이루는 단위용량에 이를 때까지 조성물을 관리한다. 그러므로 조성물은 시간에 걸쳐서 단일 용량으로서, 또는 2 또는 그 이상의 용량으로서(원하는 분자의 동일한 양을 함유하거나 함유하지 않을 수 있다) 또는 이식 장치 또는 카테테르를 통한 연속 주입으로서 투여될 수 있다. 적절한 단위용량은 적절한 용량-반응 데이터의 사용을 통해 확인될 수 있다. 본 발명의 CD30L 항원 결합 단백질은 예를 들면 1회 또는 1회 이상, 예컨대 일정 기간에 걸쳐 규칙적인 간격으로 투여될 수 있다. 특별한 구체예에서, CD30L 항원 결합 단백질은 적어도 1달 또는 그 이상, 예컨대 1달, 2달 또는 3달 또는 심지어 무한한 기간에 걸쳐서 투여된다. 만성 질환을 치료하기 위해서는 일반적으로 장기간 치료가 가장 효과적이다. 그러나 급성 질환을 치료하기 위해서는 더 짧은 기간 동안, 예컨대 1주 내지 6주 동안 투여가 충분할 것이다. 일반적으로 항원 결합 단백질은 환자가 선택된 지표 또는 지표들에 대한 기준선 이상으로 의학적으로 관련된 개선 정도를 나타낼 때까지 투여된다.
CD30L 항원 결합 단백질은 치료하고자 하는 장애의 심각성을 반영하는 적어도 하나의 지표에서 개선, 바람직하게는 지속적인 개선을 유도하기에 충분한 양으로 및 시간 동안 환자에게 투여되는 것으로 여겨진다. 환자의 병, 질병 또는 질환의 정도를 반영하는 다양한 지표들은 치료의 양과 시간이 충분한지 어떤지를 측정하기 위하여 평가될 수 있다. 그런 지표로는 예를 들면 의문의 질병의 심각성, 증상 또는 징후의 임상적으로 인지된 지표를 포함한다. 한 구체예에서, 만약 대상이 2 내지 4주 간격으로 적어도 2회의 기회에 개선을 나타낸다면 개선이 지속적인 것으로 간주된다. 개선의 정도는 일반적으로 의사에 의해 측정되는데, 의사는 이 측정을 신호, 증상, 생검 또는 다른 시험 결과를 토대로 시행하며, 또한 대상에게 지시되는 설문지, 예컨대 주어진 질병에 대해 개발된 생활의 질 설문지를 사용할 수 있다. 본 발명의 방법 및 조성물의 특별한 구체예는 CD30L 항원 결합 단백질 및 하나 또는 그 이상의 추가의 CD30L 길항체, 예를 들면 본 발명의 둘 또는 그 이상의 항원 결합 단백질, 또는 본 발명의 항원 결합 단백질 및 하나 또는 그 이상의 다른 CD30L 길항체의 사용을 포함한다. 또한 본원에는 단독으로 또는 환자가 영향을 받는 질환을 치료하는 데 유용한 다른 제제들과 조합하여 투여되는 CD30L 항원 결합 단백질이 제공된다. 그런 제제의 실례로는 단백질성 및 비-단백질성 약물 둘 다를 포함한다. 그런 제제로는 예를 들면 TNFα, IL-1, IL-2, RANK 또는 다른 사이토킨의 길항체들을 포함한다. 사이토킨 길항체는 사이토킨 및/또는 그것의 수용체를 표적으로 하는 것들을 포함한다. 사이토킨을 표적으로 하는 길항체는 사이토킨에 대한 가용성 수용체를 포함할 수 있고, 통상적으로 사이토킨에 대한 수용체의 세포외재성 도메인의 부분 또는 전부를 포함한다. 가용성 사이토킨 수용체는 단량체로서, 또는 이량체 또는 고급 다량체로서(예컨대 가용성 수용체가 사람 면역글로불린의 이량체-촉진하는 Fc 부분에 부착되는 융합 분자로서) 사용될 수 있다. 다른 구체예에서, 가용성 사이토킨 수용체는 그것의 혈청 반감기를 증가시키기 위해 페길화된다. 어떤 구체예에서, 가용성 사이토킨 길항체는 가용성 TNF 수용체(타입 I 또는 II)를 포함한다. 염증성 사이토킨을 억제하는 작은 유기 분자들이 또한 본 발명의 치료제와 함께 사용될 수 있다. 하나 이상의 CD30 리간드 항원 결합 단백질 및/또는 그것의 항원 결합 영역은 자가면역 또는 만성 염증성 질병을 치료하기 위해 부수적으로 투여될 수 있고, 단독으로 또는 동일한 자가면역 또는 만성 염증성 질환에 대해 효과적이거나 또는 동일한 환자에서 상이한 질환을 치료하기 위해 투여되는 다른 약물과 함께 투여될 수 있다.
다수의 치료제가 공동 투여되는 경우에, 적절한 기술분야에서 인지되거나 공지되어 있는 것과 같이, 단위용량도 따라서 조정될 수 있다. 그러한 제제는 동시에, 연속적으로, 교대로 또는 효과적일 치료법의 전체 과정을 허용하는 어떠한 다른 처방에 따라 투여될 수 있다.
사람 환자에 더불어, CD30L 항원 결합 단백질은 비-사람 동물, 예컨대 가축용 애완동물(개, 고양이, 새, 영장류 등), 가축용 농장 동물(말, 소, 양, 돼지, 새 등)의 치료에 유용하다. 그런 경우에 적절한 용량은 동물의 체중에 따라 측정될 수 있다. 예를 들어 0.2 내지 1mg/kg의 용량이 사용될 수 있다. 또는 다르게는, 용량은 동물의 표면적에 따라 결정되고, 예시적인 용량 범위는 0.1 내지 20mg/m2, 보다 바람직하게는 5 내지 12mg/m2이다. 작은 동물, 예컨대 개 또는 고양의 경우, 적당한 용량은 0.4mg/kg이다. CD30L 항원 결합 단백질(바람직하게는 수용체 종으로부터 유도된 유전자로부터 구성됨)은 동물의 상태가 개선될 때까지 주당 1회 또는 그 이상 주사 또는 다른 적당한 경로에 의해 투여되거나, 또는 무기한으로 투여될 수 있다.
다음의 구체예 및 실시예는, 수행된 실험 및 이루어진 결과를 포함하여, 단지 예시적인 목적으로만 제공되는 것으로, 첨부되는 청구범위의 범주를 제한하는 것으로 해석되어서는 안된다.
구체예
1. a) 표 3에 제시된 것과 같은 CDRH1과 4개까지의 아미노산 치환, 삽입 또는 결실만큼 상이한 CDRH1;
b) 표 3에 제시된 것과 같은 CDRH2와 7개까지의 아미노산 치환, 삽입 및/또는 결실만큼 상이한 CDRH2;
c) 표 3에 제시된 것과 같은 CDRH3와 11개까지의 아미노산 치환, 삽입 및/또는 결실만큼 상이한 CDRH3로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRH1, CDRH2 및 CDRH3를 포함하는 적어도 하나의 중쇄 가변 영역; 및
d) 표 3에 제시된 것과 같은 CDRL1과 4개까지의 아미노산 치환, 삽입 및/또는 결실만큼 상이한 CDRL1;
b) 표 3에 제시된 것과 같은 CDRL2와 2개까지의 아미노산 치환, 삽입 또는 결실만큼 상이한 CDRL2;
c) 표 3에 제시된 것과 같은 CDRL3와 2개까지의 아미노산 치환, 삽입 또는 결실만큼 상이한 CDRL3로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRL1, CDRL2 및 CDRL3를 포함하는 적어도 하나의 경쇄 가변 영역을 포함하는, CD30L에 결합하는 분리된 항원 결합 단백질.
2. 다음의 것들을 포함하는 구체예 1의 분리된 항원 결합 단백질:
SEQ ID NO:14, 15, 16, 17, 18 및 33으로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRH1;
SEQ ID NO:19, 20, 21, 22, 23, 24 및 34로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRH2;
SEQ ID NO:25, 26, 27, 28, 29 및 35로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRH3;
SEQ ID NO:1, 2, 3, 4, 5, 6 및 30으로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRL1;
SEQ ID NO:7, 8, 9, 10 및 31로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRL2;
SEQ ID NO:11, 12, 13 및 32로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRL3.
3. a) SEQ ID NO:36, 28, 40, 42 또는 44의 아미노산 잔기 23 내지 36을 포함하는 CDR1, 아미노산 잔기 52 내지 58을 포함하는 CDR2 및 아미노산 잔기 91 내지 100을 포함하는 CDR3를 포함하는 경쇄 가변 영역; 또는
b) SEQ ID NO:46의 아미노산 잔기 25 내지 36을 포함하는 CDR1, 아미노산 잔기 52 내지 58을 포함하는 CDR2 및 아미노산 잔기 91 내지 100을 포함하는 CDR3를 포함하는 경쇄 가변 영역으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 경쇄 가변 영역과,
SEQ ID NO:48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70 또는 72의 아미노산 잔기 31 내지 35를 포함하는 CDR1, 아미노산 잔기 50 내지 65를 포함하는 CDR2 및 아미노산 잔기 98 내지 113을 포함하는 CDR3를 포함하는 적어도 하나의 중쇄 가변 영역을 포함하는, 사람 CD30L에 결합하는 분리된 항원 결합 단백질.
4. 적어도 하나의 중쇄 가변 영역과 적어도 하나의 경쇄 가변 영역을 포함하는 구체예 1의 분리된 항원-결합 단백질.
5. 적어도 두 개의 중쇄 가변 영역과 적어도 두 개의 경쇄 가변 영역을 포함하는 구체예 1의 분리된 항원-결합 단백질.
6. 중쇄 가변 영역과 경쇄 가변 영역을 포함하는, CD30L에 결합하는 분리된 항원 결합 단백질로서, 이때 중쇄 가변 영역 서열은 표 2에 제시된 것과 같은 중쇄 가변 영역 서열과 31개까지의 아미노산 치환, 첨가 및/또는 결실만큼 상이하고, 경쇄 가변 영역 서열은 표 1에 제시된 것과 같은 경쇄 가변 영역 서열과 30개까지의 아미노산 치환, 첨가 및/또는 결실만큼 상이하다.
7. SEQ ID NO:48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70 및 72에 대해 적어도 80%의 서열 동일성을 가지는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
SEQ ID NO:36, 38, 40, 42, 44 및 46에 대해 적어도 88%의 서열 동일성을 가지는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, CD30L에 결합하는 분리된 항원 결합 단백질.
8. 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된, CD30L에 결합하는 분리된 항원 결합 단백질:
a) SEQ ID NO:48, 50, 52, 54, 56, 58, 60 및 62로 이루어진 군으로부터 선택된 중쇄 가변 영역과 SEQ ID NO:36의 경쇄 가변 영역을 포함하는 분리된 항원 결합 단백질;
b) SEQ ID NO:64의 중쇄 가변 영역과 SEQ ID NO:38의 경쇄 가변 영역을 포함하는 분리된 항원 결합 단백질;
c) SEQ ID NO:66의 중쇄 가변 영역과 SEQ ID NO:40의 경쇄 가변 영역을 포함하는 분리된 항원 결합 단백질;
d) SEQ ID NO:68의 중쇄 가변 영역과 SEQ ID NO:42의 경쇄 가변 영역을 포함하는 분리된 항원 결합 단백질;
e) SEQ ID NO:70의 중쇄 가변 영역과 SEQ ID NO:44의 경쇄 가변 영역을 포함하는 분리된 항원 결합 단백질; 및
f) SEQ ID NO:72의 중쇄 가변 영역과 SEQ ID NO:46의 경쇄 가변 영역을 포함하는 분리된 항원 결합 단백질.
9. 상기 항원 결합 단백질이 항체인, 구체예 1 내지 8 중 어느 것의 분리된 항원 결합 단백질.
10. 상기 항체는 단클론성 항체, 재조합 항체, 사람 항체, 인간화된 항체, 키메릭 항체, 다중특이성 항체 또는 그것들의 항체 단편인, 구체예 9의 분리된 항원 결합 단백질.
11. 구체예 10의 분리된 항원 결합 단백질로서, 상기 항체 단편은 Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')2 단편, Fv 단편, 이중체 또는 단일 사슬 항체 분자이다.
12. 구체예 10의 분리된 항원 결합 단백질로서, 상기 항원 결합 단백질은 사람 항체이다.
13. 구체예 10의 분리된 항원 결합 단백질로서, 상기 항원 결합 단백질은 단클론성 항체이다.
14. 구체예 9의 분리된 항원 결합 단백질로서, 상기 항원 결합 단백질은 IgG1-, IgG2-, IgG3- 또는 IgG4-유형의 것이다.
15. 구체예 14의 분리된 항원 결합 단백질로서, 상기 항원 결합 단백질은 IgG1- 또는 IgG2-유형의 것이다.
16. 전술한 구체예 중 어느 것의 분리된 항원 결합 단백질로서, 상기 항원 결합 단백질은 다음의 것들로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 특성을 가지는 분리된 항원 결합 단백질:
a) CD30/CD30L 상호작용을 억제하고;
b) CD30L-유도된 IL-8 유도를 억제하며;
c) 사람 CD30L에의 결합에 대해 항체 A 내지 F 중 하나와 교차-경합하고;
d) 해리 상수가 ≤70pM이며;
e) 항체 A 내지 F 중 하나와 실질적으로 동일한 KD로 사람 CD30L에 결합한다.
17. CD30L에 결합하는 분리된 항원 결합 단백질로서, 그 항원 결합 단백질은 AA 201 내지 234, 또는 예컨대 AA 205 내지 230 또는 AA 211 내지 226에 의해 규정된 CD30L의 C-말단 영역에 결합한다.
18. 구체예 17의 분리된 항원 결합 단백질로서, 그 항원 결합 단백질은 AA 75 내지 95, 예컨대 AA 80 내지 90 또는 AA 82 내지 88에 의해 규정된 CD30L의 추가의 영역에 결합한다.
19. 구체예 17 또는 18의 분리된 항원 결합 단백질로서, 상기 항원 결합 단백질은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 특성을 가지는 분리된 항원 결합 단백질:
a) CD30/CD30L 상호작용을 억제하고;
b) CD30L-유도된 IL-8 유도를 억제하며;
c) 사람 CD30L에의 결합에 대해 항체 A 내지 F 중 하나와 교차-경합하고;
d) 사람 CD30L에 대한 해리 상수가 최대한 70pM이며;
e) 항체 A 내지 F 중 하나와 실질적으로 동일하거나 더 낮은 KD로 사람 CD30L에 결합한다.
20. 전술한 구체예 17 내지 19 중 어느 것의 분리된 항원 결합 단백질로서, 항원 결합 단백질의 hCD30L에 대한 결합은 항체 A, B, C, D, E 및 F 중 하나 또는 그 이상의 Fab의 결합에 의해 억제된다.
21. 전술한 구체예 17 내지 19 중 어느 것의 분리된 항원 결합 단백질로서, 항원 결합 단백질은 항체 A, B, C, D, E 및 F 중 하나 또는 그 이상의 Fab와 CD30L에의 결합에 대해 경합한다.
22. 구체예 20 또는 21의 분리된 항원 결합 단백질로서, Fab는 항체 A1의 Fab이다.
23. 전술한 구체예 17 내지 22 중 어느 것의 분리된 항원 결합 단백질로서, 상기 항원 결합 단백질은 최대 75pM, 예를 들면 최대 50pM, 예컨대 40pM의 사람 CD30L에 대한 해리 상수(KD)를 가진다.
24. CDRH1, CDRH2 및 CDRH3와 CDRL1, CDRL2 및 CDRL3를 포함하는, 전술한 구체예 17 내지 23 중 어느 것의 분리된 항원 결합 단백질로서,
CDRL1은 SEQ ID NO:30의 CDRL1 공통 서열이고,
CDRL2는 SEQ ID NO:31의 CDRL2 공통 서열이며,
CDRL3는 SEQ ID NO:32의 CDRL3 공통 서열이고,
CDRH1은 SEQ ID NO:33의 CDRH1 공통 서열이며,
CDRH2는 SEQ ID NO:34의 CDRH2 공통 서열이고,
CDRH3는 SEQ ID NO:35의 CDRH3 공통 서열이다.
25. CDRH1, CDRH2 및 CDRH3와 CDRL1, CDRL2 및 CDRL3를 포함하는, 전술한 구체예 17 내지 23 중 어느 것의 분리된 항원 결합 단백질로서,
CDRL1은 SEQ ID NO:30의 CDRL1 공통 서열이고,
CDRL2는 SEQ ID NO:31의 CDRL2 공통 서열이며,
CDRL3는 SEQ ID NO:32의 CDRL3 공통 서열이고,
CDRH1은 SEQ ID NO:17의 서열 또는 SEQ ID NO:75의 CDRH1 공통 서열이며,
CDRH2는 SEQ ID NO:34의 CDRH2 공통 서열이고,
CDRH3는 SEQ ID NO:35의 CDRH3 공통 서열이다.
26. CDRH1, CDRH2 및 CDRH3와 CDRL1, CDRL2 및 CDRL3를 포함하는, 전술한 구체예 17 내지 23 중 어느 것의 분리된 항원 결합 단백질로서,
CDRL1은 SEQ ID NO:30의 CDRL1 공통 서열이고,
CDRL2는 SEQ ID NO:31의 CDRL2 공통 서열이며,
CDRL3는 SEQ ID NO:32의 CDRL3 공통 서열이고,
CDRH1은 SEQ ID NO:17의 서열 또는 SEQ ID NO:75의 CDRH1 공통 서열이며,
CDRH2는 서열 ID NO:19, 20, 21, 22, 23 및 24로부터 선택되고,
CDRH3는 SEQ ID NO:35의 CDRH3 공통 서열이다.
27. CDRH1, CDRH2 및 CDRH3와 CDRL1, CDRL2 및 CDRL3를 포함하는, 전술한 구체예 17 내지 23 중 어느 것의 분리된 항원 결합 단백질로서,
CDRL1은 SEQ ID NO:30의 CDRL1 공통 서열이고,
CDRL2는 SEQ ID NO:31의 CDRL2 공통 서열이며,
CDRL3는 SEQ ID NO:32의 CDRL3 공통 서열이고,
CDRH1은 SEQ ID NO:17의 서열 또는 SEQ ID NO:75의 CDRH1 공통 서열이며,
CDRH2는 서열 ID NO:19, 20, 21, 22, 23 및 24로부터 선택되고,
CDRH3는 SEQ ID NO:25, 26, 27, 28 및 29로 이루어진 군으로부터 선택된다.
28. 다음을 포함하는 전술한 구체예 17 내지 23 중 어느 것의 분리된 항원 결합 단백질:
SEQ ID NO:14, 15, 16, 17 및 18로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRH1;
SEQ ID NO:19, 20, 21, 22, 23 및 24로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRH2;
SEQ ID NO:25, 26, 27, 28 및 29로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRH3;
SEQ ID NO:1, 2, 3, 4, 5 및 6으로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRL1;
SEQ ID NO:7, 8, 9 및 10으로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRL2; 및
SEQ ID NO:11, 12 및 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRL3.
29. 다음을 포함하는 전술한 구체예 17 내지 23 중 어느 것의 분리된 항원 결합 단백질:
a) SEQ ID NO:14, 19 및 25에 의해 확인된 CDRH1, CDRH2 및 CDRH3와 SEQ ID NO:1, 7 및 11에 의해 확인된 CDRL1, CDRL2 및 CDRL3,
b) SEQ ID NO:15, 21 및 26에 의해 확인된 CDRH1, CDRH2 및 CDRH3와 SEQ ID NO:2, 8 및 12에 의해 확인된 CDRL1, CDRL2 및 CDRL3,
c) SEQ ID NO:15, 21 및 26에 의해 확인된 CDRH1, CDRH2 및 CDRH3와 SEQ ID NO:3, 8 및 12에 의해 확인된 CDRL1, CDRL2 및 CDRL3,
d) SEQ ID NO:16, 22 및 27에 의해 확인된 CDRH1, CDRH2 및 CDRH3와 SEQ ID NO:4, 9 및 12에 의해 확인된 CDRL1, CDRL2 및 CDRL3,
e) SEQ ID NO:17, 23 및 28에 의해 확인된 CDRH1, CDRH2 및 CDRH3와 SEQ ID NO:5, 8 및 13에 의해 확인된 CDRL1, CDRL2 및 CDRL3 또는
f) SEQ ID NO:18, 24 및 29에 의해 확인된 CDRH1, CDRH2 및 CDRH3와 SEQ ID NO:6, 10 및 12에 의해 확인된 CDRL1, CDRL2 및 CDRL3.
30. 구체예 1 내지 29 중 어느 것의 적어도 하나의 항원 결합 단백질과 경합하는 항원 결합 단백질.
31. 전부 또는 부분적으로 아퓨코실화된 구체예 1 내지 29 중 어느 것의 항원 결합 단백질.
32. 전술한 구체예들 중 어느 것의 항원 결합 단백질을 코드화하는 분리된 핵산 분자.
33. 구체예 32의 분리된 핵산 분자로서, 적어도 하나의 중쇄 가변 영역은 SEQ ID NO:49, 51, 53, 55, 57, 59, 61, 63, 65, 67, 69, 71 및 73으로 이루어진 군으로부터 선택된 분리된 핵산 분자에 의해 코드화되고, 적어도 하나의 경쇄 가변 영역은 SEQ ID NO:37, 39, 41, 43, 45 및 47로 이루어진 군으로부터 선택된 분리된 핵산 분자에 의해 코드화된다.
34. 구체예 33에 따르는 핵산 분자로서, 상기 핵산 분자는 제어 서열에 작동가능하게 연결된다.
35. 구체예 32에 따르는 핵산 분자를 포함하는 벡터.
36. 구체예 32에 따르는 핵산 분자를 포함하는 숙주 세포.
37. 구체예 35에 따르는 벡터를 포함하는 숙주 세포.
38. 구체예 33 또는 34의 핵산 분자의 단편 또는 그것의 상보물인 혼성화 프로브, PCR 프라이머 또는 서열화 프라이머로서 사용하기에 충분한 분리된 폴리뉴클레오티드.
39. 구체예 1 내지 31 중 어느 것의 항원 결합 단백질을 제조하는 방법으로서, 그 방법은 상기 항원 결합 단백질을 상기 항원 결합 단백질을 분비하는 숙주 세포로부터 제조하는 단계를 포함한다.
40. 구체예 1 내지 31 중 어느 것의 적어도 하나의 항원 결합 단백질과 제약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 제약학적 조성물.
41. 추가로 표지화 그룹 또는 이펙터 그룹을 포함하는 구체예 40의 제약학적 조성물.
42. 구체예 41의 제약학적 조성물로서, 상기 표지화 그룹은 동위원소 표지, 자성 표지, 산화환원 활성 부분, 광학 염료, 비오티닐화된 기 및 이차 리포터에 의해 인지된 예정된 폴리펩티드 에피토프로 이루어진 군으로부터 선택된다.
43. 구체예 42의 제약학적 조성물로서, 상기 이펙터 그룹은 방사성 동위원소, 방사성 핵종, 독소, 치료기 및 화학요법 기로 이루어진 군으로부터 선택된다.
44. 구체예 1 내지 31 중 어느 것의 적어도 하나의 분리된 항원 결합 단백질의 효과적인 양을 질환의 치료 또는 예방이 필요한 환자에게 투여하는 것으로 이루어지는, 환자에서 CD30L과 관련된 질환을 치료 또는 예방하는 방법.
45. 분리된 항원-결합 단백질은 단독으로 또는 조합 치료법으로서 투여되는 구체예 44의 방법.
46. 구체예 1 내지 31 중 어느 것의 적어도 하나의 항원 결합 단백질의 효과적인 양을 투여하는 것으로 이루어지는, 환자에서 CD30L 활성을 감소시키는 방법.
47. 치료 방법에 사용하기 위한 전술한 구체예 1 내지 31 중 어느 것에 따르는 항원 결합 단백질.
48. 염증성 질병의 치료를 위한 전술한 구체예 1 내지 31 중 어느 것에 따르는 항원 결합 단백질.
49. 자가면역 질병, 예컨대 관절염(류머팃성 관절염(RA)을 포함함), 전신성 홍반성 루푸스(SLE), 염증성 잘 질병(IBD), 이를테면 크론병 및 궤양성 대장염의 치료를 위한, 전술한 구체예 1 내지 31 중 어느 것에 따르는 항원 결합 단백질.
실시예
실시예 1
사람 CD30L 항체의 생성
XenoMouseTM 기술(Amgen, Thousand Oaks, CA)을 사용하여 재조합 CD30L 활성을 인지하고 억제하는 사람 단클론성 항체를 개발하였다. 선택된 항체는 사람과 게먹이 원숭이 CD30L과 교차반응하지만, 마우스 CD30L과는 반응하지 않는다.
하이브리도마 상층액을 293T 세포상에서 발현된 재조합 사람 CD30L에의 결합에 대해 형광 마이크로부피 분석 기술(FMAT)에 의해 선별할뿐 아니라 Ramos 세포 상에서의 천연 사람 CD30L에의 결합에 대해 형광-활성화된 세포 분류(FACS) 분석에 의해 선별하였다. FMAT 분석에서, CD30L을 발현하는 293T 세포로 플레이트를 코팅하고, 거기에 하이브리도마 상층액을 첨가한 후, 표준 ELISA 기법을 통해 검출하기 위해 이차 항-사람 Ig 항체를 첨가하였다. 네거티브 대조표준은 CD30L을 발현하지 않는 해당하는 비-형질전환 293T 세포였다.
상층액을 정제하고, 재조합 항체를 IgG1 및 IgG2 구성물로서 표시하였다. 항체를 천연 사람 및 게먹이 원숭이 CD30L에의 결합에 대해 다시 선별하였다. 간단히 설명하자면, 사람 버킷 림프종 Ramos 세포(3×105/웰)를 둥근 바닥 96-웰 미소적정 플레이트(Costar® 96 웰 플레이트(Corning; Acton, MA))에서 인큐베이션하면서 차단 완충액(0.02%의 아지드화 나트륨, 2%의 정상 염소 혈청 및 1%의 정상 토끼 혈청을 함유하고 있는 PBS)중의 항-CD30L IgG 항체로 적정하였다(10㎍/mL 내지 3.2ng/mL의 최종 농도). 사람 CD30.Fc 융합 단백질을 결합에 대한 포지티브 대조표준으로서 포함시켰다. 세포를 30분 동안 4℃에서 인큐베이션한 후 PBS로 2회 세척하고, 추가로 30분 동안 4℃에서 30μL/웰의 항-hu IgG-비오틴(차단 완충액 중의 1:50; Jackson Immunoresearch, West Grove, PA)과 함께 인큐베이션하였다. 그것을 PBS로 2회 세척하고, 세포를 30분 동안 4℃에서 30μL/웰(PBS로 1:50 희석)의 스트렙트아비딘-파이코에리트린(PE; Molecular Probes, Eugene, OR)과 함께 인큐베이션하였다. 세포를 PBS로 2회 세척하고, FACS 분석에 대해 준비하였다. 그 결과를 표 5에 나타낸다.
게먹이 원숭이 활성화된 T 세포를 아이소림프(Isolymph)상에서 밀도 원심분리(2000rpm, 20분 동안)에 의해 헤파린 처리된 게먹이 원숭이 혈액으로부터 말초혈 단핵 세포(PBMC)를 분리함으로써 제조하였다. PBMC를 25mL의 PBS에 재현탁하고, 300㎕의 2-아미노에틸아이소싸이오유로늄 브로마이드(AET)-처리된 양 적혈구의 50% 용액에 첨가한 후 약 700 rpm으로 4℃에서 10분 동안 원심분리하였다. 펠릿화된 세포를 4℃에서 추가로 10분 동안 인큐베이션하고, 부드럽게 재현탁한 후 아이소림프상에서 원심분리하였다. 상층액을 T 세포/적혈구 펠릿으로부터 제거하였다. 그런 다음 펠릿을 25mL의 용해 완충액(물 중의 0.85% 염화 암모늄)에 재현탁하고, 37℃에서 10분 동안 인큐베이션하였다. 그 결과의 T 세포를 펠릿화하고 배양 배지(RPMI-1640 배지 + 10% 열-비활성화된 소태아 혈청)로 2회 세척한 후, 37℃에서 18시간 동안 10ng/mL의 포볼 미리스테이트 아세테이트(PMA; Sigma Chemicals, St Louis, MO) 및 500ng/mL의 로노마이신(Calbiochem, San Francisco, CA)의 존재하에 배양하였다. 배양 기간이 끝날 때에 게먹이 원숭이 T 세포를 계수하고, PBS로 1회 세척한 후 PBS 중의 2%의 염소 혈청, 1%의 토끼 혈청 및 0.1%의 사람 혈청과 함께 30분 동안 4℃에서 인큐베이션하였다. 그런 다음 세포를 상기에서 사람 Ramos 세포에 대해 기술한 것과 같이 항-huCD30L 항체로 염색하였다. 그 결과를 표 5에 나타낸다.
항체를 또한 가용성 사람 CD30.Fc 분자에의 사람 CD30L의 결합을 차단하는 능력에 대해 선별하였다. 간단히 설명하자면, 사람 Ramos 세포 또는 활성화된 게먹이 원숭이 T 세포를 차단 완충액 중의 50㎍/mL의 항-CD30L IgG와 함께 30분 동안 4℃에서 인큐베이션하였다. 그런 다음 가용성 huCD30.Fc-His를 최종 농도 2.5㎍/mL(30μL/웰)로 첨가하고, 30분 동안 4℃에서 인큐베이션하였다. 세포를 PBS로 2회 세척하고, 5㎍/mL의 마우스 항-His 단클론성 항체(차단 완충액 중의 30μL/웰)와 함께 30분 동안 4℃에서 인큐베이션하였다. 그것을 PBS로 2회 세척하고, 세포를 항-마우스 IgG-PE(PBS중의 1:50; BD Pharmingen, San Diego, CA)와 함께 추가로 30분 동안 4℃에서 인큐베이션하였다. 그런 다음 세포를 PBS로 2회 세척하고, FACS 분석에 대해 준비하였다. 그 결과를 표 5에 나타낸다.
실시예 2
CD30L 항체 기능적 선별
항체를 두 개의 IL-8 방출 분석을 사용하여 그것들의 CD30L/CD30 상호작용을 차단하는 능력에 대해 특성확인하였다. 이들 분석은 사람 악성 큰 세포 림프종(ALCL) 셀라인 Karpas-299(K299)를 활용하는데, 그것은 CD30L에 대한 반응으로 내인성 CD30을 발현하고 IL-8을 방출한다. 간단히 설명하면, 정제된 항-사람 CD30L IgG 항체를 재조합 CD30L(단일 세포 분석) 또는 천연 CD30L을 발현하는 Ramos 세포(이중 세포 분석) 중 어느 하나와 함께 인큐베이션하고 K229 세포와 함께 배양하였다. 규정된 인큐베이션 시간이 지난 후, 세포 상층액을 수득하고 샌드위치 ELISA를 사용하여 IL-8 함량에 대해 분석하여, CD30L에 대한 반응으로 항체 후보들에 의한 K299 세포로부터의 IL-8 방출의 억제를 측정하였다.
단일 세포 분석
항-CD30L IgG 항체를 배양 희석액(RPMI-1640 배지 + 10% 열-비활성화된 소태아 혈청)으로 적정하고, 둥근 바닥 96-웰 미소적정 플레이트(Costar® 96 웰 플레이트(Corning; Acton, MA)))에 넣어 최종 농도 범위를 1㎍ml 내지 10pg/ml로 만들었다. 포지티브 대조표준으로서, 마우스 항-사람 CD30L 단클론성 항체를 미국 특허 번호 5,480,981에 기술되어 있는 것과 같이 제조하였다. 희석제 및 CD30L IgG의 최종 부피는 100㎕/웰이었다. 각 웰에 50㎕의 재조합 사람 CD30L 아이소로이신 지퍼(huCD30L LZ)를 첨가하였다. huCD30L LZ 구성물은 로이신 잔기를 아이소로이신 잔기로 대체함으로써 변형된 아이소로이신 지퍼 모티프에 그것의 N-말단에서 연결된 사람 CD30L의 세포외재성 도메인을 포함한다(미국 특허 번호 5,480,981 참조). 단일 세포 분석을 또한 huCD30L LZ 대신 cyno CD30L LZ를 사용하여 cyno 교차-반응성을 측정하기 위해 사용하였다. CynoCD30L LZ는 사람 LZ 분자에 대해 기술된 것과 같이 제조하였다.
플레이트를 45분 동안 실온에서 인큐베이션하였다. 각 웰에 50㎕의 K299 세포(4×105 세포/ml)를 첨가하였다. 그런 다음 플레이트를 24시간 동안 37℃ 5% CO2에서 인큐베이션하였다.
세포 상층액 중의 IL-8의 양을 샌드위치 ELISA에 의해, 제조업체(R&D Systems, Minneapolis, MN)의 지시를 따라 CDCL8/IL-8 ELISA DuoSet 키트를 사용하여 측정하였다. IL-8 수준을 ELISA 표준 곡선으로부터 DeltaSoft 3 버전 2.2 소프트웨어(DeltaSoft, Inc. Hillsborough, NJ)를 사용하여 내삽하였다. 모든 결과를 GraphPad PRISM 소프트웨어 v. 4.01 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA)에 의해 계산하고 IC50 값과 같이 3개의 중복 배양물에 대한 평균±평균의 표준 오차(SEM)로서 표시한다. cynoCD30L LZ를 사용한 결과를 표 5에 나타낸다.
이중 세포 분석
상기에서 기술된 것과 같이, 항-CD30L IgG 항체를 배양 희석액 안으로 적정하고, 둥근 바닥 96-웰 미소적정 플레이트에 넣어 최종 농도 범위를 1㎍/ml 내지 10pg/ml로 만들었다. 희석제 및 CD30L IgG의 최종 부피는 100㎕/웰이었다. 각 웰에 50㎕의 조사된(5000 RADS) CD30L+ Ramos 세포(4×106/ml, ATCC)를 첨가하였다. Ramos 세포에 대해 FACS 분류를 시행하여 가장 높은 수준의 세포 표면 CD30L 발현을 보이는 세포들을 선택하였다.
플레이트를 45분 동안 실온에서 인큐베이션하였다. 각 웰에 50㎕의 K299 세포(4×105 세포/ml)를 첨가하였다. 그 플레이트를 24시간 동안 37℃ 5% CO2에서 인큐베이션하였다.
배양 상층액 중의 IL-8의 양을 샌드위치 ELISA에 의해, 제조업체(R&D Systems, Minneapolis, MN)의 지시를 따라 CDCL8/IL-8 ELISA DuoSet 키트를 사용하여 측정하였다. IL-8의 양 및 IC50 값을 상기에서 기술한 것과 같이 계산하였다. 표 5 참조.
항체 유도를 마우스 항-사람 CD30L 단클론성 항체 대조표준과 비교하여 CD30L-유도된 IL-8 유도를 억제하는 능력을 토대로 선택하였다.
분석 |
항체 | |||||||
A | E | F | C | D | B | A1 | A1 IgG1 | |
천연 huCD30L (K299/Ramos 이중 세포, IC50) |
28pM | 45pM | 60pM | 36pM | 62pM | 72pM | 33pM | 32pM |
천연 결합 (FACS, EC50) Hu Cyno |
1.7nM 2.2nM |
3.3nM 2.7nM |
2.3nM 2.9nM |
1.7nM 1.0nM |
3.3nM 2.7nM |
3.1nM 4.0nM |
||
CD30L LZ 차단 (K299에의 결합, IC50) Hu Cyno |
1.5nM 1.4nM |
2.1nM 1.3nM |
2.0nM 0.45nM |
1.9nM |
2.5nM |
1.4nM |
||
천연 차단 (CD30Fc 결합, % 억제) Hu Cyno |
68% 77% |
80% 87% |
ND 97% |
88% 83% |
55% 84% |
70% 88% |
||
Cyno CD30L LZ (K299/단일 세포, IC50) |
2.0nM |
5.4nM |
5.5nM |
3.9nM |
5.4nM |
5.6nM |
2.4nM |
1.5nM |
이론적인 등전점 | 8.89 | 8.86 | 8.96 | 8.74 | 9.01 | 8.84 |
실시예 3결합 경합에 의한 CD30L 항체의 비닝하나의 표지된 CD30L 항체가 rhCD30L에의 결합에 대해 다른 미표지 CD30L 항체의 과잉량과 경합하는 결합 경합 분석을 사용하여 비닝(binning)을 수행하였다. 상호간에 경합하는 항체를 동일한 빈(bin)으로 배정하였다. 항체 A 내지 F는 rhCD30L에의 결합에 대해 상호간에 경합하였다.
실시예 4
CD30L 항체에 대한 세포 상의 평형 해리 상수(Kd)의 측정
Ramos 세포상에서 발현된 CD30L에 대한 CD30L 항체의 결합 친화성을 FACS Kd 방법에 의해 측정하였다. Ramos 세포를 RPMI1640 배지 + 10% FBS + L-glut + 0.05% 아자이드 중에서 배양하였다. 2개의 평형 반응을 설정하였고, 항체를 60nM부터 338fM까지 세포 배양 배지를 사용하여 적정하고, 두 개의 상이한 일정한 세포 농도(25000 및 250000 세포)로 인큐베이션하였다. 플레이트를 파라필름으로 밀봉하고 37℃에서 20시간 동안 흔들어주면서 인큐베이션하였다. 평형 플레이트를 원심분리하고 세포 펠릿을 빙냉 FACS 완충액(1X D-PBS+2% FBS)으로 2회 세척하였다. 그런 다음 세포를 이차 항체 염소 항-사람 Fc Cy5(Jackson Immuno Research, West Grove, PA) 및 7AAD(BD-Biosciences, Rockville, MD)와 함께 1시간 동안 얼음 위에서 어두운 곳에서 인큐베이션하였다. 인큐베이션 후에, 세포를 빙냉 FACS 완충액으로 세척하고, 유동 세포분석법으로 분석하였다. 살아있는 세포 집단에 모인 FL4 시프트의 GeoMean 값은 결합된 [Ab]를 측정한다. 그런 다음 평형 용액 중의 이론적인 유리 [Ag]를 반영하는 GeoMean 값의 반전값을 계산하였다. GeoMean 판독의 반전값을 분석에 대한 KinExA 소프트웨어 및 각 항체에 대한 Kd 계산에 사용하였다. 유리 [Ag] 척도를 적정 성분의 출발 농도에 대하여 도표화하고, 이들 도표로부터 두 개의 상이한 세포 농도에서 Kd를 곡선 맞춤으로부터 KinExATM Pro 소프트웨어로 n-곡선 분석을 사용하여 얻었다. 95% 신뢰 간격을 낮은 Kd 및 높은 Kd로서 제공한다.
아래의 표 6에서 알 수 있는 것과 같이, 항체는 Ramos 세포 상에서 발현된 CD30L에 대해 높은 친화성을 나타낸다. 모두 낮은 pM 범위의 Kd 값을 나타냈다.
항체 | Kd(pM) | 낮은 Kd (pM) | 높은 Kd (pM) |
B | 7.43 | 4.58 | 11.70 |
A | 25.46 | 18.15 | 33.10 |
D | 11.90 | 8.44 | 16.14 |
E | 52.08 | 38.29 | 69.56 |
F | 35.75 | 26.92 | 46.64 |
C | 43.99 | 34.15 | 56.02 |
실시예 5ADCC 분석A1으로부터의 가변 도메인을 사람 IgG1 불변 도메인(A1 IgG1)에 부착시켰다. 이 항체를 Fut-8 녹-아웃 CHO 셀라인에서 발현시켜서 아퓨코실화된 항체, A1 IgG1f를 얻었다.
CD30L 항체 중재된 표적 세포의 사멸을 항체 의존성 세포독성(ADCC) 분석으로 평가하였다. 표적 세포 Ramos(CD30L 발현 수준 높음), JD38(CD30L 발현 수준 중간), DS179(CD30L 발현 수준 낮음) 및 EW36(CD30L 발현 없음)을 수득하고, 2X106 세포/ml로 cRPMI-10 배지(RPMI(Life Technologies, Carlsberg, CA)+ 10% 소태아 혈청)에 재현탁하였다. 거기에 무수 DMSO 중의 Calcein-AM, 4MM(Sigma-Aldrich, St. Louis, MO)을 10μM의 최종 농도(1:400 희석)로 첨가하였다. 세포를 30분 동안 37℃에서 인큐베이션한 다음, PBS로 2회 세척하였다(각각 1500rpm, 4℃에서 5분). 펠릿을 cRPMI-10에 재현탁하고, 얼음 위에 0.2×106 세포/ml의 농도로 조정하여 놓고 다음 단계에서 사용하였다.
항체 A1 IgG1 및 항체 A1 IgG1f를 먼저 U-자형 바닥 96-웰 플레이트(BD, Franklin Lakes, NJ)에 10㎍/ml로부터 시작하여 10배 연속 적정으로 첨가하였다. 리툭시맵(Genentech, South San Francisco, CA)을 포지티브 항체 대조표준으로서 사용하였다. 항체 A1(IgG2)를 네거티브 대조표준으로서 첨가하였다. 그런 다음 상기에서 설명된 것과 같은 Calcein-AM-표지된 표적 세포를 각 웰에 첨가하고(10,000세포/웰), 항체와 함께 20분 동안 37℃에서 인큐베이션하였다. 인큐베이션 후에, 각 웰에 50㎕의 NK 세포를 4×106 세포/ml의 농도로 첨가하고, 4시간 동안 37℃에서 인큐베이션하였다. NK 세포를 펠릿화하고(1500rpm, 4℃에서 5분) cRPMI-10에 재현탁하고, 세포 농도를 4×106 세포/mL로 조정하였다.
인큐베이션 후에 대조 웰을 100% 용해를 자극하기 위해 20㎕/웰의 9% NP-40(IGEPAL CA 630, Sigma-Aldrich)을 첨가함으로써 제조하였다. 다른 웰에는 모두 20㎕/웰의 cRPMI-10 배지만을 넣었다. 플레이트를 800RPM에서 4분 동안 4℃에서 회전시켰다. 상층액(150㎕)을 제거하고, 깨끗한 바닥의 검은색 96 웰 플레이트(Molecular Devices, Spectra max GEMINI)에 옮기고 플레이트 판독기 상에서 형광값을 판독하였다. 여기 485, 방출 535.
% 최대 용해를 (샘플 값-자발적 용해)/(100% 용해-자발적 용해)*100으로서 계산하였다.
4개의 표적 세포의 CD30L 항체 중재된 사멸의 결과를 도 1에 나타낸다(1a 내지 1d). 항체 A1 IgG1은 CD30L 발현 세포 중 어느 것에 대해서도 세포 사멸을 중재하지 못하였다(도 1a 내지 1d). 항체 A1 IgG1f는 높은 CD30L 발현을 보이는 표적 세포(도 1a) 및 중간 CD30L 발현을 보이는 표적 세포(도 1b) 둘 다에 대해 세포 사망을 유도하였다. 항체 A1 IgG1f는 중간 수준의 CD30L 발현을 보이는 표적 세포에 대한 것보다 더 높은 CD30L 발현을 보이는 표적 세포에 대해 더 큰 수준의 고갈을 중재하였다(도 1a 및 1b 참조). 항체 A1 IgG1f는 낮은 CD30L 발현을 보이는(도 1c) 또는 발현을 보이지 않는(도 1d) 표적 세포를 죽이지 못하였다.
실시예 6
항-CD30L mAb의 HX-MS에 의한 에피토프 지도화
항-CD30L 항체의 CD30L 결합 영역을 HX-MS에 의해 평가하여 본원에서 기술된 항체 A 내지 F와의 분자상 상호작용에 포함된 사람 CD30L의 영역 또는 영역들을 확인하였다.
재료
hCD30L: hCD30L의 세포외재성 도메인의 두 개의 상이한 버전을 사용하였는데, SEQ ID NO:74에 의해 확인된 것과 같이 His-hCD30L-EC는 hCD30L의 잔기 63 내지 234를 함유하고, 이름이 나타내는 것과 같이 단백질은 N-말단 His-태그(RnD Systems)를 사용하여 제조된다. FLAG-hCD30L-EC는 SEQ ID NO:74의 잔기 66 내지 234를 함유하고, N-말단 FLAG-His-태그를 사용하여 포유류 세포로부터 얻었다.
사람 CD30L의 세포외재성 도메인의 cDNA를 Origene으로부터 구매하였다. FLAG-His6 태그 및 TEV 프로테아제 절단 부위를 아미노산 66 내지 234에 대한 코딩 서열의 N-말단에 2-단계 연장 PCR에 의하여 융합시키고, pJSV001 플라스미드의 EcoRI과 BamHI 부위 사이에 CD33 신호 펩티드와 한 프레임으로 클론하였다.
아래에서 사용되는 FLAG-hCD30L-EC는 N-글리코실화를 없애는 N153Q 점 돌연변이를 포함한다. N153Q 돌연변이체를 Qiagen 빠른-변화 점 돌연변이생성 키트(QIAGEN)를 사용하여 생성하였다.
HEK293 6E 세포를 단백질 제조를 위해 사용하였다. 세포를 25㎍/ml의 Geneticin 418(Gibco) 및 0.1%의 F-68(Gibco)이 첨가된 FreeStyleTM 배지(Gibco)와 함께 배양하였다. 형질전환 첫 날에 세포를 1×106 세포/ml의 밀도로 유지하고, 제조업체의 지시를 따라 293 Fectin(Invotrogen)으로 형질전환시켰다. 형질전환 후 24시간이 지난 후에, 펩톤(Promega)을 배양물에 0.5%의 최종 농도로 첨가하였다. 세포를 계속 5일 동안 성장시킨 후 상층액을 수집하였다.
배양 상층액을 원심분리(15,000rpm×20분, 4℃)에 의해 수득한 후 0.22㎛의 셀룰로스 니트레이트 막을 사용하여 여과함으로써 정화시켰다. 정화된 상층액을 Ni-킬레이트화된 세파로스 XK60 칼럼(20ml)(GE healthcare)에 적용한 후, 5 칼럼 부피의 20mM NaH2PO4 pH 7.4, 0.5M NaCl, 0.5M 이미다졸로 용출하였다. 용출된 단백질을 모아 Amicon 울트라 15 원심분리 튜브(10,000Da MWCO, Millipore)에 의해 약 5ml로 농축하고, Hiload 26/60 Superdex200 318ml 칼럼(GE healthcare)에 로딩하여 응집체를 제거하고, 완충액을 PBS로 교체하였다. 농축한 후에 최종 단백질 농도를 NANODROP UV 분광계를 사용하여 280nm에서의 흡광도를 측정함으로써 측정하였다. 단백질 순도를 SDS-PAGE에 의해 평가하였다.
탈글리코실화를 대략 16시간 동안 37℃에서 5㎍의 hCD30L당 1U의 PNGaseF(Roche)를 사용하여 수행하였다. 탈글리코실화된 단백질을 4℃에서 보관하고, 일주일 이내의 실험에 대해 사용하였다. 모든 단백질의 완충액을 PBS pH 7.4로 교체한 후 HX-MS 실험을 수행하였다.
HX-MS 실험
기기 및 데이터 기록
HX 실험을 Synapt G2 질량 분석기(Waters Inc.)에 결합된 HDX 기술을 사용하는 나노ACQUITY UPLC 시스템 상에서 수행하였다. Waters HDX 시스템은 LeapShell 소프트웨어(Leap Technologies Inc/Waters Inc.)에 의해 작동되는 Leap 로봇(H/D-x PAL; Waters Inc.)을 포함하는데, 그것은 중수소 교환 반응의 개시, 반응 시간 제어, 퀀칭 반응, UPLC 시스템 안으로의 주입 및 소화 시간 제어를 수행하였다. Leap 로봇에는 각각 완충액 보관 및 HX 반응을 위해 20℃에서 유지되고, 단백질의 보관 및 퀀칭 용액을 위해 2℃에서 유지되는 두 개의 온도 제어된 스택이 장착되어 있다. 나아가 Waters HDX 시스템에는 예비- 및 분석용 칼럼을 보유하는 온도 제어된 챔버, 및 1℃에서의 LC 튜빙과 스위칭 밸브가 구비되어 있다. 별도로 온도 제어된 챔버는 25℃에서의 펩신 칼럼을 포함한다. 인라인 펩신 소화를 위해, 300pmol의 hCD30L을 함유하고 있는 100μL의 퀀칭된 샘플을 로딩하고, 25℃에서 놓여있는 Poroszyme® 고정된 펩신 카트리지(2.1×30mm(Applied Biosystems)) 위를 100μL/Q분의 등용매 유속을 사용하여(0.1% 폼산:CH3CN 95:5) 통과시킨다. 그 결과의 펩티드를 포획하고, VanGuard 예비-칼럼 BEH C18 1.7 ㎛(2.1×5mm (Waters Inc.)) 상에서 탈염시켰다. 계속해서, 밸브를 스위칭하여 예비-칼럼 인라인을 분석 칼럼, UPLC-BEH C18 1.7㎛(1×100mm (Waters Inc.))으로 위치시키고, 펩티드를 나노AQUITY UPLC 시스템(Waters Inc.)으로부터 40㎕/분에서 전달된 10 내지 50%의 B의 9분 구배를 사용하여 분리하였다. 이동상은 A: 0.1%의 폼산과 B: CH3CN 중의 0.1%의 폼산으로 구성되었다. ESI MS 데이터, 및 별도의 상승된 에너지(MSE) 실험을 Synapt G2 질량 분석기(Waters Inc.)를 사용하여 양이온 방식으로 얻었다. 로이신-엔케팔린을 질량 잠금(m/z 556.2771에서 [M+H]+이온)으로서 사용하였고, 데이터를 연속 방식으로 수집하였다(추가의 설명에 대해서는 Andersen and Faber, Int. J. Mass Spec., 302, 139-148(2011) 참조).
데이터 분석
펩신 펩티드를 별도의 실험으로, 펩티드와 단편이 Synapt G2(Waters Inc.)의 이온 이동 특성을 활용하여 추가로 배열되는 표준 MSE 방법을 사용하여 확인하였다. MSE 데이터를 ProteinLynx Global Server 버전 2.5(Waters Inc.)를 사용하여 처리하였다. HX-MS 원데이터 파일을 DynamX 2.0 소프트웨어(Waters Inc.)로 처리하였다. DynamX는 질량 잠금-수정 및 중수소 통합 측정, 즉 중수소처리된 펩티드의 중심 측정을 자동으로 수행한다. 나아가 모든 펩티드를 소프트웨어에 의해 정확한 피크 및 중수소화 과업을 보장하기 위해 점검하였다.
에피토프 지도화 실험
아마이드 수소/중수소 교환(HX)을 mAb A, B, C, D, E 또는 F의 존재 또는 부재하에 해당하는 중수소화된 완충액(즉 D2O중에 제조된 PBS, 96% D2O 최종, pH 7.4(수정되지 않은 값))으로 hCD30L의 6배 희석에 의해 개시하였다. 모든 HX 반응을 20℃에서 수행하였고, 6.6μM의 mAb의 존재 또는 부재하에 6μM의 hCD30L(사용된 단량체 Mw)을 함유하였으며, 따라서 2.2배 과잉 몰의 mAb를 얻었다. 0.25, 0.5, 1, 3 및 10분의 시간 간격으로, HX 반응액의 50㎕의 일정액을 50㎕의 빙냉 퀀칭 완충액(1.35M TCEP)에 의해 퀀칭하여 2.5의 최종 pH를 얻었다(수정되지 않은 값).
결과
hCD30L 단백질
hCD30L 중의 글리코실화의 존재는 HXMS 분석을 방해할 것이다. 단백질 글리코실화의 미지의 질량 및 흔하게는 이종성 성질 때문에, 그 결과의 펩신 펩티드는 MS로 확인 및 분석될 수 없다. 그러나 hCD30L로부터 글리코실화를 제거함으로써 HXMS에 적당한 잘-규정된 아미노산 서열을 생성할 수 있었고, 그것은 MS로 확인 및 분석될 수 있다.
hCD30L 세포외재성 도메인은 아래의 표 7의 첫 번째 칼럼에서 열거된 것과 같이 5개의 잠재적인 N-글리코실화 부위를 함유한다. 글리코실화를 PNGaseF를 사용한 처리 및 점 돌연변이 둘 다에 의해 제거하여 HXMS 분석에 더 적합한 단백질을 얻으려고 시도하였다.
HIS-hCD30L-EC의 MS 및 SEC-MALS 분석은 5개의 잠재적인 N-글리코실화 부위 중에서 4개가 실제로 글리코실화되었음을 나타냈다(표 7; 데이터는 제시하지 않음). 이 단백질을 천연 조건 하에서 PNGaseF로 처리할 때, 단지 2개의 글리코실화만이 PNGaseF에 의해 효소적으로 제거될 수 있었고, 따라서 두 개의 N-글리코실화는 단백질 상에 남아 있었다.
천연 조건 하에서 PNGaseF로 FLAG-hCD30L-EC를 처리할 때, MS와 SEC-MALS는 둘 다 이 단백질이 완전히 탈글리코실화될 수 있었음을 증명하였다. 결론적으로, N153Q 돌연변이는 His-hCD30L-EC로부터 효소적으로는 제거될 수 없었던 N-글리코실화 부위를 제거하였고, 이 단백질은 HXMS에 최적한 것으로 여겨졌다. 글리코실화 부위(들) 평가의 개관은 표 7에 포함된다.
CD30L의 잠재적인 N-글리코실화 부위 | His-hCD30L-EC | His-hCD30L-EC + PNGaseF |
FLAG-hCD30L-EC (N153Q) | FLAG-hCD30L-EC + PNGaseF |
N81 | Glyc | D | Glyc | D |
N109 | Glyc | D | Glyc | D |
N153 | Glyc | Glyc | Q | Q |
N189 | N | N | N | N |
N201 | Glyc | Glyc | Glyc | D |
D, N, Q는 서열 위치에서 변형되지 않은 아미노산의 존재를 나타낸다.Glyc는 N-글리코실화의 존재를 나타낸다. HX-MS 분석
중수소 교환 반응 후에, hCD30L-EC를 펩신으로 소화시켜서 표 8에 표시된 펩신 펩티드 영역을 얻는다. hCD30L 잔기의 넘버링은 SEQ ID NO:74를 따르지만, N-말단 FLAG-His 태그 DYKDDDDKHHHHHHENLYFQG는 hCD30L 서열의 부분이 아니다. FLAG-hCD30L-EC의 일차 구조의 83%를 차지하는 40 펩신 펩티드의 HX 시간-경과를 mAb A, B, C, D, E 또는 F의 존재 또는 부재시에 모니터하였고, 데이터를 표 8에 나타낸다.
본 연구에서 분석하지 않은 나머지 서열은 펩신 펩티드로 덮여있다; 그러나 신호 세기가 데이터 분석에는 불충분하였다. mAb A1, B, C, D, E 또는 F의 존재 또는 부재시에 초기 시간 지점(<10분)에서 관찰된 교환 패턴은 두 개의 상이한 군으로 나누어질 수 있다: 한 군은 hCD30L-EC 펩신 펩티드가 mAb의 결합에 의해 영향을 받지 않은 교환 패턴을 나타낸다. 대조적으로, 다른 군은 hCD30L의 펩티드가 mAb 결합시에 교환으로부터 보호되는 것으로 나타난다(표 8). 중복하는 펩신 펩티드의 경우, 교환 보호 정보는 펩티드 N-말단과 첫 번째 펩티드 결합의 완전한 백-교환을 가정하는 펩티드 내에서 특이한 잔기 또는 스트레치로 하위-국한시키는 것을 시도한다. 펩티드에서 교환 보호는 이런 영역이 mAb 결합에 포함되어 있음을 가리킨다. 그로써 에피토프는 부분적으로 또는 완전하게 특이한 펩티드에 의해 규정된 영역 내에 위치한다. 그러나, HX-MS의 해상도는 변성된 단백질의 펩신 소화를 토대로 하기 때문에, 주어진 영역 내에서의 교환 보호는 그 영역 내에 있는 모든 잔기가 본질적으로 mAb 결합에 포함되는 펩신 펩티드에 의해 규정된다는 것을 암시하는 것은 아니다.
mAb A1의 에피토프 지도화
mAb A1의 에피토프를 4가지의 상이한 실험으로, 3회는 FLAG-hCD30L-EC를 사용하고 1회는 His-hCD30L-EC를 사용하여 지도화하였다. 두 가지 단백질을 모두 HX-MS 실험 전에 PNGaseF로 처리하였다. 이들 연구의 결과는 사용된 hCD30L 단백질과 무관하게 매우 유사하였고, 모두 동일한 에피토프 정보를 산출하였다. 그러나, 서열 범위는 His-hCD30L-EC 실험에서 글리코실화된 영역의 검출가능한 펩티드의 결핍으로 인해 명백하게 더 적었다.
mAb A1에 대한 에피토프 신호는 hCD30L의 N-말단에서 잔기 Cys88까지에서 관찰되었다(표 8). 교환 보호는 출발 지점(잔기 45, 62 또는 66)으로부터 연장된 펩티드가 더 길어질수록 더 강력해졌고, 그로써 펩티드의 더 많은 C-말단 영역 및 또한 잔기 88에서 교환 보호가 있음을 가리킨다. 대조적으로 펩티드 45 내지 65, 45 내지 81 및 66 내지 81은 교환 보호를 나타내지 않았다. 나아가, 잔기 D81은 글리코실화된 N이 PNGaseF의 작용을 받을 때 D로 되는 글리코실화 부위이다. 따라서 N/D81은 아마도 mAb 결합에 포함되지 않는다. 그러므로 에피토프 신호는 영역 82 내지 88 CSEDLLC 내에 있는 잔기로부터 발생하는 것으로 보인다.
mAb A1에 대한 에피토프 신호를 또한 F211 내지 S226 영역에 걸쳐있는 6개의 상이한 펩티드에서 hCD30L의 C-말단 영역(표 8)에서 관찰하였다. 관찰된 교환 보호 수준을 토대로, 모든 부분이 결합에 포함되거나 다소의 정도 차이는 있어도 mAb의 결합에 의해 영향을 받는 것으로 보인다. 항체에 의해 결합된 영역들은 표 8에서 진하게 표시된다.
결론적으로, mAb A 결합에 포함된 hCD30L의 영역은 82 내지 88 영역 CSEDLLC와 211 내지 226 영역 FQYIDTSTFPLENVLS로서 검출된다.
mAb B, C, D, E 및 F의 에피토프 지도화
mAb B, C, D, E 및 F의 에피토프를 HX-MS 실험 전에 PNGaseF로 처리된 FLAG-hCD30L-EC를 사용하여 지도화하였다. 이들 연구의 에피토프 결과는 mAb A와 매우 유사하였고(표 8), 또한 교환 보호의 정도와 관련되었다. mAb E에 대한 에피토프 지도화를 2회 수행한 반면, A, B, C 및 D는 각각 1회 지도화하였다.
Ex: 에피토프 영역을 가리키는 항체 결합시 교환 보호(적어도 3개의 시간-지점에서 >0.4Da)
W: 항체 결합시 약한 교환 보호(적어도 3개의 시간-지점에서 0.2 내지 0.4Da)
N: 항체 결합시 교환 보호 없음(<0.2Da)
na: 각각의 실험에서 분석되지 않음.
결론적으로, 결합하는 mAb B, C, D, E 및 F에 포함된 hCD30L의 영역은 mAb A1의 결합에 포함된 영역과 유사하고, 82 내지 88 영역 CSEDLLC 및 211 내지 226 영역 FQYIDTSTFPLENVLS로서 검출된다.
실시예 7
고정된 항-CD30L A-F
AB
를 사용한 CD30L 항체의 비닝
항-사람 CD30L 단클론성 항체를 고전적인 샌드위치 접근법을 사용하여 Biacore T200(GE Healthcare 28-9750-01) 상에서 에피토프 비닝하였다.
입체 장애를 줄이기 위하여 고정된 항체를 일가 형식으로 사용하였다. 항-hCD30L 항체의 항원 결합 영역이 중복되는 에피토프에 결합하는지를 측정하기 위하여, 이미 항체 A1의 Fab에 의해 결합된 CD30L에 항체 A 내지 F가 결합하는 능력을 시험하였다.
전체 항체를 힌지 영역의 시스테인의 상류쪽을 절단하는 파파인으로 소화시키거나 중쇄 및 경쇄 가변 영역의 재조합 발현에 의해 Fab 단편을 얻었다. 항-hCD30L A1의 Fab 단편(A1-FAB)을, 시스테인의 존재 하에 힌지 영역의 오른 쪽 위에서 전체 IgG를 효소적으로 절단하여 항체 분자당 두 개의 Fab 단편과 하나의 Fc 단편을 생성하는 고정된 파파인을 사용하여 제조하였다. Fab를 Fc로부터 단백질 A 친화성 크로마토그래피를 사용하여 분리한 후 완충액을 PBS로 교환하였다. 그 과정을 제조업체(Pierce Fab Preparation Kit #44985, US)의 지시를 따라 수행하였다.
항-사람 CD30L FAB(항체 A1의 Fab)를 고정시키고 이어서 사람 CD30L-His10 삼량체(R&D Systems 1028-CL)를 포획했다. 계속해서 가용성 항-hCD30L A-F를 주입하였다. 이차 항체의 결합은 두 개의 항체가 상이한 에피토프 빈에 있음을 시사한다.
항-hCD30L A1-FAB를 10mM의 아세테이트 완충액, pH 5.0으로 40㎍/mL로 희석하고, 표준 과정을 사용하여 CM5 칩(GE healthcare BR-1000-12, BR-1000-50)에 3566 RU의 수준으로 아민 결합시켰다. 사람 CD30L-His10 삼량체(R&D Systems 1028-CL)를 HBS-P+(GE healthcare BR-1006-71)로 10nM로 희석하고, A-FAB 표면 위로 주입하여 대략 175RU의 CD30L을 포획하였다. 이차 항체를 포획된 hCD30L 위로 75nM에서 주입하였다. 대조표준은 가치없는 포획(완충액만 있음)을 포함하였고, 가용성 항체 대신 완충액을 주입하였다. 모든 실험을 25℃에서 수행하였다.
A-FAB로 hCD30L을 코팅하는 것은 항체 A-F의 하위 그룹의 결합을 차단하였다. A-Fab와 A를 사용한 대조표준은 예상했던 것과 같이 둘 다 차단하였다. 또한 항체 F와 B는 포획된 hCD30L에의 결합이 방지된 반면, 항체 E, C 및 D는 hCD30L에 결합할 수 있었는데, 이것은 A, B 및 F의 결합 에피토프와 구별될 수 있는 결합 에피토프가 있다는 것을 증명한다. 결론적으로, 항체 A, F 및 B는 hCD30L에의 결합에 대해 항체 A1의 Fab와 경합한다.
SEQUENCE LISTING
<110> AMGEN Inc.
Novo Nordis A/S
<120> CD30 LIGAND ANTIGEN BINDING PROTEINS
<130> 8679.204-WO
<160> 75
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 14
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 1
Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Val Tyr Asp Tyr Val Ser
1 5 10
<210> 2
<211> 14
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 2
Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Leu Tyr Asn Tyr Val Ser
1 5 10
<210> 3
<211> 14
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 3
Thr Gly Thr Ser Ser Asp Ile Gly Leu Tyr Asp Tyr Val Ser
1 5 10
<210> 4
<211> 14
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 4
Thr Gly Thr Ser Ser Asp Ile Gly Leu Tyr Asn Tyr Val Ser
1 5 10
<210> 5
<211> 14
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 5
Thr Gly Ser Ser Ser Asp Ile Gly Thr Tyr Asn Tyr Val Ser
1 5 10
<210> 6
<211> 14
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 6
Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Leu Tyr Asn Tyr Val Ser
1 5 10
<210> 7
<211> 7
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 7
Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser
1 5
<210> 8
<211> 7
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 8
Glu Val Asn Asn Arg Pro Ser
1 5
<210> 9
<211> 7
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 9
Glu Val Ile Asn Arg Pro Ser
1 5
<210> 10
<211> 7
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 10
Glu Val Ser Lys Arg Pro Ser
1 5
<210> 11
<211> 10
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 11
Ser Ser Tyr Thr Ser Arg Ser Thr Trp Val
1 5 10
<210> 12
<211> 10
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 12
Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Trp Val
1 5 10
<210> 13
<211> 10
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 13
Ser Ser Tyr Ser Ser Ser Ser Thr Trp Val
1 5 10
<210> 14
<211> 5
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 14
Ser Tyr Ile Trp Ser
1 5
<210> 15
<211> 5
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 15
Ser Tyr Tyr Trp Thr
1 5
<210> 16
<211> 5
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 16
Ser Tyr Ser Trp Ser
1 5
<210> 17
<211> 5
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 17
Asn Asn Tyr Trp Ser
1 5
<210> 18
<211> 5
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 18
Ser Tyr Tyr Trp Ser
1 5
<210> 19
<211> 16
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 19
Arg Ile Tyr Ala Ser Gly Asn Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser
1 5 10 15
<210> 20
<211> 16
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 20
Arg Ile Tyr Ala Ser Gly Gln Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser
1 5 10 15
<210> 21
<211> 16
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 21
Arg Ile Tyr Thr Ser Gly Ile Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser
1 5 10 15
<210> 22
<211> 16
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 22
Arg Thr Ser Thr Ser Gly Arg Asn Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser
1 5 10 15
<210> 23
<211> 16
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 23
Arg Val Tyr Ser Ser Gly Leu Thr Asn Tyr Lys Pro Ser Leu Lys Ser
1 5 10 15
<210> 24
<211> 16
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 24
Arg Ile Phe Ala Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Arg Ser
1 5 10 15
<210> 25
<211> 16
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 25
Asp Tyr Arg Val Ala Gly Thr Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val
1 5 10 15
<210> 26
<211> 16
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 26
Glu Arg Val Val Gly Ala Ser Arg Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Val Asp Val
1 5 10 15
<210> 27
<211> 16
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 27
Asp Phe Thr Ile Ala Ala Arg Arg Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val
1 5 10 15
<210> 28
<211> 16
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 28
Glu Arg Ala Thr Val Thr Thr Arg Tyr His Tyr Asp Gly Met Asp Val
1 5 10 15
<210> 29
<211> 16
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 29
Glu Arg Val Gly Val Gln Asp Tyr Tyr His Tyr Ser Gly Met Asp Val
1 5 10 15
<210> 30
<211> 14
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CONSENSUS SEQUENCE
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> XAA CAN BE THR OR SER
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (7)..(7)
<223> XAA CAN BE VAL OR ILE
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (9)..(9)
<223> XAA CAN BE VAL, THR OR LEU
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (11)..(11)
<223> XAA CAN BE ASP OR ASN
<400> 30
Thr Gly Xaa Ser Ser Asp Xaa Gly Xaa Tyr Xaa Tyr Val Ser
1 5 10
<210> 31
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CONSENSUS SEQUENCE
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> XAA CAN BE SER, ASN OR ILE
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> XAA CAN BE ASN OR LYS
<400> 31
Glu Val Xaa Xaa Arg Pro Ser
1 5
<210> 32
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CONSENSUS SEQUENCE
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> XAA CAN BE THR OR SER
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> XAA CAN BE ARG OR SER
<400> 32
Ser Ser Tyr Xaa Ser Xaa Ser Thr Trp Val
1 5 10
<210> 33
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CONSENSUS SEQUENCE
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> XAA CAN BE SER OR ASN
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> XAA CAN BE TYR OR ASN
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> XAA CAN BE ILE, TYR OR SER
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> XAA CAN BETHR OR SER
<400> 33
Xaa Xaa Xaa Trp Xaa
1 5
<210> 34
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CONSENSUS SEQUENCE
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> XAA CAN BE ILE, VAL OR THR
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> XAA CAN BE TYR, PHE OR SER
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> XAA CAN BE THR, SER OR ALA
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (7)..(7)
<223> XAA CAN BE ILE, LEU, ASN, SER, ARG OR GLN
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (8)..(8)
<223> XAA CAN BE THR OR ASN
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (11)..(11)
<223> XAA CAN BE ASN OR LYS
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (15)..(15)
<223> XAA CAN BE LYS OR ARG
<400> 34
Arg Xaa Xaa Xaa Ser Gly Xaa Xaa Asn Tyr Xaa Pro Ser Leu Xaa Ser
1 5 10 15
<210> 35
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CONSENSUS SEQUENCE
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> XAA CAN BE GLU OR ASP
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(2)
<223> XAA CAN BE ARG, THR OR PHE
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)..(3)
<223> XAA CAN BE VAL, ALA, ARG OR THR
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> XAA CAN BE VAL, THR, GLY OR ILE
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> XAA CAN BE VAL, ALA OR GLY
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(6)
<223> XAA CAN BE ALA, THR, GLY OR GLN
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (7)..(7)
<223> XAA CAN BE THR, ASP, ARG OR SER
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (8)..(8)
<223> XAA CAN BE ARG OR TYR
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (10)..(10)
<223> XAA CAN BE THR OR HIS
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (12)..(12)
<223> XAA CAN BE THR ASP OR SER
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (14)..(14)
<223> XAA CAN BE MET, LEU OR VAL
<400> 35
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Tyr Xaa Tyr Xaa Gly Xaa Asp Val
1 5 10 15
<210> 36
<211> 110
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 36
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Val Tyr
20 25 30
Asp Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Thr Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Arg
85 90 95
Ser Thr Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 37
<211> 326
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 37
cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60
tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt gtttatgact atgtctcctg gtatcaacag 120
cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgaggtca gtaatcggcc ctcaggggtt 180
tctaatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240
caaactgagg acgaggctga ttattactgc agctcatata caagcaggag cacttgggtg 300
ttcggcggag ggaccaagct gaccgt 326
<210> 38
<211> 110
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 38
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Leu Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Asp Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Phe Glu Val Asn Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Asn Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser
85 90 95
Ser Thr Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 39
<211> 330
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 39
cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60
tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ctttataact atgtctcctg gtaccaacag 120
cacccagaca aagcccccaa actcatgatt tttgaggtca ataatcggcc ctcaggggtt 180
tctaatcgct tctctggctc caactctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240
caggctgagg acgaggctga ttattactgc agctcatata caagcagcag cacttgggtg 300
ttcggcggag ggaccaagtt gaccgtccta 330
<210> 40
<211> 110
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 40
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Ile Gly Leu Tyr
20 25 30
Asp Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Asp Arg Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Ile Ile Phe Glu Val Asn Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Tyr Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Asn Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser
85 90 95
Ser Thr Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 41
<211> 326
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 41
cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60
tcctgcactg gaaccagcag tgacattggt ctttatgact atgtctcctg gtaccaacag 120
cacccagaca gagcccccaa actcataatt tttgaggtca ataatcggcc ctcaggggtt 180
tcttatcgct tctctggctc caactctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240
caggctgagg acgaggctga ttattactgc agctcatata caagcagcag cacttgggtg 300
ttcggcggag ggaccaagtt gaccgt 326
<210> 42
<211> 110
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 42
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Ile Gly Leu Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Ile Ile Tyr Glu Val Ile Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Glu Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asn Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser
85 90 95
Ser Thr Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 43
<211> 330
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 43
cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60
tcctgcactg gaaccagcag tgacattggt ctttataact atgtctcctg gtaccaacag 120
cacccaggca aagcccccaa actcataatt tatgaggtca ttaatcggcc ctcaggggtt 180
tctaatcgct tctctggctc cgagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctggactc 240
caggctgagg acgaggctaa ttattactgc agttcatata caagcagcag cacttgggtg 300
ttcggcggag ggaccaagct gaccgtcctg 330
<210> 44
<211> 110
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 44
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asp Ile Gly Thr Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Tyr Pro Gly Lys Ala Pro Glu Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Glu Val Asn Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Thr Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Asn Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Ser Ser Ser
85 90 95
Ser Thr Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 45
<211> 326
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 45
cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60
tcctgcactg gaagcagcag tgacattggt acttataact atgtctcctg gtaccaacag 120
tacccaggca aagcccccga actcatgatt tatgaggtca ataatcggcc ctcaggggtt 180
tctgatcgct tctctggctc cacgtctggc aatacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240
caggctaacg acgaggctga ttattactgc agctcatatt caagcagcag cacttgggtg 300
ttcggcggag ggactaagct gaccgt 326
<210> 46
<211> 110
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 46
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Leu Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Gln Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Glu Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Thr Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Asp Asp Glu Ala Asp Tyr Ser Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser
85 90 95
Ser Thr Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 47
<211> 322
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 47
cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60
tcctgcactg gaactagcag tgacgttggt ctttataact atgtctcctg gtaccaacag 120
cagccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgaggtca gtaagcggcc ctcaggagtt 180
tctaatcgct tctctggctc cacgtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240
caggctgacg acgaggctga ttattcctgc agctcatata caagcagcag cacttgggtc 300
ttcggcggag ggaccaagct ga 322
<210> 48
<211> 124
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 48
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Ile Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Tyr Ala Ser Gly Asn Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Met Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Asp Tyr Arg Val Ala Gly Thr Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 49
<211> 372
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 49
caggtgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc 60
acctgcactg tctctggtgg ctccatcagt agttacatct ggagctggat ccggcagccc 120
gccggaaagg gactggagtg gattgggcgt atctatgcca gtgggaacac caactacaac 180
ccctccctca agagtcgagt caccatatca gtagacacgt ccaagaacca gttctccctg 240
aagctgagct ctatgaccgc cgcggacacg gccgtatatt actgtgcgag agattatagg 300
gtggctggca cttactacta ctactacggt ttggacgtct ggggccaagg gaccacggtc 360
accgtctcct ca 372
<210> 50
<211> 124
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 50
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Ile Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Tyr Ala Ser Gly Asn Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Met Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Met Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Asp Tyr Arg Val Ala Gly Thr Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 51
<211> 372
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 51
caggtgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc 60
acctgcactg tctctggtgg ctccatcagt agttacatct ggagctggat ccggcagccc 120
gccggaaagg gactggagtg gattgggcgt atctatgcca gtgggaacac caactacaac 180
ccctccctca agagtcgagt caccatgtca gtagacacgt ccaagaacca gttctccctg 240
aagctgagct ctatgaccgc cgcggacacg gccgtatatt actgtgcgag agattatagg 300
gtggctggca cttactacta ctactacggt ttggacgtct ggggccaagg gaccacggtc 360
accgtctcct ca 372
<210> 52
<211> 124
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 52
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Ile Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Tyr Ala Ser Gly Asn Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Met Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Asp Tyr Arg Val Ala Gly Thr Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 53
<211> 372
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 53
caggtgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc 60
acctgcactg tctctggtgg ctccatcagt agttacatct ggagctggat ccggcagccc 120
gccggaaagg gactggagtg gattgggcgt atctatgcca gtgggaacac caactacaac 180
ccctccctca agagtcgagt caccatgtca gtagacacgt ccaagaacca gttctccctg 240
aagctgagct ctgtaaccgc cgcggacacg gccgtatatt actgtgcgag agattatagg 300
gtggctggca cttactacta ctactacggt ttggacgtct ggggccaagg gaccacggtc 360
accgtctcct ca 372
<210> 54
<211> 124
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 54
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Ile Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Tyr Ala Ser Gly Gln Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Met Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Met Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Asp Tyr Arg Val Ala Gly Thr Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 55
<211> 366
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 55
cagctgcagg agtcgggccc aggactggtg aagccttcgg agaccctgtc cctcacctgc 60
actgtctctg gtggctccat cagtagttac atctggagct ggatccggca gcccgccgga 120
aagggactgg agtggattgg gcgtatctat gccagtgggc aaaccaacta caacccctcc 180
ctcaagagtc gagtcaccat gtcagtagac acgtccaaga accagttctc cctgaagctg 240
agctctatga ccgccgcgga cacggccgta tattactgtg cgagagatta tagggtggct 300
ggcacttact actactacta cggtttggac gtctggggcc aagggaccac ggtcaccgtc 360
tcctca 366
<210> 56
<211> 124
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 56
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Ile Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Tyr Ala Ser Gly Gln Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Asp Tyr Arg Val Ala Gly Thr Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 57
<211> 366
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 57
cagctgcagg agtcgggccc aggactggtg aagccttcgg agaccctgtc cctcacctgc 60
actgtctctg gtggctccat cagtagttac atctggagct ggatccggca gcccgccgga 120
aagggactgg agtggattgg gcgtatctat gccagtgggc aaaccaacta caacccctcc 180
ctcaagagtc gagtcaccat atcagtagac acgtccaaga accagttctc cctgaagctg 240
agctctgtaa ccgccgcgga cacggccgta tattactgtg cgagagatta tagggtggct 300
ggcacttact actactacta cggtttggac gtctggggcc aagggaccac ggtcaccgtc 360
tcctca 366
<210> 58
<211> 124
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 58
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Ile Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Tyr Ala Ser Gly Asn Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Asp Tyr Arg Val Ala Gly Thr Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 59
<211> 372
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 59
caggtgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc 60
acctgcactg tctctggtgg ctccatcagt agttacatct ggagctggat ccggcagccc 120
gccggaaagg gactggagtg gattgggcgt atctatgcca gtgggaacac caactacaac 180
ccctccctca agagtcgagt caccatatca gtagacacgt ccaagaacca gttctccctg 240
aagctgagct ctgtaaccgc cgcggacacg gccgtatatt actgtgcgag agattatagg 300
gtggctggca cttactacta ctactacggt ttggacgtct ggggccaagg gaccacggtc 360
accgtctcct ca 372
<210> 60
<211> 124
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 60
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Ile Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Tyr Ala Ser Gly Gln Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Met Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Asp Tyr Arg Val Ala Gly Thr Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 61
<211> 379
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 61
cagatgtcag gtgcagctgc aggagtcggg cccaggactg gtgaagcctt cggagaccct 60
gtccctcacc tgcactgtct ctggtggctc catcagtagt tacatctgga gctggatccg 120
gcagcccgcc ggaaagggac tggagtggat tgggcgtatc tatgccagtg ggcaaaccaa 180
ctacaacccc tccctcaaga gtcgagtcac catatcagta gacacgtcca agaaccagtt 240
ctccctgaag ctgagctcta tgaccgccgc ggacacggcc gtatattact gtgcgagaga 300
ttatagggtg gctggcactt actactacta ctacggtttg gacgtctggg gccaagggac 360
cacggtcacc gtctcctca 379
<210> 62
<211> 124
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 62
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Ile Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Tyr Ala Ser Gly Gln Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Met Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Asp Tyr Arg Val Ala Gly Thr Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 63
<211> 379
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 63
cagatgtcag gtgcagctgc aggagtcggg cccaggactg gtgaagcctt cggagaccct 60
gtccctcacc tgcactgtct ctggtggctc catcagtagt tacatctgga gctggatccg 120
gcagcccgcc ggaaagggac tggagtggat tgggcgtatc tatgccagtg ggcaaaccaa 180
ctacaacccc tccctcaaga gtcgagtcac catgtcagta gacacgtcca agaaccagtt 240
ctccctgaag ctgagctctg taaccgccgc ggacacggcc gtatattact gtgcgagaga 300
ttatagggtg gctggcactt actactacta ctacggtttg gacgtctggg gccaagggac 360
cacggtcacc gtctcctca 379
<210> 64
<211> 124
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 64
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Tyr Trp Thr Trp Ile Arg Gln Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Tyr Thr Ser Gly Ile Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Met Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Glu Arg Val Val Gly Ala Ser Arg Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Val Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 65
<211> 372
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 65
caggtgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc 60
acctgcactg tctctggtgg ctccatcagt agttactact ggacctggat ccggcagccc 120
gccgggaagg gactggagtg gattgggcgt atctatacca gtggaatcac caactacaat 180
ccctccctca agagtcgcgt caccatgtca gtagacacgt ccaagaacca gttctccctg 240
aagctgagct ctgtgaccgc cgcggacacg gccgtgtatt actgtgcgag agagcgggta 300
gtgggagcta gtaggtacta ctactacggt gtggacgtct ggggccaagg gaccacggtc 360
accgtctcct cc 372
<210> 66
<211> 124
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 66
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Tyr Trp Thr Trp Ile Arg Gln Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Tyr Thr Ser Gly Ile Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Met Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Glu Arg Val Val Gly Ala Ser Arg Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Val Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 67
<211> 372
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 67
caggtgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc 60
acctgcactg tctctggtgg ctccatcagt agttactact ggacctggat ccggcagccc 120
gccgggaagg gactggagtg gattgggcgt atctatacca gtggaatcac caactacaat 180
ccctccctca agagtcgcgt caccatgtca gtagacacgt ccaagaacca gttctccctg 240
aagctgagct ctgtgaccgc cgcggacacg gccgtgtatt actgtgcgag agagcgggta 300
gtgggagcta gtaggtacta ctactacggt gtggacgtct ggggccaagg gaccacggtc 360
accgtctcct cc 372
<210> 68
<211> 124
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 68
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Ser Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Thr Ser Thr Ser Gly Arg Asn Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Met Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Asp Phe Thr Ile Ala Ala Arg Arg Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 69
<211> 372
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 69
caggtgcagt tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc 60
acctgcactg tctctggtgg ctccatcagt agttactcct ggagctggat ccggcagccc 120
gccgggaagg gactggagtg gattgggcgt accagtacca gtgggagaaa caactacaac 180
ccctccctca agagtcgagt caccatgtca gttgacacgt ccaagaacca gttctccctg 240
aagctgaact ctgtgaccgc cgcggacacg gccgtgtatt actgtgcgag agatttcact 300
atagcagctc gtcgctacta ctactacggt atggacgtct ggggccaagg gaccacggtc 360
accgtctcct ca 372
<210> 70
<211> 124
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 70
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Arg Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Thr Asn Asn
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Val Tyr Ser Ser Gly Leu Thr Asn Tyr Lys Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Met Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Arg Leu Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Glu Arg Ala Thr Val Thr Thr Arg Tyr His Tyr Asp Gly Met Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 71
<211> 372
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 71
caggtgcagc tgcaggagtc gggcccaaga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc 60
acctgcactg tctctggtgg ctccatcact aataactact ggagctggat ccggcagccc 120
gccgggaagg ggctggagtg gattgggcgt gtctatagta gtggactcac caactacaag 180
ccctccctca agagtcgagt caccatgtca gtagacacgt ccaagaacca attctccctg 240
aggttgaact ctgtgaccgc cgcggacacg gccgtgtatt actgtgcgag agagagggca 300
acagtaacta cgaggtacca ctacgacggt atggacgtct ggggccaagg gacctcggtc 360
accgtctcct ca 372
<210> 72
<211> 124
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 72
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Phe Ala Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Arg
50 55 60
Ser Arg Val Thr Met Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Lys Glu Arg Val Gly Val Gln Asp Tyr Tyr His Tyr Ser Gly Met Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 73
<211> 372
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 73
caggtgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc 60
acttgcactg tctctggtgg ctccatcagt agttactact ggagctggat ccggcagccc 120
gccgggaagg gactggagtg gattgggcgc atctttgcca gtgggagcac caactacaac 180
ccctccctca ggagtcgagt caccatgtca agagacacgt ccaagaacca gttctccctg 240
aagctgagtt ctgtgaccgc cgcggacacg gccgtttatt actgtgcgaa agaaagggtg 300
ggagtacagg attactacca ctattccggt atggacgtct ggggccaagg gaccacggtc 360
accgtctcct ca 372
<210> 74
<211> 234
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(37)
<223> Cytoplasmic
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (38)..(62)
<223> Transmembrane
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (63)..(234)
<223> Extracellular
<400> 74
Met Asp Pro Gly Leu Gln Gln Ala Leu Asn Gly Met Ala Pro Pro Gly
1 5 10 15
Asp Thr Ala Met His Val Pro Ala Gly Ser Val Ala Ser His Leu Gly
20 25 30
Thr Thr Ser Arg Ser Tyr Phe Tyr Leu Thr Thr Ala Thr Leu Ala Leu
35 40 45
Cys Leu Val Phe Thr Val Ala Thr Ile Met Val Leu Val Val Gln Arg
50 55 60
Thr Asp Ser Ile Pro Asn Ser Pro Asp Asn Val Pro Leu Lys Gly Gly
65 70 75 80
Asn Cys Ser Glu Asp Leu Leu Cys Ile Leu Lys Arg Ala Pro Phe Lys
85 90 95
Lys Ser Trp Ala Tyr Leu Gln Val Ala Lys His Leu Asn Lys Thr Lys
100 105 110
Leu Ser Trp Asn Lys Asp Gly Ile Leu His Gly Val Arg Tyr Gln Asp
115 120 125
Gly Asn Leu Val Ile Gln Phe Pro Gly Leu Tyr Phe Ile Ile Cys Gln
130 135 140
Leu Gln Phe Leu Val Gln Cys Pro Asn Asn Ser Val Asp Leu Lys Leu
145 150 155 160
Glu Leu Leu Ile Asn Lys His Ile Lys Lys Gln Ala Leu Val Thr Val
165 170 175
Cys Glu Ser Gly Met Gln Thr Lys His Val Tyr Gln Asn Leu Ser Gln
180 185 190
Phe Leu Leu Asp Tyr Leu Gln Val Asn Thr Thr Ile Ser Val Asn Val
195 200 205
Asp Thr Phe Gln Tyr Ile Asp Thr Ser Thr Phe Pro Leu Glu Asn Val
210 215 220
Leu Ser Ile Phe Leu Tyr Ser Asn Ser Asp
225 230
<210> 75
<211> 5
<212> PRT
<213> synthetic sequence
<220>
<221> misc_feature
<222> (3)..(3)
<223> wherein X is I, S or Y.
<220>
<221> misc_feature
<222> (5)..(5)
<223> wherein X is T or S.
<400> 75
Ser Tyr Xaa Trp Xaa
1 5
Claims (15)
- CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 및 CDRL3를 포함하는 참조항체와 경합하고, 상기 참조항체가 결합하는 CD30L의 에피토프와 동일한 에피토프에 결합하는, 분리된 항체로서,
여기서, 참조항체는
SEQ ID NO:1의 CDRL1,
SEQ ID NO:7의 CDRL2,
SEQ ID NO:11의 CDRL3,
SEQ ID NO:14의 CDRH1,
SEQ ID NO:19의 CDRH2, 및
SEQ ID NO:25의 CDRH3
를 포함하는, 분리된 항체. - 제1 항에 있어서, 상기 분리된 항체는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 특성을 가지는 것을 특징으로 하는 분리된 항체:
a) CD30/CD30L 상호작용 억제;
b) CD30L-유도된 IL-8 유도 억제; 및
c) 사람 CD30L에 대한 해리 상수가 최대 70pM. - 제1 항 또는 제2 항에 있어서, 상기 분리된 항체는
SEQ ID NO:14, 15, 16, 17 및 18로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRH1;
SEQ ID NO:19, 20, 21, 22, 23 및 24로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRH2;
SEQ ID NO:25, 26, 27, 28 및 29로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRH3;
SEQ ID NO:1, 2, 3, 4, 5 및 6으로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRL1;
SEQ ID NO:7, 8, 9 및 10으로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRL2; 및
SEQ ID NO:11, 12 및 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 CDRL3
포함하고,
상기 분리된 항체는
a) SEQ ID NO:14의 CDRH1, SEQ ID NO:19의 CDRH2 및 SEQ ID NO:25의 CDRH3, 및 SEQ ID NO:1의 CDRL1, SEQ ID NO:7의 CDRL2 및 SEQ ID NO:11의 CDRL3를 포함하는 항체;
b) SEQ ID NO:15의 CDRH1, SEQ ID NO:21의 CDRH2 및 SEQ ID NO:26의 CDRH3, 및 SEQ ID NO:2의 CDRL1, SEQ ID NO:8의 CDRL2 및 SEQ ID NO:12의 CDRL3를 포함하는 항체;
c) SEQ ID NO:15의 CDRH1, SEQ ID NO:21의 CDRH2 및 SEQ ID NO:26의 CDRH3, 및 SEQ ID NO:3의 CDRL1, SEQ ID NO:8의 CDRL2 및 SEQ ID NO:12의 CDRL3를 포함하는 항체;
d) SEQ ID NO:16의 CDRH1, SEQ ID NO:22의 CDRH2 및 SEQ ID NO:27의 CDRH3, 및 SEQ ID NO:4의 CDRL1, SEQ ID NO:9의 CDRL2 및 SEQ ID NO:12의 CDRL3를 포함하는 항체;
e) SEQ ID NO:17의 CDRH1, SEQ ID NO:23의 CDRH2 및 SEQ ID NO:28의 CDRH3, 및 SEQ ID NO:5의 CDRL1, SEQ ID NO:8의 CDRL2 및 SEQ ID NO:13의 CDRL3를 포함하는 항체; 또는
f) SEQ ID NO:18의 CDRH1, SEQ ID NO:24의 CDRH2 및 SEQ ID NO:29의 CDRH3, 및 SEQ ID NO:6의 CDRL1, SEQ ID NO:10의 CDRL2 및 SEQ ID NO:12의 CDRL3를 포함하는 항체;
가 아닌 것을 특징으로 하는 분리된 항체. - 제1 항에 있어서, 상기 분리된 항체는 IgG1-, IgG2-, IgG3- 또는 IgG4-유형의 것임을 특징으로 하는 분리된 항체.
- 제1 항의 분리된 항체 및 제약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는, 자가면역 질병, 만성 염증성 질병 또는 암 치료 또는 예방용 제약학적 제제.
- 제1 항의 분리된 항체의 효과적인 양을 포함하는, 자가면역 질병, 만성 염증성 질병 또는 암 치료 또는 예방용 제약학적 조성물.
- 제6 항에 있어서, 상기 제약학적 조성물은 환자에서 CD30L 활성을 감소시키는 것을 특징으로 하는 제약학적 조성물.
- 제1 항의 분리된 항체를 코드화하는, 분리된 핵산 분자.
- 제8 항의 분리된 핵산 분자를 포함하는, 숙주 세포.
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020217003317A KR102292840B1 (ko) | 2012-04-27 | 2013-04-25 | 사람 cd30 리간드 항원 결합 단백질 |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201261639637P | 2012-04-27 | 2012-04-27 | |
US61/639,637 | 2012-04-27 | ||
PCT/US2013/038135 WO2013163377A1 (en) | 2012-04-27 | 2013-04-25 | Human cd30 ligand antigen binding proteins |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020187036937A Division KR20180137614A (ko) | 2012-04-27 | 2013-04-25 | 사람 cd30 리간드 항원 결합 단백질 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020217003317A Division KR102292840B1 (ko) | 2012-04-27 | 2013-04-25 | 사람 cd30 리간드 항원 결합 단백질 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR20200007094A KR20200007094A (ko) | 2020-01-21 |
KR102213694B1 true KR102213694B1 (ko) | 2021-02-09 |
Family
ID=48289696
Family Applications (4)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020147031292A KR101932697B1 (ko) | 2012-04-27 | 2013-04-25 | 사람 cd30 리간드 항원 결합 단백질 |
KR1020207000990A KR102213694B1 (ko) | 2012-04-27 | 2013-04-25 | 사람 cd30 리간드 항원 결합 단백질 |
KR1020187036937A KR20180137614A (ko) | 2012-04-27 | 2013-04-25 | 사람 cd30 리간드 항원 결합 단백질 |
KR1020217003317A KR102292840B1 (ko) | 2012-04-27 | 2013-04-25 | 사람 cd30 리간드 항원 결합 단백질 |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020147031292A KR101932697B1 (ko) | 2012-04-27 | 2013-04-25 | 사람 cd30 리간드 항원 결합 단백질 |
Family Applications After (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020187036937A KR20180137614A (ko) | 2012-04-27 | 2013-04-25 | 사람 cd30 리간드 항원 결합 단백질 |
KR1020217003317A KR102292840B1 (ko) | 2012-04-27 | 2013-04-25 | 사람 cd30 리간드 항원 결합 단백질 |
Country Status (22)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US9926373B2 (ko) |
EP (4) | EP2841456B1 (ko) |
JP (1) | JP6370774B2 (ko) |
KR (4) | KR101932697B1 (ko) |
CN (3) | CN110078818B (ko) |
AU (4) | AU2013251541B2 (ko) |
BR (2) | BR122021001199B1 (ko) |
CA (1) | CA2871750A1 (ko) |
CY (1) | CY1124050T1 (ko) |
DK (2) | DK2841456T3 (ko) |
ES (2) | ES2682118T3 (ko) |
HU (2) | HUE053362T2 (ko) |
IL (3) | IL307989A (ko) |
LT (1) | LT3431492T (ko) |
MX (1) | MX357327B (ko) |
PL (2) | PL2841456T3 (ko) |
PT (2) | PT3431492T (ko) |
RU (1) | RU2650800C2 (ko) |
SI (2) | SI2841456T1 (ko) |
TW (1) | TWI641618B (ko) |
WO (1) | WO2013163377A1 (ko) |
ZA (1) | ZA201407355B (ko) |
Families Citing this family (18)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
HUE053362T2 (hu) * | 2012-04-27 | 2021-06-28 | Novo Nordisk As | Emberi CD30-ligand antigént kötõ fehérjék |
US20150315566A1 (en) * | 2014-04-30 | 2015-11-05 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Method for generating high affinity, bivalent binding agents |
US11473080B2 (en) | 2014-04-30 | 2022-10-18 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Method for generating high affinity, bivalent binding agents for sandwich assays |
CA3056630A1 (en) | 2017-03-15 | 2018-09-20 | Pandion Therapeutics, Inc. | Targeted immunotolerance |
CA3064435A1 (en) | 2017-05-24 | 2018-11-29 | Pandion Therapeutics, Inc. | Targeted immunotolerance |
US10174091B1 (en) | 2017-12-06 | 2019-01-08 | Pandion Therapeutics, Inc. | IL-2 muteins |
US10946068B2 (en) | 2017-12-06 | 2021-03-16 | Pandion Operations, Inc. | IL-2 muteins and uses thereof |
JP2021532060A (ja) * | 2018-04-30 | 2021-11-25 | シーダーズ—シナイ メディカル センター | 炎症性疾患を抱える患者の選択および処置のための方法ならびにシステム |
WO2020096046A1 (ja) * | 2018-11-09 | 2020-05-14 | 国立大学法人大阪大学 | 老化関連t細胞を標的とした糖代謝異常の予防または治療用ワクチン |
TWI741460B (zh) * | 2018-12-24 | 2021-10-01 | 大陸商信達生物製藥(蘇州)有限公司 | 全人源的抗cd30單鏈抗體及其應用 |
BR112021023345A2 (pt) | 2019-05-20 | 2022-02-01 | Pandion Operations Inc | Imunotolerância com alvo em madcam |
JP2024503508A (ja) | 2021-01-15 | 2024-01-25 | シージェン インコーポレイテッド | 免疫調節性抗体-薬物コンジュゲート |
EP4288109A1 (en) | 2021-02-03 | 2023-12-13 | Seagen Inc. | Immunostimulatory compounds and conjugates |
WO2022177963A1 (en) * | 2021-02-17 | 2022-08-25 | Prometheus Biosciences, Inc. | Anti-cd30l antibodies and uses thereof |
WO2023215740A1 (en) | 2022-05-06 | 2023-11-09 | Seagen Inc. | Immunomodulatory antibody-drug conjugates |
WO2024026271A1 (en) * | 2022-07-25 | 2024-02-01 | Prometheus Biosciences, Inc. | Anti-cd30l antibodies, formulations therefor, and uses thereof |
WO2024030577A1 (en) | 2022-08-03 | 2024-02-08 | Seagen Inc. | Immunostimulatory anti-pd-l1-drug conjugates |
EP4321522A1 (en) | 2022-08-12 | 2024-02-14 | Seagen Inc. | Cytotoxic compounds and conjugates thereof |
Family Cites Families (57)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4399216A (en) | 1980-02-25 | 1983-08-16 | The Trustees Of Columbia University | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
US4740461A (en) | 1983-12-27 | 1988-04-26 | Genetics Institute, Inc. | Vectors and methods for transformation of eucaryotic cells |
US4751180A (en) | 1985-03-28 | 1988-06-14 | Chiron Corporation | Expression using fused genes providing for protein product |
US4935233A (en) | 1985-12-02 | 1990-06-19 | G. D. Searle And Company | Covalently linked polypeptide cell modulators |
EP0272253A4 (en) | 1986-03-07 | 1990-02-05 | Massachusetts Inst Technology | METHOD FOR IMPROVING GLYCOPROTE INSTABILITY. |
US4959455A (en) | 1986-07-14 | 1990-09-25 | Genetics Institute, Inc. | Primate hematopoietic growth factors IL-3 and pharmaceutical compositions |
US5260203A (en) | 1986-09-02 | 1993-11-09 | Enzon, Inc. | Single polypeptide chain binding molecules |
US4946778A (en) | 1987-09-21 | 1990-08-07 | Genex Corporation | Single polypeptide chain binding molecules |
ATE87659T1 (de) | 1986-09-02 | 1993-04-15 | Enzon Lab Inc | Bindungsmolekuele mit einzelpolypeptidkette. |
US4912040A (en) | 1986-11-14 | 1990-03-27 | Genetics Institute, Inc. | Eucaryotic expression system |
US5011912A (en) | 1986-12-19 | 1991-04-30 | Immunex Corporation | Hybridoma and monoclonal antibody for use in an immunoaffinity purification system |
US4965195A (en) | 1987-10-26 | 1990-10-23 | Immunex Corp. | Interleukin-7 |
US4968607A (en) | 1987-11-25 | 1990-11-06 | Immunex Corporation | Interleukin-1 receptors |
GB8823869D0 (en) | 1988-10-12 | 1988-11-16 | Medical Res Council | Production of antibodies |
WO1990005183A1 (en) | 1988-10-31 | 1990-05-17 | Immunex Corporation | Interleukin-4 receptors |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
US6713610B1 (en) | 1990-01-12 | 2004-03-30 | Raju Kucherlapati | Human antibodies derived from immunized xenomice |
WO1991010741A1 (en) | 1990-01-12 | 1991-07-25 | Cell Genesys, Inc. | Generation of xenogeneic antibodies |
US6673986B1 (en) | 1990-01-12 | 2004-01-06 | Abgenix, Inc. | Generation of xenogeneic antibodies |
WO1991018982A1 (en) | 1990-06-05 | 1991-12-12 | Immunex Corporation | Type ii interleukin-1 receptors |
US5814318A (en) | 1990-08-29 | 1998-09-29 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5633425A (en) | 1990-08-29 | 1997-05-27 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US6300129B1 (en) | 1990-08-29 | 2001-10-09 | Genpharm International | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5874299A (en) | 1990-08-29 | 1999-02-23 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US6255458B1 (en) | 1990-08-29 | 2001-07-03 | Genpharm International | High affinity human antibodies and human antibodies against digoxin |
US5661016A (en) | 1990-08-29 | 1997-08-26 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
ES2108048T3 (es) | 1990-08-29 | 1997-12-16 | Genpharm Int | Produccion y utilizacion de animales inferiores transgenicos capaces de producir anticuerpos heterologos. |
US5625126A (en) | 1990-08-29 | 1997-04-29 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5545806A (en) | 1990-08-29 | 1996-08-13 | Genpharm International, Inc. | Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5877397A (en) | 1990-08-29 | 1999-03-02 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
US5789650A (en) | 1990-08-29 | 1998-08-04 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5770429A (en) | 1990-08-29 | 1998-06-23 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5462990A (en) * | 1990-10-15 | 1995-10-31 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Multifunctional organic polymers |
CA2111348A1 (en) | 1991-06-14 | 1992-12-23 | John S. Logan | Production of human hemoglobin in transgenic pigs |
DE69224906T2 (de) | 1991-07-08 | 1998-10-29 | Univ Massachusetts | Thermotropes flüssig-kristallines segment-blockcopolymer |
US5262522A (en) | 1991-11-22 | 1993-11-16 | Immunex Corporation | Receptor for oncostatin M and leukemia inhibitory factor |
CA2131003A1 (en) | 1992-05-26 | 1993-12-09 | Raymond G. Goodwin | Novel cytokine that binds cd30 |
CA2140638C (en) | 1992-07-24 | 2010-05-04 | Raju Kucherlapati | Generation of xenogeneic antibodies |
DE69332981T2 (de) | 1992-10-23 | 2004-05-19 | Immunex Corp., Seattle | Methoden zur herstellung löslicher, oligomerer proteine |
US5457035A (en) | 1993-07-23 | 1995-10-10 | Immunex Corporation | Cytokine which is a ligand for OX40 |
CA2219361C (en) | 1995-04-27 | 2012-02-28 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
EP1500329B1 (en) | 1996-12-03 | 2012-03-21 | Amgen Fremont Inc. | Human antibodies that specifically bind human TNF alpha |
CA2196496A1 (en) | 1997-01-31 | 1998-07-31 | Stephen William Watson Michnick | Protein fragment complementation assay for the detection of protein-protein interactions |
US6342220B1 (en) | 1997-08-25 | 2002-01-29 | Genentech, Inc. | Agonist antibodies |
EP1053316A1 (de) | 1998-02-06 | 2000-11-22 | AbGen GmbH | Nukleinsäuren zur modulation zellulärer aktivierung |
CA2341029A1 (en) | 1998-08-17 | 2000-02-24 | Abgenix, Inc. | Generation of modified molecules with increased serum half-lives |
US6652854B2 (en) * | 2000-08-08 | 2003-11-25 | Immunex Corporation | Methods for treating autoimmune and chronic inflammatory conditions using antagonists of CD30 or CD30L |
AU2006202590A1 (en) * | 2000-08-08 | 2006-07-06 | Immunex Corporation | Methods for treating autoimmune and inflammatory conditions using antagonists of CD30 or CD30L |
US6946292B2 (en) | 2000-10-06 | 2005-09-20 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity |
US7090843B1 (en) * | 2000-11-28 | 2006-08-15 | Seattle Genetics, Inc. | Recombinant anti-CD30 antibodies and uses thereof |
US20040038349A1 (en) * | 2001-07-27 | 2004-02-26 | Hilbert David M. | Heteromultimeric TNF ligand family members |
JP2005021110A (ja) * | 2003-07-04 | 2005-01-27 | Toyama Chem Co Ltd | Cd30リガンドおよび/またはcd30の発現誘導剤、アポトーシス誘導剤ならびにそれらを含有する医薬組成物。 |
JP5427027B2 (ja) * | 2006-05-03 | 2014-02-26 | ザ・リージェンツ・オブ・ザ・ユニバーシティ・オブ・コロラド,ア・ボディー・コーポレイト | Cd40アゴニスト抗体/i型インターフェロン相乗性アジュバントの結合体、それを含む複合体、および細胞性免疫を強化する治療としてのその使用 |
US7982016B2 (en) * | 2007-09-10 | 2011-07-19 | Amgen Inc. | Antigen binding proteins capable of binding thymic stromal lymphopoietin |
JP6047142B2 (ja) * | 2011-04-01 | 2016-12-21 | ウニヴェルズィテート シュトゥットガルト | 抗体結合ドメインを有する組換えtnfリガンドファミリーメンバーポリペプチドおよびそれらの使用 |
HUE053362T2 (hu) * | 2012-04-27 | 2021-06-28 | Novo Nordisk As | Emberi CD30-ligand antigént kötõ fehérjék |
-
2013
- 2013-04-25 HU HUE18169942A patent/HUE053362T2/hu unknown
- 2013-04-25 KR KR1020147031292A patent/KR101932697B1/ko active IP Right Grant
- 2013-04-25 JP JP2015509123A patent/JP6370774B2/ja active Active
- 2013-04-25 PT PT181699422T patent/PT3431492T/pt unknown
- 2013-04-25 DK DK13720714.8T patent/DK2841456T3/en active
- 2013-04-25 CN CN201910026631.3A patent/CN110078818B/zh active Active
- 2013-04-25 WO PCT/US2013/038135 patent/WO2013163377A1/en active Application Filing
- 2013-04-25 DK DK18169942.2T patent/DK3431492T3/da active
- 2013-04-25 LT LTEP18169942.2T patent/LT3431492T/lt unknown
- 2013-04-25 BR BR122021001199-0A patent/BR122021001199B1/pt active IP Right Grant
- 2013-04-25 KR KR1020207000990A patent/KR102213694B1/ko active IP Right Grant
- 2013-04-25 RU RU2014146503A patent/RU2650800C2/ru active
- 2013-04-25 EP EP13720714.8A patent/EP2841456B1/en active Active
- 2013-04-25 CN CN202311208153.0A patent/CN117264057A/zh active Pending
- 2013-04-25 ES ES13720714.8T patent/ES2682118T3/es active Active
- 2013-04-25 ES ES18169942T patent/ES2857900T3/es active Active
- 2013-04-25 IL IL307989A patent/IL307989A/en unknown
- 2013-04-25 AU AU2013251541A patent/AU2013251541B2/en active Active
- 2013-04-25 PL PL13720714T patent/PL2841456T3/pl unknown
- 2013-04-25 PL PL18169942T patent/PL3431492T3/pl unknown
- 2013-04-25 EP EP18169942.2A patent/EP3431492B1/en active Active
- 2013-04-25 CN CN201380033217.6A patent/CN104507968B/zh active Active
- 2013-04-25 SI SI201331123T patent/SI2841456T1/sl unknown
- 2013-04-25 MX MX2014012800A patent/MX357327B/es active IP Right Grant
- 2013-04-25 BR BR112014026531-3A patent/BR112014026531B1/pt active IP Right Grant
- 2013-04-25 EP EP22188601.3A patent/EP4230641A3/en active Pending
- 2013-04-25 HU HUE13720714A patent/HUE039118T2/hu unknown
- 2013-04-25 EP EP20207117.1A patent/EP3929208A1/en not_active Withdrawn
- 2013-04-25 SI SI201331852T patent/SI3431492T1/sl unknown
- 2013-04-25 US US14/396,248 patent/US9926373B2/en active Active
- 2013-04-25 CA CA2871750A patent/CA2871750A1/en active Pending
- 2013-04-25 KR KR1020187036937A patent/KR20180137614A/ko not_active Application Discontinuation
- 2013-04-25 PT PT13720714T patent/PT2841456T/pt unknown
- 2013-04-25 KR KR1020217003317A patent/KR102292840B1/ko active IP Right Grant
- 2013-04-26 TW TW102114993A patent/TWI641618B/zh active
-
2014
- 2014-10-07 IL IL235036A patent/IL235036B/en active IP Right Grant
- 2014-10-09 ZA ZA2014/07355A patent/ZA201407355B/en unknown
-
2018
- 2018-02-27 US US15/907,002 patent/US20180298105A1/en not_active Abandoned
- 2018-04-18 AU AU2018202699A patent/AU2018202699A1/en not_active Abandoned
-
2020
- 2020-03-12 AU AU2020201820A patent/AU2020201820B2/en active Active
- 2020-07-26 IL IL276294A patent/IL276294A/en unknown
-
2021
- 2021-03-03 CY CY20211100179T patent/CY1124050T1/el unknown
- 2021-10-22 US US17/452,042 patent/US20220112295A1/en not_active Abandoned
-
2022
- 2022-08-18 AU AU2022218573A patent/AU2022218573A1/en active Pending
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
J Immunol. 2004, 173:2933-2941.* |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR102213694B1 (ko) | 사람 cd30 리간드 항원 결합 단백질 | |
US20190248906A1 (en) | Human Antigen Binding Proteins That Bind to a Complex Comprising Beta-Klotho and an FGF Receptor | |
JP5930968B2 (ja) | ヒトil−23抗原結合タンパク質 | |
TWI574697B (zh) | 人類cgrp受體結合蛋白 | |
TW202033554A (zh) | 結合β-KLOTHO, FGF受體及其複合物之人類抗原結合蛋白 | |
CA2662613A1 (en) | Compositions and methods relating to glucagon receptor antibodies |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A107 | Divisional application of patent | ||
A201 | Request for examination | ||
E902 | Notification of reason for refusal | ||
AMND | Amendment | ||
E601 | Decision to refuse application | ||
AMND | Amendment | ||
X701 | Decision to grant (after re-examination) | ||
A107 | Divisional application of patent | ||
GRNT | Written decision to grant |