KR102192314B1 - A gene storage card that preserves and stores cellular materials including human or animal's DNA - Google Patents

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Abstract

본 발명은 DNA가 보존처리된 유전자 보호 및 개인 또는 동물개체 식별용 카드 및 보존처리 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 인간 또는 동물의 신체 특정 부위에서 세포를 추출하는 단계; 상기 추출된 세포를 완충용액에 침잠하여 세포막을 제거하는 단계; 상기 세포막이 제거된 세포조각 및 DNA를 포함하는 완충용액을 원심분리하여 보존대상 세포조각 및 DNA를 추출하는 단계; 상기 보조대상 세포조각 및 DNA를 정전기적 성질을 띄는 소재에 로딩하는 단계; 상기 보존대상 세포 및 DNA가 로딩된 소재를 55℃ 내지 75℃의 온도에서 가온처리 및 건조하여 세균의 활성을 제거하는 단계; 및 상기 세균의 활성이 제거된 세포를 개인 식별용 카드의 일측에 고정하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 DNA의 보존처리 방법을 제공한다.The present invention relates to a DNA-conserved gene protection card and a method for identification of individuals or animals, and more specifically, extracting cells from a specific body part of a human or animal; Immersing the extracted cells in a buffer solution to remove the cell membrane; Extracting the cell fragments and DNA to be preserved by centrifuging the buffer solution containing the cell fragments and DNA from which the cell membrane has been removed; Loading the auxiliary target cell fragments and DNA into a material exhibiting electrostatic properties; Heating and drying the preservation target cells and the material loaded with the DNA at a temperature of 55°C to 75°C to remove bacterial activity; And fixing the cells from which the activity of the bacteria has been removed to one side of the personal identification card.

Description

사람 또는 동물의 DNA를 포함한 세포물질을 보존 처리하여 보관시킨 유전자 보관카드 및 DNA의 보존처리 방법{A gene storage card that preserves and stores cellular materials including human or animal's DNA}A gene storage card that preserves and stores cellular materials including human or animal's DNA.

본 발명은 사람 또는 동물의 DNA를 포함한 세포물질을 보존 처리하여 보관시킨 유전자 보관카드 및 DNA의 보존처리 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 세포의 세포막을 제거하고 가온 처리를 통한 건조과정을 수행하여 세균에 의한 DNA 손상을 억제시킨 후 이를 개인 식별용 카드에 탑재함으로써 DNA의 장기간 보존이 가능하게 하는 것이다. 따라서 시간에 관계없이 향후 DNA를 추출하여 유전자 검사를 수행하도록 할 수 있다. The present invention relates to a gene storage card in which cell materials including human or animal DNA are preserved and stored, and a method of preserving DNA, and in more detail, by removing the cell membrane of cells and performing a drying process through heating treatment, It is possible to preserve DNA for a long time by suppressing DNA damage by bacteria and then loading it on a personal identification card. Therefore, regardless of time, DNA can be extracted and genetically tested.

최근 개인의 유전자가 보존된 개인 식별카드가 유행되고 있는데, 이는 유전자라는 키워드가 주는 전문적인 의미가 중요하였던 종래와는 달리 기념품 및 개인정보보관 카드와 같이 일반 생활용품에도 용이하게 결합될 수 있음을 모토로 하여 비즈니스적으로 접근한 산물이다. 즉, 유전자는 종래보다 일반인들에게 보다 친숙한 키워드가 되었으며, 더 이상 전문가들만의 영역이 아님을 시사하는 것이다. 더욱이 비전문가인 개인이 유전자를 직접 추출하여 개인 식별카드에 탑재할 수 있는 키트도 판매되고 있다. In recent years, personal identification cards in which individual genes are preserved are becoming popular, and this can be easily combined into general household items such as souvenirs and personal information storage cards, unlike the conventional ones where the professional meaning given by the keyword gene was important. It is the product of a business approach with the motto. In other words, gene has become a keyword that is more familiar to the general public than before, suggesting that it is no longer an area only for experts. Moreover, kits that allow non-professional individuals to directly extract genes and mount them on personal identification cards are also on sale.

그러나 일반인들은 간편하고 비전문적인 취급방법에 의하여 유전자를 추출하도록 가이드될 수 밖에는 없기에 개인 식별카드에 본인의 유전자를 탑재하였다는 상징적 가치 이상의 의미를 갖기가 어려웠다. 즉, 일반인들에 의하여 비전문적으로 추출된 유전자는 일정 이상의 시간이 지나면 DNA 사슬이 깨지거나, 세포 자체가 수축 및 고화됨은 물론이고 세균에 의해 DNA 자체가 훼손되어 DNA의 추출이 어려우며, 따라서 향후에 유전자를 검사하는데 곤란한 경우가 대부분이었다.However, it was difficult for the general public to have more than the symbolic value of having their own genes loaded on personal identification cards because they were guided to extract genes by simple and unprofessional handling methods. In other words, for genes that were unprofessionally extracted by ordinary people, after a certain period of time, DNA chains are broken, cells themselves contract and solidify, and DNA itself is damaged by bacteria, making it difficult to extract DNA. In most cases, it was difficult to examine.

이에, 전문적인 유전자 추출방법을 사용하여 보관할 수 밖에 없는데, 이 경우에는 DNA를 추출하는데 시간이 많이 소요되며, DNA를 추출하였다고 하더라도 이를 보호용액에 담아서 냉장보관 하지 않으면 시간이 지날수록 DNA의 손상 정도가 더 심해져 유전자 분석에 사용하는데 제한을 받는 문제점이 있었다.Therefore, it has to be stored using a specialized gene extraction method. In this case, DNA extraction takes a long time. There was a problem of being limited in use for genetic analysis due to the worsening of.

그렇다고 DNA 추출하지 않고 세포를 그대로 보관하는 경우에는 DNA를 추출하는 경우에 비하여 DNA의 손상 속도를 늦출 수는 있으나, 손상이 전혀 일어나지 않는 것은 아니며, 세포막의 수축 및 세균의 활성으로 인하여 결국에는 DNA가 손상에 이르게 되므로 유전자 검사가 불가능한 경우가 대부분이다.However, if the cells are stored without DNA extraction, the damage rate of DNA can be slowed down compared to the case of extracting DNA, but the damage does not occur at all, and due to the contraction of the cell membrane and the activity of bacteria, the DNA is eventually destroyed. In most cases, genetic testing is impossible because it leads to damage.

그러므로, DNA의 보존성을 높여 추후에 유전자 검사가 가능하게 하고, 보호용액 여부나 온도조건에 관계없이 보존이 가능한 유전자 보존처리 방법의 도출이 요망되고 있다.Therefore, it is desired to develop a method of preserving a gene that can enhance the preservation of DNA and enable genetic testing at a later time, and that can be preserved regardless of the presence of a protective solution or temperature conditions.

대한민국등록특허 제1317296호Korean Registered Patent No. 1317296

본 발명은 전술한 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로서, 본 발명의 목적은 유전자 검사를 위한 DNA가 반영구적으로 보존될 수 있도록 DNA를 보존 처리하여 고안된 디스크에 안착된 개인 식별용 카드 및 그 보존방법을 제공하는 것이다.The present invention has been conceived to solve the above problems, and an object of the present invention is to provide a personal identification card mounted on a disc designed by preserving DNA so that DNA for genetic testing can be semi-permanently preserved, and a method for preserving the same. To provide.

또한, 본 발명의 다른 목적은 DNA를 카드에 고정하기까지 소요되는 시간이 종래에 비하여 크게 단축되도록 하는 DNA가 보존 처리된 유전자의 보관 및 개인 식별용 카드 및 그 보존방법을 제공하는 것이다.In addition, another object of the present invention is to provide a card for storage and personal identification of DNA-preserved genes, and a method for preserving the same, so that the time required to fix the DNA to the card is significantly shortened compared to the prior art.

또한, 본 발명의 또 다른 목적은 가온에 의한 건조 과정을 통하여 세균의 활성을 제거함으로써 DNA의 손상을 억제하도록 하는 DNA가 보존 처리된 유전자의 보관 및 개인 식별용 카드 및 그 보존방법을 제공하는 것이다.In addition, another object of the present invention is to provide a storage and personal identification card for DNA-preserved genes and a method of preserving the same to suppress DNA damage by removing bacterial activity through a drying process by heating. .

또한, 본 발명의 또 다른 목적은 정전기가 잘 일어나는 재질을 고정수단으로 활용하여 DNA를 포함한 세포 조각의 부착력을 제고함으로써 DNA를 포함한 세포 조각의 이탈을 방지하고 장기간 보존이 가능하도록 하는 DNA가 보존 처리된 유전자 보관 및 개인 식별용 카드 및 그 보존방법을 제공하는 것이다.In addition, another object of the present invention is a preservation treatment of DNA that prevents the detachment of cell fragments including DNA and enables long-term storage by enhancing the adhesion of cell fragments including DNA by utilizing a material that generates static electricity as a fixing means. It is to provide a card for storing and personal identification of the generated gene and a method of preserving the same.

본 발명의 또 다른 목적은 세포의 세포막을 제거함으로써, 장기간 보존시 세포막의 수축에 따른 DNA의 손상을 방지할 수 있도록 하는 DNA가 보존 처리된 유전자 보관 및 개인 식별용 카드 및 그 보존방법을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a DNA-preserved gene storage and personal identification card, and a method for preserving the same, so as to prevent damage to DNA due to contraction of the cell membrane during long-term storage by removing the cell membrane of cells. will be.

본 발명의 또 다른 목적은 세포막의 제거와 동시에 방부처리를 수행하여 세포의 변성에 의한 DNA의 손상을 방지하도록 하는 DNA가 보존 처리된 유전자 보관 및 개인 식별용 카드 및 그 보존방법을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a DNA-preserved gene storage and personal identification card and a method for preserving the same, which prevents DNA damage due to cell degeneration by performing an embalming treatment at the same time as the removal of the cell membrane.

본 발명은 전술한 목적을 달성하기 위하여, 사람 또는 동물의 신체 특정 부위에서 세포를 채취하는 단계; 상기 채취한 세포를 완충용액에 침잠하여 세포막을 제거하는 단계; 상기 세포막이 제거된 세포를 포함하는 완충용액을 원심분리 하여 보존대상인 DNA 및 세포조각을 추출하는 단계; 상기 보존대상인 DNA 및 세포조각을 45℃ 내지 75℃의 온도에서 건조하여 세균의 활성을 제거하는 단계; 및 상기 세균의 활성이 제거된 DNA 및 세포조각을 개인 식별용 카드의 일측에 고정하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 DNA의 보존처리 방법을 제공한다.The present invention, in order to achieve the above object, the steps of collecting cells from a specific body part of a human or animal; Immersing the collected cells in a buffer solution to remove the cell membrane; Centrifuging a buffer solution containing the cells from which the cell membrane has been removed to extract DNA and cell fragments to be preserved; Drying the DNA and cell fragments to be preserved at a temperature of 45°C to 75°C to remove bacterial activity; And fixing the DNA and cell fragments from which the bacterial activity has been removed to one side of the personal identification card.

상기 세포막을 제거하는 단계;에서는 마지막에 방부용액을 더 추가하여 DNA 및 세포조각이 방부 처리되도록 하는 것이 바람직하다.In the step of removing the cell membrane, it is preferable to add an antiseptic solution at the end so that the DNA and cell fragments are subjected to an antiseptic treatment.

상기 개인 식별용 카드에 사용되는 DNA 및 세포조각 고정용 재질은 PE 계열인 것이 바람직하다.It is preferable that the material for fixing DNA and cell fragments used in the personal identification card is a PE series.

또한, 본 발명은 전술한 DNA 보존방법에 의하여 제작되며, DNA를 이루는 사슬이 절단되지 않아 향후 유전자검사가 용의한 DNA가 보존 처리된 유전자 보관 및 개인 식별용 카드를 제공한다.In addition, the present invention provides a gene storage and personal identification card prepared by the above-described DNA preservation method and in which the DNA constituting the DNA is not cut and thus DNA is preserved for future genetic testing.

이상과 같이 본 발명에 따르면, 유전자 검사를 위한 DNA가 반영구적으로 보존되는 효과가 기대된다.As described above, according to the present invention, the effect of semi-permanently preserving DNA for genetic testing is expected.

또한, 본 발명의 다른 목적은 세포조각 및 DNA를 카드에 고정하기까지 소요되는 시간이 종래에 비하여 크게 단축되도록 하는 효과가 기대된다.In addition, another object of the present invention is expected to significantly shorten the time required to fix the cell fragments and DNA to the card compared to the prior art.

또한, 본 발명의 또 다른 목적은 가온에 의한 건조과정을 통하여 세균의 활성을 제거 함으로써 세균에 의한 DNA의 손상을 억제하도록 하는 효과가 기대된다.In addition, another object of the present invention is expected to be effective in suppressing DNA damage by bacteria by removing the activity of bacteria through a drying process by heating.

또한, 본 발명의 또 다른 목적은 정전기가 잘 일어나는 재질을 고정수단으로 활용하여 DNA를 포함한 세포 조각의 부착력을 높임으로써 DNA를 포함한 세포의 이탈을 방지하고 장기간 보존이 가능하도록 하는 효과가 기대된다.In addition, another object of the present invention is expected to be effective in preventing separation of cells including DNA and enabling long-term preservation by increasing the adhesion of cell fragments including DNA by utilizing a material that generates static electricity as a fixing means.

본 발명의 또 다른 목적은 세포막을 제거함으로써, 장기간 보존시 세포막의 수축에 따른 DNA의 손상을 방지할 수 있도록 하는 효과가 기대된다.Another object of the present invention is to remove the cell membrane, so that the effect of preventing damage to DNA due to the contraction of the cell membrane during long-term storage is expected.

본 발명의 또 다른 목적은 세포막 제거처리 이후, 방부처리를 수행하여 세포의 변성에 의한 DNA의 손상을 방지하도록 하는 효과가 기대된다.Another object of the present invention is expected to be effective in preventing DNA damage due to cell degeneration by performing an antiseptic treatment after the cell membrane removal treatment.

도 1은 본 발명의 바람직한 일 실시예에 의한 개인 식별용 카드를 나타내는 도면이다.
도 2는 본 발명의 바람직한 일 실시예에 의한 유전자 보존처리 과정을 나타내는 순서도이다.
1 is a view showing a personal identification card according to an embodiment of the present invention.
2 is a flow chart showing a gene preservation process according to a preferred embodiment of the present invention.

본 발명에서는 개인 식별카드라고 하여 사람의 유전정보를 담고 있는 카드를 지칭하였으나, 반려견 등 반려동물용 개체 식별카드로도 가능하다. In the present invention, the personal identification card refers to a card containing the genetic information of a person, but it can also be an individual identification card for companion animals such as dogs.

본 발명은 일반적인 보관 환경에서도 DNA가 장기간 보존 가능하도록 하는 것을 목적으로 하며, 따라서, 추후에도 유전자 검사가 정상적으로 이루어질 수 있도록 하는 것이다. 즉, 개인 식별카드는 특별한 환경에서 보관되는 것이 아니며, 일반적인 생활환경에서도 보관될 수 있고, 그럼에도 불구하고 DNA의 보존이 가능하도록 하는 것이다.An object of the present invention is to enable long-term storage of DNA even in a general storage environment, and therefore, to allow genetic testing to be performed normally in the future. That is, the personal identification card is not stored in a special environment, but can be stored in a general living environment, and nevertheless, it is possible to preserve DNA.

본 발명에서는 세포에서 순수하게 DNA 만을 별도로 추출하지 않고, 세포조각과 DNA가 혼재된 상태에서 보관하는 방법을 사용하되, DNA의 보존성을 향상시키기 위하여 다양한 프로세스를 수행하였다. In the present invention, a method of storing only pure DNA from cells is not separately extracted, but in a state in which cell fragments and DNA are mixed, but various processes were performed to improve the preservability of DNA.

도 1은 본 발명의 바람직한 일 실시예에 의한 개인 식별용 카드를 나타내는 도면이다. 도시된 바와 같이, 상기 카드는 신분증과 유사한 형상을 하고 있으며, 우측 하단에 DNA 및 세포조각을 탑재 및 고정하는 공간이 마련되는데, 예를 들어서 PE(polyethylene) 재질의 원형 디스크에 DNA 및 세포조각을 탑재하고, 상기 디스크를 외부 공기와의 접촉을 차단하여 카드상에 고정하는 방법에 의하여 제작할 수 있다. 1 is a view showing a personal identification card according to an embodiment of the present invention. As shown, the card has a shape similar to an identification card, and a space for mounting and fixing DNA and cell fragments is provided at the lower right. For example, DNA and cell fragments are placed on a circular disk made of PE (polyethylene). It can be manufactured by mounting the disk and fixing the disk on the card by blocking contact with external air.

세포와 함께 잔류하는 세균은 세포의 영양물질을 분해하며 번식하게 됨으로 세포 및 세포내 DNA의 변성을 초래 하게 된다. 나아가 차후 DNA 검사를 시행할 경우, 세균 개체수의 증가로 원래 목적했던 DNA 보다 세균의 DNA가 검출될 가능성이 매우 높아짐으로 세균의 활성을 억제해야 한다Bacteria that remain with the cells degrade the nutrients of the cells and multiply, resulting in denaturation of cells and intracellular DNA. Furthermore, when a DNA test is performed later, it is necessary to suppress the activity of bacteria as the possibility of detecting bacterial DNA is much higher than the originally intended DNA due to the increase in the number of bacteria.

건조과정을 통해 세균의 성장 필수요소인 온도, 습도, 영양물질 중에서 수분을 제거해 줌으로써 세균의 활성을 중지 시킬 수 있다.Through the drying process, the activity of bacteria can be stopped by removing moisture from temperature, humidity, and nutrients, which are essential elements of bacterial growth.

도 2는 본 발명의 바람직한 일 실시예에 의한 유전자 보존처리 과정을 나타내는 순서도이다. 2 is a flow chart showing a gene preservation process according to a preferred embodiment of the present invention.

본 발명의 DNA 보존방법은, 인간 또는 동물의 신체 특정 부위에서 세포를 채취하는 단계; 상기 채취된 세포를 완충용액에 침잠하여 세포 및 핵막을 제거하는 단계; 상기 세포막이 제거된 세포를 포함하는 완충용액에 방부 물질을 처리하여 세균의 활성을 억제하는 단계; 상기 세균의 활성을 어제한 완충용액을 원심 분리하여 보존대상인 세포조각 및 DNA를 추출하는 단계; 상기 보존대상 세포조각 및 DNA를 정전기적 성질을 띄는 소재에 로딩하는 단계; 상기 정전기적 성질을 띄는 소재에 로딩 된 세포조각 및 DNA를 45℃ 내지 75℃의 온도에서 건조하여 세균에 의한 세포물질 및 DNA의 변성을 억제하는 단계; 및 상기 안정화된 세포조각 및 DNA를 개인 식별용 카드의 일측에 고정하는 단계;를 포함한다.The DNA preservation method of the present invention comprises the steps of collecting cells from a specific body part of a human or animal; Immersing the collected cells in a buffer solution to remove the cells and nuclear membrane; Inhibiting the activity of bacteria by treating an antiseptic substance in a buffer solution containing the cells from which the cell membrane has been removed; Extracting cell fragments and DNA to be preserved by centrifuging the buffer solution in which the bacterial activity was yesterday; Loading the cell fragments and DNA to be preserved onto a material exhibiting electrostatic properties; Drying the cell fragments and DNA loaded on the electrostatic material at a temperature of 45°C to 75°C to inhibit denaturation of cell material and DNA by bacteria; And fixing the stabilized cell fragments and DNA to one side of the personal identification card.

여기서, 인간 또는 동물의 신체 특정 부위에서 세포를 채취하는 단계;는 일반적인 세포 채취과정인 멸균된 면봉을 이용한 구강상피세포를 채취하는 방법을 따른다. 그리고 세포의 위치나 종류는 특별히 제한되지 않고, 생체내의 핵이 있는 어느 세포도 가능하다.Here, the step of collecting cells from a specific body part of a human or animal; follows a method of collecting oral epithelial cells using a sterilized cotton swab, which is a general cell collection process. In addition, the location or type of cells is not particularly limited, and any cell with a nucleus in vivo is possible.

이후, DNA의 손상방지 및 보관성을 높이기 위해 세포 및 핵을 둘러싸고 있는 막을 제거하여야 하며, 따라서 본 발명에서는 세포 및 핵막을 파괴할 수 있는 완충용액에 채취된 세포를 침잠하는 과정을 수행한다. 여기서 완충용액의 종류는 특별히 제한되지 않는데, 예를 들어 계면활성제 등을 사용할 수 있다. Thereafter, the membrane surrounding the cells and the nucleus must be removed in order to prevent damage to the DNA and increase storage, and accordingly, in the present invention, a process of immersing the collected cells in a buffer solution capable of destroying the cells and nuclear membranes is performed. Here, the type of the buffer solution is not particularly limited, and for example, a surfactant or the like may be used.

이후, 세균에 의한 DNA의 손상 및 차후 DNA 분석이 용의하도록 하기 위해 Pr 방부제를 추가할 수 있으며, 방부제는 세포 조각 및 DNA의 보존성을 보다 높이며, 추후에 유전자 검사를 하는데, 아무런 제한요인으로 작용 하지 않는다. 방부제의 종류는 특별히 제한되지 않으며, 방부효과를 갖는 어떠한 물질도 가능하다.Afterwards, Pr preservatives can be added to facilitate DNA damage and subsequent DNA analysis by bacteria, and preservatives increase the preservation of cell fragments and DNA, and perform genetic tests later, acting as a limiting factor. I never do that. The type of the preservative is not particularly limited, and any material having an antiseptic effect may be used.

세포막을 제거한 이후에는 보존이 필요한 세포 조각과 DNA만을 선별하기 위하여 완충용액에 침잠된 세포를 12,000RPM에서 10분간 원심 분리한다. 여기서 보존대상인 세포조각을 포함한 DNA는 주로 아래에 가라앉게 되며, 상등액을 폐기하고 잔류하는 세포조각 및 DNA를 수득한다. After removing the cell membrane, the cells immersed in the buffer solution are centrifuged for 10 minutes at 12,000 RPM in order to select only the cell fragments and DNA that need to be preserved. Here, the DNA including the cell fragments to be preserved is mainly settled below, and the supernatant is discarded to obtain the remaining cell fragments and DNA.

수득한 세포조각 및 DNA는 정전기적 성질을 갖는 소재에 흡착 시키게 되며, 이 소재는 예를 들어 정전기가 많이 일어나는 고분자 재질을 채택한다. The obtained cell fragments and DNA are adsorbed on a material having an electrostatic property, and this material is, for example, a polymer material that generates a lot of static electricity.

이러한 고분자 재질로서 대표적으로 PE(polyethylene)를 사용하나, 정전기가 많이 일어나는 재질은 PE에 제한되지는 않는다. 정전기가 많이 일어나는 재질은 세포조각 및 DNA를 끌어당겨 고정하는 성능이 우수하며, 따라서 세포의 이탈이 예방되는 작용한다. PE (polyethylene) is typically used as such a polymer material, but a material that generates a lot of static electricity is not limited to PE. Materials that generate a lot of static electricity have excellent ability to attract and fix cell fragments and DNA, and thus act to prevent cell separation.

해당 세포조각 및 DNA는 보존을 높이기 위해서는 건조를 수행하여야 하는데, 건조 즉 가온 처리를 하는 데에는 45~75℃ 정도의 온도이면 족하며, 위 온도범위 중 하한 미만의 온도에서는 건조효율이 떨어져 건조시간이 길어지게 되고, 위 상한을 초과하는 온도에서는 세포 자체에 열손상이 발생되어 DNA의 장기 보존성이 저하됨은 물론이고 DNA의 이중나선을 떨어뜨려 DNA의 변성을 초래할 수 있으므로, 건조(가온처리) 온도는 위 범위에서 임계적 의의가 있다. 이와 같이 세균의 활성을 억제하기 위한 가온 처리시의 온도범위는 매우 중요한 의의를 갖는다.In order to increase the preservation of the cell fragments and DNA, drying must be carried out. For drying, that is, heating treatment, a temperature of about 45 to 75℃ is sufficient. At temperatures below the lower limit of the above temperature range, drying efficiency decreases and drying time is reduced. When the temperature exceeds the upper limit, heat damage occurs on the cell itself and the long-term preservation of DNA is deteriorated, and the double helix of the DNA may drop, resulting in DNA degeneration, so the drying (heating) temperature is There is a critical significance in the above range. In this way, the temperature range during the heating treatment for suppressing the activity of bacteria has very important significance.

이와 관련하여 각 온도별로 dsDNA(이중나선)양과 ssDNA(단일나선)양을 측정하여 나타내었다. 아래 표에 나타낸 바와 같이, 이중나선의 양이 중요하며, 이중나선의 소실양이 적은 45 ~ 75℃의 온도범위가 의의가 있음을 알 수 있다.In this regard, the amount of dsDNA (double helix) and the amount of ssDNA (single helix) were measured and shown for each temperature. As shown in the table below, the amount of double helix is important, and it can be seen that the temperature range of 45 ~ 75℃, where the amount of loss of double helix is small, is significant.

온도(℃)Temperature(℃) 4545 5050 5555 6060 6565 7070 7575 8080 8585 건조시간(분)Drying time (minutes) 120120 100100 7070 5555 4040 3030 2020 1515 1010 dsDNA 양 (㎍/㎖)dsDNA amount (㎍/mL) 831831 829829 821821 822822 819819 820820 801801 701701 511511 ssDNA 양 (㎍/㎖)ssDNA amount (㎍/㎖) 3535 3232 3535 3535 3030 3636 3838 8080 190190

건조 및 가온 처리가 완료된 세포조각 및 DNA를 담고 있는 소재는 개인 또는 개체 식별용 카드의 정해진 위치에 고정한다. Materials containing DNA and cell fragments that have been dried and warmed are fixed in a designated position on an individual or individual identification card.

한편, DNA가 안착되는 소재별로 DNA를 loading(장착)한 다음 그 소재에서 DNA를 회수하여 정제한뒤 DNA양을 확인하였는데, 이에 대한 결과는 다음 표와 같다. On the other hand, DNA was loaded (loaded) for each material on which DNA was placed, and then DNA was recovered from the material and purified, and then the amount of DNA was checked. The results are shown in the following table.

DNA로딩 디스크 소재DNA loading disc material 코팅지Coated paper PE계열PE series 와트만페이퍼Whatman Paper 나이트로젠필터Nitrogen filter dsDAN양 (㎍/㎖)dsDAN amount (㎍/㎖) 570570 620620 501501 571571

위 표로부터 알 수 있는 바와 같이, 본 발명의 PE 계열에 DNA를 안착하는 경우에 유효한 DNA의 양이 가장 많이 남아있음을 알 수 있었으며, 따라서 PE계열의 재질을 사용하는 것이 바람직하다.As can be seen from the table above, it was found that the most effective amount of DNA remained when the DNA was settled in the PE series of the present invention, and therefore, it is preferable to use a material of the PE series.

또한, 본 발명에서는 이와 같이 PE계열의 재질에 DNA를 안착하여 보관한 후, DNA 카드의 보관 시간에 따른 DNA 회수량을 측정하여 다음 표와 같이 나타내었다.In addition, in the present invention, after the DNA is seated and stored in a PE-based material as described above, the amount of DNA recovered according to the storage time of the DNA card is measured as shown in the following table.

보관시간(년)Storage time (years) 00 1One 22 33 44 dsDAN양 (㎍/㎖)dsDAN amount (㎍/㎖) 980980 930930 920920 919919 918918

위 표로부터 알 수 있는 바와 같이, 보관기간 4년에 이르기까지 최초의 DNA의 양에 비하여 거의 소실됨이 없이 잘 보존되었다.As can be seen from the table above, it was well preserved with little loss compared to the amount of the original DNA until the storage period of 4 years.

이상과 같은 본 발명을 수행하면, 기존의 키트를 이용하여 DNA를 추출과정에서 소요되는 10~24시간을 크게 단축할 수 있으며, 건조시간까지 포함해서 3시간 전후에 모든 절차를 수행할 수 있으므로, 공정상 간이하고 경제적임은 물론, 무엇보다도 DNA를 세포로부터 추출하여 보관하는 경우에 비하여, DNA가 세포조각내의 물질 중에 위치하게 하여, 이들 물질이 보호작용을 하게 됨으로써 DNA의 보존기간을 크게 향상할 수 있다. When performing the present invention as described above, 10 to 24 hours required in the DNA extraction process using an existing kit can be greatly reduced, and all procedures can be performed before and after 3 hours including drying time, The process is simple and economical, and above all, compared to the case where DNA is extracted from the cells and stored, the DNA is located in the material in the cell fragments, and these materials act as a protective function, greatly improving the storage period of DNA. I can.

이상, 본 발명의 바람직한 실시예를 들어 상세하게 설명하였으나, 본 발명은 상기 실시예에 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 기술적 사상의 범위 내에서 당 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의하여 여러 가지 변형이 가능하다.Above, the preferred embodiment of the present invention has been described in detail, but the present invention is not limited to the above embodiment, and various modifications by those of ordinary skill in the art within the scope of the technical idea of the present invention This is possible.

Claims (4)

추출된 세포를 완충용액에 침잠하여 세포막을 제거하는 단계;
상기 세포막이 제거된 세포조각 및 DNA를 포함하는 완충용액을 원심분리하여 보존대상 세포조각 및 DNA를 추출하는 단계;
상기 추출된 세포조각 및 DNA를 정전기적 성질을 띄는 소재로서 PE계열의 재질의 소재에 함께 로딩하는 단계;
상기 보존대상 세포조각 및 DNA를 포함하는 정전기적 성질을 띄는 소재를 가온처리 및 건조하여 세균의 활성을 제거하는 단계; 및
상기 세균의 활성이 제거된 세포조각 및 DNA를 개인 식별용 카드의 일측에 고정하는 단계;
를 포함하는 것을 특징으로 하는 DNA의 보존처리 방법.
Immersing the extracted cells in a buffer solution to remove the cell membrane;
Extracting the cell fragments and DNA to be preserved by centrifuging the buffer solution containing the cell fragments and DNA from which the cell membrane has been removed;
Loading the extracted cell fragments and DNA into a PE-based material as a material exhibiting electrostatic properties;
Heating and drying a material exhibiting electrostatic properties including the cell fragments to be preserved and DNA to remove the activity of bacteria; And
Fixing the cell fragments and DNA from which the bacterial activity has been removed to one side of the personal identification card;
DNA preservation treatment method comprising a.
삭제delete 삭제delete 제1항의 방법에 의하여 제작되며,
DNA를 이루는 사슬이 절단되지 않아 보존성이 우수한 DNA가 보존처리된 유전자 보호 및 개인 또는 동물개체 식별용 카드.
It is produced by the method of paragraph 1,
Cards for gene protection and identification of individuals or animals in which DNA is preserved with excellent preservation because the chains that make up DNA are not cut.
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