KR102184985B1

KR102184985B1 - 수소 및 피톤치드를 유효성분으로 포함하는 기능성 화장료 조성물

Info

Publication number: KR102184985B1
Application number: KR1020200086945A
Authority: KR
Inventors: 이정숙
Original assignee: (주)피앤스토리
Priority date: 2020-07-14
Filing date: 2020-07-14
Publication date: 2020-12-01

Abstract

본 발명에 따른 수소 및 피톤치드를 유효성분으로 포함하는, 기능성 화장료 조성물은 미세먼지에 의해 과발현된 NO 생성을 억제하고, 염증성 사이토카인인 IL-6, IL-8, IL-1

및 TNF-

의 생성을 효과적으로 억제하여 피부 염증 예방 또는 개선용 화장료 조성물로 사용될 수 있다. 여기에서, 상기 수소 및 피톤치드에 천연물질은 블루베리 추출물, 흑미 추출물, 감초 추출물, 흑마늘 추출물 또는 울금 추출물을 더 포함하는 경우 미세먼지에 의해 과발현된 NO 생성을 억제하고, 염증성 사이토카인인 IL-6, IL-8, IL-1

및 TNF-

의 생성을 더욱 효과적으로 억제함을 확인하여 피부염증 예방 또는 개선용 화장료 조성물로 사용될 수 있다.

Description

수소 및 피톤치드를 유효성분으로 포함하는 기능성 화장료 조성물 {Functional cosmetic composition comprising hydrogen and phytoncide as active ingredients}

본 발명은 수소 및 피톤치드를 유효성분으로 포함하는 기능성 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 구체적으로는 고농도의 수소 및 피톤치드를 유효성분으로 포함하며, 복합 천연 추출물을 더 포함하는 기능성 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부는 외부 환경에 직접적으로 노출되는 신체 부위로서, 우리 몸의 중요한 기관들을 보호하는 보호막 역할을 할 뿐만 아니라 수분 증발을 조절하고 외부 감염으로부터 몸을 보호하는 역할을 한다. 하지만, 아무리 외부로부터의 바이러스 침투를 막아내는 피부일지라도 과도한 자외선, 오염된 환경 등 외부로부터 받는 스트레스는 피부 자극을 유발하게 되고, 결국에는 피부 노화로 이어지게 된다.

그런데 인구증가, 도시화, 산업화 및 자동차 증가 등의 영향으로 대기오염이 심화되고 있으며, 이에 따라 오염물질의 종류가 다양해지고 있다. 특히 우리나라의 위치적인 요인으로 중국에서 배출되는 대기오염 물질의 이동으로 인한 황사와 미세먼지 등의 피해에 직면하고 그 심각성도 높아지고 있다. 미세먼지 (particulate matter)는 입자의 크기에 따라 지름이 10㎛이하인 미세먼지 (PM₁₀), 2.5㎛이하인 초미세먼지 (PM_2.5)로 분류된다. 우리나라 환경부는 PM₁₀을 대기오염물질로 규제하고 있다. 이런 미세먼지 등 대기오염물질은 호흡기질환과 심장질환을 유발한다고 알려져 있으며 이와 함께 신체에 넓은 면적을 차지하고 있는 피부에 미치는 영향 또한 그 관심이 점차 확대되고 있다.

특히, 대기오염물질 중 미세먼지는 표피장벽기능을 손상시키고 아토피피부염을 악화시킨다는 보고가 있다. 또한 민감성 피부는 외부의 자극이나 환경의 변화에 대하여 일반적인 피부보다 민감하게 반응하여 자극이나 피부염 증상을 보인다. 이러한 민감성 피부를 가진 사람은 정상적인 사람에 비해 미세먼지에 자극을 느끼는 정도도 더 민감하여 3배 이상의 자극감을 느낀 연구가 있었다. 따라서 미세먼지 등의 공해 물질은 특히 민감성 피부를 가진 사람들에게 피부 문제를 일으킬 가능성이 높다. 이는 피부노화에도 영향을 미치는데 최근 역학적 연구에서 미세먼지에 노출된 피부가 주름과 색소반점이 증가되어 노화와 직접적인 관련이 있다고 밝혔다. 미세먼지는 활성산소를 생산하여 콜라겐 합성을 저해하고 분해를 활성화시킬 수 있고 미세먼지 표면에 흡착된 PAH (polycyclic aromatic hydrocarbon) 가 AhR을 통하여 생체 이물 대사를 활성화하여 콜라겐 분해를 증가하여 피부노화가 발생한다. 이에 따라 미세먼지와 피부의 직접적인 접촉을 줄이는 방법과 분자학적 기전에 대한 연구를 통한 새로운 치료법을 모색해야한다.

피부에서의 염증반응 (inflammatory response)은 물리적 자극이나 화학물질, 세균 등에 의해 피부손상이 유발될 때 이를 방어하기 위한 작용으로서 시작되며 다양한 면역세포와 염증성 사이토카인이 관여한다. IL-6 (interleukin-6), IL-8 (interleukin-8), IL-1

(interleukin-1

) 등이 대표적인 염증 유도 사이토카인이다. IL-1

는 활성화된 단핵식균세포, 상피세포, 혈관내피세포에 의해 만들어져 염증 반응을 매개하는 전형적인 사이토카인이고, IL-6는 T세포 및 대식세포에 의해 분비되어 면역 반응을 자극하며 염증 반응을 조절하는 사이토카인이다. 또한 활성화된 대식세포 (macrophage)는 염증성 사이토카인뿐만 아니라 일산화질소 (nitric oxide: NO)나 프로스타글란딘 (prostagladin) E2 (PGE2)를 과도하게 생성하여 염증 과정을 더욱 활성화시킨다. 미세먼지 입자는 사람 각질형성세포에서 이러한 염증성 사이토카인의 발현을 증가시킨다는 보고가 있다.

이에 본 발명자들은 고농도의 수소 및 피톤치드를 유효성분으로 포함하며, 이에 몇가지 천연 추출물을 더 포함하는 경우 미세먼지에 의한 피부염증을 완화시키는 효능을 확임함으로써 본 발명을 완성하였으며, 이는 기능성 화장품으로 사용될 수 있을 것이다.

한국등록특허 10-1867308호

본 발명의 목적은 수소 및 피톤치드를 유효성분으로 포함하여 미세먼지로 인한 피부염증을 완화시킬 수 있는 기능성 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 고농도의 수소 및 피톤치드를 유효성분으로 포함하며, 천연 추출물을 더 포함하여 미세먼지로 인한 피부염증을 더욱 효과적으로 완화시킬 수 있는 기능성 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

상기 목적을 해결하기 위하여,

본 발명은 수소 및 피톤치드를 유효성분으로 포함하는, 기능성 화장료 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 고농도의 수소 및 피톤치드를 유효성분으로 포함하며, 천연 추출물을 더 포함하는, 기능성 화장료 조성물을 제공한다.

이때, 상기 천연 추출물은 블루베리 추출물, 흑미 추출물, 감초 추출물, 흑마늘 추출물 또는 울금 추출물이며, 미세먼지로 인한 피부염증을 더욱 효과적으로 완화시킬 수 있는 기능성 화장료 조성물을 제공한다.

및 TNF-

의 생성을 효과적으로 억제하여 피부 염증 예방 또는 개선용 화장료 조성물로 사용될 수 있다. 여기에서, 상기 수소 및 피톤치드에 천연 추출물은 블루베리 추출물, 흑미 추출물, 감초 추출물, 흑마늘 추출물 또는 울금 추출물을 더 포함하는 경우 미세먼지에 의해 과발현된 NO 생성을 억제하고, 염증성 사이토카인인 IL-6, IL-8, IL-1

및 TNF-

의 생성을 더욱 효과적으로 억제함을 확인하여 피부 염증 예방 또는 개선용 화장료 조성물로 사용될 수 있다.

도 1은 농도별 미세먼지 처리에 따른 RAW 264.7 세포에서 (a) 세포독성 및 (b) NO 생성량을 확인한 결과이다.
도 2는 본 발명에 따른 실시예 1의 피톤치드 및 복합 천연 추출물에 수소를 첨가한 추출물의 세포독성을 확인한 결과이다.
도 3은 본 발명에 따른 실시예 1의 피톤치드 및 복합 천연 추출물에 수소를 첨가한 추출물의 NO 생성 억제를 확인한 결과이다.
도 4는 본 발명에 따른 실시예 1의 피톤치드 및 복합 천연 추출물에 수소를 첨가한 추출물의 IL-6 생성 억제를 확인한 결과이다.
도 5는 본 발명에 따른 실시예 1의 피톤치드 및 복합 천연 추출물에 수소를 첨가한 추출물의 IL-8 생성 억제를 확인한 결과이다.
도 6은 본 발명에 따른 실시예 1의 피톤치드 및 복합 천연 추출물에 수소를 첨가한 추출물의 IL-1

생성 억제를 확인한 결과이다.
도 7은 본 발명에 따른 실시예 1의 피톤치드 및 복합 천연 추출물에 수소를 첨가한 추출물의 TNF-

생성 억제를 확인한 결과이다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명의 미세먼지에 의한 피부염증 예방 또는 개선용 기능성 화장료 조성물에 대해서,

본 발명은 복합 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물을 포함하는 미세먼지에 의한 피부염증 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 복합 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물은

복합 천연 추출물 (블루베리, 흑미, 감초, 흑마늘 또는 울금)을 제조하는 단계 (단계 1);

상기 단계 1에서 제조된 복합 천연 추출물에 편백나무 피톤치드를 첨가하는 단계 (단계 2); 및

상기 단계 2에서 제조된 편백나무 피톤치드가 첨가된 복합 천연 추출물에 고농도의 수소를 주입하는 단계 (단계 3)를 포함하는 제조방법에 의해 제조된 것일 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 탄소수 4의 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출하여 추출물을 제조할 수 있으며, 바람직하게 30 내지 50% 에탄올 수용액을 이용하여 추출한 뒤 농축하여 추출물을 제조할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명에서 사용되는 용어 "추출물 (extract)"은 추출 대상을 적절한 침출액으로 짜내고 침출액을 증발시켜 농축한 제제를 의미하는 것으로, 이에 제한되지는 않으나, 추출처리에 의해 얻어지는 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 이들의 조정제물 또는 정제물일 수 있다. 상기 복합 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물은 통상의 기술분야에 공지된 일반적인 추출방법, 분리 및 정제방법을 이용하여 제조할 수 있다. 상기 추출방법으로는, 이에 제한되지는 않으나, 바람직하게 열탕 추출, 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 방법을 사용할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 상술한 본 발명의 복합 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물의 화장품학적 유효량 (cosmetically effective amount) 및 화장품학적으로 허용되는 담체를 포함하여 제조할 수 있다.

화장료 조성물의 외형은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유한다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는, 이온형 (리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다. 본 발명에 따른 조성물은 또한 포말 (foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다.

본 발명의 일실시예에 따른 상기 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들면, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저로 구성된 제형에서 선택된 하나 이상의 제형일 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물에는 상기 복합 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물 이외에 기능성 첨가물 및 일반적인 화장료 조성물에 포함되는 성분이 추가로 포함될 수 있다. 상기 기능성 첨가물로는 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 성분을 포함할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에는 또한, 상기 기능성 첨가물과 더불어 필요에 따라 일반적인 화장료 조성물에 포함되는 성분을 배합해도 된다. 이외에 포함되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.

하기의 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세하게 설명한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명의 내용을 구체화하기 위한 것일 뿐 이에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니다.

<실시예 1> 수소, 피톤치드 및 천연 추출물 (블루베리, 흑미, 감초, 흑마늘 및 울금)의 제조

<1-1> 고농도 수소 제조 (초음파 발생 및 탈기조건에 따른 용존 수소 측정)

고농도의 수소를 제조하기 위한 공정을 이용하여 초음파처리, 초음파+탈기처리 조건에 따른 용존 수소를 측정하였다. 탈기 또는 초음파 등의 처리를 하지 않는 것을 대조군으로 하였으며, 초음파는 주파수 40kHz로 발생시켰으며, 진공압은 약 0.5bar 압력에서 실시하였다. 그 후 화장료 조성물의 용존산소는 수소가스를 3분간 주입 후 측정하였다. 각각의 용존수소를 비교한 결과는 표 1과 같다.

처리시간 (분)	대조군 (ppm)	초음파 (ppm)	초음파 + 탈기 (ppm)
1분	0.65	0.78	0.98
3분	0.65	0.79	1.00
5분	0.65	0.81	1.15
10분	0.65	0.80	1.08

탈기 또는 초음파 등의 처리를 하지 않은 대조군의 용존수소는 0.65ppm이었으며, 탈기처리를 하지 않고 초음파만 처리한 실험군의 용존수소는 0.78 내지 0.82 ppm으로 대조군 용존수소 대비 효과적인 용존수소 주입이 일어나지 않았다. 이와 대조적으로 초음파와 탈기처리를 함께 병행하였을 때에는, 용존수소 수준이 0.98 내지 1.15ppm으로 질소가스 투입 없이 초음파와 진공탈기 처리만으로 효율적으로 수소가 주입되었음을 알 수 있었고, 특히 5분 동안의 시간에서 진행한 경우 가장 효과적으로 수소가 주입됨을 확인하였다.

<1-2> 편백나무 피톤치드 준비

편백나무 피톤치드는 피톤치드 전문몰 숲의기적 (www.kijuk.co.kr)에서 구입하여 사용하였으며, 하기의 복합 천연 추출물과 같은 양의 편백나무 피톤치드 중량비 (w/w)를 첨가하였다.

<1-3> 블루베리 추출물의 제조

블루베리 (미국산) 중량 대비 30배 (wt/v%)의 50% 에탄올을 첨가하여 실온에서 24시간동안 추출하였으며, 추출과정을 3회 반복하였다. 상기 블루베리 추출액을 농축하여 최종 당도가 50 내지 70°Brix가 되도록 농축하였다. 농축액을 여과한 뒤, 물을 이용하여 1/10로 희석하였다.

<1-4> 흑미 추출물의 제조

흑미 (국내산) 중량 대비 30배 (wt/v%)의 50% 에탄올을 첨가하여 실온에서 24시간동안 추출하였으며, 추출과정을 3회 반복하였다. 상기 흑미 추출액을 농축하여 최종 당도가 10 내지 30°Brix가 되도록 농축하였다. 농축액을 여과한 뒤, 물을 이용하여 1/5로 희석하였다.

<1-5> 감초 추출물의 제조

감초 (국내산) 중량 대비 30배 (wt/v%)의 50% 에탄올을 첨가하여 실온에서 24시간동안 추출하였으며, 추출과정을 3회 반복하였다. 상기 감초 추출액을 농축하여 최종 당도가 10 내지 30°Brix가 되도록 농축하였다. 농축액을 여과한 뒤, 물을 이용하여 1/5로 희석하였다.

<1-6> 흑마늘 추출물의 제조

흑마늘 (국내산) 중량 대비 30배 (wt/v%)의 50% 에탄올을 첨가하여 실온에서 24시간동안 추출하였으며, 추출과정을 3회 반복하였다. 상기 흑마늘 추출액을 농축하여 최종 당도가 10 내지 30°Brix가 되도록 농축하였다. 농축액을 여과한 뒤, 물을 이용하여 1/5로 희석하였다.

<1-7> 울금 추출물의 제조

울금 (국내산) 중량 대비 30배 (wt/v%)의 50% 에탄올을 첨가하여 실온에서 24시간동안 추출하였으며, 추출과정을 3회 반복하였다. 상기 울금 추출액을 농축하여 최종 당도가 10 내지 30°Brix가 되도록 농축하였다. 농축액을 여과한 뒤, 물을 이용하여 1/5로 희석하였다.

<1-8> 수소, 피톤치드 및 천연 추출물을 포함하는 화장료 조성물 제조

상기 실시예 1-1 내지 1-7을 혼합함에 있어서, 물을 카본필터를 이용하여 정제하는 단계 (T1), 피톤치드를 포함하는 천연 복합 추출물의 화장료 조성물을 제조하는 단계 (T2), 수소가스를 주입하는 단계 (T3)를 포함하는 공정을 실시하여 최종 화장료 조성물을 얻을 수 있다. 본 개시의 조성물에 있어, 수소의 함량은 피부 보습 및 개선을 위한 화장료 조성물 총 중량에 대해 0.9 내지 1.2ppm이 바람직하다. 천연물질을 포함하는 화장료 조성물에 상기의 수소가 첨가되면 피부 도포 시 활성 수소가 피부의 활성 산소를 제거하고 세포 노화로 인한 세포 사멸 방지를 통해 피부 노화가 방지된다. 따라서 사용자의 피부톤이 맑아지고, 기미, 주근깨가 개선되거나 사라지게 되며, 피부 생성 촉진과 함께 노화가 예방되는 효과를 얻을 수 있다.

<비교예 1>

상기 실시예 1과 동일한 방법으로 제조하되, 편백나무 피톤치드는 혼합하지 않고, 블루베리, 흑미, 감초, 흑마늘 및 울금 추출물에 수소를 첨가하여 비교예 1로 사용하였다.

<비교예 2>

상기 실시예 1과 동일한 방법으로 제조하되, 블루베리, 흑미, 감초, 흑마늘 및 울금 추출물은 혼합하지 않고, 편백나무 피톤치드에 수소를 첨가하여 비교예 2로 사용하였다.

<실시예 2> 세포 배양

각질형성세포 (Human Keratinocyte Cell Lines, HaCaT)는 한국세포주은행 (Seoul National University, Seoul, Korea)에서 구입하였다. HacaT 세포는 37

5% CO₂ 조건하에 10% FBS (fetal bovine serum) 및 1% 페니실린-스트렙토마이신 (PS)을 포함하는 고글루코스 DMEM (WELGENE, KOREA) 배양액에서 배양하였다.

<실험예 1> 미세먼지 처리 조건 확인

LPS (1㎍/㎖)와 유사한 수준으로 NO 생성량을 나타내는 최적농도를 설정하고자, 실시예 2의 HaCaT 세포에 미세먼지를 0.1, 1, 10, 25, 50, 100, 250 및 500㎍/㎖로 처리하고 세포독성 및 NO 생성량을 측정하였다.

그 결과, 도 1에 나타낸 바와 같이, 미세먼지를 250 및 500㎍/㎖의 농도로 처리할 경우 LPS와 유사한 NO 생성을 보이는 것을 확인하였다. 따라서 이후의 실험에서는 미세먼지를 250㎍/㎖ 농도로 처리하여 실험을 수행하였다.

<실험예 2> 세포독성 평가

HaCaT 세포를 96well plate (Corning, USA)에 2Х10⁴cells/well의 세포 수가 되도록 100ul씩 분주하여 37

5% CO₂incubator에서 24시간 배양한 후 실시예 1의 피톤치드 및 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물을 100, 200 및 500㎍/㎖의 농도로 처리하고 이에 미세먼지를 250㎍/㎖로 처리하여 24시간동안 배양하였다. 이후 0.2 ㎎/㎖ 농도의 MTT solution을 각 well에 100㎕씩 넣고 2시간 동안 배양한 후 상층액을 제거하고 DMSO를 100㎕씩 분주하여 formazan을 잘 녹인 후 570nm에서 흡광도를 측정하였다.

그 결과, 도 2에 나타낸 바와 같이, 피톤치드 및 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물은 세포독성을 나타내지 않는 것을 확인하였다.

<실험예 3> NO 생성 억제 확인

본 발명에 따른 실시예 1의 피톤치드 및 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물의 NO 생성 억제를 확인하기 위해, HaCaT 세포를 6well plate (Corning, USA)에 1Х10⁶cells/well의 세포 수가 되도록 분주하여 37

5% CO₂incubator에서 24시간 배양한 후, 미세먼지를 250㎍/㎖농도로 처리하고, 비교예 1, 2 및 실시예 1을 각각 200㎍/㎖ 농도로 처리하여 18시간 동안 배양하였다. 이후 상등액 100㎕와 Griess reagent 100㎕을 혼합하여 상온에서 10분간 반응시킨 뒤, 540nm에서 흡광도를 측정하였다. Nitrite standard로 표준곡선을 작성하여 NO의 생성량을 측정하였다.

그 결과, 도 3에 나타낸 바와 같이, 비교예 1 내지 비교예 2 대비 본 발명의 실시예 1의 피톤치드 및 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물을 처리할 경우, 미세먼지에 의해 유도된 NO 생성을 현저하게 감소시키는 것을 확인하였다.

<실험예 3> 사이토카인 생성 억제 확인

본 발명에 따른 실시예 1의 피톤치드 및 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물의 염증성 사이토카인 생성 억제를 확인하기 위해 HaCaT 세포를 6well plate (Corning, USA)에 1Х10⁶cells/well의 세포 수가 되도록 분주하여 37

5% CO₂incubator에서 24시간 배양하였다. 그 후, 미세먼지를 250㎍/㎖ 농도로 처리하고, 비교예 1, 2 및 실시예 1을 각각 200㎍/㎖ 농도로 처리하여 18시간 동안 CO₂incubator에 배양한 후 배양 상층액을 희석하여 제조사의 지시에 따라 ELISA를 수행하였으며, 450nm 파장에서 마이크로스펙트로포토미터로 측정하였다. 최종 사이토카인의 양은 일정 단백질당 사이토카인 양으로 환산하여 음성대조군 (Control)과 비교하였다.

그 결과, 도 4에 나타낸 바와 같이, 비교예 1의 피톤치드에 수소를 첨가한 추출물, 비교예 2의 복합 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물 및 실시예 1의 피톤치드 및 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물을 처리하는 경우, 미세먼지에 의해 증가된 IL-6 생성량 대비 각각 157.6%, 143.8%, 102.6%로 감소하였다. 또한, 미세먼지에 의해 증가한 IL-6의 양을 100%라 하였을 때, 비교예 1은 32.94%, 비교예 2는 49.01%의 억제능을 보였으며, 특히 실시예 1에서 96.97%의 IL-6 생성 억제능을 보였으며, 비교예 1 (피톤치드에 수소를 첨가한 추출물) 보다 64.03%, 비교예 2 (복합 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물) 보다 47.96% 더 우수한 IL-6 억제능을 보이는 것을 확인하였다.

도 5에 나타낸 바와 같이, 비교예 1의 피톤치드에 수소를 첨가한 추출물, 비교예 2의 복합 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물 및 실시예 1의 피톤치드 및 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물을 처리하는 경우, 미세먼지에 의해 증가된 IL-8 생성량 대비 각각 131.8%, 135.5%, 105.6%로 감소하였다. 또한, 미세먼지에 의해 증가한 IL-8의 양을 100%라 하였을 때, 비교예 1은 34.7%, 비교예 2는 27.1%의 억제능을 보였으며, 특히 실시예 1에서 88.5%의 IL-8 생성 억제능을 보였으며, 비교예 1 (피톤치드에 수소를 첨가한 추출물) 보다 53.8%, 비교예 2 (복합 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물) 보다 61.4% 더 우수한 IL-8 억제능을 보이는 것을 확인하였다.

또한, 도 6에 나타낸 바와 같이, 비교예 1의 피톤치드에 수소를 첨가한 추출물, 비교예 2의 복합 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물 및 실시예 1의 피톤치드 및 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물 을 처리하는 경우, 미세먼지에 의해 증가된 IL-1

생성량 대비 각각 155.5%, 147.3%, 120.5%로 감소하였다. 또한, 미세먼지에 의해 증가한 IL-1

의 양을 100%라 하였을 때, 비교예 1은 31.9%, 비교예 2는 41.96%의 억제능을 보였으며, 특히 실시예 1에서 74.85%의 IL-1

생성 억제능을 보였으며, 비교예 1 (피톤치드에 수소를 첨가한 추출물) 보다 42.95%, 비교예 2 (복합 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물) 보다 32.89% 더 우수한 IL-1

억제능을 보이는 것을 확인하였다.

도 7에 나타낸 바와 같이, 비교예 1의 피톤치드에 수소를 첨가한 추출물, 비교예 2의 복합 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물 및 실시예 1의 피톤치드 및 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물을 처리하는 경우, 미세먼지에 의해 증가된 TNF-

생성량 대비 각각 200.1%, 165.8%, 116.5%로 감소하였다. 또한, 미세먼지에 의해 증가한 TNF-

의 양을 100%라 하였을 때, 비교예 1은 17.54%, 비교예 2는 45.8%의 억제능을 보였으며, 특히 실시예 1에서 86.41%의 TNF-

생성 억제능을 보였으며, 비교예 1 (피톤치드에 수소를 첨가한 추출물) 보다 68.87%, 비교예 2 (복합 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물) 보다 40.61% 더 우수한 TNF-

억제능을 보이는 것을 확인하였다.

이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허 청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

화장료의 제조예

본 발명에 따른 피톤치드 및 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물은 목적에 따라 여러 형태의 화장료로 제조 가능하다. 하기는 본 발명에 따른 피톤치드 및 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물을 활성성분으로 함유시킨 몇몇 화장료의 제조방법을 예시한 것으로 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.

<화장료 제조예 1> 유연 화장수의 제조

피톤치드 및 천연 추출물들에 수소를 첨가한 추출물 10.0 중량부

1,3-부틸렌글리콜 1.00 중량부

디소듐이디티에이 0.05 중량부

알란토인 0.10 중량부

디포타슘글리시리제이트 0.05 중량부

시트르산 0.01 중량부

소듐시트레이트 0.02 중량부

글리세레스-26 1.00 중량부

알부틴 2.00 중량부

하이드로제네이티드캐스터오일 1.00 중량부

에탄올 30.0 중량부

보존제 미량

착색제 미량

착향제 미량

정제수 잔량

<화장료 제조예 2> 영양 크림의 제조

1,3-부틸렌글리콜 7.00 중량부

글리세린 1.00 중량부

D-판테놀 0.10 중량부

식물 추출물 3.20 중량부

마그네슘알루미늄실리케이트 0.30 중량부

PEG-40 스테아레이트 1.20 중량부

스테아르산 2.00 중량부

폴리소르베이트 60 1.50 중량부

친유형글리세릴스테아레이트 2.00 중량부

소르비탄세스퀴올리에이트 1.50 중량부

세테아릴알코올 3.00 중량부

미네랄오일 4.00 중량부

스쿠알란 3.80 중량부

카르릴릭/카프릭트리글리세라이드 2.80 중량부

식물성오일 1.80 중량부

디메치콘 0.40 중량부

디포슘글리시리제이트 미량

알란토인 미량

소듐 히아루로네이트 미량

토코페릴아세테이트 적량

트리에탄올아민 적량

보존제 적량

착향제 적량

정제수 잔량

Claims

수소 및 피톤치드를 포함하는, 미세먼지로 인한 피부염증 예방 또는 개선용 화장료 조성물에서,
상기 화장료 조성물은 블루베리, 흑미, 감초, 흑마늘 및 울금으로 구성된 복합 천연 추출물을 더 포함하는 것이고,
상기 수소는 초음파처리 및 탈기처리 조건에 따른 것으로, 초음파처리 및 탈기처리 조건은 주파수 30 내지 50kHz, 진공압 0.3 내지 0.7bar 압력에서 3분 내지 7분동안 실시한 것인, 미세먼지로 인한 피부염증 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
삭제
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제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저로 구성된 제형에서 선택된 하나 이상의 제형인 것을 특징으로 하는, 미세먼지로 인한 피부염증 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 미세먼지에 의해 과발현된 NO 생성 억제하고, IL-6, IL-8, IL-1β 및 TNF-α 생성을 억제하는 것을 특징으로 하는, 미세먼지로 인한 피부염증 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
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제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 블루베리, 흑미, 감초, 흑마늘 및 울금으로 이루어진 복합 천연 추출물을 제조하는 단계 (단계 1);
상기 단계 1에서 제조된 복합 천연 추출물에 편백나무 피톤치드를 첨가하는 단계 (단계 2); 및
상기 단계 2에서 제조된 편백나무 피톤치드가 첨가된 복합 천연 추출물에 주파수 30 내지 50kHz, 진공압 0.3 내지 0.7bar 압력에서 3분 내지 7분동안의 초음파처리 및 탈기처리 조건을 통해 얻어진 고농도의 수소를 주입하는 단계 (단계 3);를 포함하는 제조방법에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는, 미세먼지로 인한 피부염증 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
제8항에 있어서,
상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 탄소수 4의 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출하는 것을 특징으로 하는, 미세먼지로 인한 피부염증 예방 또는 개선용 화장료 조성물.