KR102155559B1

KR102155559B1 - 암, 자가면역성 염증 및 중추신경계 장애를 치료하기 위한 비플루오로디옥살란-아미노-벤즈이미다졸 키나제 억제제

Info

Publication number: KR102155559B1
Application number: KR1020157001782A
Authority: KR
Inventors: 요안 레반; 미르코 자자
Original assignee: 4에스체 악티엔게젤샤프트
Priority date: 2012-06-27
Filing date: 2013-06-27
Publication date: 2020-09-15
Also published as: HK1204474A1; MY167785A; US20150158878A1; AU2013283318A1; EA029718B1; SG11201408617PA; AU2013283318B2; ZA201409194B; WO2014001464A1; EA201500050A1; CN104540831B; CN104540831A; IN2014MN02562A; EP2867237A1; CA2877589C; AU2018201275A1; CA2877589A1; JP2018076360A; JP2015525742A; MX2014015938A

Abstract

본 발명은 하기 일반식 (I)의 화합물, 또는 그 생리학적 기능성 유도체, 용매화물 또는 염 뿐 아니라, 이들의 약제로서의 용도, 이들을 포함하는 약제 조성물, 이들의 투여를 필요로 하는 의학적 질환의 치료 또는 예방 방법, 및 의학적 질환, 구체적으로는 자가면역 염증성 장애, CNS 장애, 수면 장애, 또는 암을 포함하는 증식성 질병의 치료 또는 예방용 약제의 제조에서의 이들의 용도에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 화합물의 특정 제조 방법에 관한 것이다:

상기 식에서,
A는 결합, 상기 정의된 하나 이상의 치환기 R"로 임의로 치환된 알킬 또는 알콕시, *-N(R"')CO-, *-CON(R"')-, *-N(R"')CON(R"')-, -S-, -SO-, *-N(R"')-, *-N(R"')CO-, *-CON(R"')-, -CO-, *-COO-, *-OOC-, *-SO₂N(R"')-, -SO₂, 또는 *-N(R"')-SO₂-이고, 여기서 R"'은 상기 정의된 바와 같고, *는 X에 대한 부착 지점을 특정하고; X는 아릴, 시클로알킬, 아르알킬, 헤테로시클릴 또는 헤테로아릴이고, 이들은 본원에서 추가로 설명된 하나 이상의 R^x로 치환될 수 있고; L은 결합 또는 *-N(R^N)CO-, *-CON(R^N)-, *-N(R^N)-, *-C=N(R^N)-, *-N(R^N)-알킬-, *-알킬-N(R^N)-, *-N(R^N)CON(R^N)-, *-CO-, *-SO₂-, 알킬, *-알킬-O-알킬-, *-NCO-CH=CH-, *-CH=CH-CONH-, *-SO₂N(R^N)-, *-N(R^N)SO₂-, 또는 헤테로시클릴이고, 여기서 *는 X에 대한 부착 지점을 특정하고; Y는 H, 알킬, 아릴, 아르알킬, 시클로알킬, 헤테로시클릴 또는 헤테로아릴이고, 이들은 본원에서 추가로 설명된 하나 이상의 R^Y로 치환될 수 있고; R 및 R^N은 본원에서 추가로 설명된다.

Description

암, 자가면역성 염증 및 중추신경계 장애를 치료하기 위한 비플루오로디옥살란-아미노-벤즈이미다졸 키나제 억제제{BIFLUORODIOXALANE-AMINO-BENZIMIDAZOLE KINASE INHIBITORS FOR THE TREATMENT OF CANCER, AUTOIMMUNE INFLAMMATION AND CNS DISORDERS}

카제인 키나제 1(CK1)은 매우 관련된 구성적으로 활성인 세린/트레오닌 단백질 키나제 과(family)이다(Christenson E, De Maggio AJ and Hockstra MF. (1997). Recent Results Cancer Res. 143, 263-274.; Gross SD and Anderson RA. (1998). Cell Signal 10, 699-711).

CK1은 진핵생물 도처에서 발현된다. 포유동물 과 구성원은 적어도 7개의 포유동물 CK1 동형(isoform)(α, β, γ1, γ2, γ3, δ 및 ε) 및 이들의 다양한 스플라이스 변이체를 포함한다(Fish KJ, Cegielska A, Getman ME, Landes GM and Virshup DM. (1995). J. Biol. Chem. 270, 14875-14883.; Graves PR, Haas DW, Hagedorn CH, De Paoli-Roach AA and Roach PJ.(1993). J. Biol. Chem. 268, 6394-6401.; Rowles J, Slaughter C, Moomaw C, Hsu J and Cobb MH. (1991). Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88, 9548-9552.; Zhai L, Graves PR, Robinson LC, Italiano M, Culbertson MR, Rowles J, Cobb MH, De Paoli-Roach AA and Roach PJ. (1995). J. Biol. Chem. 270, 12717-12724).

이러한 동형은 그 단백질 키나제 도메인 내부에서 높은 정도의 유사성을 공유한다. 예를 들어, CK1δ 및 CK1ε는 이 영역 내에서는 98% 동일하지만(Fish KJ, Cegielska A, Getman ME, Landes GM and Virshup DM. (1995). J. Biol. Chem. 270, 14875-14883.; Graves PR, Haas DW, Hagedorn CH, De Paoli-Roach AA and Roach PJ. (1993). J. Biol. Chem. 268, 6394-6401), C-말단의 비-촉매적 도메인의 존재, 길이 및 주요 구조에서는 상당한 변이를 보인다(Christenson E, De Maggio AJ and Hockstra MF. (1997). Recent Results Cancer Res. 143, 263-274). 이러한 가변적인 C-말단 도메인은 상이한 동형의 기질 특이성을 담당하며(Cegielska A, Gietzen KF, Rivers A and Virshup DM. (1998). J. Biol. Chem. 273, 1357-1364.; Graves PR and Roach PJ. (1995). J. Bio. Chem. 270, 21689-21694.), 다른 단백질, 및/또는 세포하 구조와의 상호작용의 조절에 관련된다.

자가인산화(Cegielska A, Gietzen KF, Rivers A and Virshup DM. (1998). J. Biol. Chem. 273, 1357-1364; 및 아마도 CK1δ의 경우에는 이량체화 Longenecker KL, Roach PJ and Hurley TD.(1998). Acta Crystallogr. D. Biol. Crystallogr. 54, 473-475)는 CK1 활성, 특이성 및 세포하 국소화를 조절하는 추가 메커니즘이다. CK1 과의 공지된 기질의 리스트는 여전히 증가하고 있고 지금까지는 세포골격 단백질, 예컨대 스펙트린, 트로포닌, 미오신 및 타우(tau)를 포함한다(Simkowski KW and Tao M. (1980) J. Biol. Chem. 255, 6456-6461; Singh TJ, Akatsuka A, Blake KR and Huang KP. (1983). Arch. Biochem. Biophys. 220, 615-622.; Singh TJ, Grunke-Iqbal I and Iqbal K. (1995). J. Neurochem. 64, 1420-1423; and transcriptional components such as RNA polymerases I and II, SV40 T antigen and CREM Dahmus ME. (1981). J. Biol. Chem. 256, 11239-11243.; de Groot RP, den Hertog J, Vandenhee de JR, Grois J and Sassone-Corsi P. (1993). EMBO J, 12, 3903-3911.; Graesser FA, Scheidtmann KH, Tuazon PT, Traugh JA and Walter G. (1988). Virology 165, 13-22).

CK1 동형은 여러 방식으로 종양의 발달에 영향을 미칠 수 있다. 위치 지향성(site-directed) 인산화를 통해 p53 및 Mdm2 기능을 조절하는 CK1 동형의 능력, 중심체 및 방추체(spindle) 조절에서의 이들의 기능, Wnt 신호화에서 CK1 동형의 반대 역할 및 아폽토시스 방해에서의 이들의 관련성은 다양한 수준에서 증식성 질병에서 CK1 과 성분의 잠재적인 역할을 입증한다. 상이한 동형은, 특정 종양 유형의 발달 및 진행에서 중요한 역할을 하는 것으로 보인다. 따라서, 약물 개발을 위해 CK1을 표적화하는 데에서의 관심이 최근 5년 이내에 증가되었다. 상이한 신호화 경로에서 카제인 키나제 1(CK1) 과의 역할은 암 발달에 관련된다(Uwe Knippschild et. al., Onkologie 2005; 28:508-514). 카제인 키나제 1(CK1) 과와 관련된 특정 장애에 대한 추가 정보는 문헌(Uwe Knippschild et al., Cellular Signalling 17 (2005) 675-689)에 공개되었다.

Wnt 및 헤지호그(Hedgehog) 경로는 줄기 세포 아이덴티티의 조절, 및 다수 종양 유형의 개시 및 유지에 관련된다. 이러한 경로의 조절이상은 암 줄기 세포 유지에서 중요한 역할을 한다. 카제인 키나제 1ε 및 1δ는 주로 Wnt 및 Hh 경로의 포지티브 조절제이다. 따라서, 카제인 키나제 1ε 및 1δ의 선택적인 억제는 암 줄기 세포의 증식 및 자가 재생을 억제한다.

세린/트레오닌 단백질 키나제의 카제인 키나제 I 과의 다수 성분은 Wnt 및 헤지호그 경로의 개별 조절 요소에 포지티브 또는 네거티브 효과를 미칠 수 있는데, 이것은 요컨대 억제를 야기한다. 카제인 키나제 1 (CK1) 인산화 및 LRP6의 활성화, Ci의 CKI 인산화 및 Ci-슬림브/β-TrCP 결합의 조절에 대한 최근 연구 결과를 포함한 이들의 역할이 고찰되었다("CKI, There's more than one: casein kinase I family members in Wnt and Hedgehog signaling" Price MA, Genes & Dev. 2006. 20: 399-410). Wnt 및 Hh 신호화 경로 둘 모두는 다수의 발달적 패턴화 사건에서 중요하다.

알츠하이머 병은, 미세소관 관련된 단백질 tau의 섬유상 응집체로 구성된 세포내 병변의 출현을 일부 특징으로 하는 노화 관련된 장애이다. 비정상적인 tau 인산화는 tau 응집을 동반하며, 이는 이 질병에서 상류의 병리학적인 사건인 것으로 간주된다. 알츠하이머 병에서 tau 과인산화에 관련된 효소는 카제인 키나제 1 과의 성분을 포함한다(Kannanayakal, TJ et al. Nuerosci Lett. 2008; 432(2): 141-5.)

생체 시계는 우리의 수면 및 활동의 일일 주기를 외부 환경에 연결시킨다. 이러한 생체 시계의 조절이상은 다수의 사람 장애, 예컨대 우울증, 계절성 정동 장애 및 대사 장애에 관련된다. 카제인 키나제 1 엡실론(CK1ε) 및 카제인 키나제 1 델타(CK1δ)는 Ser-Thr 단백질 키나제인데, 이들은 서로 밀접하게 관련되며 중요한 시계 조절제로 작용한다. 이는 그 일주기성 주기를 급격하게 변경시키는 CK1δ 및 CK1ε에서의 돌연변이에 의해서 입증되었다. 따라서, CK1의 억제제는 일주기성 장애를 치료하는데 유용하다(Walten, K. M. et al. JPET 330:430-439, 2009.)

몇몇 공보에 카제인 키나제 억제제가 설명되어 있다: Wager Travis et. al. Abstracts of Papers, 238^th ACS National Meeting, Washington, DC, United States, August 16-20, 2009; Oumata Nassima et al. Journal of Medicinal Chemistry Volume 51 Issue 17 Pages 5229-5242 Journal 2008; Mashhoon N. et al. J Biol Chem 200; 275(26): 20052-60; Pfeifer C. et al. J Med Chem. 2009 Dec 10; 52(23):7618-30.

또한, CK1 δ 및/또는 ε 억제제에 대한 몇몇의 특허 출원이 공개되었다: US 2010/0179154 A1; US 2004/0110808 A1; US 2008/0027124 A1; US 2009/0099237 A1.

몇몇 특허 및 특허 출원에 약리학적 활성을 갖는 어떤 특정의 아실-아미노-벤즈이미다졸이 설명되었다: EP 1 388 341 A1 및 US 2004/0110808 A1; US 7,132,438 B2; WO 2007/064932 A2; DE 27 54 930 A1; US 2003/0144286.

한 양태에서, 본 발명은, 하기 식 (I)의 화합물, 및 추가 구현예에서의 하기 식 (Ia)의 화합물, 및 이들 각각의 생리학적 기능성 유도체 또는 염을 제공하는데, 여기서 A, X, L 및 Y기는 본원에서 이하에 추가로 상술되어 있다.

또 다른 양태에서, 본 발명은, 본원에서 이하에 추가로 상술된 식 (I) 또는 (Ia)의 화합물, 그 생리학적 기능성 유도체 또는 염의 제조 방법을 제공한다.

또 다른 양태에서, 본 발명은, 본원에서 이하에 추가로 상술된 식 (I) 또는 (Ia)의 화합물, 그 생리학적 기능성 유도체 또는 염을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 특정의 의학적 질환의 치료 또는 예방 방법을 제공한다.

또 다른 양태에서, 본 발명은, 본원에서 이하에 추가로 상술된 특정의 의학적 질환의 치료 또는 예방용 약제의 제조에서 식 (I) 또는 (Ia)의 화합물, 그 생리학적 기능성 유도체 또는 염의 용도를 제공한다.

또 다른 양태에서, 본 발명은, 본원에서 이하에 추가로 상술된 특정의 의학적 질환의 치료 또는 예방에 사용되는 식 (I) 또는 (Ia)의 화합물, 그 생리학적 기능성 유도체 또는 염을 제공한다.

또 다른 양태에서, 본 발명은, 식 (I) 또는 (Ia)의 화합물, 그 생리학적 기능성 유도체 또는 염, 및 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제 조성물을 제공한다.

도 1은, 대조인 DMSO와 비교한 실시예 1의 화합물("A"로 표시된 컬럼)에 의한 췌장 암 세포주 PANC1 콜로니의 앵커리지 비의존적 성장의 억제를 보여준다. a) 실시예 1의 화합물은 PANC1 콜로니의 앵커리지 비의존적 성장을 감소시킨다. b) 실시예 1의 화합물은 a)의 콜로니 하위집단을 나타내는 PANC1 마크로콜로니의 억제에 특히 효력이 있다.

하기 일반식 (I)의 화합물, 또는 그 생리학적 기능성 유도체, 용매화물 또는 염이 본원에서 설명된다:

상기 식에서,

R은 독립적으로 H, 할로겐, 알킬, 할로알킬, 할로알콕시, OH, 알콕시, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 헤테로시클릴, -S-R"', -SO-R"', 니트로, -NH₂, -N(R"')₂, -NH(R"'), -NHCO(R"'), -CONH₂, -CONH(R"'), -CO(R"'), -COH, -COO(R"'), -COOH, -SO₂NH₂, -SO₂NH(R"'), -SO₂(R"'), -NH-SO₂(R"'), 및 -CNCOOR"'을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 R기가 알킬, 할로알킬, 할로알콕시, 알콕시, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 또는 헤테로시클릴인 경우에, 상기 R기는 독립적으로 H, 할로겐, 알킬, 할로알킬, 할로알콕시, OH, 알콕시, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 헤테로시클릴, -S-알킬, -S-할로알킬, 니트로, -NH₂, -N(알킬)₂, -NH(알킬), -NHCO(알킬), -CONH₂, -CONH(알킬), -CO(알킬), -COH, -COO(알킬), -COOH, -SO₂NH₂, -SO₂NH(알킬), -SO₂(알킬), -NH-SO₂(알킬), 및 -CN을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기 R"로 치환될 수 있고, 여기서 R"'은 독립적으로 H, 알킬, 할로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬 및 헤테로시클릴을 포함하는 군으로부터 선택되고;

R^N은 독립적으로 H, 알킬, 할로알킬, OH, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 헤테로시클릴, -SO-R"', -NH₂, -N(R"')₂, -NH(R"'), -NHCO(R"'), -CONH₂, -CONH(R"'), -CO(R"'), -COH, -COO(R"'), -COOH, -SO₂NH₂, -SO₂NH(R"'), -SO₂(R"'), 및 -NH-SO₂(R"')을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 R^N기가 알킬, 할로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 또는 헤테로시클릴인 경우에, 상기 기 R^N은 상기 정의된 하나 이상의 치환기 R"'로 치환될 수 있고, 여기서 R"'은 상기 정의된 바와 같고;

A는 독립적으로 결합, 상기 정의된 하나 이상의 치환기 R"로 임의로 치환된 알킬, 상기 정의된 하나 이상의 치환기 R"로 임의로 치환된 알콕시, *-N(R"')CO-, *-CON(R"')-, *-N(R"')CON(R"')-, -S-, -SO-, *-N(R"')-, *-N(R"')CO-, *-CON(R"')-, -CO-, *-COO-, *-OOC-, *-SO₂N(R"')-, -SO₂, 및 *-N(R"')-SO₂-을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 R"'은 상기 정의된 바와 같고, 여기서 *는 X에 대한 부착 지점을 특정하고;

X는 독립적으로 아릴, 시클로알킬, 아르알킬, 헤테로시클릴 및 헤테로아릴을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 기 X는 독립적으로 할로겐, 알킬, 할로알킬, 할로알콕시, OH, 알콕시, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 헤테로시클릴, -S-(R"'), 니트로, -NH₂, -N(R"')₂, -NH(R"'), -NHCO(R"'), -CONH₂, -CONH(R"'), -CO(R"'), -COH, -COO(R"'), -COOH, -SO₂NH₂, -SO₂NH(R"'), -SO₂(R"'), -NH-SO₂(R"'), 시클로알킬, 및 -CN을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 R^X로 치환될 수 있고, 여기서 R"'은 상기 정의된 바와 같고;

L은 독립적으로 *-N(R^N)CO-, *-CON(R^N)-, *-N(R^N)-, *-C=N(R^N)-, *-N(R^N)-알킬-, *-알킬-N(R^N)-, *-N(R^N)CON(R^N)-, *-CO-, *-SO₂-, 알킬, *-알킬-O-알킬-, *-NCO-CH=CH-, *-CH=CH-CONH-, *-SO₂N(R^N)-, *-N(R^N)SO₂-, 및 헤테로시클릴을 포함하는 군으로부터 선택된 연결 기 또는 결합이고, 여기서 *는 X에 대한 부착 지점을 특정하고, 여기서 R^N은 상기 정의된 바와 같고;

Y는 독립적으로 H, 알킬, 아릴, 아르알킬, 시클로알킬, 헤테로시클릴 및 헤테로아릴을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 Y기는 독립적으로 할로겐, 알킬, 할로알킬, 할로알콕시, OH, 알콕시, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 헤테로시클릴, -S-(R"'), 니트로, -NH₂, -N(R"')₂, -NH(R"'), -NHCO(R"'), -CONH₂, -CONH(R"'), -CO(R"'), -COH, -COO(R"'), -COOH, -SO₂NH₂, -SO₂NH(R"'), -SO₂(R"'), -NH-SO₂(R"'), 시클로알킬, 및 -CN을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 R^Y로 임의로 치환될 수 있고, 여기서 R"'은 상기 정의된 바와 같다.

본 발명의 구현예가 이하에 열거되어 있다:

1. 하기 일반식 (I)의 화합물, 또는 그 생리학적 기능성 유도체, 용매화물 또는 염:

상기 식에서,

R은 독립적으로 H, 할로겐, C_1-6-알킬, C_1-6-할로알킬, C_1-6-할로알콕시, OH, C_1-6-알콕시, -S-R"', -SO-R"', 니트로, -N(R"')₂, -NH(R"'), -NHCO(R"'), -CONH₂, -CONH(R"'), -CO(R"'), -COH, -COO(R"'), -COOH, -SO₂NH₂, -SO₂NH(R"'), -SO₂(R"'), 및 -NH-SO₂(R"')을 포함하는 군으로부터 선택되고,

여기서 상기 R기가 C₁ _-6-알킬, C₁ _-6-할로알킬, C₁ _-6-할로알콕시, 또는 C₁ _-6-알콕시인 경우에, 상기 R기는 독립적으로 H, 할로겐, OH, 니트로, -NH₂, -N(C₁ _-6-알킬)₂, -NH(C_1-6-알킬), -NHCO(C₁ _-6-알킬), -CONH₂, -CONH(C₁ _-6-알킬), -CO(C₁ _-6-알킬), -COH, -COO(C₁ _-6-알킬), -COOH, 및 -CN을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기 R"로 치환될 수 있고,

여기서 R"'은 독립적으로 H, C_1-6-알킬, C_1-6-할로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬 및 헤테로시클릴을 포함하는 군으로부터 선택되고;

R^N은 독립적으로 H, 알킬, 할로알킬, OH, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 헤테로시클릴, -SO-R"', -NH₂, -N(R"')₂, -NH(R"'), -NHCO(R"'), -CONH₂, -CONH(R"'), -CO(R"'), -COH, -COO(R"'), -COOH, -SO₂NH₂, -SO₂NH(R"'), -SO₂(R"'), 및 -NH-SO₂(R"')을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 R"'은 상기 정의된 바와 같고,

여기서 상기 R^N기가 알킬, 할로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 또는 헤테로시클릴인 경우에, 상기 R^N기는 상기 정의된 하나 이상의 치환기 R"'로 치환될 수 있고;

A는 독립적으로 *-N(R^a)CO-, *-CON(R^a)-, *-SO₂N(R^a)-, 및 *-N(R^a)-SO₂-로부터 선택되고, 여기서 R^a는 H 및 C_1-4-알킬로부터 선택되고, 여기서 *는 X에 대한 부착 지점을 특정하고;

X는 독립적으로 아릴, 시클로알킬, 아르알킬, 헤테로시클릴 및 헤테로아릴을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 X기는 독립적으로 할로겐, C₁ _-6-알킬, C₁ _-6-할로알킬, C₁ _-6-할로알콕시, OH, C₁ _-6-알콕시, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 헤테로시클릴, -S-C₁ _-6-알킬, -S-C₁ _-6-할로알킬, 니트로, -NH₂, -N(C₁ _-6-알킬)₂, -NH(C_1-6-알킬), -NHCO(C₁ _-6-알킬), -CONH₂, -CONH(C₁ _-6-알킬), -CO(C₁ _-6-알킬), -COH, -COO(C_1-6-알킬), -COOH, -SO₂NH₂, -SO₂NH(C_1-6-알킬), -SO₂(C_1-6-알킬), -NH-SO₂(C_1-6-알킬), C_3-6-시클로알킬, 및 -CN을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 R^X로 치환될 수 있고;

L은 독립적으로 *-NHCO-, *-CONH-, *-NH-, *-N(C_1-4-알킬)-, *-C=N(C_1-4-알킬)-, *-NH-C_1-4-알킬-, *-C_1-4-알킬-NH-, *-NHCONH-, *-CO-, *-SO₂-, C_1-4-알킬, *-C_1-2-알킬-O-C_1-2-알킬-, *-NHCO-CH=CH-, *-CH=CH-CONH-, *-SO₂NH-, *-NHSO₂-, 및 피리디닐을 포함하는 군으로부터 선택된 연결 기 또는 결합이고, 여기서 *는 X에 대한 부착 지점을 특정하고;

Y는 독립적으로 H, 알킬, 아릴, 아르알킬, 시클로알킬, 헤테로시클릴 및 헤테로아릴을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 Y기는 독립적으로 할로겐, C_1-6-알킬, C₁ _-6-할로알킬, C₁ _-6-할로알콕시, OH, C₁ _-6-알콕시, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 헤테로시클릴, -S-C_1-6-알킬, -S-C_1-6-할로알킬, 니트로, -NH₂, -N(C_1-6-알킬)₂, -NH(C_1-6-알킬), -NHCO(C_1-6-알킬), -CONH₂, -CONH(C_1-6-알킬), -CO(C_1-6-알킬), -COH, -COO(C_1-6-알킬), -COOH, -SO₂NH₂, -SO₂NH(C_1-6-알킬), -SO₂(C_1-6-알킬), -NH-SO₂(C_1-6-알킬), C_1-6-알킬-헤테로시클릴, 시클로알킬 및 -CN을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 R^Y로 임의로 치환될 수 있다.

2. 하기 일반식 (Ia)의 화합물인, 본 발명에 따른, 구체적으로 상기 항목 1에 따른 화합물, 또는 그 생리학적 기능성 유도체, 용매화물 또는 염:

상기 식에서,

X는 독립적으로 아릴, 시클로알킬, 아르알킬, 헤테로시클릴 및 헤테로아릴을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 X기는 독립적으로 할로겐, C₁ _-6-알킬, C₁ _-6-할로알킬, C₁ _-6-할로알콕시, OH, C₁ _-6-알콕시, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 헤테로시클릴, -S-C_1-6-알킬, -S-C_1-6-할로알킬, 니트로, -NH₂, -N(C_1-6-알킬)₂, -NH(C_1-6-알킬), -NHCO(C_1-6-알킬), -CONH₂, -CONH(C_1-6-알킬), -CO(C_1-6-알킬), -COH, -COO(C_1-6-알킬), -COOH, -SO₂NH₂, -SO₂NH(C_1-6-알킬), -SO₂(C_1-6-알킬), -NH-SO₂(C_1-6-알킬), C_3-6-시클로알킬, 및 -CN을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 R^X로 치환될 수 있고;

L은 독립적으로 *-NHCO-, *-CONH-, *-NH-, *-N(C_1-4-알킬)-, *-C=N(C_1-4-알킬)-, *-NH-C₁ _-4-알킬-, *-C₁ _-4-알킬-NH-, *-NHCONH-, *-CO-, *-SO₂-, C₁ _-4-알킬, *-C₁ _-2-알킬-O-C₁ _-2-알킬-, *-NHCO-CH=CH-, *-CH=CH-CONH-, *-SO₂NH-, *-NHSO₂-, 및 피리디닐을 포함하는 군으로부터 선택된 연결 기 또는 결합이고, 여기서 *는 X에 대한 부착 지점을 특정하고;

Y는 독립적으로 H, 알킬, 아릴, 아르알킬, 시클로알킬, 헤테로시클릴 및 헤테로아릴을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 Y기는 독립적으로 할로겐, C_1-6-알킬, C₁ _-6-할로알킬, C₁ _-6-할로알콕시, OH, C₁ _-6-알콕시, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 헤테로시클릴, -S-C₁ _-6-알킬, -S-C₁ _-6-할로알킬, 니트로, -NH₂, -N(C₁ _-6-알킬)₂, -NH(C_1-6-알킬), -NHCO(C_1-6-알킬), -CONH₂, -CONH(C_1-6-알킬), -CO(C_1-6-알킬), -COH, -COO(C_1-6-알킬), -COOH, -SO₂NH₂, -SO₂NH(C_1-6-알킬), -SO₂(C_1-6-알킬), -NH-SO₂(C_1-6-알킬), C_1-6-알킬-헤테로시클릴, 시클로알킬 및 -CN을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 R^Y로 임의로 치환될 수 있다.

3. X가 독립적으로 아릴, 시클로알킬, 헤테로시클릴 및 헤테로아릴을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 X기는 독립적으로 F, Cl, Br, I, C₁ _-6-알킬, C₁ _-6-할로알킬, C₁ _-6-할로알콕시, OH, C₁ _-6-알콕시, 니트로, -NH₂, -N(C₁ _-6-알킬)₂, -NH(C₁ _-6-알킬), -NHCO(C_1-6-알킬), -CONH₂, -CONH(C_1-6-알킬), -SO₂NH₂, -SO₂NH(C_1-6-알킬), -SO₂(C_1-6-알킬), C_3-6-시클로알킬, -NH-SO₂(C_1-6-알킬), -COO-C_1-6-알킬, 및 -CN을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 R^X로 치환될 수 있고;

L이 독립적으로 *-NHCO-, *-NH-, *-NHCH₂-, *-NHCONH-, *-NHCO-CH=CH-, *-NHSO₂-, *-SO₂-, 및 피리디닐을 포함하는 군으로부터 선택된 연결 기 또는 결합이고, 여기서 *는 X에 대한 부착 지점을 특정하고;

Y가 독립적으로 H, 아릴, 시클로알킬, 헤테로시클릴 및 헤테로아릴을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 Y기는 독립적으로 F, Cl, Br, C₁ _-6-알킬, C₁ _-6-할로알킬, C₁ _-6-할로알콕시, C₁ _-6-알콕시, C₁ _-6-알킬-모르폴리닐, 및 니트로를 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 R^Y로 임의로 치환될 수 있는,

본 발명에 따른, 구체적으로 상기 항목 1 또는 2에 따른 화합물, 또는 그 생리학적 기능성 유도체, 용매화물 또는 염.

4. X가 독립적으로 아릴, 아르알킬, 시클로알킬, 헤테로시클릴 및 헤테로아릴을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 X기는 독립적으로 F, Cl, Br, I, C_1-6-알킬, C₁ _-6-할로알킬, C₁ _-6-할로알콕시, OH, C₁ _-6-알콕시, 니트로, -NH₂, -N(C₁ _-6-알킬)₂, -NH(C₁ _-6-알킬), -NHCO(C₁ _-6-알킬), -CONH₂, -CONH(C₁ _-6-알킬), -SO₂NH₂, -SO₂NH(C_1-6-알킬), -SO₂(C₁ _-6-알킬), C₃ _-6-시클로알킬, -NH-SO₂(C₁ _-6-알킬), -COO-C₁ _-6-알킬, -COOH, 및 -CN을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 R^X로 치환될 수 있고;

본 발명에 따른, 구체적으로 상기 항목 1 내지 3 중 어느 하나에 따른 화합물, 또는 그 생리학적 기능성 유도체, 용매화물 또는 염.

5. X가 독립적으로 1,2,3-티아디아졸릴, 1,2,4-티아디아졸릴, 1H-1,2,3-트리아졸릴, 1H-1,2,4-트리아졸릴, 1H-피라졸릴, 1H-피롤릴, 페닐, 벤조[b]티오페닐, 시클로헥실, 푸릴, 이속사졸릴, 옥사졸릴, 이미다졸릴, 1H-피라졸릴, 피라지닐, 피리딜, 퀴놀리닐, 1-(나프탈렌-2-일)에틸, 티아졸릴 및 티오페닐을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 X기는 독립적으로 F, Cl, Br, 메틸, tert-부틸, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 디플루오로메톡시, OH, 아세틸, 메틸카르바모일, 메톡시, 니트로, -NH₂, -NEt₂, -NMe₂, -NHEt, -NHCOCH₃, -CONH₂, -SO₂NH₂, -SO₂Me, -NH-SO₂Me, 및 -CN을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 R^X로 치환될 수 있고;

L이 독립적으로 *-NHCO-, *-NH-, *-NHCH₂-, *-NHCONH-, *-NHCO-CH=CH-, *-피리디닐-, -SO₂-, 및 *-NHSO₂-을 포함하는 군으로부터 선택된 연결 기 또는 결합이고, 여기서 *는 X에 대한 부착 지점을 특정하고;

Y가 독립적으로 H, 페닐, 푸릴, 티오페닐, 피리딜, 피리미딜, 2,3-디히드로벤조[b][1,4]디옥시닐, 2,3-디히드로벤조푸라닐, 벤조[d][1,3]디옥솔릴, 티에노[3,2-d]피리미디닐, 2-옥소-2,3-디히드로벤조이미다졸릴, 피롤리디닐, 테트라졸릴, 피페리디닐, 피라졸릴, 1,2,4-옥사디아졸릴, 1,2,3-티아디아졸릴, 피롤릴, 이미다졸릴, 이속사졸릴, 티아졸릴, 및 모르폴리닐을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 Y기는 독립적으로 F, Cl, 메틸, 이소프로필, tert-부틸, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 메톡시, 메틸카르바모일, 시클로프로필, 2-모르폴리노에틸, 및 니트로를 포함하는 군으로부터 선택된 하나 또는 두 개의 R^Y로 치환될 수 있는,

본 발명에 따른, 구체적으로 상기 항목 1 내지 4 중 어느 하나에 따른 화합물, 또는 그 생리학적 기능성 유도체, 용매화물 또는 염.

6. X가 독립적으로 1,2,3-티아디아졸릴, 1,2,4-티아디아졸릴, 1H-1,2,3-트리아졸릴, 1H-1,2,4-트리아졸릴, 1H-피라졸릴, 1H-피롤릴, 페닐, 벤조[b]티오페닐, 시클로헥실, 푸릴, 이속사졸릴, 옥사졸릴, 이미다졸릴, 1H-피라졸릴, 피라지닐, 피리딜, 퀴놀리닐, 1-(나프탈렌-2-일)에틸, 티아졸릴, 벤질 및 티오페닐을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 X기는 독립적으로 F, Cl, Br, 메틸, tert-부틸, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 디플루오로메톡시, OH, 아세틸, 메틸카르바모일, 메톡시, 니트로, -NH₂, -NEt₂, -NMe₂, -NHEt, -NHCOCH₃, -CONH₂, -SO₂NH₂, -SO₂Me, -NH-SO₂Me, -COOH, 및 -CN을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 R^X로 치환될 수 있고;

L이 독립적으로 *-NHCO-, *-NH-, *-NHCH₂-, *-NHCONH-, *-NHCO-CH=CH-, *-피리디닐-, -SO₂-, 및 *-NHSO₂-를 포함하는 군으로부터 선택된 연결 기 또는 결합이고, 여기서 *는 X에 대한 부착 지점을 특정하고;

Y가 독립적으로 H, 페닐, 푸릴, 티오페닐, 피리딜, 피리미딜, 2,3-디히드로벤조[b][1,4]디옥시닐, 2,3-디히드로벤조푸라닐, 벤조[d][1,3]디옥솔릴, 티에노[3,2-d]피리미디닐, 2-옥소-2,3-디히드로벤조이미다졸릴, 피롤리디닐, 테트라졸릴, 피페리디닐, 피라졸릴, 1,2,4-옥사디아졸릴, 1,2,3-티아디아졸릴, 피롤릴, 이미다졸릴, 이속사졸릴, 티아졸릴, 티오모르폴리닐, 및 모르폴리닐을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 Y기는 독립적으로 F, Cl, 메틸, 이소프로필, tert-부틸, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 메톡시, 메틸카르바모일, 시클로프로필, 2-모르폴리노에틸, 및 니트로를 포함하는 군으로부터 선택된 하나 또는 두 개의 R^Y로 치환될 수 있는,

본 발명에 따른, 구체적으로 상기 항목 1 내지 5 중 어느 하나에 따른 화합물, 또는 그 생리학적 기능성 유도체, 용매화물 또는 염.

7. X가 독립적으로

를 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 *는 중심 모이어티에 대한 부착 지점을 특정하고, #는 L에 대한 부착 지점을 특정하고, 여기서 X기는 하나 이상의 R^X로 치환될 수 있고;

Y가 독립적으로 H이거나

를 포함하는 군으로부터 선택되고,

여기서 *는 L에 대한 부착 지점을 특정하고, 여기서 Y기는 하나 이상의 R^Y로 치환될 수 있거나;

여기서 X는

를 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 *는 중심 모이어티에 대한 부착 지점을 특정하고, 여기서 L은 결합이고, Y는 H이고, 여기서 X기는 하나 이상의 R^X로 치환될 수 있고;

여기서 각각의 R^Y는 독립적으로 F, Cl, 메틸, 이소프로필, tert-부틸, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 메톡시, 메틸카르바모일, 시클로프로필, 2-모르폴리노에틸, 및 니트로를 포함하는 군으로부터 선택되고;

여기서 각각의 R^X는 독립적으로 F, Cl, Br, 메틸, tert-부틸, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 디플루오로메톡시, OH, 아세틸, 메틸카르바모일, 메톡시, 니트로, -NH₂, -NEt₂, -NMe₂, -NHEt, -NHCOCH₃, -CONH₂, -SO₂NH₂, -SO₂Me, -NH-SO₂Me, 및 -CN을 포함하는 군으로부터 선택되는,

본 발명에 따른, 구체적으로 상기 항목 1 내지 6 중 어느 하나에 따른 화합물, 또는 그 생리학적 기능성 유도체, 용매화물 또는 염.

8. X가 독립적으로

를 포함하는 군으로부터 선택되고,

여기서 *는 중심 모이어티에 대한 부착 지점을 특정하고, #는 L에 대한 부착 지점을 특정하고, 여기서 X기는 하나 이상의 R^X로 치환될 수 있고;

L이 독립적으로, *-NHCO-, *-NH-, *-NHCH₂-, *-NHCONH-, *-NHCO-CH=CH-, *-피리디닐-, -SO₂-, 및 *-NHSO₂-를 포함하는 군으로부터 선택된 연결 기 또는 결합이고, 여기서 *는 X에 대한 부착 지점을 특정하고;

Y가 독립적으로 H이거나

를 포함하는 군으로부터 선택되고,

여기서 X는

를 포함하는 군으로부터 선택되고,

여기서 *는 중심 모이어티에 대한 부착 지점을 특정하고, 여기서 L은 결합이고, Y는 H이고, 여기서 X기는 하나 이상의 R^X로 치환될 수 있고;

여기서 각각의 R^X는 독립적으로 F, Cl, Br, 메틸, tert-부틸, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 디플루오로메톡시, OH, 아세틸, 메틸카르바모일, 메톡시, 니트로, -NH₂, -NEt₂, -NMe₂, -NHEt, -NHCOCH₃, -CONH₂, -SO₂NH₂, -SO₂Me, -NH-SO₂Me, -COOH 및 -CN을 포함하는 군으로부터 선택되는,

본 발명에 따른, 구체적으로 상기 항목 1 내지 7 중 어느 하나에 따른 화합물, 또는 그 생리학적 기능성 유도체, 용매화물 또는 염.

본 발명의 특정의 실시양태에서, Y는 본원에서 정의된 하나 이상의 R^Y로 임의로 치환된 페닐 기, 보다 구체적으로 본원에서 정의된 하나 이상의 R^Y로 치환된 페닐 기이고, 여기서 치환기 R^Y의 적어도 하나는 페닐 기 위치의 메타에 위치하고, 여기서 페닐 기의 오르쏘 위치는 H이고, 여기서 상기 오르토 및 메타 위치는 각각 L에 대한 부착 지점에 관련되어 있거나, L이 결합인 경우에는 X에 대한 부착 지점이다.

본 발명의 특정의 구현예에서, R^X는 각각 독립적으로 알킬, 알킬설포닐, 할로겐, 할로알킬, 히드록시, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 벤질아미노, 니트로, 알콕시, 할로알콕시 및 시아노를 포함하는 군으로부터 선택되고, 보다 구체적으로는 메틸, 메틸설포닐, 불소, 염소, 브롬, 트리플루오로메틸, 히드록실, 아미노, 디메틸아미노, 에틸아미노, 디에틸아미노, 벤질아미노, 니트로, 메톡시, 트리플루오로메톡시 및 시아노를 포함하는 군으로부터 선택된다.

본 발명의 특정의 구현예에서, L은 독립적으로 결합, 또는 *-NHCO-, *-NH SO₂-, *-SO₂-, *-CONH-, *-NH-, -NHCONH-, 및 *-SO₂NH-, 구체적으로는 *-NHCO-, *-NH, *-NHCONH-, 및 *-NHSO₂-를 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 *는 X에 대한 부착 지점을 특정한다. 보다 구체적으로, L은 독립적으로 *-NHCO이고, 여기서 *는 X에 대한 부착 지점을 특정한다.

본 발명의 특정의 구현예에서, R^Y는 각각 독립적으로 알킬, 할로겐, 할로알킬, 알콕시, 할로알콕시 및 니트로를 포함하는 군으로부터, 보다 구체적으로는 메틸, 염소, 플루오린, 메톡시, 트리플루오로메톡시 및 니트로를 포함하는 군으로부터 선택된다.

본 발명의 구체적인 화합물은 1μM 또는 그보다 작은, 보다 구체적으로는 100 nM 또는 그보다 작은, 암 세포 성장 억제에 대한 IC₅₀을 갖는 것들이다. 상기 IC₅₀은 본원에서 하기 예시 부분("9. 암 세포주의 판넬 상에서 증식 억제의 측정; 증식 검정")에서 설명된 바와 같이 구체적으로 측정되며, 이러한 문맥에서 구체적인 암 유형은 본원에서 설명된 것들이다.

또한, 본 발명의 구체적인 화합물은 1μM 또는 그보다 작은, 훨씬 보다 구체적으로는 200 nM 또는 그보다 작은, CK1 델타 및/또는 엡실론 억제에 대한 IC₅₀을 갖는 것들이다. 상기 IC₅₀은 본원에서 하기 예시 부분("8. 억제 능력의 측정; 키나제 검정" - 표 1 및 2에 나타난 데이터)에서 설명된 바와 같이 구체적으로 측정된다.

9. 실시예 부분에서 열거된 화합물 1 내지 149 중 하나로부터 선택되는, 본 발명에 따른, 구체적으로 상기 항목 1 내지 8 중 어느 하나에 따른 화합물, 또는 그 생리학적 기능성 유도체, 용매화물 또는 염.

10. 실시예 부분에서 열거된 화합물 1 내지 149 또는 1B 내지 26B 중 하나로부터 선택되는, 본 발명에 따른, 구체적으로 상기 항목 1 내지 9 중 어느 하나에 따른 화합물, 또는 그 생리학적 기능성 유도체, 용매화물 또는 염.

11. 실시예 부분에서 열거된 화합물 1, 2, 3, 11, 17, 18, 19, 20, 21, 26, 29, 30, 31, 33, 37, 38, 41, , 48, 49, 51, 52, 56, 57, 60, 62, 65, 66, 69, 70, 75, 76, 77, 78, 80, 81, 82, 83, 87, 88, 91, 92, 94, 100, 101, 102, 104, 105, 108, 111, 112, 113, 114, 116, 117, 118, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 128, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 144, 147, 148, 및 149 중 하나로부터 선택되는, 본 발명에 따른, 구체적으로 상기 항목 1 내지 10 중 어느 하나에 따른 화합물, 또는 그 생리학적 기능성 유도체, 용매화물 또는 염: .

12. 실시예 부분에서 열거된 하기 화합물 중 하나로부터 선택되는, 본 발명에 따른, 구체적으로 상기 항목 1 내지 11 중 어느 하나에 따른 화합물, 또는 그 생리학적 기능성 유도체, 용매화물 또는 염: 1, 2, 3, 11, 17, 18, 19, 20, 21, 26, 29, 30, 31, 33, 37, 38, 41, , 48, 49, 51, 52, 56, 57, 60, 62, 65, 66, 69, 70, 75, 76, 77, 78, 80, 81, 82, 83, 87, 88, 91, 92, 94, 100, 101, 102, 104, 105, 108, 111, 112, 113, 114, 116, 117, 118, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 128, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 144, 147, 148, 및 149, 1B, 2B, 3B, 4B, 5B, 6B, 7B, 8B, 9B, 10B, 11B, 12B, 13B, 14B, 15B, 16B, 17B, 22B, 23B, 및 25B.

13. 약제로 사용되는, 본 발명에 따른, 구체적으로 상기 항목 1 내지 12 중 어느 하나에 따른 화합물, 또는 그 생리학적 기능성 유도체, 용매화물 또는 염.

14. 자가면역염증성 장애를 포함하는 군으로부터 선택된, 보다 구체적으로는 염증성 장 질병, 다발성 경화증, 류마티스 관절염, 자가면역 포도막염, CNS 장애를 포함하는 군으로부터 선택된, 구체적으로는 알츠하이머 병, 파킨슨 병, 다운 증후군, 수면 장애, 구체적으로는 생체 시계 메커니즘과 관련된 수면 장애, 및 암을 포함하는 증식성 질병을 포함하는 군으로부터 선택된 의학적 질환의 치료 또는 예방에 사용되는, 본 발명에 따른, 구체적으로 상기 항목 1 내지 12 중 어느 하나에 따른 화합물, 또는 그 생리학적 기능성 유도체, 용매화물 또는 염.

15. 본 발명에 따른, 구체적으로 상기 항목 1 내지 12 중 어느 하나에 따른 화합물, 또는 그 생리학적 기능성 유도체, 용매화물 또는 염, 및 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는, 약제 조성물.

또한, 본 발명은, 유효량의 본 발명에 따른 화합물, 또는 그 생리학적 기능성 유도체, 용매화물 또는 염을, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 본원에서 특정된 의학적 질환의 치료 또는 예방 방법에 관한 것이다.

또한, 본 발명은, 본원에서 특정된 의학적 질환의 치료 또는 예방에서 본 발명에 따른 화합물, 또는 그 생리학적 기능성 유도체, 용매화물 또는 염의 용도에 관한 것이다.

16. 유효량의 본 발명에 따른, 구체적으로 상기 항목 1 내지 12 중 어느 하나에 따른 화합물, 또는 그 생리학적 기능성 유도체, 용매화물 또는 염을, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 자가면역 염증성 장애, CNS 장애, 수면 장애, 및 암을 포함하는 증식성 질병을 포함하는 군으로부터 선택된 의학적 질환의 치료 또는 예방 방법.

17. 자가면역 염증성 장애, CNS 장애, 수면 장애, 및 암을 포함하는 증식성 질병을 포함하는 군으로부터 선택된 의학적 질환의 치료 또는 예방용 약제의 제조에서, 본 발명에 따른, 구체적으로 상기 항목 1 내지 12 중 어느 하나에 따른 화합물, 또는 그 생리학적 기능성 유도체, 용매화물 또는 염의 용도.

18. 하기 식 IV의 화합물을 하기 식 II의 화합물과 커플링시키는 단계를 포함하는, A가 -CONH- 또는 -NHCO-인 본 발명에 따른, 구체적으로 상기 항목 1 내지 12 중 어느 하나에 따른 화합물의 제조 방법:

상기 식에서,

Y, L 및 X는 상기 정의된 바와 같고,

R¹은 NH₂이고 R²는 COOH 또는 COOCl이거나, R²는 NH₂이고 R¹은 COOH 또는 COOCl이고, 구체적으로 R¹은 NH₂이고 R²는 COOH 또는 COOCl이다.

본 발명의 화합물은 카제인 키나제 델타 및/또는 엡실론과 상호작용하는데, 이는 카제인 키나제 델타 및/또는 엡실론의 기능이 역할을 하는 의학적 질환의 예방 및/또는 치료에서 그 사용가능성을 시사한다.

구체적으로, 본 발명에 따른 화합물의 디플루오로메틸렌디옥시 기는 예상치않게 카제인 키나제 델타의 글루타밀 52 및 티로신 56의 측쇄 잔기와 2 분자 상호작용을 보여준다. 중심 모이어티의 벤즈이미다졸 헤테로사이클의 수소 결합 망상구조에 추가한 그러한 추가적인 결합 상호작용은 선행 기술에는 공지되어 있지 않았고, 본 발명에 따른 화합물의 바람직한 억제 작용에 기여한다.

이러한 예상치않은 발견은, 벤졸 고리 상에 디플루오로메틸렌디옥소 잔기를 함유하는 아실 아미노-벤즈이미다졸 유도체가 카제인 키나제 델타에 대한 특정 상호작용을 가짐을 보여준다.

하기 정의는 본 발명의 문맥에서 사용된 특정 용어를 추가로 정의하기 위한 것이다. 본원에서 사용된 특정 용어가 구체적으로 정의되지 않더라도, 이 용어는 불명확한 것으로 간주되지 않아야 한다. 오히려, 그러한 용어는 본 발명이 속하는 기술 분야에서, 구체적으로 유기 화학, 약제 과학 및 의학 분야에서의 숙련된 기술자에 의해 일반적으로 이해된 그 의미에 따라서 해석되어야 한다.

본원에서 사용된 알킬 기는 알카닐, 알케닐, 알키닐을 포함하는 것으로 이해되어야 하는데, 여기서 알카닐은 완전 포화된 탄화수소 사슬을 의미하고, 알케닐은 적어도 하나의 탄소-탄소 이중 결합을 포함하는 탄화수소 사슬을 의미하고, 알키닐은 적어도 하나의 탄소-탄소 삼중 결합을 포함하는 탄화수소 사슬(예컨대, 하나 이상의 탄소-탄소 이중 결합 및 적어도 하나의 탄소-탄소 삼중 결합을 포함하는 탄화수소 사슬)을 의미한다. 본 발명의 문맥에서, 달리 언급되지 않으면 알카닐 기는 구체적으로 선형 또는 분지형 C₁-C₆-알카닐, 구체적으로 선형 또는 분지형 C₁-C₅-알카닐을 지칭하고; 달리 언급되지 않으면 알케닐 기는 구체적으로 선형 또는 분지형 C₂-C₆-알케닐을 지칭하고; 달리 언급되지 않으면 알키닐 기는 구체적으로 선형 또는 분지형 C₂-C₆-알키닐 기를 지칭한다. 구체적인 구현예에서, 알킬 기는 -CH₃, -C₂H₅, -CH=CH₂, -C≡CH, -C₃H₇, -CH(CH₃)₂, -CH₂-CH=CH₂, -C(CH₃)=CH₂, -CH=CH-CH₃, -C≡C-CH₃, -CH₂-C≡CH, -C₄H₉, -CH₂-CH(CH₃)₂, -CH(CH₃)-C₂H₅, -C(CH₃)₃, -C₅H₁₁, -C₆H₁₃, -C(R')₃, -C₂(R')₅, -CH₂-C(R')₃, -C₃(R')₇, -C₂H₄-C(R')₃, -C₂H₄-CH=CH₂, -CH=CH-C₂H₅, -CH=C(CH₃)₂, -CH₂-CH=CH-CH₃, -CH=CH-CH=CH₂, -C₂H₄-C≡CH, -C≡C-C₂H₅, -CH₂-C≡C-CH₃, -C≡C-CH=CH₂, -CH=CH-C≡CH, -C≡C-C≡CH, -C₂H₄-CH(CH₃)₂, -CH(CH₃)-C₃H₇, -CH₂-CH(CH₃)-C₂H₅, -CH(CH₃)-CH(CH₃)₂, -C(CH₃)₂-C₂H₅, -CH₂-C(CH₃)₃, -C₃H₆-CH=CH₂, -CH=CH-C₃H₇, -C₂H₄-CH=CH-CH₃, -CH₂-CH=CH-C₂H₅, -CH₂-CH=CH-CH=CH₂, -CH=CH-CH=CH-CH₃, -CH=CH-CH₂-CH=CH₂, -C(CH₃)=CH-CH=CH₂, -CH=C(CH₃)-CH=CH₂, -CH=CH-C(CH₃)=CH₂, -CH₂-CH=C(CH₃)₂, C(CH₃)=C(CH₃)₂, -C₃H₆-C≡CH, -C≡C-C₃H₇, -C₂H₄-C≡C-CH₃, -CH₂-C≡C-C₂H₅, -CH₂-C≡C-CH=CH₂, -CH₂-CH=CH-C≡CH, -CH₂-C≡C-C≡CH, -C≡C-CH=C-H-CH₃, -CH=CH-C≡C-CH₃, -C≡C-C≡C-CH₃, -C≡C-CH₂-CH=CH₂, -CH=CH-CH₂-C≡CH, -C≡C-CH₂-C≡CH, -C(CH₃)=CH-CH=CH₂, -CH=C(CH₃)-CH=CH₂, -CH=CH-C(CH₃)=CH₂, -C(CH₃)=CH-C≡CH, -CH=C(CH₃)-C≡CH, -C≡C-C(CH₃)=CH₂, -C₃H₆-CH(CH₃)₂, -C₂H₄-CH(CH₃)-C₂H₅, -CH(CH₃)-C₄H₉, -CH₂-CH(CH₃)-C₃H₇, -CH(CH₃)-CH₂-CH(CH₃)₂, -CH(CH₃)-CH(CH₃)-C₂H₅, -CH₂-CH(CH₃)-CH(CH₃)₂, -CH₂-C(CH₃)₂-C₂H₅, -C(CH₃)₂-C₃H₇, -C(CH₃)₂-CH(CH₃)₂, -C₂H₄-C(CH₃)₃, -CH(CH₃)-C(CH₃)₃, -C₄H₈-CH=CH₂, -CH=CH-C₄H₉, -C₃H₆-CH=CH-CH₃, -CH₂-CH=CH-C₃H₇, -C₂H₄-CH=CH-C₂H₅, -CH₂-C(CH₃)=C(CH₃)₂, -C₂H₄-CH=C(CH₃)₂, -C₄H₈-C≡CH, -C≡C-C₄H₉, -C₃H₆-C≡C-CH₃, -CH₂-C≡C-C₃H₇, 및 -C₂H₄-C≡C-C₂H₅를 포함하는 군으로부터 선택된다. 상기 정의된 알킬, 알카닐, 알케닐, 및 알키닐 기, 예컨대 예 및 그 구체적인 구현예로 열거된 기는 하나 이상의 치환기 R'로 임의로 치환된다.

본원에서 사용된 아릴 기는, 하나 이상의 시클로알킬 또는 헤테로시클릴 고리에 임의로 융합될 수 있는 방향족 모노- 또는 폴리시클릭 탄화수소 고리 시스템을 지칭하는데, 여기서 아릴 기 내 고리 원자의 총 수는 6 내지 14개, 특히 6 내지 10개이다. 상기 아릴 기의 중심 모이어티로의 부착 지점은, 모노- 또는 폴리시클릭 탄화수소 고리 시스템 상에 또는 임의로 융합된 시클로알킬 또는 헤테로시클릴 고리 상에 위치할 수 있다. 아릴 기의 예는, 페닐, 나프틸, 인데닐, 아줄레닐, 플루오레닐, 1,2-디히드로나프틸, 1,2,3,4-테트라히드로나프틸, 2,3-디히드로인데닐, 1,5-디히드로-s-인다세닐, 1,6-디히드로-as-인다세닐, 1H-시클로펜타[a]나프틸 및 1H-시클로펜타[b]나프틸, 페날레닐, 페난트레닐, 안트라세닐, 1,6-디히드로펜탈레닐, 1,6a-디히드로펜탈레닐, 1,2,3,4-테트라히드로안트라세닐, 1,2,3,4-테트라히드로페난트레닐, 2,3-디히드로-1H-시클로펜타[a]나프탈레닐, 2,3-디히드로-1H-시클로펜타[b]나프탈레닐, 2,3-디히드로-1H-페날레닐, 2,3-디히드로벤조[b]티오페닐-1,1-디옥시드, 1,2,3,4-테트라히드로이소퀴놀리닐, 1,2,3,4-테트라히드로퀴놀리닐, 2,3-디히드로벤조[b][1,4]디옥시닐, 2,3-디히드로벤조[b]티오페닐, 2,3-디히드로벤조푸라닐, 2-옥소-2,3-디히드로벤조이미다졸릴, 벤조[d][1,3]디옥솔릴, 크로마닐, 인다졸리닐 및 인돌리닐이다. 구체적인 구현예에서, 아릴 기는 페닐, 2,3-디히드로벤조[b][1,4]디옥시닐, 2,3-디히드로벤조푸라닐, 2-옥소-2,3-디히드로벤조이미다졸릴 또는 벤조[d][1,3]디옥솔릴, 보다 구체적으로는 페닐이다. 예 및 그 구체적인 구현예로 열거된 기를 포함하는 상기 정의된 아릴 기는 하나 이상의 치환기 R'로 임의로 치환된다.

본원에서 사용된 헤테로아릴 기는 방향족 모노- 또는 폴리시클릭 탄화수소 고리 시스템을 지칭하는데, 여기서 하나 이상의 탄소 원자는 독립적으로 O, N 및 S를 포함하는 군으로부터 선택된 헤테로원자로 치환되고, 여기서 방향족 모노- 또는 폴리시클릭 탄화수소 고리 시스템은 임의로 하나 이상의 시클로알킬 또는 헤테로시클릴 고리에 융합될 수 있고, 여기서 헤테로아릴 기 내 고리 원자의 총 수는 5 내지 14개, 구체적으로 5 내지 10개, 보다 구체적으로 5 또는 6개이다. 상기 헤테로아릴 기의 중심 모이어티로의 부착 지점은, 모노- 또는 폴리시클릭 탄화수소 고리 시스템 상에 위치할 수 있거나 임의로 융합된 시클로알킬 또는 헤테로시클릴 고리 상에 위치할 수 있다. 헤테로아릴 기의 예는, 티아디아졸, 티아졸-2-일, 티아졸-4-일, 티아졸-5-일, 이소티아졸-3-일, 이소티아졸-4-일, 이소티아졸-5-일, 옥사졸-2-일, 옥사졸-4-일, 옥사졸-5-일, 이속사졸-3-일, 이속사졸-4-일, 이속사졸-5-일, 1,2,4-옥사디아졸-3-일, 1,2,4-옥사디아졸-5-일, 1,2,5-옥사디아졸-3-일, 벤조옥사졸-2-일, 벤조옥사졸-4-일, 벤조옥사졸-5-일, 벤조이속사졸-3-일, 벤조이속사졸-4-일, 벤조이속사졸-5-일, 1,2,5-옥사디아졸-4-일, 1,3,4-옥사디아졸-2-일, 1,2,4-티아디아졸-3-일, 1,2,4-티아디아졸-5-일, 1,3,4-티아디아졸-2-일, 이소티아졸-3-일, 이소티아졸-4-일, 이소티아졸-5-일, 벤조이소티아졸-3-일, 벤조이소티아졸-4-일, 벤조이소티아졸-5-일, 1,2,5-티아디아졸-3-일, 1-이미다졸릴, 2-이미다졸릴, 1,2,5-티아디아졸-4-일, 4-이미다졸릴, 벤조이미다졸-4-일, 1-피롤릴, 2-피롤릴, 3-피롤릴, 2-푸라닐, 3-푸라닐, 2-티에닐, 3-티에닐, 2-피리딜, 3-피리딜, 4-피리딜, 2-피라닐, 3-피라닐, 4-피라닐, 2-피리미디닐, 4-피리미디닐, 5-피리미디닐, 피리드-2-일, 피리드-3-일, 피리드-4-일, 피리드-5-일, 피리드-6-일, 3-피리다지닐, 4-피리다지닐, 2-피라지닐, 1-피라졸릴, 3-피라졸릴, 4-피라졸릴, 1,2,3-트리아졸-4-일, 1,2,3-트리아졸-5-일, 1,2,4-트리아졸-3-일, 1,2,4-트리아졸-5-일, 1H-테트라졸-2-일, 1H-테트라졸-3-일, 테트라졸릴, 아크리딜, 페나지닐, 카르바졸릴, 페녹사지닐, 인돌리진, 2-인돌릴, 3-인돌릴, 4-인돌릴, 5-인돌릴, 6-인돌릴, 7-인돌릴, 1-이소인돌릴, 3-이소인돌릴, 4-이소인돌릴, 5-이소인돌릴, 6-이소인돌릴, 7-이소인돌릴, 2-인돌리닐, 3-인돌리닐, 4-인돌리닐, 5-인돌리닐, 6-인돌리닐, 7-인돌리닐, 벤조[b]푸라닐, 벤조푸라잔, 벤조티오푸라잔, 벤조트리아졸-1-일, 벤조트리아졸-4-일, 벤조트리아졸-5-일, 벤조트리아졸-6-일, 벤조트리아졸-7-일, 벤조트리아진, 벤조[b]티오페닐, 벤즈이미다졸릴, 벤조티아졸릴, 퀴나졸리닐, 퀴녹사졸리닐, 신놀린, 퀴놀리닐, 테트라히드로퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 또는 테트라히드로이소퀴놀리닐, 퓨린, 프탈라진, 프테리딘, 티아테트라아자인덴, 티아트리아자인덴, 이소티아졸로피라진, 6-피리미디닐, 2,4-디메톡시-6-피리미디닐, 벤즈이미다졸-2-일, 1H-벤즈이미다졸릴, 벤즈이미다졸-4-일, 벤즈-이미다졸-5-일, 벤즈이미다졸-6-일, 벤즈이미다졸-7-일, 테트라졸, 테트라히드로-티에노[3,4-d]이미다졸-2-온, 피라졸로[5,1-c][1,2,4]트리아진, 이소티아졸로피리미딘, 피라졸로트리아진, 피라졸로피리미딘, 이미다조피리다진, 이미다조피리미딘, 이미다조피리딘, 이미다졸로트리아진, 트리아졸로트리아진, 트리아졸로피리딘, 트리아졸로피라진, 트리아졸로피리미딘, 또는 트리아졸로피리다진이다. 예 및 그 구체적인 구현예로 열거된 기를 포함하는 상기 정의된 헤테로아릴 기는 하나 이상의 치환기 R'로 임의로 치환된다.

본원에서 사용된 시클로알킬 기는 비-방향족, 모노- 또는 폴리시클릭 완전 포화 또는 부분 불포화 탄화수소 고리 시스템을 지칭한다. 상기 시클로알킬은 구체적으로 모노- 또는 비시클릭, 보다 구체적으로 모노시클릭이다. 상기 시클로알킬은 구체적으로 완전 포화된다. 상기 시클로알킬은 구체적으로 3 내지 10개의 탄소 원자, 보다 구체적으로 5 내지 7개의 탄소 원자를 포함한다. 훨씬 보다 구체적으로, 상기 시클로알킬은 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸, 1-노르보르닐, 2-노르보르닐, 7-노르보르닐, 1-아다만틸, 및 2-아다만틸을 포함하는 군으로부터 선택되고, 훨씬 더 보다 구체적으로 상기 시클로알킬은 시클로헥실 또는 시클로프로필이다. 예 및 그 구체적인 구현예로 열거된 기를 포함하는 상기 정의된 시클로알킬 기는 하나 이상의 치환기 R'로 임의로 치환된다.

본원에서 사용된 헤테로시클릴 기는 비-방향족 모노- 또는 폴리시클릭 완전 포화 또는 부분 불포화 탄화수소 고리 시스템을 지칭하는데, 여기서 탄소 원자의 하나 이상이 독립적으로 N, O, 또는 S로부터 선택된 헤테로원자로 치환된다. 상기 헤테로시클릴은 구체적으로 모노- 또는 비시클릭, 보다 구체적으로 모노시클릭이다. 상기 헤테로시클릴은 구체적으로 완전 포화된다. 상기 헤테로시클릴은 구체적으로 총 5 내지 10개의 탄소 및 헤테로원자, 보다 구체적으로는 총 5 내지 7개의 탄소 및 헤테로원자, 훨씬 보다 구체적으로는 총 6개의 탄소 및 헤테로원자를 포함한다. 훨씬 보다 구체적으로 상기 헤테로시클릴은 모르폴리닐, 피페리디닐, 디옥사닐, 피페라지닐, 티오모르폴리닐, 피페리디닐, 피롤리디닐, 테트라히드로푸라닐, 이속사졸리디닐, 티오모르폴리닐, 테트라히드로티오푸라닐 및 테트라히드로피라닐을 포함하는 군으로부터, 보다 구체적으로는 모르폴리닐, 피페리디닐, 디옥사닐, 피페라지닐, 티오모르폴리닐, 피페리디닐, 및 피롤리디닐을 포함하는 군으로부터 선택된다. 예 및 그 구체적인 구현예로 열거된 기를 포함하는 상기 정의된 헤테로시클릴 기는 하나 이상의 치환기 R'로 임의로 치환된다.

본원에서 사용된 할로 또는 할로겐 기는 플루오린, 염소, 브롬 또는 요오드; 구체적으로 염소 또는 플루오린을 지칭한다.

본원에서 사용된 할로알킬 기는, 탄화수소 사슬 상의 수소 원자의 하나 이상, 구체적으로 적어도 절반, 보다 구체적으로 전부가 할로겐 원자로 치환되는 알킬 기를 지칭한다. 할로알킬 기는 구체적으로 -C(R¹⁰)₃, -CH₂-C(R¹⁰)₃, -C(R¹⁰)₂-CH₃, -C(R¹⁰)₂-C(R¹⁰)₃, -C(R¹⁰)₂-CH(R¹⁰)₂, -CH₂-CH(R¹⁰)₂, -CH(R¹⁰)-C(R¹⁰)₃, -CH(R¹⁰)-CH₃, 및 -C₂H₄-C(R¹⁰)₃, 보다 구체적으로 -C(R¹⁰)₃을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 R¹⁰, R¹⁰은 할로겐, 구체적으로 F를 나타낸다. 보다 구체적으로, 할로알킬은 -CF_3, -CHF₂, -CH₂CF₃, 또는 CF₂Cl이다.

본원에서 사용된 알콕시 기는 O-알킬 기를 지칭하는데, 상기 알킬 기는 상기 정의된 바와 같다. 알콕시 기는 구체적으로 메톡시, 에톡시 및 프로폭시, 보다 구체적으로 메톡시를 포함하는 군으로부터 선택된다.

본원에서 사용된 알킬티오 기는 -S-알킬 기를 지칭하는데, 구체적으로 메틸티오이며, 상기 알킬 기는 상기 정의된 바와 같다.

본원에서 사용된 할로알콕시 기는 O-할로알킬 기를 지칭하는데, 상기 할로알킬 기는 상기 정의된 바와 같다. 할로알콕시 기는 구체적으로 -OC(R¹⁰)₃, -OCR¹⁰(R^10')₂, -OCH₂-C(R¹⁰)₃, 및 -OC₂H₄-C(R¹⁰)₃을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 R¹⁰, R^10'는 F, Cl, Br 또는 I, 구체적으로 F를 나타낸다.

알킬아미노 기는 NH-알킬 또는 N-디알킬 기를 지칭하며(상기 알킬 기는 상기 정의된 바와 같음), 구체적으로 모노- 또는 디메틸아미노, 모노- 또는 디에틸아미노 또는 이소프로필아미노, 보다 구체적으로 디메틸아미노이다.

아릴알킬 또는 아르알킬 기는 본원에서 정의된 적어도 하나의 아릴 기로 치환된 본원에서 정의된 선형 또는 분지형 C1-C6-알킬을 지칭한다. 예시적인 아릴알킬 기는 스티릴, 벤질, 페닐에틸, 1-(나프탈렌-2-일)에틸이고, 구체적으로 아릴알킬 기는 스티릴 또는 1-(나프탈렌-2-일)에틸이고, 여기서 스티릴은 구체적으로 아릴 기에 대해 상기 정의된 그 페닐 부분에서 임의로 치환된다. 다른 구체적인 구현예에서, 아릴알킬 기는 벤질, 스티릴 또는 1-(나프탈렌-2-일)에틸이다.

R'는 독립적으로 할로겐, C_1-6-알킬, C_1-6-할로알킬, C_1-6-할로알콕시, OH, C_1-6-알콕시, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 헤테로시클릴, -S-C_1-6-알킬, -S-C_1-6-할로알킬, 니트로, -NH₂, -N(C_1-6-알킬)₂, -NH(C_1-6-알킬), -NHCO(C_1-6-알킬), -CONH₂, -CONH(C_1-6-알킬), -CO(C_1-6-알킬), -COH, -COO(C_1-6-알킬), -COOH, -SO₂NH₂, -SO₂NH(C_1-6-알킬), -SO₂(C_1-6-알킬), 및 -CN을 포함하는 군으로부터, 구체적으로 F, Cl, C_1-3-알킬, C_1-3-할로알킬, C_1-3-할로알콕시, OH, C_1-3-알콕시, 페닐, 피리딜, 피롤릴, 티오페닐, 푸라닐, 시클로펜틸, 시클로헥실, 피페리디닐, 피페라지닐, 테트라히드로푸라닐, 모르폴리닐, -S-C_1-3-알킬, -S-C_1-3-할로알킬, 니트로, -NH₂, -N(C_1-3-알킬)₂, -NH(C_1-3-알킬), -NHCO(C_1-3-알킬), -CONH₂, -CONH(C_1-3-알킬), -CO(C_1-3-알킬), -COH, -COO(C_1-3-알킬), -COOH, -SO₂NH₂, -SO₂NH(C_1-3-알킬), -SO₂(C_1-3-알킬), 및 -CN을 포함하는 군으로부터, 보다 구체적으로 F, Cl, 메틸, 에틸, 이소프로필, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, OH, 메톡시, 메틸설파닐, 트리플루오로메틸설파닐, 니트로, -NH₂, 디메틸아미노, 디에틸아미노, 디이소프로필아미노, 메틸아미노, 에틸아미노, 이소프로필아미노, -NHCO-메틸, -CONH₂, -CONH-메틸, -CONH-에틸, -CO-메틸, -CO-에틸, -COO-메틸, -COO-에틸, -COOH, -SO₂NH₂, -SO₂NH-메틸, -SO₂-메틸, -SO₂NH-에틸, -SO₂-에틸, 및 -CN을 포함하는 군으로부터, 훨씬 보다 구체적으로 F, Cl, 메틸, 에틸, 이소프로필, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, OH, 메톡시, 니트로, -NH₂, 디메틸아미노, 디에틸아미노, 메틸아미노, 에틸아미노, -CONH₂, -COO-메틸, -COO-에틸, -COOH, 및 -CN을 포함하는 군으로부터, 훨씬 보다 더 구체적으로 F, Cl, 메틸, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, OH, 메톡시, 니트로, -NH₂, 및 -CN을 포함하는 군으로부터, 가장 구체적으로 F, Cl, 메틸, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, OH, 및 메톡시를 포함하는 군으로부터 선택된다. 구체적으로, R'는 추가 기로 치환되지 않는다.

분자 안정성 및/또는 화학적 원자가 규칙의 측면에서 화학적으로 실행가능한 경우에, 예를 들어 "헤테로아릴" 및 "헤테로사이클"의 문맥에서 본원에서 정의된 질소 헤테로원자는 N-산화물을 포함할 수 있다.

생리학적 조건 하에서의 분자 안정성 및/또는 화학적 원자가 규칙의 측면에서 화학적으로 실행가능한 경우에, 예를 들어 "헤테로아릴" 및 "헤테로사이클"의 문맥에서 본원에서 정의된 황 헤테로원자의 정의는 각각 산화황 및/또는 이산화황을 포함할 수 있다.

본원에서 사용된 용어 "로 치환된" 또는 "에 의해 치환된"은, 화학 기 또는 실체물(entity)의 탄소 원자 또는 헤테로원자에 연결된 하나 이상의 수소 원자가 각각 치환 기로 대체됨을 의미한다; 예를 들어, 치환된 아릴은 4-히드록시페닐을 포함하는데, 여기서 페닐 기의 4-위치에서의 H-원자가 히드록실 기로 대체된다. 치환되는 상기 수소 원자(들)는 탄소 원자 또는 헤테로원자에 부착될 수 있고, 특정 식으로, 예컨대 NH-기로 명확하게 표시될 수 있거나, 명확하게 표시되는 것이 아니라, 예를 들어, 탄화수소를 기호화하는데 일반적으로 사용되는 전형적인 "사슬" 표기에서와 같이 내재적으로 존재할 수 있다. 당업자는, 구체적으로 당업계에 공지된 합성 방법을 통하여서는 얻기 쉽지 않고/않거나 안정하지 않은 화합물을 초래하는 치환기 또는 치환기 패턴이 배제됨을 용이하게 이해할 것이다.

본원에서 사용된 용어 "중심 모이어티"는, 하기 식으로 표시되는 분자의 N-(2,2-디플루오로-5H-[1,3]디옥솔로[4',5':4,5]벤조[1,2-d]이미다졸-6-일) 부분을 의미한다.

달리 특정되지 않으면, 본 발명에 따른 화합물에 대한 기준은 본원에서 설명된 그의 약제학적으로 허용되는 유도체, 용매화물 또는 염 뿐 아니라, 상기 약제학적으로 허용되는 유도체의 염, 염 및 약제학적으로 허용되는 유도체의 용매화물, 및 임의로 약제학적으로 허용되는 유도체의 염의 용매화물을 포함한다.

본원에서 사용된 용어, 본 발명에 따른 화합물의 "약제학적으로 허용되는 유도체"는, 예를 들어 상기 화합물의 전구약물인데, 여기서 하기 기 중 적어도 하나가 하기 특정된 바와 같이 유도체화된다: 카르복실산 기는 에스테르로 유도체화되고, 히드록실 기는 에스테르로 유도체화되고, 카르복실산은 아미드로 유도체화되고, 아민은 아미드로 유도체화되고, 히드록실 기는 포스페이트 에스테르로 유도체화된다.

본원에서 사용된 용어, 본 발명에 따른 화합물과 관련하여 사용된 "호변이성질체"는 구체적으로, 치환된 벤즈이미다졸 기에 대하여 전형적으로 형성되는 호변이성질체를 포함한다. 예시로서, 본 발명에 따른 화합물에서 나타나 있듯이, 예시적인 치환된 벤즈이미다졸 모이어티의 두 개의 호변이성질체 형태가 도시된다:

본 발명에 따른 화합물은, 식 (I) 및 (Ia)를 포함하여 본원에서 설명된 식에는 명확하게 나타나 있지 않더라도, 그의 모든 호변이성질체 형태를 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 이 명세서 전체를 통하여, 일반적인 또는 그렇지 않은 화학식이 상기 예시적인 도식의 좌측에 보여진 대로 1 위치에서 치환되지 않은 1H-벤즈이미다졸 모이어티를 갖는 화합물을 개시할 때에는 언제든지, 상기 화학식은, 벤즈이미다졸 모이어티가 호변이성질체화되어 상기 예시적인 도식의 우측에 보여진 바와 같은 구조를 형성시키는 화합물과 또한 암시적으로 관련되는 것으로 이해되어야 한다.

본원에서 정의된 식 (I) 및 (Ia)의 화합물은 달리 특정되지 않으면 상기 화합물의 적용가능한 모든 입체이성질체를 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 본원에서 사용된 용어 "입체이성질체"는 IUPAC 규칙에 따라서 정의된 R- 또는 S-배열될 수 있는 적어도 하나의 입체중심을 갖는 화합물을 지칭하며, 당업자에 의해 일반적으로 이해된 거울상이성질체 및 부분입체이성질체를 포함한다. 하나 초과의 입체중심을 갖는 화합물에서, 각각의 개별 입체중심은 서로 독립적으로 R- 또는 S-배열될 수 있는 것으로 이해되어야 한다. 본원에서 사용된 용어 "입체이성질체"는 또한 광학적으로 활성인 산 또는 염기를 사용한 본원에서 설명된 화합물의 염을 지칭한다.

본 발명에서, 본 발명에 따른 화합물의 염은 구체적으로 본 발명에 따른 화합물의 약제학적으로 허용되는 염이다. 약제학적으로 허용되는 염은, 예를 들어 이들이 상기 염으로 치료될 수 있는 대상체에게 유해하지 않거나 각각의 처리에서 허용가능한 부작용을 일으키기 때문에, 의학적 응용예에 대해 적합한 것으로 당업자에 의해 일반적으로 간주되는 염이다. 대개, 상기 약제학적으로 허용되는 염은 규제 기관, 예컨대 미국 식품 의약국(FDA), 유럽 의약품청(EMA), 또는 일본 후생노동성 의약품 및 의료 기기 종합기구(PMDA)에 의해 허용되는 것으로 간주되는 염이다. 그러나, 본 발명은 원칙적으로, 그 자체로 약제학적으로 허용되지 않는 본 발명에 따른 화합물의 염을, 예를 들어 본 발명에 따른 화합물의 제조에서 중간체 또는 그 생리학적 기능성 유도체로, 또는 본 발명에 따른 화합물의 약리학적으로 허용되는 염의 제조에서 중간체 또는 그 생리학적 기능성 유도체로 또한 포함한다.

각각의 경우에, 당업자는 본 발명에 따른 특정 화합물 또는 그 약제학적으로 허용되는 유도체가 염을 형성할 수 있는 지를, 즉 본 발명에 따른 상기 화합물 또는 그 약제학적으로 허용되는 유도체가 전하를 보유할 수 있는 기, 예컨대 아미노 기, 카르복실산 기 등을 가질 수 있는 지를 용이하게 측정할 수 있다.

본 발명의 화합물의 예시적인 염은 산 부가 염 또는 염기를 갖는 염, 구체적으로 약학에서 관례적으로 사용된 약리학적으로 허용되는 무기 및 유기 산 및 염기이고, 이들은 수 불용성 또는 구체적으로 수용성 산 부가 염이다. 본 발명의 화합물의 치환기에 따라 염기를 갖는 염 또한 적합할 수 있다.

예를 들어, 산업적인 규모에서 본 발명에 따른 화합물의 제조 동안에 공정 생성물로 얻을 수 있는 약리학적으로 허용불가능한 염이 또한 본 발명에 포함되며, 이는 필요에 따라 당업자에게 공지된 방법으로 약리학적으로 허용가능한 염으로 전환될 수 있다.

전문가의 지식에 따르면, 본 발명의 화합물 및 그 염은 예를 들어, 결정형으로 단리되는 경우에 가변 양의 용매를 함유할 수 있다. 따라서, 본 발명의 화합물의 용매화물 및 구체적으로 수화물 뿐 아니라, 본 발명의 화합물의 염 및/또는 생리학적 기능성 유도체의 용매화물 및 구체적으로 수화물이 본 발명의 범위에 포함된다. 보다 구체적으로, 본 발명은 그 화학양론에 대하여 1, 2 또는 1/2 물 분자를 포함하는, 본 발명에 따른 화합물, 염 및/또는 생리학적 기능성 유도체의 수화물을 포함한다.

본원에서 사용된 용어 "실온", "rt" 또는 "r.t."는 달리 특정되지 않으면 약 25℃의 온도에 관련된다.

본원에서 사용된 용어 "안정한"은, 화합물을 빛, 수분 또는 다른 화학적 반응 조건의 부재 하에서 적어도 한 주, 구체적으로 적어도 1개월, 보다 구체적으로 적어도 6개월, 훨씬 보다 구체적으로 적어도 1년 동안 약 -80℃ 내지 +40℃, 구체적으로 약 -80℃ 내지 +25℃의 온도에서 저장하는 경우에 화학 구조가 변하지 않는 화합물, 및/또는 IUPAC 표준 조건 하에 빛, 수분 또는 다른 화학적 반응 조건의 부재 하에서 그 구조적 완전성을, 환자에게로의 치료적 또는 예방적 투여에 유용하도록 충분히 길게, 즉 적어도 한 주 유지하는 화합물을 특정한다. 이상에서 설명된 안정하지 않은 화합물은 구체적으로 본 발명에는 포함되지 않는다. 구체적으로, IUPAC 표준 조건에서 하루 미만의 기간 내에 자발적으로 분해되는 화합물은 안정한 화합물이 아닌 것으로 간주된다. 당업자는 그 전문 분야에서의 그 일반적인 지식을 기초로 어느 화합물 및 어느 치환 패턴이 안정한 화합물을 초래할 것인지를 용이하게 인지할 것이다.

본원에서 사용된 용어 "치료"는, 질병의 완전한 또는 부분적인 치유, 질병의 예방, 질병의 완화 또는 소정 질병의 진행 중단을 포함한다.

본원에서 사용된 용어 "약제"는, 순수 형태로 대상체에게 투여될 본원에서 설명된 식 (I)의 화합물, 그 약리학적으로 허용되는 염 또는 생리학적 기능성 유도체 뿐 아니라, 대상체에게 투여하기에 적합한 본 발명에 따른 적어도 하나의 화합물, 그 약리학적으로 허용되는 염 또는 생리학적 기능성 유도체를 포함한다.

본 발명에 따른 화합물 및 그 약리학적으로 허용되는 염 및 생리학적 기능성 유도체는 그 자체로 치료제로, 서로와의 혼합물로, 또는 구체적으로는 장관(예를 들어, 경구) 또는 비경구 투여가 가능하고, 예를 들어 일반적인 보조제, 약제학적으로 무해한 부형제, 담체, 완충제, 희석제 및/또는 다른 일반적인 약제학적 보조제를 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 성분에 추가하여, 활성 성분으로 치료학적 유효량의 본 발명에 따른 적어도 하나의 화합물 또는 그 염 또는 생리학적 기능성 유도체를 포함하는 약제 제조물 또는 조성물 형태로 동물, 구체적으로 포유동물 및 특히 사람에게 투여될 수 있다.

본 발명에 따른 약제 조성물, 의학적 용도 및 치료 방법은 본 발명에 따른 하나 초과의 화합물을 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 화합물, 또는 약제학적으로 허용되는 염 또는 생리학적 기능성 유도체를 포함하는 약제 조성물은 임의로, 본 발명에 따른 식 (I)의 화합물이 아닌 하나 이상의 추가 치료학적 활성 물질을 포함할 수 있다. 본원에서 사용된 용어 "치료학적 활성 물질"은, 투여 시 대상체에서 의학적 효과를 유도할 수 있는 물질을 특정한다. 상기 의학적 효과는 본 발명의 식 (I)의 화합물에 대해 본원에서 설명된 의학적 효과를 포함할 수 있지만, 또한 본 발명에 따른 화합물과 함께 공동 투여될 치료학적 활성 물질의 경우에는, 다른 의학적 물질, 예컨대 비배타적으로 이리노테칸, 옥살리플라틴, 카페시타빈, 5-플루오로우라실, 세툭시마브(에르비툭스), 파니투무마브(벡티빅스), 베바시주마브(아바스틴), 빈크리스틴, 빈블라스틴, 비노렐빈, 빈데신, 탁솔, 암사크린, 에토포시드, 에토포시드 포스페이트, 테니포시드, 액티노마이신, 안트라사이클린, 독소루비신, 발루비신, 발루비신, 이다루비신, 에피루비신, 블레오마이신, 플리카마이신, 미토마이신, 메클로레타민, 시클로포스파미드, 클로람부실, 이포스파미드 및 다른 키나제 억제제를 포함할 수 있다.

용어 "약제학적으로 허용되는"은, 당업자에게 널리 공지되어 있고 구체적으로는 각각의 실체물이 이 실체물 또는 이 실체물을 포함하는 조성물이 투여되는 대상체에게 유해하지 않음을, 상기 실체물이 안정함을, 및 상기 실체물이 각각의 약제 조성물의 다른 성분과 화학적으로 상용성(즉, 비-반응성)임을 의미한다.

본 발명에 따른 적어도 하나의 화합물 또는 그 약리학적으로 허용되는 염 또는 생리학적 기능성 유도체를 포함하는 본 발명에 따른 약제 및 약제 조성물은 경구, 직장, 기관지, 비내, 국소, 협측, 설하, 질내 또는 비경구(경피, 피하, 근육내, 폐내, 혈관내, 두개내(intracranial), 복막내, 정맥내, 동맥내, 뇌내, 안내(intraocular) 투여 또는 주입을 포함) 투여에 적합한 것들, 또는 분말 및 액체 에어로졸 투여를 포함하는 흡입 또는 통기에 의해 또는 조절 방출(예를 들어, 지연 방출, pH-조절 방출, 지연된 방출, 반복 작용 방출, 연기된 방출, 연장된 방출) 시스템에 의해 투여하기에 적합한 형태의 것들을 포함한다. 조절 방출 시스템의 적합한 예는 본 발명의 화합물을 함유하는 고체 소수성 중합체의 반투과성 매트릭스를 포함하는데, 상기 매트릭스는 성형된 물품, 예를 들어 필름 또는 미세캡슐 또는 콜로이드 약물 캐리어, 예를 들어 중합체성 나노입자, 또는 조절 방출 고체 투여 형태, 예를 들어 코어 정제 또는 다중층 정제의 형태일 수 있다.

본 발명에 따른 화합물을 포함하는 약제 또는 약제 조성물의 제조 및 그 응용예는 의학 종사자에게 널리 공지된 방법에 따라 실시될 수 있다.

본 발명에 따른 화합물, 그 약리학적으로 허용되는 염 또는 생리학적 기능성 유도체를 포함하는 약제 조성물 또는 약제의 제조에서 사용된 약제학적으로 허용되는 담체는 고체 또는 액체일 수 있다. 본 발명에 따른 화합물, 그 약리학적으로 허용되는 염 또는 생리학적 기능성 유도체를 포함하는 고체 형태 약제 조성물은 분말, 정제, 환약(pill), 캡슐, 사쉐(sachets), 좌약 및 분산성 과립을 포함한다. 고체 담체는 희석제, 향미제, 가용화제, 윤활제, 현탁화제, 결합제, 보존제, 정제 붕해제, 또는 캡슐화 재료로 또한 작용할 수 있는 하나 이상의 성분을 포함할 수 있다.

분말에서, 담체는 미세하게 분할된 고체인데, 이것은 미세하게 분할된 활성 성분과의 혼합물로 존재한다. 정제에서, 활성 성분은 필요한 결합 능력을 갖는 담체와 적합한 비율로 혼합되고, 요망된 형상 및 크기로 압축된다. 정제화되는 혼합물은 과립화되고, 체분리되고, 압축 또는 직접 압축될 수 있다. 적합한 담체는 탄산마그네슘, 스테아르산마그네슘, 탈크, 설탕, 락토스, 펙틴, 덱스트린, 전분, 젤라틴, 트라가칸트, 메틸셀룰로스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로스, 저융점 왁스, 코코아 버터 등이다. 용어 "제조물"은, 담체와 함께 또는 담체 없이 활성 성분이 담체에 의해 둘러싸여 따라서 담체와 회합되는 캡슐을 제공하는 담체로서 캡슐화 재료를 사용한 활성 화합물의 제형을 포함하는 것으로 의도된다. 유사하게, 사쉐 및 로젠지가 포함된다. 정제, 분말, 캡슐, 환약, 사쉐 및 로젠지는 경구 투여에 적합한 고체 형태로 사용될 수 있다.

좌약을 제조하기 위해, 저융점 왁스, 예컨대 지방산 글리세리드 또는 코코아 버터의 혼합물을 먼저 용융시키고, 예컨대 교반에 의해서 활성 성분을 균일하게 분산시킨다. 그 후, 용융시킨 균일 혼합물을 편리한 크기의 몰드 내로 붓고 냉각시켜서 고체화시킨다. 질내 투여에 적합한 조성물은, 활성 성분에 추가하여 당업계에서 적절한 것으로 공지된 담체를 함유하는 질 좌약(pessaries), 탐폰, 크림, 젤, 페이스트, 폼(foam) 또는 스프레이로 존재할 수 있다. 액체 제조물은 용액, 현탁액 및 에멀젼, 예를 들어 물 또는 물-프로필렌 글리콜 용액을 포함한다. 예를 들어, 비경구 주사용 액체 제조물은 수성 폴리에틸렌 글리콜 용액 중의 용액으로서 제형화될 수 있다.

본 발명에 따른 화합물은 (예를 들어, 주사, 예를 들어 볼루스 주사 또는 연속 주사에 의한) 비경구 투여를 위해 제형화될 수 있고, 앰플, 사전 충전된 주사기, 적은 부피 주입에서의 단위 용량(unit-dose) 형태, 또는 보존제가 첨가된 다중 용량(multi-dose) 용기로 존재할 수 있다. 상기 조성물은 오일성 또는 수성 비히클 중의 현탁액, 용액, 또는 에멀젼과 같은 형태를 취할 수 있고, 제형화제, 예컨대 현탁화제, 안정화제 및/또는 분산제를 함유할 수 있다. 대안적으로, 활성 성분은 사용 전에 적합한 비히클, 예를 들어 무균, 발열원 비함유 수를 사용하여 재구성하기 위한, 무균 고체의 무균성 단리에 의해 또는 용액으로부터의 동결화에 의해서 얻어진 분말 형태일 수 있다.

경구 투여에 적합한 수용액은 활성 성분을 물에 용해시키고, 예를 들어 적합한 착색제, 향미제, 안정화제 및 증점제를 필요에 따라 첨가함으로써 제조될 수 있다. 경구 사용에 적합한 수성 현탁액은 점성 물질, 예컨대 천연 또는 합성 검, 수지, 메틸셀룰로스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로스, 또는 다른 널리 공지된 현탁화제와 함께 미세하게 분할된 활성 성분을 물에 분산시킴으로써 제조될 수 있다.

고체 형태 제조물이 또한 포함되는데, 이것은 투여 직전에 경구 투여를 위한 액체 형태 제조물로 전환되도록 의도된다. 그러한 액체 형태는 용액, 현탁액 및 에멀젼을 포함한다. 이러한 제조물은 활성 성분에 추가하여, 예를 들어 착색제, 향미제, 안정화제, 완충제, 인공 및 천연 감미제, 분산제, 증점제, 가용화제 등을 함유할 수 있다.

본 발명의 구현예에서, 약제는 국소적으로, 예를 들어 경피적 치료 시스템(예를 들어, 패치) 또는 국소 제형(예를 들어, 리포좀, 크림, 연고, 로션, 젤, 분산액, 현탁액, 스프레이, 용액, 폼, 분말) 형태로 적용된다. 이것은 가능한 부작용을 감소시키는고 적절한 경우 필요한 치료를 병에 걸린(affected) 영역으로 제한시키는 데 적합할 수 있다.

구체적으로, 상기 약제는, 비제한적으로 친지질성 상(예를 들어, 바셀린, 파라핀, 트리글리세리드, 왁스, 폴리아실실록산), 오일(올리브 오일, 땅콩 오일, 피마자 오일, 트리글리세리드 오일), 유화제(예를 들어 레시틴, 포스파티딜글리세롤, 알킬 알콜, 나트륨 라우릴 설페이트, 폴리소르베이트, 콜레스테롤, 소르비탄 지방산 에스테르, 폴리옥시에틸렌 지방산 글리세롤 및 -에스테르, 폴록사머), 보존제(예를 들어, 벤즈알코늄 클로라이드, 클로로부탄올, 파라벤 또는 티오머살), 향미제, 완충 물질(예를 들어, 아세트산, 시트르산, 붕산, 인산, 타트르산(tatric acid), 트로메타몰 또는 트롤아민의 염), 용매(예를 들어, 폴리에틸렌글리콜, 글리세롤, 에탄올, 이소프로판올 또는 프로필렌글리콜), 또는 가용화제, 데포(depot) 효과 부여제, 삼투압 조절용 염, 패치용 담체 물질(예를 들어, 폴리프로필렌, 에틸렌-비닐아세타트-공중합체, 폴리아크릴레이트, 실리콘) 또는 항산화제(예를 들어, 아스코르베이트, 토코페롤, 부틸히드록시아니솔, 갈산 에스테르 또는 부틸히드록시톨루올)를 포함하는 담체 물질 또는 부형제를 포함할 수 있다.

연고 및 크림은 예를 들어, 적합한 증점제 및/또는 젤화제를 첨가하면서 수성 또는 오일성 기제(base)를 사용하여 제형화될 수 있다. 로션은 수성 또는 오일성 기제를 사용하여 제형화될 수 있고, 이는 일반적으로 또한 하나 이상의 유화제, 안정화제, 분산제, 현탁화제, 증점제 또는 착색제를 함유할 것이다.

입에서의 국소 투여에 적합한 조성물은 향미제첨가된(flavoured) 기제, 대개는 수크로스 및 아카시아 또는 트라가칸트 중에 활성 성분을 포함하는 로젠지; 불활성 기제, 예컨대 젤라틴 및 글리세린 또는 수크로스 및 아카시아 중에 활성 성분을 포함하는 향정(pastille); 및 적합한 액체 담체 중에 활성 성분을 포함하는 구강세척제를 포함한다.

용액 또는 현탁액은 통상적인 수단에 의해, 예를 들어 점적기, 피펫 또는 스프레이를 사용하여 비강으로 직접 적용될 수 있다. 상기 조성물은 단일 또는 다중-용량 형태로 제공될 수 있다. 점적기 또는 피펫의 후자 경우에서, 이것은 적절한 사전결정된 부피의 용액 또는 현탁액을 투여한 환자에 의해서 성취될 수 있다. 스프레이의 경우에, 이것은 예를 들어, 계량 분무화 스프레이 펌프에 의해서 성취될 수 있다.

기도로의 투여는 또한, 활성 성분이 적합한 추진제, 예컨대 클로로플루오로카본(CFC), 예를 들어 디클로로디플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 또는 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소, 또는 다른 적합한 기체와 함께 가압된 팩으로 제공되는 에어로졸 제형에 의해서 성취될 수 있다. 에어로졸은 편리하게는 계면활성제, 예컨대 레시틴을 또한 함유할 수 있다. 약물의 용량은 계량 밸브를 제공함에 의해 조절될 수 있다.

대안적으로, 약제는 건조 분말, 예를 들어 적합한 분말 기제, 예컨대 락토스, 전분, 전분 유도체, 예컨대 히드록시프로필메틸 셀룰로스 및 폴리비닐피롤리돈(PVP) 중의 상기 화합물의 분말 혼합물 형태로 제공될 수 있다. 편리하게, 분말 담체는 비강 내에서 젤을 형성할 것이다. 분말 조성물은 단위 용량 형태로, 예를 들어, 젤라틴으로 된, 예를 들어, 캡슐 또는 카트리지로; 또는 분말이 흡입기에 의해서 투여될 수 있는 블리스터 팩(blister pack)으로 제공될 수 있다.

비내 조성물을 포함하는 기도로의 투입을 위한 조성물에서, 상기 화합물은 일반적으로 예를 들어, 5 마이크론 이하 정도의 작은 입자 크기를 가질 것이다. 그러한 입자 크기는 당업계에 공지된 수단에 의해, 예를 들어 미세화에 의해 얻어질 수 있다.

요망되는 경우, 활성 성분의 지속 방출(sustained-release)을 제공하도록 구성된 조성물이 사용될 수 있다.

약제 제조물은 구체적으로 단위 투여 형태로 되어 있다. 그러한 형태에서, 상기 제조물은 적절한 양의 활성 성분을 함유하는 단위 용량으로 하위분할된다. 상기 단위 투여 형태는 포장된 제조물일 수 있는데, 상기 포장은 바이알 또는 앰플 중에 개별 양의 제조물, 예컨대 포장된 정제, 캡슐, 및 분말을 함유한다. 또한, 단위 투여 형태는 캡슐, 정제, 사쉐, 또는 로젠지 자체일 수 있거나, 적절한 수의 이들 중 임의 것의 포장된 형태일 수 있다. 경구 투여를 위한 정제 또는 캡슐, 및 정맥내 투여 및 연속 주입을 위한 액체가 구체적인 조성물이다.

제형화 및 투여를 위한 기술에 대한 추가 상세사항은 레밍턴의 약제 과학 제21판(펜실베니아 이스턴에 소재한 막 퍼블리싱 코.(Maack Publishing Co.))에서 확인할 수 있다.

본 발명의 화합물은 본원에 개시된 의학적 질환의 치료를 위해 이미 공지된, 방사선 치료와 함께, 또는 방사선 치료 및 다른 활성 화합물과 함께 사용될 수 있는데, 이에 의해 바람직한 첨가 또는 증폭 효과가 확인된다.

약제 제조물을 제조하기 위해, 약제학적 불활성의 무기 또는 유기 부형제가 사용될 수 있다. 환약, 정제, 코팅된 정제 및 경질 젤라틴 캡슐, 예를 들어 락토스, 옥수수전분 또는 그 유도체, 탈크, 스테아르산 또는 그 염 등이 사용될 수 있다. 연질 젤라틴 캡슐 및 좌약에 대한 부형제는 예를 들어, 지방, 왁스, 반고체 및 액체 폴리올, 천연 또는 경화된 오일 등이다. 용액 및 시럽의 제조에 적합한 부형제는 예를 들어, 물, 수크로스, 전화 당, 글루코스, 폴리올 등이다. 주사 용액의 제조에 적합한 부형제는 예를 들어, 물, 알콜, 글리세롤, 폴리올 또는 식물성 오일이다.

용량은 넓은 한계 내에서 가변될 수 있고, 각각의 개별 경우에서 개별 질환에 대해 맞춰질 것이다. 상기 사용에 대해서, 적절한 용량은 투여 모드, 치료할 구체적인 질환 및 요망된 효과에 따라서 가변될 것이다. 그러나 일반적으로, 약 1 내지 100 mg/kg 동물 체중, 구체적으로는 1 내지 50 mg/kg의 용량률(dose rate)에서 만족스러운 결과가 얻어진다. 보다 큰 포유동물, 예를 들어 사람에 적합한 용량률은 편리하게는 한 번, 하루 2 내지 4회의 분할 용량으로, 또는 지속 방출 형태로 투여된, 약 10 mg 내지 3 g/day의 정도이다.

본 발명의 화합물은 염증 장애 및 과증식성 질환, 예컨대 양성 및 악성 형태의 신생물, 예컨대 암의 치료에 적합하다.

본 발명의 문맥에서 예시적인 유형의 암은 간암종, 부신피질 암종, AIDS-관련 암, 예컨대 AIDS-관련 림프종, 항문 암, 기저 세포 암종, 담관 암, 뼈 암, 뇌 종양, 예컨대 뇌간 신경교종, 소뇌 성상세포종, 뇌 성상세포종, 악성 신경교종, 상의세포종, 수모세포종, 천막상 원시 신경외배엽성 종양, 시각 경로 및 시상하부 신경교종, 유방 암, 기관지 선종/유암종, 버킷 림프종, 알려지지 않은 원발 부위의 위장 암, 암종, 중추 신경계 림프종, 자궁경부 암, 만성 골수증식성 장애, 결장 암, 결장직장 암, 피부 T-세포 림프종, 자궁내막 암, 상의세포종, 식도 암, 두개외 생식 세포 종양, 생식선외 생식 세포 종양, 난소 생식 세포 종양, 눈 암, 예컨대 안내 흑색종 및 망막모세포종, 담낭 암, 위장 유암종 종양, 임신성 융모 종양, 신경교종, 소아 뇌간 신경교종, 두경부(head and neck) 암, 혈액 암, 성인 및 소아(원발) 간세포 암, 하인두 암, 도 세포 또는 췌장 암, 신장 암, 후두 암, 급성 림프구성 백혈병, 성인 및 소아 급성 골수성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 모발 세포 백혈병, 입술 및 구강 암, 간 암, 폐 암, 예컨대 비-소세포 폐 암 및 소 세포 폐 암, 호지킨 림프종, 비-호지킨 림프종, 원발성 중추 신경계 림프종, 발덴스트롬 마크로글로불린 혈증, 메르켈 세포 암종, 중피종, 은폐된 원발 부위를 갖는 전이성 편평 목 암, 다발성 내분비선 신생물 증후군, 다발성 골수종/형질 세포 신생물, 균상 식육종, 골수이형성 증후군, 골수이형성 골수증식성 질병, 다발성 골수종, 만성 골수증식성 장애, 비강 및 부비강 암, 비인두 암, 신경모세포종, 구강암, 구강인두 암, 골육종/뼈의 악성 섬유성 조직구종, 난소 암, 난소 상피 암, 난소 낮은 악성 잠재성 종양, 췌장 암, 부갑상선 암, 음경 암, 갈색세포종, 송과체모세포종 및 천막상 원시 신경외배엽 종양, 뇌하수체 종양, 형질 세포 신생물/다발성 골수종, 흉막폐 아세포종, 전립선 암, 직장 암, 신우 및 요관 암, 이행 세포 암, 횡문근육종, 침샘 암, 유잉 육종, 카포시 육종, 연질 조직 육종, 자궁 육종, 쎄자리 증후군, 피부 암, 예컨대 흑색종 및 비-흑색종 피부 암, 소장 암, 편평 세포 암종, 위 암, 천막상 원시 신경외배엽 종양, 고환 암, 흉선종, 흉선종 및 흉선 암종, 갑상선 암, 융모 종양, 임신성 자궁내막 암, 자궁 육종, 질 암, 외음부 암, 발덴스트롬 마크로글로불린 혈증, 윌름스 종양이다.

본 발명의 보다 구체적인 구현예에서, 본 발명의 화합물은 하기 암 유형의 치료에 사용될 수 있다: 전립선, 방광, 신장(즉, 콩팥), 근육, 난소, 피부, 폐, 췌장, 유방, 자궁경부, 결장, 간, 연결 조직, 태반, 뼈, 뇌, 자궁, 침샘 또는 고환.

본 발명의 구체적인 구현예에서, 상기 암에서는 헤지호그 신호화 경로가 활성화된다.

본 발명의 구체적인 구현예에서, 상기 암의 세포에서는 헤지호그 신호화 경로가 활성화된다.

본 발명에서, 상기 암에서 또는 상기 암의 세포에서, 헤지호그 신호화 경로가 활성화되는 환자는 "헤지호그 의존적 환자"로 간단히 지칭되고, 상기 암에서 또는 상기 암의 세포에서, 헤지호그 신호화 경로가 활성화되지 않는 환자는 "헤지호그 비의존적 환자"로 간단히 지칭된다. 본 발명에서, 환자가 앓고 있는 암이 공지된 과학 문헌에 비정상 헤지호그 신호화 경로 활성과 관련된 것으로 설명되어 있다면, 상기 환자는, 예를 들어 헤지호그 의존적 환자로 분류될 수 있다. 본 발명에서, 환자는 하기 단계를 포함하는 과정에 의해서 Wnt 의존적 환자 및 Wnt 비의존적 환자로 또한 분류될 수 있다:

1) 상기 환자로부터, 상기 환자로부터의 암 세포를 포함하는 샘플을 제공하는 단계;

2) 임의로 상기 샘플에 워크-업(work-up) 단계를 실시하는 단계,

3) 헤지호그 신호화 경로에서 역할을 하는 적어도 하나의 단백질에 특이적으로 결합되는 표지화 항체를 첨가하거나,

헤지호그 신호화 경로에서 역할을 하는 적어도 하나의 단백질에 특이적으로 결합되는 제1 항체를 첨가하고, 후속으로 상기 제1 항체에 특이적으로 결합되고 표지화 항체인 제2 항체를 첨가하는 단계,

4) 단계 3) 후에 상기 샘플을 세척하는 단계,

5) 상기 표지화 항체가 단계 4) 후에 상기 샘플에서 검출될 수 있는지를 판단하는 단계,

6) 단계 5)에서 상기 마커 모이어티가 검출될 수 있으면 상기 환자를 헤지호그 의존적 환자로 분류하고, 단계 5)에서 상기 마커 모이어티가 검출될 수 없으면 상기 환자를 헤지호그 비의존적 환자로 분류하는 단계.

본 발명에서 사용된 항체는 전형적으로 단일클론 항체이다.

상기 표지화 항체에서의 표지는 형광 표지, 염료, FRET 표지, 방사성활성 표지, 모이어티, 또는 효소적 활성 모이어티를 포함하는 군으로부터 선택된 표지에 대해, 생화학, 세포 생물학, 면역화학 등의 분야에서 항체 표지로 전형적으로 사용되는 임의 표지로부터 선택될 수 있다. 상기 효소적 활성 모이어티는 결과적으로 검출가능한 물질, 예를 들어 염료를 방출하게 되는 반응을 진행시킬 수 있다.

환자를 헤지호그 의존적 환자 및 헤지호그 비의존적 환자로 분류하는 상기 방법에서, 워크-업 단계는 예를 들어, 구체적인 구현예에서 보존, 임베딩(embedding), 슬라이싱 및 염색을 포함하는 군으로부터 선택된다. 보존은 냉동보존(cryopreservation) 또는 예를 들어 포름알데히드 또는 에탄올에 의한 고정에 의해서 실시될 수 있다. 종양 물질의 임베딩은, 이 종양 물질이 슬라이싱에 대해 준비되게 한다. 염색은 직접 또는 간접 방법을 사용하여 실시될 수 있다. 추가 정보 및 예에 대해서는 문헌(DOI: 10.1354/vp.42-4-405 J. A. Ramos-Vara, Technical Aspects of Immunohistochemistry, (2005) 42: 405 Vet Pathol)을 참고하기 바란다.

본 발명의 문맥에서, 표현 "상기 표지화 항체가 검출될 수 있음"은, 상기 표지를 검출하는데 사용된 최신 기술의 측정 방법에 의해서 상기 표지에 관련된 어떠한 신호도 검출될 수 없고/없거나, 상기 신호가 상기 측정 방법에 의해서 생성된 배경 소음에 비하여 두드러지지 않음을 의미한다.

환자를 헤지호그 의존적 환자 및 헤지호그 비의존적 환자로 분류하는 상기 방법에서, 세척 단계 4는, 단계 3으로부터의 결합되지 않고/않거나 비특이적으로 결합된 항체를 제거하기 위한 것이다. 구체적인 구현예에서, 상기 세척 단계는 완충제, 예를 들어 PBS 완충제, 및 임의로 혈청 단백질, 예를 들어 BSA로 세척하는 것을 포함한다. 세척 단계 4는 적합한 신호/소음 비를 얻도록 필요한 만큼, 예를 들어 2 이상, 3 이상, 4 이상의 횟수로 반복될 수 있다.

환자를 헤지호그 의존적 암 환자 및 헤지호그 비의존적 암 환자로 분류하는 상기 방법의 특정 구현예에서, 항체의 비특이적 결합에 의한 배경 신호는 이소타입(isotype) 대조에 의해서 제외된다. 이 대조는 단일클론 1차 항체를 사용하여 작업하는 경우에 사용될 수 있다. 상기와 같이 처리된 비교예 샘플을 항체 희석제와 함께 인큐베이션시키고, 여기에 상기 언급된 항체와 동일한 이소타입(예를 들어, IgG₁, IgG2_A, IgG2_B, IgM) 및 농도의 비-면역 면역글로불린을 보충시킨다. 그 후, 상기 샘플을 표지화 항체 및 검출 시약과 함께 인큐베이션시킨다. 이 단계는, 특이적 염색인 것으로 보여지는 것이 샘플과 면역글로불린 분자의 비-특이적 상호작용에 의해서 일어나지 않음을 확증하는 것을 도울 것이다. 이 방법의 예 및 추가 설명은 문헌("Tissue Microarrays - Methods in Molecular Biology Volume 664, 2010, pp 113-126, Immunohistochemical Analysis of Tissue Microarrays; Ronald Simon, Martina Mirlacher, and Guido Sauter")에서 확인할 수 있다.

본 발명의 문맥에서 평활화된 G 단백질-결합된 수용체는 "평활화된" 및 "Smo"로 교대로 약칭된다.

본 발명의 문맥에서, 표현 "헤지호그 신호화 경로의 활성화"는, 구체적으로 헤지호그 신호화 경로의 1차 표적 유전자, 예컨대 GLI, HHIP, Ptch의 발현, 보다 구체적으로는 헤지호그 경로를 통한 GLI 발현의 활성화를 지칭한다. 전형적으로, GLI 발현은 헤지호그의 Smo/Ptch(평활화/패치화) 복합체로의 결합을 통해서 및 그 후 GLI 발현은 Smo에 의한 신호화를 통해서 개시된다.

본 발명의 문맥에서, 헤지호그 신호화 경로에서 역할을 하는 상기 적어도 하나의 단백질은 예를 들어, 패치화, GLI, 평활화, HHIP, 헤지호그 및 SUFU를 포함하는 군으로부터 선택될 수 있다.

본 발명의 문맥에서, 용어 "GLI"는 구체적인 구현예에서 GLI 단백질 과의 성분, 예컨대 GLI1, GLI2, GLI3, 및 달리 특정되지 않으면 구체적으로 GLI1을 지칭한다.

일반적으로, 달리 특정되지 않으면, 특정 구현예에서 본원에서 정의된 단백질, 유전자 및/또는 유전자 발현 생성물은 또한, 본원에서 정의된 단백질, 유전자 및/또는 유전자 발현 생성물과 적어도 95% 서열 상동성, 보다 구체적으로 적어도 97% 서열 상동성, 훨씬 보다 구체적으로 적어도 99% 서열 상동성을 공유하는 상기 단백질, 유전자 및 유전자 발현 생성물의 변이체, 예컨대 그 동형, 동족체 및 돌연변이체를 포함하고, 특정 구현예에서 단백질 및/또는 유전자 발현 생성물의 경우에 본원에서 정의된 단백질 및/또는 유전자 발현 생성물과 본질적으로 동일한 효소 활성을 갖지만, 여기서 상기 변이체의 효소 활성은 100배 이하, 구체적으로는 10배 이하, 보다 구체적으로는 2배 이하만큼 본원에서 정의된 단백질, 및/또는 유전자 발현 생성물과 상이할 수 있다(즉, 더 높거나 더 낮을 수 있다).

본원에서 사용된 용어 "헤지호그 신호화 경로"는, 헤지호그 단백질로 공지된 과의 단백질, 예컨대 "소닉 헤지호그"(UniProtKB/Swiss-Prot: Q15465), "인디안 헤지호그"(UniProtKB/Swiss-Prot: Q14623) 및 "데저트 헤지호그"(UniProtKB/Swiss-Prot: O43323)(Ingham and McMahon, 2001)로 일반적으로 공지된 단백질과의 상호작용을 포함하는 세포성 신호화 경로를 의미한다.

본원에서 사용된 용어 "샘플"은 원칙적으로 천연 공급원으로부터의 샘플, 예컨대 포유동물로부터 얻을 수 있는 샘플, 및 천연 공급원으로부터 유래할 수 있거나 유래하지 않을 수 있고 예를 들어, 합성 및/또는 천연 단백질, 펩타이드, 올리고- 또는 폴리핵산 등을 포함하는 군으로부터 선택된 성분을 포함할 수 있는 여러 성분을 혼합시켜서 얻을 수 있는 인공 샘플을 포함한다. 특정 구현예에서, 샘플은 체액 및/또는 조직 샘플, 예컨대 포유동물로부터 얻을 수 있는 체액 및/또는 조직 샘플을 포함하는 천연 공급원으로부터의 것이다. 상기 천연 공급원으로부터의 샘플은 그 공급원, 예를 들어 포유동물로부터 얻은 후에 추가 가공하거나 추가 가공하지 않고 본 발명에 사용될 수 있다. 그러한 가공은 예를 들어, 분리, 분별, 희석, 분산, 기계적 처리, 예컨대 초음파, 또는 분쇄, 농축, 상기 샘플의 특정 성분의 제거, 또는 화합물, 예컨대 염, 완충제, 세제 등의 첨가를 포함할 수 있다.

본원에서 사용된 용어 "체액"은, 환자의 신체로부터 비롯되는 유체 또는 유체의 일부, 예컨대 환자의 신체로부터 배설되거나 분비되는 유체, 예컨대 비제한적으로 혈액, 예컨대 말초 혈액, 혈청, 혈장, 소변, 장액, 양수(liquor), 눈방수, 유리체액, 담즙, 모유, 뇌척수액, 내임파액, 외림프액, 정액, 위액, 점액, 복막액, 늑막액, 타액, 땀, 눈물 및 질 분비물, 구체적으로는 말초 혈액, 혈청, 혈장 및 소변을 특정한다. 상기 체액 자체는 질병화되고/되거나 비-질병화된 세포를 포함할 수 있거나 포함하지 않을 수 있다.

본원에서 사용된 용어 "조직 샘플"은, 환자 신체로부터 비롯되는 비-유체 물질 또는 고체를 특정한다. 조직 샘플은 비제한적으로 뼈 재료, 골수, 피부, 모낭, 점막, 뇌, 연골, 근육, 폐, 신장, 위, 소장, 방광 및 간을 포함한다. 상기 조직 샘플 자체는 질병화된 세포를 포함할 수 있거나 포함하지 않을 수 있고, 예를 들어 환자 신체의 질병화된 영역으로부터 취한 샘플, 예컨대 종양의 생검일 수 있다. 특정의 구현예에서, 조직 샘플은 피부, 모낭 또는 구강 점막으로부터 선택된다.

본 발명의 구현예에서, 샘플, 예를 들어 특정 구현예에서 정맥천자에 의해 취해진 혈액 샘플은 의학 분야에서의 당업자에게 일반적으로 공지된 임의 방법 및/또는 수단에 의해서 환자로부터 얻어진다.

본원에서 사용된 용어 "말초 혈액"은, 심장으로부터 먼 순환으로부터 얻어진 혈액, 즉 전신 순환되는 혈액, 예를 들어 말단 영역으로부터의 혈액을 특정한다.

본원에서 사용된 용어 "전혈"은, 상기 혈액의 공여자, 예컨대 환자로부터 얻어진, 세포 및 유체를 포함하는 변형되지 않은 혈액을 특정한다.

본원에서 사용된 용어 "소분자"는 약리학 분야에서 일반적으로 사용되는 것으로 이해되어야 하고, 중합체가 아니고 대개는 약 800 달톤 이하, 구체적으로 700 달톤 이하, 보다 구체적으로 600 달톤 이하, 훨씬 보다 구체적으로 500 달톤 이하의 분자량을 갖는 저분자량 유기 화합물을 의미한다. 기능성 측면에서, 소분자는 상기 분자가 세포 막을 가로질러 신속하게 확산될 수 있고/있거나 포유동물 세포의 내부에 도달될 수 있게 하는 분자량을 갖는다.

본 발명의 구체적인 구현예에서, 상기 암에서는 Wnt 신호화 경로가 활성화된다.

본 발명의 구체적인 구현예에서, 상기 암의 세포에서는 Wnt 신호화 경로가 활성화된다.

다수 암 유형이 비정상 Wnt 신호화 경로 활성과 관련된다. 아나스타스 및 문(Anastas and Moon)에 의해 고찰된 바와 같이(Nature Reviews Cancer, 2013, January, p. 11-26), 혈액 및 고체 종양, 예컨대 AML, ALL, 유방 암, 부신피질 암, 결장직장 암, 식도 암종, 위 암, 신경교아세포종, 폐 암, 전립선 암, 흑색종, HCC, 육종, 난소 암종, 췌장 암은 비정상 Wnt 신호화 경로를 나타낸다.

본 발명에서, 상기 암에서 또는 상기 암의 세포에서 Wnt 신호화 경로가 활성화되는 환자는 "Wnt 의존적 환자"로 간단히 지칭되고, 상기 암에서 또는 상기 암의 세포에서 Wnt 신호화 경로가 활성화되지 않는 환자는 "Wnt 비의존적 환자"로 간단히 지칭된다. 본 발명에서, 환자가 앓고 있는 암, 예컨대 아나스타스 및 문에 의해 상술된 암 유형이, 공지된 과학 문헌에 비정상 Wnt 신호화 경로 활성과 관련한 것으로 기재되어 있다면, 상기 환자는 예를 들어 Wnt 의존적 환자로 분류될 수 있다. 본 발명에서, 환자는 하기 단계를 포함하는 과정에 의해서 Wnt 의존적 환자 및 Wnt 비의존적 환자로 또한 분류될 수 있다:

2) 임의로 상기 샘플에 워크-업 단계를 실시하는 단계,

3) Wnt 신호화 경로에서 역할을 하는 적어도 하나의 단백질에 특이적으로 결합되는 표지화 항체를 첨가하거나,

Wnt 신호화 경로에서 역할을 하는 적어도 하나의 단백질에 특이적으로 결합되는 제1 항체를 첨가하고, 후속으로 상기 제1 항체에 특이적으로 결합되고 표지화 항체인 제2 항체를 첨가하는 단계,

4) 단계 3 후에 상기 샘플을 세척하는 단계,

6) 단계 5)에서 상기 마커 모이어티가 검출될 수 있으면, 상기 환자를 Wnt 의존적 환자로 분류하고, 단계 5)에서 상기 마커 모이어티가 검출될 수 없으면, 상기 환자를 Wnt 비의존적 환자로 분류하는 단계.

상기 환자는, 상기 환자의 암 세포를 포함하는 샘플을 제공하고, 상기 암 세포를 성장 배지 중에서 배양시키고, 상기 Wnt 억제제 처리되지 않은 상기 암 세포의 대조군과 비교하여 상기 암 세포의 성장이 공지된 Wnt 억제제에 의해 억제될 수 있는지를 비교함으로써 측정하여 Wnt 의존적 환자 및 Wnt 비의존적 환자로 추가로 분류될 수 있다.

상기 표지화 항체에서의 표지는 형광 표지, 염료, FRET 표지, 방사성활성 표지, 모이어티, 또는 효소적 활성 모이어티를 포함하는 군으로부터 선택된 표지에 대해서, 생화학, 세포 생물학, 면역화학 등의 분야에서 항체 표지로 전형적으로 사용되는 임의 표지로부터 선택될 수 있다. 상기 효소적 활성 모이어티는 결과적으로 검출가능한 물질, 예를 들어 염료를 방출하게 되는 반응을 진행시킬 수 있다.

환자를 Wnt 의존적 환자 및 Wnt 비의존적 환자로 분류하는 상기 방법에서, 워크-업 단계는 예를 들어, 구체적인 구현예에서는 보존, 임베딩, 슬라이싱 및 염색을 포함하는 군으로부터 선택된다. 보존은 냉동보존, 또는 예를 들어, 포름알데히드 또는 에탄올에 의한 고정에 의해서 실시될 수 있다. 종양 물질의 임베딩은 이 종양 물질이 슬라이싱에 대해 준비되게 한다. 염색은 직접 또는 간접 방법을 사용하여 실시될 수 있다. 추가 정보 및 예에 대해서는 문헌(DOI: 10.1354/vp.42-4-405 J. A. Ramos-Vara, Technical Aspects of Immunohistochemistry, (2005) 42: 405 Vet Pathol)을 참고하기 바란다.

환자를 Wnt 의존적 환자 및 Wnt 비의존적 환자로 분류하는 상기 방법에서, 세척 단계 4는, 단계 3으로부터의 결합되지 않고/않거나 비특이적으로 결합된 항체를 제거하기 위한 것이다. 구체적인 구현예에서, 상기 세척 단계는 완충제, 예를 들어 PBS 완충제, 및 임의로 혈청 단백질, 예를 들어 BSA로 세척하는 것을 포함한다. 세척 단계 4는 적합한 신호/소음 비를 얻도록 필요한 만큼, 예를 들어 2 이상, 3 이상, 4 이상의 횟수로 반복될 수 있다.

환자를 Wnt 의존적 암 환자 및 Wnt 비의존적 암 환자로 분류하는 상기 방법의 특정 구현예에서, 항체의 비특이적 결합에 의한 배경 신호는 이소타입(isotype) 대조에 의해서 제외된다. 이 대조는 단일클론 1차 항체를 사용하여 작업하는 경우에 사용될 수 있다. 이상과 같이 처리된 비교예 샘플을 항체 희석제와 함께 인큐베이션시키고, 여기에 상기 언급된 항체와 동일한 이소타입(예를 들어, IgG₁, IgG2_A, IgG2_B, IgM) 및 농도의 비-면역 면역글로불린을 보충시킨다. 그 후, 상기 샘플을 표지화 항체 및 검출 시약과 함께 인큐베이션시킨다. 이 단계는, 특이적 염색인 것으로 보여지는 것이 샘플과 면역글로불린 분자의 비-특이적 상호작용에 의해서 일어나지 않음을 확증하는 것을 도울 것이다. 이 방법의 예 및 추가 설명은 문헌("Tissue Microarrays - Methods in Molecular Biology Volume 664, 2010, pp 113-126 , Immunohistochemical Analysis of Tissue Microarrays; Ronald Simon, Martina Mirlacher, and Guido Sauter")에서 확인할 수 있다.

본 발명의 문맥에서, 표현 "Wnt 신호화 경로의 활성화"는 구체적으로, 예를 들어 c-myc, 사이클린 D, TCF1, LEF1, PPAR델타, c-jun, fra-1, MMP7, 악신2, ITF-2, CD44, BMP4, 서비빈, VEGF, FGF18,FGF9, FGF20, Jagged, DKK1,LGR5, SOX2, SOX9, 및 OCT4를 포함하는 군으로부터 선택된 Wnt 신호화 경로의 1차 표적 유전자 발현의 활성화를 지칭한다.

본 발명의 문맥에서, Wnt 신호화 경로에서 역할을 하는 상기 적어도 하나의 단백질은 예를 들어, 프리즐화(Frizzled) 수용체(구체적으로 FZD4, 5, 6, 7, ROR1, ROR2), Wnt 리간드(구체적으로 WNT1, 2, 3A, 5A, 7A), Wnt 억제 인자(구체적으로 WIF1), 분비된 프리즐화 관련 단백질(구체적으로 SFRP3, 4), 핵 ß-카테닌, 및 TCF/LEF 과 성분(구체적으로 LEF1, TCF7L2)을 포함하는 군으로부터 선택될 수 있다.

본원에서 사용된 용어 "Wnt 신호화 경로"는, Wnt 단백질(UniProtKB/Swiss-Prot: e.g. P56704, O00755, Q9GZT5, O00744, Q93098, P41221, Q93097, O14905, O14904, Q9UBV4, O96014, Q9H1J7, P56706, Q9Y6F9, Q9H1J5, P56705, P56703, P09544, 또는 P04628)로 공지된 과의 단백질과의 상호작용을 포함하는 세포성 신호화 경로를 의미한다.

일반적인 합성 과정

식 (Ia)의 아미드에 대해 예시되는, 본 발명의 화합물에 대한 합성 과정의 하기 설명에서, 존재하는 경우 잔기 X, L 및 Y는 상기 정의된 의미를 갖는다.

실시예

1. 전구체의 합성

1.1 N-(2,2-디플루오로벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)아세트아미드의 합성

무수 톨루엔(410 ml) 및 아세트산 무수물(16.2 ml, 1.15 eq.) 중의 5-아미노-2,2-디플루오로-1,3-벤조디옥솔(26.0 g, 150.186 mmol)의 용액을 100℃에서 2시간 동안 교반시켰다.

후속으로, 용매를 감압 하에서 제거하였다. 미정제 생성물을 100 ml 메탄올에 용해시켜서 미량의 아세트산 무수물을 제거하였다. 이어서 용매를 증발시켰다. 수득된 미정제 생성물을 톨루엔으로부터 재결정화하였다. 수득된 생성물을 여과하고 고 진공 하에서 건조시켜서 회색빛-베이지색 결정(30.5 g, 92.5% 수율, 98% 순도)을 수득하였다.

¹H NMR(DMSO-d₆ + CCl₄): 2.04(3H, s, CH₃), 7.20-7.23(1H, dd, CH-arom.), 7.30-7.33(1H, s, CH-arom.), 7.74-7.75(1H, d, CH-arom.), 10.12(1H, s, NH).

1.2 N-(2,2-디플루오로-6-니트로벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)아세트아미드의 합성

N-(2,2-디플루오로벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)아세트아미드(11.39 g, 52.938 mmol)를 빙초산(50.4 ml)에 용해시켰다. 생성되는 혼합물에 빙초산(20.2 ml, 0.28 eq.) 중의 발연 질산(6.1 ml, 3.35 eq.)의 혼합물을 적가하였다. 첨가 후에, 반응 혼합물을 실온에서 22시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 60℃에서 밤새 교반시켰다.

후속으로, 반응 혼합물을 얼음과 물의 혼합물에 부었다. 생성되는 침전물을 흡입 여과로 여과하였다. 그 후, 미정제 생성물을 실리카 겔 플래쉬 컬럼 상에서의 컬럼 크로마토그래피(용리제 DCM:MeOH 95:5)로 정제하였다. 생성물을 단리시키고 진공에서 농축시켜서 황색 고체(6.7 g, 49% 수율, 100% 순도)를 수득하였다.

¹H NMR(DMSO-d₆ + CCl₄): 2.09(3H, s, CH₃), 7.76(1H, s, CH-arom.), 8.15(1H, s, CH-arom.), 10.33(1H, s, NH).

1.3 2,2-디플루오로-6-니트로벤조[d][1,3]디옥솔-5-아민의 합성

N-(2,2-디플루오로-6-니트로벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)아세트아미드(6.76 g, 25.985 mmol)를 메탄올(676 ml)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. 그 후, 나트륨 메틸레이트(메탄올 중의 약 25%)(30.3 ml, 5 eq.)를 첨가하고, 생성되는 혼합물을 0℃에서 20분 동안 및 후속으로 5℃에서 25분 동안 교반시켰다. 그 후, 빙초산(37.2 ml, 25 eq.)을 첨가하여 반응을 중단시켰다.

용매를 감압 하에서 제거하였더니, 액체-오일성 잔여물이 형성되었다. 잔여 빙초산과 함께 용매의 마지막 미량흔을 톨루엔을 사용한 2배 동시증발로 제거하였다. 톨루엔을 첨가하자 마자, 백색 고체가 침전되었는데, 이것을 흡입 여과로 여과하였다. 여액을 진공에서 농축시키고 감압 하에서 건조시켰다. 미정제 생성물을 실리카 겔 플래쉬 컬럼 상에서의 컬럼 크로마토그래피(용리제 DCM:MeOH 95:5)로 정제하였다. 동일한 용리제 조건 아래에서 박층 크로마토그래피로 관찰된 제1 스팟(spot)을 단리시키고, 생성물 함유 분획을 수거하고, 진공에서 농축시키고, 건조시켜 오렌지색 분말을 수득하였다.

¹H NMR(DMSO-d₆; CCl₄): 6.95(1H, s, CH-arom.), 7.79(2H, s, NH₂), 7.95(1H, s, CH-arom.).

1.4 2,2-디플루오로벤조[d][1,3]디옥솔-5,6-디아민의 합성

2,2-디플루오로-6-니트로벤조[d][1,3]디옥솔-5-아민(770 mg, 3.53 mmol)을 아르곤 분위기 하에서 무수 메탄올(100 ml)에 용해시키고, 촉매로 라니 니켈을 사용하여 실온에서 1시간 동안 수소화시켰다.

반응 혼합물을 셀라이트(CELLITE)® 상에서 여과하고 메탄올로 세척하였다. 용매를 증발시키고 진공에서 농축시켰다. 보라색 고체가 침전되었고 이것을 감압 하에서 건조시켰다. 미정제 회색빛 생성물(530 mg, 53% 수율)을 실리카 겔 플래쉬 컬럼 상에서의 컬럼 크로마토그래피(용리제 DCM:MeOH 95:5)로 정제하였다. 선택된 분획을 합하고 진공에서 농축시켰다. 미정제 생성물을 에탄올 중의 1.25 M 염화수소 용액, 및 과량의 에틸 아세테이트를 사용하여 히드로클로라이드로서 침전시켰다. 생성되는 현탁액을 밤새 교반시켰다. 후속으로, 고체를 여과하였다. 그 후, 수득된 2,2-디플루오로벤조[d][1,3]디옥솔-5,6-디아민 히드로클로라이드를 물에 용해시키고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 수성 층을 pH 8 내지 10으로 알칼리화시키고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 그 후, 유기 층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고 진공에서 농축시키고 건조시켜서 갈색 고체(98% 순도)를 수득하였다.

¹H NMR(DMSO-d₆ + CCl₄): 4.52(4H, s, 2 x NH₂), 6.52(2H, s, CH-arom.).

1.5 2,2-디플루오로-5H-[1,3]디옥솔로[4',5':4,5]벤조[1,2-d]이미다졸-6-아민 히드로브로마이드(II)의 합성

무수 메탄올(98 ml) 중의 5,6-디아미노-2,2-디플루오로-1,3-벤조디옥솔(4.91 g, 0.0261 mol)의 용액에 브롬화 시아노겐(3.23 g, 1.3 eq.)을 첨가하였다. 반응 혼합물 실온에서 밤새 교반시켰다.

반응 혼합물을 후속으로 진공에서 농축시켰다. 그 후, 잔여물을 디클로로메탄으로 세척하고 침전물을 여과하고 건조시켜서 갈색 고체(6.72 g, 88% 수율, 98% 순도)를 수득하였다.

¹H NMR(DMSO-d₆ + CCl₄): 7.47(2H, s, 2 x CH-arom.), 8.46(2H, s, NH₂), 12.58(1H, s, NH).

2. 최종 화합물 (I)의 합성

2.1 일반적 과정 1

무수 DMF, 디옥산 또는 디클로로메탄, 구체적으로는 무수 DMF(디메틸포름아미드)(3~10 ml) 중의 II(1~2 eq.)의 용액에 IV(1 mmol)를 첨가하였다. HBTU(2-(1H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트)(1~1.4 eq.), DIPEA(N,N-디이소프로필에틸아민)(1~5 eq.) 또는 트리에틸아민(5 eq.), 구체적으로는 DIPEA, 및 임의로 DMAP(4-디메틸아미노피리딘)(0.1 eq.)를 또한 상기 반응 혼합물에 첨가하였다. 반응 온도는 대개 실온 내지 85℃의 범위, 구체적으로는 실온이었다. 반응을 대개는 밤새(본원에서 사용된 경우 이것은 반응 속도에 따라서 대략 12 내지 24 시간의 지속기간을 특정한다) 진행시켰다.

반응을 완료한 후에, 반응 용액에 하기한 것을 포함하는 하나 이상의 후처리를 실시하였다:

A) 유기 용매를 사용한 추출: 반응으로부터 얻어진 잔여물을 유기 용매(예컨대 에틸 아세테이트 또는 디클로로메탄)에 용해시키고, 이것을 수성 5% NaHCO₃, 수성 5% 시트르산 및 물로 적어도 1회 세척하였다. 유기 층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고 진공에서 농축시켰다.

B) 크로마토그래피: 반응으로부터 얻어진 미정제 생성물을 소정의 용리제 비율을 사용하여 실리카 겔 플래쉬 컬럼 상에서의 컬럼 크로마토그래피에 의해, 분취 TLC(박층 크로마토그래피) 또는 분취 HPLC(고압 액체 크로마토그래피)로 정제하였다. 반응을 완료한 후에, 미정제 생성물을 실리카 겔 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(CHCl₃/EtOH = 80:1 + 1 방울의 HOAc)로 정제하였다.

C) 재결정화: 미정제 생성물을 (활성탄을 사용하여) 에탄올로부터 결정화하였다.

D) 침전: 반응을 완료한 후에, 반응 혼합물을 물, 헥산 또는 수성 Na₂CO₃-용액으로 희석시키고/시키거나 얼음물에 붓고 형성된 침전물을 여과하였다.

E) 세척: 수득된 고체(예를 들어, 여과에 의해 수득됨)를 물, 수성 HCl 또는 Na₂CO₃-용액 및/또는 유기 용매로 세척하였다.

F) 현탁화 후에 여과: 미정제 생성물을 Et₂O(디에틸에테르)에 현탁시키고 여과하고 건조시켰다.

G) 중화 및 회수: 반응을 완료한 후에, 용매를 진공에서 증발시키고, 물을 첨가하고, 침전물을 형성시켰다. 수성 3% 암모니아 용액, 또는 대안적으로 탄산수소나트륨 용액을 pH = 8까지 상기 현탁액에 첨가하였다. 30분 동안 교반시킨 후에, 침전물을 여과하거나 용해된 생성물을 추출하였다.

2.2 N-(2,2-디플루오로-5H-[1,3]디옥솔로[4',5':4,5]벤조[1,2-d]이미다졸-6-일)-2-(2-(트리플루오로메톡시)벤즈아미도)티아졸-4-카르복스아미드(1)의 합성

2,2-디플루오로-5H-[1,3]디옥솔로[4',5':4,5]벤조[1,2-d]이미다졸-6-아민(3.28 mmol) 및 2-(2-(트리플루오로메톡시)벤즈아미도)티아졸-4-카르복실산(3.28 mmol)을 무수 디메틸포름아미드에 용해시키고, 2-(1H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트(HBTU)(3.28 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(DIPEA)(6.55 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 85℃에서 16시간 동안 교반시켰다. 그 후, 반응 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 잔여물을 EtOAc에 용해시키고 수성 5% 탄산수소나트륨 용액, 수성 5% 시트르산 용액 및 물로 세척하였다. 유기 층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고 진공에서 농축시켰다. 생성물을 석유 에테르/에틸 아세테이트를 사용하여 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. ¹H NMR(DMSO + d₆; CCl₄): 7.48(2H, s, CH-arom.), 7.54-7,59(2H, m, CH-arom.), 7.70-7.76(1H, m, CH-arom.), 7.80-7.83(1H, dd, CH-arom.), 8.35(1H, s, CH-티아졸), 11.14(1H, s, NH), 12.49(1H, s, NH), 13.12(1H, s, NH).

2.3 일반적 과정 2

II(1~1.5 eq.)를 무수 피리딘(1~3 ml) 중의 IV(1 eq.)의 현탁액에 첨가하였다. 생성되는 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다.

반응을 완료한 후에, 반응 용액에 필요한 경우 상기 정의된 것과 같은 후처리를 실시하였다.

2.4 N-(2,2-디플루오로-5H-[1,3]디옥솔로[4',5':4,5]벤조[1,2-d]이미다졸-6-일)벤즈아미드(49)의 합성

벤조일클로라이드(0.179 g, 1.5 eq.)를 무수 피리딘(3 ml) 중의 IV(0.25 g, 0.85 mmol)의 현탁액에 첨가하였다. 생성되는 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 반응 혼합물을 물(20 ml)로 희석하고, 형성된 침전물을 여과하고, 물로 세척하고, 에탄올로부터 재결정화하여 순수 생성물(0.1 g, 37% 수율)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, DMSO-d₆ + CCl₄): 7.32(2H, s, CH-arom.), 7.44-7.54(2H, m, CH-arom.), 7.54-7.64(1H, m, CH-arom.), 8.13(2H, d, CH-arom.), 12.29(2H, s, NH).

2.5 일반적 과정 3

I(1~1.5 eq.)을 2시간 동안 SOCl₂(3~5 ml) 중에서 환류시켰다. 과량의 SOCl₂를 진공에서 증발시키고, 피리딘(3 ml)을 생성되는 잔여물에 첨가하였다. 그 후, 상기 혼합물을 10분 동안 교반시키고, IV(1 mmol)를 첨가하고, 생성되는 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 반응을 완료한 후에, 반응 용액에 필요한 경우 상기 정의된 것과 같은 후처리를 실시하였다.

2.6 N-(2,2-디플루오로-5H-[1,3]디옥솔로[4',5':4,5]벤조[1,2-d]이미다졸-6-일)-4-메틸-1,2,3-티아디아졸-5-카르복스아미드(42)의 합성

4-메틸-1,2,3-티아디아졸-5-카르복실산(0.105 g, 1.43 eq.)을 2시간 동안 SOCl₂(4 ml) 중에서 환류시켰다. 과량의 SOCl₂를 진공에서 증발시키고 피리딘(3 ml)을 생성되는 잔여물에 첨가하였다. 수득된 혼합물을 10분 동안 교반시키고, 2,2-디플루오로-5H-[1,3]디옥솔로[4',5':4,5]-벤조[1,2-d]이미다졸-6-아민 히드로브로마이드(0.15 g, 0.51 mmol)를 첨가하고, 밤새 교반을 계속하였다. 그 후, 물(25 ml)을 첨가하고 생성되는 현탁액을 1시간 동안 교반시켰다. 수득된 침전물을 여과하고, 물로 세척하고, 건조시키고, (활성탄을 사용하여) 에탄올로부터 재결정화하여 순수 고체(90 mg, 52% 수율)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, DMSO + CCl₄): 2.96(3H, s, CH₃), 7.33(2H, s, CH-벤즈이미다졸), 12.78(2H, s, NH).

2.7 일반적 과정 4

V(1~1.5 eq.)를 DCE(1,2-디클로로에텐)(15 ml) 중의 화합물 65(1 mmol)의 현탁액에 첨가하고 혼합물을 1시간 동안 교반시켰다. 그 후, 나트륨 트리아세톡시 보로히드라이드(2 eq.) 및 아세트산(0.5~2 ml)을 첨가하고, 반응 혼합물을 2일 동안 교반시켰다. 반응을 완료한 후에, 반응 용액에 필요한 경우 상기 정의된 것과 같은 후처리를 실시하였다.

2.8 N-(2,2-디플루오로-5H-[1,3]디옥솔로[4',5':4,5]벤조[1,2-d]이미다졸-6-일)-4-(에틸아미노)벤즈아미드(77)의 합성

아세트알데히드(0.013 ml, 1.1 eq.)를 DCE(15 ml) 중의 화합물 65(0.07 g, 0.21 mmol)의 현탁액에 첨가하고 상기 혼합물을 1시간 동안 교반시켰다. 그 후, 나트륨 트리아세톡시 보로히드라이드(0.089 g, 2 eq.) 및 아세트산(0.3 ml)을 첨가하고 반응 혼합물을 2일 동안 교반시켰다. 그 후, 혼합물을 수성 10% 탄산수소나트륨 용액으로 중화시키고, 디클로로메탄으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 MgSO₄ 상에서 건조시키고 여과하고 진공에서 농축시켰다. 잔여물을 실리카 겔 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(CHCl₃/EtOH = 80:1 + 1 방울의 HOAc)로 정제하여 순수 생성물(20.3 mg, 39% 수율)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, DMSO-d₆): 1.24(3H, t, CH₃), 3.16(2H, q, CH₂), 6.29(1H, s, NH), 6.57(2H, d, CH-arom.), 7.32(2H, s, CH-벤즈이미다졸), 7.93(2H, d, CH-arom.), 11.48(1H, s, NH), 12.40(1H, s, NH)

3. 최종 화합물의 합성을 위한 대안적인 과정

3.1 N-(2,2-디플루오로-5H-[1,3]디옥솔로[4',5':4,5]벤조[1,2-d]이미다졸-6-일)-5-(2,3-디히드로벤조푸란-5-일)티오펜-3-카르복스아미드(38)의 합성

화합물 29(0.1 g, 0.2486 mmol) 및 (2,3-디히드로벤조푸란-5-일)붕산(0.612 g, 1.5 eq)을 DME(1,2-디메톡시에탄)에 현탁시켰다. 테트라키스(트리페닐포스핀)-팔라듐(0)(0.03 g, 0.2 eq) 및 수성 2M Na₂CO₃ 용액(0.5 ml, 4 eq.)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 20시간 동안 교반시키고 나서, 에틸 아세테이트에 용해시키고 물로 2회 세척하였다. 유기 층을 진공에서 농축시키고, 잔여물을 메탄올에 용해시키고 분취 HPLC로 정제하여 순수 생성물(4 mg, 4% 수율)을 수득하였다.

3.2 N-(2,2-디플루오로-5H-[1,3]디옥솔로[4',5':4,5]벤조[1,2-d]이미다졸-6-일)시클로헥산카르복스아미드(80)의 합성

IV(0.06 g, 0.2 mmol)를 2일 동안 DIPEA(0.1 ml, 0.57 eq.)의 존재 하에서 시클로헥산카르보닐 클로라이드(32 μl, 1.1 eq.)와 함께 클로로포름 중에서 환류시켰다. 후속으로, 용매를 증발시키고 잔여물을 실리카 겔 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(용리제: 에틸 아세테이트)로 정제하여 순수 생성물(0.04 g, 61% 수율)을 수득하였다. ¹H-NMR(400 MHz, DMSO-d₆): 1.26-1.35(5H, m, CH₂), 1.38-1.42(1H, m, CH₂), 1.51-1.86(4H, m, CH₂), 3.07-3.45(1H, m, CH), 7.18(1H, s, CH-arom.), 7.31(1H, s, Ch-arom.), 11.36(1H, s, NH), 12.11(1H, s, NH).

3.3 4-아미노-N-(2,2-디플루오로-5H-[1,3]디옥솔로[4',5':4,5]벤조[1,2-d]이미다졸-6-일)벤즈아미드(60)의 합성

N-(2,2-디플루오로-5H-[1,3]디옥솔로[4',5':4,5]벤조[1,2-d]이미다졸-6-일)-4-니트로벤즈아미드(0.32 g, 0.88 mmol)를 에탄올(20 ml)에 현탁시키고, 히드라진 수화물(0.3 ml) 및 Pd/C(0.16 g)를 상기 현탁액에 첨가하고, 혼합물을 1.5 시간 동안 환류시켰다. 그 후, 촉매를 여과하고; 용액을 건조 상태가 될 때까지 진공에서 증발시켰다. 잔여물을 물로 세척하여 순수 생성물(0.23 g, 79% 수율)을 수득하였다. NMR ¹H(400 MHz, DMSO-d₆): 5.68(2H, s, CH-arom.), 6.68(2H, d, CH-arom.), 7.24(2H, s, NH₂), 7.86(2H, d, CH-arom.), 11.37(1H, s, NH), 12.31(1H, s, NH).

4. 중간체의 합성

4.1 에틸 2-(2-(트리플루오로메톡시)벤즈아미도)티아졸-4-카르복실레이트의 합성

무수 THF(300 ml) 중의 에틸 2-아미노티아졸-4-카르복실레이트(12 g, 70 mmol, 1 eq.)의 용액에 DIPEA(250 ml, 209 mmol, 3 eq.)를 첨가하였다. 그 후, THF(50 ml) 중의 2-(트리플루오로메톡시)-벤조일 클로라이드(19 g, 84 mmol, 1.2 eq.)의 용액을 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 24시간 동안 교반시켰다. 그 후, 물(50 ml)을 첨가하고 THF를 감압 하에서 제거하였다. 수득된 잔여물을 DCM(디클로로메탄)으로 추출하였다. 유기 층을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축시켰다. 잔여물을 실리카 겔 상에서의 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(PE/EtOAc 80:20)로 정제하였다. 생성물을 백색 고체(12 g, 33 mmol, 48 % 수율)로 수득하였다. ¹H NMR(DMSO-d₆): 1.28-1.33(3H, t, CH₃), 4.26-4.33(2H, q, CH₂), 7.51-7.57(2H, m, CH-arom.), 7.68-7.74(1H, m, CH-arom.), 7.78-7.81(1H, dd, CH-arom.), 8.14(1H, s, CH-티아졸), 13.11(1H, s, NH).

4.2 2-(2-(트리플루오로메톡시)벤즈아미도)티아졸-4-카르복실산의 합성

에틸 2-(2-(트리플루오로메톡시)벤즈아미도)티아졸-4-카르복실레이트(10 g, 28 mmol, 1 eq.)를 THF(20 ml)에 용해시키고 수성 2M NaOH 용액(110 ml)을 실온에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 24시간 동안 교반시켰다. 그 후, THF를 감압 하에서 제거하였다. 잔여 수성 상을 15% 수성 HCl을 사용하여 pH=1~2로 산성화시켰다. 침전물을 여과로 수거하고 물로 세척하고 건조시켰다. 생성물을 백색 고체(10.4 g, 31 mmol, 수율 > 90%)로 수득하였다. ¹H NMR(DMSO-d₆): 7.51-7.57(2H, m, CH-arom.), 7.68-7.74(1H, m, CH-arom.), 7.78-7.81(1H, dd, CH-arom.), 8.06(1H, s, CH-티아졸), 13.01(1H, s, NH).

4.3 에틸 2-((4-메틸-6-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)아미노)티아졸-4-카르복실레이트의 합성

에틸 2-(디아미노메틸렌아미노)티아졸-4-카르복실레이트(2 g, 9,3 mmol, 1 eq.)를 EtOH(200 ml)에 용해시키고 1,1,1-트리플루오로펜탄-2,4-디온(1.2 ml, 9.3 mmol, 1 eq.)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 환류 하에 3.5 시간 동안 교반시켰다. 그 후, 침전물이 형성될 때까지 EtOH를 감압 하에서 부분적으로 제거하였다. 침전물을 여과로 수거하고 EtOH로 세척하고 건조시켰다. 생성물을 연황색 고체(2.2 g, 6.6 mmol, 71% 수율)로 수득하였다. ¹H NMR(DMSO-d₆): 1.28-1.33(3H, t, CH₃), 2.58(3H, s, CH₃), 4.25-4.32(2H, q, CH₂), 7.45(1H, s, CH-피리미딘), 8.04(1H, s, CH-티아졸), 12.39(1H, s, NH).

4.4 2-((4-메틸-6-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)아미노)티아졸-4-카르복실산의 합성

에틸 2-(4-메틸-6-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일아미노)티아졸-4-카르복실레이트(2.18g, 6.56mmol, 1 eq.) 및 LiOH(550 mg, 13.1 mmol, 2 eq.)를 MeOH와 물의 혼합물(52 ml : 18 ml)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 그 후, 반응 혼합물을 수성 10% HCl 용액을 사용하여 pH=2로 산성화시켰다. 그 후, MeOH를 감압 하에서 제거하였다. 형성된 침전물을 여과로 수거하여 생성물을 연황색 고체(2 g, 6.5 mmol, 99% 수율)로 수득하였다. ¹H NMR(DMSO-d₆): 2.64(3H, s, CH₃), 7.50(1H, s, CH-피리미딘), 8.03(1H, s, CH-티아졸), 12.39(1H, s, NH).

4.5 에틸 2-((2,6-디메톡시피리미딘-4-일)아미노)티아졸-5-카르복실레이트의 합성

1-(2,6-디메톡시피리미딘-4-일)티오우레아(6.133 g, 28.626 mmol)를 무수 DMF에 현탁시켰다. 브로모 피루베이트(6.699 g, 34.351 mmol)를 무수 DMF에 용해시키고 이것을 상기 혼합물에 적가하였다. 현탁액을 여과하고 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 혼합물을 진공에서 농축시켜서 생성물을 황색 고체(12.9 g, 수율: >100%)로 수득하였다. LC/MS [M+H]⁺: 310.96

4.6 2-((2,6-디메톡시피리미딘-4-일)아미노)티아졸-5-카르복실산의 합성

에틸 2-((2,6-디메톡시피리미딘-4-일)아미노)티아졸-5-카르복실레이트(9.0 g, 29 mmol)를 EtOH(100 ml)에 현탁시키고 2N NaOH(50 ml)를 첨가하고 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반시켰다. 침전물이 형성되었다. 추가로 2N NaOH(40 ml)를 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반시켰다. 혼합물을 진공에서 농축시켰다. HCl(2 N)을 첨가하자 마자 침전물이 형성되었는데, 이것을 여과하고 물로 세척하였다. 침전물을 진공에서 건조시켜서 11.58 g(89% 수율)의 순수 생성물을 수득하였다. LC/MS [M+H]⁺: 284.36

4.7 에틸 5-(2-(트리플루오로메톡시)벤즈아미도)-1,2,4-티아디아졸-3-카르복실레이트의 합성

2-(트리플루오로메톡시)벤조일 클로라이드(1.1 g, 6.5 mmol, 1 eq.)를 THF(130 ml)에 용해시키고 2-(트리플루오로메톡시)벤조일 클로라이드(1.5 g, 6.5 mmol, 1eq.) 및 DIPEA(1.1 ml, 6.5 mmol, 1 eq.)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반시켰다. 후속으로, 모든 휘발물질을 감압 하에서 제거하였다. 수득된 잔여물을 얼음물로 분쇄시켰다. 형성된 침전물을 여과로 수거하고 건조시켰다. 미정제 생성물을 실리카 겔 상에서의 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH 95:5)로 정제하였다. 생성물을 연황색 고체(1.05 g, 2.9 mmol, 45% 수율)로 수득하고 이것을 그 자체로 추가로 사용하였다. LC/MS [M+H]⁺: 361.86; ¹H NMR(DMSO-d₆): 1.31-1.36(3H, t, CH₃), 4.34-4.41(2H, q, CH₂), 7.56-7.58(2H, m, CH-aromat), 7.75-7.81(1H, m, CH-aromat), 7.88-7.92(1H, dd, CH-aromat), 13.97(1H, s, NH).

4.8 5-(2-(트리플루오로메톡시)벤즈아미도)-1,2,4-티아디아졸-3-카르복실산의 합성

에틸 5-(2-(트리플루오로메톡시)벤즈아미도)-1,2,4-티아디아졸-3-카르복실레이트(1 g, 2.9 mmol, 1 eq.) 및 LiOH(244 mg, 5.8 mmol, 2 eq.)를 EtOH와 H₂O의 혼합물(3:1)(40ml)에 용해시키고 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 그 후 혼합물을 수성 10% HCl 용액을 사용하여 pH=5로 산성화시켰다. 그 후, 반응 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 얼음조를 사용하여 냉각시킨 후에, 침전물이 형성되었고, 이것을 여과하고 물로 세척하고 진공에서 건조시켰다. 생성물을 백색 고체(638 mg, 1.9 mmol, 66% 수율)로 수득하였다. LC/MS [M+H]⁺: 333.87

4.9 에틸 2-(2,3-디히드로벤조푸란-5-일)옥사졸-4-카르복실레이트의 합성

2-클로로-옥사졸-4-카르복실산 에틸 에스테르(1.5 g, 8.5 mmol, 1 eq.) 및 2,3-디히드로-1-벤조푸란-5-일붕산(2.1 g, 12.8 mmol, 1.5 eq.)을 DME(170 ml)에 현탁시켰다. 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0)(987 mg, 0.85 mmol, 0.1 eq.) 및 수성 2M 탄산나트륨 용액(17.1 ml, 34.2 mmol, 4 eq.)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 6시간 동안 교반시켰다. 그 후, DME를 감압 하에서 제거하였다. 수득된 잔여물을 EtOAc 내에 용해시키고 물로 3회 세척하였다. 유기 층을 MgSO₄ 상에서 건조시키고 여과하고 진공에서 농축시켰다. 수득된 미정제 생성물을 실리카 겔 상에서 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(PE/EtOAc 9:1 내지 8:2)로 정제하였다. 생성물 함유 분획을 수거하고 진공에서 농축시켰다. 생성물을 황색 오일(472 mg, 순도: 약 50%)로 수득하였다. LC/MS [M+H]⁺: 259.10

4.10 2-(2,3-디히드로벤조푸란-5-일)옥사졸-4-카르복실산의 합성

THF와 H₂O의 혼합물(2:1; 15 ml) 중의 에틸 2-(2,3-디히드로벤조푸란-5-일)옥사졸-4-카르복실레이트(472 mg, 1.8 mmol, 1 eq.)의 용액에 실온에서 LiOH(402 mg, 9.6 mmol, 5 eq.)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반시켰다. 그 후, 반응 혼합물을 진공에서 농축시키고 물(50 ml)과 Et₂O(50 ml) 사이에 분배시켰다. 수성 층을 수성 1 M HCl 용액을 사용하여 pH 2~3으로 산성화시켰다. 생성되는 수성 층을 EtOAc로 2회 추출하였다. EtOAc를 사용한 추출로부터 얻어진 유기 층을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 생성물을 갈색 결정형 고체(168 mg, 0.7 mmol, 40% 수율)로 수득하였다. LC/MS [M+H]⁺: 231.87

4.11 에틸 2-(3-(2-(트리플루오로메톡시)페닐)우레이도)티아졸-4-카르복실레이트의 합성

무수 DCM(20 ml) 중의 에틸 2-아미노티아졸-4-카르복실레이트(1 g, 5.8 mmol, 1 eq.)의 용액에 무수 DCM(10 ml) 중의 1-이소시아네이토-2-(트리플루오로메톡시)벤젠(1.2 g, 5.8 mmol, 1 eq.)의 혼합물을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반시켰다. 형성된 침전물을 여과로 수거하고 DCM으로 세척하고 건조시켰다. 생성물을 백색 고체(1.9 g, 5 mmol, 86% 수율)로 수득하였다. LC/MS [M+H]⁺: 376.12

4.12 2-(3-(2-(트리플루오로메톡시)페닐)우레이도)티아졸-4-카르복실산의 합성

무수 디옥산(10 ml) 중의 에틸 2-(3-(2-(트리플루오로메톡시)페닐)우레이도)티아졸-4-카르복실레이트(1.5 g, 4.11 mmol, 1 eq.)의 용액에 0℃에서 수성 2M NaOH 용액(2.3 ml, 4.5 mmol, 1.1 eq.)을 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 8시간 동안 교반시켰다. 수성 2M HCl 용액(2.3 ml)을 첨가한 후에, 고체가 침전되었다. 상기 고체를 여과로 수거하고 물로 세척하고 건조시켰다. 생성물을 백색 고체(1.4 g, 3.9 mmol, 95% 수율)로 수득하였다. LC/MS [M+H]⁺: 348.06

4.13 메틸 3-(2-(트리플루오로메톡시)벤즈아미도)-1H-1,2,4-트리아졸-5-카르복실레이트의 합성

2-(트리플루오로메톡시)벤조일 클로라이드(0.26 ml, 1.2 eq.)를 피리딘(3 ml) 중의 메틸 3-아미노-1H-1,2,4-트리아졸-5-카르복실레이트(0.22 g, 1.4 mmol)의 현탁액에 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 그 후, 상기 혼합물을 물(20 ml)로 희석시키고 30분 동안 교반시켰다. 무색 오일이 형성되었다. 물/피리딘 용액을 경사분리하고 잔여 오일을 헥산으로 처리하여 0.167 g의 무색 침전물을 수득하였는데, 이것을 후속의 합성 단계에서 추가 특성화 없이 사용하였다.

4.14 3-(2-(트리플루오로메톡시)벤즈아미도)-1H-1,2,4-트리아졸-5-카르복실산의 합성

에탄올, 물 및 수산화칼륨의 혼합물(15 ml/15 ml/0.15 g) 중의 메틸 3-(2-(트리플루오로메톡시)벤즈아미도)-1H-1,2,4-트리아졸-5-카르복실레이트(0.16 g)의 용액을 15분 동안 환류시켰다. 에탄올을 후속으로 제거하였다. 생성되는 용액을 물로 희석시키고 pH = 3까지 HCl로 중화시켰다. 무색 침전물을 여과하고 물로 세척하여 0.117 g의 순수 생성물을 수득하였다. NMR ¹H(400 MHz, DMSO-d₆): 7.41(1H, d, CH-arom.), 7.49(1H, t, CH-arom.), 7.65(1H, t, CH-arom.), 7.73(1H, d, CH-arom.), 12.29(1H.s, NH), 12.98(1H, s, OH), 14.03(1H, s, NH).

4.15 에틸 5-아세트아미도-1H-1,2,4-트리아졸-3-카르복실레이트의 합성

아세트산 무수물 중의 에틸 5-아미노-1H-1,2,4-트리아졸-3-카르복실레이트의 현탁액을 30분 동안 환류시켰다. 과량의 아세트산 무수물을 증발시켰다. 물을 잔여물에 첨가하고 혼합물을 밤새 교반시켰다. 무색 생성물을 여과하고 물로 세척하고 건조시켜서 0.134 g(53% 수율)의 생성물을 수득하였다. ¹H-NMR(40 MHz, DMSO-d₆): 1.35(3H. t. OCH₂CH₃), 2.12(3H, s, COCH₃), 4.3(2H, q, OCH₂CH₃), 11.71(1H, s, NHCO), 13.74(1H, s, NH-트리아졸).

4.16 5-아세트아미도-1H-1,2,4-트리아졸-3-카르복실산의 합성

NaOH/H₂O(0.079 g/5 ml) 중의 에틸 5-아세트아미도-1H-1,2,4-트리아졸-3-카르복실레이트(0.13 g, 0.66 mmol)의 용액을 6시간 동안 교반시켰다. 그 후, 상기 용액을 진한 염산을 사용하여 pH = 2로 산성화시키고 무색 침전물을 여과하고 건조시켜서 순수 생성물(0.076 g, 69% 수율)을 수득하였다. ¹H-NMR(40 MHz, DMSO-d₆): 2.12(3H,s, COCH₃), 11.65(1H, s, NHCO), 13.67(1H, s, NH-트리아졸).

4.17 (6-아미노-2,2-디플루오로-5H-[1,3]디옥솔로[4',5':4,5]벤조[1,2-d]이미다졸-5-일)(1-메틸-1H-피롤-2-일)메타논의 합성

상기 화합물을 상술된 바와 같이 상기 언급된 일반적인 합성 프로토콜 1, D 및 C에 의해서 합성하였다.

다른 카르복실산 유도체를, 예시적인 합성 프로토콜로 이해되어야 하는 상기 언급된 합성 프로토콜과 유사하게 합성하였다.

5. 최종 화합물의 합성을 위한 대안적인 과정

5.1 4-아미노-N-(2,2-디플루오로-5H-[1,3]디옥솔로[4',5':4,5]벤조[1,2-d]이미다졸-6-일)-1H-피롤-2-카르복스아미드( 15B )의 합성

N-(2,2-디플루오로-5H-[1,3]디옥솔로[4',5':4,5]벤조[1,2-d]이미다졸-6-일)-4-니트로-1H-피롤-2-카르복스아미드(XX)(110.0 mg, 0.313 mmol)를 10 ml 메탄올에 용해시키고 탄소상 팔라듐(10%/C, 53.33 mg, 0.501 mmol)을 첨가하였다. 그 후, 반응 플라스크를 수소로 퍼지시키고 반응 혼합물을 수소 분위기 아래에서 2시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 셀라이트 상에서 여과하고, 여액을 진공에서 농축시켰다. 미정제 고체를 물로 세척하고 건조시켰다. 생성물을 갈색 고체(28 mg, 0.09 mmol, 28% 수율)로 수득하였다.

5.2 3-((2,2-디플루오로-5H-[1,3]디옥솔로[4',5':4,5]벤조[1,2-d]이미다졸-6-일)카르바모일)벤조산( 18B )의 합성

6 ml THF/H₂O(1:1) 중의 에틸 2-(2,3-디히드로벤조푸란-5-일)옥사졸-4-카르복실레이트(32 mg, 0.085 mmol)의 용액에 수산화리튬 일수화물(56% LiOH, 25 mg, 0.597 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 반응 혼합물을 진공에서 농축시키고 수성 층을 수성 1 mol/1 염산 용액을 사용하여 pH 2~3으로 산성화시켰다. 생성되는 고체를 여과하고 건조시켰다. 생성물을 밝은 갈색 고체(14 mg, 0.04 mmol, 46% 수율)로 수득하였다.

5.3 N-(2,2-디플루오로-5H-[1,3]디옥솔로[4',5':4,5]벤조[1,2-d]이미다졸-6-일)-1-메틸-1H-피롤-2-카르복스아미드( 20B )의 합성

3 ml 크실렌 및 1 ml DMF 중의(6-아미노-2,2-디플루오로-5H-[1,3]디옥솔로[4',5':4,5]벤조[1,2-d]이미다졸-5-일)(1-메틸-1H-피롤-2-일)메타논(37.82 mg, 0.118 mmol)의 현탁액을 4시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 동결시켰다. 미정제 생성물을 분취 TLC(DCM:MeOH 9:1)(PLC 실리카 겔 60 F₂₅₄, 1mm)로 정제하였다. 최고 스팟을 단리시키고 상술된 것과 동일한 조건을 사용하여 제2 분취 TLC로 정제하였다. 생성물을 베이지색 고체(6 mg, 0.02 mmol, 16% 수율)로 수득하였다.

6. 합성 생성물의 분석

분석적 LC/ESI-MS 파라미터: 워터스 2700 오토샘플러. 1 x 워터스 1525 다중용매 전달 시스템 5 μL 샘플 루프. 컬럼, 스테인레스 스틸 2 μm 전처리필터(prefilter)를 갖는 페노메넥스(Phenomenex) 오닉스(Onyx)^TM 모놀리틱 C18 50.2mm. 용리제 A, H₂O + 0.1% HCOOH; 용리제 B, MeCN. 구배, 3.80분 내에 5% B 내지 100% B, 그 후 0.20분 동안 등용매, 그 후 다시 0.07분 내에 5% B, 그 후 0.23분 동안 등용매; 유속, 0.6 mL/min 및 1.2 mL/min. 전기분무 공급원을 갖는 워터스 마이크로매쓰(Micromass) ZQ 단일 사중극자 질량 분광계. MS 방법, MS4_15minPM-80-800-35V; 양극/음극 이온 모드 스캐닝, m/z 1초 내에 80 ~ 800 또는 80 ~ 900; 모세관 전압, 3.50 kV; 콘 전압, 35 V; 증폭기 전압, 650 V; 탐침 및 탈용매화 기체 온도, 각각 120℃ 및 300℃. 254 nm로 설정된 워터스 2487 듀얼 λ 흡광도 검출기. 소프트웨어: 워터스 매쓰링스(Masslynx) V 4.0.

7. 본 발명의 예시적 화합물

표 1: 예시적 화합물. "CK1 델타 검정" 및 "CK1 엡실론 검정" 행 내 기호는 하기 의미를 갖는다: +++: IC₅₀ < 200 nM, ++: IC₅₀ 200~1000 nM, +: IC₅₀ > 1 μM, 각각은 본원에서 이하에 설명된 키나제 검정에 따라서 측정되었다. "HH 검정" 행 내 기호는 하기 의미를 갖는다: +++: IC₅₀ ≤ 500 nM, ++: IC₅₀ > 500~1000 nM, +: IC₅₀ 1~15 μM, 각각은 본원에서 이하에 설명된 헤지호그 리포터 검정에 따라서 측정되었다. "Wnt 검정" 행 내 기호는 하기 의미를 갖는다: +++: IC₅₀ < 5 μM, ++: IC₅₀ 5~20 μM, 각각은 본원에서 이하에 설명된 Wnt 리포터 검정에 따라서 측정되었다. "일반적 과정/후처리" 행 내 표현은 상술된 프로토콜을 지칭한다.

8. 본 발명의 추가 예시적 화합물

표 2: 추가 예시적 화합물. 행 내 기호는 상기 표 1에서와 동일한 의미를 갖는다.

9. 본 발명의 예시적 화합물에 대한 NMR 데이터:

10. 억제 능력의 측정; 카제인 키나제 검정:

기질 CK1타이드(펩타이드 HAAIGDDDDAYSITS-NH₂)를, 새로 제조한 베이스 반응 완충제(20 mM Hepes(pH 7.5), 10 mM MgCl₂, 1 mM EGTA, 0.02% Brij35, 0.02 mg/ml BSA, 0.1 mM Na₃VO₄, 2 mM DTT, 1% DMSO) 중에서 20 μM의 농도로 제조하였다. 재조합 단백질 카제인 키나제 1 델타(CSKN1D)를 5 nM의 농도로 상기 기질 용액에 첨가하고 완만하게 혼합시켰다. DMSO 중의 본 발명의 화합물의 일련의 희석물을 반응 혼합물에 첨가하고, 20분 후에 ATP와 ³³P-ATP의 혼합물(비 활성 0.01 μCi/μl 최종)을 10 μM의 최종 농도로 첨가하였다. 반응을 25℃에서 120분 동안 실시한 후에, 반응을 P81 이온 교환 필터지 상으로 스폿팅하였다. 0.75% 인산 중에서 필터를 세척함에 의해 미결합 인산염을 제거하였다. 비활성 효소를 함유하는 대조 반응으로부터 유래한 바탕(background)을 제거한 후에, 키나제 활성 데이터를, 비히클(DMSO) 반응과 비교한 시험 샘플 중에 잔류하는 키나제 활성 퍼센트로 표시하였다. 프로그램 프리즘(Prism)^®(그래프 패드 소프트웨어)을 사용하여 IC₅₀ 값 및 곡선 핏을 얻었다.

카제인 키나제 1 엡실론에 대한 본 발명의 화합물의 억제 능력을 측정하는데 상기 검정을 또한 사용하였는데, 이 검정에서는 CSKN1D 대신에, 재조합 단백질 카제인 키나제 1 엡실론(CSKN1E)을 30 nM의 농도로 기질 용액에 첨가하고 완만하게 혼합시켰다.

상기 표 1 및 2에는 CK1 델타 및 엡실론 키나제 검정에서 화합물 결과에 대한 개요가 제시되어 있다.

11. 암 세포주의 패널 상에서 증식 억제의 측정; 증식 검정

세포 성장에 대한 본 발명의 화합물(이하에서 "시험 화합물(들)")의 억제 능력을 측정하기 위해서, 암 세포를 미량역가판 내로 씨딩(seeding)하고, 상이한 농도의 시험 화합물로 처리하거나 미처리 상태로 남겨두고, 72시간 후에 단백질 함량을 세포 수에 대한 당량으로 측정하였다.

시험 화합물을 100% DMSO에 용해시키고 세포 배양 배지 중의 사전희석물을 배지 내 0.1% DMSO의 최종 농도로 제조하였다. 시험 화합물의 희석, 세포주의 연속 배양 및 검정 동안의 사용을 위한 세포 배양 배지는 세포주 공급업체에 의해 권장된 세포주 특이적 배지였고, 이것은 상기 언급된 3개의 모든 적용에 대해서 동일하였다. 씨딩된 암 세포의 24시간 사전배양 시기 후에, 시험 화합물 함유 배지 또는 대조로 0.1% DMSO를 함유하는 배지를 세포에 첨가하였다. 세포를 37℃에서 72시간 동안 성장시켰다. 또한, 모든 실험에는 24시간의 회수 시간 직후의 측정을 위해 프로세스된 세포를 갖는 몇 개의 플레이트가 포함되었다. 이들 플레이트는 시간 0에서 처리 전 존재하던 세포 수에 대한 정보를 포함하였고, 세포독성 및/또는 성장 억제 효과를 계산하기 위해 제공되었다.

처리 후, 10% TCA(트리클로르아세트산)를 첨가하여 세포를 침전시켰다. 고정시키기 전, 배지를 흡출시켰다. 4℃에서 1시간의 인큐베이션 후에, 플레이트를 400 μl의 탈이온수로 2회 세척하였다. 그 후, 세포를 100 μl의 0.08% wt/v SRB(설포로다민)로 염색시켰다. 플레이트를 적어도 30분 동안 놓아두고, 1% 아세트산으로 6회 세척하여 미결합 염색제를 제거하였다. 플레이트를 실온에서 건조되도록 놓아두고, 결합 SRB를 100 μl의 10 mM 트리스 염기와 함께 용해시켰다. 빅터(Victor) 2 플레이트 판독기(독일, 퍼킨 엘머(Perkin Elmer) 제품) 상에서 560 nm에서 광학 밀도를 측정하였다.

항암제 효과를 발현시키기 위한 하나의 일반적인 방법은, % 처리/대조 × 100로 시험제의 존재 하에서의 세포 생존도를 측정하는 것이다. 생존도와 용량 사이의 관련성은 용량 반응 곡선으로 불린다. 그러한 용량 반응 곡선은 상업적인 어플리케이션에 비교될 수 있는, 독일 뮌헨에 소재한 온코리드 게엠베하 운트 코. 카게(Oncolead GmbH & Co. KG)에 의해 개발된 알고리즘, 예를 들어 엑스엘핏(XLfit)^TM(영국 귈드포드에 소재한 아이디 비지니스 솔루션스 엘티디.(ID Business Solutions Ltd.) 제품) 알고리즘 "205"를 사용하여서 측정하였다. 제공된 시험 화합물의 세포 성장 억제 효능은 IC₅₀ 값(세포 성장을 50% 억제하는데 필요한 약물 농도)으로 특정되었다.

하기 세포주를 사용하여 상술된 바와 같이 측정된 실시예 56의 화합물의 IC₅₀은 모든 경우에서 1μM 이하였다: 22RV1(전립선), 5637(방광), 786O(신장), A204(근육), A2780(난소), A375(피부), A431(피부), A549(폐), A673(근육), ACHN(신장), ASPC1(췌장), BT20(유방), BXPC3(췌장), C33A(자궁경부), CAKI1(신장), CALU6(폐), CASKI(자궁경부), CLS439(방광), COLO205(결장), DLD1(결장), DU145(전립선), EFO21(난소), EJ28(방광), HCT116(결장), HCT15(결장), HEK293(신장), HELA(자궁경부), HEPG2(간), HS729(근육), HS578T(유방), HT1080(연결 조직), HT29(결장), IMR90(폐), IGROV1(난소), J82(방광), JAR(태반), JEG3(태반), JIMT1(유방), LOVO(결장), MCF7(유방), MDAMB435(피부), MDAMB436(유방), MDAMB468(유방), MG63(뼈), MHHES1(뼈), MIAPACA2(췌장), MT3(유방), NCIH292(폐), NCIH358M(폐), NCIH460(폐), NCIH82(폐), OVCAR3(난소), OVCAR4(난소), PANC1(췌장), PANC1005(췌장), PC3(전립선), PLCPRF5(간), RD(근육), RDES(뼈), SAOS2(뼈), SF268(뇌), SF295(뇌), SKBR3(유방), SKHEP1(간), SKLMS1(자궁), SKMEL28(피부), SKMEL5(피부), SKNAS(뇌), SKNSH(뇌), SNB75(뇌), SW620(결장), T24(방광), TE671(근육), U2OS(뼈), U87MG(뇌). UMUC3(방광), SKOV3(난소), 하기 경우에서는 100 nM 이하였다: A2780(난소), A375(피부), A673(근육), BXPC3(췌장), CALU6(폐), EJ28(방광), HCT116(결장), HCT15(결장), JAR(태반), LOVO(결장), MCF7(유방), MDAMB435(피부), MG63(뼈), MHHES1(뼈), NCIH358M(폐), PC3(전립선), SF295(뇌), SKMEL5(피부), SKNAS(뇌).

12. 앵커리지 비의존적 성장, 연질 한천 콜로니 형성의 억제

앵커리지 비의존적 성장을 분석하기 위해서, 세포를 표준 프로토콜에 따라서 12웰 플레이트 중의 0.5% 바닥 셀렉트(select) 한천®(인비트로젠(Invitrogen) 제품) 상의 0.4% 셀렉트 한천®에 씨딩하였다. 8000개의 PANC1 세포를 400μl 셀렉트 한천에 씨딩하고, 본 발명에 따른 화합물 또는 대조로 DMSO를 400 μl 성장 배지의 최종 부피로 상기 상부 한천에 첨가하였다. 배양물을 5% CO₂의 가습 분위기 중 37℃에서 21일 동안 성장시켰다. 건조에 대비해서 새 성장 배지를 주 당 2회 추가하였다. 연질 한천 배양물 중에서의 콜로니 성장을 콜로니 계수기 소프트웨어(마이크로테크 니션(Microtech Nition) 제품)를 사용하여 정량화하였다.

배양판의 첨가에 따라 다르게 암 세포 콜로니의 성장이 억제되었는데, 여기서 몇몇의 콜로니는 (상기 웰 내) 모든 암 세포 콜로니에 대한 중위 직경보다 대략 4배 이상인 직경을 갖는 마크로콜로니로 발달한다. 본 발명의 화합물에 의한 (마크로콜로니 형성을 포함한) 둘 모두의 전반적인 콜로니 형성 및 단독 마크로콜로니 형성의 억제를 측정하고, 그 결과를 도 1에 도시한다. 이 세포주의 마크로콜로니는 희귀하지만, 이것은 고활성의 헤지호그 신호화 경로를 갖는 높은 클론원성(clonogenic)의, 종양 개시 세포이다. 시험관 내에서 그러한 마크로콜로니의 억제는 종양 함유 환자에서 암 줄기 세포 억제에 관련되는 것으로 해석될 수 있다(Eberl et al., EMBO Mol Med, 2011, 4, 218-233).

성장 배지 저장 용액(멸균화시키고 4℃에서 저장): 2x DMEM, GIBCO 분말: 26.76g DMEM 분말(GIBCO, 4.5g/l 글루코스를 가짐), 7,4g NaHCO₃, 220mg 피루브산나트륨(시그마, 11.0mg/ml 용액)을 물에 용해시키고, 2M Hepes를 사용하여 7.2로 pH를 조정하고; 최종 부피 1 리터가 되게 하였다. 2xDMEM, PAA 분말: 27g DMEM 분말(4,5g/l 글루코스 및 피루브산나트륨을 가짐; PAA Art. No. G0006,3010), 7,4g NaHCO₃을 물에 용해시키고 1N HCl로 pH를 6.8-7.5로 조정하고 최종 부피가 1 리터가 되게 하였다.

사용 전에, 50ml FBS 및 5ml 펜스트렙(PenStrep)(100x 저장)을 200ml 분취액에 첨가하고; 이 2배 배지를 4℃에서 최대 6 내지 8주 동안 저장하였다.

1%(하부) 및 0.8%(상부) 셀렉트 한천의 2x 저장 용액: 100ml 물 중의 각각 1g 또는 0.8g의 셀렉트 한천(인비트로젠 제품, Art.No. 30391-023)(= 각각 1% 또는 0.8% 최종). 필요시까지 4℃에서 저장하였다.

하부 한천(= 0.5% 한천 최종 농도): 저장된 "1% 셀렉트 한천"을 전자레인지에서 용융시키고; 수조에서 42℃로 냉각시키고; 2x DMEM를 37℃로 가온시키고; 셀렉트 한천 및 2x DMEM 용액을 1:1로 혼합시키고(기포를 방지하면서); 800μl 한천/DMEM 혼합물을 각각의 웰에 플레이팅하고; 냉각시키고 완전히 경화시키고(실온) 사용 전까지 2주 이하 동안 4℃에서 저장할 수 있다.

상부 한천( = 세포를 함유하는 0.4% 한천 최종 농도); 저장된 "0.8% 셀렉트 한천"을 전자레인지에서 용융시키고; 수조 중에서 40℃로 냉각시키고; 2x DMEM을 37℃로 가온시키고; 하부 한천 플레이트가 실온으로 가온되도록 두고(또는 37℃ 인큐베이터에서 가온시키고); 셀렉트 한천 및 2x DMEM 용액을 1:1로 혼합시키고(기포를 방지하면서); 한천/DMEM 혼합물을 15 ml 관에 분취하고 40℃에서 저장하고; 세포를 트립신화하고 세포 수를 측정하고; 웰 당 8000개 세포를 한천/DMEM 혼합물에 첨가하고; 관과 플레이트를 천천히 뒤집어서 다시 혼합시키고; 냉각시키고 층류인 상부 한천을 경화시키고(약 30분; 실온); (임의적인 화학 물질을 함유하는) 400 ㎕ 배지를 상부 한천 상으로 피펫팅하여 건조를 방지하고; 적절한 경우에 상청액을 교환하였다(예를 들어, 주 당 2x).

13. Wnt 리포터 검정

안정적으로 형질감염된 사람 HEK293 세포에서 Wnt 리포터 검정을 실시하였다. Wnt3a 단백질을 투여하여 Wnt 신호화를 유도하고, 이 신호화를 CCF4-AM의 ß-락타마제 중재된 분할 및 후속적인 형광 검출에 의해 판독하였다.

셀센서(CellSensor) LEF/TCF-bla 프리스타일 293F 세포(인비트로젠 #K1677)는 프리스타일 293F 세포 내로 안정적으로 통합된 ß-카테닌/LEF/TCF 결합 요소의 조절 하에 베타-락타마제 리포터 유전자를 함유한다. 이 세포주는 마우스 Wnt3a 또는 LiCl로 자극하는 경우에 Wnt/ß-카테닌 신호화 경로의 길항제를 검출하는데 사용될 수 있다. 베타-락타마제의 검출은 기질로 CCF4-AM을 갖는 라이브블레이저(LiveBLAzer) FRET - B/G 로딩 키트(인비트로젠 #K1095)를 사용하여 가능하다.

배양 배지: DMEM 배지 + 10% 투석된 FBS(PAN 2102-P290310), + 1% NEAA(PAA M11-003), + 1% P/S(페니실린/스트렙토마이신, PAA P11-010) + 25mM HEPES(PAA S11-001), + 5μg/ml 블라스티시딘(PAA P05-017).

검정 배지: 옵티-MEM(깁코 11058-021) + 0.5% 투석된 FBS(PAN 2102-P290310), + 1% NEAA(PAA M11-003), + 1% P/S(PAA P11-010), + 10mM HEPES(PAA S11-001), + 1mM Na-피루베이트(PAA S11-003).

세포(셀센서 LEF/TCF-bla 프리스타일 293F, 인비트로젠 K1677)를 배양 배지를 사용하여 분할시켜서 검정 개시 무렵에 80~90%의 융합(confluence)에 도달되게 하였다.

검정 개시 시에, 세포를 배양물로부터 수확하고 이것을 0.66*10⁶ 세포/ml의 밀도로 검정 배지 중에 재현탁시켰다. 후속으로, 60μl 세포 현탁액을 폴리-D-리신 96 웰 플레이트(BD #354640, 수직 열은 1 내지 12로 표시하고, 수평 레인은 A 내지 H로 표시한다)의 각각의 웰에 피펫팅하였다.

후속으로 플레이트를 37℃에서 적어도 2시간 동안 인큐베이션하였다. Wnt3a로 자극하기 위해서는, LiCl을 사용한 Wnt 신호화 경로의 하룻밤 동안의 사전자극이 필요하다. 후속으로, 8M 수성 LiCl 용액을 검정 배지 중에서 1:200 희석시키고 상기 희석된 LiCl 용액 30μl를 적절한 웰 내로 플레이팅하였다(하기 피펫팅 계획 참조). 그 후, 플레이트를 37℃에서 밤새 인큐베이션하였다.

후속으로, 화합물 및 대조를 하기와 같이 제조하였다: mWnt3a(R&D 1324-WN, PBS+0.1% BSA 중에서 40μg/ml로 용해시킴)를 검정 배지 중에서 1:100 희석시켰다(= 400 ng/ml). 화합물(Cpd)을 DMSO 중에서 10 mM 농도로 희석시켜서 검정 배지 중에서 일련의 희석물(최종 농도 30μM, 10μM, 3μM, 1μM, 0.3μM, 0.1μM, 0.03μM 및 0.01μM)을 제조하고, 이것들을 적절한 웰 내로 피펫팅하였다(하기 피펫팅 계획 참조). 각각의 화합물의 각각의 희석물에 대해서, 3개의 복제물을 시험하였다. 최종 DMSO 농도는 0.3%였다.

LiCl 및 mWnt3a 자극된 세포를 높은 대조(HC)로 사용하였고, 미자극된 세포를 낮은 대조로 사용하였고, 블랭크는 세포 비함유 배지 및 mWnt3a로부터 제조하고, 공지된 Wnt 억제제(예를 들어, PKF118-310)를 사용하여 기능성 대조를 제조하고, 최종 농도는 상기와 같았다.

피펫팅 계획:

후속으로, 웰을 37℃에서 5시간 동안 인큐베이션하였다.

t = 23 시간에서, FRET 시약 혼합물(CCF4-AM이 로딩된 키트, 라이프 테크놀로지스(Life Technologies) #K1096)을 제조하였다; 플레이트 당: 138μl 용액 B, 13.8μl FRET-시약, 및 2300μl 용액 C. 24μl FRET 시약 혼합물을 각각의 웰로 플레이팅하고, 후속으로 플레이트를 적어도 2시간 동안 암소에서 인큐베이션시켰다(밤새 인큐베이션시키는 것이 가능하다). 후속으로, 플레이트를 460 및 520 nm의 방출 파장 및 405 nm의 여기 파장에서 BMG 플루오르스타(FluorStar)® 플레이트 판독기에서 측정하였다.

화합물의 잠재적 세포독성을 측정하기 위해서, 플레이트를 원심분리하고 플레이트를 쏟아서 상청액을 폐기하였다. 후속으로, 100μl Opti-MEM 및 50μl 비아라이트(ViaLight)(론자(Lonza) #LT07-321) 세포용해 완충제를 각각의 웰에 첨가한 다음, 실온(25℃)에서 10분 동안 인큐베이션하였다. 후속으로, 100μl 비아라이트 시약을 각각의 웰에 첨가한 다음, 실온(25℃)에서 암소에서 2분 동안 인큐베이션시켰다. 임의로, 200 μl의 수득된 현탁액을 백색의 96 웰 플레이트로 옮겼다. 테칸(Tecan) 울트라 플레이트 판독기를 사용하여 발광을 측정하였다.

13. 헤지호그 리포터 검정

시험 화합물의 헤지호그 신호화 경로 억제 효능을 조사하기 위해서, Gli-리포터 검정을 실시하였다.

"Gli 리포터-NIH3T3 세포주"는 뮤린 NIH3T3 세포(암스비오(Amsbio)로부터 구입한 세포) 내로 안정적으로 통합시킨 Gli 반응 요소의 조절 하에 반딧불 루시퍼라제 유전자를 함유한다. 루시퍼라제 발현은 헤지호그 신호화 경로의 활성화와 상호관련된다. 이 세포주는, 이것이 뮤린 소닉 헤지호그를 사용한 자극 및 헤지호그 신호화 경로의 억제제로의 처리에 대해 반응함을 입증한다. 경로 활성에 대한 억제를 세포 독성과 구별하기 위해서 복합 생존도 검정을 사용하였다.

성장 배지: DMEM, 10% 소 혈청, 1% 페니실린/스트렙토마이신 500μg/ml 제네티신(G418 저장 50mg/ml).

검정 배지: 옵티-MEM® 환원 혈청 배지, 0,5% 소 혈청, 1% 비필수 아미노 산, 1mM Na-피루베이트, 10mM HEPES, 1% 페니실린/스트렙토마이신.

웰 당 25.000 세포를 100μl 성장 배지 중의 백색 96 웰 플레이트 내로 씨딩하고 37℃ 및 5% CO₂에서 밤새 인큐베이션하였다. 상청액을 제거한 후에, 시험 화합물 및 대조(공지된 GLI 억제제, 예를 들어 GANT-61)를 최종 부피 45μl에서 상이한 농도로 첨가하고, 37℃ 및 5% CO₂에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 헤지호그 경로를 자극하기 위해, 5μl의 10μg/ml 농축된 뮤린 소닉 헤지호그(SHH)를 세포에 첨가하였다. 웰 마다 1μg/ml mSHH 및 0.1% DMSO의 최종 농도가 얻어졌다. 37℃에서 24시간 동안 인큐베이션시킨 후에, 세포를 생존도 및 리포터 활성에 대해 조사하였다.

생존도: 처리된 세포의 생존도를 측정하기 위해서, 프로메가(Promega)로부터의 셀티터-플루오르 키트(CellTiter-Fluor Kit)를 사용하였다. 본질적으로, 생존가능한 세포의 프로테아제만이 세포-투과성 기질 Gly-Phe-AF쿠마린(GF-AFC)을 분할시킬 수 있다. 이러한 분할에 의해서, 형광성 AFC가 방출되고 이것은 형광 판독기에서 검출될 수 있다. 이 검정을 위해서, 10μl의 GF-AFC 기질(셀티터-플루오르, 프로메가 #G6082)을 셀티터-플루오르 키트로부터의 2ml 검정 완충제로 희석시키고, 웰 당 이 희석물 10μl를 세포에 첨가하고 37℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 380~400nm에서 여기 및 505nm에서 방출되는 형광을 측정하였다.

리포터 활성: 반딧불 루시퍼라제 리포터 활성은 프로메가로부터의 원-글로(ONE-Glo)™ 루시퍼라제 검정 시스템을 사용하여 검출하였다. 이 검정을 위해, 50μl 원-글로 루시퍼라제 시약(프로메가 #E6120, 세포 용해 완충제 및 루시퍼린을 함유함)을 각각의 웰에 첨가하고, 실온에서 5분 동안 인큐베이션하였다. 플레이트 판독기에서 발광을 검출하였는데, 이것은 리포터 활성 정도로 제공되었다.

Claims

하기 일반식 (I)의 화합물, 또는 그의 용매화물 또는 염:

상기 식에서,
R은 H이고;
R^N은 H이고;
A는 *-CON(R^a)-이고,
여기서 R^a는 H이고,
여기서 *는 X에 대한 부착 지점을 특정하고;
X는 독립적으로 아릴, 시클로알킬, 아르알킬, 헤테로시클릴 및 헤테로아릴을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 기 X는 독립적으로 할로겐, C_1-6-알킬, C_1-6-할로알킬, C_1-6-할로알콕시, OH, C_1-6-알콕시, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 헤테로시클릴, -S-C_1-6-알킬, -S-C_1-6-할로알킬, 니트로, -NH₂, -N(C_1-6-알킬)₂, -NH(C_1-6-알킬), -NHCO(C_1-6-알킬), -CONH₂, -CONH(C_1-6-알킬), -CO(C_1-6-알킬), -COH, -COO(C_1-6-알킬), -COOH, -SO₂NH₂, -SO₂NH(C_1-6-알킬), -SO₂(C_1-6-알킬), -NH-SO₂(C_1-6-알킬), C_3-6-시클로알킬 및 -CN을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 R^X로 치환될 수 있고;
L은 독립적으로 *-NHCO-, *-CONH-, *-NH-, *-N(C_1-4-알킬)-, *-C=N(C_1-4-알킬)-, *-NH-C_1-4-알킬-, *-C_1-4-알킬-NH-, *-NHCONH-, *-CO-, *-SO₂-, C_1-4-알킬, *-C_1-2-알킬-O-C_1-2-알킬-, *-NHCO-CH=CH-, *-CH=CH-CONH-, *-SO₂NH-, *-NHSO₂- 및 피리디닐을 포함하는 군으로부터 선택된 연결 기 또는 결합이고, 여기서 *는 X에 대한 부착 지점을 특정하고;
Y는 독립적으로 H, 알킬, 아릴, 아르알킬, 시클로알킬, 헤테로시클릴 및 헤테로아릴을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 기 Y는 독립적으로 할로겐, C_1-6-알킬, C_1-6-할로알킬, C_1-6-할로알콕시, OH, C_1-6-알콕시, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 헤테로시클릴, -S-C_1-6-알킬, -S-C_1-6-할로알킬, 니트로, -NH₂, -N(C_1-6-알킬)₂, -NH(C_1-6-알킬), -NHCO(C_1-6-알킬), -CONH₂, -CONH(C_1-6-알킬), -CO(C_1-6-알킬), -COH, -COO(C_1-6-알킬), -COOH, -SO₂NH₂, -SO₂NH(C_1-6-알킬), -SO₂(C_1-6-알킬), -NH-SO₂(C_1-6-알킬), C_1-6-알킬-헤테로시클릴, 시클로알킬 및 -CN을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 R^Y로 임의로 치환될 수 있고;
여기서 알킬 기는 선형 또는 분지형 C₁-C₆-알카닐, 선형 또는 분지형 C₂-C₆-알케닐, 또는 선형 또는 분지형 C₂-C₆-알키닐 기를 지칭하고, 여기서 상기 알킬 기는 하나 이상의 치환기 R'로 임의로 치환되고;
아릴 기는 하나 이상의 시클로알킬 또는 헤테로시클릴 고리에 임의로 융합될 수 있는 방향족 모노- 또는 폴리시클릭 탄화수소 고리 시스템을 지칭하고, 여기서 아릴 기 내 고리 원자의 총 수는 6 내지 10개이고, 상기 아릴 기는 하나 이상의 치환기 R'로 임의로 치환되고;
헤테로아릴 기는 방향족 모노- 또는 폴리시클릭 탄화수소 고리 시스템을 지칭하고, 여기서 하나 이상의 탄소 원자는 O, N 및 S를 포함하는 군으로부터 독립적으로 선택된 헤테로원자로 치환되고, 여기서 화학적으로 실행가능한 경우에, 질소 헤테로원자는 N-산화물을 포함할 수 있고, 황 헤테로원자는 산화황 및/또는 이산화황을 포함하고, 방향족 모노- 또는 폴리시클릭 탄화수소 고리 시스템은 하나 이상의 시클로알킬 또는 헤테로시클릴 고리에 임의로 융합될 수 있고, 여기서 헤테로아릴 기 내 고리 원자의 총 수는 5 내지 10개이고, 상기 헤테로아릴 기는 하나 이상의 치환기 R'로 임의로 치환되고;
시클로알킬 기는 3 내지 10개의 탄소 원자를 포함하는 비-방향족 모노- 또는 비시클릭 완전 포화 또는 부분 불포화 탄화수소 고리 시스템을 지칭하고, 여기서 상기 시클로알킬 기는 하나 이상의 치환기 R'로 임의로 치환되고;
헤테로시클릴 기는 총 5 내지 10개의 탄소 및 헤테로원자를 포함하는 비-방향족 모노- 또는 비시클릭 완전 포화 또는 부분 불포화 탄화수소 고리 시스템을 지칭하고, 여기서 탄소 원자의 하나 이상은 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 헤테로원자로 치환되고, 여기서 화학적으로 실행가능한 경우에, 질소 헤테로원자는 N-산화물을 포함할 수 있고, 황 헤테로원자는 산화황 및/또는 이산화황을 포함하고, 상기 헤테로시클릴 기는 하나 이상의 치환기 R'로 임의로 치환되고;
R'는 할로겐, C_1-6-알킬, C_1-6-할로알킬, C_1-6-할로알콕시, OH, C_1-6-알콕시, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 헤테로시클릴, -S-C_1-6-알킬, -S-C_1-6-할로알킬, 니트로, -NH₂, -N(C_1-6-알킬)₂, -NH(C_1-6-알킬), -NHCO(C_1-6-알킬), -CONH₂, -CONH(C_1-6-알킬), -CO(C_1-6-알킬), -COH, -COO(C_1-6-알킬), -COOH, -SO₂NH₂, -SO₂NH(C_1-6-알킬), -SO₂(C_1-6-알킬) 및 -CN을 포함하는 군으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 R'는 추가 기로 치환되지 않는다.
제1항에 있어서, 하기 일반식 (Ia)의 화합물, 또는 그의 용매화물 또는 염:

상기 식에서,
X는 독립적으로 아릴, 시클로알킬, 아르알킬, 헤테로시클릴 및 헤테로아릴을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 기 X는 독립적으로 할로겐, C_1-6-알킬, C_1-6-할로알킬, C_1-6-할로알콕시, OH, C_1-6-알콕시, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 헤테로시클릴, -S-C_1-6-알킬, -S-C_1-6-할로알킬, 니트로, -NH₂, -N(C_1-6-알킬)₂, -NH(C_1-6-알킬), -NHCO(C_1-6-알킬), -CONH₂, -CONH(C_1-6-알킬), -CO(C_1-6-알킬), -COH, -COO(C_1-6-알킬), -COOH, -SO₂NH₂, -SO₂NH(C_1-6-알킬), -SO₂(C_1-6-알킬), -NH-SO₂(C_1-6-알킬), C_3-6-시클로알킬 및 -CN을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 R^X로 치환될 수 있고;
L은 독립적으로 *-NHCO-, *-CONH-, *-NH-, *-N(C_1-4-알킬)-, *-C=N(C_1-4-알킬)-, *-NH-C_1-4-알킬-, *-C_1-4-알킬-NH-, *-NHCONH-, *-CO-, *-SO₂-, C_1-4-알킬, *-C_1-2-알킬-O-C_1-2-알킬-, *-NHCO-CH=CH-, *-CH=CH-CONH-, *-SO₂NH-, *-NHSO₂- 및 피리디닐을 포함하는 군으로부터 선택된 연결 기 또는 결합이고, 여기서 *는 X에 대한 부착 지점을 특정하고;
Y는 독립적으로 H, 알킬, 아릴, 아르알킬, 시클로알킬, 헤테로시클릴 및 헤테로아릴을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 기 Y는 독립적으로 할로겐, C_1-6-알킬, C_1-6-할로알킬, C_1-6-할로알콕시, OH, C_1-6-알콕시, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 헤테로시클릴, -S-C_1-6-알킬, -S-C_1-6-할로알킬, 니트로, -NH₂, -N(C_1-6-알킬)₂, -NH(C_1-6-알킬), -NHCO(C_1-6-알킬), -CONH₂, -CONH(C_1-6-알킬), -CO(C_1-6-알킬), -COH, -COO(C_1-6-알킬), -COOH, -SO₂NH₂, -SO₂NH(C_1-6-알킬), -SO₂(C_1-6-알킬), -NH-SO₂(C_1-6-알킬), C_1-6-알킬-헤테로시클릴, 시클로알킬 및 -CN을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 R^Y로 임의로 치환될 수 있다.
제1항 또는 제2항에 있어서,
X가 독립적으로 아릴, 아르알킬, 시클로알킬, 헤테로시클릴 및 헤테로아릴을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 기 X는 독립적으로 F, Cl, Br, I, C_1-6-알킬, C_1-6-할로알킬, C_1-6-할로알콕시, OH, C_1-6-알콕시, 니트로, -NH₂, -N(C_1-6-알킬)₂, -NH(C_1-6-알킬), -NHCO(C_1-6-알킬), -CONH₂, -CONH(C_1-6-알킬), -SO₂NH₂, -SO₂NH(C_1-6-알킬), -SO₂(C_1-6-알킬), C_3-6-시클로알킬, -NH-SO₂(C_1-6-알킬), -COOH, -COO-C_1-6-알킬 및 -CN을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 R^X로 치환될 수 있고;
L이 독립적으로 *-NHCO-, *-NH-, *-NHCH₂-, *-NHCONH-, *-NHCO-CH=CH-, *-NHSO₂-, *-SO₂- 및 피리디닐을 포함하는 군으로부터 선택된 연결 기 또는 결합이고, 여기서 *는 X에 대한 부착 지점을 특정하고;
Y가 독립적으로 H, 아릴, 시클로알킬, 헤테로시클릴 및 헤테로아릴을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 기 Y는 독립적으로 F, Cl, Br, C_1-6-알킬, C_1-6-할로알킬, C_1-6-할로알콕시, C_1-6-알콕시, C_1-6-알킬-모르폴리닐 및 니트로를 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 R^Y로 임의로 치환될 수 있는 것인
화합물, 또는 그의 용매화물 또는 염.
제1항 또는 제2항에 있어서,
X가 독립적으로 1,2,3-티아디아졸릴, 1,2,4-티아디아졸릴, 1H-1,2,3-트리아졸릴, 1H-1,2,4-트리아졸릴, 1H-피라졸릴, 1H-피롤릴, 페닐, 벤조[b]티오페닐, 시클로헥실, 푸릴, 이속사졸릴, 옥사졸릴, 이미다졸릴, 1H-피라졸릴, 피라지닐, 피리딜, 퀴놀리닐, 1-(나프탈렌-2-일)에틸, 티아졸릴, 벤질 및 티오페닐을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 기 X는 독립적으로 F, Cl, Br, 메틸, tert-부틸, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 디플루오로메톡시, OH, 아세틸, 메틸카르바모일, 메톡시, 니트로, -NH₂, -NEt₂, -NMe₂, -NHEt, -NHCOCH₃, -CONH₂, -SO₂NH₂, -SO₂Me, -NH-SO₂Me, -COOH 및 -CN을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 R^X로 치환될 수 있고;
L이 독립적으로 *-NHCO-, *-NH-, *-NHCH₂-, *-NHCONH-, *-NHCO-CH=CH-, *-피리디닐-, -SO₂- 및 *-NHSO₂-을 포함하는 군으로부터 선택된 연결 기 또는 결합이고, 여기서 *는 X에 대한 부착 지점을 특정하고;
Y가 독립적으로 H, 페닐, 푸릴, 티오페닐, 피리딜, 피리미딜, 2,3-디히드로벤조[b][1,4]디옥시닐, 2,3-디히드로벤조푸라닐, 벤조[d][1,3]디옥솔릴, 티에노[3,2-d]피리미디닐, 2-옥소-2,3-디히드로벤조이미다졸릴, 피롤리디닐, 테트라졸릴, 피페리디닐, 피라졸릴, 1,2,4-옥사디아졸릴, 1,2,3-티아디아졸릴, 피롤릴, 이미다졸릴, 이속사졸릴, 티아졸릴, 티오모르폴리닐 및 모르폴리닐을 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 기 Y는 독립적으로 F, Cl, 메틸, 이소프로필, tert-부틸, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 메톡시, 메틸카르바모일, 시클로프로필, 2-모르폴리노에틸 및 니트로를 포함하는 군으로부터 선택된 하나 또는 두 개의 R^Y로 치환될 수 있는 것인
화합물, 또는 그의 용매화물 또는 염.
제1항 또는 제2항에 있어서,
X가 독립적으로

를 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 *는 중심 모이어티에 대한 부착 지점을 특정하고, #는 L에 대한 부착 지점을 특정하고, 여기서 기 X는 하나 이상의 R^X로 치환될 수 있고;
L이 독립적으로 *-NHCO-, *-NH-, *-NHCH₂-, *-NHCONH-, *-NHCO-CH=CH-, *-피리디닐-, -SO₂- 및 *-NHSO₂-를 포함하는 군으로부터 선택된 연결 기 또는 결합이고, 여기서 *는 X에 대한 부착 지점을 특정하고;
Y가 독립적으로 H이거나

를 포함하는 군으로부터 선택되고,
여기서 *는 L에 대한 부착 지점을 특정하고, 여기서 기 Y는 하나 이상의 R^Y로 치환될 수 있거나; 또는
X가

를 포함하는 군으로부터 선택되고, 여기서 *는 중심 모이어티에 대한 부착 지점을 나타내고, 여기서 L은 결합이고, Y는 H이고, 여기서 기 X는 하나 이상의 R^X로 치환될 수 있고;
여기서 각각의 R^Y는 독립적으로 F, Cl, 메틸, 이소프로필, tert-부틸, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 메톡시, 메틸카르바모일, 시클로프로필, 2-모르폴리노에틸 및 니트로를 포함하는 군으로부터 선택되고;
여기서 각각의 R^X는 독립적으로 F, Cl, Br, 메틸, tert-부틸, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 디플루오로메톡시, OH, 아세틸, 메틸카르바모일, 메톡시, 니트로, -NH₂, -NEt₂, -NMe₂, -NHEt, -NHCOCH₃, -CONH₂, -SO₂NH₂, -SO₂Me, -NH-SO₂Me, -COOH 및 -CN을 포함하는 군으로부터 선택되는 것인
화합물, 또는 그의 용매화물 또는 염.
제1항 또는 제2항에 있어서, 하기한 것들 중 하나로부터 선택되는 화합물, 또는 그의 용매화물 또는 염.
제1항 또는 제2항에 있어서, 하기한 것들 중 하나로부터 선택되는 화합물, 또는 그의 용매화물 또는 염.
삭제
염증성 장 질병, 다발성 경화증, 류마티스 관절염, 자가면역 포도막염, 알츠하이머 병, 파킨슨 병, 다운 증후군, 생체 시계 메커니즘과 관련된 수면 장애, 및 암의 군으로부터 선택된 의학적 질환의 치료 또는 예방에 사용하기 위한, 제1항 또는 제2항에 따른 화합물, 또는 그의 용매화물 또는 염을 포함하는 약제 조성물.
삭제
삭제
삭제
하기 식 IV의 화합물을 하기 식 II의 화합물과 커플링시키는 단계를 포함하는, 제1항 또는 제2항에 따른 화합물의 제조 방법:

상기 식에서,
Y, L 및 X는 제1항 또는 제2항에 정의된 바와 같고,
R¹은 NH₂이고, R²는 COOH 또는 COOCl이다.