KR102112774B1 - Composition for preventing or treating acne comprising ethyl acetate fraction of sargassum miyabei yendo - Google Patents
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Abstract
본 발명은 미아베모자반 에틸 아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유하는 여드름 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 상기 미아베모자반 에틸 아세테이트 분획물은 여드름 유발균인 프로피오니박테리움 아크네스에 의해 유도된 호중구의 침투를 억제시키고 농양을 감소시키는 효과를 나타내는 것으로 확인됨에 따라, 상기 미아베모자반 에틸 아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유하는 조성물은 우수한 여드름 치료제 및 여드름 예방 또는 개선용 화장료 조성물로 제공될 수 있다. The present invention relates to a composition for preventing or treating acne containing the miabemozaban ethyl acetate fraction as an active ingredient, wherein the miabemozaban ethyl acetate fraction penetrates neutrophils induced by acne-causing bacteria Propionibacterium acnes As it is confirmed to exhibit the effect of inhibiting and reducing the abscess, the composition containing the miabemozaban ethyl acetate fraction as an active ingredient may be provided as an excellent acne treatment agent and a cosmetic composition for preventing or improving acne.
Description
본 발명은 미아베모자반 에틸 아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유하는 여드름 예방 또는 치료용 약학조성물 및 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a pharmaceutical composition and a cosmetic composition for the prevention or treatment of acne containing the miabemozaban ethyl acetate fraction as an active ingredient.
여드름(acne)의 발병 원인은 아직도 명확히 규정되어 있지 않으며, 다만 유전적인 요인과 환경적인 요인을 배제한다면 세 가지 중요한 원인이 여드름 발병에 직접적으로 관여한다는 것으로 보고되어 있다. 그 세 가지 중요한 원인을 여드름 발병 기전을 통하여 간단히 설명하면 다음과 같다. The causes of acne are not yet clearly defined, but if genetic and environmental factors are excluded, it is reported that three major causes are directly involved in acne development. The three main causes are briefly explained through the mechanism of acne.
첫 번째 원인은 과잉으로 분비된 피지 때문이라고 할 수 있다. 피지의 형성은 남성 호르몬(androgenic hormone)의 작용에 의하여 이루어지며, 이 남성 호르몬의 비정상적인 증가 또는 이와 관련된 여러 기전을 통하여 피지선 기능이 항진되고 그 결과 과잉의 피지를 생성하게 된다. The first cause can be said to be due to excess sebum. The formation of sebum is caused by the action of androgenic hormone, and the sebaceous gland function is enhanced through abnormal increase of the male hormone or several related mechanisms, resulting in excess sebum.
두 번째는 모낭의 과각화(hyperkeratinization)로 인한 모공의 폐쇄 때문으로 설명된다. 생성된 피지는 피부 밖으로 원활하게 배출되어야 하지만 모낭의 과각화로 인하여 모공이 막혀 피지의 원활한 배출이 억제되고 그 결과 모낭 내에 피지가 정체되어 미세면포를 형성하게 된다. 피지분비와 관련되어, 피부 내에는 비활성 스테로이드 전구물질을 활성 안드로젠으로 전환시키는 데에 필요한 모든 효소가 존재하는데, 5α-리덕타아제는 그 중의 하나이다. 남성 호르몬 중의 하나인 테스토스테론은 피지선(sebaceous gland)에 진입한 후 세포(sebocyte)에 존재하는 5α-리덕타아제에 의하여 디하이드로테스토스테론으로 전환되며, 이것을 신호로 하여 유전자가 발현되는 등의 다단계 경로를 수행하게 되어 그 결과 피지를 생성하게 된다.The second is explained by the closure of the pores due to hyperkeratinization of the hair follicles. The generated sebum should be smoothly discharged out of the skin, but due to hyperkeratization of the hair follicles, the pores are blocked and smooth discharge of the sebum is suppressed. In connection with sebaceous secretion, there are all the enzymes required to convert inactive steroid precursors into active androgens in the skin, 5α-reductase is one of them. Testosterone, one of the male hormones, is converted to dihydrotestosterone by 5α-reductase present in the cell after entering the sebaceous gland, and this signal is used to signal multi-step pathways such as gene expression. This results in sebum production.
세 번째의 원인은 여드름을 일으키는 스태피로코커스 에피더미스(Staphylococcus epidermis), 스태피로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus) 및 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 등의 피부상재균 때문으로 이것은 여드름 병변 악화의 중요한 원인으로 설명된다. 모낭 내에 상주하는 여드름균은 모공벽 자극 물질을 형성한다. 미세면포는 피지의 과잉 분비가 계속되면서 크기가 점차 증가하여 면포로 발전되며 이로 인하여 모낭벽은 얇아지게 되고 여드름균에 의하여 생성된 자극성 물질은 이 얇아진 모낭벽을 자극하여 면포를 점차 염증성 병변으로 악화(구진→농포→결절→반흔)시킨다. 한편, 이와 같은 여드름의 원인에 따라 피지 억제, 피부 상재균에 대한 항균효과 등에 초점을 맞춰 여드름 치료 또는 개선을 위한 방법들에 관한 다양한 연구가 수행되고 있다.The third cause is acne lesions due to dermatophytes such as Staphylococcus epidermis, Staphylococcus aureus and Propionibacterium acnes, which cause acne. It is explained as an important cause of exacerbation. Acne bacteria residing within the hair follicles form pore wall irritants. The micro-composite gradually increases in size as the sebum continues to secrete and develops into a compost. As a result, the hair follicle wall becomes thinner, and the irritating substances produced by acne bacteria stimulate the thinned hair follicle wall to gradually exacerbate the compost into inflammatory lesions. (Gujin → pustules → nodules → scars). On the other hand, various researches on methods for the treatment or improvement of acne have been conducted, focusing on sebum suppression and antibacterial effects on skin flora, depending on the cause of such acne.
지금까지 알려진 여드름 치료 약물은 피지 분비의 조절, 각화과정 이상의 교정, 프로피오니박테리움 아크네스로 대표되는 세균에 대한 억제기능, 이 세 가지 중에서 적어도 한 가지 이상의 역할을 하여야만 여드름 치료에 유용한 약물이 될 수 있으며, 구체적으로는 피지 과분비 억제를 위해 비정상적인 남성 호르몬의 분비를 제어하는 항안드로겐제 등의 여성호르몬의 사용, 여드름균의 생장을 억제하는 항균제 및 항생제의 사용, 항염증 작용을 하는 비스테로이드계 소염제를 사용하는 방법이 이용되고 있으며, 화장료 분야에서는 레소시놀, 황, 살리실산, 벤조일퍼옥사이드 등의 성분을 첨가하여 피부 각질제거 및 여드름균을 억제하는 방법이 주로 사용되어 왔다.Acne treatment drugs that have been known so far can be useful drugs for acne treatment by controlling sebum secretion, correcting keratinization, and inhibiting bacteria represented by propionium bacterium acnes. Specifically, the use of female hormones, such as anti-androgens to control the secretion of abnormal male hormones to suppress sebaceous hypersecretion, the use of antibacterial and antibiotic agents to suppress the growth of acne bacteria, non-steroidal system with anti-inflammatory action A method of using an anti-inflammatory agent is used, and in the cosmetic field, a method of suppressing skin exfoliation and inhibiting acne bacteria has been mainly used by adding ingredients such as lesocinol, sulfur, salicylic acid, and benzoyl peroxide.
그러나 이러한 성분이 과다하게 첨가될 경우 피부 자극 및 쉽게 건조해지는 부작용이 발생하기 때문에 레소시놀, 살리실산 같은 경우 배합한도가 정해져 있고, 벤조일퍼옥사이드 같은 성분은 국내에서는 배합금지 성분으로 지정되어 있는 실정이다.However, if these ingredients are added excessively, skin irritation and easily dry side effects occur, so the compounding limit is set in the case of lesocinol and salicylic acid, and components such as benzoyl peroxide are designated as prohibited ingredients in Korea. .
본 발명은 여드름 원인균에 의해 유도되는 여드름을 예방하고 우수한 치료 효과를 나타내면서 피부 안정성이 높은 천연물 미아베모자반을 유효성분으로 함유하는 여드름 예방 또는 치료용 조성물을 제공하고자 한다. The present invention is to prevent acne induced by acne-causing bacteria and to provide a composition for preventing or treating acne containing natural miabemozaban with high skin stability as an active ingredient while exhibiting excellent therapeutic effect.
본 발명은 미아베모자반 에틸 아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유하는 여드름 예방 또는 치료용 약학조성물을 제공한다.The present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating acne containing the miabemozaban ethyl acetate fraction as an active ingredient.
또한, 본 발명은 미아베모자반 에틸 아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유하는 여드름 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다. In addition, the present invention provides a cosmetic composition for preventing or improving acne containing the miabemozaban ethyl acetate fraction as an active ingredient.
본 발명에 따르면, 미아베모자반 에틸 아세테이트 분획물은 여드름 유발균인 프로피오니박테리움 아크네스에 의해 유도된 호중구의 침투를 억제시키고 농양을 감소시키는 효과를 나타내는 것으로 확인됨에 따라, 상기 미아베모자반 에틸 아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유하는 조성물은 우수한 여드름 치료제 및 여드름 예방 또는 개선용 화장료 조성물로 제공될 수 있다. According to the present invention, the miabemozaban ethyl acetate fraction is confirmed to exhibit the effect of inhibiting the infiltration of neutrophils induced by acne-causing bacteria Propionibacterium acnes and reducing abscess, the miabemozaban ethyl acetate The composition containing the fraction as an active ingredient may be provided as an excellent acne treatment and cosmetic composition for preventing or improving acne.
도 1은 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)가 주입된 병변 부위를 나타내는 모식도로, 1번은 식염수(saline)가 주입된 부위이며, 2번은 여드름균(PA) 주입 후 미아베모자반 에틸 아세테이트 분획물이 포함되지 않은 연고(vechile)가 도포된 부위이며, 3번은 여드름균(PA) 주입 후 미아베모자반 에틸 아세테이트 분획물(SMYEE) 50μg이 포함된 연고를 도포한 부위이다 (PA: P. acnes).
도 2는 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)가 주입된 병변 부위에 미아베모자반 에틸 아세테이트 분획물(SMYEE) 50μg이 포함된 연고 또는 포함되지 않은 연고 도포 후 농양형성 변화를 확인한 헤모톡실린 & 에오신 염색 결과이다.
도 3은 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)가 주입된 병변 부위에 미아베모자반 에틸 아세테이트 분획물(SMYEE) 50μg이 포함된 연고 또는 포함되지 않은 연고 도포 후 호중구 침윤 억제 효과를 확인한 면역조직화학염색 결과이다 (PA: P. acnes, NIMP-R14: 호중구 마커).1 is a schematic diagram showing the lesion site in which the acne bacterium Propionibacterium acnes was injected, 1 is a saline injection site, and 2 is a miabemosaban after acne bacteria (PA) injection The site where the ointment (vechile) not containing the ethyl acetate fraction was applied, and number 3 was the site where the ointment containing 50 μg of the miabemozaban ethyl acetate fraction (SMYEE) was applied after acne bacteria (PA) injection (PA: P. acnes ).
Figure 2 is an acne bacterium, Propionibacterium acnes (Propionibacterium acnes) in the lesion site is injected with an ointment containing 50 μg of miabemozaban ethyl acetate fraction (SMYEE) or ointment containing ointment, hemotox after confirming the change in abscess formation This is the result of staining of cylin & eosin.
Figure 3 is an acne bacterium Propionibacterium acnes (Propionibacterium acnes) to the lesion site is injected with the mibemozaban ethyl acetate fraction (SMYEE) ointment containing 50μg or ointment after application of the ointment confirmed the effect of suppressing neutrophil infiltration Histochemical staining results (PA: P. acnes, NIMP-R14: neutrophil marker).
이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail.
미아베모자반(sargassum miyabei yendo)은 모자반(Sargassaceae)과 모자반(sargassum)속에 속하는 갈조류로 우리나라에서는 주로 남해안 및 제주도에 서식하고 있으나, 생리활성에 대해서는 다른 모자반속에 비해 많이 알려져 있지 않다. 이에 본 발명자들은 미아베모자반의 생리활성을 연구하던 중 미아베모자반이 여드름균에 의해 유도되는 여드름 치료에 우수한 효과를 나타내는 것을 확인함에 따라, 본 발명을 완성하였다.Sargassum miyabei yendo is a brown algae belonging to the genus Sargassaceae and sargassum, and is mainly found in the South Coast and Jeju Island in Korea. Accordingly, the present inventors completed the present invention, while studying the physiological activity of miabemozaban, confirming that miabemozaban exhibits an excellent effect on acne treatment induced by acne bacteria.
본 발명은 미아베모자반 에틸 아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유하는 여드름 예방 또는 치료용 약학조성물을 제공할 수 있다.The present invention can provide a pharmaceutical composition for preventing or treating acne containing the miabemozaban ethyl acetate fraction as an active ingredient.
상기 분획물은 미아베모자반 에탄올 추출물을 에틸 아세테이트로 분획하여 얻은 미아베모자반 에틸 아세테이트 분획물일 수 있으며, 보다 바람직하게는 70% 에탄올 수용액으로 추출된 미아베모자반 추출물의 에틸 아세테이트 분획물일 수 있다.The fraction may be a miabemozaban ethyl acetate fraction obtained by fractionating a miabemozaban ethanol extract with ethyl acetate, more preferably an ethyl acetate fraction of a miabemozaban extract extracted with a 70% aqueous ethanol solution.
상기 미아베모자반 에틸 아세테이트 분획물은 여드름균에 의해 유도되는 농양 형성 또는 호중구 침투를 억제할 수 있다.The miabemozaban ethyl acetate fraction may inhibit abscess formation or neutrophil penetration induced by acne bacteria.
상기 여드름은 스태피로코커스 에피더미스(Staphylococcus epidermis), 스태피로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus) 및 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)로 이루어진 여드름 유발 피부 상재균에 의해 유도될 수 있으며, 보다 바람직하게는 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)에 의해 유도되는 것일 수 있다.The acne can be induced by acne-causing dermatophytes consisting of Staphylococcus epidermis, Staphylococcus aureus, and Propionibacterium acnes, and more Preferably, it may be induced by Propionibacterium acnes.
상기 약학조성물은 피부외용제일 수 있다.The pharmaceutical composition may be an external preparation for skin.
보다 상세하게 상기 피부외용제는 연고제, 크림제, 로션제, 액제, 드레싱제, 패취제, 수포제, 테이프제, 연무제, 외용산제 및 스프레이제로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.In more detail, the external preparation for skin may be selected from the group consisting of ointment, cream, lotion, liquid, dressing, patch, blister, tape, aerosol, external acid and spray.
본 발명의 다른 구체예에서, 미아베모자반 에틸 아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유하는 약학조성물은 약학조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제, 붕해제, 감미제, 피복제, 팽창제, 윤활제, 활택제, 향미제, 항산화제, 완충액, 정균제, 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 첨가제를 추가로 포함할 수 있다.In another embodiment of the present invention, the pharmaceutical composition containing the miabemozaban ethyl acetate fraction as an active ingredient is a suitable carrier, excipient, disintegrant, sweetener, coating agent, swelling agent, lubricant, lubricant commonly used in the manufacture of pharmaceutical compositions. Agents, flavoring agents, antioxidants, buffers, bacteriostatic agents, diluents, dispersants, surfactants, binders and lubricants may further include one or more additives selected from the group consisting of.
구체적으로 담체, 부형제 및 희석제는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 사용할 수 있으며, 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트, 수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제할 수 있다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용할 수 있다. 경구를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 있으며 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제 등이 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기재로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.Specifically, carriers, excipients and diluents are lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, microcrystalline Cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil can be used, and solid dosage forms for oral administration include tablets, pills, powders, granules and capsules. Agents and the like, and such solid preparations may be prepared by mixing at least one excipient in the composition, for example, starch, calcium carbonate, sucrose or lactose, gelatin, and the like. In addition, lubricants such as magnesium stearate and talc may be used in addition to simple excipients. Liquid preparations for oral use include suspensions, liquid solutions, emulsions, syrups, etc. In addition to water and liquid paraffin, which are commonly used diluents, various excipients, such as wetting agents, sweeteners, fragrances, and preservatives, may be included. Formulations for parenteral administration include sterile aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, lyophilized preparations, suppositories, and the like. Non-aqueous solvents and suspensions may include propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oils such as olive oil, and injectable esters such as ethyl oleate. As a base for suppositories, witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin butter, and glycerogelatin may be used.
본 발명의 일실시예에 따르면 상기 약학 조성물은 정맥내, 동맥내, 복강내, 근육내, 동맥내, 복강내, 흉골내, 경피, 비측내, 흡입, 국소, 직장, 경구, 안구내 또는 피내 경로를 통해 통상적인 방식으로 대상체로 투여할 수 있다.According to an embodiment of the present invention, the pharmaceutical composition is intravenous, intraarterial, intraperitoneal, intramuscular, intraarterial, intraperitoneal, intrasternal, transdermal, intranasal, inhalation, topical, rectal, oral, intraocular or intradermal. Routes can be administered to a subject in a conventional manner.
상기 미아베모자반 에틸 아세테이트 분획물의 바람직한 투여량은 대상체의 상태 및 체중, 질환의 종류 및 정도, 약물 형태, 투여경로 및 기간에 따라 달라질 수 있으며 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 본 발명의 일실시예에 따르면 이에 제한되는 것은 아니지만 1일 투여량이 0.01 내지 200 mg/kg, 구체적으로는 0.1 내지 200 mg/kg, 보다 구체적으로는 0.1 내지 100 mg/kg 일 수 있다. 투여는 하루에 한 번 투여할 수도 있고 수회로 나누어 투여할 수도 있으며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것은 아니다.The preferred dosage of the miabemozaban ethyl acetate fraction may vary depending on the condition and weight of the subject, the type and extent of the disease, the drug form, the route and duration of administration, and may be appropriately selected by those skilled in the art. According to one embodiment of the present invention is not limited thereto, the daily dosage may be 0.01 to 200 mg / kg, specifically 0.1 to 200 mg / kg, and more specifically 0.1 to 100 mg / kg. The administration may be administered once a day or divided into several administrations, and the scope of the present invention is not limited thereby.
본 발명에 있어서, 상기 '대상체'는 인간을 포함하는 포유동물일 수 있으나, 이들 예에 한정되는 것은 아니다.In the present invention, the 'subject' may be a mammal including a human, but is not limited to these examples.
또한, 본 발명은 미아베모자반 에틸 아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유하는 여드름 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공할 수 있다.In addition, the present invention can provide a cosmetic composition for preventing or improving acne containing miabemozaban ethyl acetate fraction as an active ingredient.
상기 화장료 조성물은 유효성분인 미아베모자반 에틸 아세테이트 분획물 외에 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.The cosmetic composition may include a stabilizer, a solubilizing agent, a common auxiliary agent such as vitamins, pigments, and fragrances, and a carrier, in addition to the ethyl acetate fraction of miabemozaban as an active ingredient.
상기 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 썬 크림, 유연 화장수, 수렴 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.The cosmetic composition may be prepared in any formulation conventionally prepared in the art, for example, solutions, suspensions, emulsions, pastes, gels, creams, lotions, powders, oils, powder foundations, emulsion foundations, It may be formulated as a wax foundation and spray, but is not limited thereto. More specifically, it can be prepared in the form of a sun cream, soft lotion, converging lotion, nutrition lotion, nutrition cream, massage cream, essence, eye cream, pack, spray or powder.
상기 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜,실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation is a paste, cream or gel, animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicon, bentonite, silica, talc or zinc oxide may be used as a carrier component. .
상기 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component, and in the case of a spray, additionally chlorofluorohydrocarbon, propane / butane Or propellants such as dimethyl ether.
상기 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해 화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation is a solution or emulsion, a solvent, solubilizer or emulsifier is used as a carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1,3 -Fatty acid esters of butyl glycol oil, glycerol aliphatic esters, polyethylene glycol or sorbitan.
상기 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the formulation is a suspension, liquid diluents such as water, ethanol or propylene glycol as carrier components, ethoxylated isostearyl alcohol, suspensions such as polyoxyethylene sorbitol esters and polyoxyethylene sorbitan esters, microcrystalline cellulose , Aluminum metahydroxide, bentonite, agar or trakant, and the like.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 다만 하기의 실시예는 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 실시예는 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.Hereinafter, examples will be described in detail to help understanding of the present invention. However, the following examples are merely illustrative of the contents of the present invention, and the scope of the present invention is not limited to the following examples. The embodiments of the present invention are provided to more fully describe the present invention to those skilled in the art.
<< 실시예Example 1> 1> 미아베모자반Miabemojaban 연고 제조 Ointment manufacturer
1. One. 미아베모자반Miabemojaban 에틸 아세테이트( Ethyl acetate ( SargassumSargassum miyabeimiyabei YendoYendo ethyl acetate; SMYEE) ethyl acetate; SMYEE) 분획물Fraction 준비 Preparations
미아베모자반 70% 에탄올 추출물을 감압농축기로 농축하여 나온 농축물에 증류수를 넣어 1시간 동안 60℃ 온도로 현탁하였다. 그 후, 미아베모자반 70% 에탄올 현탁액을 용매 극성별 분획을 하기 위해 separatory funnel에 넣은 다음 1:1 비율의 헥산을 넣고 충분히 흔든 다음 3시간 동안 상온에서 방치하였다. 3시간 후 층 분리가 이루어지고 상층에 있는 헥산층을 따라내어 감압농축기로 농축하여 헥산 분획물을 완성하였으며, 이 과정을 3회 반복하였다.70% ethanol extract of miabemosaban was concentrated in a vacuum concentrator, and distilled water was added to the concentrated concentrate and suspended at 60 ° C for 1 hour. Thereafter, a 70% ethanol suspension of miabemozaban was added to a separatory funnel for fractionation by solvent polarity, and then hexane in a 1: 1 ratio was sufficiently shaken, and then allowed to stand at room temperature for 3 hours. After 3 hours, the layer was separated, the hexane layer on the upper layer was decanted, and concentrated under reduced pressure to complete the hexane fraction, and the process was repeated 3 times.
상기 헥산층을 따라내고 남은 증류수층에 다음 극성 용매인 클로로포름을 넣고 충분히 흔든 다음 3시간 동안 상온에서 방치하였다. 3시간 후 층 분리가 이루어지고 하층에 있는 클로로포름층을 따라내어 감압농축기로 농축하여 클로로포름 분획물을 완성하였으며, 상기 과정을 3회 반복하였다.The hexane layer was decanted and the remaining distilled water layer was added with the next polar solvent, chloroform, shaken sufficiently, and then left at room temperature for 3 hours. After 3 hours, the layer separation was performed, the chloroform layer at the lower layer was decanted, and concentrated by a vacuum concentrator to complete the chloroform fraction, and the above process was repeated 3 times.
상기 클로로포름층을 따라내고 남은 증류수층에 다음 극성 용매인 에틸 아세테이트를 넣고 충분히 흔든 다음 3시간 동안 상온에서 방치하고, 3시간 후 층 분리가 이루어지고 상층에 있는 에틸 아세테이트층을 따라내어 감압농축기로 농축하여 에틸 아세테이트 분획물을 얻었으며, 상기 과정을 3회 반복하였다.After decanting the chloroform layer, add the next polar solvent ethyl acetate to the remaining distilled water layer, shake it sufficiently, and then leave it at room temperature for 3 hours. After 3 hours, the layer is separated and the ethyl acetate layer on the upper layer is decanted and concentrated in a vacuum concentrator. To obtain an ethyl acetate fraction, the process was repeated 3 times.
2. 2. 미아베모자반Miabemojaban 연고 제조 Ointment manufacturer
상기 과정으로 분획한 미아베모자반 에틸 아세테이트 분획물 (SMYEE)이 함유된 연고를 제조하였다.The ointment containing the miabemozaban ethyl acetate fraction (SMYEE) fractionated by the above process was prepared.
SMYEE 스탁 (25 mg/mL in 70% 에탄올) 0.4 mL과 증류수 1.3 mL를 비커 A에 담고 60~70℃ 온도로 유지시킨 물이 든 비커에서 중탕방법으로 가열하였다.0.4 mL of SMYEE stock (25 mg / mL in 70% ethanol) and 1.3 mL of distilled water were added to Beaker A and heated in a beaker with water maintained at a temperature of 60 to 70 ° C by a hot water method.
또한, 유상 호호바오일 0.22g에 이멀시파일 0.04g과 올리브유화 0.04g이 혼합된 유화제를 비커 B에 담아 마그네틱 바를 이용하여 교반시키면서 중탕방법으로 60~70℃ 온도가 되도록 가열하였다.In addition, an emulsifier mixed with 0.22 g of oil-based jojoba oil, 0.04 g of emulsion, and 0.04 g of olive oil was placed in a beaker B and stirred using a magnetic bar, and heated to a temperature of 60 to 70 ° C by a hot water method.
호호바오일과 유화제가 녹아 혼합되면 SMYEE가 포함된 비커 A의 용액을 비커 B에 첨가하고 교반속도를 최대로 높여 5초간 혼합시켰다.When jojoba oil and emulsifier were dissolved and mixed, a solution of beaker A containing SMYEE was added to beaker B, and the stirring speed was increased to maximum and mixed for 5 seconds.
이후 천천히 교반시키면서 냉각시켜 굳는 농도를 확인하고 천연방부제인 나프리 20μl를 첨가하여 잘 혼합한 후 적당한 용기에 담아 냉장보관하였다.Thereafter, the mixture was cooled while stirring slowly, and the concentration was confirmed. After adding 20 μl of Napre, a natural preservative, the mixture was well mixed and stored in a suitable container for refrigeration.
또한, 대조군으로 미아베모자반 에틸 아세테이트 분획물 (SMYEE)을 대신 70% 에탄올 0.4 mL을 첨가하여 상기와 동일한 방법으로 SMYEE가 포함되지 않은 연고를 제조하였다.Also, as a control, an ointment not containing SMYEE was prepared in the same manner as above by adding 0.4 mL of 70% ethanol to the miabemozaban ethyl acetate fraction (SMYEE) instead.
<< 실시예Example 2> 항 여드름 효과 확인 2> Confirm anti-acne effect
1. 여드름 동물 모델 제작1. Acne animal model production
안정화 기간이 지난 후 마우스 등의 귀 하단부에서부터 꼬리 상단부까지 전체를 제모하고 24시간 방치한 후 3등분하여 도 1과 같이 각 두 부위 (2 및 3번)에 소독된 주사기를 이용하여 1×106 CFUs/10 μL의 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes; P.acnes) 여드름균을 주입하여 여드름을 유도하였으며, 4일 후 마우스 피부의 염증 상태를 확인하였다.1 × 10 6 by using the sterilization in each of the two parts (2 and 3), the syringe as shown in Figure 1 by three equal parts after epilation the whole is allowed to stand for 24 hours after a stabilization period has passed from the lower end of the ear such as a mouse to tail upper end Acne was induced by injecting CFUs / 10 μL of Propionibacterium acnes (P.acnes) acne, and after 4 days, the inflammation of the mouse skin was confirmed.
2. 2. 미아베모자반Miabemojaban 연고 도포에 따른 염증 크기 변화 확인 Confirmation of changes in the size of inflammation due to application of ointment
여드름균 주사 4일 후, 대조군인 미아베모자반 에틸 아세테이트 분획물(SMYEE)이 포함되지 않은 연고를 마우스 등 피부 2번 부위에 1일 2회씩 4일간 도포하였으며, SMYEE 50 μg이 함유된 연고를 대조군과 동일한 방법으로 마우스 등 피부 3번 부위에 도포하고 P.acnes로 유도된 농양 크기 변화를 육안으로 관찰하였다.4 days after injection of acne bacteria, ointment not containing the control group miabemozaban ethyl acetate fraction (SMYEE) was applied twice daily for 2 days to the skin and other areas of the skin, such as mice, and SMYEE 50 μg ointment was added to the control group. The same method was applied to areas of the skin, such as the mouse, and the size change of the abscess induced by P. acnes was visually observed.
그 결과, SMYEE가 함유되지 않은 연고가 도포된 2번 부위의 대조군에서는 염증 반응 감소가 확인되지 않은 반면, SMYEE가 함유된 연고가 도포된 3번 부위에서는 농양 크기가 현저하게 감소된 것을 확인할 수 있었다.As a result, it was confirmed that the reduction of the inflammatory response was not observed in the control of the site 2 where the SMYEE-free ointment was applied, whereas the size of the abscess was significantly reduced in the site 3 of the SMYEE-containing ointment. .
3. 조직병리학적(3. Histopathology ( HistopathologicalHistopathological ) 분석) analysis
연고 도포 4일 후 마우스 여드름 동물모델 등에서 세 부위의 피부조직을 적출하였다. 적출한 각 피부조직을 10% 포르말린에 고정시킨 후 일련의 조직처리과정을 거쳐 파라핀 포매기로 포매하였다.Four days after application of the ointment, skin tissue from three parts was removed from an animal model such as a mouse acne. Each extracted skin tissue was fixed in 10% formalin and then embedded in a paraffin embedder through a series of tissue treatment processes.
파라핀 포매 조직을 4 μm 두께로 절단하여 제작한 조직 절편을 헤마톡실린 & 에오신 염색한 후 광학현미경으로 조직을 관찰하였다.Paraffin-embedded tissue was cut to a thickness of 4 μm, tissue sections prepared were stained with hematoxylin & eosin, and then observed with an optical microscope.
그 결과, 도 2와 같이 SMYEE가 함유된 연고를 도포한 3번 피부 조직의 농양 형성은 SMYEE가 함유되지 않은 연고를 도포한 2번 피부 조직보다 현저하게 억제된 것을 확인할 수 있었다.As a result, as shown in FIG. 2, it was confirmed that the abscess formation of the skin tissue 3 with SMYEE-containing ointment was significantly suppressed than that of skin No. 2 with SMYEE-containing ointment.
4. 면역조직화학 염색 분석4. Immunohistochemical staining analysis
연고 도포 4일 후 마우스 여드름 동물모델 등에서 세 부위의 피부조직을 적출하였다. 적출한 각 피부조직을 10% 포르말린에 고정시킨 후 일련의 조직처리과정을 거쳐 파라핀 포매기로 포매하였다.Four days after application of the ointment, skin tissue from three parts was removed from an animal model such as a mouse acne. Each extracted skin tissue was fixed in 10% formalin and then embedded in a paraffin embedder through a series of tissue treatment processes.
파라핀 포매 조직을 4 μm 두께로 절단하여 제작한 조직 절편 슬라이드에 호중구 특이 항체(NIMP-R14, 호중구 마커)로 면역 화학염색을 수행하여 호중구(neutrophils) 분포양상을 확인하였다.Paraffin-embedded tissue was cut to a thickness of 4 μm and immunochemical staining was performed with a neutrophil-specific antibody (NIMP-R14, neutrophil marker) on a tissue section slide prepared to confirm the distribution of neutrophils.
그 결과, 도 3과 같이 P. acnes를 주입한 2번 부위의 조직 절편에서는 호중구의 수가 증가된 것이 확인되었으며, P. acnes 주입 후 1일 2회 4일간 SMYEE가 함유된 연고를 도포한 3번 부위에서는 호중구 수가 SMYEE가 함유되지 않은 연고를 도포한 2번 부위 조직보다 유의하게 감소된 것을 확인할 수 있었다.As a result, as shown in FIG. 3, it was confirmed that the number of neutrophils was increased in the tissue section of the site 2 injected with P. acnes. In the site, it was confirmed that the number of neutrophils was significantly reduced than the tissue of site 2, which was applied with ointment without SMYEE.
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.Since the specific parts of the present invention have been described in detail above, for those skilled in the art, it is clear that such specific technology is only a preferred embodiment, and the scope of the present invention is not limited thereby. something to do. Therefore, the substantial scope of the present invention will be defined by the appended claims and their equivalents.
Claims (7)
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Non-Patent Citations (1)
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|---|
| Yeon-Ji Kim 등, 2017 KoSFoST International Symposium and Annual Meeting, P15-048 (2017.06.23. 공개)* |
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