KR102111752B1 - 콜라겐 합성 촉진용 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 구주물푸레, 쓴박하 및 약석잠풀로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상의 식물의 추출물 또는 이의 분획물의 발효물을 함유하는 콜라겐 합성 촉진용 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 콜라겐 합성 촉진용 조성물을 이용하여 피부주름을 예방, 개선 또는 치료하는 방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 콜라겐 합성 촉진용 조성물을 함유하는 화장료 조성물, 식품 조성물, 의약외품 조성물 및 약학 조성물에 관한 것이다.

Description

콜라겐 합성 촉진용 조성물{Composition for promoting collagen synthesis}
본 발명은 구주물푸레, 쓴박하 및 약석잠풀로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상의 식물의 추출물 또는 이의 분획물의 발효물을 함유하는 콜라겐 합성 촉진용 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 콜라겐 합성 촉진용 조성물을 이용하여 피부주름을 예방, 개선 또는 치료하는 방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 콜라겐 합성 촉진용 조성물을 함유하는 화장료 조성물, 식품 조성물, 의약외품 조성물 및 약학 조성물에 관한 것이다.
세포 외 기질(extracellular matrix)의 주요 구성성분인 콜라겐은 피부의 섬유아세포에서 생성되는 주요 기질 단백질이다. 또한, 생체 단백질 총 중량의 약 30%를 차지하는 중요한 단백질로서 견고한 3중 나선 구조로 되어 있다. 콜라겐은 피부, 건(tendon), 뼈 및 치아의 유기물질의 대부분을 형성하는데, 특히 뼈와 피부(지피)에 그 포함량이 높다. 대부분의 다른 체내 구조물에서는 섬유상 봉입체로서 존재한다.
콜라겐은 비교적 약한 면역원인데, 이는 콜라겐의 나선구조에 의한 잠재성 항원 결정인자의 차폐가 그 일부 원인이고, 이 나선구조는 또한 콜라겐이 단백질 분해에 대한 내성을 갖도록 한다. 콜라겐의 주된 기능으로는 피부의 기계적 견고성, 결합조직의 저항력과 조직의 결합력, 세포 접착의 지탱, 세포 분할과 분화(유기체의 성장 혹은 상처 치유시)의 유도 등이 알려져 있다(Van der Rest 등, Ann NY Acad Sci, 1990).
이러한 콜라겐은 연령 및 자외선 조사에 의한 광노화에 의해 감소하며, 이는 피부의 주름 형성과 밀접한 연관이 있다고 알려져 있다(Arthur K. Balin et al., Aging and the skin, 1989). 또한 콜라겐은 상처치유에 있어서 중요한 역할을 담당하며, 손상된 상피에서 콜라겐의 합성을 촉진시켜서 상처를 신속하고 흉터 없이 회복시킬 수 있다.
종래에는 콜라겐의 피부 보습 효과 및 상처 치유 효과를 이용하기 위하여 화장품 또는 연고 등과 같은 피부외용제 조성물에 콜라겐을 배합한 제품들이 출시되어 있으나, 이들 제품들은 콜라겐 자체를 피부 표면에 도포하는 것으로서 고분자 물질인 콜라겐의 경피 흡수가 어려워 보습작용 또는 상처치유 효과를 기대할 수 없으므로 본질적인 피부기능 개선 및 상처치유의 기능을 나타낸다고 말할 수 없었다.
이러한 문제를 해결하기 위하여 콜라겐 합성 촉진 물질에 대한 관심이 높아졌으며, 종래에 알려진 콜라겐 합성촉진 물질로는 비타민 C, 레티노익산(retinoic acid), 발암증식인자(transforming growth factor, TGF)(Cardinale G. 35 al, Adv. Enzymol., 41, p.425, 1974), 동물 태반 유래의 단백질(일본공개특허공보 평8-231370), 베툴린산(betulinic acid)(일본공개특허공보 평8-208424), 클로렐라 추출물(일본공개특허공보 평9-40526, 일본공개특허공보 평10-36283, 섬유아세포 증식 촉진작용) 등이 있다.
그러나, 이들 물질은 피부적용시 자극, 발적 등의 안전성 문제로 사용량의 제한이 있거나, 효과가 미미하여 실질적으로 피부기능 개선 또는 상처 치유의 효과를 기대할 수 없었다. 따라서, 기존의 피부외용제 조성물보다 생체에 안전하고 효과가 높은 새로운 피부외용제 조성물의 개발이 절실히 요구되고 있다.
한편, 미생물이 가지고 있는 효소를 이용하여 유기물을 분해시키는 과정을 발효라고 한다. 발효와 부패는 비슷한 과정에 의해 진행되지만 분해 결과 우리의 생활에 유용하게 사용되는 물질이 만들어지면 발효라 하고, 악취가 나거나 유해한 물질이 만들어지면 부패라고 한다. 따라서, 약용식물을 미생물을 이용하여 발효시키면 약용식물의 독성이 감소되거나, 저분자화되어 소화가 용이하거나, 피부에 도포시 경피흡수 등이 용이하게 되어 생체 이용률이 향상된다.
또한, 약용 식물들은 그 자체로도 약리 작용을 나타낼 수 있지만 발효를 통해 약리효과가 더욱 강화되어 발효 전의 약용식물에 없던 새로운 약리작용을 발휘할 수 있다.
이러한 배경하에, 본 발명자들은 콜라겐 합성 촉진효과가 우수하여 피부 주름개선 효과 및 상처 치유 효과와 그 효과의 지속성이 뛰어난 물질에 대한 연구를 수행하였으며, 이에 구주물푸레, 쓴박하 및 약석잠풀로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상의 식물의 추출물 또는 이의 분획물의 발효물이 콜라겐 합성을 촉진하는 효능이 있음을 규명하고, 이를 활용한 콜라겐 합성 촉진용 조성물을 완성하기에 이르렀다.
본 발명은 구주물푸레, 쓴박하 및 약석잠풀로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상의 식물의 추출물 또는 이의 분획물의 발효물을 유효 성분으로 함유하는 조성물을 이용하여 콜라겐 합성을 촉진하는 것을 목적으로 한다.
구체적으로, 본 발명의 하나의 목적은 상기 콜라겐 합성 촉진용 조성물을 이용하여 피부주름을 예방, 개선 또는 치료하기 위한 화장료, 식품, 의약외품 또는 약학 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 콜라겐 합성 촉진용 조성물을 이용하여 피부주름을 예방, 개선 또는 치료하는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명의 일 구현예로서, 구주물푸레, 쓴박하 및 약석잠풀로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상의 식물의 추출물 또는 이의 분획물의 발효물을 유효성분으로 함유하는 콜라겐 합성 촉진용 조성물을 제공한다.
본 발명의 또 다른 일 구현예에서, 상기 콜라겐 합성 촉진용 조성물은 블랙커민, 설령쥐오줌풀 및 장엽대황으로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상의 식물의 추출물 또는 이의 분획물의 발효물을 추가로 함유할 수 있다.
본 발명의 구주물푸레(Fraxinus Excelsior)는 풀레나무속(Fraxinus)에 속하는 낙엽 활엽 교목으로 유럽이 원산지이며 한국 각지의 산에 분포한다. 구주물푸레는 항산화, 항바이러스, 항균효과로 사용된다. 구주물푸레로부터 분리된 화합물로는 잎 부위에서 분리된 카페익산이 알려져 있다.
본 발명의 쓴박하(Marrubium Vulgare)는 꿀풀과(Lamiaceae)에 속하는 일년생 초본으로 항염과 항히스타민 효과가 있다. 또한, 쓴박하는 위액과 담즙의 분비를 촉진하고 거담작용을 한다. 이에 따라, 복부 팽만감이나 가스와 같은 소화장애에 이용할 수 있고 기관지의 염증 완화에도 이용할 수 있다. 쓴박하로부터 분리된 화합물로 고미질과 타닌이 알려져 있다.
본 발명의 약석잠풀(Stachys officinalis)은 꿀풀과(Lamiaceae)에 속하는 다년생 초본으로 유럽이 원산지이며 서아시아, 북아메리카 등에 분포한다. 약석잠풀은 관절염이나 통풍에 좋고 숙취 해소에도 효능이 있다.
본 발명의 블랙커민(Nigella sativa)은 미나리아재비과(Ranunculaceae)에 속하는 일년생 초본으로 면역력증진과 알레르기 및 항암 치료 등에 사용된다. 불랙커민으로부터 분리된 화합물로는 타이모퀴논(thymoquinone), 타이모하이드로퀴논(thymohydroquinone), 디타이모퀴논(dithymoquinone), 타이몰(thymol), 카바크롤(carvacrol) 등이 알려져 있다. 또한, 불랙커민의 씨와 오일, 다양한 추출물과 그 활성 성분들은 면역강화와 항염증, 고혈당저하, 고혈압방지, 천식방지, 항균, 항기생충, 항산화 및 항암작용을 포함한 약리적 효능을 가지는 것으로 알려져 있다.
본 발명의 설령쥐오줌풀(Valeriana Officinalis)은 미타리과(Valerianaceae)에 속하는 다년생 초본으로 유럽과 북아시아가 원산지이고 한국, 일본, 사할린, 타이완, 중국 동북부에 분포한다. 유럽에서는 설령쥐오줌풀의 뿌리를 이뇨제, 진통제, 타박상 등에 사용하였으며, 현재는 히스테리와 노이로제 등에 사용한다. 또한, 한방에서는 설령쥐오줌풀의 뿌리를 정신불안증, 신경쇠약, 심근염, 위경련 등에 약재로 사용한다.
본 발명의 장엽대황(Rheum Palmatum)은 마디풀과(Polygonaceae)에 속하는 일년생 직립 초본으로 항균 및 지혈작용이 있다. 또한, 장엽대황의 약리작용으로는 대장운동 촉진, 사하작용, 해열, 체온강하, 담즙분비촉진, 혈액응고 시간단축, 항균, 이뇨, 간기능보호 등이 알려져 있다. 장엽대황으로부터 분리된 화합물로는 에모딘(emodin)이 알려져 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, "추출물"은 각각의 식물의 추출 처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다. 본 발명의 상기 추출물 또는 분획물은 바람직하게는 추출 후 건조 분말 형태로 제조되어 사용될 수 있다.
본 발명의 상기 추출물은, 상기 각각의 식물의 천연, 잡종 또는 변종 식물의 다양한 기관으로부터 추출될 수 있고, 예를 들어 각각의 식물의 뿌리, 지상부, 줄기, 잎, 꽃, 열매의 몸통, 열매의 껍질, 종자뿐만 아니라 식물 조직 배양물로부터도 추출이 가능하다.
본 발명의 상기 구주물푸레 추출물은 바람직하게는 구주물푸레의 잎의 추출물일 수 있다.
본 발명의 상기 쓴박하 추출물은 바람직하게는 쓴박하의 지상부의 추출물일 수 있다.
본 발명의 상기 약석잠풀 추출물은 바람직하게는 약석잠풀의 지상부의 추출물일 수 있다.
본 발명의 상기 블랙커민 추출물은 바람직하게는 블랙커민의 지상부의 추출물일 수 있다.
본 발명의 상기 설령쥐오줌풀 추출물은 바람직하게는 설령쥐오줌풀의 지상부의 추출물일 수 있다.
본 발명의 상기 장엽대황 추출물은 바람직하게는 장엽대황의 지상부의 추출물일 수 있다.
본 발명의 상기 각각의 식물 추출물에 있어서, 상기 각각의 식물을 추출하는 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2 종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.
본 발명에서 상기 각각의 식물을 추출하는 데에 사용되는 추출 용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 추출 용매의 비제한적인 예로는 물, 알코올 또는 이들의 혼합 용매 등을 들 수 있으며, 알코올을 용매로 사용하는 경우에는 보다 바람직하게는 C1 내지 C4의 알코올을 사용할 수 있다. 본 발명의 각각의 식물 추출물은 바람직하게는 물 또는 메탄올 추출물일 수 있다.
구체적으로, 본 발명의 일 실시예에서는 생약용 식물로 시판되는 구주물푸레, 쓴박하, 약석잠풀, 블랙커민, 설령쥐오줌풀 및 장엽대황으로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상의 식물을 구입하여 잘게 분쇄하고, 분쇄물 건조 중량에 대하여 5 내지 20 부피의 물이나, C1 내지 C4의 무수 또는 함수 저급알코올과 같은 유기용매를 사용하여 환류냉각기가 달린 추출기에서 50 내지 100℃로 1 내지 5 시간 동안 가열하여 각각의 식물의 추출물을 추출한다. 그 다음 여과포로 여과한 후, 잔사를 상기와 동일한 방법으로 1 회 이상씩 더 추출한 후, 추출액들을 합하여 감압농축하고, 동결건조 또는 분무건조하여 건조추출물을 얻을 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, "분획물"은 여러 다양한 구성 성분들을 포함하는 혼합물로부터 특정 성분 또는 특정 성분 그룹을 분리하기 위하여 분획을 수행하여 얻어진 결과물을 의미한다.
본 발명에서 상기 분획물을 얻는 분획 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 수행될 수 있다. 상기 분획 방법의 비제한적인 예로는, 각각의 식물을 추출하여 얻은 추출물에 소정의 용매를 처리하여 상기 추출물로부터 분획물을 얻는 방법을 들 수 있다.
본 발명에서 상기 분획물을 얻는 데에 사용되는 분획 용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 분획 용매의 비제한적인 예로는 물, 알코올 등의 극성 용매; 헥산(Hexane), 에틸 아세테이트(Ethyl acetate), 클로로포름(Chloroform), 디클로로메탄(Dichloromethane) 등의 비극성 용매 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합하여 사용될 수 있다. 상기 분획 용매 중 알코올을 사용하는 경우에는 바람직하게는 C1 내지 C4의 알코올을 사용할 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, "발효"는 미생물이 자신이 가지고 있는 효소를 이용하여 유기물을 분해시키는 과정 중 부패 반응이 아닌 것을 의미한다. 발효 반응과 부패 반응은 비슷한 과정에 의해 진행되지만, 분해 결과 유용한 물질이 만들어지면 발효라 하고 악취가 나거나 유해한 물질이 만들어지면 부패라고 한다.
본 발명에서 사용되는 용어, "발효물"은 상기 발효 과정을 통해 생성된 유용한 물질을 의미한다.
본 발명의 또 다른 일 구현예에서, 상기 발효물은 상기 식물의 추출물 또는 이의 분획물의 효모 발효물, 유산균 발효물 및 비피더스균 발효물로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 한다.
본 발명에서 상기 효모, 유산균 및 비피더스균으로부터 발효물을 수득하는 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야 또는 유사 분야에서 통상적으로 사용되는 방법에 따라 발효물을 수득할 수 있다.
본 발명에서, 상기 효모, 유산균 및 비피더스균으로부터 발효물을 수득하는 방법은 상기 각각의 식물의 추출물을 효모, 유산균 또는 비피더스균에 대한 기본배지에 첨가하고 각각의 해당 발효 균주, 즉 효모, 유산균 또는 비피더스균을 처리하여 발효시킴으로써 수득할 수 있다. 상기 발효 공정의 온도, 발효 시간 등은 특별히 제한되지 아니하며, 발효 전구체 물질 등에 따라 다양하게 선택될 수 있다.
본 발명에서, 상기 식물의 추출물 또는 이의 분획물은 효모, 유산균 또는 비피더스균의 배양을 위한 배지에 바람직하게는 1 내지 20 중량%로 첨가될 수 있으며, 보다 바람직하게는 1 중량% 내지 10 중량%로 첨가될 수 있고, 더욱 바람직하게는 3 중량% 내지 7 중량%로 첨가될 수 있다. 상기 범위 내에서 콜라겐 합성 촉진능이 우수한 발효물을 얻을 수 있는 이점이 있다.
본 발명의 또 다른 일 구현예에서, 상기 효모는 사카로마이세스 세레비지아에(Saccharomyces cerevisiae), 스키조사카로마이세스 엘립소이드(Schizosaccharomyces ellipsoids) 및 사카로마이세스 보울라디(Saccharomyces boulardii)로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상일 수 있으며, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 또 다른 일 구현예에서, 상기 유산균은 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus), 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri), 락토바실러스 콘푸수스(Lactobacillus confusus), 락토바실러스 퍼멘텀(Lactobacillus fermentum) 및 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis)로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상일 수 있으며, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 또 다른 일 구현예에서, 상기 비피더스균은 비피도박테리움 브레베(Bifidobacterium breve), 비피도박테리움 비피둠(Bifidobacterium bifidum), 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) 및 비피도박테리움 인판티스(Bifidobacterium infantis)로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상일 수 있으며, 이에 제한되는 것은 아니다.
구체적으로, 미생물로 효모를 사용할 경우에는 블랙커민, 구주물푸레, 쓴박하, 약석잠풀, 설령쥐오줌풀 및 장엽대황으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 식물의 추출물 또는 이의 분획물이 각각 함유된 기본 배지(YM 배지)에 효모를 바람직하게는 약 105∼107cells/mL로 접종한 후, pH 5.5∼6.5, 온도 25∼35℃, 통기량 0.05∼0.5 VVM의 조건을 유지하면서 30∼120 시간 동안 배양한다. 그 뒤, 이 발효액을 원심분리하여 고분자 침전물과 효모균체를 제거하고, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 감압농축한 후 동결건조하여 각각의 발효물을 수득할 수 있다.
한편, 미생물로 유산균을 사용할 경우에는 블랙커민, 구주물푸레, 쓴박하, 약석잠풀, 설령쥐오줌풀 및 장엽대황으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 식물의 추출물 또는 이의 분획물이 각각 함유된 기본 배지(MRS 배지)에 유산균을 바람직하게는 약 105∼107cells/mL로 접종한 후, pH 6.5∼7.5, 온도 35∼38℃, 통기량 1 VVM의 조건을 유지하면서 24∼120 시간 동안 배양한다. 그 뒤, 이 발효액을 원심분리하여 고분자 침전물과 유산균체를 제거하고, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 감압농축한 후 동결건조하여 각각의 발효물을 수득할 수 있다.
또한, 미생물로 비피더스균을 사용할 경우에는 블랙커민, 구주물푸레, 쓴박하, 약석잠풀, 설령쥐오줌풀 및 장엽대황으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 식물의 추출물 또는 이의 분획물이 각각 함유된 기본 배지(BL 배지)에 비피더스균을 바람직하게는 약 105∼107cells/mL로 접종한 후, pH 6.5∼7.5, 온도 35∼38℃, 혐기배양 조건을 유지하면서 24∼120 시간 동안 배양한다. 그 뒤, 이 발효액을 원심분리하여 고분자 침전물과 비피더스균체를 제거하고, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 감압농축한 후 동결건조하여 각각의 발효물을 수득할 수 있다.
본 발명에서, 상기 각각의 발효 균주로부터 수득한 발효물은 발효된 물질 자체뿐만 아니라, 발효 균주 및 발효물이 공존하는 발효 균주 배양 배지, 상기 배양 배지로부터 발효 균주를 원심분리하여 제거한 발효물, 상기 배양 배지로부터 발효 균주를 여과시킨 발효물, 상기 배양 배지로부터 발효 균주를 멸균처리하고 이를 여과시킨 발효물, 상기 발효물 또는 이를 포함하는 배양 배지를 추출한 추출물, 상기 발효물 또는 이의 추출물을 희석시킨 희석액, 상기 발효물 또는 이의 추출물을 건조시킨 건조물 등, 상기 발효 균주로부터 발생한 발효물을 포함하는 모든 종류의 물질을 포함한다.
본 발명에서, 상기 발효물을 수득하는 방법은, 바람직하게는 발효가 종료된 후 발효 균주를 포함한 고형물을 원심분리하여 제거하여 수득할 수 있다.
또한, 본 발명의 발효물은 감압 농축 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.
본 발명에서, 상기 발효물은 바람직하게는 구주물푸레, 쓴박하, 약석잠풀, 블랙커민, 설령쥐오줌풀 및 장엽대황으로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상의 식물의 추출물 또는 이의 분획물의 효모 발효물, 유산균 발효물 및 비피더스균 발효물의 혼합 발효물일 수 있다. 구체적으로, 상기 혼합 발효물은 구주물푸레, 쓴박하, 약석잠풀, 블랙커민, 설령쥐오줌풀 및 장엽대황으로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상의 식물의 추출물 또는 이의 분획물을 효모로 발효시킨 효모 발효물, 유산균으로 발효시킨 유산균 발효물, 및 비피더스균으로 발효시킨 비피더스균 발효물을 함께 혼합하여 제조할 수 있다. 이러한 효모 발효물, 유산균 발효물 및 비피더스균 발효물의 혼합 발효물의 경우, 콜라겐 합성 촉진 효과가 더 우수한 이점이 있다.
본 발명의 상기 콜라겐 합성 촉진용 조성물에서, 상기 발효물의 함량의 총량은 바람직하게는 상기 콜라겐 합성 촉진용 조성물의 전체 중량을 기준으로 0.0001 내지 20 중량%로 함유될 수 있으며, 보다 바람직하게는 0.01 중량% 내지 10 중량%로 함유될 수 있다. 상기 범위 내에서 세포 독성 없이 콜라겐 합성 촉진능이 우수한 이점이 있으며, 특히 0.0001 중량% 미만일 경우에는 뚜렷한 효과를 기대할 수 없다.
본 발명의 구주물푸레, 쓴박하 및 약석잠풀로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상의 식물의 추출물 또는 이의 분획물의 발효물을 유효성분으로 함유하는 콜라겐 합성 촉진용 조성물은 콜라겐 합성 촉진능을 가지는 것으로 확인되었으며, 이는 본 발명에서 최초로 규명된 것이다. 또한, 본 발명의 상기 조성물은 천연물 유래의 물질이어서 독성이 없으며, 인체에 적용하여도 부작용이 유발되지 않아 다양한 화장료 조성물, 식품 조성물, 약학 조성물 및 의약외품 조성물 등으로 활용될 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, "콜라겐"은 인체 내에서 양적 및 기능적으로 가장 큰 부분을 차지하는 단백질로, 인체 내 모든 세포의 뼈대를 형성하는 세포외기질(extracellular matrix), 보다 구체적으로 결합조직(connective tissue)의 주요 구성 인자를 의미한다. 콜라겐을 다량 함유하는 인체 조직으로는 피부(skin), 뼈 및 연골 등의 골(bone) 조직, 건(tendon), 인대(ligament) 등이 있다. 상기 조직들의 노화로 인해 피부 주름 및 처짐, 골다공증 등의 인체 노화 질환들이 비롯되며, 이는 조직의 콜라겐 합성 감소로 인한 체내 콜라겐 양 및 기능 감소에 의한 것으로 알려져 있다.
한편, 피부섬유아세포의 주된 기능으로 세포외기질 합성과 증식을 통한 손상된 피부 조직 재생 등을 들 수 있는데, 광노화와 같은 외인성노화 요인 또는 유리 산소에 의한 손상 누적, 텔로미어 단절로 인한 세포 노화 등에 따른 내인성 노화 요인들은 진피층 내에 있는 피부섬유아세포의 생리 활성 기능을 저하시키게 된다. 피부 세포외기질 중 95% 이상을 차지하고, 세포의 부착분자(adhesion molecule) 및 세포 골격(cytoskeleton) 등과의 상호 작용과 신호 교류를 통해 섬유아세포의 생리 활성에 매우 주요한 부분을 담당하는 제I형 콜라겐의 합성이 저하될 경우, 피부 조직 내 콜라겐 양이 감소되고, 이에 따라 표면 장력이 감소되어 피부 주름을 형성할 뿐만 아니라, 세포의 증식 및 재생 기능을 포함하는 생리 활성 기능이 감소하는 악순환의 원인이 된다. 따라서, 피부섬유아세포의 콜라겐은 피부 노화, 피부 주름 형성 및 피부 손상 시 조직의 수복 또는 재생과 직접적인 관련이 있다고 볼 수 있다.
즉, 피부섬유아세포의 콜라겐 또는 프로콜라겐의 합성이 촉진되면, 피부 주름을 예방 및 개선하며, 상처를 치유하고, 손상된 피부 조직을 수복 및 재생하며, 피부 노화를 방지 및 개선할 수 있다.
구체적으로, 본 발명의 일 실험예에서는 구주물푸레, 쓴박하 및 약석잠풀을 비롯하여 블랙커민, 설령쥐오줌풀 및 장엽대황의 발효물을 각각 사용한 경우, 기본배지를 사용한 것보다 인간유래의 섬유아세포에서 콜라겐 생성량이 현저히 증가되었으며, 전혀 정제되지 않은 상태임을 감안하면 기존에 알려진 콜라겐 합성 촉진물질인 비타민 C와 비교하여 섬유아세포에서 동등 이상의 매우 강력한 콜라겐 합성 촉진능이 있음을 확인하였다(실험예 1). 따라서, 상기 각각의 식물 추출물의 발효물을 유효성분으로 하는 본 발명의 콜라겐 합성 촉진용 조성물은 강력한 콜라겐 합성 촉진능을 가지고 있으므로, 피부주름 개선제나 상처치유제로 매우 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있다.
본 발명의 다른 구현예에 따르면, 구주물푸레, 쓴박하 및 약석잠풀로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상의 식물의 추출물 또는 이의 분획물의 발효물을 유효성분으로 함유하는 콜라겐 합성 촉진용 조성물을 제조하는 방법을 제공한다.
구체적으로, 구주물푸레, 쓴박하 및 약석잠풀로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상의 식물을 추출하는 단계; 및 상기 추출 단계에서 수득한 추출물을 효모, 유산균 및 비피더스균으로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상의 균주로 발효시키는 단계를 포함하는 콜라겐 합성 촉진용 조성물의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 또 다른 일 구현예에서, 상기 발효 단계는 상기 추출물을 효모, 유산균 및 비피더스균으로 각각 발효하여 효모 발효물, 유산균 발효물 및 비피더스균 발효물을 수득하는 단계; 및 상기 효모 발효물, 유산균 발효물 및 비피더스균 발효물을 혼합하여 혼합 발효물을 제조하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 상기 제조 방법에서, 상기 각 단계에 관한 설명은 본 발명의 상기 조성물과 관련하여 상기에서 설명한 바와 동일하다.
본 발명의 또 다른 일 구현예로서, 상기 콜라겐 합성 촉진용 조성물을 유효성분으로 함유하는 피부주름 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에서 사용되는 용어, "예방"이란, 본 발명의 상기 조성물을 개체에 투여하여 피부주름의 발생을 억제시키거나 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어, "개선"은 치료되는 상태와 관련된 파라미터, 예를 들면 증상의 정도를 적어도 감소시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에 따른 상기 화장료 조성물은 용액, 외용 연고, 크림, 폼, 영양 화장수, 유연 화장수, 향수, 팩, 유연수, 유액, 메이크업 베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선 스크린 크림, 선 오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면 활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패취 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 상기 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1 종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면 활성제, 보습제, 저급 알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체는 상기 화장료 조성물의 제형에 따라 다양하다.
본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화 아연 등이 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 등이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로하드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제 등이 이용될 수 있으며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일 등이 이용될 수 있고, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브 오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타하이드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
본 발명의 제형이 비누인 경우에는, 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알코올, 식물성 유, 글리세롤, 당 등이 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
본 발명의 또 다른 일 구현예로서, 상기 콜라겐 합성 촉진용 조성물을 유효성분으로 함유하는 피부주름 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 상기 식품 조성물은 특별히 제한되지 아니하며, 건강 기능 식품 조성물을 포함한다.
본 발명의 상기 건강 기능 식품 조성물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함한다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 비제한적인 예로는 육류, 소세지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등을 들 수 있다.
본 발명의 상기 건강 기능 식품 조성물이 음료 조성물인 경우, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비제한적인 예로 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드; 말토스, 수크로오스와 같은 디사카라이드; 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 천연 감미제; 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 들 수 있다. 상기 첨가되는 추가 성분의 비율은 당업자의 선택에 의해 적절하게 결정될 수 있다.
상기 외에 본 발명의 건강 기능 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강 기능 식품 조성물은 천연 과일 주스, 과일 음료 또는 야채 음료 등의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 사용되거나 2 이상을 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가물의 비율 또한 당업자에 의해 적절히 선택될 수 있다.
본 발명의 또 다른 일 구현예로서, 상기 콜라겐 합성 촉진용 조성물을 유효성분으로 함유하는 피부주름 예방 또는 개선용 의약외품 조성물을 제공한다.
본 발명의 상기 의약외품 조성물은 바디 클렌저, 소독 청결제, 세정제, 주방용 세정제, 청소용 세정제, 치약, 가글제, 물티슈, 세제, 비누, 핸드 워시, 헤어 세정제, 헤어 유연제, 가습기 충진제, 마스크, 연고제 및 필터 충진제로 이루어진 군에서 선택되는 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명의 또 다른 일 구현예로서, 상기 콜라겐 합성 촉진용 조성물을 유효성분으로 함유하는 피부노화 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 또 다른 일 구현예에서, 상기 피부노화의 예방 또는 치료는 피부주름을 예방하거나 개선함으로써 수행되는 것을 특징으로 한다.
본 발명에서 사용되는 용어, "치료"란, 본 발명의 상기 조성물을 개체에 투여하여 피부주름의 증세가 호전되도록 하거나 이롭게 되도록 하는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 상기 약학 조성물은, 상기 발효물을 유효 성분으로 함유하는 것에 더하여, 약학적으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명에서, 상기 "약학적으로 허용 가능"하다는 것은, 이를 투여 시 생물체를 자극하지 않으면서, 투여되는 화합물의 생물학적 활성 및 특성을 저해하지 않는, 약학 분야에서 통상적으로 사용되는 것을 의미한다.
본 발명의 상기 약학 조성물은, 상기 담체와 함께 제제화되어, 의약품, 사료 첨가제, 음용수 첨가제 등으로 활용될 수 있다.
본 발명에서, 상기 담체의 종류는 특별히 제한되지 아니하며 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 담체라면 어느 것이든 사용할 수 있다. 상기 담체의 비제한적인 예로는, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사 용액, 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 말토 덱스트린, 글리세롤, 에탄올 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상을 혼합하여 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 상기 약학 조성물은 필요한 경우, 부형제, 희석제, 항산화제, 완충액 또는 정균제 등 기타 약학적으로 허용 가능한 첨가제 들을 첨가하여 사용할 수 있으며, 충진제, 증량제, 습윤제, 붕해제, 분산제, 계면 활성제, 결합제 또는 윤활제 등을 부가적으로 첨가하여 사용할 수 있다.
본 발명의 상기 약학 조성물은 경구 투여 또는 비경구 투여를 위한 적합한 다양한 제형으로 제제화되어 사용될 수 있다.
상기 경구 투여용 제제의 비제한적인 예로는, 트로키제(troches), 로젠지(lozenge), 정제, 수용성 현탁액, 유성 현탁액, 조제 분말, 과립, 에멀젼, 하드 캡슐, 소프트 캡슐, 시럽 또는 엘릭시르제 등을 들 수 있다.
본 발명의 상기 약학 조성물을 경구 투여용으로 제제화하기 위하여, 락토오스, 사카로오스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아밀로펙틴(Amylopectin), 셀룰로오스(Cellulose) 또는 젤라틴(Gelatin) 등과 같은 결합제; 디칼슘 포스페이트(Dicalcium phosphate) 등과 같은 부형제; 옥수수 전분 또는 고구마 전분 등과 같은 붕괴제; 스테아르산 마그네슘(Magnesium stearate), 스테아르산 칼슘(Calcium stearate), 스테아릴 푸마르산 나트륨(Sodium stearyl fumarate) 또는 폴리에틸렌 글리콜 왁스(Polyethylene glycol wax) 등과 같은 윤활유 등을 사용할 수 있으며, 감미제, 방향제, 시럽제 등도 사용할 수 있다.
나아가 캡슐제의 경우에는 상기 언급한 물질 외에도 지방유와 같은 액체 담체 등을 추가로 사용할 수 있다.
상기 비경구용 제제의 비제한적인 예로는, 주사액, 좌제, 호흡기 흡입용 분말, 스프레이용 에어로졸제, 연고, 도포용 파우더, 오일, 크림 등을 들 수 있다.
본 발명의 상기 약학 조성물을 비경구 투여용으로 제제화하기 위하여, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결 건조 제제, 외용제 등을 사용할 수 있으며, 상기 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.
또한, 보다 구체적으로 본 발명의 상기 약학 조성물을 주사액으로 제제화하는 경우, 본 발명의 상기 조성물을 안정제 또는 완충제와 함께 물에서 혼합하여 용액 또는 현탁액으로 제조하고 이를 앰플(ampoule) 또는 바이알(vial)의 단위 투여용으로 제제화할 수 있다. 또한, 본 발명의 상기 약학 조성물을 에어로졸제로 제제화하는 경우, 수분산된 농축물 또는 습윤 분말이 분산되도록 추진제 등이 첨가제와 함께 배합할 수 있다.
또한, 본 발명의 상기 약학 조성물을 연고, 크림 등으로 제제화하는 경우에는, 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화 아연 등을 담체로 사용하여 제제화할 수 있다.
본 발명의 상기 약학 조성물의 약학적 유효량, 유효 투여량은 상기 약학 조성물의 제제화 방법, 투여 방식, 투여 시간 및/또는 투여 경로 등에 의해 다양해질 수 있으며, 상기 약학 조성물의 투여로 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 투여 대상이 되는 개체의 종류, 연령, 체중, 일반적인 건강 상태, 질병의 증세나 정도, 성별, 식이, 배설, 해당 개체에 동시 또는 이시에 함께 사용되는 약물 기타 조성물의 성분 등을 비롯한 여러 인자 및 의약 분야에서 잘 알려진 유사 인자에 따라 다양해질 수 있으며, 당해 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 목적하는 치료에 효과적인 투여량을 용이하게 결정하고 처방할 수 있다.
본 발명의 상기 약학 조성물의 보다 바람직한 효과를 위한 투여량은, 바람직하게는 1일 1 mg/kg 내지 1,000 mg/kg, 보다 바람직하게는 10 mg/kg 내지 500 mg/kg일 수 있다. 본 발명의 상기 약학 조성물의 투여는 하루에 1 회 투여될 수 있고, 수회에 나누어 투여될 수 있다. 따라서 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 상기 약학 조성물의 투여 경로 및 투여 방식은 각각 독립적일 수 있으며, 그 방식에 있어 특별히 제한되지 아니하며, 목적하는 해당 부위에 상기 약학 조성물이 도달할 수 있는 한 임의의 투여 경로 및 투여 방식에 따를 수 있다. 상기 약학 조성물은 경구 투여 또는 비경구 투여 방식으로 투여할 수 있다.
상기 비경구 투여하는 방법으로는, 예를 들어 정맥 내 투여, 복강 내 투여, 근육 내 투여, 경피 투여 또는 피하 투여 등을 이용할 수 있으며, 상기 조성물을 질환 부위에 도포하거나 분무, 흡입하는 방법 또한 이용할 수 있으나 이들에 제한되지 아니한다.
본 발명의 상기 약학 조성물은 바람직하게는 경구 투여 또는 주사 투여될 수 있다.
본 발명의 다른 일 구현예로서, 상기 콜라겐 합성 촉진용 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 피부주름 예방 또는 개선 방법을 제공한다.
본 발명에서 사용되는 용어, "개체"는 쥐, 가축, 인간 등을 포함하는 포유 동물을 비롯한 모든 동물을 의미한다.
본 발명의 상기 피부주름 예방 또는 개선 방법에서, 상기 콜라겐 합성 촉진용 조성물의 투여량, 투여 경로, 투여 방식 등은 본 발명의 상기 약학 조성물과 관련하여 상기에서 설명한 바와 동일하다.
본 발명의 다른 일 구현예로서, 상기 약학 조성물을 인간을 제외한 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 피부노화를 예방 또는 치료하는 방법을 제공한다.
본 발명에서 사용되는 용어, "인간을 제외한 개체"는 인간을 제외한 쥐, 가축 등을 포함하는 포유 동물을 비롯한 모든 동물을 의미한다.
본 발명의 상기 피부노화 예방 또는 치료 방법에서, 상기 약학 조성물의 투여량, 투여 경로, 투여 방식 등은 본 발명의 상기 약학 조성물과 관련하여 상기에서 설명한 바와 동일하다.
본 발명에 따른 콜라겐 합성 촉진용 조성물은 피부에 안전하면서도 발효를 통해 각각의 식물의 약리효과를 더욱 강화시킴으로써 콜라겐 합성을 효과적으로 촉진하여 피부 주름개선 효과 및 상처 치유 효과와 그 효과의 지속성이 뛰어나다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 다만, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것에 불과하므로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 한정되는 것으로 해석되어서는 아니된다.
제조예 1: 식물 추출물 제조
시판되는 블랙커민, 구주물푸레, 쓴박하, 약석잠풀, 설령쥐오줌풀 및 장엽대황을 구입하여 분쇄한 각각의 분쇄물 200 g을 정제수나 80 % 메탄올 3 L에 각각 넣고, 냉각콘덴서가 달린 환류추출기에서 3 시간 동안 끓여 추출하였다. 그 다음, 100 메쉬 (mesh) 여과포로 여과한 후 잔사를 같은 방법으로 1 회 더 추출하였다. 각각의 추출물을 합하여 상온에서 와트만(Whatman) 2 번 여과지로 여과하여 불용성 물질을 제거하고, 각콘덴서가 달린 증류장치에서 60℃로 감압농축한 후 동결건조하여 하기 표 1과 같은 각각의 건조 중량을 얻었다. 하기 표 1은 추출용매에 따른 각각의 식물 100 g당 추출물의 건조중량을 나타낸 것이다.
식물 80% 메탄올 정제수
블랙커민 8.0 g 7.5 g
구주물푸레 8.5 g 7.7 g
쓴박하 7.9 g 7.5 g
약석잠풀 8.4 g 7.6 g
설령쥐오줌풀 8.2 g 7.6 g
장엽대황 8.2 g 7.5 g
실시예 1: 식물 추출물의 효모 발효물 제조
상기 제조예 1에서 제조한 각각의 식물 추출물을 효모인 사카로마이세스 세레비지아에에 대한 기본배지인 YM 배지에 5 중량%로 첨가하여 발효시켰다.
구체적으로, 사카로마이세스 세레비지아에를 약 105∼107cells/mL의 농도로 5 중량%의 발효물이 함유된 효모 기본 배지(YM 배지)에 접종한 후, pH 5.5∼6.5, 온도 25∼35 ℃, 통기량 0.05∼0.5 VVM의 조건을 유지하면서 48 시간 동안 배양하였다. 그 뒤, 각각의 발효액 100 g을 원심분리하여 고분자 침전물과 효모균체를 제거한 후, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 60℃로 감압농축한 후 동결건조하여 최종적으로 각각의 식물의 효모 발효 건조물을 수득하였다. 각각의 식물의 효모 발효 건조물의 건조중량은 하기 표 2에 나타내었다.
식물 효모발효의 건조중량(g)
블랙커민 5.11 g
구주물푸레 5.42 g
쓴박하 5.38 g
약석잠풀 5.34 g
설령쥐오줌풀 5.22 g
장엽대황 5.19 g
실시예 2: 식물 추출물의 유산균 발효물 제조
상기 제조예 1에서 제조한 각각의 식물 추출물을 유산균인 락토바실러스 아시도필러스에 대한 기본배지인 MRS 배지에 5 중량%로 첨가하여 발효시켰다.
구체적으로, 락토바실러스 아시도필러스를 약 105∼107 cells/mL의 농도로 5 중량%의 상기 제조예 1의 각각의 식물 추출물이 함유된 유산균 기본 배지(MRS 배지)에 접종한 후, pH 6.5∼7.5, 온도 35∼38 ℃, 통기량 1 VVM의 조건을 유지하면서 48 시간 동안 배양하였다. 그 뒤, 각각의 발효액 100 g을 원심분리하여 고분자 침전물과 유산균체를 제거한 후, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 60℃로 감압농축한 후 동결건조하여 최종적으로 각각의 식물의 유산균 발효 건조물을 수득하였다. 각각의 식물의 유산균 발효 건조물의 건조중량은 하기 표 3에 나타내었다.
식물 유산균발효의 건조중량(g)
블랙커민 5.20 g
구주물푸레 5.39 g
쓴박하 5.29 g
약석잠풀 5.46 g
설령쥐오줌풀 5.47 g
장엽대황 5.42 g
실시예 3: 식물 추출물의 비피더스균 발효물 제조
상기 제조예 1에서 제조한 각각의 식물 추출물을 비피더스균인 비피도박테리움 롱검에 대한 기본배지인 BL 배지에 5 중량%로 첨가하여 발효시켰다.
구체적으로, 비피도박테리움 롱검을 약 105∼107 cells/mL의 농도로 5 중량%의 상기 제조예 1의 각각의 식물 추출물이 함유된 비피더스균 기본 배지(BL 배지)에 접종한 후, pH 6.5∼7.5, 온도 35∼38 ℃, 혐기배양 조건을 유지하면서 48 시간 동안 배양하였다. 그 뒤, 각각의 발효액 100 g을 원심분리하여 고분자 침전물과 비피더스균체를 제거한 후, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 60℃로 감압농축한 후 동결건조하여 최종적으로 각각의 식물의 비피더스균 발효 건조물을 수득하였다. 각각의 비피더스균 발효 건조물의 건조중량은 하기 표 4에 나타내었다.
식물 비피더스균발효의 건조중량(g)
블랙커민 5.33 g
구주물푸레 5.45 g
쓴박하 5.27 g
약석잠풀 5.44 g
설령쥐오줌풀 5.51 g
장엽대황 5.54 g
실험예 1: 식물 추출물의 발효물의 콜라겐 합성 촉진 효과 조사
상기 실시예 1 내지 3에서 제조한 블랙커민, 구주물푸레, 쓴박하, 약석잠풀, 설령쥐오줌풀 또는 장엽대황의 효모, 유산균 또는 비피더스균 발효물 각각을 인간 유래의 섬유아세포의 배양액에 첨가하여 세포수준에서 콜라겐 합성 효과를 실험하였다. 합성된 콜라겐의 측정은 PICP EIA kit(Procollagen Type Ⅰ C-Peptide Enzyme ImmunoAssay KIT)를 이용하여 정량하였다.
구체적으로, 상기 실시예 1 내지 3에서 제조한 블랙커민, 구주물푸레, 쓴박하, 약석잠풀, 설령쥐오줌풀 또는 장엽대황의 발효물을 최종농도가 0.0005%(w/w)가 되도록 각각 인간 유래의 섬유아세포(human fibroblast 세포)의 배양배지에 첨가하여 1 일간 배양한 후, 배양액을 취하여 PICP EIA Kit로 각 농도에서 콜라겐 합성 정도를 분광광도계를 이용하여 450 ㎚에서 측정하였다. 이때, 효과의 비교를 위하여 아무것도 첨가하지 않은 섬유아세포의 배양배지(대조군), 발효하지 않은 추출물 및 비타민 C를 최종농도 0.0005%(w/w)가 되도록 첨가한 시료에 대하여 동일한 방법으로 콜라겐 합성 정도를 측정하였다.
콜라겐 생성량은 UV 흡광도로 측정하고, 콜라겐 생성 증가율은 대조군에 대한 상대적인 콜라겐 생성량의 비율로 계산하고 결과를 하기 표 5에 정리하였다.
시료 증가율(%)
대조군(무첨가) -
YM 배지(최종농도 0.0005%) 105.12
MRS 배지(최종농도 0.0005%) 104.5
BL 배지(최종농도 0.0005%) 103.2
블랙커민 추출물 122.35
효모발효물(최종농도 0.0005%) 143.25
유산균발효물(최종농도 0.0005%) 148.12
비피더스균발효물(최종농도 0.0005%) 145.21
구주물푸레 추출물 115.22
효모발효물(최종농도 0.0005%) 139.58
유산균발효물(최종농도 0.0005%) 135.77
비피더스균발효물(최종농도 0.0005%) 141.24
쓴박하 추출물 115.27
효모발효물(최종농도 0.0005%) 142.76
유산균발효물(최종농도 0.0005%) 141.31
비피더스균발효물(최종농도 0.0005%) 144.22
약석잠풀 추출물 119.14
효모발효물(최종농도 0.0005%) 143.91
유산균발효물(최종농도 0.0005%) 148.18
비피더스균발효물(최종농도 0.0005%) 143.55
설령쥐오줌풀 추출물 120.30
효모발효물(최종농도 0.0005%) 141.48
유산균발효물(최종농도 0.0005%) 140.93
비피더스균발효물(최종농도 0.0005%) 141.98
장엽대황 추출물 118.27
효모발효물(최종농도 0.0005%) 142.33
유산균발효물(최종농도 0.0005%) 145.88
비피더스균발효물(최종농도 0.0005%) 140.53
비타민C(최종농도 0.0005%) 134.76
상기 표 5에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 실시예 1 내지 3에서 제조한 블랙커민, 구주물푸레, 쓴박하, 약석잠풀, 설령쥐오줌풀 또는 장엽대황의 발효물은 기본배지를 사용한 것 또는 발효하지 않은 추출물 보다 인간유래의 섬유아세포에서 콜라겐 생성량이 현저히 증가되었으며, 전혀 정제되지 않은 상태임을 감안하면 기존에 알려진 콜라겐 합성 촉진물질인 비타민 C와 비교할 때 섬유아세포에서 동등 이상의 매우 강력한 콜라겐 합성 촉진능이 있음을 알 수 있었다.
따라서, 본 발명의 콜라겐 합성 촉진용 조성물은 0.0005%(w/w) 농도 이상에서 세포독성을 나타내지 않으면서 강력한 콜라겐 합성 촉진능을 가지고 있으므로, 피부주름 개선제나 상처치유제로 매우 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있었다.
실시예 4 ~ 9: 식물 추출물의 발효물의 혼합물 제조
상기 실시예 1 내지 3에서 제조한 블랙커민, 구주물푸레, 쓴박하, 약석잠풀, 설령쥐오줌풀 또는 장엽대황의 효모, 유산균 또는 비피더스균 발효물과 정제수를 하기 표 6과 같이 혼합하였다(단위는 중량비임).
실시예4 실시예5 실시예6 실시예7 실시예8 실시예9
블랙커민 효모 20
유산균 20
비피더스균 20
구주물푸레 효모 20
유산균 20
비피더스균 20
쓴박하 효모 20
유산균 20
비피더스균 20
약석잠풀 효모 20
유산균 20
비피더스균 20
설령쥐오줌풀 효모 20
유산균 20
비피더스균 20
장엽대황 효모 20
유산균 20
비피더스균 20
정제수 40 40 40 40 40 40
실시예 10 ~ 15 및 비교예 1: 본 발명 식물 추출물의 발효 혼합물을 이용한 크림 제조
상기 실시예 4 내지 9에서 제조한 블랙커민, 구주물푸레, 쓴박하, 약석잠풀, 설령쥐오줌풀 또는 장엽대황의 발효 혼합물을 이용하여 하기 표 7의 처방으로 크림를 제조하였다(단위는 중량%임).
실시예10 실시예11 실시예12 실시예13 실시예14 실시예15 비교예1
실시예 4의 성분 2 - - - - - -
실시예 5의 성분 - 2 - - - - -
실시예 6의 성분 - - 2 - - - -
실시예 7의 성분 - - - 2 - - -
실시예 8의 성분 - - - - 2 - -
실시예 9의 성분 - - - - - 2 -
정제수 잔량 잔량 잔량 잔량 잔량 잔량 잔량
수산화칼륨 0.7 0.7 0.7 0.7 0.7 0.7 0.7
글리세린 10 10 10 10 10 10 10
프로필렌글리콜 5 5 5 5 5 5 5
세테아릴알코올 2 2 2 2 2 2 2
스테아린산 15 15 15 15 15 15 15
향료 적량 적량 적량 적량 적량 적량 적량
방부제 적량 적량 적량 적량 적량 적량 적량
실시예 16 ~ 21 및 비교예 2: 본 발명 식물 추출물의 발효 혼합물을 이용한 화장수 제조
상기 실시예 4 내지 9에서 제조한 블랙커민, 구주물푸레, 쓴박하, 약석잠풀, 설령쥐오줌풀 또는 장엽대황의 발효 혼합물을 이용하여 하기 표 8의 처방으로 화장수를 제조하였다(단위는 중량%임).
실시예16 실시예17 실시예18 실시예19 실시예20 실시예21 비교예2
실시예 4의 성분 0.2 - - - - - -
실시예 5의 성분 - 0.2 - - - - -
실시예 6의 성분 - - 0.2 - - - -
실시예 7의 성분 - - - 0.2 - - -
실시예 8의 성분 - - - - 0.2 - -
실시예 9의 성분 - - - - - 0.2 -
정제수 잔량 잔량 잔량 잔량 잔량 잔량 잔량
에탄올 10 10 10 10 10 10 10
폴리라우린산
폴리옥시에틸렌소르비탄		 1 1 1 1 1 1 1
글리세린 5 5 5 5 5 5 5
1,3-부틸렌글리콜 6 6 6 6 6 6 6
향료 적량 적량 적량 적량 적량 적량 적량
방부제 적량 적량 적량 적량 적량 적량 적량
실시예 22 ~ 27 및 비교예 3: 본 발명 식물 추출물의 발효 혼합물을 이용한 에멀전 제조
상기 실시예 4 내지 9에서 제조한 블랙커민, 구주물푸레, 쓴박하, 약석잠풀, 설령쥐오줌풀 또는 장엽대황의 발효 혼합물을 이용하여 하기 표 9의 처방으로 에멀전를 제조하였다(단위는 중량%임).
실시예22 실시예23 실시예24 실시예25 실시예26 실시예27 비교예3
실시예 4의 성분 1.0 - - - - - -
실시예 5의 성분 - 1.0 - - - - -
실시예 6의 성분 - - 1.0 - - - -
실시예 7의 성분 - - - 1.0 - - -
실시예 8의 성분 - - - - 1.0 - -
실시예 9의 성분 - - - - - 1.0 -
정제수 잔량 잔량 잔량 잔량 잔량 잔량 잔량
와셀린 2 2 2 2 2 2 2
세스퀴올레인산
소르비탄		 1 1 1 1 1 1 1
폴리옥시에틸렌
올레일에틸		 1 1 1 1 1 1 1
글리세린 6 6 6 6 6 6 6
카르복시비닐폴리머 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
트로메타민 0.16 0.16 0.16 0.16 0.16 0.16 0.16
향료 적량 적량 적량 적량 적량 적량 적량
방부제 적량 적량 적량 적량 적량 적량 적량
실험예 2: 주름 완화 효과 조사
상기 실시예 10~15 및 비교예 1의 크림을 이용하여 피부 주름 개선 효과에 대한 패널테스트를 실시하였다.
먼저, 35∼50 세까지의 건강한 여성 140 명을 20 명씩 7개의 군으로 구분하고, 1군은 비교예 1의 크림을, 2군 ~ 7군은 실시예 2 ~ 실시예 7의 크림을 안면부에 1 일 1 회 3 개월간 도포하도록 하였다. 3 개월 후 피부주름의 개선정도를 피실험자 설문조사를 통해 평가하였다. 피실험자의 피부 주름개선 및 탄력증진에 관하여 사용전과 비교하여 개선없음, 약간의 개선, 상당한 개선의 3 단계로 판정하였으며, 그 결과를 하기 표 10에 나타내었다.
구분 개선없음 약간의 개선 상당한 개선
실시예 10 1 4 15
실시예 11 1 3 16
실시예 12 1 3 16
실시예 13 2 4 14
실시예 14 1 4 15
실시예 15 1 3 16
비교예 1 10 8 2
상기 표 10에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 실시예 10 내지 15의 크림을 사용한 경우 피부주름 개선 및 탄력증진 효과가 우수함을 알 수 있었다.
이상에서 설명한 본 발명은 전술한 실시예에 의해 한정되는 것이 아니고, 본 발명의 기술적 사상을 벗어나지 않는 범위 내에서 여러 가지 치환, 변형, 및 변경이 가능함은 본 발명의 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진자에게 있어서 명백한 것이다.

Claims (15)

  1. 구주물푸레, 쓴박하 및 약석잠풀로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상의 식물의 추출물 또는 이의 사카로마이세스 세레비지아에 (Saccharomyces cerevisiae) 발효물, 락토바실러스 아시도필러스 (Lactobacillus acidophilus) 발효물 또는 비피도박테리움 롱검 (Bifidobacterium longum) 발효물을 유효성분으로 함유하는 콜라겐 합성 촉진용 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 블랙커민, 설령쥐오줌풀 및 장엽대황으로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상의 식물의 추출물 또는 이의 발효물을 추가로 함유하는 콜라겐 합성 촉진용 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 추출물은 물, C1~C4의 알코올 및 이들의 혼합 용매로 구성되는 군으로부터 선택되는 용매로 추출된 것인, 콜라겐 합성 촉진용 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 콜라겐 합성 촉진용 조성물의 전체 중량을 기준으로, 상기 발효물의 함량의 총량이 0.0001 내지 20 중량%인 콜라겐 합성 촉진용 조성물.
  5. 삭제
  6. 삭제
  7. 삭제
  8. 구주물푸레, 쓴박하 및 약석잠풀로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상의 식물을 추출하는 단계; 및
    상기 추출 단계에서 수득한 추출물을 사카로마이세스 세레비지아에 (Saccharomyces cerevisiae) 균주, 락토바실러스 아시도필러스 (Lactobacillus acidophilus) 균주 및 비피도박테리움 롱검 (Bifidobacterium longum) 균주로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상의 균주로 발효시키는 단계를 포함하는 콜라겐 합성 촉진용 조성물의 제조방법.
  9. 제8항에 있어서, 상기 발효 단계는 상기 추출물을 사카로마이세스 세레비지아에 (Saccharomyces cerevisiae), 락토바실러스 아시도필러스 (Lactobacillus acidophilus) 또는 비피도박테리움 롱검 (Bifidobacterium longum) 균주를 각각 발효하여 사카로마이세스 세레비지아에 (Saccharomyces cerevisiae) 발효물, 락토바실러스 아시도필러스 (Lactobacillus acidophilus) 발효물 또는 비피도박테리움 롱검 (Bifidobacterium longum) 발효물을 수득하는 단계; 및 상기 사카로마이세스 세레비지아에 (Saccharomyces cerevisiae) 발효물, 락토바실러스 아시도필러스 (Lactobacillus acidophilus) 발효물 또는 비피도박테리움 롱검 (Bifidobacterium longum) 발효물을 혼합하여 혼합 발효물을 제조하는 단계를 포함하는 콜라겐 합성 촉진용 조성물의 제조방법.
  10. 제1항 내지 제4항 중 어느 하나의 항의 상기 조성물을 유효성분으로 함유하는 피부주름 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
  11. 제1항 내지 제4항 중 어느 하나의 항의 상기 조성물을 유효성분으로 함유하는 피부주름 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  12. 제1항 내지 제4항 중 어느 하나의 항의 상기 조성물을 유효성분으로 함유하는 피부주름 예방 또는 개선용 의약외품 조성물.
  13. 삭제
  14. 삭제
  15. 삭제
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