KR102099345B1 - 인삼류로부터 진세노사이드를 고효율로 추출하는 방법 및 이에 의하여 추출된 진세노사이드 - Google Patents

Abstract

본 발명은 인삼류로부터 진세노사이드를 고효율로 추출하는 방법 및 이에 의하여 추출된 진세노사이드에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 효소 및 초고압(초고압-효소) 처리된 인삼류 추출 혼합액에 초음파를 처리하는 것을 특징으로 하는 인삼류로부터 진세노사이드를 고효율로 추출하는 방법 및 이에 의하여 추출된 진세노사이드에 관한 것이다.
본 발명에 의한 인삼류로부터 진세노사이드를 고효율로 추출하는 방법의 경우, 종래의 진세노사이드의 추출 효율 대비 진세노사이드를 고효율로 추출할 수 있을 뿐만 아니라 최종 추출 공정 시간을 단축시킴으로써 유효성분을 경제적, 효율적으로 추출할 수 있다.

Description

인삼류로부터 진세노사이드를 고효율로 추출하는 방법 및 이에 의하여 추출된 진세노사이드{Method for High-yield extraction of ginsenoside from ginseng and ginsenoside extracted by the same}

본 발명은 인삼류로부터 진세노사이드를 고효율로 추출하는 방법 및 이에 의하여 추출된 진세노사이드에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 효소 및 초고압(초고압-효소) 처리된 인삼류 추출 혼합액에 초음파를 처리하는 것을 특징으로 하는 인삼류로부터 진세노사이드를 고효율로 추출하는 방법 및 이에 의하여 추출된 진세노사이드에 관한 것이다.

추출은 천연물로부터 많은 생리활성성분을 얻는 필수 공정이며, 특정 유효성분을 얻기 위한 분리·정제 공정의 첫 단계이다. 식품산업에서 사용하는 일반적인 추출 방법은 스팀증류법, 환류냉각추출법, 초음파추출법(UAE), 초임계유체 추출 방법(SFE), 마이크로웨이브 추출 방법(MAE), 가속용매 추출 방법 (ASE, PLE) 및 초고압추출법(HHP)등이 있다. 상기 마이크로웨이브 추출 방법은 마이크로웨이브 추출기로 파프리카의 색소 추출, 라즈베리로부터 항산화 성분 추출 및 인삼 사포닌 추출 등에 이용하는 연구가 보고되고 있으며, 상기 가속용매 추출 방법은 가속 용매 추출기를 이용해 사상자의 기능성분 추출, 오미자로부터 리그난 추출, 클로렐라로부터 카로티노이드 및 클로로필 색소 추출 등을 포함한 다양한 추출에 이용하는 연구가 보고되고 있다(김은옥, 2016, 한국식품영양과학회지).

한편, 홍삼의 특정 진세노사이드(Ginsenoside) 추출물(Rb1+Rg1+Rg3(20s))의 추출을 위한 가속용매 추출 방법[70%에탄올, 2000psi, 150℃]은 145.24mg/100g DW의 수율을 보여주며, 인삼과 홍삼 두 가지 모두에서 유효성분인 Ginsenoside 추출 함량은 열수추출법 (95℃, 1시간)보다 초고압추출법 (80MPa, 30℃, 12시간)에서 1.2~1.4배 높다는 연구가 보고된 바 있다(Hyun-sun Lee외 10명, 2011).

초고압 장비와 효소처리를 조합하여 Ginsenoside의 추출수율을 2배 가량 증가시킨 방법 또한 보고되어 있으며(Hooh H. Sunwoo 외 3명, 2014), Ginsenoside의 특정 성분인 Rd의 경우, 초고압-효소처리 추출법에서 첨가하는 효소의 특정 조합(Cellulase 2U/mL + Cellobiase 4U/ml)으로 24시간 추출하였을 때, 대기압에서의 효소처리 보다 Rd 추출함량을 7배 높다는 연구도 보고된 바 있다(Palaniyandi 외 4명, 2015).

인삼의 유효성분으로 알려져 있는 사포닌은 인삼에 함유된 배당체라는 뜻으로 진세노사이드(Ginsenoside)라고 명명한 이후 그 주요 성분이 현재 약 30여종 이상이 밝혀져 있고, 최근까지 미량의 Ginsenoside, Phenol계 화합물, Polysaccharide 등의 효능이나 기전 연구가 활발하게 진행되고 있다.

인삼에 함유되어 있는 진세노사이드에 대해서는 많은 연구 보고가 이루어지고 있다. 그 중 Rb1은 위염 및 위궤양에 유효하고 항산화 작용이 있으며, Rb2는 암독소 호르몬에 대한 길항 작용 및 종양 혈관 신생 억제작용이 있고, Rc는 장내 세균에 의한 대사 산물을 이용한 항암제 개발 가능성이 보고된 바 있다. Rd는 신기능부전의 치료와 신경계의 보호 작용이 보고된 바 있으며, 이 외에도 산삼에서 소량으로 존재하는 것으로 알려진 비극성 사포닌인 Rg3와 Rh2의 항암작용 및 항전이작용 등이 보고되어 있다.

한국의 산양삼 주요 생리활성성분은 진세노사이드 배당체와 산으로 가수분해 되는 배당체의 산물인 프로토파낙시디올(Protopanaxadiol) 그룹과 프로토파낙사트리올(Protopanaxatriol) 그룹, 올레아놀릭산(oleanolic acid)가 있다. 한국 산양삼은 중국 산양삼과 재배인삼보다 더 많은 진세노사이드를 함유하고 있어, 보다 약리효과가 더 좋을 것으로 예상된다고 보고된 바 있다(서세명, 2010, 서울시립대학교). 한국의 산양삼은 인삼에는 없는 Rg3와 Rh2가 검출되었으며, Rg3의 경우 인삼을 홍삼화 시켰을 때 생성되는 특별한 생리활성을 갖는 진세노사이드인 것으로 알려져 있음(정희선, 2009. 상지대학교).

상술한 바와 같이 인삼의 유효성분인 진세노사이드는 다양한 추출 방법에 의하여 추출할 수 있으나, 여러 종류의 진세노사이드 함량은 추출 방법에 따라 차이가 나기 때문에 고함량의 다양한 진세노사이드를 추출하기 위하여 추출 방법을 선택하는 것은 매우 중요하다.

이에, 본 발명자들은 상기 종래기술들의 문제점들을 극복하기 위하여 예의 연구노력한 결과, 인삼류를 초고압-효소 처리한 다음 추가적으로 초음파 처리 공정을 진행할 경우, 종래의 초고압-효소 처리에 의한 진세노사이드의 추출 효율 대비 진세노사이드를 고효율로 추출할 수 있을 뿐만 아니라 최종 추출 공정 시간을 단축시킴으로써 유효성분을 경제적, 효율적으로 추출할 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.

본 발명은 진세노사이드를 고효율로 추출할 수 있을 뿐만 아니라 공정 시간을 단축시킴으로써 유효성분을 경제적, 효율적으로 추출할 수 있는 인삼류로부터 진세노사이드를 고효율로 추출하는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.

또한, 본 발명은 상기 인삼류로부터 진세노사이드를 고효율로 추출하는 방법에 따라 추출된 진세노사이드를 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위하여,

A) 인삼류를 동결건조하여 분말로 제조한 후 용매를 첨가하여 혼합액을 제조하는 단계;

B) 상기 혼합액에 효소처리하여 초고압 처리를 위한 시료를 제조하는 단계;

C) 상기 B) 단계의 시료를 압력 80 내지 120 MPa, 온도 40 내지 50℃, 처리시간 3 내지 5시간으로 초고압 처리 하여 추출 혼합액을 수득하는 단계; 및

D) 상기 C) 단계의 추출 혼합액을 30 내지 50분 동안 초음파 처리하는 단계를 포함하는 인삼류로부터 진세노사이드를 고효율로 추출하는 방법을 제공한다.

종래에 인삼류와 같은 천연물로부터 유효 성분을 추출하기 위하여 초고압-효소 처리 공정을 이용하였으나, 공정 시간 대비 고효율로 유효 성분을 추출하기 어렵다는 문제점이 있었다. 이에, 본 발명자들은 상기 초고압-효소 처리 공정에 초음파 처리 공정을 추가적으로 진행할 경우, 공정 시간 대비 고효율의 유효 성분을 추출할 수 있음을 발견하고, 본 발명을 완성하게 되었다.

본 발명의 실시예에 따르면, 초고압-효소처리 공정 후 초음파 처리한 본 발명의 경우, 초음파 처리 공정을 진행하지 않고 초고압-효소처리 공정만 진행한 군보다 진세노이드의 함량이 85% 이상 증가한 것을 확인하였다. 이러한 결과는 인삼류에서 유효성분을 추출하는데 초고압-효소반응이 효과가 있음을 보여주며, 여기에 초음파 추출 공정을 추가로 결합시킨 본 발명의 추출 방법은 유효성분을 고효율로 추출할 수 있음을 시사한다(도 2 참조).

또한, 본 발명의 실시예에 따르면, 초고압 처리의 유무에 따른 진세노사이드 추출 함량을 비교하였을 때, 초고압 처리를 함으로써 추출 수율이 약 2배 이상 차이가 나는 것을 확인하였다. 이러한 결과는, 본 발명의 추출법에서 효소반응의 전처리 공정이 유의적인 효과를 나타내기 위해서는 초고압, 즉 높은 압력조건 (100MPa 이상)이 필수적임을 보여준다(도 4 참조).

더욱이, 본 발명의 실시예에 따르면, 종래의 초고압-효소반응(100MPa, 12시간)에 의한 진세노사이드 8종의 추출 함량과 본 발명의 초음파 추출의 전처리 단계인 초고압-효소반응(100MPa, 4시간)간의 추출 함량을 비교하였을 때, 장시간(12시간) 동안 초고압을 처리한 군보다 단시간(4시간) 초고압 처리 후, 초음파 처리 할 경우 진세노사이드의 추출 함량이 최대 30% 이상 증가한 것을 확인하였다. 이러한 결과는, 본원 발명의 추출 방법은 공정 시간을 단축시켰음에도 불구하고 현저히 높은 진세노사이드를 고효율로 추출할 수 있으므로, 경제적이면서도 효율적인 추출방법임을 시시한다(도 5 참조).

본 발명에 따른 진세노사이드의 고효율 추출 방법은 인삼류뿐만 아니라 다양한 천연물, 예컨대 당귀, 오미자, 황기 및 모과 등으로부터 생리 활성 성분을 고효율로 추출하기 위하여 이용될 수 있다.

본 발명에 따른 인삼류로부터 진세노사이드를 고효율로 추출하기 위한 제조방법에 있어서, 상기 A) 단계의 용매 첨가는 분말 1 중량부 대비 구연산 수용액 80 내지 120 중량부 첨가할 수 있으며, 바람직하게는 분말 2 중량부 대비 구연산 수용액을 100 중량부 첨가하는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 따른 인삼류로부터 진세노사이드를 고효율로 추출하기 위한 제조방법에 있어서, 상기 구연산 수용액은 0.1 내지 0.3M의 구연산 수용액을 pH가 4.6 내지 5.0가 될 때까지 증류수로 희석시킨 후 인삼류 분말에 첨가할 수 있으며, 바람직하게는 0.2M의 구연산 수용액을 pH가 4.8이 될 때까지 증류수로 희석시켜 사용하는 것이 바람직하다. 상기 구연산 용액의 pH는 Vizcozyme 및 Pectinase 효소 반응을 위한 최적의 pH 범위로서, 상기 범위를 벗어날 경우 효소반응 효율이 저하되는 문제가 발생할 수 있다.

본 발명에 따른 인삼류로부터 진세노사이드를 고효율로 추출하기 위한 제조방법에 있어서, 상기 인삼류는 유효 성분으로 진세노사이드를 포함하고 있는 어떠한 인삼류도 사용할 수 있으며, 바람직하게는 고려인삼(Panax ginseng), 전칠삼(Panax notoginseng), 미국삼(Panax quiquefolius), 수삼, 태극삼, 백삼(white ginseng) 및 산양삼(wood-cultivated ginseng)으로 구성된 군으로부터 선택된 1종 이상인 것을 특징으로 한다.

본 발명에 따른 인삼류로부터 진세노사이드를 고효율로 추출하기 위한 제조방법에 있어서, 상기 B) 단계의 효소는 종래에 인삼류로부터 진세노사이드를 추출하기 위한 효소 처리 공정에 사용된 어떠한 효소도 이용될 수 있으며, 바람직하게는 Viscozyme, Pectinex 또는 이를 혼합한 것을 특징으로 한다.

본 발명의 실시예에 따르면, Viscozyme, Pectinex 또는 이를 혼합한 효소를 처리한 후, 초고압 처리 및 초음파 처리 공정을 연쇄적으로 처리하였을 때, Viscozyme 및 Pectinex 효소를 모두 처리한 군에서 추출 효율이 현저히 높은 것을 확인하였다. 이러한 결과는, 본 발명의 추출법에서 고압효소반응의 전처리 단계의 효소의 종류가 추출 함량을 결정하는 중요한 요인이며, Pectinex를 포함하는 효소 처리가 추출 수율 증가에 긍정적인 영향을 미친다는 것을 시사한다(도 2 및 도 3 참조).

본 발명에 따른 인삼류로부터 진세노사이드를 고효율로 추출하기 위한 제조방법에 있어서, 상기 D) 단계의 초음파 처리는 초음파 장비의 온수를 초음파 처리하는 동안 60℃ 내지 80℃로 유지하는 것을 특징으로 한다. 상기 초음파 처리하는 동안 온수를 상기 온도 범위로 유지하는 것은 추출 수율을 최대화 하기 위해서 이다. 온도가 60℃ 이하일 경우 추출 수율이 저하되며, 80℃ 이상일 경우 유효성분의 안정성에 영향을 미쳐 추출 수율이 저하되는 문제점이 발생할 수 있다.

본 발명은 또한, 상기 추출 방법에 따라 추출된 진세노사이드를 제공한다.

본 발명의 추출 방법에 따라 추출된 진세노사이드는 초고압-효소 처리한 진세노사이드 대비 총 진세노사이드 함량이 85% 이상 증가한 것을 특징으로 한다.

본 발명의 추출 방법에 따라 추출된 진세노사이드는 당업계에서 진세노사이드 종류로서 알려진 Rb1, Rb2, Rb3, Rc, Rd, Re, Rf, Rg1, Rg2, Rg3, Rh1, Ro, R2, CK, F1, F2 및 Rh2 일 수 있으며, 바람직하게는 Rb1, Rb2, Rc, Rd, Re, Rf, Rg1 및 Rg2로 구성된 것을 특징으로 한다.

전술한 바와 같이, 본 발명에 따른 진세노사이드 추출 방법의 경우, 종래의 초음파 처리 공정을 포함하지 않은 초고압-효소처리 기술보다 최종 추출 공정 시간을 단축시킬 수 있을 뿐만 아니라 공정 시간을 단축시켰음에도 불구하고 유효성분의 추출율은 오히려 기존 방식 대비 60% 이상 증가시킬 수 있다. 결론적으로는, 본원 발명의 추출 방법은 공정 시간 대비 고효율의 진세노사이드를 추출할 수 있으므로, 인삼류의 유효성분을 경제적, 효율적으로 추출하기 위한 방법으로 적합하다.

도 1은 본 발명의 추출 단계를 나타내는 모식도이다.
도 2는 효소 및 고압반응기와 초음파장비를 이용하여 다양한 추출 조건에서 산양삼의 23종 진세노사이드 함량을 분석한 결과를 나타낸다.
도 3은 대기압(0.1MPa, 45℃, 4시간, pH 4.8)과 초고압(100MPa, 45℃, 4시간, pH 4,8) 조건 및 초고압 전처리를 거친 시료에 초음파 처리한 조건에 따른 산양삼의 진세노사이드 주성분 8종에 관한 추출 함량을 처리 효소군 별로 비교한 결과를 나타낸다.
도 4는 본 발명의 추출법에서 대기압 (0.1MPa)에서의 효소반응 전처리 공정과 초고압(100MPa)에서의 효소반응 전처리 공정 간의 산양삼 주성분 Ginsenoside 8종의 추출 수율을 비교한 결과를 나타낸다.
도 5는 종래 기술인 고압효소반응 조건 (100MPa, 12시간)과 본 발명에서 초음파 추출 공정을 포함하는 고압효소반응 조건(100MPa, 4시간)에서 얻어지는 산양삼 주성분 Ginsenoside 8종의 추출수율을 비교한 결과를 나타낸다.
도 6은 본 발명의 초고압-초음파 추출법에서 초고압처리 단계에서 첨가하는 각 효소 별 또는 에탄올 유기용매에 따른 산양삼의 주성분 Ginsenoside 8종의 각 추출 수율을 비교한 결과를 나타낸다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.

실시예 1. 고압효소분해 전처리 과정

먼저, 산양삼을 수세하여 동결건조기로 건조한 시료를 각각 40 내지 120 메쉬 (mesh) 크기로 분쇄하여 천연물 분말을 제조하였다. 또한, 추출용매로서 이용하기 위한 구연산 수용액은 0.2M 구연산 용액의 pH가 4.8이 될 때까지 증류수로 희석하여 제조하여 사용하였다. 그 다음, 상기 제조한 pH 4.8 구연산 수용액 100 중량부에 천연물 분말(산양삼 분말) 1 중량부를 첨가하여 추출 혼합액(시료 30mg/구연산용액 30mL)을 제조하였다. 상기의 추출혼합액 30mL 기준으로 Novozymes사(Bagsvaerd, Denmark)의 Viscozyme (KTN02214) 또는 Pectinex Ultra SP-L (KRN05658), 또는 두 가지 효소의 혼합물 (Viscozyme + Pectinex) 50 내지 100μL를 추출혼합액에 첨가한다. 이렇게 제조한 추출용 혼합액을 초고압반응기 전용 플라스틱 용기인 Polypropylene bag(Nasco, WHIRL-PAK-4 oz.)에 투여하여 공기의 기포가 없도록 밀봉해서 고압효소반응 처리를 위한 시료를 준비하였다.

상기 효소를 포함하는 추출혼합액이 담긴 고압반응기 전용용기를 고압반응기(Toyo Koatsu사, TFS-2L)에 넣고, 고압반응기의 처리조건을 압력 100MPa, 온도를 45℃, 고압처리시간을 4시간으로 설정하여 가동하였다. 4시간 후에 추출혼합액을 회수하고, 추출혼합액 30mL 기준으로 에탄올 45mL를 첨가하여 전체 용액의 60 중량부가 되도록 첨가한 시료와 에탄올을 첨가하지 않은 시료를 준비하였다. 비교군은 대기압(0.1MPa) 하의 45℃ Water-bath에서 4시간 침지시켜 추출한 산양삼 추출용액으로 하였다.

고압효소분해 과정에서 추출된 진세노사이드 함량을 도 2에 나타내었다.

그 결과, 도 2에서 확인할 수 있듯이, 효소처리 및 초고압 처리한 시료의 진세노사이드의 총 함량은 27.61mg/g으로 효소처리 및 대기압 처리한 시료의 진세노사이드 함량(22.63mg/g) 대비 22% 증가하였다.

실시예 2. 고압효소분해 공정을 거친 추출혼합액의 초음파 처리

상기 실시예 1에서 고압효소분해 공정을 거친 추출혼합액을 70℃의 온수로 채워진 초음파장비 (40Hz, 230W)에 투여하여 초음파 추출 공정을 40분 동안 실시하였다. 초음파 처리를 진행하는 동안(40분 동안) 온수의 온도는 70℃로 유지하도록 하였다. 초음파 추출 공정 후 곧바로 50mL 코니칼 튜브(Conical tube)에 담은 후 원심분리 (3500 rpm, 7분, 4℃)하여 추출잔사와 추출액을 분리하였다. 그 다음, 잔사를 제거한 추출액을 메탄올 용매로 1 내지 50배 희석하여 UPLC-MS 분석장비로 추출액에 함유된 진세노사이드 23종을 정성분석 및 정량분석 하였으며, 그 결과를 도 2에 나타내었다.

그 결과, 도 2에서 확인할 수 있듯이, 효소처리, 초고압 처리 및 초음파 처리를 한 시료의 경우, 초음파 처리는 하지 않고 효소처리 및 초고압 처리한 군과 비교하였을 때, 진세노사이드의 총 함량이 88.7% 증가하였다.

또한, 각 진세노사이드 별로 추출수율을 비교해 보았을 때, 본 발명의 추출법(효소처리, 초고압처리 및 초음파처리)이 Rd 화합물 및 Re 화합물을 추출하는데 가장 효과적인 방법임을 확인할 수 있다.

또한, 대기압에서 추출한 시료와 초고압에서 추출한 시료들 간에 특히, 진세노사이드 CK와 PPD의 존재 유무의 큰 차이를 보여주고 있어 PPD의 경우 초고압 처리군의 모든 시료에서 함량에 큰 차이 없이 추출된 것을 확인할 수 있었으나 CK의 경우 특정 조건(두 가지 효소 처리)의 초고압 처리군에서만 확인할 수 있었다. CK 화합물의 경우, 본 발명의 추출법이 다른 추출법 보다 3배 이상 높은 추출 수율을 보였다.

추가적으로, 본 발명의 추출법에서 처리한 효소 종류에 따른 진세노사이드 주성분 8종 Rb1, Rb2, Rc, Rd, Re, Rf, Rg1, Rg2의 추출 총량을 비교한 결과를 도 3에 나타내었다. 도 3에서 Pectinex를 단독으로 처리하거나 Viscozyme 및 Pectinex를 함께 처리한 후, 초고압 처리한 추출물에서 가장 높은 함량을 보여주었고, 초고압 처리 후 연쇄적으로 처리해 준 초음파추출 효율 또한 상기 두 가지 처리군에서 진세노사이드(8종) 주성분의 함량이 현저히 높은 것을 확인하였다.

또한, 초고압 처리의 유무에 따른 진세노사이드 추출 함량 차이를 효소 별로 비교한 결과를 도 4에 나타내었다. 모든 효소 처리군에서 대략 2배 이상의 추출 수율의 차이가 나는 것을 확인할 수 있다.

또한, 기존 고압효소반응(100MPa, 12시간)에 의한 산양삼의 진세노사이드 주성분 8종(Rb1, Rb2, Rc, Rd, Re, Rf, Rg1, Rg2)의 추출 함량과 본 발명의 초음파 추출의 전처리 단계인 고압효소반응(100MPa, 4시간)간의 추출 함량을 비교한 결과를 도 5에 나타내었다. 비교한 결과, 12시간의 고압효소반응이 진세노사이드 추출량을 최대 13.2mg/g (31%증가) 증가시킨 것을 확하였다. 그뿐만 아니라 Viscozyme 및 Pectinex 두 가지 효소혼합액을 적용한 처리군에서 가장 높은 증대효과를 확인하였다.

마지막으로, 산양삼에서 추출되는 진세노사이드 8가지 주성분(Rb1, Rb2, Rc, Rd, Re, Rf, Rg1, Rg2) 각각에 대하여 본 발명의 처리 효소(Viscozyme, Pectinex, Viscozyme + Pectinex) 또는 무효소-에탄올 첨가 처리 조건에 따른 추출 수율을 비교한 결과를 도 6에 나타내었다.

도 6에서 Rb1의 경우, 60% 에탄올로 초고압-초음파 추출했을 때 가장 효율적으로 획득할 수 있고, Rd의 경우 Viscozyme 효소가 첨가된 처리군에서 가장 높은 수율을 확인하였다. 그 외 6종의 진세노사이드 (Rb2, Rc, Re, Rf, Rg1, Rg2)의 경우 Pectinex 또는 두 가지 효소혼합액 (V+P) 처리군에서 효과적인 방법임을 확인하였다.

Claims (9)

1. A) 인삼류를 동결건조하여 분말로 제조한 후 용매를 첨가하여 혼합액을 제조하는 단계;
   B) 상기 A) 단계의 혼합액에 효소를 혼합하여 초고압 처리를 위한 시료를 제조하는 단계;
   C) 상기 B) 단계의 시료를 압력 80 내지 120 MPa, 온도 40 내지 50℃, 처리시간 3 내지 5시간으로 초고압 처리 하여 추출 혼합액을 수득하는 단계; 및
   D) 상기 C) 단계의 추출 혼합액을 30 내지 50분 동안 초음파 처리하는 단계;를 포함하는 인삼류로부터 진세노사이드를 고효율로 추출하는 방법.
   
2. 제 1 항에 있어서,
   상기 A) 단계의 용매는 분말 1 중량부당 구연산 수용액 80 내지 120 중량부 의 비율로 첨가하는 것인
   인삼류로부터 진세노사이드를 고효율로 추출하는 방법.
   
3. 제 2 항에 있어서,
   상기 구연산 수용액은 농도가 0.1 내지 0.3M 이고, pH가 4.6 내지 5.0 인 것인
   인삼류로부터 진세노사이드를 고효율로 추출하는 방법.
   
4. 제 1 항에 있어서,
   상기 인삼류는 고려인삼(Panax ginseng), 전칠삼(Panax notoginseng), 미국삼(Panax quiquefolius), 수삼, 태극삼, 백삼(white ginseng) 및 산양삼(wood-cultivated ginseng)으로 구성된 군으로부터 선택된 1종 이상인 것인
   인삼류로부터 진세노사이드를 고효율로 추출하는 방법.
   
5. 제 1 항에 있어서,
   상기 B) 단계의 효소는 Viscozyme, Pectinex 또는 이를 혼합한 것인
   인삼류로부터 진세노사이드를 고효율로 추출하는 방법.
   
6. 제 1 항에 있어서,
   상기 D) 단계의 초음파 처리는 초음파 처리하는 동안 초음파 장비의 온수를 70℃로 유지하는 것인
   인삼류로부터 진세노사이드를 고효율로 추출하는 방법.
   
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