KR102012872B1 - 복분자, 차전자, 오미자, 구기자, 토사자 및 사상자로 이루어지는 음료용 고농축액 제조방법 및 이로부터 제조된 음료용 고농축액 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 복분자, 차전자, 오미자, 구기자, 토사자 및 사상자로 이루어지는 음료용 고농축액 제조방법 및 이로부터 제조된 음료용 고농축액에 관한 것으로서,
더욱 상세하게는, 차전자, 오미자, 구기자, 토사자 및 사상자를 혼합하여 오자혼합물을 조성하는 단계; 상기 오자혼합물을 이용하여 오자추출물을 제조하는 단계; 상기 오자추출물을 여과하는 단계; 상기 오자추출물을 농축하여 오자농축액을 제조하는 단계; 상기 오자농축액, 복분자농축액, 벌꿀을 혼합하여 음료용 고농축액을 제조하는 단계; 상기 음료용 고농축액을 살균하는 단계;를 포함하여 이루어지는 복분자, 차전자, 오미자, 구기자, 토사자 및 사상자로 이루어지는 고농축액 제조방법 및 이로부터 제조된 고농축액에 관한 것이다.
더욱 상세하게는, 차전자, 오미자, 구기자, 토사자 및 사상자를 혼합하여 오자혼합물을 조성하는 단계; 상기 오자혼합물을 이용하여 오자추출물을 제조하는 단계; 상기 오자추출물을 여과하는 단계; 상기 오자추출물을 농축하여 오자농축액을 제조하는 단계; 상기 오자농축액, 복분자농축액, 벌꿀을 혼합하여 음료용 고농축액을 제조하는 단계; 상기 음료용 고농축액을 살균하는 단계;를 포함하여 이루어지는 복분자, 차전자, 오미자, 구기자, 토사자 및 사상자로 이루어지는 고농축액 제조방법 및 이로부터 제조된 고농축액에 관한 것이다.
Description
본 발명은 복분자, 차전자, 오미자, 구기자, 토사자 및 사상자로 이루어지는 음료용 고농축액 제조방법 및 이로부터 제조된 음료용 고농축액에 관한 것으로서,
더욱 상세하게는, 차전자, 오미자, 구기자, 토사자 및 사상자를 혼합하여 오자혼합물을 조성하는 단계; 상기 오자혼합물을 이용하여 오자추출물을 제조하는 단계; 상기 오자추출물을 여과하는 단계; 상기 오자추출물을 농축한 후 살균하여 오자농축액을 제조하는 단계; 상기 오자농축액, 복분자농축액, 벌꿀을 혼합하여 음료용 고농축액을 제조하는 단계; 상기 음료용 고농축액을 살균하는 단계;를 포함하여 이루어지는 복분자, 차전자, 오미자, 구기자, 토사자 및 사상자로 이루어지는 고농축액 제조방법 및 이로부터 제조된 고농축액에 관한 것이다.
인체의 생명유지를 위한 호기성 에너지 대사에는 반드시 산소가 관여하는데, 호흡과정에 유입된 산소의 일부가 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)으로 전환되어 조직 세포가 산화적 스트레스를 유발하게 된다.
이러한 활성산소종과 같은 유리 라디칼은 생체 내 불균형을 포함한 여러 요인에 의해 지속적으로 생성되는데, 체내 산화적 스트레스는 혈관이나 조직의 손상 및 염증을 유도함으로써 생활습관병, 동맥경화, 앞 등 다양한 질병의 원인이 되기도 한다.
이에 활성산소를 소거하기 위한 항산화성 물질을 안전성의 문제로 식품 및 천연물을 이용한 연구가 활발히 진행되고 있다.
현재 우리나라에서 일반적으로 재배 되고 있는 복분자는 black raspberry (Rubus occidentalis)로 북미가 원산지이며 줄기에 가시가 있는 것이 특징이고, 가지에는 3개의 잎이 자라고 꽃의 색은 흰색으로 국내 재래종 복분자 (Rubus coreanus Miq.)의 5개의 잎과 분홍색의 꽃과 차이를 보인다.
Black raspberry의 주요 안토시아닌은 cyanidin-3-glucoside, cyanidin-3-rutinoside, cyanidin-3-sambubioside, cyanidin-3-xylosylrutinoside 등이 알려져 있고(Nybom N. 1968. Cellulose thin layers for anthocyanin analysis, with special reference to the anthocyanins of black raspbrries. J. Chromatography A. 38: 382-387), 엘라그산(ellagic acid)과 각종 안토시아닌 등이 풍부하여 천연 항산화제로도 유용한 것으로 알려져 있다.
최근에는 black raspberry 열매, 잎, 줄기 추출물의 콜레스테롤 및 혈압 개선 효과, 항산화 활성 및 식도암에 효과가 있다고 보고되어있다.
차전자(Plantaginis asiatica L.)는 우리나라, 중국 및 일본에서 자생하는 다년생 초본으로 질경이과에 속하는 종자이며, 간 기능을 증가시키고 지질대사에 영향을 미쳐 고지혈증을 향상시킨다고 보고된 바 있다. 그리고 차전자에 함유된 생리활성 물질이 간독성에 대한 해독작용과 담즙산배설 촉진 작용 등이 보고되었다.
오미자는 오미자 나무과(Schisandraceae)에 속하는 낙엽성 목본의 덩굴성 식물로 둥근 형태의 붉은색 과실이다. 오미자는 6-8월에 개화하여 9-10월에 과실이 열리고 서리가 내린 후, 채취하여 사용하며, 오미자 과육은 달고도 신맛을 나타내며, 핵중은 맥고도 떫으며 또한 쓴맛이 합해져서 다섯 가지의 맛이라고 하여 그 명칭이 유래되었다. 오미자의 주요 기능성 성분으로는 리그난 화합물이 알려져 있으며, schizandrin, gomisin N 및 gomisin A가 가장 많이 함유되어 있으며, 오미자의 붉은색은 80% 이상이 안토시아닌에 의한 것으로 보고되고 있다.
이와 같은 기능성 물질에 의해 나타나는 기능성으로는 알코올 해독작용 및 간 보호 효과, 간암세포에 대한 항암효과, 대장암세포 증식억제효과, 고지혈증 완화, 혈당 및 혈압강화와 같은 대사성 질환에 효과가 있는 것으로 보고되고 있다.
구기자(Lycii fructus)는 가지과에 속하며 한쪽이 뾰족한 방추상으로써 길이 2 ~ 3 cm, 지름 5 ~ 10 mm이다. 과피는 적색 또는 어두운 적색이고 바깥 면은 쭈꿀쭈꿀하며 속에는 황색을 띤 백색의 씨가 들어 있다.
구기자열매는 8월부터 11월까지 장시간 수확하므로 많은 양을 수확할 수 있고 손으로 직접 하나하나 수확함으로써 시골과 인근 도시의 유휴 노동력을 활용할 수 있는 노동 집약적 고소득 작목이다. 구기자는 수확시기에 따라 성분이 다른 것으로 알려져 있다. 구기자의 당은 8월에 수확한 것보다 11월에 수확한 것이 더 높으며, Betaine 또한 수확시기가 늦을수록 더 많은 것으로 알려져 있다.
총 페놀성 화합물은 구기자 품종에 따라 다르나 8월과 9월에 수확한 것이 더 많고 전자공여능 등 항산화성은 11월에 늦게 수확한 구기자가 높은 것으로 알려져 있다. 구기자 주요 성분으로는 betaine, zeaxanthin, carotine, thiamine, nicotinic acid, ascorbic acid 등이 있고, 잎에는 rutin, daucosterin, betaine 등이 들어 있으며, 근피에는 betaine, linoleic acid등이 포함되어 있다.
구기자 열매의 phytochemicals은 rutin, kukoamine, ρ-coumaric acid, cerebroside, carotenoid, β-sitosterol, zeaxanthin, physalien, cholin, stigmasterol, campesterol, cholesterol, cycloeucalenol, obtusifoliol, gramisterol, citrostadienol, cycloartanol, taurine, γ-aminobutric acid 등 아주 다양한 성분이 발견되고 있다. 구기자의 기능성연구로는 자양강장 효과와 눈을 밝게 해주는 효능 외에도 간, 신장 질환과 소갈 등에 대한 치료 효과 등 다양한 효능들이 보고되었다.
또한 구기자 잎(Lycii folium) 역시 열을 내리고 당뇨와 눈을 맑게 하는 등의 효능이 있어서 허약으로 인한 발열과 목마름 등의 치료에 사용되고 있다.
토사자(Cuscutae semen)는 메꽃과에 속하는 식물로 한국, 일본 및 중국 등에서 자생하는 토사의 종자를 가을에 채취하여 햇볕에 말린 것으로 이는 강장, 강정, 보간현 및 지갈 등에 효과가 우수하여 한방에서는 토사자환, 토사자탕과 토사자산으로 널리 사용되고 있다.
토사자는 또한 종기, 기미, 색소침착 등의 개선 효과가 있는 것으로 알려져 미용팩으로도 이용되고 있으며, 식품으로는 차로 타서 마실 수 있는 토사자 가루가 시판되고 있으며, 말린 토사자를 이용하여 제조한 술을 자양강장에 교화가 있는 것으로 알려져 있다.
토사자의 주요 성분으로는 saccharide, flavonoids, alkaloids, lignans, 및 rein glycoside 등이 있다. Kim EY 등(2004)의 보고에서는 linoleic acid emulsion을 이용한 total antioxidant 활성 측정시 1 mg/mL 농도에서 토사자가 대조구에 비해 70 % 이상의 항산화 활성을 나타내었다. Oh HC 등(2002)은 MS와 NMR을 사용하여 토사자 에탄올 추출물의 성분을 분석하였으며, 이 중 일부 화합물이 angiotensin I converting enzyme의 활성을 농도 의존적으로 억제하였음을 확인하였다.
사상자(Torilis japonica Decandolle)는 미나리과(Umbelliferae)에 속하는 두해살이풀로 우리나라 전역에 자생한다. 전체에 짧은 복모가 있고 높이 30 ~ 70 cm 줄기는 곧게 선다.
잎은 호생하며 3 출엽이고 2회 호상으로 갈라지며 길이 5 ~ 10 cm 로서 끝이 뽀족하고 녹색이며 소엽은 난상 피침형이고 뾰쪽한 톱니가 있으며 옆병 밑부분이 넓어져서 원줄기를 얼싸안는다. 꽃은 6 ~ 8 월에 피고 백색이며 가지 끝과 원줄기 끝의 복산형화서에 달리고 소산경은 5 ~ 9 개 이며, 길이 1 ~ 3 cm 로서 6 ~ 20 개의 꽃이 달린다. 열매는 4 ~ 10 개씩 달리며 난형이고 길이 2.5 ~ 3 mm 로서 짧은 가시같은 털이 있어 다른 물체에 잘 붙는다.
어린 순을 나물로 하고 열매는 약용으로 한다. 이 식물 아래 뱀이 웅크리고 있는 경우가 많아‘뱀도랏’이라고도 한다. 한의약에서 열매를 말려 만든 생약을 ‘사상자’라고 부르며 맵고 쓰며 따뜻한 성질이 있고 독이 없다고 알려져 있다. 약리효과로는 항원충작용, 성호르몬유사작용, 멜라닌 억제 효과가 있으며 항암작용, 간세포보호작용 등이 있고, 수렴성 소염약으로 가려움증 등의 다양한 생리활성을 나타내는 것으로 연구되어 있다. 사상자는 정유나 지방유 성분이 주로 이루어져 있으며 주성분으로 torilin, torilolone등의 sesquiterpene계의 화합물이 함유되어 있는 것으로 보고 되어 있다.
이와 같은 다양한 기능성 물질을 포함하고 있는 복분자, 차전자, 오미자, 구기자, 토사자 및 사상자를 이용하여 제조함으로써 높은 항산화기능을 갖는 음료용 고농축액 제조방법을 개발하게 됨으로써 본 발명의 완성에 이르게 되었다.
본 발명은 차전자, 오미자, 구기자, 토사자 및 사상자를 혼합하여 오자혼합물을 조성하는 단계; 상기 오자혼합물을 이용하여 오자추출물을 제조하는 단계; 상기 오자추출물을 여과하는 단계; 상기 오자추출물을 농축하여 오자농축액을 제조하는 단계; 상기 오자농축액, 복분자농축액, 벌꿀을 혼합하여 음료용 고농축액을 제조하는 단계; 상기 음료용 고농축액을 살균하는 단계;를 포함하여 이루어짐으로써 항산화기능성이 뛰어난 음료용 고농축액을 제공할 수 있는 음료용 고농축액 제조방법 및 이로부터 제조된 음료용 고농축액을 제공하고자 하는 것을 발명의 목적으로 합니다.
상기 목적을 달성하기 위하여,
본 발명은 차전자, 오미자, 구기자, 토사자 및 사상자를 혼합하여 오자혼합물을 조성하는 제1단계와,
상기 오자혼합물을 5 ~ 10 배수의 물에 첨가하여 93 ~ 98 ℃에서 6 ~ 10 시간 동안 환류추출하여 오자추출물을 제조하는 제2단계와,
상기 오자추출물을 90 ~ 110 um 필터로 여과하는 제3단계와,
상기 여과과정을 거친 오자추출물을 농축한 후 살균하여 오자농축액을 제조하는 제4단계와,
상기 오자농축액, 복분자농축액, 벌꿀을 혼합하여 음료용 고농축액을 제조하는 제5단계와,
상기 음료용 고농축액을 90 ~ 95 ℃에서 20 ~ 40 분 동안 살균하는 제6단계를 포함하여 이루어지는 복분자, 차전자, 오미자, 구기자, 토사자 및 사상자로 이루어지는 고농축액 제조방법을 제공한다.
본 발명에 따른 복분자, 차전자, 오미자, 구기자, 토사자 및 사상자로 이루어지는 음료용 고농축액 제조방법은 차전자, 오미자, 구기자, 토사자 및 사상자의 오자와 복분자를 이용하여 고농축상태이면서 동시에 높은 항산화활성을 갖는 음료용 고농축액 제조공정을 제공하는 효과를 가지며,
또한 이와 같은 제조공정을 거쳐 제조됨으로써 높은 항산화활성과 함께, 11.44±0.10 TAE mg/g의 높은 총 폴리페놀 함량, 3.05±0.0.2 QUE mg/g의 높은 플라보노이드 함량 및 1.69±0.02 CYE mg/g의 높은 총 안토시아닌 함량을 갖는 음료용 고농축액을 제공한다.
도 1은 본 발명에 따른 음료용 고농축액 제조공정도.
도 2는 본 발명에 따른 음료용 고농축액을 조성하는 복분자; 오자 물 추출물;의 항산화활성을 측정하기 위한 DPPH 라디칼 소거활성 측정결과 그래프.((a) 복분자 물 추출물, (b) 오자 물 추출물)
도 3은 본 발명에 따른 음료용 고농축액을 조성하는 복분자; 오자 물 추출물;의 항산화활성을 측정하기 위한 ABTS 라디칼 소거활성 측정 결과 그래프.((a) 복분자 물 추출물, (b) 오자 물 추출물)
도 4는 본 발명에 따른 음료용 고농축액을 조성하는 차전자, 오미자, 구기자, 토사자, 사상자를 혼합하여 추출 후 농축한 오자 농축액의 농도별 DPPH 라디칼 소거활성을 측정한 결과 그래프.
도 5는 본 발명에 따른 음료용 고농축액을 조성하는 차전자, 오미자, 구기자, 토사자, 사상자를 혼합하여 추출 후 농축한 오자 농축액의 농도별 ABTS 라디칼 소거활성을 측정한 결과 그래프.
도 6은 본 발명에 따른 음료용 고농축액의 농도별 DPPH 라디칼 소거활성 측정 결과 그래프.
도 7은 본 발명에 따른 음료용 고농축액의 농도별 ABTS 라디칼 소거활성 측정 결과 그래프.
도 2는 본 발명에 따른 음료용 고농축액을 조성하는 복분자; 오자 물 추출물;의 항산화활성을 측정하기 위한 DPPH 라디칼 소거활성 측정결과 그래프.((a) 복분자 물 추출물, (b) 오자 물 추출물)
도 3은 본 발명에 따른 음료용 고농축액을 조성하는 복분자; 오자 물 추출물;의 항산화활성을 측정하기 위한 ABTS 라디칼 소거활성 측정 결과 그래프.((a) 복분자 물 추출물, (b) 오자 물 추출물)
도 4는 본 발명에 따른 음료용 고농축액을 조성하는 차전자, 오미자, 구기자, 토사자, 사상자를 혼합하여 추출 후 농축한 오자 농축액의 농도별 DPPH 라디칼 소거활성을 측정한 결과 그래프.
도 5는 본 발명에 따른 음료용 고농축액을 조성하는 차전자, 오미자, 구기자, 토사자, 사상자를 혼합하여 추출 후 농축한 오자 농축액의 농도별 ABTS 라디칼 소거활성을 측정한 결과 그래프.
도 6은 본 발명에 따른 음료용 고농축액의 농도별 DPPH 라디칼 소거활성 측정 결과 그래프.
도 7은 본 발명에 따른 음료용 고농축액의 농도별 ABTS 라디칼 소거활성 측정 결과 그래프.
이하, 상기의 기술 구성에 대해 구체적으로 살펴보도록 한다.
상기한 바와 같이,
본 발명에 따른 복분자, 차전자, 오미자, 구기자, 토사자 및 사상자로 이루어지는 고농축액 제조방법은,
차전자, 오미자, 구기자, 토사자 및 사상자를 혼합하여 오자혼합물을 조성하는 제1단계와,
상기 오자혼합물을 5 ~ 10 배수의 물에 첨가하여 93 ~ 98 ℃에서 6 ~ 10 시간 동안 환류추출하여 오자추출물을 제조하는 제2단계와,
상기 오자추출물을 90 ~ 110 um 필터로 여과하는 제3단계와,
상기 여과과정을 거친 오자추출물을 농축한 후 살균하여 오자농축액을 제조하는 제4단계와,
상기 오자농축액, 복분자농축액, 벌꿀을 혼합하여 음료용 고농축액을 제조하는 제5단계와,
상기 음료용 고농축액을 90 ~ 95 ℃에서 20 ~ 40 분 동안 살균하는 제6단계를 포함하여 이루어진다.
상기 제조방법에 따른 각 단계별 기술 구성에 대해 구체적으로 살펴보도록 한다.
< 오자혼합물 조성단계(1단계) >
상기 오자혼합물은 차전자, 오미자, 구기자, 토사자 및 사상자를 혼합하여 조성되는 것이다.
보다 구체적으로는, 차전자 5 ~ 15 wt%; 오미자 30 ~ 50 wt%; 구기자 30 ~ 50 wt%; 토사자 3 ~ 8 wt%; 사상자 3 ~ 8 wt%;의 혼합으로 오자혼합물을 조성한다.
일례로, 차전자 10 wt%; 오미자 40 wt%; 구기자 40 wt%; 토사자 5 wt%; 사상자 5 wt%;의 혼합으로 조성된 오자혼합물을 사용한다.
< 오자추출물 제조단계(제2단계) >
본 단계(2단계)는 전 단계(1단계)에서 조성된 오자혼합물을 이용하여 오자추출물을 제조하는 단계이다.
보다 구체적으로는, 상기 오자혼합물을 5 ~ 10 배수의 물에 첨가하여 93 ~ 98 ℃에서 6 ~ 10 시간 동안 환류추출하여 수득한다.
일례로, 100 g 오자혼합물을 10 배 중량의 물에 첨가하여 95 ℃에서 4 시간 단위로 2 회 반복하여 환류추출한다.
< 오자추출물 여과단계(제3단계) >
상기 오자추출물을 이용하여 오자농축액을 제조하기 전에 추출물 내에 포함되어 있는 이물질을 제거하기 위한 과정으로서, 90 ~ 110 um 필터를 이용하여 여과한다. 일례로 100 um 여과필터를 사용하여 여과한다.
< 오자농축액 제조단계(제4단계) >
본 단계는 여과과정을 마친 오자추출물을 당도가 60 brix에 이르는 시점까지 60 ℃에서 감압농축하여 오자농축액을 제조하는 단계이다.
이와 같이 60 Brix까지 농축 했을때의 수율은 55.0 %로 높은 수준을 유지하게 되며, 최종적으로 음료용 고농축 제조 단가의 절감효과를 볼 수 있다.
상기 오자농축액을 제조한 후에는 90 ~ 95 ℃에서 20 ~ 40 분 동안 살균하여 음료용 고농축액 제조전에 제품 안전성을 확보한다.
< 음료용 고농축액 제조단계(제5단계) >
본 단계는 전 단계에서 수득한 오자농축액과, 복분자농축액, 벌꿀을 혼합하여 본 발명에 따른 음료용 고농축액을 제조하는 단계이다.
이때 복분자농축액은 복분자를 5 ~ 10 배수의 물에 첨가하여 93 ~ 98 ℃에서 6 ~ 10 시간 동안 환류추출하여 추출물의 당도가 60 brix에 이르는 시점까지 60 ℃에서 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
상기 음료용 고농축액의 성분 배합비는 오자농축액 40 ~ 80 wt%; 복분자농축액 10 ~ 50 wt%; 벌꿀 0.5 ~ 10 wt%의 혼합으로 조성된다.
일례로, 오자농축액 60 wt%; 복분자농축액 35 wt%; 벌꿀 5 wt%;의 혼합으로 음료용 고농축액을 조성한다.
또한 상기 음료용 고농축액은 항균 및 항산화활성을 더욱 향상시키기 위하여, 상기 오자농축액, 복분자농축액 및 벌꿀의 전체 혼합물에 대해 아마씨추출물 5 ~ 10 wt%를 더 첨가하여 조성한다.
더욱 구체적으로는, 오자농축액, 복분자농축액 및 벌꿀의 전체 혼합물 95 wt%와 아마씨추출물 5 wt%를 혼합하여 음료용 고농축액을 제조한다.
이때, 상기 아마씨추출물은 아마씨를 10 ~ 20 배 중량의 메탄올(MeOH)에 첨가하여 5 ~ 15 시간 동안 추출하고, 90 ~ 110 um 필터로 여과한 후 감압농축기(rotary vacuum evarporator)에서 40 ℃의 조건으로 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
< 살균단계(제6단계) >
본 단계는 전 단계에서 제조된 음료용 고농축액을 제조한 후에는 90 ~ 95 ℃에서 20 ~ 40 분 동안 살균하는 단계이다. 일례로, 93 ℃에서 30 분 동안 살균한다.
이후 부가 과정으로서, 도 1에 도시된 바와 같이, 일반세균, 대장균군 등에 대한 품질검사를 거친 후 제품 포장 및 출하과정을 거치게 된다.
이하, 본 발명에 따른 오자추출물, 오자농축액 및 음료용 고농축액에 대한 시험 내용 및 그에 따른 결과를 제시하고자 한다.
먼저 상기 시험에 사용되는 복분자 및 오자의 추출조건을 살펴보면, 각각의 샘플 100 g에 10 배수의 물을 용매로 첨가하여 95 ℃에서 4 시간 2 회 환류추출 한다. 추출물은 여과하여 농축한 후 동결건조기를 이용하여 동결건조한 것을 -70 ℃에서 냉동보관하며 실험에 사용하였다.
< 오자추출물의 총 폴리페놀, 총 플라보노이드, 총 안토시아닌, DPPH 라디칼 소거활성 및 ABTS 라디칼 소거활성 측정 >
1) 총 폴리페놀 측정
총 폴리페놀 함량은 각각의 추출물 0.1 g을 증류수 10 mL로 30 분간 초음파 추출하고, 이를 3,000 rpm에서 10 분간 원심분리하여 상등액을 실린지 필터(syringe filter 0.45 μm)로 여과하여 실험용액으로 사용하였다.
실험용액 1 mL에 증류수 7.5 mL과 Folin-Ciocalteau’s phenol regent 0.5 mL, 35% Na2CO3 1 mL를 순서대로 가한 다음 실온에서 1 시간 동안 반응시킨 후 UV/VIS spectrophotometer(UV-2450, Shimadzu Co., Kyoto, Japan)를 사용하여 760 nm에서 흡광도를 측정하였다.
이때 tannin acid(Sigma-Aldrich Co., St. Louis, Mo, USA)를 표준물질로 사용하여 검량곡선을 작성하고 이로부터 총 폴리페놀 함량을 구하였다.
2) 총 플라보노이드 측정
총 플라보노이드 함량은 각각의 추출물 0.1 g을 90 % ethanol 20 mL로 3 분간 초음파 추출하고, 이를 3,000 rpm에서 10 분간 원심분리하여 상등액을 취한 후 남은 잔사에 80% ehanol 30 mL로 3 분간 초음파 추출하여 이를 모두 합한 후 50 mL로 정용하여 실험용액으로 사용하였다.
실험용액 0.5 mL에 ethanol 1.5 mL, 10% 질산알루미늄 0.1 mL, 1M 초산칼슘 0.1 mL, 증류수 2.8 mL을 순서대로 가하고 vortex mixer로 혼합하여 암소에서 40분간 반응시키고 UV/VIS spectrophotometer(UV-2450, Shimadzu Co., Kyoto, Japan)를 사용하여 415 nm에서 흡광도를 측정하였다.
이때 quercetin(Sigma-Aldrich Co., St. Louis, Mo, USA)을 표준물질로 사용하여 검량곡선을 작성하고 이로부터 총 플라보노이드 함량을 구하였다.
3) 총 안토시아닌 측정
각각의 추출물의 총 안토시아닌 함량은 각각의 시료 1 ml과 0.1 % HCl을 함유하는 80 % 메탄올 용액 30 mL를 섞어서 24 시간 동안 진탕배양기에서 추출한 후 UV/VIS 분광광도계를 사용하여 528 nm에서 흡광도를 측정하였다.
이때 시아니딘을 표준물질로 사용하여 검량곡선을 작성하고 이로부터 총 안토시아닌 함량을 구하였다.
4) DPPH 라디칼 소거활성 측정
DPPH(2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl) radical 소거활성은 농도별로 조제한 각각의 시료액 0.1 mL에 에탄올 0.2 mL을 가하고 2×10-4 M DPPH용액 0.3 mL를 5 초간 vortex mixer로 혼합하여 실온에서 30 분간 반응시키고 ELISA(Synergy HT, Biotec, Washington DC, USA)를 사용하여 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조구는 시료 대신에 에탄올을 첨가하여 실험하였다.
A: Absorbance of sample
B: Absorbance of blank
5) ABTS 라디칼 소거활성 측정
ABTS assay는 농도별로 조제한 각각의 시료액 5 uL에 ABTS radical 용액 195 uL를 첨가하여 7 분간 반응시킨 후 ELISA(Synergy HT, Biotec, Washington DC, USA)를 사용하여 734 nm에서 흡광도를 측정하였고, 대조구는 시료 대신에 증류수를 첨가하여 실험하였다.
< 오자농축액의 이화학적 특성, 유리 아미노산 분석, 유기산 분석, 총 폴리페놀 측정, 총 플라보노이드 측정, 총 안토시아닌 측정, DPPH 라디칼 소거활성 측정, ABTS 라디칼 소거활성 측정 >
먼저, 상기 오자 추출 및 농축조건은 다음과 같다. 그리고 표 1은 오자 농축액 제조를 위한 오자 배합비이다.
즉, 오자는 오미자 40 wt%, 구기자 40 wt%, 차전자 10 wt%, 토사자 5 wt%, 사상자 5 wt%의 비율로 혼합하여 정제수 6 배수로 95 ℃에서 8 시간 추출하였다. 추출이 완료된 것을 100 um 여과필터를 거쳐 여과 한 후 60 ℃에서 감압 농축하였다.
Sample | 비율(wt%) |
오미자 | 40 |
구기자 | 40 |
차전자 | 10 |
토사자 | 5 |
사상자 | 5 |
합계 | 100 |
1) 오자 농축액의 이화학적 특성
오자를 혼합하여 제조한 농축액의 당도는 휴대용당도계(PAL-1 Pocket Refractometer, ATAGO, WA, USA)로 측정하였다. pH는 pH meter (Mettler Toledo)를 이용하였고, 산도는 시료 10 g에 증류수 90 mL를 혼합하여 50 mL을 취하여 pH가 8.3이 될 때까지 0.1N NaOH를 소비한 양을 젖산으로 환산하여 산도를 측정하였다.
고형분은 105 ℃ 가열건조법을 이용하여 수분측정 후 그 함량을 뺀 값으로 나타내었다. 색도는 시료 10 g에 증류수 90 mL를 혼합하여 분광측색계(CM-5, Minolta, Osaka, Japan)를 사용하여 L(Lightness), a(Redness), b(Yellowness) 값으로 표시하였고, 점도는 VISCOMETER(DV-Ⅱ Pro, Brookfield, USA)를 이용하여 spindle LV4, speeed 10 rpm으로 5 분간 측정하였다. 모든 실험은 3 회 반복 실시하여 평균값을 구하였다.
2) 오자 농축액의 유리 아미노산 분석
아미노산 분석은 각각의 시료를 정밀히 달아 약 10배의 증류수를 가해 비등 수욕 상에서 가열하여 응고시킨 다음 여과하여 물층을 취하였다.
잔사는 2~3회 소량의 물로 세정하고 기존의 물층과 합하였다. 지방이 있는 경우에는 에테르로 추출하여 제거하였고 물층을 감압 농축하여 얻은 잔사를 0.2 N 구연산나트륨 완충액(pH 2.2) 또는 0.02 N 염산으로 용해하여 일정량으로 하여 시험용액으로 한다.
불용물질이 있는 경우에는 멤브레인 필터를 사용하여 여과한 것을 표 2의 조건으로 분석하였다.
Instrurment | Amino acid analyzer L-8900 |
Column | Ion exchange resin (60 mm 4.6 mm Na type) |
Detector |
570 nm |
완충액 : 구연산리튬완충액 | |
반응액 : 닌히드린 시액 | |
Injection Vol. | 10 uL |
Flow rate | 0.4 mL/min |
Mobile phase |
57 ℃ |
135 ℃ | |
33min |
3) 오자 농축액의 유기산 분석
오자 농축액의 유기산 분석을 위해 액체크로마토그래피(Shiseido HPLC system)을 사용하여, 표 3과 같은 조건으로 분석을 진행하였다.
복분자 부산물 발효 원주 1~10 mL을 정밀하게 취하여 증류수 50 mL로 희석한 후 아세토니트릴/증류수(1:1)용액 10 mL로 유출시켜 활성화된 C18 카트리지에 10 mL을 가하여 초기 용출액 4~5 mL을 제거한 후 나머지 용출액을 분취하여 멤브레인 필터 0.45 um로 여과하여 표 3과 같은 조건으로 분석하였다.
Instrument | HPLC |
Column | Prevail organic acid (5 um, 250 4.6 mm) |
Column oven Temp. | 40℃ |
flow rate | 0.4 mL/min |
Mobile phase | 0.025M KH2PO4 |
Injection Vol. | 10 uL |
PDA | 214 nm |
4) 오자 농축액의 총 폴리페놀 측정
총 폴리페놀 함량은 오자 농축액 0.1 g을 증류수 10 mL로 30 분간 초음파 추출하고, 이를 3,000 rpm에서 10분간 원심분리하여 상등액을 실린지 필터(syringe filter 0.45μm)로 여과하여 실험용액으로 사용하였다.
실험용액 1 mL에 증류수 7.5 mL과 Folin-Ciocalteau’s phenol regent 0.5 mL, 35 % Na2CO3 1 mL를 순서대로 가한 다음 실온에서 1 시간 동안 반응시킨 후 UV/VIS spectrophotometer(UV-2450, Shimadzu Co., Kyoto, Japan)를 사용하여 760 nm에서 흡광도를 측정하였다.
이때 tannin acid(Sigma-Aldrich Co., St. Louis, Mo, USA)를 표준물질로 사용하여 검량곡선을 작성하고 이로부터 총 폴리페놀 함량을 구하였다.
5) 오자 농축액의 총 플라보노이드 측정
총 플라보노이드 함량은 오자 농축액 0.1 g을 90 % ethanol 20 mL로 3분간 초음파 추출하고, 이를 3,000 rpm에서 10분간 원심분리하여 상등액을 취한 후 남은 잔사에 80 % ehanol 30 mL로 3분간 초음파 추출하여 이를 모두 합한 후 50 mL로 정용하여 실험용액으로 사용하였다.
실험용액 0.5 mL에 ethanol 1.5 mL, 10 % 질산알루미늄 0.1 mL, 1 M 초산칼슘 0.1 mL, 증류수 2.8 mL을 순서대로 가하고 vortex mixer로 혼합하여 암소에서 40 분간 반응시키고 UV/VIS spectrophotometer(UV-2450, Shimadzu Co., Kyoto, Japan)를 사용하여 415 nm에서 흡광도를 측정하였다.
이때 quercetin(Sigma-Aldrich Co., St. Louis, Mo, USA)을 표준물질로 사용하여 검량곡선을 작성하고 이로부터 총 플라보노이드 함량을 구하였다.
6) 오자 농축액의 총 안토시아닌 측정
오자 농축액의 총 안토시아닌 함량은 각각의 시료 1 ml과 0.1 % HCl을 함유하는 80% 메탄올 용액 30 mL를 섞어서 24 시간 동안 진탕배양기에서 추출한 후 UV/VIS 분광광도계를 사용하여 528 nm에서 흡광도를 측정하였다.
이때 시아니딘을 표준물질로 사용하여 검량곡선을 작성하고 이로부터 총 안토시아닌 함량을 구하였다.
7) 오자 농축액의 DPPH 라디칼 소거활성 측정
DPPH(2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl) radical 소거활성은 농도별로 조제한 오자 농축액 0.1 mL에 에탄올 0.2 mL을 가하고 2×10-4 M DPPH용액 0.3 mL를 5 초간 vortex mixer로 혼합하여 실온에서 30 분간 반응시키고 ELISA(Synergy HT, Biotec, Washington DC, USA)를 사용하여 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조구는 시료 대신에 에탄올을 첨가하여 실험하였다.
A: Absorbance of sample
B: Absorbance of blank
8) 오자 농축액의 ABTS 라디칼 소거활성 측정
ABTS assay는 농도별로 조제한 오자 농축액 5 uL에 ABTS radical 용액 195 uL를 첨가하여 7 분간 반응시킨 후 ELISA(Synergy HT, Biotec, Washington DC, USA)를 사용하여 734 nm에서 흡광도를 측정하였고, 대조구는 시료 대신에 증류수를 첨가하여 실험 하였다.
A: Absorbance of sample
B: Absorbance of blank
< 음료용 고농축액의 이화학적 특성 및 항산화활성 측정>
1) pH, 당도, 산도 및 색도, 고형분 및 점도 측정
본 발명에 따른 음료용 고농축액의 당도는 휴대용당도계(PAL-1 Pocket Refractometer, ATAGO, WA, USA)로 측정하였다.
pH는 pH meter(Mettler Toledo)를 이용하였고, 산도는 시료 10 g에 증류수 90 mL를 혼합하여 50 mL을 취하여 pH가 8.3이 될 때까지 0.1N NaOH를 소비한 양을 젖산으로 환산하여 산도를 측정하였다.
고형분은 105 ℃ 가열건조법을 이용하여 수분측정 후 그 함량을 뺀 값으로 나타내었다.
색도는 시료 10 g에 증류수 90mL를 혼합하여 분광측색계(CM-5, Minolta, Osaka, Japan)를 사용하여 L(Lightness), a(Redness), b(Yellowness) 값으로 표시하였고,
점도는 VISCOMETER(DV-Ⅱ Pro, Brookfield, USA)를 이용하여 spindle LV3, speeed 35 rpm으로 5 분간 측정하였다.
모든 실험은 3회 반복 실시하여 평균값을 구하였다.
2) 음료용 고농축액의 총 폴리페놀 측정
총 폴리페놀 함량은 음료용 고농축액 0.1 g을 증류수 9 mL로 30 분간 초음파 추출하고, 이를 3,000 rpm에서 10 분간 원심분리하여 상등액을 실린지 필터(syringe filter 0.45μm)로 여과하여 실험용액으로 사용하였다.
실험용액 1 mL에 증류수 7.5 mL과 Folin-Ciocalteau’s phenol regent 0.5 mL, 35% Na2CO3 1 mL를 순서대로 가한 다음 실온에서 1시간 동안 반응시킨 후 UV/VIS spectrophotometer(UV-2450, Shimadzu Co., Kyoto, Japan)를 사용하여 760 nm에서 흡광도를 측정하였다.
이때 tannin acid(Sigma-Aldrich Co., St. Louis, Mo, USA)를 표준물질로 사용하여 검량곡선을 작성하고 이로부터 총 폴리페놀 함량을 구하였다.
3) 음료용 고농축액의 총 플라보노이드 측정
총 플라보노이드 함량은 음료용 고농축액 0.1 g을 80 % ethanol 10 mL로 3 분간 초음파 추출하고, 이를 3,000 rpm에서 10 분간 원심분리하여 상등액을 취한 후 남은 잔사에 80% ehanol 30 mL로 3 분간 초음파 추출하여 이를 모두 합한 후 50 mL로 정용하여 실험용액으로 사용하였다.
실험용액 0.5 mL에 ethanol 1.5 mL, 10% 질산알루미늄 0.1 mL, 1M 초산칼슘 0.1 mL, 증류수 2.8 mL을 순서대로 가하고 vortex mixer로 혼합하여 암소에서 40분간 반응시키고 UV/VIS spectrophotometer(UV-2450, Shimadzu Co., Kyoto, Japan)를 사용하여 415 nm에서 흡광도를 측정하였다.
이때 quercetin(Sigma-Aldrich Co., St. Louis, Mo, USA)을 표준물질로 사용하여 검량곡선을 작성하고 이로부터 총 플라보노이드 함량을 구하였다.
4) 음료용 고농축액의 총 안토시아닌 측정
음료용 고농축액의 총 안토시아닌 함량은 각각의 시료 1 ml과 0.1 % HCl을 함유하는 80 % 메탄올 용액 30 mL를 섞어서 24시간 동안 진탕배양기에서 추출한 후 UV/VIS 분광광도계를 사용하여 528 nm에서 흡광도를 측정하였다.
이때 시아니딘을 표준물질로 사용하여 검량곡선을 작성하고 이로부터 총 안토시아닌 함량을 구하였다.
5) 음료용 고농축액의 DPPH 라디칼 소거활성
DPPH(2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl) radical 소거활성은 농도별로 조제한 음료용 고농축액 0.1 mL에 메탄올 0.2 mL을 가하고 2×10-4 M DPPH용액 0.3 mL를 5초간 vortex mixer로 혼합하여 실온에서 30분간 반응시키고 ELISA(Synergy HT, Biotec, Washington DC, USA)를 사용하여 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조구는 시료 대신에 에탄올을 첨가하여 실험하였다.
A: Absorbance of sample
B: Absorbance of blank
6) 음료용 고농축액의 ABTS 라디칼 소거활성
ABTS assay는 농도별로 조제한 음료용 고농축액 5 uL에 ABTS radical 용액 195 uL를 첨가하여 7 분간 반응시킨 후 ELISA(Synergy HT, Biotec, Washington DC, USA)를 사용하여 734 nm에서 흡광도를 측정하였고, 대조구는 시료 대신에 증류수를 첨가하여 실험하였다.
A: Absorbance of sample
B: Absorbance of blank
이하, 본 발명에 따른 실험 결과에 대해 살펴보도록 한다.
< 복분자 및 오자의 항산화활성 >
1) 복분자 및 오자 물 추출물의 총 폴리페놀 함량
복분자 및 오자 물 추출물의 총 폴리페놀 함량을 측정한 결과는 표 4와 같다.
차전자, 오미자, 구기자, 토사자, 사상자 및 복분자 물 추출물의 총 폴리페놀의 경우 복분자가 154.74±4.16 TAE mg/g으로 가장 높은 함량을 보였고, 오자 중에서는 토사자가 90.58±4.03 TAE mg/g으로 높았으며, 차전자, 사상자, 구기자, 오미자 순으로 각각 31.94±0.17, 28.47±0.33, 27.10±0.06, 14.50±0.58 TAE mg/g 순으로 높게 나타났다.
Samples | Total polyphenol (TAE mg/g) |
복분자 | 154.74±4.16 |
차전자 | 31.94±0.17 |
오미자 | 14.50±0.58 |
구기자 | 27.10±0.06 |
토사자 | 90.58±4.03 |
사상자 | 28.47±0.33 |
2) 복분자 및 오자 물 추출물의 총 플라보노이드 함량
복분자 및 오자 물 추출물의 총 플라보노이드 함량을 측정한 결과는 표 5와 같다.
복분자 물 추출물이 29.37±2.02 QUE mg/g으로 총 폴리페놀과 마찬가지로 가장 높게 나타났으며, 오자 중에서는 사상자가 2.42±0.15 QUE mg/g으로 가장 높았으며, 토사자, 차전자, 오미자, 구기자 순으로 각각 2.02±0.23, 1.67±0.67, 0.74±0.08, 0.51±0.03 QUE mg/g으로 나타났다.
Samples | Total flavonoid contents (QUE mg/g) |
복분자 | 29.37±2.02 |
차전자 | 1.67±0.67 |
오미자 | 0.74±0.08 |
구기자 | 0.51±0.03 |
토사자 | 2.02±0.23 |
사상자 | 2.42±0.15 |
3) 복분자 및 오자 물 추출물의 DPPH 라디칼 소거활성
복분자 및 오자 물 추출물의 항산화활성을 측정하기 위하여 DPPH 라디칼 소거활성을 측정한 결과는 도 2와 같다.
복분자 물 추출물의 경우 5, 25, 50, 100, 300 ug/mL 농도로 실험한 결과 농도 의존적으로 활성이 증가하였고, 300 ug/mL 농도에서 48.07±0.49%의 활성을 보였다.
오자 물 추출물의 경우는 50, 100, 250, 500, 1,000 ug/mL 농도에서 실험하였다. 그 결과 가장 높은 활성은 토사자에서 나타났으며, 차전자, 오미자, 사상자, 구기자 순으로 높은 활성을 보였다.
4) 복분자 및 오자 물 추출물의 ABTS 라디칼 소거활성
복분자 및 오자 물 추출물의 항산화활성을 측정하기 위하여 ABTS 라디칼 소거활성을 측정한 결과는 도 3과 같다.
복분자 물 추출물의 경우 5, 25, 50, 100, 300 ug/mL 농도로 실험한 결과 농도 의존적으로 활성이 증가하였고, 300 ug/mL 농도에서 24.28±0.36%의 활성을 보였다.
오자 물 추출물의 경우는 50, 100, 250, 500, 1,000 ug/mL 농도에서 실험하였다. 그 결과 가장 높은 활성은 DPPH 라디칼 소거활성과 마찬가지로 토사자에서 나타났으며, 차전자, 사상자, 구기자, 오미자 순으로 DPPH 라디칼 소거활성과는 차이를 보였고, DPPH 라디칼 소거활성에 비해 모든 추출물이 낮은 활성을 보였다.
< 오자 농축액의 이화학적 특성 >
1) 오자(차전자, 오미자, 구기자, 토사자, 사상자)의 농축액의 이화학적 특성
차전자, 오미자, 구기자, 토사자, 사상자를 혼합하여 추출한 추출액을 60 Brix까지 농축 했을때의 수율은 표 6과 같이 55.0%로 높은 수준을 보여, 최종적으로 고농축 제품을 개발할 때 단가가 절감될 수 있을 것으로 판단된다.
또한 오자 농축액의 품질특성을 확인하기 위하여 측정한 당도, 산도, pH의 결과(표 7) 당도는 60 Birx에 오차범위 내에서 확인되었고, 산도는 5.15±0.01, pH는 3.31±0.02로 나타났고, 고형분, 색도, 점도를 측정한 결과(표 8)에서는 고형분 51.8%, 색도의 경우 L값이 15.81±0.02, a값 30.29±0.03, b값 27.20±0.01로 나타났으며, 점도의 경우 16,183.88±59.96으로 확인되었다.
Sample | 수율(%) |
오자농축액 | 55.0% |
Sample | 당도 | 산도 | pH |
오자농축액 | 60.83±0.06 | 5.15±0.01 | 3.31±0.02 |
Sample |
고형분(%) |
색도 | 점도 |
||
L | a | b | |||
오자농축액 | 51.8 |
15.81±0.02 |
30.29±0.03 | 27.20±0.01 | 16,183.88±59.96 |
3) 오자(차전자, 오미자, 구기자, 토사자, 사상자) 농축액의 유리아미노산
차전자, 오미자, 구기자, 토사자, 사상자를 혼합하여 추출 후 농축한 오자 농축액의 유리아미노산을 분석한 결과는 표 9와 같다.
가장 높은 함량은 아스파라긴산이 265.45 mg/100g이었고, 아르기닌 129.50 mg/100g, 알라닌 92.17 mg/100g, 포몰린 47.19 mg/100g, 세린 39.86 mg/100g, 로이신 39.10 mg/100g, 티로신 36.05 mg/100g, 페닐알라닌 33.49 mg/100g, 글루탐산 31.71 mg/100g, 발린 31.08 mg/100g, 히스티딘 26.74 mg/100g, 이소로이신 25.65 mg/100g, 트레오닌 20.03 mg/100g, 시로틴 11.29 mg/100g, 메티오닌 10.56 mg/100g, 트립토판 6.03 mg/100g 순으로 높은 함량을 보였다.
유리아미노산 | 함량 (mg/100g) |
트레오닌 | 20.03 |
시스틴 | 11.29 |
티로신 | 36.05 |
아르기닌 | 129.50 |
알라닌 | 92.17 |
포물린 | 47.19 |
라이신 | 19.25 |
히스티딘 | 26.74 |
이소로이신 | 25.65 |
로이신 | 39.10 |
메티오닌 | 10.56 |
페닐알라닌 | 33.49 |
트립토판 | 6.03 |
발린 | 31.08 |
글루탐산 | 31.71 |
아스파라긴산 | 265.45 |
세린 | 39.86 |
글리신 | 14.53 |
합 계 | 879.68 |
4) 오자(차전자, 오미자, 구기자, 토사자, 사상자) 농축액의 유기산
차전자, 오미자, 구기자, 토사자, 사상자를 혼합하여 추출 후 농축한 오자 농축액의 유기산을 측정한 결과(표 10) 옥살산과 호박산은 검출되지 않았고, 구연산이 95.89 mg/g, 사과산 64.03 mg/g으로 나타났다.
유기산 | 함량 (mg/g) |
옥살산 | 불검출 |
구연산 | 95.89 |
호박산 | 불검출 |
사과산 | 64.03 |
5) 오자(차전자, 오미자, 구기자, 토사자, 사상자) 농축액의 총 폴리페놀
차전자, 오미자, 구기자, 토사자, 사상자를 혼합하여 추출 후 농축한 오자 농축액의 항산화 성분을 측정하기 위하여 총 폴리페놀 함량을 측정한 결과는 표 11와 같이 14.15±0.25 TAE mg/g으로 나타나 추후 항산화활성을 측정할? 높은 수준의 활성을 보일 것으로 판단된다.
Sample | 총 폴리페놀 (TAE mg/g) |
오자농축액 | 14.15 |
6) 오자(차전자, 오미자, 구기자, 토사자, 사상자) 농축액의 총 플라보노이드
차전자, 오미자, 구기자, 토사자, 사상자를 혼합하여 추출 후 농축한 오자 농축액의 총 플라보노이드 함량을 측정한 결과는 표 12와 같이 1.31±0.24 QUE mg/g으로 확인되었다.
Sample | 총 플라보노이드 (QUE mg/g) |
오자농축액 | 1.31 |
7) 오자(차전자, 오미자, 구기자, 토사자, 사상자) 농축액의 총 안토시아닌
차전자, 오미자, 구기자, 토사자, 사상자를 혼합하여 추출 후 농축한 오자 농축액의 총 안토시아닌 함량을 측정한 결과(표 13) 0.27±0.01 CYE mg/g으로 나타났다.
Sample | 총 안토시아닌 (CYE mg/g) |
오자농축액 | 0.27 |
8) 오자(차전자, 오미자, 구기자, 토사자, 사상자) 농축액의 DPPH 라디칼 소거활성
차전자, 오미자, 구기자, 토사자, 사상자를 혼합하여 추출 후 농축한 오자 농축액의 0.625, 1.25, 2.5, 5.0, 10 mg/mL 농도에서 DPPH 라디칼 소거활성을 측정한 결과는 도 4와 같다.
농도가 증가할수록 활성도 증가하는 경향을 보였는데, 0.625, 1.25, 2.5, 5.0, 10 mg/mL 농도에서 각각 10.93±0.22, 17.17±1.02, 27.37±1.47, 44.78±2.00, 68.73±1.32%로 높은 DPPH 라디칼 소거활성을 보였다.
9) 오자(차전자, 오미자, 구기자, 토사자, 사상자) 농축액의 ABTS 라디칼 소거활성
차전자, 오미자, 구기자, 토사자, 사상자를 혼합하여 추출 후 농축한 오자 농축액의 0.625, 1.25, 2.5, 5.0, 10 mg/mL 농도에서 ABTS 라디칼 소거활성을 측정한 결과는 도 5와 같다.
농도가 증가할수록 활성도 증가하는 경향을 보였는데, 0.625, 1.25, 2.5, 5.0, 10 mg/mL 농도에서 각각 6.75±0.24, 9.52±0.14, 14.08±0.49, 24.65±0.37, 41.33±1.20%의 활성을 보였다.
< 음료용 고농축액의 이화학적 특성 및 항산화활성 >
1) 음료용 고농축액의 이화학적 특성
음료용 고농축액의 품질특성을 확인하기 위하여 측정한 당도, 산도, pH의 결과(표 14) 당도는 71.1 Birx로 확인되었고,
산도는 0.81±0.01, pH는 3.54±0.01로 나타났으며, 고형분, 색도, 점도를 측정한 결과(표 15)에서는 고형분 65.5%, 색도의 경우 L값이 1.39±0.02, a값 7.35±0.03, b값 2.24±0.02로 나타났으며, 점도의 경우 648.8±5.77로 나타났다.
Sample | 당도 | 산도 | pH |
음료용 고농축액 | 71.10±0.10 | 0.81±0.01 | 3.54±0.01 |
Sample |
고형분(%) |
색도 | 점도 |
||
L | a | b | |||
음료용 고농축액 | 65.5 | 1.39±0.02 | 7.35±0.03 | 2.24±0.02 | 648.8±5.77 |
2) 음료용 고농축액의 총 폴리페놀
음료용 고농축액의 총 폴리페놀 함량을 측정한 결과(표 16)11.44±0.10 TAE mg/g으로 음료용 고농축액의 총 폴리페놀 함량이 높은 수준으로 확인되었다.
Sample | 총 폴리페놀 (TAE mg/g) |
음료용 고농축액 | 11.44±0.10 |
3) 음료용 고농축액의 총 플라보노이드
음료용 고농축액의 총 플라보노이드 함량을 측정한 결과(표 17) 3.05±0.0.2 QUE mg/g으로 오자 농축액 보다 약 2배 이상 높은 함량을 음료용 고농축액에서 보였는데, 이는 복분자 농축액에 함유된 총 플라보노이드에 의해 함량이 높게 나타난 것으로 판단된다.
Sample | 총 플라보노이드 (QUE mg/g) |
음료용 고농축액 | 3.05±0.02 |
4) 음료용 고농축액의 총 안토시아닌
음료용 고농축액의 총 안토시아닌 함량을 측정한 결과는 표 18과 같다.
음료용 고농축액의 총 안토시아닌 함량은 1.69±0.02 CYE mg/g으로 복분자 농축액에 존재하는 총 안토시아닌에 영향에 의해 높은 함량을 보인 것으로 판단된다.
Sample | 총 안토시아닌 (CYE mg/g) |
음료용 고농축액 | 1.69±0.02 |
6) 음료용 고농축액의 DPPH 라디칼 소거활성
음료용 고농축액의 농도별 DPPH 라디칼 소거활성을 측정한 결과는 도 6과 같다.
0.625, 1.25, 2.5, 5.0, 10 mg/mL 농도에서 DPPH 라디칼 소거활성을 측정한 결과 각각 6.78±0.51, 12.88±0.58, 22.44±0.39, 35.66±0.81, 55.46±0.45%로 농도 의존적으로 활성이 증가하였다. 오자농축액에 비해 약간 낮은 활성을 보였는데, 이는 총 플라보노이드와 총 안토시아닌의 함량이 증가하였으나 총 폴리페놀 함량은 낮게 나타나 영향을 준 것으로 판단된다.
7) 음료용 고농축액의 ABTS 라디칼 소거활성
음료용 고농축액의 농도별 ABTS 라디칼 소거활성을 측정한 결과는 도 7과 같다.
0.625, 1.25, 2.5, 5.0, 10 mg/mL 농도에서 ABTS 라디칼 소거활성을 측정한 결과 각각 5.86±0.14, 8.38±0.37, 13.34±0.65, 22.62±1.12, 38.81±1.57%로 농도 의존적으로 활성이 증가하였다.
8) 음료용 고농축액의 미생물분석
음료용 고농축액의 안정성을 확인하기 위하여 세균수와 대장균군을 측정한 결과(표 19) 세균수는 5 CFU/g으로 식품안전 기준에 적합하였고, 대장균군은 음성으로 확인되었다.
분석항목 | 함량 |
세균수 | 5 CFU/g |
대장균군 | 음성 |
9) 음료용 고농축액의 유해성분 분석
음료용 고농축액의 유해성분을 확인하기 위하여 납과 카드뮴을 분석한 결과(표 20) 납의 경우 0.06±0.00 mg/g으로 나타났고, 카드뮴은 0.01±0.00으로 기준규격에 적합하였다.
분석항목 | 함량 |
납(Pb) | 0.06±0.00 |
카드뮴(Cd) | 0.01±0.00 |
10) 음료용 고농축액의 9대 영양성분
음료용 고농축액의 9대 영양성분을 분석한 결과(표 21) 열량은 277.4 Kcal/100g으로 나타났고, 탄수화물, 당류, 단백질, 지방이 각각 65.9 g/100g, 36.8 g/100g, 2.1 g/100g, 0.6 g/100g으로 나타났고, 포화지방, 트랜스지방, 콜레스테롤은 나타나지 않았으며, 나트륨은 36.9 mg/100g으로 확인되었다.
분석항목 | 함량 |
열량 | 277.4 Kcal/100g |
탄수화물 | 65.9 g/100g |
당류 | 36.8 g/100g |
단백질 | 2.1 g/100g |
지방 | 0.6 g/100g |
포화지방 | 0.0 g/100g |
트랜스지방 | 0.0 g/100g |
콜레스테롤 | 0.0 mg/100g |
나트륨 | 36.9 mg/100g |
본 발명의 복분자, 차전자, 오미자, 구기자, 토사자 및 사상자로 이루어지는 고농축액 제조방법에 따라 제조된 음료용 고농축액은 60 Brix 까지 농축한 농축액에서도 높은 수준의 항산화활성을 갖는 것으로서, 산업상 이용가능성이 크다.
Claims (7)
- 차전자 10 wt%, 오미자 40 wt%, 구기자 40 wt%, 토사자 5 wt% 및 사상자 5 wt%의 비율로 혼합하여 오자혼합물을 조성하는 제1단계와,
상기 오자혼합물을 6 배수의 물에 첨가하여 95 ℃에서 8 시간 동안 환류추출하여 오자추출물을 제조하는 제2단계와,
상기 오자추출물을 100 um 필터로 여과하는 제3단계와,
상기 여과과정을 거친 오자추출물을 60 ℃에서 감압 농축한 후 살균하여 오자농축액을 제조하는 제4단계와,
상기 오자농축액, 복분자농축액, 벌꿀을 혼합하여 음료용 고농축액을 제조하는 제5단계와,
상기 음료용 고농축액을 90 ~ 95 ℃에서 20 ~ 40 분 동안 살균하는 제6단계를 포함하여 이루어지는 것에 있어서,
상기 음료용 고농축액은 오자농축액 60 wt%; 복분자농축액 35 wt%; 벌꿀 5 wt%의 전체 혼합물 중 95 wt%와, 아마씨추출물 5 wt%를 혼합하여 조성되는 것으로서,
상기 아마씨추출물은 아마씨를 10 ~ 20 배 중량의 메탄올(MeOH)에 첨가하여 5 ~ 15 시간 동안 추출하고, 90 ~ 110 um 필터로 여과한 후 감압농축기(rotary vacuum evarporator)에서 40 ℃의 조건으로 감압농축하여 수득한 것을 특징으로 하는 복분자, 차전자, 오미자, 구기자, 토사자 및 사상자로 이루어지는 고농축액 제조방법.
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KR1020170176920A KR102012872B1 (ko) | 2017-12-21 | 2017-12-21 | 복분자, 차전자, 오미자, 구기자, 토사자 및 사상자로 이루어지는 음료용 고농축액 제조방법 및 이로부터 제조된 음료용 고농축액 |
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