KR101981489B1

KR101981489B1 - 자소엽 추출물을 포함하는 기능성 사료 조성물 및 이의 제조 방법

Info

Publication number: KR101981489B1
Application number: KR1020170102417A
Authority: KR
Inventors: 최웅규; 김영수; 정명란
Original assignee: 한국교통대학교산학협력단; 정명란
Priority date: 2017-08-11
Filing date: 2017-08-11
Publication date: 2019-08-28
Also published as: KR20190017491A

Abstract

본 발명의 기능성 사료 조성물은, 자소엽 또는 자소엽 추출물을 포함한다.
본 발명의 기능성 사료 조성물의 제조 방법은, 자소엽을 세척 및 건조하는 단계; 용매를 이용하여 저온 추출하는 단계; 감압여과 및 동결건조하여 1.08 %(w/w) 내지 1.09 %(w/w)의 루테올린을 포함하는 자소엽 추출물을 획득하는 단계; 및 상기 자소엽 추출물에 부원료를 첨가하는 단계를 포함한다.

Description

자소엽 추출물을 포함하는 기능성 사료 조성물 및 이의 제조 방법{A FUNCTIONAL PET FOOD COMPOSITION COMPRISING PERILLA FRUTESCENS LEAF EXTRACT AND MANUFACTUARING METHOD FOR THE SAME}

본 발명의 다양한 실시예는 자소엽 추출물을 포함하는 기능성 사료 조성물 및 이의 제조 방법에 관한 것으로, 자세하게는 루테올린을 함유하고 있는 자소엽 추출물을 이용한 다이어트 효능이 있는 애견 사료 조성물 및 이의 제조 방법에 관한 것이다.

국외 애완동물 관련 시장은 미국, 일본 유럽 등에서 연간 1.3%씩 계속 성장하고 있으며, 국내 애완(반려)동물 관련 산업은 90년대 후반에 이르러 급속하게 발전하여 현재는 애견시장 1조, 애견인 500만, 애견(반려동물 포함) 300만 마리에 달하는 것으로 집계되고 있다. 또한 고령인구증가는 애완견의 시장규모 향상에 기여하고 있으며, 애완견의 건강향상에 많은 시간과 노력을 기울이고 있고, 브리더 인구가 증가함에 따라 프리미엄 기능성 보조 사료 개발이 매우 필요한 실정이다.

한편, 루테올린(Luteolin)은 식물성 천연원료에서 발견되는 중요한 플라보노이드의 한 형태로써 자소엽, 셀러리, 브로콜리, 청고추, 파슬리, 케모마일, 당근, 페퍼민트, 로즈마리 등 다양한 과일과 야채 등에 존재한다.

루테올린 [2-(3,4-Dihydroxyphenyl)- 5,7-dihydroxy-4-chromenone]은 하기와 같은 화학식을 가지며, flavone의 5,7,3,4번 탄소에 hydroxyl 기가 있고, 2~3개의 이중결합이 다양한 약리학적 효과를 내는 것으로 알려져 있다.

루테올린은 항산화효과, 항알러지효과, 항암효과 및 항염증효과를 나타내는 것으로 알려져 있으며, 항염효과와 항산화효과에 기반한 알츠하이머 예방 활성도 있는 것으로 보고되어 있어 새로운 기능성 식품소재로 주목받고 있다.

이에 본 발명자는 자소엽으로부터 분리한 루테올린의 줄기세포에 대한 지방분화 억제능을 확인하고 루테올린이 다량 함유된 자소엽 추출물을 이용하여 다이어트에 효능이 있는 기능성 사료 조성물 개발에 성공하여 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 다양한 실시예에서는, 루테올린을 함유하고 있는 자소엽 추출물을 이용하여 다이어트 효능이 있는 기능성 사료 조성물 및 이의 제조 방법을 제공할 수 있다.

본 발명의 기능성 사료 조성물은, 자소엽 또는 자소엽 추출물을 포함한다.

본 발명의 기능성 사료 조성물은, 1.08 %(w/w) 내지 1.09 %(w/w)의 루테올린을 포함하는 자소엽 또는 자소엽 추출물을 포함한다.

본 발명의 기능성 사료 조성물은, 자소엽 추출물 0.8 % 내지 2.2 %; 발효녹용, 당귀, 및 산수유농축액 혼합물 18 % 내지 22 %; 포도당 31.5 % 내지 38.5%; 유당 11.7 % 내지 14.3%; 홍삼분말 9 % 내지 11%; 유카분말 1.8 % 내지 2.2%; 오배자 추출 동결건조분말 0.9% 내지 1.1%; 곽향 추출 동결건조분말 0.9% 내지 1.1%; 계내금 분말 12.6 % 내지 15.4 %; 발효녹용 동결건조분말 0.9% 내지 1.1%; 및 치즈향 0.9% 내지 1.1%을 포함한다.

본 발명의 기능성 사료 조성물의 제조 방법은, 자소엽을 세척 및 건조하는 단계; 용매를 이용하여 저온 추출하는 단계; 감압여과 및 동결건조하여 1.08 %(w/w) 내지 1.09 %(w/w)의 루테올린을 포함하는 자소엽 추출물을 획득하는 단계; 및 상기 자소엽 추출물에 부원료를 첨가하는 단계를 포함한다.

본 발명의 기능성 사료 조성물의 제조 방법에서, 상기 용매는 물, C1 내지 C4 저급 알코올 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 한다.

본 발명의 기능성 사료 조성물의 제조 방법에서, 저온 추출하는 단계에서는, 10 내지 50 ℃의 온도에서 10 내지 48시간 추출하는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 기능성 사료 조성물의 제조 방법에서, 자소엽 추출물을 획득하는 단계에서는, 상기 자소엽 추출물의 수율이 원료 대비 4.7 % 내지 5.5 % 인 것을 특징으로 한다.

본 발명의 기능성 사료 조성물의 제조 방법에서, 상기 부원료를 첨가하는 단계에서는, 자소엽 추출물 0.8 % 내지 2.2 %에 발효녹용, 당귀, 및 산수유농축액 혼합물 18 % 내지 22 %; 포도당 31.5 % 내지 38.5%; 유당 11.7 % 내지 14.3%; 홍삼분말 9 % 내지 11%; 유카분말 1.8 % 내지 2.2%; 오배자 추출 동결건조분말 0.9% 내지 1.1%; 곽향 추출 동결건조분말 0.9% 내지 1.1%; 계내금 분말 12.6 % 내지 15.4 %; 발효녹용 동결건조분말 0.9% 내지 1.1%; 및 치즈향 0.9% 내지 1.1%을 첨가하는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 기능성 사료 조성물은, 루테올린의 함량이 매우 높은 자소엽 추출물을 포함함으로써, 이를 섭취한 애견의 비만을 예방 또는 치료할 수 있다. 또한, 본 발명의 기능성 사료 조성물은, 다양한 부원료를 특정 비율로 포함함으로써, 기능성 증진과 더불어 애견의 기호도에 적합하며, 맛과 색이 우수하다.

도 1은 본 발명 자소엽을 함유하는 애견용 다이어트 보조사료의 제조공정도이다.
도 2는 자소엽 추출물의 줄기세포의 세포 활성에 미치는 영향을 확인한 결과이다.
도 3은 자소엽 추출물 첨가에 따른 지방세포의 형성능을 확인한 결과이다.
도 4는 자소엽 추출물 첨가에 따른 트리글리세라이드 함량을 확인한 결과이다.
도 5는 자소엽 추출물 첨가에 따른 지방분화와 관련된 특이적 transcription factors (PPAR-γ, C/EBP-α, adiponectin, LPL, and aP2)의 발현여부를 mRNA level에서 확인한 결과이다.
도 6은 자소엽 추출물 첨가에 따른 지방분화와 관련된 특이적 transcription factors (PPAR-γ, C/EBP-α, and aP2)의 발현여부를 protein level에서 확인한 결과이다.

이하, 본 문서의 다양한 실시예들이 첨부된 도면을 참조하여 기재된다. 실시예 및 이에 사용된 용어들은 본 문서에 기재된 기술을 특정한 실시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 해당 실시예의 다양한 변경, 균등물, 및/또는 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.

이하, 첨부한 도면을 참조하여 본 발명의 실시예를 상세하게 설명하면 다음과 같다.

본 발명의 기능성 사료 조성물은 자소엽 추출물을 포함한다. 구체적으로, 본 발명의 기능성 사료 조성물은 1.08 %(w/w) 내지 1.09 %(w/w) 의 루테올린을 함유하는 자소엽 추출물을 포함할 수 있다. 예를 들면, 자소엽 추출물에 루테올린의 함량이 1,084.2±5.9mg/100g(w/w)일 수 있다. 1.08 %(w/w) 내지 1.09 %(w/w) 의 루테올린을 함유하는 자소엽 추출물은 지방 세포의 분화를 억제할 수 있어 지질의 축적을 억제할 수 있다. 따라서, 높은 함량의 루테올린을 포함하는 자소엽 추출물을 포함하는 기능성 사료 조성물은 애견의 비만을 예방 또는 치료할 수 있다.

본 발명의 기능성 사료 조성물은 부원료들을 더 포함할 수 있다. 구체적으로, 기능성 사료 조성물은, 자소엽 추출물 0.8 % 내지 2.2 %; 발효녹용, 당귀, 및 산수유농축액 혼합물 18 % 내지 22 %; 포도당 31.5 % 내지 38.5%; 유당 11.7 % 내지 14.3%; 홍삼분말 9 % 내지 11%; 유카분말 1.8 % 내지 2.2%; 오배자 추출 동결건조분말 0.9% 내지 1.1%; 곽향 추출 동결건조분말 0.9% 내지 1.1%; 계내금 분말 12.6 % 내지 15.4 %; 발효녹용 동결건조분말 0.9% 내지 1.1%; 및 치즈향 0.9% 내지 1.1%를 포함할 수 있다.

앞서 설명한 바와 같이, 자소엽 추출물은 1.08 %(w/w) 내지 1.09 %(w/w) 의 루테올린을 함유하고, 줄기세포에 대한 지방 분화 억제 기능을 할 수 있다. 따라서, 이러한 자소엽 추출물을 0.8 % 내지 2.2 % 포함함으로써, 애견의 비만을 예방 또는 치료할 수 있다.

발효녹용, 당귀, 및 산수유농축액 혼합물은, 18 % 내지 22 % 포함됨으로써, 항염증 및 항산화기능을 할 수 있다.

포도당이 31.5 % 내지 38.5% 포함되고, 유당이 11.7 % 내지 14.3%로 포함됨으로써, 애견의 생체 내에 빠르게 흡수될 수 있는 에너지원을 제공할 수 있다.

홍삼분말은 9 % 내지 11% 포함됨으로써, 이를 섭취한 애견의 활력을 증진하고 면역력을 향상 시킬 수 있다.

유카분말은 1.8 % 내지 2.2% 포함됨으로써, 애견의 면역력을 증진할 수 있고, 배설물 냄새를 억제할 수 있다.

오배자 추출 동결건조분말은 0.9% 내지 1.1% 포함됨으로써, 이를 섭취한 애견의 피부점막 상처의 회복을 도울 수 있다.

곽향 추출 동결건조분말은 방아, 방애, 방아잎, 중개풀이라고도 부르는 약초의 추출물로써, 노화를 일으키는 뇌세포 사멸을 감소시킬 수 있다. 이러한 곽향 추출 동결건조분말이 0.9% 내지 1.1% 포함됨으로써, 항산화 역할을 할 수 있다.

계내금 분말은 꿩과에 속한 닭의 모래주머니의 내막을 채취하여 건조시킨 것이다. 이러한 계내금 분말이 12.6 % 내지 15.4 % 포함됨으로써, 소화를 촉진시키는 역할을 할 수 있다.

발효녹용 동결건조분말이 0.9% 내지 1.1% 포함됨으로써, 이를 섭취한 애견의 활력을 증진시킬 수 있다.

치즈향이 0.9% 내지 1.1% 포함됨으로써, 맛과 풍미를 향상시킬 수 있다.

이하, 도 1을 참고하여, 본 발명에 따른 기능성 사료 조성물의 제조 방법을 설명한다.

도 1을 참고하면, 기능성 사료 조성물의 제조 방법은, 자소엽을 세척 및 건조하는 단계(S100); 용매를 이용하여 저온 추출하는 단계(S200); 감압여과 및 동결건조하여 1.08 %(w/w) 내지 1.09 %(w/w)의 루테올린을 포함하는 자소엽 추출물을 획득하는 단계(S300); 및 상기 자소엽 추출물에 부원료를 첨가하는 단계(S400)를 포함할 수 있다.

먼저, 자소엽을 세척 및 건조하는 단계(S100)에서는, 자소엽을 흐르는 물 또는 다양한 세척액을 이용하여 세척한 후 건조할 수 있다.

용매를 이용하여 저온 추출하는 단계(S200)에서는, 세척 및 건조된 자소엽을 용매를 이용하여 추출할 수 있다. 추출 방법으로는 진탕추출, Soxhlet 추출 또는 환류 추출 등 다양한 방법을 이용할 수 있다. 이때, 추출 용매는, 물, 알코올 또는 이들의 혼합물을 사용할 수 있다. 이때, 알코올은 C1 내지 C4 저급 알코올일 수 있고, 예를 들면, 에탄올 또는 메탄올일 수 있다. 바람직하게는, 70 % 농도의 에탄올을 용매로 사용할 수 있다. 이때, 용매는 세척 및 건조된 자소엽의 1 배 내지 15 배의 양으로 첨가할 수 있고, 바람직하게는 10배의 양으로 첨가하여 추출할 수 있다. 추출 온도는 10 내지 50 ℃ 일 수 있고, 바람직하게는 약 30 ℃ 이하의 저온에서 추출할 수 있다. 또한, 추출시간은 10 내지 48시간 일 수 있고, 바람직하게는 12시간 내지 30 시간 일 수 있다.

이후, 감압여과 및 동결건조하여 자소엽 추출물을 획득하는 단계(S300)에서는, 자소엽 추출물을 진공감압농축기 또는 진공회전증발기를 이용하여 감압여과한 후, 동결건조할 수 있다.

이러한 단계를 거친 자소엽 추출물은 원료 대비 4.7 % 내지 5.5 %의 양으로 획득될 수 있다. 즉, 자소엽 추출물의 수율이 매우 높음을 알 수 있다.

또한, 이러한 단계를 거친 자소엽 추출물은 1,084.2±5.9mg/100g(w/w)의 루테올린 함량을 포함할 수 있다. 즉, 자소엽 추출물은 1.08 %(w/w) 내지 1.09 %(w/w)의 루테올린을 포함할 수 있다.

이후 자소엽 추출물에 부원료를 첨가하는 단계(S400)를 거칠 수 있다. 이때 부원료는, 발효녹용, 당귀, 산수유농축액 혼합물, 포도당, 유당, 홍삼분말, 유카분말, 오배자 추출 동결건조분말, 곽향 추출 동결건조분말, 계내금 분말, 발효녹용 동결건조분말 및 치즈향 중 적어도 어느 하나를 포함할 수 있다. 구체적으로, 자소엽 추출물 0.8 % 내지 2.2 %에, 발효녹용, 당귀, 및 산수유농축액 혼합물 18 % 내지 22 %; 포도당 31.5 % 내지 38.5%; 유당 11.7 % 내지 14.3%; 홍삼분말 9 % 내지 11%; 유카분말 1.8 % 내지 2.2%; 오배자 추출 동결건조분말 0.9% 내지 1.1%; 곽향 추출 동결건조분말 0.9% 내지 1.1%; 계내금 분말 12.6 % 내지 15.4 %; 발효녹용 동결건조분말 0.9% 내지 1.1%; 및 치즈향 0.9% 내지 1.1%의 부원료를 첨가할 수 있다.

이후 상기 조성물을 환제조기에서 환으로 성형하여 기능성 사료를 제조할 수 있다.

이하, 구체적인 실시예는 다음과 같다.

실시예: 자소엽 추출물의 제조

자소엽 추출물의 제조를 위하여 자소엽을 세척, 건조한 다음 자소엽의 10 배량의 70 % 에탄올을 용매로 하여 30 ℃ 이하의 저온에서 12 시간 이상 추출한 후 감압여과 및 동결건조를 통해 분말을 획득하였다. 자소엽 추출물의 수율은 원료대비 5.1±0.4%로 나타났다.

자소엽 추출물의 루테올린 함량을 확인하기 위해 HPLC를 이용하여 함량분석을 실시하였으며, 그 결과 루테올린 함량은 동결건조 추출물 대비 1,084.2±5.9mg/100g(w/w)으로 확인되었다. 이는 자소엽 대비 50mg/100g(w/w)이상의 양에 해당한다.

한편, 실시예에 따라 추출된 자소엽 추출물이 줄기세포의 세포 활성에 미치는 영향을 확인하였다. 도 2는 자소엽 추출물의 줄기세포의 세포 활성에 미치는 영향을 확인한 결과이다.

즉, 자소엽 추출물의 줄기세포의 세포 활성에 미치는 영향을 확인하기 위하여 100 μM 농도까지 루테올린을 처리한 후 세포의 활성을 확인한 결과 도 2에서와 같이 100 μM 농도 범위 내에서는 루테올린 처리가 세포활성에 영향을 미치지 않는 것으로 확인되었다. 따라서, 100 μM 농도 이하의 농도인 30 μM 농도의 범위 내에서 다음 실험을 수행하였다.

실시예에 따라 추출된 자소엽 추출물의 줄기세포에 대한 지방분화 억제능을 확인하기 위하여, 지방세포의 형성능을 확인하였다. 도 3은 자소엽 추출물 첨가에 따른 지방세포의 형성능을 확인한 결과이다. 도 3은 Donor 1 및 Donor 2의 성체줄기세포의 지방분화능을 oil red O 염색한 후 현미경으로 관찰한 것이다.

도 3을 참조하면, Donor 1 및 Donor 2 모두 루테올린의 함량을 높게 처리할 수록 지방의 크기와 지방알갱이의 개수가 감소함을 알 수 있다. 즉, 루테올린의 함량이 0일 때에 비해, 1 umol, 3 umol, 10umol 및 30 umol일 때 지방의 크기와 지방알갱이의 개수가 점점 더 감소하였다. 따라서, 루테올린에 의해 성체줄기세포의 지방분화가 억제됨을 확인하였다.

실시예에 따라 추출된 자소엽 추출물의 줄기세포에 대한 지방분화 억제능을 확인하기 위하여, 트리글리세라이드 함량을 확인하였다. 도 4는 자소엽 추출물 첨가에 따른 Donor 1 및 Donor 2의 트리글리세라이드 함량을 확인한 결과이다.

도 4를 참조하면, 도 3의 결과와 같이 Donor 1 및 Donor 2 모두 루테올린의 함량을 높게 처리할수록 트리글리세라이드 함량이 억제됨을 알 수 있다. 즉, 루테올린의 함량이 0일 때에 비해, 1 umol, 3 umol, 10umol 및 30 umol일 때 트리글리세라이드의 함량이 점점 더 낮아짐을 확인하였다. 특히, 루테올린의 함량이 30 umol일 때 트리글리세라이드가 현저히 억제됨을 확인할 수 있다.

실시예에 따라 추출된 자소엽 추출물의 줄기세포에 대한 지방분화 억제능을 확인하기 위하여, 지방분화와 관련된 특이적 transcription factors (PPAR-γ, C/EBP-α, adiponectin, LPL, and aP2)의 발현여부를 mRNA에서 확인하였다. 도 5는 자소엽 추출물 첨가에 따른 지방분화와 관련된 특이적 transcription factors (PPAR-γ, C/EBP-α, adiponectin, LPL, and aP2)의 발현여부를 mRNA level에서 확인한 결과이다.

도 5의 진한색 막대그래프를 참고하면, 지방분화에 직, 간접적으로 관여하는 transcription factors (PPAR-γ, C/EBP-α, adiponectin, LPL, and aP2) 모두가 루테올린의 첨가에 따라 억제됨을 확인할 수 있었다.

실시예에 따라 추출된 자소엽 추출물의 줄기세포에 대한 지방분화 억제능을 확인하기 위하여, 지방분화와 관련된 특이적 transcription factors (PPAR-γ, C/EBP-α, adiponectin, LPL, and aP2)의 발현여부를 protein level에서 확인하였다. 도 6은 자소엽 추출물 첨가에 따른 지방분화와 관련된 특이적 transcription factors (PPAR-γ, C/EBP-α, and aP2)의 발현여부를 protein level에서 확인한 결과이다.

도 6을 참조하면, 지방분화에 직, 간접적으로 관여하는 transcription factors (PPAR-γ, C/EBP-α, and aP2) 모두가 루테올린의 첨가에 따라 억제됨을 확인할 수 있었다. 즉, 루테올린의 첨가에 의해 줄기세포의 지방분화는 효과적으로 억제됨을 확인할 수 있었다.

상술한 실시예에 설명된 특징, 구조, 효과 등은 본 발명의 적어도 하나의 실시예에 포함되며, 반드시 하나의 실시예에만 한정되는 것은 아니다. 나아가, 각 실시예에서 예시된 특징, 구조, 효과 등은 실시예들이 속하는 분야의 통상의 지식을 가지는 자에 의하여 다른 실시예들에 대해서도 조합 또는 변형되어 실시 가능하다. 따라서 이러한 조합과 변형에 관계된 내용들은 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 할 것이다.

또한, 이상에서 실시예들을 중심으로 설명하였으나 이는 단지 예시일 뿐 본 발명을 한정하는 것이 아니며, 본 발명이 속하는 분야의 통상의 지식을 가진 자라면 본 실시예의 본질적인 특성을 벗어나지 않는 범위에서 이상에 예시되지 않은 여러 가지의 변형과 응용이 가능함을 알 수 있을 것이다. 예를 들어, 실시예들에 구체적으로 나타난 각 구성 요소는 변형하여 실시할 수 있는 것이다. 그리고 이러한 변형과 응용에 관계된 차이점들은 첨부한 청구 범위에서 규정하는 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims

자소엽 또는 자소엽 추출물을 포함하고,
상기 자소엽 또는 자소엽 추출물은,
1.08 %(w/w) 내지 1.09 %(w/w)의 루테올린을 포함하며,
상기 자소엽 추출물 0.8 % 내지 2.2 %; 발효녹용, 당귀, 및 산수유농축액 혼합물 18 % 내지 22 %; 포도당 31.5 % 내지 38.5%; 유당 11.7 % 내지 14.3%; 홍삼분말 9 % 내지 11%; 유카분말 1.8 % 내지 2.2%; 오배자 추출 동결건조분말 0.9% 내지 1.1%; 곽향 추출 동결건조분말 0.9% 내지 1.1%; 계내금 분말 12.6 % 내지 15.4 %; 발효녹용 동결건조분말 0.9% 내지 1.1%; 및 치즈향 0.9% 내지 1.1%을 포함하는 것을 특징으로 하는 애견의 비만 예방 또는 치료용 기능성 사료 조성물.
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자소엽을 세척 및 건조하는 단계;
용매를 이용하여 저온 추출하는 단계;
감압여과 및 동결건조하여 1.08 %(w/w) 내지 1.09 %(w/w)의 루테올린을 포함하는 자소엽 추출물을 획득하는 단계; 및
상기 자소엽 추출물에 부원료를 첨가하는 단계를 포함하고,
상기 부원료를 첨가하는 단계에서는,
상기 자소엽 추출물 0.8 % 내지 2.2 %에
발효녹용, 당귀, 및 산수유농축액 혼합물 18 % 내지 22 %; 포도당 31.5 % 내지 38.5%; 유당 11.7 % 내지 14.3%; 홍삼분말 9 % 내지 11%; 유카분말 1.8 % 내지 2.2%; 오배자 추출 동결건조분말 0.9% 내지 1.1%; 곽향 추출 동결건조분말 0.9% 내지 1.1%; 계내금 분말 12.6 % 내지 15.4 %; 발효녹용 동결건조분말 0.9% 내지 1.1%; 및 치즈향 0.9% 내지 1.1%을 첨가하는 것을 특징으로 하는 애견의 비만 예방 또는 치료용 기능성 사료 조성물의 제조 방법.
제4항에 있어서,
상기 용매는 물, C1 내지 C4 저급 알코올 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 하는 애견의 비만 예방 또는 치료용 기능성 사료 조성물의 제조 방법.
제4항에 있어서,
상기 저온 추출하는 단계에서는,
10 내지 50 ℃의 온도에서 10 내지 48시간 추출하는 것을 특징으로 하는 애견의 비만 예방 또는 치료용 기능성 사료 조성물의 제조 방법.
제4항에 있어서,
상기 자소엽 추출물을 획득하는 단계에서,
상기 자소엽 추출물의 수율은 원료 대비 4.7 % 내지 5.5 % 인 것을 특징으로 하는 애견의 비만 예방 또는 치료용 기능성 사료 조성물의 제조 방법.
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