KR101921736B1 - 능이버섯에서 추출된 추출물의 제조 방법 및 그 용도 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 민주름버섯목 굴뚝버섯과인 능이버섯 균사체 획득과 면역력을 상승시키기 위해 인삼을 배지로한 균사체 증식방법으로 추출한 당백질이 우수한 렉틴의 면역체계의 활성화에 도움을 주는 것을, 단백질 분해와 지방분해능력의 활성화를 통하여 확인하고 본 발명을 완성 하게 되었다
결국 본 발명의 주된 목적은 인삼을 배지로 한 능이버섯 균사체로부터 주출된 추출물을 제공하는 것에 그 목적이 있다.
상기의 목적을 달성하기 위하여 본 발명은, 인삼 배지에 능이버섯 균사체를 접종하여 배양한 후 추출하여 수득된 렉틴 단백질과 사포닌을 포함하는 능이버섯에서 추출된 추출물을 제공한다.

Description

능이버섯에서 추출된 추출물의 제조 방법 및 그 용도{Extract method of sarcodon saparatus and use}
본 발명은 능이버섯에서 추출된 추출물, 그 제조 방법 및 그 용도에 관한 것으로 더욱 상세하게는 인삼을 배지로한 능이버섯 균사체에서 추출한 추출물, 그 제조 방법 및 그 용도에 관한 것이다.
능이버섯은 민주름버섯목 굴뚝버섯과에 속하는 것으로, 주로 활엽수림에서 서식한다. 또한, 독특한 향이 좋아 향버섯으로 불리기도 하며 분류학상 균류에 속하고 대부분의 담자균류의 일종으로 탄수화물, 단백질, 지질, 무기질 및 비타민 등의 영양소를 많이 함유하고 있는 장점이 있다.
상기와 같은 능이버섯의 장점에 따라 다양한 용도로 활용되고 있다. 예를 들면, 공개특허 제1997-0027302호에는 능이버섯의 균사체를 배양하여 이들로부터 분리하는 능이버섯에서 유래되는 신규한 단백질 분해 효소로의 활용이 개시되어 있다.
또한, 등록특허 제1074649호에는 능이버섯 및 마카 추출물을 포함하는 미백 및 항산화용 화장료 조성물의 구성이 개시되어 있어 화장품으로의 용도를 제시하고 있다.
또한, 등록특허 제859324호에는 능이버섯 9kg을 음지에서 7일 정도 건조시켜 건조된 능이버섯 250g를 얻은 다음, 감초 20g, 은행200g, 감잎50g, 느릅나무 50g를 압력솥에 물 25ℓ와 함께 투입하여 180℃에서 4시간 가열한 다음, 다시 2차로 100℃에서 충분히 끓인 다음, 멸균하여 레토르트 진공 포장하여 제조함을 특징으로 하는 능이버섯을 주로 하는 건강 음료의 제조방법의 구성이 개시되어 있어, 건강 음료의 용도를 제시하고 있다.
즉, 상기한 바와 같이, 능이버섯은 단백질 분해 효소, 기능성 화장품의 원료 그리고 기능성 음료 등의 다양한 용도로 활용되고 있다.
한편, 능이버섯은 내부에 포함된 렉틴에 의하여 다양한 기능성 효과를 제시하는 것으로 알려져 있으며, 상기 렉틴이란 당류 성분과 결합하는 단백질 인 당단백질(Glydoprotein)로서 비 면역게에 의해 생성되는 물질을 명명하는 용어로서 주로 콩과식물에서 발견이되나 최근에는 겨우살이, 버섯류, 미생물로 부터도 새로운 렉틴이 발견이 되고있다.
일반적으로 렉틴은 적혈구 표면의 당단백(Glycoprotein) 부분과 특이하게 결합함으로서 적혈구를 응집 시키기 때문에 응집소 또는 적혈구응집소( Haemagglutinin)로 불려지나, 적혈구 응집이외에도 백혈구 응집효과, 백혈구 증식자극효과 등 여러 생리활성이 보고 되고 이으며, 이러한 특성에 따라 일부 렉틴은 생리활성의 면역체계(activity Pysioloy immunotherapeutic agent) 요법제로 활용 가능성이 연구되고 있다.
그리고, 면역요법(immunotherapy)은 정상조직의 손상을 최소화하면서 최대의 치유효과를 기대할수있기 때문에 많은 연구자들에 의해 활발히 연구되고 있으며 구체적으로 암백신, 단클론항체, 사이토카인류 미생물 산물 등을 들 수 있다.
한편, 버섯류의 단백다당체인 이중 미생물산물에 속하며 국내에서는 구름버섯 자실체로부터 코포랑(Copolang)이 개발되어 사용되고 있으며, 상황버섯( Phellinus linteus) 균사배양추출물이 메시마-엑스라는 의약품으로 허가를 얻어 면역체계 활성화로제품으로 사용되고 있다.
이처럼 버섯의 면역활성 성분에 관한 연구는 주로 단백다당체에 집중되어 이루어짐을 알 수 있으며 버섯의 단백다당체는 세포벽 구성 성분으로서 분자량이 통상 10만이상 수백만에 달하는 거대분자로서 열에 안정하고 유기용매에 녹지 않으며 물에 대해서도 상온에서 추출되지않기 때문에 시료를 상압 또는 고압하에 1∼10시간 가열하고 추출하는 열 추출법을 사용하는 것이 일반적이다.
그러나 능이버섯은 활엽수림에서만 서식하고 단백질 및 지방 분해 특성이 우수하여 면역활성에 도움을 주는 것으로 예상되나, 이에 대한 구체적인 연구는 현재 보고되지 않은 실정이다.
이에 본 발명은 민주름버섯목 굴뚝버섯과인 능이버섯 균사체 획득과 면역력을 상승시키기 위해 인삼을 배지로한 균사체 증식방법으로 추출한 당백질이 우수한 렉틴의 면역체계의 활성화에 도움을 주는 것을, 단백질 분해와 지방분해능력의 활성화를 통하여 확인하고 본 발명을 완성 하게 되었다
결국 본 발명의 주된 목적은 인삼을 배지로 한 능이버섯 균사체로부터 주출된 추출물을 제공하는 것에 그 목적이 있다.
또한 인삼을 배지로 한 능이버섯 균사체로부터 주출된 추출물의 제조 방법을 제공하는 것에 그 목적이 있다.
또한 인삼을 배지로 한 능이버섯 균사체로부터 주출된 추출물을 물비누의 첨가물에 적용하는 것에 그 목적이 있다.
또한 인삼을 배지로 한 능이버섯 균사체로부터 주출된 렉틴 단백질을 화장수의 첨가물에 적용하는 것에 그 목적이 있다.
또한 인삼을 배지로 한 능이버섯 균사체로부터 주출된 추출물을 음식물의 첨가물에 적용하는 것에 그 목적이 있다.
상기의 목적을 달성하기 위하여 본 발명은, 인삼 배지에 능이버섯 균사체를 접종하여 배양한 후 추출하여 수득된 렉틴 단백질과 사포닌을 포함하는 능이버섯에서 추출된 추출물을 제공한다.
또한 본 발명은, 배양된 균사체에 추출 용매를 가하고 분쇄하여 배양 추출물을 수득하는 배양 추출물 수득 단계; 상기 배양 추출물을 감압 농축하여 1차 추출물을 수득하는 1차 추출물 수득 단계; 및 상기 추출물을 용매에 용해시켜 한외여과하여 최종 추출물을 수득하는 최종 추출물 수득 단계;를 포함한다.
바람직하게는, 상기 1차 추출물 수득 단계 이후에 상기 1차 추출물 수득 단계와 동일한 방식의 2차 추출물 수득 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 한다.
더욱 바람직하게는, 상기 추출 용매는 물, pH7.0 내지 9.0의 4mM 내지 1M Tris 완충용액, 0.001 내지 1.0N NaOH 용액, 0.001 내지 1.0N 구연산 (Citric acid) 용액 및 0.1 내지 5.0%(w/v) NaCl용액 중 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 한다.
또한, 본 발명은 상기한 추출물을 유효 성분으로 하는 물비누용 첨가물의 용도를 제공한다.
또한, 본 발명은 상기한 추출물을 유효 성분으로 하는 화장수용 첨가물의 용도를 제공한다.
또한, 본 발명은 상기한 추출물을 유효성분으로 하는 음식물용 첨가물의 용도를 제공한다.
본 발명에 따른 능이버섯에서 추출된 추출물은 인삼을 배지로 하여 균사체를 증식한 후, 추출하는 것으로, 상기 추출물은 높은 적혈구 응집 효과와 우수한 고체 지방 분해 효과를 제공하여 혈전 치료 및 예방용으로 활용할 수 있으며, 미용용 물비누의 첨가물로, 미용용 화장수의 첨가물로 그리고 음식물용 첨가물로 사용될 수 있는 효과가 있다.
도 1은 본 발명에 따른 능이버섯에서 추출된 추출물의 제조 방법의 절차도이며,
도 2는 본 발명에 따른 균사체의 성장을 나타내는 사진이며,
도 3은 실시예 3에 따라 균사체의 사진이며,
도 4는 실시예 4에 따른 결과이며,
도 5는 실시예 5의 조성비이며,
도 6은 비교예 5의 조성비이며,
도 7은 실시예 5의 결과이며,
도 8은 비교예 5의 결과이며,
도 9는 실시예 6의 조성비이며,
도 10은 비교예 6의 조성비이며,
도 11은 실시예 6의 결과이며,
도 12는 비교예 6의 결과이며,
도 13은 실시예 7의 조성비이며,
도 14는 비교예 7의 조성비이며,
도 15는 도 13 및 도 14의 결과이다.
이하 본 발명에 따른 바람직한 실시예를 첨부한 도면을 참조하여 구체적으로 설명한다.
본 발명에 따른 능이버섯에서 추출된 추출물의 제조 방법은 도 1에 도시된 바와 같이, 배양된 균사체에 용매를 가하고 분쇄하여 배양 추출물을 수득하는 배양 추출물 수득 단계(S1), 상기 배양 추출물을 감압 농축하여 1차 추출물을 수득하는 1차 추출물 수득 단계(S2), 상기 1차 추출물을 감압 농축하여 2차 추출물을 수득하는 2차 추출물 수득 단계(S2) 및 상기 2차 추출을 용매에 용해시켜 한외여과하여 최종 추출물을 수득하는 최종 추출물 수득 단계(S4)를 포함하여 구성된다.
이하 각 단계에 대하여 구체적으로 설명한다.
배양 추출물 수득 단계(S1)
배양 추출물 수득 단계는 인삼 배지에 균사체를 배양한 후, 배양 추출물을 수득하는 단계이다.
먼저, 잘 수세한 인삼을 1∼10mm 정도로 파쇄하여 수삼 100중량부에 대하여 엿기름 당화액 20 내지 25중량부, 뉴질랜드 소금 2 내지 3중량부를 혼합한 후, 110 내지 121℃에서 20∼30분간 1차 감압멸균한다.
이후 능이버섯(Sacodon aspratus) 균사체 배양액을 접종하여 25∼35℃로 30 내지 45일간 배양을하여 균사체 증식을 시킨다.
이후 추출물 변성을 억제하기위해 110 내지 121℃하에서 20∼30분간 2차 감압 멸균한다.
감압 멸균이 완료된 자실체 및 인공균사체에 추출용매를 가하고 분쇄하여 추출물을 수득한다.
이대 상기 추출용매로는 물, pH7.0 내지 9.0의 4mM 내지 1M Tris 완충용액, 0.001 내지 1.0N NaOH 용액, 0.001 내지 1.0N 구연산 (Citric acid) 용액 및 0.1 내지 5.0%(w/v) NaCl용액 중 선택된 어느 하나 또는 어느 하나 이상을 혼합하여 사용할 수 있다.
배양후 멸균된 균사체는 상기 추출용매에 침지하고 상온에서 (20∼25℃)으로 45 내지 50시간 동안 교반후 여과 또는 원심분리하여 배양 추출물을 획득한다.
1차 추출물 수득 단계(S2)
1차 추출물 수득 단계는 상기 배양 추출된 추출물을 추가적인 절차를 이용하여 1차 추출물을 수득하는 단계이다.
상기 배양 추출 단계에서 수득된 추출물을 감압 농축하고 황산암모늄을 가하여 1차 추출물을 획득한다.
이때 인삼의 유용성분인 사포닌과 버섯의 렉틴 활성을 유지하기 위하여 감압농축은 50 내지 60℃로 한다.
그리고 상기 감압농축된 추출물에 황산 암모늄을 20 내지 100g/L의 농도로 용해시키고 상온(20∼25℃)에서 20시간 내지 28시간 정치한 다음 원심 분리를하여 상등액인 1차 추출물을 수득한다.
2차 추출물 수득 단계(S3)
2차 추출물 수득 단계는 1차 추출물 수득 단계와 동일한 방식으로 수행하며, 이때 출발 물질은 1차 추출물로 진행한다.
상기 2차 추출물 수득 단계는 추출물의 농도와 전체 단계의 수율을 높이기 위한 구성으로, 필요한 경우 본 단계는 생략 가능하다.
최종 추출물 수득 단계(S4)
최종 추출물 수득 단계는 상기 2차 추출물 수득 단계를 통하여 수득된 2차 추출물에서 사포닌을 함유한 렉틴을 최종 추출하는 단계이다.
상기 2차 추출물 수득 단계에서 수득된 2차 추출물에 주정인 에탄올을 2차 추출물 100중량부에 대하여 100 내지 200중량부를 혼합한 후, 상온(20∼25℃)에 20시간 내지 28시간 정치한 후, 한외여과하여 최종 추출물을 수득한다.
상기 방식으로 추출된 최종 추출물은 불순물이 포함되지 않은 사포닌을 함유한 렉틴으로 이루어진다.
이하 실시예들은 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명한다.
실시예 1: 능이버섯 균사체에서 유래된 렉틴의 제조
잘 수세한 인삼을 6 내지 8mm 정도로 파쇄하여 수삼 100중량부에 대하여 엿기름 당화액 22중량부, 뉴질랜드 소금 2.5중량부를 혼합한 후, 120℃에서 30분간 1차 감압멸균하였다. 그리고 능이버섯 균사체 배양액을 접종하여 25∼35℃로 40일간 배양하여 균사체 증식시켰다.
이때 증식된 균사체는 도 2에 도시된 바와 같다.
이후 상기 능이버섯 균사체 200g에 1200ml 의 Tris완충용액(10mM pH7.5)을 가하여 상온에서(20∼25℃)으로 24시간 정치한 다음 감압 여과하여 배양 추출물을 획득하였다.
이후 상기 배양 추출물에 황산암모늄을 100g/L의 농도로 용해시키고 원심분리를 10℃이하에서 10,000rpm 하여 상등액을 획득하여 1차 추출물 획득한 후, 상기 1차 추출물에 황산암모늄 100g/L로 농도로 추가용해시켜 상온에서(20∼25℃)으로 24시간 정치한 다음 원심분리를 10℃이하에서 10,000rpm 하여 상등액을 통하여 2차 추출물을 획득하고, 이후 에탄올을 2차 추출물 100중량부에 대하여 200중량부 추가한 후, 상온에서 24시간 정치한 후, 한외여과를 통하여 최종 590g의 추출물을 얻었으며, 최종 추출물은 분석결과 100μg/ml 렉틴 성분과 2.5μg/ml의 사포닌성분을 포함하는 것으로 확인되었다.
실시예 2. 능이버섯에서 유래된 렉틴의 화학분석
상기 최종 추출물에 함유된 총당함량과 총단백질 함량을 측정하였다. 이때 총당함량은 안쓰론(Anthron)법에 따라 포도당을 표준으로 하여 안쓰론 시약과 반응시켜 발색도를 625nm에서 측정하여 검량곡선에 의거하여 분석하고, 총단백 함량은 쿠마씨에 브릴리언트 블루( Coomassie brilliant blue)법을 변형시켜 소 혈청 알부민(Bovine serum albumin)을 표준 단백질로하여 620nm에서 측정하였다.
측정 결과 렉틴의 총당함량은 20 내지 25%(w/w)이고 총단백함량은 40 내지 70%(w/w)이므로 당과 단백질의 함량 비율이 1:2 내지 3.5(w/w) 임을 확인하였다.
실시예 3 능이버섯에서 유래된 렉틴의 적혈구응집효과
본 발명으로 획득한 랙틴의 적혈구의 응집 효과를 다른 버섯인 상황버섯의 렉틴(비교예)의 활성과 비교하였다
실시예 1과 동일한 방법으로 상황버섯 균사체 의 렉틴 성분을 100μg/ml 농도로 수득하여 실시예 1에서 수득한 렉틴 수용액을 1,2,4,8 16배로 희석하여 준비하고 적혈구응집효과를 위하여 CR계 생쥐의 말초혈액을 5IU/ml 헤파린 생리식염수로 10배로 희석한 혈액을 준비하였다.
그리고 혈액 희석액을 12계의 웰 용기에 25μg/씩 넣고 각각의 렉틴 희석액을 25μg으로 가하여 35 내지 37℃ 배양기내에서 2시간동안 반응시킨후 적혈구의 응집효과를 비교하였다.
상기 도 3를 통하여 농도별로 비교 시험한 결과 상황버섯의 렉틴보다 본 발명의 추출물의 응집효과가 우수하게 나타났음을 확인할 수 있었다.
실시예 4 능이버섯에서 유래된 렉틴의 지방 분해효과
본 발명으로 획득한 추출물의 지방 분해능력을 측정 시험을 위하여 우지및 돈지를 여과하여 지방 성분을 채취하였다. 우지와 돈지는 상온에서 고체 상태로 유지 돼기 때문에 60℃이상으로 액상의 지방을 만들어서 실시예에서 추출한 능이버섯 랙틴 성분인 100μg/ml 과 상황버섯의 랙틴 성분인 100μg/ml와 비교시험을 하였다.
본 비교 실험을 위해 동량의 지방 함량과 추출물의 분해 정도를 비교하기 위해 우지와 돈지 각각 90중량%와 실시예 및 비교예를 각각 10중량%로 첨가하여 30분간 혼합한후에 1시간 정도 상온에서 놓고 물성시험을 비교하였다.
물성시험 결과는 도 4에 도시하였다. 도 4에 도시된 바와 같이, 본 발명에 따른 추출물은 고체 지방을 분해하는 능력이 있음을 확인하였다.
실시예 5 미용용 물비누 첨가물로서의 효과
식물성 지방산, 식물성오일, 글리세린, 정제수를 넣어 65℃ ∼75℃로 오일을 잘 용해하여 수산화칼륨(Potassium hydroxide)을 첨가하여, 비누화반응인 검화공정을 마친후 산성제인 구연산으로 pH를 조정한 후 본 발명으로 습득한 추출물과 향료를 첨가하여 미용 물비누를 제조하였다.
이때 배합비율을 도 5와 같이 각단계별 300 Kg 씩 총 1,500kg을실시예 5-1 내지 실시예 5-5의 혼합비로 제조하여 비교 시험하였다.
비교예로는 도 6에 도시된 바와 같이, 키토산을 함유한 5개의 일반 비누를 제조하였다.
제조된 실시예 및 비교예의 비누를 다음과 같은 방법으로 사용후 피부 상태의 검사를 실시하였다.
피부상태가 최적의 상태 13점, 세균성에 의한 피부회복 4점, 차도경도 3점, 차도없음 0점 전체 18점 만점으로 하여 피부에트러불이 있거나 여드름이 많은 18세에서 25세미만의 성인 남녀를 50명을 대상으로 실시예 60일, 비교예 60일을 사용하게 한후 회복검사를 실시하여 평균값을 취하였으며, 그 결과는 실시예를 도 7 그리고 비교예는 도 8에 각각 도시하였다.
상기 도 7 및 도 8에 도시된 바와 같이, 실시예의 효과가 우수함을 확인하였다. 즉, 제조된 일반 미용비누에 비해 빠른 시간내에 피부의 재생 효과를 나타내는 것으로 확인되었으며, 부가적으로 피부의 회복이 빨라진 반면 회복후에 일반 미용비누를 사용시에 전조한 환절기에 다시 피부의 트러블이 발생하였으나 본 발명에 따른 첨가물을 포함하는 비누를 사용한 후에는 다시 피부가 회복되는 효과를 얻었다.
그리고 본 발명에 따른 참가물은 실시예 5-2 이상의 조성비 즉, 2중량% 이상이 함유된 경우 높은 효과를 얻는 것이 확인되었다.
실시예 6 화장수 첨가물로서의 효과
식물성 지방산, 식물성오일, 글리세린, 정제수를 넣어 65℃ ∼75℃로 오일을 잘 용해하여 유화제를 첨가하여 유화 공정을 마친후 산성제인 구연산으로 pH를 조정한후 본 발명으로 습득한 추출물과 향료를 첨가하여 기초화장품의 화장수를 제조하였으며 이를 5단계로 배합비율을 조정 도 9와 같이 각단계별 100 Kg씩 총 500kg을 실시예 6-1 내지 실시예 6-2로 제조하였다.
그리고 비교예로 도 10에 도시된 바와 같이, 키토산을 첨가한 화장수를 각각 제조하였다.
피부 상태 검사는 실시예 5와 동일한 방법으로 실시하였으며, 그 결과 본 발명에 따른 화장수는 도 11에 비교예의 결과는 도 12에 각각 도시하였다.
시험결과 실시예 6-1 내지 6-5가 비교예 6-1 내지 비교예 6-5에 비하여 빠른 피부 재생 효과를 나타내는 것을 확인하였다.
실시예 7 음식물 첨가물로서의 효과
식품 중 동치미에 본 발명에 따른 추출물을 첨가하여 제조하였다. 이때 본 발명에 따른 추출물을 전체 중량에 대하여 1중량%, 2중량%, 6중량% 및 10중량%를 첨가하여 각각의 동치미(실시예 7-1 내지 실시예 7-4)를 제조하였으며, 이때 구성비는 도 13에 도시하였다. 그리고 비교를 위하여 도 14에 도시된 바와 같이, 상황버섯 추출물을 동일한 비율로 첨가하여 비교예 7-1 내지 비교예 7-4를 각각 제조하였다.
그리고 단백질 분해 시험은 도 15에 도시하였다. 상기 도 15에 도시된 바와 같이, 상황버섯 균사체 보다 능이버섯균사체가 단백질 분해효과가 2% 농도에서 ±0.45% 발현이 되었고 상황버섯 균사체의 경우는 추출물의 농도가 10% 정도가 되어야만 어느 정도 발현이 되었음을 확인할 수 있었다.
또한, 맛의 기호도 및 소비자 취향을 20명의 평가단에 의하여 실시한 결과, 실시예의 기호도가 더 높은 것으로 확인되었다.
이상에서는 본 발명을 특정의 바람직한 실시예에 대하여 도시하고 설명하였으나, 본 발명은 이러한 실시예에 한정되지 않으며, 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 특허청구범위에서 청구하는 본 발명의 기술적 사상을 벗어나지 않는 범위내에서 실시할 수 있는 다양한 형태의 실시예들을 모두 포함한다.
S1: 배양 추출물 수득 단계 S2: 1차 추출물 수득 단계
S3: 2차 추출물 수득 단계 S4: 최종 추출물 수득 단계

Claims (7)

  1. 삭제
  2. 삭제
  3. 인삼 배지에 능이버섯 균사체를 접종하여 배양하고, 배양된 균사체에 추출 용매를 가하고 분쇄하여 배양 추출물을 수득하는 배양 추출물 수득 단계;
    상기 배양 추출물을 감압 농축하여 1차 추출물을 수득하는 1차 추출물 수득 단계; 및
    상기 추출물을 용매에 용해시켜 한외여과하여 최종 추출물을 수득하는 최종 추출물 수득 단계;를 포함하는 능이버섯에서 추출된 추출물의 제조 방법에 있어서,
    상기 1차 추출물 수득 단계 이후에 수득된 1차 추출물을 출발 물질로 하여, 상기 1차 추출물 수득 단계와 동일한 방식으로 수행되는 2차 추출물 수득 단계를 더 포함하고,
    상기 추출 용매는 물, pH7.0 내지 9.0의 4mM 내지 1M Tris 완충용액, 0.001 내지 1.0N NaOH 용액, 0.001 내지 1.0N 구연산 (Citric acid) 용액 및 0.1 내지 5.0%(w/v) NaCl용액 중 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 능이버섯에서 추출된 추출물의 제조 방법.
  4. 삭제
  5. 청구항 3에 따른 방법으로 제조된 추출물을 유효 성분으로 하는 물비누용 첨가물.
  6. 청구항 3에 따른 방법으로 제조된 추출물을 유효 성분으로 하는 화장수용 첨가물.
  7. 청구항 3에 따른 방법으로 제조된 추출물을 유효성분으로 하는 음식물용 첨가물.
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