KR101837160B1 - New microorganism BT-SJP KCTC12726BP and use thereof - Google Patents
New microorganism BT-SJP KCTC12726BP and use thereof Download PDFInfo
- Publication number
- KR101837160B1 KR101837160B1 KR1020160092282A KR20160092282A KR101837160B1 KR 101837160 B1 KR101837160 B1 KR 101837160B1 KR 1020160092282 A KR1020160092282 A KR 1020160092282A KR 20160092282 A KR20160092282 A KR 20160092282A KR 101837160 B1 KR101837160 B1 KR 101837160B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- sjp
- strain
- snu
- present
- yeast
- Prior art date
Links
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title description 13
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims abstract description 38
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 claims abstract description 28
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 claims abstract description 28
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 claims abstract description 28
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 23
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims abstract description 20
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 claims abstract description 18
- 241000431964 Candida glycerinogenes Species 0.000 claims description 2
- 241000235036 Debaryomyces hansenii Species 0.000 claims description 2
- 241000235645 Pichia kudriavzevii Species 0.000 claims 1
- 230000015784 hyperosmotic salinity response Effects 0.000 claims 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 abstract description 9
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 abstract description 8
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 abstract description 8
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 7
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 abstract description 7
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 abstract description 7
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 abstract description 6
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 abstract description 6
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 abstract description 6
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 abstract description 5
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 abstract description 4
- 239000002778 food additive Substances 0.000 abstract description 4
- 230000007774 longterm Effects 0.000 abstract description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 14
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 12
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 9
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 9
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 8
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 7
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241001354013 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis Species 0.000 description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 5
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 5
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 4
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 4
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 description 3
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 3
- 244000206911 Candida holmii Species 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 2
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 2
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 2
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 2
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 102000038379 digestive enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108091007734 digestive enzymes Proteins 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 2
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 2
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 2
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 2
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 2
- NWXMGUDVXFXRIG-WESIUVDSSA-N (4s,4as,5as,6s,12ar)-4-(dimethylamino)-1,6,10,11,12a-pentahydroxy-6-methyl-3,12-dioxo-4,4a,5,5a-tetrahydrotetracene-2-carboxamide Chemical compound C1=CC=C2[C@](O)(C)[C@H]3C[C@H]4[C@H](N(C)C)C(=O)C(C(N)=O)=C(O)[C@@]4(O)C(=O)C3=C(O)C2=C1O NWXMGUDVXFXRIG-WESIUVDSSA-N 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 206010012742 Diarrhoea infectious Diseases 0.000 description 1
- 208000035240 Disease Resistance Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 208000005577 Gastroenteritis Diseases 0.000 description 1
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 1
- 239000006137 Luria-Bertani broth Substances 0.000 description 1
- 208000002720 Malnutrition Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 241000009328 Perro Species 0.000 description 1
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 1
- 208000003286 Protein-Energy Malnutrition Diseases 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000003570 air Substances 0.000 description 1
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 1
- 239000012867 bioactive agent Substances 0.000 description 1
- 208000011090 bird disease Diseases 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000005757 colony formation Effects 0.000 description 1
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 239000010779 crude oil Substances 0.000 description 1
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 235000019621 digestibility Nutrition 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 208000001848 dysentery Diseases 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002327 eosinophilic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 235000013350 formula milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 238000011331 genomic analysis Methods 0.000 description 1
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 1
- 244000005709 gut microbiome Species 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 1
- 230000007413 intestinal health Effects 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- CXKWCBBOMKCUKX-UHFFFAOYSA-M methylene blue Chemical compound [Cl-].C1=CC(N(C)C)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 CXKWCBBOMKCUKX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960000907 methylthioninium chloride Drugs 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 230000000626 neurodegenerative effect Effects 0.000 description 1
- 231100000065 noncytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 239000005416 organic matter Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000007793 ph indicator Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 235000020826 protein-energy malnutrition Nutrition 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 229960002181 saccharomyces boulardii Drugs 0.000 description 1
- 239000013535 sea water Substances 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 235000013555 soy sauce Nutrition 0.000 description 1
- 235000000053 special nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000019086 sulfide ion homeostasis Effects 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000002341 toxic gas Substances 0.000 description 1
- 210000003954 umbilical cord Anatomy 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/16—Yeasts; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
- A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/195—Antibiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/32—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the health of the digestive tract
- A23V2200/3204—Probiotics, living bacteria to be ingested for action in the digestive tract
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2250/00—Food ingredients
- A23V2250/76—Yeasts
-
- C12R1/645—
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Physiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Botany (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Fodder In General (AREA)
Abstract
본 발명은 담즙염 내성 효모 균주에 관한 것으로, 보다 상세하게는 내담즙성 BT-SJP 균주, 상기 내담즙성 BT-SJP 균주를 포함하는 프로바이오틱스 조성물 및 상기 프로바이오틱스 조성물을 포함하는 식품 또는 사료에 관한 것이다. 본 발명의 내담즙성 BT-SJP 균주는 장내에서 분비되는 담즙에 대한 내성이 우수하며, 인체와 유사한 35~40℃의 온도에서 증식성 및 장정착성이 우수하며, 병원성을 나타내지 않는다. 본 발명의 내담즙성 BT-SJP 균주는 상기와 같은 특성을 가짐으로써, 프로바이오틱스 조성물, 식품 또는 식품 첨가제, 사료 또는 사료 첨가제 등으로 광범위하게 활용될 수 있다.The present invention relates to a bile salt-resistant yeast strain, and more particularly to a probiotics composition comprising an intrachain brittle BT-SJP strain, the bacilli BT-SJP strain, and a food or feed containing the probiotic composition . The bacteriostatic BT-SJP strain of the present invention is excellent in resistance to bile secreted in the intestines and is excellent in proliferation and long-term fixability at a temperature of 35 to 40 캜, similar to the human body, and does not show pathogenicity. The bacterium-resistant bovine BT-SJP strain of the present invention has the above-mentioned characteristics and can be widely used as a probiotic composition, a food or food additive, a feed or a feed additive.
Description
본 발명은 담즙염 내성 효모 균주에 관한 것으로, 보다 상세하게는 내담즙성 BT-SJP 균주, 상기 내담즙성 BT-SJP 균주를 포함하는 프로바이오틱스 조성물 및 상기 프로바이오틱스 조성물을 포함하는 식품 또는 사료에 관한 것이다.The present invention relates to a bile salt-resistant yeast strain, and more particularly to a probiotics composition comprising an intrachain brittle BT-SJP strain, the bacilli BT-SJP strain, and a food or feed containing the probiotic composition .
효모는 진핵세포로 구성된 단세포 미생물로서, 당을 발효시켜 에탄올과 이산화탄소를 생산하는 능력이 있으며, 주로 출아에 의해 증식하는 진균류의 총칭으로 사용되고 있다. 효모는 과일의 표면, 토양, 공기, 해수 또는 식물의 표피와 꽃술 및 동물의 체내에 이르기까지 폭넓게 분포되어 자연계로부터 쉽게 분리될 수 있다. 또한 효모는 예로부터 알코올 제조 및 제빵 등의 용도로 인간에게 매우 유용하게 이용되어 왔다.Yeast is a single cell microorganism composed of eukaryotic cells. It is capable of producing ethanol and carbon dioxide by fermenting sugars, and is generally used as a generic term for fungi that proliferate mainly by germination. Yeast can be widely distributed from the surface of fruits, soil, air, seawater or the epidermis of plants to flowers and animals and can be easily separated from the natural world. In addition, yeast has been used for human beings very usefully for alcohol production and baking.
최근에는 효모 자체가 값싼 단백질 및 비타민 영양공급원으로 사용되기도 하고, 특히 장내 미생물의 균형을 유지하고 병원성 세균의 증식을 억제하며, 면역 증진의 효과 등이 있는 것으로 보고되었다. 그에 따라 현재 효모는 프로바이오틱스 또는 보조사료 생균제로써 사료 내 영양소의 소화율 및 가축 생산성을 개선시키기 위한 사료 첨가제로 이용되고 있다.Recently, it has been reported that yeast itself is used as a cheap protein and vitamin nutrient source, especially in maintaining intestinal microorganism balance, inhibiting the growth of pathogenic bacteria, and improving immunity. As a result, yeast has been used as a feed additive to improve the digestibility of feed nutrients and livestock productivity as probiotics or supplementary feed probiotics.
효모는 식품 분야를 포함한 다양한 산업 분야에서 이용되고 있으며, 인체나 동물의 장에 서식하면서 장내 유해균의 발육을 억제함으로써 장내 건강 유지에 중요한 역할을 하고 있다. 또한, 축산분야에서 효모는 가축의 사료에 첨가되어 가축의 성장에 필요한 소화효소의 분비를 촉진하고, 장내 세균수를 안정화시키며, 대사성 질병을 예방하는 역할을 수행하여 가축의 생산성을 향상시켜, 효과적인 생균제로 널리 이용되고 있다.Yeast is used in various industrial fields including food field, and it plays an important role in maintaining intestinal health by inhibiting the development of harmful bacteria in the intestines while living in the intestines of human and animals. In addition, in the livestock sector, yeast is added to the feed of livestock to promote the secretion of digestive enzymes necessary for the growth of livestock, to stabilize intestinal bacterial counts, to prevent metabolic diseases, to improve livestock productivity, It is widely used as a probiotic agent.
최근에는 효모 세포벽의 주성분인 글루칸이 동물의 면역 기능을 강화시키는 물질로 보고되고, 동물에 급여될 때 동물의 질병 저항성을 높이는 효과를 나타내는 것으로 알려졌다. 이에 따라 효모는 가축의 생산성 향상을 위해 사용되는 항생제가 야기하는 가축 내 잔류 및 내성 문제를 해결하는 대체 물질로서 현재 주목을 받고 있다. 그러나 통상적으로 효모는 인체 또는 동물에 투여될 때, 체내 소화 효소(담즙 등)에 의해 증식이 억제되는 문제점이 있어, 이를 해결할 수 있는 기술의 개발이 필요한 실정이다.Recently, glucan, a major component of yeast cell wall, has been reported as a substance that enhances the immune function of an animal and has been shown to have an effect of increasing the disease resistance of an animal when it is fed to an animal. Therefore, yeast has been attracting attention as a substitute substance to solve the residual and tolerance problem in livestock caused by antibiotics used for improving productivity of livestock. However, when yeast is administered to humans or animals, there is a problem that proliferation is inhibited by digestive enzymes (bile, etc.) in the body, and development of a technology for solving the problems is required.
본 발명이 해결하고자 하는 과제는 온도 저항성 및 내담즙성을 갖는 SJP-SNU의 변이 균주를 제공하는 것이다.The object of the present invention is to provide a mutant strain of SJP-SNU having temperature resistance and bile resistance.
본 발명이 해결하고자 하는 또 다른 과제는 상기 변이 균주를 유효성분으로 포함하는 프로바이오틱스 조성물, 식품 또는 사료를 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a probiotic composition, food or feed containing the mutant strain as an active ingredient.
본 발명의 발명자들은 SJP-SNU 효모 균주를 모균주로 사용하여, 담즙염을 포함하는 배지에서 연속 계대 배양하여, 본 발명의 높은 내담즙성(bile tolerance)을 갖는 BT-SJP 효모 균주를 선별하였다. 구체적으로, 본 발명자들은 온도 저항성 및 담즙염 내성을 갖는 효모 균주를 발굴하기 위해, SJP-SNU 효모 균주를 모균주로 사용하였으며, 이를 담즙염이 포함된 배지에서 연속 계대 배양하여 담즙염에 내성을 갖도록 유도하였다. 이후 여러 개의 콜로니 중 배양시간 경과에 따라 가장 높은 증식성을 보인 균주를 선발하였고, 이러한 균주가 담즙염 내에서 모균주 대비 증식성이 증가된 것을 확인하고, 이를 BT-SJP로 명명하여, 본 발명을 완성하였다.The inventors of the present invention selected BT-SJP yeast strains having high tolerance to bile bile of the present invention by continuously culturing in SJP-SNU yeast strain as a parent strain and in a medium containing bile salt . Specifically, the present inventors used SJP-SNU yeast strains as parent strains in order to isolate yeast strains having resistance to temperature and bile salt resistance, and then cultured them in a medium containing bile salts to induce tolerance to bile salts . The most proliferative strains were selected from among several colonies in accordance with the passage of time, and it was confirmed that this strain increased the proliferation of the parent strain in the bile salt, and named BT-SJP, .
본 발명은 내담즙성 BT-SJP 균주를 제공한다. 상기 내담즙성 BT-SJP 균주는 0.15%(w/v) 담즙염이 함유된 배지에서 6시간 배양 시, 초기 접종 농도의 18배 내지 43배, 바람직하게 20 내지 43배, 25 내지 43배, 30 내지 43배, 35 내지 43배, 더욱 바람직하게 40 내지 45배의 콜로니 농도(CFU/ml)로 증식될 수 있다. 구체적으로, 상기 내담즙성 BT-SJP 균주는 0.15% 담즙염이 함유된 YPD broth에 20 CFU/ml의 농도로 접종된 후, 37℃에서 6시간 배양 시 360 CFU/ml 이상, 바람직하게 400 CFU/ml 이상, 500 CFU/ml 이상, 600 CFU/ml 이상, 700 CFU/ml 이상, 더욱 바람직하게 800 CFU/ml 이상의 균체 농도, 예를 들어 360 내지 900 CFU/ml, 바람직하게 400 내지 860 CFU/ml의 균체 농도로 증식될 수 있다. 본 발명의 내담즙성 BT-SJP 균주는 우수한 내담즙성을 가지므로, 장내 생존력이 우수하여 섭취 후 일정기간 우수한 활성을 유지할 수 있어, 프로바이오틱스로써 유용하게 이용될 수 있다.The present invention provides an intra-biliary BT-SJP strain. The bacteriostatic BT-SJP strain was cultivated for 18 hours in a culture medium containing 0.15% (w / v) bile salt for 18 to 43 times, preferably 20 to 43 times, 25 to 43 times, 30 to 43 times, 35 to 43 times, more preferably 40 to 45 times the colony concentration (CFU / ml). Specifically, the bacilli BT-SJP strain was inoculated into YPD broth containing 0.15% bile salt at a concentration of 20 CFU / ml, and then cultured at 37 ° C for 6 hours at 360 CFU / ml or higher, preferably 400 CFU / ml or more, preferably 400 to 860 CFU / ml or more, 500 CFU / ml or more, 600 CFU / ml or more, 700 CFU / ml or more, more preferably 800 CFU / ml. < / RTI > Since the bacteriostatic BT-SJP strain of the present invention has excellent bile resistance, it has excellent intestinal viability and can maintain excellent activity for a certain period after ingestion, and thus can be usefully used as probiotics.
본 발명의 내담즙성 BT-SJP 균주는 35 내지 40℃, 바람직하게 35 내지 37℃에서 높은 증식성(온도 저항성)을 가지며, 65℃에서 내열성을 가질 수 있다. 상기 내담즙성 BT-SJP 균주는 일반적인 효모종이 25 내지 30℃에서 배양되는 것과 달리 35 내지 40℃, 바람직하게 37℃에서 매우 높은 증식성을 보이면서 담즙염 내성 능력도 가지므로, 프로바이오틱스로써 우수한 장점을 가질 수 있다. 또한, 본 발명의 내담즙성 BT-SJP 균주는 계태아 또는 4주령의 닭에서 병원성을 나타내지 않으며, 장정착성이 우수하여 프로바이오틱스로 사용되기에 우수한 장점을 가진다.The biliary BT-SJP strain of the present invention has high proliferative (temperature resistance) at 35 to 40 캜, preferably 35 to 37 캜, and can have heat resistance at 65 캜. The bacteriostatic BT-SJP strain has a very high proliferative activity at 35 to 40 DEG C, preferably 37 DEG C, and is also capable of bile salt resistance, unlike the conventional yeast papermaking at 25 to 30 DEG C, and thus has excellent advantages as probiotics Lt; / RTI > In addition, the biliary BT-SJP strain of the present invention does not show pathogenicity in a fetus or a 4-week-old chicken, and has excellent advantages of being used as a probiotics because of its excellent long-term fixability.
상기 내담즙성 BT-SJP 균주는 대전에 소재하는 한국생명공학연구원 생물자원센터에 2014년 12월 4일자로 기탁하여, 기탁번호 KCTC12726BP로 기탁된 내담즙성 효모 균주일 수 있다.The bacilli BT-SJP strain may be an intra-biliary yeast strain deposited on Dec. 4, 2014 with the deposit number KCTC12726BP at the Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology, Daejeon, Korea.
또한, 본 발명은 상기 내담즙성 BT-SJP 균주를 포함하는 프로바이오틱스(생균제) 조성물을 제공한다. 상기 조성물은 내담즙성 BT-SJP 균주, 상기 균주의 배양액, 상기 배양액의 농축액 및 상기 배양액의 건조물 등으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상을 유효성분으로 포함할 수 있다. 본 발명의 내담즙성 BT-SJP 균주는 내담즙성이 우수하며, 생체 온도와 유사한 온도(35 내지 40℃)에서 안정적으로 증식할 수 있으며, 장정착성이 우수하며 병원성이 없으므로, 프로바이오틱스 조성물의 유효성분으로 효과적으로 사용될 수 있다.In addition, the present invention provides a probiotic (prophylactic) composition comprising the above-mentioned bacilli BT-SJP strain. The composition may contain at least one selected from the group consisting of an intra-biliary BT-SJP strain, a culture solution of the strain, a concentrated solution of the culture solution, and a dried product of the culture solution. The biliary BT-SJP strain of the present invention is excellent in bile bite property and can be stably grown at a temperature (35 to 40 ° C) similar to a living body temperature. Since the bacterium BT-SJP has excellent long-term fixability and no pathogenicity, It can be effectively used as an active ingredient.
본 발명에 있어서, 배양물은 특정 미생물을 배양 배지 또는 배양액에서 배양한 것을 의미하며, 상기 배양물은 상기 특정 미생물을 포함하는 것일 수 있다. 상기 배양물은 그 제형이 한정되지 않고, 일 예로 액체 또는 고체일 수 있다. 바람직하게 본 발명의 배양액은 액체 배지에 특정 미생물을 접종하여 배양한 것을 의미할 수 있다. 또한, 본 발명에 있어서 배양액의 농축액은 상기 배양액을 농축한 것을 의미할 수 있으며, 배양액의 건조물은 상기 배양액에서 수분을 제거한 것을 의미할 수 있다.In the present invention, the culture means that a specific microorganism is cultured in a culture medium or a culture solution, and the culture may contain the specific microorganism. The culture is not limited in its formulation, and may be, for example, liquid or solid. Preferably, the culture medium of the present invention may mean that the culture medium is inoculated with a specific microorganism in a liquid medium. In the present invention, the concentrate of the culture liquid may mean that the culture liquid is concentrated, and the dried material of the culture liquid may mean that moisture is removed from the culture liquid.
본 발명에 있어서, 프로바이오틱스(probiotics)는 사람 또는 동물에 제공되어 사람 또는 동물 숙주의 장내 균총을 개선함으로써 유익한 효과를 주는 단일 또는 복합 균주 형태의 생균제일 수 있다. 일반적으로 프로바이오틱스는 장내 세균총의 이상 발효에 의하여 야기되는 제반 증상을 치료하고 개선하는 효과가 있으며, 숙주 장내의 소화관 벽에 밀집, 정착하여 유해 미생물이 정착하지 못하게 하는 작용을 한다. 생균활성제는 사람 또는 가축의 장내 미생물 균총을 개선시켜 건강에 유익한 효능을 주는 생균제재를 의미할 수 있다. 미생물이 생균활성제로 활용되기 위해서는 위장을 통과하는 과정에서 일정 균수가 생존해야 하므로, 내담즙성 및 장내 생존력이 우수하여 섭취 후 일정기간 그 활성이 유지될 수 있어야 한다. 본 발명의 내담즙성 BT-SJP 균주는 상기와 같은 생균활성제의 요구 조건을 만족시키므로, 우수한 프로바이오틱스 조성물로 사용될 수 있다.In the present invention, probiotics can be a probiotics in the form of a single or multiple strains which are provided to humans or animals to provide beneficial effects by ameliorating intestinal flora of a human or animal host. In general, probiotics have the effect of treating and ameliorating all the symptoms caused by abnormal fermentation of intestinal bacterial flora, and they function to prevent harmful microorganisms from settlement by being densely settled and fixed on the walls of the digestive tract in the host's intestines. The live bacterial activator may mean a bioactive agent that improves the intestinal microflora of a human or livestock to give a beneficial effect to health. In order for the microorganism to be used as a live-active agent, a certain number of bacteria must survive in the process of passing through the stomach, so that the biliary properties and intestinal viability are excellent, so that the activity can be maintained for a certain period after ingestion. The bacteriostatic bovine BT-SJP strain of the present invention satisfies the requirements of the live bacterial active agent as described above, and thus can be used as an excellent probiotic composition.
또한, 본 발명에 있어서 프로바이오틱스 조성물은 정장 작용을 가지므로, 정장용 조성물로 사용될 수 있다. 정장용은 사람 또는 동물의 장내 세균총의 이상 발효에 의하여 야기되는 제반 증상을 치료 또는 개선하는 용도를 의미할 수 있다. 상기 증상으로는 예를 들어, 설사(예를 들어 유해 미생물에 의한 감염성 설사 또는 장 급성 설사 등), 위장염, 염증성 장질환, 신경성 장염 증후군 또는 소장 미생물 과성장증 등이 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.Further, in the present invention, the probiotic composition has a dressing action and can therefore be used as a composition for dressing. Formal application may mean the treatment or amelioration of various symptoms caused by abnormal fermentation of intestinal flora of a person or an animal. Such symptoms may include, for example, diarrhea (for example, infectious diarrhea or intestinal diarrhea caused by harmful microorganisms), gastroenteritis, inflammatory bowel disease, neurodegenerative syndrome or small intestine microorganisms and growth conditions, It is not.
본 발명의 프로바이오틱스 조성물은 당업계에 공지된 방법에 따라 다양한 제형 및 방법으로 제조 및 투여될 수 있다.The probiotic compositions of the present invention can be prepared and administered in a variety of formulations and methods according to methods known in the art.
또한, 본 발명은 상기 프로바이오틱스 조성물을 포함하는 식품 또는 식품 첨가제를 제공한다. 또한, 본 발명은 상기 프로바이오틱스 조성물을 포함하는 사료 또는 사료 첨가제를 제공한다. 상기 식품 또는 사료를 통해 BT-SJP 균주를 포함하는 프로바이오틱스 조성물이 사람 또는 동물의 장내로 효과적으로 전달될 수 있다.The present invention also provides a food or food additive comprising the probiotic composition. The present invention also provides a feed or feed additive comprising the probiotic composition. The probiotic composition comprising the BT-SJP strain can be effectively delivered into the intestines of a human or animal through the food or feed.
본 발명에 있어서 식품은 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 바람직하게 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미한다. 통상적으로, 상기 식품은 건강기능 식품, 음료, 식품 첨가제 또는 음료 첨가제 등일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 예를 들어, 상기 식품은 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 기능성 식품, 특수영양식품(예를 들어 조제유류 또는 영유아식 등), 건강보조식품, 과자류(예를 들어 스넥류) 또는 유가공식품 등일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 식품은 당업계에 공지된 통상적인 제조 방법에 따라 제조될 수 있다.In the present invention, the term " food " means a natural product or a processed product containing one or more nutrients, preferably a state of being able to be eaten directly through a certain degree of processing. Typically, the food may be, but is not limited to, a health functional food, beverage, food additive or beverage additive. For example, the food may be selected from the group consisting of various foods, beverages, gums, tea, vitamin complex, functional foods, special nutrition foods (such as crude oil or infant formula), health supplements, confectionery Food, and the like. The food can be prepared according to a conventional manufacturing method known in the art.
상기 식품은 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 기능성 식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 또는 희석제 등을 추가적으로 포함할 수 있다.The food may comprise a pharmaceutically acceptable food-aid additive and may additionally comprise suitable carriers, excipients or diluents conventionally used in the manufacture of a functional food.
본 발명에 있어서, 상기 식품은 상기 프로바이오틱스 조성물을 전체 식품 중량의 0.0001 내지 99 중량%, 바람직하게 0.001 내지 90 중량%, 더욱 바람직하게 0.1 내지 80 중량%, 가장 바람직하게 1 내지 50 중량%로 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니며, 식품의 종류 또는 용도에 따라서 적절하게 조절될 수 있다.In the present invention, the food contains 0.0001 to 99% by weight, preferably 0.001 to 90% by weight, more preferably 0.1 to 80% by weight, most preferably 1 to 50% by weight of the total food weight of the probiotic composition But it is not limited thereto and can be appropriately adjusted depending on the kind or use of the food.
본 발명에 있어서, 상기 사료 첨가제는 사료에 첨가되어 사용될 수 있고, 그에 따라 사료를 섭취하는 동물의 장내에서 유해 미생물에 대한 저항성 증진을 유도함으로써 가축의 생산성을 증진시킬 수 있다.In the present invention, the feed additive may be added to feed, thereby improving the productivity of livestock by inducing resistance to harmful microorganisms in the intestines of an animal that feeds the feed.
본 발명에 있어서, 상기 사료는 상기 프로바이오틱스 조성물을 전체 사료 중량의 0.0001 내지 99 중량%, 바람직하게 0.001 내지 90 중량%, 더욱 바람직하게 0.1 내지 80 중량%, 가장 바람직하게 1 내지 50 중량%로 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In the present invention, the feed contains 0.0001 to 99% by weight, preferably 0.001 to 90% by weight, more preferably 0.1 to 80% by weight, most preferably 1 to 50% by weight of the total feed weight of the probiotic composition But is not limited thereto.
본 발명의 사료 또는 사료 첨가제를 적용할 수 있는 동물 종류는 소, 돼지, 양, 염소, 개 또는 고양이 등의 각종 가축, 애완동물, 조류 및 어류 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있으며, 이에 제한되는 것은 아니다.The animal species to which the feed or feed additive of the present invention can be applied may be at least one kind selected from the group consisting of cattle such as cattle, pig, sheep, goat, dog or cat, pet, But is not limited to.
본 발명의 내담즙성 BT-SJP 균주는 장내에서 분비되는 담즙에 대한 내성이 우수하며, 인체와 유사한 35~40℃의 온도에서 증식성 및 장정착성이 우수하며, 병원성을 나타내지 않는다.The bacteriostatic BT-SJP strain of the present invention is excellent in resistance to bile secreted in the intestines and is excellent in proliferation and long-term fixability at a temperature of 35 to 40 캜, similar to the human body, and does not show pathogenicity.
본 발명의 내담즙성 BT-SJP 균주는 상기와 같은 특성을 가짐으로써, 프로바이오틱스 조성물, 식품 또는 식품 첨가제, 사료 또는 사료 첨가제 등으로 광범위하게 활용될 수 있다.The bacterium-resistant bovine BT-SJP strain of the present invention has the above-mentioned characteristics and can be widely used as a probiotic composition, a food or food additive, a feed or a feed additive.
도 1은 SJP-SNU 모균주와 S. cerevisiae (KCTC 50757)의 장정착성을 비교한 결과를 나타낸다.
도 2는 SJP-SNU 모균주와 S. boulardii의 37℃에서의 증식성을 비교한 결과이다.
도 3은 SJP-SNU 모균주와 S. cerevisiae (KCTC 50757) 및 S. boulardii의 내열성을 비교한 결과이다.
도 4는 SJP-SNU 모균주의 에탄올 분해 효능을 나타낸 결과이다. SJP-SNU 모균주의 경우 37℃에서 에탄올을 분해하고 산을 생성해, pH 지시약인 페놀레드의 색이 적색에서 황색으로 변한 결과를 나타낸 것이다.
도 5는 SJP-SNU 신종효모의 악취의 원인인 황화수소 저감 효능을 나타낸 결과이다.
도 6은 SJP-SNU 신종효모의 비병원성을 나타낸 결과로 A는 SJP-SNU 신종효모를 계태아섬유아세포에 접종 시 세포변성효과가 전혀 없는 결과를 나타낸 것이다. B는 SJP-SNU 신종효모를 10일령 SPF 발육란에 요막강 경로로 접종하고, 계태아 폐사와 병변 유무를 조사한 결과로, 인산완충용액을 접종한 대조군과 비교 시 폐사가 전혀 없었고, 병변이 관찰되지 않아 병원성이 없는 결과를 나타낸 것이다.
도 7은 게놈 분석을 통하여 SJP-SNU 모균주를 동정한 결과를 나타낸다.
도 8은 모균주를 담즙염을 함유하는 배지에서 연속 계대 배양하여 본 발명의 변이주를 선별한 모식도이다.
도 9는 배양시간 0, 2, 4 및 6시간에 담즙염을 함유하는 배지에서 BT-SJP와 모균주의 시간에 따른 콜로니 형성을 비교한 결과를 나타낸 것이다.
도 10은 배양 시간 0 내지 6시간 동안 담즙염을 함유하는 배지에서 BT-SJP와 모균주의 시간대별 증식을 관찰한 후 곡선 그래프로 나타낸 것이다.Figure 1 shows the results of comparing the intestinal fixation of SJP-SNU parent strain with S. cerevisiae (KCTC 50757).
Fig. 2 shows the results of comparing the proliferative activity of the SJP-SNU parent strain and S. boulardii at 37 ° C.
FIG. 3 shows the results of comparing the heat resistance of SJP-SNU parent strain with S. cerevisiae (KCTC 50757) and S. boulardii .
Figure 4 shows the results of ethanol degradation of the parent strain of SJP-SNU. In the case of SJP-SNU parent strain, ethanol was decomposed at 37 ° C to generate acid, and the color of phenol red as pH indicator changed from red to yellow.
Fig. 5 shows the results of showing the hydrogen sulfide-reducing effect, which is the cause of the odor of the SJP-SNU new yeast.
Fig. 6 shows the results of the non-pathogenicity of SJP-SNU new yeast. As a result, A showed no cytotoxic effect upon inoculation of SJP-SNU new yeast into fetal fibroblasts. B showed that the new yeast strain SJP-SNU was inoculated into the umbilical cord at 10-day-old SPF developmental pathway, and there was no mortality compared to the control group inoculated with the phosphate buffer solution. The results showed no pathogenicity.
Fig. 7 shows the result of identification of the SJP-SNU parent strain through genome analysis.
Fig. 8 is a schematic diagram showing the selection of mutants of the present invention by successive subculture in the medium containing the parental bile salt.
FIG. 9 shows the results of comparing the time-dependent colony formation of BT-SJP and parent strain in medium containing bile salts at 0, 2, 4, and 6 hours of culture time.
FIG. 10 is a graph showing the time-dependent proliferation of BT-SJP and parent strain in a medium containing bile salts for 0 to 6 hours of culture time.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예 등을 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 하기 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 발명의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail to facilitate understanding of the present invention. However, the embodiments according to the present invention can be modified into various other forms, and the scope of the present invention should not be construed as being limited to the following embodiments. Embodiments of the invention are provided to more fully describe the present invention to those skilled in the art.
실시예Example 1: One: SJPSJP -- SNUSNU 모균주의Parental 특성 characteristic
1-1. 1-1. SJPSJP -- SNUSNU 신종 효모의 분리 Isolation of new yeast
다양한 곳에서 채취한 각각 1g의 부숙토에 항생제-PBS(gentamycin, kanamycin, ampicilin, tetracyclin 및 streptomycin-50ug/ml) 9ml를 첨가하였다. 이후 부숙토를 37℃에서 2시간 배양하고, 60℃에서 10분간 열처리 하였다. 이후 항생제-PBS로 10진 희석하고, YMA에 100ul씩 골고루 도포 후 37℃에서 18시간 배양하였다. 배양된 미생물 가운데 가장 큰 집락을 클로닝하고, 이를 메틸렌 블루로 염색하여 효모를 분리하였으며, 이를 SJP-SNU로 명명하였다.9 ml of antibiotics-PBS (gentamycin, kanamycin, ampicillin, tetracyclin and streptomycin-50 ug / ml) were added to 1 g of composted soil collected at various sites. The composted soil was then incubated at 37 ° C for 2 hours and heat-treated at 60 ° C for 10 minutes. Then, 10-dilution with antibiotic-PBS was performed, 100 ul aliquots were applied to YMA and cultured at 37 째 C for 18 hours. The largest colonies of the cultured microorganisms were cloned and stained with methylene blue to isolate the yeast, which was named SJP-SNU.
1-2. 장 정착성 비교1-2. Comparison of Fixability
4주령(120913) SPF(specific pathogen free) 닭을 3마리씩 3그룹을 설정하여 107cfu/ml의 SJP-SNU, S. cerevisiae(KCTC 50757) 및 PBS(대조군, Con)를 하루 1회 500ul씩 3일간 경구 투여하였다. 이후 4일째 3마리의 맹장변을 채취하여 합친 후 무게를 측정하였다. 이후 항생제-PBS(gentamycin, kanamycin, ampicilin, tetracyclin 및 streptomycin-50ug/ml)로 10배 희석 후, 10진 희석하여 YMA에 100ul씩 골고루 도포한 후, 37℃에서 18시간 배양하여 집락 수를 측정하였다. 그 결과 대조군과 S. cerevisiae 투여군은 효모가 전혀 분리되지 않았지만(0 colony forming unit(cfu)/g), SJP-SNU는 맹장변 그램당 3.8x105cfu/g이 분리되어 장 정착성이 뛰어난 것을 확인하였다(도 1).SJP-SNU, S. cerevisiae (KCTC 50757) and PBS (control, Con) were inoculated once per day with 500ul each of 10 7 cfu / ml of 4 weeks old (120913) SPF (specific pathogen free) Orally for 3 days. On the 4th day, 3 appendices were collected and weighed. After 10-fold dilution with antibiotics-PBS (gentamycin, kanamycin, ampicillin, tetracycline and streptomycin-50 ug / ml), 10 μl of dilution was applied to each well of 100 μl of YMA and incubated at 37 ° C. for 18 hours to measure the number of colonies . As a result, the control group and the S. cerevisiae treated group showed no separation of yeast (0 colony forming unit (cfu) / g), whereas SJP-SNU separated 3.8 x 10 5 cfu / g per cecomorphogram, (Fig. 1).
S. cerevisiae에 비해 37℃에서 배양성이 좋으며 시중에 판매되고 있는 Saccharomyces boulardii를 SJP-SNU와 함께 37℃에서 배양성을 비교하였다. 그 결과 SJP-SNU는 18시간만에 매우 활발한 성장을 보인 반면, S. boulardii는 18시간 배양에서 집락을 형성하지 못하였다. 나아가, S. boulardii의 집락은 32시간 배양 후에도 SJP-SNU의 집락보다 작았다. 이를 통해 SJP-SNU가 S. boulardii보다 37℃에서의 배양성이 탁월함을 확인하였다(도 2). Saccharomyces boulardii , which is well- rounded at 37 ° C compared to S. cerevisiae and commercially available, was compared at 37 ° C with SJP-SNU. As a result, SJP-SNU showed very active growth in 18 hours, while S. boulardii did not colonize in culture for 18 hours. Furthermore, the colony of S. boulardii was smaller than that of SJP-SNU after 32 hours of incubation. Thus, it was confirmed that SJP-SNU was superior to S. boulardii at 37 ° C. (FIG. 2).
1-3. 내열성 비교 1-3. Heat resistance comparison
S. cerevisiae (KCTC 50757) 및 S. boulardii는 YM broth에서 30℃에서 18시간 배양하였고, SJP-SNU는 37℃에서 18시간 배양하였다. 이후 각각을 55, 60 및 65℃에서 10분간 열처리하고, YMA에 도말하여 37℃에서 배양한 후 생존 여부를 확인하였다. 그 결과 모두 60℃까지는 생존하였으나, 65℃에서는 SJP-SNU만 생존하여 뚜렷한 차이를 보였다(도 3). S. cerevisiae (KCTC 50757) and S. boulardii were cultured in YM broth at 30 ° C for 18 hours and SJP-SNU at 37 ° C for 18 hours. Then, each of them was heat-treated at 55, 60 and 65 ° C for 10 minutes, spread on YMA and cultured at 37 ° C, and then viability was confirmed. As a result, all survived up to 60 ° C., but only SJP-SNU survived at 65 ° C. (FIG. 3).
1-4. 1-4. SJPSJP -- SNUSNU 모균주Parent strain 배양액의 항 인플루엔자 바이러스 효과 Anti-influenza virus effect of culture media
SJP-SNU을 24시간 동안 배양한 배양액(pH 4.59)을 여과하였다. A/chicken/Korea/01310/2001 (H9N2)(국립수의과학검역원 조류질병과; 등록특허 제10-0790801호) 조류 인플루엔자 바이러스 배양액을 유기물(5% BCS in PBS)로 1/20의 비율로 희석한 후, SJP-SNU 배양액과 1:1로 혼합하였다. 이를 4℃에서 30분간 반응시킨 후 단계별 희석하고, Egg-bit에 접종하여 Virus Control과 비교하였다. 그 결과 SJP-SNU 모균주 배양액에서 10배 이상의 바이러스 역가(TCID50/0.1ml)의 감소가 관찰되어 유의적인 차이를 보였다(P<0.05).SJP-SNU was cultured for 24 hours, and the culture solution (pH 4.59) was filtered. A / chicken / Korea / 01310/2001 (H9N2) (National Veterinary Research and Quarantine Service, Bird Disease Division, Registered Patent No. 10-0790801) The avian influenza virus culture was diluted 1/20 with an organic substance (5% BCS in PBS) And then mixed with the SJP-SNU culture solution at a ratio of 1: 1. They were reacted at 4 ° C for 30 minutes, diluted stepwise, and inoculated with Egg-bit and compared with Virus Control. As a result, there was a significant difference (P <0.05) in the decrease of virus titer (TCID 50 /0.1 ml) of 10 times or more in SJP-SNU parent strain culture.
a HA 양성 / 접종 well 수a HA positive / inoculated well
1-5. 에탄올 분해능 비교1-5. Ethanol degradation ability comparison
5%, 10% 및 15% EtOH (in PBS + phenol red 0.1%)에 SJP-SNU 106 cfu/100ul을 접종한 후 37℃에서 16시간 동안 배양하였다. 5% EtOH에서 SJP-SNU를 접종하여 배양한 경우, SJP-SNU를 접종하지 않은 대조군 대비 지시약(Phenol Red) 색이 확연하게 노란색으로 변하였다. 또한, 10% EtOH에서도 SJP-SNU를 접종하여 배양한 경우, 대조군 대비 구별 가능한 정도로 노란색으로 변하였다. 그러나, 15% EtOH의 경우 차이가 없었다(도 4A).SJP-
5%, EtOH (in PBS)를 사용하여 S. exiguus (KCTC7169) 표준주와 SJP-SNU의 에탄올(EtOH) 분해능을 비교하기 위해 각각의 균주를 106 cfu/100ul을 접종 후, 37℃에서 16시간 동안 배양하였다. 그 결과 S. exiguus (KCTC7169) 표준주의 경우 균주를 접종하지 않은 대조군 대비 변화가 없었으나, SJP-SNU의 경우 뚜렷이 구별되는 노란색을 보였다. 따라서 SJP-SNU의 경우 37℃에서 에탄올을 분해하여 아세트산으로 분해하는 능력이 탁월함을 확인하였다(도 4B).To compare the ethanol (EtOH) resolution of S. exiguus (KCTC7169) standard strain and SJP-SNU using 5% EtOH (in PBS), 10 6 cfu / 100ul of each strain was inoculated, Lt; / RTI > As a result, there was no change in S. exiguus (KCTC7169) standard compared to the control group in which the strain was not inoculated, but SJP-SNU showed distinct yellow color. Therefore, it was confirmed that the ability of SJP-SNU to decompose ethanol into acetic acid at 37 ° C was excellent (FIG. 4B).
1-6. 황화수소 분해능 비교1-6. Hydrogen sulfide decomposition ability comparison
혐기 상태에서 유기물이 미생물에 의해 분해될 때 산생되는 황화수소(H2S)는 무색의 독성 가스로 알려져 있다. SJP-SNU 균주의 황화수소 저감 효능을 평가하기 위해, 황화수소를 산생하는 Salmonella Enteritidis (SE) 최소 균수를 측정하였다. 이를 위해, LB 육즙배지에 배양한 SE 4.3x109cfu/ml을 TSI 사면배지에 10-3 ~ 10-10 희석한 후 접종하여, 37℃에서 18시간 배양하였다. 그 결과 10-6 희석하는 경우 SE에 의해 산생된 황화수소에 의해 배지 전체가 흑변되는 것을 확인하였다(도 5A).Hydrogen sulfide (H 2 S), which is produced when organic matter is decomposed by microorganisms in an anaerobic state, is known as a colorless toxic gas. In order to evaluate the hydrogen sulfide-reducing effect of the SJP-SNU strain, Salmonella enteritidis (SE) producing the hydrogen sulfide was measured. For this, SE 4.3 × 10 9 cfu / ml cultured in LB broth was inoculated after diluting 10 -3 to 10 -10 in TSI slope medium and cultured at 37 ° C. for 18 hours. As a result, it was confirmed that the entire medium was blackened by hydrogen sulfide produced by SE when 10 -6 dilution (FIG. 5A).
YM broth에서 배양한 SJP-SNU (8.8x109cfu/ml) 및 S. boulardii (2x108cfu/ml) 원액 및 원액을 2배 희석한 것을 준비하였다. 이들을 각각 10진 희석하여 각 희석 효모 450ul와 상기 SE 10-6 희석균 50ul를 혼합하여 사면배지에 접종하였다. 이를 37℃에서 18시간 동안 배양한 결과, SJP-SNU 및 S. boulardii 모두에서 효모의 수가 많을수록 황화수소 산생에 의한 배지의 흑변이 억제되는 경향이 관찰되었다(도 5B).SJP-SNU (8.8x10 9 cfu / ml) and S. boulardii (2x10 8 cfu / ml) stock solution and stock solution were cultured in YM broth. Diluted by them respectively,
1-7. 병원성 평가 1-7. Virulence evaluation
YM broth에 SJP-SNU를 접종하고 37℃에서 24시간 배양한 배양액을 100배 희석하여 배양하였다. 이를 계태아섬유아세포에 접종하고 5일 후 관찰한 결과, 세포변성효과가 관찰되지 않았다(도 6A). SJP-SNU (107CFU/ml) 배양액을 SPF종란에 0.1 ml/개씩 접종한 후 60시간 동안 배양하며 계태아의 생존 유무를 조사하였다. 60시간후 4℃에서 종야 정치한 후 계태아의 병변을 관찰한 결과, SJP-SNU 접종 계태아는 모두 60시간동안 생존하였으며, 계태아 역시 대조군과 차이를 보이지 않아 계태아에 대한 병원성이 없음을 확인하였다(도 6B).SJP-SNU was inoculated in YM broth and incubated at 37 ° C for 24 hours. The culture was diluted 100 times and cultured. After 5 days of inoculation with fetal fibroblasts, no cytopathic effect was observed (Fig. 6A). SJP-SNU (10 7 CFU / ml) was inoculated into the SPF seedlings at a concentration of 0.1 ml / ml and incubated for 60 hours. The SJP-SNU-inoculated fetus survived for 60 hours, and the fetus did not show any pathogenicity to the fetus because it did not differ from the control group. (Fig. 6B).
면역억제에 의한 SJP-SNU의 병원성을 평가하기 위해, 4주령 SPF 시험계 3마리씩 4그룹을 설정하여 107cfu/ml의 SJP-SNU, S. cerevisiae (KCTC 50757) 및 PBS (대조군)를 하루 1회 500 ul씩 3일간 경구 투여하였다. 이후, 4일간 사료 급이를 중단(음수공급)하여 면역을 억제(Protein-energy malnutrition 모델)시킨 후, 5일째 시험계의 혈액을 채취하였다. 신장 및 간장으로부터 면봉 재료를 채취하여, YM 한천배지(항생제)에 도말하여 효모의 유무를 조사하였다. 그 결과 효모가 전혀 분리되지 않아, SJP-SNU의 내부 장기 침습성은 없는 것으로 확인되었다. In order to evaluate the pathogenicity of SJP-SNU by immunosuppression, four groups of three 4-week-old SPF test systems were set up, and 10 7 cfu / ml of SJP-SNU, S. cerevisiae (KCTC 50757) 500 μl per day for 3 days. Thereafter, the feeding was stopped (negative supply) for 4 days to inhibit the immune system (protein-energy malnutrition model), and the blood of the test system was collected on the fifth day. Cotton swabs were taken from kidneys and liver and plated on YM agar medium (antibiotics) to determine the presence or absence of yeast. As a result, yeast was not isolated at all and it was confirmed that SJP-SNU was not invasive to the internal organs.
12주령 SPF 성계 3수에 109 cfu/ml/수의 SJP-SNU를 피하 접종한 후 14일간 임상 증상을 관찰하였다. 성계 3수를 접종 14일 후 안락사시켜 병변을 관찰하였다. 그 결과 대조군 대비 임상증상을 보이지 않았고 부검 결과 병변을 보이지 않아, SJP-SNU는 병원성이 없음을 확인하였다.SJP-SNU was injected subcutaneously at 10 9 cfu / ml / water in the 3-week-old SPF group and clinical symptoms were observed for 14 days. Three days after the inoculation, eosinophilic lesions were observed. As a result, no clinical symptoms compared to the control group, no autopsy results, and no SJP-SNU pathogenicity.
1-8. 게놈분석을 이용한 균주 동정1-8. Identification of strain using genome analysis
본 발명의 SJP-SNU 신종 효모의 게놈을 DNeasy® Blood & Tissue Kit (QIAGEN 사)를 사용하여 추출한 후, NGS 기법을 통해 염기서열을 결정하였다. SJP-SNU 신종 효모의 염기서열 어셈블리, ORF(open reading frame) 예측, BLAST 검색 및 효모 동정(Krona tool) 등의 게놈 분석은 인트론바이오테크놀로지에서 수행하였다. 그 결과 SJP-SNU 신종효모 균주의 게놈은 Pichia kudriavzevii와 74.40%, Candida glycerinogenes와 13.05% 및 Debaryomyces hansenii과 10.72% 유사함을 확인하였다(표 3).The genome of the SJP-SNU new yeast strain of the present invention was extracted using DNeasy Blood & Tissue Kit (QIAGEN), and the nucleotide sequence was determined by the NGS technique. Genomic analysis such as nucleotide sequence assembly of SJP-SNU new yeast, ORF (open reading frame) prediction, BLAST search and yeast identification (Krona tool) was performed by Intron Biotechnology. As a result, the genome of the SJP-SNU new yeast strain was Pichia 74.40 % with kudriavzevii, 13.05% with Candida glycerinogenes , and Debaryomyces hansenii and 10.72% (Table 3).
이러한 결과로부터 SJP-SNU 신종 효모는 주변환경에 적응하기 위해 다양한 효모 균주들과 heterospecific hybridizations을 통해 진화한 신종 효모인 것으로 확인되었다(도 7).From these results, it was confirmed that the new yeast strain SJP-SNU was a new yeast that evolved through heterospecific hybridizations with various yeast strains in order to adapt to the surrounding environment (FIG. 7).
실시예Example 2: 2: 담즙염Bile salt 내성 변이주 개발 Development of resistant mutant strains
모균주에서 담즙염 내성 변이주를 제조하기 위한 구체적인 방법은 도 8에 나타내었다. 도 8은 모균주를 담즙염을 함유하는 배지에서 연속 계대 배양하여 본 발명의 변이주를 선별한 모식도이다.A specific method for producing a bile salt-resistant mutant strain in parent strain is shown in FIG. Fig. 8 is a schematic diagram showing the selection of mutants of the present invention by successive subculture in the medium containing the parental bile salt.
효모 배양을 위한 YPD agar와 broth는 제조 회사의 메뉴얼에 따라 제작하여 사용하였다. 담즙염 내성 균주 선발을 위한 배지는 기존에 사용되고 있는 효모 배양 배지 YPD에 담즙염을 0.15 중량%로 첨가한 YPD Broth를 제작하였다.YPD agar and broth for yeast culture were prepared according to the manual of the manufacturer. YPD broth prepared by adding 0.15% by weight of bile salt to yeast culture medium YPD, which has been used previously, was prepared for the bile salt resistant strain selection.
상기 YPD broth에 모균주를 접종하여 37℃ 셰이킹(shaking) 인큐베이터에서 16 내지 18시간 배양하였다. 배양 원액을 10진 희석하여 103 내지 104 cfu/ml을 YPD Broth와 0.15% 담즙염(Bile salt)이 함유된 YPD에 각각 접종한 후, 37℃ 셰이킹 인큐베이터에서 3일 동안 배양하였다. 각 broth에서 배양된 배양 원액을 10진 희석하여 같은 방법으로 두가지 broth에 103~104 cfu/ml씩을 접종하였고, 37℃ 셰이킹 인큐베이터에서 1일 동안 배양하였다. 이후 계대 배양에서는 1일을 기준으로 배양하였고 19대까지 연속 계대 배양하여 최종적으로 담즙염 내성 변이주를 선발하고, BT-SJP로 명명하였다. 이후 BT-SJP 변이 균주는 -70℃에 보관하였다.The YPD broth was inoculated with a parent strain and cultured in a shaking incubator at 37 ° C for 16 to 18 hours. The culture broth was decanted and 10 3 to 10 4 cfu / ml was inoculated into YPD broth and 0.15% Bile salt-containing YPD, respectively, and cultured in a 37 ° C shaking incubator for 3 days. The culture broth cultured in each broth was decanted, and in the same manner, 10 3 to 10 4 cfu / ml were inoculated into two broths and cultured in a 37 ° C shaking incubator for 1 day. In the subculture, the cells were cultured on the 1 st day and cultured continuously for up to 19th consecutive days. Finally, the mutants were selected as BT-SJP. The BT-SJP mutant strains were then stored at -70 ° C.
상기 선발된 BT-SJP 변이 균주를 한국생명공학연구원 생물자원센터에 2014년 12월 4일자로 기탁하여, 기탁번호 KCTC12726BP를 부여 받았다.The selected BT-SJP mutant strain was deposited at the BRC Center of the Korea Biotechnology Research Institute on Dec. 4, 2014 and received the deposit number KCTC12726BP.
실시예Example 3: 3: 담즙염Bile salt 내성 변이 균주와 Resistant mutant strain 모균주의Parental 증식성 비교 분석 Proliferation comparative analysis
상기 실시예 2에서 얻은 BT-SJP 담즙염 내성 변이 균주 및 모균주를 0.15% 담즙염이 함유된 YPD broth에 각각 접종하였다. 이를 37℃에서 배양하면서 2시간 간격으로 배양액을 수거하여 YPD agar 플레이트에 도말하였다. 이후 37℃ 인큐베이터에서 16 내지 18시간 배양하여 형성된 콜로니 수를 측정하여, 하기 표 4에 정리하였다. 구체적으로 배양시간 0, 2, 4 및 6시간에 각각 상기 담즙염을 함유하는 배지에서 BT-SJP와 모균주의 시간에 따른 콜로니 형성을 비교한 결과를 도 9에 나타내었다.The BT-SJP bile salt-resistant mutant strain and parent strain obtained in Example 2 were inoculated into YPD broth containing 0.15% bile salt, respectively. The culture was collected at 2 hours intervals while cultured at 37 ° C and plated on a YPD agar plate. Thereafter, the number of colonies formed by culturing in a 37 ° C incubator for 16 to 18 hours was measured and summarized in Table 4 below. Specifically, the results of comparing the time-course of colonization of BT-SJP and parent strain in medium containing the bile salt at 0, 2, 4 and 6 hours of culture time are shown in FIG.
상기 표 4 및 도 9에 나타난 바와 같이, 담즙염을 함유하는 배지에서 본 발명의 BT-SJP 균주가 모균주에 비해 콜로니를 현저하게 많이 생성하는 것을 확인하였다. 구체적으로 모균주는 접종 시 균주 농도 대비 4시간 경과 시 4.3배, 및 6시간 배양 시 21배로 증가하여다. 이에 비해 본 발명의 BT-SJP 균주는 접종 시 균주 농도 대비 2시간 경과 시 22배, 4시간 경과시 98배, 및 6시간 배양 시 42.5배로 콜로니 수가 현저하게 증가하였다.As shown in Table 4 and FIG. 9, it was confirmed that the BT-SJP strain of the present invention produced significantly more colonies in the culture medium containing the bile salt than the parent strain. Specifically, parent strain increased 4.3 times at 4 hours after incubation and 21 times at 6 hours incubation. In contrast, the BT-SJP strain of the present invention showed a remarkable increase in the number of colonies by 22 times at the time of inoculation, 92 times at the time of 4 hours, 42.5 times at the time of 6 hours of incubation.
또한, 상기 배양 시간 0 내지 6시간 동안 담즙염을 함유하는 배지에서 BT-SJP와 모균주의 시간대별 증식을 관찰한 후, 곡선 그래프로 도 10에 나타내었다. 즉 도 10은 담즙염을 함유하는 배지에서 BT-SJP 및 모균주의 시간대별 증식 곡선 변화를 나타내는 그래프이다. 도 10에 나타난 바와 같이, 반응 시간 4시간 이후부터, BT-SJP 변이주는 모균주에 비해 높은 증식성을 나타내었고, 이로부터 BT-SJP 변이주는 담즙에 대한 내성이 우수함을 확인하였다.In addition, the time-series proliferation of BT-SJP and parent strain in the culture medium containing the bile salt for 0 to 6 hours of the culture time was observed and then shown in a curve graph in FIG. That is, FIG. 10 is a graph showing changes in growth curves of BT-SJP and parent strain in the medium containing bile salts by time. As shown in FIG. 10, BT-SJP mutants showed higher proliferation than the parent strains from 4 hours after the reaction time, and the BT-SJP mutant was found to be more resistant to bile.
Claims (4)
담즙염 내성 BT-SJP 균주(KCTC12726BP).It has a total genome sequence similarity of 74.40% with Pichia kudriavzevii , 13.05% with Candida glycerinogenes , and 10.72% with Debaryomyces hansenii As a mutant strain of the novel yeast strain SJP-SNU,
Bile salt tolerance BT-SJP strain (KCTC12726BP).
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020160092282A KR101837160B1 (en) | 2016-07-20 | 2016-07-20 | New microorganism BT-SJP KCTC12726BP and use thereof |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020160092282A KR101837160B1 (en) | 2016-07-20 | 2016-07-20 | New microorganism BT-SJP KCTC12726BP and use thereof |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20180010101A KR20180010101A (en) | 2018-01-30 |
| KR101837160B1 true KR101837160B1 (en) | 2018-03-09 |
Family
ID=61070907
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020160092282A KR101837160B1 (en) | 2016-07-20 | 2016-07-20 | New microorganism BT-SJP KCTC12726BP and use thereof |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR101837160B1 (en) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102110956B1 (en) * | 2018-12-11 | 2020-05-14 | (주)카보엑스퍼트 | Saccharomyces boulardii CEY2 mutant strain having high productivity of glycogen and uses thereof |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005049086A1 (en) | 2003-11-18 | 2005-06-02 | Ultra Biotech Limited | Yeast compositions and their uses as dietary supplement or medicine |
| US20100303778A1 (en) | 2007-12-26 | 2010-12-02 | Jean-Luc Simon | Composition for human and/or animal nutrition, uses thereof and yeasts |
-
2016
- 2016-07-20 KR KR1020160092282A patent/KR101837160B1/en active IP Right Grant
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005049086A1 (en) | 2003-11-18 | 2005-06-02 | Ultra Biotech Limited | Yeast compositions and their uses as dietary supplement or medicine |
| US20100303778A1 (en) | 2007-12-26 | 2010-12-02 | Jean-Luc Simon | Composition for human and/or animal nutrition, uses thereof and yeasts |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 농림축산식품부 연구보고서, 서울대학교 산학협력단, "신종 효모로 구성된 프로바이오틱 생균제 효능기전 연구"(2015.01.20.)* |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20180010101A (en) | 2018-01-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5872104B2 (en) | New Bacillus subtilis {NOVELBACILLUSSUBTILIS} | |
| KR101370942B1 (en) | Novel Bacillus subtilis | |
| KR102166596B1 (en) | Lactobacillus plantarum JDFM LP11 strain having antimicrobial activity, anti-aging activity and probiotics properties and uses thereof | |
| KR101845709B1 (en) | Lactobacillus plantarum KCC-26 and composition comprising the same | |
| CN104171429A (en) | Use of lactobacillus plantarum LP28 | |
| CN105132321A (en) | Enterococcus faecium, culture medium thereof for high-density solid-state fermentation, and high-density solid-state fermentation method | |
| KR20140022506A (en) | Lactobacillus plantarum gb-lp1 strain having improved immunological activity and anti-virus activity, and fermentation process thereof | |
| KR20160057855A (en) | Lactic acid bacterium separated from kimchii and having antifungal activity, and compositon including it | |
| KR101507744B1 (en) | Lactobacillus paracasei ML-7 strain having antimicrobial activity and uses thereof | |
| KR20170020215A (en) | Novel lactobacillus sp. and feed composition for animal comprising thereof | |
| KR100925173B1 (en) | Functional feed additive and process for producing the same | |
| KR101494230B1 (en) | Novel strain of Bacillus amyloliquefaciens and animal feed additive containing it | |
| KR20170050527A (en) | Vegetable Lactobacillus plantarum DSR KF15 having Activities on Antimicrobial And Antifungal for keeping freshness and Use Thereof | |
| KR20190047756A (en) | A composition comprising lactobacillus probiotics and a functional feed additive comprising the same | |
| KR101837160B1 (en) | New microorganism BT-SJP KCTC12726BP and use thereof | |
| KR101485970B1 (en) | Novel Lactobacillus sp. AML 2-1 strain, a method of producing polyamines and Gamma-aminobutyric acid using Lactobacillus sp. AML 2-1 and use of polyamines and Gamma-aminobutyric acid | |
| KR101665334B1 (en) | Rhodobacter sphaeroides CB 8521 strain, having the effect of reducing malodor and immune activity in livestock industry, and microbial agent using it | |
| KR102003822B1 (en) | Lactic acid bacteria improving hair quality, additives and composition for animal feed for improving hair quality comprising thereof as effective component | |
| KR100954882B1 (en) | Novel lactic acid bacteria preventing avian influenza infection and composition containing the same | |
| KR101616530B1 (en) | Lactococcus lactis KR-W.W-2 as a novel strain with antibacterial activity and use thereof | |
| KR101823073B1 (en) | New microorganism SJP-SNU KCTC12756BP and use thereof | |
| KR101649476B1 (en) | Growth inhibitor against bacillus amyloliquefaciens KNU-1 (KCTC18343P) or culture medium thereof | |
| KR101670955B1 (en) | Feed for farming-fish and Farming-fish farmed using that | |
| KR20180134128A (en) | Sparassis crispa fermentation product having antioxidative and immunological activity, and preparing method thereof | |
| KR101674553B1 (en) | A medium composition for high concentration culture of lactic acid bacteria |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant |