KR101713178B1 - 키토산 가교 수용성 다당류의 제조방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 키토산 가교 수용성 다당류의 제조방법에 관한 것으로, 본 발명의 제조방법에 의해 제조된 키토산으로 가교결합된 수용성 다당류는 단백질 등전점 부근인 pH 4.2~4.8 영역에서 단백질의 분산 안정에 매우 우수한 효과를 발휘하여 단백질 침전을 억제할 수 있다. 따라서, 본 발명에서 제조된 키토산 가교 수용성 다당류는 단백질 함유 음료 또는 식품에 사용될 수 있다.

Description

키토산 가교 수용성 다당류의 제조방법 {Method for production of water-soluble polysaccharide cross-linked with chitosan}

본 발명은 키토산 가교 수용성 다당류의 제조방법에 관한 것으로, 좀 더 구체적으로 단백질 등전점 부근인 pH 4.2~4.8 영역에서 단백질을 안정화시킬 수 있는 키토산 가교 수용성 다당류의 제조방법에 관한 것이다.

종래의 산성 음료에서, 분산 안정제로는 펙틴(pectin) 또는 카복시메틸셀룰로스(carboxymethyl cellulose, CMC)가 사용되었다. 하지만, 이들은 음료의 점도를 높이는 문제점을 야기하였다. 이에 최근에는 상기의 문제점인 점도를 낮추기 위해, 다당류를 이용하여 산성 하에서 점도를 높이지 않는 분산 안정제를 개발하여 사용하고 있다.

다당류는 식물섬유소로 이용되는 동시에 식품기능제로서의 성질을 가지고 있어 여러 식품의 기능소재로 널리 이용되고 있는데, 그 예로 단백질 음료, 미반류, 면류 등이 있다. 또한, 다당류의 우수한 분산성은 미네랄의 분산에도 이용이 가능하여, 그림 도구나 도료 등의 안료, 시멘트의 분산제로서도 이용되고 있다.

한편, 산성 발효유 분야에서 분산 안정제로서의 다당류 사용은 저점도와 높은 안정화로 인해 독자적인 시장을 구축하고 있다. 아시아, 특히 한국과 중국에서 산성 발효유 시장은 크게 신장하고 있는데, 이에 맞춰 분산 안정제로 쓰일 수 있는 다당류 개발도 더욱 중요한 관심사가 되고 있다.

다당류는 자신이 가진 음전하에 의해 단백질 표면에 이온적 또는 소수적으로 결합하는데, 전기적 반발이나 입체 장해에 의해 단백질의 응집 또는 침전을 억제시킨다.

하지만, 기존의 다당류는 단백질 등전점 영역인 pH 4.2~4.8에서 충분한 분산 안정성을 나타내지 못하고 있다.

따라서, 단백질 등전점 영역인 pH 4.2~4.8에서도 안정적인 분산 안정제를 개발하고자 하는 노력이 필요한 실정이다.

대한민국 등록특허 제10-1056794호(발명의 명칭: 수용성 대두 식이섬유 제조 방법, 이에 의한 다당류 및 이들을 첨가한 식품)에는, 수용성 식이섬유 제조방법에 있어서, 두부제조 과정에서 발생하는 비지에서 효소로 비지 잔사를 마련하는 단계; 상기 비지 잔사를 물에 분산 용해시키고 수산화나트륨으로 pH 11~13으로 조정하고 50~65℃에서 1~3시간 동안 연화하는 단계; 상기 연화된 액에 염산을 첨가하여 pH 4~6으로 조정하여 110~130℃에서 1~3시간 동안 추출하는 단계; 상기 추출한 액을 수득하여 한외여과를 실시하여 단당류, 저분자 단백질, 색소성분 및 무기염류를 제거하는 단계;를 포함하는 수용성 대두 식이섬유의 제조방법에 대해 기재되어 있다. 대한민국 등록특허 제10-0226245호(발명의 명칭: 수용성 다당류 및 그의 제조방법)에는, 람노스, 푸코스, 아라비노스, 크실로스, 갈락토스, 글루코스 및 우론산으로 구성되고, 우로산의 에스테르화도가 50%이하인 수용성 다당류 및 그의 제조방법에 대해 기재되어 있다.

본 발명에서는 비지 및 키토산을 이용하여, 단백질 등전점 부근인 pH 4.2~4.8 영역에서 단백질을 안정화시킬 수 있는 수용성 다당류를 제조할 수 있는 방법을 개발하여 제공하고자 한다.

또한, 본 발명은 비지로부터 중성당(neutral sugar) 함량을 극대화시킬 수 있는 추출조건을 확립하여 제공하고자 한다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 비지(bean curd refuse)로부터 추출된 수용성 다당류에 가교제로서 키토산을 첨가하고, pH 10~14의 알칼리 조건하에서 가열하는 단계 (a); 상기 가열 후, 냉각하고 pH를 3~5로 조정한 후, 가교 반응에 참여하지 않은 여분의 키토산을 원심분리를 통해 제거하는 단계 (b); 상기 원심분리 후, 상층액의 pH를 6~8로 조정한 후, 에탄올수용액을 첨가하여 에탄올 침전을 수행하는 단계 (c); 및 상기 에탄올 침전 후, 원심분리하여 침전물을 수득하는 단계 (d);를 포함하는 것을 특징으로 하는 키토산으로 가교된 수용성 다당류의 제조방법을 제공한다.

본 발명의 키토산 가교 수용성 다당류의 제조방법에 의해 제조된 수용성 다당류는 기존의 비지 유래 다당류와 달리 단백질 등전점 부근인 pH 4.2~4.8 영역에서도 단백질의 분산 안정에 매우 우수한 효과를 발휘함이 본 발명을 통해 확인되었다.

이하에서는 본 발명의 키토산으로 가교된 수용성 다당류의 제조방법에 대해 더욱 자세히 설명하고자 한다.

<단계 (a): 수용성 다당류에 키토산 첨가 후, 가열>

본 단계 (a)는 비지(bean curd refuse)로부터 추출된 수용성 다당류에 가교제로서 키토산을 첨가하고, pH 10~14의 알칼리 조건하에서 가열하는 단계이다. 본 발명에서는 가교제로서 키토산을 사용하는데, 상기 조건을 통해 수용성 다당류와 키토산 사이의 가교결합이 유도된다. 이때, 본 단계 (a)의 가열은 바람직하게 70~90℃로 30~120분 동안 수행하는 것이 좋은데, 이 조건에서 가교결합이 극대화될 수 있기 때문이다. 또한, 본 단계 (a)는 필요 시 물을 더 첨가할 수도 있다.

한편, 본 단계 (a)의 비지로부터 추출된 수용성 다당류는, 바람직하게 비지에 무게비로 5~6배수의 물을 가하고, pH를 2~3으로 조정한 후, 가열하는 단계 (가); 상기 가열 후, 냉각하고 원심분리하여 침전물을 제거하고 상등액을 수득하는 단계 (나); 상기 상등액의 pH를 4~6으로 조정하고, 원심분리하여 침전물을 수득하는 단계 (다); 상기 침전물을 건조하여 건조물을 수득한 후, 정제수에 용해시키는 단계 (라); 및 상기 용해 후, 에탄올 수용액을 첨가하여 에탄올 침전을 수행하고 원심분리하는 단계 (마); 를 포함하는 과정으로부터 수득된 것을 사용하는 것이 좋다. 이와 같은 과정을 통해 수득된 수용성 다당류는 중성당 함량이 높아, 가교제와의 가교결합시 분산 안정력이 증가된다. 이하, 각 단계에 대해 하기에서 더욱 상세히 설명하고자 한다.

<단계 (가): 비지에 물 첨가 및 가열>

본 단계 (가)는 비지에 무게비로 5∼6배수의 물을 가하고, pH를 2.5∼4.5로 조정한 후, 가열하는 단계이다. 이와 같은 조건을 통해 가열함으로써 하기 과정을 통해 수득되는 수용성 다당류 내 중성당의 함량을 증대시킬 수 있다. 중성당 함량이 높아지면 가교결합시 분산 안정력이 증대될 수 있다.

이때, 상기 비지로부터 수용성 다당류의 수득과정에서 상기 단계 (가)의 pH 조정은 바람직하게 시트르산(citric acid)을 첨가하여 수행하는 것이 좋다. 본 발명에서 실험한 바에 의하면 염산 등의 강산을 사용하는 경우보다 유기산인 시트르산을 사용하는 경우, 중성당을 비롯한 저분자 다당류의 함량이 더 늘어남을 확인할 수 있었다.

또한, 상기 단계 (가)의 가열은, 바람직하게 100~120℃ 온도로 150~450분 동안 수행하는 것이 좋다. 이와 같은 조건에서 수용성 다당류 내 중성당 함량이 극대화될 수 있기 때문이다.

<단계 (나): 상등액 수득>

본 단계 (나)는 상기 가열 후, 냉각하고 원심분리하여 침전물을 제거하고, 상등액을 수득하는 단계이다. 본 단계를 통해 수용성 물질이 아닌 불필요 고형분이 제거된다. 이때, 원심분리는 바람직하게 6,000~10,000 rpm으로 20~30분 정도 수행하는 것이 좋다. 또한, 필요 시 필터 여과과정을 더 거칠 수도 있다.

<단계 (다): 침전물 수득>

본 단계 (다)는 상기 상등액 수득 후, 상등액의 pH를 4~6으로 조정하고, 원심분리하여 침전물을 수득하는 단계이다. pH를 조정함으로써 다당류만 침전시켜 수득하고, 단당류 등은 상등액을 통해 제거할수 있다.

<단계 (라): 건조 및 정제수 용해>

본 단계 (라)는 상기 침전물 수득 후, 침전물을 건조하여 건조물을 수득한 후, 정제수에 용해시키는 단계이다. 정제수는 수득된 건조물에 대해 무게비로 3~5배 정도 첨가되는 것이 좋다.

<단계 (마): 에탄올 침전 및 원심분리>

본 단계 (마)는 상기 용해 후, 에탄올 수용액을 첨가하여 에탄올 침전을 수행하고 원심분리하는 단계이다. 본 단계를 통해 본 발명의 수용성 다당류가 회수될 수 있다. 이때, 에탄올 수용액은 바람직하게 에탄올 함량이 90~99%인 것을 사용하는 것이 좋고, 상기 단계 (라)에서 정제수를 첨가하여 제조한 용액의 부피 대비 1.5~2.5배 정도의 양만큼 첨가하는 것이 좋다. 또한, 원심분리는 바람직하게 6,000~10,000 rpm으로 20~30분 정도 수행하는 것이 좋다.

<단계 (바): 침전물의 건조>

본 발명의 비지로부터 추출된 수용성 다당류의 수득과정은, 상기 단계 (가)~(마) 외에 본 단계 (바)를 더 포함할 수 있는데, 본 단계 (바)는 상기 단계 (마)의 원심분리 후, 건조하는 단계이다. 본 단계의 건조를 통해 수용성 다당류가 분말 형태로 회수될 수 있다.

<단계 (b): 미반응 키토산의 제거>

본 단계 (b)는 상기 단계 (a)의 가열 후, 냉각하고 pH를 3~5로 조정한 후, 가교 반응에 참여하지 않은 여분의 키토산을 원심분리를 통해 제거하는 단계이다. 본 단계를 통해 반응에 참여하지 않은 키토산이 제거된다. 이때, 본 단계 (b)의 pH 조정은 바람직하게 시트르산으로 수행하는 것이 좋다. 시트르산을 사용함으로써 pH 변화의 충격을 최소화하여 반응액에 안정성을 부여할 수 있기 때문이다.

<단계 (c): 에탄올 침전>

본 단계 (c)는 상기 단계 (b)의 원심분리 후, 상층액의 pH를 6~8로 조절한 후, 에탄올수용액을 첨가하여 에탄올 침전을 수행하는 단계이다. 이를 통해 키토산으로 가교결합된 수용성 다당류가 침전된다. 이때, 에탄올 수용액은 바람직하게 에탄올 순도 90~99%의 것을 사용하는 것이 좋고, 상층액에 대해 부피비로 6~7배 정도 첨가되는 것이 좋다.

<단계 (d): 침전물의 수득>

본 단계 (d)는 상기 단계 (c)의 에탄올 침전 후, 원심분리하여 침전물을 수득하는 단계이다. 원심분리를 통해 침전된 키토산 가교 수용성 다당류를 회수할 수 있다. 원심분리는 바람직하게 6,000~10,000 rpm으로 20~30분 정도 수행하는 것이 좋다.

<단계 (e): 침전물의 세척>

본 발명은 상기 단계 (a)~(d)외에 바람직하게 본 단계 (e)를 더 포함할 수 있는데, 본 단계 (e)는 상기 단계 (d)의 침전물 수득 후, 단계 (d)로부터 수득된 침전물에 에탄올 수용액을 첨가하여 세척하는 단계이다. 이를 통해 본 발명 키토산 가교 수용성 다당류의 순도를 높일 수 있다. 이때, 에탄올 수용액은 바람직하게 에탄올 순도 50~70%의 것을 사용하는 것이 좋다.

<단계 (f): 침전물의 재수득>

본 발명은 상기 단계 (e) 후, 바람직하게 본 단계 (f)를 더 포함할 수 있는데, 본 단계 (f)는 상기 단계 (e)의 세척 후, 원심분리하여 침전물을 수득하는 단계이다. 원심분리는 바람직하게 6,000~10,000 rpm으로 20~30분 정도 수행하는 것이 좋다.

<단계 (g): 침전물의 건조>

본 발명은 상기 단계 (f) 후, 바람직하게 본 단계 (g)를 더 포함할 수 있는데, 본 단계 (g)는 상기 (f)의 침전물 수득 후, 상기 침전물을 건조시키는 단계이다. 본 단계를 통해 본 발명의 키토산 가교 수용성 다당류는 수분이 제거된 분말 형태로 제조된다. 건조는 바람직하게 50~70℃ 온도로 10~20분 정도 수행되는 것이 좋다.

본 발명의 제조방법에 의해 제조된 키토산으로 가교결합된 수용성 다당류는 단백질 등전점 부근인 pH 4.2~4.8 영역에서 단백질의 분산 안정에 매우 우수한 효과를 발휘하여 단백질 침전을 억제할 수 있다.

따라서, 본 발명에서 제조된 키토산 가교 수용성 다당류는 단백질 함유 음료 또는 식품에 사용될 수 있다.

도 1은 수용성 다당류의 추출시, pH 조건에 따른 저분자 다당류의 함량을 나타낸 것이다.
도 2는 수용성 다당류의 추출시, 추출시간에 따른 다당류의 함량을 나타낸 것이다.
도 3은 수용성 다당류의 추출과정을 나타낸 것이다.
도 4는 수용성 다당류에 키토산을 첨가하여 키토산이 가교된 수용성 다당류를 제조하는 과정을 나타낸 것이다.
도 5는 단백질 발효유를 제조하는 과정을 나타낸 것이다.
도 6은 본 발명에서 제조한 키토산 가교 수용성 다당류의 단백질 분산 안정 효과를 보여주는 사진이다.

이하, 본 발명의 구성을 하기 실시예를 통해 구체적으로 설명하고자 한다. 다만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니고, 그와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.

[ 실험예 1: 중성당 함량을 극대화시키는 수용성 다당류의 추출조건 탐색]

본 실험예에서는 표면반응법(response surface method, RSM)을 사용하여 추출 용매(증류수)의 양과 추출 시간에 따라 비지로부터 추출되는 중성당(neutral sugar) 함량을 정량 분석하고자 하였다.

이때, 비지는 50 g 사용하였으며, 각 용매의 양과 추출 시간에 따라 측정된 총 중성당(neutral sugar)의 농도는 하기 표 1에 나타내었다.

Run	증류수 (g)	추출시간 (min)	총 중성당 (ppm)
1	250.000	720.000	2268.08000
2	187.500	435.000	1546.88000
3	187.500	435.000	2366.57000
4	125.000	150.000	1454.08000
5	187.500	435.000	2298.57000
6	275.888	435.000	2610.07000
7	187.500	435.000	2538.25000
8	187.500	435.000	1914.02000
9	125.000	720.000	1492.95000
10	250.000	150.000	978.88300
11	187.500	31.949	810.10900
12	99.112	435.000	1262.20000
13	187.500	838.051	1561.93000

실험결과, 비지에 무게비로 5.5배의 증류수를 가하고, 480분 동안 추출을 수행하였을 경우, 추출되는 중성당 함량이 가장 높은 것으로 나타났다.

[ 실시예 1: 시트르산( citric acid)을 사용한 수용성 다당류의 추출]

본 실시예에서는 시트르산(citric acid)을 사용하여 수용성 다당류를 추출하고자 하였다.

비지(bean curd refuse)에 무게비로 5.5배수의 물을 가하고, 시트르산(citric acid)을 첨가하여 각각 pH가 각각 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5가 되게 하였다. 이후, 이와 같이 다양한 산성조건을 갖는 각기 다른 6개의 샘플을 105℃ 온도로, 480분 동안 가열하여 수용성 다당류를 추출하였다.

[ 비교예 1: 염산( HCl )을 사용한 수용성 다당류의 추출]

본 비교예에서는 염산(HCl)을 사용하여 수용성 다당류를 추출하고자 하였다.

비지(bean curd refuse)에 무게비로 5.5배수의 물을 가하고, 염산(HCl)을 첨가하여 pH를 각각 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5가 되게 하였다. 이후, 이와 같이 다양한 산성조건을 갖는 각기 다른 6개의 샘플을 105℃ 온도로, 480분 동안 가열하여 수용성 다당류를 추출하였다.

[ 실험예 2: pH에 따른 수용성 다당류의 함량 분석]

본 실험예에서는 상기 실시예 1과 비교예 1에 대해 수용성 다당류 내 저분자 다당류의 함량을 고속액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography, HPLC)를 사용하여 분석하고자 하였다.

실험결과, pH 5를 제외하고는 pH가 낮아질수록 저분자 다당류의 함량이 높아지는 것으로 나타났다. 또한, 염산을 사용한 경우보다, 시트르산을 사용한 경우 저분자 다당류의 함량이 월등히 높은 것을 확인할 수 있었다 (도 1). 도 1은 추출조건 중 pH 조건에 따른 저분자 다당류의 함량을 나타낸 그래프이다.

따라서, 하기 실시예에서는 수용성 다당류의 효과적인 추출을 위해 시트르산을 사용하였다.

[실험예 3: 추출시간에 따른 수용성 다당류의 함량 분석]

본 실험예에서는 상기 실시예 1에 대해 추출시간에 따른 다당류의 함량을 분석하고자 하였다.

실험결과, 추출시간이 경과함에 따라 총다당류의 함량이 증가함에도 불구하고, 저분자 다당류 (MW 107~6.1kDa)의 함량은 200분 이후 크게 변함 없음을 알 수 있고, 고분자 다당류 (MW 2,350~107kDa)의 함량은 증가함을 알 수 있었다 (도 2). 도 2는 수용성 다당류의 추출시, 추출시간에 따른 다당류의 함량을 나타낸 것이다.

[ 실시예 2: 키토산으로 가교된 수용성 다당류의 제조]

본 실시예에서는 상기 실시예 1에서 확인된 조건 (시트르산 사용 및 낮은 pH)을 사용하여, 중성당 함량이 높고, 분산 안정성이 높은 수용성 다당류를 추출하고, 여기에 가교제로서 키토산을 첨가하여, 키토산으로 가교된 수용성 다당류를 최종 제조하고자 하였다.

먼저, 비지(bean curd refuse) 50 g에 무게비로 5.5배수의 물을 가하고, 시트르산(citric acid)을 첨가하여 pH가 2.5가 되게 하였다. 이러한 산성조건 하에서 105℃ 온도로, 480분 동안 가열하여 수용성 다당류를 추출하였다. 그 후, 추출물을 냉각하였다. 냉각 후, 8000 rpm에서 25분 동안 원심분리하고, 0.6 ㎛의 필터로 고형분을 제거하였다. 이후, 고형분이 제거된 추출물을 20% NaOH를 사용하여, pH 5의 산성으로 조절한 후, 건조하였다. 건조된 추출물을 물에 용해시킨 후, 96% 에탄올로 침전하였다. 이후, 8000 rpm에서 25분 동안 원심분리하고, 고형분을 획득하였다. 획득된 고형분을 60℃에서 24시간 건조시킨 후, 분쇄하여 본 발명의 수용성 다당류를 수득하였다 (도 3 참조). 도 3은 수용성 다당류의 추출과정을 나타낸 것이다.

한편, 상기 수득한 수용성 다당류 10 g에 정제수를 무게비로 8배수의 정제수를 가하여 혼합한 후, 가교제로 키토산을 0.135 g 첨가하였다. 첨가 후, 20%의 NaOH를 사용하여 pH 12로 맞춘 후, 80℃에서 60분 동안 가열하여 반응시켰다.

반응 후, 반응물을 냉각하고, 30%의 시트르산(citric acid)을 사용하여 pH를 4.5로 조절하였다. pH 조절 후, 가교 반응에 참여하지 않은 여분의 키토산은 8000 rpm에서 25분 동안 원심분리하여 제거하였다.

그 후, 상층액의 pH를 7로 조절한 후, 순도 96%의 에탄올을 무게비로 수용성 다당류의 6배수만큼 첨가하여 침전시키고, 8000 rpm에서 25분 동안 원심분리하여 가교결합된 수용성 다당류를 회수하였다.

가교결합된 다당류의 회수 후, 순도 60%의 에탄올로 수용성 다당류를 세척하고, 8000 rpm에서 25분 동안 원심분리하여 고형분을 수득하였다. 이후, 0.3 ㎛ 필터로 고형분을 걸러내고, 60℃에서 15시간 동안 건조 및 분쇄하여 키토산으로 가교된 수용성 다당류를 최종 제조하였다 (도 4 참조). 도 4는 키토산으로 가교된 수용성 다당류를 제조하는 과정을 나타낸 것이다.

[ 비교예 2: 트리폴리인산염(tripolyphosphate, TPP)이 가교된 수용성 다당류의 제조]

본 비교예에서는 상기 실시예 2에서 가교제로 키토산 대신 트리폴리인산염(TPP)을 사용하여 수용성 다당류를 제조하였다.

[ 실험예 4: 키토산으로 가교된 수용성 다당류의 분산 효과 평가]

본 실험예에서는 상기 실시예 2에서 제조된 '키토산으로 가교된 수용성 다당류'를 단백질이 함유된 음료에 첨가하여 단백질 분산 효과를 평가하고자 하였다.

실험을 위해 먼저 단백질이 함유된 발효유를 제조하였다. 탈지분유 21 g에 물 79 g을 혼합하여 95℃의 온도에서 15분 동안 가열하였다. 가열 후, 40℃ 온도에서 냉각하고, 시판되는 발효유 80 g을 첨가한 후, 37℃에서 12시간 동안 발효하여 pH 4 상태의 발효유를 제조하였다 (도 5 참조). 도 5는 단백질 발효유를 제조하는 과정을 나타낸 것이다.

한편, 상기에서 제조된 발효유에 물, 그래뉼당 및 본 발명의 '키토산으로 가교된 수용성 다당류'를 하기 표 2의 비율대로 첨가하였다. 이후, 3500 rpm에서 2분 동안 교반하고, 10% 시트르산(citric acid)으로 pH를 4.55로 조정하였다. 그 후, 3500 rpm에서 5분 동안 교반하고, 냉장보관 상태로 13일 동안 단백질을 침전시켜 그 결과를 관찰하였다.

	성분	함량
1	2% 키토산 가교 수용성 다당류 용액	20중량%
2	물	52중량%
3	50% 그래뉼당 용액	14중량%
4	21% 발효유	14중량%
총계		100

이때, 대조군으로는 대두다당류를 첨가한 발효유 (대조군 1) 및 상기 비교예 2에서 제조한 'TPP 가교 수용성 다당류'를 첨가한 발효유 (대조군 2)를 사용하였다.

실험결과, 13일차에서, 대두다당류가 단순 첨가된 대조군 1은 많은 양의 단백질 침전이 일어났다. 'TPP 가교 수용된 다당류'가 첨가된 대조군 2는 약 1.2 cm의 침전물 생성이 관찰되었다.

하지만, 본 발명의 키토산으로 가교된 수용성 다당류(실시예 2)를 첨가한 경우, 단백질 침전이 거의 나타나지 않는 것으로 관찰되었다 (도 6). 도 6은 본 발명의 키토산으로 가교된 수용성 다당류의 분산 안정 효과를 보여주는 사진이다.

상기와 같은 결과로부터, 본 발명의 키토산 가교 수용성 다당류는 단백질의 등전점인 pH 4.2~4.8에서 단백질을 안정적으로 분산시키는 것으로 확인할 수 있었다.

Claims (9)

1. 비지(bean curd refuse)로부터 추출된 수용성 다당류에 가교제로서 키토산을 첨가하고, pH 10∼14의 알칼리 조건하에서 가열하는 단계 (a);
   상기 가열 후, 냉각하고 pH를 3∼5로 조정한 후, 가교 반응에 참여하지 않은 여분의 키토산을 원심분리를 통해 제거하는 단계 (b);
   상기 원심분리 후, 상층액의 pH를 6∼8로 조정한 후, 에탄올수용액을 첨가하여 에탄 올 침전을 수행하는 단계 (c); 및
   상기 에탄올 침전 후, 원심분리하여 침전물을 수득하는 단계 (d);를 포함하되,
   상기 비지로부터 추출된 수용성 다당류는,
   비지에 무게비로 5∼6배수의 물을 가하고, 시트르산(citric acid)을 첨가하여 pH를 2.5∼4.5로 조정한 후, 가열하는 단계 (가);
   상기 가열 후, 냉각하고 원심분리하여 침전물을 제거하고 상등액을 수득하는 단계 (나);
   상기 상등액의 pH를 4∼6으로 조정하고, 원심분리하여 침전물을 수득하는 단계 (다);
   상기 침전물을 건조하여 건조물을 수득한 후, 정제수에 용해시키는 단계 (라); 및
   상기 용해 후, 에탄올수용액을 첨가하여 에탄올 침전을 수행하고 원심분리하는 단계 (마);를 포함하는 과정으로부터 수득된 것을 특징으로 하는 키토산으로 가교된 수용성 다당류의 제조방법.
   
2. 제1항에 있어서,
   상기 단계 (d)의 침전물 수득 후,
   단계 (d)로부터 수득된 침전물에 에탄올 수용액을 첨가하여 세척하는 단계 (e); 및
   상기 세척 후, 원심분리하여 침전물을 수득하는 단계 (f); 를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 키토산으로 가교된 수용성 다당류의 제조방법.
   
3. 제2항에 있어서,
   상기 단계 (f)의 침전물 수득 후,
   상기 침전물을 건조시키는 단계 (g)를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 키토산으로 가교된 수용성 다당류의 제조방법.
   
4. 제1항에 있어서,
   상기 단계 (a)의 가열은,
   70~90℃로 30~120분 동안 수행하는 것을 특징으로 하는 키토산으로 가교된 수용성 다당류의 제조방법.
   
5. 제1항에 있어서,
   단계 (b)의 pH 조정은,
   시트르산(citric acid)으로 수행하는 것을 특징으로 하는 키토산으로 가교된 수용성 다당류의 제조방법.
   
6. 삭제
7. 제1항에 있어서,
   상기 단계 (마)의 원심분리 후,
   건조하는 단계 (바);를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 키토산으로 가교된 수용성 다당류의 제조방법.
   
8. 삭제
9. 제1항에 있어서,
   상기 단계 (가)의 가열은,
   100∼120℃ 온도로 150∼450분 동안 수행하는 것을 특징으로 하는 키토산으로 가교된 수용성 다당류의 제조방법.

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