KR101706598B1 - 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제를 유효성분으로 포함하는 골 질환 및 관절 질환의 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제를 유효성분으로 포함하는 골 질환 및 관절 질환의 예방 또는 치료용 조성물 Download PDF

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윤현주
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Abstract

본 발명은 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제 및 이의 제조방법과 상기 복합제를 유효성분으로 포함하는 골 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 및 골 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물과 사료 첨가제 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제는 수용성 유기물질의 손실이 최소화되고 칼슘 흡수율을 향상시키는 효과가 우수하며, 월등한 골형성 및 골조직 재생 효능을 나타낼 수 있다.

Description

수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제를 유효성분으로 포함하는 골 질환 및 관절 질환의 예방 또는 치료용 조성물{Composition comprising water-soluble fructooligosaccharide calcium for preventing or treating bone disease and joint disease}
본 발명은 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제 및 이의 제조방법과 상기 복합제를 유효성분으로 포함하는 골 질환 및 관절 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 및 골 질환 및 관절 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물과 사료 첨가제 조성물에 관한 것이다.
골은 콜라겐과 같은 여러 가지 단백질과 무기질이 포함된 다양한 비단백질 성분으로 구성되어 있는 단단한 장기이다. 골은 인체의 형태 유지 및 몸을 지탱하고, 무기질을 다른 연조직에 제공하는 무기질 저장고 기능과 더불어 연조직 장기를 보호하는 역할을 수행한다. 골은 다른 기관과 마찬가지로 생성과 파괴가 반복되어 리모델링이 일어나는 기관이다. 골 항상성은 오래된 골을 제거하고 더불어 새로운 골 형성으로 유지되며, 건강한 삶을 유지하는데 필수요건이다.
골 질환 및 관절 질환과 칼슘과의 연관성은 이미 널리 알려져 있으며, 골 질환 및 관절 질환을 예방하기 위해 일상생활에서의 칼슘 섭취가 중요한 방법으로 주목받고 있으나, 실제 그 섭취량은 권장량의 60% 수준에 그치고 있다(비특허문헌 1 참조). 특히 칼슘은 섭취 후 평균 30% 정도만이 흡수되며, 나머지 70% 가량은 배출되어 흡수가 어려운 영양소 중 하나로서, 골 건강을 위해서는 적정량의 칼슘 섭취도 중요하지만 얼마나 효율적으로 흡수되는가 또한 매우 중요한 요인이다.
한편, 진주분말(Pearl Powder)은 칼슘 함량이 약 90%이며, 각종 미네랄이 풍부하고, 칼슘의 체내 흡수를 돕는 다량의 마그네슘을 함유하고 있으나, 납과 같은 중금속은 함유되어있지 않아 우수한 칼슘제 개발의 소재로 알려져 있다. 또한, 담수 진주 분말에는 기존의 패각칼슘이나 해조칼슘과는 달리 폴리펩타이드, 비타민, 아미노산 등의 유기물질이 함유되어 있어 유기물질 유래의 다양한 기능성을 가진 소재로서 주목받고 있다(비특허문헌 2 참조). 그러나, 진주 분말은 물에 대한 용해도가 매우 낮아서 진주 분말 자체를 섭취하여 생리활성을 기대하기 어려우며, 특히 칼슘이나 유기성분들이 물에 잘 녹지 않기 때문에 실제 사용시 진주 분말의 기능성을 최대한 활용할 수 없다. 이에 따라, 진주 분말 유래의 칼슘 및 유기물질의 활성이 최대한 보존되면서 물에 잘 녹는 수용성의 진주 분말을 제조하고, 진주 분말 유래의 칼슘과 미네랄을 이온화하는 방법이 요구되고 있는 실정이다.
보건산업진흥원, 2002년도 계절별 국민영양조사 II. Tong et al. The anti-aging effect of pearl oyster shell powder (POSP). J Tradit Chin Med. 1988, 247-250. 건강기능성 식품의 국내외 개발 및 연구동향, 식품기술, 2005, 제18권 제4호, 69-87.
이러한 배경하에서, 본 발명자들은 진주 분말에 포함된 수용성 유기물질의 손실을 최소화하면서 칼슘의 이온화를 유도하고, 칼슘의 흡수를 용이하게 하는 방법을 개발하기 위해 예의 연구 노력한 결과, 산성 용액 중에서 진주 분말 및 프락토올리고당을 반응시킴으로써, 진주 분말 유래의 이온화칼슘과 프락토올리고당이 결합된 수용성의 복합제가 제조가능하며, 상기 복합제가 골형성 또는 골조직 재생 효과를 나타냄을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제를 유효성분으로 포함하는 골 질환 및 관절 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제의 제조방법 및 이에 의해 제조된 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제 원료를 제공하는 것이다.
그러나, 본원이 해결하고자 하는 과제는 이상에서 언급한 과제로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 제1양태는 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제를 유효성분으로 포함하는 골 질환 및 관절 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 제2양태는 진주 분말 및 프락토올리고당을 산 용액 중에서 혼합하고 반응시키는 단계를 포함하는 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 제3양태는 진주 분말 및 프락토올리고당을 산 용액 중에서 혼합하고 반응시킴으로써 제조된 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제를 제공한다.
본 발명의 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제는 골조직 재생 및 골형성 분화를 촉진시키는 신규한 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제인 것을 특징으로 한다.
본원 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함" 한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.
본원 명세서 전체에서 사용되는 정도의 용어 "약", "실질적으로" 등은 언급된 의미에 고유한 제조 및 물질 허용오차가 제시될 때 그 수치에서 또는 그 수치에 근접한 의미로 사용되고, 본원의 이해를 돕기 위해 정확하거나 절대적인 수치가 언급된 개시 내용을 비양심적인 침해자가 부당하게 이용하는 것을 방지하기 위해 사용된다. 본원 명세서 전체에서 사용되는 정도의 용어 "~(하는) 단계" 또는 "~의 단계"는 "~ 를 위한 단계"를 의미하지 않는다.
본원 명세서 전체에서, “A 및/또는 B”의 용어는 "A 또는 B, 또는 A 및 B"를 의미한다.
본원 명세서 전체에서, 마쿠시 형식의 표현에 포함된 "이들의 조합"의 용어는 마쿠시 형식의 표현에 기재된 구성 요소들로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 혼합 또는 조합을 의미하는 것으로서, 상기 구성 요소들로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 포함하는 것을 의미한다.
이하, 본 발명을 자세히 설명한다.
본원의 일 구현예에 따르면, 산성 용액 내에서 진주 분말 및 프락토올리고당을 혼합 및 교반하는 제1단계; 및 상기 혼합물을 여과하는 제2단계를 포함하는, 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제의 제조방법을 제공할 수 있다.
본원의 일 구현예에 따르면, 상기 진주 분말은 담수진주 분말일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 따르면, 상기 진주 분말의 평균 입경은 약 10 nm 내지 약 500 nm일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 상기 진주 분말의 평균 입경은 약 50 nm 내지 약 500 nm, 약 100 nm 내지 약 500 nm, 약 300 nm 내지 약 500 nm, 약 10 nm 내지 약 300 nm, 약 10 nm 내지 약 100 nm, 약 10 nm 내지 약 50 nm, 약 90 nm 내지 약 110 nm, 또는 약 100 nm일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 따르면, 상기 산성 용액은 약 10% 내지 약 30% 초산 용액일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 상기 산성 용액은 약 10% 내지 약 30%, 약 20% 내지 약 30%, 약 10% 내지 약 20%, 약 10% 내지 약 15%, 또는 약 10%의 초산 용액일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 따르면, 상기 진주 분말 및 프락토올리고당은 약 10:1 내지 약 1:10의 중량비로 혼합될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 상기 진주 분말 및 프락토올리고당은 약 1:1의 중량비로 혼합될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 따르면, 상기 산성 용액 내에서 진주 분말 및 프락토올리고당을 혼합 및 교반하는 제1단계는, 산성 용액에 진주 분말 및 프락토올리고당을 투입하고 교반하는 과정을 1 회 내지 20 회 반복하는 것을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 따르면, 상기 혼합 및 교반은 약 30℃ 내지 약 80℃의 온도에서 수행될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 상기 혼합 및 교반은 약 30℃ 내지 약 60℃, 약 30℃ 내지 약 50℃, 약 50℃ 내지 약 80℃, 약 60℃ 내지 약 80℃, 또는 약 60℃의 온도에서 수행될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 따르면, 상기 방법은 상기 혼합물을 여과 후에 건조하는 것을 더 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 따르면, 본원의 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제의 제조방법에 의해 제조된 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제를 유효성분으로 포함하는, 골 질환 및 관절 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공할 수 있다.
본원의 일 구현예에 따르면, 상기 골 질환 및 관절 질환은 퇴행성 관절염, 류마티스성 관절염, 변형성 관절염, 골연화증, 골다공증, 구루병 및 페이젯병(Paget's disease)으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 따르면, 본원의 약학적 조성물은 골형성 및 골조직 재생 중 하나 이상의 효과를 가지는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 따르면, 본원의 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제의 제조방법에 의해 제조된 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제를 유효성분으로 포함하는, 골 질환 및 관절 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공할 수 있다.
본원의 일 구현예에 따르면, 본원의 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제의 제조방법에 의해 제조된 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제를 유효성분으로 포함하는, 골 질환 및 관절 질환의 예방 또는 개선용 사료첨가제 조성물을 제공할 수 있다.
진주 분말은 당업계에서 통상적으로 사용되는 분쇄 공정 등을 통하여 분쇄되어 제조되는 것일 수 있고, 필요에 따라 살균 공정, 전처리 공정 및/또는 분급 공정 등이 추가적으로 수행될 수 있다. 예를 들어, 본 발명에서 사용하는 진주 분말은 담수 진주를 10 내지 500 nm 크기의 입자로 분쇄한 식용 진주 분말로, 99%이상이 탄산칼슘이며, 각종 미네랄이 풍부하고, 칼슘의 체내 흡수를 돕는 다량의 마그네슘을 함유하고 있으나, 납과 같은 중금속은 함유되어있지 않아 우수한 칼슘제 개발의 소재로 알려져 있다(표 1; ICP 원자방출분광기에 의한 담수 진주중의 칼슘 함량). 기존의 패각칼슘이나 해조칼슘과는 달리 담수 진주 분말에는 콘키올린(conchiolin) 등의 폴리펩타이드가 풍부하여 다른 칼슘원에 비하여 수용성의 칼슘 제조가 용이하며, 폴리펩타이드나 아미노산 유래의 새로운 기능성이 기대될 수 있다. 그러나, 상기 진주 분말 자체는 물에 대한 용해도(0.03 mg/mL, 0.003%)가 매우 낮아서 수용액으로 제조하여야 하며, 이를 섭취하여 생리 활성을 기대하기 어려운 점이 있다.
담수 진주
원소 농도 (단위 : ppm)
As 0.08
Ca 394900
Fe 9.62
K 38.53
Li 0.024
Mg 49.52
Mn 692.51
Na 2318.80
Pb 불검출
Sr 484.89
Zn 0.027
본원의 바람직한 구현예에서, 진주 분말과 프락토올리고당을 산 용액중에서 혼합하고 반응시킴으로써, 진주 분말 유래의 이온화칼슘과 프락토올리고당이 결합된 형태의 수용성을 나타내는 복합제를 제조할 수 있으며, 이를 통해 진주 분말 중에 포함된 다량의 칼슘 흡수가 용이할 뿐만 아니라 상기 복합제가 골 형성 및 골조직 재생을 촉진시키는 효능을 나타냄을 발견하였다. 본 발명은 이에 기초한다.
본 발명은 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제를 유효성분으로 포함하는 골 질환 및 관절 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제는 진주 분말로부터 유래된 이온화칼슘과 프락토올리고당이 결합하여 형성될 수 있으며, 상기 이온화칼슘은 진주 분말의 산 처리에 의해 생성될 수 있다. 예를 들어, 상기 산 처리는 유기산 용액을 이용하여 수행될 수 있으며, 예를 들어 식용 빙초산, 젖산, 주석산, 구연산으로부터 선택되는 하나 이상의 유기산을 사용할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제는 수용성을 나타내어 생체이용률이 향상됨으로 인해 다량의 칼슘 흡수를 용이하게 할 수 있다. 또한, 본 발명의 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제는 골화(칼슘의 침착) 및 연골 조직의 형성을 촉진하며, 조골세포의 기능을 활성화시킬 수 있다(도 5 내지 도 7). 따라서, 본 발명에 따른 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제는 골 질환 및 관절 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로서 의약품, 의약부외품에 유용하게 이용될 수 있다.
본 발명의 용어 "예방"이란 본 발명의 조성물의 투여로 골 질환 및 관절 질환의 발생 및 확산을 억제시키거나 지연시키는 모든 행위를 의미하고, "치료"란 본 발명의 조성물의 투여로 골 질환 및 관절 질환의 증세가 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 약학적 조성물에 의해 예방 또는 치료될 수 있는 골 질환 및 관절 질환은 퇴행성 관절염, 류마티스성 관절염, 변형성 관절염, 골연화증, 골다공증, 구루병 및 페이젯병(Paget's disease) 등을 포함하며, 골형성 및/또는 연골 생성 촉진능으로 인해 치료되거나 개선될 수 있는 것으로 당업자에게 알려진 골 질환 및 관절 질환을 포함한다. 특히, 본 발명의 약학적 조성물은 골형성 및 연골조직의 재생을 촉진시켜 골 질환 및 관절 질환의 예방 또는 치료에 효과적으로 사용될 수 있다.
상기 약학적 조성물은, 이에 한정되는 것은 아니지만 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 파우더, 젤, 연고, 크림 등의 외용제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 본 발명의 상기 조성물은 약제의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 항생제, 담체, 부형제 및/또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물은 각각의 사용 목적에 맞게 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁제, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구 제형, 멸균 주사 용액의 주사제 등 다양한 형태로 제형화하여 사용할 수 있으며, 경구 투여하거나 정맥내, 복강내, 피하, 직장, 국소 투여 등을 포함한 다양한 경로를 통해 투여될 수 있다. 이러한 조성물에 포함될 수 있는 적합한 담체, 부형제 또는 희석제의 예로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸셀룰로즈, 미정질셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등을 들 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 충전제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제, 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.
경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 상기 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면 전분, 탄산칼슘, 수크로스, 락토즈, 젤라틴 등을 혼합하여 제형화한다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크와 같은 윤활제가 사용될 수 있다.
경구용 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 예시될 수 있으며, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 액체 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액제, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔, 마크로골, 트윈61. 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다. 한편, 주사제에는 용해제, 등장화제, 현탁화제, 유화제, 안정화제, 방부제 등과 같은 종래의 첨가제가 포함될 수 있다.
본 발명의 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다.
본 발명의 용어 "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미하며, 유효용량 수준은 대상의 건강상태, 골 질환 및 관절 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
구체적으로, 본 발명의 조성물에서 복합제의 유효량은 대상의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로는 체중 kg 당 1 내지 10 mg, 바람직하게는 1 내지 5 mg을 매일 또는 격일 투여하거나 1일 1 내지 3회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나, 투여 경로, 질병의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
또한, 본 발명은 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제를 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물을 이를 필요로 하는 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 골 질환 및 관절 질환을 예방 또는 치료하는 방법을 제공한다.
본 발명의 용어 "개체"란, 상기 골 질환 및 관절 질환이 발병하였거나 발병할 수 있는 인간을 포함한 원숭이, 소, 말, 양, 돼지, 닭, 고양이, 개, 마우스, 랫트, 토끼 또는 기니아피그를 포함한 모든 동물을 의미하고 본 발명의 약학적 조성물을 개체에게 투여함으로써 상기 질환을 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 기존의 치료제와 병행하여 투여될 수 있다.
본 발명의 용어 "투여"란, 임의의 적절한 방법으로 대상에게 소정의 물질을 제공하는 것을 의미하며, 본 발명의 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있다. 예를 들어, 상기 투여 경로는 복강내 투여, 정맥내 투여, 근육내 투여, 피하 투여, 피내 투여, 경구 투여, 국소 투여 및 비내 투여로부터 선택될 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 또한, 본 발명의 약학적 조성물은 활성 물질이 표적 세포로 이동할 수 있는 임의의 장치에 의해 투여될 수도 있다. 바람직한 투여방식 및 제제는 정맥 주사제, 피하 주사제, 피내 주사제, 근육 주사제, 점적 주사제를 포함할 수 있다. 주사제는 생리식염액, 링겔액 등의 수성 용제, 식물유, 고급 지방산 에스테르(예, 올레인산에칠 등), 알코올 류(예, 에탄올, 벤질알코올, 프로필렌글리콜, 글리세린 등) 등의 비수성 용제 등을 이용하여 제조할 수 있고, 변질 방지를 위한 안정화제(예, 아스코르빈산, 아황산수소나트륨, 피로아황산나트륨, BHA, 토코페롤, EDTA 등), 유화제, pH 조절을 위한 완충제, 미생물 발육을 저지하기 위한 보존제(예, 질산페닐수은, 치메로살, 염화벤잘코늄, 페놀, 크레솔, 벤질알코올 등) 등의 약학적 담체를 포함할 수 있다.
다른 하나의 양태로서, 본 발명은 산성 용액 내에서 진주 분말 및 프락토올리고당을 혼합 및 교반하는 제1단계; 및 상기 혼합물을 여과하는 제2단계를 포함하는 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제의 제조방법을 제공한다.
구체적으로, 본원의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 진주 분말과 프락토올리고당의 반응은 산을 포함하는 수용액에 상기 반응물을 10:1 내지 1:10의 중량비로 혼합하고 30 내지 80℃에서 교반하여 수행할 수 있다. 상기 제1단계는, 산성 용액에 진주 분말 및 프락토올리고당을 투입하고 교반하는 과정을 1 회 내지 20 회 반복할 수 있다.
또한, 상기 진주 분말은 10 내지 500 nm 크기의 입자로 분쇄된 나노 단위의 진주 분말일 수 있으며, 분말의 크기가 크면, 초산에 의한 이온화 반응이 너무 약하므로, 이온화하기 어려울 수 있다. 상기 산으로는 빙초산을 사용할 수 있으나, 이에 제한되지 않으며, 10% 내지 30%의 초산 수용액으로 제조하여 사용할 수 있다. 상기 10% 내지 30%의 초산 용액을 이용하면, 사용된 진주 분말 내의 탄산칼슘은 칼슘이온으로 물에 녹게 되며, 그 과정에 진주 분말에 결합되어 있던 수용성 유기 물질들도 같이 이온화된 진주 분말 용액에 녹아 나오게 만들 수 있으며, 이들 유기성분들에 의한 기능성도 얻을 수 있다. 또한, 상기 산 용액에 의해 생성된 이온화칼슘과 프락토올리고당이 결합하여 복합제를 형성할 수 있으며, 상기 수용액 상에 용해되어 있는 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제는 여과하고 건조한 후 분말화하는 단계에 의해 분말로 제조할 수 있다.
본 발명에 사용되는 프락토올리고당은 설탕의 과당(fructose) 잔기에 1-3개의 과당이 결합된 당류의 혼합물로서, 장내 유익 세균인 비피더스균의 증식을 돕고 장내유해세균을 억제하는 효과와 더불어 칼슘 흡수를 촉진시키는 효능을 나타내는 것으로 알려져 있다(비특허문헌 3 참조). 따라서, 본 발명의 제조방법에 의하여 제조된 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제는 수용성의 특성에 의해 생체이용률이 향상될 수 있으며, 또한 칼슘 흡수율이 증진되어 골형성 및 골조직 재생을 증진시키는 효과를 나타낼 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서, 상기 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제는 이온화칼슘과 프락토올리고당의 단순 혼합제에 비해 보다 우수한 골화 및 연골조직 생성 효과를 나타냄을 확인하였으며, 이를 통해 이온화칼슘과 프락토올리고당이 복합제를 형성함으로써 월등한 골형성 및 골조직 생성 효능을 나타낼 수 있음을 확인하였다(도 6).
또 다른 하나의 양태로서, 본 발명은 진주 분말 및 프락토올리고당을 산 용액 중에서 혼합하고 반응시킴으로써 제조된 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제를 제공한다. 상기 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제는 골형성 및 골조직 재생 효과가 우수하게 나타나므로, 골 질환 및 관절 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물의 유효성분으로 포함될 수 있다.
상기 식품 조성물은 유효성분 이외에 식품학적으로 허용가능한 식품보조첨가제를 포함할 수 있다. 본 발명에서 사용되는 용어 "식품보조첨가제"란 식품에 보조적으로 첨가될 수 있는 구성요소를 의미하며, 각 제형의 건강기능식품을 제조하는데 첨가되는 것으로서 당업자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 식품보조첨가제의 예로는 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등이 포함되지만, 상기 예들에 의해 본 발명의 식품보조첨가제의 종류가 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 식품 조성물에는 건강기능식품이 포함될 수 있다. 본 발명에서 사용되는 용어 "건강기능식품"이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 말한다. 여기서 '기능성'이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 당 업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조가능하며, 상기 제조시에는 당 업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한, 상기 건강기능식품의 제형 또한 건강기능식품으로 인정되는 제형이면 제한없이 제조될 수 있다. 본 발명의 식품용 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나, 본 발명의 건강기능식품은 골 질환 및 관절 질환의 개선 효과를 증진시키기 위한 보조제로 섭취가 가능하다.
또한, 본 발명의 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제는 골 질환 및 관절 질환이 발병하였거나 발병할 수 있는 원숭이, 소, 말, 양, 돼지, 닭, 고양이, 개, 마우스, 랫트, 토끼 또는 기니아피그를 포함한 모든 동물에게 공급되는 골 질환 및 관절 질환의 예방 또는 개선용 사료 첨가제 조성물의 유효성분으로 포함될 수 있다. 상기 사료는, 사료에 본 발명의 사료 첨가제를 첨가하여 제조하거나, 상기 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제를 포함하는 조성물을 직접 첨가하여 제조할 수 있다. 본 발명에서 상기 사료의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 사료를 사용할 수 있다. 상기 사료의 비제한적인 예로는, 곡물류, 근과류, 식품 가공 부산물류, 조류, 섬유질류, 제약부산물류, 유지류, 전분류, 박류 또는 곡물 부산물류 등과 같은 식물성 사료; 단백질류, 무기물류, 유지류, 광물성류, 유지류, 단세포 단백질류, 동물성 플랑크톤류 또는 음식물 등과 같은 동물성 사료를 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상을 혼합하여 사용될 수 있다.
본 발명의 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제는 수용성 유기물질의 손실이 최소화되고 칼슘 흡수율을 향상시키는 효과가 우수하며, 월등한 골형성 및 골조직 재생 효능을 나타낼 수 있다. 이에 따라, 상기 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제는 골 질환 및 관절 질환의 예방 또는 치료용 조성물의 유효성분으로 포함될 수 있다.
도 1은 본 발명의 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제의 건조분말을 나타낸 도이다.
도 2는 본 발명의 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제의 투여 농도별 제브라피쉬 배아의 심장박동수를 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제에 따른 제브라피쉬 배아의 형태학적 변화를 관찰한 도이다.
도 4는 발명의 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제의 제브라피쉬에 대한 흡수 정도를 형광현미경으로 확인한 도이다.
도 5는 본 발명의 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제에 의한 골 및 연골의 형성 정도를 관찰한 도이다. 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제에 의해 알시안 블루(골) 및 알리자린 레드(연골)의 염색 정도가 증가됨을 나타낸다.
도 6은 본 발명의 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제, 및 이온화칼슘과 프락토올리고당의 단순 혼합제에 의한 골 및 연골의 형성 효능을 관찰한 도이다.
도 7은 본 발명의 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제에 의한 골형성 관련 유전자의 발현 수준을 나타낸 도이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다.
실시예 1 :　이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제의 제조
빙초산 20 mL를 증류수 180 mL와 혼합하여 10% 초산용액을 제조한 후, 상기 10% 초산용액 200 mL에 담수진주분말 2 g과 프락토올리고당 2 g을 첨가하였다. 그 후, 60℃에서 10분간 교반하면서 기포가 다 없어질 때까지 용해시켰다. 매 10분 간격으로 담수진주분말과 프락토올리고당을 각각 2g씩 첨가한 다음, 거품 위에 놓인 진주칼슘분말을 초산칼슘용액에 잘 섞이도록 거품 속으로 담수진주칼슘과 프락토올리고당 각 분말을 밀어넣었다. 이 과정을 9번 반복하였으며, 최종적으로 총 20 g의 진주칼슘과 프락토올리고당을 각각 용해시켰다. 수득한 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제 수용액을 여과하였으며, 80℃의 건조오븐에서 건조하여 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제 건조분말을 수득하였다(도 1).
실시예 2 : 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제의 급성 독성 평가
이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제의 급성 독성을 분석하기 위하여, 수정 후 24시간(24 hpf)된 제브라피쉬 배아의 배양액에 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제를 농도별(37.5 내지 2400 μg/mL)로 처리하였다. 48 hpf에서의 독성을 확인하기 위하여 배아의 껍질을 제거한 후 심박수를 측정하고, 형태학적 변화(phenotype)를 확인하였다. 심박수는 3번 반복하여 측정한 후 통계처리하였으며, 형태학적 변화는 출혈 유무 및 몸통(trunk)의 변형을 중심으로 관찰하였다.
그 결과, 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제를 37.5 내지 2400 μg/mL의 농도로 제브라피쉬 배아에 처리한 경우, 심장박동수에 유의성 있는 차이가 나타나지 않았다(도 2). 또한, 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제를 10 내지 100 μg/mL의 농도로 제브라피쉬 배아에 처리한 경우, 출혈 또는 머리, 배, 및 꼬리의 형성 이상 등과 같은 전형적인 형태학적 독성영향은 관찰되지 않았다(도 3). 상기 결과로부터, 상기 실시예 1에서 제조한 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제는 심장박동, 출혈, 형태학적 변화를 기준으로 독성을 나타내지 않음을 확인하였다.
실시예 3 : 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제의 골형성 활성 평가
3-1. 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제를 포함하는 제브라피쉬 배아용 식이 제조 및 흡수 확인
제브라피쉬 배아의 난황이 사라지고 먹이에 대한 반응이 보이기 시작하면 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제을 포함하는 식이를 공급하였다. 글루텐 과립(Gluten granule)으로 제조하여 먹이를 정상적으로 급여하면서 칼슘을 보조제로 추가 급여하였다. 보조제로서의 칼슘을 성인 범위(0.4 g - 2 g(60 kg기준))에서 투여하는 것을 기준으로, 제브라피쉬에 대해 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제의 투여 용량을 설정하였다. 제브라피쉬에 공급한 식이를 배아가 제대로 섭취하였는지 확인하기 위해, 글루텐 가루와 10 mg/mL의 닐 레드(Nile red, 염색시약)를 혼합한 후, 막자사발에 글루텐 가루를 넣고 증류수를 1 mL씩 서서히 첨가하면서 반죽하였다. 균일하게 반죽된 글루텐을 동결건조하였다. 건조가 종료된 글루텐은 1000, 800, 700 μm 크기의 체(sieve)에 차례로 통과시키면서 700 μm 크기의 알갱이를 얻어 제브라피쉬에게 공급하였다.
상기에서 제조한 식이를 투여하고 4, 8, 12, 24시간이 경과한 후, 트리카인(Tricaine)으로 마취시킨 제브라피쉬를 형광현미경 하에서 흡수 정도를 확인한 결과, 투여된 먹이를 섭취한 제브라피쉬의 장에서 붉은색의 형광이 4시간 내지 24시간 동안 지속적으로 나타나는 것을 확인하였다(도 4).
3-2. 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제의 골형성 활성 평가
제브라피쉬 배아의 난황이 사라지고 먹이에 대한 반응이 보이기 시작하면 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제을 농도별로 함유하는 식이를 하루에 한번씩 투여하였다. 투여 후 21일이 경과된 시점에 알시안 블루(Alcian blue) 및 알리자린 레드(Alizarin red)로 염색하여 골형성 차이를 비교분석하였다. 염색을 위한 방법은 다음과 같다: 제브라피쉬를 0.016% 트리카인으로 마취하고 3.7%의 중성 완충 포름알데히드(neutral buffered formaldehyde)로 고정하였다. 1xPBS-T로 제브라피쉬를 5분간 3번 세척하였으며, 0.1%의 알시안 블루 용액에 제브라피쉬를 옮기고 4시간 내지 밤새도록 염색하였다. 염색 후, 70% 에탄올 및 30% PBST, 50% 에탄올 및 50% PBST, 30% 에탄올 및 70% PBST에서 탈수 과정을 수행하였다. 0.05% 트립신(trypsin)에 제브라피쉬를 옮기고 1시간 반응시킨 후 1xPBS-T로 5분간 3번 세척하였다. 0.05% 알리자린 레드 용액에 제브라피쉬를 옮기고 4시간 이상 염색하고 현미경으로 염색된 정도를 관찰하였다.
알시안 블루(골) 및 알리자린 레드(연골)의 염색 정도를 비교분석한 결과, 대조군(이온화 칼슘 및 프락토올리고당 복합제 무처리군)에 비해 수용성 이온화 칼슘 및 프락토올리고당 복합제 처리군에서 연골과 골에 대한 염색 정도가 모두 증가됨을 확인하였다(도 5).
3-3. 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제; 및 단순 혼합제의 골형성 활성 비교분석
제브라피쉬 배아의 난황이 사라지고 먹이에 대한 반응이 보이기 시작하면, 0.1 mg/mL의 이온화칼슘 및 프락토올리고당 혼합제(B), 또는 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제(C)를 함유하는 식이를 하루에 한번씩 투여하였다. 투여 후 21일이 경과된 시점에 알시안 블루 및 알리자린 레드로 염색하여 골형성 차이를 비교분석하였다. 염색 방법은, 상기 실시예 3-2의 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제의 골형성 활성 평가에서 이용한 염색 방법과 동일하게 수행하였다.
그 결과, 대조군(이온화 칼슘 및 프락토올리고당 복합제, 및 혼합제 무처리군)에 비해 수용성 이온화 칼슘 및 프락토올리고당 혼합제 처리군에서 연골 및 뼈에 대한 염색의 정도가 증가됨을 확인하였다. 그러나, 상기 이온화 칼슘 및 프락토올리고당 혼합제 처리군을 이온화 칼슘 및 프락토올리고당 복합제 처리군과 비교분석한 결과, 동일 농도임에도 불구하고 복합제의 처리군에서 골화(칼슘의 침착) 정도가 더욱 향상되었음이 관찰되었으며, 연골 조직의 형성 정도도 크게 증가함이 관찰되었다(도 6).
상기 결과로부터, 수용성 이온화 칼슘 및 프락토올리고당 복합제는 기존의 이온화 칼슘, 또는 수용성 칼슘과 프락토올리고당을 단순 배합하여 제조한 이온화 칼슘 및 프락토올리고당 혼합제에 비해 보다 우수한 골화(칼슘의 침착) 형성 및 연골 조직의 생성 효능을 나타냄을 확인하였다.
3-4. 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제에 따른 골형성 관련 유전자 발현 수준 분석
제브라피쉬 배아의 난황이 사라지고 먹이에 대한 반응이 보이기 시작하면 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제를 함유하는 식이를 하루 한번씩 투여한 후, 21일이 경과된 제브라피쉬로부터 RNA를 분리하였다. 분리한 RNA로부터 cDNA합성한 후, Dlx5, 콜라겐 타입 I(Type I collagen), 오스테오칼린(osteocalcin), β-actin 유전자의 프라이머를 이용하여 PCR 방법으로 증폭하여 유전자의 발현수준을 분석하였다.
유전자 정방향 프라이머 역방향 프라이머
Dlx5 GCCACGGATTCTGGCTATTA
(서열번호 1)		 TGAGCCGTAATCAGGGTAGG
(서열번호 2)
Col I CTGGAAACCGTGGTGAATCT
(서열번호 3)		 GACCAGGATGTCCACGAAGT
(서열번호 4)
OCN TGACGTGGCCTCTATCATCA
(서열번호 5)		 TTTATAGGCGGCGATGATTC
(서열번호 6)
β-actin GCAGAAGGAGATCACATCCCTGGC
(서열번호 7)		 CATTGCCGTCACCTTCACCGTTC
(서열번호 8)
그 결과, 본 발명의 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제는 골/관절 형성과 관련된 마커로 사용되는 Dlx5와 콜라겐 타입 I 유전자의 발현량은 증가시키는 반면, 골의 파괴를 유발하는 오스테오칼린 유전자에는 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다(도 7). 상기 결과로부터, 상기 실시예 1에서 제조한 수용성 이온화 칼슘 및 프락토올리고당 복합제에 의해 조골세포의 기능이 항진됨을 확인하였다.
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.
<110> inje university industry-academic cooperation foundation <120> Composition comprising water-soluble fructooligosaccharide calcium for preventing or treating bone disease and joint disease <130> P15367 <160> 8 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Dlx5 forward primer <400> 1 gccacggatt ctggctatta 20 <210> 2 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Dlx5 reverse primer <400> 2 tgagccgtaa tcagggtagg 20 <210> 3 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Col I forward primer <400> 3 ctggaaaccg tggtgaatct 20 <210> 4 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Col I reverse primer <400> 4 gaccaggatg tccacgaagt 20 <210> 5 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> OCN forward primer <400> 5 tgacgtggcc tctatcatca 20 <210> 6 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> OCN reverse primer <400> 6 tttataggcg gcgatgattc 20 <210> 7 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> beta-actin forward primer <400> 7 gcagaaggag atcacatccc tggc 24 <210> 8 <211> 23 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> beta-actin reverse primer <400> 8 cattgccgtc accttcaccg ttc 23

Claims (12)

  1. 초산 용액 내에서 담수 진주 분말 및 프락토올리고당을 혼합 및 교반하는 제1단계; 및
    상기 혼합물을 여과하는 제2단계;를 포함하는, 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제의 제조방법.
  2. 삭제
  3. 제1항에 있어서, 상기 담수 진주 분말의 평균 입경은 10 nm 내지 500 nm인, 방법.
  4. 제1항에 있어서, 상기 초산 용액은 10% 내지 30% 초산 용액인, 방법.
  5. 제1항에 있어서, 상기 담수 진주 분말 및 프락토올리고당은 10:1 내지 1:10의 중량비로 혼합되는, 방법.
  6. 제1항에 있어서, 상기 초산 용액 내에서 담수 진주 분말 및 프락토올리고당을 혼합 및 교반하는 제1단계는, 초산 용액에 담수 진주 분말 및 프락토올리고당을 투입하고 교반하는 과정을 1 회 내지 20 회 반복하는 것을 포함하고, 상기 혼합 및 교반은 30℃ 내지 80℃의 온도에서 수행되는, 방법.
  7. 제1항에 있어서, 상기 혼합물을 여과 후에 건조하는 것을 더 포함하는, 방법.
  8. 제1항, 제3항 내지 제7항 중 어느 한 항의 방법에 의해 제조된 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제를 유효성분으로 포함하는, 골 질환 및 관절 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  9. 제8항에 있어서, 상기 골 질환 및 관절 질환은 퇴행성 관절염, 류마티스성 관절염, 변형성 관절염, 골연화증, 골다공증, 구루병 및 페이젯병(Paget’s disease)으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 약학적 조성물.
  10. 제8항에 있어서, 골형성 및 골조직 재생 중 하나 이상의 효과를 가지는, 약학적 조성물.
  11. 제1항, 제3항 내지 제7항 중 어느 한 항의 방법에 의해 제조된 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제를 유효성분으로 포함하는, 골 질환 및 관절 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  12. 제1항, 제3항 내지 제7항 중 어느 한 항의 방법에 의해 제조된 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제를 유효성분으로 포함하는, 골 질환 및 관절 질환의 예방 또는 개선용 사료첨가제 조성물.
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20180108471A (ko) * 2017-03-23 2018-10-04 인제대학교 산학협력단 홍합패각 및 올리고당을 유효성분으로 함유하는 칼슘복합제 및 이의 용도
WO2018174553A3 (ko) * 2017-03-23 2019-01-10 인제대학교 산학협력단 홍합패각 및 올리고당을 유효성분으로 함유하는 칼슘복합제 및 이의 용도
CN116369249A (zh) * 2023-01-13 2023-07-04 四川轻化工大学 斑马鱼肠炎模型的构建方法

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108741093A (zh) * 2018-05-24 2018-11-06 广西山水牛畜牧业有限责任公司 一种牛骨中钙的提取方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20020065433A (ko) * 2002-07-09 2002-08-13 주식회사 진주나라 상온 산가수분해법을 이용한 수용성 진주분말의 제조방법
KR20100056329A (ko) * 2008-11-24 2010-05-27 한국과학기술연구원 골다공증 예방 및 치료용 칼슘 화합물 및 칼슘 화합물 시비쌀
KR20140078317A (ko) * 2012-12-17 2014-06-25 주식회사 삼양제넥스 프락토올리고당을 함유한 기능성 젤리 조성물 및 그 제조방법

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100759222B1 (ko) * 2006-03-09 2007-09-17 정정례 홍삼식초 음료수의 제조방법
KR20100135034A (ko) * 2009-06-16 2010-12-24 최정헌 골다공증 예방에 효과를 갖는 해조(꼬시래기) 스낵 제조방법

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20020065433A (ko) * 2002-07-09 2002-08-13 주식회사 진주나라 상온 산가수분해법을 이용한 수용성 진주분말의 제조방법
KR20100056329A (ko) * 2008-11-24 2010-05-27 한국과학기술연구원 골다공증 예방 및 치료용 칼슘 화합물 및 칼슘 화합물 시비쌀
KR20140078317A (ko) * 2012-12-17 2014-06-25 주식회사 삼양제넥스 프락토올리고당을 함유한 기능성 젤리 조성물 및 그 제조방법

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Tong et al. The anti-aging effect of pearl oyster shell powder (POSP). J Tradit Chin Med. 1988, 247-250.
건강기능성 식품의 국내외 개발 및 연구동향, 식품기술, 2005, 제18권 제4호, 69-87.
보건산업진흥원, 2002년도 계절별 국민영양조사 II.

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20180108471A (ko) * 2017-03-23 2018-10-04 인제대학교 산학협력단 홍합패각 및 올리고당을 유효성분으로 함유하는 칼슘복합제 및 이의 용도
WO2018174553A3 (ko) * 2017-03-23 2019-01-10 인제대학교 산학협력단 홍합패각 및 올리고당을 유효성분으로 함유하는 칼슘복합제 및 이의 용도
KR102040809B1 (ko) * 2017-03-23 2019-11-05 인제대학교 산학협력단 홍합패각 및 올리고당을 유효성분으로 함유하는 칼슘복합제 및 이의 용도
CN116369249A (zh) * 2023-01-13 2023-07-04 四川轻化工大学 斑马鱼肠炎模型的构建方法
CN116369249B (zh) * 2023-01-13 2024-05-17 四川轻化工大学 斑马鱼肠炎模型的构建方法

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