KR101680639B1 - New microorganism Isaria fumosorosea FG340 and Microbial control agent for the prevention of Spodoptera exigua larva - Google Patents
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Abstract
본 발명은 신규미생물 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340와 이를 함유하는 파밤나방 유충 방제용 미생물제제에 관한 것이다.
본 발명의 신규미생물 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340(KACC93199P) 균주는 서열번호 1로 표현되며 파밤나방 유충에 대해 방제효과를 갖는 것이 특징이다.
본 발명에 의해 파밤나방 유충에 대하여 방제효과를 갖는 신규미생물인 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340균주와 이를 함유하는 파밤나방 유충 방제용 미생물 제제로 제공된다.The present invention relates to a novel microorganism Isaria fumosorosea , FG340 and a microorganism preparation containing the same.
The novel microorganism Isaria fumosorosea FG340 (KACC93199P) of the present invention is represented by SEQ. ID. NO. 1 and is characterized in that it has a controlling effect against the parasitic larvae.
According to the present invention, Isaria fumosorosea FG340 strain, which is a novel microorganism having a controlling effect against larvae of Paralichthys olivaceus, and a microorganism preparation for controlling paralichia larvae containing the same are provided.
Description
본 발명은 신규미생물 이사리아 푸모소로세 FG340와 이를 함유하는 파밤나방 유충 방제용 미생물제제에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 파밤나방 유충에 대하여 방제효과를 갖는 신규미생물인 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340균주와 이를 함유하는 파밤나방 유충 방제용 미생물 제제에 관한 것이다.
The present invention relates to a novel microbial isolia fumoroside FG340 and a microorganism preparation for controlling the larvae of the present invention. More particularly, the present invention relates to a novel microorganism Isaria fumosorosea , FG340 strain and a microorganism preparation containing the same.
곤충병원성 곰팡이는 대부분 불완전균류(Hyphomycetes)에 속하며 사람과 동,식물에는 무해하면서 대상으로 하는 해충에는 특이적으로 병원성을 나타내는 곰팡이로서 자연상태에서 숙주의 밀도를 조절하는 역할을 한다. Insect pathogenic fungi are mostly infectious fungi (Hyphomycetes). They are harmless to humans, plants, and plants. They are a pathogenic fungus that is specific to the target insect pests, and play a role in regulating host density in the natural state.
곤충병원성 곰팡이의 곤충숙주에 대한 침입 기작은 숙주의 섭식을 통해 감염되는 곤충병원성 세균이나 바이러스와는 달리 곰팡이 포자가 숙주 표피에 부착되는 것을 시작으로 표피를 물리적, 화학적 작용으로 뚫고 내부로 침입하여 곤충의 면역작용을 차단하고 독성물질을 분비하여 숙주를 치사시킨다. Insect pathogenic fungi The invasive mechanism against the insect host is different from insect pathogenic bacterium or virus which is infected through host feeding. The fungus spore begins to adhere to the host's epidermis, penetrates the epidermis physically and chemically, To block the immune function and secrete toxic substances to kill the host.
이들 곤충 병원성 곰팡이를 해충방제에 이용할 경우 인간과 고등생물, 어류, 곡물 등에 직접적인 또는 위험물질의 축적 등과 같은 간접적인 위해 요소가 없어 안정성이 높고, 목적하는 해충만 선별적으로 제거할 수 있는 선택성이 있으며, 또한 살충효과의 지속성이 유지되어 반복적인 미생물제제의 살포를 최소한으로 줄일 수 있다는 이점이 있다.When these insect pathogenic fungi are used for pest control, there is no indirect risk factor such as accumulation of dangerous substances directly in human, higher organisms, fish, and grains, and stability is high, and selectivity that can selectively remove only the desired insect pests And the persistence of the insecticidal effect is maintained so that the application of the repetitive microorganism preparation can be minimized.
현재까지 약 750여 종 이상의 곤충병원성 곰팡이가 알려져 있으며, 그 중 메타리지움 아니소플리애(Metarhizium anisopliae), 노무라에 릴레이이(Nomuraea rileyi) 등이 대표적으로 미생물 살충제로 개발되어 여러 해충 방제에 이용되고 있다.To date, more than 750 insect pathogenic fungi have been known, including Metarhizium anisopliae , Nomuraea rileyi ) have been developed as microbial insecticides and have been used in various pest control.
파밤나방(Spodoptera exigua)은 나비목(Lepidoptera), 밤나방과(Noctuidae)에 속하는 해충으로, 채소, 화훼, 과수 등을 포함한 거의 모든 농업 작물을 가해하여 경제적으로 큰 손실를 주고 있는 대표적인 광식성 해충이다. 파밤나방은 비교적 살충제에 감수성이 높은 어린 유충 시기에 줄기 속으로 들어가 안쪽에서 가해를 하여 약제에 노출될 기회가 적고, 3령 유충 이상이 되면 유기합성 살충제에 대한 저항성이 강해지므로 방제가 어려운 난방제 해충으로 여겨지고 있다. Spodoptera exigua is a pest insect belonging to Lepidoptera, Noctuidae, and is a typical insect pest which is causing economic damage by adding almost all agricultural crops including vegetables, flowers and fruit trees. It is relatively insensitive to insecticides. It enters into the stem at the early stage of insect repellent, and there is less chance of exposure to the medicines due to the harmful effect from the inside. When the insecticidal activity of the third instar larva is over, resistance to organic synthetic insecticide becomes strong, It is considered a pest.
최근까지는 파밤나방의 방제를 위해서 주로 유기인계, 카바메이트계, 피레스로이드계 등의 화학살충제를 사용하고 있으나, 무분별한 살충제의 남용으로 기존 살충제에 대해 저항성을 나타내며, 화학살충제의 지속적인 사용으로 인해 환경오염 문제 유발, 해충의 약제 저항성 획득 그리고 사람들의 건강에 대한 우려로 친환경적인 방제 방법에 대한 관심이 높아지고 있다. Until recently, chemical insecticides such as organophosphorus, carbamate and pyrethroid have been mainly used for the control of pestilence, but they are resistant to existing insecticides due to unreasonable abuse of insecticides, There is increasing interest in environmentally friendly methods of control due to problems, pesticide resistance, and concerns about people's health.
관련 선행기술로는 공개특허 10-2011-0005355 (천적인 곤충병원성 곰팡이를 이용한 파밤나방 방제제 및 방제방법)과 공개특허 10-2008-0006679 (해충에 높은 병원성이 있어 선발된 신규한 메타리지움 아니소플리애 곰팡이 및 이를 이용한 미생물살충제 조성물)에 관한 것이 공개되어 있다.
Related prior arts are disclosed in Korean Patent Laid-Open Publication No. 10-2011-0005355 (Method of Controlling and Controlling Paralichthys olivaceus using Antifungal Insecticidal Fungi) and Patent Application No. 10-2008-0006679 A microflora fungus and a microbial pesticide composition using the same).
본 발명의 목적은 파밤나방 유충에 대하여 방제효과를 갖는 신규미생물인 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340균주와 이를 함유하는 파밤나방 유충 방제용 미생물 제제를 제공하는데 있다.It is an object of the present invention to provide a novel microorganism Isaria fumosorosea , FG340 strain and a microorganism preparation containing the same.
본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제들은 이상에서 언급한 기술적 과제들로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 다른 기술적 과제들은 아래의 기재로부터 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
It is to be understood that both the foregoing general description and the following detailed description are exemplary and explanatory and are not intended to limit the invention to the particular embodiments that are described. It is to be understood that both the foregoing general description and the following detailed description are exemplary and explanatory and are not restrictive of the invention, There will be.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 신규미생물 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340(KACC93199P) 균주는 서열번호 1로 표현되며 파밤나방 유충에 대해 방제효과를 갖는 것이 특징이다.In order to achieve the above object, the novel microorganism Isaria fumosorosea , The strain FG340 (KACC93199P) is represented by SEQ ID NO: 1 and is characterized in that it has a controlling effect against the parasitic larvae.
상기 균주는 토양에서 접종되어 감염된 꿀벌부채명나방 유충으로부터 분리되는 것이 특징이다.The strain is characterized in that the strain is inoculated in the soil and separated from the infected bee moth larvae.
상기 균주는 살충 미생물농약, 엽면살포제 또는 관주살포제 중 어느 하나의 유효성분으로 이용되는 것이 특징이다.The strain is characterized in that it is used as an active ingredient of any one of an insecticidal microbial pesticide, a foliar spraying agent or a conventional spraying agent.
본 발명의 파밤나방 유충 방제용 미생물제제는 상기의 신규미생물 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340(KACC93199P) 균주의 균체 또는 그 배양액을 유효성분으로 함유하는 것이 특징이다.The microorganism preparation for controlling parasitic fly larva according to the present invention is characterized by containing the above-mentioned microorganism Isaria fumosorosea FG340 (KACC93199P) strain or a culture thereof as an active ingredient.
상기 배양액은 미생물 배지에 상기 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340(KACC93199P) 균주를 20~30℃에서 5~15일간 배양하여 수득된 배양액인 것이 특징이다.The culture broth was cultured on Isoba fumosorosea , FG340 (KACC93199P) is cultured at 20 to 30 DEG C for 5 to 15 days.
상기 미생물 배지는 PDA(Potato dextrose agar)배지인 것이 특징이다.The microorganism medium is a PDA (Potato dextrose agar) medium.
상기 배양액에는 1㎖ 당 1×106∼1×108 개 포자의 상기 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340(KACC93199P) 균주가 포함되는 것이 특징이다.The culture broth contains Isaria fumosorosea at a concentration of 1 × 10 6 to 1 × 10 8 spores per ml, FG340 (KACC93199P).
본 발명의 파밤나방 유충을 방제하는 방법은 상기의 미생물제제를 파밤나방 유충이 존재하는 식물체에 분무 처리하는 것이 특징이다.The method for controlling the parasitic larva of the present invention is characterized in that the microorganism preparation is spray-treated on a plant in which the parasitic larva is present.
상기 분무처리는 20~30℃의 온도하에서 이루어지는 것이 특징이다.
The spraying treatment is performed at a temperature of 20 to 30 캜.
상기에서 살펴본 바와 같이, 본 발명의 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340 또는 그 배양액을 함유하는 미생물 제제는 파밤나방 유충에 대하여 병원성을 갖으며, 환경공해와 인체독성이 없어 환경 친화적인 파밤나방 유충 방제용 미생물 농약으로 유용하게 사용될 수 있다.
As described above, the microorganism preparation containing Isaria fumosorosea FG340 or a culture thereof of the present invention has pathogenicity to the parasitic larvae and is environmentally friendly because it has no environmental pollution and human toxicity It can be used effectively as a microbial pesticide for the control of larvae of the insects.
도 1은 실시예 1에서 분리된 신규미생물 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340의 형태학적 특성을 나타낸 도면이다.
도 2는 실시예 1에서 분리된 신규미생물 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340의 16S rRNA 염기서열을 나타낸 도면이다.
도 3은 실시예 1에서 분리된 신규미생물 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340 처리시 파밤나방 유충의 살충상태를 나타낸 도면이다.
도 4는 실시예 1에서 분리된 신규미생물 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340의 처리농도별 파밤나방 유충에 대해 살충효과를 나타낸 도면이다.
도 5는 실시예 1에서 분리된 신규미생물 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340의 처리 온도별 파밤나방 유충에 대해 살충효과를 나타낸 도면이다.Fig. 1 is a graph showing the results of the isolation of the novel microorganism Isaria fumosorosea , FG340 < / RTI >
Fig. 2 is a graph showing the results of the isolation of the novel microorganism Isaria fumosorosea isolated in Example 1. Fig. 16S rRNA base sequence of FG340.
Fig. 3 is a graph showing the results of the isolation of the novel microorganism Isaria fumosorosea , FIG. 6 is a diagram showing the insecticidal status of the larvae of the paralichthys olivaceus during the treatment with FG340. FIG.
Fig. 4 is a graph showing the relationship between the new microorganism Isaria fumosorosea isolated in Example 1, FIG. 5 is a diagram showing the insecticidal effect against the larvae of the parasitic larvae according to the treatment concentration of FG340. FIG.
Fig. 5 is a graph showing the activity of the new microorganism Isaria fumosorosea isolated in Example 1. Fig. FIG. 5 is a diagram showing an insecticidal effect on the larvae of the parasitic larvae according to the treatment temperature of FG340. FIG.
본 명세서에 기재된 용어, 기술 등은 특별한 한정이 없는 한, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 일반적으로 사용되는 의미로 사용된다.The terms, techniques, and the like described in this specification are used in the meaning commonly used in the technical field to which the present invention belongs, unless otherwise specified.
본 발명의 신규 미생물 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340는 서열번호 1의 염기서열을 포함하며, 파밤나방 유충(Spodoptera exigua larva)에 대해 방제효과를 나타내는 것으로 하기 실시예 및 실험예를 통해 규명되었다.The novel microorganism Isaria fumosorosea of the present invention, FG340 contains the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 1 and shows a control effect against Spodoptera exigua larva , which has been identified through the following examples and experimental examples.
설명하면, 파밤나방 유충에 대하여 높은 방제효과를 나타내는 신규 미생물을 선발하기 위하여, 토양을 채취한 후 여기에 꿀벌부채명나방 유충을 투여하여 일정기간동안 배양한 다음 감염된 꿀벌부채명나방 유충의 표면에서 곤충병원성 균주를 선발하였다.In order to select a new microorganism exhibiting a high control effect against the parasitoid larvae, the soil was collected, and the bees were then cultivated for a certain period of time. Insect pathogenic strains were selected.
상기 선발된 균주를 PDA 배지에 접종하여 배양한 후 관찰 한 바 균사체의 색상은 처음에 흰색에서 점차 밝은 갈색으로 변하므로 Isaria sp.로 판단되었다.When the selected strain was inoculated into the PDA medium and cultured, the color of the mycelium changed from white to gradually light brown at first, and thus Isaria sp. Respectively.
이에, 이를 16S rRNA 분석결과, 이사리아 속(Isaria sp.)의 신규한 균주로 밝혀져, 이를 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340 균주로 명명하고, 이 균주를 국립농업과학원 농업유전지원센터에 기탁하여 2014년 05월 22일 수탁번호 KACC93199P를 부여받았다.As a result of 16S rRNA analysis, it was identified as a new strain of Isaria sp., Named as Isaria fumosorosea FG340 strain, and this strain was designated as the National Agricultural Research Service Agricultural Genetic Support Center On May 22, 2014 to receive the deposit number KACC93199P.
상기 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340 균주는 서열번호 1로 기재되는 염기서열 전체 또는 그것의 일부로 이루어지며, 571bp의 오픈 리딩 프레임(ORF)으로 구성된다.The Isaria fumosorosea FG340 strain consists of the entire nucleotide sequence shown in SEQ ID NO: 1 or a part thereof and is composed of an open reading frame (ORF) of 571 bp.
이러한 상기 본 발명의 신규미생물 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340 균주는 하기 배양조건을 통해 배양될 시 상기 신규미생물을 단시간내에 대량생산도 가능하여 산업적으로 사용할 수 있다.The new microorganism Isaria fumosorosea FG340 of the present invention can be industrially used as it can be mass produced in a short time when it is cultured through the following culture conditions.
설명하면, 상기 신규미생물은 배양배지로서 PDA배지 상에서 잘 자라며, 특히 20~30℃에서 5~15일간 배양할시 가장 최적의 균주생육이 이루어지게 된다(하기 표 1에 예시). The new microorganism grows well on the PDA medium as a culture medium. Especially when cultivated at 20 to 30 DEG C for 5 to 15 days, the most optimal strain growth is achieved (as shown in Table 1 below).
즉, 상기 배양이 20℃미만에서 이루어질 경우에는 그 온도가 너무 낮아 상기 균주의 증식속도를 더디게 하며, 30℃를 초과할 경우에는 온도가 너무 높아 오히려 상기 균주의 증식속도를 더디게 하기 때문이다. That is, when the culture is performed at a temperature lower than 20 ° C, the temperature is too low to slow the growth rate of the strain, and if it exceeds 30 ° C, the temperature is too high to slow the growth rate of the strain.
이러한 본 발명의 상기 신규미생물 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340 균주의 균체 또는 그 배양액은 파밤나방 유충 방제용 미생물제제의 유효성분으로 사용하게 된다.The microorganism Isaria fumosorosea FG340 strain of the present invention or the culture thereof is used as an effective ingredient of a microorganism preparation for controlling B. larvae.
이와 같은 미생물제제는 활성곰팡이의 생존기간, 생존기간 중 발아율, 살충 활성 유지능력이 우수하므로, 살충 미생물농약, 엽면살포제 또는 관주살포제 등에 이용될 수 있다.Such microbial agents are excellent in the survival period of the active fungi, germination rate during the survival period, and ability to maintain the insecticidal activity, and thus can be used for insecticidal microbial pesticides, foliar spraying agents,
바람직하게는, 본 발명의 상기 미생물제제를 파밤나방의 유충 또는 유충이 붙어 있는 농작물에 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340균주를 집중하여 분무처리하고, 미생물의 유효량은 단위용량(㎖) 당 미생물의 수가 1×106∼1×108 개의 포자 정도로 분무하는 것이 좋다. 이때 분무처리는 20~30℃의 온도 하에서 이루어질 시 상기 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340 균주의 활성이 높아 파밤나방 유충에 대해 가장 우수한 살충효과를 나타내게 된다.
Preferably, the microorganism preparation of the present invention is subjected to spray treatment by concentrating Isaria fumosorosea FG340 strain in a crop having larva or larva of Paralichthys olivaceus, and the effective amount of the microorganism is expressed in unit dose (ml) It is preferable that the number of sugar microorganisms is sprayed at about 1 × 10 6 to 1 × 10 8 spores. At this time, when spraying is carried out at a temperature of 20 to 30 ° C., the activity of Isaria fumosorosea FG340 is high, and thus it exhibits the most excellent insecticidal effect against the parasitoid larvae.
하기 실시예 및 실험예에 의해서 보다 구체적으로 설명하지만 보호범위가 하기 실시예 및 실험예에 국한되는 것은 아니다.The present invention will be described in more detail with reference to the following examples and experimental examples, but the scope of protection is not limited to the following examples and experimental examples.
<< 실시예Example 1> 본 발명의 신규미생물 분리 1> Isolation of a New Microorganism of the Present Invention
파밤나방에 대해 병원성을 갖는 미생물을 분리하기 위해서 경기도 양평 소재 파밭(관행농법) 중 4군데 지점에서 500 ㎖의 토양을 채취하였다.In order to isolate the pathogenic microorganisms against parasitoids, 500 ml of soil was collected from four sites.
채취한 시료는 2mm 체에 내려 20㎖를 플라스틱 용기에 담고 1.5cm크기의 꿀벌부채명나방 유충을 10마리씩 투여하였다.The collected samples were dropped into 2 mm sieve, and 20 ml of each sample was placed in a plastic container, and 10 mice of 1.5 cm sized bee-bearing moth larvae were administered.
7 ~ 14일간 25℃에서 배양한 후 감염된 꿀벌부채명나방 유충의 표면으로부터 곤충병원성 균주(FG340)를 분리하였다.
After incubation at 25 ℃ for 7 ~ 14 days, insect pathogenic strain (FG340) was isolated from the surface of infected bee moth larvae.
<< 실시예Example 2> 분리된 신규미생물의 형태학적 특성 및 염기서열 분석 2> Morphological Characteristics and Sequence Analysis of Isolated New Microorganisms
상기 실시예 1에서 분리된 균주(FG340)를 PDA(Potato dextrose agar)배지에 접종하여 7일간 25℃에서 배양한 후 광학현미경으로 관찰하였다.The strain (FG340) isolated in Example 1 was inoculated into a PDA (Potato dextrose agar) medium, cultured at 25 ° C for 7 days, and then observed with an optical microscope.
관찰된 균주의 모습은 도 1과 같으며, 균사체의 색상은 처음에 흰색에서 시간이 갈수록 밝은 갈색을 띄므로 Isaria sp.로 판단되었다.The observed strain is as shown in Fig. 1, and the color of the mycelium is initially white and gradually becomes light brown . Respectively.
또한, 실시예 1에서 분리된 균주를 16S rRNA의 ITS부분을 Sequencing한 결과이사리아 속(Isaria sp.)과 100% 상동성이 있음을 확인하였으며, 분석된 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340의 16S RNA 염기서열은 도 2와 같다.In addition, the strain isolated in Example 1 was found to be 100% homologous to Isaria sp. By sequencing the ITS portion of 16S rRNA . Isaria fumosorosea , which was analyzed, The 16S RNA base sequence of FG340 is shown in Fig.
<실험예 1> 선발된 이사리아 푸모소로세 FG340의 파방나방 유충에 대한 방제효과 확인<Experimental Example 1> Determination of the effect of the selected Isaria fumorosa FG340 on the larvae
1. 실험방법1. Experimental Method
상기 실시예 1에서 분리한 균주(FG340)의 분생포자를 PDA(Potato dextrose agar)배지에서 14일간 배양하였다.Conidia of the strain (FG340) isolated in Example 1 were cultured in a PDA (Potato dextrose agar) medium for 14 days.
상기 배양액을 지름 100mm의 배추잎에 존재하는 파밤나방 2령 유충에 분무 처리한 후 3일, 5일, 7일째 그 상태를 확인하였다.
The culture broth was sprayed on a second instar larvae of Chinese cabbage on a leaf of Chinese cabbage having a diameter of 100 mm, and the state was confirmed on
2. 실험결과2. Experimental results
상기 실험결과 도 3에 나타나 있듯이, 시간이 경과될 수록 상기 실시예 1에서 분리한 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340가 파방나방 유충을 사멸시킴을 확인하였다.
As shown in FIG. 3, as time elapsed, Isaria fumosorosea FG340 isolated from Example 1 was found to be killed by the moth larva.
<실험예 2> 선발된 이사리아 푸모소로세 FG340균주의 적정 발아온도 및 온도별 균사생육 확인<Experimental Example 2> Determination of mycelial growth of the selected Isaria fumorosa FG340 strain by optimum germination temperature and temperature
1. 실험방법1. Experimental Method
선발된 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340균주의 적정 발아온도을 알아보기 위해 상기 실시예 1에서 선발된 FG340균주를 PDA배지 상에서 각 온도별로 24일간 배양하였다.
To determine the optimum germination temperature of the selected Isaria fumosorosea FG340 strain, the FG340 strain selected in Example 1 was cultured on the PDA medium for 24 days at each temperature.
2. 실험결과2. Experimental results
상기 실험결과 하기 표 1과 같이 나타났다.The results of the experiment are shown in Table 1 below.
(mm, mean±SE)Mycelial growth for 7 days
(mm, mean 占 SE)
상기 표 1에 나타나 있듯이, 본 발명의 상기 실시예 1에서 선발된 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340균주는 20~30℃에서 생육이 잘 이루어짐을 확인하였다.
As shown in Table 1, Isaria fumosorosea FG340 strain selected in Example 1 of the present invention was found to be well grown at 20 to 30 ° C.
<< 실험예Experimental Example 3> 선발된 이사리아 푸모소로세 FG340균주의 포자 분무처리 농도별 파방나방 유충에 대한 방제효과 확인 3> Identification of the control effect of the selected Isaria fuomorosse FG340 strain on the larvae of the moth larvae by the spore spray treatment concentration
1. 실험방법1. Experimental Method
상기 실시예 1에서 분리한 균주(FG340)의 분생포자를 PDA(Potato dextrose agar)배지에서 14일간 배양하여 포자를 수거하였다.Conidia of the strain (FG340) isolated in Example 1 were cultured in a PDA (Potato dextrose agar) medium for 14 days to collect spores.
상기 수거한 포자는 0.01% 트윈80용액으로 현탁한 후, 헤모사이토미터를 사용하여 포자농도를 측정한 후, 1×106, 1×107, 1×108개의 포자/㎖가 되도록 포자현탁액을 제조하였다.The collected spores were suspended in a 0.01
상기 제조된 포자현탁액을 파밤나방 유충이 투입된 지름 100mm의 배추잎 앞, 뒷면에 700㎕씩 분무처리 한 후 95%이상의 상대습도를 유지하면서 25℃에서 사육하였다.The prepared spore suspension was sprayed on the front and back sides of the cabbage leaves having a diameter of 100 mm and the back surface of the cabbage larvae, respectively, at 700, and maintained at a temperature of 25 캜 while maintaining a relative humidity of 95% or more.
살충력에 대한 조사는 처리 후 6일째까지 매일 실시하였으며, 반복 당 30마리씩 3회 반복으로 행하고 그 결과를 나타내었다.
The insecticidal activity was investigated daily until 6 days after the treatment, and 30 replicates were repeated 3 times.
2. 실험결과2. Experimental results
상기 실험결과 하기 표 2 및 도 4와 같이 나타났다.The results of the experiment are shown in Table 2 and FIG.
(㎖)Treatment concentration
(Ml)
(%)Mortality rate
(%)
(일, 반수 치사시간)LT 50
(Day, half lethal time)
상기 표 2 및 도 4에 나타나 있듯이, 본 발명의 신규미생물인 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340균주의 포자현탁액은 1×106~1×108 개의 포자 농도에서 분무 처리할 시 높은 살충율을 나타내었으며, 특히 1×107~1×108 개의 포자 농도에서 분무 처리시 살충율 100%를 나타냄을 확인하였다.
As shown in Table 2 and FIG. 4, the spore suspension of Isaria fumosorosea FG340, a novel microorganism of the present invention, was sprayed at a concentration of 1 × 10 6 to 1 × 10 8 spores, And it was confirmed that the insecticidal rate was 100% when sprayed at a concentration of 1 × 10 7 to 1 × 10 8 spores.
<< 실험예Experimental Example 4> 선발된 이사리아 푸모소로세 FG340균주의 온도별 실내 4> Indoors by temperature of selected Isaria furomorose FG340 strain 살충율Mortality rate 검정 black
1. 실험방법1. Experimental Method
상기 실시예 1에서 분리한 균주(FG340)의 분생포자를 PDA(Potato dextrose agar)배지에서 14일간 배양하여 포자를 수거하였다.Conidia of the strain (FG340) isolated in Example 1 were cultured in a PDA (Potato dextrose agar) medium for 14 days to collect spores.
상기 수거한 포자는 0.01% 트윈80용액으로 현탁한 후, 헤모사이토미터를 사용하여 포자농도를 측정한 후, 1×108개의 포자/㎖ 농도가 되도록 포자현탁액을 제조하였다.The collected spores were suspended in a 0.01
상기 제조된 포자현탁액을 파밤나방 2령(부화 후 4일)유충이 붙어있는 지름 100mm의 배추잎 앞, 뒤면에 700㎕씩 분무처리한 후, 95%이상의 상대습도를 유지하면서 15℃, 20℃, 25℃, 30℃의 서로 다른 온도조건으로 사육하였다.The prepared spore suspension was sprayed with 700 μl of each of the front and back of the cabbage leaves having a diameter of 100 mm and attached to a second instar larva (4 days after hatching), and maintained at a relative humidity of 95% or more at 15 ° C. and 20 ° C. , 25 ℃ and 30 ℃, respectively.
살충력에 대한 조사는 처리 후 6일째까지 매일 실시하였으며, 반복 당 20마리씩 2회 반복으로 행하고 그 결과를 나타내었다.
The insecticidal activity was investigated daily for 6 days after the treatment, and the repetition of the insecticidal activity was repeated twice with 20 animals per repetition.
2. 실험결과2. Experimental results
상기 실험결과 하기 표 3 및 도 5와 같이 나타났다.The results of the experiment are shown in Table 3 and FIG.
(℃)Temperature
(° C)
(%)Mortality rate
(%)
(일, 반수 치사시간)LT 50
(Day, half lethal time)
상기 표 3 및 도 5에 나타나 있듯이, 상기 본 발명의 실시예 1에서 분리된 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340의 포자현탁액을 서로 다른 온도조건으로 파밤나방에 대한 살충력을 조사한 결과, 20~30℃에서 파밤나방 유충에 대하여 높은 살충율을 나타냄을 확인하였다.As shown in Table 3 and FIG. 5, when the spore suspension of Isaria fumosorosea FG340 isolated from Example 1 of the present invention was tested for insecticidal activity against P. chinensis at different temperature conditions, It was confirmed that the insecticidal rate was about 30 ℃.
이와 같이 본 발명의 신규미생물인 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340균주는 파밤나방유충에 대해 우수한 방제효과를 나타냄으로써 이를 함유하는 미생물 제제는 환경공해와 인체독성이 없어 환경 친화적인 파밤나방 방제용 미생물 농약으로 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있다.
As described above, Isaria fumosorosea FG340, a novel microorganism of the present invention, exhibits excellent controlling effect against larvae of Bacillus thuringiensis, and thus the microorganism preparation containing the same is environmentally friendly and environmentally friendly, It can be used effectively as a pesticide for controlling microorganisms.
상기의 본 발명은 바람직한 실시예 및 시험예를 중심으로 살펴보았으며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 본질적 기술 범위 내에서 상기 본 발명의 상세한 설명과 다른 형태의 실시예들을 구현할 수 있을 것이다. 여기서 본 발명의 본질적 기술범위는 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.
While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, it is to be understood that the invention is not limited to the disclosed exemplary embodiments. You can implement the examples. The scope of the present invention is defined by the appended claims, and all differences within the scope of the claims are to be construed as being included in the present invention.
<110> REPUBLIC OF KOREA(MANAGEMENT : RURAL DEVELOPMENT ADMINISTRATION) <120> New microorganism Isaria fumosorosea FG340 and Microbial control agent for the prevention of Spodoptera exigua larva} <130> P2014-0064 <160> 1 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 571 <212> DNA <213> Isaria sp. <400> 1 tccgtaggtg aacctgcggg ntttttactc cctacccttt gtgacatacc tatcgttgct 60 tcggcggact cgccccggcg tccggacggc cctgcgccgc ccgcgacccg gacccaggcg 120 gccgccggag acccacaaat tctgtttcta tcagtctttc tgaatccgcc gcaaggcaaa 180 acaaatgaat caaaactttc aacaacggat ctcttggttc tggcatcgat gaagaacgca 240 gcgaaatgcg ataagtaatg tgaattgcag aattcagtga atcatcgaat ctttgaacgc 300 acattgcgcc cgccagcatt ctggcgggca tgcctgttcg agcgtcattt caaccctcga 360 caccccttcg ggggagtcgg cgttggggac cggcagcata ccgccggccc cgaaatacag 420 tggcggcccg tccgcggcga cctctgcgta gtactccaac gcgcaccggg aacccgacgc 480 ggccacgccg taaaacaccc aacttctgaa cgttgacctc ggatcaggta ggactacccg 540 ctgaacttaa gcatatcaat aagcggagga a 571 <110> REPUBLIC OF KOREA (MANAGEMENT: RURAL DEVELOPMENT ADMINISTRATION) <120> New microorganism Isaria fumosorosea FG340 and Microbial control agent for the prevention of Spodoptera exigua larva} <130> P2014-0064 <160> 1 <170> Kopatentin 2.0 <210> 1 <211> 571 <212> DNA <213> Isaria sp. <400> 1 tccgtaggtg aacctgcggg ntttttactc cctacccttt gtgacatacc tatcgttgct 60 tcggcggact cgccccggcg tccggacggc cctgcgccgc ccgcgacccg gacccaggcg 120 gccgccggag acccacaaat tctgtttcta tcagtctttc tgaatccgcc gcaaggcaaa 180 acaaatgaat caaaactttc aacaacggat ctcttggttc tggcatcgat gaagaacgca 240 gcgaaatgcg ataagtaatg tgaattgcag aattcagtga atcatcgaat ctttgaacgc 300 acattgcgcc cgccagcatt ctggcgggca tgcctgttcg agcgtcattt caaccctcga 360 caccccttcg ggggagtcgg cgttggggac cggcagcata ccgccggccc cgaaatacag 420 tggcggcccg tccgcggcga cctctgcgta gtactccaac gcgcaccggg aacccgacgc 480 ggccacgccg taaaacaccc aacttctgaa cgttgacctc ggatcaggta ggactacccg 540 ctgaacttaa gcatatcaat aagcggagga a 571
Claims (9)
신규미생물 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340(KACC93199P) 균주.
Comprising a nucleotide sequence of SEQ ID NO: 1 and having a controlling effect against parasitic larvae,
A new microbial isolate , Isaria fumosorosea , FG340 (KACC93199P) strain.
상기 균주는 살충 미생물농약, 엽면살포제 또는 관주살포제 중 어느 하나의 유효성분으로 이용되는,
신규미생물 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340(KACC93199P) 균주.
The method according to claim 1,
Wherein the strain is used as an active ingredient of any one of an insecticidal microbial pesticide, a leaf side spraying agent,
A new microbial isolate , Isaria fumosorosea , FG340 (KACC93199P) strain.
파밤나방 유충 방제용 미생물제제.
A culture medium obtained by cultivating the Isaria fumosorosea FG340 (KACC93199P) strain of the novel microorganism of claim 1 or a microorganism medium thereof at 20 to 30 DEG C for 5 to 15 days As an active ingredient,
Microorganism preparation for control of larvae of Bombyx mori.
상기 미생물 배지는 PDA(Potato dextrose agar)배지인 것을 특징으로 하는,
파밤나방 유충 방제용 미생물제제.
5. The method of claim 4,
Characterized in that the microorganism medium is a PDA (Potato dextrose agar)
Microorganism preparation for control of larvae of Bombyx mori.
Characterized in that the microbial formulation of claims 4 or 6 is spray-applied to a plant in which the larvae are present.
상기 분무처리는 20~30℃의 온도하에서 이루어지는 것이 특징인, 파밤나방 유충을 방제하는 방법.
9. The method of claim 8,
Wherein the spraying treatment is carried out at a temperature of 20 to 30 占 폚.
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