KR101679388B1 - 강글리오사이드 및 시알산 함량이 증진된 녹용 또는 녹각 발효물의 제조방법 및 상기 방법에 의해 제조된 발효물을 함유하는 관절 및 연골 건강제품 - Google Patents

강글리오사이드 및 시알산 함량이 증진된 녹용 또는 녹각 발효물의 제조방법 및 상기 방법에 의해 제조된 발효물을 함유하는 관절 및 연골 건강제품 Download PDF

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Abstract

본 발명은 (a) 분쇄한 녹용 또는 녹각에 물을 첨가한 후 추출하는 단계; (b) 상기 (a)단계의 추출한 녹용 추출물 또는 녹각 추출물에 펙티나아제 및 셀룰라아제를 첨가한 후 효소 반응시키고 가열하는 단계; 및 (c) 상기 (b)단계의 가열한 녹용 추출물 또는 녹각 추출물을 식히고, 상기 식힌 추출물에 락토바실러스 균주를 첨가하여 발효하고 농축하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 강글리오사이드 및 시알산 함량이 증진된 녹용 또는 녹각 발효물의 제조방법, 상기 방법으로 제조된 강글리오사이드 및 시알산 함량이 증진된 녹용 또는 녹각 발효물 및 상기 녹용 및 녹각 발효물을 함유하는 가공식품에 관한 것이다.

Description

강글리오사이드 및 시알산 함량이 증진된 녹용 또는 녹각 발효물의 제조방법 및 상기 방법에 의해 제조된 발효물을 함유하는 관절 및 연골 건강제품{Method for producing fermented velvet antler or hard antler with enhanced ganglioside and sialic acid content and health product for joint and cartilage comprising fermentation product produced by the same method}
본 발명은 녹용 추출물 또는 녹각 추출물을 효소 처리한 후 유산균을 첨가하여 발효하여 제조하는 것을 특징으로 하는 강글리오사이드 및 시알산 함량이 증진된 녹용 또는 녹각 발효물의 제조방법, 상기 방법으로 제조된 강글리오사이드 및 시알산 함량이 증진된 녹용 또는 녹각 발효물 및 상기 녹용 및 녹각 발효물을 함유하는 가공식품에 관한 것이다.
녹용은 사슴의 뿔로서, 보정강장약(補精强壯藥)으로 사용된다. 사슴의 뿔은 늦봄에 저절로 떨어지는데, 곧 그 자리에 새로운 뿔이 자라며, 이 자라기 시작한 뿔을 녹용이라 하고, 부드러운 세모(細毛)로 덮여 있으며, 따뜻하고 혈관이 많이 들어 있으며 칼슘이 풍부하다.
녹용은 분골, 상대, 중대, 하대로 구분되는데, 분골은 녹용의 맨 꼭지부분으로 흰색을 띠고 굵기가 가늘고 조직이 치밀하며, 절단면에 까맣게 각질화된 부분이 있고, 판토크린뿐만 아니라 성장호르몬이 많이 함유되어 있어서 허약아나 병약자에게 좋지만, 생산량 부족으로 가격이 가장 비싸다. 상대는 녹용의 윗부분으로 거의 붉은 핏빛의 연한 갈색을 띠고 비교적 조직이 치밀하며, 판토크린이 많이 함유되어 조혈작용이 있고, 심장과 위를 보한다.
한편, 녹각은 사슴과에 속하는 마녹 또는 매화녹 등 각종 사슴의 각질화된 뿔로서, 녹각은 한의학상의 약명이다. 녹각은 맛이 짜고 성질은 따뜻하고 독이 없으며 간(肝), 신장 두 개의 장부에 들어간다. 녹각은 혈액순환을 촉진시키고 어혈을 없애주며 신장기능과 간기능을 도와주고, 칼슘을 다량 함유하고 있어 뼈를 튼튼하게 해주며, 흔히 녹용의 대용으로 많이 쓰이고 있으나 그 효력은 녹용에 비해 약하다.
녹용 및 녹각은 그 효능이 우수함에도 불구하고 가격이 비싸기 때문에 적용에 한계가 있으며, 녹용 및 녹각에 함유되어 있는 유효성분의 분리 또는 추출이 용이하지 못하여 실제로 인체로의 흡수가 잘 이루어지지 않는 문제점이 있었다.
녹용 및 녹각 내에는 시알산, 헥소스(hexose), 펜토스(pentose), 헥소사민(hexosamine) 및 유로닉산(uronic acid)과 유리 아미노산 및 무기질과 동물조직에 널리 분포되어 있는 특수 지방산의 일종인 프로스타글란딘류와 당지질의 일종인 강글리오사이드(ganglioside)가 존재하는 것으로 보고된 바 있다.
상기 시알산은 뉴라민산(neuraminic acid)의 아실 유도체의 총칭으로 현재 동물계에 20여 종 이상이 알려져 있으며, 바이러스에 대한 리셉터 작용, 독소의 중화, 세포와 분자의 면역학적 인식 부위, 세포접착 또는 암의 전이 등 중요한 생리작기능에 관여하고 있는 산성당으로 보고되어 있다. 대사과정에서 일시적으로 유리형으로 존재할 뿐, 대부분 당쇄의 비환원 말단에 글리코시드로 결합되어 올리고당의 형태로 존재한다.
강글리오시드(ganglioside)는 글리코스핑고당지질(glycosphingolipid)의 하나로서 친수성인 당부분과 소수성인 세라마이드(ceramide)로 구성되어 있는 양쪽성 물질로서, 한 개 이상의 시알산(N-acetylneuraminic acid: sialic acid)을 가지고 있는 당지질로서 중추신경 조직 내에 존재하고 있으며 신경 기능과 세포막의 여러 가지 기능에 관여한다. 또한, 암세포를 정상세포로 환원하는 기능과 면역력 향상, 집중력 강화, 기억력 향상, 관절염 개선 등에 효과가 있는 것으로 알려져 있다.
한국등록특허 제0808060호에는 바실러스 리케니포미스 균주를 이용한 녹용 발효물의 제조방법이 개시되어 있고, 한국등록특허 제0966139호에는 왕겨 또는 쌀겨와 유산균을 첨가하여 발효한 녹용 발효물의 제조방법이 개시되어 있으나, 본 발명의 강글리오사이드 및 시알산 함량이 증진된 녹용 또는 녹각 발효물의 제조방법과는 상이하다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 안출된 것으로서, 본 발명의 목적은 강글리오사이드(ganglioside) 및 시알산(sialic acid) 함량이 증진된 녹용 또는 녹각 발효물을 제조하기 위해, 효소 처리 및 발효조건 등의 제조조건을 최적화하여 녹용 또는 녹각 발효물을 제조함으로써, 기존의 녹용 또는 녹각을 이용한 발효물 및 추출물에 비해 강글리오사이드 및 시알산 함량이 다량 증진된 고품질의 녹용 또는 녹각 발효물의 제조방법을 제공하는 데 있다.
상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 (a) 분쇄한 녹용 또는 녹각에 물을 첨가한 후 추출하는 단계; (b) 상기 (a)단계의 추출한 녹용 추출물 또는 녹각 추출물에 펙티나아제 및 셀룰라아제를 첨가한 후 효소 반응시키고 가열하는 단계; 및 (c) 상기 (b)단계의 가열한 녹용 추출물 또는 녹각 추출물을 식히고, 상기 식힌 추출물에 락토바실러스 균주를 첨가하여 발효하고 농축하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 강글리오사이드 및 시알산 함량이 증진된 녹용 또는 녹각 발효물의 제조방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 강글리오사이드 및 시알산 함량이 증진된 녹용 또는 녹각 발효물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 녹용 또는 녹각 발효물을 함유하는 가공식품을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 녹용 발효물 및 녹각 발효물에 감초, 당귀, 우슬, 두충, 오가피 및 목과 혼합 추출물, 홍삼 농축액 및 글루코사민을 혼합한 혼합물에 사이클로덱스트린을 첨가한 후 분무 건조하여 과립화하여 제조하는 것을 특징으로 하는 녹용 및 녹각 발효물을 함유하는 가공식품의 제조방법을 제공한다.
본 발명은 인체에 유용한 성분인 강글리오사이드 및 시알산 함량을 증진시킬 수 있도록 추출, 효소처리 및 발효하여 녹용 또는 녹각 발효물을 제조함으로써, 강글리오사이드 및 시알산 함량이 증진되어 건강 지향의 새로운 형태의 기능성 식품을 제공하여 기존의 녹용 및 녹각 제품과는 차별화된 제품을 제공할 수 있고, 상기 녹용 또는 녹각 발효물을 다양한 건강기능식품에 유용하게 쓰일 수 있는 이점이 있다.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은
(a) 분쇄한 녹용 또는 녹각에 물을 첨가한 후 추출하는 단계;
(b) 상기 (a)단계의 추출한 녹용 추출물 또는 녹각 추출물에 펙티나아제 및 셀룰라아제를 첨가한 후 효소 반응시키고 가열하는 단계; 및
(c) 상기 (b)단계의 가열한 녹용 추출물 또는 녹각 추출물을 식히고, 상기 식힌 추출물에 락토바실러스 균주를 첨가하여 발효하고 농축하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 강글리오사이드 및 시알산 함량이 증진된 녹용 또는 녹각 발효물의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 녹용 또는 녹각 발효물의 제조방법에서, 상기 (a)단계의 추출은 바람직하게는 분쇄한 녹용 또는 녹각에 물 6~10배량(v/w)을 첨가한 후 82~92℃에서 3~5시간씩 1~3회 추출할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 분쇄한 녹용 또는 녹각에 물 8배량(v/w)을 첨가한 후 87℃에서 4시간씩 2회 추출할 수 있다. 상기와 같은 조건에서 녹용 및 녹각을 추출하는 것이 쓴맛은 최소화하면서, 추출 수율이 높고 유효성분을 다량 추출할 수 있었다.
또한, 본 발명의 녹용 또는 녹각 발효물의 제조방법에서, 상기 (b)단계는 바람직하게는 녹용 추출물 또는 녹각 추출물에 펙티나아제 및 셀룰라아제를 첨가한 후 45~55℃에서 66~78시간 동안 효소 반응시키고 85~95℃에서 25~35분 동안 가열할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 녹용 추출물 또는 녹각 추출물에 펙티나아제 및 셀룰라아제를 첨가한 후 50℃에서 72시간 동안 효소 반응시키고 90℃에서 30분 동안 가열할 수 있다. 상기와 같은 종류의 효소를 모두 이용하여 효소 반응시킴으로써, 강글리오사이드 및 시알산과 같은 유효성분 함량을 다량 증진시킬 수 있었다.
또한, 본 발명의 녹용 또는 녹각 발효물의 제조방법에서, 상기 (c)단계의 락토바실러스 균주는 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 및 락토바실러스 롱검(Lactobacillus longum) 혼합 균주일 수 있다. 상기와 같은 3종의 락토바실러스 균주를 모두 사용하여 녹용 및 녹각을 발효하는 것이 강글리오사이드 및 시알산 함량을 더욱 증진시킬 수 있었다.
본 발명의 녹용 또는 녹각 발효물의 제조방법은, 보다 구체적으로는
(a) 분쇄한 녹용 또는 녹각에 물 6~10배량(v/w)을 첨가한 후 82~92℃에서 3~5시간씩 1~3회 추출하는 단계;
(b) 상기 (a)단계의 추출한 녹용 추출물 또는 녹각 추출물에 펙티나아제 및 셀룰라아제를 첨가한 후 45~55℃에서 66~78시간 동안 효소 반응시키고 85~95℃에서 25~35분 동안 가열하는 단계; 및
(c) 상기 (b)단계의 가열한 녹용 추출물 또는 녹각 추출물을 식히고, 상기 식힌 추출물에 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 및 락토바실러스 롱검(Lactobacillus longum)을 첨가하여 34~40℃에서 44~52시간 동안 발효하고 농축하는 단계를 포함할 수 있으며,
더욱 구체적으로는
(a) 분쇄한 녹용 또는 녹각에 물 8배량(v/w)을 첨가한 후 87℃에서 4시간씩 2회 추출하는 단계;
(b) 상기 (a)단계의 추출한 녹용 추출물 또는 녹각 추출물에 펙티나아제 및 셀룰라아제를 첨가한 후 50℃에서 72시간 동안 효소 반응시키고 90℃에서 30분 동안 가열하는 단계; 및
(c) 상기 (b)단계의 가열한 녹용 추출물 또는 녹각 추출물을 식히고, 상기 식힌 추출물에 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 및 락토바실러스 롱검(Lactobacillus longum)을 첨가하여 37℃에서 48시간 동안 발효하고 농축하는 단계를 포함할 수 있다.
본 발명은 또한, 상기 방법으로 제조된 강글리오사이드 및 시알산 함량이 증진된 녹용 또는 녹각 발효물을 제공한다.
본 발명은 또한, 상기 녹용 또는 녹각 발효물을 함유하는 가공식품을 제공한다. 상기 가공식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 발효물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 떡류, 누룽지, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 가공식품을 모두 포함한다.
본 발명은 또한, 상기 녹용 발효물 및 녹각 발효물에 감초, 당귀, 우슬, 두충, 오가피 및 목과 혼합 추출물, 홍삼 농축액, 글루코사민 및 당류를 혼합한 혼합물에 사이클로덱스트린을 첨가한 후 분무 건조하여 과립화하여 제조하는 것을 특징으로 하는 녹용 및 녹각 발효물을 함유하는 가공식품의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 녹용 및 녹각 발효물을 함유하는 가공식품의 제조방법은, 보다 구체적으로는
(a) 감초, 당귀, 우슬, 두충, 오가피 및 목과를 23~28:15~18:15~18:15~18:15~18:7~9 중량비율로 혼합한 혼합물에 물 8~10배량(v/w)을 첨가한 후 80~90℃에서 3~5시간씩 1~3회 추출한 후 여과하고 농축하여 생약 추출물을 제조하는 단계;
(b) 홍삼에 주정 또는 물을 5~10배량(v/w) 첨가한 후 80~90℃에서 6~10시간씩 2~4회 추출한 후 여과하고 농축하여 홍삼 농축액을 제조하는 단계; 및
(c) 혼합물 100 중량부를 기준으로, 상기 (a)단계의 생약 추출물 16~24 중량부 및 상기 (b)단계의 홍삼 농축액 4~6 중량부와 2~3 brix의 녹용 발효물 8~12 중량부, 16~20 brix의 녹각 발효물 8~12 중량부, 글루코사민 12~18 중량부 및 당류 35~45 중량부를 혼합한 혼합물에 혼합물 대비 사이클로덱스트린을 8~12 중량% 첨가한 후 과립으로 성형하는 단계를 포함할 수 있으며,
더욱 구체적으로는
(a) 감초, 당귀, 우슬, 두충, 오가피 및 목과를 25:16.7:16.7:16.7:16.7:8.2 중량비율로 혼합한 혼합물에 물 9배량(v/w)을 첨가한 후 85℃에서 4시간씩 2회 추출한 후 여과하고 농축하여 생약 추출물을 제조하는 단계;
(b) 홍삼에 주정 또는 물을 5~10배량(v/w) 첨가한 후 88℃에서 8시간씩 3회 추출한 후 여과하고 농축하여 홍삼 농축액을 제조하는 단계; 및
(c) 혼합물 100 중량부를 기준으로, 상기 (a)단계의 생약 추출물 20 중량부 및 상기 (b)단계의 홍삼 농축액 5 중량부와 2.5 brix의 녹용 발효물 10 중량부, 18 brix의 녹각 발효물 10 중량부, 글루코사민 15 중량부 및 당류 40 중량부를 혼합한 혼합물에 혼합물 대비 사이클로덱스트린을 10 중량% 첨가한 후 과립으로 성형하는 단계를 포함할 수 있다.
상기와 같은 조건으로 제조된 가공식품은 녹용 및 녹각의 쓴맛과 이취는 감소하고, 기호도가 우수하여 섭취가 용이한 과립으로 제조할 수 있었고, 상기 식품은 관절 및 연골 건강을 위한 용도로 섭취할 수 있다.
이하, 본 발명의 실시예를 들어 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
제조예 1: 녹용 발효물
(a) 50 mm로 분쇄한 녹용에 정제수를 8배량(v/w)을 첨가한 후 87℃에서 4시간 동안 추출한 후 여과하여 1차 추출물을 제조하고, 상기 여과하고 남은 녹용에 다시 정제수를 8배량(v/w)을 첨가한 후 87℃에서 4시간 동안 추출한 후 여과하여 2차 추출물을 제조하고, 상기 1차 추출물 및 상기 2차 추출물을 혼합하여 5 brix로 농축하여 녹용 추출물을 제조하였다.
(b) 상기 (a)단계의 녹용 추출물에 펙티나아제 및 셀룰라아제 혼합 효소를 5% 첨가한 후 50℃에서 72시간 동안 효소 반응시키고 90℃에서 30분 동안 가열하여 효소를 실활시켰다.
(c) 상기 (b)단계의 가열한 녹용 추출물을 식히고, 상기 식힌 추출물에 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 및 락토바실러스 롱검(Lactobacillus longum)의 혼합 유산균을 1% 첨가하여 37℃에서 48시간 동안 발효하고 22 brix로 농축하였다.
제조예 2: 녹각 발효물
(a) 50 mm로 분쇄한 녹각에 정제수를 8배량(v/w)을 첨가한 후 87℃에서 4시간 동안 추출한 후 여과하여 1차 추출물을 제조하고, 상기 여과하고 남은 녹각에 다시 정제수를 8배량(v/w)을 첨가한 후 87℃에서 4시간 동안 추출한 후 여과하여 2차 추출물을 제조하고, 상기 1차 추출물 및 상기 2차 추출물을 혼합하여 5 brix로 농축하여 녹각 추출물을 제조하였다.
(b) 상기 (a)단계의 녹각 추출물에 펙티나아제 및 셀룰라아제 혼합 효소를 5% 첨가한 후 50℃에서 72시간 동안 효소 반응시키고 90℃에서 30분 동안 가열하여 효소를 실활시켰다.
(c) 상기 (b)단계의 가열한 녹각 추출물을 식히고, 상기 식힌 추출물에 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 및 락토바실러스 롱검(Lactobacillus longum)의 혼합 유산균을 1% 첨가하여 37℃에서 48시간 동안 발효하고 22 brix로 농축하였다.
제조예 3: 녹용 및 녹각을 함유하는 관절 및 연골 건강기능식품
(a) 감초, 당귀, 우슬, 두충, 오가피 및 목과(木瓜)를 25:16.7:16.7:16.7:16.7:8.2의 중량비율로 혼합한 혼합물에 9배량(v/w)의 정제수를 첨가한 후 85℃에서 4시간 동안 추출한 후 여과하여 1차 추출물을 제조하고, 상기 여과하고 남은 혼합물에 9배량(v/w)의 정제수를 첨가한 후 85℃에서 4시간 동안 추출한 후 여과하여 2차 추출물을 제조하고, 상기 1차 추출물 및 상기 2차 추출물을 혼합한 후 10℃ 이하로 냉각하여 8,000 rpm으로 원심분리하고 수분 함량이 40%가 될 때까지 농축하여 생약 추출물을 제조하였다.
(b) 5 mesh 이하로 조분쇄한 홍삼에 70% 주정을 10배량(v/w) 첨가한 후 85℃에서 8시간 동안 추출한 후 여과하여 1차 추출물을 제조하고, 상기 여과하고 남은 홍삼에 2차 및 3차 추출은 각각 50% 주정 및 정제수를 5배량 첨가하여 1차 추출과 동일한 온도 및 시간에서 추출하고, 상기 1차, 2차 및 3차 추출물을 혼합한 후 10℃ 이하로 냉각하여 6,800 rpm으로 원심분리하고 수분함량 40% 이하로 농축하여 홍삼 농축액을 제조하였다.
(c) 상기 (a)단계의 생약 추출물 20 중량%, 상기 (b)단계의 홍삼 농축액 5 중량%, 제조예 1의 녹용 발효물(2.5 brix) 10 중량% 및 제조예 2의 녹각 발효물(18 brix) 10 중량%과 글루코사민 15 중량% 및 당류 40 중량%를 혼합한 혼합물에 혼합물 대비 사이클로덱스트린을 10% 첨가한 후, 유동층 과립기를 이용하여 100℃ 이하에서 과립으로 성형하고, 스틱파우치에 포장하였다.
1. 강글리오사이드 및 시알산 함량 측정
녹용 또는 녹각 발효물을 2 brix로 희석하여 냉동시킨 후 분석시 해동하여 HPLC로 강글리오사이드(ganglioside, S-GAG) 및 시알산(sialic acid) 함량을 정량하였다.
실시예 1: 효소 종류에 따른 녹용 발효물의 지표성분 함량 변화
제조예 1의 방법으로 제조된 녹용 발효물과 제조예 1의 방법으로 제조하되, (b)단계의 효소 종류를 달리하여 제조된 녹용 발효물(비교예 1 내지 3)을 가지고 강글리오사이드 및 시알산 함량을 비교한 결과는 하기 표 1과 같다.
비교예 1은 상기 제조예 1의 방법으로 제조하되, (b)단계의 효소 처리하지 않고 녹용 추출물을 바로 유산균 발효하여 제조된 녹용 발효물을 의미하고, 비교예 2는 상기 제조예 1의 방법으로 제조하되, 펙티나아제를 사용하지 않고 셀룰라아제 사용하여 효소 반응시켜 제조된 녹용 발효물을 의미하고, 비교예 3은 상기 제조예 1의 방법으로 제조하되, 펙티나아제 및 셀룰라아제 혼합 효소를 사용하지 않고, 프로테아제를 사용하여 제조된 녹용 발효물을 의미한다.
녹용 발효물의 지표성분 함량
구분 S-GAG(㎍/ml) sialic acid(㎍/ml)
제조예 1 78.1±0.12 22.0±0.01
비교예 1 62.2±0.06 11.4±0.05
비교예 2 67.3±0.24 12.6±0.04
비교예 3 58.8±0.16 10.2±0.09
그 결과, 표 1에 기재된 바와 같이, 강글리오사이드(ganglioside) 함량의 경우 제조예 1이 비교예들에 비해 약 16.0~32.8% 함량이 증가하였고, 시알산(sialic acid) 함량의 경우 제조예 1이 비교예들에 비해 약 74.6~115.7% 증가하였다. 따라서, 녹용 발효물 제조 시 펙티나아제 및 셀룰라아제 혼합 효소를 이용하여 효소 반응하는 것이 녹용 발효물의 지표성분 함량이 증진됨을 확인할 수 있었다.
실시예 2: 유산균 종류에 따른 녹용 발효물의 지표성분 함량 변화
제조예 1의 방법으로 제조된 녹용 발효물과 제조예 1의 방법으로 제조하되, (c)단계의 유산균 종류를 달리하여 제조된 녹용 발효물(비교예 4 내지 6)을 가지고 강글리오사이드 및 시알산 함량을 비교한 결과는 하기 표 2와 같다.
비교예 4는 상기 제조예 1의 방법으로 제조하되, 효소 처리한 녹용 추출물을 유산균으로 발효하지 않고 제조된 녹용 추출물을 의미하고, 비교예 5는 상기 제조예 1의 방법으로 제조하되, (c)단계에서 락토바실러스 애시도필러스 및 락토바실러스 롱검을 사용하지 않고, 락토바실러스 플란타룸 균주를 이용하여 제조된 녹용 발효물을 의미하고, 비교예 6은 (c)단계에서 락토바실러스 균주를 사용하지 않고, 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)을 사용하여 발효한 녹용 발효물을 의미한다.
녹용 발효물의 지표성분 함량
구분 S-GAG(㎍/ml) sialic acid(㎍/ml)
제조예 1 78.1±0.12 22.0±0.01
비교예 4 67.2±0.10 13.4±0.04
비교예 5 68.1±0.08 15.6±0.01
비교예 6 68.6±0.14 14.2±0.04
그 결과, 표 2에 기재된 바와 같이, 강글리오사이드(ganglioside) 함량의 경우 제조예 1이 비교예들에 비해 약 13.8~16.2% 함량이 증가하였고, 시알산(sialic acid) 함량의 경우 제조예 1이 비교예들에 비해 약 41.0~64.2% 증가하였다. 따라서, 녹용 발효물 제조 시 락토바실러스 애시도필러스, 락토바실러스 플란타룸 및 락토바실러스 롱검의 혼합 유산균을 이용하여 발효하여 녹용 발효물을 제조하는 것이 녹용 발효물의 지표성분 함량이 증진됨을 확인할 수 있었다.
실시예 3: 효소 종류에 따른 녹각 발효물의 지표성분 함량 변화
제조예 2의 방법으로 제조된 녹각 발효물과 제조예 2의 방법으로 제조하되, (b)단계의 효소 종류를 달리하여 제조된 녹각 발효물(비교예 7 내지 9)을 가지고 강글리오사이드 및 시알산 함량을 비교한 결과는 하기 표 3과 같다.
비교예 7은 상기 제조예 2의 방법으로 제조하되, (b)단계의 효소 처리하지 않고 녹각 추출물을 바로 유산균 발효하여 제조된 녹각 발효물을 의미하고, 비교예 8은 상기 제조예 2의 방법으로 제조하되, 셀룰라아제를 사용하지 않고 펙티나아제를 사용하여 효소 반응시켜 제조된 녹각 발효물을 의미하고, 비교예 9는 상기 제조예 2의 방법으로 제조하되, 펙티나아제 및 셀룰라아제 혼합 효소를 사용하지 않고, 리파아제를 사용하여 제조된 녹각 발효물을 의미한다.
녹각 발효물의 지표성분 함량
구분 S-GAG(㎍/ml) sialic acid(㎍/ml)
제조예 2 21.7±0.05 4.7±0.02
비교예 7 13.5±0.06 1.9±0.01
비교예 8 15.3±0.02 2.6±0.04
비교예 9 14.9±0.01 2.4±0.08
그 결과, 표 3에 기재된 바와 같이, 강글리오사이드(ganglioside) 함량의 경우 제조예 2의 녹각 발효물이 비교예들에 비해 약 41.8~60.7% 함량이 증가하였고, 시알산(sialic acid) 함량의 경우 제조예 2의 녹각 발효물이 비교예들에 비해 약 80.8~147.4% 증가하였다. 따라서, 녹각 발효물 제조 시 펙티나아제 및 셀룰라아제 혼합 효소를 이용하여 효소 반응하는 것이 녹각 발효물의 지표성분 함량이 증진됨을 확인할 수 있었다.
실시예 4: 유산균 종류에 따른 녹각 발효물의 지표성분 함량 변화
제조예 2의 방법으로 제조된 녹각 발효물과 제조예 2의 방법으로 제조하되, (c)단계의 유산균 종류를 달리하여 제조된 녹각 발효물(비교예 10 내지 12)을 가지고 강글리오사이드 및 시알산 함량을 비교한 결과는 하기 표 4와 같다.
비교예 10은 상기 제조예 2의 방법으로 제조하되, 효소 처리한 녹각 추출물을 유산균으로 발효하지 않고 제조된 녹각 추출물을 의미하고, 비교예 11은 상기 제조예 2의 방법으로 제조하되, (c)단계에서 락토바실러스 플란타룸 및 락토바실러스 롱검을 사용하지 않고, 락토바실러스 애시도필러스 균주를 이용하여 제조된 녹각 발효물을 의미하고, 비교예 12는 (c)단계에서 락토바실러스 균주를 사용하지 않고, 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) 균주를 사용하여 발효한 녹각 발효물을 의미한다.
녹각 발효물의 지표성분 함량
구분 S-GAG(㎍/ml) sialic acid(㎍/ml)
제조예 2 21.7±0.05 4.7±0.02
비교예 10 15.1±0.04 2.4±0.02
비교예 11 16.9±0.03 3.0±0.03
비교예 12 15.8±0.03 2.6±0.02
그 결과, 표 4에 기재된 바와 같이, 강글리오사이드(ganglioside) 함량의 경우 제조예 2가 비교예들에 비해 약 28.4~43.7% 함량이 증가하였고, 시알산(sialic acid) 함량의 경우 제조예 2가 비교예들에 비해 약 56.7~95.8% 증가하였다. 따라서, 녹각 발효물 제조 시 락토바실러스 애시도필러스, 락토바실러스 플란타룸 및 락토바실러스 롱검의 혼합 유산균으로 발효하여 녹각 발효물을 제조하는 것이 녹각 발효물의 지표성분 함량이 증진됨을 확인할 수 있었다.

Claims (6)

  1. (a) 분쇄한 녹용 또는 녹각에 물을 첨가한 후 추출하는 단계;
    (b) 상기 (a)단계의 추출한 녹용 추출물 또는 녹각 추출물에 펙티나아제 및 셀룰라아제를 첨가한 후 효소 반응시키고 가열하는 단계; 및
    (c) 상기 (b)단계의 가열한 녹용 추출물 또는 녹각 추출물을 식히고, 상기 식힌 추출물에 락토바실러스 균주를 첨가하여 발효하고 농축하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 강글리오사이드(ganglioside) 및 시알산(sialic acid) 함량이 증진된 녹용 또는 녹각 발효물의 제조방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 락토바실러스 균주는 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 및 락토바실러스 롱검(Lactobacillus longum) 혼합 균주인 것을 특징으로 하는 강글리오사이드 및 시알산 함량이 증진된 녹용 또는 녹각 발효물의 제조방법.
  3. 제1항에 있어서,
    (a) 분쇄한 녹용 또는 녹각에 물 6~10배량(v/w)을 첨가한 후 82~92℃에서 3~5시간씩 1~3회 추출하는 단계;
    (b) 상기 (a)단계의 추출한 녹용 추출물 또는 녹각 추출물에 펙티나아제 및 셀룰라아제를 첨가한 후 45~55℃에서 66~78시간 동안 효소 반응시키고 85~95℃에서 25~35분 동안 가열하는 단계; 및
    (c) 상기 (b)단계의 가열한 녹용 추출물 또는 녹각 추출물을 식히고, 상기 식힌 추출물에 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 및 락토바실러스 롱검(Lactobacillus longum)을 첨가하여 34~40℃에서 44~52시간 동안 발효하고 농축하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 강글리오사이드 및 시알산 함량이 증진된 녹용 또는 녹각 발효물의 제조방법.
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