KR101658616B1 - Cosmetics Compositions Comprising Basella spp. Extract to Regulate Expression of Vital Protein as Active Ingredients - Google Patents

Abstract

본 발명은 황궁채 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물 및 황궁채 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부용 약제 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 화장료 조성물은 항산화 효과, 티로시나아제 저해효과, 세포활성 효과, 항노화 효과(MMP-1 단백질 발현 저해), 피부세포노화 개선, Caveolin-1 발현 저해 효과, CCN-1 발현 저해 효과, 피부 탄력 개선 및 주름 개선 효과 등의 효과로 피부보습력과 미백 기능을 향상시키고, 표피의 각질 탈락을 원할하게 하여 피부 표면을 매끄럽게 해주는 효과가 있다.The present invention relates to a cosmetic composition comprising an ash extract as an active ingredient and a pharmaceutical composition for dermatitis containing an extract of an ash extract. The cosmetic composition of the present invention is useful as an antioxidant, a tyrosinase inhibiting effect, a cell activating effect, an antiaging effect (inhibiting MMP-1 protein expression), skin cell senescence improvement, caveolin-1 expression inhibiting effect, CCN- Improving the skin elasticity and wrinkle improving effect, and improving the skin moisturizing power and whitening function.

Description

노화 관련 생체단백질의 발현조절이 가능한 황궁채 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물 {Cosmetics Compositions Comprising Basella spp. Extract to Regulate Expression of Vital Protein as Active Ingredients }(Cosmetics Compositions Comprising Basella spp.) As an active ingredient, which is capable of controlling the expression of an aging-related bioprotein. Extract to Regulate Expression of Vital Protein as Active Ingredients}

본 발명은 노화 관련 생체단백질의 발현조절이 가능한 황궁채 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 화장료 조성물은 피부 탄력 및 주름 개선 효과가 탁월하고 보습력, 표피의 각질탈락을 원활하게 하여, 피부 표면을 매끄럽게 할 수 있다.
The present invention relates to a cosmetic composition comprising as an active ingredient, an extract of Immaculaceae which is capable of controlling the expression of a biological protein related to aging. The cosmetic composition according to the present invention is superior in the skin elasticity and wrinkle-reducing effect, and has a moisturizing ability, smooth skin of the skin, and smooth skin surface.

피부는 다양한 외부 요인들로부터 물리적, 화학적 상해를 직접 받는 부위인 동시에 또한 이들의 기능적, 구조적 손상을 치유할 수 있는 능력을 가진 우리가 살아가는데 없어서는 안 될 조직이다. 그러나 우리의 피부는, 예를 들어, 각종 오염물질과 스트레스 등으로 인해 손상을 입게 되는데, 이와 같은 손상으로 피부의 세포 증식이 제대로 이루어지지 않게 되면 피부는 더욱 더 큰 손상을 입게 되고 피부 탄력이 저하되며, 주름이 생성 된다. 피부가 노화되면, 피부 탄력에 중요한 역할을 하고 있는 매트릭스(Matrix) 안의 콜라겐(collagen), 뮤코다당류(mucopolysaccharide) 및 히알루론산(hyaluronic acid)의 양이 줄어들고, 불용성 콜레겐의 양이 증가한다. 이에 따라, 진피는 피부의 수분을 유지하기 어렵게 되고, 피부는 거칠게 된다. 나아가 피지샘과 땀샘의 기능도 감소하여 피지와 땀의 양이 점차로 줄어들게 된다. 이로 인해 피지막은 적당히 생성되지 못하고, 피부 수화에 대한 보호막을 잃게 되어, 결국 피부는 건조하게 되고, 투명성을 잃게 되어 피부단백질의 탄력이 감소되고 주름이 생성된다.Skin is a site that directly receives physical and chemical injuries from various external factors, and is an indispensable organization for us to have the ability to heal their functional and structural damage. However, our skin, for example, is damaged due to various pollutants and stresses. If such a damage does not result in proper cell proliferation of the skin, the skin becomes more damaged and the skin elasticity is lowered And wrinkles are generated. As the skin ages, the amount of collagen, mucopolysaccharide, and hyaluronic acid in the matrix, which plays an important role in skin elasticity, decreases and the amount of insoluble cholesterol increases. As a result, the dermis becomes difficult to maintain the moisture of the skin, and the skin becomes rough. Furthermore, sebaceous glands and sweat glands decrease in function, gradually reducing the amount of sebum and sweat. As a result, the sebum is not properly produced, the protective film against skin hydration is lost, and the skin is finally dried, the transparency is lost, the elasticity of the skin protein is reduced, and wrinkles are formed.

한편, 피부의 보습 작용도 기능을 다하지 못하면 피부 탄력 저하의 원인이 된다. 즉 피부의 보습력 상실은 피부 노화의 중요한 원인이 되고 있다. 피부의 수분균형은 표피에 의해 조절된다. 표피의 각질층은 죽은 세포들이 쌓여 있는 것이지만, 피부의 수분유지를 위해서 매우 중요한 역할을 한다. 사람의 생체는 대부분이 생명의 유지에 중요한 역할을 하는 물로 구성되어 있다. 정상 피부에서의 수분은 체내에 70%, 각질층에 20%가 함유되어 있어 피부의 탄력성 및 유연성을 지탱해 준다. 각질층의 수분이 10% 이하일 경우, 피부는 건성화되고 피부 트러블의 원인이 된다고 알려져 있다. 규칙적인 각질화(keratinization)로 생성된 각질층 안의 수분의 양은 항상 10 내지 20%를 유지한다. 현재 피부 내 수분 유지 방법은 폐색제(occlusive agent)를 사용하고 있다. 상기 폐색제는 수분 손실을 막는 장벽을 피부 위에 형성함으로써, 수분 부유를 촉진하는 소수성 물질이다. 가장 일반적으로 사용되는 폐색제로는 바세린, 라놀린, 코코아 버터, 미네랄 오일 및 실리콘이 있으며, 화장품으로 제조하기 위하여 소듐 라우릴 설페이트(sodium lauryl sulfate), 디메틸 술폭사이드(dimetyl sulfoxide), 크로톤 오일(croton oil) 및 수산화나트륨 등과 같은 원료를 20 내지 50여 종 첨가시킨다. 상기 원료들이 제품에 적용되면, 피부에 염증, 가려움증, 알러지 등의 자극을 일으킬 수 있다. 피부가 자극을 일으키는 물질에 노출되면 각질층이 손상을 받게 되고, 따라서 각질층 손상의 지표가 되는 경표피 수분 손실(transepidermal water loss)이 증가하게 되며, 이는 1차적인 염증반응의 원인이 되기도 한다.On the other hand, if the moisturizing function of the skin does not function properly, it may cause skin elasticity degradation. That is, loss of moisture of the skin is an important cause of skin aging. The moisture balance of the skin is controlled by the epidermis. The stratum corneum of the epidermis is an accumulation of dead cells, but plays a very important role in maintaining moisture in the skin. The human body is composed mostly of water that plays an important role in the maintenance of life. The moisture content of the normal skin is 70% in the body and 20% in the stratum corneum, which supports the elasticity and flexibility of the skin. When the water content of the stratum corneum is 10% or less, it is known that the skin becomes dry and causes skin troubles. The amount of moisture in the stratum corneum produced by regular keratinization is always 10-20%. Presently, the method of water retention in the skin uses an occlusive agent. The occlusive agent is a hydrophobic substance which promotes floating of water by forming a barrier against moisture loss on the skin. The most commonly used occlusive agents are vaseline, lanolin, cocoa butter, mineral oil and silicone. To make cosmetics, sodium lauryl sulfate, dimethyl sulfoxide, croton oil And 20 to 50 kinds of raw materials such as sodium hydroxide and the like are added. When the raw materials are applied to a product, irritation such as inflammation, itching, and allergy may occur on the skin. Exposure of the skin to irritating substances damages the stratum corneum, leading to an increase in transepidermal water loss, an indicator of stratum corneum damage, which may also be a primary inflammatory response.

이러한 이유로 종래의 화장품은 피부에 유해한 부작용이 발생되는 문제점이 있고 때문에 피부 보습 효과 및 보호 효과 등을 얻는데 한계가 있다.For this reason, conventional cosmetics have a problem that harmful side effects are generated on the skin, and thus there is a limit to obtaining a skin moisturizing effect and a protective effect.

한편, 황궁채(Basella spp.)는 석죽목, 낙규과의 상록 덩굴성 식물로 여러해살이풀로 초본성의 덩굴식물로 최고 4m까지 자란다. 잎은 타원형으로 광택이 나고 녹색 또는 자색을 띤다. 또한 자색계는 덩굴성이 강하지만 녹색계는 덩굴성이 약하다. 인디언시금치(Basella alba L.), 실론시금치(Salyon spinach), 말라바시금치(Malabar spinach) 등으로도 불리는데, 원산지는 동남아시아 및 열대지방으로 덩굴성 2년생 식물이다. 태국에서는 황실채소, 중국, 대만 등에서는 황궁채(皇宮菜)라고도 불린다. 줄기와 잎이 녹색인 청경종(靑莖種)과 붉은색인 적경종(赤莖種)이 있다. 잎은 다육질로 털이 없고 윤기가 나고, 꽃은 백색이며, 어린열매는 녹색을 띠지만 완숙되면 짙은 보라색으로 직경 3~5㎝의 아름다운 열매를 맺는다. 또한, 영양 면에서도 우수한데, 비타민이나 칼슘, 철분 등이 풍부하여 현지에서는 여름철 채소로서 귀중하게 이용된다. 생잎보다도 건조된 잎은 영양가가 뛰어난데 칼슘은 시금치의 약 45배, 철분과 비타민 A도 8배 정도 많은 것으로 보고되고 있다.On the other hand, Imperium japonica (Basella spp.) Is a perennial plant which is an evergreen vine plant of Chrysanthemum japonica and Araliaceae. It grows up to 4m as an herbaceous vine plant. Leaves are elliptical, lustrous and green or purple. The green color system is strong in vine, but green system is weak in vine. It is also known as Indian spinach (Basella alba L.), Ceylon spinach (Salyon spinach), Malabar spinach, etc. Its origin is Southeast Asia and the tropics. Imperial vegetables in Thailand, and Imperial Palace (皇宮 菜) in China and Taiwan. There are blue-green seeds and red-indexed green seeds with green stem and leaf. Leaves are fleshy, hairs-free, shiny, flowers are white, young fruits are green, but when ripe, they are dark purple and bear beautiful fruit with a diameter of 3 ~ 5㎝. In addition, it is excellent in nutrition, but it is rich in vitamins, calcium, and iron, and is used as a summer vegetable locally. Leaves dry than leaves are nutritious, calcium is about 45 times more than spinach, iron and vitamin A is reported to be 8 times more.

또한 고욤나무(Diospyros lotus)는 쌍떡잎식물 감나무목 감나무과의 낙엽 교목으로 고욤·고양나무, 소시라고도 한다. 마을 부근에 많이 자란다. 높이 약 10m이다. 껍질은 회갈색이고 잔가지에 회색 털이 있으나 차차 없어진다. 잎은 어긋나고 타원형 또는 긴 타원형으로 끝이 급하게 좁아져 뾰족하고, 길이 6∼12㎝, 나비 5∼7㎝로 톱니는 없다. 잎자루는 길이 8∼12㎜이다.Also, Gyomam (Diospyros lotus) is a deciduous arboreous tree with dicotyledonous plant, persimmon tree, and persimmon tree. It grows a lot in the vicinity of the village. It is about 10 meters high. The skin is grayish brown and the twigs have gray hairs but gradually disappear. Leaves are alternate phyllotaxis, elliptical or long elliptical, sharp end narrowed, pointed, 6-12cm long, 5 ~ 7cm wide with no saw teeth. The petiole is 8-12mm long.

꽃은 암수딴그루이며 항아리 모양이다. 6월에 검은 자줏빛으로 피고 새가지 밑부분의 잎겨드랑이에 달린다. 수꽃은 2∼3개씩 한군데에 달리며 수술이 16개이고, 암꽃에는 꽃밥이 없는 8개의 수술과 1개의 암술이 있다. 열매는 둥근 장과(漿果)로 지름 1.5㎝ 정도이며 10월에 익는다. The flowers are dioecious and have a jar shape. It blooms in black purple in June and runs on the axilla of the lower part of the new branch. There are 16 stamens, 2 stamens, 1 stamina, 8 stamens and 1 pistil. Fruits are round berries with a diameter of about 1.5㎝ and ripen in October.

열매에는 타닌이 들어 있으며 빛깔은 노란색 또는 어두운 자줏빛이다. 덜익은 것을 따서 저장하였다가 먹기도 한다. 열매의 생김새에 따라 여러 가지 품종으로 나뉜다. 한방에서는 열매를 따서 말린 것을 군천자(君遷子)라 하여 소갈·번열증(煩熱症) 등에 처방한다. 씨를 뿌려서 자란 고욤나무는 흔히 감나무를 접목할 때 대목용으로 쓰며, 목재는 여러 가지 도구의 재료로 쓴다. 한국(경기도 이남), 일본 등지에 분포한다.The fruit contains tannins and the color is purplish yellow or dark purple. It saves and saves after it is less ripe. It is divided into various kinds according to the appearance of fruit. In one room, the dried fruit is named as 子 子 子 子 하여 하여. 증 증 증 증 증. Goyom trees, which are grown by sowing seeds, are often used for cross section when grafting persimmon, and wood is used for various tools. It is distributed in Korea (South Kyunggi Province) and Japan.

한편, 피부 그을림 또는 색소침착 등은 자외선 노출에 의해 피부에서의 멜라닌 생성에 의한 것이다. 이를 예방하는 하나의 방법은 피부에 닿는 자외선을 차단하거나 미리 흡수하는 자외선 차단제 등을 바르는 것이다. 그러나, 자외선에 노출되기전에 매번 발라야하고 물로 쉽게 씻겨나가므로 자주 발라야 하는등 사용할 때 번거로우며 특히 이러한 제제들의 장기사용에 대한 안정성이 확립되어 있지 않다는 단점이 있다.On the other hand, skin burning or pigmentation is caused by melanin production in the skin by ultraviolet exposure. One way to prevent this is to cut off ultraviolet rays reaching the skin or apply ultraviolet ray blocking agents that absorb in advance. However, it has to be applied every time before exposure to ultraviolet rays, and it is easily washed out with water. Therefore, it is troublesome when it is used frequently, for example, and it is disadvantageous in that stability for long-term use of these agents is not established.

비타민C는 효소의 조인자(enzymatic co-factor)로 작용하고 비타민E의 사용량을 줄여주며 항산화제로서 작용하는 등 다양한 생리기능을 가진 것으로 알려져있다. 특히, 비타민 C는 다량으로 사용하면 미백효과가 있는 것으로 알려져 있는데 고용량으로 사용되는 경우 수퍼옥시드 및 하이드록실 라디칼과 반응한다.Vitamin C is known to have a variety of physiological functions such as acting as an enzymatic co-factor, reducing the use of vitamin E, and acting as an antioxidant. Vitamin C is known to have a whitening effect when used in large amounts. It reacts with superoxide and hydroxyl radicals when used in high doses.

수퍼옥시드와 하이드록실 라디칼은, 산소를 함유하는 활성기 산소로서 정상 상태 또는 질병 상태에서 생성될 수 있는데, 피부가 햇빛에 타는 경우나 피부 노화의 경우에 있어서 원인물질로서 작용한다.Superoxide and hydroxyl radicals are active oxygen radicals containing oxygen which can be produced in a normal or diseased state, which acts as a causative agent in the case of sunburn or skin aging.

비타민C는 이러한 물질과 반응함으로서, 자외선에 의한 피부그을림 또는 피부노화를 방지할 수 있다.Vitamin C reacts with these substances to prevent skin burns or skin aging caused by ultraviolet rays.

그러나, 비타민C는 2번 탄소와 3번 탄소사이에 이중결합이 있고, 물 존재하에서 산-이온화 반응이 일어 날 수 있는 수소(pK=4.2)를 갖는다. 또한 자신이 쉽게 산화되는 강한 환원제이므로 pH가 높은 조건하에서는 불안정한 음이온형태의 화합물로 된다. 비타민C의 이러한 불안정성은 비타민C를 용액으로 제제화하려는 경우 문제점으로 작용하는데, 극성반발력에 의한 입체화학적 응력, 아스코르빈산 음이온에 의한 산화적 분해 및 물의 공격으로 인한 분해등이 그 원인으로 생각된다.However, vitamin C has a double bond between carbon number 2 and carbon number 3 and has hydrogen (pK = 4.2), which can undergo acid-ionization reaction in the presence of water. In addition, since it is a strong reducing agent which is easily oxidized by itself, it becomes an unstable anion type compound under high pH conditions. This instability of vitamin C is a problem when vitamin C is formulated as a solution, which is attributed to the stereochemical stress due to polar repulsive force, oxidative degradation by ascorbic acid anion, and decomposition due to water attack.

비타민C를 안정화시키려는 종래의 방법으로는 극히 낮은 농도의 비타민C를 사용하는 방법, 비수용성 용매를 사용하는 방법, 또는 비타민C의 여러 유도체를 사용하는 방법 등이 있다.Conventional methods for stabilizing vitamin C include a method using an extremely low concentration of vitamin C, a method using a non-aqueous solvent, or a method using several derivatives of vitamin C, and the like.

이에, 본 발명자들은 피부 탄력 개선 및 주름 개선 효과 등이 우수한 화장품을 개발하고자 노력하던 중, 황궁채 추출물이 다양한 효능을 가지며 특히 피부 탄력 개선 및 주름 개선 효과의 기능성이 탁월함을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
Accordingly, the inventors of the present invention have completed the present invention by confirming that the extract of Huanggokgang has various efficacies, and especially the skin elasticity improvement and wrinkle improving effect are excellent, while trying to develop a cosmetic product having excellent skin elasticity and wrinkle improving effect .

위와 같은 종래기술의 문제점을 해소하고자, 본 발명의 목적은 황궁채 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공하는데 있다.
In order to solve the problems of the prior art as described above, the object of the present invention is to provide a cosmetic composition comprising an Imperial Herbal Extract as an active ingredient.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 황궁채 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a cosmetic composition comprising an Imperial Herbal Extract as an active ingredient.

또한 본 발명은 황궁채 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부용 약제 조성물을 제공한다.
The present invention also provides a pharmaceutical composition for dermatology, which comprises an extract of Imperial Palace Mallard as an active ingredient.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 황궁채 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.The present invention provides a cosmetic composition comprising an Imperial Herbal Extract as an active ingredient.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 조성물은 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 프레스파우더, 루스파우더 및 아이섀도우로 이루어진 군으로부터 선택된 화장품에 사용되는 것이 바람직하고, 상기 조성물은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되며 일반적으로 사용되는 함량을 포함하는 보조제를 추가로 포함하는 것이 바람직하며, 이때 상기 보조제는 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온 봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제 및 지질 소낭으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 포함하는 것이 보다 바람직하다.In the cosmetic composition of the present invention, the composition may be a skin lotion, a skin softener, a skin toner, an astringent, a lotion, a milk lotion, a moisturizing lotion, a nutrition lotion, a massage cream, The composition is preferably used in cosmetics selected from the group consisting of a pack, a soap, a shampoo, a cleansing foam, a cleansing lotion, a cleansing cream, a body lotion, a body cleanser, an emulsion, a press powder, a loose powder and an eye shadow, It is preferred to include adjuvants which are commonly used in the scientific field and which contain the commonly used contents, wherein the adjuvants are selected from the group consisting of fatty substances, organic solvents, solubilizers, thickeners, gelling agents, softeners, antioxidants, , A stabilizer, a foaming agent, a fragrance, a surfactant, water, an ionic or nonionic emulsifier, a filler , It is more preferable to include a sequestering agent, chelating agent, preserving agent, vitamin, blocker, moisturing agent, essential oil, dye, pigment, hydrophilic or hydrophobic activator, and at least one selected from the group consisting of lipid vesicles.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 추출물은 70% 에탄올 추출물인 것이 바람직하고, 상기 조성물은 황금채 추출물 이외에 고욤나무 추출물을 추가로 함유하는 것이 바람직하다.
In the cosmetic composition of the present invention, it is preferable that the extract is a 70% ethanol extract, and that the composition further contains a gomam extract in addition to the golden extract.

또한 본 발명은 황궁채 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부용 약제 조성물을 제공한다.The present invention also provides a pharmaceutical composition for dermatology, which comprises an extract of Imperial Palace Mallard as an active ingredient.

본 발명의 피부용 약제 조성물에 있어서, 상기 황궁채 추출물 이외에 글리콜산 또는 비타민 C를 추가로 함유하는 것이 바람직하고, 상기 추출물은 70% 에탄올 추출물인 것이 바람직하다.
In the pharmaceutical composition for skin of the present invention, it is preferable to further contain glycolic acid or vitamin C in addition to the above-mentioned Imperial Citrine extract, and the extract is preferably 70% ethanol extract.

본 발명의 유효성분인 글리콜산은, 사탕수수(sugarcane)로부터 유래하는 천연 생성물로서 상업적으로 구입가능하다. 글리콜산은 생체에 대해 레틴-A보다 더 안전하며, 콜라겐을 생합성함으로써 피부를 재생시키고 노화를 방지하는 작용을 한다.The glycolic acid as an active ingredient of the present invention is commercially available as a natural product derived from sugarcane. Glycolic acid is safer for the body than retin-A, and acts to regenerate skin and prevent aging by biosynthesizing collagen.

황궁채 추출물에 노화방지제(antiaging agent)인 글리콜산과 항산화제(antioxidant)인 비타민 C를 배합함으로써, 글리콜산의 피부자극 및 통증이 경감되고 글리콜산의 피부 흡수가 원활하게 되어 피부재생 및 노화방지 효과가 극대화될 뿐 아니라, 비타민C가 안정화된다.By combining vitamin C, an antiaging agent of glycolic acid, and antioxidant vitamin C, the skin irritation and pain of glycolic acid are alleviated and the absorption of glycolic acid is smooth. As well as being maximized, vitamin C is stabilized.

황궁채 추출물에 글리콜산과 비타민C를 함께 사용함으로써 생기는 효과에 있어서의 상승 작용은, 낮은 pH를 갖는 유기산의 단점이 극복되고 흡수가 증가하여 효과가 증대될 뿐 아니라, 비타민C는 글리콜산에 의해 안정화되는 등, 일방의 약리작용에 있어 극복되지 않은 부분을 타방이 보완하는 상보적 작용 등에 의한 것으로 생각된다.Synergism in the effect of using glycolic acid and vitamin C together in the extract of Huangchunggangjok extract overcomes the disadvantages of organic acids having a low pH and increases the absorption and increases the effect, and vitamin C is stabilized by glycolic acid , And complementary actions that complement the other part of the pharmacological action of the other.

또한 상기 양 유효성분의 함유량은 사용형태, 사용목적, 사용방법, 제제형 등에 따라 다르나, 예컨대 화장제로서는 0.01 내지 8중량%, 바람직하기로는 0.5 내지 5중량% 함유되며, 연고제 또는 크림제로서는 0.01 내지 12중량%, 바람직하기로는 5내지 12중량%이고, 나머지는 각 제제에 필요한 첨가제 및 용매 등으로 채워진다.The content of the above two active ingredients is 0.01 to 8% by weight, preferably 0.5 to 5% by weight, as a cosmetic agent, and 0.01% by weight or more as an ointment or cream agent, depending on the use form, use purpose, To 12% by weight, preferably 5 to 12% by weight, and the remainder is filled with additives and solvents necessary for each preparation.

본 발명의 조성물은 황궁채 추출물, 글리콜산과 비타민C 외에도, 연고기제 및 보습제, 연화제, 습윤제, 활택제, 보존제 등의 각종 첨가제를 포함할 수 있다.The composition of the present invention may contain various additives such as an ointment base, a moisturizing agent, a softening agent, a wetting agent, a lubricant, a preservative, and the like in addition to an emerald extract, glycolic acid and vitamin C.

상기 첨가제로는 경랍, 스테아릴알콜, 폴리에틸렌글리콜 4000, 글리세린, 세탄올, 라우릴황산나트륨, 파라옥시안식향산에틸, 파라옥시안식향산부틸 및 프로필렌글리콜 등이 포함되며, 이러한 첨가제는 각각 첨가하거나 또는 상업적으로 구입가능한 기제에 포함되어 있는 성분의 형태로 첨가될 수 있다.Examples of the additives include wax, stearyl alcohol, polyethylene glycol 4000, glycerin, cetanol, sodium lauryl sulfate, ethyl p-hydroxybenzoate, butyl p-hydroxybenzoate and propylene glycol. These additives are added individually or commercially May be added in the form of a component included in a possible mechanism.

경랍(sperm wax)은 고래의 두부에 있는 납질의 고형성분을 정제하여 얻은 것으로 다른 기제에 첨가되어 연고에 적당한 조도를 부여하며 적정량 첨가될 수 있다.The sperm wax is obtained by purifying the solid component of lead in the head of whale. It can be added to other base to give proper intensity to the ointment and added in an appropriate amount.

스테아릴알콜(stearyl alcohol)은 활택제로서 작용하며 적정량 첨가될 수 있다. 폴리에틸렌글리콜 4000은 대표적인 수용성 기제로서 산화에틸렌과 물과의 중합체이며 물에 잘 녹고 대부분의 의약품과의 혼합성이 좋고 주약의 흡수가 우수한 것으로 적정량 사용될 수 있다.Stearyl alcohol acts as a lubricant and may be added in an appropriate amount. Polyethylene glycol 4000 is a representative water-soluble base material, and it is a polymer of ethylene oxide and water. It is soluble in water, good in compatibility with most medicines, and excellent in absorption of medicine.

글리세린은 연화제 및 흡습제로서 적정량 사용될 수 있다.Glycerin can be used in an appropriate amount as a softening agent and a hygroscopic agent.

세탄올은 유화제 및 증점제로서 적정량 사용될 수 있다.Cetanol can be used in an appropriate amount as an emulsifier and a thickener.

라우릴황산나트륨(sodium lauryl sulfate)은 조성물의 혼합을 돕기위한 습윤연화제로서 적정량 사용될 수 있다.Sodium lauryl sulfate may be used in an appropriate amount as a wetting softener to assist in mixing the composition.

파라옥시안식향산에틸 및 파라옥시안식향산부틸은 제제의 유효성을 지속시키는 보존제로서 유효량 포함될 수 있다. 상기 보존제들은 넓은 pH 영역에서 활성을 보이며 2종류의 병용에 의해 유효성이 증대된다.Ethyl p-hydroxybenzoate and butyl p-hydroxybenzoate may be included in an effective amount as a preservative to maintain the effectiveness of the preparation. These preservatives show activity in a wide pH range and their effectiveness is enhanced by the combination of two kinds.

프로필렌글리콜은 계면활성제로서 5 내지 10중량% 사용될 수 있으며,글리콜산과 비타민 C의 피부 흡수를 도와준다.Propylene glycol can be used as a surfactant in an amount of 5 to 10% by weight and helps to absorb the skin of glycolic acid and vitamin C.

상기 성분들은 본 발명의 유효성분인 글리콜산과 비타민C를 피부에 적용하기 편리하게 할 뿐 아니라 그 자체로서도 피부표면의 수분과 지질의 조절, 피부의 보호, 정화작용 등의 피부에 유리한 효과를 갖는다.
The above components not only make it easy to apply glycolic acid and vitamin C, which are effective ingredients of the present invention, to skin, but also have an effect on the skin such as control of moisture and lipid on skin surface, protection of skin and purification action.

본 발명자들은 일 실시예로서 70% 에탄올을 이용하여 황궁채 추출물을 제조하였다. 상기 황궁채 추출물에 대한 안전성 및 효능의 효과를 평가하였다. 구체적으로, DPPH법을 이용한 항산화를 측정한 결과, 황궁채 추출물은 우수한 항산화 효과를 나타낸다(표 1 참조). 또한, NBT를 이용한 항산화 활성을 측정한 결과, 황궁채 추출물은 농도의존적으로 슈퍼옥사이드 라디칼을 소거시킨다(표 2 참조). 또한, 티로시나제 저해 실험에서 황궁채 추출물은 티로시나아제 저해효과가 우수하다(표 3 참조).As an example, the present inventors prepared an Imperial Herbal Extract using 70% ethanol. The effect of safety and efficacy on the above-mentioned Imperial thistle extract was evaluated. Specifically, as a result of measuring antioxidation by the DPPH method, the extract of Huanggonggangchae showed excellent antioxidative effect (see Table 1). As a result of measuring the antioxidative activity using NBT, the extract of Huanggonggangchae scavenges superoxide radicals in a concentration-dependent manner (see Table 2). In addition, in the inhibition test of tyrosinase, the extract of Huanggokgakje has excellent tyrosinase inhibitory effect (see Table 3).

한편, 황궁채 추출물은 세포독성이 없는 물질이다(표 4 참조).On the other hand, Hwanggokgak extract is a substance that is not cytotoxic (see Table 4).

또한, 세포활성 실험에서 황궁채 추출물은 세포활성 효과가 우수하다(표 5 참조). MMP-1 발현 저해실험에서 황궁채 추출물은 0.05%의 농도에서 72.98%의 우수한 MMP-1 단백질 발현 저해효과를 나타내므로, 콜라겐을 보호하여 탄력과 피부가 늘어지는 것을 방지하므로, 항노화(anti-aging) 소재로 응용이 가능하다(표 6 참조). 황궁채 추출물은 시르튜인 발현양을 증가시키므로, 수명을 연장시키고, 노화에 관련된 질병을 완화시켜준다(도 2 및 도 3 참조). 황궁채 추출물의 Caveolin-1 발현 저해 효과를 측정한 결과, 대조군에 비해 caveolin-1 발현양을 감소시킨다(표 8 참조). 또한, 황궁채 추출물은 CCN-1 발현양 저해 효과를 나타낸다(표 9 및 도 4 참조). 아울러, 황궁채 추출물을 함유한 크림은 피부 탄력 개선효과가 우수하다(표 11 참조). 또한, 황궁채 추출물을 함유한 크림은 피부 주름 개선 효과를 크게 증진시킨다(표 12 참조). 아울러, 황궁채 추출물을 함유한 크림을 도포한 실험자의 안면 피부에서 미백효과가 우수하다(표 13 참조).
In addition, in the cell activity test, the extract of Huangchonggakje has excellent cell activation effect (see Table 5). In the inhibition of MMP-1 expression, Hwanggokgak extract showed 72.98% inhibitory effect on MMP-1 protein expression at a concentration of 0.05%. Therefore, anti-aging (anti-aging) (See Table 6). The Huangchunggak extract increases the amount of expression of sirtuin, thus extending the life span and alleviating the disease associated with aging (see Figs. 2 and 3). The inhibitory effect of caveolin-1 on the inhibition of caveolin-1 expression by Huangchunggak extract was reduced compared to the control group (see Table 8). In addition, the Huangchonggak extract exhibits an inhibitory effect on CCN-1 expression (see Table 9 and Fig. 4). In addition, cream containing Hwanggokchae extract has excellent skin elasticity improvement effect (see Table 11). In addition, the cream containing the Imperial Palace extract greatly enhances the effect of wrinkles on the skin (see Table 12). In addition, the whitening effect is excellent in the facial skin of an experimenter who applied a cream containing an Imperial Herbal Extract (see Table 13).

상기와 같이 구성되는 본 발명의 화장료 조성물은 항산화 효과, 티로시나아제 저해효과, 세포활성 효과, 항노화 효과(MMP-1 단백질 발현 저해), 피부세포노화 개선, Caveolin-1 발현 저해 효과, CCN-1 발현 저해 효과, 피부 탄력 개선 및 주름 개선 효과 등의 효과로 피부보습력과 미백 기능을 향상시키고, 표피의 각질 탈락을 원할하게 하여 피부 표면을 매끄럽게 해준다.
The cosmetic composition of the present invention having the above-described composition can be used as an antioxidative effect, a tyrosinase inhibitory effect, a cell activation effect, an anti-aging effect (inhibition of MMP-1 protein expression), skin cell senescence improvement, caveolin- 1 improves skin moisturizing ability and whitening function by the effect of inhibiting the expression, improving the skin elasticity and wrinkle, and smoothes the skin surface by making the epidermal keratin detachment smooth.

도 1은 황궁채 추출물의 MMP-1 발현 저해효과를 나타낸 그래프로서, 황궁채 추출물은 0.05%의 농도에서 72.98%의 우수한 MMP-1 단백질 발현 저해효과를 나타내었다.
도 2는 자외선 및 외부 물질의 처리에 의한 장수유전자(SIRT-1) mRNA 평가 결과를 나타낸 전기영동 사진으로, 각질형성세포를 배양하여 자외선 조사 및 SLS와 H₂O₂를 농도별로 처리한 결과 특히 UVB 및 H₂O₂처리에 의해 장수유전자(SIRT-1) mRNA 발현량이 감소하였다.
도 3은 신소재의 농도별 처리에 의한 장수유전자(SIRT-1) mRNA 평가 결과를 나타낸 전기영동 사진으로, 각질형성세포를 혈청 결여 조건에서 mRNA 발현량을 측정한 결과 황궁채 추출물에서 약간의 증가를 나타내었다.
도 4는 황궁채 추출물 처리에 따른 CCN-1 발현양 저해 효과를 확인한 그래프이다.FIG. 1 is a graph showing the inhibitory effect of MMP-1 on the expression of MMP-1. The extract of MMP-1 showed an excellent inhibitory effect on MMP-1 protein expression of 72.98% at a concentration of 0.05%.
FIG. 2 is an electrophoresis image showing the results of evaluation of long-lived gene (SIRT-1) mRNA by treatment with ultraviolet light and foreign substances. As a result of culturing keratinocytes and irradiating ultraviolet light and treatment with SLS and H ₂ O ₂ UVB and H ₂ O ₂ treatment reduced the expression of long-lived gene (SIRT-1) mRNA.
FIG. 3 is an electrophoresis image showing the results of evaluation of long-lived gene (SIRT-1) mRNA by treatment with the concentration of new material. As a result of measurement of mRNA expression level in keratinocytes under serum-free conditions, .
FIG. 4 is a graph showing the inhibitory effect of CCN-1 on the expression of Huangkonggak extract.

이하, 본 발명에 따른 바람직한 실시예를 더욱 구체적으로 제시하여 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 이하의 실시예는 이 기술분야에서 통상적인 지식을 가진 자에게 본 발명이 충분히 이해되도록 제공되는 것으로서 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 이와 같은 실시예들에 의하여 본 발명이 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, preferred embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the drawings. However, it should be understood that the following embodiments are provided so that those skilled in the art may understand the present invention without departing from the scope and spirit of the present invention. no.

<실시예 1> 황궁채 추출물의 제조&Lt; Example 1 >

황궁채를 중국 무역상을 통하여 구입하였으며, 전초 중 열매부분을 따로 분리하여 세척 및 건조 후 사용하였다. 상기 황궁채에 약 10배의 70% 에탄올을 넣고 6시간 동안 환류 추출한 다음, 추출물을 여과하고 진공농축 및 동결 건조하여 약 4g의 분말 형태의 황궁채 추출물을 얻었다.
Imperial japonica was purchased through Chinese traders, and the fruit part of the outpost was separated and washed and dried. Approximately 10 times 70% ethanol was added to the Imperial Palace and refluxed for 6 hours. Then, the extract was filtered and concentrated in vacuo and lyophilized to obtain about 4 g of powdered oyster shell extract.

<실시예 2> 황궁채 추출물 및 고욤나무 추출물의 제조&Lt; Example 2 > Production of Huanggonggangjip and Guillaume Extracts

상기 실시예의 황금채의 전초 중 열매부분을 따로 분리하여 세척 및 건조하고, 동일하게 고욤나무의 전초 중 열매부분을 따로 분리하여 세척 및 건조 후 사용하였다. 상기 황궁채 및 고욤나무에 약 10배의 70% 에탄올을 넣고 6시간 동안 환류 추출한 다음, 추출물을 여과하고 진공농축 및 동결 건조하여 약 4g의 분말 형태의 황궁채와 고욤나무 추출물을 얻었다.
The fruit part of the golden stamens of the above example was separately washed and dried, and the fruit part of the outpost of the fruit was separately removed and washed and dried before use. Approximately 10 times 70% ethanol was added to the above Imperial thyme and gomam tree, and the mixture was refluxed for 6 hours. The extract was filtered and concentrated in vacuo and lyophilized to obtain about 4 g of powdered emerald and gomam extracts.

<실험예> 황궁채 추출물 안전성 및 효능효과 평가 실험&Lt; Experimental Example >

상기 실시예 1에서 제조한 황궁채의 70% 에탄올 추출물로 얻은 모든 시료는 원액을 동일 농도로(10%)로 DMSO에 용해하여 실험을 수행하였으며, 세포실험에는 최종 DMSO 농도가 1%가 넘지 않도록 하여 실험하였다. 또한, 모든 시료는 시료처리 전 0.2 ㎛ 주사 필터기로 필터를 한 후 시료를 처리하였다.
All the samples obtained from the 70% ethanol extract of Imperial jellyfish prepared in Example 1 were dissolved in DMSO at the same concentration (10%), and the final DMSO concentration was not exceeded 1% Respectively. In addition, all the samples were treated with a filter with a 0.2 mu m scanning filter before the sample was treated.

<실험예 1> DPPH 법을 이용한 항산화효과 평가<Experimental Example 1> Evaluation of antioxidative effect by DPPH method

피부의 주름생성 방지 등의 노화를 억제하기 위해 사용되는 실험원료의 평가방법으로 프리라디칼인 DPPH의 소거능을 평가하였다. 상기 방법은 실험물질이 라디칼인 DPPH(2,2-Di(4-tert-octylphenyl)-1-picrylhydrazyl radical)를 소거하여 탈색되는 정도를 565 nm에서 흡광도를 측정한다(표 1). 비교예로서 녹차 시료를 사용하였다. 이러한 실험결과, 황궁채 추출물은 우수한 항산화 효과를 가진 원료로 나타났다(표 1).
The scavenging ability of DPPH, which is a free radical, was evaluated by an evaluation method of experimental raw materials used for suppressing aging such as prevention of wrinkling of skin. This method measures the absorbance at 565 nm of the degree of decolorization by dissolving DPPH (2,2-Di (4-tert-octylphenyl) -1-picrylhydrazyl radical) as a test substance (Table 1). As a comparative example, a green tea sample was used. As a result of these experiments, the extracts of Hwanggokgakje showed excellent antioxidant activity (Table 1).

[표 1] DPPH 자유라디칼 소거효과[Table 1] DPPH free radical scavenging effect

<실험예 2> NBT법을 이용한 항산화 활성 평가 <Experimental Example 2> Evaluation of antioxidative activity using NBT method

피부의 주름생성 방지 등의 노화를 억제하기 위한 원료의 평가방법으로 NBT법을 이용, 항산화 활성을 측정하였다. 이는 잔틴 옥시다제(xanthine oxidase)가 잔틴과 반응하여 요산으로 전환되고 이때 생성되는 O₂ ^-를 소거하는 활성을 평가하는 것으로, 저해제가 소거하지 못한 활성산소를 나이트로블루테트라졸륨(nitroblue tetrazolium)이 반응, 디포르마잔(diformazan)으로 전환되어 565 ㎚에서 흡광도를 측정한다(표 2). 이러한 실험 결과, 황궁채 추출물은 농도의존적으로 슈퍼옥사이드 라디칼 소거 효과가 나타났다.
The antioxidative activity was measured by the NBT method as a raw material evaluation method for suppressing aging such as prevention of wrinkling of the skin. This is because the xanthine oxidase reacts with xanthine to convert it into uric acid and the activity of eliminating O ₂ ^- generated at this time is evaluated. When nitrobenz tetrazolium is reacted with the active oxygen which the inhibitor has not cleared, Reaction, converted to diformazan, and absorbance is measured at 565 nm (Table 2). As a result of this experiment, the effect of superoxide radical scavenging effect on the concentration of.

[표 2] 슈퍼옥사이드 라디칼 소거효과[Table 2] Superoxide radical scavenging effect

<실험예 3> 티로시나아제 (Tyrosinase) 저해효과 실험<Experimental Example 3> Tyrosinase Inhibitory Effect Test

티로시나아제는 티로신(Tyrosine)에서 멜라닌을 형성하는 일련된 산화 반응에서 처음 티로신(tyrosine)이 도파(dopa)로 산화되는 과정과 다음 단계인 도파가 도파퀴논(dopaquinone)으로 산화되는 두 단계의 반응을 촉진하는 효소이다. 상기 티로시나아제 저해 효과 실험은 실험물질이 티로시나아제 활성을 억제하는 정도를 평가하는 실험이다. 이러한 실험 결과, 황궁채 추출물의 티로시나아제 저해효과는 우수한 것으로 확인되었다(표 3).
Tyrosinase is a process in which tyrosine is first oxidized to dopa in a series of oxidative reactions that form melanin in tyrosine and two steps in which dopa is oxidized to dopaquinone Lt; / RTI &gt; The tyrosinase inhibitory effect test is an experiment for evaluating the degree to which the test substance inhibits tyrosinase activity. As a result of these experiments, it was confirmed that the inhibitory effect of tymycinase on the extract of Huanggongkangchae was excellent (Table 3).

[표 3] 티로시나제 저해효과[Table 3] Inhibitory effects of tyrosinase

<실험예 4> 세포독성실험 결과<Experimental Example 4> Cytotoxicity test results

본 실험은 실험물질의 세포 독성을 평가하여 피부 이상반응을 간접적으로 확인하는 것이다. 먼저 시료를 농도별로 세포 배양 배지를 이용해 희석하여 처리하였다. 100% 세포 생존을 나타내는 농도가 나올 수 있도록 처리 시료의 농도를 결정하였다. 시료 처리 후 약 24시간 동안 37℃ CO₂배양기에서 배양하였다. 배양 후 세포 생존률을 측정하여 100% 세포 생존률을 나타내는 시료의 농도를 구하였다(표 4). 이러한 실험 결과, 황궁채 추출물은 세포독성이 없는 물질임을 확인하였다.
This experiment is to evaluate the cytotoxicity of the test substance and indirectly confirm the skin adverse reaction. First, samples were diluted with cell culture medium for each concentration. The concentration of the treated sample was determined so that a concentration indicating 100% cell survival could be obtained. After the sample treatment, the cells were cultured in a 37 ° C CO ₂ incubator for about 24 hours. The cell viability after culturing was measured to determine the concentration of the sample showing 100% cell viability (Table 4). As a result of these experiments, it was confirmed that the Hwanggokgakjeong extract was not cytotoxic.

[표 4] 세포독성 평가결과 [ Table 4] Cytotoxicity evaluation results

<실험예 5> 세포활성 실험<Experimental Example 5> Cell activity test

본 실험은 실험물질의 세포 활성촉진 효과를 측정하여 피부 세포 재생 촉진 및 활력강화 등 항노화 효과를 평가하기 위한 것이다. 먼저, 배양한 섬유아세포를 웰 플레이트(well plate)에 일정수의 세포를 분주하고 24시간 동안 안정화시켰다. 실험물질 처리 후 약 48시간 동안 37℃ CO₂ 배양기에서 배양하였다. MTT 분석을 이용하여 무처리 대조군 대비 실험물질 처리군의 세포활성 효과를 계산하였다(표 5). 이러한 실험 결과, 황궁채 추출물에 대한 세포활성 효과는 우수한 것으로 확인되었다.
This experiment was conducted to evaluate the anti-aging effect such as stimulation of skin cell regeneration and vitality by measuring the promoting effect of cell activity of the test substance. First, the cultured fibroblasts were divided into a number of cells in a well plate and stabilized for 24 hours. After the treatment, the cells were cultured in a 37 ° C CO ₂ incubator for about 48 hours. MTT assay was used to calculate the cell activation effect of the test substance-treated group compared to the untreated control group (Table 5). As a result of these experiments, it was confirmed that the cell activation effect on the Hwanggokgak extract was excellent.

[표 5] 세포활성 평가결과[Table 5] Cell activity evaluation result

<실험예 6> MMP-1 발현 저해 실험 (엘리자 키트 사용)Experimental Example 6: Inhibition of MMP-1 expression (using Eliza kit)

MMP-1(Matrix methaloprotease-1, collagenase) 저해 활성을 가진 물질은 콜라겐을 보호하여 탄력과 피부가 늘어지는 것을 방지한다. 따라서 원료의 MMP 저해 활성을 측정함으로써 주름을 개선하고 탄력 있는 피부를 위한 화장품 개발에 유용하게 사용될 수 있다. MMP-1 합성량 측정은 MMP-1 Biotrok™ ELISA kit (UK)를 이용한 ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)방법으로 실시하였다. 먼저 24시간 배양한 배지를 MMP-1에 대한 단일클론 항체(monoclonal anti-MMP-1)로 코팅된 마이크로플레이트의 각 웰에 100 ㎕씩 분주한 후, 뚜껑을 덮어 실온(20-25℃)에서 2시간 동안 보온하였다. 각 웰의 내용물을 제거한 후 세척용 완충제(wash buffer)로 세척과정을 3회 반복하였다. 세척액을 완전히 제거한 다음 각 웰에 MMP-1에 대한 다클론 항체(polyclonal anti-MMP-1) 100 ㎕씩 분주한 후, 뚜껑을 덮어 실온에서 2시간 동안 보온하였다. 각 웰의 내용물을 제거한 후 세척용 완충제의 세척과정을 3회 반복하였으며, 세척액을 완전히 제거한 후 각 웰에 퍼옥시다제 연결체(peroxidase conjugate)를 100 ㎕씩 분주한 후 실온에서 1시간 동안 보온하였다. 보온이 끝난 후 세척용 완충제의 세척과정을 3회 반복하여 미반응 항체를 제거하였으며, 희석된 기질 용액을 각 웰에 100 ㎕씩 분주한 후 실온에서 30분간 보온하였다. 효소(peroxidase)와 기질(TMB, 3,3',5,5'- Tetramethylbenzidine)은 반응의 시간에 따라서 반응 정도가 달라질 수 있으므로 동일한 시간에 반응을 종료시키기 위하여 반응정지 용액(2N H₂SO₄)을 각 웰에 100 ㎕씩 넣고 30분 내에 마이크로플레이트 리더기(micro plate reader)(USA)를 이용하여 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. 산출된 농도는 최종적으로 BCA 단백질 분석 키트를 이용하여 정량한 총 단백질로 보정하였다(표 6 및 도 1). 이러한 실험 결과, 황궁채 추출물은 0.05%의 농도에서 72.98%의 우수한 MMP-1 단백질 발현 저해효과를 나타내므로, 추후 항노화(anti-aging) 소재로 응용이 가능할 것이다.
MMP-1 (Matrix methaloprotease-1, collagenase) inhibiting substance protects collagen to prevent stretching and skin elasticity. Therefore, by measuring the MMP inhibitory activity of the raw material, it is possible to improve wrinkles and be useful for developing cosmetics for elastic skin. The amount of MMP-1 synthesis was determined by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) using the MMP-1 Biotrok ™ ELISA kit (UK). First, 100 μl of each of the wells of the microplate coated with the monoclonal anti-MMP-1 for MMP-1 was dispensed into the culture medium for 24 hours, covered with the lid, and then incubated at room temperature (20-25 ° C) It was kept warm for 2 hours. After the contents of each well were removed, washing was repeated three times with a wash buffer. After the washing solution was completely removed, 100 μl of polyclonal anti-MMP-1 antibody against MMP-1 was dispensed into each well, covered with a lid, and kept at room temperature for 2 hours. The contents of each well were removed and the washing buffer was washed three times. After removing the washing solution completely, 100 μl of peroxidase conjugate was dispensed into each well, followed by incubation at room temperature for 1 hour . After the incubation, washing of washing buffer was repeated 3 times to remove unreacted antibody. 100 μl of the diluted substrate solution was dispensed into each well, and incubated at room temperature for 30 minutes. Enzyme (peroxidase) and substrate (TMB, 3,3 ', 5,5'- Tetramethylbenzidine ) the reaction solution to stop the reaction degree may vary according to the time of the reaction, so to complete the reaction at the same time (2N H ₂ SO ₄ ) Was added to each well at an amount of 100 μl, and the absorbance was measured at 450 nm using a microplate reader (USA) within 30 minutes. The calculated concentrations were finally corrected with the total protein quantified using the BCA protein assay kit (Table 6 and Figure 1). As a result of these experiments, the Hwanggokgachae extract showed an excellent inhibitory effect on MMP-1 protein expression of 72.98% at a concentration of 0.05%, so that it can be applied as an anti-aging material in the future.

[표 6] MMP-1 발현 저해효과[Table 6] MMP-1 expression inhibitory effect

<실험예 7> 시르튜인(Sirtuin) 발현양 변화 확인 (RT-PCR)Experimental Example 7 Confirmation of Sirtuin Expression Level (RT-PCR)

시르튜인은 수명을 연장시키고, 노화에 관련된 질병을 완화시켜주는 것으로 관찰되었으며, 포유류에서 발견되는 7종의 시르튜인 중 사람에서 주로 발견되고 주요 역할을 하는 Sirt-1은 p53, FOXO, PGC-1α, Ku70 등을 비롯한 다양한 단백질들을 탈아세틸화(deacetylation) 시켜서 그 활성을 조절하고, 이는 스트레스 반응, 세포 대사, 노화 등 다양한 생리현상에 영향을 미친다(SIRT1 Functionally Interacts with the Metabolic Regulator and Transcriptional Coactivator PGC-1, Shino Nemoto, Maria M. Fergusson and Toren Finkel, J. Biol. Chem. 2005, 280:16456-16460).Sirtin has been observed to prolong the life span and alleviate the disease associated with aging. Sirt-1, which is found primarily in humans among the seven species of sirtuins found in mammals, plays a major role in p53, FOXO, PGC -1α, Ku70, and the like, and it affects various physiological phenomena such as stress reaction, cell metabolism, and aging (SIRT1 Functionally Interacts with the Metabolic Regulator and Transcriptional Coactivator PGC-1, Shino Nemoto, Maria M. Fergusson and Toren Finkel, J. Biol. Chem. 2005, 280: 16456-16460 ).

시르튜인은 장수유전자로 알려져 있으며, 다양한 연구를 통해 포유동물에서도 노화 조절에 중요한 역할을 한다는 사실이 밝혀지고 있다(Mammalian Sirt1: insights on its biological functions. Shahedur Rahman, Rezuanul Islam. Cell Communication and Signaling 2011, 9:11). 각질형성세포에서 Sirt-1의 단백질 발현량을 평가한 후 RT-PCR을 이용하여 유전자발현도 확인하였다. 자외선 및 외부 자극물질, 신소재를 세포에 처리하여 SIRT-1 유전자 발현량을 평가함으로써 피부세포노화를 개선시킬 수 있는 효과가 있는지 알아보았다.
Sirutin is known as the longevity gene and has been shown to play an important role in controlling aging in mammals through various studies (Mammalian Sirt1: insights on its biological functions. Shahedur Rahman, Rezuanul Islam. Cell Communication and Signaling 2011 , 9:11). The expression of Sirt-1 protein in keratinocytes was assessed and gene expression was also confirmed by RT-PCR. We examined the effect of SIRT-1 gene expression on skin cells treated with ultraviolet rays, external stimulants, and new materials to improve skin cell senescence.

<7-1> 자외선 및 외부 유해물질의 처리에 의한 장수유전자(SIRT-1) mRNA 평가<7-1> Evaluation of longevity gene (SIRT-1) mRNA by treatment with ultraviolet rays and external harmful substances

HaCaT 케라티노사이트에 자외선(UVA, UVB)을 다양한 세기로 조사하고 24시간 후 SIRT-1의 유전자 발현량을 측정하였으며, SLS와 H₂O₂를 농도별로 처리하여 장수유전자(SIRT-1)의 유전자 발현량을 측정하였다. SIRT-1의 mRNA 발현 RT-PCR로 확인한 결과 자외선 조사에 의해 발현량이 조금 감소하였으며, 상대적으로 UVB에 의해 발현이 감소하는 것으로 나타났다. 상기 PCR 증폭은 94℃ 0.5분, 50℃ 0.5분, 72℃ 1분, 26~30 사이클로 반응시켰다. PCR에 의하여 생성된 산물을 1.5% 아가로스 젤에서 전기영동하여 SIRT-1, GAPDH 유전자의 발현을 상 분석기(image analyzer) (BIS303PC, DNR Imaging Systems Ltd, UK)로 확인 하였으며, 각 밴드의 밀도는 농도계 프로그램(densitometric program) (NIH Image software, Maryland, USA)을 이용하였다. 각 유전자의 서열은 하기 표 7에 나타내었다.
The expression levels of SIRT-1 and SIRT-1 were measured by UVA and UVB at various intensities on HaCaT keratinocytes and treated with SLS and H ₂ O ₂ at various concentrations. The amount of gene expression was measured. As a result of RT-PCR of SIRT-1 mRNA expression, the expression level was slightly decreased by ultraviolet irradiation, and the expression was decreased by UVB. The PCR amplification was carried out at 94 DEG C for 0.5 minute, 50 DEG C for 0.5 minute, 72 DEG C for 1 minute, and 26 to 30 cycles. The PCR products were electrophoresed on 1.5% agarose gel and the expression of SIRT-1 and GAPDH genes was confirmed by image analyzer (BIS303PC, DNR Imaging Systems Ltd, UK) Densitometric program (NIH Image software, Maryland, USA) was used. The sequence of each gene is shown in Table 7 below.

[표 7] RT-PCR 분석에서 사용한 유전자에 대한 프라이머 서열 [Table 7] Primer sequences for genes used in RT-PCR analysis

단백질 발현과 마찬가지로 SLS 처리에 의해서는 별다른 영향이 나타나지 않았으며, H₂O₂에 의해 급격하게 발현이 감소하는 것으로 나타났다(도 2). 도 2는 자외선 및 외부 물질의 처리에 의한 장수유전자(SIRT-1) mRNA 평가 결과로서, 각질형성세포를 배양하여 자외선 조사 및 SLS와 H₂O₂를 농도별로 처리한 결과 특히 UVB 및 H₂O₂ 처리에 의해 장수유전자(SIRT-1) mRNA 발현량이 감소하는 것으로 나타났다.
Similar to protein expression, no significant effect was observed by SLS treatment, and the expression was abruptly decreased by H ₂ O ₂ (FIG. 2). FIG. 2 shows the results of evaluation of long-lived gene (SIRT-1) mRNA by treatment with ultraviolet rays and external substances. Ultrasonic irradiation and treatment with SLS and H ₂ O ₂ by concentration showed that UVB and H ₂ O ₂ (SIRT-1) mRNA expression was decreased by treatment.

<7-2> 황궁채 농도별 처리에 의한 장수유전자(SIRT-1) mRNA 평가<7-2> Evaluation of long-lived gene (SIRT-1) mRNA by treatment with Imperial Herbarium Concentration

HaCaT 케라티노사이트에서 RT-PCR을 통해 SIRT-1 유전자 발현량도 확인해본 결과 황궁채 환류추출물에서 약간의 증가를 나타내었다(도 3). 도 3은 신소재의 농도별 처리에 의한 장수유전자(SIRT-1) mRNA 평가 결과를 나타낸 것으로, 각질형성세포를 혈청 결여 조건에서 mRNA 발현량을 측정한 결과 황궁채 추출물에서 약간의 증가를 나타내었다.
The expression level of SIRT-1 gene was also confirmed by RT-PCR in HaCaT keratinocyte, and it was slightly increased in the refolding extract of Hwangsungbuk (Fig. 3). Fig. 3 shows the result of evaluation of long-lived gene (SIRT-1) mRNA by treatment with concentration of new material, The amount of mRNA expression in keratinocytes was slightly increased in the absence of serum.

<실험예 8> 황궁채 추출물의 Caveolin-1 발현 저해 효과<Experimental Example 8> Caveolin-1 expression inhibitory effect

세포의 caveolin-1 발현 양 측정을 위해 FITC로 표지된 caveolin-1 항체로 염색하는 방법을 사용하였고, FITC-conjugated caveolin-1 항체(santa cruz, USA)를 사용하였다. 실험 조건에 맞추어 배양된 세포를 수확한 후 차갑게 만든 0.5% BSA를 첨가한 PBS로 2회 헹구어 주었다. 세포를 수집한 수 1:100 비율로 희석한 FITC-conjugated caveolin-1 항체를 50 ㎕를 넣어 가볍게 섞어주고 빛이 차단된 4℃ 상태에서 30분 동안 반응한 후 차갑게 만든 0.5% BSA를 첨가한 PBS 500 ㎕로 2회 헹구어 주어 잔여 항체를 제거해 주었다. 그 후에 0.5% BSA를 첨가한 PBS 500 ㎕를 첨가한 후 FACS 분석을 하였다. 기기는 FACSCalibur(BD, USA)를 사용하였고, 분석은 WinMDI를 사용하였다(표 8). 이러한 실험 결과, 황궁채 추출물 처리 후 세포의 caveolin-1 발현양 변화를 확인한 결과 황궁채 추출물 대신 동량의 PBS를 처리한 대조군에 비해 caveolin-1 발현양이 감소함을 확인하였다.
For the measurement of caveolin-1 expression in cells, FITC-labeled caveolin-1 antibody staining was used and FITC-conjugated caveolin-1 antibody (santa cruz, USA) was used. The cultured cells were harvested according to the experimental conditions and rinsed twice with cold PBS containing 0.5% BSA. Cells were collected by adding 50 ㎕ of FITC-conjugated caveolin-1 antibody diluted at a ratio of 1: 100 and lightly mixed. The cells were reacted for 30 minutes at 4 캜 in which light was blocked and then washed with PBS containing 0.5% BSA Rinse twice with 500 μl to remove residual antibody. Then, 500 μl of PBS supplemented with 0.5% BSA was added, and FACS analysis was performed. The instrument was FACSCalibur (BD, USA) and WinMDI was used for analysis (Table 8). As a result, the amount of caveolin-1 expressed in the cells after treatment with the extract of Huanggongkangchung was lower than that of the control.

[표 8] 황궁채 추출물 처리에 따른 caveolin-1 발현양 변화 FACS 분석 결과[Table 8] Changes in the expression level of caveolin-1 in the treatment of Imperial Herbal Extract FACS analysis

<실험예 9> 황궁채 추출물의 CCN-1 발현 저해 효과<Experimental Example 9> Inhibition of CCN-1 Expression by Imperial Leaflet Extract

섬유아세포가 노화됨에 따라 콜라겐 항상성이 깨어지는데 이때 CCN-1 발현이 증가한다. 따라서 CCN-1 저해 활성을 측정함으로써 섬유아세포의 콜라겐 항상성을 유지시켜 노화징후를 개선하는 화장품 개발에 유용하게 사용될 수 있다. CCN-1 측정은 이용한 ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)방법으로 실시하였다. 먼저 24시간 배양한 배지를 CCN-1에 대한 단일클론 항체(monoclonal anti-CCN-1)로 코팅된 마이크로플레이트의 각 웰에 100 ㎕씩 분주한 후, 뚜껑을 덮어 실온(20-25℃)에서 2시간 동안 보온하였다. 각 웰의 내용물을 제거한 후 세척용 완충제(wash buffer)로 세척과정을 3회 반복하였다. 세척액을 완전히 제거한 다음 각 well에 CCN-1에 대한 다클론 항체(polyclonal anti-CCN-1) 100 ㎕씩 분주한 후, 뚜껑을 덮어 실온에서 2시간 동안 보온하였다. 각 웰의 내용물을 제거한 후 세척용 완충제의 세척과정을 3회 반복하였으며, 세척액을 완전히 제거한 후 각 웰에 퍼옥시다제 연결체를 100 ㎕씩 분주한 후 실온에서 1시간 동안 보온하였다. 보온이 끝난 후 세척용 완충제의 세척과정을 3회 반복하여 미반응 항체를 제거 하였으며, 희석된 기질 용액을 각 웰에 100 ㎕씩 분주한 후 실온에서 30분간 보온하였다. 효소(peroxidase)와 기질(TMB, 3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine)은 반응의 시간에 따라서 반응 정도가 달라 질 수 있으므로 동일한 시간에 반응을 종료시키기 위하여 반응정지 용액(2N H₂SO₄)을 각 웰에 100 ㎕씩 넣고 30분 내에 마이크로 플레이트 리더기 (USA)를 이용하여 450 nm에서 흡광도를 측정하였다(표 9 및 도 4). 도 4는 황궁채 추출물 처리에 따른 CCN-1 발현양 저해 효과를 확인한 것이다. 대조군은 시료를 처리하지 않은 세포이다.
As fibroblasts age, collagen homeostasis breaks, which increases CCN-1 expression. Therefore, by measuring the inhibitory activity of CCN-1, it can be usefully used in the development of cosmetics for improving the signs of aging by maintaining the collagen homeostasis of fibroblasts. CCN-1 assay was performed by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). First, 100 μl of the culture medium for 24 hours was dispensed into each well of a microplate coated with monoclonal anti-CCN-1 for CCN-1, and then covered with a lid and incubated at room temperature (20-25 ° C) It was kept warm for 2 hours. After the contents of each well were removed, washing was repeated three times with a wash buffer. After removing the washing solution completely, 100 μl of polyclonal anti-CCN-1 antibody against CCN-1 was dispensed into each well, covered with a lid, and kept at room temperature for 2 hours. The contents of each well were removed, and the washing buffer was washed three times. After removing the washing solution completely, 100 μl of the peroxidase conjugate was dispensed into each well and incubated at room temperature for 1 hour. After the incubation, washing of washing buffer was repeated 3 times to remove unreacted antibody. 100 μl of the diluted substrate solution was dispensed into each well, and incubated at room temperature for 30 minutes. Enzyme (peroxidase) and substrate (TMB, 3,3 ', 5,5'- Tetramethylbenzidine) is a reaction stop solution in order to terminate the reaction at the same time as they may have a degree of reaction depends on the reaction time (2N H ₂ SO ₄ ) was added to each well at an amount of 100 μl, and the absorbance was measured at 450 nm using a microplate reader (USA) within 30 minutes (Table 9 and FIG. 4). FIG. 4 shows the effect of inhibiting the expression of CCN-1 in the treatment of Imperial Prunus. The control group is the untreated cells.

[표 9] 황궁채 추출물 처리에 따른 CCN-1 발현양 저해 효과 확인[Table 9] Confirmation of inhibitory effect of CCN-1 expression by treatment with Imperial Herbal Extract

<실험예 10> 피부 탄력 개선 및 주름 개선 효과 시험<Experimental Example 10> Skin elasticity improvement and wrinkle improvement effect test

실시예 1의 황궁채 추출물을 함유한 화장료를 제조하여 사람을 대상으로 피부 탄력 개선 효과 및 주름 개선 효과를 대조군(황궁채 추출물을 첨가하지 않은 실시예 1과 동일한 화장료)과 비교실험을 행하여 평가하였다. 비교실험에 사용된 화장료는 크림형태이고, 그 조성은 하기 표 9와 같다. 우선 표 9에 기록되어 있는 나) 상을 가열하여 70℃에 보존하였다. 이것에 가) 상을 가하여 예비유화 후 호모믹서로 균일하게 유화하고 다음에 서서히 냉각하여 크림을 제조하였다. The cosmetic composition containing the extract of Imperial Citrine of Example 1 was prepared, and the skin elasticity improvement effect and the wrinkle improvement effect were evaluated in comparison with the control group (the same cosmetic composition as in Example 1 in which the Imperial Herb Extract was not added). The cosmetic composition used in the comparative experiment is in cream form, and the composition thereof is shown in Table 9 below. First, the b) image recorded in Table 9 was heated and stored at 70 ° C. To this, a) phase was added, pre-emulsified, uniformly emulsified with a homomixer, and then gradually cooled to prepare a cream.

실시예 2의 황궁채 고욤나무 추출물에 대해서도 동일한 방법으로 크림을 제조하였다.
Creams were prepared in the same manner as in Example 2 except for the extract of Guillaume gourd.

[표 10] 황궁채 추출물 함유 크림 제형 처방(단위 : 중량%)[Table 10] Prescription of cream containing emulsion of Huangchonggak (unit:% by weight)

실험자(20세~35세의 여성) 20명을 대상으로 얼굴 오른쪽 부위에는 실시예 1 크림을, 얼굴 왼쪽 부위에는 대조군 크림을 각각 1일 2회씩 연속 2개월간 도포하였다. 동일하게 실험자(20세~35세의 여성) 20명을 대상으로 얼굴 오른쪽 부위에는 실시예 2 크림을, 얼굴 왼쪽 부위에는 대조군 크림을 각각 1일 2회씩 연속 2개월간 도포하였다. Twenty subjects (20 to 35 year old female) applied the cream of Example 1 to the right side of the face and the cream of the control to the left side of the face for 2 consecutive months. Twenty patients (20 to 35 years old) were treated with the cream of Example 2 on the right side of the face and the cream of the control on the left side of the face for 2 consecutive months, respectively.

실험 완료 후 피부 탄력 개선 효과는 제품 사용 전과 2개월간 사용 후에 피부탄력측정기(cutometer SEM 575, C+K Electronic Co., Germany)를 이용하여 측정하였다. 실험결과는 하기 표 11에 Cutometer SEM 575의 △R7값으로 기재하였는데 R7값은 피부의 점탄성(viscoelasticity) 성질을 나타낸다. 하기 표 11과 같이, 실시예의 황궁채 추출물 또는 고욤나무 추출물을 함유한 크림은 피부 탄력 개선효과가 우수함을 알 수 있다.
The skin elasticity was measured by using a skin elasticity meter (SEM 575, C + K Electronic Co., Germany) before and after using the product for 2 months. The experimental results are shown in the following Table 11 as the ΔR7 value of Cutometer SEM 575, where the R7 value indicates the viscoelasticity property of the skin. As shown in the following Table 11, it can be seen that the cream containing the royal palm tree extract or the gomoma extract of the Examples has excellent skin elasticity improving effect.

[표 11] 실시예 1 및 실시예 2의 추출물을 함유 크림 피부탄력 효과 확인(n=20, p<0.05)[Table 11] Confirmation of cream skin elasticity effect containing extracts of Example 1 and Example 2 (n = 20, p < 0.05)

실험자(20세~35세의 여성) 15명을 대상으로 얼굴 오른쪽 부위에는 실시예 1에서 제조된 크림을 얼굴 왼쪽 부위에는 대조군에서 제조된 크림을 각각 1일 2회씩 연속 2개월간 도포하였다. 동일하게 실험자(20세~35세의 여성) 15명을 대상으로 얼굴 오른쪽 부위에는 실시예 2에서 제조된 크림을 얼굴 왼쪽 부위에는 대조군에서 제조된 크림을 각각 1일 2회씩 연속 2개월간 도포하였다.The cream prepared in Example 1 was applied to the right side of the subject and the cream made in the control side was applied to the left side of the face for 15 consecutive months for 15 consecutive months. In the same experiment, the cream prepared in Example 2 was applied to the right side of the face and the cream made in the control side was applied to the left side of the face for 15 consecutive months for 15 consecutive months.

실험 완료 후 피부 주름 개선 효과는 제품 사용 전과 2개월간 사용 후에 피부의 주름개선효과를 알아보기 위하여 실리콘 재질의 모사판(replica)을 제작하여 지정 부위의 주름의 상태를 화상분석기인 비지오미터(visiometer: SV60, C+K Electronic Co., Germany)로 측정하였다. 그 결과는 표 11에 나타내었으며, 이 결과는 2개월 후의 각각의 파라미터 값에서 2개월 전 파라미터 값을 뺀 것의 평균을 나타낸 것이다. 즉, 이 값이 음수로 나올수록 주름 개선효과가 높다는 것을 의미한다. 표 12와 같이, 실시예 1의 황궁채 추출물 및 실시예 2의 추출물을 함유한 크림은 피부 주름 개선 효과가 크게 증진되었음을 확인할 수 있었다.
To evaluate the wrinkle improvement effect of the skin before and after the use of the product after the completion of the experiment, a silicone replica was made and the wrinkle state of the designated area was measured with a visiometer SV60, C + K Electronic Co., Germany). The results are shown in Table 11, which shows the average of two parameter values after two months minus the parameter values two months ago. That is, as the value becomes negative, it means that the wrinkle improving effect is higher. As shown in Table 12, it was confirmed that the effect of improving the wrinkles of the skin was greatly improved by the cream containing the extract of Huang Tong Kak and the extract of Example 2 of Example 1.

[표 12] 피부 주름 개선 효과[Table 12] Skin wrinkle improvement effect

<실험예 11> 미백효능 임상 평가<Experimental Example 11> Clinical evaluation of whitening efficacy

실시예 1 및 실시예 2에서 수득한 추출물을 함유한 크림 제형의 화장료를 사용하여 사람을 대상으로 피부 미백효과를 대조군(황궁채 추출물을 첨가하지 않은 실시예 1과 동일한 화장료)과 비교실험을 행하여 평가하였다. 실험자 (20세~35세의 여성) 20명을 대상으로 얼굴 오른쪽 부위에는 실시예 1 크림을, 얼굴 왼쪽 부위에는 대조군 크림을 각각 1일 2회씩 연속 2개월간 도포하였다. 동일하게 실험자 (20세~35세의 여성) 20명을 대상으로 얼굴 오른쪽 부위에는 실시예 2 크림을, 얼굴 왼쪽 부위에는 대조군 크림을 각각 1일 2회씩 연속 2개월간 도포하였다. The skin whitening effect in humans was compared with the control group (the same cosmetic composition as in Example 1 in which the Imperial Herb Extract was not added) using the cream formulations containing the extracts obtained in Examples 1 and 2, Respectively. Twenty subjects (20 to 35 year old female) applied the cream of Example 1 to the right side of the face and the cream of the control to the left side of the face for 2 consecutive months. Twenty patients (20 to 35 years old) were treated with the cream of Example 2 on the right side of the face and the cream of the control on the left side of the face for 2 consecutive months, respectively.

시험 완료 후 얼굴 좌우 양편의 도포 부위 피부를 화상분석기 및 피부색의 변화를 크로마메타(Minolta CR300)를 이용하여 색의 밝기변화(L)를 측정하고, 복수의 숙련자에 의한 객관적 육안 관찰과 피검자에 의한 주관적 육안관찰을 실시하여 하기 등급 분류에 따라 효과를 측정하였으며, 이때 미백효능 정도를 다음의 7등급으로 분류하여 평가하였다.
After the completion of the test, the color of the applied area of the left and right sides of the face was analyzed with an image analyzer and color change (L) of the color was measured using a Minolta CR300. Objective visual observation by a plurality of experts Subjective visual observation was carried out and the effect was measured according to the following classification. The degree of whitening efficacy was classified into the following seven classes.

미백 효능 육안 평가 기준: Whitening efficacy Visual evaluation criteria:

-3: 매우 악화-3: Very bad

-2: 악화-2: worse

-1: 약간 악화-1: slightly worse

0: 변화 없음0: No change

1: 약간 개선1: slight improvement

2: 개선2: Improvement

3: 매우 개선
3: Very much improved

하기 표 13에서 나타낸 바와 같이 실시예 1 및 실시예 2 추출물을 함유한 크림을 도포한 실험자의 안면 피부에서 미백효과가 우수함을 알 수 있다. 각 수치는 평균값을 나타낸다.
As shown in the following Table 13, it can be seen that the whitening effect is excellent in the facial skin of the user who applied the cream containing the extract of Example 1 and Example 2. Each value represents an average value.

[표 13] 미백효과[Table 13] Whitening effect

<제조예> <Production Example>

황궁채 추출물을 함유한 화장수, 유액 및 미용액을 제조하였다. 이들 담쟁이넝쿨 열매 추출물을 함유한 화장수, 유액 및 미용액은 활성산소 소거효과 뿐만 아니라 피부 잔주름 개선효과, 미백효과 등 피부 노화 방지 및 개선에 우수한 효과를 나타내었다.
Lotion and essence containing emulsion extracts were prepared. Lotion, essence and lotion containing these fruit extracts showed excellent effects on the prevention of active oxygen scavenging, prevention of skin aging and improvement of skin whitening effect and whitening effect.

<제조예 1> 황궁채 추출물을 함유한 화장수 제조Preparation Example 1 Preparation of Lotion Containing Imperial Citrine Extract

95% 에탄올 8g에 폴리피로리돈 0.05g, 올레일알콜 0.1g, 폴리옥시에틸렌모노올레이트 0.2g, 향료 0.2g, 파라옥시안식향산메틸에스테르 0.1g, 소량의 산화방지제, 소량의 색소를 혼합용해 한다. 황궁채 추출물 10g, 글리세린 5g을 정제수 85.33g에 용해한 것에 상기 혼합액을 첨가한 후 교반하여 피부개선효과가 있는 화장수를 얻었다.
0.05 g of polypyrrolidone, 0.1 g of oleyl alcohol, 0.2 g of polyoxyethylene monooleate, 0.2 g of fragrance, 0.1 g of p-hydroxybenzoic acid methyl ester, a small amount of antioxidant and a small amount of pigment are mixed and dissolved in 8 g of 95% ethanol . 10 g of the royal palm leaf extract and 5 g of glycerin were dissolved in 85.33 g of purified water. The above mixture was added to the mixture, followed by stirring to obtain a skin lotion having skin-improving effect.

<제조예 2> 황궁채 추출물을 함유한 유액 제조<Preparation Example 2> Preparation of emulsion containing emulsion

세틸알콜 1.2g, 스쿠알란 10g, 바세린 2g, 파라옥시안식향산에틸에스테르 0.2g, 글리세린모노에스테아레이드 1g, 폴리옥시에틸렌(20몰 부가)모노올레이트 1g및 향료 0.1g을 70℃에서 가열혼합용해하고, 실시예 1에서 수득한 황궁채 추출물 0.5g, 디프로필렌글리콜 5g, 폴리에틸렌글리콜-1500 2g, 트리에탄올아민 0.2g, 정제수 76.2g을 75℃로 가열해서 용해시킨다. 양자를 혼합하여 유화시킨 후 냉각하여 수중유(O/W)형의 피부개선효과가 있는 유액을 얻었다.
0.2 g of cetyl alcohol, 10 g of squalane, 2 g of vaseline, 0.2 g of p-hydroxybenzoic acid ethyl ester, 1 g of glycerin monoestearylate, 1 g of polyoxyethylene (20 mols) monooleate and 0.1 g of perfume were mixed and dissolved at 70 캜 0.5 g of the Imperial Citrine extract obtained in Example 1, 5 g of dipropylene glycol, 2 g of polyethylene glycol-1500, 0.2 g of triethanolamine and 76.2 g of purified water were dissolved by heating at 75 캜. The two were mixed and emulsified and then cooled to obtain an oil-in-water (O / W) type milky lotion.

<제조예 3> 황궁채 추출물을 함유한 미용액 제조&Lt; Preparation Example 3 > Production of essence containing emulsion

95% 에틸알콜 5g에 폴리옥시에틸렌솔비탄모노올레이트 1.2g, 키툴로오즈 0.3g, 히아루론산나트륨 0.2g, 비타민 E-아세테이트 0.2g, 감초산 나트륨 0.2g, 파라옥시안식향산에틸에스테르 0.1g, 실시예 1에서 수득한 잔나비불로로 추출물 1g 및 적량의 색소를 혼합하여 피부개선효과가 있는 미용액을 얻었다.
To 5 g of 95% ethyl alcohol, 1.2 g of polyoxyethylene sorbitan monooleate, 0.3 g of chitoolose, 0.2 g of sodium hyaluronate, 0.2 g of vitamin E-acetate, 0.2 g of sodium permanganate, 0.1 g of p-hydroxybenzoic acid ethyl ester 1 g of the extract of Namna bifrolo obtained in Example 1 and an appropriate amount of pigment were mixed to obtain a serum having skin-improving effect.

<< 실시예Example 3>  3> 황궁채Imperial Palace 추출물에  In the extract 글리콜산Glycolic acid 및 비타민 C가 첨가된 조성물의 제조 And vitamin C

상기 황궁채 추출물 450g에 글리콜산(글리콜산 99%, Aldrich사제품) 45g 및 비타민C(L-Ascorbic acid, Sigma) 30g을 잘 혼합하였다.
45 g of glycolic acid (99% of glycolic acid, manufactured by Aldrich) and 30 g of vitamin C (L-Ascorbic acid, Sigma) were well mixed with 450 g of the above-mentioned Imperial Citrine extract.

<실험예 12> 색소 침착, 잔주름 제거, 여드름 자국 및 비타민 C의 산화성 시험 <Experimental Example 12> Pigmentation, removal of wrinkles, oxidative testing of acne marks and vitamin C

눈가 및 뺨 등에 색소 침착이 심한 건강한 남녀 자원자 50명씩 세그룹을 피험자로 하여, 상기 실시예 3의 조성물을 1일 2회 아침 저녁으로 4개월 동안 색소 침착 부위에 적용하게 하였다. 일주일마다 색소 침착이 제거되는 정도와 피부에 대한 자극이 일어나는 정도를 관찰하여 기록하였다.The composition of Example 3 was applied twice daily to the pigmentation sites in the morning and evening for four months, with three groups of 50 healthy male and female volunteers with severe pigmentation on the eyes and cheeks. The extent to which pigmentation was removed weekly and the extent to which the skin was stimulated was observed and recorded.

얼굴에 잔주름이 있는 40대 이상의 건강한 남녀 자원자 50명씩을 세 그룹으로 나누어, 상기 실시예 3의 조성물을 1일 2회 아침 저녁으로 12개월 동안 주름부위에 적용하게 하였다. 피험자들은 환부가 가급적 햇빛에 노출되지 않도록 하였고 2내지 3개월 간격으로 그 개선 정도를 사진을 찍어 비교하였다. 사진을 찍을때는 전혀 화장하지 않은 상태로 동일 조건하에서 찍었으며, 주름이 개선된 정도를 현저한 효력이 있는 경우, 유효, 무효의 경우로 나누어 하기 표에 나타내었다.50 healthy volunteers and over 40 volunteers with fine wrinkles on their faces were divided into three groups and the composition of Example 3 was applied to the wrinkles twice a day in the morning and evening for 12 months. Subjects were asked to avoid exposure to sunlight as much as possible, and they were photographed and photographed at intervals of 2 to 3 months. The photographs were taken under the same conditions with no cremation at all, and the degree of improvement in wrinkles is shown in the table below when the effect is significant, when the effect is valid or when the effect is invalid.

이마, 빰 및 등에 농포성 여드름이 있는 남녀 환자 50명씩 세그룹을 피험자로 하여 상기 실시예 3의 조성물을 1일 2회 환부에 바르도록 하고, 피부에 적용시 자극이 있는 지와 그 개선된 정도를 육안으로 관찰하여 하기 표에 나타내었다.The composition of Example 3 was applied to the affected area twice a day with three groups of 50 male and female patients having brow skin acne on the forehead, chin, and back, and the number of stimuli applied to the skin and the degree of its improvement Were visually observed and shown in the following table.

비타민C의 공기중 산소에 의한 산화 정도를 상온에서 육안으로 관찰하였다. 비타민C가 산화되는지의 기준은 흰색이 황색으로 변색되는 정도로써 평가하여 하기 표 14에 나타내었다.
The degree of oxidation of vitamin C in air by oxygen was visually observed at room temperature. The criteria for the oxidation of vitamin C were evaluated in terms of degree of discoloration of white to yellow, and are shown in Table 14 below.

[표 14][Table 14]

본 발명의 실시예 3의 조성물을 환자에게 적용한 결과 얼굴의 잔주름 제거, 모공 축소, 여드름 치료, 햇볕에 그을린 피부에 대한 미백 효과 등을 나타내었다.
As a result of application of the composition of Example 3 of the present invention to a patient, it showed reduction of facial wrinkles, reduction of pores, acne treatment, and whitening effect on sun-exposed skin.

이상, 본 발명의 바람직한 실시예를 들어 상세하게 설명하였으나, 본 발명은 상기 실시예에 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 기술적 사상의 범위내에서 당 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의하여 여러 가지 변형이 가능하다.While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, it is to be understood that the invention is not limited to the disclosed exemplary embodiments, but, on the contrary, This is possible.

Claims (7)

항산화 기능, 티로시나아제 저해효과, 세포활성 효과, MMP-1 단백질 발현 저해효과, Sirt-1의 단백질 발현효과, caveolin-1 발현 저해 효과 및 CCN-1 발현양 저해 효과를 갖는 황궁채 및 고욤나무의 에탄올 환류 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부보습력과 미백 기능용 화장료 조성물.
The effect of antioxidant function, tyrosinase inhibitory effect, cell activity effect, inhibition of MMP-1 protein expression, protein expression of Sirt-1, caveolin-1 expression inhibition effect and CCN- A cosmetic composition for skin moisturizing and whitening function comprising ethanol reflux extract as an active ingredient.
삭제delete 제1항에 있어서,
상기 조성물은 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 프레스파우더, 루스파우더 및 아이섀도우로 이루어진 군으로부터 선택된 화장품에 사용되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
The method according to claim 1,
The composition may be in the form of a skin lotion, a skin softener, a skin toner, an astringent, a lotion, a milk lotion, a moisturizing lotion, a nutrition lotion, a massage cream, a nutrition cream, a moisturizing cream, a hand cream, , Cosmetics selected from the group consisting of cleansing lotion, cleansing cream, body lotion, body cleanser, milky lotion, press powder, loose powder and eye shadow.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되며 일반적으로 사용되는 함량을 포함하는 보조제를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
The method according to claim 1,
Characterized in that the composition further comprises adjuvants which are commonly used in cosmetics or dermatological science and which contain a commonly used content.
제4항에 있어서,
상기 보조제는 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온 봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제 및 지질 소낭으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
5. The method of claim 4,
The adjuvant may be selected from the group consisting of fatty substances, organic solvents, solubilizers, thickeners, gelling agents, softening agents, antioxidants, suspending agents, stabilizing agents, foaming agents, fragrances, surfactants, water, ionic or nonionic emulsifiers, Wherein the cosmetic composition comprises at least one selected from the group consisting of a chelating agent, a chelating agent, a preservative, a vitamin, a blocking agent, a wetting agent, a essential oil, a dye, a pigment, a hydrophilic or lipophilic active agent and a lipid vesicle.
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