KR101590042B1 - Composition for protecting and treating vaginosis disease comprising the purified fraction isolated from bee venom - Google Patents
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Abstract
본 발명은 봉독 정제물을 포함하는 질염 예방 및 치료용 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 투석 처리한 봉독 정제물을 유효성분으로 사용함으로써 인체의 적용에 있어서 부작용 및 독성이 없어 부담 없이 적용 가능하며, 특히 질염의 원인이 되는 진균류와 일반 세균에 우수한 항균 활성이 우수하여 질염 예방 및 치료용으로 사용하기에 적합하다. 또한, 여러 제형으로 제조될 수 있는 제형 우수성이 뛰어나 환자의 취향과 편리성에 따른 제품화가 가능하다.The present invention relates to a composition for the prevention and treatment of vaginitis comprising bee venom purified product, and more particularly, to a bee venom purified bee venom which is free from side effects and toxicity in the application of human beings, , And is particularly suitable for use in the prevention and treatment of vaginitis due to its excellent antimicrobial activity against fungi and common bacteria that cause vaginitis. In addition, it is excellent in formulations that can be manufactured in various formulations, and it is possible to commercialize products according to the taste and convenience of patients.
Description
본 발명은 봉독 정제물을 포함하는 질염 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a composition for preventing and treating vaginitis comprising bee venom purified water.
질염은 질 분비물, 냄새, 작열감, 소양감, 성교통, 배뇨통 등의 증상을 특징으로 하는 질의 감염 또는 염증상태로 가장 흔한 부인과 질환이다. 가임기 여성에서 발생하는 질염의 90% 이상은 세균성 질염, 칸디다성 질염, 트리코모나스 질염 등이다. 가임기 연령에서 발생하는 질염 중에 가장 흔한 세균성 질염은 40~50%를 차지하고, 그 다음이 칸디다성 질염 20~25%, 트리코모나스 질염 15~20% 순이고 비 감염성 질염 등도 있다. 질 내에는 많은 종류의 정상 세균군이 있고 이중 호기성 세균인 락토바실러스(lactobacillus )가 가장 많은 비율을 차지하고 있다. 이 세균은 과산화수소를 분비하여 질 내를 산성 상태로 유지해주고 유기체들 사이에 균형을 유지하며 병균에 대한 저항성을 지니게 하는데 저항 세균군의 변화를 초래하는 상황에서는 감염의 기회가 증가하게 된다.Vaginitis is the most common gynecological condition with vaginal infection or inflammation characterized by symptoms such as vaginal discharge, odor, burning sensation, bulimia, dyspareunia, and dysuria. More than 90% of the vaginitis in women of childbearing age are bacterial vaginitis, candidiasis, and trichomoniasis. Bacterial vaginitis is the most common vaginitis occurring at the age of childbirth, accounting for 40 ~ 50%, followed by Candida infections 20 ~ 25%, Trichomonas vaginitis 15 ~ 20% and noninfectious vaginitis. There are many kinds of quality in the normal flora it occupies a double aerobic bacteria Lactobacillus bacteria (lactobacillus) that most rates. The bacterium secretes hydrogen peroxide, which keeps the vagina acidic, maintains balance among organisms, and is resistant to germs. In situations where the resistance group changes, the chance of infection increases.
질염의 치료법을 보면 세균성 질염은 메트로니다졸(metronidazole)과 클린다마이신(clindamycin) 등의 약물을 사용하게 되는데 겔을 질 안에 주입하는 방법과 경구로 투여하는 방법이 있다. 임신 중에서도 약물 치료를 하여야 하지만 메트로니다졸은 태아에 대한 악영향이 가능하기 때문에 임신 초기에는 치료를 금해야 하고 임신중기이상에서부터 치료하게 된다. 다른 방법으로는 클린다마이신 등을 경구 투여하는 방법을 사용하게 된다.In the treatment of vaginitis, bacterial vaginosis uses drugs such as metronidazole and clindamycin, which are injected into the vagina and orally administered. Medication should be given during pregnancy, but metronidazole can be harmful to the fetus, so treatment should be avoided in the early stages of pregnancy and treatment should be started in the middle of pregnancy. As another method, a method of orally administering clindamycin or the like is used.
칸디다성 질염의 경우 아졸(azole) 계통의 항진균제를 사용하게 되는데, 국소 요법에 사용되는 항진균제의 종류로는 부토코나졸(butoconazole), 클로트리마졸(clotrimazole), 미코나졸(miconazole), 나이스타틴(nystatin), 티코나졸(ticonazole), 테르모나졸(terconazole) 등이며, 경구요법에 사용되는 항 진균제의 종류로는 플루코나졸(fluconazole), 이트라코나졸(itraconazole), 케토코나졸(ketoconazole) 등이 있다.Candida albicans is an azole-type antifungal agent used in local therapy. Examples of antifungal agents used in topical therapy include butoconazole, clotrimazole, miconazole, nystatin, ticonazole, and terconazole. Examples of antifungal agents used in oral therapy include fluconazole, itraconazole, and ketoconazole.
트리코모나스 질염의 경우에는 메트로니다졸을 경구로 투여하게 되며, 임신 중에는 임신초기에는 메트로니다졸 치료를 금해야 하고, 임신 중기 이상에서부터 치료가 가능하게 된다. 또한, 재발하여 치료가 실패할 경우 메트로니다졸에 대한 항생제 감수성 검사를 실시하여야 한다[비특허문헌 1].In the case of trichomoniasis vaginitis, metronidazole is administered orally. During pregnancy, metronidazole treatment should be prohibited at the beginning of pregnancy. In addition, when treatment fails due to recurrence, antibiotic susceptibility test for metronidazole should be performed [Non-Patent Document 1].
질염 치료에 사용되는 메트로니다졸(metronidazole)과 클린다마이신(clindamycin) 등의 약물은 항생물질의 부작용과 장기 치료에 따른 내성균에 의한 치료의 어려움이 있으며, 더욱이 임신 초기에는 태아에 대한 악영향이 가능하기 때문에 임신 치료의 어려움 등이 발생하게 된다.
Metronidazole and clindamycin, which are used in the treatment of vaginosis, have side effects of antibiotics and difficulty in treatment by resistant bacteria due to long-term treatment. Furthermore, since it is possible to adversely affect the fetus in the early pregnancy, And the like.
이에, 본 발명자들은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위하여 연구한 결과, 봉독과 같은 천연물을 사용하되. 봉독을 투석하여 정제된 봉독 정제물을 사용하여 투석 전 정제되지 않은 봉독 보다 부작용이 현저히 감소되고, 월등히 우수한 질염 치료 효과를 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다. As a result, the present inventors have found that natural materials such as bee venom are used. The present invention has been completed by confirming the excellent effect of treating vaginitis with significantly reduced adverse effects compared to bee venom not purified before dialysis using purified bee venom purified water by dialysis of bee venom.
따라서, 본 발명은 봉독 정제물을 유효성분으로 포함하는 질염 예방 및 치료용 조성물을 제공하는데 그 목적이 있다.
Accordingly, it is an object of the present invention to provide a composition for the prevention and treatment of vaginitis comprising an edible bee venom as an active ingredient.
상기 과제를 해결하기 위한 수단으로서, 본 발명은 봉독 정제물을 유효성분으로 포함하는 질염 예방 및 치료용 조성물을 제공한다.
As a means for solving the above problems, the present invention provides a composition for preventing and treating vaginitis comprising an edible bee venom as an active ingredient.
상기 과제를 해결하기 위한 다른 수단으로서, 본 발명은 봉독 정제물을 유효성분으로 포함하는 질 세정제, 겔제, 좌제 또는 에어로졸제를 제공한다.
As another means for solving the above problems, the present invention provides a vaginal detergent, a gel, a suppository or an aerosol preparation containing bee venom purified product as an effective ingredient.
본 발명에서 사용되는 유효성분인 봉독은 질염의 원인이 되는 진균류와 일반 세균에 우수한 항균 활성이 우수하여 질염 예방 및 치료용으로 사용하기에 적합하다. 특히, 히스타민이 제거된 봉독 정제물의 경우 그 효과가 더욱 뛰어나며, 잠재적인 부작용도 줄일 수 있고 의약품의 안전성을 향상시킬 수 있다. 또한, 여러 제형으로 제조될 수 있는 제형 우수성이 뛰어나 환자의 취향과 편리성에 따른 제품화가 가능하다.
The bee venom, which is an active ingredient used in the present invention, is excellent in antimicrobial activity against fungi and general bacteria that cause vaginitis and is suitable for use in the prevention and treatment of vaginitis. In particular, bee venom purified tablets with histamine removed are more effective, reduce potential side effects, and improve the safety of medicines. In addition, it is excellent in formulations that can be manufactured in various formulations, and it is possible to commercialize products according to the taste and convenience of patients.
도 1은 봉독 정제 전 후의 유효성분의 함량을 나타낸 것이다.
도 2는 봉독 정제 전 후의 히스타민(histamine) HPLC 데이타이다.
도 3은 봉독 정제 전 후의 항원물질 히스타민 시험 결과이다.Fig. 1 shows the content of the active ingredient before and after bee venom purification.
2 is histamine HPLC data before and after the bee venom purification.
Fig. 3 is a histamine test result of the antigenic substance before and after the bee venom purification.
본 발명은 봉독 정제물을 유효성분으로 포함하는 질염 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for preventing and treating vaginitis comprising bee venom purified product as an effective ingredient.
상기 질염은 칸디다성 질염, 세균성 질염, 트리코모나스 질염(Trichomonas vaginitis) 또는 위축성 질염(Atrophic vaginitis)인 것으로서, 칸디다성 질염의 원인균이 칸디다 알비칸스(Candida albicans)인 것일 수 있으며, 또한 세균성 질염인 것으로서, 세균성 질염의 원인균은 가드넬라 바지날리스(Gardnerella vaginalis), 마이코플라스마 속(Mycoplasma spp), 모빌룬커스 속(Mobiluncus spp), 박테로이데스 속(Bacteroides spp), 스트렙토코커스 속(Streptococcus spp), 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus) 등의 다양한 혐기성균, 통성혐기성균 등의 세균으로 발생할 수 있는 것일 수 있다. 트리코모나스 질염(Trichomonas vaginitis)은 트리코모나스라는 기생성편모충 감염이 원인이며, 위축성 질염(Atrophic vaginitis)은 폐경기 이후 질점막 두께의 감소에 의하여 세균 감염이 쉬운 상태가 될 수 있는데, 이때 메가스파에라 속(Megasphaera spp.), 아토포비움 버지나(Atopobium vaginae), 에거텔라 속(Eggerthella spp), 크로스트리디움 유사속(Clostridium-like spp), 펩토스트렙토코커스 마이크로스(Peptostreptococuus micros), 프레보텔라 속(Prevotella spp) 등의 다양한 혐기성균, 통성혐기성균에 감염에 인한 것일 수 있다.The vaginitis is Candida albicans, bacterial vaginitis, Trichomonas vaginitis or atrophic vaginitis. Candida albicans may be the causative organism of Candida albicans, and it is also a bacterial vaginitis. The causative organisms of bacterial vaginitis include Gardnerella vaginalis, Mycoplasma spp, Mobiluncus spp, Bacteroides spp, Streptococcus spp, Staphylococcus spp, Anaerobic bacteria such as Staphylococcus aureus, and anaerobic bacteria such as tuberous anaerobic bacteria. Trichomonas vaginitis is caused by a parasitic infestation of trichomoniasis, and atrophic vaginitis can be caused by a decrease in vascular mucosal thickness after menopause. In this case, Megasphaera Atopobium vaginae, Eggerthella spp, Clostridium-like spp, Peptostreptococuus micros, Prevotella spp., Pseudomonas spp. spp), and the like, and anaerobic bacteria.
본 발명에서 사용된 봉독 정제물에 대하여 구체적으로 설명하면 다음과 같다.The bee venom purified product used in the present invention will be described in detail as follows.
봉독은 40여 가지의 성분으로 구성되어 있으며, 주요 구성성분은 멜리틴(melittin), 아파민(apamin), 엠씨디-펩타이드(MCD-peptide)와 같은 활성 펩타이드, 히알루로니다제(hyaluronidase), 포스포리파아제 A2(phospholipase A2)와 같은 효소, 도파민(dopamine), 히스타민(histamine) 등과 같은 생리활성 아민 그리고 당, 인지질, 아미노산, 페로몬 등이 있다. 특히, 멜리틴은, 강산의 26개의 아미노산으로 이루어진 폴리펩타이드로 건조 봉독 전체의 40-60%를 이루고 있으며, 지질막에 대한 강력한 표면활성, 용혈작용, 항균활성과 항진균활성(Habermann E. Bee and wasp venoms. Science 1972;177:314-322., Habermann E. Pharmacologically important substances in the bee- and wasp-venoms. Pharm Unserer Zeit 1974;3:145-151., Gauldie J et al. The peptide components of bee venom. Eur J Biochem 1976;61:369-376., Lariviere and Melzack. The bee venom test: a new tonic-pain test. Pain 1996;66:271-277.), 그리고 항암 활성(Liu et al. Melittin-induced Ca2 +(I) increases and subsequent death in canine renal tubular cells. Hum Exp Toxicol 2008a;27:417-424., Liu et al. Melittin prevents liver cancer cell metastasis through inhibition of the Rac1-dependent pathway. Hepatology 2008b;47:1964-1973., Orsolic et al. Inhibition of mammary carcinoma cell proliferation in vitro and tumor growth in vivo by bee venom. Toxicon 2003;41:861-870.) 등의 다양한 생리활성, 약리활성, 독성을 갖고 있으며 봉독의 약리작용에 주요한 역할을 하는 것으로 보인다. Bee venom is composed of about 40 components and its major components are active peptides such as melittin, apamin, MCD-peptide, hyaluronidase, Enzymes such as phospholipase A2, physiologically active amines such as dopamine and histamine, and sugars, phospholipids, amino acids, and pheromones. In particular, melitin is a polypeptide consisting of 26 amino acids of strong acid, which constitutes 40-60% of the total dry bee venom. It has a strong surface activity, hemolytic action, antimicrobial activity and antifungal activity (Habermann E. Bee and wasp Pharm Unserer Zeit 1974; 3: 145-151., Gauldie J et al., " The peptide components of bee venom < RTI ID = 0.0 > Pain 1996: 66: 271-277), and anticancer activity (Liu et al., Melittin- induced Ca 2 + (I) increases and subsequent death in canine renal tubular cells Hum Exp Toxicol 2008a; 27:.... 417-424, Liu et al Melittin prevents liver cancer cell metastasis through inhibition of the Rac1-dependent pathway Hepatology 2008b ; 47: 1964-1973., Orsolic et al. Inhibition of mammary carcinoma cell proliferation in vitro and tumor growth in vivo by bee venom. Toxicon 2003; 41: 861-870.), and it seems to play a major role in the pharmacological action of bee venom.
하지만 대부분의 독과 같이 봉독에 노출되었을 때도 알레르기(allergy) 반응에 의한 면역반응 또한 적지 않아 임상 응용에 어려움이 있었다. 임상 응용 시의 부작용은 주로 히스타민(histamine)에 의해 일어나며, 피부 발진, 홍반 등의 알러지 반응이 문제가 될 수 있고 통증의 원인이 된다(Lariviere and Melzack. Pain 1996;66:271-277). 또한, 다음에서 설명하는 바와 같이 다양한 표적에 작용하여 다양한 생리학적 활성을 나타내는 생리활성 물질이기 때문에, 잠재적인 부작용의 위험 또한 배제할 수 없다. 특히, 봉독 주사제의 경우 히스타민에 의한 자궁 수축의 잠재적 위험성 때문에 FDA에서는 임부 카테고리 C로 분류하고 있다. 따라서, 히스타민에 의한 부작용을 개선하기 위해 봉독을 정제하는 과정에서 알레르기 반응의 원인이 되는 히스타민을 제거하고 항염증 작용을 하는 멜리틴(melittin), 아파민(apamin), 포스포리파아제 A2(phospholipase A2)를 유지하는 개선된 봉독 정제법이 필요하다.However, even when exposed to bee venom, most of the venom had difficulty in clinical applications because of the low number of immune responses due to allergic reactions. Adverse effects in clinical applications are mainly caused by histamine, and allergic reactions such as skin rash and erythema can be a problem and cause pain (Lariviere and Melzack. Pain 1996; 66: 271-277). In addition, since it is a physiologically active substance which acts on various targets and exhibits various physiological activities as described below, the risk of potential side effects can not be excluded. In particular, for bee venom injections, the FDA classifies them as pregnancy category C because of the potential risk of uterine contraction caused by histamine. Therefore, in order to improve the side effects of histamine, it is necessary to remove histamine, which is a cause of allergic reaction, in the process of purifying bee venom, and to remove melittin, apamin, phospholipase A2 ) Is required to maintain an improved bee venom purification method.
히스타민은 외부 자극(스트레스, stress)에 대하여 신체가 빠른 방어 행위를 하기 위하여 분비하는 유기 물질 중의 하나이며, 포유동물의 거의 모든 조직에서 발견되고, 다른 척추동물, 무척추동물, 미생물과 일부 식물의 조직에서도 발견된다. 1911년 영국의 과학자 조지 버거와 헨리 H. 데일이 화학적으로 처음 분리하였다. Histamine is one of the organic substances secreted by the body for rapid defensive action against external stimuli (stresses). It is found in almost all tissues of mammals, and is composed of other vertebrates, invertebrates, microorganisms, . In 1911, British scientist George Berger and Henry H. Dale first chemically separated.
체내에서는 히스티딘 탈탄산효소가 아미노산인 히스티딘에 작용해 히스타민이 생성된다. 히스타민은 주로 비만세포(mast cell) 내에 커다란 과립형태로 저장되어 있는데, 이 유주 세포는 그 과립의 일부를 방출하여 상처나 자극에 대응한다. 이렇게 나오는 히스타민은 이 물질에 의한 상처나 이들의 침입에 대한 신체의 방어반응에 중요한 역할을 하는데, 해당 부위의 혈액량을 늘리고 혈관을 확장시키며 모세혈관의 투과성을 높이는 과정을 통해서 면역세포가 염증 부위에 쉽게 도달하도록 하는 것이다. 비슷한 기능을 가진 물질로는 세로토닌, 키닌, 보체, 인터페론 등이 있다.In the body, histidine deacetylase acts on the amino acid histidine to produce histamine. Histamine is mainly stored in mast cells in the form of large granules, which release some of the granules and respond to scars or stimuli. Histamine in the body plays an important role in the body's defense against the scars and intrusion of these substances. By increasing the amount of blood in the area, expanding the blood vessels, and increasing the permeability of the capillaries, It is easy to reach. Materials with similar functions include serotonin, quinine, complement, and interferon.
히스타민에 대한 많은 연구가 있었지만 생리학적 중요성은 아직 완전히 밝혀지지 않았다. 또한, 히스타민은 위액, 특히 염산을 분비시키는 가장 강력한 활성제 중의 하나이며, 임신 중에 자궁의 운동조절 및 태아나 임산부의 혈관을 확장시키고, 비만 세포로부터 히스타민이 분비되면 폐와 자궁 같은 기관들의 평활근 세포가 수축되는 등 체내에서 다양한 효과를 나타낸다. 히스타민의 작용은 G 단백질 결합수용체인 H1, H2, H3 및 H4의 네 가지 수용체 아형의 활성화에 의해 매개된다. 현재는 H1 및 H2 수용체가 임상적인 관심을 갖고 있지만, H3 및 H4 수용체에 대한 연구도 진행되고 있다. Although there have been many studies on histamine, its physiological significance has not yet been fully understood. In addition, histamine is one of the strongest activators that secrete gastric juice, especially hydrochloric acid. It regulates the movement of the uterus during pregnancy and enlarges the blood vessels of the fetus and pregnant women. When histamine is secreted from mast cells, smooth muscle cells of the lungs and uterus And is contracted and exhibits various effects in the body. The action of histamine is mediated by the activation of four receptor subtypes of the G protein-coupled receptors H1, H2, H3 and H4. Currently, H1 and H2 receptors are of clinical interest, but studies on H3 and H4 receptors are also under way.
히스타민의 조직 및 장기 체계에 대한 효과는 다음과 같이 알려져 있다.The effects of histamine on tissue and organ systems are known as:
① 심혈관계: 사람에 대한 히스타민의 주사 및 주입은 혈관 확장 작용과 흥분작용, 그리고 반사성 빈맥에 의해 수축기, 이완기 혈압을 감소시키고 심박수를 증가시킨다. 또한, 조홍, 온감 및 두통 역시 히스타민의 투여 중에 발생할 수 있다. 히스타민의 심장에 대한 직접적 효과는 심근 수축력 증가와 보조 조정기 속도의 증가이다. 이런 심혈관계에 대한 작용은 비만세포로부터 분비되는 내인성 히스타민에 의하여 야기된다.① Cardiovascular: Histamine injections and infusions in humans reduce systolic and diastolic blood pressure and increase heart rate by vasodilatation, excitatory action, and reflex tachycardia. Heartburn, warmth and headache may also occur during administration of histamine. The direct effect of histamine on the heart is an increase in myocardial contractility and an increase in the speed of the assistant regulator. This cardiovascular action is caused by endogenous histamine secreted from mast cells.
② 위장관 평활근: 고용량의 히스타민은 H1 수용체에 의해 매개되어 설사를 유발하는데 이는 위장관 평활근을 수축시키는 효과를 가져온다.② Gastrointestinal smooth muscle: High-dose histamine is mediated by H1 receptor and causes diarrhea, which has the effect of contraction of the smooth muscle of the gastrointestinal tract.
③ 호흡기 평활근: H1 수용체에 의해 매개되어 기관지 수축을 초래한다. 정상인에서 히스타민 상용량에 의한 기관지 수축은 그리 현저하지 않지만 천식 환자에서 유도되는 기관지 수축은 과도한 신경반응을 나타낼 것이다. 왜냐하면 그러한 환자는 다른 여러 가지 자극에 대하여 과도하게 반응하기 때문이다.③ Respiratory smooth muscle: mediated by H1 receptors, causing bronchoconstriction. Bronchial contraction caused by histamine in normal subjects is not so significant, but bronchoconstriction induced by asthma patients will show excessive neuronal responses. Because such patients are overreacting to a variety of other stimuli.
④ 기타 평활근 근육: 일반적으로 눈과 생식관의 평활근에 대하여 대수롭지 않은 효과를 보이지만 과민반응(anaphylaxis)으로 고통받고 있는 임신부는 히스타민 유도 수축에 의하여 유산할 수 있다.④ Other smooth muscle Muscles: Pregnant women suffering from anaphylaxis usually have a minor effect on the smooth muscle of the eyes and gonadal vessels, but can be aborted by histamine-induced contractions.
⑤ 신경말단: 히스타민은 강력한 감각신경 특히 통증과 가려움증을 매개하는 말단 흥분제이다.⑤ Nerve endings: Histamine is a terminal stimulant that mediates strong sensory nerves, especially pain and itching.
⑥ 분비조직: 위벽세포의 H2 수용체의 활성화에 기인하여 강력한 위산분비 촉진제로 약간 덜하게는 펩신(pepsin) 및 내인성 요소의 촉진제로 인식되어 왔다. 이는 아데닐사이클라제(adenylyl cyclase)의 활성, cAMP 농도 및 세포 내 칼슘 농도 증가와 관련되어 있다. 비록 위산생성 최대효과는 H2 수용체 차단제에 의하여 감소할지라도 완전히 상실되진 않으며 아세틸콜린 및 가스트린 등과 같은 다른 위산 분비 촉진제는 cAMP를 증가시키지 않는다. 히스타민은 소장 및 대장에서의 분비를 촉진시키지만 정상 농도에서 다른 선조직의 활성에 대하여는 대수롭지 않은 효과를 나타내고 매우 고농도의 히스타민은 부신수질의 방출을 초래한다.⑥ Secretory organization: It has been recognized as a potent gastric acid secretion promoter due to the activation of H2 receptors in gastric wall cells and as a promoter of pepsin and endogenous factors to a lesser extent. This is related to the activity of adenylyl cyclase, cAMP concentration and intracellular calcium concentration. Although gastric acid maximal effects are reduced by H2 receptor blockers, they are not completely lost, and other gastric acid secretagogues such as acetylcholine and gastrin do not increase cAMP. Histamine promotes secretion in the small intestine and the large intestine, but at a normal concentration it has little effect on the activity of other tissues and very high histamine releases the adrenal medulla.
⑦ 3상 반응: 히스타민을 내피 주사하면 삼중반응이라고 알려진 연쇄반응을 유발시켜 피부를 긁을 때 피부 발적이 생기고, 주변으로 피부 발적이 번지어 긁은 부위에 담마진이 생긴다. 이런 현상은 혈관에 미치는 히스타민의 영향 때문에 생기는데 염증, 알레르기, 아나필락시스 등의 면역반응을 나타내는 중요한 역할을 한다. 면역반응에서 히스타민은 혈관을 확장시키고, 활성이 더 큰 면역계 성분이 방화벽을 통과해서 상처를 입거나 감염된 조직으로 이동할 수 있도록 혈관벽의 투과성을 증가시키는 작용이 있다. ⑦ Three-phase reaction: When histamine is injected into the endothelium, it triggers a chain reaction known as a triple reaction, resulting in skin redness when the skin is scratched, skin rash around the skin, This phenomenon is caused by the influence of histamine on the blood vessels and plays an important role in the immune response such as inflammation, allergy, and anaphylaxis. In the immune response, histamine expands the blood vessels and increases the permeability of the vascular wall so that more active immune system components can pass through the firewall to injure or migrate to infected tissues.
건조열 같은 알레르기 반응에서는 체내에 있는 이물질에 대한 면역계의 과민반응 결과 비만 세포에서 히스타민이 비정상적으로 많이 분비되어 비만세포에 붙어 있는 항체들이 이들 항원과 결합해 중화시키는데 이 과정에서 비만 세포가 터지게 되어 히스타민이 분비된다. 이 히스타민의 분비 때문에 콧물이 나고 눈물이 고이고 조직에 부종이 생기는 등 눈으로 볼 수 있는 알레르기 증상이 나타난다. 항원-항체 반응 또한 아나필락시스를 일으키는데, 이는 심각하고 즉각적이며 때로는 치명적인 반응으로 아나필락시스의 영향 가운데 일부는 히스타민의 감염에 의해 생기는 것과 유사하다. In the case of allergic reactions such as dryness, the hypersensitivity of the immune system to foreign substances in the body results in abnormal secretion of histamine from mast cells, which binds to the antigens attached to the mast cells to neutralize them. In this process, Is secreted. This secretion of histamine causes eye allergic symptoms such as runny nose, tears, edema in the tissues. Antigen-antibody responses also cause anaphylaxis, a serious, immediate, and sometimes fatal reaction, with some of the effects of anaphylaxis similar to those caused by histamine infections.
이와 같이 히스타민은 매우 다양한 생리활성을 조절하여 다양한 작용을 나타내기 때문에 부작용의 원인이 될 수 있고, 이 히스타민이 제거된 봉독 정제물을 사용함으로써 질염 예방 및 치료에 사용되는 조성물의 더 안전한 사용을 확보할 수 있다.As such, histamine can regulate a wide variety of physiological activities to exhibit various actions, which may cause side effects. By using the histamine-free bee venom purified product, it is possible to secure a safer use of the composition used for prevention and treatment of vaginitis can do.
따라서, 본 발명은 유효성분으로 히스타민이 제거된 봉독 정제물을 사용하며, 상기 봉독 정제물은 봉독을 투석으로 정제 처리한 것으로, 보다 바람직하게는 꿀벌로부터 채취하여 건조한 봉독을 물, 탄소수 1 내지 4의 저급알코올 또는 이들의 혼합용매로 녹인 후 여과 및 불순물을 제거하고 동결건조하여 수득하는 제 1단계; 상기 제 1단계의 봉독을 증류수 등의 용액에 용해시켜 봉독 용해물을 얻는 제 2단계; 상기 봉독 용해물을 단백질 투석막을 이용한 투석을 실시한 후에 수득한 투석막 내액을 취하여 동결건조하는 제 3단계 공정을 통하여 수득할 수 있다.Accordingly, the present invention provides a bee venom purified product in which histamine is removed as an active ingredient, and the bee venom purified product is a bee venom purified by dialysis. More preferably, the bee venom collected from bees is dried, Of a lower alcohol or a mixed solvent thereof, filtering and removing impurities, and lyophilizing to obtain a first step; A second step of dissolving the bee venom of the first step in a solution such as distilled water to obtain a bee venom solu- tion; The bee venom solution is dialyzed using a protein dialysis membrane, and the obtained dialyzed membrane internal liquor is taken and lyophilized.
상기 봉독 정제물들은 지표성분으로 가능한 성분으로서 포스포리파제의 함량이 1% 내지 80%, 바람직하게는 3% 내지 50%, 보다 바람직하게는 5% 내지 20%이고, 멜리틴의 함량이 30% 내지 90%, 바람직하게는 35% 내지 80%, 보다 바람직하게는 40% 내지 60%이며, 아파민의 함량이 0.1% 내지 30%, 바람직하게는 0.5% 내지 15%, 보다 바람직하게는 1.0% 내지 10%인 정제물이다.The bee venom tablets may contain 1 to 80%, preferably 3 to 50%, more preferably 5 to 20% of phospholipase as a component capable of being an indicator component, and the content of melitin is 30% , More preferably from 1.0% to 10%, more preferably from 0.5% to 10%, and most preferably from 0.1% to 10% % ≪ / RTI >
본 발명에서는 상기와 같은 효능을 갖고 있는 천연물질인 봉독 정제물을 이용하여 질염 예방 및 치료용 약학 조성물 및 질 세정제를 발명하고자 한 것이다.In the present invention, a pharmaceutical composition for preventing and treating vaginitis and a vaginal detergent using the bee venom purified product, which is a natural substance having the above-mentioned effects, is invented.
구체적으로 설명하면, 본 발명에서 질염을 일으키는 진균성 병원균에 대한 항진균 효과 및 세균에 대한 항균 효과를 나타내는 봉독 정제물의 함량은 조성물 전체 중량에 대해 0.0001 ~ 10 중량%로 함유되며, 바람직하게는 0.01 ~ 5 중량%를 함유한다. 이때, 봉독 정제물이 조성물 전체 중량에 대해 0.0001 중량% 미만으로 함유될 경우에는 항진균 또는 항균 효과가 낮아 효능이 반감될 수 있으며, 10 중량% 초과로 함유될 경우에는 세포 독성을 초래할 수 있다.Specifically, the content of the bee venom purified water which exhibits the antifungal effect on the fungal pathogenic fungus causing vaginitis and the antibacterial effect on the bacteria according to the present invention is 0.0001 to 10% by weight, preferably 0.01 to 10% by weight, 5% by weight. When the bee venom purified product is contained in an amount less than 0.0001% by weight based on the total weight of the composition, the antifungal or antimicrobial effect is low and the efficacy may be reduced. If the bee venom tablet is contained in an amount exceeding 10% by weight, cytotoxicity may be caused.
이러한 봉독 정제물을 함유한 조성물을 질염 예방 및 치료용 약학 조성물로 이용할 시, 약학적으로 허용되는 담체(carrier), 부형제(forming agent), 희석제(dilute), 안정제, 계면활성제, 점증제, pH 조절제 등과 혼합하여 액제, 겔제, 좌제, 에어로졸제 등과 같은 외용제로 제형화하여 사용할 수 있다.When the composition containing such a beejoon purified product is used as a pharmaceutical composition for the prevention and treatment of vaginitis, the pharmaceutically acceptable carrier, the forming agent, the dilute, the stabilizer, the surfactant, the thickening agent, the pH An external agent such as a liquid agent, a gel, a suppository, an aerosol agent and the like in admixture with a controlling agent.
이러한 봉독 정제물을 함유한 조성물을 화장료로 이용할 시 담체(carrier), 부형제(forming agent), 희석제(dilute), 안정제, 계면활성제, 점증제, pH 조절제 등과 혼합하여 질 세정제로서 사용할 수 있다.When the composition containing such bee venom purified water is used as a cosmetic, it can be used as a vaginal detergent by mixing with a carrier, a forming agent, a dilute, a stabilizer, a surfactant, an increasing agent, a pH adjusting agent and the like.
본 발명에서 액상 세정제로 제제화하는 경우, 제제를 물과 같은 용제에 일정비율로 희석하여 사용하게 되며, 사용되는 부형제 중 계면활성제를 사용하게 되는데, 이때 사용할 수 있는 계면활성제는 음이온성 계면활성제로서는 비누류, 황산화물, 설폰화물이 있으며, 양이온성 계면활성제는 제4급암모늄 화합물이 있고, 양성 계면활성제는 아미노산형 양성계면활성제, 베타인형 양성계면활성제이 있다. 비이온성 계면활성제는 다가알코올 고급지방산, 폴리에틸렌글리콜 고급지방산, 폴리옥시에틸렌 고급알코올, 소르비탄 고급지방산, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 고급지방산 등이 있다. 업계에서는 일반적으로 계면활성제로서는 음이온성 계면활성제인 설폰산을 주로 사용하게 되며, 라우릴황산과 그 염이 해당된다. 또한, 천연 유지에서 얻어지는 계면활성제도 사용할 수 있는데 천연유지는 식물성인 경우 코코넛유, 팜유, 목화씨유, 올리브유 등이 있으며, 동물성은 우지, 돈지, 산양지, 경유, 어유 등이 있다. 본 발명에서는 석유, 석탄에서 얻어지는 계면활성제가 아닌 천연 유지에서 유래되는 계면활성제를 사용하여 인체 적합성을 높였다. 희석제로는 폴리에틴렌글리콜, 폴리프로필렌, 글리세린, 부틸렌글리콜 등을 사용할 수 있으며, 용제로서는 물, 에탄올 등을 사용할 수 있다. 관능 향상을 위하여 향 등을 추가적으로 사용하며 제제의 안정성을 높이기 위하여 안정제를 사용할 수 있으며, 안정제로는 에데트산나트륨, 글리시린진산암모늄 등을 사용할 수 있다.In the present invention, when the composition is formulated with a liquid detergent, the preparation is diluted in a solvent such as water at a predetermined ratio, and a surfactant is used among the excipients to be used. As the anionic surfactant, Sulfuric acid, sulfuric acid, and sulfone. The cationic surfactant is a quaternary ammonium compound. The amphoteric surfactant is an amino acid type amphoteric surfactant and a betaine type amphoteric surfactant. Nonionic surfactants include polyhydric alcohol higher fatty acids, polyethylene glycol higher fatty acids, polyoxyethylene higher alcohols, sorbitan higher fatty acids, and polyoxyethylene sorbitan higher fatty acids. In the industry, sulfonic acid, which is an anionic surfactant, is mainly used as a surfactant, and laurylsulfuric acid and salts thereof are mainly used. Surfactants obtained from natural oils can also be used. Natural oils such as coconut oil, palm oil, cottonseed oil and olive oil can be used as vegetable oil, and animal oils such as tallow, lard, mountain oil, diesel oil and fish oil. In the present invention, a surfactant derived from a natural oil, which is not a surfactant obtained from petroleum or coal, is used to enhance human fitness. As the diluent, poly (ethylene glycol), polypropylene, glycerin, butylene glycol and the like can be used. As the solvent, water, ethanol and the like can be used. In order to improve the sensory properties, fragrance and the like may be additionally used. In order to enhance the stability of the preparation, a stabilizer may be used. As the stabilizer, sodium edetate, ammonium glycyrrhizin and the like may be used.
봉독 정제물 외에 기타 성분들은 필요에 따라 본 발명의 효과를 저하시키지 않는 범위 내에서 사용할 수 있으며, 본 발명의 일례로 봉독 정제물 0.0001 내지 10 중량%; 계면활성제 10 내지 30 중량%; 안정제 0.001 내지 3 중량%; 용제 60 내지 95 중량%를 포함한 세정제를 제조할 수 있다.Other components besides the bee venom purified product may be used within a range that does not deteriorate the effect of the present invention if necessary. Examples of the bee venom purified product include 0.0001 to 10% by weight; 10 to 30% by weight of a surfactant; 0.001 to 3% by weight of stabilizer; A cleaning agent containing 60 to 95% by weight of a solvent can be prepared.
아울러, 상기 세정제는 스프레이형, 액상형, 겔형, 분말, 고형의 비누타입이거나, 폼 타입 또는 물티슈 등으로 제형화될 수 있다.In addition, the detergent may be in the form of a spray, a liquid, a gel, a powder, a soap, a foam, a wet tissue, or the like.
본 발명에서의 겔제는 피부에 도포하는 액체를 침투시킨 분자량이 큰 유기분자로 이루어진 겔상(반고형상)의 외용제로 정의를 내릴 수 있다. 겔제에는 수성 겔제 및 유성 겔제가 있다. 통상적으로 겔제를 제조하는데 사용되는 고분자 물질의 경우 셀룰로오스 유도체, 예를 들면 히드록시프로필셀룰로오스 등; 천연검류, 예를 들면 산탄검, 알긴산염, 아라비아검 등; 그 밖의 고분자 물질은 카보머, 포비돈 등을 사용할 수 있으며. 용제는 물, 에탄올, 이소프로판올 등을 사용할 수 있으며, 희석제는 폴리에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 글리세린, 부틸렌글리콜 등을 사용할 수 있으며, 안정제로는 에데트산나트륨, 글리시린진산암모늄, 글리시리진산이칼륨 등을 사용할 수 있다. 또한, 점증제로 트리에탄올 아민 등을 사용할 수 있으며, 여기에 pH 조절제(구연산, 구연산나트륨 등)와 향 등을 추가로 사용할 수 있다.The gel agent in the present invention can be defined as a gel-like (semi-circular) external preparation made of organic molecules having a large molecular weight permeating a liquid to be applied to the skin. The gels include aqueous gels and oily gels. Typically, cellulose derivatives such as hydroxypropylcellulose and the like are usable as polymeric materials used for preparing gels; Natural gums such as xanthan gum, alginate, gum arabic and the like; Other polymeric materials may be carbomers, povidone, and the like. The diluent may be polyethylene glycol, propylene glycol, glycerin, butylene glycol, and the like. Examples of the stabilizer include sodium edetate, ammonium glycyrrhizin, potassium dipotassium glycyrrhizate, and the like. . In addition, gradually increasing triethanolamine and the like can be used, and a pH adjusting agent (citric acid, sodium citrate, etc.) and fragrance can be additionally used.
봉독 정제물 외에 기타 성분들은 필요에 따라 본 발명의 효과를 저하시키지 않는 범위 내에서 사용할 수 있으며, 본 발명의 일례로 봉독 정제물 0.0001 내지 10 중량%; 고분자 물질 0.5 내지 15 중량%; 안정제 0.001 내지 3 중량%; 용제 80 내지 97 중량%; 희석제 0.5 내지 10 중량%; 점증제 0.1 내지 5 중량%를 포함한 겔제를 제조할 수 있다.Other components besides the bee venom purified product may be used within a range that does not deteriorate the effect of the present invention if necessary. Examples of the bee venom purified product include 0.0001 to 10% by weight; 0.5 to 15% by weight of a polymeric material; 0.001 to 3% by weight of stabilizer; 80 to 97% by weight of a solvent; 0.5 to 10% by weight of a diluent; A gel containing 0.1 to 5% by weight of the thickening agent can be prepared.
본 발명에서 좌제로 제형화하는 경우 기제로 평균분자량 1,000 내지 10,000의 폴리에틸렌글리콜을 사용하며 인체의 체온에 의해 용융되어 유효성분인 봉독이 방출되도록 하여 구성하며, 추가적으로 pH 조절제(구연산, 구연산나트륨 등), 계면활성제, 안정제 등을 포함할 수 있다.In the present invention, polyethylene glycol having an average molecular weight of 1,000 to 10,000 is used as a base when melamine is formulated as a suppository and melted by the body temperature of the human body to release the bee venom as an active ingredient. In addition, a pH adjusting agent (citric acid, sodium citrate, , Surfactants, stabilizers, and the like.
봉독 정제물 외에 기타 성분들은 필요에 따라 본 발명의 효과를 저하시키지 않는 범위 내에서 사용할 수 있으며, 본 발명의 일례로 봉독 정제물 0.0001 내지 10 중량%; 기제 90 내지 99.999 중량%를 포함한 좌제를 제조할 수 있다.Other components besides the bee venom purified product may be used within a range that does not deteriorate the effect of the present invention if necessary. Examples of the bee venom purified product include 0.0001 to 10% by weight; Suppositories containing 90 to 99.999% by weight of a base can be prepared.
본 발명에서 유효성분이 포함되어 있는 액상 또는 고체물질의 미세분산을 가스압력에 의해 작동상태에서 방출시키는 에어로졸제로 제형화하는 경우 봉독 정제물에 계면활성제, 용제, pH 조절제, 안정제, 향을 포함하여 제조할 수 있다. 여기에서 용제는 물, 에탄올, 이소프로판올 등을 사용할 수 있으며, 희석제는 폴리에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 글리세린, 부틸렌글리콜 등을 사용할 수 있으며, 계면활성제는 음이온 계면활성제, 양이온 계면활성제, 양이온성 계면활성제, 비이온성 계면활성제를 사용할 수 있으며, 안정제로서는 에데트산나트륨, 글리시리진산암모늄, 글리시리진산이칼륨 등을 사용할 수 있고, pH 조절제로는 구연산, 구연산나트륨 등을 사용할 수 있다. 가스압력을 내기 위한 분사체는 프로판가스, 부탄가스, 압축공기, 질소가스 등을 사용할 수 있다. 본 발명의 실시예에서는 용제의 경우 물, 에탄올, 부틸렌글리콜 혼합액을 사용하였으며, pH 조절제로는 구연산, 구연산나트륨 등을 사용하였으며, 안정제는 에데트산나트륨, 글리시리진산이칼륨, 글리시리진산 암모늄을 사용하여 제형화하였으며, 가스압력을 내기 위한 분사체는 질소가스를 사용하였다.When the present invention is formulated into an aerosol agent which releases the fine dispersion of the liquid or solid material containing the active ingredient in the operating state by the gas pressure, the preparation of the bee venom tablet containing the surfactant, the solvent, the pH adjuster, can do. The diluent may be polyethylene glycol, propylene glycol, glycerin, butylene glycol, etc. The surfactant may be an anionic surfactant, a cationic surfactant, a cationic surfactant, an anionic surfactant, Nonionic surfactants can be used. As the stabilizer, sodium edetate, ammonium glycyrrhizinate, potassium dipotassium glycyrrhizinate and the like can be used, and citric acid, sodium citrate and the like can be used as a pH regulator. Propellant gas, butane gas, compressed air, nitrogen gas and the like can be used as a jetting substance for gas pressure. In the examples of the present invention, a mixture of water, ethanol and butylene glycol was used as a solvent, and citric acid, sodium citrate and the like were used as pH adjusters. The stabilizer was sodium edetate, potassium glycyrrhizinate and ammonium glycyrrhizinate Nitrogen gas was used as a jetting body for gas pressure.
봉독 정제물 외에 기타 성분들은 필요에 따라 본 발명의 효과를 저하시키지 않는 범위 내에서 사용할 수 있으며, 본 발명의 일례로 봉독 정제물 0.0001 내지 10 중량%; 안정제 0.001 내지 3 중량%; 용제 85 내지 99.7 중량%; pH 조절제 0.001 내지 1.0 중량%, 희석제 0.1 내지 10 중량%, 계면활성제 0.01 내지 1.0 중량%를 포함한 에어로졸제를 제조할 수 있다.
Other components besides the bee venom purified product may be used within a range that does not deteriorate the effect of the present invention if necessary. Examples of the bee venom purified product include 0.0001 to 10% by weight; 0.001 to 3% by weight of stabilizer; 85 to 99.7% by weight of a solvent; an aerosol agent containing 0.001 to 1.0% by weight of a pH adjusting agent, 0.1 to 10% by weight of a diluent, and 0.01 to 1.0% by weight of a surfactant may be prepared.
본 발명에 있어서 봉독 정제물을 포함한 약학 조성물 또는 질 세정제는 질염의 원인이 되는 진균류인 칸디다알비칸스(Candida albicans)와 일반 세균에 항진균 및 항균 활성이 우수하므로 세균 및 진균의 발육과 생활 기능을 저지 또는 억제할 수 있다.In the present invention, a pharmaceutical composition or a vaginal detergent containing bee venom purified product is excellent in antifungal activity and antimicrobial activity against Candida albicans and general bacterium which are the fungi causing vaginitis and thus inhibits growth and life functions of bacteria and fungi Or suppressed.
또한, 상기 약제용은 경구 투여를 위한 고형제제로서 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등으로 제형화된 것일 수 있고, 비경구 투여를 위한 형태로서 크림, 연고, 로션, 드레싱용액, 분무제, 기타 도포제 등으로 제형화된 것일 수 있다.
The pharmaceutical preparations may be formulated as tablets, pills, powders, granules, capsules and the like as solid preparations for oral administration. Examples of the form for parenteral administration include creams, ointments, lotions, dressings, Other coating agents, and the like.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나, 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하고, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.
Advantages and features of the present invention and methods of achieving them will become apparent with reference to the embodiments described in detail below. However, it is to be understood that the present invention is not limited to the disclosed embodiments, but may be embodied in many different forms and should not be construed as limited to the embodiments set forth herein. Rather, these embodiments are provided so that this disclosure will be thorough and complete, To fully disclose the scope of the invention to those skilled in the art, and the invention is only defined by the scope of the claims.
제조예Manufacturing example 1: One: 봉독Beijing 분리 detach
서양종꿀벌(Apis meliffera L.)을 봉독채집장치를 이용하여 봉독을 채집하고, 채집한 건조 봉독을 증류수로 용해한 후, 원심분리시킨 다음, 이를 여과한 후 동결건조하여 순수한 봉독을 분리해 내었다.
The honey bee ( Apis meliffera L.) was collected by using a bee venom collecting device, and the collected bee venom was dissolved with distilled water, centrifuged, filtered, and lyophilized to separate the pure bee venom.
제조예Manufacturing example 2: 2: 봉독Beijing 정제물Purified water 제조 Produce
제조예 1의 건조 봉독에서 히스타민을 제거하기 위하여 1.000 g을 저울로 정밀히 달아서 HPLC 용 증류수 4mL 에 녹인 후 10cm 로 자른 단백질 투석막 (Spectra/Por 7 Dialysis membrane, Spectrum, USA. 132107) 에 넣은 후 400 mL (투석막 내액의 100배) 의 HPLC 용 증류수를 담은 원통형 유리 플라스크에 단백질 투석막이 잠기도록 하여 마그네틱 바를 넣어서 회전시켜 90분 동안 투석하였다. 투석이 끝나면 투석막 내액을 취하여 동결건조하여 봉독 정제물을 얻었다.
In order to remove histamine from the dry beacon of Preparation Example 1, 1.000 g was precisely weighed and dissolved in 4 mL of distilled water for HPLC, and the solution was added to a protein dialysis membrane (Spectra / Por 7 Dialysis membrane, Spectrum, USA, 132107) (100 times the inner volume of the dialysis membrane) of distilled water for HPLC was immersed in a cylindrical glass flask and dialyzed for 90 minutes by rotating it with a magnetic bar. After the dialysis, the inner membrane of the dialysis membrane was taken and lyophilized to obtain bee venom purified water.
비교예Comparative Example 1: 질 세정제 ( 1: Vaginal detergent ( 플라세보Placebo ))
코코글루코시드 15.0 g15.0 g of coco glucoside
코코암포아세테이트나트륨 5.0 g5.0 g of sodium cocoammonoacetate
에데트산나트륨 100.0 mgSodium edetate 100.0 mg
정제수 79.90 gPurified water 79.90 g
상기 원료를 칭량하여 조제 용기에 넣은 다음 액 온도를 80 ℃로 가온하면서, 교반하여 완전 용해시켰다. 완전 용해되면 액 온도를 40 ℃로 냉각한 다음, 진공 탈포하여 100 g의 질 세정제 플라세보를 제조하였다.
The raw materials were weighed, placed in a preparation vessel, and completely dissolved by stirring while heating the solution temperature to 80 占 폚. Upon complete dissolution, the solution temperature was cooled to 40 ° C and vacuum degassed to produce 100 g of a vaginal detergent placebo.
비교예Comparative Example 2: 질 세정제 2: Vaginal detergent
제조예 1의 봉독 20.0 mg20.0 mg of bee venom of Preparation Example 1
코코글루코시드(코코넛유 유래 계면활성제) 15.0 g15.0 g of coco glucoside (a surfactant derived from coconut oil)
코코암포아세테이트나트륨(코코넛유 유래 계면활성제) 5.0 g5.0 g of sodium cocoammonoacetate (surfactant derived from coconut oil)
에데트산나트륨 100.0 mgSodium edetate 100.0 mg
정제수 79.88 gPurified water 79.88 g
상기 원료를 칭량하여 조제 용기에 넣은 다음 액 온도를 80 ℃로 가온하면서, 교반하여 완전 용해시켰다. 완전 용해되면 액 온도를 40 ℃로 냉각한 다음, 진공 탈포하여 100 g의 질 세정제를 제조하였다.
The raw materials were weighed, placed in a preparation vessel, and completely dissolved by stirring while heating the solution temperature to 80 占 폚. When completely dissolved, the solution temperature was cooled to 40 DEG C and then degassed under vacuum to prepare 100 g of a quality detergent.
실시예Example 1: 질 세정제 1: quality detergent
제조예 2의 봉독 정제물 20.0 mg20.0 mg of the bee venom purified product of Preparation Example 2
코코글루코시드(코코넛유 유래 계면활성제) 15.0 g15.0 g of coco glucoside (a surfactant derived from coconut oil)
코코암포아세테이트나트륨(코코넛유 유래 계면활성제) 5.0 g5.0 g of sodium cocoammonoacetate (surfactant derived from coconut oil)
에데트산나트륨 100.0 mgSodium edetate 100.0 mg
정제수 79.88 gPurified water 79.88 g
상기 원료를 칭량하여 조제 용기에 넣은 다음 액 온도를 80 ℃로 가온하면서, 교반하여 완전 용해시켰다. 완전 용해되면 액 온도를 40 ℃로 냉각한 다음, 진공 탈포하여 100 g의 질 세정제를 제조하였다.
The raw materials were weighed, placed in a preparation vessel, and completely dissolved by stirring while heating the solution temperature to 80 占 폚. When completely dissolved, the solution temperature was cooled to 40 DEG C and then degassed under vacuum to prepare 100 g of a quality detergent.
비교예Comparative Example 3: 3: 겔제Gelse ( ( 플라세보Placebo ))
에데트산나트륨 50.0 mgSodium edetate 50.0 mg
글리시리진산칼륨 50.0 mgPotassium glycyrrhizinate 50.0 mg
부틸렌글리콜 3.0 g3.0 g of butylene glycol
포비돈 K30 1.0 gPovidone K30 1.0 g
카보머 300.0 mgCarbomer 300.0 mg
트리에탄올아민 400.0 mgTriethanolamine 400.0 mg
정제수 95.20 gPurified water 95.20 g
상기 원료를 칭량한 다음, 조제 용기에 넣고 액 온도를 80 ℃ 가온 교반하면서 완전 용해하고, 40 ℃ 냉각한 다음 진공 탈포하여 100 g의 겔제를 제조하였다.
The raw materials were weighed, then placed in a preparation vessel, completely dissolved while stirring at 80 DEG C, cooled to 40 DEG C, and degassed under vacuum to prepare 100 g of a gel.
비교예Comparative Example 4: 4: 겔제Gelse ( ( 봉독Beijing 농도: 25.0 ㎍/g) Concentration: 25.0 占 퐂 / g)
제조예 1의 봉독 2.5 mgBee venom of Preparation Example 1 2.5 mg
에데트산나트륨 50.0 mgSodium edetate 50.0 mg
글리시리진산칼륨 50.0 mgPotassium glycyrrhizinate 50.0 mg
부틸렌글리콜 3.0 g3.0 g of butylene glycol
포비돈 K30 1.0 gPovidone K30 1.0 g
카보머 300.0 mgCarbomer 300.0 mg
트리에탄올아민 400.0 mgTriethanolamine 400.0 mg
정제수 95.1975 gPurified water 95.1975 g
상기 원료를 칭량한 다음 조제 용기에 넣고 액 온도를 80 ℃ 가온 교반하면서 완전 용해한 다음, 40 ℃ 냉각한 다음 진공 탈포하여 100 g의 겔제를 제조하였다.
The raw materials were weighed, placed in a preparation vessel, completely dissolved while being heated at 80 DEG C with stirring, cooled at 40 DEG C and vacuum degassed to prepare 100 g of a gel.
실시예Example 2: 2: 겔제Gelse ( ( 봉독Beijing 농도: 25.0 ㎍/g) Concentration: 25.0 占 퐂 / g)
제조예 2의 봉독 정제물 2.5 mg2.5 mg of bee venom purified product of Preparation Example 2
에데트산나트륨 50.0 mgSodium edetate 50.0 mg
글리시리진산칼륨 50.0 mgPotassium glycyrrhizinate 50.0 mg
부틸렌글리콜 3.0 g3.0 g of butylene glycol
포비돈 K30 1.0 gPovidone K30 1.0 g
카보머 300.0 mgCarbomer 300.0 mg
트리에탄올아민 400.0 mgTriethanolamine 400.0 mg
정제수 95.1975 gPurified water 95.1975 g
상기 원료를 칭량한 다음 조제 용기에 넣고 액 온도를 80 ℃ 가온 교반하면서 완전 용해한 다음, 40 ℃ 냉각한 다음 진공 탈포하여 100 g의 겔제를 제조하였다.
The raw materials were weighed, placed in a preparation vessel, completely dissolved while being heated at 80 DEG C with stirring, cooled at 40 DEG C and vacuum degassed to prepare 100 g of a gel.
비교예Comparative Example 5: 5: 좌제Suppository ( ( 플라세보Placebo ))
폴리에틸렌글리콜 1500 50.0 gPolyethylene glycol 1500 50.0 g
폴리에틸렌글리콜 4000 50.0 gPolyethylene glycol 4000 50.0 g
상기 원료를 칭량한 다음 조제 용기에 넣고 액 온도를 80 ℃ 가온 교반하면서 완전 용해하고, 40 ℃ 냉각한 다음 진공 탈포하여 100 g의 좌제를 제조하였다.
The raw materials were weighed, placed in a preparation vessel, completely dissolved with stirring at 80 DEG C, cooled to 40 DEG C, and defoamed in vacuo to prepare 100 g of suppositories.
비교예Comparative Example 6: 6: 좌제Suppository ( ( 봉독Beijing 농도: 50.0 ㎍/g) Concentration: 50.0 占 퐂 / g)
제조에 1의 봉독 5.0 mgPreparation of 1 bee venom 5.0 mg
폴리에틸렌글리콜 1500 49.995 gPolyethylene glycol 1500 49.995 g
폴리에틸렌글리콜 4000 50.0 gPolyethylene glycol 4000 50.0 g
상기 원료를 칭량한 다음 조제 용기에 넣고 액 온도를 80 ℃ 가온 교반하면서 완전 용해하고, 40 ℃ 냉각한 다음 진공 탈포하여 100 g의 좌제를 제조하였다.
The raw materials were weighed, placed in a preparation vessel, completely dissolved with stirring at 80 DEG C, cooled to 40 DEG C, and defoamed in vacuo to prepare 100 g of suppositories.
실시예Example 3: 3: 좌제Suppository ( ( 봉독Beijing 농도: 50.0 ㎍/g) Concentration: 50.0 占 퐂 / g)
제조예 2의 봉독 정제물 5.0 mg5.0 mg of the bee venom purified product of Preparation Example 2
폴리에틸렌글리콜 1500 49.995 gPolyethylene glycol 1500 49.995 g
폴리에틸렌글리콜 4000 50.0 gPolyethylene glycol 4000 50.0 g
상기 원료를 칭량한 다음 조제 용기에 넣고 액 온도를 80 ℃ 가온 교반하면서 완전 용해하고, 40 ℃ 냉각한 다음 진공 탈포하여 100 g의 좌제를 제조하였다.
The raw materials were weighed, placed in a preparation vessel, completely dissolved with stirring at 80 DEG C, cooled to 40 DEG C, and defoamed in vacuo to prepare 100 g of suppositories.
비교예Comparative Example 7: 7: 에어로졸제Aerosol agent ( ( 플라세보Placebo ))
부틸렌글리콜 3.5 g3.5 g of butylene glycol
에탄올 3.0 gEthanol 3.0 g
글리세린 0.5 g0.5 g of glycerin
피이지-60하이드로제네이트카스터오일 0.3 g≪ tb > < tb > Pigment-60 Hydrogenate castor oil 0.3 g
구연산 20.0 mgCitric acid 20.0 mg
구연산나트륨 80.0 mgSodium citrate 80.0 mg
에데트산나트륨 50.0 mgSodium edetate 50.0 mg
글리시리진산암모늄 10.0 mgAmmonium glycyrrhizine 10.0 mg
글리시리진산이칼륨 50.0 mg50.0 mg of potassium glycyrrhizin potassium
정제수 92.485 gPurified water 92.485 g
상기 원료를 칭량한 다음 조제 용기에 넣고 액 온도를 80 ℃ 가온 교반하면서 완전 용해하고, 40 ℃ 냉각한 다음 진공 탈포하여 100 g의 액을 제조한 후 압력용기에 충전한 다음 질소가스를 충전하고 밀봉하여 에어로졸제 플라세보를 제조하였다.
The raw material was weighed and placed in a preparation container. The solution was completely dissolved with stirring at 80 DEG C, cooled to 40 DEG C, and vacuum degassed to prepare 100 g of a solution. The solution was filled in a pressure vessel, To produce an aerosol placebo.
비교예Comparative Example 8: 8: 에어로졸제Aerosol agent ( ( 봉독Beijing 농도: 50.0 ㎍/g) Concentration: 50.0 占 퐂 / g)
제조예 1의 봉독 5.0 mgBee venom of Preparation Example 1 5.0 mg
부틸렌글리콜 3.5 g3.5 g of butylene glycol
에탄올 3.0 gEthanol 3.0 g
글리세린 0.5 g0.5 g of glycerin
피이지-60하이드로제네이트카스터오일 0.3 g≪ tb > < tb > Pigment-60 Hydrogenate castor oil 0.3 g
구연산 20.0 mgCitric acid 20.0 mg
구연산나트륨 80.0 mgSodium citrate 80.0 mg
에데트산나트륨 50.0 mgSodium edetate 50.0 mg
글리시리진산암모늄 10.0 mgAmmonium glycyrrhizine 10.0 mg
글리시리진산이칼륨 50.0 mg50.0 mg of potassium glycyrrhizin potassium
정제수 92.485 gPurified water 92.485 g
상기 원료를 칭량한 다음 조제 용기에 넣고 액 온도를 80 ℃ 가온 교반하면서 완전 용해하고, 40 ℃ 냉각한 다음 진공 탈포하여 100 g의 액을 제조한 후 압력용기에 충전한 다음 질소가스를 충전하고 밀봉하여 에어로졸제를 제조하였다.
The raw material was weighed and placed in a preparation container. The solution was completely dissolved with stirring at 80 DEG C, cooled to 40 DEG C, and vacuum degassed to prepare 100 g of a solution. The solution was filled in a pressure vessel, To prepare an aerosol formulation.
실시예Example 4: 4: 에어로졸제Aerosol agent ( ( 봉독Beijing 농도: 50.0 ㎍/g) Concentration: 50.0 占 퐂 / g)
제조예 2의 봉독 정제물 5.0 mg5.0 mg of the bee venom purified product of Preparation Example 2
부틸렌글리콜 3.5 g3.5 g of butylene glycol
에탄올 3.0 gEthanol 3.0 g
글리세린 0.5 g0.5 g of glycerin
피이지-60하이드로제네이트카스터오일 0.3 g≪ tb > < tb > Pigment-60 Hydrogenate castor oil 0.3 g
구연산 20.0 mgCitric acid 20.0 mg
구연산나트륨 80.0 mgSodium citrate 80.0 mg
에데트산나트륨 50.0 mgSodium edetate 50.0 mg
글리시리진산암모늄 10.0 mgAmmonium glycyrrhizine 10.0 mg
글리시리진산이칼륨 50.0 mg50.0 mg of potassium glycyrrhizin potassium
정제수 92.485 gPurified water 92.485 g
상기 원료를 칭량한 다음 조제 용기에 넣고 액 온도를 80 ℃ 가온 교반하면서 완전 용해하고, 40 ℃ 냉각한 다음 진공 탈포하여 100 g의 액을 제조한 후 압력용기에 충전한 다음 질소가스를 충전하고 밀봉하여 에어로졸제를 제조하였다.
The raw material was weighed and placed in a preparation container. The solution was completely dissolved with stirring at 80 DEG C, cooled to 40 DEG C, and vacuum degassed to prepare 100 g of a solution. The solution was filled in a pressure vessel, To prepare an aerosol formulation.
실험예Experimental Example 1: 단백질 함량 비교 1: Protein content comparison
정제 전과 후의 건조봉독 단백질 함량을 비교하기 위해 아파민, PLA2, 멜리틴, 히스타민 함량을 HPLC로 분석하였으며, 그 함량은 각각 정제 전에는 3.18%, 11.67%, 47.45%, 1.37% 그리고 정제 후에는 3.18%, 13.31%, 47.04%, 미검출(ND, Not Detected)임을 확인함으로써, 약리작용을 하는 유효성분들은 그대로 유지되면서 히스타민이 제거된 것을 알 수 있었다(도 1, 도 2).
In order to compare the content of dry bean curd protein before and after the purification, the content of aminophylline, PLA2, melitin and histamine was analyzed by HPLC and the contents were 3.18%, 11.67%, 47.45%, 1.37% and 3.18% , 13.31%, and 47.04%, respectively. Thus, it was confirmed that histamine was removed while maintaining the pharmacological activity of the active ingredients (FIGS. 1 and 2).
실험예Experimental Example 2: 부작용 평가 2: Evaluation of side effects
히스타민에 의한 부작용을 평가하기 위해, 투석 전후의 봉독 정제물을 대한약전의 일반시험법 중 히스타민 시험법에 따라 히스타민에 의한 혈압 강하를 비교하였다. In order to evaluate the side effects of histamine, the beaded tablets before and after dialysis were compared with the histamine-induced blood pressure drop according to the histamine test in the general test method of the Korean Pharmacopoeia.
도 3에서 볼 수 있듯이 봉독 정제물 주사에 의한 혈압 강하의 폭이, 투석 정제 후의 봉독 정제물을 주사하였을 때 현저하게 줄어드는 것을 확인할 수 있었다.
As can be seen from FIG. 3, the width of the blood pressure drop due to the injection of the bee venom tablet was remarkably reduced when the bee venom tablet after the dialysis was purified.
실험예Experimental Example 3: 항균 효과 검증 시험( 3: Antibacterial effect test ( AgarAgar diffusiondiffusion assayassay ))
봉독을 함유하는 질염 예방 및 치료용 조성물 및 질 세정제의 항균 효과를 검증하고자 agar diffusion assay 중 paper disc method를 진행하였다. In order to examine the antimicrobial effect of the composition and vaginal detergent for the prevention and treatment of vaginitis - containing vaginitis, the paper disc method was performed during the agar diffusion assay.
사용한 균주는 질염의 원인 균주를 사용하였으며, 통성혐기성 균주로 Escherichia coli(그람음성), Staphylococcus aureus(그람양성), Staphylococcus epidermids(그람양성), Enterobacter aerogenes(그람음성), Klebsiella pneumoniae(그람음성)를 사용하였고, 혐기성 균주로는 여성의 질에서 분리한 Proteus mirabilis(그람음성), Fusobacterium nucleatum(그람음성)를 사용하였다. Escherichia coli (gram negative) , Staphylococcus aureus (gram positive) , Staphylococcus epidermids (gram negative), Enterobacter aerobic (Gram negative) and Klebsiella pneumoniae (gram negative). The anaerobic strains were Proteus mirabilis (gram negative) , Fusobacterium nucleatum (gram negative) was used.
사용한 균주를 배지에 배양하여 활성을 높인 다음, 실험에 사용하였다. 페트리디쉬에 agar 배지를 넣고 굳힌 다음 시험 균주를 spreading 방법으로 고르게 펴서 도말한 다음 paper disc를 배지 위에 놓고 그 위에 일정 농도의 봉독 및 질 세정제, 겔제, 에어로졸제를 종류별로 첨가한 다음 인큐베이터에서 37 ℃, 18시간, 혐기성 조건에서 배양하여 생육 저지환 생성 여부를 확인하여 항균 효과를 검증하였다.The strain used was cultivated in the medium to increase its activity and then used in the experiment. The agar medium was placed in a Petri dish, and the test strain was spread out by spreading method. The paper disc was placed on the medium, and a bee venom and vaginal detergent, a gel and an aerosol agent were added thereto on the medium. , 18 hours, and anaerobic conditions.
실험 결과, 통성 혐기성균인 Escherichia coli , Staphylococcus aureus , Staphylococcus epidermids , Enterobacter aerogenes , Klebsiella pneumoniae 경우 봉독이 함유되어 있는 경우에 저지환이 나타나지만, 특히 봉독 정제물의 실시예 1~4에서 저지환이 크게 나타나고 있어 우수한 항균 효과를 확인하였으며, 혐기성균인 Proteus mirabilis , Fusobacterium nucleatum 경우에도 마찬가지로 봉독 정제물의 실시예 1~4에서 저지환이 크게 나타나고 있어 항균 효과가 우수함을 확인하였다.As a result, Escherichia coli , Staphylococcus aureus , Staphylococcus epidermidis , Enterobacter aerogenes , Klebsiella pneumoniae When ring appears to commit if the bee venom is contained, in particular it was confirmed that purified bee venom appears larger ring Jersey In Example 1-4 water excellent antimicrobial effect, anaerobic seonggyunin Proteus mirabilis , Fusobacterium In the case of nucleatum , it was confirmed that Examples 1 to 4 of the bee venom purified product showed a large inhibitory effect and thus the antibacterial effect was excellent.
실험 결과는 하기 표 1에 나타내었다.The experimental results are shown in Table 1 below.
+++ : 저지환 3mm 이상 +++: Less than 3mm
++ : 저지환 2mm 내지 3mm++: low refracting angle 2 mm to 3 mm
+ : 저지환 1mm 내지 2mm+: 1 mm to 2 mm
- : 저지환 1mm 미만
-: Less than 1mm in diameter
실험예Experimental Example 4: 항진균효과 시험( 4: Antifungal effect test ( AgarAgar diffusiondiffusion assayassay ))
비교예 1~8 및 실시예 1~4의 항진균 효과를 칸디다성 질염의 지표 균주인 Candiida albicans를 사용하였다. The antifungal effect of Comparative Examples 1 to 8 and Examples 1 to 4 was used as an indicator strain of Candida albicans , Candiida albicans .
사용한 균주는 배지에 배양하여 활성을 높인 다음, 실험에 사용하였다. 페트리디쉬에 agar 배지를 넣고 굳힌 다음, 시험 균주를 spreading 방법으로 고르게 펴서 도말한 후 paper disc를 배지 위에 놓고 그 위에 일정 농도의 봉독, 질세정제, 겔제, 에어로졸제를 종류별로 첨가한 다음 인큐베이터에서 25℃, 5일간, 호기성 조건에서 배양하여 생육 저지환 생성 여부를 확인하여 항진균 효과를 검증하였다.The strains used were cultured in medium to increase activity and then used in the experiment. After the agar medium was added to the petri dish and hardened, the test strain was spread out by spreading method. The paper disc was placed on the medium, and the bee venom, the vaginal detergent, the gel agent and the aerosol agent were added thereto on the paper disc. Day for 5 days under aerobic conditions to confirm the generation of inhibition of growth.
실험 결과는 하기 표 2에 나타내었다.The experimental results are shown in Table 2 below.
+++ : 저지환 3mm 이상 +++: Less than 3mm
++ : 저지환 2mm 내지 3mm++: low refracting angle 2 mm to 3 mm
+ : 저지환 1mm 내지 2mm+: 1 mm to 2 mm
- : 저지환 1mm 미만
-: Less than 1mm in diameter
실험예Experimental Example 5: 항균 효과 시험( 5: Antibacterial effect test ( growthgrowth inhibitioninhibition testtest ))
비교예 1~8 및 실시예 1~4의 항균 효과를 검증하고자 액체 배지를 시험관에 넣고 희석한 후 일정한 시험 균주를 접종하고(105~106 CFU/㎖) 인큐베이터에서 30~37 ℃, 18시간 혐기성 조건 하에서 배양한 후 각 시험관의 탁도를 관찰하여 항균 효과를 확인하였다. In order to verify the antibacterial effects of Comparative Examples 1 to 8 and Examples 1 to 4, the liquid medium was diluted and then inoculated with a test strain (10 5 to 10 6 CFU / ml) in an incubator at 30 to 37 ° C and 18 After incubation under the anaerobic conditions, the turbidity of each test tube was observed to confirm the antimicrobial effect.
항균작용이 없는 경우 탁도가 많이 나타나게 되며, 항균 작용이 있을 경우 탁도가 없는 상태가 된다. 사용한 시험 균주는 통성혐기성 균인 Escherichia coli(그람음성), Staphylococcus aureus(그람양성), Staphylococcus epidermids(그람양성), Enterobacter aerogenes(그람음성), Klebsiella pneumoniae(그람음성) 사용하였고, 혐기성균인 여성의 질에서 분리한 Proteus mirabilis(그람음성), Fusobacterium nucleatum (그람음성)을 사용하였다.If there is no antimicrobial action, turbidity will be high. If there is antibacterial action, there will be no turbidity. The test strains used were Escherichia coli (gram negative) , Staphylococcus aureus (gram positive) , Staphylococcus epidermids (gram positive), Enterobacter aerogenes (gram negative) , Klebsiella pneumoniae (gram negative) Proteus was isolated from the vagina of anaerobic bacteria mirabilis (gram negative), Fusobacterium nucleatum (Gram negative) was used.
실험에 사용된 검체 중 비교예 1~8 및 실시예 1~4의 경우에는 정제수에 10배수 희석하여 검체로 하였다. 시험 시에는 각 20 ㎕를 취하여 시험 균주가 접종된 시험관에 넣었으며, 인큐베이터에 배양한 다음 탁도는 UV/Vis spectrophotometer를 사용하여 파장 600 ㎚에서 흡광도를 측정하였다.Among the samples used in the experiments, in the case of Comparative Examples 1 to 8 and Examples 1 to 4, a specimen was diluted 10-fold with purified water. At the time of the test, 20 ㎕ of each strain was placed in a test tube inoculated with the test strain. After culturing in an incubator, the turbidity was measured at a wavelength of 600 nm using a UV / Vis spectrophotometer.
실험 결과는 하기 표 3에 나타내었다.The experimental results are shown in Table 3 below.
+++ : 흡광도 0.04 미만 항균력 매우 우수 +++: Absorbance Less than 0.04 Antimicrobial power Very good
++-: 흡광도 0.05 ~ 0.04 항균력 약간 우수++ -: absorbance 0.05 ~ 0.04 slightly better antimicrobial activity
++ : 흡광도 0.05 ~ 0.20 항균력 우수 ++: Absorbance 0.05 ~ 0.20 Good antimicrobial activity
+ : 흡광도 0.20 ~ 0.30 항균력 보통 +: Absorbance 0.20 ~ 0.30 Antimicrobial power Normal
- : 흡광도 0.30 이상 항균력 없음 -: Absorbance 0.30 or more No antibacterial activity
상기 표 3의 실험결과, 투석 후에 투석 전 보다 더 우수한 항균력을 확인하였다.
As a result of the experiment shown in Table 3, a better antibacterial activity was confirmed after dialysis than before dialysis.
실험예Experimental Example 6: 항진균 효과 시험 ( 6: Antifungal effect test ( growthgrowth inhibitioninhibition testtest ))
비교예 1~8 및 실시예 1~4의 항진균 효과를 검증하고자 액체 배지를 시험관에 넣고 희석한 후 일정한 시험 균주를 접종하고(105~106 CFU/㎖) 인큐베이터에서 30~37 ℃, 18시간 혐기성 조건하에서 배양한 후 각 시험관의 탁도를 관찰하여 항균 효과를 확인하였다. 항균작용이 없는 경우 탁도가 많이 나타나게 되며, 항균작용이 있을 경우 탁도가 없는 상태가 된다. 사용한 시험 균주는 칸디다성 질염의 지표 균주인 Candiida albicans를 사용하였다. In order to verify the antifungal effects of Comparative Examples 1 to 8 and Examples 1 to 4, the liquid medium was diluted and then inoculated with a test strain (10 5 to 10 6 CFU / ml) in an incubator at 30 to 37 ° C and 18 After incubation under the anaerobic conditions, the turbidity of each test tube was observed to confirm the antimicrobial effect. If there is no antimicrobial action, turbidity will be high. If there is antibacterial action, there will be no turbidity. The test strains used were Candiida , an indicator strain of Candida albicans albicans were used.
실험에 사용된 검체 중 봉독의 경우 정제수에 용해시켜 표 2의 봉독 농도로 하였으며, 실시예 1, 비교예 1의 경우에는 정제수에 10배수 희석하여 검체로 하였다. 시험 시에는 각 20 ㎕를 취하여 시험 균주가 접종된 시험관에 넣었으며, 인큐베이터에 배양한 다음 탁도는 UV/Vis 분광광도계를 사용하여 파장 600 ㎚에서 흡광도를 측정하였다.In the case of bee venom in the experiment, the bee venom concentration in Table 2 was dissolved by dissolving in purified water. In the case of Example 1 and Comparative Example 1, a sample was diluted 10-fold with purified water. At the time of the test, each 20 μl was put into a test tube inoculated with the test strain. After culturing in an incubator, the turbidity was measured at a wavelength of 600 nm using a UV / Vis spectrophotometer.
실험결과는 하기 표 4에 나타내었다.The experimental results are shown in Table 4 below.
+++ : 흡광도 0.04 미만 항균력 매우 우수 +++: Absorbance Less than 0.04 Antimicrobial power Very good
++-: 흡광도 0.05 ~ 0.04 항균력 약간 우수++ -: absorbance 0.05 ~ 0.04 slightly better antimicrobial activity
++ : 흡광도 0.05 ~ 0.20 항균력 우수 ++: Absorbance 0.05 ~ 0.20 Good antimicrobial activity
+ : 흡광도 0.20 ~ 0.30 항균력 보통 +: Absorbance 0.20 ~ 0.30 Antimicrobial power Normal
- : 흡광도 0.30 이상 항균력 없음 -: Absorbance 0.30 or more No antibacterial activity
상기 표 4의 실험결과, 투석 후에 투석 전 보다 더 우수한 항균력을 확인하였다.As a result of the experiment shown in Table 4, a better antibacterial activity was confirmed after dialysis than before dialysis.
Claims (18)
A composition for preventing and treating vaginitis, comprising as an active ingredient a bee venom purified product containing phospholipase, melitin and apamin and histamine removed.
상기 질염은 세균성 질염(bacterial vaginosis), 칸디다성 질염(Candida vaginitis), 트리코모나스 질염(Trichomonas vaginitis) 또는 위축성 질염(Atrophic vaginitis)인 질염 예방 및 치료용 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the vaginitis is bacterial vaginosis, Candida vaginitis, Trichomonas vaginitis, or atrophic vaginitis.
상기 포스포리파제, 멜리틴 및 아파민이 포함되고 히스타민이 제거된 봉독 정제물은 전체 조성물 중량에 대하여 0.0001 내지 10중량%를 포함하는 질염 예방 및 치료용 조성물.
The method according to claim 1,
A composition for preventing and treating vaginitis comprising the phospholipase, melitin and apamin and containing histidine-removed bee venom purified product in an amount of 0.0001 to 10% by weight based on the total weight of the composition.
상기 포스포리파제, 멜리틴 및 아파민이 포함되고 히스타민이 제거된 봉독 정제물은 봉독을 투석으로 정제한 것인 질염 예방 및 치료용 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the bee venom purified product containing phospholipase, melitin and apamin and histamine removed is purified by bee venom by dialysis.
상기 포스포리파제, 멜리틴 및 아파민이 포함되고 히스타민이 제거된 봉독 정제물은 꿀벌로부터 채취하여 건조한 봉독을 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매로 녹인 후 여과 및 불순물을 제거하고 동결 건조하여 수득하는 제 1단계; 상기 제 1단계의 봉독을 증류수에 용해시켜 봉독 용해물을 얻는 제 2단계; 상기 봉독 용해물을 단백질 투석막을 이용한 투석을 실시한 후에 수득한 투석막 내액을 취하여 동결 건조하는 제 3단계 공정을 통하여 수득된 것인 질염 예방 및 치료용 조성물.
The method according to claim 1,
The bee venom purified product containing phospholipase, melitin and apamin and histamine removed is dissolved in water, a lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms or a mixed solvent thereof, which is collected from bees and dried, and the filtrate and impurities are removed A first step of obtaining by lyophilization; A second step of dissolving the bee venom of the first step in distilled water to obtain a bee venom solu- tion; And a third step of lyophilizing the inner membrane of the dialysis membrane obtained after dialyzing the bee venom melt with a protein dialysis membrane.
A gel for prevention and treatment of vaginitis comprising as an active ingredient a bee venom purified product containing phospholipase, melitin and apamin and histamine removed.
상기 포스포리파제, 멜리틴 및 아파민이 포함되고 히스타민이 제거된 봉독 정제물은 봉독을 투석으로 정제한 것인 질염 예방 및 치료용 겔제.
The method according to claim 6,
Wherein the bee venom purified product containing phospholipase, melitin and apamin and histamine-free is purified by dialysis against bee venom.
상기 포스포리파제, 멜리틴 및 아파민이 포함되고 히스타민이 제거된 봉독 정제물은 꿀벌로부터 채취하여 건조한 봉독을 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매로 녹인 후 여과 및 불순물을 제거하고 동결 건조하여 수득하는 제 1단계; 상기 제 1단계의 봉독을 증류수에 용해시켜 봉독 용해물을 얻는 제 2단계; 상기 봉독 용해물을 단백질 투석막을 이용한 투석을 실시한 후에 수득한 투석막 내액을 취하여 동결 건조하는 제 3단계 공정을 통하여 수득된 것인 질염 예방 및 치료용 겔제.
The method according to claim 6,
The bee venom purified product containing phospholipase, melitin and apamin and histamine removed is dissolved in water, a lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms or a mixed solvent thereof, which is collected from bees and dried, and the filtrate and impurities are removed A first step of obtaining by lyophilization; A second step of dissolving the bee venom of the first step in distilled water to obtain a bee venom solu- tion; And a third step of lyophilizing the inner membrane of the dialysis membrane obtained by dialyzing the bee venom solution with a protein dialysis membrane.
A suppository for the prevention and treatment of vaginitis comprising as an active ingredient a bee venom purified product containing phospholipase, melitin and apamin and histamine removed.
상기 포스포리파제, 멜리틴 및 아파민이 포함되고 히스타민이 제거된 봉독 정제물은 봉독을 투석으로 정제한 것인 질염 예방 및 치료용 좌제.
10. The method of claim 9,
The bee venom purified product containing the phospholipase, melitin and apamin and histamine removed is purified by beeodol dialysis.
상기 포스포리파제, 멜리틴 및 아파민이 포함되고 히스타민이 제거된 봉독 정제물은 꿀벌로부터 채취하여 건조한 봉독을 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매로 녹인 후 여과 및 불순물을 제거하고 동결 건조하여 수득하는 제 1단계; 상기 제 1단계의 봉독을 증류수에 용해시켜 봉독 용해물을 얻는 제 2단계; 상기 봉독 용해물을 단백질 투석막을 이용한 투석을 실시한 후에 수득한 투석막 내액을 취하여 동결 건조하는 제 3단계 공정을 통하여 수득된 것인 질염 예방 및 치료용 좌제.
10. The method of claim 9,
The bee venom purified product containing phospholipase, melitin and apamin and histamine removed is dissolved in water, a lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms or a mixed solvent thereof, which is collected from bees and dried, and the filtrate and impurities are removed A first step of obtaining by lyophilization; A second step of dissolving the bee venom of the first step in distilled water to obtain a bee venom solu- tion; A supernatant for prevention and treatment of vaginitis, which is obtained through a third step of lyophilizing the inner membrane of the dialysis membrane obtained after dialyzing the bee venom solution with a protein dialysis membrane.
An aerosol preparation for prevention and treatment of vaginitis comprising as an active ingredient a bee venom purified product containing phospholipase, melitin and apamin and histamine removed.
상기 포스포리파제, 멜리틴 및 아파민이 포함되고 히스타민이 제거된 봉독 정제물은 봉독을 투석으로 정제한 것인 질염 예방 및 치료용 에어로졸제.
13. The method of claim 12,
Wherein the bee venom purified product containing phospholipase, melitin and apamin and histamine-free is purified by dialysis against bee venom.
상기 포스포리파제, 멜리틴 및 아파민이 포함되고 히스타민이 제거된 봉독 정제물은 꿀벌로부터 채취하여 건조한 봉독을 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매로 녹인 후 여과 및 불순물을 제거하고 동결 건조하여 수득하는 제 1단계; 상기 제 1단계의 봉독을 증류수에 용해시켜 봉독 용해물을 얻는 제 2단계; 상기 봉독 용해물을 단백질 투석막을 이용한 투석을 실시한 후에 수득한 투석막 내액을 취하여 동결 건조하는 제 3단계 공정을 통하여 수득된 것인 질염 예방 및 치료용 에어로졸제.
13. The method of claim 12,
The bee venom purified product containing phospholipase, melitin and apamin and histamine removed is dissolved in water, a lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms or a mixed solvent thereof, which is collected from bees and dried, and the filtrate and impurities are removed A first step of obtaining by lyophilization; A second step of dissolving the bee venom of the first step in distilled water to obtain a bee venom solu- tion; The present invention relates to an aerosol formulation for preventing and treating vaginitis, which is obtained through a third step of lyophilizing the inner membrane of a dialysis membrane obtained after dialyzing the beesoluble solution with a protein dialysis membrane.
A vaginal detergent comprising as an active ingredient a bee venom tablet containing phospholipase, melitin and apamin and histamine removed.
상기 포스포리파제, 멜리틴 및 아파민이 포함되고 히스타민이 제거된 봉독 정제물은 봉독을 투석으로 정제한 것인 질 세정제.
16. The method of claim 15,
Wherein the bee venom purified product containing the phospholipase, melitin and apamin and histamine removed has been purified by dialysis.
상기 포스포리파제, 멜리틴 및 아파민이 포함되고 히스타민이 제거된 봉독 정제물은 꿀벌로부터 채취하여 건조한 봉독을 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매로 녹인 후 여과 및 불순물을 제거하고 동결 건조하여 수득하는 제 1단계; 상기 제 1단계의 봉독을 증류수에 용해시켜 봉독 용해물을 얻는 제 2단계; 상기 봉독 용해물을 단백질 투석막을 이용한 투석을 실시한 후에 수득한 투석막 내액을 취하여 동결 건조하는 제 3단계 공정을 통하여 수득된 것인 질 세정제.
16. The method of claim 15,
The bee venom purified product containing phospholipase, melitin and apamin and histamine removed is dissolved in water, a lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms or a mixed solvent thereof, which is collected from bees and dried, and the filtrate and impurities are removed A first step of obtaining by lyophilization; A second step of dissolving the bee venom of the first step in distilled water to obtain a bee venom solu- tion; And a third step of lyophilizing the inner membrane of the dialysis membrane obtained after dialyzing the bee venom solution with a protein dialysis membrane.
스프레이형, 고형, 액상형, 겔형의 비누, 폼, 또는 오일 제형인 질 세정제.
16. The method of claim 15,
A vaginal detergent that is a spray, solid, liquid, gel soap, foam, or oil formulation.
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|---|---|---|---|---|
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Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 『여성 청결제에 대한 인식과 봉독의 유효성 평가』, 중앙대학교 의약식품대학원 석사학위 논문(2013년2월)* |
| Effect of bee venom on the growth of Trichomonas vaginalis, 2013년 한국실험동물학회 동계심포지엄, 95 페이지(2013년2월)* |
| Journal of Pharmacopuncture, Vol. 13(3), pp. 103-108(2010년9월)* |
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| KR102373422B1 (en) * | 2021-11-29 | 2022-03-10 | 성현주 | Composition for vaginal cleaning including functional peptides |
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