KR101587608B1 - Composition for inhibiting growth of body hair comprising piperin as an effective ingredient - Google Patents
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Abstract
본 발명은 피페린(Piperin)을 유효성분으로 포함하는 체모성장 억제용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 조성물 총 중량 대비 피페린 0.0005 내지 5 중량%를 포함하는 체모성장 억제용 화장료 또는 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 조성물은 TGF-β1의 프로모터를 활성화시키고 TGF-β1의 발현을 증가시킴으로써 외모근초세포의 증식을 억제하여 체모의 성장을 효과적으로 억제한다. 본 발명의 조성물은 독성이 없어 인체에 적용하여도 부작용이 없으며, 국소적 부위의 털을 제거하거나 감소시키기에 유용하다. The present invention relates to a composition for inhibiting hair growth comprising piperine as an active ingredient and more particularly to a cosmetic composition or pharmaceutical composition for inhibiting hair growth comprising 0.0005 to 5 wt% . The composition of the present invention activates the promoter of TGF-beta 1 and increases the expression of TGF-beta 1, thereby effectively suppressing the growth of hair follicles by inhibiting the proliferation of the appearance root cultured cells. The composition of the present invention is not toxic and has no side effects even when it is applied to a human body, and is useful for removing or reducing hairs in a local area.
Description
본 발명은 피페린을 유효성분으로 포함하는 체모 성장 억제용 조성물에 관한 것으로서, 구체적으로는 피페린을 유효성분으로 포함하는 체모성장 억제용 화장료 조성물 및 체모성장 억제용 약학적 조성물에 관한 것이다.TECHNICAL FIELD The present invention relates to a composition for inhibiting hair growth comprising piperine as an active ingredient, and more particularly, to a cosmetic composition for inhibiting hair growth and a pharmaceutical composition for inhibiting hair growth comprising piperine as an active ingredient.
사람의 모발은 약 10만-15만개 정도이며, 각각의 모발은 서로 다른 성장주기를 가진다. 모발성장주기는 3단계로 구성되는데, 모발이 가장 활발하게 성장하는 성장기(anagen stage), 모발의 퇴화가 시작되는 퇴화기(catagen stage) 및 모발의 성장이 멈추거나 휴식에 접어드는 휴지기(telogen stage)로 분류된다.Human hair has about 100,000 to 150,000 hairs, and each hair has a different growth period. The hair growth cycle consists of three stages: the anagen stage where hair grows most actively, the catagen stage where hair starts to degenerate, and the telogen stage where hair growth stops or rests. .
모낭의 성장과 탈락에는 남성호르몬이 매우 중요하게 작용하고 있는데 남성호르몬에 의해 모낭에서 조절되는 인자들 중, 형질전환성장인자-β(Transforming growth factor; 이하 TGF-β)는 모낭성장 억제와 모발주기 중 퇴행기의 유도에 중요한 역할을 한다(Tsuji Y, Denda S, Soma T, Raftery L, Momoi T, Hibino T, A potential suppressor of TGF-beta delays catagen progression in hair follicles, J Investig Dermatol Symp Proc, 2003:8(1):65-68). 즉, TGF-β는 남성호르몬에 의해 모낭의 모유두세포에서 발현되어 모낭의 기질세포와 외모근초 각질세포의 아폽토시스를 일으키고 성장기의 모낭을 퇴행기로 유발함으로써, 휴지기 모낭이 증가하며 성장기 모낭이 퇴행기 모낭으로 바뀌게 되어 쉽게 빠지며 가늘고 짧은 모발이 생성된다(이영주, 이주영, 남성의 안드로겐성 탈모자의 임상적 진단과 관리, 한국미용학회지, 2007:13(2): 799-810).Among the factors regulated by hair follicles in the hair follicle, transforming growth factor-β (TGF-β) inhibits hair follicle growth and hair follicle growth 2003). It has been shown that TGF-beta is a potent inhibitor of TGF-beta, and that it is involved in the induction of metastasis (Tsuji Y, Denda S, Soma T, Raftery L, Momoi T, Hibino T. A potential suppressor of TGF-beta delays in hair follicles, J Investig Dermatol Symp Proc 2003: 8 (1): 65-68). In other words, TGF-β is expressed in the dermal papilla cells of the hair follicle by the male hormone, causing the apoptosis of the hair follicle stromal cells and the follicular keratinocyte and inducing the growing hair follicle as a regressor, whereby the dormant hair follicle is increased, (Lee, Young-Joo, Lee, Joo-young, Clinical diagnosis and management of male androgenetic dehumanizer, Journal of Korean Society of Hairdressing, 2007: 13 (2): 799-810).
두발이나 체모는 신체의 기관을 외부의 자극으로부터 보호하는 신체의 중요한 방어 수단의 하나로서 기능하여 오고 있었으나, 지금은 두발을 제외한 체모는 방어수단으로서의 기능이나 역할이 점차 무의미해지고 있다.Hair or body hair has been functioning as one of the important defenses of the body that protects the organs of the body from external stimuli. Now, except for the hair, the function and role as the defensive means are becoming increasingly irrelevant.
특히, 심미적인 관점에서 살펴볼 때 여성의 경우 체모는 반대로 없는 편이 바람직하게 여겨지고 있다. 이에 따라 체모를 제거하기 위해 여러 가지 방법을 이용하고 있다. 체모를 제거하는 방법에는 전기면도기, 제모기, 초음파, 레이저 등을 이용한 기계적 수단을 이용하여 체모를 뽑거나 잘라내어 제거하거나, 접착테이프 등의 물리적 수단을 이용하는 방법, 그리고 제모크림, 왁스, 젤 등의 화학적인 수단을 이용한 제모방법 등 여러 가지가 있으며, 특정의 단백 분해 효소를 함유하는 제재가 영구 탈모제로서 사용되고 있다.In particular, when viewed from an aesthetic point of view, it is desirable for women to have no hair on the contrary. Accordingly, various methods are used to remove hairs. Examples of methods for removing hairs include a method in which hairs are removed or cut off by mechanical means using an electric razor, an epilator, an ultrasonic wave, or a laser, a method using physical means such as an adhesive tape, There are various methods such as depilatory methods, and a material containing a specific protease is used as a permanent depilator.
하지만 기계적 수단이나 물리적 수단을 이용하여 체모를 잡아 뽑는 탈모 방법은 통증을 수반하는 폐해가 있으며, 기존의 제모 크림이나 왁스에 의한 화학적인 수단은 통증을 수반하면서도 화학 성분에 의한 피부 손상의 우려가 있을 수 있다. 또한, 종래의 방법들은 발모의 억제라는 점에서 아직 불충분하거나, 단기간으로 효능을 가져, 체모의 성장에 따라 일정 기간 경과 후에는 다시 체모 제거 처리를 행해야 하는 단점이 있다. However, hair removal methods using mechanical means or physical means to pull hair removal have painful disadvantages, and chemical means using conventional hair removal cream or wax may cause skin damage due to chemical components . In addition, the conventional methods are still insufficient in terms of suppression of hair growth, have an effect in a short period of time, and have a disadvantage in that hair removal treatment must be performed again after a certain period of time has elapsed due to hair growth.
따라서 본 발명이 해결하고자 하는 과제는 전술한 문제점을 해결하며, 종래의 물리적 방법 또는 화학적 방법을 통한 체모의 제거가 아닌, 인체에 안전하면서도 체모의 성장을 효과적으로 억제할 수 있는 체모 성장 억제용 조성물 및 체모 성장 억제 방법을 제공하는 것이다.SUMMARY OF THE INVENTION Accordingly, the present invention has been made to solve the above-mentioned problems, and it is an object of the present invention to provide a composition for inhibiting hair growth, which is safe for human body but can effectively inhibit hair growth, And to provide a method for inhibiting hair growth.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 피페린(Piperin)을 유효성분으로 포함하는 체모성장 억제용 화장료 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명은 피페린을 유효성분으로 포함하는 체모성장 억제용 약학적 조성물을 제공한다.In order to solve the above problems, the present invention provides a cosmetic composition for inhibiting hair growth comprising piperine as an active ingredient. The present invention also provides a pharmaceutical composition for inhibiting hair growth comprising piperine as an active ingredient.
상기 체모성장 억제용 화장료 또는 약학적 조성물에서 상기 피페린은 하기 화학식 1로 표시되는 것이 사용될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.In the cosmetic or pharmaceutical composition for inhibiting hair growth, the piperine may be represented by the following formula (1), but is not limited thereto.
본 발명자들은 종래의 화학적, 물리적 수단에 의한 제모제의 문제점을 해결하기 위하여 인체에 안전하면서도 체모 성장을 효과적으로 억제할 수 있는 체모성장 억제용 조성물을 제공하고자 연구하였다. 그 결과, 피페린은 인간 TGF-β1(Transforming growth factor beta 1) 유전자의 프로모터를 활성화시키며, 인간 TGF-β1 유전자의 발현을 증가시킴으로써 외모근초세포의 증식을 억제하여 체모성장을 효과적으로 억제할 수 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.The present inventors have researched to provide a composition for inhibiting hair growth which can safely protect the human body and effectively inhibit hair growth in order to solve the problems of the hair removal agent by the conventional chemical and physical means. As a result, piperine activates the promoter of human TGF-β1 (Transforming growth factor beta 1) gene and inhibits proliferation of appearance root cells by increasing the expression of human TGF-β1 gene, thereby effectively inhibiting hair growth To complete the present invention.
이하에서 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail.
본 발명의 일 실시예에서, Human Hair Outer Root Sheath Cells(SCIENCELL, 미국)에 피페린을 처리 후 트립판-블루(시그마, 미국)로 세포를 염색한 다음, 세포 수를 측정한 결과 피페린이 세포의 증식을 억제함을 확인할 수 있었다(실시예 1).In one embodiment of the present invention, human hair outer root sheath cells (SCIENCELL, USA) were treated with piperine and then stained with trypan blue (Sigma, USA) (Example 1). ≪ tb > < TABLE >
또한, 본 발명의 다른 일 실시예에서, 인간 TGF-β1의 프로모터와 루시퍼레이즈를 결합한 벡터를 리포펙타민을 이용하여 형질전환된 세포에 피페린을 처리 후 루시퍼레이즈 어세이를 실시한 결과 피페린이 인간 TGF-β1의 프로모터를 활성화시킴을 확인할 수 있었다(실시예 2). Further, in another embodiment of the present invention, when a vector obtained by combining a promoter of human TGF-? 1 with luciferase is subjected to luciferase assay after treating the cells transformed with lipofectamine, It was confirmed that the promoter of TGF-? 1 was activated (Example 2).
또한, 본 발명의 다른 일 실시예에서, 인간 TGF-β1을 발현한다고 알려진 Follicle Dermal Papilla(Promocell, 독일)에 피페린을 처리 후 역전사 PCR(reverse transcription polymerase chain reaction, RT-PCR)을 이용해 상대발현을 비교한 결과 피페린이 인간 TGF-β1의 발현을 증가시킴을 확인할 수 있었다(실시예 3). 상기 인간 TGF-β1의 발현을 증가시킨다는 것은 바람직하게는 상기 인간 TGF-β1의 발현을 전사 수준에서 증가시키는 것을 의미한다.In another embodiment of the present invention, the expression of the relative expression (TGF-beta1) by treatment with piperidine in a Follicle Dermal Papilla (Promocell, Germany) , It was confirmed that piperidine increases the expression of human TGF-β1 (Example 3). Increasing the expression of human TGF- beta 1 preferably means increasing the expression of human TGF- beta 1 at the transcription level.
또한, 본 발명의 일 실시예에서 피페린을 외용연고 또는 크림 제형으로 제조하고, 이를 인간의 피부에 도포하였을 때 우수한 체모성장 억제 효과를 나타냄을 확인하였다(실시예 4 및 5).In addition, it has been confirmed that piperazine is manufactured into an external ointment or cream formulation in an embodiment of the present invention and exhibits excellent hair growth inhibitory effect when applied to human skin (Examples 4 and 5).
상기와 같은 본 발명의 실시예들을 볼 때, 본 발명의 피페린은 외모근초의 생성 및 발달을 감소시키는 효능이 있으므로 체모성장 억제제의 유효성분으로 유용하게 사용될 수 있다.In view of the above-described embodiments of the present invention, piperine of the present invention has an effect of reducing the appearance and development of root rot, so that it can be effectively used as an effective ingredient of a hair growth inhibitor.
상기 화장료 또는 약학적 조성물에 포함되는 상기 피페린의 함량은 조성물 총 중량 대비 0.0005 중량% 내지 5 중량% 포함될 수 있다. 상기 피페린이 조성물 총 중량 대비 0.0005 중량% 미만의 농도에서는 그 효과를 얻기 어려우며, 5 중량% 초과의 농도에서는 제형 안정성에 문제가 발생할 수 있다.The content of the piperine contained in the cosmetic composition or the pharmaceutical composition may be 0.0005% by weight to 5% by weight based on the total weight of the composition. If the concentration of the piperidine is less than 0.0005% by weight based on the total weight of the composition, the effect is difficult to obtain, and if the concentration exceeds 5% by weight, the formulation stability may be deteriorated.
상기 화장료 또는 약학적 조성물에 유효성분으로 포함되는 상기 피페린은 이와 동일한 효능을 갖는 범위 내에서 피페린 수화물, 피페린 유도체, 이의 용매화합물 또는 입체 이성질체 등을 포함할 수 있다. 상기 피페린은 화학적으로 합성하거나 직접 추출하여 사용할 수도 있고 시판되는 것을 구입하여 사용할 수도 있다. 상기 피페린을 천연 물질로부터 분리하는 경우에는 상기 피페린을 포함하는 한, 천연물의 추출물 또는 이의 분획물을 모두 포함한다.The piperine contained in the cosmetic composition or the pharmaceutical composition as an active ingredient may contain piperine hydrate, piperine derivative, a solvent or a stereoisomer thereof, and the like within a range having the same efficacy. The piperine may be chemically synthesized or extracted directly, or a commercially available piperidine may be purchased and used. When the piperine is separated from a natural substance, the extract includes a natural product or a fraction thereof, as long as it contains the piperine.
본 발명에서 사용하는 용어 "체모"는, 신체에 분포하는 모발(hair)을 총칭한다. 상기 체모의 분포 부위는 특별히 제한되지 아니하나, 본 발명의 목적상 특히 겨드랑이, 팔, 다리, 안면 등 체모의 발생, 성장 또는 과다 분포로 미관을 해치거나 생활에 불편을 초래하는 신체 부위에 분포하는 모발을 의미할 수 있다.The term "hairs" used in the present invention refers collectively to hairs distributed in the body. The distribution of the hairs is not particularly limited. However, for the purpose of the present invention, it is preferable that the hairs are distributed in a body part which causes harm to aesthetics due to occurrence, growth, or excessive distribution of hairs such as armpits, arms, It can mean hair.
본 발명에서 사용하는 용어 "체모성장 억제"는 체모의 발생 또는 성장을 억제하거나, 체모가 성장하는 속도를 늦추는 것뿐만 아니라, 체모의 굵기 또는 길이를 감소시키는 것을 포함한다.The term "hair growth inhibition" used in the present invention includes not only suppressing hair growth or growth, slowing hair growth rate, but also reducing hair thickness or length.
본 발명의 피페린은 바람직하게는 체모성장 억제용 피부 외용제에 첨가될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 체모성장 억제용 피부 외용제는 화장료 조성물 또는 약학적 조성물일 수 있다. 체모성장 억제용 피부 외용제를 화장품 또는 의약으로 제형화할 경우, 활성 성분에 대한 담체로서 작용하는 피부적으로 허용가능한 공지의 부형제를 포함할 수 있다. 의약으로의 제형화시에는 Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 내용을 참조할 수 있으며, 화장품으로 제형화시에는 International cosmetic ingredient dictionary, 6th ed., The cosmetic, Toiletry and Fragrance Association, Inc., Washington, 1995에 개시되어 있는 내용을 참조할 수 있다. 상기 문헌들은 본 명세서의 일부로서 포함된다.The piperine of the present invention may preferably be added to an external preparation for skin hair growth inhibition, but is not limited thereto. The external skin preparation for hair growth inhibition may be a cosmetic composition or a pharmaceutical composition. When formulating a skin external preparation for hair growth inhibition with a cosmetic or a medicinal agent, it may contain known dermatologically acceptable excipients which act as a carrier for the active ingredient. When formulated as a medicament, the contents disclosed in Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA can be referred to. When formulating into cosmetics, International cosmetic ingredient dictionary, 6th ed., The cosmetic, Toiletry and Fragrance Association , Inc., Washington, 1995, which is incorporated herein by reference in its entirety. Which are incorporated herein by reference.
구체적으로, 상기 화장료 또는 약학적 조성물은 피부외용제로서 액상, 유상, 크림상, 연고, 스틱상, 팩, 파스타제, 산제, 젤 또는 스프레이 등의 제형으로 제조될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니며, 외피에 적용할 수 있는 어떠한 제형으로도 이용 가능하다. 바람직하게는, 본 발명의 목적상 상기 화장료 또는 약학적 조성물은 외용 연고, 로션 등과 같은 반고형 제제로 제조될 수 있다.Specifically, the cosmetic or pharmaceutical composition may be formulated into a form such as a liquid, oil, cream, ointment, stick, pack, pasta, powder, gel or spray as an external preparation for skin, And the like. Preferably, for the purposes of the present invention, the cosmetic or pharmaceutical composition may be formulated as a semi-solid preparation, such as an external ointment, lotion, and the like.
피부외용제로서 상기 화장료 또는 약학적 조성물은 사용 및 취급이 용이하도록 화장학적 또는 약학적으로 허용가능한 담체, 희석제, 보조제, 착색제, 안정화제, 착향제, 계면발현제, 유분, 보습제, 알코올, 점증제, 산화방지제, pH 조절제 또는 자외선 차단제 등을 추가로 포함할 수 있다.As the external preparation for skin, the cosmetic composition or the pharmaceutical composition may contain a cosmetically or pharmaceutically acceptable carrier, diluent, adjuvant, colorant, stabilizer, flavor, interfacial agent, oil, moisturizer, alcohol, , An antioxidant, a pH adjuster or an ultraviolet screening agent.
또한, 본 발명의 상기 약학적 조성물은 경구 투여 또는 비경구 투여에 적합하도록 다양한 제형으로 제제화되어 사용될 수 있다.In addition, the pharmaceutical composition of the present invention may be formulated into various formulations suitable for oral administration or parenteral administration.
상기 약학적 조성물의 경구 투여용 제제는 트로키제(troches), 로젠지(lozenge), 정제, 수용성 현탁액, 유성 현탁액, 조제 분말, 과립, 에멀젼, 하드 캡슐, 소프트 캡슐, 시럽 또는 엘릭시르제 등으로 제조될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.Formulations for oral administration of the pharmaceutical compositions may be in the form of troches, lozenges, tablets, aqueous suspensions, oily suspensions, prepared powders, granules, emulsions, hard capsules, soft capsules, syrups or elixirs But is not limited thereto.
상기 약학적 조성물을 경구 투여용으로 제제화하기 위하여, 락토오스, 사카로오스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아밀로펙틴(Amylopectin), 셀룰로오스(Cellulose) 또는 젤라틴(Gelatin) 등과 같은 결합제; 디칼슘 포스페이트(Dicalcium phosphate) 등과 같은 부형제; 옥수수 전분 또는 고구마 전분 등과 같은 붕괴제; 스테아르산 마그네슘(Magnesium stearate), 스테아르산 칼슘(Calcium stearate), 스테아릴 푸마르산 나트륨(Sodium stearyl fumarate) 또는 폴리에틸렌 글리콜 왁스(Polyethylene glycol wax) 등과 같은 윤활유 등이 사용될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니며, 감미제, 방향제, 시럽제 등도 사용될 수 있다. 나아가 캡슐제의 경우에는 상기 언급한 물질 외에도 지방유와 같은 액체 담체 등이 추가로 사용될 수 있다.Binding agents such as lactose, saccharose, sorbitol, mannitol, starch, amylopectin, cellulose or gelatin to formulate the pharmaceutical composition for oral administration; Excipients such as dicalcium phosphate and the like; Disintegrating agents such as corn starch or sweet potato starch; Lubricants such as magnesium stearate, calcium stearate, sodium stearyl fumarate or polyethylene glycol wax may be used. However, it is not limited thereto, and sweeteners, Fragrances, syrups, and the like may also be used. Furthermore, in the case of capsules, in addition to the above-mentioned substances, liquid carriers such as fatty oils and the like may further be used.
상기 약학적 조성물의 비경구용 제제로는 주사액, 좌제, 호흡기 흡입용 분말, 스프레이용 에어로졸제, 연고, 도포용 파우더, 오일 또는 크림 등으로 제조될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.Examples of the parenteral preparation for the pharmaceutical composition include, but are not limited to, injections, suppositories, respiratory inhalation powders, aerosol preparations for spray, ointment, powder for application, oils or creams.
상기 약학적 조성물을 비경구 투여용으로 제제화하기 위하여, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결 건조 제제 또는 외용제 등이 사용될 수 있으며, 상기 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.In order to formulate the pharmaceutical composition for parenteral administration, a sterilized aqueous solution, a non-aqueous solvent, a suspension, an emulsion, a lyophilized preparation or a external preparation may be used. Examples of the non-aqueous solution and the suspension include propylene glycol, polyethylene glycol, Vegetable oils such as olive oil, injectable esters such as ethyl oleate, and the like can be used.
또한, 보다 구체적으로 상기 약학적 조성물을 주사액으로 제제화하는 경우, 본 발명의 상기 약학적 조성물을 안정제 또는 완충제와 함께 물에서 혼합하여 용액 또는 현탁액으로 제조하고 이를 앰플(ampoule) 또는 바이알(vial)의 단위 투여용으로 제제화할 수 있다. 또한, 본 발명의 상기 약학적 조성물을 에어로졸제로 제제화하는 경우, 수분산된 농축물 또는 습윤 분말이 분산되도록 추진제 등이 첨가제와 함께 배합될 수 있다.More specifically, when the pharmaceutical composition is formulated into an injection, the pharmaceutical composition of the present invention is mixed with a stabilizer or a buffer in water to prepare a solution or suspension, which is then mixed with an ampoule or a vial Unit dosage form. Further, when the pharmaceutical composition of the present invention is formulated into an aerosol formulation, a propellant or the like may be formulated together with the additive such that the water-dispersed concentrate or the wet powder is dispersed.
또한, 상기 약학적 조성물을 연고, 크림 등으로 제제화하는 경우에는, 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화 아연 등을 담체로 사용하여 제제화할 수 있다.When the pharmaceutical composition is formulated into an ointment, cream, or the like, it may be mixed with an animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tragacanth, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc, Can be used as a carrier.
본 발명의 상기 약학적 조성물의 투여 경로 및 투여 방식은 각각 독립적일 수 있으며, 그 방식에 있어 특별히 제한되지 아니하며, 목적하는 해당 부위에 상기 약학적 조성물이 도달할 수 있는 한 임의의 투여 경로 및 투여 방식에 따를 수 있다. 상기 약학적 조성물은 경구 투여 또는 비경구 투여 방식으로 투여할 수 있다. 본 발명의 상기 약학적 조성물은 바람직하게는 비경구 투여될 수 있으며, 보다 바람직하게는 피부에 도포하는 방식으로 투여될 수 있다.The route of administration and the mode of administration of the pharmaceutical composition of the present invention may be independent of each other and are not particularly limited in the method and may be arbitrarily administered and administered as long as the pharmaceutical composition can reach the desired site It is possible to follow the method. The pharmaceutical composition may be administered orally or parenterally. The pharmaceutical composition of the present invention may preferably be administered parenterally, and more preferably, it may be administered in a manner such that it is applied to the skin.
상기 비경구 투여 방법으로는, 상기 조성물을 질환 부위에 도포하거나 분무, 흡입하는 방법 등이 있으며, 근육 내 투여, 경피 투여 또는 피하 투여하는 방법 또한 이용할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.Examples of the parenteral administration method include a method of applying, spraying, or inhalation the composition to a diseased site, Intraperitoneal, intramuscular, transdermal or subcutaneous administration may also be used, but are not limited thereto.
본 발명의 약학 조성물의 바람직한 투여량은 대상자의 연령, 성별, 체중, 증상, 질병의 정도, 약물 형태, 투여 경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 약학 조성물은 0.01 내지 1000 mg/일로 투여될 수 있다. 투여는 하루에 한번 할 수도 있고, 수회 나누어 할 수도 있다. 또한, 그 투여량은 연령, 성별, 체중, 질병의 정도 또는 투여경로 등에 따라서 증감될 수 있다. 따라서 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.The preferred dosage of the pharmaceutical composition of the present invention varies depending on the age, sex, weight, symptom, degree of disease, drug form, administration route and period of time of the subject, but can be appropriately selected by those skilled in the art. However, for a desired effect, the pharmaceutical composition of the present invention may be administered at 0.01 to 1000 mg / day. The administration can be done once a day, or divided into several times. In addition, the dose may be increased or decreased according to age, sex, weight, degree of disease, administration route, or the like. Accordingly, the dosage is not limited in any way to the scope of the present invention.
본 발명은 피페린을 유효성분으로 포함하는 화장료 또는 약학적 조성물을 피부에 도포하는 것을 포함하는 체모성장 억제 방법을 제공한다. 또한, 본 발명은 피페린을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물을 경구 또는 비경구 투여하는 것을 포함하는 체모성장 억제 방법을 제공한다.The present invention provides a hair growth inhibition method comprising applying a cosmetic composition or a pharmaceutical composition containing piperine as an active ingredient to the skin. The present invention also provides a method for inhibiting hair growth comprising oral or parenteral administration of a pharmaceutical composition comprising piperine as an active ingredient.
또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 피페린을 유효성분으로 포함하는 TGF-β1 유전자 발현 촉진용 조성물을 제공한다.Also, the present invention provides a composition for promoting TGF-β1 gene expression comprising piperine represented by the above-mentioned formula (1) as an active ingredient.
본 발명에 따른 피페린을 유효성분으로 포함하는 조성물은 TGF-β1 프로모터의 활성화 및 TGF-β1의 생성을 촉진하며, 외모근초세포의 증식을 억제함으로써 체모의 성장을 효과적으로 억제할 수 있다. 본 발명의 조성물은 독성이 없어 인체에 적용하여도 부작용이 없으며, 국소적 부위의 털을 제거하거나 감소시키기에 유용하다. The composition comprising piperine according to the present invention as an active ingredient promotes the activation of the TGF-beta1 promoter and the production of TGF-beta1, and can effectively inhibit hair growth by inhibiting the proliferation of the appearance root cultured cells. The composition of the present invention is not toxic and has no side effects even when it is applied to a human body, and is useful for removing or reducing hairs in a local area.
도 1은 인간 TGF-β 프로모터 영역을 pGL3 벡터에 클로닝하여 재조합된 벡터를 보여주는 도면이다.
도 2는 모유두세포에 피페린을 처리 한 후 인간 TGF-β1의 상대적인 발현 변화를 역전사 PCR(RT-PCR)을 이용하여 측정한 그래프이다.1 is a diagram showing a recombinant vector obtained by cloning a human TGF-beta promoter region into a pGL3 vector.
FIG. 2 is a graph showing the relative expression of human TGF-β1 after treatment with phenylephrine in the dermal papilla using reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR).
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예 등을 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 하기 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 발명의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail to facilitate understanding of the present invention. However, the embodiments according to the present invention can be modified into various other forms, and the scope of the present invention should not be construed as being limited to the following embodiments. Embodiments of the invention are provided to more fully describe the present invention to those skilled in the art.
본 발명의 실험예들에서 사용된 피페린은 Xi'an Guanyu Bio-tech Co., Ltd(西安冠宇生物技術有限公司)에서 구입하여 사용하였다.
The piperine used in the experimental examples of the present invention was purchased from Xi'an Guanyu Bio-tech Co., Ltd.
실험예Experimental Example 1: 피페린의 1: of piperine 외모근초세포Apparent cells 증식 억제 효능 확인 Confirming the proliferation inhibiting effect
본 실시예에서는 피페린의 외모근초세포의 증식 억제 효능을 알아보기 위하여 Human Hair Outer Root Sheath Cells(SCIENCELL, 미국)에 피페린을 처리 후 트립판-블루(시그마, 미국)로 세포를 염색한 다음, 세포 수를 측정하여 세포분열의 변화를 관찰하였다.In order to examine the inhibitory effect of piperine on the proliferation inhibitory effect of phenylephrine, Piperin was treated with Human Hair Outer Root Sheath Cells (SCIENCELL, USA), and cells were stained with trypan blue (Sigma, USA) , And the number of cells was measured to observe changes in cell division.
먼저, 균일한 수의 세포를 96 well plate에 깔아준 뒤 안정화시킨 후 피페린을 20ppm이 되도록 처리한 후 3일 동안 추가배양 하였다. 이후 트립판-블루로 세포를 염색한 다음 세포 수를 측정하였다. DHT(dihydrotestosterone) 100nM을 처리하여 배양한 군을 양성 대조군으로 평가하였으며, 무처리 대비 피페린을 처리한 세포의 상대적인 세포 생존율을 아래와 같이 분석하여 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다. First, a uniform number of cells were plated on a 96-well plate, stabilized, treated with 20 ppm of piperidine, and further cultured for 3 days. The cells were then stained with trypan blue and the number of cells was measured. DHT (dihydrotestosterone) 100 nM was evaluated as a positive control. The relative cell viability of cells treated with piperine versus untreated was analyzed as follows. The results are shown in Table 1 below.
상대적인 세포 생존율 = (화합물 처리군)/(음성대조군) X 100Relative cell viability = (compound treated group) / (negative control group) X 100
(무처리)Negative control group
(No treatment)
(DHT 처리)Positive control group
(DHT treatment)
(Piperin)Piperine
(Piperine)
상기 표 1 에서와 같이, 음성 대조군 및 양성 대조군에 비해 피페린을 처리한 군에서 외모근초세포의 생존율이 감소하는 것을 알 수 있다.
As shown in Table 1, the survival rate of the appearance-rooted myocytes decreased in the group treated with piperine compared to the negative control group and the positive control group.
실험예Experimental Example 2: 2: 모유두세포에서의In dermal papilla cells 인간 human TGFTGF -β1의 프로모터 활성 조사-β1 promoter activity
인간 TGF-β1의 프로모터 활성 정도를 알아보기 위해서 리포터 벡터를 제조하였다. 이를 위해 우선 인간 게놈 DNA로부터 인간 TGF-β1의 프로모터 영역(-1,132 ~ +271)을 PCR을 이용하여 증폭하였다. 이 때 사용한 프라이머를 표 2에 나타내었다.A reporter vector was prepared to examine the degree of promoter activity of human TGF-? 1. For this purpose, the promoter region (-1,132 to +271) of human TGF-beta 1 was amplified from human genomic DNA using PCR. The primers used at this time are shown in Table 2.
증폭된 DNA를 HindШ과 SalI 제한효소를 이용하여 자르고 파이어 플라이 루시퍼레이즈를 발현하는 pGL3 벡터에 클로닝 하였다(도 1). 상기 제조된 플라즈미드 벡터와 레닐라 루시퍼레이즈(Renilla luciferase)를 항상 발현하는 플라즈미드가 40 : 1 의 비율로 들어있는 DNA 혼합물로 조합하여 프로모터 어세이에 사용하였다. 인체 유래의 모유두세포(Promocell, 독일)를 10% 우혈청(fetal bovin serum)을 포함한 DMEM 배지에서 18시간 배양한 후, 배양된 세포에 인간 TGF-β1의 프로모터와 루시퍼레이즈를 결합한 상기 벡터를 리포펙타민(lipofectamine)을 이용하여 형질전환(transfection)을 통해 세포 내로 주입하였다. The amplified DNA was cut with HindIII and SalI restriction enzymes and cloned into pGL3 vector expressing firefly luciferase (Fig. 1). The prepared plasmid vector and a plasmid always expressing Renilla luciferase were used in a promoter assay in combination with a DNA mixture in a ratio of 40: 1. Human dermal papilla cells (Promocell, Germany) were cultured in a DMEM medium containing 10% fetal bovine serum for 18 hours, and then the resulting vector, in which the promoter of human TGF-β1 and luciferase were combined with the cultured cells, And injected into cells via transfection using lipofectamine.
5시간 배양 후, 우혈청이 포함되어 있지 않은 DMEM 배지로 2회 세척하고, DMEM 배지에 피페린을 20ppm이 되도록 처리하여 18시간 배양하였다. 18시간 처리 후 세포를 회수하여 냉각된 인산완충용액(PBS)으로 세척하고, 세포 용해 완충액을 이용하여 세포를 용해한 후 원심분리기를 이용하여 상등액만 추출하여 루시퍼레이즈 어세이(Promega, 미국)를 실시한 후 퍼킨엘머 빅터3(Perkin Elmer Victor3)로 형광정도(luminescence)를 측정하고 분석하였다. 음성대조군은 무 처리군이며, 양성대조군은 DHT 100nM만 처리한 군이다. 증가율을 아래와 같이 분석, 그 결과를 표 3에 나타내었다.After 5 hours of incubation, the cells were washed twice with DMEM medium containing no serum, and treated with 20 ppm of piperidine in a DMEM medium, followed by incubation for 18 hours. After 18 hours of treatment, the cells were recovered, washed with cold phosphate buffer (PBS), and the cells were lysed using a cell lysis buffer. Then, only the supernatant was extracted using a centrifugal separator and subjected to luciferase assay (Promega, USA) Fluorescence luminescence was measured and analyzed with a Perkin Elmer Victor 3. The negative control group was untreated and the positive control group was treated with only 100 nM of DHT. The growth rate was analyzed as follows, and the results are shown in Table 3.
증가율(%) = (화합물 처리군)/(음성대조군) X 100Growth rate (%) = (Compound treated group) / (Negative control group) X 100
(무처리)Negative control group
(No treatment)
(DHT 처리)Positive control group
(DHT treatment)
(Piperin)Piperine
(Piperine)
상기 표 3에 나타나는 바와 같이, 본 발명의 일 실시예에 따른 피페린은 인간 TGF-β1의 프로모터를 활성화시킴을 알 수 있다. 해당 측정값은 파이어 플라이 루시퍼레이즈 수치를 레닐라 루시퍼레이즈 수치로 보정한 값이다.
As shown in Table 3, piperine according to an embodiment of the present invention activates the promoter of human TGF-? 1. The measured value is the value obtained by correcting the firefly luciferase value with the Renilla luciferase value.
실험예Experimental Example 3: 3: 모유두세포에서의In dermal papilla cells 인간 human TGFTGF -β1의 증가 조사 -β1 increase
본 실험예에서는 피페린의 모유두세포에서 인간 TGF-β1의 발현증가 효능을 알아보기 위하여 Human Hair Outer Root Sheath Cells(SCIENCELL, 미국)을 사용하였다. 균일한 수의 세포를 6-well plate에 깔고 안정화시킨 후 피페린을 처리하였다. 처리 후 48시간 배양하여 얻은 RNA를 cDNA로 합성 후 인간 TGF-β1의 상대적인 함량을 측정하였다. 인간 TGF-β1의 변화는 인간 게놈 DNA로부터 TGF-β1의 mRNA서열을 찾아 역전사 PCR(RT-PCR)을 이용해 측정하였다. 이때 사용한 프라이머를 하기 표 4에 나타내었다.In this experiment, Human Hair Outer Root Sheath Cells (SCIENCELL, USA) was used to evaluate the effect of increasing the expression of human TGF-β1 in the dermal papilla cells of piperine. A uniform number of cells were plated on a 6-well plate and treated with piperine. After culturing for 48 hours after the treatment, the RNA was synthesized with cDNA and the relative content of human TGF-? 1 was measured. The changes in human TGF-β1 were determined by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) in the presence of TGF-β1 mRNA sequences from human genomic DNA. The primers used at this time are shown in Table 4 below.
실험 결과, 피페린을 처리에 의해 모유두세포에서 인간 TGF-β1 상대적인 mRNA 양이 증가함이 확인되었다. 결과 분석은 Comparative CT(ΔΔCT) Experiment로 진행하였으며 internal control은 GAPDH를 사용하였고, 그 결과는 도 2에 나타내었다.
As a result of the experiment, it was confirmed that the amount of human TGF-β1 mRNA increased in the dermal papilla cells by treatment with piperine. The results were analyzed using the Comparative C T (ΔΔC T ) Experiment, and the internal control was performed using GAPDH. The results are shown in FIG.
피페린을 함유하는 피부 외용 연고의 제조Preparation of External Ointment Containing Piperine
하기 표 5의 조성으로, 피페린을 함유하는 피부 외용 연고(실시예 1) 및 피페린을 함유하지 않는 피부 외용 연고(비교예 1)를 제조하였다.Skin external ointment containing piperine (Example 1) and external skin ointment containing no piperine (Comparative Example 1) were prepared with the composition shown in Table 5 below.
피페린을 함유하는 크림의 제조Manufacture of cream containing piperine
하기 표 6의 조성으로, 피페린을 함유하는 크림(실시예 2) 및 피페린을 함유하지 않는 크림(비교예 2)을 제조하였다.Cream containing piperine (Example 2) and cream without piperine (Comparative Example 2) were prepared with the composition shown in Table 6 below.
실험예Experimental Example 4: 제모 효과 조사 4: Investigation of hair removal effect
상기 실시예 2 및 비교예 2의 크림에 대해서 건강한 25세에서 35세의 여성 20명을 대상으로 제모 효과를 다음과 같이 실시하였다. Twenty women aged 25 to 35 years old who were healthy to cream of Example 2 and Comparative Example 2 were subjected to the following hair removal effect.
피험자들은 왼쪽 다리에는 피페린이 없는 비교예 2의 크림을, 오른쪽 다리에는 피페린 0.2% 함유하는 실시예 2의 크림을 1일 2회 3개월간 도포하였다. 3개월 후 제모의 효과를 피험자의 설문 및 영상분석을 통해 평가하였다. 피험자의 설문은 체모의 굵기 변화 및 성장 지연에 관하여 사용전과 비교하여 개선 없음, 약간의 개선, 상당한 개선의 3단계로 판정하였으며 결과는 표 7에 나타내었다.The subjects were applied the cream of Comparative Example 2 without piperine on the left leg and the cream of Example 2 containing 0.2% piperine on the right leg twice a day for three months. After three months, the effects of hair removal were evaluated by questionnaire and image analysis. The subjects' questionnaires were compared with those before use with regard to changes in hair thickness and growth retardation, and the three stages of no improvement, slight improvement, and significant improvement were determined.
표 7에서 볼 수 있듯이 본 발명에 의한 실시예 2의 크림을 피부에 적용한 경우 체모의 굵기 변화 및 성장 지연에 따른 제모의 효과가 우수함을 알 수 있다.
As can be seen from Table 7, when the cream of Example 2 according to the present invention is applied to the skin, it can be seen that the effect of hair removal due to the change in hair thickness and growth delay is excellent.
실시예Example 5: 체모 영상 분석 5: Body image analysis
체모의 영상분석을 위해 피험자는 평가 4일 전 다리를 면도하였다. 실험이 시작되기 전과 종료된 직후 평가를 실시하였다. 영상분석에 의한 실시예 2 및 비교예 2의 체모 성장의 측정 결과는 표 8에 실험 전의 체모의 길이에 대한 감소율을 평균하여 나타내었다.For image analysis of body hair, subjects shaved their legs four days before evaluation. Evaluation was carried out before and after the experiment. The results of measurement of hair growth of Example 2 and Comparative Example 2 by image analysis are shown in Table 8 by averaging the reduction rate with respect to the hair length before the experiment.
상기 표 8에서 알 수 있듯이 본 발명에 의한 피페린을 첨가한 실시예 2의 크림을 피부에 도포한 경우 체모성장 지연 효과가 현저하게 발휘되는 것을 알 수 있다.As can be seen from Table 8, when the cream of Example 2 containing piperine according to the present invention is applied to the skin, it can be seen that the hair growth retarding effect is remarkably exerted.
Claims (12)
[화학식 1]
The cosmetic composition for suppressing hair growth according to claim 1, wherein the piperine is a compound represented by the following formula (1).
[Chemical Formula 1]
[화학식 1]
5. The pharmaceutical composition for inhibiting hair growth according to claim 4, wherein the piperine is a compound represented by the following formula (1).
[Chemical Formula 1]
12. The composition of claim 11, wherein the composition is a pharmaceutically acceptable carrier, diluent, adjuvant, colorant, stabilizer, flavor, interfacial agent, oil, humectant, alcohol, thickeners, antioxidants, Or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and a pharmaceutically acceptable carrier.
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