KR101580965B1 - Cosmetic composition and skin external composition with Daedaleopsis tricolor fruit body extract or Daedaleopsis tricolor mycelium extract or Daedaleopsis tricolor mycelium culture fluid - Google Patents

Cosmetic composition and skin external composition with Daedaleopsis tricolor fruit body extract or Daedaleopsis tricolor mycelium extract or Daedaleopsis tricolor mycelium culture fluid Download PDF

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김홍주
심홍보
문권기
임봉균
최형철
김기영
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Abstract

The present invention relates to a cosmetic composition and a skin external application which contain a fruit body extract, a mycelium extract, and culture liquid of Daedaleopsis tricolor. More particularly, the present invention relates to the cosmetic composition and the skin external application which contain a filtrate obtained from the fruit body extract of Daedaleopsis tricolor, a filtrate obtained from the mycelium extract of Daedaleopsis tricolor, or the culture liquid obtained by culturing fruit bodies of Daedaleopsis tricolor as an active ingredient. The fruit body extract, the mycelium extract, or the culture medium of Daedaleopsis tricolor contained in the cosmetic composition and the skin external application of the present invention exhibits complex effects of anti-oxidation, promotion of collagen synthesis, anti-aging, improvement of fine wrinkles, skin whitening, moisturization, alleviation of skin irritation, prevention of acne, improvement of atopic dermatitis, anti-inflammation, prevention of hair damage, prevention of hair loss, and improvement of hair growth.

Description

삼색도장버섯 자실체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체의 배양액을 함유하는 화장료 조성물 및 피부외용제 조성물 {Cosmetic composition and skin external composition with Daedaleopsis tricolor fruit body extract or Daedaleopsis tricolor mycelium extract or Daedaleopsis tricolor mycelium culture fluid}TECHNICAL FIELD [0001] The present invention relates to a cosmetic composition and skin external composition comprising Daedaleopsis tricolor fruit body extract or Daedaleopsis tricolor mycelium extract or Daedaleopsis tricolor mycelium culture fluid}

본 발명은 삼색도장버섯(Daedaleopsis tricolor) 자실체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체의 배양액을 함유하는 화장료 조성물 및 피부외용제 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는 삼색도장버섯 자실체 추출물로부터 수득한 여과액 또는 삼색도장버섯 균사체 추출물로부터 수득한 여과액 또는 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 및 피부외용제 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a three-color coated mushroom ( Daedaleopsis The present invention relates to a cosmetic composition and a composition for external application for skin which comprise a culture solution of tricolor fruiting body extract or tricolor coated mushroom mycelium extract or tricolor coated mushroom mycelium, And a cultured solution obtained by culturing the obtained filtrate or mycelia of tricolor coated mushrooms as an active ingredient.

피부는 표피, 진피 및 피하지방으로 이루어진 몸의 외피로서, 다양한 환경적인 요인에 대해 신체를 보호하는 물리적 장벽의 기능, 촉각 및 온도 조절 등의 역할을 한다. 그런데, 산업화된 현대 사회에서는 서구화된 생활습관, 스트레스, 환경오염 및 자외선 양의 증가로 인해 피부 자극, 피부 노화, 아토피, 피부 염증, 여드름 등의 피부 트러블이 쉽게 발생한다. The skin is the outer skin of the body consisting of epidermis, dermis and subcutaneous fat. It functions as a physical barrier to protect the body against various environmental factors, tactile sensation and temperature control. In modernized industrialized society, skin troubles such as skin irritation, skin aging, atopy, skin inflammation and acne easily occur due to westernized lifestyle, stress, environmental pollution and increase of ultraviolet ray amount.

이중 피부노화는 내인성 노화(intrinsic aging)와 광노화(phtoaging) 두 가지로 나눌 수 있다 (Gilchrest BA: J. Am . Acad . Dermatol.,21, 610-613(1989)). 내인성 노화는 연령이 증가함에 따라 생체의 생리적인 기능이 저하되어 자연적으로 유발되는 노화현상이고(Braverman IM 등: J. Invest. Dermatol., 78, 434-443(1982)), 광노화는 피부가 광에 반복적으로 노출되어 피부의 외양 또는 기능이 변화되는 것을 의미한다(Ridder GM등: J. Am. Acad. Dermatol., 25, 751-760(1991)).Double skin aging can be divided into intrinsic aging and phtoaging (Gilchrest BA: J. Am . Acad . Dermatol ., 21, 610-613 (1989)). Endogenous aging is a naturally occurring aging phenomenon resulting from decreased physiological function of the body as age increases (Braverman IM, J. Invest. Dermatol ., 78, 434-443 (1982) (Ridder GM et al., J. Am. Acad. Dermatol ., 25, 751-760 (1991)).

또한, 피부노화는 자외선, 스트레스, 질병상태, 환경인자, 상처, 나이가 들어감에 따라 활성산소종이 활성화되어 야기될 수 있으며, 이런 상태가 심화 될 경우 생체 내에 존재하는 항산화 방어막을 파괴하고, 세포 및 조직을 손상시켜 성인병 및 노화를 촉진하게 된다. 좀더 구체적으로 말하자면, 피부의 주요 구성물질인 지질, 단백질, 다당류 및 핵산 등이 산화되어 피부 세포 및 조직이 파괴되고, 결국 피부노화 현상이 생겨나는 것이다. 특히 단백질의 산화는 피부의 결합조직인 콜라겐, 히알루론산, 엘라스틴, 프로테오글라이칸, 피브로넥틴 등이 절단되어 심한 과다 염증반응이 일어나고, 피부의 탄력에 지장을 주게 되고 이것이 더 심해질 경우 DNA의 변이에 의해 돌연변이, 암의 유발, 면역기능 저하의 사태에 이르게 된다.In addition, skin aging can be caused by active oxygen species activated by ultraviolet rays, stress, disease states, environmental factors, wounds, and aging. When such conditions are deepened, the antioxidant defense membrane in the living body is destroyed, It damages tissues and promotes adult diseases and aging. More specifically, lipids, proteins, polysaccharides and nucleic acids, which are major constituents of the skin, are oxidized to destroy skin cells and tissues, resulting in skin aging. In particular, the oxidation of proteins causes severe hyperinflammation of collagen, hyaluronic acid, elastin, proteoglycans, and fibronectin, which are connective tissues of the skin, which interferes with skin elasticity. Mutation, cancer induction, and immune function.

그러므로, 신체의 대사 과정 중 발생하는 활성산소종이나 자외선 조사, 염증반응에 의해 매개되는 활성산소종을 소거하여 세포막을 보호하고, 또 이미 손상 받은 세포는 활발한 신진대사에 의해 재생시켜서 세포를 증식시켜야 피부가 회복되고, 건강한 피부를 유지할 수 있다. 노화에는 활성산소종 뿐만 아니라 MMP(Matrix metallopretease)라는 효소가 관여하는데 생체 내에서 콜라겐과 같은 세포 외 기질의 합성과 분해는 적절하게 조절되나, 노화가 진행되면서 그 합성이 감소하며 콜라겐을 분해하는 효소인 기질 금속단백질 분해효소(MMP)의 발현이 촉진되어 피부의 탄력이 저하되고 주름이 형성된다. 또한 자외선 노출에 의해 이러한 분해효소가 활성화되기도 한다. 그러므로, 자외선에 의해 세포 내에서 활성화가 유도되는 MMP 발현을 조절하거나, 그 활성을 억제할 수 있는 물질의 개발이 요구되고 있다. 지금까지 화장품의 소재로서 사용된 원료들은 단순히 분해효소(MMP)의 활성만을 억제하는 것이 대부분이었다.Therefore, it is necessary to protect the cell membrane by abolishing the reactive oxygen species that are mediated by the active oxygen species, the ultraviolet ray irradiation and the inflammation reaction that occur during the metabolism of the body, and regenerate already damaged cells by active metabolism to proliferate the cells The skin can be restored and healthy skin can be maintained. In aging, not only active oxygen species but also MMP (Matrix metallopretease) are involved. The synthesis and degradation of extracellular matrix such as collagen in vivo is appropriately regulated, but its synthesis is reduced as aging progresses and enzymes degrading collagen (MMP) is promoted and the elasticity of the skin is lowered and wrinkles are formed. These degrading enzymes are also activated by exposure to ultraviolet light. Therefore, there is a demand for development of a substance capable of modulating MMP expression induced by activation of ultraviolet light in a cell or inhibiting its activity. Until now, the raw materials used as cosmetic materials mostly inhibited only the activity of degrading enzyme (MMP).

한편, 멜라닌은 색소 세포 내에 존재하는 티로시나제의 작용에 의해 타이로신으로부터 도파(dopa), 도파퀴논(dopaquinone)으로 변환되어 도파크롬(dopachrome) 등을 거처 생성된다. 멜라닌은 피부에 존재하여 자외선 등으로부터 신체를 보호하고 체내 호르몬 분비 조절에 중요한 기능을 나타낸다. 그러나, 멜라닌이 과잉생산되면 기미, 주근깨 등을 형성하고 피부노화를 촉진하며, 피부암 유발에 중요한 작용을 하는 것으로 알려져 멜라닌 과잉생산을 예방하기 위한 연구개발이 활발히 진행되고 있다. 이미 아스코르빈산(일본특개평 4-9320), 하이드로퀴논(일본특개평 6-192062), 코직산(일본특개소 56-7710), 알부틴(일본특개평 4-93150) 및 식물 추출물 등이 티로시나제 저해 활성을 나타내어 미백 화장료로 이용되고 있으나 화장품 제형 중에서의 안정성이 나빠, 분해되어 착색되거나, 이취가 발생하거나, 생체 수준에서의 효능, 효과가 불분명하거나 또는 안전성이 문제가 되어 그 사용이 제한되고 있는 실정이다.On the other hand, melanin is converted from tyrosine to dopa and dopaquinone by the action of tyrosinase existing in pigment cells, and is generated by dopachrome. Melanin is present in the skin, protects the body from ultraviolet light and has an important function in regulating hormone secretion in the body. However, when melanin is overproduced, it forms spots and freckles, promotes skin aging, and plays an important role in skin cancer induction, so that research and development for preventing melanin overproduction have been actively conducted. (Japanese Patent Laid-open No. 4-93050) and plant extracts inhibit tyrosinase (Japanese Patent Laid-open Publication No. 4-9320), hydroquinone (Japanese Patent Laid Open No. 6-192062), kojic acid Activity and is used as a whitening cosmetic, but its stability is poor in cosmetic formulations, it is decomposed to cause coloration, odor, or efficacy at a biological level, its effect is unclear, or its safety is a problem. to be.

한편, 아토피 피부염(atopic dermatitis)은 아토피 알러지를 가진 사람에게서 나타나는 대표적인 질환으로, 아직까지 아토피 피부염의 원인은 명확히 밝혀지지 않았지만 아토피 피부염 환자의 70%에서 아토피의 병력이 있었으며, 알레르기성 체질인 사람에서 호발하고, 특히 다른 알러지 질환인 알러지성 비염, 천식 등을 동반하기 때문에 유전적 요인에 의한 질병이나 면역 질환 중의 하나로 이해되고 있다. 아토피성 피부염의 치료에는, 높은 약리효과를 기대할 수 있는 부신피질 호르몬 등의 약재가 사용되고 있으나 부신피질 호르몬제의 부작용이 문제가 되고 있고, 부신피질 호르몬제의 사용 중지에 의하여 리바운드(약물의 사용정지 후에 일어나는 극적인 환부의 병세악화)가 생기는 것도 잘 알려져 있다. 이와 같이 부작용의 대책으로서, 부신피질 호르몬 등의 호르몬을 포함하지 않는 비스테로이드성 항염증제 또는 항히스타민제 등이 사용되고 있으나, 완치가 어려운 상태이기 때문에 부작용이 없는 아토피 피부염의 개선제 또는 치료제 개발이 매우 절실한 실정이다.Atopic dermatitis is a common disease in people with atopic allergies. Although the cause of atopic dermatitis has not yet been clarified, atopic dermatitis has a history of atopy in 70% of the patients, And it is understood to be one of diseases caused by genetic factors or immune diseases because it is accompanied by allergic diseases such as allergic rhinitis and asthma. In the treatment of atopic dermatitis, medicines such as corticosteroids, which can expect high pharmacological effects, are used, but side effects of corticosteroids are problematic, and the use of corticosteroids causes the rebound It is also well-known that a later severe worsening of the affected part occurs. As a countermeasure for such side effects, a non-steroidal anti-inflammatory agent or an antihistamine agent which does not contain a hormone such as adrenocorticotropic hormone is used, but since it is difficult to cure, the development of a remedy or therapeutic agent for atopic dermatitis without side effects is very urgent .

한편, 최근에는 피부 트러블 뿐만 아니라, 탈모의 예방 및 치료에도 많은 관심이 기울어지고 있다. 일반적으로, 탈모는 남성호르몬의 양에 직접적인 관계가 있다고 알려져 있다. 이러한 남성호르몬의 분비상승에 의해 피지선의 기능이 활발해지면 생성된 과잉 피지가 모낭벽의 과각화로 인하여 모낭 내에 정체되면서 생기는 면포가 여드름의 초기단계이다. 남성호르몬에 의한 탈모 및 여드름의 기전을 설명하면, 5-알파-리덕타아제(5-α-Reductase)는 피지선, 모낭, 전립선, 부고환 등의 남성 호르몬 반응성 조직에 존재하는 남성 호르몬들 중 하나로서, 테스토스테론(testosterone)을 디하이드로 테스토스테론(dihydrotestosterone)으로 대사시키는데 관여하는 효소이며, 그 전환에는 NADPH를 필요로 한다. 또한, 테스토스테론은 남성 성충동, 골격근 증가, 남성외부생식기, 음낭성장, 정자형성 등에 관여하고, 디하이드로테스토스테론은 여드름, 피지 증가, 탈모 및 전립선 비대증 등의 해당 조직에 관여한다. 특히, 사춘기 이후에 남성 호르몬의 과량 분비는 여드름과 탈모를 유발하는데, 5-알파-리덕타아제에 의하여 생성되는 남성 호르몬의 활성형태인 디하이드로테스토스테론의 과량 생성을 막기 위해 5-알파-리덕타아제 억제제를 사용하여 탈모방지 또는 여드름 방지제를 개발하려는 연구들이 활발히 진행되고 있다.On the other hand, in recent years, much attention has been paid not only to skin troubles but also to prevention and treatment of hair loss. In general, hair loss is known to be directly related to the amount of male hormone. When the function of the sebaceous gland is activated by the increase of the secretion of the male hormone, the excess sebum produced in the hair follicle is stagnated in the hair follicle due to the overgrowth of the hair follicle wall, and the cotton gland is the initial stage of acne. 5-alpha-Reductase is one of the male hormones present in male hormone reactive tissues such as sebaceous glands, hair follicles, prostate, and epididymis, as a result of male hormone-induced hair loss and acne. , An enzyme involved in the metabolism of testosterone into dihydrotestosterone, and requires NADPH for its conversion. In addition, testosterone is involved in male sexual dysfunction, skeletal muscle increase, male external genitalia, scrotum growth, spermatogenesis and the like, and dihydrotestosterone is involved in the relevant tissues such as acne, sebum increase, hair loss and enlargement of the prostate. In particular, after puberty, excessive secretion of male hormones causes acne and hair loss. To prevent excessive production of dihydrotestosterone, an active form of male hormone produced by 5-alpha-reductase, 5-alpha-reductase Studies have been actively conducted to develop anti-hair loss or anti-acne agents using an azeotropic agent.

최근에는 피부에 대한 관심이 날로 높아지고, 여러 부작용이 나타나는 화학물질 등의 사용을 기피하면서, 천연 추출물로부터 얻어진 항산화, 주름완화, 미백, 가려움 완화 등의 기능을 가진 기능성 화장료(Functional cosmetics)에 많은 관심이 집중되고 있다. 예를 들어, 미국 특허공보 US 5,972,341은 코미포라 무쿨(Commiphora mukul) 추출물의 주름개선 효과에 관하여, 대한민국 특허 제0431076호는 백급, 자소, 에키나시아 및 발효대두 추출물을 포함하는 아토피 피부의 치유 개선용 화장료 조성물에 관하여, 대한민국 특허 제0511494호는 하수오, 시엽, 일라이트를 포함하는 아토피 피부염 치료를 위한 추출물 및 조성물에 관하여 개시하고 있다. 또한, 천연물 중에서도 약용과 식용버섯 추출물을 사용한 화장품이 많이 개발되고 있다. 지금까지 알려진 버섯의 추출물을 이용한 화장료 조성물로서는 눈꽃동충하초(한국특허 제0340185호), 상황버섯, 치마버섯(한국특허 제0681703호, 제0295623호), 잎새버섯(한국특허 제0438009호), 표고버섯 등이 있으며 이들 추출물의 피부 노화방지 효과에 관한 연구가 계속되어 왔다.Recently, there has been a lot of interest in functional cosmetics with functions such as antioxidation, wrinkle reduction, whitening, and itching relief obtained from natural extracts while avoiding the use of chemicals which cause various side effects, . For example, U.S. Patent No. 5,972,341 discloses a wrinkle-improving effect of an extract of Commiphora mukul. Korean Patent No. 0431076 discloses a cosmetic composition for improving the healing properties of atopic skin including white wool, barley, echinacea and fermented soybean extract Regarding the composition, Korean Patent No. 0511494 discloses extracts and compositions for the treatment of atopic dermatitis, including daphnia, leaf, and ilite. Among natural products, many cosmetics using medicinal and edible mushroom extracts are being developed. As the cosmetic compositions using the mushroom extracts known so far, there have been proposed various cosmetic compositions such as snow flake (Korean Patent No. 0340185), Situ mushroom, Chima mushroom (Korean patent No. 0681703, No. 0295623), Leaf mushroom (Korean patent No. 0438009) And the research on the anti-aging effect of these extracts has been continued.

약용과 식용으로 사용되고 있는 버섯류들은 그 예와 종류가 무수히 많지만, 화장료 조성물로서 이용되고 연구되고 있는 버섯류들은 아직은 일부분으로 알려져 있다. Mushrooms which are used for medicinal and edible purposes are many examples and kinds, but mushrooms which are used and studied as cosmetic composition are still known as a part.

한편, 삼색도장버섯(Daedaleopsis tricolor)은 민주름버섯목 구멍장이버섯과의 버섯으로, 활엽수 죽은 나무에 기와 모양으로 무리지어 발생하는 갈색 버섯이다. 버섯 표면은 밋밋하지만 형태는 반원형 또는 편평한 조개껍질 모양이다. 갓의 빛깔이 황갈색, 적갈색, 암갈색의 3가지 색상으로 삼색의 아름다움이 돋보여 삼색도장버섯(Daedaleopsis tricolor)이라고 이름붙여졌다. 갓 밑면의 자실층은 완전한 주름을 이루고 처음에는 잿빛 흰색이나 점차 잿빛 갈색에서 검은색으로 된다. 홀씨는 원통 모양이며 무색이다. On the other hand, three colored mushrooms ( Daedaleopsis tricolor ) is a brown mushroom that occurs in the form of a tile-like pattern on a hardwood dead tree, with mushrooms and mushrooms. The mushroom surface is flat, but the shape is semicircular or flat shell-like. The color of the gut is three colors, yellowish brown, reddish brown and dark brown. The beauty of three colors is called "Daedaleopsis tricolor". The glans layer on the underside of the freshly formed complete wrinkles, initially becoming ashenish white or gradually grayish brown to black. Hall is cylindrical and colorless.

그러나, 삼색도장버섯의 자실체 추출물, 균사체 추출물 또는 균사체 배양액의 피부 노화방지 효과, 피부 미백 효과, 피부 주름 개선효과, 피부 보습효과, 피부 자극 완화효과, 아토피 개선효과, 여드름 개선효과, 모발손상 방지효과, 탈모방지, 육모 개선효과 및 염증질환 예방 또는 치료효과에 대한 기술은 아직까지 확인된 바가 없다.
However, the effect of preventing the skin aging, skin whitening effect, skin wrinkle improvement effect, skin moisturizing effect, skin irritation alleviation effect, atopy improvement effect, acne improvement effect, hair damage prevention effect of fruiting body extract, mycelium extract or mycelium culture solution of tricolor painted mushroom , Prevention of hair loss, improvement of hair growth, and prevention or treatment of inflammatory diseases have not yet been confirmed.

대한민국 등록특허 제10-0340185호(발명의 명칭: 눈꽃동충하초 추출물을 함유하는 주름 방지용 화장료 조성물)에는 눈꽃동충하초의 추출물을 함유시킴으로써 주름방지에 우수한 화장료 조성물에 대해 기재되어있다.Korean Patent No. 10-0340185 entitled "Cosmetic Composition for Preventing Wrinkles Containing Snow Flower Cordyceps Extract", contains a cosmetic composition excellent in preventing wrinkles by containing an extract of Snow Flower Cordyceps. 대한민국 등록특허 제10-0438009호(발명의 명칭: 잎새버섯 균사체의 추출물을 함유하는 화장료 조성물)에는 항산화 효과와 피부 세포의 증식 및 콜라겐의 생성촉진 효과와 피부 멜라닌생성 억제 효과가 있는 잎새버섯의 균사체 또는 그의 배양액으로부터 얻은 추출물을 함유하는 화장료 조성물에 대해 기재되어 있다.Korean Patent No. 10-0438009 entitled "Cosmetic Composition Containing Extract of Mycelium of Leafy Mushrooms" is a cosmetic composition containing an extract of mycelia of leaf mushroom having an antioxidative effect, a skin cell proliferation promoting effect on collagen production and a skin melanin production inhibitory effect Or an extract obtained from the culture broth thereof.

본 발명은 천연추출물을 이용하여 '항산화, 콜라겐 합성 촉진, 노화 방지, 피부 잔주름 개선, 미백, 보습, 피부자극 완화, 여드름 방지, 아토피 개선, 항염증, 모발손상 방지, 탈모방지 및 육모 개선 효과를 가지는 화장료 조성물' 및 '여드름, 아토피, 염증질환의 예방 및 치료 효과를 가지는 피부외용제 조성물'을 제공하는 것을 목적으로 한다.
The present invention relates to the use of natural extracts to improve the antioxidant activity, promote collagen synthesis, prevent aging, improve skin wrinkles, whitening, moisturizing, alleviating skin irritation, preventing acne, improving atopy, preventing inflammation, preventing hair loss, And to provide a composition for external application for skin having a preventive and therapeutic effect of acne, atopic and inflammatory diseases.

상기의 목적을 달성하기 위해 본 발명은 삼색도장버섯(Daedaleopsis tricolor) 자실체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a cosmetic composition characterized by comprising a culture solution obtained by culturing a Daedaleopsis tricolor fruit body extract, a tricolor coated mushroom mycelial extract or a tricolor coated mushroom mycelium as an active ingredient do.

본 발명의 화장료 조성물은 항산화 효과, 노화 방지 효과, 콜라겐 합성촉진효과, 주름 개선효과, 미백효과, 피부 보습효과, 피부자극 완화효과, 여드름 개선 효과, 아토피성 피부염 개선 효과, 염증질환 개선 효과, 모발손상 방지효과, 탈모방지 또는 육모 개선효과가 우수한 화장료 조성물을 제공하기 위해, 삼색도장버섯 자실체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 한다. The cosmetic composition of the present invention is useful as an antioxidant, antioxidant, collagen synthesis, wrinkle, whitening, skin moisturizing, skin irritation, acne improvement, atopic dermatitis improvement, In order to provide a cosmetic composition composition having excellent effects of preventing damage, preventing hair loss or improving hair growth, there is provided a cosmetic composition comprising as an active ingredient a culture solution obtained by culturing a tricolor coated mushroom fruiting body extract, a tricolor coated mushroom mycelium extract or a tricolor coated mushroom mycelium do.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 삼색도장버섯 자실체 추출물은 삼색도장버섯 자실체를 추출하여 얻을 수 있는데, 여기서 삼색도장버섯 자실체의 종류에는 특정의 종류에 한정되는 것은 아니며, 자연채취된 것 또는 인공배양된 것 모두 사용할 수 있다. In the cosmetic composition of the present invention, the tricolor coated mushroom fruit body extract may be obtained by extracting a trichromatic mushroom fruit body, wherein the type of the mushroom fruit body of the tricolor painted mushroom is not limited to a specific kind, Can be used.

또한, 본 발명의 삼색도장버섯 자실체 추출물의 추출방법은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상 사용하는 방법을 이용할 수 있으며, 바람직하게는 물 및 탄소수 C1~C4를 갖는 저급 알코올 중 선택되는 하나 이상의 것을 혼합한 용매를 추출용매로 사용하여 추출하는 것이 좋다. 이때, 용매는 바람직하게 자실체 분말의 약 2~20배를 사용할 수 있고, 더욱 바람직하게는 약 2~5배를 사용할 수 있다. 또한, 10~30℃의 추출온도에서 냉침 추출, 환류 냉각 추출, 열수 추출, 초음파 추출, 초고압 추출 등의 추출방법을 이용할 수 있다. In addition, the method of extracting the three-color coated mushroom fruit body extract of the present invention may be a method commonly used in the art to which the present invention pertains, and preferably one or more selected from the group consisting of water and lower alcohols having C 1 -C 4 carbon atoms It is good to extract using one solvent as extraction solvent. At this time, the solvent is preferably used about 2 to 20 times, more preferably about 2 to 5 times, of the fruiting body powder. Extraction methods such as cold extraction, reflux cooling extraction, hot water extraction, ultrasonic extraction, and ultra-high pressure extraction can be used at an extraction temperature of 10 to 30 ° C.

또한, 액상의 샘플을 제조하고자 하는 등의 필요에 의해 이와 같이 수득한 추출액을 여과, 감압농축 또는 동결건조한 후, 극성용매에 가용할 수 있다. 일 예로, 수득된 추출액을 여과시킨 후, 농축조로 이송하여 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결 건조하고, 이렇게 얻어진 감압농축물 및 동결건조물이 0.00001~70.0중량% 함유되게 정제수, 에탄올, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여 액상의 추출물 샘플을 제조할 수 있는 것이다.Further, the thus-obtained extract can be used for a polar solvent after filtration, concentration under reduced pressure or freeze-drying according to the necessity of producing a liquid sample or the like. For example, the obtained extract is filtered, transferred to a concentration tank, concentrated under reduced pressure and freeze-dried at 50 DEG C or lower, and purified water, ethanol, butylene glycol, Propylene glycol, and the like can be used to produce a liquid sample of the extract.

한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 삼색도장버섯 자실체 추출물은, 상기와 같이 얻어진 자실체 추출물에 함유된 '다당체' 그 자체를 의미할 수도 있다.Meanwhile, in the cosmetic composition of the present invention, the tricolor coated mushroom fruit body extract may mean the 'polysaccharide' itself contained in the fruit body extract obtained as described above.

한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 삼색도장버섯 균사체 추출물은 삼색도장버섯 균사체를 추출하여 수득한 것으로, 그 추출방법은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상 사용하는 방법을 이용할 수 있으며, 바람직하게는 물 및 탄소수 C1~C4를 갖는 저급 알코올 중 선택되는 하나 이상의 것을 혼합한 용매를 추출용매로 사용하여 추출하는 것이 좋다. 이때, 용매는 바람직하게 균사체 분말의 약 2~20배를 사용하는 것이 좋고, 더욱 바람직하게는 약 2~5배를 사용하는 것이 좋다. 또한, 10~30℃의 추출온도에서 냉침 추출, 환류 냉각 추출, 열수 추출, 초음파 추출, 초고압 추출 등의 추출방법을 이용할 수 있다.Meanwhile, in the cosmetic composition of the present invention, the tricolored mushroom mycelium extract is obtained by extracting mushroom mycelium of tricolor coated mushroom. The extraction method may be a commonly used method in the technical field of the present invention, Is preferably extracted using a solvent obtained by mixing at least one selected from water and lower alcohols having C1-C4 carbon atoms as an extraction solvent. At this time, the solvent is preferably used about 2 to 20 times, more preferably about 2 to 5 times, of the mycelial powder. Extraction methods such as cold extraction, reflux cooling extraction, hot water extraction, ultrasonic extraction, and ultra-high pressure extraction can be used at an extraction temperature of 10 to 30 ° C.

또한, 액상의 샘플을 제조하고자 하는 등의 필요에 의해, 여과, 감압농축 또는 동결건조하여 극성용매에 가용하는 것이 좋다. 일 예로, 수득된 추출액을 여과시킨 후, 농축조로 이송하여 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결 건조하고, 이렇게 얻어진 감압농축물 및 동결건조물이 0.00001~70.0중량% 함유되게 정제수, 에탄올, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여 액상의 추출물 샘플을 제조할 수 있다.Further, it is preferable to be soluble in a polar solvent by filtration, concentration under reduced pressure or lyophilization depending on the necessity of producing a liquid sample. For example, the obtained extract is filtered, transferred to a concentration tank, concentrated under reduced pressure and freeze-dried at 50 DEG C or lower, and purified water, ethanol, butylene glycol, Propylene glycol, may be used to prepare a liquid sample of the extract.

한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액은 그대로 사용하거나, 건조(또는 동결건조)하여 분말 형태로 사용할 수 있다. 바람직하게는 배양액을 여과하여 사용할 수도 있다. 구체적으로 삼색도장버섯 균사체를 액체 배양한 후, 균사체를 원심분리를 통해 제거한 후, 배양 여액을 종이필터로 여과하여 수득된 여과액을 사용할 수 있는 것이다. 이때, 배양은 '발효'를 포함하는 의미이다.On the other hand, in the cosmetic composition of the present invention, the culture solution obtained by culturing the above-mentioned tricolor coated mushroom mycelium can be used as it is, or dried (or lyophilized) to be used in powder form. Preferably, the culture solution may be used by filtration. Specifically, the mycelium is removed by centrifugation after liquid culture of the mushroom mycelium of three colors, and the filtrate obtained by filtering the culture filtrate with a paper filter can be used. At this time, the culture means 'fermentation'.

또한, 액상의 샘플을 제조하고자 하는 등의 필요에 의해, 여과액을 여과, 감압농축 또는 동결건조하여 극성용매에 가용하는 것이 좋다. 일 예로, 수득된 배양액을 여과시킨 후, 농축조로 이송하여 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결 건조하고, 이렇게 얻어진 감압농축물 및 동결건조물이 0.00001~70.0중량% 함유되게 정제수, 에탄올, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여 액상의 추출물 샘플을 제조할 수 있다.Further, it is preferable to use the filtrate in a polar solvent by filtration, concentration under reduced pressure or freeze-drying, depending on the necessity of producing a liquid sample. For example, the resulting culture is filtered and then transferred to a concentration tank, concentrated under reduced pressure at 50 ° C or below and freeze-dried. Purified water, ethanol, butylene glycol, Propylene glycol, may be used to prepare a liquid sample of the extract.

또한, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 삼색도장버섯 균사체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액은, 상기 추출물 또는 상기 여과액에서 추출된 '다당체' 그 자체를 의미하기도 한다.In addition, in the cosmetic composition of the present invention, the culture solution obtained by culturing the above-mentioned tricolor coated mushroom mycelium extract or tricolor coated mushroom mycelium means the 'polysaccharide' itself extracted from the above extract or the filtrate.

또한, 상기 삼색도장버섯 균사체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액은, 1종 이상의 동물 또는 식물 또는 생약재를 기질로 사용한 삼색도장버섯 균사체의 추출물인 것이 바람직하다. 여기서, 상기 동물 또는 식물 또는 생약재는 특별히 한정되는 것은 아니며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상 사용되는 동물 또는 식물 또는 생약재를 기질로 사용할 수 있다.In addition, the culture solution obtained by culturing the above-mentioned tricolor coated mushroom mycelium extract or tricolor painted mushroom mycelium is preferably an extract of the tricolor coated mushroom mycelium using at least one species of animal, plant or herbal medicine as a substrate. Herein, the animal, plant or herb medicine is not particularly limited, and an animal, a plant or a herbal medicine commonly used in the technical field of the present invention can be used as a substrate.

한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 삼색도장버섯 자실체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액은 항산화 효과, 기질 금속단백질분해효소(MMP-1) 활성 저해효과, 기질 금속단백질분해효소(MMP-1) 발현 억제효과, 프로콜라겐 생합성 촉진효과, 엘라스틴 생성 촉진효과, 미백효과, 염증유발관련 효소(hyaluronidase) 활성 억제효과, 자외선 조사에 의한 세포독성 완화효과, 자외선 조사에 의한 염증성 사이토카인 발현 억제효과, 자외선 조사에 의한 프로스타글란딘 생합성 억제 효과, 여드름균에 대한 항균효과, 아토피 피부염에 대한 항염증효과, 피부 자극 완화효과, 모발손상 방지효과, 탈모방지 또는 육모 개선 효과가 매우 우수하여 다기능성 화장료 조성물에 이용될 수 있다. On the other hand, in the cosmetic composition of the present invention, the culture solution obtained by culturing the above-mentioned tricolor coated mushroom fruit body extract, tricolor coated mushroom mycelial extract or tricolor coated mushroom mycelium has antioxidative effect, inhibitory effect on substrate metalloproteinase (MMP-1) , Suppression of matrix metalloproteinase (MMP-1) expression, promotion of procollagen biosynthesis, promotion of elastin production, whitening effect, hyaluronidase activity inhibitory effect, cytotoxic relaxation effect by ultraviolet irradiation, ultraviolet Anti-inflammatory effect against acne bacterium, anti-inflammatory effect against atopic dermatitis, skin irritation alleviation effect, hair damage prevention effect, prevention of hair loss, or hair growth improvement effect by irradiation with ultraviolet rays, inhibition effect on prostaglandin biosynthesis by irradiation of ultraviolet rays Can be used for a multi-functional cosmetic composition.

한편, 본 발명의 화장료 조성물은 조성물 전체에 대해 삼색도장버섯 자실체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액을 0.00001~70.0 중량% 함유하는 것이 좋은데, 0.00001 중량% 미만으로 포함되는 경우에는 피부개선효과 등이 미미하고, 70.0 중량%를 초과하는 경우에는 재료 투입량 대비 효율성이 떨어져 경제적이지 못하기 때문이다. On the other hand, the cosmetic composition of the present invention preferably contains 0.00001 to 70.0% by weight of the culture obtained by cultivating the tricolor coated mushroom fruit body extract, the tricolor coated mushroom mycelium extract or the tricolor coated mushroom mycelium on the whole composition, If it is included, the effect of improving the skin is insignificant. If it exceeds 70.0% by weight, the efficiency with respect to the input amount of the material is low, which is not economical.

한편, 본 발명에서 "유효성분으로 포함된다"는 의미는 본 발명의 화장료 조성물로부터 피부질환 개선 또는 모발 개선의 효과를 나타낼 수 있는 정도로, 화장료 조성물에 삼색도장버섯 자실체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액이 첨가되는 것을 의미한다.In the present invention, the term "included as an active ingredient" means that the cosmetic composition of the present invention contains the extract of mushroom fruiting body of tricolor coated mushroom or mushroom mycelial extract of tricolor, Means that the culture solution obtained by culturing the mycelium of tricolor coated mushroom is added.

한편, 본 발명의 화장료 조성물의 제형은 일 예로, 화장수, 젤, 수용성 리퀴드, 크림, 에센스, 수중유(O/W)형 및 유중수(W/O)형으로 이루어진 기초화장료 제형; 수중유형 또는 유중수형의 메이크업베이스, 파운데이션, 스킨커버, 립스틱, 립그로스, 페이스파우더, 투웨이케익, 아이새도, 치크칼라 및 아이브로우펜슬류로 이루어진 색조화장료 제형;이 있다. On the other hand, the cosmetic composition of the present invention may be formulated into cosmetic formulations, for example, lotions, gels, water-soluble liquids, creams, essences, oil-in-water (O / W) and water-in-oil (W / O) formulations. A color cosmetic formulation consisting of an underwater type or a water-in-oil type makeup base, a foundation, a skin cover, a lipstick, a lip gloss, a face powder, a two way cake, an eye shadow, a teak color and an eyebrow pencil.

한편, 화장료 조성물은 가장 바람직하게 피부 미백용, 노화방지용, 피부자극완화용, 피부 보습용, 주름 개선용, 아토피 피부 개선용, 여드름 개선용, 모발손상 방지용 및 탈모방지 또는 육모 개선용 화장료 조성물인 것이 좋다.
On the other hand, the cosmetic composition is most preferably a cosmetic composition for skin whitening, anti-aging, skin irritation, skin moisturizing, wrinkle improving, atopic skin improving, acne improving, hair damage prevention, hair loss prevention, It is good.

또한, 본 발명은 삼색도장버섯 자실체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 '여드름 예방 및 치료용', '아토피 예방 및 치료용' 또는 '염증질환의 예방 및 치료용' 피부외용제 조성물을 제공한다.The present invention also relates to a method for preventing and treating acne, a method for preventing and treating atopic diseases, which comprises culturing a mushroom extract of tricolor mushroom fruiting body, a mushroom mycelial extract of tricolor painted mushroom mycelium, Or " for the prevention and treatment of inflammatory diseases ".

본 발명의 피부외용제 조성물은 여드름 예방 및 치료 효과, 아토피 예방 및 치료 효과, 염증질환의 예방 및 치료 효과가 우수한 피부외용제 조성물을 제공하기 위해, 삼색도장버섯 자실체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 한다. The composition for external application for skin of the present invention is characterized in that it contains at least one of tricolor mushroom fruity body extract or tricolor coated mushroom mycelium extract or tricolor paint And a culture solution obtained by culturing mycelia of mushroom as an active ingredient.

본 발명의 피부외용제 조성물에 있어서, 상기 삼색도장버섯 자실체 추출물은 삼색도장버섯 자실체를 추출하여 얻을 수 있는데, 여기서 삼색도장버섯 자실체의 종류에는 특정의 종류에 한정되는 것은 아니며, 자연채취된 것 또는 인공배양된 것을 모두 사용할 수 있다. In the composition for external application for skin of the present invention, the tricolor coated mushroom fruit body extract may be obtained by extracting the mushroom fruit body of tricolor painted mushroom. The type of the mushroom body of the tricolor painted mushroom is not limited to a specific kind, Any of those cultured can be used.

또한, 본 발명의 피부외용제 조성물에 있어서, 상기 삼색도장버섯 자실체 추출물의 추출방법은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상 사용하는 방법을 이용할 수 있으며, 바람직하게는 물 및 탄소수 C1~C4를 갖는 저급 알코올 중 선택되는 하나 이상의 것을 혼합한 용매를 추출용매로 사용하여 추출하는 것이 좋다. 이때, 용매는 바람직하게 자실체 분말의 약 2~20배를 사용할 수 있고, 더욱 바람직하게는 약 2~5배를 사용할 수 있다. 또한, 10~30℃의 추출온도에서 냉침 추출, 환류 냉각 추출, 열수 추출, 초음파 추출, 초고압 추출 등의 추출방법을 이용할 수 있다. In addition, in the composition for external application for skin of the present invention, the method for extracting the tricolor coated mushroom fruit body extract may be a method commonly used in the technical field to which the present invention belongs, preferably water and a lower alcohol having a carbon number of C1 to C4 It is preferable to use a solvent obtained by mixing at least one selected from the above-mentioned solvents as an extraction solvent. At this time, the solvent is preferably used about 2 to 20 times, more preferably about 2 to 5 times, of the fruiting body powder. Extraction methods such as cold extraction, reflux cooling extraction, hot water extraction, ultrasonic extraction, and ultra-high pressure extraction can be used at an extraction temperature of 10 to 30 ° C.

또한, 액상의 샘플을 제조하고자 하는 등의 필요에 의해 이와 같이 수득한 추출액을 여과, 감압농축 또는 동결건조하여 극성용매에 가용할 수 있다. 일 예로, 수득된 추출액을 여과시킨 후, 농축조로 이송하여 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결 건조하고, 이렇게 얻어진 감압농축물 및 동결건조물이 0.00001~70.0중량% 함유되게 정제수, 에탄올, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여 액상의 추출물 샘플을 제조할 수 있다.Further, the extract obtained as described above may be filtered, concentrated under reduced pressure, or lyophilized to a polar solvent in accordance with the necessity of producing a liquid sample. For example, the obtained extract is filtered, transferred to a concentration tank, concentrated under reduced pressure and freeze-dried at 50 DEG C or lower, and purified water, ethanol, butylene glycol, Propylene glycol, may be used to prepare a liquid sample of the extract.

본 발명의 피부외용제 조성물에 있어서, 상기 삼색도장버섯 자실체 추출물은 이와 같이 얻어진 자실체 추출물에 함유된 '다당체' 그 자체를 의미할 수도 있다.In the composition for external application for skin of the present invention, the tricolor coated mushroom fruit body extract may mean the 'polysaccharide' itself contained in the fruit body extract thus obtained.

한편, 본 발명의 피부외용제 조성물에 있어서, 상기 삼색도장버섯 균사체 추출물은 삼색도장버섯 균사체를 추출하여 수득한 것으로, 그 추출방법은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상 사용하는 방법을 이용할 수 있으며, 바람직하게는 물 및 탄소수 C1~C4를 갖는 저급 알코올 중 선택되는 하나 이상의 것을 혼합한 용매를 추출용매로 사용하여 추출하는 것이 좋다. 이때, 용매는 바람직하게 균사체 분말의 약 2~20배를 사용하는 것이 좋고, 더욱 바람직하게는 약 2~5배를 사용하는 것이 좋다. 또한, 10~30℃의 추출온도에서 냉침 추출, 환류 냉각 추출, 열수 추출, 초음파 추출, 초고압 추출 등의 추출방법을 이용할 수 있다. Meanwhile, in the composition for external application for skin of the present invention, the extract of the tricolor coated mushroom mycelium is obtained by extracting the mushroom mycelium of tricolor coated mushroom. The extraction method may be a commonly used method in the technical field of the present invention, It is preferable to use a solvent obtained by mixing at least one selected from the group consisting of water and lower alcohols having C1-C4 carbon atoms as an extraction solvent. At this time, the solvent is preferably used about 2 to 20 times, more preferably about 2 to 5 times, of the mycelial powder. Extraction methods such as cold extraction, reflux cooling extraction, hot water extraction, ultrasonic extraction, and ultra-high pressure extraction can be used at an extraction temperature of 10 to 30 ° C.

또한, 액상의 샘플을 제조하고자 하는 등의 필요에 의해, 이와 같이 수득한 추출액을 여과, 감압농축 또는 동결건조하여 극성용매에 가용하는 것이 좋다. 일 예로, 수득된 추출액을 여과시킨 후, 농축조로 이송하여 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결 건조하고, 이렇게 얻어진 감압농축물 및 동결건조물이 0.00001~70.0중량% 함유되게 정제수, 에탄올, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여 액상 형태의 샘플을 제조할 수 있다. Further, it is preferable that the thus obtained extract solution is subjected to filtration, concentration under reduced pressure or freeze-drying to be soluble in a polar solvent in accordance with the necessity of producing a liquid sample. For example, the obtained extract is filtered, transferred to a concentration tank, concentrated under reduced pressure and freeze-dried at 50 DEG C or lower, and purified water, ethanol, butylene glycol, Propylene glycol, and the like, may be used to prepare a sample in liquid form.

한편, 본 발명의 피부외용제 조성물에 있어서, 상기 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액은 그대로 사용하거나, 건조(또는 동결건조)하여 분말 형태로 사용할 수 있다. 바람직하게는 배양액을 여과하여 사용할 수도 있다. 구체적으로 삼색도장버섯 균사체를 액체 배양한 후, 균사체를 원심분리를 통해 제거한 후, 배양 여액을 종이필터로 여과하여 수득된 여과액을 사용할 수 있는 것이다. 이때, 배양은 '발효'를 포함하는 의미이다. On the other hand, in the composition for external application for skin of the present invention, the culture liquid obtained by culturing the above-mentioned tricolor coated mushroom mycelium may be used as it is, or dried (or lyophilized) to be used in powder form. Preferably, the culture solution may be used by filtration. Specifically, the mycelium is removed by centrifugation after liquid culture of the mushroom mycelium of three colors, and the filtrate obtained by filtering the culture filtrate with a paper filter can be used. At this time, the culture means 'fermentation'.

또한, 액상의 샘플을 제조하고자 하는 등의 필요에 의해, 상기 배양액을 여과, 감압농축 또는 동결건조하여 극성용매에 가용하는 것이 좋다. 일 예로, 수득된 배양액을 여과시킨 후, 농축조로 이송하여 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결 건조하고, 이렇게 얻어진 감압농축물 및 동결건조물이 0.00001~70.0중량% 함유되게 정제수, 에탄올, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여 액상의 추출물 샘플을 제조할 수 있다.Further, it is preferable that the culture solution is filtrated, concentrated under reduced pressure or lyophilized to be soluble in a polar solvent according to the necessity of producing a liquid sample. For example, the resulting culture is filtered and then transferred to a concentration tank, concentrated under reduced pressure at 50 ° C or below and freeze-dried. Purified water, ethanol, butylene glycol, Propylene glycol, may be used to prepare a liquid sample of the extract.

또한, 본 발명의 피부외용제 조성물에 있어서, 상기 삼색도장버섯 균사체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액은 상기 열수추출물, 상기 유기용매 추출물 또는 상기 여과액에서 추출된 다당체일 수도 있다.In addition, in the composition for external application for skin of the present invention, the culture solution obtained by culturing the tricolor coated mushroom mycelium extract or the tricolor coated mushroom mycelium may be a polysaccharide extracted from the hydrothermal extract, the organic solvent extract or the filtrate.

또한, 상기 삼색도장버섯 균사체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액은 1종 이상의 동물 또는 식물 또는 생약재를 기질로 사용한 삼색도장버섯 균사체의 추출물인 것이 바람직하다. 여기서, 상기 동물 또는 식물 또는 생약재는 특별히 한정되는 것은 아니며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상 사용되는 동물 또는 식물 또는 생약재를 기질로 사용할 수 있다. In addition, the culture solution obtained by culturing the above-mentioned tricolor coated mushroom mycelium extract or tricolor coated mushroom mycelium is preferably an extract of the tricolor coated mushroom mycelium using at least one animal or plant or herbal medicine as a substrate. Herein, the animal, plant or herb medicine is not particularly limited, and an animal, a plant or a herbal medicine commonly used in the technical field of the present invention can be used as a substrate.

한편, 본 발명의 피부외용제 조성물에 있어서, 상기 삼색도장버섯 자실체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액은 여드름 예방 및 치료 효과, 아토피 예방 및 치료 효과 또는 염증질환의 예방 및 치료 효과가 우수하여, 다기능성 피부용제 조성물에 이용될 수 있다. On the other hand, in the composition for external application for skin of the present invention, the culture solution obtained by culturing the tricolor coated mushroom fruit body extract, the tricolor coated mushroom mycelial extract or the tricolor coated mushroom mycelium in the composition for external application for skin of the present invention is effective for prevention and treatment of acne, And can be used in a multifunctional skin solvent composition.

한편, 본 발명의 피부외용제 조성물은 조성물 전체에 대해 삼색도장버섯 자실체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액을 0.00001~70.0 중량% 함유하는 것이 좋은데, 0.00001 중량% 미만으로 포함되는 경우에는 피부질환 예방 및 치료 효과가 미미하고, 70.0 중량%를 초과하는 경우에는 재료 투입량 대비 효율성이 떨어져 경제적이지 못하기 때문이다. On the other hand, the composition for external application for skin of the present invention preferably contains 0.00001 to 70.0% by weight of the culture obtained by cultivating the tricolor coated mushroom fruit body extract, the tricolor coated mushroom mycelium extract or the tricolor coated mushroom mycelium on the whole composition, The effect of prevention and treatment of skin diseases is insignificant, and when it exceeds 70.0% by weight, the efficiency with respect to the input amount of material is inferior and it is not economical.

한편, 본 발명에서 "유효성분으로 포함된다"는 의미는 본 발명의 피부외용제 조성물로부터 피부질환 예방 및 치료의 효과를 나타낼 수 있는 정도로, 피부외용제 조성물에 삼색도장버섯 자실체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액이 첨가되는 것을 의미한다.The term "included as an active ingredient " in the present invention means that an extract of mushroom fruiting body of tricolor coated mushroom or extract of mushroom mycelium of tricolor is applied to the composition for external application for skin from the composition for external application for skin of the present invention, Or a culture solution obtained by culturing the mycelium of tricolor coated mushroom is added.

한편, 본 발명의 피부외용제 조성물의 제형은 사용방법에 따라 바람직한 형태일 수 있으며, 특히 포유동물에 투여된 후 활성 성분의 신속, 지속 또는 지연된 방출을 제공할 수 있도록 당업계에 공지된 방법을 채택하여 제형화 하는 것이 좋다. 구체적인 제형의 예로는 경고제(PLASTERS), 로션제(LOTIONS), 리니멘트제(LINIMENTS), 방향수제(AROMATIC WATERS), 에어로솔제(AEROSOLS), 연고제(OINTMENTS), 유제(EMULSIONS), 카타플라스마제(CATAPLSMA), 크림제(CREAMS) 및 파스타제(PASTES) 중 선택되는 어느 하나일 수 있다.On the other hand, the formulation of the external preparation for skin of the present invention may be in a preferable form depending on the method of use, and a method known in the art is adopted so as to provide rapid, sustained or delayed release of the active ingredient after administration to a mammal To formulate it. Examples of specific formulations include, but are not limited to, PLASTERS, LOTIONS, LINIMENTS, AROMATIC WATERS, AEROSOLS, OINTMENTS, EMULSIONS, (CATAPLSMA), cream (CREAMS), and pasta (PASTES).

한편, 본 발명의 피부외용제적 조성물은 약리학적으로 허용되는 기제; 운반제; 부형제; 전분, 트래거캔스 고무, 젤라틴, 당밀, 폴리비닐 알콜, 폴리비닐 에테르, 폴리비닐 피롤리돈, 히드록시프로필 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 에틸 셀룰로오스 및 카르복시메틸 셀룰로오스를 포함하는 결합제; 한천, 전분, 젤라틴 가루, 카르복시메틸 셀룰로오스 나트륨, 카르복시메틸 셀룰로오스 칼슘, 결정 셀룰로오스, 탄산칼슘, 탄산수소나트륨 및 알긴산 나트륨을 포함하는 분쇄제; 스테아린산 마그네슘, 활석 및 수첨 식물유를 포함하는 윤활제; 및 착색제 등을 포함할 수 있고, 상기 운반제 및 부형제로는 젖당, 글루코오스, 수크로오스, 만니톨, 감자녹말, 옥수수녹말, 탄산칼슘, 인산칼슘 및 셀룰로오스 등이 있다. 상기 외에도 안정화제, 용해보조제, 경피흡수 촉진제 등의 보조제 방향제, 방부제 등의 첨가제가 더 첨가될 수 있다.On the other hand, the composition for external application for skin of the present invention comprises a pharmacologically acceptable base; Carrier; Excipients; Binders comprising starch, tragacanth gum, gelatin, molasses, polyvinyl alcohol, polyvinyl ether, polyvinylpyrrolidone, hydroxypropylcellulose, methylcellulose, ethylcellulose and carboxymethylcellulose; A pulverizing agent comprising agar, starch, gelatin powder, carboxymethyl cellulose sodium, carboxymethyl cellulose calcium, crystalline cellulose, calcium carbonate, sodium hydrogen carbonate and sodium alginate; Lubricants including magnesium stearate, talc and hydrogenated vegetable oils; And a coloring agent. Examples of the carrier and excipient include lactose, glucose, sucrose, mannitol, potato starch, cornstarch, calcium carbonate, calcium phosphate, and cellulose. In addition to the above, additives such as stabilizers, solubilizers, perfume fragrances such as transdermal absorption accelerators, and preservatives may be further added.

한편, 본 발명의 피부외용제 조성물의 사용량은 사용방법, 사용자의 연령, 성별, 체중, 및 질환의 중증도 등을 고려하여 결정하는 것이 좋다. 일 예로, 본 발명의 삼색도장버섯 자실체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체의 배양액을 함유하는 피부외용제 조성물은 유효성분을 기준으로 하였을 때 1일 0.00001 내지 100 ㎎/㎏(체중)으로 1회 이상 사용 가능하다. 그러나 상기의 사용량은 예시하기 위한 일 예에 불과하며, 사용자의 상태에 따라 의사의 처방에 이해 변화될 수 있으며, 실질적으로 숙련된 임상 의사는 환자를 위해 본 발명의 피부외용제 조성물에 대한 이상적인 사용량 및 사용 계획, 예를 들어 특정 필요 및 환자의 전체적인 조건의 관점에서 가장 적절한 치료 전략을 정할 수 있다. On the other hand, the amount of the composition for external application for skin of the present invention is preferably determined in consideration of the method of use, the age, sex, weight, severity of disease and the like of the user. For example, the composition for external application for skin containing the tricolor coated mushroom fruit body extract, the tricolor coated mushroom mycelium extract or the culture of the tricolor coated mushroom mycelium of the present invention is 0.00001 to 100 mg / kg (body weight) per day based on the active ingredient It can be used more than once. However, the above amount of use is merely an example, and it may be changed according to the state of the user depending on the doctor's prescription, and a physician skilled in the art will be able to make an ideal use amount for the skin external composition composition of the present invention The planning of use, for example, the most appropriate treatment strategy can be determined in terms of the specific needs and the overall condition of the patient.

또한, 본 발명의 피부외용제 조성물의 적절한 사용량은 시험관 내 또는 동물 모델에서 일반적으로 결정될 수도 있다. 일 예로, 시험관 내에서 표적 세포에 대해 여러 농도의 본 발명 피부 피부외용제 조성물을 첨가하여 그 적절한 사용량을 결정할 수도 있다.
Further, the appropriate amount of the external skin application composition of the present invention may be generally determined in vitro or in an animal model. As an example, various concentrations of the inventive skin dermal external agent composition may be added to the target cells in vitro to determine the appropriate dosage.

본 발명의 화장료 조성물 및 피부외용제 조성물에 함유된 삼색도장버섯(Daedaleopsis tricolor) 자실체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체 배양액은 항산화, 콜라겐 합성 촉진, 노화 방지, 피부 잔주름 개선, 미백, 보습, 피부자극 완화, 여드름 방지, 아토피 개선, 항염증, 모발손상 방지, 탈모방지 및 육모 개선 효과를 복합적으로 발휘한다.
The Daedaleopsis tricolor fruit body extract, the tricolor coated mushroom mycelial extract or the tricolor coated mushroom mycelium culture liquid contained in the cosmetic composition and the composition for external application for skin of the present invention are antioxidant, promote collagen synthesis, prevent aging, improve skin wrinkle, , Alleviation of skin irritation, prevention of acne, improvement of atopy, anti-inflammation, prevention of hair damage, prevention of hair loss, and improvement of hair growth.

이하, 본 발명의 내용을 하기 실시예에서 더욱 상세히 설명하고자 한다. 다만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니고, 그와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail in the following Examples. However, the scope of the present invention is not limited to the following embodiments, and includes modifications of equivalent technical ideas.

[제조예 1: 삼색도장버섯 자실체 추출물의 제조][Preparation Example 1: Preparation of Trichromatic Fruit Fruit Extract]

본 제조예에서는 삼색도장버섯(Daedaleopsis tricolor) 자실체 추출물을 제조하고자 하였다. In this example, three colored mushrooms ( Daedaleopsis tricolor ) fruiting body extracts.

삼색도장버섯(Daedaleopsis tricolor) 자실체를 동결건조하고 분쇄하여 수득한 자실체 분말을 에탄올이 70%(v/v) 함유된 수용액으로 5시간씩 3회 환류추출하였다. 그 후, 냉침하고, 와트만(Whatman) #5 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 50 ℃이하에서 감압농축 및 동결건조시킨 후, 수득한 동결 건조물이 15중량% 함유되도록 부틸렌글리콜에 용해시켜 "삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 부틸렌글리콜 용액. 이하, '삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 샘플'이라 함"을 제조하였다.
Three-color mushroom ( Daedaleopsis tricolor fruiting body was lyophilized and pulverized. The obtained fruiting body powder was subjected to reflux extraction three times for 5 hours in an aqueous solution containing 70% (v / v) ethanol. Then, it was cooled down and filtered with a Whatman # 5 filter paper. The filtered extract was concentrated under reduced pressure and freeze-dried at 50 DEG C or lower, and then dissolved in butylene glycol so that the lyophilized product thus obtained was contained in an amount of 15% by weight to obtain a solution of a tricolor coated mushroom-containing butylene glycol solution A sample containing a fruit body extract "was prepared.

[제조예 2: 삼색도장버섯 균사체 추출물의 제조][Preparation Example 2: Preparation of mycelium extract of tricolor coated mushroom]

본 제조예에서는 삼색도장버섯(Daedaleopsis tricolor) 균사체 추출물을 제조하고자 하였다. In this example, three colored mushrooms ( Daedaleopsis tricolor ) mycelial extracts.

실험에 사용된 삼색도장버섯(Daedaleopsis tricolor) 균주는 신선한 자실체로부터 직접 분리하였으며, 삼색도장버섯 균사체를 효모-맥아즙 한천배지(효모 추출물 3 g, 맥아즙 3 g, 포도당 10 g, 펩톤 5 g, 한천 20 g, 증류수 1 ℓ)가 든 시험관에 사면배양하여 4℃에 보관하고 1개월마다 계대배양하여 사용하였다. The tricolored mushroom ( Daedaleopsis tricolor) strain was isolated directly from fresh fruit bodies, the tri-color coating mushroom mycelium Yeast-Malt Extract agar (yeast extract 3 g, wort 3 g, glucose 10 g, peptone 5 g, agar 20 g, distilled water 1 ℓ) is The slides were incubated at 4 ° C and subcultured every month.

상기 사면배지에서 자란 균사체를 무균적으로 균질화하고, 이를 포도당 3%, 효모 추출물 1.0%를 함유한 단순 복합 배지로 하여, pH 5.5로 조정한 액체배지에 5%(v/v)가 되게 접종한 후, 발효조 내에서 온도 27℃, 회전수 150 rpm, 통기량 1.5 vvm의 조건으로 10일간 배양하였다.The mycelium grown on the slope medium was aseptically homogenized and inoculated into a liquid medium adjusted to pH 5.5 to 5% (v / v) as a simple complex medium containing 3% glucose and 1.0% yeast extract After that, the cells were incubated in a fermenter at a temperature of 27 DEG C, a rotation speed of 150 rpm, and aeration amount of 1.5 vvm for 10 days.

배양 후, 삼색도장버섯(Daedaleopsis tricolor) 균사체를 원심분리를 통해 회수하였다. 그 후, 균사체를 동결건조하고 분쇄하여 균사체 분말을 수득하였으며, 이를 에탄올이 70%(v/v) 함유된 수용액으로 5시간씩 3회 환류추출 및 냉침하고, 와트만(Whatman) #5 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 50 ℃이하에서 감압농축 및 동결건조시킨 후, 수득한 동결 건조물이 15중량% 함유되도록 부틸렌글리콜에 용해시켜 "삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 부틸렌글리콜 용액. 이하 '삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플'이라 함"을 제조하였다.
After incubation, three tricolored mushrooms ( Daedaleopsis tricolor ) mycelium was recovered by centrifugation. Thereafter, the mycelium was lyophilized and pulverized to obtain a mycelial powder, which was subjected to reflux extraction and freezing three times for 5 hours in an aqueous solution containing 70% (v / v) ethanol, followed by filtration with a Whatman # 5 filter paper Filtered. The filtered extract was concentrated under reduced pressure and freeze-dried at 50 DEG C or less, and then dissolved in butylene glycol so that the lyophilized product thus obtained contained 15% by weight to obtain a solution of "a solution of a solution of tricolor coated mushroom mycelium in butylene glycol Quot; referred to as " extract-containing sample ".

[[ 제조예Manufacturing example 3:  3: 삼색도장버섯Tricolored mushroom 균사체 배양액의 수득] Obtaining Mycelial Culture Medium]

본 제조예에서는 삼색도장버섯(Daedaleopsis tricolor) 균사체의 배양으로부터 배양액을 수득하고자 하였다. In this example, three colored mushrooms ( Daedaleopsis tricolor ) mycelial cultures.

실험에 사용된 삼색도장버섯(Daedaleopsis tricolor) 균주는 신선한 자실체로부터 직접 분리하였으며, 삼색도장버섯 균사체를 효모-맥아즙 한천배지(효모 추출물 3 g, 맥아즙 3 g, 포도당 10 g, 펩톤 5 g, 한천 20 g, 증류수 1 ℓ)가 든 시험관에 사면배양하여 4℃에 보관하고 1개월마다 계대배양하여 사용하였다. The tricolored mushroom ( Daedaleopsis tricolor) strain was isolated directly from fresh fruit bodies, the tri-color coating mushroom mycelium Yeast-Malt Extract agar (yeast extract 3 g, wort 3 g, glucose 10 g, peptone 5 g, agar 20 g, distilled water 1 ℓ) is The slides were incubated at 4 ° C and subcultured every month.

상기 사면배지에서 자란 균사체를 무균적으로 균질화하고, 이를 포도당 3%, 효모 추출물 1.0%를 함유한 단순 복합 배지로 하여, pH 5.5로 조정한 액체배지에 5%(v/v)가 되게 접종한 후, 발효조 내에서 온도 27℃, 회전수 150 rpm, 통기량 1.5 vvm의 조건으로 10일간 배양하였다.The mycelium grown on the slope medium was aseptically homogenized and inoculated into a liquid medium adjusted to pH 5.5 to 5% (v / v) as a simple complex medium containing 3% glucose and 1.0% yeast extract After that, the cells were incubated in a fermenter at a temperature of 27 DEG C, a rotation speed of 150 rpm, and aeration amount of 1.5 vvm for 10 days.

배양완료 후, 균사체를 원심분리를 통해 제거한 배양여액을 종이필터 (watman no.4)로 여과하고, 여과된 추출물을 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결건조시킨 후, 수득한 동결 건조물이 5중량% 함유되도록 부틸렌글리콜에 용해시켜 "삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 부틸렌글리콜 용액. 이하, '삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플'이라 함"을 제조하였다.
After completion of the cultivation, the mycelia were removed by centrifugation, and the culture filtrate was filtered with a paper filter (watman no. 4). The filtered extract was concentrated under reduced pressure at 50 ° C or below and lyophilized, Dissolved in butylene glycol to prepare a solution containing a solution of a triple-color coated mushroom mycelium-containing butylene glycol, hereinafter referred to as "a sample containing a culture solution of a mushroom mycelium of three colors".

[실험예 1: NBT을 이용한 항산화 효과 측정][Experimental Example 1: Measurement of antioxidative effect by NBT]

본 실험예에서는 NBT(Nitroblue tetrazolium)법을 이용하여 상기 제조예 1에서 제조한 삼색도장버섯 자실체 추출물, 상기 제조예 2에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 상기 제조예 3에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 배양액의 항산화 효과를 측정하고자 하였다. In this Experimental Example, using the NBT (Nitroblue tetrazolium) method, the three-color coated mushroom fruit body extract prepared in Preparation Example 1, the three-color coated mushroom mycelial extract prepared in Preparation Example 2, and the three- And the antioxidative effect of the culture solution.

NBT(Nitroblue tetrazolium)법은 크산틴과 크산틴옥시다제에 의해 활성산소를 생성시키고, 생성된 활성산소와 니트로블루테트라졸리움(Nitro Blue Tetrazolium;NBT)이 반응하여 생성된 청색을 파장 560 nm에서 측정하는 방법이다. 본 실험예에서는 하기와 같은 방법으로 활성산소 소거율을 측정하였다. 또한, 항산화제로 잘 알려진 비에이치티(butylated hydroxytoluene, BHT)를 양성대조군으로 사용하였다.The NBT (Nitroblue tetrazolium) method generates free radicals by xanthine and xanthine oxidase, and the blue color produced by the reaction of the generated free radicals with Nitro Blue Tetrazolium (NBT) is measured at a wavelength of 560 nm . In this Experimental Example, the active oxygen scavenging rate was measured in the following manner. In addition, butylated hydroxytoluene (BHT), well known as an antioxidant, was used as a positive control.

바이엘병에 0.05 M의 탄산나트륨(Na2CO3) 2.4 ㎖, 3 mM의 크산틴 용액 0.1 ㎖, 3 mM의 EDTA 용액 0.1 ㎖, BSA 용액 0.1 ㎖, 0.72 mM의 NBT 용액 0.1 ㎖를 가하고, 여기에 상기 제조예 1~3에서 제조한 '삼색도장버섯 자실체 함유 샘플', '삼색도장버섯 균사체 함유 샘플', '삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플'을 0.025, 0.05, 0.1, 0.25 중량% 농도로 희석하여 각각 0.1 ㎖씩 첨가한 후, 25℃에서 10분간 방치하였다.2.4 ml of sodium carbonate (Na 2 CO 3 ), 0.1 ml of 3 mM xanthine solution, 0.1 ml of 3 mM EDTA solution, 0.1 ml of BSA solution and 0.1 ml of 0.72 mM NBT solution were added to Bayer's disease, The samples containing the tricolor coated mushroom fruit bodies, the samples containing the tricolor coated mushroom mycelium and the samples containing the tricolor coated mushroom mycelium cultures prepared in Preparation Examples 1 to 3 were diluted to concentrations of 0.025, 0.05, 0.1 and 0.25 wt% 0.1 ml each was added thereto, and the mixture was allowed to stand at 25 占 폚 for 10 minutes.

방치 후, 크산틴옥시다제 용액 0.1 ㎖를 가하여 빠르게 교반한 다음, 25℃에서 20분간 배양 하였고, 여기에 6 mM의 염화구리(CuCl2) 용액 0.1 ㎖를 가하여 반응을 정지시키고 560 nm에서의 흡광도(St)를 측정하였다. After incubation, 0.1 ml of xanthine oxidase solution was added, and the mixture was rapidly stirred. Then, the mixture was incubated at 25 ° C for 20 minutes, and then 0.1 ml of a 6 mM copper chloride (CuCl 2 ) solution was added to stop the reaction. (St).

공시험은 상기 자실체 추출물, 균사체 추출물 및 균사체 배양액 대신 증류수를 사용한 것으로, 상기와 동일한 방법으로 흡광도(Bt)를 측정하였다.The blank test was conducted by using distilled water instead of the above-described fruit body extract, mycelium extract and mycelial culture, and the absorbance (Bt) was measured in the same manner as described above.

시료용액의 블랭크(Blank)는 상기 크산틴옥시다제 용액 대신 증류수를 사용해 상기와 동일한 방법으로 흡광도(Bo)를 측정하였다. 또한, 활성산소 소거율(%)은 하기 수학식 1에 의하여 산출하였으며, 그 결과는 하기 표 1에 나타내었다. The blank of the sample solution was measured for absorbance (Bo) in the same manner as above using distilled water instead of the xanthine oxidase solution. In addition, the active oxygen scavenging ratio (%) was calculated by the following formula (1), and the results are shown in Table 1 below.

Figure 112015055791816-pat00001
Figure 112015055791816-pat00001

St : 시료용액의 효소 반응 후의 560 nm에서의 흡광도St: Absorbance at 560 nm after enzyme reaction of the sample solution

Bt : 공시험용액의 효소 반응 후의 560 nm에서의 흡광도Bt: Absorbance at 560 nm after enzyme reaction in blank test solution

So : 효소 무첨가 시료용액의 560 nm에서의 흡광도So: Absorbance at 560 nm of enzyme-free sample solution

Bo : 효소 무첨가 공시험용액의 560 nm에서의 흡광도
Bo: Absorbance at 560 nm of enzyme-free blank test solution

시료
sample
활성산소 소거율(항산화 효과;%)Active oxygen scavenging rate (antioxidant effect;%)
0.25중량%0.25 wt% 0.1중량%0.1 wt% 0.05중량%0.05 wt% 0.025중량%0.025 wt% 제조예 1
(삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 샘플)
Production Example 1
(Sample containing three colors of mushroom fruit body extract)
9494 8989 6969 4545
제조예 2
(삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플)
Production Example 2
(Sample containing extract of mycelium of mushrooms of tricolor)
9292 8484 6767 3939
제조예 3
(삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플)
Production Example 3
(A sample containing a culture solution of mycelium of three colors of mushroom)
9090 8686 6262 3737
양성대조군(BHT)The positive control (BHT) 8383

실험결과, BHT와 같은 농도에서 삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 삼색도장버섯 균사체 배양액 모두 BHT보다 우수한 항산화효과를 발휘하는 것을 확인할 수 있었다 (표 1).
As a result of the experiment, it was confirmed that the extracts of tricolor coated mushroom fruiting body, tricolor coated mushroom mycelium extract and tricolor coated mushroom mycelium exert more excellent antioxidative effect than BHT at the same concentration as BHT (Table 1).

[실험예 2: DPPH법을 이용한 항산화 효과 측정] [ Experimental Example 2: Measurement of antioxidative effect by DPPH method ]

본 실험예에서는 DPPH법을 이용하여 상기 제조예 1에서 제조한 삼색도장버섯 자실체 추출물, 상기 제조예 2에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 상기 제조예 3에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 배양액의 항산화 효과를 측정하고자 하였다.In this Experimental Example, the antioxidative activity of the tricolor coated mushroom fruit body extract prepared in Preparation Example 1, the tricolor coated mushroom mycelium extract prepared in Preparation Example 2 and the tricolor coated mushroom mycelium prepared in Preparation Example 3 were measured using the DPPH method Respectively.

DPPH법은 DPPH(2,2-Di(4-tert-octylphenyl)-1-picrylhydrazyl free radical)라는 유리기를 사용하여 환원력에 의한 자유라디칼 소거활성을 측정하는 방법으로, 피검물질에 의해 DPPH가 환원되어 흡광도가 감소하는 정도를 공시험액의 흡광도와 비교하여 파장 560 nm에서 자유라디칼 소거율을 측정하였으며, 측정방법은 하기와 같았다. The DPPH method is a method of measuring free radical scavenging activity by reducing power using a free radical called DPPH (2,2-Di (4-tert-octylphenyl) -1-picrylhydrazyl free radical) The degree of decrease of the absorbance was compared with the absorbance of the blank test solution, and the free radical scavenging rate was measured at a wavelength of 560 nm. The measurement method was as follows.

제조예 1~3에서 제조한 '삼색도장버섯 자실체 함유 샘플', '삼색도장버섯 균사체 함유 샘플', '삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플'을 0.025, 0.05, 0.1, 0.25 중량% 농도로 희석하여 각각 96-웰 플레이트에 각각 20 ㎕씩 넣었다. 여기에 100 μM 메탄올 용액으로 제조된 DPPH를 첨가하여 용액의 총 부피가 200 ㎕가 되도록 하였다. 이것을 37℃에서 30분간 방치한 후 560 nm에서 흡광도를 측정하였다. 0.05, 0.1, and 0.25% by weight of the sample containing the three colored mushroom fruiting bodies, the three-color coated mushroom mycelium-containing sample and the three-color coated mushroom mycelium-containing culture liquid prepared in Preparation Examples 1 to 3 were diluted to concentrations of 0.025, 0.05, And 20 [mu] L of each were added to a 96-well plate. To this was added DPPH prepared in 100 μM methanol solution so that the total volume of the solution became 200 μl. After incubation at 37 ° C for 30 minutes, the absorbance was measured at 560 nm.

이때, 자유라디칼 소거활성(%)은 다음의 수학식 2로 산출하였으며, 그 결과는 하기 표 2에 나타내었다. At this time, the free radical scavenging activity (%) was calculated by the following Equation 2, and the results are shown in Table 2 below.

Figure 112015055791816-pat00002
Figure 112015055791816-pat00002

A: 삼색도장버섯 자실체 추출물 또는 균사체 추출물 또는 균사체 배양액을 첨가하지 않은 대조군 웰의 흡광도.A: Absorbance of the control well without the addition of the triple-color coated mushroom extract or mycelium extract or mycelium culture.

B: 삼색도장버섯 자실체 추출물 또는 균사체 추출물 또는 균사체 배양액을 첨가한 실험군 웰의 흡광도.
B: Absorbance of experimental group wells supplemented with tricolor coated mushroom extract or mycelium extract or mycelium culture.

시료
sample
활성산소 소거율(항산화 효과;%)Active oxygen scavenging rate (antioxidant effect;%)
0.25중량%0.25 wt% 0.1중량%0.1 wt% 0.05중량%0.05 wt% 0.025중량%0.025 wt% 제조예 1
(삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 샘플)
Production Example 1
(Sample containing three colors of mushroom fruit body extract)
9393 8686 8282 6161
제조예 2
(삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플)
Production Example 2
(Sample containing extract of mycelium of mushrooms of tricolor)
9090 8888 8383 5959
제조예 3
(삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플)
Production Example 3
(A sample containing a culture solution of mycelium of three colors of mushroom)
9595 8989 8686 6363
양성대조군(BHT)The positive control (BHT) 8585

실험결과, BHT와 같은 농도에서 삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 삼색도장버섯 균사체 배양액 모두 BHT 보다 우수한 항산화 효과를 발휘하는 것을 확인할 수 있었다 (표 2).
As a result, the antioxidative effect of BHT was better than that of BHT (Table 2).

[[ 실험예Experimental Example 3: 자외선 조사 후  3: After UV irradiation 금속단백질분해효소Metalloproteinase (( MMPMMP -1) 발현억제 정도 측정]-1) < / RTI >

본 실험예에서는 상기 제조예 1에서 제조한 삼색도장버섯 자실체 추출물, 상기 제조예 2에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 상기 제조예 3에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 배양액의 자외선 조사 후 금속단백질분해효소(MMP-1) 발현억제 정도를 측정하고자 하였다. In this Experimental Example, the three-color coated mushroom fruit body extract prepared in Preparation Example 1, the three-color coated mushroom mycelium extract prepared in Preparation Example 2, and the three-color coated mushroom mycelial culture prepared in Preparation Example 3, (MMP-1) expression in mice.

UV 조사 후, 제조예 1~3에서 제조한 '삼색도장버섯 자실체 함유 샘플', '삼색도장버섯 균사체 함유 샘플', '삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플'을 0.02, 0.01, 0.005 중량% 농도로 희석하여 각각 0.5 ㎖씩 첨가하였다. 그 후, 금속단백질분해효소(MMP-1) 농도를 측정하기 위해서 효소면역 시험법(ELISA)을 수행하였다.After the UV irradiation, the samples containing the tricolor coated mushroom fruit bodies, the samples containing the tricolor coated mushroom mycelium, and the samples containing the tricolor coated mushroom mycelium cultures prepared in Production Examples 1 to 3 were diluted to concentrations of 0.02, 0.01 and 0.005 wt% 0.5 ml each was added. Then, enzyme immunoassay (ELISA) was performed to measure the concentration of metalloproteinase (MMP-1).

UV 챔버를 이용하여 인간 진피 섬유아세포에 UVA를 6.3 J/cm2의 에너지로 조사하였고, 자외선 조사량과 배양시간은 예비 실험을 통하여 섬유아세포에서 금속단백질분해효소(MMP-1) 발현량이 최대가 되는 조건을 확립하였다. 음성 대조군은 은박지로 싸서 UVA의 환경에 같은 시간 유지하였고, UVA 방출량은 UV 라디오미터를 이용하여 측정하였다. UVA가 조사되는 동안의 세포는 이전에 분주된 배지 그대로이고 UVA를 조사한 후, 샘플이 들어간 배지로 교환하여 24시간 배양한 다음, 배지를 회수하여 96-웰 플레이트에 코팅하였다. 일차항체 MMP-1 (Ab-5) 단일클론항체를 처리하고 37℃에서 60분 동안 반응시켰다. UVA was irradiated to human dermal fibroblasts at an energy of 6.3 J / cm 2 using a UV chamber, and ultraviolet irradiation amount and incubation time were measured in a preliminary experiment to determine the maximum amount of metalloproteinase (MMP-1) Conditions. The negative control was wrapped in silver foil and kept in the UVA environment for the same time, and the UVA emission was measured using a UV radiometer. The cells while UVA was irradiated were irradiated with UVA, and then cultured for 24 hours in a medium containing the sample. Then, the medium was recovered and coated on a 96-well plate. The primary antibody MMP-1 (Ab-5) monoclonal antibody was treated and reacted at 37 ° C for 60 minutes.

이차항체인 안티마우스 IgG(whole mouse, alkaline phosphatase conjugated)를 다시 60분 정도 반응시킨 후, 알카린 포스파타제 기질 용액 1 mg/㎖ (p-nitrophenyl phosphate in diethanolamine 완충용액)을 상온에서 30분간 반응시키고 마이크로플레이트 리더로 405 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조군으로는 시료를 첨가하지 않은 것을 사용하였고, 양성대조군으로는 레티놀을 사용하였으며,하기 수학식 3을 이용하여 MMP-1 발현억제율을 산출하였다. 그 결과는 하기 표 3에 나타내었다. After incubation for 60 minutes with a secondary antibody, anti mouse IgG (alkaline phosphatase conjugated), 1 mg / ml alkaline phosphatase substrate solution (p-nitrophenyl phosphate in diethanolamine buffer) was reacted at room temperature for 30 minutes, Absorbance was measured at 405 nm with a plate reader. As a control group, no sample was used, retinol was used as a positive control group, and MMP-1 expression inhibition was calculated using the following equation (3). The results are shown in Table 3 below.

Figure 112015055791816-pat00003
Figure 112015055791816-pat00003

시료
sample
MMP-1 발현억제율(%)MMP-1 expression inhibition rate (%)
0.02중량%0.02 wt% 0.01중량%0.01 wt% 0.005중량%0.005 wt% 대조군Control group 00 00 00 제조예 1
(삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 샘플)
Production Example 1
(Sample containing three colors of mushroom fruit body extract)
6565 3030 1818
제조예 2
(삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플)
Production Example 2
(Sample containing extract of mycelium of mushrooms of tricolor)
6464 3131 2020
제조예 3
(삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플)
Production Example 3
(A sample containing a culture solution of mycelium of three colors of mushroom)
6767 3232 2323
MMP-1 발현억제율(%)MMP-1 expression inhibition rate (%) 양성대조군(레티놀) 0.02 중량%0.02% by weight positive control (retinol) 3636

실험결과, 시료를 처리하지 않은 대조군에 반해 삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 삼색도장버섯 균사체 배양액 모두 우수한 억제율을 보였는데, 이는 양성대조군인 레티놀의 억제율에 비해서도 우수한 결과를 보이는 것을 확인할 수 있었다 (표 3).
As a result of the experiment, it was confirmed that the three-color coated mushroom fruit body extract, the three-color coated mushroom mycelial extract and the three-color coated mushroom mycelial culture showed excellent inhibition rate compared with the control without sample treatment, which is superior to the inhibition rate of the positive control retinol (Table 3).

[[ 실험예Experimental Example 4: 타입 1  4: Type 1 프로콜라겐Procollagen 생합성 촉진효과 측정] Biosynthesis promoting effect measurement]

본 실험예에서는 프로콜라겐 분석(procollagen assay)을 통하여 상기 제조예 1에서 제조한 삼색도장버섯 자실체 추출물, 상기 제조예 2에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 상기 제조예 3에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 배양액의 피부기질 성분인 타입 1 프로콜라겐의 생합성을 촉진시키는 효과를 확인하고자 하였다.In the present experimental example, the three-color coated mushroom fruit body extract prepared in Preparation Example 1, the three-color coated mushroom mycelium extract prepared in Preparation Example 2, and the three-color coated mushroom mycelium prepared in Preparation Example 3 were obtained through procollagen assay And to promote the biosynthesis of type 1 procollagen, a skin substrate component of the culture solution.

신생아의 표피조직에서 분리한 사람진피섬유아세포(human dermal fibroblast)는 Modern Tissue Technology(MTT, Korea)로부터 분양받아 DMEM/F-12(3:1) 배지에 10% 우태아혈청(FBS)을 첨가하여 1×104 cell/cm2농도로 배양하였다. 80% 정도 자라면 1:3의 비율로 분주하여 계대 배양하였고, 4차 계대 배양된 세포를 실험에 이용하였다.Human dermal fibroblasts isolated from the epidermal tissue of newborns were purchased from Modern Tissue Technology (MTT, Korea) and supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS) in DMEM / F-12 (3: And cultured at a concentration of 1 × 10 4 cells / cm 2 . When 80% of the cells were grown, the cells were subcultured at a ratio of 1: 3, and the fourth subcultured cells were used for the experiment.

프로콜라겐의 양을 측정하는 실험을 위해서 섬유아세포를 48-웰 플레이트(well plate)에 90% 이상 배양한 후, 제조예 1~3에서 제조한 '삼색도장버섯 자실체 함유 샘플', '삼색도장버섯 균사체 함유 샘플', '삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플'을 0.02, 0.01, 0.005 중량% 농도로 희석하여 각각 0.5 ㎖씩 첨가하고, 24시간이 지난 후, 배지 중에 유리된 프로콜라겐의 양을 프로콜라겐타입-1C-펩타이드 EIA 키트(procollagen type-1 C-peptide EIA kit, MK101, Takara, Japan)를 사용하여 측정하였다. 이때, 양성대조군으로 TGF-β를 사용하였다.For the experiment to measure the amount of procollagen, the fibroblasts were cultured in a 48-well plate at a concentration of 90% or more. Then, the samples containing the three-color coated mushroom fruit bodies prepared in Preparation Examples 1 to 3, 0.02, 0.01, and 0.005% by weight of each of the samples containing the mycelium-containing sample and the tricolor coated mushroom mycelium-containing liquid were diluted to 0.5 ml each. After 24 hours, the amount of procollagen liberated in the medium was measured with procollagen Type-1 C-peptide EIA kit (procollagen type-1 C-peptide EIA kit, MK101, Takara, Japan). At this time, TGF-β was used as a positive control.

프로콜라겐 생합성촉진율은 하기 수학식 4을 이용하여 산출하였으며, 그 결과는 하기 표 4에 나타내었다. The promoting rate of procollagen biosynthesis was calculated using the following equation (4), and the results are shown in Table 4 below.

Figure 112015055791816-pat00004
Figure 112015055791816-pat00004

시료
sample
프로콜라겐 생합성촉진효과(%)Promoting effect of procollagen biosynthesis (%)
0.02중량%0.02 wt% 0.01중량%0.01 wt% 0.005중량%0.005 wt% 제조예 1
(삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 샘플)
Production Example 1
(Sample containing three colors of mushroom fruit body extract)
144144 135135 125125
제조예 2
(삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플)
Production Example 2
(Sample containing extract of mycelium of mushrooms of tricolor)
141141 133133 122122
제조예 3
(삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플)
Production Example 3
(A sample containing a culture solution of mycelium of three colors of mushroom)
140140 133133 121121
프로콜라겐 생합성촉진효과(%)Promoting effect of procollagen biosynthesis (%) 양성대조군(TGF-β) 0.001중량%0.001% by weight of positive control (TGF-β) 126126

실험결과, 삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 삼색도장버섯 균사체 배양액은 세포신호전달 물질 TGF-β와 유사한 효과를 나타내었다 (표 4).
As a result, the three-color coated mushroom fruiting body extract, the tricolor coated mushroom mycelium extract and the tricolor coated mushroom mycelial fluid showed similar effects to the cell signaling substance TGF-β (Table 4).

[[ 실험예Experimental Example 5:  5: 엘라스타제Elastase 활성 억제효과 측정] Activity inhibition effect measurement]

본 실험예에서는 상기 제조예 1에서 제조한 삼색도장버섯 자실체 추출물, 상기 제조예 2에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 상기 제조예 3에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 배양액의 엘라스타제 활성 억제효과를 측정하고자 하였다. In this Experimental Example, the effect of inhibiting elastase activity of the tricolor coated mushroom fruit body extract prepared in Preparation Example 1, the tricolor coated mushroom mycelial extract prepared in Preparation Example 2, and the cultured mushroom mycelium prepared in Preparation Example 3 Respectively.

사람의 섬유 아세포를 배양용 플라스크에 넣고 80% 정도 자랄 때까지 배양하였다. 이후, 제조예 1~3에서 제조한 '삼색도장버섯 자실체 함유 샘플', '삼색도장버섯 균사체 함유 샘플', '삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플'을 0.02, 0.01, 0.005 중량% 농도로 희석하여 각각 0.2 ㎖씩 첨가한 후, 세포배양액을 채취하여 상업적으로 이용 가능한 엘라스틴 측정기구를 이용하여 엘라스틴 생성 정도를 측정하였다 (Bieth J: Biochem med., 11, 350-357(1974), Schwartz DE: J.Invest Dermatol., 86, 63-68(1986)). Human fibroblasts were placed in a culture flask and cultured until they grew to about 80%. Thereafter, the samples containing the tricolor coated mushroom fruit bodies, the samples containing the tricolor coated mushroom mycelium, and the sample containing the tricolor coated mushroom mycelium cultures prepared in Preparation Examples 1 to 3 were diluted to concentrations of 0.02, 0.01, and 0.005 wt% 0.2 ml, and the cell culture medium was collected and the degree of elastin production was measured using a commercially available elastin measuring apparatus (Bieth J: Biochem med. , 11, 350-357 (1974), Schwartz DE: J. Invest Dermatol ., 86, 63-68 (1986)).

즉, 엘라스타제의 기질인 'Suc-(Ala) 3 NA'의 NA가 분해되면서 생기는 색의 변화를 흡광도를 이용하여, 엘라스타제의 활성도를 측정하였다. 이때, 삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 삼색도장버섯 균사체 배양액을 처리하지 않은 군을 대조군으로 사용하였으며, 그 결과는 하기 표 5에 나타내었다.
That is, the activity of the elastase was measured using the absorbance of the color change caused by the decomposition of NA of 'Suc- (Ala) 3 NA', an elastase substrate. At this time, the control group was used as a control group in which the three-color coated mushroom fruit body extract, the three-color coated mushroom mycelium extract, and the three-color coated mushroom mycelium were not treated, and the results are shown in Table 5 below.

Figure 112015055791816-pat00005
Figure 112015055791816-pat00005

시료
sample
엘라스타제 활성 억제율(%)Elastase activity inhibition rate (%)
0.02중량%0.02 wt% 0.01중량%0.01 wt% 0.005중량%0.005 wt% 대조군Control group 00 00 00 제조예 1
(삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 샘플)
Production Example 1
(Sample containing three colors of mushroom fruit body extract)
2929 1818 1111
제조예 2
(삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플)
Production Example 2
(Sample containing extract of mycelium of mushrooms of tricolor)
2727 1616 99
제조예 3
(삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플)
Production Example 3
(A sample containing a culture solution of mycelium of three colors of mushroom)
3030 1919 1111

실험결과, 삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 삼색도장버섯 균사체 배양액 모두 농도 의존적으로 엘라스타제의 활성 억제율이 증가하는 것을 확인할 수 있었다 (표 5).
As a result, it was confirmed that the inhibition rate of the elastase activity was increased in a concentration-dependent manner in all of the tricolor coated mushroom fruiting body extract, tricolor coated mushroom mycelial body extract and tricolor coated mushroom mycelial body fluid (Table 5).

[[ 실험예Experimental Example 6:  6: 티로시나제Tyrosinase 활성 억제효과 측정] Activity inhibition effect measurement]

본 실험예에서는 상기 제조예 1에서 제조한 삼색도장버섯 자실체 추출물, 상기 제조예 2에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 상기 제조예 3에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 배양액의 티로시나제 활성 억제효과를 측정하고자 하였다.In this Experimental Example, the effect of inhibiting tyrosinase activity of the tricolor coated mushroom fruit body extract prepared in Preparation Example 1, the tricolor coated mushroom mycelial extract prepared in Preparation Example 2, and the cultured mushroom mycelium prepared in Preparation Example 3 was measured Respectively.

티로시나제는 생체 내에서 티로신(tyrosine)이라는 물질의 산화과정을 촉진하여 멜라닌이 생성되도록 하는 효소이다. 티로시나제는 버섯에서 분리 및 정제된 것으로 시그마(Sigma) 사에서 구입하여 사용하였다.Tyrosinase is an enzyme that stimulates the oxidation of tyrosine in vivo to produce melanin. Tyrosinase was isolated and purified from mushrooms and purchased from Sigma.

기질인 L-티로신은 0.05 M 인산나트륨 완충용액(pH 6.8)에 용해하여 0.1 ㎎/㎖ 용액으로 만들고, 제조예 1~3에서 제조한 '삼색도장버섯 자실체 함유 샘플', '삼색도장버섯 균사체 함유 샘플', '삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플'은 각각 0.05 M 인산나트륨 완충용액(pH 6.8)에 0.005, 0.01, 0.02중량% 농도가 되도록 조절하여 용해한 후, 사용하였다. L-티로신 용액 0.5 ㎖를 시험관에 넣고 여기에 삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 샘플, 삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플 및 삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플 0.5 ㎖를 각각 가하고 37℃ 항온기에서 10분간 방치하였다. 그 후, 200 unit/㎖ 티로시나제 0.5 ㎖를 첨가하고 37℃에서 10분간 반응시켰다. 상기 반응액이 든 시험관을 얼음 위에 놓아 급냉시켜 반응을 중지시킨 후, 분광광도계를 파장 475 nm에서의 흡광도를 측정하였다. The substrate L-tyrosine was dissolved in a 0.05 M sodium phosphate buffer solution (pH 6.8) to prepare a 0.1 mg / ml solution, and the samples containing the tricolor coated mushroom fruit bodies prepared in Preparation Examples 1 to 3, the sample containing the tricolor coated mushroom mycelium , And 'sample containing culture medium of tricolor coated mushroom mycelium' were dissolved in 0.05 M sodium phosphate buffer solution (pH 6.8) at concentrations of 0.005, 0.01 and 0.02 wt%, respectively. 0.5 ml of L-tyrosine solution was put into a test tube, and a sample containing the tricolor mushroom fruiting body extract, a sample containing the tricolor coated mushroom mycelium extract, and a sample containing the tricolor coated mushroom mycelium were added to the test tube, and the mixture was allowed to stand in a thermostat at 37 ° C for 10 minutes. Thereafter, 0.5 ml of 200 units / ml tyrosinase was added, and the mixture was reacted at 37 占 폚 for 10 minutes. The reaction tube was placed on ice to quench the reaction, and the absorbance of the reaction tube was measured with a spectrophotometer at a wavelength of 475 nm.

대조군으로는 삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 샘플, 삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플 및 삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플 대신 완충용액 0.5 ㎖를 넣은 것을 사용하였고, 양성대조군으로는 미백제로 잘 알려진 알부틴을 사용하였다. 또한, 상기 각 시료의 티로시나아제 활성 저해율은 하기 수학식 6에 따라 계산하였으며, 그 결과는 하기 표 6에 나타내었다. As the control group, 0.5 ml of the buffer solution was used instead of the sample containing the tricolor coated mushroom fruit body extract, the sample containing the tricolor coated mushroom mycelium extract and the sample containing the tricolor coated mushroom culture, and albutin, which is well known as a whitening agent, was used. The tyrosinase activity inhibition rate of each of the above samples was calculated according to the following equation (6), and the results are shown in Table 6 below.

Figure 112015055791816-pat00006
Figure 112015055791816-pat00006

시료
sample
티로시나제 저해율(%)Inhibition rate of tyrosinase (%)
0.02중량%0.02 wt% 0.01중량%0.01 wt% 0.005중량%0.005 wt% 대조군Control group 00 00 00 제조예 1
(삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 샘플)
Production Example 1
(Sample containing three colors of mushroom fruit body extract)
5858 4343 2929
제조예 2
(삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플)
Production Example 2
(Sample containing extract of mycelium of mushrooms of tricolor)
5656 4242 3131
제조예 3
(삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플)
Production Example 3
(A sample containing a culture solution of mycelium of three colors of mushroom)
5555 4141 3535
티로시나제 저해율(%)Inhibition rate of tyrosinase (%) 양성대조군(알부틴) 0.2중량%0.2% by weight of positive control (arbutin) 5454

실험결과, 삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 삼색도장버섯 균사체 배양액 모두 알부틴과 유사한 티로시나제 활성 저해율을 나타내었다 (표 6).
As a result, the tyrosinase activity inhibition rate similar to that of arbutin was shown in both of the tricolor coated mushroom fruit body extract, the tricolor coated mushroom mycelium extract and the tricolor coated mushroom mycelium culture (Table 6).

[[ 실험예Experimental Example 7:  7: B16F1B16F1 멜라닌 세포를 이용한 멜라닌 합성 억제효과 측정] Measurement of inhibitory effect on melanin synthesis using melanocytes]

본 실험예에서는 상기 제조예 1에서 제조한 삼색도장버섯 자실체 추출물, 상기 제조예 2에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 상기 제조예 3에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 배양액의 멜라닌 합성 억제효과를 측정하고자 하였다. In this Experimental Example, the effect of inhibiting the melanin synthesis of the tricolor coated mushroom fruit body extract prepared in Preparation Example 1, the tricolor coated mushroom mycelial extract prepared in Preparation Example 2 and the cultured mushroom mycelium prepared in Preparation Example 3 was measured Respectively.

본 실험예에서 사용된 B16F1 멜라노싸이트는 마우스에서 유래한 세포주이며, 멜라닌이라는 흑색색소를 분비하는 세포이다. B16F1 멜라닌 세포의 멜라닌 합성 억제효과 측정은 다음과 같이 수행하였다. B16F1 멜라닌 세포를 6-웰 플레이트에 각 웰당 2×106 농도로 분주하고 세포를 부착시킨 후, 제조예 1~3에서 제조한 '삼색도장버섯 자실체 함유 샘플', '삼색도장버섯 균사체 함유 샘플', '삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플'을 0.02, 0.01, 0.005 중량% 농도로 희석하여 각각 2 ㎖씩 첨가하여 72시간 동안 배양하였다. The B16F1 melanocyte used in this experiment is a mouse-derived cell line and is a cell that secretes melanin, a black pigment. The inhibitory effect of B16F1 melanin on melanin synthesis was measured as follows. B16F1 melanocytes were dispensed in a 6-well plate at a concentration of 2 x 10 6 cells per well and the cells were adhered. Then, the samples containing the tricolor coated mushroom fruit bodies, the samples containing the tricolor coated mushroom mycelium prepared in Preparation Examples 1 to 3, , And 'samples containing cultured mycelium cultures of tricolor coated mushrooms' were diluted to concentrations of 0.02, 0.01 and 0.005 wt%, respectively, and 2 ml of each was added thereto, followed by culturing for 72 hours.

72시간 배양 후, 세포를 트립신-EDTA로 떼어낸 다음, 세포수를 측정한 다음 원심분리하여 세포를 회수하였다. 세포 내 멜라닌의 정량은 로탄(R Lotan and D Lotan, Cancer Res, 40: 3345-3350, 1980)의 방법을 변형하여 하기와 같이 실시하였다. After culturing for 72 hours, the cells were detached with trypsin-EDTA, the number of cells was measured, and the cells were recovered by centrifugation. Quantification of intracellular melanin was carried out as follows by modifying the method of Rotan (R Lotan and D Lotan, Cancer Res, 40: 3345-3350, 1980).

셀 펠릿을 PBS로 1회 세척한 후, 균질화 완충액(50 mM 소듐 포스페이트, pH 6.8, 1% Triton X-100, 2 mM PMSF) 1 ㎖를 첨가하고, 5분간 와류하여 세포를 파쇄하였다. 원심분리(3,000 rpm, 10분)하여 수득한 세포 여액에 1N NaOH(10% DMSO)를 첨가하여 추출된 멜라닌을 용해한 후, 마이크로 플레이트 판독기로 405 nm에서 멜라닌의 흡광도를 측정한 다음, 멜라닌을 정량하여 시료의 멜라닌 생성 저해율(%)을 측정하였다. 또한, 대조군으로 삼색도장버섯 자실체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체 배양액을 첨가하지 않은 것으로 하였고, 양성대조군으로 미백제로 알려진 알부틴을 사용하였다. B16F1 멜라닌 세포의 멜라닌 생성 저해율(%)은 하기 수학식 7에 의하여 계산하였으며, 그 결과는 하기 표 7에 나타내었다. Cell pellets were washed once with PBS and then 1 ml of homogenization buffer (50 mM sodium phosphate, pH 6.8, 1% Triton X-100, 2 mM PMSF) was added and vortexed for 5 minutes to disrupt the cells. After centrifugation (3,000 rpm, 10 min), 1N NaOH (10% DMSO) was added to the obtained cell filtrate to dissolve extracted melanin, and the absorbance of melanin was measured at 405 nm with a microplate reader. To thereby determine the inhibition rate (%) of melanin formation in the sample. As a control, arbutin extract of tricolor coated mushroom, tricolor coated mushroom mycelial extract, or tricolor coated mushroom mycelium was not added. Arbutin known as a whitening agent was used as a positive control. Melanin inhibition rate (%) of B16F1 melanocytes was calculated by the following equation (7), and the results are shown in Table 7 below.

Figure 112015055791816-pat00007
Figure 112015055791816-pat00007

A: 시료를 첨가하지 않은 웰의 멜라닌 양A: Amount of melanin in wells to which no sample was added

B: 시료를 첨가한 웰의 멜라닌 양
B: Amount of melanin in the well to which the sample was added

시료
sample
멜라닌 합성 저해율(%)Melanin synthesis inhibition (%)
0.02중량%0.02 wt% 0.01중량%0.01 wt% 0.005중량%0.005 wt% 대조군Control group 00 00 00 제조예 1
(삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 샘플)
Production Example 1
(Sample containing three colors of mushroom fruit body extract)
6565 5656 4141
제조예 2
(삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플)
Production Example 2
(Sample containing extract of mycelium of mushrooms of tricolor)
6464 5252 4343
제조예 3
(삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플)
Production Example 3
(A sample containing a culture solution of mycelium of three colors of mushroom)
6767 5151 3737
멜라닌 합성 저해율(%)Melanin synthesis inhibition (%) 양성대조군(알부틴) 0.2중량%0.2% by weight of positive control (arbutin) 5555

실험결과, 삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 삼색도장버섯 균사체 배양액은 알부틴과 유사한 멜라닌 합성 저해율을 나타내었다 (표 7).
As a result, the melanin synthesis inhibitory rate similar to that of arbutin was shown in Table 7 (Table 7).

[[ 실험예Experimental Example 8: 염증유발관련 효소( 8: Inflammation inducing enzymes hyaluronidasehyaluronidase ) 활성 억제효과 측정]) Measurement of inhibitory effect]

본 실험예에서는 상기 제조예 1에서 제조한 삼색도장버섯 자실체 추출물, 상기 제조예 2에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 상기 제조예 3에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 배양액의 히알루로니다아제(hyaluronidase) 활성 억제효과를 측정하고자 하였다. In this Experimental Example, the three-color coated mushroom fruit body extract prepared in Preparation Example 1, the three-color coated mushroom mycelium extract prepared in Preparation Example 2, and the hyaluronidase of the cultured mushroom mycelium prepared in Preparation Example 3, Activity inhibition effect.

히알루로니다아제(hyaluronidase)는 히아루론산을 가수분해하는 효소로 염증을 유발하는 효소이다. 본 실험예에서는 히알루로니다아제(hyaluronidase)의 활성을 억제하여 항염증효과를 측정하는 방법(Kakegawa Y: Japanese J. of Inflammation, 4, 437-438, 1984)을 응용해 항염증 효과를 판정하였다. 또한, 양성대조군으로 컴프리 추출물, 시소 추출물, 유용성 감초 추출물을 사용하였다.Hyaluronidase is an enzyme that hydrolyzes hyaluronic acid and causes inflammation. In this experiment, the anti-inflammatory effect was evaluated by the method of measuring the anti-inflammatory effect by inhibiting the activity of hyaluronidase (Kakegawa Y: Japanese J. of Inflammation, 4, 437-438, 1984) . Also, as a positive control, comfrey extract, seiso extract, and useful licorice extract were used.

제조예 1~3에서 제조한 '삼색도장버섯 자실체 함유 샘플', '삼색도장버섯 균사체 함유 샘플', '삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플' 각각의 100 ㎕와 히알루로니다아제 용액(type Ⅳ-S, Sigma, 400 U/㎖) 50 ㎕를 넣고 37℃에서 20분간 반응시킨 후, 효소활성화용액(compound 48/80 CaCl22H2O, Sigma, 0.1 ㎎/㎖)을 100 ㎕ 첨가하고 다시 37℃에서 20분간 반응시켰다. 히아루론산(hyaluronic acid) 용액(0.4 ㎎/㎖)을 250 ㎕ 넣고, 37℃에서 40분간 반응시킨 후, 0.4N NaOH 100 ㎕를 넣어 반응을 종결시켰다. 포타슘보레이트 용액을 100 ㎕ 첨가하여 95℃에서 3분간 반응시키고, 냉각시킨 후, p-디메틸아미노벤즈알데히드 용액을 3 ㎖ 넣고 다시 20분간 37℃에서 반응시킨 후 발색시켰다.100 μl of each of the "samples containing tricolor coated mushroom fruiting bodies", "samples containing tricolor coated mushroom mycelium" and "samples containing the tricolor coated mushroom mycelium culture liquid" prepared in Production Examples 1 to 3 and hyaluronidase solution (type Ⅳ-S 50 μl of Sigma (Sigma, 400 U / ml) was added to the reaction mixture at 37 ° C for 20 minutes. 100 μl of the enzyme activation solution (compound 48/80 CaCl 2 2H 2 O, Sigma, 0.1 mg / ml) For 20 minutes. 250 μl of hyaluronic acid solution (0.4 mg / ml) was added, reacted at 37 ° C for 40 minutes, and then 100 μl of 0.4 N NaOH was added to terminate the reaction. 100 μl of potassium borate solution was added and reacted at 95 ° C for 3 minutes. After cooling, 3 ml of p-dimethylaminobenzaldehyde solution was added and reacted at 37 ° C for 20 minutes for color development.

585 nm에서 흡광도를 측정하여 히알루로니다아제 활성 저해율을 측정하였다. 히알루로니다아제의 활성 저해율(%)은 하기 수학식 8에 의하여 계산하였으며, IC50 값은 히알루로니다아제 효소 활성을 50% 저해하는 물질의 농도이다. The absorbance at 585 nm was measured to determine the hyaluronidase inhibition rate. The activity inhibition rate (%) of hyaluronidase was calculated by the following equation (8), and the IC 50 value is the concentration of the substance inhibiting hyaluronidase activity by 50%.

수학식 8에 의한 결과값은 하기 표 8에 나타내었다. The results of the equation (8) are shown in Table 8 below.

Figure 112015055791816-pat00008
Figure 112015055791816-pat00008

A: 시료를 첨가하지 않은 웰의 효소활성A: Enzyme activity of well without addition of sample

B: 시료를 첨가한 웰의 효소 활성
B: Enzyme activity of the well to which the sample was added

시료명Name of sample 히알루로니다아제 활성 저해효과(IC50;%)Hyaluronidase inhibitory effect (IC 50 ;%) 컴프리 추출물Comfrey extract 0.250.25 시소 추출물Seiso extract 0.500.50 유용성 감초 추출물Usefulness Licorice extract 0.200.20 제조예 1
(삼색도장버섯 자실체 추출물함유 샘플)
Production Example 1
(Sample containing three colors of mushroom fruit body extract)
0.250.25
제조예 2
(삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플)
Production Example 2
(Sample containing extract of mycelium of mushrooms of tricolor)
0.250.25
제조예 3
(삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플)
Production Example 3
(A sample containing a culture solution of mycelium of three colors of mushroom)
0.250.25

실험결과, 삼색도장버섯 자실체 추출물의 IC50값, 삼색도장버섯 균사체 추출물 IC50값 및 삼색도장버섯 균사체 배양액의 IC50값은 항염증제로 잘 알려진 컴프리 추출물, 시소 추출물 및 유용성 감초 추출물과 동등 이상의 효과를 나타내었다 (표 8).
A result, the tri-color coating mushroom fruit body extract of the IC 50 values, the three color coating mushroom mycelium extract IC 50 values and the three color coating mushroom IC 50 value of the mycelium broth is well-known comfrey extract, seesaw extract and the oil-soluble licorice extract and at least equivalent effect as anti-inflammatory agents (Table 8).

[[ 실험예Experimental Example 9: 자외선조사에 의한 세포독성 완화 효과 측정] 9: Measurement of mitigation effect of cytotoxicity by ultraviolet irradiation]

본 실험예에서는 상기 제조예 1에서 제조한 삼색도장버섯 자실체 추출물, 상기 제조예 2에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 상기 제조예 3에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 배양액의 자외선 조사에 의한 세포독성의 완화 효과를 측정하고자 하였다. In this Experimental Example, the cytotoxicity of the three-color coated mushroom fruit body extract prepared in Preparation Example 1, the tricolor coated mushroom mycelium extract prepared in Preparation Example 2 and the cultured mushroom mycelium prepared in Preparation Example 3 by ultraviolet irradiation And to measure the mitigation effect.

섬유아세포(fibroblast)를 24-웰 시험 플레이트에 1x105개씩 넣고 24시간 동안 부착시켰다. 각 웰을 PBS로 1회 세척하고 각 웰에 500 ㎕의 PBS를 넣었다. 이 섬유아세포에 자외선 B(UV B) 램프(Model : F15T8, UV B 15W, Sankyo Dennki사, Japan)를 이용하여 자외선 10 mJ/cm2를 조사한 후, PBS를 덜어내고 세포배양 배지(DMEM에 10% FBS가 첨가된 것) 1 ㎖를 첨가하였다. 여기에 제조예 1~3에서 제조한 '삼색도장버섯 자실체 함유 샘플', '삼색도장버섯 균사체 함유 샘플', '삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플'을 0.02, 0.01, 0.005 중량% 농도로 희석하여 각각 0.1 ㎖씩 첨가한 후, 24시간 동안 배양하였다. Fibroblasts were placed in 24-well test plates at 1 × 10 5 cells and adhered for 24 hours. Each well was washed once with PBS and 500 占 퐇 of PBS was added to each well. After irradiating the fibroblasts with 10 mJ / cm 2 of ultraviolet light using an ultraviolet B (UVB) lamp (Model: F15T8, UVB 15W, Sankyo Dennki Co., Japan), PBS was removed and cultured in a cell culture medium % FBS added) was added. The samples containing the tricolor coated mushroom fruit bodies, the samples containing the tricolor coated mushroom mycelium and the samples containing the tricolor coated mushroom mycelium cultures prepared in Production Examples 1 to 3 were diluted to concentrations of 0.02, 0.01 and 0.005 wt% 0.1 ml was added thereto, followed by culturing for 24 hours.

24시간이 지나면 배지를 제거하고, 각 웰 당 세포배양 배지 500 ㎕와 MTT용액(2.5 ㎎/㎖) 60 ㎕를 넣은 후, 2시간 동안 37℃ CO2 배양기에서 배양하였다. 배양 후, 배지를 제거하고 이소프로판올-HCl(0.04 N)을 500 ㎕씩 넣어주었다. After 24 hours, the medium was removed, and 500 μl of the cell culture medium and 60 μl of MTT solution (2.5 mg / ml) were added to each well, followed by culturing in a 37 ° C. CO 2 incubator for 2 hours. After the culture, the medium was removed and 500 μl of isopropanol-HCl (0.04 N) was added.

그 후, 5분간 진탕하여 세포를 용해시키고, 상등액 100 ㎕씩을 96-웰 시험 플레이트에 옮긴 후, 마이크로플레이트 판독기를 이용하여 565 nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포생존율(%)은 하기 수학식 9에 의해 계산하였고, 자외선에 의한 세포독성 완화율(%)은 하기 수학식 10에 의하여 계산하였으며, 그 값은 하기 표 9에 나타내었다. Then, the cells were lysed by shaking for 5 minutes, and 100 쨉 l of the supernatant was transferred to a 96-well test plate, and the absorbance was measured at 565 nm using a microplate reader. The cell survival rate (%) was calculated by the following equation (9), and the cytotoxic relaxation rate (%) by ultraviolet ray was calculated by the following equation (10).

Figure 112015055791816-pat00009
Figure 112015055791816-pat00009

Bo : 세포배양배지만을 발색 반응한 웰의 565 nm 흡광도Bo: Absorbance at 565 nm of wells reacting with cell culture medium

Bt : 시료를 첨가하지 않은 웰을 발색 반응한 웰의 565 nm 흡광도Bt: Absorbance at 565 nm of wells to which color reaction was performed in wells to which no sample was added

St : 시료를 첨가한 웰을 발색 반응한 웰의 565 nm 흡광도
St: absorbance at 565 nm of wells to which color reaction was performed in wells to which samples were added

Figure 112015055791816-pat00010
Figure 112015055791816-pat00010

Bo : 자외선 조사하지 않고 시료 첨가하지 않은 웰의 세포 생존율Bo: Cell viability of wells not irradiated with ultraviolet light and not added

Bt : 자외선 조사하고 시료를 첨가하지 않은 웰의 세포 생존율Bt: cell viability of wells irradiated with ultraviolet light and not added sample

St : 자외선 조사하고 시료를 첨가한 웰의 세포 생존율
St: Cell viability of wells irradiated with ultraviolet light and added with sample

시료
sample
세포독성 완화율(%)Cytotoxic Relaxation Rate (%)
0.02중량%0.02 wt% 0.01중량%0.01 wt% 0.005중량%0.005 wt% 제조예 1
(삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 샘플)
Production Example 1
(Sample containing three colors of mushroom fruit body extract)
5151 3333 1919
제조예 2
(삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플)
Production Example 2
(Sample containing extract of mycelium of mushrooms of tricolor)
4949 3030 1818
제조예 3
(삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플)
Production Example 3
(A sample containing a culture solution of mycelium of three colors of mushroom)
4444 3535 1818

실험결과, 삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 삼색도장버섯 균사체 배양액은 자외선에 의한 세포 독성을 우수하게 완화하여 자외선에 의한 세포독성을 효과적으로 방어함을 확인할 수 있었다 (표 9).
As a result of the experiment, it was confirmed that the culture of the mushroom fruiting body extract of tricolor coated mushroom, the mushroom mycelial extract of tricolor coated mushroom and the mushroom mycelial culture of the tricolor coated mushroom excellently mitigates cytotoxicity by ultraviolet rays, thereby effectively preventing cytotoxicity by ultraviolet rays (Table 9).

[[ 실험예Experimental Example 10: 자외선 조사에 의한 염증성 사이토카인 발현 억제효과 측정] 10: Measurement of inhibitory effect of inflammatory cytokine expression by ultraviolet irradiation]

본 실험예에서는 상기 제조예 1에서 제조한 삼색도장버섯 자실체 추출물, 상기 제조예 2에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 상기 제조예 3에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 배양액의 자외선 조사에 의해 발현되는 염증성 사이토카인 발현 억제 정도를 측정하고자 하였다. In this Experimental Example, the three-color coated mushroom fruit body extract prepared in Preparation Example 1, the three-color coated mushroom mycelium extract prepared in Preparation Example 2, and the three-color coated mushroom mycelium cultured in Preparation Example 3, And suppression of cytokine expression.

사람의 표피조직에서 분리한 섬유아세포(Fibroblast)를 24-웰 시험 플레이트에 5X104개씩 넣고 24시간 동안 부착시켰다. 각 웰을 PBS로 1회 세척하고 각 웰에 500 ㎕의 PBS를 넣었다. 이 섬유아세포에 자외선B(UVB) 램프(Model : F15T8, UV B 15W, Sankyo Dennki사, Japan)를 이용하여 자외선 10 mJ/cm2를 조사한 후, PBS를 덜어내고 세포배양 배지(DMEM에 FBS가 첨가되지 않은 배지) 350 ㎕를 첨가하였다. 여기에 제조예 1~3에서 제조한 삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 샘플, 삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플 및 삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플을 각각 0.5 ㎖ 첨가한 후, 5시간 동안 배양하였다. Fibroblasts isolated from human epidermal tissue were placed in a 24-well test plate in an amount of 5 × 10 4 and adhered for 24 hours. Each well was washed once with PBS and 500 占 퐇 of PBS was added to each well. After irradiating the fibroblasts with 10 mJ / cm 2 of ultraviolet light using an ultraviolet B (UVB) lamp (Model: F15T8, UVB 15W, Sankyo Dennki, Japan), PBS was removed and the cell culture medium ≪ / RTI > supplemented medium) was added. To each well, 0.5 ml of each of the samples containing the tricolor coated mushroom fruit extract, the sample containing the tricolor coated mushroom mycelium extract, and the sample containing the tricolor coated mushroom mycelium prepared in Production Examples 1 to 3 was added, followed by culturing for 5 hours.

배양 후, 배양 상층액을 150 ㎕ 취하여 'IL-1'를 정량함으로서, 삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 삼색도장버섯 균사체 배양액의 염증성 사이토카인 발현 억제효과를 판단하였다. 'IL-1'의 양은 효소면역분석법(Enzyme-linked Immunosorbent Assay)을 이용하여 정량화하였으며, 'IL-1'의 생성율은 하기 수학식 11에 의해 계산하였다. 그 값은 하기 표 10에 나타내었다.After the incubation, 150 [mu] l of the culture supernatant was measured to determine the effect of inhibiting the inflammatory cytokine expression of the tricolor coated mushroom fruiting body extract, tricolor coated mushroom mycelial body extract and tricolor coated mushroom mycelial body fluid by quantifying 'IL-1'. The amount of 'IL-1' was quantitated using an enzyme-linked immunosorbent assay, and the production rate of 'IL-1' was calculated by the following equation (11). The values are shown in Table 10 below.

Figure 112015055791816-pat00011
Figure 112015055791816-pat00011

Bo : 자외선 조사하지 않고 시료 첨가하지 않은 웰의 IL-1 생성량Bo: IL-1 production amount in wells not irradiated with ultraviolet light and not added to the sample

Bt : 자외선 조사하고 시료를 첨가하지 않은 웰의 IL-1 생성량Bt: IL-1 production amount in wells irradiated with ultraviolet rays and not added samples

St : 자외선 조사하고 시료를 첨가한 웰의 IL-1 생성량
St: IL-1 production in wells irradiated with ultraviolet light and added with sample

시료
sample
염증성 사이토카인 발현 억제율(%)Inhibitory rate of inflammatory cytokine expression (%)
0.02중량%0.02 wt% 0.01중량%0.01 wt% 0.005중량%0.005 wt% 제조예 1
(삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 샘플)
Production Example 1
(Sample containing three colors of mushroom fruit body extract)
3535 2929 2323
제조예 2
(삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플)
Production Example 2
(Sample containing extract of mycelium of mushrooms of tricolor)
3333 2525 1919
제조예 3
(삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플)
Production Example 3
(A sample containing a culture solution of mycelium of three colors of mushroom)
3131 2727 2020

실험결과, 낮은 농도에서도 삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 삼색도장버섯 균사체 배양액은 염증성 사이토카인 발현을 억제하여 자외선에 의한 염증 발생을 효과적으로 억제함을 확인할 수 있었다 (표 10).
The results showed that even at low concentrations, the mushroom extract of tricolor mushroom, the mushroom mycelium extract of tricolor, and the mushroom culture of tricolor coated mushroom suppressed inflammatory cytokine expression, effectively inhibiting the development of inflammation caused by ultraviolet light (Table 10).

[[ 실험예Experimental Example 11: 여드름균에 대한 항균력 측정] 11: Measurement of antibacterial activity against acne bacteria]

본 실험예에서는 페이퍼 디스크 테스트(Paper Disc Test)로 상기 제조예 1에서 제조한 삼색도장버섯 자실체 추출물, 상기 제조예 2에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 상기 제조예 3에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 배양액의 여드름균에 대한 항균력을 확인하고자 하였다. In this experimental example, the three-color coated mushroom fruit body extract prepared in Preparation Example 1, the three-color coated mushroom mycelium extract prepared in Preparation Example 2, and the three-color coated mushroom mycelium prepared in Preparation Example 3 were used in the Paper Disc Test To confirm the antimicrobial activity against the acne bacteria in the culture solution.

먼저, 여드름 발생원인의 피부 상재균인 프로피오니박테리움 아크네(Propionibacterium acnes)를 활성화시키기 위하여 BHI액체배지(Brain-Heart Infusion Broth;3.7%)에서 48시간 전배양하였다. 이렇게 준비한 균 배양액을 BHI 고체배지(Brain-Heart Infusion Broth 3.7%, aggar 1.5%)에 0.1 ㎖씩 도말 한 후, 건조시켰다. 제조예 1~3에서 제조한 삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 샘플, 삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플 및 삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플을 각각 95% 에탄올 수용액에 12%(w/v)로 희석하여 직경 8 mm의 페이퍼 디스크(paper disc)에 50 ㎕씩 점적한 후, 앞서 준비한 고체 배지 위에 올려놓은 후, 이것을 35℃ 혐기 배양조에서 3일간 배양하였다. 페이퍼 디스크(Paper disc) 주변에 생긴 균 성장 저지 영역을 관찰하고 저지환의 크기를 측정함으로써 항균력을 평가하였다. 그 값은 하기 표 11에 나타내었다. First, for activation of Propionibacterium acnes, a skin overgrowth caused by acne, 48 hours pre-culture was carried out in a BHI liquid medium (Brain-Heart Infusion Broth; 3.7%). The bacterial culture thus prepared was plated in 0.1 ml of BHI solid medium (Brain-Heart Infusion Broth 3.7%, aggar 1.5%) and dried. Samples containing the tricolor coated mushroom fruit extract prepared in Preparation Examples 1 to 3, the sample containing the tricolor coated mushroom mycelium extract and the sample containing the mushroom mycelium cultured in the tricolor coated mushroom were diluted to 12% (w / v) in a 95% mm of paper disc, and then placed on the above-prepared solid medium. Then, this was incubated in a 35 ° C anaerobic incubation tank for 3 days. The antimicrobial activity was evaluated by observing the growth inhibition zone around the paper disc and measuring the size of the inhibition zone. The values are shown in Table 11 below.

시료
sample
균 성장 저지환 크기(mm)Bacterial growth inhibition size (mm)
0.02중량%0.02 wt% 0.01중량%0.01 wt% 0.005중량%0.005 wt% 제조예 1
(삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 샘플)
Production Example 1
(Sample containing three colors of mushroom fruit body extract)
1818 1616 1212
제조예 2
(삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플)
Production Example 2
(Sample containing extract of mycelium of mushrooms of tricolor)
1818 1515 1111
제조예 3
(삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플)
Production Example 3
(A sample containing a culture solution of mycelium of three colors of mushroom)
1818 1616 1212

실험결과, 삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 삼색도장버섯 균사체 배양액의 균 성장 저지환의 크기는 0.02중량% 농도에서 18 mm인 것으로 나타나, 본 발명의 화장료 조성물의 우수한 항균력을 확인할 수 있었다 (표 11).
As a result, it was found that the size of the bacterial growth inhibition of the three-color coated mushroom fruiting body extract, the tricolor coated mushroom mycelium extract and the tricolor coated mushroom mycelial culture was 18 mm at a concentration of 0.02 wt%, and the excellent antibacterial activity of the cosmetic composition of the present invention was confirmed (Table 11).

[[ 실험예Experimental Example 12: 12: CompoundCompound 48/80에 의한 아토피 피부염 유발 후  After induction of atopic dermatitis by 48/80 삼색도장버섯Tricolored mushroom 자실체 추출물,  Fruit body extract, 삼색도장버섯Tricolored mushroom 균사체 추출물 및  Mycelium extract and 삼색도장버섯Tricolored mushroom 균사체 배양액의 항염증 효과 측정] Measurement of anti-inflammatory effect of mycelial culture liquid]

본 실험예에서는 Compound 48/80에 의한 아토피 피부염 유발 후, 상기 제조예 1에서 제조한 삼색도장버섯 자실체 추출물, 상기 제조예 2에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 상기 제조예 3의 제조한 삼색도장버섯 균사체 배양액의 항염증 효과를 측정하고자 하였다.In this Experimental Example, after the induction of atopic dermatitis by Compound 48/80, the tricolor coated mushroom fruit body extract prepared in Preparation Example 1, the tricolor coated mushroom mycelial extract prepared in Preparation Example 2, and the tricolor paint To investigate the anti - inflammatory effect of mushroom mycelial culture.

BALB/c 마우스(5 wks, male)의 등 쪽 목 부위 피부의 진피 내로 마리당 30 ㎕의 compound 48/80(Sigma, Co.; 1 ㎎/㎖ in saline)을 주사한 후, 케이지에 집어넣고 60분 동안 마우스가 목을 긁는 행동을 관찰하였다. 삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 삼색도장버섯 균사체 배양액의 항염 치료 효능을 검정하기 위하여 compound 48/80을 주사하기 5일 전부터 제조예 1~3에서 제조한 삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 샘플, 삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플 및 삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플을 250 ㎕/㎖의 농도로 마리당 100 ㎕씩 각각 마우스의 등 쪽 목 부위에 도포하였다. 30 μl of compound 48/80 (Sigma, Co .; 1 mg / ml in saline) was injected into the dermis of dorsal skin of BALB / c mice (5 wks, male) The mice were observed to scratch their neck for a minute. To evaluate the anti-inflammatory efficacy of the three-color coated mushroom fruiting body extract, three-color coated mushroom mycelial extract and three-color coated mushroom mycelium, the samples containing the three-color coated mushroom fruit body extract prepared in Preparation Examples 1 to 3 , A sample containing the mycelium extract of the tricolor coated mushroom and a sample containing the mushroom mycelium culture liquid of the tricolor were applied at a concentration of 250 쨉 l / ml to the dorsal neck of each mouse in an amount of 100 쨉 l per mouse.

도포방법은 5일 동안 하루에 두 번씩 총 10회에 걸쳐 마우스의 등 쪽 목 부위에 도포하여 전처리 한 다음 compound 48/80을 주사한 후, 총 1시간 동안 5분 간격으로 마우스가 뒷발로 목을 긁는 시간을 측정하여 소양증 정도를 측정하였다. 그 값은 하기 표 12에 나타내었다. After application of compound 48/80, the mouse was applied to the dorsal neck of the mouse for 5 minutes at a rate of 5 minutes for 1 hour. Scratching time was measured and the degree of pruritus was measured. The values are shown in Table 12 below.

시료명Name of sample Number of scratching (in 5min) Number of scratching (in 5min) 55 1010 1515 2020 2525 3030 3535 4040 4545 5050 5555 6060 대조군Control group 4040 4242 5151 6363 8989 9595 9999 7373 6060 5151 4141 3333 제조예 1
(삼색도장버섯
자실체 추출물 함유 샘플)
Production Example 1
(Tricolor painted mushroom
Fruit body extract-containing sample)
2121 2222 2626 2828 3030 3333 3535 3939 4242 2525 1515 1313
제조예 2
(삼색도장버섯
균사체 추출물 함유 샘플)
Production Example 2
(Tricolor painted mushroom
Mycelium extract-containing sample)
2222 2424 2525 2828 2929 3232 3434 3737 3939 2222 1212 1010
제조예 3
(삼색도장버섯
균사체 배양액 함유 샘플)
Production Example 3
(Tricolor painted mushroom
Sample containing mycelium culture liquid)
2121 2424 2626 2929 2828 3131 3434 3838 4141 2323 1414 99

실험결과, 삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 삼색도장버섯 균사체 배양액 모두 compound 48/80에 의한 아토피 피부염(피부 소양증) 유발을 억제하는 것을 확인할 수 있었다 (표 12).
As a result, it was confirmed that compound 48/80 inhibited the induction of atopic dermatitis (skin pruritus) in all of the tricolor coated mushroom fruiting body extract, tricolor coated mushroom mycelial extract and tricolor coated mushroom mycelial culture (Table 12).

[[ 실험예Experimental Example 13: 수분 흡습성 측정] 13: Measurement of moisture hygroscopicity]

본 실험예에서는 상기 제조예 1에서 제조한 삼색도장버섯 자실체 추출물, 상기 제조예 2에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 상기 제조예 3에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 배양액의 수분 흡습성을 측정하고자 하였다.In this Experimental Example, the water hygroscopicity of the three-color coated mushroom fruit body extract prepared in Preparation Example 1, the three-color coated mushroom mycelial extract prepared in Preparation Example 2, and the cultured mushroom mycelium prepared in Preparation Example 3 were measured.

사람의 건조 표피세포를 제조예 1~3에서 제조한 삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 샘플, 삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플 및 삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플과 증류수에 각각 포화 흡수시키고 흡수된 물의 양을 측정한 후, 48시간 건조 후의 질량변화를 측정하였다. 각각의 측정된 질량의 변화로부터 피부 세포 단위 질량당 흡수된 물의 양을 비교하였다. 이러한 실험은 표피세포에 흡습되는 물의 양을 비교하기 위한 방법으로 실제 사람의 피부에 있어서도 그 보습효과를 예상할 수 있는 한가지 방법으로 사용되고 있다.Dried epidermal cells were measured by measuring the amount of water absorbed and absorbed by the sample containing the tricolor coated mushroom fruit extract prepared in Production Examples 1 to 3, the sample containing the tricolor coated mushroom mycelium extract and the sample containing the mushroom mycelium cultured in the tricolor coated mushroom and distilled water, respectively And the change in mass after 48 hours of drying was measured. The amount of water absorbed per skin cell unit mass was compared from each measured mass change. This experiment is a method for comparing the amount of water absorbed to the epidermal cells, and is used as one method of predicting the moisturizing effect even in the human skin.

구체적으로, 사람의 표피세포를 건조시켜 단위질량당 함유된 수분의 양을 일정하게 만든 후, 각각의 표피세포 시료의 무게와 함유된 물의 양을 카이저 방법(Kaiser method)을 사용하여 측정하였다. 물의 함량이 측정된 표피세포를 삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 샘플, 삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플 및 삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플 및 정제수에 각각 24시간 담지하여 포화 흡수시켜준 뒤, 세포 내에 물이 포화흡수된 표피세포를 꺼내서 무게를 달고, 일부를 채취하여 카이저 수분 측정기로 함유되어 있는 단위질량당 수분의 양을 측정하였다. Specifically, human epidermal cells were dried to make the amount of water contained per unit mass constant, and then the weight of each epidermal cell sample and the amount of water contained were measured using the Kaiser method. The epidermal cells in which the water content was measured were carried on a sample containing the tricolor coated mushroom fruit body extract, a sample containing the tricolor coated mushroom mycelium extract, and a sample containing the tricolor coated mushroom mycelium and the purified water for 24 hours to saturate and absorb the water, The absorbed epidermal cells were taken out, weighed, and a portion was taken to measure the amount of water per unit mass contained in the Kaiser Moisture Analyzer.

그 후, 다시 48시간 감압건조시키고, 무게를 달고난 후, 일부를 채취하여 카이저 방법에 의해 수분량을 측정하여 함유되어 있는 단위질량당 수분의 양을 측정하였다 (수분 mg/표피세포 질량 g). 그 값은 하기 표 13에 나타내었다. Subsequently, after drying for 48 hours under reduced pressure, the weight was added, and a portion was taken. The water content was measured by the Kaiser method and the amount of water per unit mass was measured (mg of water / epidermal cell mass g). The values are shown in Table 13 below.

시료명Name of sample 수분함량(수분 mg/표피세포 질량 g)Moisture content (mg / epidermal cell mass g) 초기 건조상태Initial dry state 포화상태Saturation 재건조 후After re-drying 정제수 Purified water 400400 780780 400400 제조예 1
(삼색도장버섯
자실체 추출물 함유 샘플)
Production Example 1
(Tricolor painted mushroom
Fruit body extract-containing sample)
400400 800800 620620
제조예 2
(삼색도장버섯
균사체 추출물 함유 샘플)
Production Example 2
(Tricolor painted mushroom
Mycelium extract-containing sample)
400400 810810 610610
제조예 3
(삼색도장버섯
균사체 배양액 함유 샘플)
Production Example 3
(Tricolor painted mushroom
Sample containing mycelium culture liquid)
400400 790790 630630

실험결과, 삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 삼색도장버섯 균사체 배양액으로 포화 흡습시킨 표피세포가 정제수에 의하여 포화 흡습된 표피세포보다 재건조 과정에 있어 훨씬 많은 물을 함유하고 있음을 확인할 수 있었다 (표 13).
As a result of the experiment, it was confirmed that the epidermal cells saturated with the mushroom mycelial extract of tricolor coated mushroom, the mushroom mycelial extract of tricolor coated mushroom, and the mushroom mycelial culture of tricolor showed much more water in the re-drying process than the saturated moisture-absorbed epidermal cells (Table 13).

[[ 실험예Experimental Example 14: 사람 모발 단백질의 결합 효과] 14: Binding Effect of Human Hair Protein]

본 실험예에서는 상기 제조예 1에서 제조한 삼색도장버섯 자실체 추출물, 상기 제조예 2에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 상기 제조예 3에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 배양액의 사람 모발 단백질의 결합 효과를 확인하고자 하였다. In this Experimental Example, the binding effect of the human hair protein of the tricolor coated mushroom fruit body extract prepared in Preparation Example 1, the tricolor coated mushroom mycelial extract prepared in Preparation Example 2, and the cultured mushroom mycelium prepared in Preparation Example 3 Respectively.

사람 모발 케라틴 단백질 50 ㎍에 삼색도장버섯 자실체 추출물, 제조예 1~3에서 제조한 '삼색도장버섯 자실체 함유 샘플', '삼색도장버섯 균사체 함유 샘플', '삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플'을 0.5, 0.25, 0.1 중량%의 시험 농도가 되게 희석하고, 각각 상온에서 30분 동안 반응시킨 후, 6% 과산화수소와 0.5% 암모니아 1:1 혼합 용액으로 처리하여 30분 동안 반응시켰다. 50 [mu] g of human hair keratin protein was mixed with the tricolor coated mushroom fruiting body extract, the sample containing tricolor coated mushroom fruiting body, the sample containing tricolor coated mushroom mycelium and the sample containing the tricolor coated mushroom mycelium prepared in Production Examples 1-3, , 0.25, and 0.1 wt%, respectively. The reaction mixture was reacted at room temperature for 30 minutes, and then treated with a mixed solution of 6% hydrogen peroxide and 0.5% ammonia in a 1: 1 mixed solution for 30 minutes.

반응액을 10% SDS-폴리아크릴아미드 젤에서 램리(Laemmli)의 방법에 따라 전기영동하고, 젤에 있는 케라틴 단백질을 0.1% 쿠마시 블루(Coomassie brilliant blue R 250), 10% 빙초산 및 40% 에탄올의 혼합 용액에서 1시간 동안 염색한 후, 10% 빙초산 및 40% 에탄올의 혼합용액에서 탈색시키고 케라틴 단백질 띠를 확인하였다. 이미지 마스터(Amersham Pharmacia Biotech.) 소프트웨어를 사용하여 50 ㎍의 사람 모발 케라틴 단백질만 전기영동했을 때 나타나는 케라틴 단백질 띠를 100%로 하고, 삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물 또는 삼색도장버섯 균사체 배양액을 첨가하지 않은 군을 대조군으로 비교하여 케라틴 결합 효과를 %로 표시하여 하기 표 14에 나타내었다. The reaction solution was electrophoresed on a 10% SDS-polyacrylamide gel according to the method of Laemmli and the keratin protein in the gel was dissolved in 0.1% Coomassie brilliant blue R 250, 10% glacial acetic acid and 40% ethanol For 1 hour, decolorized in a mixed solution of 10% glacial acetic acid and 40% ethanol, and the keratin protein band was identified. Using the image master (Amersham Pharmacia Biotech.) Software, the keratin protein band appeared when the human hair keratin protein alone was electrophoresed at 50 μg, and the keratin protein band was 100%. The extract of the three mushroom painted mushroom fruit bodies, the mushroom mycelium extract of the three- The results are shown in Table 14 below, in which the keratin binding effect is expressed as a percentage in comparison with the control group in which the culture solution is not added.

시료
sample
모발단백질 결합효과(%)Hair protein binding effect (%)
0.5중량%0.5 wt% 0.25중량%0.25 wt% 0.1중량%0.1 wt% 대조군Control group 100100 제조예 1
(삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 샘플)
Production Example 1
(Sample containing three colors of mushroom fruit body extract)
151151 140140 123123
제조예 2
(삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플)
Production Example 2
(Sample containing extract of mycelium of mushrooms of tricolor)
150150 139139 125125
제조예 3
(삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플)
Production Example 3
(A sample containing a culture solution of mycelium of three colors of mushroom)
149149 137137 120120

실험결과, 삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 삼색도장버섯 균사체 배양액 모두 함량이 증가함에 따라 모발 단백질 케라틴과의 결합 능력도 증가하는 것을 확인할 수 있었다 (표 14).
As a result of the experiment, it was confirmed that the binding ability of hair color protein keratin increases with increasing contents of the tricolor coated mushroom fruiting body extract, tricolor coated mushroom mycelial body extract and tricolor coated mushroom mycelial body fluid (Table 14).

[[ 실험예Experimental Example 15: 모발 성장 효과 시험] 15: Hair growth effect test]

본 실험예에서는 제조예 1에서 제조한 삼색도장버섯 자실체 추출물, 상기 제조예 2에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 제조예 3에서 제조한 삼색도장버섯 균사체 배양액의 모발 성장 효과를 확인하고자 하였다.In this Experimental Example, the hair growth effect of the three-color coated mushroom fruit body extract prepared in Preparation Example 1, the three-color coated mushroom mycelial extract prepared in Preparation Example 2, and the cultured mushroom mycelium prepared in Preparation Example 3 was examined.

상기 제조예 1~3에서 제조한 '삼색도장버섯 자실체 함유 샘플', '삼색도장버섯 균사체 함유 샘플', '삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플'을 2 중량%를 함유하는 30% 함수 에탄올 용액을 각각 제조하여 모발 성장 효과 시험에 사용하였다. 모발 성장 효과 시험은 마우스(ICR), 생후 47~53일 것을 사용하여 등 부위 털을 제거하고, 등 부위가 깨끗한 것을 골라 물질 군 마다 10마리를 사용하여 다음날부터 매일 시험물질을 개체당 100 ㎖씩 도포하였다. 시간 경과에 따른 모발의 길이 및 모발 성장 정도를 모 제거 후, 복원 정도에 따라 점수를 0에서 2까지 부가하여 각각 비교하였다. 모발성장 정도를 비교하기 위하여, 대조군으로는 30% 알코올 용액을 각 개체에 도포하여 성장 상태를 관찰하였다.A 30% strength ethanol solution containing 2% by weight of the "samples containing the tricolor coated mushroom fruit bodies", "samples containing the tricolor coated mushroom mycelium" and "samples containing the tricolor coated mushroom mycelium culture liquid" prepared in Preparation Examples 1 to 3 And used for hair growth effect test. Hair growth test was carried out by using mouse (ICR), 47 ~ 53 days after birth, removing the hairs from the dorsal area, and selecting the back area clean. Using 10 animals per group, 100 ml of test substance per day Respectively. After removing hair length and hair growth degree over time, scores were added from 0 to 2 according to the degree of restoration. In order to compare the degree of hair growth, a 30% alcohol solution was applied to each individual as a control group and the growth state was observed.

또한, 모발성장 촉진 효과 정도를 3등급으로 분류하여 평가하였다 (0:전혀 자라지 않음, 1:약간자람, 2:많이자람). 그 값은 하기 표 15에 나타내었다. The degree of hair growth promoting effect was classified into three grades (0: no growth, 1: slight growth, 2: much growth). The values are shown in Table 15 below.

경과일수Elapsed days 55 1010 1515 대조군Control group 0.070.07 0.130.13 0.800.240.800.24 제조예 1(2중량%)Preparation Example 1 (2% by weight) 0.140.14 0.630.63 1.390.071.390.07 제조예 2(2중량%)Production Example 2 (2% by weight) 0.150.15 0.680.68 1.390.041.390.04 제조예 3(2중량%)Production Example 3 (2% by weight) 0.160.16 0.710.71 1.410.081.410.08

실험결과, 삼색도장버섯 자실체 추출물과 삼색도장버섯 균사체 배양액의 우수한 모발성장 촉진 효과를 확인할 수 있었다 (표 15).
As a result, the excellent hair growth promoting effect of the three-color coated mushroom fruiting body extract and the tricolor coated mushroom mycelial fluid was confirmed (Table 15).

[[ 실시예Example 1 내지 3 및  1 to 3 and 비교예Comparative Example 1:  One: 화장료Cosmetics 조성물의 제조] Preparation of the composition]

본 실시예에서는 상기 제조예 1 내지 3에서 제조한 삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 샘플, 삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플 및 삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플을 함유하는 화장료 조성물을 각각 제조하고자 하였다.In this Example, cosmetic compositions containing the samples containing the tricolor coated mushroom fruit body extract, the sample containing the tricolor coated mushroom mycelial extract, and the sample containing the tricolor coated mushroom mycelial fluid prepared in Production Examples 1 to 3 were prepared.

제조된 화장료는 크림형태이며, 그 조성은 하기 표 16에 나타내었다.The cosmetics prepared are in cream form and their composition is shown in Table 16 below.

우선 하기 표 16의 (나)상을 가열하여 70℃에 보존하였고, (나)상에 (가)상을 가하여 예비 유화 후, 호모믹서로 균일하게 유화하고, 서서히 냉각하여 삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 배양액을 함유하는 화장료 조성물을 제조하였다. 이때, 하기 표 16에 나타낸 바와 같이 제조예 1 내지 3을 함유하지 않는 화장료 조성물을 비교예 1로 하였다.
First, the phase (b) in Table 16 was heated and stored at 70 ° C. The phase (a) was added to the phase (b) to preliminarily emulsify, emulsified uniformly with a homomixer, and slowly cooled to obtain a three- A cosmetic composition containing a three-color coated mushroom mycelium extract and a three-color coated mushroom mycelial culture was prepared. At this time, as shown in the following Table 16, the cosmetic composition containing no Production Examples 1 to 3 was regarded as Comparative Example 1.

원료Raw material 실시예 1
(중량%)
Example 1
(weight%)
실시예 2
(중량%)
Example 2
(weight%)
실시예 3
(중량%)
Example 3
(weight%)
비교예 1
(중량%)
Comparative Example 1
(weight%)
end 스테아릴 알콜Stearyl alcohol 88 88 88 88 스테아린산 Stearic acid 22 22 22 22 스테아린산 콜레스테롤Stearic acid cholesterol 22 22 22 22 스쿠알란Squalane 44 44 44 44 2-옥틸도데실알콜2-octyldodecyl alcohol 66 66 66 66 폴리옥시에틸렌(25몰부가)알콜에스테르Polyoxyethylene (25 mole addition) alcohol ester 33 33 33 33 글리세릴모노스테아린산 아스테르Glyceryl monostearate Aster 22 22 22 22 I 삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 샘플
(제조예 1)
Samples containing tricolor coated mushroom fruit body extract
(Production Example 1)
1One -- -- --
삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플
(제조예 2)
Sample containing extract of mycelium of mushroom of three colors
(Production Example 2)
-- 1One -- --
삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플
(제조예 3)
Samples containing cultures of mycelium of three colors of mushroom
(Production Example 3)
-- -- 1One --
프로필렌글리콜Propylene glycol 55 55 55 55 정제수Purified water to 100to 100

[[ 실험예Experimental Example 16:  16: 화장료Cosmetics 조성물의 피부 탄력 개선효과 측정] Measurement of Skin Elasticity Improvement Effect of Composition]

상기 실시예 1 내지 3 및 비교예 1에서 제조된 화장료 조성물의 피부 탄력 개선효과를 측정하기 위해 실험자 (20세~35세의 여성) 20명을 대상으로 얼굴 오른쪽 부위에는 실시예 1 내지 실시예 3을 얼굴 왼쪽 부위에는 비교예 1을 각각 1일 2회씩 연속 2개월간 도포하였다.In order to measure the skin elasticity-improving effect of the cosmetic composition prepared in Examples 1 to 3 and Comparative Example 1, 20 subjects (20 to 35 years old) And Comparative Example 1 was applied to the left side of the face for 2 consecutive months, twice a day.

피부 탄력 개선효과를 확인하기 위해 제품 사용 전과 2개월간 사용 후에 피부탄력측정기(cutometer SEM 575, C+K Electronic Co., Germany)를 이용하여 측정하였다. 실험결과는 하기 표 17에 'Cutometer SEM 575'의 R7값으로 기재하였는데, R7값은 피부의 점탄성(viscoelasticity)의 성질을 나타낸다 (n=20, p<0.05). To evaluate the effect of skin elasticity improvement, the skin elasticity was measured before use and after 2 months of use with a skin elasticity meter (SEM 575, C + K Electronic Co., Germany). The experimental results are shown in Table 17 below as R7 values of 'Cutometer SEM 575', where R7 values indicate viscoelasticity properties of the skin (n = 20, p <0.05).

실험제품Experimental product 피부탄력효과(R7)Skin elasticity effect (R7) 실시예 1Example 1 0.260.26 실시예 2Example 2 0.240.24 실시예 3Example 3 0.230.23 비교예 1Comparative Example 1 0.120.12

실험결과, 삼색도장버섯 자실체 추출물을 함유하는 실시예 1, 삼색도장버섯 균사체 추출물을 함유하는 실시예 2, 삼색도장버섯 균사체 배양액을 함유하는 실시예 3을 도포한 실험자의 피부 탄력개선효과가 비교예 1 보다 우수한 것을 확인할 수 있었다.The results of the experiment showed that the skin elasticity improving effect of Example 1 containing the tricolor coated mushroom fruiting body extract, Example 2 containing the tricolor coated mushroom mycelium extract, and Example 3 containing the cultured mushroom mycelium of the tricolor coated mushroom, 1. &Lt; / RTI &gt;

상기 결과로부터 본 발명의 화장료 조성물의 우수한 피부 탄력 개선효과를 확인할 수 있었다 (표 17).
From the above results, it was confirmed that the cosmetic composition of the present invention has an excellent skin elasticity improving effect (Table 17).

[[ 실험예Experimental Example 17:  17: 화장료Cosmetics 조성물의 피부 주름 개선효과 측정] Measurement of wrinkle improvement effect of the composition]

상기 실시예 1 내지 3 및 비교예 1에서 제조된 화장료 조성물의 피부 주름 개선효과를 측정하기 위해 실험자 (20세~35세의 여성) 20명을 대상으로 얼굴 오른쪽 부위에는 실시예 1 내지 실시예 3을, 얼굴 왼쪽 부위에는 비교예 1을 각각 1일 2회씩 연속 2개월간 도포하였다. In order to measure the effect of improving the skin wrinkles of the cosmetic composition prepared in Examples 1 to 3 and Comparative Example 1, 20 subjects (20 to 35 years old) , And Comparative Example 1 was applied to the left side of the face twice a day for 2 consecutive months.

피부의 주름개선효과를 알아보기 위하여 제품 사용 전과 2개월간 사용 후에 실리콘 재질의 모사판(replica)을 제작하여 지정 부위의 주름의 상태를 화상분석기인 비지오 미터(visiometer: SV60, C+K Electronic Co., Germany)로 측정하였다. 그 결과는 2개월 후의 각각의 파라미터(parameter) 값에서 2개월 전 파라미터 값을 뺀 것의 평균으로 계산하였다. 즉, 값이 음수가 나올수록 주름 개선효과가 높다는 것을 의미하며, 그 값은 하기 표 18에 나타내었다.To evaluate the effect of wrinkles on the skin, a replica of silicone material was prepared before use and after 2 months of use, and the state of the wrinkles at the designated area was measured with a visiometer (SV60, C + K Electronic Co.) using an image analyzer. , Germany). The result was calculated as the average of the parameter values after 2 months minus the parameter values two months ago. That is, the negative value indicates that the wrinkle improving effect is higher, and the value is shown in Table 18 below.

실험제품Experimental product R1R1 R2R2 R3R3 R4R4 R5R5 실시예 1Example 1 -0.21-0.21 -0.16-0.16 -0.13-0.13 -0.10-0.10 -0.08-0.08 실시예 2Example 2 -0.22-0.22 -0.17-0.17 -0.12-0.12 -0.08-0.08 -0.07-0.07 실시예 3Example 3 -0.20-0.20 -0.18-0.18 -0.11-0.11 -0.09-0.09 -0.06-0.06 비교예 1Comparative Example 1 -0.12-0.12 -0.09-0.09 -0.06-0.06 -0.06-0.06 -0.04-0.04 R1: 주름 등고선의 최고치와 최저치의 차이값
R2: 주름 등고선을 임의로 5칸씩 나눈 후 그 중 R1값 들의 평균
R3: 5개씩 나눈 R1값 중 최고치
R4: 주름 등고선의 기선(baseline)에서 각각의 꼭대기와 계곡의 값을 뺀 평균값
R5: 주름 등고선의 기선에서 각각의 주름 윤곽을 뺀 값의 평균값
R1: Difference between the maximum value and the minimum value of the wrinkle contour line
R2: The wrinkle contour line is arbitrarily divided into 5 squares, and the average of R1 values
R3: Maximum value of R1 divided by 5
R4: Mean value of the baseline of the wrinkle contour minus the value of each apex and valley
R5: Mean value of the value obtained by subtracting the outline of each wrinkle from the base line of the wrinkle contour line

실험결과, 삼색도장버섯 자실체 추출물을 함유한 실시예 1, 삼색도장버섯 균사체 추출물을 함유한 실시예 2, 삼색도장버섯 균사체 배양액을 함유한 실시예 3의 피부 주름 개선효과가 비교예 1 보다 우수함을 확인할 수 있었다.The results of the experiment show that the effect of improving the skin wrinkles of Example 1 containing the tricolor mushroom fruiting body extract, Example 2 containing the tricolor mushroom mycelium extract, and Example 3 containing the tricolor coated mushroom mycelium is superior to Comparative Example 1 I could confirm.

상기의 결과로부터 본 발명의 화장료 조성물의 우수한 주름 개선효과를 확인할 수 있었다 (표 18).
From the above results, it was confirmed that the cosmetic composition of the present invention has excellent wrinkle-improving effect (Table 18).

[[ 실험예Experimental Example 18:  18: 화장료Cosmetics 조성물의 미백효과 측정] Measurement of Whitening Effect of Composition]

본 실험예에서는 상기 실시예 1 내지 3 및 비교예 1에서 제조된 화장료 조성물의 미백효과를 측정하고자 하였다.In this Experimental Example, the whitening effect of the cosmetic compositions prepared in Examples 1 to 3 and Comparative Example 1 was measured.

실험자 (20세~35세의 여성) 20명을 대상으로 얼굴 오른쪽 부위에는 실시예 1 내지 실시예 3을, 얼굴 왼쪽 부위에는 비교예 1을 각각 1일 2회씩 연속 2개월간 도포하였다. Twenty persons (20 to 35 years old female) were applied to Examples 1 to 3 on the right side of the face and Comparative Example 1 on the left side of the face for two consecutive months, twice a day.

2개월 후, 얼굴 좌우 양편의 도포 부위 피부를 화상분석기 및 피부색의 변화를 크로마메타(Minolta CR300)를 이용하여 색의 밝기변화(L)를 측정하고, 복수의 숙련자에 의한 객관적 육안 관찰과 피검자에 의한 주관적 육안관찰을 실시하여 하기 등급 분류에 따라 효과를 측정하였으며, 미백효능 정도를 7등급으로 분류하여 평가하였다(-3: 매우 악화, -2: 악화, -1: 약간 악화, 0: 변화 없음, 1: 약간 개선, 2: 개선, 3: 매우 개선). 그 결과는 하기 표 19에 나타내었다.After two months, the color change (L) of the color was measured using an image analyzer and skin color change using a Minolta CR300, and an objective visual observation with a plurality of expert (-3: severe deterioration, -2: deteriorated, -1: slightly deteriorated, 0: unchanged), and the degree of whitening efficacy was classified into seven grades , 1: slightly improved, 2: improved, 3: highly improved). The results are shown in Table 19 below.

평균값medium 피부색의 밝기 변화(L)Change in skin color brightness (L) 숙련자의 객관적 평가Objective evaluation of expert 피검자의 주관적 평가Subjective evaluation of the subject 실시예 1Example 1 3.03.0 3.03.0 2.82.8 실시예 2Example 2 3.03.0 2.82.8 2.62.6 실시예 3Example 3 3.03.0 2.92.9 2.72.7 비교예 1Comparative Example 1 1.91.9 1.91.9 1.41.4

실험결과, 삼색도장버섯 자실체 추출물을 함유하는 실시예 1, 삼색도장버섯 균사체 추출물을 함유하는 실시예 2, 삼색도장버섯 균사체 배양액을 함유하는 실시예 3은 비교예 1 보다 미백효과가 우수함을 확인할 수 있었다.As a result of the experiment, it was confirmed that Example 1 containing the tricolor coated mushroom fruiting body extract, Example 2 containing the tricolor coated mushroom mycelium extract, and Example 3 containing the tricolor coated mushroom mycelial culture had better whitening effect than Comparative Example 1 there was.

상기의 결과로부터 본 발명의 화장료 조성물의 우수한 미백효과를 확인할 수 있었다 (표 19).
From the above results, it was confirmed that the cosmetic composition of the present invention had excellent whitening effect (Table 19).

[[ 실험예Experimental Example 19:  19: 화장료Cosmetics 조성물의 아토피성 피부염에 대한 개선효과 측정] Measurement of improvement effect on atopic dermatitis of the composition]

본 실험예에서는 상기 실시예 1 내지 3 및 비교예 1에서 제조된 화장료 조성물의 아토피성 피부염에 대한 개선효과를 측정하고자 하였다.In this experiment, the effect of the cosmetic composition prepared in Examples 1 to 3 and Comparative Example 1 on the atopic dermatitis was evaluated.

25~30세의 아토피 환자로서, 2년 이상 아토피성 피부염을 앓고 있는 환자 30명에 대하여 아토피성 피부염 개선효과를 조사하였다. 동일인에게 왼쪽 손에는 실시예 1 또는 실시예 3을, 오른쪽 손에는 비교예 1을 매일 저녁 세정 후, 피부에 1일 1회 60일간 도포하고 아토피성 피부염 상태 개선 정도를 측정하였다. 측정은 설문조사에 의한 관능평가로 실시하였으며, 그 결과는 하기 표 20에 나타내었다. We investigated the improvement of atopic dermatitis in 30 patients with atopic dermatitis of at least two years. In the same person, Example 1 or Example 3 was applied to the left hand and Comparative Example 1 was applied to the right hand every evening after washing the skin every day for 60 days once a day, and the improvement degree of the atopic dermatitis condition was measured. The measurement was carried out by sensory evaluation by questionnaire, and the results are shown in Table 20 below.

매우 좋다very good 좋다good 그저 그렇다so so 실시예 1Example 1 70%(21명)70% (21 people) 30%(9명)30% (9 people) 0%0% 실시예 2Example 2 80%(24명)80% (24 people) 20%(6명)20% (6 people) 0%0% 실시예 3Example 3 70%(21명)70% (21 people) 30%(9명)30% (9 people) 0%0% 비교예 1Comparative Example 1 10%(3명)10% (3 people) 30%(9명)30% (9 people) 60%(18명)60% (18 persons)

실험결과, 삼색도장버섯 자실체 추출물이 함유된 실시예 1, 삼색도장버섯 균사체 추출물이 함유된 실시예 2, 삼색도장버섯 균사체 배양액이 함유된 실시예 3이 비교예 1 보다 아토피성 피부개선효과가 우수하다는 사실을 확인할 수 있었다.As a result of the experiment, it was found that Example 1 containing the tricolor coated mushroom fruiting body extract, Example 2 containing the tricolor coated mushroom mycelium extract, and Example 3 containing the tricolored mushroom mycelial culture showed better atopic skin improvement I was able to confirm the fact.

상기의 결과로부터 본 발명의 화장료 조성물의 우수한 아토피성 피부염 개선효과를 확인할 수 있었다 (표 20).
From the above results, it was confirmed that the cosmetic composition of the present invention has an excellent atopic dermatitis improving effect (Table 20).

[[ 실험예Experimental Example 20:  20: SLS에SLS 의한 피부 자극 완화효과 측정] &Lt; / RTI &gt;

본 실험예에서는 상기 실시예 1 내지 3에서 제조된 화장료 조성물의 자극 완화 효과를 인체 첩포 실험으로 평가하였다.In this Experimental Example, the stimulation relaxation effect of the cosmetic composition prepared in Examples 1 to 3 was evaluated by a human skin patch test.

일반적 화장품 처방(크림, 로션, 스킨, 에센스)에 자극을 일으키는 SLS(sodium lauryl sulfate) 1%와 실시예 1 또는 실시예 3의 화장료를 혼용하여 24시간, 48시간, 72시간 동안 첩포한 후, 자극 유발지수를 바탕으로 자극완화 효과를 평가한 것이다.After 1% of sodium lauryl sulfate (SLS) causing irritation to general cosmetic formulations (cream, lotion, skin, essence) was mixed with cosmetic materials of Example 1 or Example 3 for 24 hours, 48 hours and 72 hours, Based on the stimulation index, the effect of stimulation relaxation was evaluated.

20~50세의 건강한 남녀 50명의 팔 상박 부위에 'FINN CHAMBER(FINLAND)'를 이용하여 제품을 0.3 mg씩 첩포하고, 24시간 후 급성 자극 지수를 평가하였다. 평가 후 재차 동일한 부위에 동량의 제품을 첩포하고 48시간 및 72시간 후의 지연성 자극 지수를 평가하였다.The product was sprayed with 0.3 mg of FINN CHAMBER (FINLAND) on the upper arm of 50 healthy male and female 20 to 50 year olds, and the acute irritation index was evaluated after 24 hours. After the evaluation, the same amount of product was applied again to the same site again, and the delayed irritation index after 48 hours and 72 hours was evaluated.

실험결과, SLS를 단독으로 첩포한 부분은 24시간 후부터 피부에 붉게 자극이 나타났으나, 삼색도장버섯 자실체 추출물을 함유하는 실시예 1, 삼색도장버섯 균사체 추출물을 함유하는 실시예 2 및 삼색도장버섯 균사체 배양액을 함유하는 실시예 3은 첩포하고 24시간, 48시간, 72시간 경과 후에도 아무런 피부 발작을 일으키지 않았다.As a result of the experiment, the area where the SLS was applied alone showed irritation on the skin after 24 hours, Example 1 containing the tricolor coated mushroom fruit body extract, Example 2 containing the tricolor coated mushroom mycelium extract, and tricolor painted mushroom Example 3 containing the mycelial culture solution did not cause any skin attack even after 24 hours, 48 hours, and 72 hours after the patch.

상기의 결과로부터 삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물 및 삼색도장버섯 균사체 배양액이 화장료에 혼용되었을 때 자극을 유발시키는 기재(계면 활성제, 향, 알콜)에 의한 피부 자극을 감소시킬 수 있다는 사실을 확인할 수 있었다.
From the above results, it can be seen that skin irritation caused by stimulants (surfactant, fragrance, alcohol) can be reduced when the culture of the tricolor coated mushroom fruiting body, the tricolor coated mushroom mycelium extract and the tricolor coated mushroom mycelium are mixed in cosmetics .

[[ 실시예Example 4 내지 6 및  4 to 6 and 비교예Comparative Example 2:  2: 피부외용제Skin external medicine 조성물의 제조] Preparation of the composition]

본 실시예에서는 상기 제조예 1 내지 3에서 제조한 삼색도장버섯 자실체 추출물 함유 샘플, 삼색도장버섯 균사체 추출물 함유 샘플 및 삼색도장버섯 균사체 배양액 함유 샘플을 함유하는 피부외용제 조성물을 제조하고자 하였다. In this Example, a composition for external application for skin containing the samples containing the tricolor coated mushroom fruit body extract, the sample containing the tricolor coated mushroom mycelium extract, and the sample containing the tricolor coated mushroom mycelium culture liquid prepared in Production Examples 1 to 3 was prepared.

제조된 피부 외용제는 크림형태이며, 그 조성은 하기 표 21에 나타내었다.The prepared external preparation for skin is in cream form and its composition is shown in Table 21 below.

우선, 하기 표 21의 (나)상을 가열하여 70℃에 보존하였고, (나)상에 (가)상을 가하여 예비 유화 후, 호모믹서로 균일하게 유화하고, 서서히 냉각하여 삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 배양액을 함유하는 피부 외용제 조성물을 제조하였다. 이때, 하기 표 21에 나타낸 바와 같이 제조예 1 내지 3을 함유하지 않는 피부 외용제 조성물을 비교예 2로 하였다.
First, the phase (b) shown in Table 21 below was heated and stored at 70 ° C. The phase (a) was added to the phase (b) to preliminarily emulsify the emulsion, homogeneously emulsified with a homomixer, and gradually cooled to obtain a three- , Tricolor coated mushroom mycelium extract, and tricolor coated mushroom mycelial culture was prepared. At this time, as shown in the following Table 21, the composition for external application for skin which does not contain Preparative Examples 1 to 3 was regarded as Comparative Example 2.

원료Raw material 실시예 4
(중량%)
Example 4
(weight%)
실시예 5
(중량%)
Example 5
(weight%)
실시예 6
(중량%)
Example 6
(weight%)
비교예 2
(중량%)
Comparative Example 2
(weight%)
end 세토스테아릴알코올Cetostearyl alcohol 2.02.0 2.02.0 2.02.0 2.02.0 글리세릴스테아레이트Glyceryl stearate 1.51.5 1.51.5 1.51.5 1.51.5 마이크로크리스탈린Microcrystalline 0.70.7 0.70.7 0.70.7 0.70.7 스쿠알렌Squalene 5.05.0 5.05.0 5.05.0 5.05.0 유동파라핀Liquid paraffin 3.03.0 3.03.0 3.03.0 3.03.0 폴리솔베이트Polysorbate 1.21.2 1.21.2 1.21.2 1.21.2 솔비탄스테아레이트Sorbitan stearate 0.50.5 0.50.5 0.50.5 0.50.5 토코페릴아세테이트Tocopheryl acetate 0.20.2 0.20.2 0.20.2 0.20.2 사이클로메치콘Cyclomethicone 3.03.0 3.03.0 3.03.0 3.03.0 BHTBHT 0.050.05 0.050.05 0.050.05 0.050.05 I 제조예1Production Example 1 1One -- -- -- 제조예2Production Example 2 -- 1One -- -- 제조예3Production Example 3 -- -- 1One -- 1,3-부틸렌글리콜1,3-butylene glycol 55 55 55 55 EDTA-2NaEDTA-2Na 0.020.02 0.020.02 0.020.02 0.020.02 정제수Purified water to 100to 100

[실험예 21: 여드름 치료 및 개선 효능 확인][Experimental Example 21: Acne treatment and improvement efficacy]

본 실험예에서는 상기 실시예 4 내지 6 및 비교예 2에서 제조된 피부 외용제 조성물의 여드름에 대한 치료 및 개선효과를 확인하고자 하였다.In this experimental example, the effects of the external preparation for skin prepared in Examples 4 to 6 and Comparative Example 2 on acne were examined.

붉은 여드름과 화농성 여드름을 동반한 여드름 환자 30명을 대상으로 30일간 여드름 개선효과를 조사하였다. 각 10명씩 실시예 4 내지 6에서 제조된 피부외용제를 각각 여드름 부위에 문질러 바르게 하고, 이틀에 한 번씩 여드름의 상태를 육안으로 점검하였다. 얼굴 부분을 2분할하여 한쪽은 시험군으로서 또 다른 한쪽은 대조군으로 비교예 2를 적용하였다. 여드름 염증에 대한 치료 효과의 평가 기준은 하기의 5단계를 이용하였는데, 얼굴 전체에 대하여 평가하였다.
30 acne patients with red acne and purulent acne were studied for 30 days. Each of the 10 external skin preparations prepared in Examples 4 to 6 was rubbed on the acne area, and the condition of the acne was visually checked every two days. The face part was divided into two parts, and the other part was applied as the test group and the control group 2 was applied as the control group. The evaluation criteria for the acne inflammation were evaluated using the following 5 steps.

0 : 여드름의 염증을 확인하지 못한 경우;0: Failure to confirm acne inflammation;

1 : 여드름 염증이 대조군에 비하여 80% 회복된 경우;1: acne inflammation is recovered by 80% compared to the control;

2 : 여드름 염증이 대조군에 비하여 50% 회복된 경우;2: acne inflammation was recovered by 50% compared with the control;

3 : 여드름 염증이 대조군에 비하여 30% 회복된 경우; 및3: acne inflammation is recovered by 30% compared to the control; And

4 : 여드름 염증이 대조군에 비하여 전혀 회복되지 않은 경우.
4: Acne inflammation is not recovered at all compared to the control.

각 평점의 평균을 산출하여 하기 표 22로 나타냈다. 평점의 평균 산출방법은 2일 간격으로 시험군과 대조군의 여드름 염증 상태를 10명에 대하여 측정하여 0 ~ 4 중 해당되는 단계를 정한 후, 합산하여 평점을 계산하였다.The average of each rating was calculated and shown in Table 22 below. The mean score was calculated by evaluating acne inflammation status of test group and control group in 10 days at intervals of 2 days, calculating 0 ~ 4 steps and adding up the scores.

실시예 4Example 4 실시예 5Example 5 실시예 6Example 6 비교예 2Comparative Example 2 평점grade 1.91.9 1.61.6 1.71.7 3.63.6

실험결과, 삼색도장버섯 자실체 추출물이 함유된 실시예 4, 삼색도장버섯 균사체 추출물이 함유된 실시예 5, 삼색도장버섯 균사체 배양액이 함유된 실시예 6이 비교예 2보다 여드름 개선효과가 우수하다는 사실을 확인할 수 있었다.As a result of the experiment, it was found that Example 4 containing the tricolored mushroom fruiting body extract, Example 5 containing the tricolored mushroom mycelium extract and Example 6 containing the tricolored mushroom mycelium culture showed better acne improvement effect than Comparative Example 2 .

상기의 결과로부터 본 발명의 피부 외용제 조성물의 우수한 여드름 개선효과를 확인할 수 있었다 (표 22).
From the above results, it was confirmed that the composition for external application for skin of the present invention has excellent acne improvement effect (Table 22).

[[ 실험예Experimental Example 22: 아토피 치료 및 개선 효능 확인]  22: Atopy treatment and improvement efficacy confirmation]

본 실험예에서는 상기 실시예 4 내지 6 및 비교예 2에서 제조된 피부 외용제 조성물의 아토피성 피부염에 대한 치료 및 개선효과를 확인하고자 하였다.In this experiment, the effects of the composition for external application for skin prepared in Examples 4 to 6 and Comparative Example 2 on atopic dermatitis were investigated.

25~30세의 아토피 환자로서, 2년 이상 아토피성 피부염을 앓고 있는 환자 30명에 대하여 아토피성 피부염 개선효과를 조사하였다. 동일인에게 왼쪽 손에는 실시예 4 또는 실시예 6을, 오른쪽 손에는 비교예 2를 매일 저녁 세정 후, 피부에 1일 1회 60일간 도포하고 아토피성 피부염 상태 개선 정도를 측정하였다. 측정은 설문조사에 의한 관능평가로 실시하였으며, 그 결과는 하기 표 23에 나타내었다. We investigated the improvement of atopic dermatitis in 30 patients with atopic dermatitis of at least two years. The same person applied Example 4 or Example 6 on the left hand and Comparative Example 2 on the right hand after washing the skin every evening for 60 days once a day to measure the degree of improvement of the atopic dermatitis condition. The measurement was carried out by sensory evaluation by questionnaire, and the results are shown in Table 23 below.

매우 좋다very good 좋다good 그저 그렇다so so 실시예 4Example 4 80%(21명)80% (21 people) 20%(9명)20% (9 people) 0%0% 실시예 5Example 5 80%(24명)80% (24 people) 20%(6명)20% (6 people) 0%0% 실시예 6Example 6 70%(21명)70% (21 people) 30%(9명)30% (9 people) 0%0% 비교예 2Comparative Example 2 10%(3명)10% (3 people) 40%(12명)40% (12 people) 50%(15명)50% (15 people)

실험결과, 삼색도장버섯 자실체 추출물이 함유된 실시예 4, 삼색도장버섯 균사체 추출물이 함유된 실시예 5, 삼색도장버섯 균사체 배양액이 함유된 실시예 6이 비교예 2보다 아토피성 피부개선효과가 우수하다는 사실을 확인할 수 있었다.As a result of the experiment, it was found that Example 4 containing the tricolored mushroom fruiting body extract, Example 5 containing the tricolored mushroom mycelium extract and Example 6 containing the tricolored mushroom mycelial culture showed better atopic skin improvement than Comparative Example 2 I was able to confirm the fact.

상기의 결과로부터 본 발명의 피부 외용제 조성물의 우수한 아토피성 피부염 개선효과를 확인할 수 있었다 (표 23). From the above results, it was confirmed that the composition for external application for skin of the present invention is excellent in improving atopic dermatitis (Table 23).

Claims (20)

삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물, 및 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액 중 어느 하나를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 여드름 개선용 화장료 조성물.
A cosmetic composition for improving acne characterized by comprising an effective ingredient selected from the group consisting of a fruity body extract of tricolor coated mushroom, a mushroom mycelial extract of tricolor, and a culture solution obtained by culturing mycelia of tricolor coated mushroom.
삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물, 및 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액 중 어느 하나를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 아토피 피부 개선용 화장료 조성물.
A cosmetic composition for improving atopic skin, characterized by containing as an active ingredient any one of a fruity body extract of tricolor coated mushroom, a mushroom mycelial extract of tricolor coated mushroom, and a culture solution obtained by culturing mycelia of tricolor coated mushroom.
삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물, 및 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액 중 어느 하나를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 모발 손상 방지용 화장료 조성물.
A cosmetic composition for preventing damage to hair, characterized in that it contains, as an active ingredient, any one of a fruity body extract of tricolor painted mushroom, a mushroom mycelial extract of tricolor painted mushroom, and a culture liquid obtained by culturing mycelia of tricolor painted mushroom.
삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물, 및 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액 중 어느 하나를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 탈모방지 및 육모 개선용 화장료 조성물.
A cosmetic composition for preventing hair loss and hair growth, which comprises as an active ingredient any one of a three-color coated mushroom fruit body extract, a three-color coated mushroom mycelial extract, and a culture liquid obtained by culturing mycelia of three-color coated mushroom.
삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물, 및 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액 중 어느 하나를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 여드름 예방 및 치료용 피부외용제 조성물.
A composition for external application for skin for the prevention and treatment of acne, which comprises, as an active ingredient, any one of a three-color coated mushroom fruit body extract, a three-color coated mushroom mycelial extract, and a culture solution obtained by culturing mycelia of three-
삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물, 및 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액 중 어느 하나를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 아토피 예방 및 치료용 피부외용제 조성물.
A composition for external skin application for the prevention and treatment of atopy, which comprises, as an active ingredient, any one of a three-color coated mushroom fruit body extract, a three-color coated mushroom mycelium extract, and a culture liquid obtained by culturing the three-
삼색도장버섯 자실체 추출물, 삼색도장버섯 균사체 추출물, 및 삼색도장버섯 균사체를 배양하여 수득한 배양액 중 어느 하나를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 염증질환 예방 및 치료용 피부외용제 조성물.

A composition for external application for skin for the prevention and treatment of inflammation diseases, which comprises, as an active ingredient, any one of a three-color coated mushroom fruit body extract, a three-color coated mushroom mycelium extract, and a culture liquid obtained by culturing the three-

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