KR101523663B1 - A composition for preventing or treating fatty liver disease or obesity, comprising a extract of Arctium lappa Linne, Glycyrrhiza uralensis Fischer, Zingiberis rhizoma Crudus and Magnoliae Cortex - Google Patents

A composition for preventing or treating fatty liver disease or obesity, comprising a extract of Arctium lappa Linne, Glycyrrhiza uralensis Fischer, Zingiberis rhizoma Crudus and Magnoliae Cortex Download PDF

Info

Publication number
KR101523663B1
KR101523663B1 KR1020130069063A KR20130069063A KR101523663B1 KR 101523663 B1 KR101523663 B1 KR 101523663B1 KR 1020130069063 A KR1020130069063 A KR 1020130069063A KR 20130069063 A KR20130069063 A KR 20130069063A KR 101523663 B1 KR101523663 B1 KR 101523663B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
extract
obesity
fatty liver
ginger
fat
Prior art date
Application number
KR1020130069063A
Other languages
Korean (ko)
Other versions
KR20140146407A (en
Inventor
마진열
송광훈
김동건
권혜은
이지혜
김태수
Original Assignee
한국 한의학 연구원
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 한국 한의학 연구원 filed Critical 한국 한의학 연구원
Priority to KR1020130069063A priority Critical patent/KR101523663B1/en
Publication of KR20140146407A publication Critical patent/KR20140146407A/en
Application granted granted Critical
Publication of KR101523663B1 publication Critical patent/KR101523663B1/en

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/28—Asteraceae or Compositae (Aster or Sunflower family), e.g. chamomile, feverfew, yarrow or echinacea
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • A61K36/484—Glycyrrhiza (licorice)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/57—Magnoliaceae (Magnolia family)
    • A61K36/575—Magnolia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/906—Zingiberaceae (Ginger family)
    • A61K36/9068—Zingiber, e.g. garden ginger
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/331—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using water, e.g. cold water, infusion, tea, steam distillation, decoction
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

본 발명은 우방자(Arctium lappa Linne), 감초(Glycyrrhiza uralensis Fischer), 생강(Zingiberis rhizoma Crudus) 및 후박(Magnoliae Cortex)의 혼합 생약 추출물을 포함하는, 지방간 질환 또는 비만의 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 또는 지방간 질환 또는 비만의 예방 또는 개선용 식품 조성물; 및 상기 약학적 조성물을 이용한 지방간 질환 또는 비만의 치료 방법에 관한 것이다. The present invention relates to a pharmaceutical composition for preventing or treating fatty liver disease or obesity, which comprises a mixed herbal extract of Arctium lappa Linne, Glycyrrhiza uralensis Fischer, Ginger ( Zingiberis rhizoma Crudus) and Magnoliae Cortex , Or a food composition for preventing or ameliorating fatty liver disease or obesity; And a method for treating fatty liver disease or obesity using the pharmaceutical composition.

Description

우방자, 감초, 생강 및 후박의 혼합 생약 추출물을 포함하는, 지방간 질환 또는 비만의 예방 또는 치료용 조성물{A composition for preventing or treating fatty liver disease or obesity, comprising a extract of Arctium lappa Linne, Glycyrrhiza uralensis Fischer, Zingiberis rhizoma Crudus and Magnoliae Cortex}TECHNICAL FIELD The present invention relates to a composition for prevention or treatment of fatty liver disease or obesity, which comprises a herbal extract of a herbal composition, a herb, a licorice, a ginger and a mixture of herbal extracts, Zingiberis rhizoma Crudus and Magnoliae Cortex}

본 발명은 우방자(Arctium lappa Linne), 감초(Glycyrrhiza uralensis Fischer), 생강(Zingiberis rhizoma Crudus) 및 후박(Magnoliae Cortex)의 혼합 생약 추출물을 포함하는, 지방간 질환 또는 비만의 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 또는 지방간 질환 또는 비만의 예방 또는 개선용 식품 조성물; 및 상기 약학적 조성물을 이용한 지방간 질환 또는 비만의 치료 방법에 관한 것이다.
The present invention relates to a pharmaceutical composition for preventing or treating fatty liver disease or obesity, which comprises a mixed herbal extract of Arctium lappa Linne, Glycyrrhiza uralensis Fischer, Ginger ( Zingiberis rhizoma Crudus) and Magnoliae Cortex , Or a food composition for preventing or ameliorating fatty liver disease or obesity; And a method for treating fatty liver disease or obesity using the pharmaceutical composition.

최근 경제적 발전과 식습관 등의 변화에 따라 비만, 지방간 등 다양한 질환의 발병이 급증하고 있는 상황이다. 지방간이란, 정상 간에서 지방이 차지하는 비율(5%)보다 많은 양의 지방이 간에 축적된 증상을 의미한다. 상기 지방간은 크게 과음으로 인한 알코올성 지방간과 비만, 당뇨병, 고지혈증, 약물 등으로 인한 비알코올성 지방간으로 나눌 수 있는데, 알코올성 지방간은 알코올을 많이 섭취하게 되면 간에서 지방 합성이 촉진되고 정상적인 에너지 대사가 이루어지지 않아 발생하고, 비알코올성 지방간은 알코올 이외의 원인으로 인하여 발생한다. 상기 비알코올성 지방간은 지방 대사의 이상을 초래하는 성인병에 동반되는 경우가 빈번한 것으로 알려져 있으며, 특히 비알코올성 지방간 질환(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)은 가장 흔한 간질환의 하나로서 간에 지방이 축적되어 발생하며, 이 질환은 염증에 더 민감하게 반응하게 하여 간의 기능을 저하시키게 된다. NAFLD는 심각한 문제로서 대두되고 있지만 아직까지 그 치료약이 부족한 실정으로, 비만, 인슐린 과민증, 당뇨병 등을 앓고 있는 사람들에게서 많이 발생하는 것으로 알려져 있다. 상기 질환의 경우, 인슐린 저항성이나 과도한 지방 분해에 의해 혈액 내 유리 지방산의 농도가 높아지므로, 이로부터 NAFLD가 발병할 수 있다.Recently, various diseases such as obesity and fatty liver have been increasing rapidly due to changes in economic development and eating habits. Fatty liver means that the amount of fat accumulated in the liver is higher than the proportion of fat in the normal liver (5%). The fatty liver may be divided into alcoholic fatty liver due to excessive drinking, non-alcoholic fatty liver due to obesity, diabetes, hyperlipemia, drug, etc. Alcoholic fatty liver promotes lipid synthesis and normal energy metabolism in liver And non-alcoholic fatty liver is caused by causes other than alcohol. Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) is one of the most common liver diseases, and liver fat accumulation is the most common. , Which causes the disease to react more sensitively to inflammation, thereby lowering liver function. NAFLD has emerged as a serious problem, but it is still lacking in its therapeutic drugs and is known to occur in people suffering from obesity, insulin hypersensitivity, diabetes and the like. In the case of the above diseases, the concentration of free fatty acid in the blood increases due to insulin resistance or excessive fat decomposition, thereby resulting in NAFLD.

알코올성 지방간의 경우에는, 알코올의 섭취를 억제함으로써, 증상의 완화 또는 호전을 기대할 수 있는 반면, 비알코올성 지방간의 경우에는 뚜렷한 발병원인이 밝혀져 있지 않아, 상대적으로 치료에 어려움을 겪고 있다. 이에 비알코올성 지방간을 치료할 수 있는 제제를 개발하려는 다양한 연구가 수행되고 있으나, 표적 기관인 간은 다양한 약물의 해독과정이 수행되는 기관이기 때문에, 안전성을 확보하기 위하여 약리활성을 향상시키지 않은 약물의 경우에는 간세포를 치료하기도 전에 분해되고, 치료효과를 향상시키기 위하여 약리활성을 증가시킨 약물의 경우에는 간세포가 손상될 수 있다는 어려움이 있어, 별다른 치료방법이 제시되지 못하고 있는 실정이다.
In the case of alcoholic fatty liver, it is expected that the alleviation or improvement of the symptoms can be expected by suppressing the intake of alcohol, while the cause of the non - alcoholic fatty liver is not well known and relatively difficult to treat. Various studies have been conducted to develop a drug capable of treating a non-alcoholic fatty liver. However, since the target liver is an organ in which a process of detoxifying various drugs is performed, in the case of a drug that does not improve pharmacological activity in order to secure safety In the case of drugs that have been degraded before treatment of hepatocytes and have increased pharmacological activity in order to improve the therapeutic effect, hepatocytes may be damaged, and therefore, no specific treatment method has been proposed.

비만은, 고혈압, 당뇨병, 심혈관계질환 등의 만성질환을 유발하는 것으로 널리 알려져 있으며, 최근 보건복지가족부의 2007년 국민건강ㆍ영양조사결과에 의하면 한국 성인의 31.7%가 비만으로 나타났다. 또한, 전 세계 인구의 약 25%에 해당하는 17억 명이 현재 과체중(BMI> 25)이고, 미국, 유럽, 일본 등 주요 국가들의 1억2천 명을 포함한 서구지역 3억 명 이상이 비만환자(BMI> 30)로 분류되고 있다. 중국은 7천만 명이 비만인구인 것으로 알려져 있으며, 세계적으로는 어린이 5명 중 1명이 소아비만에 해당되며 급속도로 증가하고 있어 소아비만이 심각한 사회문제로 대두되고 있는 상황이다. 국내외에서 판매되는 비만치료제로는 미 FDA에서 승인을 받은 orlistat을 주원료로 하는 '제니칼'이 있는데, 리파아제작용을 억제하는 제니칼의 경우 지방변, 가스생성, 지용성비타민 흡수저하 등의 위장계 부작용이 있다. 따라서, 안정성을 확보할 수 있으면서도 비만 치료 효과가 있는 물질의 개발이 필요하다.
Obesity is widely known to cause chronic diseases such as hypertension, diabetes and cardiovascular diseases. According to the 2007 National Health and Nutrition Examination Survey of the Ministry of Health, Welfare and Family Affairs, 31.7% of Korean adults were obese. In addition, 1.7 billion people, or about 25% of the world's population, are currently overweight (BMI> 25), and more than 300 million people in the western region, including the United States, Europe and Japan, BMI> 30). In China, 70 million people are known to be obese. One in five children in the world are obese and rapidly increasing, making childhood obesity a serious social problem. As a treatment for obesity that is marketed at home and abroad, there is "Xenical", which is the main ingredient of orlistat approved by the US FDA. In the case of Xenical inhibiting the lipase action, there are gastrointestinal side effects such as fat side, gas production and degradation of fat soluble vitamin. Therefore, it is necessary to develop a substance that can achieve stability and yet have the effect of treating obesity.

이러한 배경 하에, 본 발명자들은 지방간 및 비만을 효과적으로 치료하면서도, 천연물에서 유래되어 안전성을 확보할 수 있는 약물을 개발하기 위하여 예의 노력한 결과, 우방자, 감초, 생강 및 후박의 혼합 생약 추출물의 경우, 상기 생약 단독에 비하여 현저히 우수한 지방 축적 억제 효과를 나타내어 우수한 지방간 치료 효과를 나타낼 뿐만 아니라, 고지방 섭취에 의한 체중 증가를 효과적으로 감소시킴을 확인하였다. 이에, 상기 혼합 생약 추출물을 지방간 질환 및 비만의 예방 또는 치료에 효과적으로 사용할 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.
Under these circumstances, the inventors of the present invention have made intensive efforts to develop a drug derived from a natural product and capable of ensuring safety while effectively treating fatty liver and obesity. As a result, in the case of a herbal medicine extract of a mixture of Wisteria, licorice, ginger, It showed a remarkable superior fat accumulation inhibitory effect as compared with the single fat diet, and showed not only excellent fatty liver treatment effect but also effective reduction of weight gain due to high fat intake. Thus, it has been confirmed that the herbal medicine extract can be effectively used for prevention or treatment of fatty liver disease and obesity, and the present invention has been completed.

본 발명의 하나의 목적은 우방자(Arctium lappa Linne), 감초(Glycyrrhiza uralensis Fischer), 생강(Zingiberis rhizoma Crudus) 및 후박(Magnoliae Cortex)의 혼합 생약 추출물을 포함하는, 지방간 질환 또는 비만의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.One object of the present invention is to provide a method for preventing or treating fatty liver disease or obesity, which comprises a mixed herbal extract of Arctium lappa Linne, Glycyrrhiza uralensis Fischer, Ginger ( Zingiberis rhizoma Crudus) and Magnoliae Cortex To provide a pharmaceutical composition.

본 발명의 다른 목적은 우방자, 감초, 생강 및 후박의 혼합 생약 추출물을 포함하는, 지방간 질환 또는 비만의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a food composition for preventing or ameliorating fatty liver disease or obesity, which comprises a herbal medicine extract of a mixture of an alopecia, a licorice, a ginger and a horsetail.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 혼합 생약 추출물을 지방간 질환 및 비만 의심 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 지방간 질환 또는 비만의 치료 방법을 제공하는 것이다.
Yet another object of the present invention is to provide a method for treating fatty liver disease or obesity, which comprises the step of administering the mixed herbal extract to fatty liver disease and obese individuals.

상기의 목적을 달성하기 위한 하나의 양태로서, 본 발명은 우방자(Arctium lappa Linne), 감초(Glycyrrhiza uralensis Fischer), 생강(Zingiberis rhizoma Crudus) 및 후박(Magnoliae Cortex)의 혼합 생약 추출물을 포함하는, 지방간 질환 또는 비만의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
In one aspect to accomplish the above object, the present invention relates to a method for the treatment of fatty liver disease, including a mixed herbal extract of Arctium lappa Linne, Glycyrrhiza uralensis Fischer, Zingiberis rhizoma Crudus and Magnoliae Cortex , A pharmaceutical composition for preventing or treating diseases or obesity is provided.

본 발명에서 용어 "우방자(Arctium lappa Linne)"란, 국화과에 속한 우엉의 성숙한 종자를 건조한 것이다. 우엉은 높이가 1.5m 정도로서 줄기는 위에서 가지가 갈라지고 뿌리는 굵고 길게 자라는 것으로 알려져 있다. 우방자는 풍과 열을 발산시키고 열을 내리고 해독하는 효능과 함께 폐를 윤택하게 하는 것으로 알려져 있다. 본 발명에서 사용되는 상기 우방자는 자연에서 채취된 것으로 사용하거나, 상업적으로 판매되는 것을 구입할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In the present invention, the term " Arctium lappa Linne "is a dried mature seed of burdock belonging to the family Asteraceae. The burdock is about 1.5m high, and the stem is divided from the upper branch, and the roots are known to grow thick and long. It is known that a friend is enriching the lungs with the efficacy of releasing the heat and the heat and deciphering the wind and heat. The wanderer used in the present invention may be purchased from nature, or commercially available, but is not limited thereto.

본 발명에서 용어 "감초(Glycyrrhiza uralensis Fischer)"란, 국로(國老), 미초(美草), 밀감(蜜甘), 밀초(蜜草), 영통(靈通), 첨초(甛草)라고도 명칭되는 식물이다. 상기 감초는 겉껍질은 적갈색이나 암갈색을 띠며 세로로 주름이 있고 때때로 피목, 싹눈 및 비늘잎이 붙어 있으며, 특이한 냄새가 나고 맛이 달고, 러시아(시베리아), 이란, 아프가니스탄, 파키스탄, 중국(감숙성, 신강성), 몽골에서 자라며 우리나라에서 재배하거나 자생하는 식물을 의미한다. 한방에서는 모든 약의 독성을 조화시켜서 약효가 잘 나타나게 하며 장부의 한열과 사기를 다스리고 모든 혈맥의 소통을 잘 시키며 근육과 뼈를 튼튼히 하는데 사용되어 왔다. 본 발명에서 사용되는 감초는 자연에서 채취하거나, 상업적으로 판매되는 것을 구입할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In the present invention, the term " Glycyrrhiza uralensis Fischer "is also referred to as Kuniyu, Micho, . The licorice is reddish brown or dark brown with vertical wrinkles, occasionally shrubs, buds and scaly leaves, unusual odor and flavor, and Russia (Siberia), Iran, Afghanistan, Pakistan, China It is a plant that grows in Mongolia and grows or grows in Korea. It has been used to harmonize the toxicity of all medicines in one room, to make medicinal effects appear better, to control the heat and scent of the books, to communicate all blood vessels, and to strengthen muscles and bones. Licorice used in the present invention can be collected from nature or commercially available, but is not limited thereto.

본 발명에서 용어 "생강(Zingiberis Rhizoma Crudus)"이란, 뿌리줄기가 옆으로 자라고 다육질이며 덩어리 모양이고 황색이며 매운맛과 향긋한 냄새가 있으며, 뿌리줄기의 각 마디에서 잎집으로 만들어진 가짜 줄기가 곧게 서고 높이가 30∼50cm에 달하며 윗부분에 잎이 2줄로 배열되며, 잎은 어긋나고 줄 모양의 바소꼴이며 양끝이 좁고 밑 부분이 긴 잎집이 되는 형태의 식물의 뿌리줄기를 의미한다. 한방에서는 건강으로도 명명되며, 뿌리줄기 말린 것을 약재로 사용한다. 이는 감기로 인한 오한, 발열, 두통, 구토, 해수, 가래를 치료하고, 식중독으로 인한 복통설사 등에도 효과가 있다고 알려져 왔다. 본 발명에서 사용되는 생강은 자연에서 채취하거나, 상업적으로 판매되는 것을 구입할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In the present invention, the term "ginger ( Zingiberis Rhizoma Crudus)" means that the rootstock grows sideways and is fleshy, lumpy, yellowish, with a spicy and fragrant smell, with fake stalks made of sheaths straight at each node of the rootstock, It is 30 ~ 50cm long and is composed of 2 rows of leaves on the upper part. It is a rhizome of a plant in which the leaves are alternate, bar-shaped with a narrow line, narrow on both ends and long on the bottom. In one room, it is named as health, and dried roots are used as medicines. It has been known to treat chills, fever, headache, vomiting, seawater and sputum caused by a cold, as well as diarrhea caused by food poisoning. The ginger used in the present invention can be collected from nature or commercially available, but is not limited thereto.

본 발명에서 용어 "후박(Magnoliae Cortex)"이란, 후박나무의 줄기껍질을 의미한다. 상기 후박은, 맛은 쓰고, 성질은 따뜻한 특성이 있으며, 한방에서는 소화불량, 가래, 천식 등의 치료에 사용되어 왔다. 본 발명에서 사용되는 후박은 자연에서 채취하거나, 상업적으로 판매되는 것을 구입할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
In the present invention, the term " Magnoliae Cortex " The pasta has a characteristic taste and a warm characteristic, and has been used for treatment of indigestion, sputum, asthma and the like. The starch used in the present invention can be collected from nature or commercially available, but is not limited thereto.

본 발명의 조성물은 상기 우방자, 감초, 생강 및 후박의 혼합 생약 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하며, 상기 4가지 생약 성분을 모두 포함함으로써 단독 추출물이 나타낼 수 없는, 지방간 질환 및 비만에 대한 현저한 치료 효과를 나타낸다.
The composition of the present invention is characterized by containing herbal extracts of the mixture of the above-mentioned alopecia, licorice, ginger and haggis, and the remarkable therapeutic effect on fatty liver disease and obesity .

본 발명에서 용어, "혼합 생약 추출물"은 식물과 같은 천연물들을 혼합한 다음, 하나 이상의 용매로 추출하여 수득한 추출물의 형태이거나 천연물 각각을 용매로 추출하여 수득한 추출물들을 서로 혼합한 형태를 의미한다. 본 발명에서 상기 우방자, 감초, 생강 및 후박의 혼합 생약 추출물은 "KIOM-2012H"와 혼용될 수 있다. 본 발명에서 상기 혼합 생약 추출물은 우방자, 감초, 생강 및 후박의 혼합물을 추출 용매로 추출한 것이거나, 우방자 추출물, 감초 추출물, 생강 추출물 및 후박 추출물을 서로 혼합한 형태일 수 있다. 나아가 상기 우방자, 감초, 생강 및 후박으로 이루어지는 군으로부터 선택된 하나 이상의 생약을 서로 혼합하여 이를 용매로 추출한 다음, 나머지 생약 추출물과 혼합하여 제조할 수 있다. The term "mixed herbal medicine extract" in the present invention means a form of an extract obtained by mixing natural products such as plants, followed by extraction with one or more solvents, or a mixture of extracts obtained by extracting each natural product with a solvent . In the present invention, the crude herbal medicine extract of the above-mentioned Wisteria, licorice, ginger and horsetail can be mixed with "KIOM-2012H ". In the present invention, the mixed herbal medicine extract may be one obtained by extracting a mixture of a supernatant, licorice, ginger and horsetail with an extraction solvent, or a mixture of a herringbone extract, licorice extract, ginger extract and horsetail extract. Further, the herbal medicine may be prepared by mixing one or more herbal medicines selected from the group consisting of the above-mentioned supernatant, licorice, ginger and horseradish, and extracting it with a solvent, followed by mixing with the remaining herbal medicine extract.

상기 혼합 생약 추출물의 제조에 사용되는 용매로는 물, 탄소수 1(C1) 내지 탄소수 4(C4) 알코올, 바람직하게는 메탄올, 에탄올 또는 부탄올, 또는 이들의 혼합 용매를 사용할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 추출방법으로는 용매 추출, 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출, 초음파 추출, 또는 증기 추출 등의 방법을 사용할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
As the solvent used for the preparation of the mixed herbal medicine extract, water, a C 1 to C 4 alcohol, preferably methanol, ethanol or butanol, or a mixed solvent thereof may be used. However, It does not. Examples of the extraction method include, but are not limited to, solvent extraction, hot water extraction, cold extraction, reflux extraction, ultrasonic extraction, or steam extraction.

본 발명에서 용어, "지방간(fatty liver)"은, 정상 간에서 지방이 차지하는 비율(5%)보다 많은 양의 지방이 간에 축적된 증상을 의미한다. 상기 지방간은 크게 과음으로 인한 알코올성 지방간과 비만, 당뇨병, 고지혈증 또는 약물 등으로 인한 비알코올성 지방간으로 분류될 수 있다. 알코올성 지방간은 알코올을 많이 섭취하게 되면 간에서 지방 합성이 촉진되고 정상적인 에너지 대사가 이루어지지 않아 발생하고, 비알코올성 지방간은 알코올 이외의 원인으로 인하여 발생하며, 상기 비알코올성 지방간은 지방 대사의 이상을 초래하는 성인병에 동반되는 경우가 빈번한 것으로 알려져 있다.The term "fatty liver " in the present invention means a symptom in which the amount of fat accumulated in the liver is greater than the proportion of fat in the normal liver (5%). The fatty liver can be classified into nonalcoholic fatty liver due to alcoholic fatty liver and obesity due to excessive drinking, diabetes, hyperlipidemia or drugs and the like. Alcoholic fatty liver is caused by the promotion of fat synthesis in the liver and normal energy metabolism is not achieved when a large amount of alcohol is consumed. Non-alcoholic fatty liver occurs due to causes other than alcohol, and the nonalcoholic fatty liver causes abnormal fat metabolism Are often accompanied by adult diseases.

본 발명에서 용어 "비알코올성 지방간"이란, 상기 지방간 중에서 알코올 이외의 원인으로 인하여 발생하는 지방간을 의미한다. 이는 전체 지방간의 57%를 차지하고, 대체로 지방 대사의 이상을 초래하는 성인병에 동반되는 경우가 빈번한 것으로 알려져 있다. 이러한 성인병에 동반되는 원인 중 하나는 과도한 탄수화물의 섭취 및 이로 인하여 발생하는 비만인 것으로 알려져 있으며, 실제로 비알코올성 지방간이 발병된 환자의 75%가 비만환자라고 보고된 바 있다.The term "nonalcoholic fatty liver" in the present invention means a fatty liver caused by causes other than alcohol in the above-mentioned fatty liver. It is known that 57% of the total fatty liver is frequently accompanied by adult diseases that cause abnormal fat metabolism. One of the causes of these diseases is known to be the excessive intake of carbohydrates and the resulting obesity. In fact, 75% of patients with nonalcoholic fatty liver disease have been reported to be obese.

본 발명에서 용어, "비만"은 체지방 또는 지방조직이 체내에 과다하게 축적되어 있는 상태를 말하며, 일반적인 비만의 기준은 자신의 정상체중(표준제중)의 20%를 초과했을 때를 말하며, 최근에는 진단장비의 발전으로 인해 체지방량을 기준으로 볼 때, 남자는 체지방량이 25% 이상, 여자는 30% 이상을 비만으로 보고 있다. 이외에 체질량지수(BMI)와 허리둘레 (waist circumference), 그리고 체지방지수가 비만지표로 많이 사용되고 있다.
In the present invention, the term "obesity" refers to a state in which body fat or fat tissue is excessively accumulated in the body, and the standard of obesity generally refers to when it exceeds 20% of its normal weight (in standard) In terms of body fat mass due to the development of diagnostic equipment, men consume more than 25% body fat and over 30% obese women. In addition, body mass index (BMI), waist circumference, and body fat index are often used as an indicator of obesity.

본 발명에서 용어, "예방"이란, 상기 약학적 조성물의 투여로 지방간 질환 또는 비만의 발병을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미한다. 또한, "치료"란, 상기 약학적 조성물의 투여로 지방간 질환 또는 비만의 증세가 호전되거나 이롭게 변하는 모든 행위를 의미한다.
The term "prevention" in the present invention means any action which inhibits or delays the onset of fatty liver disease or obesity by the administration of the pharmaceutical composition. In addition, "treatment" means any action in which the symptom of fatty liver disease or obesity is improved or changed by the administration of the pharmaceutical composition.

상기 본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 허용 가능한 희석제, 부형제 또는 담체를 추가로 포함할 수 있다. The pharmaceutical composition of the present invention may further comprise a pharmaceutically acceptable diluent, excipient or carrier.

약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 상기 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테로 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.The composition comprising a pharmaceutically acceptable carrier can be of various oral or parenteral formulations. In the case of formulation, a diluent or excipient such as a filler, an extender, a binder, a wetting agent, a disintegrant, or a surfactant is usually used. Solid formulations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules, and the like, which may contain one or more excipients such as starch, calcium carbonate, sucrose or lactose lactose, gelatin and the like. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate, talc, and the like are also used. Liquid preparations for oral administration include suspensions, solutions, emulsions, syrups and the like. Various excipients such as wetting agents, sweeteners, fragrances, preservatives and the like may be included in addition to water and liquid paraffin, which are simple diluents commonly used. have. Formulations for parenteral administration include sterilized aqueous solutions, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, freeze-dried preparations, and suppositories. Examples of the non-aqueous solvent and the suspending agent include propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, and injectable ester such as ethyl oleate. Examples of the suppository base include witepsol, macrogol, tween 61, cacao paper, laurin, glycerogelatin and the like.

상기 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여할 수 있다. The pharmaceutical composition may be administered in a pharmaceutically effective amount.

본 발명에서 용어, "투여"란 어떠한 적절한 방법으로 개체에게 본 발명의 약학적 조성물을 도입하는 것을 의미하며, 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한, 경우 또는 비 경구의 다양한 경로를 통하여 투여될 수 있으며, 구체적으로, 구강, 직장, 국소, 정맥 내, 복강 내, 근육 내, 동맥 내, 경피, 비측 내, 흡입 또는 피 내 경로를 통하여 통상적인 방식으로 투여될 수 있다.The term "administering" in the present invention means introducing the pharmaceutical composition of the present invention into a subject by any appropriate method, and the administration route of the composition may be varied depending on the case, And may be administered in a conventional manner via oral, rectal, topical, intravenous, intraperitoneal, intramuscular, intraarterial, transdermal, intranasal, inhalation or intradermal routes.

본 발명에서 용어, "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 개체 종류 및 중증도, 연령, 성별, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 또한, 상기 조성물은 쥐, 가축, 인간 등의 다양한 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁 내 경막 또는 뇌혈관 내(Intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.The term "pharmaceutically effective amount" as used herein means an amount sufficient to treat a disease at a reasonable benefit / risk ratio applicable to medical treatment, and an effective dose level will vary depending on the species and severity, age, sex, Activity, sensitivity to the drug, time of administration, route and rate of excretion, duration of treatment, factors including co-administered drugs, and other factors well known in the medical arts. The composition of the present invention may be administered as an individual therapeutic agent or in combination with other therapeutic agents, and may be administered sequentially or simultaneously with conventional therapeutic agents. And can be administered singly or multiply. It is important to take into account all of the above factors and to administer the amount in which the maximum effect can be obtained in a minimal amount without adverse effect, and can be easily determined by those skilled in the art. In addition, the composition can be administered to a variety of mammals, including rats, livestock, humans, and the like, by a variety of routes. All modes of administration may be expected, for example, by oral, rectal or intravenous, intramuscular, subcutaneous, intra-uterine or intracerebroventricular injection.

본 발명의 일 실시예에서는, 우방자, 감초, 생강 및 후박의 혼합 생약 추출물(KIOM-2012H)를 제조하였고(실시예 1), 상기 혼합 생약 추출물이 세포 독성을 나타내지 않으면서도(도 2), 간 조직 내에 지방 축적을 효과적으로 억제함을 확인하였다(도 3 및 4). 또한, 상기 혼합 생약 추출물이 지방산 합성에 관여하는 FAS 및 SREBP-1c의 mRNA 수준을 유의적으로 감소시키며, CD36의 발현을 현저히 감소시켜 세포 내로의 지방 유입을 감소시킴을 확인하였다(도 5 및 6). 또한, 상기 혼합 생약의 25% 에탄올 추출물 및 열수 추출물 모두 지방산 축적을 억제하였고(도 7), 특히 우방자, 감초, 생강, 후박 단독 추출물에 비하여 상기 우방자, 감초, 생강 및 후박을 단독 추출물과 같은 양으로 포함하는 본 발명의 혼합 생약 추출물이 현저히 우수한 지방 축적 억제효과를 나타냄을 확인하여, 이를 지방간 질환의 예방 또는 치료에 유용하게 사용할 수 있음을 확인하였다(도 8). 또한, 고지방 식이를 섭취한 마우스에 본 발명의 혼합 생약 추출물을 함께 섭취시킨 경우, 고지방 식이군에 비하여 체중 감소, 몸무게 대비 복부 지방 비율 감소, 혈중 ALT 감소, 간조직내 중성 지방 감소, 간 무게 감소, 혈중 당 농도 감소 및 당 분해능 증가 효과를 모두 나타낼 수 있음을 in vivo에서 확인하였다(도 9 내지 14). 또한, 고지방 식이와 본 발명의 혼합 생약 추출물을 함께 섭취한 군의 경우, 지질 방울 축적 유전자인 Fsp27/Cidec, Adrp/Plin2c 및 Fit2/Fitm2과 지방 유입을 조절하는 대표적인 유전자인 CD36의 mRNA 발현을 현저하게 감소시키는 것을 확인하여, 본 발명의 혼합 생약 추출물이 유전자 발현 수준의 조절에 관여하여 상기와 같은 효과에 기여할 수 있음을 확인하였다(도 15). 상기와 같은 결과는 본 발명의 혼합 생약 추출물이 지방간 질환 및 비만에 대하여 우수한 예방 또는 치료 효과를 나타낼 수 있음을 시사하는 결과이다.
In Example 1 of the present invention, a mixed herbal medicine extract (KIOM-2012H) of a mixture of a gastro-intestinal, licorice, ginger and horsetail was prepared (Example 1), and the mixed herbal extract had no cytotoxicity And effectively inhibited fat accumulation in tissues (Figs. 3 and 4). In addition, it was confirmed that the mixed herbal extract significantly decreased the mRNA levels of FAS and SREBP-1c involved in fatty acid synthesis, and significantly decreased the expression of CD36, thereby reducing the intracellular fat inflow (FIGS. 5 and 6 ). In addition, the 25% ethanol extract and the hot water extract of the mixed herbicides suppressed fatty acid accumulation (Fig. 7). In particular, the extracts of the herbivorous, licorice, ginger and ginger extracts (Fig. 8). It was confirmed that the mixed herbal medicine extract of the present invention, which contains the herbal composition of the present invention, exhibits a remarkably excellent fat accumulation inhibitory effect, and thus can be effectively used for preventing or treating fatty liver disease. In addition, when the herbal extract of the present invention was administered to mice fed a high fat diet, weight loss, weight loss, abdominal fat ratio reduction, blood ALT reduction, hepatic triglyceride reduction, liver weight loss , Decrease in blood glucose concentration, and increase in glucose resolution were all confirmed in vivo (Figs. 9 to 14). In addition, in the group in which the high fat diet and the mixed herbal medicine extract of the present invention were taken together, mRNA expression of lipid droplet accumulating genes Fsp27 / Cidec, Adrp / Plin2c and Fit2 / Fitm2 and CD36, , And it was confirmed that the mixed herbal extract of the present invention is involved in the regulation of gene expression level and can contribute to the above effect (FIG. 15). These results indicate that the herbal extract of the present invention can exert excellent preventive or therapeutic effects on fatty liver disease and obesity.

또 하나의 양태로서, 본 발명은 우방자, 감초, 생강 및 후박의 혼합 생약 추출물을 포함하는, 지방간 질환 또는 비만의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
In another aspect, the present invention provides a food composition for prevention or amelioration of fatty liver disease or obesity, which comprises a herbal extract of a mixture of a gastro-enteric, licorice, ginger and horseradish.

상기 우방자, 감초, 생강, 후박, 혼합 생약 추출물, 지방간 질환 및 비만에 대해서는 상기에서 설명한 바와 같다. The above-mentioned alopecia, licorice, ginger, gum, mixed herbal extract, fatty liver disease and obesity are as described above.

상기 혼합 생약 추출물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. When the mixed herbal medicine extract is used as a food additive, the extract may be added as it is or may be used together with other foods or ingredients, and may be suitably used according to a conventional method.

본 발명의 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 화합물들을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료 및 비타민 복합제 등이 있고, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함할 수 있으며, 동물을 위한 사료로 이용되는 식품을 포함한다. The kind of the food of the present invention is not particularly limited. Examples of foods to which the compounds can be added include dairy products including meats, sausages, breads, chocolates, candies, snacks, confectionery, pizza, ramen noodles, gums, ice cream, soups, drinks, tea, Alcoholic beverages, and vitamin complexes, and can include foods in a conventional sense, and foods used as feed for animals.

상기 외에 본 발명의 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 또한, 상기 식품은 공지의 제조방법에 따라 정제, 과립, 분말, 캅셀, 액상의 용액 및 환 등의 제형으로도 제조될 수 있다. 본 발명에 의한 화합물을 유효성분으로 포함하는 것 이외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며, 통상의 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가성분으로서 포함할 수 있다.
In addition to the above, the food composition of the present invention may contain various nutrients, vitamins, electrolytes, flavors, colorants, pectic acid and salts thereof, alginic acid and its salts, organic acids, protective colloid thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, , A carbonating agent used in carbonated drinks, and the like. It may also contain flesh for the production of natural fruit juices, fruit juice drinks and vegetable drinks. The food may also be prepared in the form of tablets, granules, powders, capsules, solutions in liquid form, and the like according to known production methods. There are no particular restrictions on other components other than those containing the compound according to the present invention as an active ingredient, and may include various conventional flavors or natural carbohydrates as additional ingredients.

또 하나의 양태로서, 본 발명은 상기 혼합 생약 추출물을 지방간 질환 또는 비만 의심 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 지방간 질환 또는 비만의 치료 방법을 제공한다.
In another aspect, the present invention provides a method for treating fatty liver disease or obesity, comprising the step of administering the mixed herbal extract to a fatty liver disease or obese subject.

상기 혼합 생약 추출물, 지방간 질환 및 비만에 대해서는 상기에서 설명한 바와 같다. The above herbal medicine herbal extract, fatty liver disease and obesity are as described above.

구체적으로, 본 발명의 치료 방법은 상기 약학적 조성물을 약학적 유효량으로 지방간 질환 또는 비만 의심 개체 내에 투여하는 것을 포함한다. 상기 개체는 개, 소, 말, 토끼, 마우스, 래트, 닭 또는 인간을 포함한 포유류 전체를 의미하나, 상기 예에 의해 본 발명의 포유류가 한정되는 것은 아니다. 상기 약학적 조성물은 경구, 비 경구, 피하, 복강 내, 폐 내, 및 비강 내로 투여될 수 있고, 국부적 치료를 위해, 필요하다면 병변 내 투여를 포함하는 적합한 방법에 의해 투여될 수 있다. 비 경구 주입에는 근육 내, 정맥 내, 동맥 내, 복강 내 또는 피하투여가 포함된다. In particular, the method of treatment of the present invention comprises administering the pharmaceutical composition in a pharmaceutically effective amount into a fatty liver disease or obese subject. The term refers to whole mammals including dogs, cows, horses, rabbits, mice, rats, chickens or humans, but the mammal of the present invention is not limited by the above examples. The pharmaceutical composition may be administered orally, non-oral, subcutaneous, intraperitoneal, intrapulmonary, and intranasal, and may be administered by a suitable method, including localized administration, if necessary, for localized treatment. Non-oral injections include intramuscular, intravenous, intraarterial, intraperitoneal, or subcutaneous administration.

본 발명의 상기 약학적 조성물의 바람직한 투여량은 개체의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다.
The preferred dosage of the pharmaceutical composition of the present invention varies depending on the condition and body weight of the individual, the degree of disease, the type of drug, the route of administration and the period of time, but can be appropriately selected by those skilled in the art.

본 발명의 조성물은 우방자, 감초, 생강 및 후박의 4가지 생약 추출물을 포함함으로써, 비만 및 지방간 질환에 대하여 효과적인 치료 효과를 가지므로, 이를 상기 질환의 예방 또는 치료가 필요한 분야에 사용할 수 있다.
Since the composition of the present invention contains four herbal medicine extracts such as alopecia, licorice, ginger and horsetail, it has an effective therapeutic effect on obesity and fatty liver disease and can be used in fields requiring prevention or treatment of the diseases.

도 1은, 우방자(Arctium lappa Linne), 감초(Glycyrrhiza uralensis Fischer), 생강(Zingiberis rhizoma Crudus) 및 후박(Magnoliae Cortex)의 혼합 생약 추출물(KIOM-2012H)에 대한 HPLC 크로마토그램과 표준 마커 물질을 나타내는 도이다. 구체적으로, 도 1에서 리퀴리틴(liquiritin, #1), 알크틴(arctiin, #2), 마타레시놀(matairesinol, #3), 알크티제닌(arctigenin, #4), 글리시린진(glycyrrhinzin, #5), 6-진제롤(6-gingerol, #6), 및 메그놀롤(magnolol, #7)에 대한 표준 피크가 나타나있다. 이러한 결과는 230㎚에서 측정하였다.
도 2는, 세포 생존 능력에 대한 KIOM-2012H의 영향을 확인한 도이다. 구체적으로, KIOM-2012H를 다양한 농도(100, 250, 500, 750, 및 1000 ㎍/㎖)로 HepG2 세포에 처리하였다. 대조군의 경우, 세포를 비히클(vehicle)로 처리하였다. 그 다음, 24시간 동안 반응시키고, 세포의 생존율을 MTT 어세이로 측정하였다. 본 결과는 3배수의 웰을 이용한 3번의 독립적인 실험의 mean±SE를 나타낸다.
도 3은, KIOM-2012H의 FFA-유도된 지방 축적 효과를 HepG2 세포에서 확인한 결과를 나타낸 도이다. 구체적으로, HepG2 세포에 (A) 무처리하거나, (B) 0.1% BSA 대조군으로 배양하거나, (C) 1mM의 FFA 혼합물로 배양하거나, 또는 (D 내지 G) 다양한 농도의 KIOM-2012H(100, 200, 500, 및 1000㎍/㎖)와 함께 1mM의 FFA를 처리하여 배양한 결과이다. 각 군은 각각의 처리 후 24시간 동안 배양하였으며, 그 다음 세포 내 지방 축적을 측정하기 위하여 세포를 오일 레드 O 염색을 수행하였다. 이때, 세포의 염색 여부는 광학현미경으로 400배의 배율에서 조사하였다. 여기서 보여주는 자료는 3번의 독립적인 실험 중 대표적인 결과를 나타낸 것이다. (H) 이러한 오일 레드 O 염색에 의한 지방 축적을 정량적으로 분석한 결과를 나타낸 것이다.
도 4는, KIOM-2012H가 HepG2 세포의 세포 내 지방과 트리글리세리드(TG) 양을 감소시킴을 확인한 도이다. 구체적으로, HepG2 세포에 KIOM-2012H를 처리하지 않거나, 이와 함께 1mM의 FFA 혼합물을 24시간 동안 처리하였다(100, 200, 500, 및 1000㎍/㎖). 여기서, 대조군 세포는 1% BSA로 24시간 동안 처리하였다. (A) 나일 레드 염색에 의한 세포 내 지방 축적을 평가한 도이다. (B) 세포 내 트리글리세리드 양을 측정한 결과를 나타낸 도이다. 이때, 흡광도 측정값(reading)을 단백질 농도로 정상화(normalization)하였다. 여기서, 데이터는 3배수의 웰을 이용한 3번의 독립적인 실험의 mean±SE로 나타낸 것이다.
도 5는, KIOM-2012H가 FFA에 의한 지방 생성 유전자 mRNA 발현에 미치는 영향을 보여주는 도이다. 구체적으로, 1mM의 FFA와 함께 다양한 농도의 KIOM-2012H(100, 200, 500, 및 1000 ㎍/㎖)를 세포에 24시간 동안 처리하였다. 대조군의 경우, 세포를 1% BSA로 24시간 동안 처리하고, 총 RNA를 분리한 다음, SREBP-1c(A) 및 FAS(B)에 대한 mRNA 수준을 실시간 정량 PCR로 분석하였다. 여기서, 자료는 적어도 3번의 독립적인 실험에 대한 mean±SE로 나타낸 것이다.
도 6은, KIOM-2012H의 지방산 유입(import)에 대한 효과를 확인한 도이다. 구체적으로, (A) HepG2 세포를 KIOM-2012H의 부재(회색) 또는 존재(흰색) 하에 BODIPY FL C16과 함께 인큐베이션하였고, 형광 정도를 유세포 분류기(flow cytometry)로 측정하였다. (B) 세포를 다양한 농도의 KIOM-2012H의 부재 또는 존재 시(100, 200, 500, 및 1000 ㎍/㎖)에 1mM의 FFA로 24시간 동안 처리하였다. 이때, CD36의 유전자 발현을 실시간 정량 PCR(real-time quantitative PCR)로 분석하였다. 자료는 적어도 3번의 독립적인 실험의 mean±SE로 나타낸다.
도 7은, 우방자, 감초, 생강 및 후박의 열수 추출물 및 25% 에탄올 추출물의 세포 내 지방 축적 효과를 확인한 도이다. 여기서, #p=0.0568; *p=0.0447을 나타낸다.
도 8은, 후박 추출물(0.25mg/㎖), 감초 추출물(0.25mg/㎖), 생강 추출물(0.20mg/㎖) 및 우방자 추출물(0.23mg/㎖) 각각, 또는 상기 후박, 감초, 생강 및 우방자의 혼합 생약 추출물(1mg/㎖)을 HepG2 세포에 처리하여 지방 축적의 억제 정도를 확인한 결과를 나타낸 도이다.
도 9는, KIOM-2012H를 고지방식이(HFD, 60% fat)와 함께 마우스에 투여하여, 시간에 따른 몸무게 변화와 몸무게 대비 복부 지방량 비율을 관찰한 결과를 나타낸 도이다.
도 10은, KIOM-2012H가 고지방식이(HFD, 60% fat) 마우스의 혈중 간 손상 지표인 ALT(alanine aminotransferase)에 미치는 영향을 확인한 도이다.
도 11은, KIOM-2012H가 고지방식이(HFD, 60% fat) 마우스의 간 조직 내의 중성 지방에 미치는 영향을 확인한 도이다.
도 12는, KIOM-2012H가 고지방식이(HFD, 60% fat) 마우스의 간 조직 중량에 미치는 영향을 확인한 도이다.
도 13은, KIOM-2012H가 고지방식이(HFD, 60% fat)에 의해 증가된 공복 상태의 혈중 당 농도를 감소시킴을 확인한 도이다.
도 14는, KIOM-2012H가 고지방식이(HFD, 60% fat)에 의해 감소된 당 분해능을 증가시킴을 확인한 도이다.
도 15는, KIOM-2012H가 고지방식이(HFD, 60% fat)에 의한 간 조직 내 지방 축적 연관 유전자 mRNA 발현에 미치는 영향을 보여주는 도이다. Figure 1 shows the HPLC chromatogram and standard marker material for the mixed herbal extract (KIOM-2012H) of Arctium lappa Linne, Glycyrrhiza uralensis Fischer, Zingiberis rhizoma Crudus and Magnoliae Cortex . 1, arctiin, # 2, matairesinol, # 3, arctigenin, # 4, glycyrrhinzin, , # 5), 6-gingerol, # 6, and magnolol (# 7). These results were measured at 230 nm.
FIG. 2 shows the effect of KIOM-2012H on cell viability. FIG. Specifically, KIOM-2012H was treated with HepG2 cells at various concentrations (100, 250, 500, 750, and 1000 占 퐂 / ml). For the control group, the cells were treated with vehicle. Then, the cells were reacted for 24 hours, and the viability of the cells was measured by MTT assay. The results represent the mean ± SE of three independent experiments using triplicate wells.
FIG. 3 is a graph showing the results of FFA-induced fat accumulation effect of KIOM-2012H in HepG2 cells. FIG. Specifically, HepG2 cells were treated with (A) no treatment, (B) with 0.1% BSA control, (C) with 1 mM FFA mixture, or (D to G) with various concentrations of KIOM- 200, 500, and 1000 占 퐂 / ml) with 1 mM FFA. Each group was incubated for 24 hours after each treatment, and the cells were then subjected to oil red O staining to measure the accumulation of intracellular fat. At this time, the cells were stained with 400 times magnification with an optical microscope. The data presented here is representative of three independent experiments. (H) Quantitative analysis of fat accumulation by oil red O staining is shown.
FIG. 4 is a graph showing that KIOM-2012H decreases the amount of intracellular fat and triglyceride (TG) in HepG2 cells. Specifically, HepG2 cells were not treated with KIOM-2012H, and a 1 mM FFA mixture was treated for 24 hours (100, 200, 500, and 1000 μg / ml). Here, control cells were treated with 1% BSA for 24 hours. (A) Evaluation of intracellular fat accumulation by Nile red staining. (B) the amount of triglycerides in the cells. At this time, the absorbance readings were normalized to protein concentrations. Here, the data are expressed as the mean SE of three independent experiments using triplicate wells.
FIG. 5 is a graph showing the effect of KIOM-2012H on FFA-induced lipogenesis gene mRNA expression. Specifically, various concentrations of KIOM-2012H (100, 200, 500, and 1000 [mu] g / ml) were treated with 1 mM FFA for 24 hours. For the control group, cells were treated with 1% BSA for 24 hours, total RNA was isolated, and mRNA levels for SREBP-1c (A) and FAS (B) were analyzed by real-time quantitative PCR. Here, data are expressed as mean ± SE for at least 3 independent experiments.
FIG. 6 is a graph showing the effect of KIOM-2012H on the fatty acid import. Specifically, (A) HepG2 cells were incubated with BODIPY FL C16 in the absence (gray) or presence (white) of KIOM-2012H and the degree of fluorescence was measured by flow cytometry. (B) cells were treated with 1 mM FFA for 24 hours in the absence or presence of various concentrations of KIOM-2012H (100, 200, 500, and 1000 ug / ml). At this time, gene expression of CD36 was analyzed by real-time quantitative PCR. Data are presented as means ± SE of at least 3 independent experiments.
FIG. 7 is a graph showing the intracellular fat accumulation effect of hot-water extract and 25% ethanol extract of Wisteria, licorice, ginger, and horsetail. Here, # p = 0.0568; * p = 0.0447.
8 is a graph showing the results of a comparison between the extracts of Japanese apricot extract (0.25 mg / ml), licorice extract (0.25 mg / ml), ginger extract (0.20 mg / (1 mg / ml) was applied to HepG2 cells to examine the degree of inhibition of fat accumulation.
FIG. 9 is a graph showing the results of observing weight change and body weight-to-abdominal fat mass ratio with time in mice administered with high-fat diet (HFD, 60% fat) to KIOM-2012H.
FIG. 10 is a graph showing the effect of KIOM-2012H on alanine aminotransferase (ALT), an index of liver damage in high-fat diet (HFD, 60% fat) mice.
Fig. 11 shows the effect of KIOM-2012H on triglyceride in liver tissue of high-fat diet (HFD, 60% fat) mice.
FIG. 12 is a graph showing the effect of KIOM-2012H on liver tissue weight of a high-fat diet (HFD, 60% fat) mouse.
FIG. 13 shows that KIOM-2012H decreases the fasted state blood glucose concentration increased by high fat diet (HFD, 60% fat).
Fig. 14 shows that KIOM-2012H increases sugar resolution reduced by high fat diet (HFD, 60% fat).
Fig. 15 shows the effect of KIOM-2012H on the expression of fat accumulation-associated gene mRNA in liver tissue by high fat diet (HFD, 60% fat).

이하 본 발명을 하기 예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나 이들 예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 예에 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to the following examples. However, these examples are for illustrative purposes only, and the scope of the present invention is not limited to these examples.

실시예 1: 우방자, 감초, 생강 및 후박의 혼합 생약 추출물(KIOM-2012H)의 제조Example 1: Preparation of mixed herbal medicine extract (KIOM-2012H) containing starch, licorice, ginger and horseradish

실시예 1-1: 우방자, 감초, 생강 및 후박의 혼합 생약 열수 추출물의 제조Example 1-1: Preparation of hot water extract of herbal medicines mixed with alopecia, licorice, ginger and haggis

본 발명에서 사용된 약초는 한약초 조합(영천, 한국)에서 구입하였다. 우방자, 감초, 생강 및 후박의 혼합 생약 추출물을 제조하기 위하여, 우방자(우엉, Arctium lappa Linne) 9g, 감초(Glycyrrhiza uralensis Fischer) 7.5g, 생강(건강, Zingiberis Rhizoma Crudus) 6g 및 후박(Magnoliae Cortex) 7.5g을 포함하는 혼합 천연물(총 30g)에 끓는 물 1L를 가하고 90 내지 100℃에서 3 내지 4시간 동안 가열하여 열수 추출하였다. 이어, 조추출물을 여과하여 동결 건조기에서 감압 건조시켰다. 수득한 추출물의 건조 중량은 2.887g이었으며(수율 9.57%), 이를 사용하기 전에 DPBS에 녹여 사용하였다.
The herbs used in the present invention were purchased from herbal medicine herbal combination (Yeongcheon, Korea). Woobangja, to manufacture licorice, ginger and mixed herbal extract of magnolia, woobangja (burdock, Arctium lappa Linne) 9g, licorice root (Glycyrrhiza uralensis Fischer) 7.5g, ginger (health, Zingiberis Rhizoma Crudus) 6g and Magnolia (Magnoliae Cortex) 1 g of boiling water was added to a mixed natural product (total of 30 g) containing 7.5 g of the extract, and the mixture was heated at 90 to 100 캜 for 3 to 4 hours for hot extraction. Then, the crude extract was filtered and dried under reduced pressure in a freeze dryer. The dry weight of the obtained extract was 2.887 g (yield: 9.57%), which was dissolved in DPBS before use.

실시예 1-2: 우방자, 감초, 생강 및 후박의 혼합 생약 에탄올 추출물의 제조Example 1-2: Preparation of mixed herbal medicine ethanol extract of alopecia, licorice, ginger, and liquorice

우방자 9g, 감초 7.5g, 생강 6g 및 후박 7.5g을 포함하는 혼합 천연물(총 30g)을 분쇄기로 분쇄하여 500 ㎖의 삼각플라스크에 준비하고, 25% 에탄올(EtOH) 300 ㎖씩을 각각 분말이 들어 있는 삼각플라스크에 첨가하여 38℃의 중탕기에 24시간 동안 중탕한 후 추출액을 회수하였다. 회수된 추출액은 필터로 여과한 후 여과된 추출액을 회전식 증발농축기로 25% 에탄올(EtOH)을 제거한 다음 동결건조기로 동결 건조하여 분말을 얻었다. 상기 추출물을 증류수에 100㎎/㎖로 용해시켜 스톡용액을 제조하여 이용하였다.
(Total of 30 g) containing 9 g of Ganoderma lucidum, 7.5 g of licorice, 6 g of ginger, and 7.5 g of gum arabic was pulverized by a pulverizer into a 500 ml Erlenmeyer flask, and 300 ml of 25% ethanol (EtOH) The flask was added to an Erlenmeyer flask. The flask was boiled in a hot water bath at 38 ° C for 24 hours, and the extract was recovered. The recovered extract was filtered with a filter, and the filtered extract was freeze - dried with a rotary evaporator to remove 25% ethanol (EtOH) and then lyophilized to obtain a powder. The above extract was dissolved in distilled water at 100 mg / ml to prepare a stock solution.

비교예: 후박, 감초, 생강 또는 우방자 추출물의 제조Comparative Example: Preparation of Extracts of Buckwheat, Licorice, Ginger or Weevil

(1) 후박 추출물의 제조(1) Preparation of Extract

후박 30g 중량을 분쇄기로 분쇄하여 500㎖의 삼각플라스크에 준비하고, 25% 에탄올(EtOH) 300㎖ 씩을 분말이 들어 있는 삼각플라스크에 첨가하여 38℃의 중탕기에 24시간 동안 중탕한 후 추출액을 회수하였다. 회수된 추출액은 필터로 여과한 후 여과된 추출액을 회전식 증발농축기로 25% 에탄올(EtOH)을 제거한 다음 동결건조기로 동결 건조하여 분말을 얻었다. 상기 추출물을 증류수에 100㎎/㎖로 용해시켜 스톡용액을 제조하여 이용하였다.
30 g of starch was pulverized by a pulverizer and prepared in a 500 ml Erlenmeyer flask. 300 ml of 25% ethanol (EtOH) was added to the flask containing the powder, and the mixture was stirred in a hot water bath at 38 ° C for 24 hours and the extract was recovered . The recovered extract was filtered with a filter, and the filtered extract was freeze - dried with a rotary evaporator to remove 25% ethanol (EtOH) and then lyophilized to obtain a powder. The above extract was dissolved in distilled water at 100 mg / ml to prepare a stock solution.

(2) 감초 추출물의 제조(2) Preparation of licorice extract

감초 30g 중량을 분쇄기로 분쇄하여 500㎖의 삼각플라스크에 준비하고, 25% 에탄올(EtOH) 300㎖씩을 분말이 들어 있는 삼각플라스크에 첨가하여 38℃의 중탕기에 24시간 동안 중탕한 후 추출액을 회수하였다. 회수된 추출액은 필터로 여과한 후 여과된 추출액을 회전식 증발농축기로 25% 에탄올(EtOH)을 제거한 다음 동결건조기로 동결 건조하여 분말을 얻었다. 상기 추출물을 증류수에 100㎎/㎖로 용해시켜 스톡용액을 제조하여 이용하였다.
30 g of licorice was pulverized with a pulverizer and prepared in a 500 ml Erlenmeyer flask. 300 ml of 25% ethanol (EtOH) was added to the flask containing the powder, and the mixture was boiled in a hot water bath at 38 ° C for 24 hours and the extract was recovered . The recovered extract was filtered with a filter, and the filtered extract was freeze - dried with a rotary evaporator to remove 25% ethanol (EtOH) and then lyophilized to obtain a powder. The above extract was dissolved in distilled water at 100 mg / ml to prepare a stock solution.

(3) 생강 추출물의 제조(3) Production of ginger extract

생강 30g 중량을 분쇄기로 분쇄하여 500㎖의 삼각플라스크에 준비하고, 25% 에탄올(EtOH) 300㎖씩을 분말이 들어 있는 삼각플라스크에 첨가하여 38℃의 중탕기에 24시간 동안 중탕한 후 추출액을 회수하였다. 회수된 추출액은 필터로 여과한 후 여과된 추출액을 회전식 증발농축기로 25% 에탄올(EtOH)을 제거한 다음 동결건조기로 동결 건조하여 분말을 얻었다. 상기 추출물을 증류수에 100㎎/㎖로 용해시켜 스톡용액을 제조하여 이용하였다.
30 g of ginger was weighed into a 500 ml Erlenmeyer flask and 300 ml of 25% ethanol (EtOH) was added to the Erlenmeyer flask containing the powder. The mixture was boiled in a hot water bath at 38 ° C for 24 hours, and the extract was recovered . The recovered extract was filtered with a filter, and the filtered extract was freeze - dried with a rotary evaporator to remove 25% ethanol (EtOH) and then lyophilized to obtain a powder. The above extract was dissolved in distilled water at 100 mg / ml to prepare a stock solution.

(4) 우방자 추출물의 제조(4) Preparation of extract

우방자 30g 중량을 분쇄기로 분쇄하여 500㎖의 삼각플라스크에 준비하고, 25% 에탄올(EtOH) 300㎖씩을 분말이 들어 있는 삼각플라스크에 첨가하여 38℃의 중탕기에 24시간 동안 중탕한 후 추출액을 회수하였다. 회수된 추출액은 필터로 여과한 후 여과된 추출액을 회전식 증발농축기로 25% 에탄올(EtOH)을 제거한 다음 동결건조기로 동결 건조하여 분말을 얻었다. 상기 추출물을 증류수에 100㎎/㎖로 용해시켜 스톡용액을 제조하여 이용하였다.
The weight of 30 g of the recipient was pulverized by a pulverizer and prepared in a 500 ml Erlenmeyer flask. 300 ml of 25% ethanol (EtOH) was added to the Erlenmeyer flask containing powder, and the mixture was recovered by boiling in a hot water bath at 38 ° C for 24 hours . The recovered extract was filtered with a filter, and the filtered extract was freeze - dried with a rotary evaporator to remove 25% ethanol (EtOH) and then lyophilized to obtain a powder. The above extract was dissolved in distilled water at 100 mg / ml to prepare a stock solution.

실험예 1: KIOM-2012H의 HPLC 분석Experimental Example 1: HPLC analysis of KIOM-2012H

실시예 1-1에서 제조한 우방자, 감초, 생강 및 후박의 혼합 생약 추출물의 표준물질의 존재 및 함량을 확인하기 위하여, HPLC를 이용한 화학적 분석(chemical fingerprinting)을 하기와 같이 수행하였다.Chemical fingerprinting using HPLC was performed as follows in order to confirm the presence and content of the standard substances of the herbal extracts of mixed weevils, licorice, ginger, and lobster prepared in Example 1-1.

HPLC는 Elite Lachrom HPLC system(Hitachi Co., Japan)을 사용하였고, L-2130 pump, L-2200 auto-sampler, L-2350 column oven, L-2455 diode array UV/VIS detector로 구성되어 있으며, 컬럼은 OptimaPak C18(5μm, 100A, 4.6mm×250mm, RStech Co., Korea)을 사용하였고, 컬럼 오븐은 30℃를 유지하였다. 이동상은 HPLC용 물과 아세토니트릴(acetonitrile)의 혼합용매의 비율을 변화시킨 gradient solvent system(5 내지 100% 아세토니트릴 혼합용매, 시간: 60분, 유속: 1㎖/min)을 사용하였고, 구체적으로, 표준 화합물들(리퀴리틴(liquiritin), 글리시린진(glycyrrhinzin), 알크틴(arctiin), 마타레시놀(matairesinol), 알크티제닌(arctigenin), 진제롤(gingerol) 및 메그놀롤(magnolol))과 KIOM-2012H의 분말의 무게를 정확히 측정한 다음, 메탄올에 녹여 100mg/mL의 농도로 조제하였으며, 0.45㎛ filter로 여과한 후 10㎕를 주입하여 분석하였다. 이때, DAD 검출기의 UV 파장은 KIOM-2012H의 모든 피크가 고르게 잘 분포한 230nm를 선택하였다. The HPLC system was composed of L-2130 pump, L-2200 auto-sampler, L-2350 column oven and L-2455 diode array UV / VIS detector using an Elite Lachrom HPLC system (Hitachi Co., OptimaPak C18 (5 m, 100 A, 4.6 mm x 250 mm, RStech Co., Korea) was used and the column oven was maintained at 30 ° C. The mobile phase was a gradient solvent system (5 to 100% acetonitrile mixed solvent, time: 60 minutes, flow rate: 1 ml / min) in which the ratio of the mixed solvent of HPLC water and acetonitrile was changed, , Standard compounds (liquiritin, glycyrrhinzin, arctiin, matairesinol, arctigenin, gingerol, and magnolol) ) And KIOM-2012H were dissolved in methanol to prepare a solution having a concentration of 100 mg / mL. The solution was filtered with a 0.45 μm filter and injected with 10 μl of the solution. At this time, the UV wavelength of the DAD detector was 230 nm, in which all the peaks of the KIOM-2012H were evenly distributed.

그 결과, 도 1에 나타낸 바와 같이, 우방자에는 알크틴, 마타레시놀 및 알크티제닌이, 감초에는 리퀴리틴 및 글리시린진이, 생강에는 6-진저롤이, 후박에서는 메그놀롤이 지표 물질로서 존재함을 확인할 수 있었다.
As a result, as shown in Fig. 1, alkucin, matarascinol and alcytigenin were present in the right-wing, licoritin and glycyrinzin in licorice, 6-gingerol in ginger, and megnolol in indicator .

실험예 2: KIOM-2012H의 세포독성 및 지방 축적 억제 효과 확인Experimental Example 2: Confirmation of cytotoxicity and fat accumulation inhibition effect of KIOM-2012H

(1) 세포배양(1) Cell culture

세포은행인 ATCC(American type culture collection, ATCC, Manassas, VA)로부터 입수한 HepG2 세포를, 1% 페니실린/스트렙토마이신 및 37℃에서 불활성화시킨 10% 소 태아 혈청(Fetal bovine serum, FBS)을 포함하며, DMEM(Dulbecco's modified Eagle's medium)과 F-12가 1:1(v/v)로 혼합된 혼합 배지(invitrogen)에서, 5% CO2 조건에서 배양하였다. 또한, FFA(free fatty acid) 혼합물(올레이트(oleate) 및 팔미테이트 (palmitate)의 나트륨 염, Sigma)은, 소 태아 혈청(FBS)에 첨가하여 최종 농도 1%가 되도록 배양 배지를 준비하였다. 본 발명에서 세포배양은 세포가 75%의 포화도(confluence)에 도달했을 때 사용하였다.
HepG2 cells obtained from a cell bank, ATCC (American Type Culture Collection, ATCC, Manassas, Va.), Were inoculated with 1% penicillin / streptomycin and 10% fetal bovine serum (FBS) And cultured in a mixed medium (Invitrogen) mixed with DMEM (Dulbecco's modified Eagle's medium) and F-12 at a ratio of 1: 1 (v / v) under 5% CO 2 . In addition, a free fatty acid (FFA) mixture (sodium salt of oleate and palmitate, Sigma) was added to fetal bovine serum (FBS) to prepare a culture medium to a final concentration of 1%. In the present invention, cell culture was used when the cells had reached a confluence of 75%.

(2) KIOM-2012H의 세포독성 평가(2) Evaluation of cytotoxicity of KIOM-2012H

상기 실시예 1-1(KIOM-2012H)의 세포독성을, HepG2 세포를 사용한 MTT 분석법을 이용하여 평가하였다.The cytotoxicity of Example 1-1 (KIOM-2012H) was evaluated using MTT assay using HepG2 cells.

구체적으로, 배양한 HepG2 세포를 48-웰 플레이트에 분주하고, 상기 분주된 세포에 서로 다른 농도(100, 250, 500, 750, 및 1000㎍/㎖)의 실시예 1-1을 각각 가한 다음, 24시간 동안 반응시켰다. 이어, 20㎕의 MTT 용액(5㎎/㎖, USB, Austria)을 각 웰에 가하고, 37℃에서 4시간 동안 추가로 반응시켰다. 반응이 종료된 후, 배양액을 제거하고, 100㎕ DMSO를 첨가하여 5분 동안 흔들어주며 반응시켰다. 그 다음, 마이크로 플레이트 형광 분광광도계(BD Bioscience)로 570㎚에서 상기 반응물의 흡광도를 측정하였고, 그 결과를 도 2에 나타내었다.
Specifically, the cultured HepG2 cells were dispensed into a 48-well plate, and the cells were subjected to different concentrations (100, 250, 500, 750, and 1000 μg / ml) of Example 1-1, And reacted for 24 hours. Then, 20 占 퐇 of MTT solution (5 mg / ml, USB, Austria) was added to each well and further reacted at 37 占 폚 for 4 hours. After completion of the reaction, the culture medium was removed, and 100 μl of DMSO was added thereto, followed by shaking for 5 minutes. Then, the absorbance of the reactant was measured at 570 nm with a microplate fluorescence spectrophotometer (BD Bioscience), and the results are shown in FIG.

그 결과, 상기 도 2에 나타낸 바와 같이, 실시예 1-1은 1000㎍/㎖의 고농도로 처리하는 경우에도 세포 생존율을 거의 변화시키지 않아, 세포 독성을 나타내지 않음을 확인하였다.
As a result, as shown in Fig. 2, it was confirmed that Example 1-1 did not show cytotoxicity because it hardly changed the cell survival rate even when treated at a high concentration of 1000 占 퐂 / ml.

(3) KIOM-2012H의 지방축적 억제효과 확인(3) Confirmation of inhibition of fat accumulation by KIOM-2012H

간 지방증(hepatic steatosis)에 대한 실시예 1-1(KIOM-2012H)의 효능을 확인하기 위하여, in vitro 모델인 FFA에 의해 유도된 세포성 간 지방증 모델을 사용하였다.In order to confirm the efficacy of Example 1-1 (KIOM-2012H) on hepatic steatosis, an in vitro model of FFA-induced cellular hepatic steatosis model was used.

구체적으로, 배양한 HepG2 세포에 아무것도 처리하지 않거나, 0.1% BSA를 처리하거나, 1%의 FFA(free fatty acid) 혼합물(올레이트(oleate) 및 팔미테이트 (palmitate)의 나트륨 염, Sigma)을 처리하거나, 또는 1%의 FFA와 100, 200, 500 또는 1000㎍/㎖ 농도의 실시예 1-1을 복합 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 배양이 종료된 후, 배양된 세포를 대상으로 오일 레드 O 염색을 수행하고 이를 현미경으로 관찰하여 세포 내에서 생성된 지방 과립의 수준을 분석하여 실시예 1-1(KIOM-2012H)의 지방축적에 미치는 영향을 확인하였고, 그 결과를 도 3에 나타내었다.Specifically, cultured HepG2 cells were treated with 0.1% BSA or treated with a 1% FFA (free fatty acid) mixture (sodium salt of oleate and palmitate, Sigma) , Or combined with 1% of FFA at a concentration of 100, 200, 500 or 1000 μg / ml of Example 1-1 and cultured for 24 hours. After completion of the culture, oil-red O staining was performed on the cultured cells, and the result was observed with a microscope to analyze the level of the lipid granules produced in the cells, and the fat accumulation of Example 1-1 (KIOM-2012H) And the results are shown in Fig.

구체적으로, 도 3은 실시예 1-1(KIOM-2012H)의 지방축적 억제효과를 나타내는 현미경 사진 및 그래프로서, A는 아무런 처리도 하지 않은 대조군을 나타내고 B는 vehicle(BSA)만 처리한 음성대조군을 나타내며, C는 1%의 FFA만 처리한 양성대조군을 나타내고, D는 1%의 FFA와 100㎍/㎖의 실시예 1-1이 복합 처리된 실험군을 나타내고, E는 1%의 FFA와 200㎍/㎖의 실시예 1-1이 복합 처리된 실험군을 나타내며, F는 1%의 FFA와 500㎍/㎖의 실시예 1-1이 복합 처리된 실험군을 나타내고, G는 1%의 FFA와 1000㎍/㎖의 실시예 1-1이 복합 처리된 실험군을 나타낸다. 또한, H는 오일 레드 O 염색에 의해 측정된 세포 내 지방 과립의 수준을 정량적으로 나타낸 것이다. 3 is a photograph and a graph showing a fat accumulation inhibitory effect of Example 1-1 (KIOM-2012H), wherein A represents a control group without any treatment and B represents a negative control group treated with only vehicle (BSA) C represents a positive control group treated with only 1% FFA, D represents an experiment group in which 1% FFA and 100 μg / ml of Example 1-1 were combined, E represents 1% FFA and 200 F represents the experimental group in which 1% FFA and 500 μg / ml of Example 1-1 were combined, G represents 1% FFA and 1000 Mu] g / ml of Example 1-1. In addition, H represents quantitatively the level of intracellular fat granules measured by oil red O staining.

그 결과, 도 3에 나타낸 바와 같이, FFA의 처리에 의하여 증가한 세포 내 지방 과립의 정도가 본 발명의 실시예 1-1에 의하여 농도 의존적으로 감소하는 결과를 나타내었다.
As a result, as shown in Fig. 3, the degree of intracellular fat granules increased by the treatment with FFA was decreased in a concentration-dependent manner according to Example 1-1 of the present invention.

또한, 본 발명자들은 HepG2 세포에서 실시예 1-1(KIOM-2012H)이 FFA-유도된 지방 축적을 억제할 수 있는지 여부를 나일 레드 염색으로 재차 확인하였다. In addition, the present inventors reaffirmed whether or not Example 1-1 (KIOM-2012H) can inhibit FFA-induced fat accumulation in HepG2 cells by Nile red staining.

나일 레드 염색은 하기와 같은 과정으로 수행되었다. Nile red staining was carried out by the following procedure.

24시간 동안 배양된 세포를 PBS로 2회 세척하고, DMSO에 용해된 0.75㎍/mL의 나일 레드 염료를 가한 다음, 암조건 및 상온의 조건에서 15분 동안 반응시켰다. 염료의 광퇴색(photobleaching)을 최소화하기 위하여, 플레이트를 알루미늄 호일로 싸서 인큐베이션 하였다. 반응이 종료된 후 이를 형광 분광광도계(spectrophotometer)에 적용하여 여기파장(excitation) 485㎚ 및 방출파장(emission) 572㎚의 조건에서 형광강도를 측정하였고, 그 결과를 도 4A에 나타내었다.Cells cultured for 24 hours were washed twice with PBS, 0.75 μg / mL Nile red dye dissolved in DMSO was added, and the cells were allowed to react for 15 minutes under dark conditions and at room temperature. To minimize photobleaching of the dye, the plate was wrapped in aluminum foil and incubated. After the reaction was completed, the resultant was applied to a spectrophotometer, and the fluorescence intensity was measured at excitation wavelength 485 nm and emission wavelength 572 nm. The results are shown in FIG. 4A.

그 결과, 도 4A에 나타낸 바와 같이, 나일 레드 염색에 의한 세포에 포함된 인지질의 수준을 평가한 결과, FFA에 의해 증가한 인지질 수준이 본 발명의 실시예 1-1에 의하여 농도 의존적으로 감소함을 확인할 수 있었다.
As a result, as shown in FIG. 4A, the level of phospholipids contained in the cells by Nile red staining was evaluated. As a result, it was found that the phospholipid level increased by FFA was decreased in a concentration-dependent manner according to Example 1-1 of the present invention I could confirm.

또한, HepG2 세포에서 실시예 1-1(KIOM-2012H)이 FFA-유도된 지방 축적을 억제할 수 있는지 여부를 세포 내 TG(Triglyceride)의 양을 측정함으로써 재차 확인하였다. In addition, whether or not Example 1-1 (KIOM-2012H) inhibited FFA-induced fat accumulation in HepG2 cells was confirmed again by measuring the amount of TG (Triglyceride) in the cells.

구체적으로, 24시간 동안 배양된 세포에 포함된 중성지방(Triglyceride, TG)의 함량을 측정하기 위하여, 배양된 세포를 상업적 키트(Asan Pharm. Co., Seoul, Korea)에 적용하고, 그 결과를 단위세포 단백질(mg)에 대한 중성지방의 함량(㎍)으로 표시하였다(도 4B). Specifically, in order to measure the content of triglyceride (TG) contained in the cells cultured for 24 hours, the cultured cells were applied to a commercial kit (Asan Pharm. Co., Seoul, Korea) (Mg) of triglyceride to unit cell protein (mg) (Fig. 4B).

그 결과, 도 4B에 나타낸 바와 같이, FFA의 처리에 의하여 증가한 세포 내의 중성 지방 수준 역시, 실시예 1-1의 처리에 의하여 농도 의존적으로 감소하는 결과를 나타내었다.
As a result, as shown in Fig. 4B, the intracellular triglyceride level increased by FFA treatment also decreased in a concentration-dependent manner by the treatment of Example 1-1.

(4) KIOM-2012H가 지방산 합성 효소(fatty acid synthase, FAS) 및 SREBP-1c의 발현에 미치는 영향(4) Effect of KIOM-2012H on the expression of fatty acid synthase (FAS) and SREBP-1c

상기 (3)에서, 본 발명의 실시예 1-1(KIOM-2012H)이 간세포로의 지방축적을 억제하는 효과를 나타냄을 확인하였으므로, 이러한 효과가 세포 내 유전자 발현수준의 변화에 의한 것인지를 규명하기 위하여, 하기와 같은 실험을 수행하였다.In Example (3), it was confirmed that Example 1-1 (KIOM-2012H) of the present invention had an effect of inhibiting fat accumulation in hepatocytes. Therefore, it was confirmed whether this effect was due to a change in the level of intracellular gene expression The following experiment was carried out.

구체적으로, 실시예 1-1을 FFA를 처리한 HepG2 세포에 농도 의존적으로 처리하여, 지방산 생합성 과정에서 마지막 과정을 촉매 하는 지방산 합성효소(fatty acid synthase, FAS) 및 상기 FAS의 유전자 발현을 조절하는, 스테롤 조절인자-결합 단백질-1c(sterol regulatory element-binding proteins-1c, SREBP-1c)의 발현 변화를 확인하였다. Specifically, Example 1-1 was treated with FFA-treated HepG2 cells in a concentration-dependent manner to control the fatty acid synthase (FAS), which catalyzes the last step in the fatty acid biosynthesis process, and the gene expression of the FAS , And sterol regulatory element-binding proteins-1c (SREBP-1c).

구체적으로, 24시간 동안 배양한 HepG2 세포로부터 총 RNA를 분리하고, 상대적인 mRNA 발현을 검출하기 위하여 테크만 프로브(Taqman probes, ABI)를 이용한 역-전사(reverse-transcription)와 Q-PCR을 수행하여, FAS와 SREBP-1c의 mRNA 수준을 측정 및 비교하였고, 그 결과를 도 5에 나타내었다.Specifically, total RNA was isolated from HepG2 cells cultured for 24 hours, and reverse-transcription and Q-PCR were performed using Taqman probes (ABI) to detect relative mRNA expression , And mRNA levels of FAS and SREBP-1c were measured and compared, and the results are shown in FIG.

그 결과, 도 5에 나타낸 바와 같이, 실시예 1-1은 FFA에 의해 유도된 FAS 및 SREBP-1c mRNA 모두를 농도 의존적으로 감소시키는 결과를 나타내었다.
As a result, as shown in Fig. 5, Example 1-1 showed that FAS and SREBP-1c mRNA induced by FFA were both reduced in a concentration-dependent manner.

(5) 지방산 흡수에 미치는 KIOM-2012H의 효과(5) Effect of KIOM-2012H on fatty acid uptake

상기 (3)의 결과로부터, 본 발명에서 제공하는 실시예 1-1(KIOM-2012H)이 간세포 내로의 지방축적을 억제하는 효과를 나타냄을 확인하였으므로, 이러한 효과가 세포 외 지방산에 대한 흡수 수준의 변화에 의한 것인지를 규명하고자, BODIPY-표지된 지방산(fatty acid, C16)을 이용하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.From the results of (3) above, it was confirmed that Example 1-1 (KIOM-2012H) provided by the present invention had an effect of inhibiting fat accumulation into hepatocytes. (Fatty acid, C16), the following experiment was carried out.

구체적으로, 24시간 동안 배양된 세포에 실시예 1-1의 존재 또는 부재 하에서 1μM의 BODIPY-표지된 지방산(fatty acid, C16, Invitrogen)을 처리하고, 37℃에서 30분 동안 반응시켰으며, 반응이 종료된 후 4℃에서 0.2% BSA가 포함된 PBS로 세포를 세척하였다. 이어, 세포를 유세포 분석기에 적용하여 각 세포에서 발현되는 BODIPY 형광의 수준을 측정하였고, 그 결과를 도 6에 나타내었다.Specifically, cells cultured for 24 hours were treated with 1 μM of BODIPY-labeled fatty acid (fatty acid, C16, Invitrogen) in the presence or absence of Example 1-1, reacted at 37 ° C. for 30 minutes, The cells were washed with PBS containing 0.2% BSA at 4 < 0 > C. Next, the cells were applied to a flow cytometer to measure the level of BODIPY fluorescence expressed in each cell, and the results are shown in FIG.

그 결과, 도 6에 나타낸 바와 같이, 실시예 1-1 처리는 간세포에서 지방산의 유입을 현저히 감소시키는 결과를 나타내었고(흰색-실시예 1-1 처리군; 회색-비처리군, 6A), 지방산의 흡수(uptake)에 관여하는 CD36의 mRNA 발현을 농도 의존적으로 감소시키는 결과를 나타내었다(도 6B)
As a result, as shown in Fig. 6, the treatment of Example 1-1 showed a significant decrease in the inflow of fatty acid in hepatocytes (white-treated group of Example 1-1; gray-untreated group, 6A) Dependent expression of mRNA expression of CD36 involved in fatty acid uptake (Fig. 6B)

종합하면, 상기와 같은 결과는 본 발명의 우방자, 감초, 생강 및 후박의 혼합 생약 추출물(KIOM-2012H)가 지방산 합성에 관여하는 유전자의 발현을 감소시키고, 이의 세포 내 유입을 매개하는 유전자인 CD36의 발현 역시 감소시킴으로써, 간세포 내로의 지방 흡수를 억제하여, 지방간, 특히 비알코올성 지방간을 예방 또는 치료할 수 있음을 시사하는 것이다.
As a result, the above results indicate that the herbal extract (KIOM-2012H) of the present invention is effective in reducing the expression of genes involved in fatty acid synthesis and inhibiting CD36 In the hepatocyte, thereby preventing or treating the fatty liver, especially the nonalcoholic fatty liver.

실험예 3: 우방자, 감초, 생강 및 후박의 혼합 생약 열수 추출물 및 에탄올 추출물의 지방 축적 억제 효과 확인Experimental Example 3: Confirmation of inhibitory effect of hot water extract and ethanol extract on the accumulation of fat in mixed herbal medicines, licorice, ginger, and ginger

실시예 1-1의 열수 추출물 및 실시예 1-2의 에탄올 추출물이, FFA에 의해 유도된 세포 내 지방 축적을 억제시키는지를 확인하기 위하여, 실험예 2의 (3)에 기재된 방법으로 나일 레드 염색을 수행하였다. In order to confirm whether the hot-water extract of Example 1-1 and the ethanol extract of Example 1-2 inhibited FFA-induced intracellular fat accumulation, Nile red staining was performed by the method described in (3) of Experimental Example 2 Respectively.

구체적으로, 배양한 HepG2 세포에 아무것도 처리하지 않거나, 1% FFA 혼합물을 처리하거나, 1%의 FFA와 실시예 1-1의 열수 추출물(0.1, 0.2, 0.5 또는 1.0mg/㎖) 또는 1%의 FFA와 실시예 1-2의 에탄올 추출물(0.1, 0.2, 0.5 또는 1.0mg/㎖)을 처리하여, 24시간 동안 배양하였다. 배양이 종료된 후, 배양된 세포를 대상으로 나일 레드 염색을 수행하였고, 그 결과를 정량적으로 나타내었다. Specifically, the cultured HepG2 cells were either treated with 1% FFA mixture or treated with 1% FFA and the hot-water extract (0.1, 0.2, 0.5 or 1.0 mg / ml) or 1% FFA and the ethanol extract of Example 1-2 (0.1, 0.2, 0.5 or 1.0 mg / ml) were treated and cultured for 24 hours. After completion of the culture, nyl red staining was performed on the cultured cells, and the results were quantitatively shown.

그 결과, 도 7에 나타낸 바와 같이, 실시예 1-1 및 1-2 모두 농도 의존적으로 FFA에 의해 유도된 세포 내 지방 축적을 감소시키는 결과를 나타내었으며, 에탄올 추출물의 경우, 저농도(0.2mg/㎖)에서 세포 내 지방 축적 효과가 보다 우수한 결과를 나타내었다.
As a result, as shown in Fig. 7, both of Examples 1-1 and 1-2 showed a decrease in FFA-induced intracellular fat accumulation in a concentration-dependent manner. In the case of the ethanol extract, low concentration (0.2 mg / Ml), the effect of intracellular fat accumulation was better.

실험예 4: 우방자, 감초, 생강 및 후박의 단독 추출물과 혼합 생약 추출물의 지방 축적 억제 효과 비교Experimental Example 4: Comparison of inhibitory effect of extracts of herbivorous, licorice, ginger,

우방자, 감초, 생강 및 후박 각각의 추출물 및 상기 4가지 생약의 혼합 생약 추출물의 지방 축적 억제 효과를 비교하기 위하여, FFA에 의해 유도된 세포 내 지방 함량 측정을 이용하였다.FFA - induced intracellular fat content measurements were used to compare the lipid accumulation inhibitory effects of extracts from the herbal extracts, the herbal extracts, the licorice extracts, the ginger extracts and the herbal extracts.

구체적으로, 비교예의 (1) 내지 (4) 또는 실시예 1-2의 혼합 생약 추출물을 1% FFA와 함께 HepG2 세포에 처리하고, 24시간 동안 배양하였다. 배양이 종료된 후, 배양된 세포를 대상으로 나일 레드 염색을 수행하였고, 그 결과를 정량적으로 나타내었다. Specifically, HepG2 cells were treated with 1% FFA in the mixed herbal medicine extracts of Comparative Examples (1) to (4) or Example 1-2 and cultured for 24 hours. After completion of the culture, nyl red staining was performed on the cultured cells, and the results were quantitatively shown.

그 결과, 도 8에 나타낸 바와 같이, 후박, 감초, 생강 및 우방자 단독 추출물의 경우, 세포 내 지방 축적을 억제하지 못하거나, 오히려 지방 축적을 다소 증가시키는 결과를 보이기도 하였다. 다만, 우방자의 경우 지방 축적을 억제시키는 결과를 보였으나, 약 18.7%의 억제 효과만을 보인 반면, 우방자에 후박, 감초, 생강을 더한 본 발명의 혼합 생약의 추출물은 58.6% 가량 억제시키는 결과를 나타내었다. 즉, 본 발명의 혼합 생약 추출물에 포함된 4가지 생약은 단독 추출물에 의해 나타내지 못하는 지방 축적 억제 효과를 나타냄을 시사하는 것이다.
As a result, as shown in FIG. 8, in the case of the extract of L., licorice, Ginger and Wisteria alone, it did not inhibit the accumulation of intracellular fat, or rather increased fat accumulation. However, in the case of the right-wingers, the inhibition effect of the fat accumulation was shown, but only about 18.7% of the inhibitory effect was shown. On the other hand, the extract of the mixed medicament of the present invention added to the right wingers with ginger, licorice, . In other words, it is suggested that the four herbal medicines contained in the mixed herbal medicine extract of the present invention exhibit the fat accumulation inhibitory effect which can not be shown by the single extract.

실험예 5: 우방자, 감초, 생강 및 후박의 혼합 생약 추출물의 고지방 식이 마우스에 미치는 효과 확인Experimental Example 5: Confirmation of effect of high-fat dietary herbal extracts on the mouse with the combination of the best friend, licorice, ginger,

(1) 실험동물의 사육(1) Breeding of experimental animals

실험동물은 4주령, 수컷 C57BL/6N 마우스 170마리를 샘타코사에서 구입하여 1주일 간 적응시킨 후 실험에 사용하였다. 이 후 난괴법(randomized complete block design)에 의하여 정상 식이 대조군(CON, 10% fat), 고지방 식이 대조군(HFD, 60% fat), 또는 고지방 식이 및 실시예 1-1 투여군(125mg/kg/day, 250mg/kg/day, 500mg/kg/day, 또는 1000mg/kg/day)으로 나누어 14주간 사육하였으며, 물과 실험 식이는 자유롭게 공급하였다. 마우스를 각 군당 13마리씩 사용하였다. 각 군을 대상으로 상기의 고지방 식이와 추출물들은 매일 14주간 경구투여 방식으로 공급하였다. 매주 한번 14주간 체중의 변화를 측정하였으며, 식이섭취량, 간 무게, 복부지방 무게를 측정하였다. 사육실 온도는 22±1 ℃, 습도는 50±5 %로 유지하였고, 명암은 12시간 간격으로 조절하였다. 10% 정상 식이와 60% 고지방 식이는 중앙실험동물사에서 구입하여 공급하였다.
In the experimental animals, 170 male C57BL / 6N mice were purchased from Samtaco Company for 4 weeks and used for the experiment after being adapted for 1 week. (CON, 10% fat), high fat dietary control (HFD, 60% fat), or high fat diet and Example 1-1 administration group (125 mg / kg / day) by randomized complete block design , 250 mg / kg / day, 500 mg / kg / day, or 1000 mg / kg / day) for 14 weeks. Water and experimental diets were fed ad libitum. Thirteen mice per group were used. For each group, the high fat diets and extracts were fed orally for 14 weeks daily. Dietary intake, liver weight, and abdominal fat weight were measured every week for 14 weeks. The incubation temperature was maintained at 22 ± 1 ℃ and the humidity was maintained at 50 ± 5%. 10% normal diet and 60% high fat diet were purchased from the Central Laboratory Animals.

(2) 체중 변화와 몸무게 대비 복부지방 비율 변화(2) Changes in body fat and abdominal fat ratio relative to body weight

실시예 1-1(KIOM-2012H)이 고지방 식이에 의한 마우스 몸무게 증가에 미치는 영향을 확인한 결과, 고지방 식이군에 비하여 고지방 식이와 본 발명의 실시예 1-1을 모두 섭취한 군의 경우, 몸무게가 현저히 낮은 결과를 나타내었다. 특히, 실시예 1-1 500mg/kg/day 및 1000mg/kg/day 투여군에서 현저히 낮은 결과를 나타내었다(도 9A).
As a result of examining the effect of Example 1-1 (KIOM-2012H) on the mouse body weight gain by the high fat diet, in the case of eating the high fat diet and the food of Example 1-1 of the present invention in comparison with the high fat diet group, Were significantly lower. In particular, the results were significantly lower in the group administered with 500 mg / kg / day and 1000 mg / kg / day of Example 1-1 (FIG. 9A).

또한, 실시예 1-1이 고지방 식이에 의한 마우스 몸무게 대비 복부지방 비율 증가에 미치는 영향을 확인한 결과, 고지방 식이군에 비하여 고지방 식이 및 실시예 1-1 500mg/kg/day 및 1000mg/kg/day 투여군에서 몸무게 대비 복부지방 비율이 유의하게 감소하는 결과를 나타내었다(도 9B).
As a result of examining the effect of Example 1-1 on the increase in the abdominal fat ratio compared to the mouse body weight by the high fat diet, it was found that the high fat diets and the high fat diets of Examples 1-1 to 500 mg / kg / day and 1000 mg / kg / day (Fig. 9B). The results are shown in Fig. 9B.

이와 같은 결과는 본 발명의 4가지 혼합 생약 추출물이 비만의 예방 또는 치료 효과가 있음을 시사하는 결과이다.
These results suggest that the four herbal medicine extracts of the present invention have an effect of preventing or treating obesity.

(3) 혈중 ALT 변화(3) ALT changes in blood

실시예 1-1이 고지방 식이에 의한 혈중 ALT 증가를 감소시킬 수 있는지를 확인한 결과, 고지방 식이군에 비하여 고지방 식이와 본 발명의 실시예 1-1을 모두 섭취한 군을 비교하였을 때, 실시예 1-1의 섭취량이 증가함에 따라 ALT의 수치도 현저히 감소하는 결과를 나타내었다(도 10). As a result of confirming whether or not Example 1-1 could reduce ALT increase by high fat diet, when comparing the group that ingested both the high fat diet and Example 1-1 of the present invention in comparison with the high fat dietary group, As the intake of 1-1 increased, the level of ALT also decreased significantly (FIG. 10).

구체적으로, 고지방식이를 섭취하여 지방간이 유발된 고지방식이군(HFD)의 혈액 내 S-GPT(ALT) 농도(119.24 IU/L)는 정상 대조군(CON)의 혈액 내 S-GPT(ALT) 농도(53.2 IU/L)에 비해 2.24배 증가한 반면, 고지방식이 HFD에 실시예 1-1을 500, 1000 mg/kg/day 투여한 군의 경우, 혈액 내 S-GPT(ALT) 농도가 64.14 IU/L, 53.38 IU/L로 감소시킨 결과를 나타내었다. Specifically, the S-GPT (ALT) concentration (119.24 IU / L) in the blood of the high fat diet (HFD) induced by fatty liver induced by the high fat diet was significantly higher in the blood of the normal control group (CON) , The S-GPT (ALT) concentration in the blood was increased to 64.14 (500 mg / kg / day) in the group treated with the high-fat diet HFD at 500 and 1000 mg / IU / L and 53.38 IU / L, respectively.

이러한 결과는 실시예 1-1의 식이 첨가가 혈중 S-GPT(ALT) 효소 활성을 감소시킬 수 있음을 나타내는 것으로, 이는 본 발명의 우방자, 감초, 생강 및 후박의 혼합 생약 추출물이 고지방식이에 의해 발생되는 지방간을 개선하여 간 손상을 억제하는 효능을 나타낼 수 있음을 시사하는 것이다.
These results indicate that the addition of the dietary supplement of Example 1-1 can reduce the activity of S-GPT (ALT) enzyme in blood. This indicates that the herbal extract of the present invention, licorice, ginger, Suggesting that it is possible to improve the liver space caused by the liver and to inhibit liver damage.

(4) 간 조직 내의 중성지방 변화(4) triglyceride changes in liver tissue

실시예 1-1이 고지방 식이에 의한 증가된 중성 지방 수치를 감소시킬 수 있는지를 확인한 결과, 고지방 식이 군에서 현저히 증가된 중성지방 수치가 실시예 1-1의 투여군에서 비교적 농도 의존적으로 감소하는 결과를 나타내었다(도 11). As a result of confirming whether Example 1-1 could reduce the increased triglyceride level by the high fat diet, it was found that the significantly increased triglyceride level in the high fat dietary group was relatively dose-dependently reduced in the administration group of Example 1-1 (Fig. 11).

구체적으로, 고지방식이를 섭취하여 지방간이 유발된 고지방식이군(HFD)의 간 조직 중성지방 농도(56.50±3.40 ㎍/㎎ liver)는 정상 대조군(CON)의 간 조직 중성지방 농도(24.36±9.50 ㎍/㎎ liver)보다 2.3배 증가한 반면, 고지방식이 HFD에 실시예 1-1을 500, 1000 mg/kg/day투여한 군에서는 간 조직 중성지방 농도가 고지방 식이군(HFD)에 비해 각각 25%, 27% 감소한 결과를 나타내었다. 따라서 실시예 1-1의 식이 첨가는 간 조직 지질 수준을 유의적으로 감소시켜 지방간을 개선하는 것으로 나타났다.
In conclusion, liver triglyceride concentration (56.50 ± 3.40 ㎍ / ㎎ liver) of high fat diet (HFD) induced by high fat diets was significantly higher than liver fat concentration (24.36 ± 9.50 (HFD) compared to the high fat diet group (HFD), whereas the high fat diet group fed the HFD at 500 and 1000 mg / kg / day, respectively, %, And 27%, respectively. Thus, the addition of the dietary supplement of Example 1-1 significantly reduced liver lipid levels and improved fatty liver.

(5) 간 조직 중량 변화(5) Change in liver tissue weight

실시예 1-1(KIOM-2012H)이 고지방 식이에 의해 증가한 간 조직 중량을 감소시킬 수 있는지를 확인한 결과, 고지방 식이군에 비하여 고지방 식이와 본 발명의 실시예 1-1을 모두 섭취한 군을 비교하였을 때, 간 조직 중량이 현저히 감소된 결과를 나타내었다. As a result of confirming whether or not Example 1-1 (KIOM-2012H) can reduce the liver tissue weight which was increased by the high fat diet, it was confirmed that the group that ingested both the high fat diet and Example 1-1 of the present invention In comparison, liver tissue weight was significantly reduced.

고지방식이의 장기간 섭취는 비알코올성 지방간을 유발시키게 된다. 이에, 본 실험에서는 고지방식이를 섭취하여 지방간이 유발된 고지방식이군(HFD)의 간 조직 중량(2.08g)이 정상 대조군(CON)의 간 조직 중량(1.38g)에 비해 현저하게 증가됨을 확인하였고, 반면, 고지방식이 HFD에 실시예 1-1을 500, 1000 mg/kg/day투여한 군의 경우, 간 조직 중량이 각각 1.57g, 1.59g로 감소한 것을 확인하였다. 이와 같은 결과는 실시예 1-1이 고지방 식이에 의해 유발되는 간 조직에 대한 지방 축적을 방지하는 효과를 가짐을 뒷받침하는 결과이다(도 12).
Long - term intake of high - fat diets causes nonalcoholic fatty liver. Therefore, in this experiment, it was confirmed that the liver tissue weight (2.08 g) of the high fat diet (HFD) fed with high fat diet significantly increased the liver tissue weight (1.38 g) of the normal control (CON) . On the other hand, it was confirmed that the liver tissue weights were decreased to 1.57 g and 1.59 g, respectively, when the high-fat diet fed group 1 and group HFD received 500 and 1000 mg / kg / day, respectively. These results support the fact that Example 1-1 has the effect of preventing fat accumulation in the liver tissue induced by the high fat diet (Fig. 12).

(6) 공복 시의 혈중 당 농도 변화(6) Changes in blood glucose concentration at fasting

실시예 1-1이 고지방 식이에 의한 혈중 당 농도를 감소시킬 수 있는지를 확인한 결과, 고지방 식이군에 비하여 고지방 식이와 본 발명의 실시예 1-1을 모두 섭취한 군을 비교하였을 때, 실시예 1-1의 섭취량이 증가함에 따라 혈중 당 농도가 유의하게 감소하는 결과를 나타내었다(도 13).As a result of confirming whether or not Example 1-1 can lower blood sugar level by the high fat diet, when comparing the group which ingested both the high fat diet and Example 1-1 of the present invention in comparison with the high fat dietary group, As the intake of 1-1 was increased, the blood glucose concentration was significantly decreased (Fig. 13).

구체적으로, 고지방식이를 섭취하여 지방간이 유발된 고지방식이군(HFD)의 혈청(serum) 내 당 농도(293.06±41.42 ㎎/㎗)는 정상 대조군(CON)의 혈청 내 당 농도(192.3±38.02 ㎎/㎗))에 비해 35% 증가한 반면, 고지방식이 HFD에 실시예 1-1을 1000 mg/kg/day투여한 군의 경우, 혈청 내 당 농도는 228.3±36.48 ㎎/㎗로서, 고지방식이군에 비해 22% 감소한 것으로 나타났다. 따라서 실시예 1-1의 식이 첨가는 혈청 내 당 농도를 유의적으로 감소시키는 것으로 나타났다.
Specifically, the glucose concentration (293.06 ± 41.42 ㎎ / ㎗) in the serum of high fat diet (HFD) fed with high fat diets was significantly higher in the serum (192.3 ± 38.02 Kg / day), the glucose level in the serum was 228.3 ± 36.48 mg / dl in the case of administration of Example 1-1 at 1000 mg / kg / day to the high fat diet HFD, And 22% less than the group. Therefore, the addition of the dietary supplement of Example 1-1 significantly reduced the glucose concentration in the serum.

(7) 당 분해능 변화(7) Change per resolution

고지방 식이의 장기간 섭취는 당 분해능 감소를 유발시키게 된다. 이와 같은 고지방 식이에 의하여 감소된 당 분해능을, 본 발명의 KIOM-2012H가 증가시킬 수 있는지 여부를 확인하였다. Long-term intake of high-fat diets leads to decreased glucose resolution. It was confirmed whether or not the KIOM-2012H of the present invention can increase the sugar solubility reduced by such a high-fat diet.

그 결과, 도 14에 나타낸 바와 같이, 고지방식이 HFD에 KIOM-2012H를 1000 mg/kg/day투여한 군에서 당 분해능이 고지방식이 HFD대조군에 비해 현저하게 증가한 것으로 나타났다.
As a result, as shown in FIG. 14, the high-fat diet method significantly increased the glucose tolerance in the group treated with 1000 mg / kg / day of KIOM-2012H in HFD compared to the HFD control group.

(8) KIOM-2012H의 지질 유입 및 축적에 관여하는 유전자의 발현에 미치는 영향(8) Effect of KIOM-2012H on expression of genes involved in lipid entry and accumulation

상기 (4)에서, 본 발명의 혼합 생약 추출물이 간세포로의 지방축적을 억제하는 효과를 나타냄을 확인하였으므로, 이러한 효과가 세포 내 유전자 발현수준의 변화에 의한 것인지를 규명하기 위하여, 하기와 같은 실험을 수행하였다.In the above (4), it was confirmed that the mixed herbal medicine extract of the present invention had an effect of inhibiting fat accumulation in hepatocytes. Therefore, in order to determine whether this effect is due to a change in the level of intracellular gene expression, Respectively.

실시예 1-1이 고지방 식이에 의하여 증가된 지질 방울 축적 유전자 발현을 확인하기 위하여, 간에서 지질 방울 축적과 지방 유입을 조절하는 대표적인 유전자인 Fsp27/Cidec, Adrp/Plin2c, Fit2/Fitm2 및 CD36의 발현 변화를 확인하였다. In order to confirm the expression of the lipid droplet accumulation gene increased by the high-fat diet of Example 1-1, the expression levels of Fsp27 / Cidec, Adrp / Plin2c, Fit2 / Fitm2 and CD36 Expression changes were confirmed.

이를 위하여, 간 조직으로부터 총 RNA를 분리하고, 상대적인 mRNA 발현을 검출하기 위하여 테크만 프로브(Taqman probes, ABI)를 이용한 역-전사(reverse-transcription)와 Q-PCR을 수행하여, Fsp27/Cidec, Adrp/Plin2c, Fit2/Fitm2, 및 CD36의 mRNA 수준을 측정 및 비교하였고, 그 결과를 도 15에 나타내었다.To do this, total RNA was isolated from liver tissue and reverse-transcription and Q-PCR were performed using Taqman probes (ABI) to detect relative mRNA expression, and Fsp27 / Cidec, MRNA levels of Adrp / Plin2c, Fit2 / Fitm2, and CD36 were measured and compared, and the results are shown in Fig.

그 결과, 도 15에 나타낸 바와 같이, 고지방식이 HFD에 실시예 1-1을 500, 1000 mg/kg/day투여한 군에서 Fsp27/Cidec, Adrp/Plin2c, Fit2/Fitm2 및 CD36의 mRNA 수준이 현저하게 감소하는 결과를 나타내었다.
As a result, as shown in Fig. 15, mRNA levels of Fsp27 / Cidec, Adrp / Plin2c, Fit2 / Fitm2, and CD36 were higher in the high fertilization type HFD group administered with 500 mg / kg / And significantly decreased.

종합하면, 본 발명의 우방자, 감초, 생강 및 후박의 혼합 생약 추출물을 포함하는 본 발명의 조성물이, 지방간 질환 및 비만을 예방 또는 치료할 수 있음을 시사하는 것이다.
Taken together, this suggests that the composition of the present invention, including the herbal extract of licorice, licorice, ginger and horseradish of the present invention, can prevent or treat fatty liver disease and obesity.

이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술 분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로서 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.From the above description, it will be understood by those skilled in the art that the present invention may be embodied in other specific forms without departing from the spirit or essential characteristics thereof. In this regard, it should be understood that the above-described embodiments are to be considered in all respects as illustrative and not restrictive. The scope of the present invention should be construed as being included in the scope of the present invention without departing from the scope of the present invention as defined by the appended claims.

Claims (8)

우방자(Arctium lappa Linne), 감초(Glycyrrhiza uralensis Fischer), 생강(Zingiberis rhizoma Crudus) 및 후박(Magnoliae Cortex)의 혼합 생약 추출물을 포함하는, 비만의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
A pharmaceutical composition for preventing or treating obesity, comprising a mixed herbal extract of Arctium lappa Linne, Glycyrrhiza uralensis Fischer, Ginger ( Zingiberis rhizoma Crudus) and Magnoliae Cortex .
삭제delete 제1항에 있어서,
상기 혼합 생약 추출물은 우방자, 감초, 생강 및 후박의 혼합물을 추출한 것이거나, 또는 우방자 추출물, 감초 추출물, 생강 추출물 및 후박 추출물을 서로 혼합한 것인 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the mixed herbal extract is one obtained by extracting a mixture of alopecia, licorice, ginger and horseradish, or a combination of a herbal extract, licorice extract, ginger extract and horsetail extract.
제1항에 있어서,
상기 추출은 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 및 이들의 혼합용매로 이루어지는 군으로부터 선택된 용매로 수행된 것인 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the extraction is carried out with a solvent selected from the group consisting of water, alcohols having 1 to 4 carbon atoms, and mixed solvents thereof.
제4항에 있어서,
상기 탄소수 1 내지 4의 알코올 용매는 메탄올, 에탄올 또는 부탄올인 것인 조성물.
5. The method of claim 4,
Wherein the alcohol solvent having 1 to 4 carbon atoms is methanol, ethanol or butanol.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체를 추가로 포함하는 것인 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the composition further comprises a pharmaceutically acceptable carrier.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가지는 것인 조성물.
The method according to claim 1,
The composition may be any one selected from the group consisting of tablets, pills, powders, granules, capsules, suspensions, solutions, emulsions, syrups, sterilized aqueous solutions, nonaqueous solvents, suspensions, emulsions, lyophilized preparations and suppositories ≪ / RTI >
우방자(Arctium lappa Linne), 감초(Glycyrrhiza uralensis Fischer), 생강(Zingiberis rhizoma Crudus) 및 후박(Magnoliae Cortex)의 혼합 생약 추출물을 포함하는, 비만의 예방 또는 개선용 식품 조성물. A food composition for preventing or improving obesity, comprising a mixed herbal extract of Arctium lappa Linne, Glycyrrhiza uralensis Fischer, Ginger ( Zingiberis rhizoma Crudus) and Magnoliae Cortex .
KR1020130069063A 2013-06-17 2013-06-17 A composition for preventing or treating fatty liver disease or obesity, comprising a extract of Arctium lappa Linne, Glycyrrhiza uralensis Fischer, Zingiberis rhizoma Crudus and Magnoliae Cortex KR101523663B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020130069063A KR101523663B1 (en) 2013-06-17 2013-06-17 A composition for preventing or treating fatty liver disease or obesity, comprising a extract of Arctium lappa Linne, Glycyrrhiza uralensis Fischer, Zingiberis rhizoma Crudus and Magnoliae Cortex

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020130069063A KR101523663B1 (en) 2013-06-17 2013-06-17 A composition for preventing or treating fatty liver disease or obesity, comprising a extract of Arctium lappa Linne, Glycyrrhiza uralensis Fischer, Zingiberis rhizoma Crudus and Magnoliae Cortex

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20140146407A KR20140146407A (en) 2014-12-26
KR101523663B1 true KR101523663B1 (en) 2015-05-28

Family

ID=52675665

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020130069063A KR101523663B1 (en) 2013-06-17 2013-06-17 A composition for preventing or treating fatty liver disease or obesity, comprising a extract of Arctium lappa Linne, Glycyrrhiza uralensis Fischer, Zingiberis rhizoma Crudus and Magnoliae Cortex

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR101523663B1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20200089782A (en) 2019-01-17 2020-07-28 한국식품연구원 Composition for preventing or improving non-alcoholic fatty liver disease comprising complex extracts of ginger, centella asiatica and ramie leaf
KR20210079828A (en) 2019-12-20 2021-06-30 주식회사 지앤피바이오사이언스 A composition for improving, preventing and treating of anti-inflammatory, obesity and nonalcoholic fatty liver disease comprising Artemisia Annua extract, Magnolia Obovata Bark extract and its mixed extracts

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104771702B (en) * 2015-04-23 2018-11-02 上海众胜医药科技有限公司 A kind of preparation method of Chinese medicine composition that treating fatty liver and steatohepatitis
WO2017111488A1 (en) * 2015-12-24 2017-06-29 (주)휴온스 Composition for preventing or treating fatty liver, hyperlipidemia or obesity, containing monoterpenyl magnolol as active ingredient, and method for preparing fraction of magnolia officinalis rehd. et wils.
JP7478504B2 (en) * 2017-03-16 2024-05-07 クラシエ株式会社 Inhibitor of enlargement of lipid droplets in the liver, composition for inhibiting enlargement of lipid droplets in the liver, and food composition for inhibiting enlargement of lipid droplets in the liver
KR102158337B1 (en) * 2019-03-13 2020-09-25 안동대학교 산학협력단 Composition for preventing, ameliorating or treating fatty liver disease comprising vinegar of Kalopanax septemlobus as effective component

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20090022637A (en) * 2007-08-31 2009-03-04 재단법인서울대학교산학협력재단 The composition comprising the extract or purified extract of magnolia cortex for preventing and treating fatty liver diseases, and a method for preparing purified extract

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20090022637A (en) * 2007-08-31 2009-03-04 재단법인서울대학교산학협력재단 The composition comprising the extract or purified extract of magnolia cortex for preventing and treating fatty liver diseases, and a method for preparing purified extract

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
무간생간탕. 우수경험방집(2004 발행). 한국전통지식포탈 DB *
무간생간탕. 우수경험방집(2004 발행). 한국전통지식포탈 DB*

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20200089782A (en) 2019-01-17 2020-07-28 한국식품연구원 Composition for preventing or improving non-alcoholic fatty liver disease comprising complex extracts of ginger, centella asiatica and ramie leaf
KR20210079828A (en) 2019-12-20 2021-06-30 주식회사 지앤피바이오사이언스 A composition for improving, preventing and treating of anti-inflammatory, obesity and nonalcoholic fatty liver disease comprising Artemisia Annua extract, Magnolia Obovata Bark extract and its mixed extracts

Also Published As

Publication number Publication date
KR20140146407A (en) 2014-12-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101523663B1 (en) A composition for preventing or treating fatty liver disease or obesity, comprising a extract of Arctium lappa Linne, Glycyrrhiza uralensis Fischer, Zingiberis rhizoma Crudus and Magnoliae Cortex
KR101930483B1 (en) Smilax china leaf fermented with Aspergillus species and Extract of the same
KR20120002131A (en) Composition for treating or preventing obesity containing curcuma longa extract
KR20100122333A (en) Compositions for the prevention and treatment of obesity, hyperlipidemia, atherosclerosis, fatty liver, diabetes mellitus or metabolic syndrome comprising extracts or fractions of glycine max leaves as an active ingredient
KR20130102295A (en) Composition comprising extract of humulus japonicus or humulus scandens for preventing or treating of metabolic diseases
KR101830048B1 (en) Food composition for improvement obesity or improvement hyperlipidemic with the extract of Terminalia chebula fruit and Phyllanthus emblica
KR20160141027A (en) Phamaceutical composition or healthy food comprising water extracts from Pleurotus eryngii var. ferulea (Pf.). for treating or preventing metabolic disorder
KR20140137289A (en) Composition comprising an extract of Alpinia officinarum Hance for preventing and treating hangover or liver disease
KR102178199B1 (en) a composition comprising an extract of Rhus verniciflua and Eucommia ulmoides, as an active ingredient for preventing or treating obesity
KR20140137288A (en) Composition comprising an extract of Alpinia officinarum Hance for preventing and treating hangover or liver disease
KR101445485B1 (en) A composition comprising the combined extract of Curcuma Longa L. and Nelumbo nucifera as an active ingredient showing anti-obesity and anti-hypercholesterolemia activity
KR102122408B1 (en) Composition for preventing, ameliorating or treating andropause syndrome comprising roasted Glycyrrhiza uralensis extract as effective component
KR20180137971A (en) Composition of the hot water extract of Dendropanax morbiferus Lev. having anti-apoptotic activity for preventing and treating of neurodegenerative diseases
KR20210021333A (en) Anti-obese composition comprising Gymnaster koraiensis
JP6981641B2 (en) PDE5 activity inhibitor
KR100895500B1 (en) Composition for the prevention and treatment of fatty liver diseases containing honokiol as an active ingredient
KR20160094313A (en) Composition for anti-obesity comprising Chaenomelis Fructus extract or its fraction as effective component
KR100695625B1 (en) Composition comprising an extract of roasted Licorice showing anti-inflammatory activity.
KR101533910B1 (en) Composition for preventing and improving hyperlipidemia comprising extracts of Momordica charantia, Corni fructus, Schizandra chinensis and Jujube
KR20120005111A (en) Athletic ability enhancing composition comprising licorice extracts and preparation method thereof
KR101340040B1 (en) Composition comprising extract of malt for preventing or treating of obesity and metabolic diseases
KR100992995B1 (en) Novel uses of piperonal
KR20110078237A (en) Composition for treating or preventing obesity containing eriobotrya japonica extract
KR20040084376A (en) Pharmaceutical composition comprising the extract of Chlorella for anti-inflammation
KR101207991B1 (en) Composition for preventing or treating obesity and metabolic disease

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
AMND Amendment
E601 Decision to refuse application
X091 Application refused [patent]
AMND Amendment
X701 Decision to grant (after re-examination)
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20180410

Year of fee payment: 4