KR101441097B1 - Strain for green tea fermentation and preparation method of green tea fermentation liquid using the same - Google Patents

Abstract

본 발명은 녹차 발효용 균주 및 이를 이용한 녹차발효액의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명에 따른 녹차 발효용 균주는 발효를 통해 녹차의 관능성과 기능성을 향상시키는 균주이다. 또한 본 발명에 따른 균주를 이용하여 발효되는 녹차발효액의 제조방법은 녹차의 관능성과 기능성을 향상시키는 것이기 때문에 녹차의 소비를 증가시킬 수 있으며, 관련 녹차 산업 발전에 크게 기여할 수 있다. 또한 녹차 소비를 통해 녹차 재배 농가의 수익 창출에 크게 기여할 수 있다. 또한 녹차의 발효를 통해 녹차의 관능성 및 기능성을 크게 향상시키는 신규한 균주를 개발한 것으로서 젖산 균주의 활용도를 더욱 다각화한다. The present invention relates to a strain for fermentation of green tea and a method for producing a fermented green tea using the same.
The strain for fermentation of green tea according to the present invention is a strain which improves the sensory and functional properties of green tea through fermentation. In addition, since the method of manufacturing a fermented green tea fermented by using the strain according to the present invention enhances the sensory and functional properties of green tea, consumption of green tea can be increased and the green tea industry can contribute to the development of the related green tea industry. In addition, consumption of green tea can greatly contribute to profit generation of green tea farmers. In addition, we have developed a novel strain that significantly improves the functionality and functionality of green tea through fermentation of green tea, and further diversifies utilization of lactic acid strains.

Description

녹차 발효용 균주 및 이를 이용한 녹차발효액의 제조방법{Strain for green tea fermentation and preparation method of green tea fermentation liquid using the same}TECHNICAL FIELD [0001] The present invention relates to a strain for fermentation of green tea and a method for preparing the fermentation broth using the same,

본 발명은 녹차 발효용 신규한 균주 및 이를 이용한 녹차발효액의 제조방법에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 신규한 균주를 이용하여 녹차를 발효시킴으로서 녹차의 전체적인 기능성 및 관능성 향상을 도모하는 발명에 관한 것이다.
The present invention relates to a novel strain for fermentation of green tea, and a method for producing the fermentation broth using the same, and more particularly, to an invention for improving the overall functionality and functionality of a green tea by fermenting green tea using a novel strain .

젖산 균주에 의한 식물체의 발효는 당을 주요 기질로 하여 일어나는 젖산 발효가 대부분이며, 일반적으로 여러 가지 식물 원료에 당을 첨가하거나 젖산 균주 등의 미생물을 첨가하여 발효시킨다. 젖산균과 식물체에 함유되어 있는 여러 가지의 효소에 의해서 식물 추출액을 발효시키게 되면 여러 가지 생화학반응에 의해서 식물체의 영양성분이 소화, 흡수되기 쉬운 형태로 변환될 수 있으며, 효소작용으로 생성된 성분들에 의해 새로운 생리조절기능을 발현할 수 있다. The lactic acid fermentation by the lactic acid strain is mostly lactic acid fermentation which takes place with sugar as a main substrate, and it is generally fermented by adding sugar to various plant materials or by adding microorganisms such as lactic acid strains. When the plant extract is fermented by lactic acid bacteria and various enzymes contained in the plant, the nutrients of the plant can be converted into a form that is easily digested and absorbed by various biochemical reactions, and the components produced by the enzyme action A new physiological regulation function can be expressed.

이렇게 젖산 균주의 발효에 의한 새로운 생리조절기능은 여러 요인의 상호 작용에 의해 발생할 수 있다. 그러므로 젖산 균주의 발효에 의해 발생하는 새로운 생리조절기능을 예상하는 것은 어려운 문제점이 있다. Thus, the new physiological regulation function by fermentation of lactic acid strains can be caused by the interaction of various factors. Therefore, it is difficult to anticipate the new physiological control function caused by fermentation of the lactic acid strain.

한편 녹차는 Camellia sinensis라는 학명을 갖는 차나무의 잎을 발효시켜 만든 음료로, 커피와 함께 오랜 세월 동안 세계적으로 널리 음용되어 왔으며, 현재까지 많은 소비가 이루어지고 있다. 또한 생산 지역, 시기, 제조방법 등에 따라 약 3,000종 이상의 차가 생산되고 있고 각 민족의 기호 및 기술에 맞게 다양하게 가공되는 실정이다. 이러한 녹차는 그 향과 맛 이외에 기능적인 측면에서도 탁월한 효과를 나타내고 있다. 녹차에는 데아닌과 카테킨 그리고 카페인 함량이 높으며 칼륨을 비롯한 각종 미네랄이 풍부히 함유되어 있고 비타민C를 비롯하여 토코페롤, 베타카로틴 등 여러 가지 비타민류도 다량 함유되어 있어 여러 가지 생리활성을 나타내게 된다. 녹차의 대표적인 효능인 항산화 효과는 녹차의 주요 성분인 카테킨류에 의해서 나타나는 효과로 알려져 있고 항암작용과 혈중콜레스테롤 저하 작용에도 효과적이며, 당뇨완화 및 충치예방에도 효과를 보인다는 연구결과가 보고되었다. Meanwhile, green tea is a drink made by fermenting tea leaves with the scientific name Camellia sinensis. It has been widely consumed worldwide for many years with coffee. In addition, more than 3,000 varieties of tea are produced according to the production area, time, and manufacturing method, and they are variously processed according to the tastes and techniques of each people. Such green tea has excellent effect in addition to its flavor and taste. Green tea has a high content of catechin and caffeine, and contains various minerals including potassium. It also contains various vitamins such as tocopherol and beta-carotene as well as vitamin C, thereby exhibiting various physiological activities. The antioxidant effect, which is a typical effect of green tea, is known to be an effect caused by catechin, which is a main component of green tea, and is also effective in anticancer action and blood cholesterol lowering effect, and also in diabetic relief and prevention of cavities.

이렇게 녹차에는 관능성과 기능성이 풍부함에도 불구하고 여러 요인에 의해 젖산 균주로부터 발현되는 생리조절기능을 예상해 내기 어려운 문제점이 있으므로, 상기 젖산 균주를 사용하여 발효시킴으로써 이러한 녹차의 관능성과 기능성을 보다 월등히 향상시키려는 노력은 전무한 실정이다. 또한 여기에 더하여 발효를 통해 녹차의 관능성과 기능성을 보다 향상시킬 수 있는 신규한 젖산 균주를 발굴하려는 노력이 전무한 실정에 처한 문제점이 있다.
Thus, there is a problem that it is difficult to anticipate the physiological control function expressed by the lactic acid strain due to various factors, even though the green tea has abundant sensibility and functionality. Therefore, by fermenting the lactic acid strain, No efforts have been made. In addition, there is a problem in that there is no attempt to discover a novel lactic acid strain that can further improve the sensory and functional properties of green tea through fermentation.

본 발명은 상술한 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로서, 본 발명의 목적은 발효를 통해 녹차의 관능성과 기능성을 보다 향상시키는 신규한 녹차 발효용 균주 및 이를 이용한 녹차발효액의 제조방법을 제공하는 것이다.
Disclosure of Invention Technical Problem [8] Accordingly, the present invention has been made keeping in mind the above problems occurring in the prior art, and it is an object of the present invention to provide a novel green tea fermentation strain and a method for producing a green tea fermentation solution using the same.

위와 같은 과제를 해결하기 위한 본 발명의 한 특징에 따른 균주는 녹차 잎에서 분리된 녹차 당추출물 발효용 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) RP-001[기탁번호 KCCM11303P] 또는 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) RP-002[기탁번호 KCCM11304P]이다.
In order to solve the above-mentioned problems, a strain according to one aspect of the present invention comprises Lactobacillus pentosus RP-001 (Accession No. KCCM11303P) or Lactobacillus plantarum plantarum) RP-002 [Deposit No. KCCM11304P].

본 발명의 또 다른 특징에 따른 녹차발효액의 제조방법은 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) RP-001[기탁번호 KCCM11303P] 또는 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) RP-002[기탁번호 KCCM11304P]를 이용한다.The method for producing a fermentation broth of green tea according to another aspect of the present invention uses Lactobacillus pentosus RP-001 [Deposition No. KCCM11303P] or Lactobacillus plantarum RP-002 [Deposit No. KCCM11304P] .

또한 상기 녹차발효액은 녹차 잎, 물, 당액 및 상기 RP-001 또는 RP-002 균주를 혼합하여 발효시키는 것을 특징으로 한다.Also, the green tea fermentation broth is characterized in that the green tea leaves, water, sugar solution, and RP-001 or RP-002 strain are mixed and fermented.

또한 상기 당액은 포도당, 과당, 설탕 및 올리고당으로 이루어지는 군 중에서 선택된 어느 하나 이상의 당을 포함하여 제조되는 것을 특징으로 한다.The sugar solution may be prepared by including at least one sugar selected from the group consisting of glucose, fructose, sugar, and oligosaccharides.

또한 상기 녹차발효액은 물 100중량부에 대하여 녹차 잎 10~200 중량부, 당액 10~200중량부, RP-001 또는 RP-002 균주 0.01 내지 1중량부를 혼합하여 발효시키는 것을 특징으로 한다.The green tea fermentation broth is prepared by mixing 10-200 parts by weight of green tea leaves, 10-200 parts by weight of sugar solution, 0.01-1 parts by weight of RP-001 or RP-002 strain per 100 parts by weight of water.

또한 상기 발효는 3~15일간 10~35℃의 온도에서 1차 발효를 거친 후, 3~6개월 동안 4~15℃의 온도에서 2차 발효하여 이루어지는 것을 특징으로 한다.The fermentation is performed by first fermenting at a temperature of 10 to 35 ° C. for 3 to 15 days and then by secondary fermentation at a temperature of 4 to 15 ° C. for 3 to 6 months.

본 발명에 따른 녹차 발효용 균주는 발효를 통해 녹차의 관능성과 기능성을 향상시키는 균주이다. The strain for fermentation of green tea according to the present invention is a strain which improves the sensory and functional properties of green tea through fermentation.

또한 본 발명에 따른 균주를 이용하여 발효되는 녹차의 제조방법은 녹차의 관능성과 기능성을 향상시키는 것이기 때문에 녹차의 소비를 증가시킬 수 있으며, 관련 녹차 산업 발전에 크게 기여할 수 있다. Also, since the method of manufacturing green tea fermented by using the strain according to the present invention improves the sensuality and functionality of green tea, consumption of green tea can be increased and it can contribute to development of the related green tea industry.

또한 녹차 소비를 통해 녹차 재배 농가의 수익 창출에 크게 기여할 수 있다. 또한 녹차의 발효를 통해 녹차의 관능성 및 기능성을 크게 향상시키는 신규한 균주를 개발한 것으로서 젖산 균주의 활용도를 더욱 다각화한다.
In addition, consumption of green tea can greatly contribute to profit generation of green tea farmers. In addition, we have developed a novel strain that significantly improves the functionality and functionality of green tea through fermentation of green tea, and further diversifies utilization of lactic acid strains.

도 1은 본 발명에 따른 균주인 기탁번호 KCCM11303P 균주의 필로제닉 트리를 나타낸 그림이다.
도 2는 본 발명에 따른 균주인 기탁번호 KCCM11304P 균주의 필로제닉 트리를 나타낸 그림이다. 1 is a diagram showing a phylogenetic tree of a strain No. KCCM11303P, which is a strain according to the present invention.
2 is a diagram showing a phylogenetic tree of the strain No. KCCM11304P, which is a strain according to the present invention.

이에 본 발명자들은 녹차의 관능성 및 기능성을 크게 향상시키는 녹차 발효용 신규 균주를 개발하기 위하여 예의 연구 노력한 결과, 본 발명에 따른 녹차 발효용 균주 및 이를 이용한 녹차의 제조방법을 발견하여 본 발명을 완성하였다. Accordingly, the inventors of the present invention found that a strain for fermentation of green tea according to the present invention and a method for producing green tea using the same were found as a result of intensive research to develop a novel strain for green tea fermentation which greatly improved the functionality and functionality of green tea. Respectively.

일반적으로 젖산 균은 글루코오스 등 당류를 분해하여 젖산을 생성하는 세균으로서 흔히 유산균이라고도 한다. 그리고 간균이라고도 부르는 락토바실러스(Lactobacillus) 속에 속하는 균주는 이러한 젖산 균주의 일례에 해당한다. Generally, lactic acid bacteria are bacteria that produce lactic acid by decomposing saccharides such as glucose and are often referred to as lactic acid bacteria. A strain belonging to the genus Lactobacillus, also called bacillus, is an example of such a lactic acid strain.

구체적으로 본 발명에 따른 녹차 발효용 균주는 녹차 잎에서 분리된 녹차 당추출물 발효용 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) RP-001[기탁번호 KCCM11303P] 또는 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) RP-002[기탁번호 KCCM11304P]일 수 있다. Specifically, the strain for fermentation of green tea according to the present invention is characterized in that Lactobacillus pentosus RP-001 [Deposit No. KCCM11303P] or Lactobacillus plantarum RP-002 [Deposit number KCCM 11304P].

상기 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) RP-001은 차나무 잎 또는 녹차 잎으로부터 분리되며, 서열번호 1의 염기서열로 암호화되는 녹차 발효용 균주로서 기탁번호는 KCCM11303P 일 수 있다. Lactobacillus pentosus RP-001 is isolated from tea leaves or green tea leaves, and is a strain for fermentation of green tea, which is encoded by the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 1, and can be deposited at KCCM 11303P.

상기 서열번호 1의 염기서열은 16S rDNA의 염기서열일 수 있으며, 5’에서 3’방향의 염기서열일 수 있다.The nucleotide sequence of SEQ ID NO: 1 may be a base sequence of 16S rDNA and may be a nucleotide sequence of 5'to 3'direction.

상기 기탁번호 KCCM11303P 의 균주는 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus)와 99% 이상의 상동성을 보일 수 있다.The strain of the above deposit number KCCM11303P may exhibit 99% or more homology with Lactobacillus pentosus.

상기 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) RP-002는 차나무 잎 또는 녹차 잎으로부터 분리되며, 서열번호 2의 염기서열로 암호화되는 녹차 발효용 균주로서 기탁번호는 KCCM11304P 일 수 있다.Lactobacillus plantarum RP-002 is isolated from tea leaves or green tea leaves and is a strain for fermentation of green tea, which is encoded by the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 2, and can be deposited at KCCM11304P.

상기 서열번호 2의 염기서열은 16S rDNA의 염기서열일 수 있으며, 5’에서 3’방향의 염기서열일 수 있다.The base sequence of SEQ ID NO: 2 may be a base sequence of 16S rDNA, and may be a base sequence of 5 'to 3' direction.

상기 기탁번호 KCCM11304P 의 균주는 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)과 99% 이상의 상동성을 보일 수 있다.The strain of the deposit number KCCM11304P may have 99% or more homology with Lactobacillus plantarum.

상기 기탁번호 KCCM11303P 또는 기탁번호 KCCM11304P 의 균주는 차나무 잎 또는 녹차 잎으로부터 분리된 것일 수 있다. 이를 통해 다른 방법으로 분리된 락토바실러스 펜토서스에 비해 발효된 녹차의 관능성과 기능성을 월등히 향상시킬 수 있다. The strain of KCCM 11303P or KCCM 11304P may be isolated from tea leaves or green tea leaves. This makes it possible to significantly improve the sensory and functional properties of fermented green tea as compared to other methods of Lactobacillus pentosus.

상기 차나무 잎은 차나무로부터 수득되는 것이라면 부위별로 특별한 제한이 있는 것은 아니다. 또한 상기 녹차 잎은 상기 녹차로 이용하기 위해 상기 차나무 잎을 가공하여 제조되는 것으로서 당업계에 적용되는 공지의 가공 방법이 모두 포함되며, 상기 가공의 방법에 특별한 제한이 있는 것은 아니다.The tea leaf is not limited to a particular region as long as it is obtained from a tea tree. Also, the green tea leaves are manufactured by processing the tea leaves for use in the green tea, and include all known processing methods applicable in the art, and there is no particular limitation on the processing method.

상기 기탁번호 KCCM11303P의 균주로부터 발효된 녹차는 산도 0.30~0.35%, pH 4~5, 라디칼 소거능에 의한 항산화능이 92% 이상인 것으로서, 5점 척도법에 따른 종합기호도 평가 점수가 3.5 이상일 수 있다. 그러므로 상기 녹차의 산도, pH, 항산화능 및 5점 척도법에 의한 평가 점수가 상기 상한치 내지 하한치의 범위 내에서 이루어지게 되면, 기존의 락토바실러스 속에 속하는 다른 균주로부터 발효되는 녹차에 비해 월등히 향상된 기능성 및 관능성을 가지는 것에 해당 할 수 있다. 또한 동속 동종인 것으로서 기존의 다른 식물체나 물질로부터 분리된 락토바실러스 펜토서스에 비해 차나무 잎 또는 녹차 잎에서 분리한 균주이기 때문에 월등히 향상된 관능성과 기능성을 보유한 발효 녹차를 수득할 수 있다. The green tea fermented from the strain No. KCCM11303P has an acidity of 0.30 to 0.35%, a pH of 4 to 5, and an antioxidative activity of 92% or more by radical scavenging ability, and the overall preference score according to the 5-point scale method may be 3.5 or more. Therefore, when the score of the green tea is evaluated by the pH, antioxidant ability, and 5-point scaling method within the range of the upper limit value or the lower limit value, it is possible to obtain a significantly improved functional and sensory It may be equivalent to having sex. In addition, since it is a homozygous strain, it is a strain isolated from a tea leaf or green tea leaf as compared with Lactobacillus pentosus isolated from other plants or substances, so that a fermented green tea having significantly improved sensibility and functionality can be obtained.

또한 본 발명에 따른 KCCM11303P 균주는 기존의 다른 락토바실러스 및 락토바실러스 펜토서스 균주에 의해 발효된 녹차에 비해 향상된 항산화능을 보이는 것일 수 있다.The KCCM11303P strain according to the present invention may exhibit an enhanced antioxidant ability as compared with green tea fermented by other Lactobacillus and Lactobacillus pentosus strains.

상기 기탁번호 KCCM11304P 의 균주로부터 발효된 녹차는 산도 0.28~0.33%, pH 4~5, 라디칼 소거능에 의한 항산화능이 90% 이상인 것으로서, 5점 척도법에 따른 종합기호도 평가 점수가 3.5 이상일 수 있다. 그러므로 상기 녹차의 산도, pH, 항산화능 및 5점 척도법에 의한 평가 점수가 상기 상한치 내지 하한치의 범위 내에서 이루어지게 되면, 기존의 락토바실러스 속에 속하는 다른 균주로부터 발효되는 녹차에 비해 월등히 향상된 기능성 및 관능성을 가지는 것에 해당 할 수 있다. 또한 동속 동종인 것으로서 기존의 다른 식물체나 물질로부터 분리된 락토바실러스 플란타룸에 비해 차나무 잎 또는 녹차 잎에서 분리한 균주이기 때문에 월등히 향상된 관능성과 기능성을 보유한 발효 녹차를 수득할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 KCCM11304P 균주는 기존의 다른 락토바실러스 및 락토바실러스 플란타룸 균주에 의해 발효된 녹차에 비해 향상된 항산화능을 보이는 것일 수 있다.The green tea fermented from the strain No. KCCM11304P has an acidity of 0.28 to 0.33%, a pH of 4 to 5, and an antioxidative activity of 90% or more by radical scavenging ability, and the overall preference score according to the 5-point scale method may be 3.5 or more. Therefore, when the score of the green tea is evaluated by the pH, antioxidant ability, and 5-point scaling method within the range of the upper limit value or the lower limit value, it is possible to obtain a significantly improved functional and sensory It may be equivalent to having sex. In addition, since it is a homozygous strain, it is a strain isolated from tea leaves or green tea leaves as compared with Lactobacillus plantarum isolated from other plants or substances. Thus, a fermented green tea having significantly improved sensibility and functionality can be obtained. In addition, KCCM11304P strain according to the present invention may have improved antioxidant ability compared to green tea fermented by other Lactobacillus and Lactobacillus plantarum strains.

상기 당추출물에 있어서 당은 포도당, 과당, 설탕 및 올리고당으로 이루어지는 군 중에서 선택된 어느 하나 이상일 수 있다. 또한 상기 당추출물에서 추출의 방법은 당업계에 적용되는 공지의 방법이 모두 포함될 수 있다. In the sugar extract, the sugar may be any one or more selected from the group consisting of glucose, fructose, sugar, and oligosaccharides. Further, the method of extracting from the sugar extract may include all known methods applicable in the art.

그러므로 본 발명에 따른 KCCM11303P 균주 또는 KCCM11304P 균주는 발효를 통해 녹차의 관능성과 기능성을 보다 향상시킬 수 있다.
Therefore, the KCCM11303P strain or KCCM11304P strain according to the present invention can further improve the sensory and functional properties of green tea through fermentation.

본 발명의 또 다른 특징에 따른 녹차발효액의 제조방법은 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus)인 RP-001 KCCM11303P 또는 락토바실러스 플란다룸(Lactobacillus plantarum)인 RP-002 KCCM11304P 를 이용한 것일 수 있다. The method of producing the fermentation broth of green tea according to another aspect of the present invention may be using RP-001 KCCM 11303P, Lactobacillus pentosus, or RP-002 KCCM 11304P, Lactobacillus plantarum.

상기 녹차발효액은 녹차 잎, 물, 당액 및 상기 RP-001 또는 RP-002 균주를 혼합하여 발효시키는 것을 특징으로 하는 녹차발효액의 제조방법.Wherein the green tea fermentation broth is fermented by mixing green tea leaves, water, sugar solution, and RP-001 or RP-002 strain.

상기 당액은 포도당, 과당, 설탕 및 올리고당으로 이루어지는 군 중에서 선택된 어느 하나 이상의 당을 포함하여 제조되는 것일 수 있다. The sugar solution may be prepared by including at least one sugar selected from the group consisting of glucose, fructose, sugar and oligosaccharide.

상기 녹차발효액은 물 100중량부에 대하여 녹차 잎 10~200 중량부, 당액 10~200중량부, RP-001 또는 RP-002 균주 0.01 내지 1중량부를 혼합하여 발효시키는 것일 수 있다. 상기 녹차발효액을 구성하는 각 물질이 상기 조성범위의 하한치 미만으로 혼합되는 경우에는 본 발명에서 달성하려는 녹차발효액의 풍미감을 발현시킬 수 없어 바람직하지 않으며, 상기 조성범위의 상한치를 초과하여 혼합되는 경우에는 풍미감을 달성할 수 없을 뿐만 아니라 다른 물질의 함량을 제한할 수 있어 바람직하지 않다. The green tea fermentation broth may be prepared by mixing 10-200 parts by weight of green tea leaves, 10-200 parts by weight of sugar solution, 0.01-1 parts by weight of RP-001 or RP-002 strain per 100 parts by weight of water. When each substance constituting the green tea fermentation broth is mixed below the lower limit of the composition range, it is not preferable since the flavor feeling of the fermentation broth of the green tea to be achieved in the present invention can not be expressed. If the content exceeds the upper limit of the composition range, It is not preferable because the flavor can not be achieved and the content of other substances can be limited.

상기 발효는 3~15일간 10~35℃의 온도에서 1차 발효를 거친 후, 3~6개월 동안 4~15℃의 온도에서 2차 발효하여 녹차발효액을 제조하는 것이 바람직하다. Preferably, the fermentation is performed for 3 to 15 days at a temperature of 10 to 35 ° C, followed by a second fermentation at a temperature of 4 to 15 ° C for 3 to 6 months to produce a green tea fermentation broth.

상기 발효는 바람직하게는 1차 발효 후 2차 발효를 추가로 수행하는 것이 녹차의 풍미감을 더욱 깊고 은은하게 하여 바람직할 수 있다. 또한 상기 발효의 온도가 하한치 미만이면 충분한 발효 효과를 볼 수 없어 바람직하지 않으며, 상기 발효의 온도가 상한치를 초과하면 균주의 손상 및 녹차 고유의 풍미감을 손상시킬 수 있어 바람직하지 않다. 또한 상기 발효의 시간이 하한치 미만이면 충분한 발효의 효과를 달성할 수 없어 바람직하지 않으며, 상기 발효의 시간이 상한치를 초과하면 녹차의 상태가 변질되어 녹차 고유의 풍미감을 손상시킬 우려가 있으므로 바람직하지 않다. It is preferable that the fermentation is performed by further performing secondary fermentation after the first fermentation, thereby making the flavor feeling of green tea more deep and gentle. If the temperature of the fermentation is less than the lower limit, a sufficient fermentation effect can not be obtained. If the temperature of the fermentation exceeds the upper limit, damage to the strain and flavor inherent to green tea may be impaired. If the fermentation time is less than the lower limit, a sufficient fermentation effect can not be attained. If the fermentation time exceeds the upper limit value, the condition of the green tea is altered to deteriorate the flavor inherent in the green tea, which is not preferable .

상기 1차 발효 및 2차 발효를 수행한 후 숙성의 과정을 거치는 것이 바람직하며, 상기 숙성에 있어서 숙성의 시간은 녹차의 풍미감을 증가시키는 기간이라면 특별한 제한이 있는 것은 아니지만 바람직하게는 6개월 내지 10년의 기간 동안 숙성 될 수 있다. It is preferable that the fermentation is carried out after the primary fermentation and the secondary fermentation, and the aging time in the fermentation is not particularly limited as long as it is a period for increasing the flavor feeling of green tea, It can be aged for a period of years.

또한 상기 KCCM11303P 균주 또는 KCCM11304P 균주를 이용하여 발효 녹차를 제조하게 되면 기존의 다른 락토바실러스를 이용한 경우나 락토바실러스 펜토서스 및 락토바실러스 플란타룸 균주를 이용하여 제조된 녹차에 비해 향상된 항산화능을 보일 수 있다.In addition, when the fermented green tea is prepared using the KCCM11303P strain or the KCCM11304P strain, the antioxidant activity can be enhanced compared with the case of using other Lactobacillus or Lactobacillus pentosus and Lactobacillus plantarum strain have.

그러므로 본 발명에 따른 발효 녹차의 제조방법에 의해 녹차를 제조하게 되면 녹차의 관능성과 기능성을 보다 향상시킬 수 있다.Therefore, when the green tea is prepared by the fermented green tea manufacturing method according to the present invention, the sensory and functional properties of the green tea can be improved.

상기 제조방법으로 제조되는 녹차에는 음용자의 기호에 맞게 보조 첨가제가 혼합될 수 있으며, 상기 보조 첨가제는 특별한 제한 없이 당업계에 적용되는 모든 보조 첨가제가 포함될 수 있다.
The green tea produced by the above production method may be mixed with an auxiliary additive in accordance with the preference of the drinker, and the auxiliary additive may include all auxiliary additives which are applicable in the art without any particular limitation.

이하 본 발명을 바람직한 실시예를 참고로 하여 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings. The present invention may, however, be embodied in many different forms and should not be construed as limited to the embodiments set forth herein.

실시예Example

<< 실시예Example 1: 녹차 잎에서 젖산 균주의 분리 및 배양> 1: Isolation and culture of lactic acid strains from green tea leaves>

젖산 균주 분리 배지는 식품 및 유제품으로부터 락토바실러스속(Lactobacillus) 균의 분리 및 배양에 이용되는 MRS평판배지를 이용하였다. 영양원으로서 펩톤, 글루코오즈, 육즙을 함유하며, 그램 음성균, 진균류 및 락토바실러스속 균 이외의 세균 증식을 억제하기 위해 시트르산염을 함유하고 있고 브롬페놀블루(bromophenol blue, BPB)를 0.002 % 첨가한 배지로서, 이 배지는 브롬페놀블루가 pH 3.0에서 노랑, pH 4.6에서 보라색을 나타내는 원리를 이용하여 유산균을 분리하는데 활용된다. 채집된 녹차 시료의 일정량을 멸균된 가위와 칼 등으로 잘게 자른 후 멸균 생리식염수를 가해 균질기를 이용해서 가능한 한 저온으로 균질화한 후 시료 0.1 ㎖ BPB를 첨가한 MRS 평판배지에 가해 유리막대를 도말봉으로 사용하여 잘 펴서 발라 접종하였다. 또한 MRS 평판배지에서 분리한 균주를 MRS액체배지에 접종한 후, 진동배양기(Shaking Incubator)에서 30℃에서 2~3일간 배양하였다. 하기 표 1은 이러한 BPB를 첨가한 MRS 배지의 조성을 정리하여 나타낸 표이다.
The lactic acid strain isolation medium was prepared by using MRS plate medium used for the isolation and cultivation of Lactobacillus bacteria from food and dairy products. A medium containing citrate and bromophenol blue (BPB) in an amount of 0.002% for inhibiting bacterial growth other than gram-negative bacteria, fungi and lactobacillus bacteria, containing peptone, glucose and juice as nutrient sources , Which is used to isolate lactic acid bacteria using the principle that bromophenol blue shows yellow at pH 3.0 and purple at pH 4.6. The green tea samples were cut into small pieces with sterilized scissors and knives, sterilized with physiological saline, homogenized at a low temperature as possible using a homogenizer, added to a MRS plate medium containing 0.1 ml BPB, , And was inoculated with a lotion. The strain isolated from the MRS plate medium was inoculated into the MRS liquid medium and then cultured in a shaking incubator at 30 ° C for 2 to 3 days. Table 1 summarizes the composition of the MRS medium supplemented with BPB.

<< 실시예Example 2: 녹차 잎에서 분리한 젖산 균주의 배양 및 접종 균주의 준비> 2: Culture of lactic acid strains isolated from green tea leaves and preparation of inoculation strains>

분리한 균주 및 한국식품연구원 또는 한국미생물조존센터에 기탁되어 있는 균주를 MRS액체배지에 접종한 후 30℃에서 2~3일간 배양하고 배양액은 3000 rpm의 속도로 10분간 원심분리하여 상층액의 배지를 제거하였다. 이를 다시 0.75%의 생리 식염수를 이용하여 젖산균 균주를 현탁한 후 3000 rpm의 속도로 10분간 원심분리하여 식염수를 제거하여 주었다, 이와 같은 방법을 3회 반복하여 배지성분을 완전히 제거하여 주었다. The isolates and the strains deposited at the Korea Food Research Institute or the Korean Microbiological Society were inoculated into the MRS broth and incubated at 30 ° C for 2 ~ 3 days. The broth was centrifuged at 3000 rpm for 10 minutes, . Then, the lactic acid bacteria were suspended in 0.75% physiological saline and centrifuged at 3000 rpm for 10 minutes to remove the saline solution. This method was repeated 3 times to completely remove the culture medium.

<< 실시예Example 3: 선발된 젖산 균주의 동정> 3: Identification of selected lactic acid strains>

상기 실시예 2에 의해 선발된 균주의 동정을 위하여 16S rDNA 염기서열분석을 실시하였다. 16S rDNA 염기서열분석은 선발된 균주를 MRS 액체배지에 배양시킨 후 genomic DNA extraction kit(iNtRON Biotechnology, Korea)를 사용하여 DNA를 추출하였다. 추출된 DNA는 1% agarose gel을 이용하여 확인하였다. 16S rDNA를 증폭하기 위하여 추출된genomic DNA를 template로 하여27F(5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’, forward), 1492R(5’-GGCTACCTTGT TACGACTT-3’, reverse) primer를 이용하여 PCR을 진행하였다. PCR조건은 95℃에서 1분간 denaturation, 45℃에서 1분간 annealing, 72℃에서 1분30초간 extension으로 30 cycle을 수행하였다. 얻어진 PCR product는 sequencing을 위하여 purification Kit(iNtRON Biotechnology, Korea)를 이용하여 정제하였다. DNA 염기서열은 ABI PRISM 3700 DNA analyzer (Perkin Elmer, U.S.A.)를 사용하여 염기서열을 결정하였으며, 이것을 NCBI의 BLAST를 이용하여 GenBank database와 비교하여 분리균주를 동정하였다. 16S rDNA sequencing was performed to identify the strain selected by Example 2 above. For 16S rDNA sequencing, selected strains were cultured in MRS broth and DNA was extracted using genomic DNA extraction kit (iNtRON Biotechnology, Korea). The extracted DNA was identified using 1% agarose gel. PCR was performed using 27F (5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3 ', forward) and 1492R (5'-GGCTACCTTGT TACGACTT-3', reverse) primers with genomic DNA extracted as a template to amplify 16S rDNA. The PCR conditions were 30 cycles of denaturation at 95 ° C for 1 min, annealing at 45 ° C for 1 min, and extension at 72 ° C for 1 min 30 sec. The obtained PCR product was purified using sequencing kit (iNtRON Biotechnology, Korea) for sequencing. The nucleotide sequence of the DNA was determined using ABI PRISM 3700 DNA analyzer (Perkin Elmer, U.S.A.) and compared with GenBank database using NCBI BLAST.

녹차 잎에서 순수 분리한 균주 중 녹차발효능이 우수하다고 판단되는 균주 RP-001과 RP-002균주의 16S rDNA 염기서열을 Clustal X 와 Mega 4를 이용하여 phylogenic tree를 분석한 결과 결과 RP-001균주는 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus), RP-002 균주는 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarm)과 99%의 상동성을 나타내었으며 생리적인 특성으로 항산화능, 산생성능 및 종합기호도에서 우수하다는 점이 관찰되었다. 이상의 결과로부터 RP-001 균주를 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) RP-001로, RP-002 균주를 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) RP-002 균주로 명명하였다. 또한 본 발명에서는 상기 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) RP-001는 서열번호 1의 염기서열로 암호화되며, 상기 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) RP-002 균주는 서열번호 2의 염기서열로 암호화된다. 또한 이를 각각 Korean Culture Center of Microorganisms에 기탁하였으며, 그 기탁번호는 상기 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) RP-001는 기탁번호 KCCM11303P 를 부여받았고, 상기 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) RP-002는 기탁번호 KCCM11304P 를 부여받았다. 또한 하기 도 1 및 도 2는 이의 필로제닉 트리(phylogenic tree)를 나타낸 그림이다. 이중 하기 도 1은 RP-001의 필로제닉 트리를 나타낸 것이며, 하기 도 2는 RP-002의 필로제닉 트리를 나타낸 것이다.
The phylogenic tree of 16S rDNA sequence of RP-001 and RP-002 strains, which were found to be excellent in green tea efficacy, was analyzed by purely isolating from green tea leaves. The result was RP-001 strain Lactobacillus pentosus and RP-002 strain were 99% homologous with Lactobacillus plantarum, and their physiological properties were superior in antioxidant ability, production performance and overall acceptability. . From the above results, the strain RP-001 was named Lactobacillus pentosus RP-001, and the strain RP-002 was named Lactobacillus plantarum RP-002. In the present invention, the Lactobacillus pentosus RP-001 is encoded by the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 1, and the Lactobacillus plantarum RP-002 strain is encoded by the nucleotide sequence of SEQ ID NO: do. Lactobacillus pentosus RP-001 was deposited under accession number KCCM 11303P, and the Lactobacillus plantarum RP-002 was deposited at the Korean Culture Center of Microorganisms, I received the deposit number KCCM11304P. 1 and 2 are diagrams showing a phylogenic tree thereof. FIG. 1 shows a phylogenetic tree of RP-001, and FIG. 2 shows a phylogenetic tree of RP-002.

<< 실시예Example 4: 녹차 잎에서 분리한 젖산균으로부터 발효된 녹차의 제조> 4: Preparation of green tea fermented from lactic acid bacteria isolated from green tea leaves>

본 발명에서 사용되는 녹차는 생녹차와 건조녹차(증제차 또는 덖음차)를 사용하였다. 녹차원재료에 적당량의 증류수를 가하고 여기에 설탕, 과당, 포도당, 올리고당 등의 당류가 50중량% 되게 혼합한 후 준비된 젖산균 접종균주를 1중량% 되게 접종하고 20℃에서 10일간 배양하여 1차 녹차발효액을 제조한다.
The green tea used in the present invention was green green tea and dried green tea (japanese tea or green tea). An appropriate amount of distilled water was added to the raw material of green tea, 50% by weight of saccharides such as sugar, fructose, glucose and oligosaccharide were mixed therein, and the prepared lactic acid bacteria inoculation strain was inoculated 1% by weight and cultured at 20 DEG C for 10 days. .

상기의 1차 녹차발효액은 50~100메쉬의 체로 여과하여 4~15℃의 온도에서 3~6개월 동안 2차 발효한다. The primary green tea fermentation broth is filtered through a sieve of 50-100 mesh, and is subjected to secondary fermentation at a temperature of 4 to 15 ° C for 3 to 6 months.

상기의 2차발효액은 미세여과기(0.4~1㎛)로 여과하여 4~15℃의 온도에서 6개월간 숙성하여 최종적으로 발효 녹차를 제조하였다.
The secondary fermentation broth was filtered with a microfilter (0.4 to 1 탆) and aged at a temperature of 4 to 15 캜 for 6 months to finally produce a fermented green tea.

비교예Comparative Example

비교예Comparative Example 1 One

기존의 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus)에 속하는 균주로서 그 기탁번호가 KCCM 35472인 균주로부터 발효시킨 것을 제외하고 상기 실시예와 동일한 방법으로 발효된 녹차를 본 비교예 1로 하였다.
The green tea fermented in the same manner as in the above example was regarded as Comparative Example 1, except that the strain belonging to the conventional Lactobacillus pentosus was fermented from a strain having the deposit number KCCM 35472.

비교예Comparative Example 2 2

기존의 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)에 속하는 균주로서 그 기탁번호가 KCCM 40012인 균주로부터 발효시킨 것을 제외하고는 상기 실시예와 동일한 방법으로 발효된 녹차를 본 비교예 2로 하였다.
The green tea fermented in the same manner as in the above example was used as Comparative Example 2, except that the strain belonging to the conventional Lactobacillus plantarum was fermented from a strain having the deposit number KCCM 40012.

비교예Comparative Example 3 3

기존의 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus)에 속하는 균주로서 그 기탁번호가 KCCM 32820인 균주로부터 발효시킨 것을 제외하고는 상기 실시예와 동일한 방법으로 발효된 녹차를 본 비교예 3으로 하였다.
The green tea fermented in the same manner as in the above example was used as Comparative Example 3, except that the strain belonging to the existing Lactobacillus acidophilus was fermented from a strain having the deposit number KCCM 32820.

비교예Comparative Example 4 4

기존의 락토바실러스 락티스(Lactobacillus lactis)에 속하는 균주로서 그 기탁번호가 KCCM 41574인 균주로부터 발효시킨 것을 제외하고는 상기 실시예와 동일한 방법으로 발효된 녹차를 본 비교예 4로 하였다.
The green tea fermented in the same manner as in the above example was used as Comparative Example 4, except that the strain belonging to the conventional Lactobacillus lactis was fermented from a strain having the deposit number KCCM 41574.

비교예Comparative Example 5 5

기존의 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)에 속하는 균주로서 그 기탁번호가 KCCM 40430인 균주로부터 발효시킨 것을 제외하고는 상기 실시예와 동일한 방법으로 발효된 녹차를 본 비교예 5로 하였다.
The green tea fermented in the same manner as in the above example was used as Comparative Example 5, except that the strain belonging to the conventional Streptococcus thermophilus was fermented from a strain having the deposit number KCCM 40430.

실험예Experimental Example

<< 실험예Experimental Example 1: 산도,  1: acidity, pHpH , , 항산화능Antioxidant ability 및 전체적인  And overall 관능성Sensuality 평가> Evaluation>

상기 실시예에 의한 RP-001 균주 및 RP-002 균주로부터 발효된 녹차와 상기 비교예 1 내지 비교예 5에 의한 균주들로부터 발효된 녹차의 산도, pH 및 전체적인 관능성을 평가하는 실험을 진행하였다. 이의 실험은 구체적으로는 상기 실시예 2에 의해 선발된 균주에 대해 최종적으로 0.75%의 생리 식염수를 이용하여 생균수가 107cfu/ml가 되도록 접종 균주를 준비하였다.PH, and overall sensory evaluation of the green tea fermented from the green tea fermented from the RP-001 strain and the RP-002 strain and the strains according to the above Comparative Examples 1 to 5 according to the above Examples . Specifically, the strain selected in Example 2 was finally inoculated with 0.75% physiological saline to prepare an inoculation strain having a viable cell count of 107 cfu / ml.

녹차시료에 멸균증류수를 가하여 침지하고 여기에 설탕, 과당, 포도당, 올리고당 등의 당류를 첨가하여 10 내지 70중량%이 되게 혼합한 후 준비된 젖산균 접종균주를 0.01 내지 1중량% 되게 접종하였다. 이를 10내지 35℃에서 3-15일간 배양하였고 1 내지 2일 간격으로 시료를 채취하였고 제조된 발효 녹차의 종합기호도를 평가하였다. 관능점수는 5점척도법에 따라 종합기호도를 평가하였다. 이때 5점이‘매우 좋다’, 4점이 ‘좋다’, 3점이 ‘보통이다’, 2점이 ‘좋지 않다’, 1점이 ‘매우 좋지 않다’의 항목을 가지고 평가하였으며, 이의 결과는 하기 표 2에 나타내었다.
To the green tea sample, sterilized distilled water was added for immersion, saccharides such as sucrose, fructose, glucose, and oligosaccharide were added to the mixture to make 10 to 70% by weight, and the prepared lactic acid bacteria inoculation strain was inoculated at 0.01 to 1% by weight. The culture was incubated at 10 ~ 35 ℃ for 3-15 days. Samples were collected at intervals of 1 ~ 2 days and the preference preference of the fermented green tea was evaluated. The sensory score was evaluated by the 5 - point scaling method. At this time, 5 items were evaluated as 'very good', 4 items as 'good', 3 items as 'normal', 2 items as 'not good' and 1 item as 'not very good' .

상기 표 2에서 확인할 수 있는 바와 같이 실시예에 따른 균주들에 의해 발효된 녹차의 경우가 높은 산도, 적절한 pH를 보이는 것으로 확인되었다. 그리고 이를 전체적으로 종합하고 관능성을 측정한 관능 점수에서도 나머지 비교예들에 비해 높은 점수를 보이는 것으로 확인되었다. As can be seen from the above Table 2, it was confirmed that the green tea fermented by the strains according to the examples had a high pH and an appropriate pH. And it was confirmed that the sensory score of the sensory sensation was higher than that of the other comparative examples.

특히 본 발명에서 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus)에 속하는 RP-001는 같은 락토바실러스 펜토서스에 속하는 비교예 1의 경우에 비해 높은 산도, 낮은 Ph를 보이며, 또한 전체적인 관능점수에서도 3.8을 보여 2.7을 보인 비교예 1에 비해 월등히 향상된 점수를 보이는 것을 확인할 수 있었다. 또한 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)에 속하는 RP-002의 경우에도 같은 락토바실러스 플란타룸에 속하는 비교예 2의 경우에 비해 높은 산도, 낮은 pH, 높은 항산화능을 보이며, 또한 전체적인 관능점수에서도 3.7을 보여 3.1을 보인 비교예 2에 비해 월등히 향상된 점수를 보이는 것을 확인할 수 있었다.Particularly, RP-001 belonging to Lactobacillus pentosus in the present invention shows higher pH and lower pH than that of Comparative Example 1 belonging to the same Lactobacillus pentosus, The results are shown in Fig. Also, RP-002 belonging to Lactobacillus plantarum showed higher acidity, lower pH and higher antioxidant ability than that of Comparative Example 2 belonging to the same Lactobacillus plantarum, 3.7, showing a significantly improved score compared to Comparative Example 2 showing 3.1.

이러한 실험 결과를 통해 락토바실러스 속에 속하는 비교예 1 내지 비교예 5의 다른 균주들에 비해 본 발명의 실시예에 따른 균주인 RP-001 및 RP-002의 경우로 발효된 녹차의 경우가 발효 녹차의 관능성과 기능성을 월등히 향상시키는 것을 확인할 수 있었다. 또한 보다 구체적으로는 동속 동종에 속하는 비교예 1 및 비교예 2의 경우보다 우수한 관능성과 기능성을 보이는 것을 확인할 수 있으므로, 본 발명에 따른 실시예의 균주들이 락토바실러스 펜토서스 및 락토바실러스 플란타룸와 각각 99%의 상동성을 보인다 하더라도 녹차 잎에서 분리된 균주들로서 기존의 동속 동종의 다른 균주들보다 발효를 통해 녹차의 관능성과 기능성을 우수하게 향상시키는 것임을 확인할 수 있었다. The results of these experiments show that, in comparison with the strains of Comparative Examples 1 to 5 belonging to the genus Lactobacillus, RP-001 and RP-002, which are strains according to the embodiments of the present invention, And it was confirmed that the sensibility and the functionality were improved remarkably. More specifically, it was confirmed that the microorganisms of the examples according to the present invention exhibited more excellent sensory properties and functionality than those of the comparative examples 1 and 2 belonging to the same genus, % Of the strains were isolated from the green tea leaves. It was confirmed that the fermentation enhances the sensory and functional properties of the green tea than other strains of the same genus.

<< 실험예Experimental Example 2:  2: 라디칼Radical 소거능의Scarce 측정 실험> Measurement experiment>

본 발명의 실시예 따른 균주들에 의해 발효된 녹차와 비교예 1 내지 비교예 5에 의해 발효된 녹차의 구체적인 기능성 향상을 측정하기 위한 실험을 진행하였다. 이때 항산화능의 향상을 구체적으로 나타낼 수 있는 DPPH 라디칼 소거능을 비교 측정하는 실험을 진행하였다. DPPH 라디칼 소거능은 0.1 mM DPPH 용액 2.95 mL에 녹차발효액 0.05 mL를 가하여 흡광도의 변화를 517 nm에서 정확히 30분 후에 측정하였고 녹차발효액의 첨가 전 후의 차이를 백분율로 나타내었다. 이의 결과는 하기 표 3에서 확인할 수 있다.
Experiments were conducted to measure the specific functional improvement of the green tea fermented by the strains according to the embodiment of the present invention and the green tea fermented by Comparative Examples 1 to 5. The DPPH radical scavenging ability which can specifically show the improvement of the antioxidant ability was measured at the same time. The DPPH radical scavenging activity was measured by adding 0.05 mL of the green tea fermentation solution to 2.95 mL of 0.1 mM DPPH solution and measuring the absorbance change at 517 nm exactly after 30 minutes. The difference between the two before and after the addition of the green tea fermentation solution was expressed as a percentage. The results are shown in Table 3 below.

상기 표 3에서 확인 할 수 있는 바와 같이 본 발명에 따른 실시예의 균주들에 의해 발효된 녹차의 경우가 비교예 1 내지 비교예 5에 의한 경우보다 라디칼 소거능이 우수하게 향상되는 결과를 확인 할 수 있었다. 특히 동속 동종에 속하는 비교예 1 및 비교예 2의 경우보다 실시예들에 의한 균주인 RP-001 및 RP-002의 경우가 라디칼 소거능이 향상되는 것을 확인할 수 있어 항산화능이 보다 우수한 것임을 확인할 수 있었다.
As can be seen from the above Table 3, it was confirmed that the green tea fermented by the strains of the examples according to the present invention had better radical scavenging ability than those of Comparative Examples 1 to 5 . Particularly, it was confirmed that the radical scavenging ability of the RP-001 and RP-002 strains according to the examples was improved than that of the comparative example 1 and the comparative example 2 belonging to the same genus, and thus the antioxidant ability was better.

<< 실험예Experimental Example 3: 각 녹차들의  3: Each green tea 색지수Color index 변화 측정 실험> Change measurement experiment>

상기 실시예에 의한 균주들로부터 발효된 녹차 및 비교예 1 내지 비교예 5에 따른 균주들로부터 발효된 녹차의 색깔 변화를 관찰하는 실험을 진행하였다. 이는 각각의 색지수를 비교하는 방식으로 진행하였다. 또한 육안으로 관찰하였다. 이의 결과는 하기 표 4에 나타냈다.
Experiments were conducted to observe the change in color of green tea fermented from the fermented green tea from the strains according to the above-mentioned examples and the strains according to Comparative Examples 1 to 5. This was done by comparing each color index. It was also observed with naked eyes. The results are shown in Table 4 below.

상기 표 4에서 확인할 수 있는 바와 같이 각 시료에 대해 L, a, b를 3반복 측정한 결과 명도를 나타내는 L값은 RP-001과 RP-002의 경우 10.12와 9.85로 다른 비교군에 비해 높게 측정되어 가장 밝은 것으로 나타났다. As can be seen in Table 4, L, a, and b were repeatedly measured for each sample, and the L values indicating brightness were 10.12 and 9.85 for RP-001 and RP-002, respectively, And appeared to be the brightest.

a, b값의 측정 결과 RP-001, RP-002, 비교예1, 2는 -a의 값으로 녹색을 띠었으며 비교예3, 4, 5, 6는 +a의 값으로 적색을 띠고 있음을 알 수 있었고 측정값 모두 +b의 값으로 모두 황색을 띠고 있었다.
As a result of measurement of the values of a and b, RP-001 and RP-002, Comparative Examples 1 and 2 are green with a value of -a, and Comparative Examples 3, 4, 5 and 6 are red with a value of + a All the measured values were all yellow with the value of + b.

이를 통해 본 발명에 따른 실시예의 균주들에 의해 발효되는 녹차가 비교예 1 내지 비교예 5에 의해 발효되는 녹차에 비해 맛을 비롯한 전체적인 관능성을 향상시키며, 항산화능을 비롯한 기능성을 우수하게 향상시키는 균주 임을 확인할 수 있었다.
As a result, the green tea fermented by the strains of the examples according to the present invention improves the overall sensuality including flavor as compared with the green tea fermented by Comparative Examples 1 to 5, and improves the functionality including antioxidant ability It was confirmed that the strain was a strain.

상기에서는 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 설명하였지만, 본 발명은 이에 한정되는 것은 아니고, 본 발명의 기술 사상 범위 내에서 여러 가지로 변형하여 실시하는 것이 가능하고, 이 또한 첨부된 특허 청구 범위에 속하는 것은 당연하다.
While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, it is to be understood that the invention is not limited to the disclosed exemplary embodiments, but, on the contrary, is intended to cover various modifications and equivalent arrangements included within the spirit and scope of the appended claims. It is natural.

한국미생물보존센터(국외)Korea Microorganism Conservation Center (overseas) KCCM11303PKCCM11303P 2012100820121008 한국미생물보존센터(국외)Korea Microorganism Conservation Center (overseas) KCCM11304PKCCM11304P 2012100820121008

<110> RAPHAS Co., Ltd. <120> Strain for green tea fermentation and preparation method of green tea fermentation liquid using the same <130> HPC3622 <160> 2 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 1522 <212> DNA <213> Lactobacillus pentosus <400> 1 gaaccggctc aggacgaacg ctggcggcgt gcctaataca tgcaagtcga acgaactctg 60 gtattgattg gtgcttgcat catgatttac atttgagtga gtggcgaact ggtgagtaac 120 acgtgggaaa cctgcccaga agcgggggat aacacctgga aacagatgct aataccgcat 180 aacaacttgg accgcatggt ccgagtttga aagatggctt cggctatcac ttttggatgg 240 tcccgcggcg tattagctag atggtggggt aacggctcac catggcaatg atacgtagcc 300 gacctgagag ggtaatcggc cacattggga ctgagacacg gcccaaactc ctacgggagg 360 cagcagtagg gaatcttcca caatggacga aagtctgatg gagcaacgcc gcgtgagtga 420 agaagggttt cggctcgtaa aactctgttg ttaaagaaga acatatctga gagtaactgt 480 tcaggtattg acggtattta accagaaagc cacggctaac tacgtgccag cagccgcggt 540 aatacgtagg tggcaagcgt tgtccggatt tattgggcgt aaagcgagcg caggcggttt 600 tttaagtctg atgtgaaagc cttcggctca accgaagaag tgcatcggaa actgggaaac 660 ttgagtgcag aagaggacag tggaactcca tgtgtagcgg tgaaatgcgt agatatatgg 720 aagaacacca gtggcgaagg cggctgtctg gtctgtaact gacgctgagg ctcgaaagta 780 tgggtagcaa acaggattag ataccctggt agtccatacc gtaaacgatg aatgctaagt 840 gttggagggt ttccgccctt cagtgctgca gctaacgcat taagcattcc gcctggggag 900 tacggccgca aggctgaaac tcaaaggaat tgacgggggc ccgcacaagc ggtggagcat 960 gtggtttaat tcgaagctac gcgaagaacc ttaccaggtc ttgacatact atgcaaatct 1020 aagagattag acgttccctt cggggacatg gatacaggtg gtgcatggtt gtcgtcagct 1080 cgtgtcgtga gatgttgggt taagtcccgc aacgagcgca acccttatta tcagttgcca 1140 gcattaagtt gggcactctg gtgagactgc cggtgacaaa ccggaggaag gtggggatga 1200 cgtcaaatca tcatgcccct tatgacctgg gctacacacg tgctacaatg gatggtacaa 1260 cgagttgcga actcgcgaga gtaagctaat ctcttaaagc cattctcagt tcggattgta 1320 ggctgcaact cgcctacatg aagtcggaat cgctagtaat cgcggatcag catgccgcgg 1380 tgaatacgtt cccgggcctt gtacacaccg cccgtcacac catgagagtt tgtaacaccc 1440 aaagtcggtg ggggtaacct tttaggaacc accgcctaag tgggacagag attagggtga 1500 atctaanggg gttgcccctt aa 1522 <210> 2 <211> 1533 <212> DNA <213> Lactobacillus plantarum <400> 2 ttttagagtt ttggatctgg ctcaggacga acgctggcgg cgtgcctaat acatgcaagt 60 cgaacgaact ctggtattga ttggtgcttg catcatgatt tacatttgag tgagtggcga 120 actggtgagt aacacgtggg aaacctgccc agaagcgggg gataacacct ggaaacagat 180 gctaataccg cataacaact tggaccgcat ggtccgagct tgaaagatgg cttcggctat 240 cacttttgga tggtcccgcg gcgtattagc tagatggtgg ggtaacggct caccatggca 300 atgatacgta gccgacctga gagggtaatc ggccacattg ggactgagac acggcccaaa 360 ctcctacggg aggcagcagt agggaatctt ccacaatgga cgaaagtctg atggagcaac 420 gccgcgtgag tgaagaaggg tttcggctcg taaaactctg ttgttaaaga agaacatatc 480 tgagagtaac tgttcaggta ttgacggtat ttaaccagaa agccacggct aactacgtgc 540 cagcagccgc ggtaatacgt aggtggcaag cgttgtccgg atttattggg cgtaaagcga 600 gcgcaggcgg ttttttaagt ctgatgtgaa agccttcggc tcaaccgaag aagtgcatcg 660 gaaactggga aacttgagtg cagaagagga cagtggaact ccatgtgtag cggtgaaatg 720 cgtagatata tggaagaaca ccagtggcga aggcggctgt ctggtctgta actgacgctg 780 aggctcgaaa gtatgggtag caaacaggat tagataccct ggtagtccat accgtaaacg 840 atgaatgcta agtgttggag ggtttccgcc cttcagtgct gcagctaacg cattaagcat 900 tccgcctggg gagtacggcc gcaaggctga aactcaaagg aattgacggg ggcccgcaca 960 agcggtggag catgtggttt aattcgaagc tacgcgaaga accttaccag gtcttgacat 1020 actatgcaaa tctaagagat tagacgttcc cttcggggac atggatacag gtggtgcatg 1080 gttgtcgtca gctcgtgtcg tgagatgttg ggttaagtcc cgcaacgagc gcaaccctta 1140 ttatcagttg ccagcattaa gttgggcact ctggtgagac tgccggtgac aaaccggagg 1200 aaggtgggga tgacgtcaaa tcatcatgcc ccttatgacc tgggctacac acgtgctaca 1260 atggatggta caacgagttg cgaactcgcg agagtaagct aatctcttaa agccattctc 1320 agttcggatt gtaggctgca actcgcctac atgaagtcgg aatcgctagt aatcgcggat 1380 cagcatgccg cggtgaatac gttcccgggc cttgtacaca ccgcccgtca caccatgaga 1440 gtttgtaaca cccaaagtcg gtggggtaac cttttaggaa ccagcgccta aggtggacga 1500 tgattaggtg agcanannng gggggggcaa caa 1533 &Lt; 110 > RAPHAS Co., Ltd. <120> Strain for green tea fermentation and preparation method of green          tea fermentation liquid using the same <130> HPC3622 <160> 2 <170> Kopatentin 2.0 <210> 1 <211> 1522 <212> DNA <213> Lactobacillus pentosus <400> 1 gaaccggctc aggacgaacg ctggcggcgt gcctaataca tgcaagtcga acgaactctg 60 gtattgattg gtgcttgcat catgatttac atttgagtga gtggggaact ggtgagtaac 120 acgtgggaaa cctgcccaga agcgggggat aacacctgga aacagatgct aataccgcat 180 aacaacttgg accgcatggt ccgagtttga aagatggctt cggctatcac ttttggatgg 240 tcccgcggcg tattagctag atggtggggt aacggctcac catggcaatg atacgtagcc 300 gacctgagag ggtaatcggc cacattggga ctgagacacg gcccaaactc ctacgggagg 360 cagcagtagg gaatcttcca caatggacga aagtctgatg gagcaacgcc gcgtgagtga 420 agaagggttt cggctcgtaa aactctgttg ttaaagaaga acatatctga gagtaactgt 480 tcaggtattg acggtattta accagaaagc cacggctaac tacgtgccag cagccgcggt 540 aatacgtagg tggcaagcgt tgtccggatt tattgggcgt aaagcgagcg caggcggttt 600 tttaagtctg atgtgaaagc cttcggctca accgaagaag tgcatcggaa actgggaaac 660 ttgagtgcag aagaggacag tggaactcca tgtgtagcgg tgaaatgcgt agatatatgg 720 aagaacacca gtggcgaagg cggctgtctg gtctgtaact gacgctgagg ctcgaaagta 780 tgggtagcaa acaggattag ataccctggt agtccatacc gtaaacgatg aatgctaagt 840 gttggagggt ttccgccctt cagtgctgca gctaacgcat taagcattcc gcctggggag 900 tacggccgca aggctgaaac tcaaaggaat tgacgggggc ccgcacaagc ggtggagcat 960 gtggtttaat tcgaagctac gcgaagaacc ttaccaggtc ttgacatact atgcaaatct 1020 aagagattag acgttccctt cggggacatg gatacaggtg gtgcatggtt gtcgtcagct 1080 cgtgtcgtga gatgttgggt taagtcccgc aacgagcgca acccttatta tcagttgcca 1140 gcattaagtt gggcactctg gtgagactgc cggtgacaaa ccggaggaag gtggggatga 1200 cgtcaaatca tcatgcccct tatgacctgg gctacacacg tgctacaatg gatggtacaa 1260 cgagttgcga actcgcgaga gtaagctaat ctcttaaagc cattctcagt tcggattgta 1320 ggctgcaact cgcctacatg aagtcggaat cgctagtaat cgcggatcag catgccgcgg 1380 tgaatacgtt cccgggcctt gtacacaccg cccgtcacac catgagagtt tgtaacaccc 1440 aaagtcggtg ggggtaacct tttaggaacc accgcctaag tgggacagag attagggtga 1500 atctaanggg gttgcccctt aa 1522 <210> 2 <211> 1533 <212> DNA <213> Lactobacillus plantarum <400> 2 ttttagagtt ttggatctgg ctcaggacga acgctggcgg cgtgcctaat acatgcaagt 60 cgaacgaact ctggtattga ttggtgcttg catcatgatt tacatttgag tgagtggcga 120 actggtgagt aacacgtggg aaacctgccc agaagcgggg gataacacct ggaaacagat 180 gctaataccg cataacaact tggaccgcat ggtccgagct tgaaagatgg cttcggctat 240 cacttttgga tggtcccgcg gcgtattagc tagatggtgg ggtaacggct caccatggca 300 atgatacgta gccgacctga gagggtaatc ggccacattg ggactgagac acggcccaaa 360 ctcctacggg aggcagcagt agggaatctt ccacaatgga cgaaagtctg atggagcaac 420 gccgcgtgag tgaagaaggg tttcggctcg taaaactctg ttgttaaaga agaacatatc 480 tgagagtaac tgttcaggta ttgacggtat ttaaccagaa agccacggct aactacgtgc 540 cgcagccgc ggtaatacgt aggtggcaag cgttgtccgg atttattggg cgtaaagcga 600 gcgcaggcgg ttttttaagt ctgatgtgaa agccttcggc tcaaccgaag aagtgcatcg 660 gaaactggga aacttgagtg cagaagagga cagtggaact ccatgtgtag cggtgaaatg 720 cgtagatata tggaagaaca ccagtggcga aggcggctgt ctggtctgta actgacgctg 780 aggctcgaaa gtatgggtag caaacaggat tagataccct ggtagtccat accgtaaacg 840 atgaatgcta agtgttggag ggtttccgcc cttcagtgct gcagctaacg cattaagcat 900 tccgcctggg gagtacggcc gcaaggctga aactcaaagg aattgacggg ggcccgcaca 960 agcggtggag catgtggttt aattcgaagc tacgcgaaga accttaccag gtcttgacat 1020 actatgcaaa tctaagagat tagacgttcc cttcggggac atggatacaggtggtgcatg 1080 gttgtcgtca gctcgtgtcg tgagatgttg ggttaagtcc cgcaacgagc gcaaccctta 1140 ttatcagttg ccagcattaa gttgggcact ctggtgagac tgccggtgac aaaccggagg 1200 aaggtgggga tgacgtcaaa tcatcatgcc ccttatgacc tgggctacac acgtgctaca 1260 atggatggta caacgagttg cgaactcgcg agagtaagct aatctcttaa agccattctc 1320 agttcggatt gtaggctgca actcgcctac atgaagtcgg aatcgctagt aatcgcggat 1380 cagcatgccg cggtgaatac gttcccgggc cttgtacaca ccgcccgtca caccatgaga 1440 gtttgtaaca cccaaagtcg gtggggtaac cttttaggaa ccagcgccta aggtggacga 1500 tgattaggtg agcanannng gggggggcaa caa 1533

Claims (6)

녹차 잎에서 분리된 균주인 것을 특징으로 하는 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) RP-001[기탁번호 KCCM11303P].
Lactobacillus pentosus RP-001 [Deposit No. KCCM11303P], which is a strain isolated from green tea leaves.
락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) RP-001[기탁번호 KCCM11303P]를 포함한 녹차발효액.
Green tea fermentation broth containing Lactobacillus pentosus RP-001 [Deposit No. KCCM11303P].
녹차 잎, 물, 당액 및 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus) RP-001[기탁번호 KCCM11303P] 균주를 혼합하여 녹차발효액을 제조하는 단계를 포함하며,
상기 당액은 포도당, 과당, 설탕 및 올리고당으로 이루어지는 군 중에서 선택된 어느 하나 이상의 당을 포함하여 제조되는 것을 특징으로 하고,
상기 녹차발효액은 물 100중량부에 대하여 녹차 잎 10~200중량부, 당액 10~200중량부, RP-001 균주 0.01 내지 1중량부를 혼합하여 발효시키는 것을 특징으로 하는 녹차발효액의 제조방법.

A green tea leaf, water, a sugar solution, and Lactobacillus pentosus RP-001 [Deposit No. KCCM11303P] to produce a green tea fermentation liquid,
Wherein the sugar solution is prepared by incorporating at least one sugar selected from the group consisting of glucose, fructose, sugar, and oligosaccharide,
Wherein the green tea fermentation broth is prepared by mixing 10-200 parts by weight of green tea leaves, 10-200 parts by weight of sugar solution, and 0.01-1 parts by weight of RP-001 strain per 100 parts by weight of water.

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