KR101440821B1 - 섬유상 물질의 분리장치 및 분리방법 - Google Patents

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Abstract

본 발명에 따른 섬유상 물질의 분리장치에는, 브라운 운동이 가능한 섬유상 물질을 도입하는 도입장치; 미리 정하여진 방향으로 상기 섬유상 물질을 이동시키는 장(field)이 적어도 하나 인가되는 상태로 마련되고, 상기 섬유상 물질의 이동경로를 제공하는 이동경로 제공부; 상기 이동경로 제공부에 적어도 세 개가 제공되어, 상기 섬유상 물질을 적어도 일시적으로 포획할 수 있는 포획영역 제공부; 및 상기 이동경로 제공부를 통과한 상기 섬유상 물질을 획득하는 획득장치가 포함된다. 본 발명에 따르면, 안전성이 향상되고, 분리된 섬유상 물질의 순수성이 향상되고, 섬유상 물질을 다량으로 분리할 수 있고, 분리방법이 간편한 장점이 있다. 그 외에 발명의 본질에서 유추되는 다양한 장점을 얻을 수 있는 것도 물론이다. 이로써, 섬유상 물질을 분리하는 산업에서 획기적인 수율의 증가를 얻을 수 있다.

Description

섬유상 물질의 분리장치 및 분리방법{SEPARATION APPARATUS AND METHOD FOR FIBROUS MATTER}
본 발명은 섬유상 물질의 분리장치 및 분리방법에 관한 것이다. 더 상세하게는 브라운 운동이 가능한 상태로 섞여있는 물질을 서로 같은 물질 별로 분리하는 분리장치 및 분리방법에 관한 것이다.
DNA로 예시가능한 섬유상 물질을 분리하는 방법으로는 겔-전기영동법이 알려져 있다. 상기 겔-전기영동법을 간단하게 소개한다. 먼저, DNA를 에티디움 브로마이드(ethidium bromide)로 염색한 후 겔을 통과시켜서 분획하고, UV조사 하에서 염색된 위치의 겔을 잘라낸 후, 겔과 염료를 제거한다. 이로써 DNA를 추출해 낼 수 있다.
상기 겔-전기영동법은, 인체에 유해한 염료를 사용하기 때문에 안전성의 문제점이 있고, 화학적 처리가 수행됨으로써 DNA의 순수성이 파괴되는 문제점이 있고, 여러 단계를 거쳐야 하기 때문에 시간이 많이 걸리는 문제점이 있고, 각 단계들이 서로 분리되고 연속적으로 수행될 수 없기 때문에 극소량으로서 족한 검사산업에는 적용될 수 있으나 생산 및 제조 산업적 목적으로는 이용할 수 없는 문제점이 있다.
본 발명은 상기되는 문제점을 극복하기 위한 것으로서, 인체유해성/공해발생의 문제가 발생하지 않아서 안전하게 적용가능하고, DNA와 같은 섬유상 물질을 순수한 상태로 분리할 수 있고, 빠르고 연속적인 공정으로 섬유상 물질을 다량으로 분리할 수 있고, 간편한 공정으로 섬유상 물질을 분리할 수 있는 섬유상 물질의 분리장치 및 분리방법을 제안한다.
본 발명에 따른 섬유상 물질의 분리장치에는, 브라운 운동이 가능한 섬유상 물질을 도입하는 도입장치; 미리 정하여진 방향으로 상기 섬유상 물질을 이동시키는 장(field)이 적어도 하나 인가되는 상태로 마련되고, 상기 섬유상 물질의 이동경로를 제공하는 이동경로 제공부; 상기 이동경로 제공부에 적어도 세 개가 제공되어, 상기 섬유상 물질을 적어도 일시적으로 포획할 수 있는 포획영역 제공부; 및 상기 이동경로 제공부를 통과한 상기 섬유상 물질을 획득하는 획득장치가 포함된다.
상기 장치발명에서, 상기 장은, 전기장, 자기장, 중력장, 및 유체장 중의 적어도 어느 하나일 수 있고, 상기 포획영역 제공부에 의해서 제공되는 포획영역은, 나노 플라즈몬 현상에 의한 광 필드, 유체장, 및 DNA 바인딩 단백질 중의 적어도 어느 하나에 의해서 형성될 수 있고, 상기 포획영역 제공부 간의 간격은, 상기 장의 인가방향과 가까운 방향의 간격보다, 상기 장의 인가방향과 먼 방향의 간격이 크게 마련될 수 있다.
본 발명에 따른 섬유상 물질의 분리방법에는, 섬유상 물질을 장(field)을 따라서 이동시키는 것; 및 상기 섬유상 물질을, 이격되는 적어도 세 개의 포획영역에 적어도 일시적으로 포획시키는 것이 포함된다.
상기 방법발명에서, 상기 포획영역 제공부 간의 간격은, 상기 장의 인가방향과 가까운 방향의 간격보다, 상기 장의 인가방향과 먼 방향의 간격이 작게 제공될 수 있다.
이하, 실시예와 관련된 선행기술 특허번호를 첨부합니다.
20130047668 (자성 입자를 이용하여 표적 물질을 분리 및 정제하는 방법 및 장치)
20110107969 (다중 분리 장치 및 혈중 암세포 분리 방법)
20120116207 (입자 분리 장치 및 이를 이용한 섬유형상 입자의 분리방법)
본 발명에 따르면, 안전성이 향상되고, 분리된 섬유상 물질을 순수성이 향상되고, 섬유상 물질을 다량으로 분리할 수 있고, 분리방법이 간편한 장점이 있다. 그 외에 발명의 본질적 사상으로부터 유추가능한 다양한 장점을 얻을 수 있는 것도 물론이다.
도 1은 실시예에 따른 섬유상 물질의 분리장치의 개략적인 도면.
도 2는 이동경로 제공부의 평면도.
도 3에서 도 6은 인접하는 한 쌍의 포획영역에서 섬유상 물질이 이동하는 과정을 시간차를 두고서 보이는 도면.
도 7은 두 가지 종류의 섬유상 물질이 이동경로 제공부를 통과하는 것을 모식적으로 보여주는 도면.
도 8은 섬유상 물질의 분리방법을 설명하는 흐름도.
이하에서는 도면을 참조하여 본 발명의 구체적인 실시예를 상세하게 설명한다. 다만, 본 발명의 사상은 첨부되는 실시예로 제한되지 아니하며, 본 발명의 사상을 이해하는 당업자는 동일한 사상의 범위 내에 포함되는 다른 실시예를 구성요소의 부가, 변경, 삭제, 및 추가 등에 의해서 용이하게 제안할 수 있을 것이다.
도 1은 실시예에 따른 섬유상 물질의 분리장치의 개략적인 도면이다.
도 1을 참조하면, DNA로 예시 가능한 섬유상 물질이 도입되는 도입장치(2)와, 상기 도입장치(2)를 통하여 도입된 섬유상 물질이 이동하는 이동경로를 제공하는 이동경로 제공부(1)와, 상기 이동경로 제공부(1)를 통하여 이동한 섬유상 물질을 회득하는 획득장치(3)와, 상기 이동경로 제공부(1)의 전방과 후방에 적어도 일 부분이 위치하는 장(field)발생장치(4)가 포함된다. 또한, 상기 이동경로 제공부(1)를 향하여 레이저를 조사하는 레이저 조사장치(5)가 더 마련된다.
상기 도입장치(2)는, 섬유상 물질이 도입될 수 있는 장치라면 어떠한 장치도 가능할 수도 있다.
상기 이동경로 제공부(1)는, 도 2에 제시되는 이동경로 제공부(1)의 평면도를 통하여 볼 수 있는 바와 같이 판상으로 마련될 수 있다. 상기 이동경로 제공부(1)는 예를 들어 1mm*1mm의 크기로 마련될 수 있다. 상기 이동경로 제공부(1)에는 격자배치구조로 마련되는 포획영역 제공부(11)가 제공되어 있다. 상기 포획영역 제공부(11)는 직경 100nm의 원형 구멍으로 제공될 수 있다. 원형이 아닌 사각형 삼각형 등의 다른 형상도 충분히 사용될 수 있다. 상기 포획영역 제공부(11)는 일시적으로 섬유상 물질을 포획하는 기능을 제공할 수 있다. 한편, 도 2를 기준으로 할 때, 섬유상 물질은 하측에서 상측으로 이동한다. 이때 상기 포획영역 제공부(11)는, 상기 섬유상 물질의 이동방향과 나란한 방향(즉 도 2를 기준으로 수직방향)의 거리(L1)는, 경사지는 방향(즉 도 2를 기준으로 경사방향)의 거리(L2)에 비하여 크다. 예시적으로 L1이 200nm이고, L2는 140nm로 제공될 수 있다.
상기 획득장치(3)는, 상기 이동경로 제공부(1)를 경유하여 이동한 섬유상 물질을 획득하는 작용을 수행한다. 상기 획득장치(3)에는, 제 1 획득부(31)와 제 2 획득부(32)가 제공될 수 있다. 상기 획득부(31)(32)는, 분리된 섬유상 물질을 획득하는 것으로서, 각 획득부는 서로 같은 종류의 섬유상 물질을 획득할 수 있다.
예를 들어 섬유상 이동방향의 경사방향에 배치된 상기 제 1획득부(31)와 제 2획득부(32)는 상기 섬유상 물질의 이동방향과 나란한 방향에 배치된 획득부(또는, 폐기부)에 비하여, 상대적으로 길이가 긴 섬유상 물질을 획득할 수 있다
삭제
상기 장발생장치(4)는, 상기 도입장치(2)에서 상기 획득장치(3)를 향하는 방향으로 장(field)을 발생시킨다. 상기 장발생장치(4)는 예를 들어 전기장일 수 있다. 상기 섬유상 물질이 DNA로서 (-)극성을 가지는 물질인 경우에는, 상기 장발생장치(4)는, 상기 도입장치(2) 측은 (-)극, 상기 획득장치(3) 측은 (+)극을 띄도록 바이어스를 걸 수 있다. 이 전기장에 의해서 DNA로 예시되는 섬유상 물질은 획득장치(3)로 이동해 갈 수 있다.
상기 레이저 조사장치(5)가 상기 이동경로 제공부(1)로 레이저를 조사하면, 나노 플라즈몬 현상에 의해서 포획영역 제공부(11)에는 광 필드에 의한 포획영역을 제공한다. 결국, 빛의 장(광 필드)이 격자형태로 제공되고, 상기 격자형태는 상기 포획영역 제공부(11)와 같은 배치의 격자형태를 가지게 되는 것은 용이하게 이해될 것이다. 상기되는 바와 같이 나노 플라즈몬 현상을 이용하여 밀리와트 급의 레이저로도 생체입자에 대한 포획영역을 제공할 수 있다.
상기되는 구성을 가지는 섬유상 물질의 분리장치의 작용을 설명한다.
상기 레이저 조사장치(5)가 상기 이동경로 제공부(1)로 레이저를 조사하면, 구멍으로 제공되는 상기 포획영역 제공부(11)에는 광필드에 의한 포획영역(도 7의 13참조)이 제공된다. 상기 광필드에 의한 포획영역은 섬유상 물질을 포획할 수 있다.
상기 도입장치(2)에서, DNA로 예시되는 섬유상 물질이 이동경로 제공부(1)로 도입되면, 섬유상 물질은, 장발생장치(4)에 의한 전기장에 의한 힘, 브라운 운동에 의한 힘, 및 광 필드에 의한 힘을 받는다. 이때 광 필드에 의한 힘은 어느 하나의 광 필드에 의한 포획영역에 섬유상 물질이 멈추어 있도록 하고, 브라운 운동에 의한 힘 및 전기장에 의한 힘은 섬유상 물질이 이동하도록 한다.
도 3에서 도 6은 인접하는 한 쌍의 포획영역에서 섬유상 물질이 이동하는 과정을 설명하는 도면이다.
도면에서, 점선의 화살표는 전기장에 의한 힘, 얇은 실선의 화살표는 포획영역에서 광 필드에 의한 힘, 굵은 실선의 화살표는 브라운 운동에 의한 힘을 나타낸다. 광 필드는 포획영역을 측면에서 살펴본 모습으로 이해할 수 있다. 섬유상 물질이 광필드에 의한 포획영역에 적어도 일 부분이 포함되면 포획된 것으로 판단할 수 있다.
도 3을 참조하면, 섬유상 물질이 포획영역에 완전히 포함되어 있을 때에는 브라운 운동에 의한 힘과 전기장에 의한 힘을 받더라도 포획영역에 위치하지만, 섬유상 물질의 길이가 길어서 포획영역의 경계선 밖으로 일부가 노출될 경우에는 노출된 부위가 비교적 큰 브라운 운동을 한다. 도 4를 참조하면, 자유 운동을 하는 노출된 끝단이 인접한 오른쪽 포획영역에 포획된 상태가 도시되어 있다. 도 5를 참조하면, 왼쪽 끝단이 브라운 운동에 의해 왼쪽 영역에서 부분 이탈하고 오른쪽 영역으로 사슬 대부분이 이동한 것을 볼 수 있다. 도 6을 참조하면, 시간이 계속해서 흘러 섬유상 물질의 왼쪽 부위가 왼쪽 영역에서 완전히 이탈한 상태인 것을 볼 수 있다. 결론적으로, 섬유상 물질은 왼쪽 포획영역에서 오른쪽 포획영역으로 이동하게 된다. 이를 뜀뛰기로 생각할 수도 있다. 한편, 섬유상 물질이 이동하는 힘으로는 브라운 운동에 의한 힘과 전기장에 의한 힘이 작용할 수 있고, 섬유상 물질이 어느 특정의 포획영역에 멈추어 있도록 하는 힘으로는 광 필드에 의한 힘이 작용할 수 있다.
여기서 뜀뛰기 여부를 결정하는 설계 인자로는 주고 받는 두 포획영역의 거리일 수 있다. 예를 들어, 수직방향으로 포획영역 제공부(11) 간의 거리(L1)가 200nm이고, 경사방향으로 포획영역 제공부(11) 간의 거리(L2)가 140nm이고, 섬유상 물질의 종류가 달라서 각 종류의 길이가 16nm 및 160nm라고 예시할 수 있다. 이때에 16nm 길이로 짧은 섬유상 물질은 어느 하나의 포획영역 제공부(11)에 포획될 수 있다. 그러나, 160nm 길이로 긴 섬유상 물질은 어느 하나의 포획영역 제공부에서 이웃하는 다른 포획영역 제공부로 이동하게 된다. 물론, 짧은 섬유상 물질도 영구적으로 어느 하나의 포획영역 제공부에 머무르지 않고 브라운 운동에 의한 힘에 의해서 이탈하게 되고, 이탈된 섬유상 물질은 전기장에 의한 힘에 의해서 이동하게 된다.
한편, 섬유상 물질의 길이에 따라서 두 가지의 유동 방향이 생기게 된다. 첫째 길이가 ?은 경우에는 어느 하나의 포획영역 제공부에 완전히 포함되어 포획되어 있다가, 브라운 운동에 의한 힘에 의해 포획영역 제공부를 이탈하는 경우, 전기장에 의한 힘에 의해 도 2를 기준으로 상측으로 흐르게 된다. 이에 반하여, 섬유상 물질의 길이가 포획영역 제공부보다 길어서 전체가 포획영역 제공부에 포함되지 않는 경우에는, 포획되지 않은 일부분이 브라운 운동으로 떠돌다가 상대적으로 이동거리가 가까운 경사방향으로 이웃하는 포획영역 제공부로 이동하게 된다. 아울러, 일단 특정한 경사방향으로 이동이 시작되면, 이동이 개시된 경사방향으로 이어서 이동해 나갈 가능성이 높다.
결과적으로, 길이가 긴 섬유상 물질로서 어느 하나의 포획영역 제공부에 포획되어 있던 섬유상 물질은, 멀리 떨어져 있는(예시적으로 200nm) 수직방향의 이웃하는 포획영역 제공부(11)가 아닌 가까이 있는(예시적으로 140nm) 경사지는 방향의 이웃하는 포획영역 제공부(11)로 이동하게 된다. 이러한 과정은, 섬유상 물질이 이동경로 제공부(1)의 전체 영역을 통과할 때까지 일어나게 된다.
도 7은 두 가지 종류의 섬유상 물질이 이동경로 제공부를 통과하는 것을 모식적으로 보여주는 도면이다.
도 7을 참조하면, 길이가 짧은 섬유상 물질은 수직방향으로 계속해서 이동하는 것을 볼 수 있고, 길이가 긴 섬유상 물질은 경사진 방향으로 이동해 가는 것을 볼 수 있다. 도 7에서는 오른쪽 경사지는 방향으로만 섬유상 물질이 이동해 가는 것으로 도시하고 있으나, 이에 제한되지 아니하고 왼쪽 경사지는 방향으로도 섬유상 물질이 이동해 갈 수 있다. 다만, 왼쪽 경사지는 방향으로 이동하는 섬유상 물질은 획득부(32)에 이르지 못하고 이동경로 제공부(1)의 외부로 유출될 것이므로 섬유상 물질의 순수성에 영향을 미치지 않는다.
한편, 길이가 긴 섬유상 물질이 일단 특정한 경사방향으로 이동이 시작되면, 관성에 의해서 이동이 개시된 경사방향으로 이어서 이동해 나갈 가능성이 높다. 따라서, 정하여진 경사방향으로 계속해서 이동해 나갈 것이다. 또한, 경우에 따라서 정하여진 한쪽 경사방향(예를 들어 오른쪽경사방향)으로의 이동이 원활하게 일어나지 않는 경우에는 오른쪽 방향으로 약한 장을 추가적으로 가하거나, 상기 장 발생장치에 의한 전기장의 인가방향을 오른쪽을 약간량 틀어줄 수도 있다. 이 경우에는 비록 길이가 짧은 섬유상 물질의 수직방향 직진성이 떨어질 수 있으나, 상기 포획영역 제공부(11)는 이동경로 제공부(1)에 무수히 많이 가공되므로 평균적으로 길이가 긴 섬유상 물질과 길이가 짧은 섬유상 물질이 분리되는 위치가 구분될 수 있는 것은 명확하다.
상기되는 작용에 따르면, 도 1에서 제 1 획득부(31) 및 제 2 획득부(31)에서 길이가 긴 섬유상 물질이 연속적으로 순수하게 획득될 수 있을 것이다. 반면, 길이가 짧은 섬유상 물질은 장의 방향으로 직진 운동을 하여, 타 획득부 또는 폐기부로 분리될 수 있다.
삭제
도 8은 실시예에 따른 섬유상 물질의 분리방법을 설명하는 흐름도이다.
도 8을 참조하면, 브라운 운동이 가능한 섬유상 물질을 이동경로 제공부로 도입한다(S1). 이동경로 제공부로 도입된 섬유상 물질은 브라운 운동에 의한 힘 및 장(field)에 의한 힘을 받아서 이동하고(S2), 일정거리 이동한 다음에는 포획영역 제공부에 포획되고, 이때에도 브라운 운동에 의한 힘과 장에 의한 힘이 계속해서 작용한다(S3). 브라운 운동 및 장에 의한 힘에 의해서 인접하는 포획영역 제공부로 이동하는데, 이때 이동하는 경로는 섬유상 물질의 길이에 따라서 다른 양상을 보이게 된다(S4). 이때에도 브라운 운동에 의한 힘과 장에 의한 힘은 계속해서 가하여진 상태이다. 이러한 이동은 획득장치에 이르기까지 계속해서 수행된다.
본 발명은 상기되는 실시예 외에 다른 실시예를 더 포함할 수 있다. 이하에서는 동일한 사상의 범위 내에 포함될 수 있는 다른 실시예를 제시한다.
먼저, 상기 장발생장치에 의해서 발생되는 전기장은 다른 방식으로 대체될 수 있다. 예를 들어, 자기장으로 대체할 수 있고, 이 경우에 섬유상 물질에는 자성이 있는 철을 입힐 수도 있다. 또한, 장발생장치를 제거하고서 도입장치에서 획득장치를 향하여 유체를 일정한 유속으로 흐르도록 하여 유체장을 인가할 수도 있다. 또한, 장발생장치를 제거하고 중력장을 인가하여 섬유상 물질이 중력에 의해서 획득장치 측으로 이동하도록 할 수도 있다.
또한, 상기 광 필드에 의한 포획영역을 제공하는 방식은 다른 방식으로 대체될 수 있다. 예를 들어, 레이저 조사 장치를 제거하고, 포획영역 제공부를 구멍으로 제공하고, 상기 구멍을 통해서 일정한 유체가 흐르도록 할 수 있다. 이 경우에는 유체에 의한 유체장이 발생함으로써, 섬유상 물질을 포획할 수도 있을 것이다. 다만, 이 경우에는 유체의 유속이 지나치게 빠르지 않도록 정밀하게 제어할 필요가 있다. 다른 경우로서, 포획영역 제공부에 DNA 바인딩 단백질을 제공하여, DNA가 일시적으로 바인딩되도록 할 수도 있다.
또한, 상기 섬유상 물질로는 DNA뿐만 아니라, 탄소나노튜브, 일반단백질 등의 다른 섬유상 물질이 예시될 수도 있을 것이다. 이때 극성이 없는 물질의 경우에는 극성을 띄도록 하기 위하여, 극성물질이 부착되도록 할 수도 있고, 극성이 필요하지 않는 장(field)의 경우(예를 들어 중력장)에는 극성물질을 부착하지 않을 수도 있다.
또한, 분리효과를 증진시키기 위하여, 상기 이동경로 제공부에는 소정의 진동을 인가할 수도 있을 것이다.
또한, 장의 인가방향이 조절됨으로써, 포획영역 간의 간격은 경사방향 및 수직방향으로 달라지는 양상이 서로 다르게 조정될 수도 있을 것이다.
본 발명에 따르면, 안전성이 향상되고, 분리된 섬유상 물질의 순수성이 향상되고, 섬유상 물질을 다량으로 분리할 수 있고, 분리방법이 간편한 장점이 있다. 그 외에 발명의 본질에서 유추되는 다양한 장점을 얻을 수 있는 것도 물론이다. 이로써, 섬유상 물질을 분리하는 산업에서 획기적인 수율의 증가를 얻을 수 있다.
1: 이동경로 제공부
2: 도입장치
3: 획득장치
4: 장발생장치
5: 레이저 조사장치

Claims (8)

  1. 브라운 운동이 가능한 섬유상 물질을 도입하는 도입장치;
    미리 정하여진 방향으로 상기 섬유상 물질을 이동시키는 장(field)이 적어도 하나 인가되는 상태로 마련되고, 상기 섬유상 물질의 이동경로를 제공하는 이동경로 제공부;
    상기 이동경로 제공부에 적어도 세 개가 제공되어, 상기 섬유상 물질을 적어도 일시적으로 포획할 수 있는 포획영역 제공부; 및
    상기 이동경로 제공부를 통과한 상기 섬유상 물질을 획득하는 획득장치가 포함되는 섬유상 물질의 분리장치.
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 장은, 전기장, 자기장, 중력장, 및 유체장 중의 적어도 어느 하나인 섬유상 물질의 분리장치.
  3. 제 1 항에 있어서,
    상기 포획영역 제공부에 의해서 제공되는 포획영역은, 나노 플라즈몬 현상에 의한 광 필드, 유체장, 및 DNA 바인딩 단백질 중의 적어도 어느 하나에 의해서 형성되는 섬유상 물질의 분리장치.
  4. 제 1 항에 있어서,
    상기 이동경로 제공부의 평면상에 제공되는 상기 포획영역 제공부 간의 간격에 있어서, 상기 장의 인가방향과 평행한 방향의 간격보다 짧은 상기 장의 인가방향과 경사지는 방향의 간격이 적어도 한 개 이상 있는 섬유상 물질의 분리장치.
  5. 섬유상 물질을 장(field)에 의한 힘과 브라운 운동에 의한 힘으로 이동시키는 것;
    상기 섬유상 물질을 이격되는 적어도 세 개의 포획영역에 적어도 일시적으로 포획시키는 것; 및
    상기 브라운 운동에 의한 힘과 장에 의한 힘으로 상기 포획에서 벗어나 상기 섬유상 물질의 특성에 따라서 경로를 달리하여 이동하는 것; 이 포함되는 섬유상 물질의 분리방법.
  6. 제 5 항에 있어서,
    상기 포획영역 간의 간격에 있어서, 상기 장의 인가방향과 평행한 방향의 간격보다 짧은 상기 장의 인가방향과 경사지는 방향의 간격이 적어도 한 개 이상 있는 섬유상 물질의 분리방법.
  7. 제 5 항에 있어서,
    상기 섬유상 물질의 특성은 상기 섬유상 물질의 길이인 것을 특징으로 하는 섬유상 물질의 분리방법.
  8. 제 5 항에 있어서,
    상기 섬유상 물질은 특성에 따라 이동시켜 분리한 후 획득하는 것;이 더 포함되는 섬유상 물질의 분리방법.
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