KR101432746B1 - 야콘, 사상자 및 석창포의 혼합 추출물, 이를 함유하는 탈모 또는 전립선 비대증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물 및 탈모의 예방 또는 개선용 화장료 조성물 - Google Patents

야콘, 사상자 및 석창포의 혼합 추출물, 이를 함유하는 탈모 또는 전립선 비대증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물 및 탈모의 예방 또는 개선용 화장료 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 본 발명은 야콘, 사상자 및 석창포의 혼합 추출물 및 이를 유효성분으로 포함하는 탈모 또는 전립선 비대증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물 및 탈모의 예방 또는 개선용 화장료 조성물에 대한 것이다. 본 발명에 따른 야콘, 사상자 및 석창포의 혼합 추출물은 테스토스테론 5α-환원효소 억제에 뛰어난 효과를 가짐으로써 전립선 비대증은 물론 탈모의 예방 및 개선을 위한 건강식품 조성물이나 화장료 조성물로서 유용하게 사용될 수 있으며, 특히 본 발명에 따른 혼합 추출물의 투여 후 1~2주 경과 후 전립선 비대증 환자의 빈뇨, 잔뇨감, 야간빈뇨, 세뇨, 핍뇨, 난뇨 증상의 개선되는 것으로 확인되었다. 나아가, 본 발명에 따른 혼합 추출물의 투여에 의해 간의 지방대사가 촉진되며 신장의 기능이 개선되는 효과도 확인할 수 있었다. 더욱이, 본 발명에 따른 혼합 추출물을 12개월 이상 장기 복용한 경우에도 기존 화학 약제와 달리 복용에 따른 특별한 부작용이나 불편감을 호소하는 경우가 없어 안전성까지 탁월하다는 장점도 함께 구비하고 있다.

Description

야콘, 사상자 및 석창포의 혼합 추출물, 이를 함유하는 탈모 또는 전립선 비대증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물 및 탈모의 예방 또는 개선용 화장료 조성물{Mixture extract of yacon(Smallanthus sonchifolius), Torilis japonica and Acorus gramineus, health food composition and cosmetic composition for preventing or improving benign prostatic hyperplasia or alopecia containing the same}
본 발명은 야콘, 사상자 및 석창포의 혼합 추출물 및 이를 유효성분으로 포함하는 탈모 또는 전립선 비대증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물 및 탈모의 예방 또는 개선용 화장료 조성물에 대한 것이다.
우리 몸에 있어서 성호르몬의 역할은 매우 중요한데, 이중 남성호르몬인 안드로겐은 부신피질 및 성선에서 합성되며 대표적인 것이 테스토스테론(testosterone)과 DHT(dihydrotestoste rone)이다. 테스토스테론은 근육 양 증가, 음경 및 음낭의 성장, 음성변화, 남성화 음모와 겨드랑이 털, 정자 형성을 관여하고, DHT는 전립선의 성장, 여드름, 성모성장(가슴, 수염, 팔다리, 몸통, 외측 귀, 코털), 안드로겐 탈모증을 일으킨다. 그러므로, 테스토스테론은 남성화, 정자 형성과 같은 정상적인 남성기능에 필수적이지만 DHT는 태아기 때의 생식선 생성을 제외하고는 필수적인 것이 아니며, DHT는 전립선비대증이나, 여드름, 다모증, 안드로겐 탈모증 등의 여러 질병을 발생시키므로, 의학계에서는 테스토스테론을 DHT로 변화시키는 효소인 5α-환원효소를 억제하여 DHT 생성을 막으려는 노력이 시도되고 있다.
5α-환원효소는 2종류(제1형, 제2형)의 동종효소가 있으며 두 가지 모두 testosterone을 DHT로 변화시키는 효소이다. 제1형은 피지선, 표피, 모낭의 각질형성세포(keratinocytes), 모유두세포, 땀샘에 주로 분포하며, 제2형은 두피 모낭의 모근초(root sheaths), 부고환, 정관, 정낭(seminal vesicle), 전립선, 태아 생식기의 피부에 주로 분포한다.
5α-환원효소는 제1형과 제2형 모두 모낭에 존재하고 있으며, 제1형 및 제2형 5α-환원효소 모두 남녀 안드로겐성 탈모증환자의 외측모근초(outer root sheath)에서 발현되므로, 이 동종효소들을 억제하면 안드로겐탈모증을 치료할 수 있는 가능성이 있다. 5α-환원효소 제2형이 선천적으로 결핍된 사람에서는 안드로겐성 탈모증이 발생되지 않거나 앞 이마선이 뒤로 조금 후퇴하는 정도가 된다. 피지선과 표피, 땀샘에서는 DHT 형성에 5α-환원효소 제1형이 관여하고 있으므로 여드름 같은 경우는 특이적으로 제1형 5α-환원효소 효소를 억제하는 것이 효과적이다.
피지선은 피부의 표면과 머리에 기름을 공급하는 피지를 만드는 장소이고 피부의 전피층 상부에 위치하며 모낭과 연결되어 있다. 피지선은 손바닥, 발바닥을 제외한 몸 전체 피부에 분포하며 머리와 얼굴에 가장 많이 분포한다. 이곳에서 만들어지는 기름과 비슷한 지질과 피지는 피지관을 통하여 모낭속으로 운반된 다음 털을 따라 피부 바깥으로 배출되게 된다. 사춘기에 접어들면서 피지선의 피지 분비가 왕성해지고, 또 모낭에 존재하는 세균의 작용으로 인해 생성된 유리지방산은 여드름의 발생에 중요한 역할을 한다. 피지선에서 제1형 5α-환원효소가 분비된다. 이 효소는 남성호르몬인 테스토스테론을 5α-DHT로 환원시켜, 모기질세포의 분열을 억제시켜 모발의 생성을 막는다. 피지선이 비대해지고 기능이 활발하면, 모발의 표면에 잔비듬이 많아질 뿐만 아니라 이 환원효소의 분비도 증가하여 모발의 발육과 성장에도 영향을 미친다. 따라서 대머리인 사람들의 피지선은 대체로 비대한 반면 비정상적으로 털이 많거나 다모증인 사람들의 피지선은 정상이거나 정상인보다 다소 작다고 볼 수 있다.
전립선은 정낭, 고환과 함께 생식을 기능하는 성부속기관 중의 하나로써, 방광의 바로 밑 부분에 위치하고 있으며, 사정관과 요도가 전립선의 가운데로 통과한다. 크기는 약 4~5 cm 정도의 호두만한 크기로, 무게는 약 20g 정도이다. 전립선은 정액의 일부인 전립선액을 만들며, 전립선액은 정자에 영양을 공급하며 사정된 정액을 굳지 않게 하여 정자의 운동성을 증진시켜 정자의 수정 능력을 높여준다. 또한 전립선액은 알칼리성으로 나팔관의 강산성을 중화시켜 정자가 안전하게 나팔관을 지나 난자와 만나 수정이 이루어지도록 도와주는 역할을 하기도 한다.
전립선에 이상이 생기면, 배뇨와 성생활에서 큰 장애를 일으키는데 특히 우리나라의 경우 현대사회로 넘어오면서 서구화된 식생활과 생활습관으로 인해 전립선염, 전립선비대증, 전립선암 등 전립선관련 질환이 크게 늘고 있다.
전립선 비대증의 발생 과정은 테스토스테론이 혈액 속에서 전립선 조직으로 유입되어 이것이 5α-환원효소의 작용으로 DHT로 변하고, 전립선 세포내의 수용체와 결합하여 전립선이 커지고, 동시에 증식된다고 알려져 있다.
전립선비대의 약물치료는 크게 전립선 크기를 줄여주는 약물인 5α-환원효소 억제제와 항남성호르몬제 등과 전립선 요도를 열어주는 약물(α-차단제)로 나뉜다. 시판되고 있는 5α-환원효소 억제제로는 제2형만 억제하는 ‘프로스카(finasteride)’와 두 가지를 모두 억제하는 ‘아보다트(dutasteride)’가 출시되어 있다. 상기 화학적으로 합성된 5α-환원효소 억제제인 finasteride, dutasteride 등은 성욕과 발기기능에 중요한 역할을 담당하는 남성호르몬(테스토스테론)이 보다 강력한 형태(DHT)로 바뀌는 변화를 억제하는 것으로, 장기 복용 시 발기부전, 성욕감소 및 사정량 감소 등의 부작용이 보고되고 있다.
테스토스테론을 DHT로 바꾸는 작용을 하는 5α-환원효소는 앞서 밝혔듯이 두가지 형태가 알려져 있으며 제1형은 뇌, 간, 생식기 이외의 피부, 모낭의 피부돌기 등에 존재하고 제2형은 전립선, 부고환, 정낭 등 안드로겐 의존성 조직에 존재하며 전립선 비대증과 관련이 있다. 이와 같이 5α-환원효소는 뇌에도 존재하여 뇌신경세포와 중추신경의 기능에도 중요한 역할을 하는 데 이 효소를 억제해서 시상하부-뇌하수체-고환 호르몬 축이 손상되면 성욕과 성기능이 억제되는 부작용과 테스토스테론 생산이 저하되어 발기부전이 나타난다.
따라서 이러한 부작용이 없는 천연물 유래 5α-환원효소 억제제를 이용하여 탈모 및 전립선 비대증을 예방 또는 개선하려는 노력이 시도되어 왔다. 예를 들어, 다래 추출물을 함유한 탈모 및 지루성 피부 증상의 예방 및 개선용 건강 기능식품(특허등록 제10-0521800호), 탈모방지용 석류추출물 및 상기 석류추출물을 포함하는 탈모방지용 화장료 조성물(특허등록 제10-0451885호), 이소플라본 아글리콘 제니스테인을 함유하는 탈모 방지 또는 모발성장 촉진용 조성물(특허등록 제10-0500641호), 두피장해 치료용 경구 조성물(특허등록 제10-0846888호), 패모 줄기 추출물을 유효성분으로 함유하는 탈모방지 및 발모개선용 화장료 조성물(특허등록 제10-0927971호) 등이 알려져 있다.
한편, 야콘(Smallanthus sonchifolius)은 국화과(Asteraceae, Compositae)에 속하는 다년생 식물로 원산지는 남아메리카 안데스 지역의 에콰도르, 페루이며, 고산지역 인디언들의 식품 및 민간약으로 이용되어 왔으며, 우리나라에는 1985년에 일본에서 도입되어 현재 전국 각지에서 재배되고 있다.
야콘 잎의 수용성 추출물은 쥐에서 혈당을 낮추는 효과가 있다고 보고된 바 있으며(J. Ethnopharm., 125~132, 2001), 상기 추출물에서 이러한 약리효과를 가진 성분으로는 클로로젠산(chlorogenic acid), 카페산(caffeic acid), 페룰산(ferulic acid) 등의 페놀성 화합물로, 강력한 항산화 활성을 나타내어 활성라디칼에 기인한 만성질환의 예방 및 치료제로서 활용할 수 있다고 보고된 바 있다(Eur. J. Nutr., 42: 61~66, 2003; J. Agric. Food Chem., 53: 5577~5582, 2005).
그리고, 야콘의 괴근(뿌리)은 생김새가 고구마와 비슷하며, 맛은 배처럼 달고 시원하다. 야콘의 괴근에는 페놀성 화합물과 프락토올리고(fructo-oligo)당이 다량 함유되어 있고(Natural Product Science, 14: 73~80, 2008; Field Crops Res., 86:157~165, 2004), 당뇨에 효과가 있는 것으로 알려져서 일본에서는 이미 야콘 괴근이 당뇨병으로 고통받는 사람들은 위한 식이보조제로 사용되고 있다(Eur. J. Nutr. 42: 61-66, 2003; Yakugaku Zasshi, 126(8), 665-669, 2006).
야콘 중에는 탄수화물로서 프락토스(fructose), 글루코스(glucose), 슈크로스(sucrose), 프락토올리고당과 이눌린(inulin)이 다량 함유되어 있고, 전분은 전혀 들어 있지 않다. 이들 중 프락토올리고당은 무독성 감미 물질로 장내유산균인 비피더스(Bifidus)균의 먹이가 되어 이들을 증가시켜 소화를 촉진하고, 장내 정상 세균총을 개선하여 정장작용을 한다. 특히, 야콘에 함유된 프락토스는 주요 감미원으로 사용되고 있는 슈크로스에 비해 1.5 ~ 2.0배 당도가 더 높고, 장내 흡수 속도가 느리며, 체내에서 흡수 및 이용이 용이하지 않기 때문에 당뇨, 동맥경화, 비만 등에 유용한 대체 감미원이 될 수 있다.
또한, 야콘 괴근은 알칼리성 원소들이 다른 채소류, 과일류보다 많이 함유되어 있으며, 21종류의 유리 질소 화합물을 포함하며, 그 중에서도 아스파라긴, 글루타민, 프로린, 알기닌 등의 아미노산 및 아미드류(amide)가 비교적 많이 함유되어 있다.
사상자는 미나리과(Umbeliferae)에 속하는 1년생 또는 월년생(越年生) 초본인 벌사상자 및 동속 근연식물의 성숙한 과실을 사용하는 데, 우리나라에서는 Torilis japonica의 성숙한 과실을 쓰고 있다. 우리나라 각지의 강변, 해변 및 개천이나 산간의 계곡 등지에서 자생하며, 봄, 가을 양계절에 성숙한 과실을 채취하여 햇볕에 말려 사용한다. 성미는 신(辛)·고(苦), 온(溫) 무독(無毒) 하고 신(腎)·비(脾) 2경(二經)에 작용한다. 효능은 온신장양(溫腎壯陽), 조습살충(燥濕殺蟲), 산한거풍(散寒祛風) 등의 효능이 있어서 궁냉(宮冷), 습진(濕疹), 습창(濕瘡), 개선소양(疥癬瘙痒) 병증을 치료한다. 현대의약적인 사상자의 효능은 항균작용, 항바이러스작용 및 남성 호르몬 비슷한 작용이 있는 것으로 밝혀져 있으며, 음위증, 발기불능과 자궁탈출증 및 피부소양증, 과민성피부염, 급성 삼출성 피부염, 트리코모나스성 질염, 음부소양증, 대하, 음낭습진, 옴 등 각종 피부질환에 응용되고 있다.
석창포는 천남성과(Araceae)에 속하는 다년생 초본으로 학명은 Acorus gramineus 이다. 우리나라 중남부의 냇가나 계곡가에 자생하며, 중국남부지방에 자생 또는 재배한다. 가을에 뿌리줄기를 채취하여 건조한 후 사용하며, 성미는 신(辛), 온(溫), 무독하고 심(心)·위(胃) 이경(二經)에 작용한다. 진정, 진통, 건위작용이 있으며 정신혼미, 이명, 두통, 풍습성 관절염, 위염, 십이지장궤양, 소화불량, 만성 기관지염 등에 사용한다. 뿌리줄기에 0.5~0.9%, 신선한 잎에 0.25%의 정유가 들어있는 것으로 밝혀져 있다. 정유의 63~81%는 β-아사론이며, 이 밖에 α-아사론 8~14%, 카리오필렌 1~4% 등 다양한 정유성분이 들어 있으며, 그 외에 팔미트산, 페놀성 물질, 미량원소 등이 들어있다. 현재까지 밝혀진 석창포의 약리작용으로는 진정, 진경작용이 있어 신경정신성 질환에 임상에서 자주 이용되고 있다. 즉, 석창포 추출물을 생쥐에 복강주사 했을 때 자발 운동이 뚜렷하게 감소하고 수면시간이 연장되는 작용이 있는 것으로 밝혀졌으며, pentylenetetrazole을 복강주사 하여 간대성경련을 유발한 흰쥐에 석창포 추출물을 투여했을 때 경련을 일으킨 동물의 수가 감소한 것으로 나타났으며, 토끼의 측뇌실에 acetylcholine을 주입하여 유발한 경련에도 효과가 있는 것으로 나타났다는 보고가 있다. 또한 석창포 추출물을 경구투여하면 소화액 분비가 촉진되고 위장의 이상발효가 억제되며 장관 평활근 경련을 이완시키는 작용이 있으며, β 및 α-asarone은 기니피그의 관상동맥 혈류량을 뚜렷하게 증가시키는 작용이 있는 것으로 밝혀져 있다. 또한 α-Asarone은 고양이에게 histamin으로 유발한 기관지수축을 확장하는 효과가 있는 것으로 나타났다.
이에, 본 발명자는 양방치료방법의 원리인 전립선질환 치료방법을 도입하여 즉, 전립선 크기를 줄여주는 약물인 5α-환원효소 억제 약제와 전립선 요도를 열어주는 α-차단제 기능을 가지는 약제를 동시에 투여하기 위해 스크리닝 하고, 이들을 한방 방제학 이론인 군신좌사의 원리에 의해 처방을 완성한 결과, 야콘, 사상자 및 석창포를 포함하는 혼합 추출물이 부작용 없이 탈모 및 전립선 비대증을 예방 또는 개선하는데 효과적임을 발견하였고, 특히, 상기 혼합 추출물을 전립선 비대 증상을 나타내는 사람을 대상으로 투여해본 결과 잔뇨감, 야간빈뇨, 뇨실금 등이 개선되고 1회 소변량이 증가하는 것을 발견함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명이 해결하고자 하는 기술적 과제는 발기부전, 성욕감소 및 사정량 감소 등의 부작용을 초래하지 않으면서 탈모 및 전립선 비대증의 예방 또는 개선에 효과적으로 이용될 수 있는 천연물 유래의 5α-환원효소 억제제 및 α-차단제 혼합 추출물 및 이를 유효성분으로 포함하는 탈모 또는 전립선 비대증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물 및 탈모의 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
상기 기술적 과제를 달성하기 위해, 본 발명은 야콘, 사상자 및 석창포의 혼합 추출물을 제안한다.
또한, 본 발명은 상기 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 또는 전립선 비대증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물을 제안한다.
또한, 본 발명은 상기 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모의 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제안한다.
본 발명에 따른 야콘, 사상자 및 석창포의 혼합 추출물은 테스토스테론 5α-환원효소를 억제하는 효과에 뛰어난 효과를 가짐으로써 전립선 비대증은 물론 탈모의 예방 및 개선을 위한 건강식품 조성물이나 화장료 조성물로서 유용하게 사용될 수 있으며, 특히 본 발명에 따른 혼합 추출물의 투여 후 1~2주 경과 후 전립선비대증 환자의 빈뇨, 잔뇨감, 야간빈뇨, 세뇨, 핍뇨, 난뇨 증상이 개선되는 것으로 확인되었다. 나아가, 본 발명에 따른 혼합 추출물의 투여에 의해 간의 지방대사가 촉진되며 신장의 기능이 개선되는 효과도 확인할 수 있었다.
더욱이, 본 발명에 따른 혼합 추출물을 12개월 이상 장기 복용한 경우에도 기존 화학 약제와 달리 복용에 따른 특별한 부작용이나 불편감을 호소하는 경우가 없어 안전성까지 탁월하다는 장점도 함께 구비하고 있다.
도 1은 본원 실시예 1에서 제조된 혼합 추출물의 투여에 따른 혈중 DHT 농도의 영향을 나타내는 결과이다.
도 2는 본원 실시예 1에서 제조된 혼합 추출물의 투여에 따른 PCNA(proliferating cell nuclear antigen) 단백질의 발현에 대한 영향을 나타내는 Western blot 결과이다.
도 3은 실험예 6에 있어서 설문응답자 연령분포 및 국제전립선증상점수표(IPSS)에 따른 평균 전립선지수 조사 결과이다.
도 4는 실험예 6에 있어서 본원 실시예 2에서 제조된 혼합 추출물을 포함하는 환제의 복용 전후의 국제전립선증상점수 조사 결과이다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명에 따른 혼합 추출물은 야콘, 사상자 및 석창포의 혼합 추출물이며, 상기 야콘은 야콘 잎 및 야콘 뿌리의 적어도 하나 이상을 포함할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 야콘, 사상자 및 석창포는 시중 약재상에서 판매하는 것을 입수해 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 혼합 추출물은 야콘, 사상자 및 석창포를 혼합하고 추출용매로 추출한 것일 수도 있고, 야콘, 사상자 및 석창포 각각의 단독 추출물을 수득한 후 이들 단독 추출물들을 혼합한 것일 수도 있다. 그리고, 본 발명에 따른 혼합 추출물은 별도로 특정하지 않는 한, 분말일 수도 있고 액상일 수도 있다.
한편, 본 발명에 따른 혼합 추출물은 공지의 추출 방법에 의해 제조될 수 있다. 예를 들어, 약재상으로부터 구입한 야콘, 사상자 및 석창포를 세절하여 혼합하고, 상기 혼합 약재 부피의 10 ~ 15 배 부피의 추출용매를 첨가한 후, 상기 추출용매가 증발되는 것을 방지하기 위하여 냉각 콘덴서를 구비한 열탕 추출기로 90 ~ 100 ℃에서 24 ~ 48 시간 동안 가열 추출하고, 추출 용매를 감압 증류기로 농축하여 농축한 후 액상 추출물로 수득하거나, 추가적으로 동결건조 등의 건조 과정을 거쳐 분말 형태로 수득 될 수 있다.
이때, 야콘, 사상자 및 석창포의 혼합 중량비는 특별히 제한되지 않으나, 1~50:1~25:1~25 인 것이 바람직하며, 1~4:1~2:1~2인 것이 더욱 바람직하다.
그리고, 상기 추출용매는 공지의 것으로서 특별히 제한되지 않으나, 물, 에탄올, 메탄올, 프로판올, 에틸아세테이트 또는 이들의 혼합용매를 추출용매인 것이 바람직하며, 그 중에서도 물 또는 함수 에탄올이 가장 바람직하다. 여기서, 함수 에탄올의 경우, 이에 포함된 에탄올의 양은 30 내지 70(w/w)%인 것이 바람직하며, 그 중에서도 50(w/w)%인 것이 더 바람직하다.
상기와 같이 제조된 본 발명에 따른 혼합 추출물은 테스토스테론 5α-환원효소 억제 효과를 가져 안드로겐성 탈모 및 전립선 비대의 예방 및 개선에 효과적으로 사용될 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 야콘, 사상자 및 석창포의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 또는 전립선 비대증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물을 제공한다.
이때, 상기 건강식품 조성물에 포함되는 야콘, 사상자 및 석창포의 혼합 추출물의 함량은, 건강식품 조성물의 전체 중량 기준으로 60 ~ 80 중량%인 것이 바람직하다.
한편, 본 발명에 따른 건강식품 조성물은 환제, 산제, 정제, 캅셀제 또는 액제의 형태로 적절히 가공될 수 있다. 예를 들어, 환 형태의 경우에는 본 발명에 따른 혼합 추출물, 부형제, 결합제, 붕해제 등의 혼합물을 통상의 방법으로 성형하여 조제할 수 있으며, 필요에 따라 백당 등의 물질로 제피하거나 전분 등의 물질로 환의를 입힐 수도 있다.
또한, 본 발명에 따른 건강식품 조성물은 식품의약품 안정청에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 적합하게 판정된 공지의 식품 첨가물을 더 포함할 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 야콘, 사상자 및 석창포의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모의 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
여기서, 상기 화장료 조성물에 포함되는 야콘, 사상자 및 석창포의 혼합 추출물의 함량은, 화장료 조성물의 전체 중량 기준으로 0.1 ~ 10 중량%인 것이 바람직하다.
본 발명에 따른 화장료 조성물에 대한 제형은 특별히 제한되지 않으나, 두피에 도포함에 있어서 용이하고 편리한 형태인 크림, 샴푸 또는 팩인 것이 바람직하다. 이때, 각 제형의 화장료 조성물에 있어서, 상기 혼합 추출물 외에 화장료 조성물에 통상적으로 사용되는 착색제, 착향제, 현탁화제, 유화제, 용해보조제, 안정제, 등장제, pH조절제, 점도조절제, 용제, 방부제 등을 포함할 수 있다.
아래에서 본 발명에 대해 실시예를 기초로 하여 상세하게 설명한다. 제시된 실시예는 예시적인 것으로 본 발명의 범위를 제한하기 위한 것은 아니다.
< 실시예 1> 혼합 추출물의 제조
야콘 잎((주)온당야콘) 25g, 야콘 뿌리((주)온당야콘) 25g, 사상자((주)푸른약업사) 25g 및 석창포((주)푸른약업사) 25g으로 이루어진 혼합 약재 100g에 증류수 1L를 가하여 열탕 추출기에서 100 ℃에서 3 시간 추출하여 얻은 추출액을 여과한 후 이를 회전식감압증류기(EYELA, Japan)를 이용해 고형분이 20 % 될 때까지 농축하고, 동결건조기(EYELA FD-5N, Japan)를 사용하여 건조하여 분말 형태의 혼합 추출물을 수득하였다.
< 실시예 2> 혼합 추출물을 포함하는 환의 제조
야콘 잎((주)온당야콘) 500g, 야콘 뿌리((주)온당야콘) 500g, 사상자((주)푸른약업사) 500g 및 석창포((주)푸른약업사) 500g으로 이루어진 혼합 약재 2kg에 증류수 10L를 가하여 열탕 추출기에서 100 ℃에서 3 시간 추출하여 얻은 추출액을 여과한 후 회전식감압증류기(EYELA, Japan)를 이용해 50 Brix가 될 때까지 농축하여 얻은 여액을, 야콘 잎((주)온당야콘) 250g, 야콘 뿌리((주)온당야콘) 250g, 사상자((주)푸른약업사) 250g 및 석창포((주)푸른약업사) 250g으로 이루어진 혼합 약재 1kg을 세절하여 얻은 분말에 혼합하고, 이를 반죽하여 환을 제조하였다.
< 실험예 1> S.D. 래트를 이용한 전립선 비대 억제 효과 측정
실시예 1에서 제조된 혼합 추출물의 전립선 비대 억제 효과를 측정하기 위해 동물실험을 실시하였다.
본 실험에 사용된 실험동물은, S.D. 래트(12주령, 수컷, 평균 체중이 350∼360g, (주)샘타코)로서 5 일간의 순화기간을 거친 후 실험에 사용하였다. 사육실 및 실험실의 환경은 온도 23±2℃, 상대습도 55±10%, 조명주기 12시간(07:00-19:00), 조도 150-300 lux로 조절하였다. 식이는 rat용 고형사료를, 물은 정제수를 자유롭게 섭취하도록 하였다. 본 실험과 관련한 모든 동물실험은 충북대학교 실험동물센터 동물실험윤리위원회 (Institutional Animal Care and Use Committee, IACUC)의 승인 하에 동 센터의 표준작업순서 (Standard Operation Procedures, SOP) 및 1989년 미국독성학회 (Society of Toxicology, SOT)에서 채택한 "Guide Principles in the Use of Animals in Toxicology"에 따라 수행되었다.
본 실험은 정상대조군(normal control group), 전립선비대 유발군(Benign Prostate Hypertrophy, BPH group), 양성대조군인 finasteride((주)한올제약) 투여군(positive control group) 및 상기 실시예 1에서 제조한 혼합 추출물을 각각 200㎎/㎏ 및 400㎎/㎏ 만큼 투여한 2개의 투여군(YC 200㎎/㎏ 및 YC 400㎎/㎏) 등 총 5군의 실험군으로 나누어 진행하였고, 각 군당 9마리씩을 배정하였다. 정상군은 테스토스테론 투여를 위해 기제로 사용한 올리브오일만을 피하로 주사하였다. 반면에, 전립선비대를 유발하기 위해 전립선비대 유발군, 양성대조군 및 실시예 1에서 제조한 혼합 추출물 투여군(200㎎/㎏, 400㎎/㎏) 모두에게 테스토스테론 농도가 3mg/ml가 되도록 조제한 올리브오일을 3mg/kg의 용량으로 30일간 피하로 주사하였다. 이후 다시 30일간 전립선비대 유발군, 양성대조군 및 실시예 1에서 제조한 혼합 추출물 투여군(200㎎/㎏, 400㎎/㎏) 모두에게 테스토스테론을 3mg/kg을 피하로 주사하여 지속적으로 전립선비대를 유발하였으며, 동시에 정상대조군 및 전립선비대 유발군은 정제수를 경구로 투여하였으며, 양성대조군에는 농도 2mg/ml의 finasteride를 10mg/kg 용량으로 경구투여 하였으며, 실시예 1에서 제조한 혼합 추출물 투여군은 40mg/ml 및 80mg/ml로 제조한 혼합 추출물을 200㎎/㎏ 및 400㎎/㎏ 용량으로 경구투여하였다.
그 결과, 아래 [표 1]에서 확인할 수 있는 바와 같이, 테스토스테론 3mg/kg을 피하로 투여하여 전립선 비대를 유발했을 때 투여 2주 후부터 정상대조군에 비해 몸무게가 감소하기 시작하였으며, 최종 몸무게는 약 20% 정도 감소하는 것으로 나타났다. 반면, 전립선 무게는 전립선비대 유발군의 경우 정상대조군에 비해 2배 이상 증가하는 것으로 나타났다. 한편 양성 대조약인 finasteride 투여군의 경우 전립선 무게가 전립선비대 유발군에 비해 31.43% 유의성 있게 감소한 것으로 나타났으며, 야콘환 투여의 경우 200mg/kg 및 400mg/kg 투여의 경우 모두 28.57% 유의성 있게 감소한 것으로 나타났다.
몸무게(g) 전립선 무게(g) 억제율(%)
최초 최종 최초 최종
정상 대조군
NC)		 359.44±10.74 533.33±31.22 1.14±0.21 0.22±0.05
전립선 비대
유발군
(BPH)		 362.22±6.67 444.44±8.82 2.52±0.24 0.57±0.05
양성대조군
(Finasteride)		 362.11±7.82 441.11±23.15 2.03±0.22* 0.46±0.06* 31.43
실시예 1의
혼합 추출물 200mg/kg
투여군
(YC 200mg/kg)		 360.00±7.07 446.67±27.39 2.05±0.27* 0.47±0.08* 28.57
실시예 1의
혼합 추출물 400mg/kg
투여군
(YC 400mg/kg)		 358.89±10.54 443.75±21.34 2.10±0.27* 0.47±0.06* 28.57
(Data represented as mean ± SD (n=9). *, significant difference from the BPH value (ANOVA test, *, p<0.05).)
< 실험예 2> 혈중 DHT 농도의 측정
실시예 1에서 제조된 혼합 추출물의 투여가 S.D. 래트의 혈중 DHT 농도에 미치는 영향을 측정하기 위해, 부검 전일 20∼24시간 절식시킨 S.D. 래트를 에테르 마취하에, 복대정맥에서 전채혈해서 얻은 혈액을 ELISA(enzyme-linked immunoassay) kit (ALPCO Diagnostics, Salem, NH, USA)를 이용하여 사용자 지시에 따라 측정하였다. ELISA reader(Bio-Rad Laboratories, Inc.)의 흡광도는 450nm에서 측정하였다.
상기 측정 결과를 나타내는 도 1에 의하면, 전립선비대 유발군의 혈액내 DHT 농도 수치는 정상대조군보다 현저하게 높았다. 그러나, finasteride로 처치한 양성대조군의 DHT 농도 수치는 전립선비대 유발군에 비해 유의성 있게 더 낮은 것으로 나타났다. 한편, 실시예 1에서 제조한 혼합 추출물을 각각 200㎎/㎏ 및 400㎎/㎏ 만큼 투여한 2개의 투여군(YC 200㎎/㎏ 및 YC 400㎎/㎏)의 혈액내 DHT 농도 수치는 2개군 모두에서 전립선비대 유발군에 비해 유의성 있게 더 낮은 것으로 나타났다.
즉, 본원 발명에 따른 혼합 추출물은 혈액내 DHT 농도를 유효하게 낮추는 효과를 가지므로, 전립선 비대증은 물론 안드로겐성 탈모의 예방 또는 개선 등에 효과적으로 사용될 수 있음을 알 수 있다.
< 실험예 3> 전립선 조직에 대한 Western blot
S.D. 래트에 1개월간 테스토스테론 3mg/kg을 피하로 투여하여 전립선비대를 유발 후 다시 1 개월간 유지요법으로 테스토스테론 3mg/kg을 피하로 투여하면서 양성대조군인 finasteride 또는 실시예 1에서 제조한 혼합 추출물을 200㎎/㎏ 또는 400㎎/㎏ 투여한 후 에테르로 마취하여 치사 시키고 전립선을 채취하였다. 조직을 homogenizer로 잘게 분쇄한 후 protease inhibitor (1mM PMSF, 1mM Na3VO4, 1㎍/ml leupeptine 및 1㎍/ml aprotinin)를 함유한 RIPA 완충액(20mM Tris, pH 7.4, 100mM NaCl, 1% sodium deoxycholate, 1% Nonidet P-40 및 1% SDS)에 현탁시켰다. 상기 용해액을 취하여 western blot을 하였다. 즉, 일정량의 단백질을 SDS-gel loading buffer와 혼합하여 SDS-acrylamide gel에서 electrophoresis를 하였다. 단백질을 PVDF membrane으로 이동 시키고 5% skim-milk를 함유한 Tris-buffered saline으로 blocking한 후 membrane에 anti-PCNA 또는 GAPDH와 반응시킨 후 enhanced chemiluminescence 시약으로 반응시켜 각각의 band를 동정하였다.
그 결과, 도 2로부터 알 수 있는 바와 같이, 양성대조군은 정상대조군에 비해 PCNA가 현저히 증가된 결과를 나타내었으며, finasteride를 투여한 양성대조군또는 실시예 1에서 제조한 혼합 추출물의 투여군은 PCNA가 현저히 감소된 결과를 나타내었다. 이는 상기 실험예 3에서 ELISA를 이용하여 전립선비대를 유발하는 물질로 알려진 혈액 중 DHT 농도측정 실험에서 finasteride 또는 실시예 1에서 제조한 혼합 추출물 투여가 DHT 생성을 억제하는 효과를 나타낸 결과와 일치하는 것이다.
< 실험예 4> 실시예 1에서 제조된 혼합 추출물이 간 및 신장 대사에 미치는 영향 측정
혈액 생화학 지표의 분석은 부검전일 20∼24시간 절식 시킨 동물을 에테르 마취하에, 복대정맥에서 전채혈해서 얻은 혈액을 혈청분리용 원심분리관(SST-tube, BD micro vaccutainer, USA)에 넣어 실온에 30분간 방치하여 응고시킨 다음, 원심분리(3,000 rpm × 15 min)해서 얻은 혈청에 대해서 alanine transaminase(ALT), aspartate transaminase(AST)를 포함한 생화학적인 검사를 생화학 자동분석기(Hitachi-747, Hitachi Medical, Co., LTD., Japan)를 이용하여 측정하였으며, 사용한 시약은 DAIICHI (Daiichi chemical Co.., Ltd, Japan) 사의 것을 이용하여 측정하였으며, 모든 실험과정과 검사법은 진단검사의학적 가이드라인에 준하여 실험하였다.
본 실험 결과를 나타내는 아래 [표 2]에 따르면, 전립선비대 유발군의 경우 정상대조군에 비해 AST, ALT가 증가 하는 경향을 나타냈으며, 소량이지만 HDL이 감소하고 LDL이 증가하는 경향이 나타나 간의 지방대사량이 떨어지는 것으로 나타났다. 반면, TG가 약간 감소하는 것으로 나타났는데 이것은 비클(vehicle)로 올리브오일을 사용하여 상대적으로 정상대조군의 TG가 올라갔기 때문으로 생각된다. 실제 무투여군의 경우 TG는 정상대조군에 비해 더 낮은 21.25±9.55(데이터 미도시)로 나타났다.
한편, 실시예 1에서 제조한 혼합 추출물 400mg/kg 투여한 경우, 전립선비대 유발군과 비교시 AST, ALT 및 HDL이 유의성 있게 감소한 것으로 나타났으며, 정상대조군, 전립선비대 유발군 및 양성대조군 모두에 비해 AST가 감소한 것으로 나타났다. 특히 실시예 1에서 제조한 혼합 추출물 400mg/kg 투여로 비클만을 투여한 정상대조군에 비해서도 AST, TG 및 CRE이 감소한 것으로 나타나 실시예 1에서 제조한 혼합 추출물은 간 및 신장대사를 촉진하는 것으로 생각된다.
N. Control BPH Finasteride YC 200mg/kg YC 400mg/kg
Mean STD Mean STD Mean STD Mean STD Mean STD
AST 124.53 ± 18.44 2.65 ± 22.88 113.50±16.30* 124.59 ± 17.71 74.14±8.22
ALT 30.14 ± 5.91 38.11 ± 6.58 29.69 ± 5.59 * 32.10 ± 6.91 27.08 ± 4.18*
T. Cho 62.96 ± 8.35 49.27 ± 9.95 60.77 ± 10.94 61.67 ± 10.36 68.70 ± 18.24
HDL-C 20.82 ± 2.75 16.80 ± 2.32 19.04 ± 2.69 19.82 ± 2.96* 23.05 ± 3.87*
LDL-C 6.89 ± 1.32 9.68 ± 1.42 8.24 ± 1.27 10.08 ± 3.10 8.71 ± 2.30
TG 38.79 ± 13.14 17.48 ± 5.11* 18.90 ± 4.90 18.08 ± 5.93* 20.46 ± 8.34
BUN 20.23 ± 2.39 19.96 ± 2.21 19.39 ± 2.69 20.33 ± 2.87 19.55 ± 1.93
CRE 0.57 ± 0.11 0.53 ± 0.05 0.53 ± 0.07 0.51 ± 0.06 0.49 ± 0.10
(Data represented as mean ± SD (n=9). *, significant difference from the BPH value (ANOVA test, *, p<0.05).)
< 실험예 5> 실시예 1에서 제조된 혼합 추출물이 전립선의 조직학적 변화에 미치는 영향에 대한 병리학적 고찰
래트에 대한 마지막 투약 다음날 체중측정과 채혈 후 래트의 전립선을 수술로 절제하여 그 중량을 측정하였다. 중량 측정 후 각 전립선을 10 % 중성 완충 포르말린 용액에 고정한 후, 70 %, 80 %, 95 %, 100 % 에탄올에 차례로 담가 탈수시킨 후 파라핀 블록을 만들었다. 이후 microtome을 이용하여 4 ㎛의 두께로 각 전립선조직을 관상으로 절편한 다음 gelatin coated slide에 부착시켰다. 작성된 조직 절편들은 조직염색을 위하여 xylene에 담가 파라핀을 제거하고 100 %, 95 %, 80 %, 70 % 에탄올과 증류수에 차례로 담가서 재수화(rehydration)를 시켰다. 재수화된 조직을 hematoxyline-eosin(H&E)로 염색한 후 광학현미경 하에서 조직학적으로 평가하였다.
상기와 같이 H&E 염색으로 실시한 조직학적 소견에서 정상군의 경우 다른 실험군에 비하여 전립선의 크기가 크며, 선포세포 (acinar gland)가 둥근 형태로 위축 없이 잘 유지하고 있었고, 도관 상피 세포 (duct epithelial cell) 역시 원주형의 형태로 정상 세포핵과 분비선들이 정상 형태를 유지하고 있었으며, 결합 조직의 증식이나 섬유화 역시 관찰되지 않았다.
한편, 전립선 비대 유발군에서는 선세포가 선형에서 타원형의 형태로 불규칙하게 분포되어 있고, 도관 세포 역시 편평세포의 형태로 심하게 위축되어 있었으며, 결합조직은 심한 세포의 증식과 임파구 및 단핵구의 침윤과 함께 여러 부위에서 섬유화성 변성과 편평상피세포의 화생이 심하게 관찰되었다. 반면, 양성대조군으로 투여한 finasteride 투여군 역시 선세포는 둥근 형태로 정상군과 유사한 형태를 보였고 도관세포는 원주모양으로 잘 유지되어 있었으며, 결합조직은 경도의 증식과 섬유화가 관찰되었으나 이는 대부분의 연구에서 나타나는 결과와 유사하였다.
그리고, 실시예 1에서 제조한 혼합 추출물 투여군에서는 정상대조군에서 관찰되었던 선포세포는 보다 둥근형태로 위축 정도가 전립선비대 유발군과의 비교에서는 완만하였고, 이는 도관세포와 입방세포에서도 세포핵과 분비선들의 형태 및 공간이 대조군에 비해서는 완만한 것으로 관찰되었다. 결합조직 또한 경도의 증식과 함께 임파구 및 단핵구의 침윤이 감소되었고 섬유화 변성 역시 전립선비대 유발군에 비해 감소되는 경향을 보였다.
< 실험예 6> 전립선 기능 개선 효과에 대한 설문조사
전립선 비대증에 있어서의 질환의 중증도는 요류 동태 검사, 전립선 중량, 그리고 국제 전립선 증상 점수(I-PSS) 등의 평가를 이용하여 판정되고 있는데, 본 원에서는 하부 요로 증상의 중증도를 평가하는 지표의 하나인 I-PSS를 이용, 상기 환제의 복용 전과 후 질문에 대한 회답을 점수화하여 전립선 비대증에 수반되는 임상 증상의 개선 작용을 확인하고자 한다. 구체적으로, 아래 [표 3]의 국제전립선증상점수표(IPSS)에 따라 각항의 질문에 대하여 해당 사항의 숫자를 합산하여 '증상 없음'(0 점), '경미한 증상'(1-7점), '중등도의 증상'(8-19점) 또는 '심한 증상'(20-35점)으로 판정한다.
질문 전혀
없음		 5번중
1번		 5번중
1-2번		 5번중
2-3번		 5번중
3-4회		 거의
항상
1.평소 소변을 볼 때 다 보았는데도 소변이 남아 있는 것같이 느끼는 경우가 있습니까? 0 1 2 3 4 5
2.평소 소변을 보고 난 후 2시간 이내에 다시 소변을 보는 경우가 있습니까? 0 1 2 3 4 5
3.평소 소변을 볼 때 소변 줄기가 끊어져서 다시 힘주어 소변을 보는 경우가 있습니까? 0 1 2 3 4 5
4.평소 소변을 참기가 어려운 경우가 있습니까? 0 1 2 3 4 5
5.평소 소변 줄기가 가늘다고 느끼는 경우가 있습니까? 0 1 2 3 4 5
6.평소 소변을 볼 때 소변이 금방 나오지 않아 아랫배에 힘을 주어야 하는 경우가 있습니까? 0 1 2 3 4 5
7.평소에 잠을 자다가 일어나서 소변을 보는 경우가 하루 밤에 몇 번이나 있습니까? 없다 1번 2번 3번 4번 5번 이상
본 출원인은 2012년 5월 3일부터 2012년 5월 6일까지 코엑스에서 열린 세계여성발명대회에 관람자 104명을 대상으로 상기에서 언급한 국제전립선지수 설문조사를 통하여 전립선지수를 측정하였다.
설문응답자 104명의 연령분포는 30대가 10.5%, 40대가 27.5%, 50대가 32.5%, 60대가 17.5%, 70대가 10.00%, 기타 2.0%로 40~60대가 전체의 77.5%를 차지하였으며, 50대가 가장 높은 비율을 보였다. 이와 같은 이유는 설문응답들이 40~50대의 비율이 높았으며, 전립선비대 증상이 구체적으로 나타나는 시기는 50대인 것으로 보인다.
한편, 이들 설문자들의 평균 전립선지수는 30대가 15.25점, 40대가 9.0점, 50대가 10.76점, 60대가 14.28점, 70대가 6.25점인 것으로 나타났다. 30대가 특이적으로 높았던 것은 전립선비대 증상이 있는 사람들이 선택적으로 설문에 응했기 때문인 것으로 판단되며, 70대가 상대적으로 낮은 이유는 건강에 관심도가 많아 자체관리를 잘 하고 있는 사람들이 설문에 응했기 때문인 것으로 판단되었다. 따라서, 도 3으로부터 확인할 수 있는 바와 같이, 전립선지수는 이미 밝혀진 바와 같이 40~60대를 대상으로 추정해 볼 때 나이가 증가함에 따라 증가하는 것으로 판단된다.
따라서, 본 발명자 등은 40~60대 전립선비대 증상을 나타내는 사람 중 치료가 필요하다고 판단되는 전립선지수 8 이상인 남녀(전체 응답자의 64% 차지)를 대상으로 본 조성물을 투여하기로 결정하고, 상기 설문응답자 중 전립선지수가 8 이상이며, 자발적으로 본 조성물을 복용하겠다고 한 남녀 45명을 대상으로 상기 실시예 2에서 제조한 환제를 1개월간 투여 한 후 설문지를 다시 작성하도록 하여 본 조성물이 전립선질환에 미치는 영향을 분석하였다.
본 실험과 관련한 모든 결과들은 평균±표준편차로 나타내었고 통계처리는 SigmaStat®을 이용하여 one-way ANOVA test를 실시하여 하였으며, *, p<0.05와 **, p<0.01을 기준으로 유의성 여부를 판정하였다.
그리고, 본 실험에 대한 결과를 나타내는 도 4로부터, 본원발명에 따라 실시예 2에서 제조된 환제의 투여전과 투여 1개월 후 국제전립선지수 설문지의 점수를 합산하여 비교해본 결과 40대, 50대, 60대 모두의 경우에 있어 유의한 차이(*, p<0.05)로 전립선비대증상이 개선된 것을 확인할 수 있다.

Claims (10)

  1. 야콘, 사상자 및 석창포의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 안드로겐성 탈모의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 야콘은 야콘 잎 및 야콘 뿌리로부터 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 안드로겐성 탈모의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 야콘, 사상자 및 석창포의 혼합 중량비가 1~50:1~25:1~25 인 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 안드로겐성 탈모의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 물, 에탄올, 메탄올, 프로판올, 에틸아세테이트 또는 이들의 혼합용매를 추출용매로 하여 추출된 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 안드로겐성 탈모의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 30 내지 70의 (v/v)% 에탄올 수용액을 추출용매로 하여 추출된 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 안드로겐성 탈모의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
  6. 야콘, 사상자 및 석창포의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
  7. 제6항에 있어서, 야콘은 야콘 잎 및 야콘 뿌리로부터 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 전립선 비대증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
  8. 제6항에 있어서, 야콘, 사상자 및 석창포의 혼합 중량비가 1~50:1~25:1~25 인 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 전립선 비대증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
  9. 제6항에 있어서, 물, 에탄올, 메탄올, 프로판올, 에틸아세테이트 또는 이들의 혼합용매를 추출용매로 하여 추출된 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 전립선 비대증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
  10. 제6항에 있어서, 30 내지 70의 (v/v)% 에탄올 수용액을 추출용매로 하여 추출된 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 전립선 비대증의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
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