KR101361445B1 - Composition comprising peptide, 5-fluorouracil, and mature dendritic cells for cancer treatment - Google Patents
Composition comprising peptide, 5-fluorouracil, and mature dendritic cells for cancer treatment Download PDFInfo
- Publication number
- KR101361445B1 KR101361445B1 KR1020110142340A KR20110142340A KR101361445B1 KR 101361445 B1 KR101361445 B1 KR 101361445B1 KR 1020110142340 A KR1020110142340 A KR 1020110142340A KR 20110142340 A KR20110142340 A KR 20110142340A KR 101361445 B1 KR101361445 B1 KR 101361445B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- cancer
- dendritic cells
- mature dendritic
- cells
- fluorouracil
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
- A61K31/513—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cytosine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
본 발명은 서열번호 1의 서열을 가지는 WKYMVm 펩타이드를 포함하고, 5-플루오로우라실(5-fluorouracil) 및/또는 성숙수지상세포(mature dendritic cells)를 유효량 포함하는 암 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 약학적 조성물은 체내의 면역반응을 증진시켜 항암효과의 증진, 낮은 부작용, 높은 암의 전이 억제효과 등을 가진다.The present invention relates to a pharmaceutical composition for treating cancer comprising a WKYMVm peptide having the sequence of SEQ ID NO: 1, and containing an effective amount of 5-fluorouracil and / or mature dendritic cells. . The pharmaceutical composition according to the present invention enhances the immune response in the body and has anti-cancer effects, low side effects, and high cancer metastasis suppressing effects.
Description
본 발명은 서열번호 1의 서열을 가지는 WKYMVm 펩타이드를 포함하고, 5-플루오로우라실(5-fluorouracil) 및/또는 성숙수지상세포(mature dendritic cells)를 포함하는 암 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a pharmaceutical composition for treating cancer, comprising a WKYMVm peptide having a sequence of SEQ ID NO: 1, and comprising 5-fluorouracil and / or mature dendritic cells.
기존의 항암제는 분열이 활발히 진행되고 있는 세포의 각종 대사경로에 개입하여, 핵산의 합성을 억제하거나 세포 독성을 일으켜 항암활성을 나타내는 약제가 대부분이었기 때문에, 암세포에만 선택적으로 작용하는 것이 아니라 정상세포, 특히 세포 분열이 활발한 조직 세포에도 손상을 입혀 구토, 위장장애, 탈모증, 골수기능저하로 인한 백혈구 감소증 등 심각한 부작용을 초래한다. 또한, 암세포의 전이 능력 및 유전적 불안정으로 인하여 항암제에 대한 내성 획득, 및 재발에 대한 문제점도 있다.Existing anticancer drugs intervene in various metabolic pathways of active cell division and inhibit the synthesis of nucleic acids or cause cytotoxicity, and most of them show anticancer activity. In particular, damage to tissue cells active in cell division causes serious side effects such as vomiting, gastrointestinal disorders, alopecia, leukopenia due to myelosuppression. In addition, there is a problem in obtaining resistance to anticancer drugs and recurrence due to metastatic capacity and genetic instability of cancer cells.
따라서 최근에는 정상세포의 손상을 최소화할 수 있는 표적지향성을 가지는 항암제의 개발, 항암제의 투여용량을 줄여 부작용을 최소화하는 방법, 체내의 면역력을 높이는 방법 등 효과적인 항암제를 개발하기 위한 다양한 연구들이 활발하게 진행되고 있다. 하지만 대부분의 항암제들은 여전히 높은 부작용 및 재발위험성 등의 문제점을 가지고 있다.Recently, various studies have been actively conducted to develop effective anticancer drugs, such as the development of a target-oriented anticancer agent that can minimize damage to normal cells, a method of minimizing side effects by reducing the dose of anticancer drugs, and a method of enhancing the immune system of the body. It's going on. However, most anticancer drugs still have problems such as high side effects and recurrence risk.
이와 같이 암을 효과적으로 치료하기 위해서는, 높은 항암효과를 가지는 동시에 부작용 및 재발위험성을 함께 줄일 수 있는 효과적인 항암제의 개발이 요구되고 있는 실정이다.In order to effectively treat cancer as described above, there is a demand for the development of an effective anticancer agent that has a high anticancer effect and can reduce side effects and the risk of recurrence.
본 발명은 상기와 같은 종래 기술상의 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로, 서열번호 1의 서열을 가지는 WKYMVm 펩타이드를 포함하고, 5-플루오로우라실(5-fluorouracil) 및/또는 성숙수지상세포(mature dendritic cells)를 유효량 포함하는 암 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것을 그 목적으로 한다.The present invention has been made to solve the above problems in the prior art, comprising a WKYMVm peptide having a sequence of SEQ ID NO: 1, 5-fluorouracil and / or mature dendritic cells (mature dendritic) It is an object of the present invention to provide a pharmaceutical composition for treating cancer comprising an effective amount of cells).
그러나 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.However, the technical problem to be achieved by the present invention is not limited to the above-mentioned problem, another task that is not mentioned will be clearly understood by those skilled in the art from the following description.
본 발명은 서열번호 1의 서열을 가지는 WKYMVm 펩타이드 및 5-플루오로우라실(5-fluorouracil)을 유효량 포함하는 암 치료용 약학적 조성물을 제공한다.The present invention provides a pharmaceutical composition for treating cancer comprising an effective amount of a WKYMVm peptide having a sequence of SEQ ID NO: 1 and 5-fluorouracil.
또한 본 발명은 서열번호 1의 서열을 가지는 WKYMVm 펩타이드 및 성숙수지상세포(mature dendritic cell)를 유효량 포함하는 암 치료용 약학적 조성물을 제공한다.In another aspect, the present invention provides a pharmaceutical composition for treating cancer comprising an effective amount of the WKYMVm peptide having a sequence of SEQ ID NO: 1 and mature dendritic cells.
또한 본 발명은 서열번호 1의 서열을 가지는 WKYMVm 펩타이드, 5-플루오로우라실(5-fluorouracil), 및 성숙수지상세포(mature dendritic cell)를 유효량 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.The present invention also provides a pharmaceutical composition comprising an effective amount of a WKYMVm peptide having a sequence of SEQ ID NO: 1, 5-fluorouracil, and mature dendritic cells.
본 발명의 일 구현예로, 상기 조성물은 대장암 또는 림프세포에서 유래하는 암을 억제하는 데 사용되는 것을 특징으로 한다.In one embodiment of the present invention, the composition is characterized in that it is used to suppress cancer derived from colon cancer or lymph cells.
또한 본 발명은 서열번호 1의 서열을 가지는 WKYMVm 펩타이드 및 5-플루오로우라실(5-fluorouracil)을 병용투여하여 항암치료 효과를 높이는 방법을 제공한다.In another aspect, the present invention provides a method of increasing the anti-cancer treatment effect by using a combination of WKYMVm peptide having a sequence of SEQ ID NO: 1 and 5-fluorouracil.
또한 본 발명은 서열번호 1의 서열을 가지는 WKYMVm 펩타이드 및 성숙수지상세포(mature dendritic cell)를 병용투여하여 항암치료 효과를 높이는 방법을 제공한다.In another aspect, the present invention provides a method of increasing the anti-cancer treatment effect by co-administration of WKYMVm peptide having a sequence of SEQ ID NO: 1 and mature dendritic cells.
또한 본 발명은 서열번호 1의 서열을 가지는 WKYMVm 펩타이드, 5-플루오로우라실(5-fluorouracil) 및 성숙수지상세포(mature dendritic cell)를 병용투여하여 항암치료 효과를 높이는 방법을 제공한다.In another aspect, the present invention provides a method of increasing the anti-cancer treatment effect by concurrently administering the WKYMVm peptide having a sequence of SEQ ID NO: 1, 5-fluorouracil and mature dendritic cells.
본 발명에 따른 WKYMVm 펩타이드를 포함하고, 5-플루오로우라실 및/또는 성숙수지상세포의 병용투여는, 체내 면역성을 증진시켜 항암제의 사용량을 줄일 수 있기 때문에 항암제로 인한 부작용 및 내성을 효과적으로 줄일 수 있을 뿐만 아니라 항암효과를 현저히 증가시킬 수 있기 때문에 암의 치료에 적용될 수 있을 것으로 기대된다. 또한 항암제의 종류를 자유롭게 변경하여 다양한 종류의 암 치료에 사용가능할 것으로 기대된다.Concomitant administration of 5-fluorouracil and / or mature dendritic cells, comprising the WKYMVm peptide according to the present invention, can effectively reduce side effects and resistance caused by anticancer drugs because it can increase the immunity of the body and reduce the amount of anticancer drugs. In addition, it is expected to be applicable to the treatment of cancer because it can significantly increase the anticancer effect. In addition, it is expected that the type of anticancer agent can be freely used to treat various types of cancer.
도 1 은 WKYMVm 펩타이드, 5-플루오로우라실, 성숙수지상세포의 투여 방법에 대한 개략적인 모식도이다.
도 2 는 WKYMVm 펩타이드, 5-플루오로우라실, 성숙수지상세포의 단독 및 병용투여에 의한 항암효과를 측정한 결과를 나타내는 도면이다.
도 3 은 WKYMVm 펩타이드, 5-플루오로우라실, 성숙수지상세포의 단독 및 병용투여에 의한 암세포 사멸 유도효과를 측정한 결과를 나타내는 도면이다.
도 4 는 WKYMVm 펩타이드, 5-플루오로우라실, 성숙수지상세포의 병용투여에 의해 면역세포의 종양조직으로의 이동 유도효과를 측정한 결과를 나타내는 도면이다.
도 5 는 WKYMVm 펩타이드, 5-플루오로우라실, 성숙수지상세포의 병용투여에 의한 면역세포의 종양조직으로의 이동 유도 효과에 항-CD8 항체, 항-CD4 항체 및 항-asialo-GM1 항체가 미치는 영향을 측정한 결과를 나타내는 도면이다.
도 6 은 WKYMVm 펩타이드, 5-플루오로우라실, 및 성숙수지상세포의 병용투여에 의해 유도된 CD8 T lymphocyte 및 NK 세포의 항암효과를 측정한 결과를 나타내는 도면이다.
도 7 은 WKYMVm 펩타이드, 5-플루오로우라실, 및 성숙수지상세포의 병용투여가 암조직 또는 말초혈액에서의 사이토킨 양에 미치는 효과를 측정한 결과를 나타내는 도면이다.
도 8 은 WKYMVm 펩타이드, 5-플루오로우라실, 및 성숙수지상세포 병용투여의 암전이 억제효과를 측정한 결과를 나타내는 도면이다.
도 9 는 WKYMVm 펩타이드, 5-플루오로우라실, 및 성숙수지상세포 병용투여의 항암효과를 측정한 결과를 나타내는 도면이다.1 is a schematic diagram of a method of administering the WKYMVm peptide, 5-fluorouracil, mature dendritic cells.
Figure 2 shows the results of measuring the anticancer effect of WKYMVm peptide, 5-fluorouracil, mature dendritic cells alone and in combination administration.
Figure 3 shows the results of measuring the effect of cancer cell death induced by WKYMVm peptide, 5-fluorouracil, mature dendritic cells alone and in combination.
Figure 4 shows the results of measuring the effect of inducing the migration of immune cells to tumor tissue by co-administration of WKYMVm peptide, 5-fluorouracil, mature dendritic cells.
5 shows the effect of anti-CD8 antibody, anti-CD4 antibody and anti-asialo-GM1 antibody on the effect of inducing the migration of immune cells into tumor tissue by coadministration of WKYMVm peptide, 5-fluorouracil, and mature dendritic cells. It is a figure which shows the result of having measured.
Figure 6 shows the results of measuring the anticancer effect of CD8 T lymphocytes and NK cells induced by the co-administration of WKYMVm peptide, 5-fluorouracil, and mature dendritic cells.
Fig. 7 shows the results of measuring the effect of the combined administration of WKYMVm peptide, 5-fluorouracil, and mature dendritic cells on the amount of cytokines in cancer tissues or peripheral blood.
Fig. 8 shows the results of measuring cancer metastasis inhibitory effect of WKYMVm peptide, 5-fluorouracil, and mature dendritic cell co-administration.
Fig. 9 shows the results of measuring anticancer effects of WKYMVm peptide, 5-fluorouracil, and mature dendritic cell co-administration.
이전에 본 발명자들은 단핵백혈구(monocyte), 호중구(neutrophil) 등과 같은 백혈구 세포를 증가시키는 펩타이드 리간드(Trp-Lys-Tyr-Met-Val-D-Met-NH2: 서열번호 1, 이하, “WKYMVm 펩타이드”라 함)를 발표한바 있다(Bae et al., 1999, J. Leukoc. Biol. 65, 241-248). 따라서 본 발명자들은 WKYMVm 펩타이드를 이용하여 면역반응을 촉진시키는 동시에 항암제를 병용투여하여 항암제의 사용량을 줄이면서 항암 효과는 증가시킬 수 있는 방법에 대하여 연구한 결과 본 발명을 완성하게 되었다.Previously, we have described peptide ligands (Trp-Lys-Tyr-Met-Val-D-Met-NH 2 : SEQ ID NO: 1, hereinafter, “WKYMVm that increase leukocyte cells such as monocytes, neutrophils, etc.). Peptides ”(Bae et al., 1999, J. Leukoc. Biol. 65, 241-248). Therefore, the present inventors have completed the present invention as a result of research on a method of increasing the anticancer effect while reducing the amount of anticancer agent by simultaneously using an anticancer agent while promoting an immune response using the WKYMVm peptide.
대표적인 항암제 중 하나인 5-플루오로우라실(5-fluorouracil, 5-FU)은 DNA의 전구물질인 티민과 유사한 구조를 가지고 있어 암세포의 DNA 합성을 저해하며 항암효과를 나타내기 때문에, 위암을 비롯한 소화기계 암에서 널리 사용되고 있다. 그러나 골수저하, 설사 등의 부작용으로 인한 한계를 가지고 있다. 또한 수지상세포는 체내의 면역반응을 촉진하여 면역항암치료에 사용할 수 있을 것이라는 가능성이 제시되고 있어 많은 연구가 진행되고 있지만, 아직 항암 효과 등에 있어 미비한 실정이다.One of the representative anticancer drugs, 5-fluorouracil (5-FU) has a structure similar to that of thymine, a precursor of DNA, which inhibits DNA synthesis of cancer cells and shows anticancer effects. Widely used in mechanical arms. However, there are limitations due to side effects such as bone marrow depression and diarrhea. In addition, dendritic cells have been suggested to be able to be used for immune chemotherapy by promoting the immune response in the body, many studies have been conducted, but the situation is still insufficient in the anti-cancer effect.
따라서 본 발명자들은 체내의 면역반응을 촉진할 수 있는 WKYMVm 펩타이드 및 수지상세포와 항암제인 5-플루오로우라실을 병용투여하여 항암 치료에 사용하고자 하였다.Therefore, the present inventors tried to use WKYMVm peptide and dendritic cells that can promote the immune response in the body and 5-fluorouracil, an anticancer agent, for use in anticancer treatment.
본 발명의 일 실시예에서는 WKYMVm 펩타이드, 5-플루오로우라실, 또는 성숙수지상세포를 단독으로 투여하는 것보다, WKYMVm 펩타이드에 5-플루오로우라실 및/또는 성숙수지상세포를 병용투여하면 암의 부피를 약 5배 정도 줄일 수 있다는 것을 확인하였으며(실시예 1 참조), 다른 실시예에서는 병용투여를 통하여 암의 전이를 5배 이상 억제할 수 있다는 것을 확인하였을 뿐만 아니라, 인위적으로 암을 유발시킨 쥐의 생존률을 현저히 증가시킬 수 있다는 것을 확인하였다(실시예 6 및 7 참조).In one embodiment of the present invention, administration of 5-fluorouracil and / or mature dendritic cells in combination with WKYMVm peptide, 5-fluorouracil, or mature dendritic cells alone increases the volume of cancer. It was confirmed that it can be reduced by about 5 times (see Example 1), and in other examples, it was confirmed that the metastasis of cancer can be inhibited by 5 times or more through co-administration. It was confirmed that the survival rate can be significantly increased (see Examples 6 and 7).
상기 결과들로부터, 서열번호 1의 서열을 가지는 WKYMVm 펩타이드를 포함하고, 5-플루오로우라실(5-fluorouracil) 및/또는 성숙수지상세포(mature dendritic cells)를 병용 투여하는 것은 단독으로 사용하는 것보다 항암 효과를 현저히 높일 수 있을 뿐만 아니라, 부작용을 줄이는 동시에 암의 전이까지 억제할 수 있기 때문에, 암의 치료에 적용될 수 있을 것으로 기대된다. 이에 본 발명은 서열번호 1의 서열을 가지는 WKYMVm 펩타이드를 포함하고, 5-플루오로우라실(5-fluorouracil) 및/또는 성숙수지상세포(mature dendritic cells)를 병용투여하여 항암치료 효과를 높이는 방법을 제공한다.From these results, co-administration of 5-fluorouracil and / or mature dendritic cells containing WKYMVm peptide having the sequence of SEQ ID NO. Not only can the anti-cancer effect be significantly increased, but also the side effects can be reduced and cancer metastasis can be suppressed. Accordingly, the present invention includes a WKYMVm peptide having a sequence of SEQ ID NO: 1, and provides a method of enhancing anti-cancer treatment effect by concurrently administering 5-fluorouracil and / or mature dendritic cells. do.
또한, 본 발명은 서열번호 1의 서열을 가지는 WKYMVm 펩타이드를 포함하고, 5-플루오로우라실(5-fluorouracil) 및/또는 성숙수지상세포(mature dendritic cells)를 유효량 포함하는 암 치료용 약학적 조성물을 제공한다. 본 발명의 암 치료용 약학적 조성물을 적용할 수 있는 암의 종류에는 제한이 없다. 바람직하게는, 대장암 또는 림프세포에서 유래하는 암을 억제하는 데 사용할 수 있다.In another aspect, the present invention provides a pharmaceutical composition for treating cancer comprising a WKYMVm peptide having a sequence of SEQ ID NO: 1, an effective amount of 5-fluorouracil and / or mature dendritic cells to provide. There is no restriction on the type of cancer to which the pharmaceutical composition for treating cancer of the present invention can be applied. Preferably, it can be used to suppress colon cancer or cancer derived from lymphoid cells.
본 발명의 약학적 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있다. 상기 약제학적으로 허용 가능한 담체는 생리식염수, 폴리에틸렌글리콜, 에탄올, 식물성 오일, 및 이소프로필미리스테이트 등을 포함할 수 있으며, 이에 한정되지는 않는다.The pharmaceutical composition of the present invention may comprise a pharmaceutically acceptable carrier. The pharmaceutically acceptable carrier may include, but is not limited to, physiological saline, polyethylene glycol, ethanol, vegetable oil, and isopropyl myristate.
본 발명의 다른 측면은 서열번호 1의 서열을 가지는 WKYMVm 펩타이드를 포함하고, 5-플루오로우라실(5-fluorouracil) 및/또는 성숙수지상세포(mature dendritic cells)를 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물의 약제학적 유효량을 개체에 투여하여 암을 치료하는 방법을 제공한다. 본 발명에서 개체란 질병의 치료를 필요로 하는 대상을 의미하고, 보다 구체적으로는 인간, 또는 비-인간인 영장류, 생쥐(mouse), 쥐(rat), 개, 고양이, 말, 및 소 등의 포유류를 의미한다. 또한, 본 발명에서 약제학적 유효량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설율, 및 질환의 중증도 등에 따라 그 범위가 다양하게 조절될 수 있음은 당업자에게 명백하다.Another aspect of the present invention provides a pharmaceutical composition comprising a WKYMVm peptide having a sequence of SEQ ID NO: 1, comprising 5-fluorouracil and / or mature dendritic cells as an active ingredient A method of treating cancer is provided by administering a pharmaceutically effective amount to a subject. In the present invention, an individual refers to a subject in need of treatment for a disease, and more specifically, a human, or a non-human primate, a mouse, a rat, a dog, a cat, a horse, It means mammals. It is also apparent to those skilled in the art that the pharmaceutically effective amount of the compound of the present invention can be variously adjusted depending on the patient's body weight, age, sex, health condition, diet, administration time, administration method, excretion rate, Do.
본 발명의 약학적 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물 형태, 투여경로, 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나 바람직하게는, 1일 0.001 내지 100mg/체중kg으로, 보다 바람직하게는 0.01 내지 30mg/체중kg으로 투여한다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 여러번 나누어 투여할 수도 있다. 본 발명의 서열번호 1의 서열을 가지는 WKYMVm 펩타이드, 5-플루오로우라실(5-fluorouracil), 및/또는 성숙수지상세포(mature dendritic cells)는 전체 조성물 총 중량에 대하여 0.0001 내지 10 중량%, 바람직하게는 0.001 내지 1 중량%의 양으로 존재할 수 있다.The preferred dosage of the pharmaceutical composition of the present invention varies depending on the condition and the weight of the patient, the degree of disease, the drug form, the administration route, and the period, but can be appropriately selected by those skilled in the art. However, preferably, it is administered at 0.001 to 100 mg / kg body weight per day, more preferably 0.01 to 30 mg / kg body weight. Administration may be administered once a day or may be divided several times. WKYMVm peptide, 5-fluorouracil, and / or mature dendritic cells having the sequence of SEQ ID NO: 1 of the present invention are preferably 0.0001 to 10% by weight, based on the total weight of the total composition, preferably May be present in an amount from 0.001 to 1% by weight.
본 발명의 약학적 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여방법에는 제한이 없으며, 예를 들면, 경구, 직장, 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막, 또는 뇌혈관(intra cerbroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.
The pharmaceutical composition of the present invention can be administered to mammals such as mice, mice, livestock, humans, and the like by various routes. The method of administration is not limited and can be administered, for example, orally, rectally, or by intravenous, intramuscular, subcutaneous, intrauterine, or intra-cerebroventricular injection.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, preferred embodiments of the present invention will be described in order to facilitate understanding of the present invention. However, the following examples are provided only for the purpose of easier understanding of the present invention, and the present invention is not limited by the following examples.
[[ 실시예Example ]]
실시예Example 1. One. WKYMVmWKYMVm 펩타이드Peptides , 5-, 5- FUFU , , 성숙수지상세포의Of mature dendritic cells 항암효과 측정 Anticancer effect measurement
WKYMVm 펩타이드, 5-fluorouracil(5-FU), 및 성숙수지상세포(mature dendritic cell, mDC)를 병용투여할 경우 항암효과가 있는지 확인하기 위하여, 우선 골수세포(bone marrow cell)를 DC 배지(10% fetal bovine serum, 2mM L-glutamine, 50uM beta-mercaptoethanol, 및 항생제를 포함하는 RPMI 1640 배지)에서 5일간 배양하며 0, 2, 4일째 GM-CSF(1,000U/mL) 및 IL-4(500U/mL)를 처리하였다. 그리고 5일째 상기 세포를 수집하여 새로운 DC 배지로 옮겨준 후, lipopolysaccharide(100ng/mL), CpG oligodeoxynucleotide 1826(10μg/mL) 및 CT-26 세포 용해물(100μg/mL)을 첨가하여 2일간 배양하여 성숙수지상세포를 준비하였다. 그리고 생후 6-8 주령 BALB/c 수컷 마우스에 결장암세포주인 CT-26 세포주(5X105 cells/100μL의 인산염완충용액(phosphate buffered saline, PBS))를 피하주사(subcutaneous injection)하여 암을 유발시켰다(-3 days). 그리고 상기 마우스에 0일(0 day) 및 1일(1 day)에 각각 100μg/100μL의 5-FU를 피하주사하고, 2일(2 day)에 WKYMVm 펩타이드(100μg/100μL)를 12시간 간격으로 4회 피하주사하고 성숙수지상세포(1X106 cells/100μL)를 12시간 간격으로 2회 꼬리 정맥으로 주사하였다. 그리고 4일(4 day) 및 5일(5 day)에 5-FU(100μg/100μL)를 피하주사하였다. 그 후에, 상기 생쥐에 WKYMVm 펩타이드, 5-FU, 및 성숙수지상세포를 일주일에 2회씩 3주 동안 반복 병용투여하였다. 대조군으로는 아무것도 처리하지 않은 마우스, WKYMVm 펩타이드, 5-FU, 또는 성숙수지상세포를 단독 또는 두 개의 조합으로 실험군과 같이 나누어 투여한 마우스를 이용하였다. 그리고 하기 식을 이용하여 암의 부피를 정량화하였다. 실험순서에 대한 개략적인 모식도는 도 1에 나타내었고, 상기 실험 결과는 도 2에 나타내었다.To determine whether anti-cancer effects were obtained when WKYMVm peptide, 5-fluorouracil (5-FU), and mature dendritic cells (mDC) were used in combination, bone marrow cells were first added to DC medium (10%). Incubated for 5 days in RPMI 1640 medium containing fetal bovine serum, 2 mM L-glutamine, 50 uM beta-mercaptoethanol, and antibiotics, GM-CSF (1,000 U / mL) and IL-4 (500 U / mL) on
암의 부피(mm3) = 길이(mm) X 너비(mm)2/2The volume of cancer (mm 3) = length (mm) X width (mm) 2/2
도 2에 나타난 바와 같이, WKYMVm 펩타이드, 5-FU, 또는 성숙수지상세포를 각각 처리한 경우에는 약간 암의 부피가 줄어든 반면, WKYMVm 펩타이드 및 mDC, 또는 mDC 및 5-FU를 병용투여한한 경우에는 암의 부피가 줄어든 것을 확인할 수 있었다. 또한 WKYMVm 펩타이드, 5-FU, 및 성숙수지상세포를 병용투여한 경우에는 암의 부피가 현저하게 줄어든 것을 확인할 수 있었다. 상기 결과를 통하여, 두 개를 병용투여할 경우에도 항암 효과가 증가되지만, 세 개를 모두 병용투여하면 항암효과가 현저히 증가된다는 것을 확인할 수 있었다.
As shown in Figure 2, when treated with WKYMVm peptide, 5-FU, or mature dendritic cells, respectively, the volume of the cancer slightly reduced, while in the case of co-administration of WKYMVm peptide and mDC, or mDC and 5-FU The volume of the cancer was reduced. In addition, when the WKYMVm peptide, 5-FU, and mature dendritic cells were administered in combination, it was confirmed that the cancer volume was significantly reduced. Through the above results, the anti-cancer effect was increased even when the two doses in combination, it was confirmed that the anti-cancer effect is significantly increased when all three together.
실시예Example 2. 2. WKYMVmWKYMVm 펩타이드Peptides , 5-, 5- FUFU , , 성숙수지상세포의Of mature dendritic cells 예정된 세포사멸 유도효과 측정 Determining Induced Apoptosis Inducing Effect
WKYMVm 펩타이드, 5-fluorouracil(5-FU), 및 성숙수지상세포(mature dendritic cell, mDC) 병용투여의 항암효과가 예정된 세포사멸(apoptosis)을 유도하기 때문인지 확인하기 위하여, 실시예 1과 동일한 방법으로 마우스에 단독 또는 병용투여하고 39일 후에 암을 마우스로부터 제거한 후 10% neutral phosphate buffered formalin(NBF)으로 고정한 후, 파라핀에 넣어 여러 층으로 절단하고 염색하였다. 형태학적 분석을 위해서는 헤마톡시린 및 이오신(hematoxylin and eosin, H&E)으로 염색한 후 광학 현미경을 통해 관찰하였고, 면역학적 분석을 위해서는 anti-murine cleaved caspase-3 항체 또는 anti-murine FAS 항체로 1차 결합시킨 후, FITC가 결합되어 있는 anti-murine IgG 또는 Alexa 594가 결합되어 있는 anti-murine IgG를 이용하여 2차 결합시킨 후 형광 현미경으로 관찰하였다. 또한 TUNEL(Terminal deoxy-nucleotidyl transferase-mediated digoxigenin-dUTP nick end labeling) 염색법을 이용하여 염색하였다. 그 결과는 도 3에 나타내었다.To determine whether the anticancer effect of the combination of WKYMVm peptide, 5-fluorouracil (5-FU), and mature dendritic cell (mDC) is due to induction of apoptosis, the same method as in Example 1 39 days later, the cancer was removed from the mouse, fixed with 10% neutral phosphate buffered formalin (NBF), and then cut into several layers and stained with paraffin. For morphological analysis, stained with hematoxylin and eosin (H & E) and observed through light microscopy. For immunological analysis, anti-murine cleaved caspase-3 antibody or anti-murine FAS antibody was used. After secondary binding, anti-murine IgG bound to FITC or anti-murine IgG bound to Alexa 594 was used for secondary binding, followed by fluorescence microscopy. Also stained using TUNEL (Terminal deoxy-nucleotidyl transferase-mediated digoxigenin-dUTP nick end labeling) staining method. The results are shown in Fig.
도 3에 나타난 바와 같이, TUNEL 염색, FAS 및 Caspase-3 염색 모두 유사한 결과를 나타내었다. WKYMVm 펩타이드, 또는 성숙수지상세포 단독으로 처리한 경우에는 세포가 거의 죽지 않은 것을 확인하였고, 5-FU를 단독처리한 경우에는 일부 세포가 죽은 것을 확인할 수 있었다. 또한 두 개를 병용투여한 경우에도 일부 세포가 죽은 것을 확인할 수 있었지만, WKYMVm 펩타이드, 5-FU, 및 성숙수지상세포를 병용투여한 경우에는 거의 모든 세포가 죽은 것을 확인할 수 있었다. 상기 결과를 통하여, KYMVm 펩타이드, 5-FU, 및 성숙수지상세포의 병용투여는 예정된 세포사멸을 유도하여 암세포를 사멸시키는 것을 확인할 수 있었다.
As shown in Figure 3, TUNEL staining, FAS and Caspase-3 staining all showed similar results. When treated with WKYMVm peptide or mature dendritic cells alone, the cells were almost dead, and when treated with 5-FU alone, some of the cells were dead. In addition, even when two were administered in combination, some cells were confirmed to be dead, but in combination with WKYMVm peptide, 5-FU, and mature dendritic cells, almost all of the cells were confirmed to be dead. Through the above results, co-administration of KYMVm peptide, 5-FU, and mature dendritic cells was confirmed to induce apoptosis and kill cancer cells.
실시예Example 3. 3. WKYMVmWKYMVm 펩타이드Peptides , 5-, 5- FUFU , , 성숙수지상세포의Of mature dendritic cells 항암면역반응 유도효과 측정 Induction of anticancer immune response
WKYMVm 펩타이드, 5-fluorouracil(5-FU), 및 성숙수지상세포(mature dendritic cell, mDC)의 병용투여가 항암면역반응을 유도하는지 확인하기 위하여, FITC(Fluorescein isothiocyanate)가 결합되어 있는 anti-murine CD3 항체, PE(Phycoerythrin)가 결합되어 있는 anti-murine CD4 항체, FITC가 결합되어 있는 anti-murine CD11b 항체, 또는 PE가 결합되어 있는 anti-murine DX5 항체를 이용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 암을 염색하고 형광 현미경을 통하여 관찰하였다. 그 결과는 도 4에 나타내었다.Anti-murine CD3 conjugated with Fluorescein isothiocyanate (FITC) to determine whether co-administration of WKYMVm peptide, 5-fluorouracil (5-FU), and mature dendritic cells (mDC) induce anticancer immune responses Cancer was treated in the same manner as in Example 2 using an antibody, an anti-murine CD4 antibody bound with PE (Phycoerythrin), an anti-murine CD11b antibody bound with FITC, or an anti-murine DX5 antibody bound with PE. Stained and observed through a fluorescence microscope. The results are shown in Fig.
도 4에 나타난 바와 같이, WKYMVm 펩타이드, 5-fluorouracil(5-FU), 및 성숙수지상세포(mature dendritic cell, mDC)의 병용투여는 CD8 T lymphocyte 및 NK(natural killer) 세포를 현저히 암 주변으로 유도한다는 것을 확인하였다. 또한 CD4 T lymphocyte도 약하게 암 주변으로 모이는 것을 확인할 수 있었다.As shown in FIG. 4, co-administration of WKYMVm peptide, 5-fluorouracil (5-FU), and mature dendritic cells (mDC) induced CD8 T lymphocytes and NK (natural killer) cells significantly around cancer. It was confirmed that. In addition, CD4 T lymphocytes were found to gather weakly around the cancer.
또한, CD8 T lymphocyte 및 NK(natural killer) 세포가 서로 영향을 주어 암 주변으로 모이는 것이 아닌지 확인하기 위하여, rat anti-mouse CD8 항체, rat anti-mouse asialo-GM1 항체, 또는 rat anti-mouse CD4 항체 100μg을 각각 암을 마우스에 피하주사하기 하루 전, 피하주사한 당일, 및 피하주사후 5일째에 복강내주사(intraperitoneal injection)하였다. 그리고 상기와 동일한 방법으로 염색하고 형광 현미경을 통하여 관찰하였다. 그 결과는 도 5에 나타내었다.In addition, rat anti-mouse CD8 antibodies, rat anti-mouse asialo-GM1 antibodies, or rat anti-mouse CD4 antibodies to confirm that CD8 T lymphocytes and natural killer (NK) cells do not influence each other to gather around cancer. 100 μg of each was intraperitoneal injection one day prior to subcutaneous injection of cancer into the mouse, the day of subcutaneous injection, and 5 days after subcutaneous injection. And stained in the same manner as above and observed through a fluorescence microscope. The results are shown in Fig.
도 5에 나타난 바와 같이, anti-CD8 항체를 처리한 경우에는 CD8 T lymphocyte는 암 주변으로 유도되지 않았지만, NK 세포는 암 주변에 모여있는 것을 확인할 수 있었다. 또한 anti-asialo-GM1 항체를 처리한 경우에는 NK 세포는 암 주변으로 유도되지 않았지만, CD8 T lymphocyte는 암 주변으로 모여들었으며, anti-CD4 항체를 처리한 경우에는 CD8 T lymphocyte 및 NK 세포 모두 암 주변으로 유도된 것을 확인할 수 있었다.
As shown in FIG. 5, when the anti-CD8 antibody was treated, CD8 T lymphocytes were not induced around the cancer, but NK cells were confirmed to be collected around the cancer. In addition, anti-asialo-GM1 antibody treated NK cells did not induce cancer, but CD8 T lymphocytes gathered around cancer, and anti-CD4 antibody treated CD8 T lymphocytes and NK cells. It was confirmed that the induced around.
실시예Example 4. 4. WKYMVmWKYMVm 펩타이드Peptides , 5-, 5- FUFU , 및 , And 성숙수지상세포의Of mature dendritic cells 병용투여에 의해 유도된 Induced by co-administration CD8CD8 T T lymphocytelymphocyte 및 And NKNK 세포의 항암효과 측정 Measurement of anticancer effect of cells
항암면역반응은 다양한 종류의 백혈구(leukocyte)들이 함께 작용하여 일어나게 된다. 따라서, WKYMVm 펩타이드, 5-FU, 및 성숙수지상세포의 병용투여에 의하여 유도된 CD8 T lymphocyte 및 NK 세포가 항암면역반응을 일으키는지 확인하기 위하여, rat anti-mouse CD8 항체, rat anti-mouse asialo-GM1 항체, 또는 rat anti-mouse CD4 항체 100μg을 실시예 3과 동일한 방법으로 복강주사한 후, 암의 부피를 날짜별로 측정하였다. 그 결과는 도 6에 나타내었다.An anticancer immune response occurs when various types of leukocytes work together. Therefore, in order to determine whether CD8 T lymphocytes and NK cells induced by the co-administration of WKYMVm peptide, 5-FU, and mature dendritic cells induce an anticancer immune response, rat anti-mouse CD8 antibody, rat anti-mouse asialo- 100 μg of the GM1 antibody or the rat anti-mouse CD4 antibody was intraperitoneally injected in the same manner as in Example 3, and then the volume of the cancer was measured by date. The results are shown in Fig.
도 6에 나타난 바와 같이, 병용투여한 경우에는 암의 부피가 현저히 감소하였지만, 항체를 함께 투여한 경우에는 암의 부피가 처리하지 않은 대조군과 유사하게 나타나는 것을 확인할 수 있었다. 그러나 rat anti-mouse CD4 항체를 처리한 경우에는 암의 부피가 병용투여한 마우스와 동일한 것을 확인하였다. 상기 결과를 통하여, WKYMVm 펩타이드, 5-FU, 및 성숙수지상세포의 병용투여에 의하여 유도된 CD8 T lymphocyte 및 NK 세포가 항암효과에 중요한 역할을 하는 것을 확인하였다.
As shown in Figure 6, when administered in combination, the volume of the cancer was significantly reduced, but when administered with the antibody was confirmed that the volume of the cancer appears similar to the untreated control group. However, when the rat anti-mouse CD4 antibody was treated, it was confirmed that the cancer volume was the same as that of the co-administered mouse. Through the above results, it was confirmed that CD8 T lymphocytes and NK cells induced by co-administration of WKYMVm peptide, 5-FU, and mature dendritic cells play an important role in anticancer effects.
실시예Example 5. 5. WKYMVmWKYMVm 펩타이드Peptides , 5-, 5- FUFU , 및 , And 성숙수지상세포의Of mature dendritic cells 병용투여가 암세포의 Concomitant administration of cancer cells 사이토킨Cytokine 분비에 미치는 효과 측정 Determination of the effect on secretion
WKYMVm 펩타이드, 5-FU, 및 성숙수지상세포의 병용투여가 암세포의 사이토킨(cytokine) 분비에 미치는 효과를 확인하기 위하여, 마우스에 WKYMVm 펩타이드, 5-FU, 및 성숙수지상세포를 병용투여한 후 42일째에 마우스의 암 용해물 또는 마우스의 심장으로부터 혈액을 추출하여 효소결합면역흡착검사(enzyme-linked immunosorbent assay , enzyme-linked immunospecific assay, ELISA)를 실시하였다. 그 결과는 도 7에 나타내었다.To determine the effect of co-administration of WKYMVm peptide, 5-FU, and mature dendritic cells on cytokine secretion of cancer cells, 42 days after co-administration of WKYMVm peptide, 5-FU, and mature dendritic cells in mice Blood was extracted from mouse lysates of the mouse or the heart of the mouse and subjected to an enzyme-linked immunosorbent assay, enzyme-linked immunospecific assay (ELISA). The results are shown in Fig.
도 7A 및 도 7B에 나타난 바와 같이, WKYMVm 펩타이드, 5-FU, 및 성숙수지상세포를 병용투여한 경우에는 인터페론-감마(IFN-gamma) 및 인터루킨-12(IL-12)가 급격히 증가한 것을 확인할 수 있었다. 또한 WKYMVm 펩타이드 및 성숙수지상세포 두 개만을 병용투여한 경우에도 인터루킨-12가 급격히 증가된 것을 확인할 수 있었다.As shown in FIGS. 7A and 7B, when the WKYMVm peptide, 5-FU, and mature dendritic cells were co-administered, interferon-gamma (IFN-gamma) and interleukin-12 (IL-12) were rapidly increased. there was. In addition, even when only two WKYMVm peptides and mature dendritic cells were administered in combination, it was confirmed that interleukin-12 was rapidly increased.
또한, rat anti-mouse CD8 항체, rat anti-mouse asialo-GM1 항체, 또는 rat anti-mouse CD4 항체 100μg을 실시예 3과 동일한 방법으로 함께 투여하면 인터페론-감마 및 인터루킨-12의 양이 다시 급격히 감소하는 것을 확인할 수 있었다. 상기 결과들은 WKYMVm 펩타이드, 5-FU, 및 성숙수지상세포의 병용투여에 의하여 유도된 CD8 T lymphocyte 및 NK 세포가 인터페론-감마 및 인터루킨-12를 생성시킨다는 것을 의미한다.
In addition, administration of 100 μg of rat anti-mouse CD8 antibody, rat anti-mouse asialo-GM1 antibody, or rat anti-mouse CD4 antibody in the same manner as in Example 3 resulted in a sharp reduction in the amount of interferon-gamma and interleukin-12. I could confirm that. The results indicate that CD8 T lymphocytes and NK cells induced by co-administration of WKYMVm peptide, 5-FU, and mature dendritic cells produce interferon-gamma and interleukin-12.
실시예Example 6. 6. WKYMVmWKYMVm 펩타이드Peptides , 5-, 5- FUFU , 및 , And 성숙수지상세포Mature dendritic cells 병용투여의 암전이 억제효과 측정 Measurement of cancer metastasis inhibitory effect of combined administration
암의 재발을 막기 위해서는, 암의 전이를 방지하는 것이 가장 중요하기 때문에 WKYMVm 펩타이드, 5-FU, 및 성숙수지상세포의 병용투여가 암전이를 억제하는지 확인하였다. 자연적인 폐전이 실험을 위해서는, 실시예 1과 동일하게 CT-26 세포주를 이용하여 마우스에 암을 유발시키고, 3주 동안 WKYMVm 펩타이드, 5-FU, 및 성숙수지상세포를 병용투여하였다. 그리고 42일째 상기 마우스의 폐 표면의 암 결절(tumor nodule) 수를 측정하였다. 그리고 인위적인 폐전이 실험을 위해서는, 마우스의 꼬리 정멱에 CT-26 세포주를 주사하고, 2주 동안 WKYMVm 펩타이드, 5-FU, 및 성숙수지상세포를 병용투여한 후, 실시예 2와 동일한 방법으로 마우스의 폐를 헤마톡시린 및 이오신(hematoxylin and eosin, H&E)으로 염색하고 관찰하였다. 그 결과는 도 8에 나타내었다.In order to prevent cancer from recurring, it was confirmed that co-administration of WKYMVm peptide, 5-FU, and mature dendritic cells suppresses cancer metastasis, since it is most important to prevent cancer metastasis. For natural lung metastasis experiments, cancer was induced in mice using CT-26 cell line as in Example 1, and WKYMVm peptide, 5-FU, and mature dendritic cells were co-administered for 3 weeks. And the number of cancer nodule on the lung surface of the mouse was measured on
도 8A에 나타난 바와 같이, CT-26 세포주를 피하주사한 경우 자연스럽게 폐 조직으로 암이 전이되었고, WKYMVm 펩타이드, 5-FU, 및 성숙수지상세포를 병용투여한 경우에는 암이 거의 전이되지 않은 것을 확인할 수 있었다.As shown in FIG. 8A, when the CT-26 cell line was injected subcutaneously, the cancer naturally metastasized to lung tissue, and when the WKYMVm peptide, 5-FU, and mature dendritic cells were used in combination, it was confirmed that the cancer almost did not metastasize. Could.
또한 도 8B에 나타난 바와 같이, 인위적으로 폐 조직으로 암을 전이시킨 경우에도, WKYMVm 펩타이드, 5-FU, 및 성숙수지상세포를 병용투여한 경우에는 암이 거의 전이되지 않은 것을 확인할 수 있었다.
In addition, as shown in FIG. 8B, even when artificially metastasized cancer to lung tissue, the cancer was almost metastatic when WKYMVm peptide, 5-FU, and mature dendritic cells were administered in combination.
실시예Example 7. 7. WKYMVmWKYMVm 펩타이드Peptides , 5-, 5- FUFU , 및 , And 성숙수지상세포Mature dendritic cells 병용투여의 항암효과 측정 Determination of anticancer effect of combined administration
WKYMVm 펩타이드, 5-FU, 및 성숙수지상세포의 병용투여의 실질적인 항암효과를 확인하기 위하여, 실시예 1과 동일한 방법으로 마우스에 암을 유발시킨 후 WKYMVm 펩타이드, 5-FU, 및 성숙수지상세포를 단독 또는 병용투여하고 마우스의 생존률을 측정하였다. 그 결과는 도 9A에 나타내었다.In order to confirm the substantial anticancer effect of the co-administration of the WKYMVm peptide, 5-FU, and mature dendritic cells, cancer was induced in mice in the same manner as in Example 1, followed by the WKYMVm peptide, 5-FU, and mature dendritic cells alone. Or co-administered and the survival rate of the mice was measured. The results are shown in Figure 9A.
도 9A에 나타난 바와 같이, WKYMVm 펩타이드, 5-FU, 및 성숙수지상세포를 병용투여한 경우 80일이 지나도 80% 이상의 마우스가 생존해 있는 것을 확인할 수 있었다.As shown in FIG. 9A, when the WKYMVm peptide, 5-FU, and mature dendritic cells were coadministered, more than 80% of mice survived after 80 days.
또한 CD8 T lymphocyte 및/또는 NK 세포를 병용투여 시 항암효과가 있는지 확인하기 위하여, CT-26 세포주를 1X106 cells 농도로 높여 마우스에 투여한 후, 상기와 동일하게 실험을 진행하였다. 그 결과는 도 9B에 나타내었다.In addition, in order to determine whether the antitumor effect when co-administered with CD8 T lymphocytes and / or NK cells, the CT-26 cell line was increased to 1X10 6 cells and administered to mice. The results are shown in Figure 9B.
도 9B에 나타난 바와 같이, CT-26 세포주의 농도를 증가시켰을 때는 KYMVm 펩타이드, 5-FU, 및 성숙수지상세포를 병용투여한 경우에도 80일째 생존률이 40% 정도로 감소된 것을 확인하였다. 또한 CD8 T lymphocyte 또는 NK 세포를 단독으로 KYMVm 펩타이드, 5-FU, 및 성숙수지상세포와 병용투여한 경우에는 생존률이 미비하게 증가하였으나, CD8 T lymphocyte 및 NK 세포를 병용투여한 경우에는 80일이 지나도 생존률이 80%이상인 것을 확인할 수 있었다.As shown in FIG. 9B, when the concentration of CT-26 cell line was increased, survival rate was reduced by 40% at 80 days even when KYMVm peptide, 5-FU, and mature dendritic cells were co-administered. In addition, the survival rate was slightly increased when CD8 T lymphocytes or NK cells were used alone with KYMVm peptide, 5-FU, and mature dendritic cells. Survival rate was found to be more than 80%.
상기 결과들을 통하여 WKYMVm 펩타이드, 5-FU, 및 성숙수지상세포를 병용투여한 경우 각각 단독으로 처리한 경우에 비하여 항암 효과가 현저히 증가되는 것을 확인하였으며, 또한 CD8 T lymphocyte 및 NK 세포를 병용투여하는 경우, 항암 효과가 더욱 증가되는 것을 확인하였다.
Through the above results, the combination of WKYMVm peptide, 5-FU, and mature dendritic cells was confirmed that the anti-cancer effect was significantly increased compared with the treatment alone, and the combination of CD8 T lymphocytes and NK cells. It was confirmed that the anticancer effect was further increased.
전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야 한다.It will be understood by those skilled in the art that the foregoing description of the present invention is for illustrative purposes only and that those of ordinary skill in the art can readily understand that various changes and modifications may be made without departing from the spirit or essential characteristics of the present invention. will be. It is therefore to be understood that the embodiments described above are in all respects illustrative and not restrictive.
서열목록 전자파일 첨부Attach an electronic file to a sequence list
Claims (7)
상기 조성물은 상기 항암제와 동시에(simultaneous), 별도로(separate) 또는 순차적(seqeuntial)으로 투여되는 것을 특징으로 하는, 조성물.The method of claim 1,
The composition is characterized in that it is administered simultaneously (seultaneous), separate (separate) or sequential (seqeuntial) with the anticancer agent.
상기 조성물은 대장암 또는 림프세포에서 유래하는 암을 억제하는 데 사용되는 것을 특징으로 하는, 조성물.3. The method according to claim 1 or 2,
The composition is characterized in that it is used to inhibit cancers derived from colon cancer or lymph cells.
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020110142340A KR101361445B1 (en) | 2011-12-26 | 2011-12-26 | Composition comprising peptide, 5-fluorouracil, and mature dendritic cells for cancer treatment |
| PCT/KR2012/011291 WO2013100500A1 (en) | 2011-12-26 | 2012-12-21 | Pharmaceutical composition for treating cancer, comprising peptide, 5-fluorouracil, and mature dendritic cells |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020110142340A KR101361445B1 (en) | 2011-12-26 | 2011-12-26 | Composition comprising peptide, 5-fluorouracil, and mature dendritic cells for cancer treatment |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20130074325A KR20130074325A (en) | 2013-07-04 |
| KR101361445B1 true KR101361445B1 (en) | 2014-02-12 |
Family
ID=48697876
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020110142340A KR101361445B1 (en) | 2011-12-26 | 2011-12-26 | Composition comprising peptide, 5-fluorouracil, and mature dendritic cells for cancer treatment |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR101361445B1 (en) |
| WO (1) | WO2013100500A1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20220062926A (en) | 2020-11-09 | 2022-05-17 | 충남대학교산학협력단 | Anticancer Adjuvant Composition for Treatment of Colon Cancer Comprising Bacillus sp. |
Families Citing this family (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104507489B (en) | 2012-05-11 | 2016-07-13 | 杰姆维克斯&凯尔有限公司 | For preventing and treat the compositions of rheumatoid arthritis |
| KR20150014483A (en) | 2012-05-11 | 2015-02-06 | 주식회사 카엘젬백스 | Anti-inflammatory Peptides and Composition comprising the same |
| WO2014010971A1 (en) | 2012-07-11 | 2014-01-16 | 주식회사 카엘젬백스 | Cell-penetrating peptide, conjugate comprising same and composition comprising same |
| ES2716870T3 (en) | 2013-04-19 | 2019-06-17 | Gemvax & Kael Co Ltd | Composition for the treatment and prevention of ischemic injury |
| US10383926B2 (en) | 2013-06-07 | 2019-08-20 | Gemvax & Kael Co., Ltd. | Biological markers useful in cancer immunotherapy |
| ES2808076T3 (en) | 2013-06-21 | 2021-02-25 | Gemvax & Kael Co Ltd | Regulator of hormonal secretion, composition that contains it and procedure to control hormonal secretion through its use |
| EP3072519B1 (en) | 2013-11-22 | 2020-08-19 | Gemvax & Kael Co., Ltd. | Peptide having angiogenesis inhibitory activity and composition containing same |
| EP3085380B1 (en) | 2013-12-17 | 2020-06-17 | Gemvax & Kael Co., Ltd. | Composition for treating prostate cancer |
| US9937240B2 (en) | 2014-04-11 | 2018-04-10 | Gemvax & Kael Co., Ltd. | Peptide having fibrosis inhibitory activity and composition containing same |
| JP6466971B2 (en) | 2014-04-30 | 2019-02-06 | ジェムバックス アンド カエル カンパニー，リミティド | Organ, tissue or cell transplant composition, kit and transplant method |
| KR102413243B1 (en) | 2014-12-23 | 2022-06-27 | 주식회사 젬백스앤카엘 | Peptides for treating ophthalmopathy and the Composition Comprising the Same |
| KR102636129B1 (en) | 2015-02-27 | 2024-02-14 | 주식회사 젬백스앤카엘 | Peptides for protecting against hearing damage and compositions containing the same |
| KR102638286B1 (en) | 2015-07-02 | 2024-02-20 | 주식회사 젬백스앤카엘 | Peptides with antiviral activity and compositions containing the same |
| KR20180123512A (en) | 2016-04-07 | 2018-11-16 | 주식회사 젬백스앤카엘 | Peptides having increased telomerase activity and telomeric elongation potency and compositions comprising same |
| KR20240041258A (en) | 2022-09-22 | 2024-03-29 | (의) 삼성의료재단 | Pharmaceutical composition for destroying tumor blood vessels |
| KR20240041259A (en) | 2022-09-22 | 2024-03-29 | (의) 삼성의료재단 | Pharmaceutical composition for destroying tumor blood vessels |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20080071194A (en) * | 2005-12-23 | 2008-08-01 | 주식회사 포스코 | Anticancer agent comprising a peptide |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101222439B1 (en) * | 2010-04-30 | 2013-01-15 | 경북대학교 산학협력단 | A composition comprising dendritic cells for the treatment of renal cell carcinoma |
-
2011
- 2011-12-26 KR KR1020110142340A patent/KR101361445B1/en not_active IP Right Cessation
-
2012
- 2012-12-21 WO PCT/KR2012/011291 patent/WO2013100500A1/en active Application Filing
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20080071194A (en) * | 2005-12-23 | 2008-08-01 | 주식회사 포스코 | Anticancer agent comprising a peptide |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Clinical Cancer research. 2005. 11(6). pp.5993-6001. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20220062926A (en) | 2020-11-09 | 2022-05-17 | 충남대학교산학협력단 | Anticancer Adjuvant Composition for Treatment of Colon Cancer Comprising Bacillus sp. |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20130074325A (en) | 2013-07-04 |
| WO2013100500A1 (en) | 2013-07-04 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR101361445B1 (en) | Composition comprising peptide, 5-fluorouracil, and mature dendritic cells for cancer treatment | |
| KR102039520B1 (en) | GLA monotherapy for use in cancer treatment | |
| Tepper et al. | An eosinophil-dependent mechanism for the antitumor effect of interleukin-4 | |
| EP3590518B1 (en) | Polynucleotide toll-like receptor 9 agonists for treating cancer of the lung | |
| US20060034938A1 (en) | Combination preparation of a biological response modifier and an anticancer agent and uses thereof | |
| KR20190034210A (en) | Cancer immunoadjuvant | |
| KR20180105261A (en) | Antitumor combinations containing a vegf inhibiting agent and irinotecan | |
| KR101313404B1 (en) | Antitumor combinations containing a vegf inhibitor and 5fu or one of its derivative | |
| KR20020016844A (en) | Activation and protection of cytotoxic lymphocytes using a reactive oxygen metabolite inhibitor | |
| CA2914501C (en) | Compositions and methods for reducing or preventing metastasis | |
| Sarkar et al. | Protective effect of neoglycoprotein-conjugated muramyl dipeptide against Leishmania donovani infection: the role of cytokines. | |
| US20180147198A1 (en) | Combinations of pfkfb3 inhibitors and immune checkpoint inhibitors to treat cancer | |
| Pope et al. | 7-Allyl-8-oxoguanosine (loxoribine) inhibits the metastasis of B16 melanoma cells and has adjuvant activity in mice immunized with a B16 tumor vaccine | |
| US11839655B2 (en) | Combination cancer therapy | |
| WO2023114775A2 (en) | Dual cytokine fusion proteins comprising multi-subunit cytokines | |
| EP2205268B1 (en) | Interferon alpha sequential regimen for treating cancers | |
| Bergman et al. | Treatment of neoplastic meningeal xenografts by intraventricular administration of an antiganglioside monoclonal antibody, 3F8 | |
| WO2015194643A1 (en) | Pdgf-dependent cell-growth inhibitor, pdgf-dependent cell-growth inhibiting method, cell dispersion inhibitor, cell dispersion inhibiting method, temozolomide activity enhancer, and antitumor agent | |
| Ferdinandi et al. | Virulizin®-a review of its antineoplastic activity | |
| JPH09510737A (en) | Use of IL-4 to enhance chemotherapeutic agents | |
| Schwarz et al. | Interleukin 4 retards dissemination of a human B-cell lymphoma in severe combined immunodeficient mice | |
| CN116585315A (en) | Compositions for modulating PD-1 signaling | |
| EP3641799A1 (en) | Nk-92 cells and il-15 agonist combination therapy | |
| Parker et al. | [29] In vivo and in vitro antiproliferative effects of antisense interleukin 10 oligonucleotides | |
| Wu et al. | Anti‐tumor Effects of Interleukin‐4 and Interleukin‐5 against Mouse B Cell Lymphoma and Possible Mechanisms of Their Action |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant | ||
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20170102 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20180201 Year of fee payment: 5 |
|
| LAPS | Lapse due to unpaid annual fee |