KR101248378B1 - Pharmaceutical composition for arthritis treatment and prevention - Google Patents

Abstract

PURPOSE: A pharmaceutical composition containing a complex crude drug extract is provided to suppress synthesis of a substrate disruptor and to maximize a cartilage protection function. CONSTITUTION: A pharmaceutical composition for preventing and treating arthritis contains Caragana sinica, Gentianae macriphyllae Radix, Kalopanacis Cortex, Eucommia ulmoides, Ledebouriellae Radix, Clematidis Radix, Achyranthes japonica (Miq.) Nakai, and Acorus gramineus in a weight ratio of 1:0.5-3:0.05-1:0.5-3:0.5-2.5:0.5-3:0.5-3:0.5-3. [Reference numerals] (AA) Complex crude drug extract; (BB) Negative control group; (CC) Positive control group; (DD) Comparative example 1; (EE) Comparative example 2; (FF) Comparative example 3; (GG) Preparation example 1;

Description

관절염 치료 및 예방용 약학조성물{Pharmaceutical composition for Arthritis treatment and prevention}Pharmaceutical composition for Arthritis treatment and prevention

본 발명은 관절염 치료 및 예방용 약학조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a pharmaceutical composition for treating and preventing arthritis.

관절염은 세계인구의 5%가 앓고 있는 국내에서도 약 200만 명 이상의 환자가 고통을 겪고 있는 대표적인 퇴행성, 난치성 질환으로서 관절낭 내층의 활액막에 염증성 변화가 일어나 전신의 관절에서 부종과 통증이 유발되는 질환이다. 관절염은 진행성이고 관절의 변형 및 관절굽힘이 어려운 장애를 일으켜 치료되지 않을 경우 계속 악화되어 심각한 결과를 초래한다. 관절염은 크게 퇴행성 관절염(골관절염, Osteoarthritis)과 류마티스 관절염(Rheumatoid arthritis)으로 분류 된다.Arthritis is a representative degenerative and refractory disease that affects more than 2 million people in Korea, where 5% of the world's population suffers. It is a disease that causes swelling and pain in the joints of the whole body due to inflammatory changes in the synovial membrane of the inner capsule capsule. . Arthritis is a progressive and difficult joint deformity and articulation that causes severe discomfort if not treated. Arthritis is largely classified into degenerative arthritis (osteoarthritis) and rheumatoid arthritis.

상기 퇴행성 관절염은 중년 또는 노년에 주로 발생하고 무릎관절과 엉덩이 관절과 같이 체중을 많이 받는 관절에 통증, 강직감 및 운동 장애 등을 초래하는 질환이다. 원인으로는 단순이 나이가 들어서 발생하는 노화 현상으로 생각하였으나 현재는 여러 가지 원인이 있는 것으로 알려져 있다. 연령, 유전적 요소, 비만, 관절의 모양, 호르몬 등의 복합적인 원인으로 증상이 나타나는 것으로 생각되고 있다. 퇴행성관절염은 주로 관절연골(Cartilage)의 손상에 관여하는데 연골의 손상에 주로 관여하는 것으로 알려진 매트릭스 메탈로 프로테나제(Matrix Metalloproteinases, MMPs)가 작용하여 연골조직을 파괴하게 되며, 그 주위의 뼈에 퇴행성 변화를 일으킨다. 또한 염증성 사이토카인(Cytokine), 인터쿠킨-1(IL-1), 종양괴사인자-a(TNF-a) 등을 유도 시키게 되는데, 이로 인하여 근육, 인대 등과 같은 조직에도 영향을 미쳐 심한 통증을 일으킨다는 보고가 있다(Fernandes J.C. et. al., The role of cytokines in osteoarthritis pathophysiology, 39, pp237-46, 2002).The degenerative arthritis is a disease that occurs mainly in middle age or old age and causes pain, stiffness, and movement disorders in weight-bearing joints such as knee joints and hip joints. As a cause, I thought that aging is a aging phenomenon caused by age, but now it is known that there are many causes. Symptoms are thought to be caused by a combination of age, genetic factors, obesity, joint shape, and hormones. Degenerative arthritis is primarily involved in cartilage damage, and matrix metalloproteinases (MMPs), known to be involved in cartilage damage, destroy cartilage tissue. Causes degenerative changes. Induced inflammatory cytokines, interkukin-1 (IL-1), and tumor necrosis factor-a (TNF-a), which also affects tissues such as muscles and ligaments, causing severe pain. (Fernandes JC et. Al., The role of cytokines in osteoarthritis pathophysiology, 39, pp237-46, 2002).

또한 상기 류마티스성 관절염(Rheumatoid arthritis)은 여러 관절에 나타나는 염증성 자기면역 질환이다. 관절염에 걸린 환자의 경우 관절의 활막(Synovial membrane)조직의 증생(hyperplasia)되며 동시에 대식세포(macrophage), 수상세포(dendrtic cell) 및 활성화 된 T 림프구와 B 림프구가 활막조직으로 이동하고 다형액세포(polymorphonuclear cell)는 활액(synovial fluid) 내와 연골(cartilage) 표면에 축적되어 염증을 유발하게 된다. 이 같은 활막 조직의 염증은 알려지지 않은 자가 항원에 대해 반응성이 있는 T 림프구가 유발하는 것으로 생각되고 있다.In addition, the rheumatoid arthritis is an inflammatory autoimmune disease in various joints. In patients with arthritis, hyperplasia of the synovial membrane tissue of the joints occurs, while macrophages, dendritic cells, and activated T lymphocytes and B lymphocytes migrate to the synovial tissue and polymorphic cells Polymorphonuclear cells accumulate in synovial fluid and on cartilage surfaces, causing inflammation. Inflammation of the synovial tissue is thought to be caused by T lymphocytes reactive to unknown autoantigens.

그럼에도 불구하고 대부분의 조직에 침투된 T 림프구는 세포 표면에 활성화 표지를 나타내지 않으며 사이토카인(cytokine)을 거의 발현하지도 않는다. 이와 대조적으로 류마티스성 관절염 증상을 가지 활막조직과 혈액에는 대식세포(macrophage)에서 유래된 사이토카인 들이 매우 많이 관찰되고 있다. 이러한 사이토카인으로는 활막 섬유세포의 성장을 촉진하는 것으로 알려진 인터루킨-1(IL-1), 종양괴사인자-a(TNF-a) 등이 있다. 이러한 실험 결과들은 T 림프구가 활막조직의 염증을 유발하는데 매우 중요하며, 이후의 염증 증상은 활성화된 활막 세포들로부터 유래된 사이토카인에 의해 유지된다는 가설을 제시한다(carson D.A. et. al., J.Clin. Invest., 87, pp379-383, 1991,; panayi G.S., curr. opin. Rheumatol., 9, pp236-240, 1997).Nevertheless, T lymphocytes that infiltrate most tissues show no activation markers on the cell surface and rarely express cytokines. In contrast, macrophage-derived cytokines have been observed in synovial tissues and blood with rheumatoid arthritis symptoms. Such cytokines include interleukin-1 (IL-1) and tumor necrosis factor-a (TNF-a), which are known to promote the growth of synovial fibroblasts. These experimental results suggest that T lymphocytes are very important for inducing inflammation of synovial tissue and that subsequent inflammatory symptoms are maintained by cytokines derived from activated synovial cells (carson DA et. Al., J Clin.Invest., 87, pp 379-383, 1991 ,; panayi GS, curr.opin.Rheumatol., 9, pp236-240, 1997).

또한 활막조직의 증생은 관절염에 있어서 혈관이 없는 연골부에 발생하는 결합 조직층인 판누스(pannus)를 형성하여 질환 관절의 연골과 골조직을 비가역적으로 파괴하게 되는데 여기에는 연골조직 파괴 인자로 알려진 매트릭스 메탈로 프로테나제(MMPs) 등이 작용하여 연골조직이 파괴되게 된다.In addition, synovial hyperplasia can form irreversible destruction of cartilage and bone tissue of diseased joints by forming pannus, a layer of connective tissue that develops in cartilage without blood vessels in arthritis. Metalloproteinases (MMPs) and the like act to destroy cartilage tissue.

상기 퇴행성 관절염 및 류마티스성 관절염 등 모든 관절염의 이상적인 목표는 질환 관절의 연골과 골조직을 보호 유지시키는 것이다. 연골을 보호 유지시키는데 관여하는 사이토카인으로 알려진 IL-4(Interleukin-4)를 활성화 시키면 연골 보호에 효과가 있음이 보고된 바 있다(Kim S.H., J. Immunol., 166, pp3499-3055, 2001). The ideal goal of all arthritis, such as degenerative arthritis and rheumatoid arthritis, is to protect the cartilage and bone tissue of the diseased joint. It has been reported that activating IL-4 (Interleukin-4), a cytokine involved in maintaining cartilage, has an effect on cartilage protection (Kim SH, J. Immunol., 166, pp3499-3055, 2001). .

이 밖에도 연골조직 파괴 인자로 잘 알려진 MMPs가 있고, 이 효소의 저해제로 TIMP(tissue inhibitor of metalloproteinase)가 있다. MMP 중에서도 MMP-2는 평상시에 결합조직의 개조(remodeling)에 중요한 생리적 활성을 나타내지만, 관절염이 발생한 관절에 있어서는 심각한 조직 손상을 유도하므로, 이 MMP-2를 억제시킴과 동시에 이 효소의 저해제인 TIMP-2의 유도 활성을 갖는 약물을 개발한다면 관절염에 있어서 가장 중요한 증상 중의 하나인 연골파괴를 막을 수 있을 뿐만 아니라 이로 인한 환자의 심각한 고통도 예방할 수 있음이 보고된 바 있다(Mengshol J.A. et.al., Arthritis Rheum., 46, pp13-20, 2002). 아직까지 이와 같은 관절염 치료제는 개발되어 있지 않으며, 지금까지 사용된 약품들도 효과가 매우 제한적이어서 일단 관절염이 발생하면 환자에 심각한 고통을 가져오고 있다.In addition, MMPs are well known as cartilage destruction factors, and TIMP (tissue inhibitor of metalloproteinase) is an inhibitor of this enzyme. Among the MMPs, MMP-2 exhibits physiological activity that is important for normal remodeling of connective tissues, but induces severe tissue damage in arthritic joints. Therefore, MMP-2 is inhibited and an inhibitor of this enzyme. It has been reported that the development of drugs with inducible activity of TIMP-2 not only prevents cartilage destruction, which is one of the most important symptoms of arthritis, but also prevents severe pain of patients (Mengshol JA et.al). , Arthritis Rheum., 46, pp 13-20, 2002). No such arthritis treatments have been developed yet, and the drugs used so far have very limited effects, causing severe pain in patients once arthritis occurs.

따라서 관절염을 치료하기 위한 목적은 관절의 통증과 염증을 감소시키고, 관절의 변형을 방지할 뿐만 아니라 보다 근본적으로는 관절염을 유발하는 세포내 작용 메카니즘을 밝히고 그 기작을 제어하는데 있다.Therefore, the purpose of treating arthritis is to reduce the pain and inflammation of the joint, to prevent the deformation of the joint, and more fundamentally to identify and control the mechanism of intracellular action that causes arthritis.

한편, 지금까지 알려진 관절염 치료제로는 적당한 비스테로이드성 항염증 약물(NSAIDs), 금제제, 페니실라민(penicillamine), 스테로이드(steroid)성 호르몬제 등이 있다. 그러나 이러한 치료제는 장기간 복용시 부작용이 따르는 문제점이 있다. 이에 최근에는 염증 기전의 중심 역할을 하는 TNF(tumor necrosis factor)의 수용성 수용체를 유전자 재조합 기술로 생산하여 치료제로 개발하려는 노력이 있었으나, 염증, 부종, 비정상적인 신혈관 생성, 골 및 연골조직의 침식 등 예상치 못했던 부작용이 발생하는 문제점이 있다. 그러므로 생체내 적용시 비교적 부작용이 적으며 관절염의 증상을 완화시킬 수 있는 효과가 뛰어난 새로운 치료제의 개발이 시급한 실정이다.Meanwhile, known arthritis therapeutic agents include suitable nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs), contraindications, penicillamine, penicillamine, and steroid hormones. However, such a therapeutic agent has a problem in that side effects are taken for a long time. Recently, efforts have been made to produce a water-soluble receptor of TNF (tumor necrosis factor), which plays a central role in inflammatory mechanisms, as a therapeutic agent.However, inflammation, edema, abnormal neovascularization, erosion of bone and cartilage tissue, etc. Unexpected side effects occur. Therefore, there is an urgent need to develop a new therapeutic agent having relatively low side effects when applied in vivo and excellent in alleviating the symptoms of arthritis.

Fernandes J.C. et. al., The role of cytokines in osteoarthritis pathophysiology, 39, pp 237-46, 2002 Fernandes J.C. et. al., The role of cytokines in osteoarthritis pathophysiology, 39, pp 237-46, 2002 Mengshol J.A. et.al., Arthritis Rheum., 46, pp13-20, 2002 Mengshol J.A. et.al., Arthritis Rheum., 46, pp 13-20, 2002

이에 본 발명자는 상기 복합 생약재로부터 이들 각각의 생약들의 특성과 효능을 최대한 살리고 관절염에 대한 치료효과 특히 연골 보호 작용을 극대화시키기 위하여 한방의 원리에 근거한 거풍습, 강근골, 활혈 및 조직재생 촉진작용을 중심으로 100여종의 후보 생약을 선정하여 이를 바탕으로 관절염 치료에 대한 검정 실험을 거쳐 괄목한 만한 관절염 치료효과를 갖는 생약들의 배합을 찾아내어 본 발명을 완성하게 되었다.In order to maximize the therapeutic effect, especially cartilage protection effect against arthritis, the present inventors to maximize the characteristics and efficacy of each of these herbal medicines from the complex herbal medicines to promote the function of cheonghap, gangeun bones, blood circulation and tissue regeneration Based on the selection of about 100 candidate herbal medicines based on this, through the experimental experiments for the treatment of arthritis to find a combination of herbal drugs having a remarkable arthritis treatment effect was completed the present invention.

본 발명의 목적은 복합 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 관절염 치료 및 예방용 약학조성물을 제공하는 것이다.It is an object of the present invention to provide a pharmaceutical composition for the treatment and prevention of arthritis, containing a complex herbal extract as an active ingredient.

또한, 본 발명의 목적은 복합 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 관절염 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공하는 것이다.In addition, it is an object of the present invention to provide a health functional food for preventing and improving arthritis containing a complex herbal extract as an active ingredient.

본 발명은 상기 목적을 달성하기 위하여 염증성 물질의 유리와 기질파괴 물질의 합성을 억제하고, 연골 보호 작용을 극대화시킬 수 있는 복합 생약 추출물을 제공하고, 이를 유효성분으로 하는 관절염 치료 및 예방용 약학조성물을 제공한다.The present invention provides a composite herbal extract that can inhibit the synthesis of glass and substrate destruction of inflammatory substances to maximize the cartilage protection effect, to achieve the above object, and to treat and prevent arthritis as an active ingredient To provide.

또한, 본 발명은 상기 복합 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 관절염 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.In addition, the present invention provides a functional food for preventing and improving arthritis containing the complex herbal extract as an active ingredient.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 골담초, 진교, 해동피, 두충, 방풍, 위령선, 우슬, 및 석창포를 포함하는 복합 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 관절염 치료 및 예방용 약학조성물을 제공한다.The present invention provides a pharmaceutical composition for the treatment and prevention of arthritis, containing a complex herbal extracts including goldamcho, Jinkyo, Haedongpi, tongchung, windproof, gastric, hyssop, and Seokchangpo as an active ingredient.

본 발명의 골담초(Caragana Chambgu Lamarck)는 높이 1 내지 2 cm 되고 잎지는 떨기나무이다. 잎은 두 쌍의 타원형 쪽 잎으로 된 짝수 깃꼴겹잎인데, 긴 가지에 어긋나게 붙고 짧은 가지에서는 모여 난다. 잎 꼭지 밑에 가시가 있다. 잎이 붙은 가지를 사용하는데 잎과 가지에 플라보노이드, 껍질에 알칼로이드가 있다. 위장병, 근육통, 각기병 신경통에 효험 있는 약재로 처방되고 있다. Caragana Chambgu Lamarck of the present invention is 1 to 2 cm tall and leafy bush. The leaf is an even pinnip leaf consisting of two pairs of oval-shaped leaves, attached to long branches and gathered on short branches. There is a thorn under the leaf stem. Branches with leaves are used, with flavonoids on the leaves and branches and alkaloids on the bark. It is prescribed as an effective medicine for gastrointestinal diseases, myalgia, and neuralgia.

본 발명의 진교(Gentianae Macrophyllae Radix)는 큰잎용담(Gentiana macrophylla pall) 및 용담과의 뿌리를 말린 것이다. 줄기는 높이 2 m에 이르고 잎은 3 내지 5개로 갈라진 둥근 모양이다. 여름철에 푸른색을 띤 흰꽃이 핀다. 천초에 플라보노이드, 잎에 0.8%, 줄기에 0.69%, 꽃이 0.25%, 뿌리에 1.3 내지 1.7%의 알칼로이드가 있다. 동의 치료에서는 뿌리는 열내림, 류마티스, 관절염, 팔다리마비 혈변에 사용해 왔다고 알려져 있다(생약학, 동명사, pp165). Gentianae Macrophyllae Radix of the present invention is dried root of Gentiana macrophylla pall and gentian. The stem reaches 2 m in height and leaves are rounded in 3 to 5 branches. Blue flowers bloom in summer. At the beginning there are flavonoids, 0.8% in leaves, 0.69% in stems, 0.25% in flowers, and 1.3-1.7% alkaloids in roots. Roots are known to have been used for lowering fever, rheumatism, arthritis, and limb paralysis in the treatment of sinus (biopharmaceuticals, ming ming, pp165).

본 발명의 해동피(Kalopanacis cortex)는 음나무(kalopanax pictus nakai, 오갈피 나무과)의 줄기껍질이다. 바깥부분은 암갈색을 띠며 안쪽은 회향색으로 긴 가시가 많이 붙어 있다. 식물의 모든 부위에 사포니, 정류, 쿠마린이 있다. 플라보노이드는 꽃에서 뚜렷하고 줄기와 잎에서는 약간 반응이 있다. 동의 치료에서는 진통제와 염증반응을 억제하며 항관절염에 사용해 왔다고 알려져 있다(생약학, 동명사, pp549).The thawing skin (Kalopanacis cortex ) of the present invention is kalopanax pictus nakai , stems of the Ogalpi tree). The outer part is dark brown and the inside is fennel color with many long spines. All parts of the plant have saponies, rectifications and coumarins. Flavonoids are pronounced in flowers and slightly reactive in stems and leaves. It is known that copper therapy has been used for anti-arthritis by suppressing analgesics and inflammatory reactions (Biopharmaceuticals, Dongmyung, pp549).

본 발명의 두충(Eucommiae cortex)은 두충나무과의 수피로 중국에서 주로 생산되며 한국이나 일본에서도 재배된다. 잎이 지는 나무이며 식물전체에 고무질이 있어 껍질과 잎은 끓이면 명주실 같은 줄이 생긴다. 잎에는 클로르켄산(C₁₆H₁₈O₉) 카페산, 아우쿠빈(C₁₅H₂₂O₉) 고무질이 있다. 동의 치료에서는 혈압강화작용, 요통 및 무릎 관절에 쓰며 특히 콜라겐 합성을 촉진하는 효과가 있다고 알려져 있다(Li Y, et.al.,(2000) Biol. pharm. bull. 23;54~59). Eucommiae of the present invention Cortex ) is a bark of the family of the cedar , which is mainly produced in China, and is also cultivated in Korea and Japan. It is a leafy tree, and there is rubber throughout the plant, so when the bark and leaves boil, silk-like lines are formed. The leaves contain chloric acid (C ₁₆ H ₁₈ O ₉ ) caffeic acid, acuvin (C ₁₅ H ₂₂ O ₉ ) gum. In motion therapy, it is known to be used for blood pressure strengthening, low back pain and knee joint, and especially to promote collagen synthesis (Li Y, et. Al., (2000) Biol. Pharm. Bull. 23; 54 ~ 59).

본 발명의 방풍(Saposhnikoviae radix)은 원주상 이루고 길이 15 내지 20 cm, 지름 7 내지 15 mm이고, 아래쪽은 약간 가늘은 미나리과의 뿌리줄기이다. 뿌리에 정유와 0.23 내지 0.88%의 쿠마린이 있다. 예로부터 여러 가지 풍과 머리아픔, 뼈마디 아픔과 관절염 억제 효과가 있다고 알려져 있다(생약학, 동명사, pp137).Windproof of the present invention ( Saposhnikoviae radix ) is circumferential, 15-20 cm long, 7-15 mm in diameter, with a slightly thin rhizome on the lower part. At the root is essential oil and 0.23 to 0.88% coumarin. Since ancient times, it has been known to have various wind and head pain, bone node pain and arthritis inhibitory effects (biopharmaceutical, gyeongmyeongsa, pp137).

본 발명의 위령선(clematidis radix) 중국 원산의 길이 4m 정도 자라고 잎은 대생하며 2회 3출옆이거나 간혹 3개씩 달린다. 소엽은 난형 또는 난상 피침형이고, 길이 2 내지 5 cm로서 표면에는 털이 없으나 뒷면에는 잔털이 있고 가장자리에 톱니가 드문드문 있는 마나리 아재비과 및 동속 식물의 뿌리 및 뿌리줄기다. 뿌리에는 사포닌과 약 0.2% 플라보노이드가 있고 쿠에르찌틴과 캠메를 이 분리 되어 있다. 동의 치료에서는 풍한습이, 근육마비, 관절마비, 류마티스, 통풍성 관절염에 사용해 왔다고 알려져 있다(생약학, 동명사, pp173).Of the present invention wiryeongseon (clematidis radix ) It grows about 4m long and native to China, and leaves are viviparous and run 3 times or sometimes 3 times. Leaflets are ovate or ovate lanceolate, 2-5 cm long, without hairs on the surface but with fine hairs on the back and sparsely on the edges, and the roots and rhizomes of the same family. Root contains saponin and about 0.2% flavonoids, separated from querchitin and camme. In the treatment of motion, it is known that wind and humidity have been used for muscle paralysis, joint paralysis, rheumatism, and gouty arthritis.

본 발명의 우슬(Achyranthis radix)은 높이 약 90 cm 되는 여러해 살이 풀로 줄기는 네모가 났고 마디는 부풀어 마치 쇠무릎처럼 생겼으며 쇠무릎 또는 비름과의 뿌리이다. 뿌리에는 물분해하면 올레아놀산과 글루쿠론산으로 갈라지는 사포닌이 있다. 그리고 물에 녹는 알칼로이드인 아키라틴(C₆H₁₁O₂NH₂O)과 기타 알칼로이드와 회분 8%이고 그 가운데서 칼리움염은 24.5%이다. 동의 치료에서는 항염증작용, 관절통개선, 중풍, 각기 월경불순에 사용해 왔다고 알려져 있다(생약학, 동명사, pp166). Achyranthis radix of the present invention is a perennial herb of about 90 cm in height, the stems are square, and the nodes are swollen like a knee and are roots of iron knee or amaranth. The roots contain saponins that break down into oleanolic acid and glucuronic acid when hydrolyzed. Alkaloids, water-soluble akyratin (C ₆ H ₁₁ O ₂ NH ₂ O) and other alkaloids and ash, 8% of which is 24.5%. It is known that it has been used for anti-inflammatory action, joint pain improvement, stroke, and menstrual irregularities.

본 발명의 석창포(Acori graminei rhizoma)은 물가에서 자라는 여러해 살이 풀로 긴 칼모양 잎이 모여난 것으로 천남성과(araceae)의 뿌리줄기이다. 뿌리줄기에 0.5 내지 0.9%의 정유가 있고 정유의 63 내지 81%는 β-아사론이 있고 이밖에도 팔미틴산, 페놀성물질 미량 원소 등이 있다. 동의 치료에서는 건위, 진정, 항 진균 작용에 효과가 있다고 알려져 있다(생약학, 동명사, pp253). Acori graminei rhizoma of the present invention is a root stem of araceae, which is a long blade-shaped leaves gathered by perennial grasses grown in the water. There are 0.5 to 0.9% of essential oils in the rhizome, and 63 to 81% of essential oils have β-asarone. In addition, there are palmitic acid and phenolic trace elements. It is known that the treatment of motion is effective for health, sedation, and antifungal activity (Biopharmaceuticals, Dong Myung Co., pp253).

본 발명의 조성물은 유효성분으로 골담초, 진교, 해동피, 두충, 방풍, 위령선, 우슬, 및 석창포를 포함하는 복합 생약 추출물인 것을 특징으로 한다.The composition of the present invention is characterized in that the complex herbal extract containing goldamcho, jinkyo, Haedongpi, Tofu, Windproof, Maeseryeong, Woo Seol, and Seokchangpo as an active ingredient.

본 발명에서 ‘복합 생약 추출물’이란 생약재로부터 분리된 활성성분 즉, 목적하는 활성을 보이는 물질의 혼합물을 의미하며, 통상적으로 물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매를 이용하는 추출과정으로 제조되며, 물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매의 추출액, 이의 건조 분말 또는 이를 이용하여 제형화된 모든 형태를 포함한다.In the present invention, the 'composite herbal medicine extract' means an active ingredient separated from the herbal medicine, that is, a mixture of substances showing a desired activity, and is usually prepared by an extraction process using water, an organic solvent or a mixed solvent thereof, Extracts of organic solvents or mixed solvents thereof, dry powders thereof, or any form formulated using them.

또한, 상기 복합 생약 추출물에는 상기 추출과정을 거친 추출액을 분획한 것도 포함된다.In addition, the complex herbal extracts include those fractions obtained by the extraction process.

상기 복합 생약 추출물은 물, 알코올, 또는 이들의 혼합 용매를 추출용매로 사용하여 제조될 수 있으며, 바람직하게는 물과 알코올의 혼합 용액으로 추출할 수 있다.The complex herbal extract may be prepared using water, alcohol, or a mixed solvent thereof as an extractant, and preferably, may be extracted with a mixed solution of water and alcohol.

특히, 물과 탄소수 1 내지 4의 알코올의 혼합용매일 수 있으며, 더욱 특히는 3 내지 30%의 메탄올, 에탄올 등의 탄소수 1 내지 4의 알코올, 더욱 더 바람직하게는 5 내지 20%의 에탄올일 수 있다.In particular, the solvent may be a mixed solvent of water and an alcohol having 1 to 4 carbon atoms, more particularly, an alcohol having 1 to 4 carbon atoms such as methanol and ethanol of 3 to 30%, and still more preferably 5 to 20% ethanol. have.

본 발명의 복합 생약 추출물은 상기 각각의 생약재를 개별적으로 추출물로 제조한 후 혼합할 수도 있으며, 상기 생약재를 혼합하여 추출할 수도 있다.The composite herbal extract of the present invention may be prepared by separately extracting each herbal medicine as an extract, or may be extracted by mixing the herbal medicine.

본 발명의 복합 생약 추출물은 보다 상세하게 다음과 같이 제조할 수 있다.Complex herbal extract of the present invention can be prepared in more detail as follows.

상기 복합 생약 추출물은 골담초, 진교, 해동피, 두충, 방풍, 위령선, 우슬, 및 석창포의 복합 생약을 건조한 후, 상기 복합 생약들의 5 내지 20배 부피의 물, 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매를 가하여 80 내지 100℃의 추출온도에서 1시간 내지 24시간 동안 열수추출법으로 2 내지 5회 반복 추출하여 용매에 가용한 추출물을 수득하는 단계; 및The complex herbal extract is dried after the combined herbal medicine of goldamcho, Jinkyo, Haedongpi, Toe Chung, Windbreak, Ulleung, Woo Seol, and Seokchangpo, and then added water, lower alcohol or a mixed solvent of 5 to 20 times the volume of the combined herbs to 80 Extracting soluble in a solvent by repeatedly extracting 2 to 5 times by hot water extraction for 1 to 24 hours at an extraction temperature of 100 ° C .; And

상기 수득한 추출물을 여과한 후, 40 내지 80℃에서 감압 농축한 후 동결건조 또는 진공건조를 통하여 분말엑스를 제조하는 단계;를 포함하여 제조될 수 있다.After filtering the extract obtained, and then concentrated under reduced pressure at 40 to 80 ℃ to prepare a powder extract through lyophilization or vacuum drying; may be prepared.

또한 가용한 추출물은 이후, 헥산, 메틸렌클로라이드, 아세톤, 에틸아세테이트, 클로로포름 또는 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 용매로 분획과정을 더욱 실시할 수 있다. 상기 분획시 용매는 2종 이상 개별적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있으며, 용매의 극성에 따라 순차적으로 사용하여 각 용매의 추출물을 제조할 수 있다. 추출물 제조온도는 4 내지 120℃일 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다. 추출시간은 특별히 한정되지는 않으나 10분 내지 30일 일 수 있으며, 통상의 추출기기, 초음파분쇄 추출기 또는 분획기를 이용할 수 있다. 제조된 추출물은 이후 감압 여과 또는/및 동결건조하여 용매를 제거할 수 있다.In addition, the available extract can be further subjected to the fractionation process with a solvent selected from the group consisting of hexane, methylene chloride, acetone, ethyl acetate, chloroform or a mixture thereof. In the fractionation, two or more solvents may be used individually or in combination, and may be used sequentially according to the polarity of the solvent to prepare extracts of each solvent. Extract preparation temperature may be 4 to 120 ℃, but is not limited thereto. The extraction time is not particularly limited, but may be 10 minutes to 30 days, and a conventional extraction device, an ultrasonic grinding extractor, or a fractionator may be used. The prepared extract can then be filtered under reduced pressure or / and lyophilized to remove the solvent.

본 발명의 복합 생약 추출물은 상기 골담초, 진교, 해동피, 두충, 방풍, 위령선, 우슬, 및 석창포의 배합 중량비가 1 : 0.5 내지 3 : 0.05 내지 1 : 0.5 내지 3 : 0.5 내지 2.5 : 0.5 내지 3 : 0.5 내지 3 : 0.5 내지 3인 것을 특징으로 한다.The compound herbal extract of the present invention has a compounding weight ratio of 1, 0.5 to 3: 0.05 to 1: 0.5 to 3: 0.5 to 2.5: 0.5 to 3: 0.5 to 3: 0.5 to 3.

복합 생약 추출물은 상기 골담초, 진교, 해동피, 두충, 방풍, 위령선, 우슬, 및 석창포를 특정 배합 중량비를 사용하는 경우, 상기 생약재들의 일부 조합으로 처리한 경우에 비해, 종양괴사인자-알파(TNF-α)와 나이트릭옥사이드(nitric oxide, NO)와 같은 염증성 물질의 유리 억제 효과가 약 4 내지 5배 우수하며, 연골을 파괴하는 물질인 기질파괴물질, 메트릭스 메탈로프로티나아제-13의 합성을, 동일 온도로 처리하였을 경우, 현저하게 저해시킴으로서 목적하는 관절염의 예방 또는 치료에 효과적으로 사용될 수 있다. Complex herbal extracts, when used in certain combination weight ratios of the gallweed, jinkyo, Haedongpi, tonggi, windbreak, gastrointestinal, hyssop, and Seokchangpo, compared to when treated with some combinations of the herbal medicine, tumor necrosis factor-alpha (TNF- The inhibitory effect of inflammatory substances such as α) and nitric oxide (NO) is about 4 to 5 times better and the synthesis of matrix metalloproteinase-13, which is a substance that destroys cartilage, When treated at the same temperature, it can be effectively used for the prevention or treatment of the desired arthritis by significantly inhibiting.

상기 골담초, 진교, 해동피, 두충, 방풍, 위령선, 우슬, 및 석창포의 배합 중량비는 재료 투입량에 대비 경제성과 상기 생약재 내 목적하는 활성을 보이는 물질의 실질적인 관절염 치료효과에 중요한 의미를 가지는 또한. 각 추출물의 배합비를 적절히 한정함으로써 효율적이면서도 경제적인 장점이 있다. The compounding weight ratio of goldamcho, Jinkyo, Haedongpi, Toesok, Windbreak, Gasyeongseon, Wooslung, and Seokchangpo have important meanings on the effectiveness of treating the arthritis and the practical effect of the material showing the desired activity in the herbal medicine. There is an efficient and economical advantage by appropriately limiting the blending ratio of each extract.

특히, 골담초, 진교, 해동피, 두충, 방풍, 위령선, 우슬, 및 석창포의 배합 중량비가 1 : 1 내지 2 : 0.1 내지 0.5 : 1 내지 2 : 0.7 내지 1.5 : 1 내지 2 : 0.7 내지 1.5 : 0.7 내지 2의 범위인 경우 관절염 치료에 있어 현저한 상승효과를 나타내어 종전의 치료제을 대체하여 효과적인 관절염 치료제로서 사용될 수 있다.In particular, the compounding weight ratio of Goldamcho, Jinkyo, Haedongpi, Toesok, Windbreak, Gasyeongseon, Wooslung, and Seokchangpo is from 1: 1 to 2: 0.1 to 0.5: 1 to 2: 0.7 to 1.5: 1 to 2: 0.7 to 1.5: 0.7 to 0.7. In the range of 2, it shows a significant synergistic effect in the treatment of arthritis and can be used as an effective arthritis treatment in place of the previous treatment.

골담초, 진교, 해동피, 두충, 방풍, 위령선, 우슬, 및 석창포을 포함하는 추출물을 복합 조성으로 사용하는 경우, 관절염의 주 원인중 하나인 염증성 물질의 유리억제 능력과 연골을 파괴하는 기질파괴물질(MMP-13)의 합성을 효율적으로 억제시키고, 만성 관절염에 대해서도 관절염의 진행을 효과적으로 억제하는 것을 확인하였다. When extracts containing gallweed, orthodontic, thawing blood, worms, windbreaks, gastrointestinal tract, hyssop, and Seokchangpo are used in complex compositions, matrix inhibitors (MMPs) that inhibit free radicals and cartilage of inflammatory substances, one of the main causes of arthritis, -13) was effectively inhibited, and the progression of arthritis was also effectively suppressed for chronic arthritis.

이는 본 발명의 조성물이 관절염 치료로서 우수한 효과가 있음을 증명하는 것이다. This proves that the composition of the present invention has an excellent effect as a treatment for arthritis.

본 발명의 조성물은 유효성분이 전체 조성물의 0.001 내지 95 중량%, 바람직하게는 1 내지 80% 중량%로 사용될 수 있다. 그러나 상기와 같은 조성은 반드시 이에 한정되는 것은 아니고, 환자의 상태 및 질환의 종류 및 진행 정도에 따라 변할 수 있다.The composition of the present invention may be used in an active ingredient of 0.001 to 95% by weight, preferably 1 to 80% by weight of the total composition. However, the composition is not limited thereto, and may vary depending on the condition of the patient, the type of disease, and the progress of the disease.

따라서, 본 발명의 복합 생약 추출물은 염증성 물질인 종양괴사인자-알파와 나이트릭옥사이드, 그리고 기질파괴 물질인 메트릭스 메탈로 프로티에이즈-13의 합성을 억제하는데 우수한 활성을 나타내며, 관절염 동물에서 관절염의 병적 진행을 현저히 억제시키는 효능이 있으므로 관절염의 예방 또는 치료에 효과적으로 사용될 수 있다.Therefore, the complex herbal extract of the present invention shows excellent activity in inhibiting the synthesis of tumor necrosis factor-alpha and nitoxide and matrix metalloprotease-13, which are inflammatory substances, and inhibiting the synthesis of arthritis in arthritis animals. Since it has the effect of significantly inhibiting pathological progression, it can be effectively used for the prevention or treatment of arthritis.

상기 관절염은 급성 및 만성 류마티스; 위축성 관절염; 만성 염증성 관절염; 콜라겐 유도성 관절염; 변형성 관절염; 감염성 관절염; 폐경기 관절염; 단절성 관절염; 비대증 관절염; 화농성 관절염; 및 결핵성 관절염에 의한 관절염 및 퇴행성 골관절염 질환;으로부터 선택되는 하나 이상인 것으로, 바람직하게는 급성 류마티스, 만성 류마티스, 콜라겐 유도성 관절염 및 만성염증성 관절염일 수 있다. The arthritis includes acute and chronic rheumatism; Atrophic arthritis; Chronic inflammatory arthritis; Collagen-induced arthritis; Deformable arthritis; Infectious arthritis; Menopausal arthritis; Break arthritis; Hypertrophic arthritis; Purulent arthritis; And arthritis and degenerative osteoarthritis diseases caused by tuberculous arthritis; and preferably, may be acute rheumatoid, chronic rheumatism, collagen-induced arthritis and chronic inflammatory arthritis.

본 발명은 상기 기술한 골담초, 진교, 해동피, 두충, 방풍, 위령선, 우슬, 및 석창포를 포함하는 복합 생약 추출물은 병용하여 식품, 예를들면, 건강보조식품, 기능성 식품, 식품첨가제 등으로 제공될 수 있다. 상기 건강보조식품, 기능성 식품, 식품첨가제는 관절염의 치료 또는 예방용 작용을 가진다.The present invention is a combination herbal extract containing the above-mentioned goldamcho, Jinkyo, Haedongpi, Tohpi, windbreak, gastric, hyssop, and Seokchangpo in combination with foods, for example, health supplements, functional foods, food additives, etc. Can be. The health supplements, functional foods, food additives have an action for the treatment or prevention of arthritis.

본 명세서에서 사용된 용어 "예방"은 골담초, 진교, 해동피, 두충, 방풍, 위령선, 우슬, 및 석창포를 포함하는 복합 생약 추출물을 포함하는 조성물의 투여로 관절염의 발병을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미한다.As used herein, the term "prevention" refers to any action that inhibits or delays the development of arthritis by the administration of a composition comprising a complex herbal extract comprising boneweed, orthodontist, thawing blood, worms, windbreak, gastrointestinal tract, hyssop, and Seokchangpo. it means.

본 명세서에서 사용된 용어 "치료"란 골담초, 진교, 해동피, 두충, 방풍, 위령선, 우슬, 및 석창포를 포함하는 복합 생약 추출물을 포함하는 조성물의 투여로 관절염의 증세를 호전시키거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다.As used herein, the term "treatment" refers to any or all of which improves or beneficially alters the symptoms of arthritis by administration of a composition comprising a complex herbal extract comprising bonsai, necrosis, thawing blood, worms, windbreaks, gastrointestinal tract, hyssop, and Seokchangpo. It means an act.

본 발명에 따른 조성물을 포함하는 약학적 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. 본 발명의 일 구체예에 따른 약학적 조성물에 포함될 수 있는 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 및 희석제는 락토오스, 덱스트로오스, 글루코만난, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리트리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알기네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰오로스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 마그네슘 스테라에리트 및 광물유를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.Pharmaceutical compositions comprising the compositions according to the invention may further comprise suitable carriers, excipients and diluents commonly used in the manufacture of pharmaceutical compositions. Pharmaceutically acceptable carriers, excipients and diluents that may be included in the pharmaceutical composition according to one embodiment of the invention include lactose, dextrose, glucomannan, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia Rubber, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate And mineral oils.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 공지된 통상의 방법에 따라 정제, 캡슐, 과립제, 환제, 현탁액, 시럽 등의 다양한 제형으로 제형화되어 사용될 수 있다.The pharmaceutical composition according to the present invention can be formulated and used in various formulations such as tablets, capsules, granules, pills, suspensions, syrups and the like according to conventional methods known in the art.

본 발명의 골담초, 진교, 해동피, 두충, 방풍, 위령선, 우슬, 및 석창포를 포함하는 복합 생약 추출물을 포함하는 약학 조성물은 우수한 관절염 치료 또는 예방 효과를 제공할 뿐만 아니라, 약물에 의한 독성 및 부작용도 없어 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있다. 이에 따라, 골담초, 진교, 해동피, 두충, 방풍, 위령선, 우슬, 및 석창포를 포함하는 복합 생약 추출물은 식품의 주, 부원료 및 식품 첨가제로서 사용이 가능하다.The pharmaceutical composition comprising a complex herbal extract comprising boneweed, pendulum, thawing blood, worms, windbreaks, gastric glands, hyssop, and Seokchangpo of the present invention not only provides excellent arthritis treatment or preventive effect, but also toxicity and side effects by drugs. It can be used with confidence even during long-term use. Accordingly, the complex herbal extract including goldamcho, Jingyo, Haedongpi, Toe Chung, Windproof, Gasyeongseon, Woo Seol, and Seokchangpo can be used as a main, secondary ingredient and food additive of food.

따라서, 이러한 관점에서, 본 발명은 상기 기술한 골담초, 진교, 해동피, 두충, 방풍, 위령선, 우슬, 및 석창포를 포함하는 복합 생약 추출물은 병용하여 식품, 예를들면, 건강보조식품, 기능성 식품, 식품첨가제 등으로 제공될 수 있다. 상기 건강보조식품, 기능성 식품, 식품 첨가제는 관절염의 치료 또는 예방용 작용을 가진다.Therefore, in this respect, the present invention is a combination herbal extract containing the above-mentioned goldamcho, Jinkyo, Haedongpi, tofu, windproof, gastric, hyssop, and Seokchangpo in combination with food, for example, dietary supplement, functional food, It may be provided as a food additive. The dietary supplement, functional food, food additives have an action for the treatment or prevention of arthritis.

본 명세서에서 사용된 용어 "식품"이란 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 바람직하게는 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미하며, 통상적인 의미로서, 식품, 식품 첨가제, 기능성식품 및 음료를 모두 포함하는 의도이다.As used herein, the term "food" means a natural product or processed product containing one or more nutrients, and preferably means that it can be directly eaten through a certain processing process, By the meaning, it is intended to include all foods, food additives, functional foods and beverages.

본 명세서에서 사용된 용어 "기능성식품"이란 식품에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 식품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 식품군이나 식품 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 생체 조절 기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 식품을 의미하며, 특히 "건강기능식품"을 포함한다.As used herein, the term "functional food" refers to the regulation of biodefense rhythms of food groups or food compositions that have added value to the food by using physical, biochemical, or biotechnological techniques to act and express the function of the food for a specific purpose. , Means a food processed and designed to fully express the bioregulatory function related to disease prevention and recovery to the living body, and particularly includes "health functional food".

본 명세서에서 사용된 용어 "건강보조식품"이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 가공한 식품으로서, 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 건강보조의 목적으로 특정성분을 원료로 하거나 식품원료에 들어있는 성분을 추출, 농축, 정제, 혼합 등의 방법으로 제조, 가공한 식품을 말한다.As used herein, the term "health food" is a food manufactured and processed using raw materials or ingredients having a useful function for the human body, and is useful for health uses such as nutrient control or physiological action on the structure and function of the human body. Refers to foods that are manufactured and processed by extracting, concentrating, refining, or mixing certain ingredients as raw materials or ingredients contained in food raw materials for the purpose of health supplement to obtain effect.

특히 본 발명에서 기능성식품 또는 건강보조식품은 상기 식품을 섭취하기 전과 비교하여 관절염 증상을 개선하거나, 관절염의 진행 감소에 도움을 줄 수 있는 식품을 의미하며, 본원발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면, 대한의학협회 등에서 제시된 자료를 참조하여 관절염의 정확한 기준을 알고, 개선된 정도를 판단할 수 있을 것이다.In particular, the functional food or health supplement in the present invention means a food that can improve the symptoms of arthritis or help to reduce the progression of arthritis, compared to before ingesting the food, and the general knowledge in the art If you have a medical history, you can know the exact criteria of arthritis and judge the degree of improvement by referring to the data presented by the Korean Medical Association.

상기 기능성식품 및 건강보조식품에는 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 더욱 포함할 수 있으며, 기능성 식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.The functional foods and dietary supplements may further include food acceptable food additives, and may further include appropriate carriers, excipients and diluents commonly used in the manufacture of functional foods.

본 발명의 골담초, 진교, 해동피, 두충, 방풍, 위령선, 우슬, 및 석창포를 포함하는 복합 생약 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 기능성 식품 등이 있다. 추가로, 본 발명에서 식품에는 특수영양식품(예, 조제유류, 영,유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류(예, 라면류, 국수류 등), 건강보조식품, 조미식품(예, 간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류(예, 스넥류), 유가공품(예, 발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품(각종 김치류, 장아찌 등), 음료(예, 과실,채소류 음료, 두유류, 발효음료류 등), 천연조미료(예, 라면 스프 등)을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 상기 식품, 음료 또는 식품첨가제는 통상의 제조방법으로 제조될 수 있다.Examples of foods to which the complex herbal extracts including goldamcho, jinkyo, Haedongpi, tofu, windbreak, gastric, hyssop, and Seokchangpo of the present invention can be added include, for example, various foods, beverages, gums, teas, vitamin complexes, and functionalities. Food and the like. In addition, the food in the present invention includes special nutritional products (e.g., prepared oils, infants, baby food, etc.), processed meat products, fish products, tofu, jelly, noodles (e.g. ramen, noodles, etc.), health supplements, seasoned foods ( For example, soy sauce, miso, red pepper paste, mixed soy sauce, sauces, confectionery (eg snacks), dairy products (eg fermented milk, cheese, etc.), other processed foods, kimchi, pickles (various kimchi, pickles, etc.), beverages ( Examples include, but are not limited to, fruits, vegetable drinks, soy milk, fermented beverages, and the like, and natural seasonings (eg, ramen soup). The food, beverage or food additive may be prepared by a conventional production method.

본 발명에서 기능성 음료란 갈증을 해소하거나 맛을 즐기기 위하여 마시는 것의 총칭을 의미하며 기능성 음료를 포함하는 의도이다. 상기 음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 골담초, 진교, 해동피, 두충, 방풍, 위령선, 우슬, 및 석창포를 포함하는 복합 생약 추출물을 유효성분으로 포함하는 것 외에 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기의 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어 포도당, 과당 등 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 수크로스 등 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올이다. 상기한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖ 당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 5 내지 12 g이다. 그밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일 주스, 과일 쥬스 음료, 야채 음료의 제조를 위한 과육을 추가로 함유할 수 있다.Functional drink in the present invention is a generic term for drinking to quench thirst or to enjoy the taste and is intended to include a functional drink. The beverage is not particularly limited to other ingredients other than including the complex herbal extracts including gallweed, Jingon, Haedongpi, Tofu, Windproof, Gasyeongsen, Emulsion, and Seokchangpo as essential ingredients in the indicated ratios, and there is no special limitation. Various flavors or natural carbohydrates, etc. may be included as additional ingredients. Examples of such natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose, fructose and other disaccharides such as maltose, sucrose and the like and polysaccharides such as dextrin, cyclodextrin and the like, and Sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol. As flavoring agents other than those mentioned above, natural flavoring agents (tauumatin, stevia extract (for example, rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.) and synthetic flavoring agents (saccharin, aspartame, etc.) can be advantageously used. The proportion of said natural carbohydrates is generally about 1 to 20 g, preferably 5 to 12 g per 100 ml of the composition of the invention, else the composition of the invention is intended for the preparation of natural fruit juices, fruit juice drinks, vegetable drinks. It may further contain a pulp for.

본 발명의 조성물을 구성하는 각 추출물 자체는 자연식품으로서 독성 및 부작용이 거의 없으므로 예방 목적으로 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있다.Each extract constituting the composition of the present invention is a natural food with little toxicity and side effects, so can be used with confidence even for long-term use for the purpose of prevention.

본 발명에 따른 약학 조성물은 생약재 추출물 각각이 관절염의 주 원인 중 하나인 염증성 물질의 유리 억제 능력를 발휘할 수 있는 특정 비율로 혼합됨으로써 관절염의 치료에 있어 현저한 상승효과(synergy) 뿐 아니라 부작용이 또한 없어 종전의 치료제를 대체하여 효과적인 관절염 치료제로서 사용될 수 있는 장점이 있다.The pharmaceutical composition according to the present invention is mixed with each herbal extract in a specific ratio capable of exerting the free inhibitory ability of an inflammatory substance which is one of the main causes of arthritis, and thus there is no significant synergy as well as side effects in the treatment of arthritis. There is an advantage that can be used as an effective arthritis treatment by replacing the treatment of.

도 1은 본 발명의 복합 생약 추출물이 연골기질파괴 물질인 메트릭스 메탈로프로티에이즈-13(MMP-13) 합성 억제에 미치는 영향을 나타낸 도면이다.1 is a view showing the effect of the composite herbal extract of the present invention on the inhibition of the synthesis of matrix metalloproteinase-13 (MMP-13), which is a cartilage matrix destruction substance.

발명은 하기 실시예에 의하여 더욱 구체적으로 설명한다. 그러나, 하기 실시예는 본 발명의 이해를 돕기 위한 것일 뿐, 어떤 의미로든 본 발명의 범위가 이러한 실시예에 의하여 한정되는 것은 아니다.The invention will be described in more detail with reference to the following examples. However, the following examples are provided to aid understanding of the present invention, and the scope of the present invention is not limited by these examples in any sense.

이때, 사용되는 기술 용어 및 과학 용어에 있어서 다른 정의가 없다면, 이 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 통상적으로 이해하고 있는 의미를 가지며, 하기의 설명 및 첨부 도면에서 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있는 공지 기능 및 구성에 대한 설명은 생략한다.Hereinafter, the technical and scientific terms used herein will be understood by those skilled in the art without departing from the scope of the present invention. Descriptions of known functions and configurations that may be unnecessarily blurred are omitted.

[제조예 1][Production Example 1]

골담초, 진교, 해동피, 두충, 방풍, 위령선, 우슬, 석창포 재배산으로 시중의 건재상에서 구입하여 사용하였다. 각각의 약재를 깨끗이 세척한 후 그늘에서 건조하였다.Goldamcho, Jingyo, Haedongpi, Doochung, Windproof, Weeyeongseon, Wooslung, Seokchangpo were produced and used in commercial building. Each herb was washed thoroughly and dried in the shade.

골담초(25.2g), 진교(37.8g), 해동피(7.5g), 두충(42g), 방풍(28.5g), 위령선(36g), 우슬(27g), 석창포(30g)를 파쇄기로 잘게 부수어 준비하였다.Goldamcho (25.2g), Jingyo (37.8g), Haedongpi (7.5g), Tofu (42g), Windbreak (28.5g), Maeseryeongseon (36g), Wooseul (27g), Seokchangpo (30g) was prepared by crushing finely. .

상기 복합 생약재에 4 ℓ의 10% 에탄올 혼합용매를 가해 잘 교반한 다음 열을 가해 90내지 95℃를 유지하는 추출온도에서 3시간 동안 환류 추출한 후 여액을 검은 종이로 여과하였고, 같은 방법으로 2회에 걸쳐 여액을 모아 60℃에서 생약추출물을 감압농축한 후 동결 건조시켜 혼합 생약 조성물 분말 엑스(DH301-2) 27 g을 얻었다.
4 L of 10% ethanol mixed solvent was added to the composite herbal medicine, the mixture was stirred well, and heated to reflux for 3 hours at an extraction temperature of 90 to 95 ° C., and then the filtrate was filtered through black paper. The filtrate was collected over and concentrated under reduced pressure the herbal extract at 60 ℃ and then lyophilized to obtain 27 g of the mixed herbal composition powder extract (DH301-2).

[비교 제조예 1]Comparative Preparation Example 1

상기 제조예 1의 분쇄된 생약재에 4 ℓ의 증류수를 가하는 것을 제외하고는 동일한 방법으로 분말 액스를 제조하였다.
A powder ax was prepared in the same manner except adding 4 L of distilled water to the ground herbal medicine of Preparation Example 1.

[비교 제조예 2][Comparative Production Example 2]

상기 제조예 1의 분쇄된 생약재에 4 ℓ의 50% 에탄올 혼합용매를 가하는 것을 제외하고는 동일한 방법으로 분말 액스를 제조하였다.
Powder ax was prepared in the same manner except that 4 L of 50% ethanol mixed solvent was added to the pulverized herbal medicine of Preparation Example 1.

[실시예 1]Example 1

상기 제조예 및 비교 제조예 1 내지 2의 제조방법에 있어서, 추출방법에 따른 복합 생약재의 수득량을 조사하였다. 즉, 해당 용매에 따른 추출을 각각 3회씩 실시하여, 각 추출 횟수에 따른 수득량을 전체 수득량에 대한 백분율로 나타내었다.In the production methods of Preparation Examples and Comparative Preparation Examples 1 and 2, the yield of the composite herbal medicines according to the extraction method was investigated. That is, the extraction according to the solvent was performed three times each, and the yield according to the number of extraction was expressed as a percentage of the total yield.

상기 표 1에서도 확인할 수 있듯이, 상기 실시예 1의 알코올 혼합용매를 이용한 열수 추출법의 경우 비교예의 추출방법에 비해 2차 추출만으로도 거의 100%에 가까이 추출되는 것을 알 수 있었다.As can be seen in Table 1, the hot water extraction method using the alcohol mixed solvent of Example 1 was found to be extracted almost close to 100% only by the second extraction compared to the extraction method of the comparative example.

상기 결과는 추출방법에 대한 경제적인 문제 뿐 아니라 나아가 복합 생약재에 함유되어 있는 유효성분의 약리 효능에 있어서도 일정기간 치료시 그에 따른 효과 역시 차이가 있음을 확인한 결과이다.
The result is a result confirming that there is a difference in the pharmacological efficacy of the active ingredient contained in the complex herbal medicine as well as the economic problem of the extraction method, the effect according to the treatment for a certain period of time.

[[ 실험예Experimental Example 1] 복합 생약 추출물의 의한 종양괴사인자-a( 1] Tumor Necrosis Factor-a by Complex Herbal Extracts TNFTNF -a) 유리 억제 효능분석-a) free inhibition efficacy assay

상기 제조예 1의 복합 생약 추출물이 인체 단구성 세포주(human monocytic cell line)인 THP-1 세포에서 유리되는 사이토카인인 종양괴사인자-a(TNF-a)의 유리억제에 미치는 영향을 알아보기 위하여 하기와 같은 실험을 하였다.In order to investigate the effect of the composite herbal extract of Preparation Example 1 on the free inhibition of the tumor necrosis factor-a (TNF-a), a cytokine released from THP-1 cells, which are human monocytic cell lines The following experiment was carried out.

보다 상기 제조예 1의 복합 생약 추출물에 대한 탁월한 효능의 비교를 위하여, 상기 제조예 1의 추출방법과 동일하게 제조하되 복합 생약재의 구성의 조합을 다양하게 하여 실험에 이용하였다. In order to compare the excellent efficacy of the composite herbal extract of Preparation Example 1, it was prepared in the same manner as the extraction method of Preparation Example 1, but was used in the experiment by varying the combination of the composition of the composite herbal medicine.

즉, 비교예 1로 골담초, 두충, 진교, 위령선, 석창포를 배합 중량비가 1: 1.7 : 1.5 : 1.4 : 1.2 가 되도록 혼합하여 제조한 복합 생약 추출물을 제조하였다. That is, in Comparative Example 1, a composite herbal extract prepared by mixing goldamcho, Tobacco, Jinkyo, Garyeongseon, Seokchangpo so that the blending weight ratio is 1: 1.7: 1.5: 1.4: 1.2.

또한, 비교예 2로 골담초, 두충, 석창표, 방풍, 우슬, 골담초, 해동피를 배합 중량비가 1 : 1.7 : 1.2 : 1.1 : 1.0 이 되도록 혼합하여 제조한 복합 생약 추출물을 제조하였다.
In addition, as a comparative example 2, a composite herbal extract prepared by mixing gallweed, tofu, Seokpyo, windproof, dew, gallweed and thawed blood so that the blending weight ratio is 1: 1.7: 1.2: 1.1: 1.0.

또한, 비교예 3으로 골담초, 진교, 위령선, 방풍, 우슬을 배합 중량비가 1 : 1.5 : 1.4 : 1.1 : 1.0 이 되도록 혼합하여 제조한 복합 생약 추출물을 제조하였다.
In addition, in the Comparative Example 3, a composite herbal extract prepared by mixing goldamcho, Jinkyo, Gasyeongseon, windbreak, and dew with a blending weight ratio of 1: 1.5: 1.4: 1.1: 1.0.

(1) 세포의 선별 및 세포 배양(1) Cell selection and cell culture

상기 제조예 1의 복합 생약 추출물이 사람의 종양괴사인자-a(TNF-a) 유리에 미치는 영향을 평가하기 위하여, 사람에서 유래된 세포주인 THP-1세포(ATCC No.TIB-202)는 미국세포주 은행(ATCC, USA)에서 구입하였고, 10% FBS(fatal bovine serum)와 0.05 mM 2-메르캅토 에탄올(2-mercapto ethanol)를 첨가한 RPMI 1640(Gibco, BRL, USA)배지로 37℃, CO₂ 배양기에서 배양하여 실험에 사용하였다.
In order to evaluate the effect of the composite herbal extract of Preparation Example 1 on the release of human tumor necrosis factor-a (TNF-a), THP-1 cells (ATCC No.TIB-202), a human-derived cell line, Purchased from Cell Line Bank (ATCC, USA), 37 ° C. in RPMI 1640 (Gibco, BRL, USA) medium supplemented with 10% fat bovine serum (FBS) and 0.05 mM 2-mercapto ethanol. Cultures in a CO ₂ incubator were used for the experiment.

(2) 종양괴사인자-a(TNF-a)의 유리량 측정(2) Free amount measurement of tumor necrosis factor-a (TNF-a)

상기 실시예 1의 복합 생약 추출물이 종양괴사인자-a(TNF-a)유리에 미치는 영향을 알아보기 위하여, 상기 (1)1에서 기술한 방법으로 준비된 세포를 이용하여 종양괴사인자-a(TNF-a)의 유리량을 효소면역 측정법(ELISA)으로 측정하였다. 구체적으로, 96-웰플레이트(well plate)에 5×10⁵ 개/well로 세포를 분주하고, 지질다당질(lipopolysaccharide, LPS)을 첨가하여 종양괴사인자-a(TNF-a)가 유리되도록 세포를 활성화 시켰다.In order to determine the effect of the composite herbal extract of Example 1 on the tumor necrosis factor-a (TNF-a) glass, tumor necrosis factor-a (TNF) using the cells prepared by the method described in (1) 1 above The free amount of -a) was measured by enzyme immunoassay (ELISA). Specifically, the cells are dispensed at 5 × 10 ⁵ cells / well in a 96-well plate, and the cells are added to liberate tumor necrosis factor-a (TNF-a) by adding lipopolysaccharide (LPS). Activated.

LPS와 동시에 시험군에서 상기 제조예 1에서 제조한 복합 생약 추출물을 다양한 농도로 처리하여 24시간 동안 배양하였다.Simultaneous treatment with LPS and the complex herbal extract prepared in Preparation Example 1 in a variety of concentrations incubated for 24 hours.

24시간 후 세포배양액 안의 종양괴사인자-a(TNF-a)의 양을 효소면역측정법(ELISA)으로 측정하였다. 효소면역 측정시 흡광도는 Dynatech MR-7000(Dynatech Laboratorie 사) 기기를 이용하여 450 mm에서 측정하였으며, 종양괴사인자-a(TNF-a) 유리량은 대조군(LPS만 첨가한 군)에 대한 백분율로 계산하였다.After 24 hours, the amount of tumor necrosis factor-a (TNF-a) in the cell culture was measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Absorbance was measured at 450 mm using Dynatech MR-7000 (Dynatech Laboratorie) instrument. Tumor necrosis factor-a (TNF-a) release was calculated as a percentage of the control group (LPS only). It was.

상기 과정에 의한 혼합 생약재 추출물의 농도에 따른 종양괴사인자-알파(TNF-α)의 유리량 억제 효과를 하기 표 2에 나타내었다.Inhibitory effect of the tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) according to the concentration of the mixed herbal medicine extract by the above process is shown in Table 2 below.

상기 표 2에서도 확인할 수 있듯이, 상기 제조예 1의 복합 생약재 추출물을 첨가한 세포는 2 mg/㎖ 농도에서 대조군에 대하여 유리 TNF-α생성율이 8.7%로, 비교예에 비하여 4 내지 5배 이상의 종양괴사인자-알파(TNF-α) 유리 억제 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.
As can be seen in Table 2, the cells to which the composite herbal extract of Preparation Example 1 was added, the free TNF-α production rate of the control group at a concentration of 2 mg / ㎖ 8.7%, 4 to 5 times more tumor than the comparative example It was confirmed that the necrosis factor-alpha (TNF-α) glass inhibitory effect was exhibited.

[실험예 2] 복합 생약 추출물에 의한 나이트릭옥사이드(NO) 생성 억제 효능 분석Experimental Example 2 Analysis of Inhibitory Effect of Nitric Oxide (NO) Formation by a Complex Herbal Extract

상기 제조예 1의 복합 생약 추출물이이 마우스 대식세포 세포주(mouse macrophage call line)인 RAW 264.7 세포에서 생성되는 염증을 매개하는 물질인 나이트릭옥사이드(NO)생성 억제에 미치는 영향을 알아보기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.
In order to determine the effect of the composite herbal extract of Preparation Example 1 on the inhibition of nitric oxide (NO) production, which is a mediator of inflammation produced in RAW 264.7 cells, which is a mouse macrophage call line The experiment was performed.

(1) 세포의 선별 및 세포 배양(1) Cell selection and cell culture

상기 제조예 1의 복합 생약 추출물이이 나이트릭옥사이드 생성에 미치는 영향을 평가하기 위하여, 마우스에서 유래된 세포주인 RAW 264.7 세포(ATCC No. TIB-71)를 미국 세포주 은행(ATCC, USA)에서 구입하여 10% FBS(fetal bovine serum)를 첨가한 DMEM(Gibco, BRL, USA) 배지로 37℃, CO₂ 배양기에서 배양하여 실험에 사용하였다.
In order to evaluate the effect of the composite herbal extract of Preparation Example 1 on the production of nitric oxide, RAW 264.7 cells (ATCC No. TIB-71), a cell line derived from mouse, were purchased from the American Cell Line Bank (ATCC, USA). DMEM (Gibco, BRL, USA) medium to which 10% FBS (fetal bovine serum) was added was cultured in a 37 ℃, CO ₂ incubator used in the experiment.

(2) 나이트릭옥사이드(NO) 생성량 측정(2) Nitric oxide (NO) production amount measurement

상기 제조예 1의 복합 생약 추출물이 나이트릭옥사이드 생성에 미치는 영향을 평가하기 위하여 상기 (1)에서 기술한 방법으로 준비된 세포를 이용하여 나이트릭옥사이드 생성량을 측정하였다. 구체적으로, 96-웰플레이트(well plate)에 5×10⁵ 개/well로 세포를 활성화 시켰다. LPS와 동시에 시험군에는 상기 제조예 1의 복합 생약 추출물을 다양한 농도로 처리하여 12시간 동안 배양하였다. 12시간 후 세포 배양액 안의 나이트릭옥사이드 양을 그리스반응(Griess reaction)으로 측정하였다.In order to evaluate the effect of the composite herbal extract of Preparation Example 1 on the nitric oxide production, the amount of nitric oxide production was measured using the cells prepared by the method described in (1). Specifically, cells were activated at 5 × 10 ⁵ cells / well in a 96-well plate. Simultaneously with LPS, the test group was incubated for 12 hours by treating the compound herbal extract of Preparation Example 1 at various concentrations. After 12 hours, the amount of nitric oxide in the cell culture was measured by a Greries reaction.

상기 실험예 1에서와 같이, 상기 제조예 1의 복합 생약 추출물에 대한 탁월한 효능의 비교를 위하여, 상기 실험예 1에서 사용한 동일한 비교예 1 내지 3의 복합 생약 추출물을 실험에 이용하였다. As in Experimental Example 1, in order to compare the excellent efficacy of the complex herbal extract of Preparation Example 1, the same complex herbal extract of Comparative Examples 1 to 3 used in Experimental Example 1 was used in the experiment.

상기 과정에 의한 복합 생약 추출물의 농도에 따른 나이트릭옥사이드 생성량 억제 효과를 하기 표 3에 나타내었다.Inhibitory effect of the nitric oxide production according to the concentration of the composite herbal extract by the above process is shown in Table 3 below.

상기 표 3에도 확인할 수 있듯이, 상기 제조예 1의 복합 생약재 추출물을 첨가한 세포는 비교예 1 내지 3의 세포에 비해 나이트릭옥사이드 생성 억제 효과가 우수했으며, 특히 6㎎/㎖ 농도에서는 약 2 내지 5배 정도의 나이트릭옥사이드 생성 억제 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.
As can be seen in Table 3, the cells to which the extract of the complex herbal medicine of Preparation Example 1 was superior to the nitric oxide production inhibitory effect compared to the cells of Comparative Examples 1 to 3, in particular at about 6 mg / ㎖ concentration of about 2 to It was confirmed that the effect of inhibiting the production of nitric oxide about 5 times.

[실험예 3] 복합 생약 추출물에 메트릭스 메탈로 프로티나아제(MMP) 합성 억제 효능 실험Experimental Example 3 Inhibitory Effect of Matrix Metalloproteinase (MMP) Synthesis on Complex Herbal Extracts

상기 제조예 1의 복합 생약 추출물이 인체연골육종 세포주(human chondrosarcoma cell line)인 SW1353 세포에서 생성되는 기질파괴물질은 메트릭스 메탈로 프로티나아제-13(MMP-13)의 합성에 미치는 영향을 알아보기 위하여 다음 실험을 실시하였다.
To find out the effect of the composite herbal extract of Preparation Example 1 on the synthesis of matrix metallo proteinase-13 (MMP-13) as a matrix depleting substance produced in SW1353 cells that are human chondrosarcoma cell line In order to perform the following experiment.

(1) MMP-13 합성량 측정(1) MMP-13 synthesis amount measurement

상기 제조예 1의 복합 생약 추출물이 MMP-13 합성에 미치는 영향을 평가하기 위하여, 사람에서 유래된 세포주인 SW1353 세포(ATCC No. HTB-94)를 미국 세포주 은행(ATCC. USA)에서 구입하여 10% FBS(fetal bovine serum)를 첨가한 DMEM(Gibco, BRL, USA)배지로 37℃, CO₂ 배양기에서 배양하여 실험에 사용하였다.
In order to evaluate the effect of the composite herbal extract of Preparation Example 1 on the synthesis of MMP-13, SW1353 cells (ATCC No. HTB-94), which is a human-derived cell line, were purchased from the American Cell Line Bank (ATCC. USA). DMEM (Gibco, BRL, USA) medium with% FBS (fetal bovine serum) was incubated in 37 ℃, CO ₂ incubator used in the experiment.

(2) MMP-13 합성량 측정(2) MMP-13 synthesis amount measurement

상기 제조예 1의 복합 생약 추출물이 MMP-13 합성에 미치는 영향을 알아보기 위하여, 상기의 (1)에서 기술한 방법으로 준비된 세포를 이용하여 MMP-13 발현을 측정하였다. 구체적으로 96-웰플레이트(well plate)에 5×10⁵ 개/well 로 세포를 분주하고, 24시간 후에 PBS 완충용액(NaCl 8 g, K치 0.2 g, Na₂HPO₄ 1.44 g, KH₂PO₄ 0.24 g/1 L 증류수, pH 7.4)으로 세척한 후 FBS가 없는 DMEM 배지에서 24시간 동안 다시 배양 하였다. 시험군에 상기 상기 제조예 1의 복합 생약 추출물을 1시간 동안 처리한 다음, 대조군과 시험군에 종양괴사인자-a(TNF-a)를 처리하였다. 24시간 후 세포 배양액 안의 MMP-13의 양을 웨스턴 블로팅 방법을 이용하여 측정하였다. In order to determine the effect of the composite herbal extract of Preparation Example 1 on MMP-13 synthesis, MMP-13 expression was measured using cells prepared by the method described in (1) above. Specifically, cells were dispensed at 5 × 10 ⁵ cells / well in a 96-well plate, and after 24 hours, PBS buffer (NaCl 8 g, K value 0.2 g, Na ₂ HPO ₄ 1.44 g, KH ₂ PO). ₄ 0.24 g / 1 L distilled water, pH 7.4) and then incubated for 24 hours in DMEM medium without FBS. After treating the complex herbal extract of Preparation Example 1 in the test group for 1 hour, the control group and the test group were treated with tumor necrosis factor-a (TNF-a). After 24 hours, the amount of MMP-13 in the cell culture was measured using Western blotting.

즉, 세포 배양액을 SDS-폴리아마이드젤에 적용시켜 전기영동한 후 반건조 블러터(Trans-BLOT SD system, Biorad)를 사용하여 막으로 이동시켰다. 막을 TBS-T(10 mM Tris-buffered Saline, 0% Tween-20, pH7.2)로 1회 세척 후, 차단액(3% 탈지 우유)으로 1시간 동안 방치하였다. 1시간 후 TBS-T로 2회 세척후 사람 MMP-13에 대한 단일항체(chemicon 사)를 1:3000-5000 으로 희석하여 2시간 동안 반응시켰다. 반응 후 TBS-T로 3회 세척하고, HRP가 결합된 염소 항-마우스 IgG(Horseradish peroxidase conjugated goat anti-mouse IgG, promega 사)를 희석하여 1시간 동안 반응시켰다. 1시간 후 다시 막을 3 내지 4회 세척 후, ECL(Enhanced chemiluminesence) 웨스턴 블럿 분석시스템(Amersham 사)을 이용하여 확인하였다.That is, the cell culture was applied to SDS-polyamide gel and electrophoresed, and then transferred to the membrane using a semi-dry blister (Trans-BLOT SD system, Biorad). Membranes were washed once with TBS-T (10 mM Tris-buffered Saline, 0% Tween-20, pH7.2) and left for 1 hour with blocking solution (3% skim milk). After 1 hour, washed twice with TBS-T, and then a single antibody (chemicon) for human MMP-13 was diluted 1: 3000-5000 and reacted for 2 hours. After the reaction, washed three times with TBS-T, HRP-bound goat anti-mouse IgG (Horseradish peroxidase conjugated goat anti-mouse IgG, promega) was diluted and reacted for 1 hour. After 1 hour, the membrane was washed again 3-4 times, and then confirmed using an enhanced chemiluminesence (ECL) western blot analysis system (Amersham).

상기 실험예 1에서와 같이, 상기 제조예 1의 복합 생약 추출물에 대한 탁월한 효능의 비교를 위하여, 상기 실험예 1에서 사용한 동일한 비교예 1 내지 3의 복합 생약 추출물을 실험에 이용하였다. 상기 제조예 1의 복합 생약 추출물이의 MMP-13 발현에 미치는 영향의 실험결과를 도 1에 나타내었다.As in Experimental Example 1, in order to compare the excellent efficacy of the complex herbal extract of Preparation Example 1, the same complex herbal extract of Comparative Examples 1 to 3 used in Experimental Example 1 was used in the experiment. Experimental results of the effect of the composite herbal extract of Preparation Example 1 on the expression of MMP-13 is shown in FIG.

도 1에서도 확인할 수 있듯이, 비교예 1 내지 3의 복합 생약 추출물과 상기 제조예 1의 복합 생약 추출물을 동일 농도(6 ㎎/㎖)로 처리 한 경우, 상기 제조예 1의 복합 생약 추출물을 처리했을 때 비교예 1 내지 3의 복합 생약 추출물을 처리했을 때보다 밴드의 강도가 현저히 줄어들어 것들 확인할 수 있었고, 상기의 결과로부터 상기 제조예 1의 복합 생약 추출물이 MMP-13 합성 억제 효과가 우수함을 확인할 수 있었다.
As can be seen in Figure 1, when the composite herbal extract of Comparative Examples 1 to 3 and the composite herbal extract of Preparation Example 1 were treated at the same concentration (6 mg / ㎖), the composite herbal extract of Preparation Example 1 When the composite herbal extracts of Comparative Examples 1 to 3 when compared to the strength of the band was significantly reduced can be confirmed, from the results of the composite herbal extract of Preparation Example 1 was confirmed that the MMP-13 synthesis inhibitory effect is excellent. there was.

[실험예 4] 제조예 1의 복합 생약 추출물의 독성 시험Experimental Example 4 Toxicity Test of Complex Herbal Extract of Preparation Example 1

본 발명에 사용된 생약재들은 식품원료로 분류되어 있어 제조예 1의 복합 생약 추출물의 안정성에는 문제가 없을 것으로 판단되나, 본 발명자들은 이를 경구 투여하여 안정성을 확인하고자 아래와 같은 방법으로 독성 실험을 하였다.The herbal medicines used in the present invention are classified as food ingredients, so it is determined that there is no problem in the stability of the composite herbal extract of Preparation Example 1, but the present inventors conducted toxicity tests in the following manner to check the stability by oral administration thereof.

실험동물로 6주령의 특정병원부재(SPF)마우스를 사용하여 독성실험을 하였다. 군당 10마리 동물에 제조예 1의 복합 생약 추출물을 0.9% Nacl에 녹여 17시간동안 절식시킨 마우스에 2 g/kg, 5 g/kg의 용량으로 단회 경우 투여하였다. 시험물질 투여 후 동물의 폐사여부, 임상증상, 체중변화를 관찰하고 혈액검사와 혈액 생화학적 검사를 실시하였으며, 부검하여 육안으로 복강장기와 흉강장기의 이상여부를 관찰하였다.Toxicity experiments were carried out using SPF mice, 6 weeks old, as experimental animals. In 10 animals per group, the compound herbal extract of Preparation Example 1 was dissolved in 0.9% Nacl and fastened for 17 hours to mice fed at a dose of 2 g / kg and 5 g / kg. After administration of the test substance, mortality, clinical symptoms, and changes in body weight were observed. Blood tests and blood biochemical tests were performed. The necropsy was performed to visually observe the abdominal and thoracic organ abnormalities.

시험결과 제조예 1의 복합 생약 추출물은 투여한 모든 동물에서 특이할만한 임상증상이나 폐사된 동물은 없었으며 혈액검사, 혈액 생화학 검사, 부검소견에서 독성변화는 관찰되지 않았다. As a result of the test, the herbal extract of Preparation Example 1 had no specific clinical symptoms or dead animals in all the administered animals, and no toxicity change was observed in blood test, blood biochemical test, and autopsy findings.

이상의 결과 본 발명의 제조예 1의 복합 생약 추출물은 마우스에서 5g/kg 까지 독성변화를 나타내지 않으며, 경구투여 최소 치사량(LD₅₀)은 5 g/kg 이상인 안전한 물질임을 확인할 수 있었다.
As a result, the composite herbal extract of Preparation Example 1 of the present invention did not show a toxic change to 5g / kg in the mouse, and the minimum lethal dose (LD ₅₀ ) was confirmed to be a safe substance of 5 g / kg or more.

[실험예 5] 복합 생약 추출물의 제2형 콜라겐 유도 관절염 실험동물에서 관절염 진행 억제 효과 분석Experimental Example 5 Effect of Complex Herbal Extracts on the Arthritis Progression Inhibitory Effect in Type 2 Collagen-Induced Arthritis

본 발명의 상기 제조예 1의 복합 생약 추출물이 관절염의 진행을 억제할 수 있는지를 확인하기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.
In order to determine whether the composite herbal extract of Preparation Example 1 of the present invention can inhibit the progression of arthritis, the following experiment was performed.

(1) 콜라겐-유도 관절염 마우스 모델의 제조(1) Preparation of Collagen-Induced Arthritis Mouse Model

제2형 콜라겐 유도 관절염 실험동물을 만들기 위하여 5~6주령의 수컷 DBA/1 마우스를 일본의 SCI사로 부터 구입하였으며 마우스를 온도 21℃, 습도 40%의 조건하에서 사육하였다. 소의 제2형 콜라겐(일본, 콘드렉스 사)을 0.05% 초산에 2 mg/㎖의 농도로 용해한 후, 소의 제2형 콜라겐을 같은 양의 완전 면역반응 항진제(complete adjuvant, 일본, 콘드렉스 사)와 섞었다. 얼음으로 냉각하면서 3 ㎖ 주사기에 연결된 T-연결기를 이용하여 윤질한 현탁액을 만들었다. 현탁액이 잘 만들어 졌는지를 확인한 후, 마우스의 꼬리부위에 피하 내에 콜라겐 현탁액 100 ㎕를 주사하였다(courtenay J.S., et.al., Nature, 283, pp666-668, 1980).
In order to make type 2 collagen-induced arthritis experimental animals, male DBA / 1 mice, 5-6 weeks old, were purchased from SCI Co., Ltd. in Japan, and mice were bred under conditions of 21 ° C. and 40% humidity. After dissolving bovine type 2 collagen (Kondrex, Japan) at a concentration of 2 mg / ml in 0.05% acetic acid, bovine type 2 collagen was dissolved in the same amount of complete adjuvant (Kondrex, Japan, Japan). Mixed with. A cool suspension was made using a T-connector connected to a 3 ml syringe while cooling on ice. After confirming that the suspension was well formed, 100 µl of the collagen suspension was injected subcutaneously into the tail of the mouse (courtenay JS, et.al., Nature, 283, pp666-668, 1980).

(2) 복합 생약 추출물의 경구 투여(2) Oral administration of the complex herbal extract

상기 제조예 1에서 제조한 복합 생약 추출물을 물에 녹여서 0.25 uM 필터를 이용하여 여과하여 제조하였다. 제조한 복합 생약 추출물을 276 mg/kg/day 로 매일 1회씩, 3주 동안 1 ㎖주사기에 존대를 연결하여 마우스의 입으로 직접 투여하였다.The composite herbal extract prepared in Preparation Example 1 was dissolved in water and prepared by filtration using a 0.25 uM filter. The prepared herbal extracts were administered once daily at 276 mg / kg / day and connected directly to the mouth of the mouse by connecting the maximus to a 1 ml syringe for 3 weeks.

상기 제조예 1의 복합 생약 추출물에 대한 탁월한 효능의 비교를 위하여, 양성 대조군으로 관절염 치료제인 페니실라민(penicillamine)을 투여하였다.
In order to compare the excellent efficacy of the complex herbal extract of Preparation Example 1, penicillamine (penicillamine), which is a therapeutic agent for arthritis, was administered as a positive control.

(3) 관절염의 (3) arthritis 진행여부Progress 관찰 observe

콜라겐 현탁액을 주사한 마우스의 관절염의 발명은 주사일로부터 30일 경부터 발생하는 것으로 알려져 있다. 관절염 병변의 육안적 관찰은 위의 참고 문헌에 근거하여 다음과 같은 스코어를 사용하여 실시하였다.The invention of arthritis in mice injected with collagen suspensions is known to occur 30 days from the day of injection. Visual observation of arthritis lesions was performed using the following scores based on the above references.

0 : 종창 및 발작이 없음, 1 : 관절의 경미한 발적 및 종창, 2 : 관절부 발적 및 종창이 뚜렷함, 3 : 지관절을 포함하여 발정, 종창의 정도가 심함, 4 : 관절의 전 부위에 종창이 극심함.0: No swelling and seizures, 1: slight redness and swelling of the joint, 2: clear redness and swelling of the joint, 3: estrus, including the limb joint, severe swelling, 4: swelling in all areas of the joint This is extreme.

따라서 관절 병변의 최고 스코어는 마우스 한 마리당 좌우의 전, 후지를 합하여 16이며, 다리 하나당 스코어는 4가 최고스코어 이다(Courtenay J. S., Dallman M. J., Dayan AD, et al. : Immunisation against heterologousTherefore, the highest score of joint lesion is 16, including the left and right front and back per mouse, and the highest score per leg is 4 (Courtenay J. S., Dallman M. J., Dayan AD, et al .: Immunisation against heterologous

type II collagen induces arthritis in mice. Nature 283:666-668. 1980).
type II collagen induces arthritis in mice. Nature 283: 666-668. 1980).

(4) 복합 생약 추출물 투여 후, 제2형 콜라겐 유도 관절염 실험동물에서 관절염 진행억제효과 관찰(4) Observation of Arthritis Progression Inhibitory Effect in Type 2 Collagen-Induced Arthritis Experiment Animals

상기 (2)에서 제조한 복합 생약 추출물을 제2형 콜라겐 유도 관절염 실험동물에 경구투여한 후 관절염의 진행을 억제하는 치료효과를 하기 표 4에 나타내었다.The therapeutic effect of inhibiting the progression of arthritis after oral administration of the composite herbal extract prepared in (2) to a type 2 collagen-induced arthritis experimental animal is shown in Table 4 below.

그 결과 상기 표 4에서도 확인할 수 있듯이, 본 발명의 상기 제조예 1의 복합 생약 추출물을 투여한 경우, 지금까지 알려진 관절염 치료제 보다 관절염의 병적 진행을 억제하는 효능이 우수함을 확인하였다.
As a result, as can be seen in Table 4, when the composite herbal extract of Preparation Example 1 of the present invention was administered, it was confirmed that the efficacy of inhibiting the pathological progression of arthritis than the known arthritis treatment agent so far.

[제제예 1] 정제의 제조Preparation Example 1 Preparation of Tablet

상기 제조예 1의 복합 생약 추출물 200 mg200 mg complex herbal extract of Preparation Example 1

유당 100 mgLactose 100 mg

전분 100 mgStarch 100 mg

스테아린산마그네슘 적량Magnesium stearate appropriate amount

통상의 정제 제조방법에 따라 상기의 혼합성분을 혼합하고 타정하며 정제를 제조한다.
According to the conventional tablet manufacturing method, the above-mentioned mixed ingredients are mixed, tableted and tablets are prepared.

[제제예 2] 캡슐제의 제조Preparation Example 2 Preparation of Capsule

상기 제조예 1의 복합 생약 추출물 100 mg100 mg of the composite herbal extract of Preparation Example 1

유당 50 mgLactose 50 mg

전분 50 mgStarch 50 mg

탈크 2 mgTalc 2 mg

스테아린산마그네슘 적량Magnesium stearate appropriate amount

통상의 캡슐제 제조 방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
According to a conventional capsule preparation method, the above ingredients are mixed and filled into gelatin capsules to prepare capsules.

[제제예 3] 액제의 제조Preparation Example 3 Preparation of Liquid

상기 제조예 1의 복합 생약 추출물 1000 mg1000 mg complex herbal extract of Preparation Example 1

설탕 20 g20 g of sugar

이성화당 20 g20 g of isomerized sugar

레몬향 적량Lemon flavor

정제수를 가하여 전체 1000 ㎖로 맞추었다. 통상의 액제의 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음 갈색 병에 충전하고 멸균시켜 액제를 제조한다.
Purified water was added to adjust the total volume to 1000 ml. According to a conventional method for preparing a liquid, the above components are mixed, and then filled into a brown bottle and sterilized to prepare a liquid.

[[ 제제예Formulation example 4]  4] 건강음료의Health drink 제조 Produce

상기 제조예 1의 복합 생약 추출물 1000 mg1000 mg complex herbal extract of Preparation Example 1

액상과당 2 g2 g liquid fructose

올리고당 100 g100 g oligosaccharides

설탕 2 g2 g of sugar

식염 1 g1 g of salt

물 900 ㎖900 ml of water

통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 87℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 ㎖용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.After mixing the above components according to the conventional healthy beverage production method, and then stirred and heated at 87 ℃ for about 1 hour, the resulting solution is filtered and obtained in a sterilized 2 ml container, sealed sterilized and stored in the refrigerator and then Used to prepare the healthy beverage composition of the invention.

Claims (8)

골담초, 진교, 해동피, 두충, 방풍, 위령선, 우슬, 및 석창포를 포함하는 복합 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 관절염 치료 및 예방용 약학조성물.A pharmaceutical composition for the treatment and prevention of arthritis, which contains a complex herbal extract including goldamcho, jinkyo, Haedongpi, tofu, windbreak, gastrointestinal tract, hyssop, and Seokchangpo as an active ingredient. 제 1항에 있어서,
상기 복합 생약 추출물은 골담초, 진교, 해동피, 두충, 방풍, 위령선, 우슬, 및 석창포의 배합 중량비가 1 : 0.5 내지 3 : 0.05 내지 1 : 0.5 내지 3 : 0.5 내지 2.5 : 0.5 내지 3 : 0.5 내지 3 : 0.5 내지 3인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.The method of claim 1,
The complex herbal extract is a compounding weight ratio of goldamcho, jinkyo, Haedongpi, Tokchung, windbreak, gastric, hyssop, and Seokchangpo of 1: 0.5 to 3: 0.05 to 1: 0.5 to 3: 0.5 to 2.5: 0.5 to 3: 0.5 to 3 : Pharmaceutical composition, characterized in that 0.5 to 3. 제 2항에 있어서,
상기 복합 생약 추출물은 골담초, 진교, 해동피, 두충, 방풍, 위령선, 우슬, 및 석창포의 복합 생약재를 건조한 후, 상기 복합 생약들의 5 내지 20배 부피의 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매를 가하여 80 내지 100℃의 추출온도에서 1시간 내지 24시간 동안 열수추출법으로 2 내지 5회 반복 추출하여 용매에 가용한 추출물을 수득하는 단계; 및
상기 수득한 추출물을 여과한 후, 40 내지 80℃에서 감압 농축한 후 동결건조 또는 진공건조를 통하여 분말엑스를 제조하는 단계;를 포함하여 제조되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.The method of claim 2,
The composite herbal extract is dried after the combined herbal medicine of goldamcho, jinkyo, Haedongpi, Toechung, Windbreak, Gasyeongseon, Woo Seol, and Seokchangpo, water of 5 to 20 times the volume of the combined herbs, lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms or their Adding a mixed solvent and repeatedly extracting 2 to 5 times by hot water extraction for 1 to 24 hours at an extraction temperature of 80 to 100 ° C. to obtain an extract soluble in a solvent; And
After filtering the extract obtained, and then concentrated under reduced pressure at 40 to 80 ℃ to prepare a powder extract through lyophilization or vacuum drying; pharmaceutical composition comprising a. 제 1항에 있어서,
상기 유효성분은 전체 조성물의 0.001 내지 95 중량%인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.The method of claim 1,
The active ingredient is a pharmaceutical composition, characterized in that 0.001 to 95% by weight of the total composition. 제 1항에 있어서,
상기 관절염은 급성 및 만성 류마티스; 위축성 관절염; 만성 염증성 관절염; 콜라겐 유도성 관절염; 변형성 관절염; 감염성 관절염; 폐경기 관절염; 단절성 관절염; 비대증 관절염; 화농성 관절염; 및 결핵성 관절염에 의한 관절염 및 퇴행성 골관절염 질환;으로부터 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.The method of claim 1,
The arthritis includes acute and chronic rheumatism; Atrophic arthritis; Chronic inflammatory arthritis; Collagen-induced arthritis; Deformable arthritis; Infectious arthritis; Menopausal arthritis; Break arthritis; Hypertrophic arthritis; Purulent arthritis; And arthritis and degenerative osteoarthritis diseases caused by tuberculous arthritis. 제 5항에 있어서,
상기 관절염은 급성 류마티스, 만성 류마티스, 콜라겐 유도성 관절염 및 만성염증성 관절염으로부터 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.6. The method of claim 5,
The arthritis is a pharmaceutical composition, characterized in that at least one selected from acute rheumatism, chronic rheumatism, collagen-induced arthritis and chronic inflammatory arthritis. 제 1항 내지 제 6항에서 선택되는 어느 한 항에 있어서,
상기 약학조성물은 종양괴사인자의 유리 억제, 매트릭스 메탈로프로티나아제-13의 합성 억제, 및 나이트릭옥사이드의 생성 억제를 통하여 관절염을 예방 또는 치료하는 것을 특징으로 하는 약학조성물. 7. The compound according to any one of claims 1 to 6,
The pharmaceutical composition is a pharmaceutical composition, characterized in that to prevent or treat arthritis through the inhibition of the release of tumor necrosis factor, the synthesis of matrix metalloproteinase-13, and the inhibition of the production of nitric oxide. 골담초, 진교, 해동피, 두충, 방풍, 위령선, 우슬, 및 석창포를 포함하는 복합 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 관절염 예방 및 개선용 건강기능식품.Health functional food for preventing and improving arthritis, which contains a complex herbal extract including goldamcho, jinkyo, Haedongpi, tofu, windproof, gastrointestinal, hyssop, and Seokchangpo.

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