KR101247524B1 - An alcohol detoxification composition comprising taraxerone - Google Patents

Abstract

PURPOSE: A composition containing taraxerone for relieving a hangover is provided to promote ADH and ALDH activation and to treat side effects. CONSTITUTION: A composition for relieving a hangover contains taraxerone of chemical formula 1 which is isolated from a Sedum sarmentosum extract. A health functional food for relieving a hangover contains taraxerone of chemical formula 1. The health functional food is selected from the group consisting of a drink, meat, sausage, bread, candy, a snack, noodles, ice cream, a dairy product, soup, or an ion drink.

Description

타라제론을 함유하는 숙취해소용 조성물 {An alcohol detoxification composition comprising taraxerone}Hangover-relieving composition containing taraserone {An alcohol detoxification composition comprising taraxerone}

본 발명은 타라제론(taraxerone)을 함유하는 숙취해소용 조성물에 관한 것으로서, 자세하게는 본 발명은 알코올 분해 효소인 ADH(Alcohol dehydrogenase)와 ALDH(Acetaldehyde dehydrogenase)의 활성을 촉진하는 효과가 있는 타라제론(taraxerone)을 함유하는 숙취해소용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for relieving hangover containing taraxerone (taraxerone), and in detail, the present invention relates to a taraxalone having an effect of promoting the activity of alcohol degrading enzymes ADH (Alcohol dehydrogenase) and ALDH (Acetaldehyde dehydrogenase). It relates to a hangover composition containing taraxerone).

한국의 알코올 소비는 세계 최고의 수준이며 간암이나 간경변으로 인한 사망이 한국인의 주요 사망원인이 되는 등 음주로 인한 사회경제적 및 보건학적 폐해는 엄청나며 이는 증가추세에 있다. 과다한 알코올 섭취는 신체의 거의 모든 부분에 영향을 미쳐서 간질환, 위염, 췌장염, 고혈압, 중풍, 당뇨병, 심장병 등 많은 질환을 일으키는 것으로 보고되고 있다. 최근 보건복지부 산하 한국보건사회연구원이 실시한 국민건강 영양조사결과에 의하면 국내 20세 이상 성인의 경우 술을 마시는 날은 1달 평균 약 8일로서 남자는 약 11일, 여자는 약 4일 정도인 것으로 나타났고, 이때 만취 횟수는 주 1회 이상이 약 4.7%, 1개월에 1~3회가 약 10.7%, 3개월에 1~3회가 약 13.2%인 것으로 조사된 바 있으며 이는 국민 건강의 측면에서 상당히 우려할 만한 수준이다. 이와 같이, 현대인들은 그 정도가 지나쳐 인체 내에서 감당할 수 없을 정도로 알코올을 과량 섭취하고, 그로 인한 부작용인 갈증, 전신권태, 피로감, 기억상실, 복부팽만감, 소화 불량, 구토 설사, 비타민 결핍 등의 숙취 현상으로 고생하는 경우가 많고 알코올 중독에 걸릴 위험성도 그만큼 증가하고 있는 실정이다. 이와 같은 숙취현상은 간세포와 체내에 축적된 알코올 및 아세트알데하이드의 작용에 의해 발생하는 것으로 알려져 있다. 특히, 아세트알데하이드는 음주 후 두통을 수반하는 대표적인 화학물질로서 WHO에서도 그 자체의 독성을 경고한 바 있다.Korea's alcohol consumption is among the highest in the world, and the socioeconomic and health consequences of alcohol use are enormous, with deaths caused by liver cancer and cirrhosis being the leading cause of death for Koreans. Excessive alcohol consumption affects almost all parts of the body and is reported to cause many diseases such as liver disease, gastritis, pancreatitis, high blood pressure, stroke, diabetes, and heart disease. According to the results of the National Health and Nutrition Survey conducted by the Korea Institute for Health and Social Affairs under the Ministry of Health and Welfare, the average drinking time for adults over 20 years old is about 8 days a month, about 11 days for men and about 4 days for women. At this time, the frequency of intoxication was about 4.7% at least once a week, about 10.7% at 1 ~ 3 times a month, and about 13.2% at 1 ~ 3 times a month. At the level of considerable concern. As such, modern people consume excessive amounts of alcohol that they cannot afford in the human body, and side effects such as thirst, general boredom, fatigue, memory loss, bloating, indigestion, vomiting diarrhea and vitamin deficiency Many suffer from the phenomenon and the risk of alcoholism is increasing that much. This hangover phenomenon is known to be caused by the action of acetaldehyde and alcohol accumulated in the liver cells and the body. In particular, acetaldehyde is a representative chemical that causes headaches after drinking alcohol, and WHO has warned of its toxicity.

술의 주성분인 에탄올은 신체적 정신적으로 인체에 미치는 효과가 매우 다양하고 광범위하여 그 대사과정과 독성 발현 특성에 대한 많은 연구가 진행되고 있다. 섭취된 에탄올은 소화관을 통해 흡수 후 20~120분 사이에 최고 혈중 농도에 도달한다. 흡수된 에탄올은 간을 비롯한 모든 장기들에서 대사되는데 일부(약 10%)는 호흡을 통하여 또는 소변 및 땀으로 배출된다. 정상적인 상태에서 소량의 알코올을 섭취할 경우 간장 내로 들어온 에탄올은 세포질(cytosol) 내의 알코올탈수효소(alcohol dehydrogenase, ADH)와 알데하이드탈수소효소(aldehyde dehydrogenase, ALDH)의 작용에 의해 아세테이트로 전환되고, 이는 순환계를 통해 간세포 밖으로 배설된다. 이 중 특히 에탄올의 최초 대사산물인 아세트알데하이드는 에탄올에 비해 반응성이 매우 높고 독성이 강하여 알코올성 간 장애의 주원인 물질로 밝혀진 바 있다. 아세트알데하이드는 세포 내 에너지 생성기관인 미토콘드리아의 호흡을 방해하고 산화적 인산화 반응을 억제하며 막단백질 및 콜라겐 단백질과도 결합하여 항체를 생성하기도 하고 면역학적으로 세포독성을 나타내며 간세포 분비 단백질의 방출기구를 저해하는 것으로 밝혀진 바 있다. 또한, 아세트알데하이드는 미오피브로블라스트(myofibroblast)의 콜라겐 합성을 촉진하여 간 섬유화와 간세포의 변성 종대를 일으키며 생체내 거대분자와 반응하여 어덕트(adduct)를 형성하기도 한다.Ethanol, the main ingredient of alcohol, has a wide variety of effects on the human body both physically and mentally, and many studies have been conducted on its metabolic processes and toxic expression characteristics. Ingested ethanol reaches its highest blood level between 20 and 120 minutes after absorption through the digestive tract. Absorbed ethanol is metabolized in all organs, including the liver, and some (about 10%) are released through breathing or into urine and sweat. When consuming small amounts of alcohol under normal conditions, ethanol entering the liver is converted to acetate by the action of alcohol dehydrogenase (ADH) and aldehyde dehydrogenase (ALDH) in the cytosol. Through the hepatocytes are excreted out. Among these, acetaldehyde, the first metabolite of ethanol, has been found to be a major cause of alcoholic liver disorder because it is highly reactive and toxic. Acetaldehyde interferes with the respiration of mitochondria, a cellular energy production organ, inhibits oxidative phosphorylation, binds to membrane proteins and collagen proteins to produce antibodies, immunologically cytotoxic, and inhibits the release mechanism of hepatocyte secretory proteins. It has been found to do. In addition, acetaldehyde promotes collagen synthesis of myofibroblast, causing hepatic fibrosis and degeneration of hepatocytes, and reacting with macromolecules in vivo to form adducts.

또한, 인체로 섭취된 알코올에 의해서 간 내에 중성지방이 축적되기도 한다. 간에서의 중성지방 축적은 지방산 합성에 증가되기보다는 알코올에 의한 지방산 산화억제가 중성지방축적의 중요인자로 작용하는 것으로 알려져 있다. 간에서의 중성지방 축적은 간의 대사장애를 반영해주며 계속적인 중성지방축적은 결국 섬유조직의 증식 및 간세포의 손상을 초래하기도 한다. 이와 같은 알코올 대사의 결과 지방산이 많이 만들어져 간에 지방이 축적되는데 이를 알코올성 지방간이라고 한다. 이 알코올성 지방간은 특히 만성 간질환으로 진행하는 경우가 많은데 알코올성 간염의 10~15%와 간경변증의 8~20% 정도가 알코올성 지방간과 관련 있는 것으로 보고된 바 있다. In addition, triglycerides may accumulate in the liver by alcohol ingested by the human body. Accumulation of triglycerides in the liver is known to be an important factor in triglyceride accumulation rather than fatty acid oxidation inhibition by alcohol rather than increased fatty acid synthesis. Accumulation of triglycerides in the liver reflects metabolic disorders in the liver, and continued triglyceride accumulation may eventually lead to fibrosis and damage to liver cells. As a result of this alcohol metabolism, many fatty acids are made and fat accumulates in the liver, which is called alcoholic fatty liver. The alcoholic fatty liver is often progressed to chronic liver disease, and 10-15% of alcoholic hepatitis and 8-20% of cirrhosis have been reported to be associated with alcoholic fatty liver.

한편, 간 내에는 아세트알데하이드 뿐만 아니라 각종 약물 및 지방대사산물과 과산화지질의 대사과정, 그리고 C-C 결합의 산화적 절단으로 생체에 극히 유해한 것으로 알려진 여러 종류의 알데하이드가 생성된다. 상기 알데하이드의 산화에 관여하는 주효소인 ALDH는 간, 콩팥, 심장 및 위를 포함한 많은 장기와 조직에 널리 분포하고 세포질, 미토콘드리아, 마이크로솜 등에도 존재하여 폭넓은 기질 특이성을 보이며, 각종 알데하이드에 대응할 수 있는 약물대사효소의 성격을 지니고 있다.Meanwhile, not only acetaldehyde but also various drugs and fat metabolites and metabolism of lipid peroxide, and oxidative cleavage of C-C bonds, produce various kinds of aldehydes which are known to be extremely harmful to the living body. ALDH, the main enzyme involved in the oxidation of aldehydes, is widely distributed in many organs and tissues, including liver, kidney, heart, and stomach, and is also present in cytoplasm, mitochondria, microsomes, etc., and exhibits broad substrate specificity. It has the character of a possible drug metabolic enzyme.

따라서 어떤 요인에 의하여 간 내 ALDH 활성에 변화가 오게 되면 아세트알데하이드의 해독 및 물질 대사에도 영향을 미치는 것으로 알려져 있다. 이 과정에서 체내의 알코올과 아세트알데하이드의 함량이 높아지게 되면 간세포와 뇌세포에 손상을 입히고 구토 및 두통이 유발되고, 심하면 오한이나 복통이 발생하게 되는데, 이러한 생리적 현상이 숙취의 원인이 된다. 한편, 선천적으로 ALDH의 발현이 적은 사람의 경우에는 음주를 하게 되면 정상적인 알코올 대사작용이 방해되어 숙취를 일으키는 현상이 더욱 심해지게 된다. 특히, ALDH는 아세트알데하이드가 저농도이어도 산화를 개시하는 Π형과 아세트알데하이드가 고농도가 되어야만 작용을 하는 Ｉ형이 있다. 그런데, 동양인은 일반적으로 Π형 ALDH의 발현이 결핍되어 있거나 Π형 ALDH가 발현을 하더라도 극히 적은 양이 발현되는 경우가 많기 때문에 아세트알데하이드의 산화가 잘 되지 않다고 알려져 있다. 따라서, 이러한 사람들의 경우, 산화되지 않은 아세트알데하이드 및 에탄올의 유독작용에 의하여 정상적인 신진대사가 방해를 받아 여러 숙취현상을 느끼게 된다. Therefore, it is known that changes in liver ALDH activity by some factors also affect the detoxification and metabolism of acetaldehyde. In this process, the content of alcohol and acetaldehyde in the body increases, causing damage to the liver cells and brain cells, causing vomiting and headaches, severe chills or abdominal pain, which causes the hangover. On the other hand, in the case of people who are inherently low in expression of ALDH, drinking causes further hangovers that interfere with normal alcohol metabolism. In particular, ALDH has a type Π which initiates oxidation even at low concentrations of acetaldehyde and a type I which only works when acetaldehyde is at a high concentration. By the way, it is known that Asians generally do not oxidize acetaldehyde because the expression of Π ALDH is deficient or extremely small amount is expressed even when Π ALDH is expressed. Therefore, in these people, normal metabolism is disturbed by the toxic effects of unoxidized acetaldehyde and ethanol, and many hangovers are felt.

한편, 상기와 같은 숙취현상을 해소하기 위해, 알코올 섭취로 인한 숙취를 제거하고 혈중 알코올 농도를 감소시킬 수 있는 효과가 있는 생약 제제 또는 인공 제제가 단독 또는 혼합되어 있는 제품의 개발이 이루어지고 있다. 특히, 한국공개특허 제2003-70232호에는 오수유 추출물을 함유하는 숙취해소 및 항산화 작용을 위한 조성물, 한국등록특허 제721644호에는 누에 추출물을 함유한 숙취해소용 기능성 식품, 한국등록특허 제787633호에는 현미를 기질로 하여 배양시킨 노루궁뎅이버섯 균사체 배양물과 곶감, 진피, 감초, 사인, 헛개나무 등으로 이루어진 천연약재 함유 간기능 개선과 숙취해소용 차, 한국등록특허 제915893호에는 참나무 껍질, 솔잎, 감초, 갈근, 측백엽, 쑥, 금은화, 모과의 추출물을 주성분으로 하는 숙취예방 및 해소를 위한 생약 추출물, 한국등록특허 제771525호에는 헛개나무 열매, 인진호, 갈근, 진피, 창출 및 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 숙취해소용 조성물 등이 공지되어 있다.On the other hand, in order to eliminate the hangover as described above, the development of a product that is alone or mixed with herbal medicines or artificial preparations that are effective to remove the hangover caused by alcohol intake and reduce blood alcohol concentration. In particular, Korean Patent Publication No. 2003-70232 discloses a composition for hangover relief and antioxidant activity containing sewage oil extract, and Korean Registered Patent No. 721644 for hangover functional food containing silkworm extract, and Korean Registered Patent No. 787633. Tea for improving liver function and hangover, containing Korean medicinal mycelium mycelium culture cultured with brown rice as a substrate and dried persimmon, dermis, licorice, cod, hut tree, Korean Patent No.915893, oak bark, pine needle Herbal extract for hangover prevention and remedy, which is mainly composed of extracts of licorice, brown root, baekryeop, mugwort, sterling silver, Chinese quince. Known compositions for hangover relief and the like are known.

한편, 돌나물(Sedum sarmentosum)은 쌍떡잎식물 장미목 돌나물과의 여러해살이풀이며, 돈나물, 돗나물, 수분초라고도 불린다. 숙취제거에 탁월한 효능이 있으며 간을 보호하는 식품이다. 식욕을 돋워주고 피를 맑게 하며 살균, 소염, 해독효과가 있으며 비타민C는 물론 인산과 칼슘 등 각종 영양소가 풍부하며 특히 뼈에 좋은 칼슘이 우유의 두 배나 되며 수분함량이 높아 건조해진 피부의 수분보충에도 효과적이며 한의학에서는 불갑초라 하여 해열, 해독, 황달, 타박상, 간경변, 뱀 등 독충에 물렸을 때 치료제로 사용해 왔으며 돌나물의 즙을 내어 꾸준히 복용하면 전염성 간염에 효과가 있다는 기록이 있을만큼 간질환에 뛰어난 효능이 있으며 최근엔 콜레스테롤 수치를 낮춰준다는 연구 결과도 있어 갱년기 여성 뿐만 아니라 남성들에게도 좋은 음식으로 알려져 있다.On the other hand, Sedum ( Sedum) sarmentosum ) is a perennial plant of the dicotyledonous plant Rosaceae, also called Donna, Dungnab, and Moisture. It is excellent for removing hangovers and protects the liver. It boosts appetite, clears blood, has bactericidal, anti-inflammatory, and detoxification effects. It is rich in vitamin C as well as various nutrients such as phosphate and calcium. It is also effective in oriental medicine, and it has been used as a cure for fever, detoxification, jaundice, bruises, cirrhosis, snakes, etc. It is effective and has recently been shown to lower cholesterol levels, making it a good food for men as well as menopausal women.

돌나물의 다양한 효능 중 숙취해소능에 대한 개발은 활발히 이루어져 있지 않은 실정이며 한국등록특허 제660175호에 사철쑥, 수분초(돌나물), 근채, 노근, 모려분의 열수추출물로 이루어진 숙취해소용 음료조성물이 개시되어 있다. Among the various effects of dolmen, the development of hangover ability is not active. Korean Registered Patent No. 660175 discloses a hangover composition for hangover elimination consisting of hot water extracts of wormwood, hydrangea, rhizome, old root and seed powder. It is.

본 발명자는 한국등록특허 제976241호에서 돌나물 에틸아세테이트 분획물이 ADH(Alcohol dehydrogenase)와 ALDH(Acetaldehyde dehydrogenase)의 활성을 촉진시켜 알코올 분해 및 숙취해소 효과가 있다는 것을 확인한 바 있다. 이에 본 발명자들은 상기 돌나물 에틸아세테이트 분획물의 효과에 대해 연구를 하던 중, 상기 돌나물 에틸아세테이트 분획물에서 분리된 유효성분인 타라제론(taraxerone)이 ADH(Alcohol dehydrogenase)와 ALDH(Acetaldehyde dehydrogenase)의 활성을 촉진시켜 알코올 분해 및 숙취해소 효과가 있다는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.The present inventors have confirmed in Korean Patent No. 976241 that dolmul ethyl acetate fraction has an alcohol decomposition and hangover effect by promoting the activity of ADH (Alcohol dehydrogenase) and ALDH (Acetaldehyde dehydrogenase). The inventors of the present invention, while studying the effect of the ethanol ethyl acetate fraction, taraserone (taraxerone), which is an active ingredient isolated from the ethanol ethyl acetate fraction to promote the activity of ADH (Alcohol dehydrogenase) and ALDH (Acetaldehyde dehydrogenase) The present invention was completed by confirming that there is an effect of alcohol decomposition and hangover.

한국공개특허 제2003-70232호 (오수유 추출물을 함유하는 숙취해소 및 항산화 작용을 위한 조성물, 2003.08.29. 공개)Korean Unexamined Patent Publication No. 2003-70232 (Composition for Hangover Relief and Antioxidant Activity Containing Sewage Oil Extract, published on Aug. 29, 2003) 한국등록특허 제721644호 (누에 추출물을 함유한 숙취해소용 기능성 식품, 2007.05.23. 공고)Korean Registered Patent No. 721644 (Functional Hangover Functional Food Containing Silkworm Extract, Announced May 23, 2007) 한국등록특허 제787633호 (간 기능 개선과 숙취해소용 차 및 그 제조방법, 2007.12.21. 공고)Korean Registered Patent No. 787633 (Car for improving liver function and hangover and its manufacturing method, 2007.12.21. Notification) 한국등록특허 제915893호 (숙취예방 및 해소를 위한 생약 추출물 및 이를 이용한 기능성 식품, 2009.09.07. 공고)Korean Registered Patent No.915893 (Medicinal Herb Extract and Functional Food Using It, 2009.09.07. 한국등록특허 제771525호 (혼합 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 숙취해소용 조성물, 2007.10.30. 공고)Korean Registered Patent No. 771525 (Hangover Relief Composition Containing Mixed Herbal Extract as Active Ingredient, Announced October 30, 2007) 한국등록특허 제660175호 (숙취해소용 음료조성물, 2006.12.21. 공고)Korean Registered Patent No. 660175 (Drinking composition for hangover elimination, December 21, 2006) 한국등록특허 제976241호 (알코올 분해 및 숙취해소용 돌나물 분획물, 2010.08.17. 공고)Korean Registered Patent No. 976241 (Solmul Fraction for Alcohol Decomposition and Hangover Relief, 2010.08.17.)

본 발명의 목적은 타라제론(taraxerone)을 함유하는 숙취해소용 조성물을 제공하는 데에 있으며, 자세하게는 본 발명의 목적은 알코올 분해 효소인 ADH(Alcohol dehydrogenase)와 ALDH(Acetaldehyde dehydrogenase)의 활성을 촉진하는 효과가 있는 타라제론(taraxerone)을 함유하는 숙취해소용 조성물을 제공하는 데에 있다.An object of the present invention is to provide a hangover composition containing taraxerone (taraxerone), and in detail, an object of the present invention is to promote the activity of alcohol degrading enzymes ADH (Alcohol dehydrogenase) and ALDH (Acetaldehyde dehydrogenase) It is to provide a hangover relief composition containing taraxerone (taraxerone) that is effective to.

본 발명은 하기 화학식 1의 타라제론(taraxerone, D-friedoolean-14-en-3-one)을 함유하는 숙취해소용 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a hangover relief composition containing taraxerone (taraxerone, D-friedoolean-14-en-3-one) of Chemical Formula 1 below.

[화학식 1][Formula 1]

상기 타라제론은 돌나물(Sedum sarmentosum) 추출물로부터 분리될 수 있다.The taraserone is sedum ( Sedum sarmentosum ) can be isolated from the extract.

또한 본 발명은 상기 타라제론을 함유하는 숙취해소용 건강기능식품에 관한 것이다. In another aspect, the present invention relates to a hangover for dietary supplement containing the taraserone.

상기 건강기능식품은 드링크제, 육류, 소세지, 빵, 캔디류, 스넥류, 면류, 아이스크림을 포함한 낙농제품, 스프, 이온음료를 포함한 음료수 및 비타민 복합제를 포함한 영양 공급용 제품으로 구성되는 군으로부터 선택될 수 있다.The health functional food may be selected from the group consisting of a drink, meat, sausage, bread, candy, snacks, noodles, dairy products including ice cream, soups, beverages including ionic beverages and nutritional supplement products including vitamin complexes. .

이하 본 발명을 자세하게 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 알코올 분해 효소인 ADH와 ALDH의 활성을 촉진하는 효과가 있는 타라제론을 함유하는 숙취해소용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a hangover-relieving composition containing tarazerone which has an effect of promoting the activity of the alcohol degrading enzymes ADH and ALDH.

본 발명의 타라제론 화합물은 돌나물 추출물로부터 얻을 수 있으며, 이는 유기용매(알코올, 에테르, 아세톤 등)에 의한 추출, 헥산과 물의 분배, 칼럼크로마토그래피에 의한 방법, 식물체 성분의 분리 추출에 이용되는 공지의 방법을 단독 또는 적합하게 조합하여 용이하게 얻을 수가 있다. 또한, 상기 타라제론 화합물은 공지된 방법을 통해 합성될 수도 있다.The taraseron compound of the present invention can be obtained from dolnamul extract, which is used for extraction with an organic solvent (alcohol, ether, acetone, etc.), partitioning of hexane and water, method by column chromatography, separation extraction of plant components The method can be easily obtained by combining alone or suitably. In addition, the taraseron compound may be synthesized through a known method.

본 발명에서 사용하는 크로마토그래피에는 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(silica gel column chromatography), 엘에이취-20 칼럼 크로마토그래피(LH-20 column chromatography), 이온교환수지 크로마토그래피(ion exchange resin chromatography), 박층크로마토그래피(TLC; thin layer chromatography), 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography), 역상 크로마토그래피(reversed phase chromatography), 중압 크로마토그래피(MPLC; Medium pressure liquid chromatography) 등이 이용될 수 있다.Chromatography used in the present invention includes silica gel column chromatography, L-20 column chromatography, ion exchange resin chromatography, thin layer chromatography ( Thin layer chromatography, high performance liquid chromatography, reversed phase chromatography, medium pressure liquid chromatography (MPLC) and the like.

바람직하게는, 상기 돌나물 추출물은 건조하여 분말화한 돌나물 또는 돌나물 생즙에 그 중량의 1~20배(v/w), 바람직하게는 2~10배(v/w)의 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 알코올 수용액을 가한 후, 20~100℃의 추출 온도에서 약 1시간~2일, 바람직하게는 2시간~1일 동안 열수 추출, 환류냉각 추출, 초음파 추출 등의 추출방법을 1~5회, 바람직하게는 2~3회 반복하여 추출물을 수득한 후, 감압여과하여 제조할 수 있다. Preferably, the sedum extract is dried to powdered sedum or sedum raw juice of 1 to 20 times (v / w), preferably 2 to 10 times (v / w) lower carbon atoms of 1 to 4 times its weight. After adding alcohol or an aqueous solution of these alcohols, extraction methods such as hot water extraction, reflux cooling extraction, and ultrasonic extraction for about 1 hour to 2 days, preferably 2 hours to 1 day at an extraction temperature of 20 to 100 ° C. After repeating 5 times, preferably 2 to 3 times to obtain the extract, it can be prepared by filtration under reduced pressure.

또한, 상기 타라제론 화합물은 상기 돌나물 추출물을 분획한 에틸아세테이트 분획물에서 분리될 수 있다. 바람직하게는 상기 돌나물 에틸아세테이트 분획물은 상기 돌나물 추출물을 공지된 방법의 분획방법을 이용해 제조할 수 있다. In addition, the taraserone compound may be separated from the ethyl acetate fractions fractionated the dolmul extract. Preferably, the dolmul ethyl acetate fraction may be prepared using the dolmul extract fractionation method of a known method.

자세하게는, 상기 돌나물 추출물에 돌나물 중량의 2~10배의 물을 가하여 현탁한 후 이들 현탁액에 돌나물 중량의 2~10배(v/w)의 헥산을 가하여 1~5회, 바람직하게는 2~4회 추출하여 n-헥산 가용성 분획부와 수용성 분획부로 분리하는 단계;In detail, 2 to 10 times the weight of dolmuls is suspended by adding water to the dolmul extract, and 2 to 10 times (v / w) hexane of dolmens weight is added to these suspensions 1 to 5 times, preferably 2 to 5 times. Extracting four times to separate the n-hexane soluble fraction and the aqueous fraction;

상기 헥산 수용성 분획부에 다시 돌나물 중량의 2~10배(v/w)의 에틸아세테이트를 가하여 추출한 다음, 에틸아세테이트 가용성 분획부와 수용성 분획부를 분리하는 단계; Extracting by adding 2-10 times (v / w) ethyl acetate to the hexane-soluble fraction to the hexane-soluble fraction, and separating the ethyl acetate soluble fraction and the water-soluble fraction;

상기 에틸아세테이트 수용성 분획에 다시 돌나물 중량의 2~10배(v/w)의 부탄올을 가하여 추출한 다음 부탄올 가용성 분획부와 수용성 분획부를 분리하는 단계; 및,Extracting the ethyl acetate aqueous fraction by adding 2-10 times (v / w) butanol to the weight of dolmuls and then separating the butanol soluble fraction and the aqueous fraction; And

상기 각각의 용매 분획부를 회전 진공 농축기로 감압 농축하여 용매를 제거하여 각각의 n-헥산, 에틸아세테이트, 부탄올 분획물을 얻는 단계;를 포함하여 제조한 돌나물 에틸아세테이트 분획물에서 본 발명의 타라제론 화합물을 분리할 수 있다. The solvent fractions were concentrated under reduced pressure with a rotary vacuum concentrator to remove the solvents to obtain respective n-hexane, ethyl acetate and butanol fractions. The taraseone compound of the present invention was isolated from the prepared dolna ethyl acetate fractions. can do.

또한, 상기 타라제론 화합물은 에틸아세테이트 분획물로부터 실리카겔 크로마토그래피의 일종인 오픈컬럼크로마토그래피와 박층크로마토그래피를 실시하여 분리할 수 있다. In addition, the taraseron compound can be separated from the ethyl acetate fraction by performing open column chromatography and thin layer chromatography, which is a kind of silica gel chromatography.

본 발명의 타라제론 화합물을 함유하는 숙취해소용 조성물은 타라제론 화합물이 상기 조성물 총 중량에 0.01~50 중량%로 포함될 수 있다.Hangover composition containing the taraserone compound of the present invention may be included in the total weight of the composition of the taraserone compound 0.01 to 50% by weight.

또한, 본 발명의 타라제론 화합물을 함유하는 숙취해소용 조성물은 통상의 방법에 따른 적절한 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함할 수 있다. 본 발명의 타라제론 화합물을 함유하는 숙취해소용 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 본 발명에 따른 타라제론 화합물을 포함하는 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 상세하게는, 제제화 할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 타라제론 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스, 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다. In addition, the hangover composition containing the taraserone compound of the present invention may further comprise a suitable carrier, excipient or diluent according to a conventional method. Carriers, excipients and diluents which may be included in the hangover composition containing the taraserone compound of the present invention include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate , Gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil. The composition comprising the tarazerone compound according to the present invention may be in the form of powder, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols and the like, oral formulations, suppositories, or sterile injectable solutions, respectively, according to a conventional method. Can be formulated and used. In detail, when formulated, it may be prepared using diluents or excipients such as fillers, extenders, binders, wetting agents, disintegrating agents, surfactants, etc. which are commonly used. Solid preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules, and the like, and such solid preparations include at least one excipient such as starch, calcium carbonate, sucrose, lactose, gelatin in the taraserone compound. It can be prepared by mixing. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate and talc may also be used. Examples of liquid formulations for oral use include suspensions, solutions, emulsions and syrups. In addition to water and liquid paraffin which are commonly used simple diluents, various excipients such as wetting agents, sweeteners, fragrances, preservatives and the like have. Formulations for parenteral administration include sterilized aqueous solutions, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, freeze-dried preparations and suppositories. Examples of the suspending agent include propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, injectable ester such as ethyl oleate, and the like. As the base of the suppository, witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin butter, glycerogelatin and the like can be used.

본 발명의 타라제론 화합물을 함유하는 숙취해소용 조성물은 알코올 분해 및 숙취해소를 위한 식품 및 음료 등에 다양하게 이용될 수 있다. 본 발명의 타라제론 화합물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 각종 식품류, 예를 들어, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있으며, 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있다. Hangover composition containing the taraserone compound of the present invention can be used in a variety of foods and beverages for alcohol decomposition and hangover. Examples of the food to which the tarazone compound of the present invention may be added include various foods, for example, beverages, gums, teas, vitamin complexes, and health supplements, and include pills, powders, granules, tablets, capsules, or It can be used in the form of a drink.

이때, 식품 또는 음료 중의 상기 타라제론 화합물의 양은, 일반적으로 본 발명의 건강식품 조성물의 경우 전체 식품 중량의 0.01~15 중량%로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물의 경우 100㎖를 기준으로 0.02~10g, 바람직하게는 0.3~1g의 비율로 가할 수 있다. 본 발명의 건강 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 타라제론 화합물을 함유하는 외에는 액체성분에는 특별한 제한점은 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로 함유할 수 있다. At this time, the amount of the taraserone compound in the food or beverage can be generally added to 0.01 to 15% by weight of the total food weight in the case of the health food composition of the present invention, 0.02 ~ 10g based on 100ml for the health beverage composition Preferably, it can add in the ratio of 0.3-1 g. The health beverage composition of the present invention has no special limitation except for containing the taraserone compound as an essential ingredient in the indicated ratio, and may contain various flavors or natural carbohydrates as additional ingredients, such as ordinary drinks. .

상술한 천연 탄수화물의 예로는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린; 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100㎖당 일반적으로 1~20g, 바람직하게는 5~12g이다. 상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.Examples of the above-mentioned natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose, fructose and the like; Disaccharides such as maltose, sucrose and the like; Polysaccharides such as dextrin, cyclodextrin; Conventional sugars such as and the like and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol. As flavoring agents other than those described above, natural flavoring agents (tauumatin, stevia extract, etc.) and synthetic flavoring agents (saccharin, aspartame, etc.) can be advantageously used. The proportion of the natural carbohydrate is generally 1-20 g, preferably 5-12 g per 100 ml of the composition of the present invention. In addition to the above-mentioned composition, the composition of the present invention can be used as a flavoring agent such as various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), synthetic flavors and natural flavors, coloring agents and aggravating agents (cheese, chocolate etc.), pectic acid and its salts, Salts, organic acids, protective colloid thickeners, pH adjusting agents, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonating agents used in carbonated beverages and the like.

그밖에 본 발명의 타라제론 화합물을 함유하는 숙취해소용 조성물은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그 중량을 제한하지는 않지만 본 발명의 타라제론 화합물을 함유하는 숙취해소용 조성물 100 중량부 당 0~20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다. In addition, the hangover composition containing the taraserone compound of the present invention may contain a flesh for producing natural fruit juice and fruit juice beverage and vegetable beverage. These components can be used independently or in combination. The proportion of such additives is not limited in weight, but is generally selected in the range of 0 to 20 parts by weight per 100 parts by weight of the hangover composition containing the taraserone compound of the present invention.

본 발명의 타라제론(taraxerone)을 함유하는 숙취해소용 조성물은 알코올 대사에 관련된 간효소인 ADH와 ALDH의 활성을 촉진시키는 효능이 있어 알코올 섭취를 통해 나타나는 부작용인 갈증, 전신권태, 피로감, 기억상실, 복부팽만감, 소화 불량, 구토 설사, 비타민 결핍 등의 숙취현상을 개선한다. 또한, 상기 타라제론(taraxerone)을 함유하는 숙취해소용 조성물은 알코올 대사에 관련된 간효소인 ADH와 ALDH를 활성화시켜 에탄올을 최종 대사산물인 아세트산으로 빠르게 분해시키므로 알코올 섭취로 인한 간의 손상을 줄일 수 있으며, 그 외에 위염, 췌장염, 고혈압, 중풍, 식도염, 당뇨병 등의 알코올 섭취로 인해 나타나는 질환들을 개선하는 데 유용하게 사용할 수 있다.The composition for relieving hangover containing taraxerone of the present invention has the effect of promoting the activity of ADH and ALDH, which are liver enzymes related to alcohol metabolism, which is a side effect of alcohol consumption, thirst, general boredom, fatigue, memory loss It also improves hangover symptoms such as bloating, indigestion, vomiting diarrhea and vitamin deficiency. In addition, the hunger composition containing the taraxerone (taraxerone) can reduce the liver damage caused by alcohol consumption by activating ADH and ALDH, which are liver enzymes involved in alcohol metabolism, to rapidly decompose ethanol into acetic acid, the final metabolite. In addition, it can be useful for improving diseases caused by alcohol consumption such as gastritis, pancreatitis, high blood pressure, stroke, esophagitis and diabetes.

도 1A는 돌나물 에틸아세테이트 분획물을 HPLC(High Performance Liquid Chromatography)로 분석한 결과를 나타내는 그래프이며, 도 1B 및 도 1C는 GC(gas chromatography)를 이용하여 돌나물 에틸아세테이트 분획물을 분석함으로써 타라제론 화합물의 구조를 확인한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 2는 타라제론 화합물, DMSO(대조군), DHM(양성대조군), 생리식염수(saline) 또는 돌나물 메탄올 추출물, 돌나물 에틸아세테이트 분획물을 40% 에탄올과 함께 경구투여한 ICR 마우스의 혈청에서의 ADH와 ALDH의 함량을 나타내는 그래프이다.
도 3은 타라제론 화합물, DMSO(대조군), DHM(양성대조군), 생리식염수(saline) 또는 돌나물 메탄올 추출물, 돌나물 에틸아세테이트 분획물을 40% 에탄올과 함께 경구투여한 ICR 마우스의 간에서의 ADH와 ALDH의 RNA 발현량을 나타내는 그래프이다. Figure 1A is a graph showing the results of analyzing the dolmul ethyl acetate fraction by HPLC (High Performance Liquid Chromatography), Figure 1B and 1C is the structure of the tarajeron compound by analyzing the dolmul ethyl acetate fraction using gas chromatography (GC) This graph shows the result of checking.
Figure 2 shows the ADH and ALDH in the serum of ICR mice orally administered with tarazerone compound, DMSO (control), DHM (positive control), saline or ethanol methanol extract, dolmul ethyl acetate fraction with 40% ethanol. It is a graph showing the content of.
Figure 3 shows the ADH and ALDH in liver of ICR mice orally administered with tarazerone compound, DMSO (control), DHM (positive control), saline or ethanol methanol extract, dolmul ethyl acetate fraction with 40% ethanol. It is a graph showing the amount of RNA expression.

이하 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명은 여기서 설명되는 실시예에 한정되지 않고 다른 형태로 구체화될 수도 있다. 오히려, 여기서 소개되는 내용이 철저하고 완전해질 수 있기 위해 또한 당업자에게 본 발명의 사상을 충분히 전달할 수 있기 위해 제공하는 것이다.Hereinafter, a preferred embodiment of the present invention will be described in detail. However, the present invention is not limited to the embodiments described herein but may be embodied in other forms. Rather, it is provided to the purpose of the present disclosure to be thorough and complete, and to fully convey the spirit of the present invention to those skilled in the art.

<실시예 1. 타라제론 화합물의 분리>Example 1 Separation of Tarazoneron Compound

돌나물(Sedum sarmentosum)을 깨끗이 세척하고 건조하여 분쇄한 돌나물 분말 100g을 45℃에서 24시간 동안 메탄올 0.5ℓ로 3회 추출하였다. 이 후, 상기 추출액을 24시간 동안 진탕하여 여과하고 회전진공농축기로 60℃에서 감압농축하여 돌나물 메탄올 추출물 30g을 얻었다. 상기 돌나물 메탄올 추출물에 물을 0.5ℓ 넣고 현탁시킨 후 2회에 걸쳐 헥산 0.5ℓ를 가하여 추출한 다음 헥산층을 분리한 후 헥산층을 감압농축하여 헥산 분획물을 얻었다. 남은 수용액 층에 연이어 에틸아세테이트 0.5ℓ, 부탄올 0.5ℓ를 상기한 바와 같은 동일한 방법으로 순서대로 분획한 후 각각 감압농축하여 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물을 각각 얻었다. Sedum sarmentosum ( Sedum sarmentosum ) was washed, dried and crushed 100g of pulverulent powder extracted with 0.5 liter of methanol three times for 24 hours at 45 ℃. Thereafter, the extract was shaken for 24 hours, filtered, and concentrated under reduced pressure at 60 ° C using a rotary vacuum concentrator to obtain 30 g of methanol extract. 0.5 liters of water was added to the methanol extract of the dolmuls, suspended, and extracted with 0.5 liters of hexane twice. The hexane layer was separated, and the hexane layer was concentrated under reduced pressure to obtain a hexane fraction. Subsequently, 0.5 liter of ethyl acetate and 0.5 liter of butanol were successively fractionated in the same manner as described above, followed by concentration under reduced pressure, respectively, to obtain an ethyl acetate fraction and a butanol fraction, respectively.

이 후, 실리카겔이 충진된 컬럼에 에틸아세테이트 분획물을 로딩하고 혼합용매(클로로포름:에틸아세테이트:물=5:2:1,용량비율)로 용출하였다. 오픈컬럼크로마토그래피에서 분리된 각각의 분취액은 오픈컬럼크로마토그래피와 동일한 용매를 사용한 박층크로마토그래피로 분리하여 유사한 흐름비율(알에프팩터)을 갖는 분획만을 포집하였다. 이들 분획을 다시 오픈컬럼크로마토그래피(노르말헥산:에틸아세테이트=8:1, 용량비율)를 실시하였다. 오픈컬럼크로마토그래피에서 분리된 분획은 직전에 실시한 오픈컬럼크로마토그래피와 동일한 용매를 사용한 박층크로마토그래피로 확인하였다. 박층크로마토그래피 상에서 동일한 흐름비율(알에프팩터)을 갖는 분획만을 포집하였고, 각각의 분획을 가스크로마토그래피(GC, 메스디텍터)로 확인하여 최종적으로 타라제론이 분리된 것을 확인하였다. Thereafter, an ethyl acetate fraction was loaded on a silica gel-filled column and eluted with a mixed solvent (chloroform: ethyl acetate: water = 5: 2: 1, volume ratio). Each aliquot separated from open column chromatography was separated by thin layer chromatography using the same solvent as open column chromatography to capture only fractions having similar flow rates (RF factors). These fractions were further subjected to open column chromatography (normal hexane: ethyl acetate = 8: 1, capacity ratio). The fraction separated from the open column chromatography was confirmed by thin layer chromatography using the same solvent as the open column chromatography. Only fractions having the same flow rate (RF factor) were collected on thin layer chromatography, and each fraction was confirmed by gas chromatography (GC, mass detector) to finally determine that the taragerone was separated.

돌나물의 에틸아세테이트 분획물에서 분리된 타라제론의 순도(purity)를 HPLC(high performance liquid chromatography)를 이용하여 분석한 결과, 96.383%(도 1 A 참조)의 순도를 지닌 것으로 확인되었다. 또한 분리된 화합물을 GC-MS(gas chromatography-mass spectrometer)를 이용하여 분자량 424임을 확인하였다. 이 때, 각각의 결과는 도 1에 나타내었다. 도 1A는 타라제론의 순도를 분석한 HPLC 결과이며, 도 1B는 타라제론의 GC 분석 결과이며, 도 1C는 타라제론을 GC-MS로 분석한 결과를 나타낸다. Purity of the taraserone isolated from the ethyl acetate fraction of dolgi was analyzed by high performance liquid chromatography (HPLC). As a result, it was confirmed that the purity was 96.383% (see FIG. 1A). In addition, the separated compound was confirmed to have a molecular weight of 424 by using a gas chromatography-mass spectrometer (GC-MS). At this time, each result is shown in FIG. FIG. 1A is a result of HPLC analyzing the purity of tarazeron, FIG. 1B is a result of GC analysis of tarazeron, and FIG. 1C shows a result of analysis of tarazeron by GC-MS.

또한 상기 HPLC와 GC 분석조건은 하기 표 1에 나타내었다.In addition, the HPLC and GC analysis conditions are shown in Table 1 below.

　조건Condition HPLCHPLC GC 및 GC-MSGC and GC-MS Stationary
phaseStationary
phase
C₁₈ (250×4.6mm)
C ₁₈ (250 × 4.6mm)
DB-1 (30m, 0.32mm, 5.0μm)
DB-1 (30m, 0.32mm, 5.0μm) Mobile
phaseMobile
phase Acetonitrile : water = 60 : 40
(Flow rate = 1㎖/min)Acetonitrile: water = 60: 40
(Flow rate = 1ml / min) Nitrogen
(Split ratio = 10: 1)Nitrogen
(Split ratio = 10: 1)
Detector
Detector
UV (200nm)
UV (200 nm) GC : FID
GC-MS : mass detectorGC: FID
GC-MS: mass detector Oven
temperatureOven
temperature
40℃
40 ℃
70℃(5min), 10℃/min, 320℃(5min)
70 ° C (5min), 10 ° C / min, 320 ° C (5min) Detector temperatureDetector temperature
-
-
320℃
320 ℃ Injector
temperatureInjector
temperature
-
-
300℃
300 ℃

<< 실시예Example 2.  2. 타라제론Tarazeron 화합물의 물리화학적 성질> Physical and Chemical Properties of Compounds>

¹H-NMR, ¹³C-NMR, HPLC, GC-MS 및 X-ray 결정분석을 이용하여 상기 실시예 1에서 분리한 타라제론 화합물의 물성 및 순도를 분석하였다. 상기 화합물의 물리화학적 특성은 다음과 같다.The physical properties and purity of the tarazone compound isolated in Example 1 were analyzed using ¹ H-NMR, ¹³ C-NMR, HPLC, GC-MS, and X-ray crystallography. The physicochemical properties of the compound are as follows.

실시예Example 2-1.  2-1. ^1One H-H- NMRNMR 및  And ¹³¹³ C-C- NMRNMR

¹H-NMR 500 MHz, CDCl₃: ¹ H-NMR 500 MHz, CDCl ₃ :

δ_H 0.82 (H-28), 0.98 (H-25), 0.91 (H-30), 0.92 (H-27), 0.96 (H-29), 1.10 (H-26), 0.83 (H-23), 0.91 (H-24), 5.55 (dd, J=8.2, 3.1 Hz, H-15), 2.10 및 2.20 (H-2), 2.01 (dd, J=12.9, 3.0 Hz, H-7β), 1.92 (dd, J=14.5, 3.0 Hz), 1.90 (m, H-1), 1.20~1.60 (나머지 16개의 CH protons) δ _H 0.82 (H-28), 0.98 (H-25), 0.91 (H-30), 0.92 (H-27), 0.96 (H-29), 1.10 (H-26), 0.83 (H-23) , 0.91 (H-24), 5.55 ( dd , J = 8.2, 3.1 Hz, H-15), 2.10 and 2.20 (H-2), 2.01 ( dd , J = 12.9, 3.0 Hz, H-7β), 1.92 ( dd , J = 14.5, 3.0 Hz), 1.90 ( m , H-1), 1.20-1.60 (rest 16 CH protons)

¹³C-NMR 125 MHz, CDCl₃: ¹³ C-NMR 125 MHz, CDCl ₃ :

δ_C 217.9 (C-3), 158.0 (C-14), 117.6 (C-15), 56.2 (C-5), 49.2 (C-18), 49.1 (C-9), 48.0(C-4), 41.0 (C-19), 39.3 (C-8), 38.7 (C-1), 38.1 (C-13), 38.1 (C-12), 37.9 (C-17), 37.1 (C-16), 36.2 (C-10), 35.5 (C-7), 34.5 (C-2), 34.0 (C-21), 33.8 (C-29), 33.5 (C-22), 30.3 (C-28), 30.2 (C-26), 29.2 (C-20), 26.5 (C-23), 26.0 (C-27), 21.9 (C-30), 21.7 (C-24), 20.4 (C-6), 17.8 (C-11), 15.2 (C-25)δ _C 217.9 (C-3), 158.0 (C-14), 117.6 (C-15), 56.2 (C-5), 49.2 (C-18), 49.1 (C-9), 48.0 (C-4) , 41.0 (C-19), 39.3 (C-8), 38.7 (C-1), 38.1 (C-13), 38.1 (C-12), 37.9 (C-17), 37.1 (C-16), 36.2 (C-10), 35.5 (C-7), 34.5 (C-2), 34.0 (C-21), 33.8 (C-29), 33.5 (C-22), 30.3 (C-28), 30.2 (C-26), 29.2 (C-20), 26.5 (C-23), 26.0 (C-27), 21.9 (C-30), 21.7 (C-24), 20.4 (C-6), 17.8 ( C-11), 15.2 (C-25)

실시예Example 2-2. X- 2-2. X- rayray 결정분석 Crystal analysis

X-ray intensity 결과는 graphite monochromated Mo Kα radiation(λ = 0.71073Å at 173K)을 사용한 Bruker SMART APEX-II CCD diffractometer로부터 수집하였다. SHELXS-97 및 SHELXS-97를 사용한 F ²에 대한 full-matrix least-squares calculation을 통한 직접 방법(direct method)으로 구조를 해석하였다. 모든 비수소원자(non-hydrogen atoms)는 등방성으로 정제(isotropical refined)하였다. 수소원자는 irrespective carbon atoms(B _iso=1.2B _eq for CH₂ and 1.5B _eq for CH₃ groups)에 위치할 수 있는 ideal positions에 놓았다. 상기 결정구조 결과(Crystallographic data)는 Cambridge Crystallographic Data Center에 예치하였다(Deposition No. CCDC-823740). 결정구조 결과는 www.ccdc.cam.ac.uk/deposit(or from the CCDC, 12 Union Road, Cambridge CB2 1EZ, UK; Fax: +44-01223 336033; e-mail: [email protected])을 통해 무료로 얻을 수 있다.X-ray intensity results were collected from Bruker SMART APEX-II CCD diffractometer using graphite monochromated Mo Kα radiation (λ = 0.71073Å at 173K). The structure was analyzed by direct method through full-matrix least-squares calculation of F ² using SHELXS-97 and SHELXS-97. All non-hydrogen atoms were isotropically refined. Hydrogen atoms are irrespective carbon atoms ( B _iso = 1.2 B _eq for CH ₂ and 1.5 B _eq for CH ₃ in ideal positions that can be placed in groups). The crystal structure data (Crystallographic data) was deposited in the Cambridge Crystallographic Data Center (Deposition No. CCDC-823740). Crystal structure results are available at www.ccdc.cam.ac.uk/deposit(or from the CCDC, 12 Union Road, Cambridge CB2 1EZ, UK; Fax: + 44-01223 336033; e-mail: [email protected] .uk) for free.

타라제론의 성상 : 황색/ 미황색의 투명한 결정Characteristics of tarazeron: Yellow / light yellow transparent crystal

화학식 : C₃₀H₄₈OChemical Formula: C ₃₀ H ₄₈ O

분자량 : 424.68Molecular Weight: 424.68

녹는점 : 174(2) KMelting Point: 174 (2) K

Wavelength : 0.71073 ÅWavelength: 0.71073 Å

Crystal system, space group Monoclinic, P 2₁ Crystal system, space group Monoclinic, P 2 ₁

Unit cell dimensions : a = 12.4896(9)Å α = 90°Unit cell dimensions: a = 12.4896 (9) Å α = 90 °

b = 7.2379(5)Å β = 90.560(2)° b = 7.2379 (5) Å β = 90.560 (2) °

c = 28.093(2)Å γ = 90° c = 28.093 (2) Å γ = 90 °

Volume : 2539.5(3) ų Volume: 2539.5 (3) Å ³

Z, Calculated density : 4, 1.111 Mg/m³ Z, Calculated density: 4, 1.111 Mg / m ³

F(000) : 944F (000): 944

Crystal size : 0.22 × 0.14 × 0.14㎜Crystal size: 0.22 × 0.14 × 0.14㎜

Theta range for data collection : 1.63 to 25.50°Theta range for data collection: 1.63 to 25.50 °

Reflections collected/unique : 19640 / 7718 [R _int=0.0310]Reflections collected / unique: 19640/7718 [ R _int = 0.0310]

Goodness-of-fit of F ² : 1.033Goodness-of-fit of F ² : 1.033

Final R indices [I>2σ(I)] : R ₁=0.0493, wR ₂=0.1259Final R indices [ I > 2σ ( I )]: R ₁ = 0.0493, wR ₂ = 0.1259

R indices (all data) : R ₁=0.0604, wR ₂=0.1345 R indices (all data): R ₁ = 0.0604, wR ₂ = 0.1345

Largest diff. peak and hole : 0.468 and -0.212 e Å^-3 Largest diff. peak and hole: 0.468 and -0.212 e Å ^-3

<< 실시예Example 3.  3. 타라제론Tarazeron 화합물의  Compound ADHADH 와 Wow ALDHALDH 활성 측정 - 알코올 및  Activity measurement-alcohol and 아세트알데하이드에Acetaldehyde 대한 농도 확인> Concentration check>

알코올 및 아세트알데하이드 분석 키트(kit)를 사용하여 타라제론 화합물의 ADH와 ALDH 활성 측정 시험을 하였다(알코올과 아세트알데하이드의 함량이 낮게 나올수록 ADH와 ALDH의 활성이 높은 것으로 확인됨). Alcohol and acetaldehyde assay kit (kit) was used to test the ADH and ALDH activity of the taraserone compound (the lower the content of alcohol and acetaldehyde, the higher the ADH and ALDH activity was confirmed).

이를 위해 각각의 시료를 DMSO(dimethyl sulfoxide)에 하기 표 2의 조건으로 녹여 사용하였으며, 타라제론 화합물 처리군, 대조군(DMSO 처리군), 무처리군(생리식염수[Saline] 처리군), DHM(dihydromyricetin, 양성대조군), 돌나물 메탄올 추출물 및 돌나물 에틸아세테이트 분획물을 처리하였을 때의 에탄올과 아세트알데하이드의 농도를 자외선분광광도기(UV spectrophotometer)를 사용하여 340nm에서 흡광도를 측정하였고, 이에 대한 결과는 하기 표 2에 나타내었다. 이 때, 돌나물 메탄올 추출물과 돌나물 에틸아세테이트 분획물의 결과는 대조군 대비 타라제론 화합물의 활성에 대한 결과만을 나타내었다(표 3 참조).To this end, each sample was dissolved in DMSO (dimethyl sulfoxide) under the conditions shown in Table 2, and used as a taserone compound treated group, a control group (DMSO treated group), an untreated group (saline saline [Saline] treated group), and DHM ( The concentrations of ethanol and acetaldehyde when dihydromyricetin (positive control), dolmul methanol extract and dolmul ethyl acetate fraction were measured at 340 nm using an UV spectrophotometer, and the results are shown in the following table. 2 is shown. At this time, the results of the methanol extract and dolmul ethyl acetate fraction of the dolmul showed only the results for the activity of the taraserone compound compared to the control (see Table 3).

처리
농도

process
density 에탄올 (mM)Ethanol (mM) 아세트알데하이드 (mM)Acetaldehyde (mM)
생리
식염수
Physiology
Saline
DMSO
DMSO
타라
제론
Tara
Xeron
DHM
DHM
돌나물 메탄올 추출물
Sedum methanol extract 돌나물 에틸
아세
테이트
분획물Sedum ethyl
Ace
Tate
Fraction
생리
식염수
Physiology
Saline
DMSO
DMSO
타라
제론
Tara
Xeron
DHM
DHM
돌나물 메탄올 추출물
Sedum methanol extract 돌나물 에틸
아세
테이트
분획물Sedum ethyl
Ace
Tate
Fraction
0
0 519.04±19.01519.04 ± 19.01 519.21±9.87519.21 ± 9.87
^--
--
-
-
-
- 584.28±15.83584.28 ± 15.83 584.28±15.83584.28 ± 15.83
^--
--
-
-
-
-
100μM
100 μM
-
-
-
- 446.86±2.44446.86 ± 2.44 520.01±11.82520.01 ± 11.82
-
-
-
-
^--
-
- 507.51±4.58507.51 ± 4.58 590.38±9.15590.38 ± 9.15 --
-
-
250μM
250 μM
-
-
-
- 277.35±2.58277.35 ± 2.58 515.73±9.38515.73 ± 9.38
-
-
-
-
^--
-
- 367.13±1.87367.13 ± 1.87 588.92±16.83588.92 ± 16.83 --
-
-
500μM
500 μM
-
-
-
- 224.79±2.45224.79 ± 2.45 520.82±12.91520.82 ± 12.91
-
-
-
-
^--
-
- 266.26±5.38266.26 ± 5.38 634.23±18.34634.23 ± 18.34 --
-
-
1mM
1 mM
-
-
-
- 106.57±2.43106.57 ± 2.43 522.03±12.65522.03 ± 12.65
-
-
-
-
^--
-
- 73.05±2.4573.05 ± 2.45 660.13±10.54660.13 ± 10.54 --
-
-
3mM
3mM
-
-
-
- 88.09±3.4388.09 ± 3.43 122.03±10.49122.03 ± 10.49
-
-
-
-
^--
-
- 58.29±0.0958.29 ± 0.09 106.60±5.87106.60 ± 5.87 --
-
-
5mM
5mM
-
-
-
- 86.32±2.9186.32 ± 2.91 121.23±9.93121.23 ± 9.93
-
-
-
-
^--
-
- 58.05±2.0858.05 ± 2.08 108.08±6.24108.08 ± 6.24 --
-
-

상기 표 2의 결과를 확인하면, 타라제론 화합물을 처리함으로서 에탄올과 아세트알데하이드의 농도가 현저하게 감소하였음을 확인할 수 있다. 이상의 결과로부터 ADH와 ALDH 활성을 50% 상승시킬 수 있는 타라제론의 농도(EC₅₀)는 각각 512.42±3.12μM과 500.16±3.23μM인 것으로 확인되었다.Checking the results in Table 2, it can be seen that the concentration of ethanol and acetaldehyde was significantly reduced by treating the tarazerone compound. From the above results, it was confirmed that the concentration of tarazeron (EC ₅₀ ) which can increase ADH and ALDH activity by 50% was 512.42 ± 3.12μM and 500.16 ± 3.23μM, respectively.

또한, 상기 결과를 통해 하기 표 3에 타라제론 화합물의 ADH와 ALDH 활성값을 상승시키는 효과를 대조군에 대한 상대적인 상승률로 나타내었다(에탄올과 아세트알데하이드의 농도를 이용해서, ADH와 ALDH 활성값은 대조구에 대한 상대적인 활성도 증가율로 표시함).In addition, through the above results, the effect of increasing the ADH and ALDH activity values of the taraserone compound in Table 3 is shown as a relative increase rate with respect to the control group (using the concentration of ethanol and acetaldehyde, the ADH and ALDH activity values were the control group. As a percentage increase in activity relative to).

조건
Condition 대조군 대비 타라제론 화합물의 활성 (fold)Activity of foldase compound compared to the control (fold) ADHADH ALDHALDH 타라제론 1mM Tarazeron 1mM 4.94.9 9.29.2 타라제론 3mMTarazeron 3mM 5.95.9 11.511.5 타라제론 5mMTarazeron 5mM 6.06.0 11.511.5 돌나물 메탄올 추출물
(100mg/㎖)Sedum methanol extract
(100mg / ml)
2.2
2.2
1.9
1.9 돌나물 에틸아세테이트 분획물 (100mg/㎖)Sedum Ethyl Acetate Fraction (100mg / mL)
3.3
3.3
4.1
4.1

상기 표 3의 결과를 확인하면, 타라제론 화합물의 처리에 따라 1mM, 3mM, 5mM의 타라제론 화합물 처리군의 ADH 활성은 대조군 대비 4.9, 5.9, 6.0배가 증가하였고, ALDH 활성은 대조군 대비 9.2, 11.5, 11.5배 증가하는 것으로 확인되어 타라제론 화합물의 숙취해소 효과가 매우 우수함을 알 수 있었다. 또한, 상기 효과는 돌나물 메탄올 추출물과 돌나물 에틸아세테이트 분획물의 효과보다 우수한 것으로 확인되었다. According to the results of Table 3, the ADH activity of the 1mM, 3mM, and 5mM tarazone compound treated groups increased by 4.9, 5.9, 6.0 times compared to the control group, and the ALDH activity was 9.2, 11.5 compared to the control group. It was confirmed that the increase of 11.5 times, the hangover relief effect of the taraserone compound was found to be very excellent. In addition, the effect was confirmed to be superior to the effect of the methanol extract and dolmul ethyl acetate fraction.

<< 실시예Example 4.  4. 타라제론Tarazeron 화합물 및 에탄올을 섭취한 동물의 혈청에서의 알코올과  Alcohol in the serum of the animals 아세트알데하이드의Acetaldehyde 농도 확인> Check the concentration>

타라제론 화합물의 ADH와 ALDH 활성을 동물 실험을 통해 확인하였다. 이를 위해, 각 군당 5마리의 ICR 웅성 마우스(20~25g)에 40% 에탄올(5㎖/kg body weight)과 타라제론 화합물을 경구투여하고, 3시간 동안 30분 간격으로 혈청으로부터 알코올과 아세트알데하이드의 농도를 실시예 3에서 사용한 키트를 이용하여 측정하였으며 이에 대한 결과를 도 2에 나타내었다. The ADH and ALDH activities of the tarazerone compounds were confirmed through animal experiments. To this end, 5 ICR male mice (20-25 g) in each group were orally dosed with 40% ethanol (5 ml / kg body weight) and tarazerone compound, and alcohol and acetaldehyde from serum at 30 minute intervals for 3 hours. The concentration of was measured using the kit used in Example 3 and the results are shown in FIG. 2.

도 2를 참고하면, 타라제론 화합물을 처리한지 1시간 후부터 혈중 알코올 농도나 아세트알데하이드의 변화가 현저하게 차이가 나는 것으로 확인되었다. 반면, 생리식염수(Saline, Group5)를 처리한 군이나 3mM DHM(양성대조군, Group 3)의 혈중알코올 농도나 아세트알데하이드는 대조군(DMSO, Group 4)보다는 혈중 알코올 농도나 아세트알데하이드가 거의 감소되지 않는 것으로 나타났다. Referring to FIG. 2, it was confirmed that a change in blood alcohol concentration or acetaldehyde was significantly different from 1 hour after treatment with the taraserone compound. On the other hand, serum alcohol concentration or acetaldehyde of the group treated with saline (Saline, Group 5) or 3 mM DHM (positive control group, Group 3) showed little decrease in blood alcohol concentration or acetaldehyde than the control group (DMSO, Group 4). Appeared.

또한, 상기 도 2의 결과를 대조군 대비 혈중 알코올 농도의 감소율(%)로 하기 표 4에 표현하였다. In addition, the results of FIG. 2 are expressed in Table 4 below as a reduction rate (%) of blood alcohol concentration compared to the control group.

조건Condition 대조군 대비 혈중 알코올 농도의 감소율 (%)% Decrease in blood alcohol concentration compared to the control group
타라제론 500μM (Groups 1)
+ 40% 에탄올
Tarazeron 500μM (Groups 1)
+ 40% ethanol 1시간 후After 1 hour 30.130.1 2시간 후After 2 hours 28.528.5 3시간 후After 3 hours 20.020.0
타라제론 1mM (Groups 2)
+ 40% 에탄올
Tarazeron 1mM (Groups 2)
+ 40% ethanol 1시간 후After 1 hour 32.832.8 2시간 후After 2 hours 58.658.6 3시간 후After 3 hours 66.766.7

상기 표 4의 결과를 참고하면, 타라제론 500μM과 1mM이 처리된 군(Groups 1 및 2)의 혈중 알코올 농도를 대조군(Group 4)과 대비하여 비교하였을 때, 타라제론 500μM(Group1)에서 1, 2, 3시간 째에 알코올의 농도가 대조군 대비 30.1%, 28.5%, 20.0%로 감소하였고, 타라제론 1mM(Group2)에서는 1, 2, 3시간 째에 알코올의 농도가 32.8%, 58.6%, 66.7%로 감소하여 본 발명의 화합물인 타라제론을 에탄올과 함께 섭취할 때에 혈중 알코올 농도를 감소시키는 효과가 우수한 것으로 확인되었다. Referring to the results of Table 4, when compared to the blood alcohol concentration of the group (Groups 1 and 2) treated with tarazeron 500μM and 1mM compared to the control group (Group 4), 1, in Tarazeron 500μM (Group1) At 2 and 3 hours, the alcohol concentration decreased to 30.1%, 28.5%, and 20.0% compared to the control group, and at 1, 2, and 3 hours in tarazeron 1 mM (Group2), the alcohol concentration was 32.8%, 58.6%, and 66.7. It was confirmed that the effect of reducing the alcohol concentration in blood when ingested with ethanol, the compound of the present invention reduced to% by ethanol.

마찬가지로, 상기 도 2의 결과를 대조군 대비 혈중 아세트알데하이드 농도의 감소율(%)로 하기 표 5에 표현하였다. Similarly, the results of FIG. 2 are expressed in Table 5 below as a percentage reduction rate of acetaldehyde concentration in blood compared to the control group.

조건Condition 대조군 대비 혈중 아세트알데하이드 농도의 감소율 (%)% Decrease in blood acetaldehyde concentration compared to the control group
타라제론 500μM (Groups 1)
+ 40% 에탄올
Tarazeron 500μM (Groups 1)
+ 40% ethanol 1시간 후After 1 hour 23.123.1 2시간 후After 2 hours 38.138.1 3시간 후After 3 hours 52.252.2
타라제론 1mM (Groups 2)
+ 40% 에탄올
Tarazeron 1mM (Groups 2)
+ 40% ethanol 1시간 후After 1 hour 57.757.7 2시간 후After 2 hours 54.854.8 3시간 후After 3 hours 56.656.6

상기 표 5의 결과를 확인하면, 타라제론 500μM(Group 1)에서 대조군(Group 4)과 비교하여 1, 2, 3시간 째에 혈중 아세트알데하이드의 농도가 23.1, 38.1, 52.2% 감소하였고, 타라제론 1mM(Group2)에서는 대조군(Group 4)과 비교하여 1, 2, 3시간 째에 혈중 아세트알데하이드의 농도가 57.7, 54.8, 56.6% 감소하는 것으로 나타나 본 발명의 화합물인 타라제론을 에탄올과 함께 섭취할 때에 혈중아세트알데히드 농도를 감소시키는 효과가 우수한 것으로 확인되었다. When the results of Table 5 were confirmed, the concentration of acetaldehyde in the blood was reduced by 23.1, 38.1, and 52.2% at 1, 2, and 3 hours compared to the control group (Group 4) at 500 μM of the taraserone (Group 1). In 1 mM (Group 2), the concentration of acetaldehyde in blood was decreased by 57.7, 54.8, and 56.6% at 1, 2 and 3 hours compared to the control group (Group 4). It was confirmed that the effect of reducing the blood acetaldehyde concentration at the time was excellent.

<< 실시예Example 5.  5. 타라제론Tarazeron 화합물의  Compound ADHADH 와 Wow ALDHALDH 활성 측정 - 에탄올을 섭취한 동물의 간에서의  Determination of activity-in liver of animals fed ethanol ADHADH 와 ALDH의 And of ALDH RNARNA 발현 확인> Expression confirmation>

상기 실시예 4의 마우스에서 타라제론 화합물과 40% 에탄올이 투여된 지 3시간 후에 간조직을 추출하여, ADH, ALDH의 RNA 발현 정도를 확인하였다.In the mouse of Example 4, liver tissues were extracted 3 hours after the administration of the tarazerone compound and 40% ethanol, and the RNA expression levels of ADH and ALDH were confirmed.

이를 위해, 상기 간조직을 TRIzol 용액(Invitrogen, Carlsbad, CA, USA)에 녹여 총 RNA를 추출하였으며, one-step RT-PCT kit(Qiagen, Valencia, CA, USA)를 이용하여 RT-PCR(reverse transcription polymerase chain reaction)을 수행하였다.To this end, the liver tissue was dissolved in TRIzol solution (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) to extract the total RNA, RT-PCR (reverse) using a one-step RT-PCT kit (Qiagen, Valencia, CA, USA) transcription polymerase chain reaction.

이 때 RT-PCR에 사용된 프라이머(primer)는 하기와 같다. In this case, primers used for RT-PCR are as follows.

ADH1 Left: 5'-GCAAGCTTTCCGTGAGAAAC-3'ADH1 Left: 5'-GCAAGCTTTCCGTGAGAAAC-3 '

ADH1 Right: 5'-TCCACCAAAGGGCATAGAAG-3'ADH1 Right: 5'-TCCACCAAAGGGCATAGAAG-3 '

ALDH2 Left: 5'-CAGGTTCCACTGAGGTTGGT-3' ALDH2 Left: 5'-CAGGTTCCACTGAGGTTGGT-3 '

ALDH2 Right: 5'-ATGCCATCTTTGACGTCTCC-3'ALDH2 Right: 5'-ATGCCATCTTTGACGTCTCC-3 '

β-actin Left: 5'-CTGACCGAGCGTGGCTAC-3' β-actin Left: 5'-CTGACCGAGCGTGGCTAC-3 '

β-actin Right: 5'-CCTGCTTGCTGATCCACA-3'β-actin Right: 5'-CCTGCTTGCTGATCCACA-3 '

또한, RT-PCR의 조건은 하기와 같다.In addition, the conditions of RT-PCR are as follows.

95℃ for 3min for denaturation, 1 cycle, 95 ℃ for 3min for denaturation, 1 cycle,

94℃ for 45s, 56℃ for 45s annealing, 72℃ for 1min extension, 25 cycles, 94 ° C for 45s, 56 ° C for 45s annealing, 72 ° C for 1min extension, 25 cycles,

72℃ for 10min final extension, 1 cycle. 72 ° C for 10min final extension, 1 cycle.

이 후, 상기 RT-PCR 결과물은 EtBr(ethidium bromide)로 염색된 1.2% 아가로오스 겔에 전기영동하여 각 유전자의 발현량을 비교하였으며, 이에 대한 결과를 도 3에 나타내었다. Afterwards, the RT-PCR result was subjected to electrophoresis on 1.2% agarose gel stained with EtBr (ethidium bromide) to compare the expression levels of each gene, and the results are shown in FIG. 3.

도 3을 참고하면, 타라제론 화합물을 각각 500μM 및 1mM로 처리한 Group 1 및 2에서는 ADH, ALDH 발현량이 알코올 섭취 30분 이후부터 강하게 발현하고 있으며, 시간이 흐를수록 그 발현량이 더 증가하는 것으로 나타났다. 반면, 양성대조군이나 대조군 및 생리식염수가 처리된 Group 3~5에서는 1시간 째에 ADH, ALDH의 발현이 약하게 증가하다가 곧 감소하는 것으로 나타났다. 따라서, 상기 결과를 통해서도 실시예 3 및 4의 결과와 마찬가지로 본 발명의 타라제론 화합물이 ADH, ALDH의 활성을 증가시키는 효과가 있음을 확인할 수 있었다. Referring to FIG. 3, in Groups 1 and 2, in which the tarazerone compound was treated with 500 μM and 1 mM, respectively, ADH and ALDH expression levels were strongly expressed after 30 minutes of alcohol intake. . On the other hand, in the positive control group, the control group, and saline-treated group 3 ~ 5, the expression of ADH and ALDH increased slightly after 1 hour and then decreased. Therefore, it was confirmed from the above results that the thyraseron compound of the present invention has an effect of increasing the activity of ADH and ALDH, similarly to the results of Examples 3 and 4.

<< 실시예Example 6. 에탄올을 섭취한 동물의 간에서의 항산화 활성 확인> 6. Confirmation of Antioxidant Activity in the Liver of Animals Consuming Ethanol>

상기 실시예 4의 마우스에서 타라제론 화합물과 40% 에탄올이 투여된 지 0.5, 1, 2 및 3시간 후에 간조직을 추출하여, Applied Bioanalytical Labs(Bradenton, FL, USA)의 키트를 이용하여 CAT(catalase), SOD(superoxide dismutase), GSH(reduced glutathione)의 활성을 확인하였으며, 이에 대한 결과는 하기 표 6에 나타내었다. 0.5, 1, 2 and 3 hours after the administration of the tarazerone compound and 40% ethanol in the mouse of Example 4, the liver tissue was extracted, using a kit of Applied Bioanalytical Labs (Bradenton, FL, USA) CAT ( catalase), SOD (superoxide dismutase), GSH (reduced glutathione) was confirmed the activity, the results are shown in Table 6 below.

조건Condition Experimental time (h)Experimental time (h) 0.50.5 1One 22 33

CAT
(U/mg protein)

CAT
(U / mg protein) Group 1Group 1 12.88±0.0912.88 ± 0.09 13.01±0.1213.01 ± 0.12 13.14±0.1213.14 ± 0.12 13.27±0.0113.27 ± 0.01 Group 2Group 2 14.65±0.0214.65 ± 0.02 14.78±0.0214.78 ± 0.02 14.94±0.0214.94 ± 0.02 14.95±0.0114.95 ± 0.01 Group 3Group 3 10.29±0.0110.29 ± 0.01 10.19±0.0110.19 ± 0.01 10.24±0.0510.24 ± 0.05 11.64±0.0511.64 ± 0.05 Group 4Group 4 10.28±0.0210.28 ± 0.02 10.12±0.0210.12 ± 0.02 10.14±0.0310.14 ± 0.03 10.53±0.0310.53 ± 0.03 Group 5Group 5 10.85±0.0410.85 ± 0.04 10.27±0.0310.27 ± 0.03 10.28±0.0310.28 ± 0.03 10.67±0.0310.67 ± 0.03 에탄올 섭취전Before ethanol intake 15.87±0.00 15.87 ± 0.00

SOD
(U/mg protein)
　

SOD
(U / mg protein)
Group 1Group 1 10.80±0.0010.80 ± 0.00 10.90±0.0010.90 ± 0.00 11.55±0.0711.55 ± 0.07 12.52±0.0112.52 ± 0.01 Group 2Group 2 10.80±0.0010.80 ± 0.00 11.84±0.0011.84 ± 0.00 12.53±0.0012.53 ± 0.00 12.53±0.0012.53 ± 0.00 Group 3Group 3 10.80±0.0010.80 ± 0.00 11.53±0.0011.53 ± 0.00 12.37±0.0312.37 ± 0.03 12.50±0.0212.50 ± 0.02 Group 4Group 4 10.80±0.0010.80 ± 0.00 10.46±0.0010.46 ± 0.00 10.36±0.0010.36 ± 0.00 10.37±0.0210.37 ± 0.02 Group 5Group 5 10.80±0.0010.80 ± 0.00 10.46±0.0010.46 ± 0.00 10.37±0.0110.37 ± 0.01 10.37±0.0110.37 ± 0.01 에탄올 섭취전Before ethanol intake 12.53±0.0012.53 ± 0.00

GSH
(μM/g protein)
　

GSH
(μM / g protein)
Group 1Group 1 4.53±0.014.53 ± 0.01 4.69±0.114.69 ± 0.11 4.85±0.004.85 ± 0.00 4.89±0.014.89 ± 0.01 Group 2Group 2 4.80±0.014.80 ± 0.01 4.85±0.064.85 ± 0.06 4.99±0.014.99 ± 0.01 5.03±0.015.03 ± 0.01 Group 3Group 3 4.83±0.014.83 ± 0.01 4.69±0.024.69 ± 0.02 4.78±0.014.78 ± 0.01 4.80±0.004.80 ± 0.00 Group 4Group 4 3.70±0.023.70 ± 0.02 3.13±0.023.13 ± 0.02 3.17±0.013.17 ± 0.01 3.21±0.023.21 + 0.02 Group 5Group 5 3.71±0.013.71 ± 0.01 3.14±0.013.14 ± 0.01 3.18±0.013.18 ± 0.01 3.21±0.013.21 ± 0.01 에탄올 섭취전Before ethanol intake 5.15±0.015.15 ± 0.01 Group 1; 500μM taraxerone + 40% 에탄올
Group 2; 1mM taraxerone + 40% 에탄올
Group 3; 3mM DHM + 40% 에탄올 (positive control)
Group 4; DMSO + 40% 에탄올 (control)
Group 5; saline + 40% 에탄올Group 1; 500 μM taraxerone + 40% ethanol
Group 2; 1 mM taraxerone + 40% ethanol
Group 3; 3 mM DHM + 40% ethanol (positive control)
Group 4; DMSO + 40% ethanol (control)
Group 5; saline + 40% ethanol

상기 표 6의 결과를 참고하면, Group 3~5는 에탄올 섭취 후 간 조직에서의 CAT, SOD, GSH의 농도가 0.5시간 째에 크게 감소하였으며, 3시간이 지나도 상기 CAT, SOD, GSH의 농도가 거의 유사한 것을 확인할 수 있었다. 반면, 본 발명의 타라제론 화합물을 섭취한 Group 1 및 2는 에탄올 섭취 후 간 조직에서의 CAT, SOD, GSH의 농도가 0.5시간 째에도 많이 줄어들지 않는 것을 알 수 있으며, 시간이 흐를수록 에탄올을 섭취하기 전의 농도로 빠르게 회복되는 것을 확인할 수 있었다. 따라서 타라제론 화합물이 ADH 및 ALDH 활성 뿐만 아니라, 항산화 활성 및 간보호 효과도 우수한 것으로 나타났다. Referring to the results of Table 6, Groups 3 to 5 significantly decreased the concentrations of CAT, SOD and GSH in liver tissue after ingesting ethanol at 0.5 hours, and the concentrations of CAT, SOD and GSH were increased even after 3 hours. It was found to be almost similar. On the other hand, Group 1 and 2 ingesting the taraserone compound of the present invention can be seen that the concentration of CAT, SOD, GSH in the liver tissue does not decrease much even after 0.5 hours, ethanol intake over time It was confirmed that the recovery quickly to the concentration before. Therefore, the taraseron compound was shown to be excellent in antioxidant activity and hepatoprotective effect, as well as ADH and ALDH activity.

<< 실시예Example 7.  7. 렛트에To let 대한  About 급성경구투여Acute oral administration 독성실험> Toxicity Test>

6주령의 특정병원부재(SPF) SD계 랫트를 사용하여 다음과 같이 급성독성실험을 실시하였다. 먼저 상기 렛드를 20마리씩 준비하여, 대조군(무처리군)에 10마리를 두고 나머지 10마리의 렛드에 타라제론 화합물을 용해시켜 5g/㎏/㎖의 용량으로 단회 경구 투여하였다. 이 후, 상기 타라제론 화합물을 투여한 후의 렛드의 폐사 여부, 임상증상, 체중변화를 관찰하고 혈액학적 검사와 혈액생화학적 검사를 실시하였으며, 부검하여 육안으로 복강장기와 흉강장기의 이상 여부를 관찰하였다. 그 결과, 대조군 및 타라제론을 투여한 모든 동물에서 특기할 만한 임상증상이나 폐사된 동물은 없었으며, 체중변화, 혈액검사, 혈액생화학 검사, 부검소견 등에서도 독성변화는 관찰되지 않았다. 따라서 본 발명의 타라제론 화합물은 경구 투여 최소 치사량(LD₅₀값)이 5g/㎏ 이상인 안전한 물질로 판단되었다.Acute toxicity test was performed using 6 week-old SPF SD rats as follows. First, the 20 red rats were prepared, 10 rats were placed in a control group (untreated group), and the tarazone compound was dissolved in the remaining 10 red rats and administered once orally at a dose of 5 g / kg / ml. Subsequently, the mortality, clinical symptoms, and weight change of the red after the administration of the taraserone compound were observed, and a hematological and hematological examination was performed. The necropsy was performed to visually observe the abdominal and thoracic organ abnormalities. It was. As a result, no significant clinical symptoms or dead animals were noted in all the animals treated with the control and tarazerone, and no toxic changes were observed in weight changes, blood tests, blood biochemistry tests, and autopsy findings. Therefore, the taraserone compound of the present invention was determined to be a safe substance having a minimum lethal dose (LD ₅₀ value) of 5 g / kg or more.

<< 제조예Manufacturing example 1.  One. 산제의Sanje 제조> Manufacturing>

본 발명의 타라제론 화합물 30㎎30 mg of taraserone compound of the present invention

유당 100㎎Lactose 100mg

탈크 10㎎Talc 10mg

상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.The above ingredients are mixed and filled in an airtight cloth to prepare a powder.

<< 제조예Manufacturing example 2. 정제의 제조> 2. Manufacturing of Tablets>

본 발명의 타라제론 화합물 100㎎100 mg of taraserone compound of the present invention

옥수수전분 100㎎Corn Starch 100mg

유당 100㎎Lactose 100mg

스테아린산 마그네슘 2㎎2 mg magnesium stearate

상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.After mixing the above components, tablets are prepared by tableting according to a conventional method for preparing tablets.

<< 제조예Manufacturing example 3.  3. 액제의Liquid 제조> Manufacturing>

본 발명의 타라제론 화합물 300㎎300 mg of taraserone compound of the present invention

이성화당 10g10 g of isomerized sugar

만니톨 5gMannitol 5g

정제수 적량Purified water

통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체 100㎖로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.According to the conventional method of preparing a liquid solution, each component is added to the purified water to dissolve it, and lemon flavor is added thereto, then the above ingredients are mixed, adjusted to 100 ml by adding purified water, and then filled into a brown bottle and sterilized to prepare a liquid solution. do.

<< 제조예Manufacturing example 4. 건강식품의 제조> 4. Manufacturing of Health Foods>

본 발명의 타라제론 화합물 1000㎎1000 mg of taraserone compound of the present invention

비타민 A 아세테이트 70㎍70 μg of vitamin A acetate

비타민 E 1.0㎎Vitamin E 1.0mg

비타민 B1 0.13㎎Vitamin B1 0.13mg

비타민 B2 0.15㎎Vitamin B2 0.15mg

비타민 B6 0.5㎎Vitamin B6 0.5mg

비타민 B12 0.2㎍0.2 µg of vitamin B12

비타민 C 10㎎Vitamin C 10mg

비오틴 10㎍10 μg biotin

니코틴산아미드 1.7㎎Nicotinamide 1.7mg

엽산 50㎍Folate 50 ㎍

판토텐산 칼슘 0.5㎎Calcium Pantothenate 0.5mg

무기질 혼합물 적량Mineral mixture

황산제1철 1.75㎎Ferrous Sulfate 1.75mg

산화아연 0.82㎎Zinc Oxide 0.82mg

탄산마그네슘 25.3㎎Magnesium Carbonate 25.3mg

제1인산칼륨 15㎎15 mg potassium monophosphate

제2인산칼슘 55㎎Dicalcium Phosphate 55mg

구연산칼륨 90㎎Potassium Citrate 90mg

탄산칼슘 100㎎Calcium Carbonate 100mg

염화마그네슘 24.8㎎Magnesium chloride 24.8mg

상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 제제예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.The composition ratio of the above-mentioned vitamin and mineral mixtures is composed of relatively suitable ingredients for health foods as a preferred formulation, but the formulation ratio may be arbitrarily modified, and the above ingredients may be mixed according to a general health food manufacturing method. The granules may be prepared and used for preparing a health food composition according to a conventional method.

<< 제제예Formulation example 5. 건강 음료의 제조> 5. Manufacture of Health Drinks>

본 발명의 타라제론 화합물 1000㎎1000 mg of taraserone compound of the present invention

구연산 100㎎Citric Acid 100mg

올리고당 100gOligosaccharide 100g

매실농축액 2gPlum concentrate 2g

타우린 1g1 g of taurine

정제수를 가하여 전체 900㎖Add 900 ml of purified water

통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2ℓ 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다. The above components were mixed according to a conventional health drink manufacturing method, and the mixture was heated at 85 DEG C for about 1 hour with stirring, and the solution thus prepared was filtered to obtain a sterilized 2-liter container, which was sealed and sterilized, &Lt; / RTI &gt;

상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 제제예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용 용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.Although the composition ratio is a composition suitable for a preferred beverage in a preferred formulation example, the compounding ratio may be arbitrarily modified according to regional and ethnic preferences such as demand hierarchy, demand country, and use purpose.

Claims (5)

돌나물(Sedum sarmentosum) 추출물로부터 분리된 하기 화학식 1의 타라제론(taraxerone)을 함유하는 숙취해소용 조성물.
[화학식 1]

Hangover ( Sedum sarmentosum) Hangover composition containing the taraxerone (taraxerone) of the formula (1) isolated from the extract.
[Formula 1]

삭제delete 돌나물(Sedum sarmentosum) 추출물로부터 분리된 하기 화학식 1의 타라제론(taraxerone)을 함유하는 숙취해소용 건강기능식품.
[화학식 1]

Hangingul ( Sedum sarmentosum) health functional food for hangover relief containing the taraxerone (taraxerone) of the formula 1 isolated from the extract.
[Formula 1]

삭제delete 제3항에 있어서,
상기 건강기능식품은 드링크제, 육류, 소세지, 빵, 캔디류, 스넥류, 면류, 아이스크림을 포함한 낙농제품, 스프, 이온음료를 포함한 음료수 및 비타민 복합제를 포함한 영양 공급용 제품으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 건강기능식품.
The method of claim 3,
The health functional food is selected from the group consisting of nutritional products, including drinks, meat, sausages, bread, candy, snacks, noodles, dairy products including ice cream, soups, beverages including ionic beverages and vitamin complexes. Health functional food.

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