KR101238836B1 - Phamaceutical or food composition for treating or preventing obesity disease comprising a mixture of lactic acid bacteria - Google Patents
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Abstract
본 발명은 혼합 유산균을 포함하는 비만 또는 비만 관련 질환 치료 또는 예방용 약제학적 조성물 또는 식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 혼합유산균 배양액을 포함하는 비만 관련 질환의 조성물은 각각 다른 기능과 특성을 나타내는 유산균들을 혼합한 것으로, 체중 감소, 혈중 지질 성분의 수치 저하, 간 기능 수치 호전 및 장내 유해 효소 활성의 저해로 인한 장내 총 유산균 수를 증가시키는 효과를 나타내고, 체중을 감소시키면서도 장기능, 간기능을 활성화할 뿐만 아니라, 아밀라아제 활성을 감소시켜 식욕을 억제하면서, 리파아제 활성을 증가시켜 지방 분해를 촉진시켜 비만 관련 질환의 치료 및 예방용 약제학적 조성물 및 기능성 식품으로 이용될 수 있다. The present invention relates to a pharmaceutical composition or a food composition for treating or preventing obesity or obesity-related diseases, including mixed lactic acid bacteria.
The composition of the obesity-related disease comprising the mixed lactic acid bacteria culture medium according to the present invention is a mixture of lactic acid bacteria showing different functions and characteristics, respectively, weight loss, lowering of blood lipid components, improving liver function and inhibiting intestinal harmful enzyme activity It has the effect of increasing the total number of intestinal lactic acid bacteria, and not only activates intestinal function and liver function, but also decreases amylase activity while suppressing appetite, increasing lipase activity and promoting fat breakdown It can be used as a pharmaceutical composition and a functional food for the treatment and prevention of diseases.
Description
본 발명은 혼합 유산균을 포함하는 비만 또는 비만 관련 질환 치료 또는 예방용 약제학적 조성물 또는 식품 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a pharmaceutical composition or a food composition for treating or preventing obesity or obesity-related diseases, including mixed lactic acid bacteria.
최근 현대인들은 고열량의 식사가 주를 이루는 식생활로의 변화 및 운동 부족, 스트레스의 증가에 의해 인체의 항상성이 교란되고 있으며, 이에 따라 각종 비만 및 관련 대사성 질환이 급증하고 있다. 관련 대사성 질환은 2형 당뇨병 및 고혈압뿐 아니라, 뇌졸중, 동맥경화 등 심혈관 질환과 각종 암에 이르기까지 인류의 건강 및 생명을 위협하는 심각한 질환을 포함한다. 20세기 후반에 비하면 비만율은 5~10배 증가하였다. 특히 중ㆍ장년층의 복부비만은 만성 대사 증후군의 직접적인 원인이 될 수 있어 항상 주의가 필요하다. 팔, 다리에 축적된 지방은 잘 분해ㆍ흡수되지 않아 용모는 보기 싫게 하여도 건강에는 큰 지장이 없지만, 복부 비만의 경우는 지방이 쉽게 용해되어 혈액 속에 흡수되므로 대사 증후군의 원인이 될 수 있다.Recently, the homeostasis of the human body has been disturbed by the change in diet, the lack of exercise, and the increase of stress, which are mainly caused by high-calorie meals, and accordingly, various obesity and related metabolic diseases are rapidly increasing. Related metabolic diseases include not only
세계보건기구(WHO)에서는 1996년도에 비만을 질병으로 분류하고, 이를 예방 내지 치료해야 할 대상으로 명시하였다. In 1996, the World Health Organization (WHO) classified obesity as a disease and specified it as a target for prevention or treatment.
현재까지 알려진 비만치료제로는 제니칼(Xenical, 로슈제약회사, 스위스), 리덕틸(Reductil, 에보트사, 미국), 엑소리제(Exolise, 아토파마, 프랑스) 등으로 크게 식욕억제제, 에너지소비 촉진제, 지방흡수억제제로 분류되며, 대부분의 비만치료제는 시상하부와 관련된 신경전달물질을 조절함으로써 식욕을 억제하는 식욕억제제이다. 그러나, 종래의 치료제들은 심장질환, 호흡기질환, 신경계질환 등의 부작용과 함께 그 효능의 지속성도 낮아, 더욱 개선된 비만치료제의 개발이 필요하고 또한 현재 개발되고 있는 제품도 부작용 없이 만족할 만한 치료효과를 가지는 치료제는 없어 새로운 비만치료제의 개발이 요구되고 있다.
Known obesity treatments such as Xenical (Roche Pharmaceuticals, Switzerland), Reductil (Eboth, USA), Exolise (Atopama, France), etc. Classified as inhibitors, most anti-obesity agents are appetite suppressants that suppress appetite by regulating neurotransmitters associated with the hypothalamus. However, conventional therapeutics have low side effects such as heart disease, respiratory disease, and neurological disease, and thus have low sustainability. Therefore, the development of more improved obesity drugs is needed, and the currently developed products have satisfactory therapeutic effects without side effects. Since there is no therapeutic agent, there is a need for the development of a new obesity treatment.
그러나, 자료에 의하면, 기존까지 비만에 대한 약학적 치료는 장기간 체중 감량을 유지시키는 데에는 효과적으로 나타나지 않으므로, 향후 연구는 비만의 유행을 감소시키기 위해 새로운 약물 요법의 발견이 필수적이다.
However, data suggest that conventional pharmacological treatments for obesity do not appear to be effective in maintaining long-term weight loss, so future research is essential to discover new drug therapies to reduce the prevalence of obesity.
한편, 생균제(probiotic)라는 용어는 Lilly 와 Stillwell(Lilly D. M. et al., Science, 'Probiotics: growth promoting factors produced by microorganism', 147; 747, 1996)에 의해서 최초로 사용되었으며, 살아있는 미생물 제제를 의미한다. Parker(Parker R. B., An Nutr & Health, 29; 4-8, 1974)는 생균제에 대해 '장내 미생물 균형에 영향을 주는 살아있는 미생물을 의미'하는 것으로 정의한 바 있다.The term probiotic, on the other hand, was first used by Lilly and Stillwell (Lilly DM et al., Science, 'Probiotics: growth promoting factors produced by microorganism', 147; 747, 1996) and refers to living microbial agents. . Parker (Parker R. B., An Nutr & Health, 29; 4-8, 1974) defined probiotics as 'living microorganisms that affect intestinal microbial balance'.
생균제는 장내 균총이 잘 발달되게 함으로써 'Nurmi concept'라고 불리는 경쟁적 배제의 개념으로 장내 유익한 미생물 군집이 성숙하게 하는 결과 그 후에는 살모넬라와 같은 병원성 미생물의 근접을 막을 수 있고(Nurmi E. et al., Nature, 241; 210, 1973), 면역 질환의 치료 및 예방의 잠재적 효과 때문에 중목을 끌고 있다 (Borchers, 2009).Probiotics allow the intestinal flora to be well developed, leading to the maturation of beneficial microbial communities in the gut with the concept of competitive exclusion, called the 'Nurmi concept', which can subsequently prevent the proximity of pathogenic microorganisms such as Salmonella (Nurmi E. et al. , Nature, 241; 210, 1973), attracting attention because of the potential effects of the treatment and prevention of immune diseases (Borchers, 2009).
게다가, 최근 실험 연구에서는 비만에서의 몇몇 박테리아 균주의 예방적 효과를 나타내었다. 이들 중에서, 비피도박테리아는 유산균의 일종에 속하는 공생균 중에서 포유류 소화관내에 가장 많은 생균제의 하나이다. 한 연구에서는 비피도박테리움 롱검의 균주가 Streptococcus thermophilus 및 Lactobacillus delbrueckii subspecies bulgaricus (SL)의 혼합 배양액보다 총 콜레스테롤과 관련하여 랫트와 쥐에서 현저한 효과를 나타내었다.In addition, recent experimental studies have shown the protective effect of several bacterial strains on obesity. Among them, Bifidobacteria is one of the most probiotic agents in the mammalian digestive tract among commensal bacteria belonging to a class of lactic acid bacteria. In one study, strains of Bifidobacterium longgum were isolated from Streptococcus. thermophilus and Lactobacillus Relative to total cholesterol in rats and rats were significantly more effective than delbrueckii subspecies bulgaricus (SL).
다른 연구에서는 생균제를 처리한 마우스에서 비피도박테리움 균주가 포도당 내성, 인슐린 분비가 유도된 글루코스 및 정상화 염증도(감소된 내독소혈증, 플라즈마 및 지방 세포 친염증 사이토카인)와 양성적으로 연관되어있다(Cani et al., 2007).
In another study, Bifidobacterium strains were positively associated with glucose tolerance, insulin-induced glucose and normalized inflammation (reduced endotoxemia, plasma and fat cell proinflammatory cytokines) in probiotic-treated mice. (Cani et al., 2007).
결과적으로, 동결건조된 비피도박테리아, 락토바실리 및 스트렙토코커스 서모필러스의 혼합물은 식이유도비만을 향상시켰고, 간 자연 살해 T-세포의 증가 및 마우스에서의 염증 신호를 감소시키는 지방간 및 인슐린 저항과 관련이 있다 (Ma et al., 2008). As a result, the mixture of lyophilized bifidobacteria, lactobacilli and Streptococcus thermophilus improved dietary obesity and increased fatty liver and insulin resistance, which increased liver natural killer T-cells and reduced inflammation signals in mice. Related (Ma et al., 2008).
이러한 연구 결과들을 통해 비피도박테리아 제제는 안전하고, 다양하게 사용되어질 수 있다는 것을 알 수 있으나, 비만과 관련하여서는 비피도박테리아 균주가 지방 대사 및 체중과 관련이 있고, 비만 관리를 위한 잠재적 치료제로 제안되고 있을 뿐, 구체적이고 다양한 용도로의 활용이 결여되어 있는 실정이다.These findings suggest that Bifidobacterial formulations are safe and can be used in various ways. However, in relation to obesity, Bifidobacterial strains are associated with fat metabolism and body weight and suggested as potential therapeutics for obesity management. There is a lack of specific and various uses.
이에 따라 종래의 비피도박테리아를 이용한 생균제로서의 활성 확인을 통한 비만 관련 질환의 치료 또는 예방용 제제의 개발이 요구되고 있다.
Accordingly, there is a need for development of an agent for the treatment or prevention of obesity-related diseases through the confirmation of activity as a probiotic using a conventional Bifidobacteria.
본 발명은 상기한 문제점을 해결하기 위하여 혼합유산균 배양액을 고지방 식이로 유도된 군에 투여할 경우 체중 감소 효과를 나타냄은 물론 장내 세균에 대한 우수한 유해 효소 활성 저해 효과를 나타냄을 확인하고, 상기 혼합유산균을 포함하는 비만 관련 질환의 치료 및 예방용 약학 조성물 및 기능성 식품을 제공하는 것을 목적으로 한다.
In order to solve the above problems, when the mixed lactobacillus culture solution is administered to a high fat diet-induced group, it shows a weight loss effect as well as an excellent inhibitory effect on harmful enzyme activity against intestinal bacteria. It is an object to provide a pharmaceutical composition and functional food for the treatment and prevention of obesity-related diseases comprising a.
본 발명은 상기한 목적을 위하여, 혼합 유산균을 유효 성분으로 포함하는 비만 또는 비만 관련 질환의 치료 또는 예방용 약제학적 조성물을 제공한다.
The present invention provides a pharmaceutical composition for the treatment or prevention of obesity or obesity-related diseases comprising a mixed lactic acid bacteria as an active ingredient for the above purpose.
본 발명에 있어서, 상기 혼합 유산균은 비피도박테리움 슈도카테눌라툼 SPM 1204(수탁번호 KCTC 10616BP), 비피도박테리움 롱검 SPM 1205(수탁번호 KCTC 10630BP), 및 비피도박테리움 롱검 SPM 1207(수탁번호 KCTC 11506 BP)으로 구성되는 것인 혼합 유산균을 포함한다.
In the present invention, the mixed lactic acid bacteria is Bifidobacterium pseudocatenuratum SPM 1204 (Accession No. KCTC 10616BP), Bifidobacterium long gum SPM 1205 (Accession No. KCTC 10630BP), and Bifidobacterium long gum SPM 1207 (Accession No. KCTC 11506 BP).
본 발명에 있어서, 상기 혼합 유산균은 비피도박테리움 슈도카테눌라툼 SPM 1204(수탁번호 KCTC 10616BP), 비피도박테리움 롱검 SPM 1205(수탁번호 KCTC 10630BP), 및 비피도박테리움 롱검 SPM 1207(수탁번호 KCTC 11506 BP)을 108 내지 109 cfu/ml 포함하는 각각의 배양액을 동일 부피비로 혼합한 것을 특징으로 한다. In the present invention, the mixed lactic acid bacteria is Bifidobacterium pseudocatenuratum SPM 1204 (Accession No. KCTC 10616BP), Bifidobacterium long gum SPM 1205 (Accession No. KCTC 10630BP), and Bifidobacterium long gum SPM 1207 (Accession No. KCTC 11506 BP) is characterized in that each culture solution containing 10 8 to 10 9 cfu / ml at the same volume ratio.
본 발명에 있어서, 상기 혼합 유산균을 유효 성분으로 포함하는 비만 또는 비만 관련 질환의 치료 또는 예방용 약제학적 조성물은 혈액 내의 아미노트랜스퍼라아제 (AST), 아스파테이트 아미노트랜스퍼라아제 (ALT) 의 수치를 감소시키는 것을 특징으로 한다.In the present invention, the pharmaceutical composition for the treatment or prevention of obesity or obesity-related diseases comprising the mixed lactic acid bacteria as an active ingredient is the level of aminotransferase (AST), aspartate aminotransferase (ALT) in the blood It is characterized by reducing.
본 발명에 있어서, 상기 혼합 유산균을 유효 성분으로 포함하는 비만 또는 비만 관련 질환의 치료 또는 예방용 약제학적 조성물은 알파 아밀라아제의 활성을 감소시키는 것을 특징으로 한다. In the present invention, the pharmaceutical composition for the treatment or prevention of obesity or obesity-related diseases comprising the mixed lactic acid bacteria as an active ingredient is characterized by reducing the activity of alpha amylase.
본 발명에 있어서, 상기 혼합 유산균을 유효 성분으로 포함하는 비만 또는 비만 관련 질환의 치료 또는 예방용 약제학적 조성물은 리파아제의 활성을 증가시키는 것을 특징으로 한다.
In the present invention, the pharmaceutical composition for the treatment or prevention of obesity or obesity-related diseases comprising the mixed lactic acid bacteria as an active ingredient is characterized by increasing the activity of lipase.
본 발명은 또한, 본 발명에 의한 혼합 유산균을 유효 성분으로 포함하는 비만 또는 비만 관련 질환의 치료 또는 예방용 약제학적 조성물을 포함하는 식품 조성물을 제공한다.The present invention also provides a food composition comprising a pharmaceutical composition for the treatment or prevention of obesity or obesity-related diseases comprising the mixed lactic acid bacteria according to the present invention as an active ingredient.
본 발명의 혼합유산균 중에 하나인 비피도박테리움 슈도카테눌라툼 SPM 1204은 인분으로부터 분리한 신규한 비피도박테리움 속 미생물로서, 상기 미생물이 외인성 항원에 대한 수지상 세포의 교차-제시를 증진시키고, NO 및 TNF-α 생산을 유도하며 대식세포를 활성화시키는 면역 증강 활성을 가지고 있으며, 본 발명자에 의해 2004년 3월 31일자로 기탁되었다(기탁번호: KCTC 10616BP). Bifidobacterium sudocatechinulatum SPM 1204, one of the mixed lactic acid bacteria of the present invention, is a novel Bifidobacterium spp. Microorganism isolated from humans, which promotes cross-presentation of dendritic cells to exogenous antigens, It has an immune enhancing activity that induces NO and TNF-α production and activates macrophages, and was deposited by the inventors on March 31, 2004 (Accession No .: KCTC 10616BP).
본 발명의 혼합유산균인 비피도박테리움 롱검 SPM 1205은 인간의 분변으로부터 새로운 비피도박테리움 균주로서, 장기능을 활성화함과 동시에 면역기능을 강화하는 기능을 가지고 있으며, 본 발명자에 의해 2004년 5월 10 일자로 기탁되었다(기탁번호: KCTC 10630BP).Bifidobacterium longgum SPM 1205, a mixed lactic acid bacterium of the present invention, is a novel Bifidobacterium strain from human feces, and has a function of activating intestinal function and enhancing immune function. Deposited on the 10th of January (Accession Number: KCTC 10630BP).
본 발명의 혼합유산균인 비피도박테리움 롱검 SPM 1207은 고밀도 지단백질(HDL : High Density Lipoprotein) 수치는 상승시키며, 총 콜레스테롤 수치 및 저밀도 지단백질 (LDL : Low Density Lipoprotein) 수치는 저하시키는 신규한 비피도박테리움 롱검 균주로서, 본 발명자에 의해 2009년 5월 12일 자로 한국미생물보존센터에 기탁되었다(기탁번호 : KCTC 11506BP).
Bifidobacterium long gum SPM 1207, a mixed lactic acid bacterium of the present invention, increases high density lipoprotein (HDL) levels, and decreases total cholesterol and low density lipoprotein (LDL) levels. As a Leeum long gum strain, it was deposited by the present inventors with the Korea Microorganism Conservation Center on May 12, 2009 (Accession No .: KCTC 11506BP).
본 발명은 이와 같이 개별적으로는 면역 증강 활성, 장기능 활성 및 콜레스테롤 수치 저하 활성을 가지는 것으로 것으로 알려진 유산균들을 혼합하여 비만 관련 질환의 치료 및 예방용 조성물로의 용도를 제공하는 것이며, 상기 조성물은 음식물 섭취 억제, 체지방 감소용으로도 적용될 수 있다.
The present invention is to provide a use as a composition for the treatment and prevention of obesity-related diseases by mixing the lactic acid bacteria known to have immune enhancing activity, intestinal function activity and cholesterol level lowering activity individually. It can also be used to reduce intake and reduce body fat.
본 발명의 조성물에 포함되는 혼합유산균은 아밀라아제 활성을 감소시켜 식욕을 억제하고, 지속적인 음식물 섭취 억제 효과를 일으키며, 리파아제 활성을 증가시켜 지방을 분해하여 흡수되도록 함으로써, 비만 관련 질환의 치료에 유용하게 사용될 수 있다. 또한 이러한 음식물 섭취 억제 효과로 인해 콜레스테롤 혹은 지방세포와 같은 체지방을 감소시키는 데 유용하게 사용될 수 있다. Mixed lactic acid bacteria contained in the composition of the present invention can be useful in the treatment of obesity-related diseases by reducing amylase activity, inhibiting appetite, causing continuous food intake inhibitory effect, and increasing lipase activity to break down fat to be absorbed. Can be. In addition, the food intake inhibitory effect may be useful for reducing body fat such as cholesterol or fat cells.
일반적으로 비만 및 이의 관련 질환의 치료 및 예방시, 체지방의 감소는 필요하지만 제지방의 감소, 즉 단백질의 감소는 바람직하지 못하다. 본 발명에 따른 혼합유산균을 포함하는 조성물은 지방 세포와 같은 체지방의 감소, 장내 유해 효소 저해 활성을 통해 비만 관련 질환 치료제로 우수한 성분으로 작용할 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물에 포함되는 혼합유산균은 혈액 내의 아미노트랜스퍼라아제 (AST)와 아스파테이트 아미노트랜스퍼라아제 (ALT) 의 수치를 감소시켜 체지방을 감소시켜 비만 억제 효과를 나타내면서도 간 기능을 활성화시키므로 체지방 감소에 따른 부작용이 전혀 없는 우수한 비만 관련 치료 또는 예방 효과를 나타낸다.
In general, in the treatment and prevention of obesity and its related diseases, a decrease in body fat is required but a decrease in lean fat, ie a decrease in protein, is undesirable. The composition comprising the mixed lactic acid bacteria according to the present invention can act as an excellent component as a therapeutic agent for obesity-related diseases through the reduction of body fat such as fat cells, intestinal harmful enzyme inhibitory activity. In addition, the mixed lactic acid bacteria included in the composition of the present invention reduce the levels of aminotransferase (AST) and aspartate aminotransferase (ALT) in the blood to reduce body fat and activate the liver function while showing the effect of inhibiting obesity As a result, it shows excellent obesity-related treatment or preventive effect without any side effects of body fat reduction.
본 발명의 비만 관련 질환은 비만, 고지혈증, 인슐린 내성 증후군, 비만 관련 위식도역류, 지방간염, 심혈관질환 및 대사 증후군으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
Obesity-related diseases of the present invention can be selected from the group consisting of obesity, hyperlipidemia, insulin resistance syndrome, obesity-related gastroesophageal reflux, fatty liver, cardiovascular disease and metabolic syndrome.
본 발명의 혼합유산균 배양액을 포함하는 비만 관련 질환 치료용 조성물은 약제학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. The composition for treating obesity-related diseases including the mixed lactic acid bacteria culture medium of the present invention may further include appropriate carriers, excipients and diluents commonly used in the manufacture of pharmaceutical compositions.
본 발명에 따른 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 화합물 또는 추출물을 포함하는 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.The compositions according to the invention can be used in the form of powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols and the like, oral formulations, external preparations, suppositories and sterile injectable solutions, respectively, according to conventional methods. Carriers, excipients and diluents that may be included in the composition comprising the compound or extract include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin, calcium Phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil. In the case of formulation, a diluent or excipient such as a filler, an extender, a binder, a wetting agent, a disintegrant, or a surfactant is usually used. Solid preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules, and the like, and such solid preparations include at least one excipient such as starch, calcium carbonate, sucrose in the composition. ) Or lactose, gelatin and the like are mixed. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate talc are also used. Examples of the liquid preparation for oral use include suspensions, solutions, emulsions, and syrups. In addition to water and liquid paraffin, simple diluents commonly used, various excipients such as wetting agents, sweeteners, fragrances, preservatives and the like may be included . Formulations for parenteral administration include sterilized aqueous solutions, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, freeze-dried preparations, and suppositories. Examples of the suspending agent include propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, injectable ester such as ethyl oleate, and the like. As the base of the suppository, witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin butter, glycerogelatin and the like can be used.
본 발명의 혼합유산균의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 혼합유산균은 1일 0.01 mg/kg 내지 10 g/kg으로, 바람직하게는 1 mg/kg 내지 1 g/kg으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수 있다. 따라서, 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다. The preferred dosage of the mixed lactic acid bacteria of the present invention depends on the condition and weight of the patient, the extent of the disease, the form of the drug, the route of administration and the duration, and may be appropriately selected by those skilled in the art. However, for the desired effect, the mixed lactic acid bacteria of the present invention is preferably administered at 0.01 mg / kg to 10 g / kg, preferably 1 mg / kg to 1 g / kg per day. The administration may be carried out once a day or divided into several doses. Thus, the dosage amounts are not intended to limit the scope of the invention in any manner.
본 발명의 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 (intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.
The composition of the present invention may be administered to mammals such as rats, mice, livestock, humans, and the like in various routes. All modes of administration can be administered, for example, by oral, rectal or intravenous, intramuscular, subcutaneous, intrauterine dural or intracerebroventricular injection.
본 발명의 혼합 유산균을 식품으로 사용할 경우, 상기 혼합 유산균을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용되고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 본 발명의 혼합유산균 배양액을 포함하는 비만 관련 질환의 예방용 기능성 식품은 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료 형태일 수 있고, 이에 한정되는 것은 아니다. When the mixed lactic acid bacteria of the present invention is used as a food, the mixed lactic acid bacteria can be added as it is or used together with other foods or food ingredients, and can be suitably used according to a conventional method. Functional food for the prevention of obesity-related diseases, including the mixed lactic acid bacteria culture medium of the present invention may be in the form of powder, granules, tablets, capsules or beverages, but is not limited thereto.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 균주를 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있고, 발효유, 요구르트, 치즈, 우유 음료 또는 분유로 제조하는 것이 바람직하고, 발효유, 요구르트, 음료수, 분유, 식품첨가물, 또는 건강보조식품인 것이 더욱 바람직하다.There is no particular limitation on the kind of the food. Examples of foods to which the strain can be added include meat, sausage, bread, chocolate, candy, snacks, confectionery, pizza, ramen, dairy products including other noodles, gums, ice cream, various soups, drinks, tea, drinks, Alcoholic beverages and vitamin complexes, and the like, and are preferably prepared with fermented milk, yoghurt, cheese, milk drink or milk powder, and more preferably fermented milk, yoghurt, beverage, milk powder, food additives or health supplements.
유효 성분의 혼합양은 그의 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다.The amount of the active ingredient to be mixed can be suitably determined according to its intended use (prevention, health or therapeutic treatment).
일반적으로, 본 발명의 비피도박테리움 롱검 균주를 식품 또는 음료의 제조시에 상기 특정식품 소재 1 g(또는 ㎖) 당 본 발명의 균을 1 x 107 내지 10 x 108 개(균수) 첨가하고, 바람직하게는 1 x 108 내지 5 x 108 개의 양으로 첨가한다.In general, 1 x 10 7 to 10 x 10 8 (bacteria) of the Bifidobacterium long gum strain of the present invention per 1 g (or ml) of the specific food material is added at the time of preparing the food or beverage. And preferably in an amount of 1 × 10 8 to 5 × 10 8 .
본 발명의 균주의 유효용량은 상기 약제학적 조성물의 유효용량에 준해서 사용할 수 있으나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 범위 이하일 수 있으며, 유효성분은 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있음은 확실하다.The effective dose of the strain of the present invention may be used in accordance with the effective dose of the pharmaceutical composition, but may be less than the above range in the case of long-term intake for the purpose of health and hygiene or health control, Since there is no problem in terms of safety, it is evident that it can be used in an amount above the above range.
본 발명의 식품 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 혼합유산균을 함유하는 것 외에는 특별히 제한이 없으며, 통상의 식품과 같이 여러 가지 향미제 등을 추가성분으로서 함유할 수 있다.
There is no restriction | limiting in particular except the said food composition containing the said mixed lactic acid bacteria as an essential component in the ratio which is indicated, and it can contain various flavors etc. as an additional component like a normal food.
본 발명에 따른 혼합유산균 배양액을 포함하는 비만 관련 질환의 조성물은 각각 다른 기능과 특성을 나타내는 유산균들을 혼합한 것으로, 체중 감소, 혈중 지질 성분의 수치 저하, 간 기능 수치 호전 및 장내 유해 효소 활성의 저해로 인한 장내 총 유산균 수를 증가시키는 효과를 나타내고, 체중을 감소시키면서도 장기능, 간기능을 활성화할 뿐만 아니라, 아밀라아제 활성을 감소시켜 식욕을 억제하면서, 리파아제 활성을 증가시켜 지방 분해를 촉진시켜 비만 관련 질환의 치료 및 예방용 약제학적 조성물 및 기능성 식품으로 이용될 수 있다.
The composition of the obesity-related disease comprising the mixed lactic acid bacteria culture medium according to the present invention is a mixture of lactic acid bacteria showing different functions and characteristics, respectively, weight loss, lowering of blood lipid components, improving liver function and inhibiting intestinal harmful enzyme activity It has the effect of increasing the total number of intestinal lactic acid bacteria, and not only activates intestinal function and liver function, but also decreases amylase activity while suppressing appetite, increasing lipase activity and promoting fat breakdown It can be used as a pharmaceutical composition and a functional food for the treatment and prevention of diseases.
도 1은 실험 기간 동안의 식품 섭취량의 변화를 나타낸 도이고,
도 2는 실험 기간 동안의 총 유산균 수 변화를 나타낸 도이며,
도 3은 본 발명의 혼합유산균을 섭취한 경우 장내 유해 효소 활성 저해를 나타낸 도이다.1 is a view showing the change in food intake during the experiment period,
2 is a view showing the total number of lactic acid bacteria changes during the experiment period,
Figure 3 is a diagram showing the inhibition of intestinal harmful enzyme activity when ingested mixed lactic acid bacteria of the present invention.
이하, 본 발명을 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to Examples and Experimental Examples. However, the following Examples and Experimental Examples are merely illustrative of the present invention, and the present invention is not limited to the following Examples and Experimental Examples.
<<
실시예Example
1. 혼합 유산균의 제조> 1. Preparation of Mixed Lactic Acid Bacteria>
본 발명의 혼합 유산균은 한국인의 장에 존재하는 20세 내지 30세의 건강한 어른의 분변으로부터 동정된 비피도박테리움 슈도카테눌라툼 SPM 1204, 비피도박테리움 롱검 SPM 1205 및 비피도박테리움 롱검 SPM 1207이고, 하기 표 1에 나타난 배지를 이용하여 배양하였다.Mixed lactic acid bacteria of the present invention is Bifidobacterium sudocatechinulatum SPM 1204, Bifidobacterium longgum SPM 1205 and Bifidobacterium longgum SPM identified from feces of 20 to 30 years old healthy adults present in Korean intestines 1207 and cultured using the medium shown in Table 1 below.
bBL, Blood Liver (Nissui Pharm. Co. Ltd., Japan). b BL, Blood Liver (Nissui Pharm. Co. Ltd., Japan).
cGAM, General Anaerobic Medium (Nissui Pharm. Co. Ltd., Japan).
c GAM, General Anaerobic Medium (Nissui Pharm. Co. Ltd., Japan).
상기 유산균들을 각각 GAM agar medium에 접종하여 37℃에서 종균 배양한 후, 이 종균 배양액을 각각 1 % 씩 혼합 접종하여 멸균된 GAM(General anaerobic medium) (Nissui Pharm. Co. Ltd., Japan) broth에서 N2(90%), H2(5%) 및 CO2 (5%)로 구성되는 혼합 가스로 채워진 혐기적 시스템(Bactron Anaerobic Chamber, Sheldon Manufacturing Inc.,USA))하에 37℃에서 18시간 동안 배양하였다. 이후 배양액을 4000rpm으로 5분간 원심분리하여 상등액을 제거하고 균체만 회수하였다.
Each of the lactic acid bacteria was inoculated in a GAM agar medium, followed by incubation at 37 ° C., followed by inoculation of 1% of each of these spawn cultures in sterilized GAM (General anaerobic medium) (Nissui Pharm. Co. Ltd., Japan) broth. 18 hours at 37 ° C. under an anaerobic system filled with a mixed gas consisting of N 2 (90%), H 2 (5%) and CO 2 (5%) (Bactron Anaerobic Chamber, Sheldon Manufacturing Inc., USA) Incubated. Thereafter, the culture solution was centrifuged at 4000 rpm for 5 minutes to remove the supernatant and only the cells were recovered.
상기 3 가지 균주를 배양하여 얻어진 각각의 균체를 1.0 x 108 cfu/ml의 농도로 하여 혼합한 후, 혼합 배양물을 하기의 실험예에서 실험 대상용 랫트에 경구 투여하였다.
Each of the cells obtained by culturing the three strains were mixed at a concentration of 1.0 × 10 8 cfu / ml, and then the mixed cultures were orally administered to the rats for the test subjects in the following experimental examples.
<< 참고예Reference Example 1. 실험 동물의 준비 및 투여군 설정> 1.Preparation of experimental animals and setting up administration groups>
실험 동물은 중앙 실험 동물에서 구입한 3 주령의 수컷 SD (스프라그-다우리) 랫트 36 마리를 구입하였고, 신진 대사 상태를 안정화시키기 위해 1주 동안 표준 식이 (AIN-76A #100000, Dyets Inc., Bethlehem, PA, USA)를 급여하였다.The experimental animals purchased 36 male SD (Sprague-Dauri) rats of 3 weeks of age from the central experimental animals, and the standard diet (AIN-76A # 100000, Dyets Inc. for 1 week to stabilize metabolic status). , Bethlehem, PA, USA).
케이지 당 2 마리씩 넣었고, 물과 사료는 임의로 공급하였다. 랫트는 12 시간 주기로 빛과 어둠에 노출시켰고, 온도는 22 ± 2℃ 및 습도는 55 ± 5%를 유지시켰으며, 모든 동물 실험은 삼육대학교에서 승인한 실험 동물 사육 지침서에 따라 수행되었다. Two animals per cage were fed and water and feed were randomly fed. Rats were exposed to light and dark at 12 hour cycles, maintained at 22 ± 2 ° C and humidity at 55 ± 5%, and all animal experiments were conducted according to experimental animal breeding guidelines approved by Sahmyook University.
랫트는 임의로 선택하여 한 그룹당 12마리씩 3 그룹(실시예(HFD-LAB), 비교예 1(SD), 비교예 2(HFD))으로 설정하였다.
Rats were randomly selected and set up in 3 groups (Example (HFD-LAB), Comparative Example 1 (SD), and Comparative Example 2 (HFD)) of 12 animals per group.
<< 실시예Example 2. 식이 조절에 따른 체중 변화 측정> 2. Measurement of weight change according to diet
하기 표 2에 나타난 바와 같이, 비교예 1(SD) 그룹은 대조군으로써 표준 식이 및 PBS를 급여하였고, 비교예 2(HFD) 그룹은 고지방식이 (40% beef tallow modified AIN-76A purified rodent diet #101556, Dyets Inc., Bethlehem, PA, USA) 및 PBS를 급여하였으며, 실시예(HFD-LAB) 그룹은 고지방 식이 및 본 발명의 상기 실시예 1에서 제조된 혼합유산균을 0.2 ml 급여하였다. As shown in Table 2, Comparative Example 1 (SD) group was fed a standard diet and PBS as a control, Comparative Example 2 (HFD) group was fed a high-fat diet (40% beef tallow modified AIN-76A purified rodent diet # 101556, Dyets Inc., Bethlehem, PA, USA) and PBS, and the Example (HFD-LAB) group fed 0.2 ml of the high fat diet and the mixed lactic acid bacteria prepared in Example 1 of the present invention.
(SD) 그룹Comparative Example 1
(SD) group
(HFD) 그룹Comparative Example 2
(HFD) group
(HFD-LAB) 그룹Example
(HFD-LAB) Group
상기 표준 식이 및 고지방 식이의 조성물은 하기 표 3에 나타내었다. 모든 랫트는 실험 시작 전 일주일 동안 각각의 식이에 적응되었다. 그 후, 랫트에 5주 동안 1일 1회에 0.2ml의 PBS 또는 실시예 1의 혼합유산균 (1 X 108 CFU/ml)을 경구 투여하였고, 체중 및 식이 섭취량을 매일 측정하였다. The compositions of the standard diet and the high fat diet are shown in Table 3 below. All rats were adapted to their diet for a week before the start of the experiment. Rats were then orally administered 0.2 ml of PBS or mixed lactic acid bacteria of Example 1 (1 × 10 8 CFU / ml) once daily for 5 weeks and body weight and dietary intake were measured daily.
<< 참고예Reference Example 2. 통계학적 분석> 2. Statistical Analysis
모든 측정값은 평균±표준편차로 나타내었다. 일원 배치 또는 이원 배치 분석법을 통해 검정하였으며, 데이터 분석은 StatView for Macintosh (version 5.0; SAS Institute, Cary, NC, USA)를 이용하여 수행하였다.
All measurements are expressed as mean ± standard deviation. Tests were performed using one-way or two-way batch analysis, and data analysis was performed using StatView for Macintosh (version 5.0; SAS Institute, Cary, NC, USA).
<< 실험예Experimental Example 1. 체중 측정> 1.weight measurement>
7주의 실험 기간 동안 3일 간격으로 각각의 그룹에 대한 체중 변화를 측정하였으며 그 결과인 실험 기간 동안의 체중 변화 및 증가량을 아래 표 4에 나타내었다.The change in body weight for each group was measured at three-day intervals during the seven week experiment period, and the results are shown in Table 4 below.
하기 표 4 에서 비교예 1(SD) 그룹은 315.86 ±12.42 g, 고지방 식이만을 먹인 비교예 2(HFD) 그룹은 349.14 ±29.14 g, HFD-혼합유산균을 먹인 실시예(HFD-LAB) 그룹은 339.70±26.75 g 으로 나타나, 고지방 식이만을 먹인 비교예 2(HFD) 그룹의 체중 증가가 가장 높게 나타나는데 비해, 본 발명의 실시예에 따른 HFD-혼합유산균을 먹인 실시예(HFD-LAB) 그룹은 고지방 식이만을 먹인 비교예 2(HFD) 보다 체중 증가가 감소하였음을 확인할 수 있다.In Table 4, the Comparative Example 1 (SD) group is 315.86 ± 12.42 g, the high fat diet only Comparative Example 2 (HFD) group was fed 349.14 ± 29.14 g, the HFD-mixed lactic acid bacteria (HFD-LAB) group was 339.70 The weight gain of the Comparative Example 2 (HFD) group fed only the high fat diet was shown to be ± 26.75 g, whereas the Example (HFD-LAB) group fed the HFD-mixed lactic acid bacteria according to the embodiment of the present invention had a high fat diet. It can be seen that the weight gain is reduced compared to Comparative Example 2 (HFD) fed only.
그룹Example (HFD-LAB)
group
또한, 각각의 그룹에 대한 평균 식품 섭취율을 측정하여 그 결과를 도 1에 나타내었다. 도 1에서 나타난 바와 같이, 비교예 2(HFD) 그룹의 평균 식품 섭취량은 비교예 1(SD) 그룹보다 높게 나타났으나, 비교예 2(HFD) 그룹과 실시예(HFD-LAB) 그룹에서의 차이는 나타나지 않았다.
In addition, the average food intake rate for each group was measured and the results are shown in FIG. 1. As shown in FIG. 1, the average food intake of the Comparative Example 2 (HFD) group was higher than that of the Comparative Example 1 (SD) group, but in the Comparative Example 2 (HFD) group and the Example (HFD-LAB) group No difference was seen.
<< 실험예Experimental Example 2. 혈청 분석 및 간기능 활성화 여부 측정> 2. Serum analysis and measurement of liver function activation>
7주의 실험 기간 종료 후, 3 그룹(실시예(HFD-LAB), 비교예 1(SD), 비교예 2(HFD))의 각각의 랫트에서 채취한 혈액 샘플을 튜브에 수집하였고, 원심 분리하여 혈청을 분리하였다 (3500rpm/10min).At the end of the 7 week experiment period, blood samples from each rat of 3 groups (Example (HFD-LAB), Comparative Example 1 (SD), Comparative Example 2 (HFD)) were collected in tubes and centrifuged. Serum was isolated (3500 rpm / 10 min).
분리한 혈청에서 총 콜레스테롤 (TC), 고밀도 리포단백질 콜레스테롤 (HDL-C), 저밀도 리포단백질 콜레스테롤 (LDL-C), 트리글리세리드, 글루코스, 렙틴, 알라닌, 아미노트랜스퍼라아제 (AST), 아스파테이트 아미노트랜스퍼라아제 (ALT) 수치는 한국 수의학 협회에서 분석하였으며, 그 결과를 아래 표 5에 나타내었다. Total cholesterol (TC), high density lipoprotein cholesterol (HDL-C), low density lipoprotein cholesterol (LDL-C), triglyceride, glucose, leptin, alanine, aminotransferase (AST), aspartate aminotransfer from isolated serum Latase (ALT) levels were analyzed by the Korean Veterinary Association, and the results are shown in Table 5 below.
표 5에서 보는 바와 같이 HFD-혼합유산균을 먹인 실시예(HFD-LAB)은 고지방 식이만을 먹인 비교예 2(HFD) 그룹과 비교했을때, 고밀도 리포단백질 콜레스테롤 (HDL-C) 수치는 증가하면서도, 총 콜레스테롤 (TC), 저밀도 리포단백질 콜레스테롤 (LDL-C), 트리글리세리드, 글루코스, 렙틴, 알라닌, 아미노트랜스퍼라아제 (AST), 아스파테이트 아미노트랜스퍼라아제 (ALT) 의 수치가 감소하여 체중이 감소하면서도 간기능을 향상시키는 효과를 나타냄을 알 수 있었다.As shown in Table 5, the HFD-lactic acid bacteria fed Example (HFD-LAB) increased the high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C) level compared to the Comparative Example 2 (HFD) group fed the high fat diet, Reduced levels of total cholesterol (TC), low density lipoprotein cholesterol (LDL-C), triglycerides, glucose, leptin, alanine, aminotransferase (AST) and aspartate aminotransferase (ALT) It was found to show an effect of improving liver function.
특히 아미노트랜스퍼라아제 (AST)의 경우 비교예 1 및 비교예 2에 비하여 20% 이상 감소함을 확인할 수 있다.
In particular, it can be seen that the aminotransferase (AST) is reduced by more than 20% compared to Comparative Example 1 and Comparative Example 2.
<< 실험예Experimental Example 3. 장기 무게 측정> 3. Long-term weight measurement>
7 주의 실험 기간 종료 후 3 그룹(실시예(HFD-LAB), 비교예 1(SD), 비교예 2(HFD))의 각각의 랫트를 희생시킨 후의 지방 (부고환 및 후복막), 간, 비장 및 췌장들은 즉시 제거하였고, 각각의 무게를 측정하였다.Fats (dye testes and posterior peritoneum), liver, spleen after sacrifice of each rat of 3 groups (Example (HFD-LAB), Comparative Example 1 (SD), Comparative Example 2 (HFD)) after the end of the 7 week experiment period. And pancreas were immediately removed and each weighed.
하기 표 6에서 나타난 바와 같이, 고지방 식이의 비교예 2의 경우 지방의 양을 포함하는 체지방의 형태의 에너지 축적을 유도하는 부정소 및 후복막의 무게를 증가하였으나, 고지방 식이와 본 발명에 따른 실시예의 유산균 조성물을 함께 섭취한 실시예 그룹의 경우 비교예 2 보다 현저히 무게 증가량이 감소함을 알 수 있다. As shown in Table 6, in Comparative Example 2 of the high fat diet, although the weight of the anaerobic and retroperitoneum induced energy accumulation in the form of body fat including the amount of fat, the high fat diet and the practice according to the present invention In the case of the Example group ingested with the lactic acid bacterium composition of the example it can be seen that the weight increase is significantly reduced than in Comparative Example 2.
(SD)Comparative Example 1
(SD)
(HFD)Comparative Example 2
(HFD)
(HFD-LAB)Example
(HFD-LAB)
(epididymal + retroperitoneal)Fat weight (g)
(epididymal + retroperitoneal)
(g/100 g body weight)Fat pad weight
(g / 100 g body weight)
<< 실험예Experimental Example 4. 알파- 4. Alpha 아밀라아제Amylase 및 리파아제 활성 측정> And lipase activity measurement>
알파-아밀라아제 및 리파아제 활성은 알파-아밀라아제 분석 키트(BioAssay Systems, USA) 및 리파아제 분석 키트 (BioAssay Systems, USA)를 각각 이용하여 측정하였으며, 그 결과를 아래 표 7 에 나타내었다. Alpha-amylase and lipase activity were measured using alpha-amylase assay kit (BioAssay Systems, USA) and lipase assay kit (BioAssay Systems, USA), respectively, and the results are shown in Table 7 below.
아래 표 7 에서 보는 바와 같이 본 발명의 혼합 유산균을 투여한 군의 경우 표준 식이를 한 비교예 1 그룹에 비해 아밀라아제의 활성은 감소하고, 리파아제의 활성은 증가하였다. As shown in Table 7 below, in the group to which the mixed lactic acid bacteria of the present invention were administered, the activity of amylase was decreased and the activity of lipase was increased as compared to the comparative example 1 group having the standard diet.
(U/L)Lipase
(U / L)
d : 각각의 표준편차를 나타냄.d: Each standard deviation is shown.
알파 아밀라아제는 다당류를 가수분해하는 소화효소 중의 하나이고, 사람의 췌장(이자)액과 타액에 포함되어 있다. 따라서, α-아밀라아제 활성의 저해는 식욕을 적절하게 만족시켜서 비만을 억제하는 효과와 또한 당뇨병 치료에 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 본 발명의 실시예에서 혼합 유산균을 투여한 군의 경우 α-아밀라아제의 활성을 감소시켜 비만 억제, 당뇨병 치료에 효과가 있음을 알 수 있다. Alpha amylase is one of the digestive enzymes that hydrolyze polysaccharides and is contained in human pancreatic (interest) fluid and saliva. Thus, inhibition of α-amylase activity is known to be effective in satisfying appetite to inhibit obesity and also in treating diabetes. In the embodiment of the present invention, in the group administered with the mixed lactic acid bacteria it can be seen that it is effective in inhibiting obesity, diabetes treatment by reducing the activity of α-amylase.
리파아제는 췌장 효소중 하나로서 장에서 지방을 분해하여 흡수하는 역할을 한다. 혈액 속의 지방을 분리하여 세포로 이동시킨 후 세포에서 지방을 분해하여 미토콘드리아에서 에너지 활용을 하도록 유도하는 기능을 하는 것으로 알려져 있다. 따라서, 리파아제를 활성화시키는 기전에 비만 약물 중 하나로 알려져 있다. 본 발명의 실시예에 의한 혼합 유산균을 투여한 경우 상기 표 7에서 보는 바와 같이 비교예 1의 경우에 비하여 리파아제의 활성을 급격히 증가시켜 비만 억제, 당뇨병 치료에 효과가 있음을 알 수 있다.
Lipase is one of the pancreatic enzymes that breaks down and absorbs fat from the intestine. It is known to function to induce the utilization of energy in the mitochondria by separating fats in the blood and moving them to the cells and then breaking down fats in the cells. Thus, the mechanism of activating lipases is known as one of the obese drugs. In the case of administering the mixed lactic acid bacteria according to the embodiment of the present invention, as shown in Table 7, it can be seen that the activity of lipase is rapidly increased as compared with the case of Comparative Example 1, which is effective in inhibiting obesity and treating diabetes.
<< 실험예Experimental Example 5. 장 기능 활성화 여부 측정> 5. Measuring whether the chapter function is activated>
5-1. 장내 총 5-1. An intestinal gun 유산균수Lactobacillus 측정 Measure
장내 총 유산균 수 및 유해 효소 측정을 위해 분변 시료를 수집하였다. 분변 시료는 직장 자극에 의한 직장으로부터 채취하였고, 즉시 살균 튜브에 옮겨 4℃에서 보관하였다. 분변 시료 (0.1g)는 볼텍스를 이용하여 0.1 M의 인산염 버퍼 0.9ml과 혼합하였고, 0.1ml은 10-1 to 10- 7 부터 10배의 농도로 희석하였다. 1ml은 선택적 GAM (General Anaerobic Medium) agar medium에 첨가하였고, 혐기성 조건에서 48시간 배양 후에, 비피도박테리움의 균수를 측정하였다 (Choi et al., 2005).Fecal samples were collected for determination of total intestinal lactic acid bacteria and harmful enzymes. Fecal samples were taken from the rectum by rectal stimulation and immediately transferred to sterile tubes and stored at 4 ° C. Fecal samples (0.1g) by using a vortex was mixed with 0.1 M phosphate buffer, 0.9ml, 0.1ml is 10 -1 to 10 - were diluted to a concentration of 10 times from 7. 1 ml was added to a selective GAM (General Anaerobic Medium) agar medium, and after 48 hours of incubation in anaerobic conditions, the number of Bifidobacterium bacteria was measured (Choi et al., 2005).
총 균수에 대한 유산균수는 도 2에 나타내었다. 총균수에 대한 혼합유산균수는 실시예(HFD-LAB) 그룹과 비교예 2(HFD) 그룹이 비교예 1(SD) 그룹보다 낮게 나타났으나, HFD-LAB 그룹은 HFD 그룹보다 현저하게 증가함을 알 수 있었다.
The total number of lactic acid bacteria against the number of bacteria is shown in FIG. 2. The mixed lactic acid bacteria count for the total bacterial count was lower in the Example (HFD-LAB) and Comparative Example 2 (HFD) groups than in the Comparative Example 1 (SD) group, but the HFD-LAB group was significantly increased than the HFD group. And it was found.
5-2. β-5-2. β- 글루코시다아제Glucosidase 활성 측정 Active measurement
2mM p-nitrophenyl-β-D-glucopyranoside 0.8 ㎖와 현탁한 효소액 (현탁된 분변 샘플) 0.2 ㎖로 구성된 반응액 1 ㎖를 37℃에서 30분간 반응시킨 후 0.5N NaOH 1 ㎖를 가해 반응을 종료시킨다. 그 뒤 이 반응 용액을 원심분리(3,000 rpm/10min)한 후 상등액을 405 nm에서 흡광도를 측정하였으며 그 결과를 도 3 에 나타내었다.
1 ml of a reaction solution consisting of 0.8 ml of 2 mM p-nitrophenyl-β-D-glucopyranoside and 0.2 ml of suspended enzyme solution (suspended fecal sample) is reacted at 37 ° C for 30 minutes, and then 1 ml of 0.5N NaOH is added to terminate the reaction. . Thereafter, the reaction solution was centrifuged (3,000 rpm / 10 min) and the supernatant was measured for absorbance at 405 nm. The results are shown in FIG. 3.
5-3. β-5-3. β- 글루쿠로니다제Glucuronidase 활성 측정 Active measurement
2 mM p-nitrophenyl-β-D-glucuronide 0.8 ㎖와 현탁한 효소액 0.2 ㎖로 구성된 반응액 1 ㎖를 37℃에서 30분간 반응시키고 0.5N NaOH 1 ㎖를 가해 반응을 종료시킨다. 그 뒤 이 반응 용액을 원심분리(3,000 rpm/10min)한 후 상등액을 405 nm에서 흡광도를 측정하였으며 그 결과를 도 3에 나타내었다.
1 ml of a reaction solution consisting of 0.8 ml of 2 mM p-nitrophenyl-β-D-glucuronide and 0.2 ml of suspended enzyme solution was reacted at 37 ° C. for 30 minutes, and 1 ml of 0.5N NaOH was added to terminate the reaction. Thereafter, the reaction solution was centrifuged (3,000 rpm / 10 min), and the supernatant was measured for absorbance at 405 nm. The results are shown in FIG. 3.
5-4. 5-4. 트립토파나아제Tryptopanase 활성 측정 Active measurement
Complete reagent solution(0.05 M potassium phosphate buffer 100 ㎖에 2.75 mg of pyridoxal phosphate, 19.6 mg of disodium EDTA dihydrate, 10 mg of bovine serum albumin이 포함되고 pH 7.5) 0.2 ㎖ 및 20 mM 트립토판 0.2 ㎖와 현탁한 효소액 0.1 ㎖로 구성된 반응 용액을 37℃에서 한 시간 동안 반응시키고 color reagent(ρ-디메틸아미노베즈알데히드 14.7 g, 95% 에탄올 948 ㎖, H2SO4 52 ㎖) 2 ㎖를 가하여 반응을 종료시킨 후 원심분리(3,000 rpm/10min)하고 상등액을 550 nm에서 흡광도를 측정하였으며 그 결과를 도 3에 나타내었다.
0.2 ml of complete reagent solution (0.25 ml of 20 mM tryptophan) and enzyme solution suspended in 100 ml of 0.05 M potassium phosphate buffer containing 2.75 mg of pyridoxal phosphate, 19.6 mg of disodium EDTA dihydrate, 10 mg of bovine serum albumin and pH 7.5 The reaction solution consisting of ㎖ was reacted at 37 ° C. for one hour, and 2 ml of color reagent (ρ-dimethylaminobezaldehyde 14.7 g, 95% ethanol 948 ml, H 2 SO 4 52 ml) was added to terminate the reaction, followed by centrifugation. The absorbance was measured at 550 nm (3,000 rpm / 10 min) and the results are shown in FIG. 3.
5-5. 5-5. 우레아제Urease 활성 측정 Active measurement
Urea substrate solution(20 mM sodium phosphate buffer에 4 mM urea를 녹인 용액) 0.3 ㎖와 현탁된 효소액 0.5 ㎖로 구성된 반응 용액을 37℃에서 30분간 반응하고, 1 N (NH4)2SO4 0.1 ㎖를 첨가하여 반응을 종료시켰다.A reaction solution consisting of 0.3 ml of urea substrate solution (solution dissolved in 4 mM urea in 20 mM sodium phosphate buffer) and 0.5 ml of suspended enzyme solution was reacted at 37 ° C. for 30 minutes, and 0.1 ml of 1 N (NH 4 ) 2 SO 4 was added. The reaction was terminated by addition.
그 뒤 이 반응액에 페놀니트로프루시드 시약(Phenolnitroprusside reagent) 1 ㎖와 알칼리 하이포클로라이트 시약(alkaline hypochlorite reagent (NaClO)) 1 ㎖를 첨가하여 65℃에서 20분간 반응시켰다. 이 반응 용액을 3,000 rpm 에서 10분간 원심 분리시키고, 상등액을 603 nm에서 흡광도를 측정하였으며 그 결과를 도 3 에 나타내었다.
Thereafter, 1 ml of a phenolnitroprusside reagent and 1 ml of an alkaline hypochlorite reagent (NaClO) were added to the reaction solution for 20 minutes at 65 ° C. The reaction solution was centrifuged at 3,000 rpm for 10 minutes, and the supernatant was measured for absorbance at 603 nm. The results are shown in FIG. 3.
도 3에서 보는 바와 같이 본 발명의 혼합 유산균을 섭취한 실시예(HFD-LAB) 그룹에서의 우레아제를 제외한 β-글루코시다아제, β-글루쿠로니다제, 트립토파나아제의 장내 유해 활성은 각각 36%, 30% 및 13%로 감소함을 확인하였다.As shown in Figure 3 intestinal detrimental activity of β-glucosidase, β-glucuronidase, tryptopanase except urease in the group (HFD-LAB) ingested mixed lactic acid bacteria of the present invention is It was confirmed that the reduction was 36%, 30% and 13%, respectively.
Claims (7)
Bifidobacterium sudocatechinulatum SPM 1204 (Accession No. KCTC 10616BP), Bifidobacterium long gum SPM 1205 (Accession No. KCTC 10630BP), and Bifidobacterium long gum SPM 1207 (Accession No. KCTC 11506 BP) A pharmaceutical composition for treating or preventing obesity or obesity-related diseases comprising phosphorus mixed lactic acid bacteria.
상기 혼합 유산균은 비피도박테리움 슈도카테눌라툼 SPM 1204(수탁번호 KCTC 10616BP), 비피도박테리움 롱검 SPM 1205(수탁번호 KCTC 10630BP), 및 비피도박테리움 롱검 SPM 1207(수탁번호 KCTC 11506 BP)을 108 내지 109 cfu/ml 포함하는 각각의 배양액을 동일 부피비로 혼합한 것을 특징으로 하는 혼합 유산균을 포함하는 비만 또는 비만 관련 질환 치료 또는 예방용 약제학적 조성물.
The method of claim 1,
The mixed lactic acid bacteria are Bifidobacterium pseudocatenuratum SPM 1204 (Accession No. KCTC 10616BP), Bifidobacterium long gum SPM 1205 (Accession No. KCTC 10630BP), and Bifidobacterium long gum SPM 1207 (Accession No. KCTC 11506 BP) A pharmaceutical composition for treating or preventing obesity or obesity-related diseases, including mixed lactic acid bacteria, characterized in that each culture solution containing 10 8 to 10 9 cfu / ml in the same volume ratio.
상기 혼합 유산균을 유효 성분으로 포함하는 비만 또는 비만 관련 질환의 치료 또는 예방용 약제학적 조성물은 혈액 내의 아미노트랜스퍼라아제(AST)와 아스파테이트 아미노트랜스퍼라아제(ALT)의 수치를 감소시키는 것을 특징으로 하는 혼합 유산균을 포함하는 비만 또는 비만 관련 질환 치료 또는 예방용 약제학적 조성물.
The method of claim 1,
A pharmaceutical composition for the treatment or prevention of obesity or obesity-related diseases comprising the mixed lactic acid bacteria as an active ingredient is characterized by reducing the levels of aminotransferase (AST) and aspartate aminotransferase (ALT) in the blood. A pharmaceutical composition for treating or preventing obesity or obesity-related diseases comprising mixed lactic acid bacteria.
상기 혼합 유산균을 유효 성분으로 포함하는 비만 또는 비만 관련 질환의 치료 또는 예방용 약제학적 조성물은 알파 아밀라아제의 활성을 감소시키는 것을 특징으로 하는 혼합 유산균을 포함하는 비만 또는 비만 관련 질환 치료 또는 예방용 약제학적 조성물.
The method of claim 1,
A pharmaceutical composition for the treatment or prevention of obesity or obesity-related diseases comprising the mixed lactic acid bacteria as an active ingredient is a pharmaceutical for the treatment or prevention of obesity or obesity-related diseases comprising a mixed lactic acid bacteria, characterized in that to reduce the activity of alpha amylase Composition.
상기 혼합 유산균을 유효 성분으로 포함하는 비만 또는 비만 관련 질환의 치료 또는 예방용 약제학적 조성물은 리파아제의 활성을 증가시키는 것을 특징으로 하는 혼합 유산균을 포함하는 비만 또는 비만 관련 질환 치료 또는 예방용 약제학적 조성물.
The method of claim 1,
Pharmaceutical composition for the treatment or prevention of obesity or obesity-related diseases comprising the mixed lactic acid bacteria as an active ingredient Pharmaceutical composition for the treatment or prevention of obesity or obesity-related diseases comprising a mixed lactic acid bacteria, characterized in that to increase the activity of lipase .
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